MEMÓRIAS DO INSTITUTO BUTANTAN

ÍNDICE

TOMO XXXI (Fasc. I)

1964

NECROLÓGIOS . 1

1. ARTIGAS, P. DE TOLEDO & PEREZ, M. D. — Catadiscus eldoradiensis

n. sp., Trematoda, Paramphistomata de Leptodactylus ocellatus .... 5

2. BRUNNER JR., A. & VALLEJO-FREIRE, A. — Estruturas em reticuló-

citos . 9

3. BüCHERL, W. — Loxosceles e Loxoscelismo na América do Sul. V. As

espécies sul-americanas do gênero Loxosceles Heinecken e Lowe 1832 15

4. BÜCHERL, W. — Distribuição geográfica dos aracnóides peçonhentos te¬

míveis (classe Aracnomorpha, subclasse Arachnoidea, ordens Scor-

piones e Araneida .:. 55

5. BÜCHERL, W. — Mecanismo da picada das aranhas peçonhentas perigosas 67

6. BüCHERL, W. — Histologia das glândulas de veneno de algumas aranhas

e escorpiões .,.

7. BüCHERL, W. — Biologia de artrópodos peçonhentos . 85

8. BÜCHERL, W., LUCAS, S. & DESSIMONI, V. — Aranhas da família

Ctenidae, subfamilia Cteninae. I. Redescrição dos gêneros Ctenus

Walckenaer 1805 e Phoneutria Perty 1833 . 95

9. CAVENAGHI, T. M. C. M. & ROSENFELD, G. — Preservation of bone

marrow cells of dog with heparin and EDTA . 103

10. FONSECA, F. da — Atricholaeps ( Ischnolaelaps) marioi, sp. n. 111

11. LUCAS, S. — Estudos sôbre aranhas da família Lycosidae. 2. Sôbre o co¬

lorido de algumas espécies da subfamilia Lycosinae . 115

12. LUCAS, S. — Sôbre a posição sistemática de algumas espécies de aranhas

verdadeiras do gênero Cupiennius, Simon 1891, da familia Ctenidae,

em relação ao gênero Ancylometes, Bertkau 1880, da família Pi-

sauridae . 127

13. MACHADO, J. C. — Alterações espontâneas da base de implantação e da

túnica média muscular da aorta de cobaias. Aspectos morfológicos

sugestivos do seu desenvolvimento e estudo da freqüência . 135

14. MARTINS, L. F. — Contribution to the studies of coagulogram in thorough-

bred horses . 143

SciELO

15. MARTINS, L. F„ GRECCHI, R. & ROSENFELD, G. — Thromboplastin

generation test in normal horses and horses injected with tetanic

toxin . 163

16. ROSENFELD, G. & LANGLADA, F. G. de — Corticosteroid and ACTH

in experimental poisoning with animal venous . 171

17. ROSENFELD, G. & LANGLADA, F. G. de — Difference between lethal

doses of toxic substanees injected intravenously and intra-arterially 185

18. SALIBA, F. — Estudo anátomo-patológico da evolução da necrose pro¬

duzida experimentalmente por veneno de Bothrops jararaca. In¬

fluência de substância organo-heparinóide . 191

19. VALLEJO-FREIRE, A. & BRUNNER JR., A. — Rickettsiemia experi¬

mental da febre maculosa do Brasil . 201

SciELO

10 11 12 13 14 15

NECROLÓGIO

PROF. DR. FLAVIO OLIVEIRA RIBEIRO DA FONSECA (1900-1963)

Faleceu em São Paulo, Brasil, no dia 22 de maio de 1963. o Prof. Dr. Flavio

Oliveira Ribeiro da Fonseca. ex-Diretor do Instituto Butantan, chefe da Secção de

Parasitologia e membro do Conselho do Fundo de Pesquisas do Instituto Butantan.

Nascido no Rio de Janeiro a 12 de outubro de 1900. radicou-se em São Paulo

desde 1926.

Iniciou a carreira científica já durante o Curso de Medicina da Universi¬

dade do Brasil, especializando-se em Parasitologia, Microhiologia e Zoologia Mé¬

dica, no Instituto Oswaldo Cruz em Manguinhos, Rio de Janeiro.

Formado em Medicina em 1923, trabalhou em vários laboratórios do Insti¬

tuto Oswaldo Cruz e como chefe do Laboratório do Hospital José Carlos Rodri¬

gues, do Rio de Janeiro.

Em 1925 foi designado para chefiar a Secção Médica da Comissão de Pla¬

nejamento da Estrada de Ferro Transcontinental de Santos, no Brasil, a Arica,

no Peru. tendo percorrido os sertões de Mato Grosso e florestas da Bolívia.

Em 1926 foi indicado para substituir o professor catedrático, na Cadeira

de Microhiologia da Faculdade de Medicina da Universidade de São Paido. onde.

lecionou até 1931. Nessa data foi incluído como assistente no corpo médico do

Instituto Butantan de São Paulo, de onde somente saiu para dirigir, por tempo

limitado em 1946, o Serviço de Profilaxia da Malária de São Paulo, onde intro¬

duziu o emprego do DDT e antimaláricos sintéticos modernos. No Instituto Bu¬

tantan trabalhou em Imunoterapia, Bacteriologia e Virulogia e, em 1937, foi de¬

signado chefe do Departamento de Parasitologia, ocupando êsse cargo até sua morte.

Por sete oportunidades diferentes foi chamado a exercer o cargo de Diretor

do Instituto Butantan, coincidindo quase sempre com os momentos de maiores

dificuldades para a Instituição.

O Dr. Flavio da Fonseca foi um dos fundadores da Escola Paulista de Me¬

dicina e era professor catedrático de Parasitologia desde 1933. Fazia parte do

corpo docente da Faculdade de Medicina da Universidade de São Paulo e da

Faculdade de Medicina Veterinária da Universidade de São Paulo.

Era major-médico da Reserva do Exército.

SciELO

Ocupou inúmeros cargos de relevo, não só no ensino médico como na pes¬

quisa. Ao primeiro trabalho publicado no ano de 1926 seguiram-se 130 outros

de alto mérito científico, além de alguns inéditos. Cultivou a Acarologia como

autodidata desde 1931. Foi o iniciador do estudo dos ácaros parasitos de ver¬

tebrados na América do Sul, sendo considerado um dos grandes acarologistas da

atualidade. Deixou no Instituto Butantan, para estudos, 80.000 exemplares de

ácaros, provàvelmente uma das maiores coleções do mundo. A contribuição de

sua vasta experiência na especialidade era constantemente solicitada por pesquisa¬

dores de inúmeros centros científicos de todos os países. Sua biblioteca acaro-

lógica compreende cêrca de 2.000 trabalhos, enviados por especialistas de todo

inundo.

Nas suas horas de lazer a distração predileta era a caça, o que muito auxi¬

liou na obtenção de material para estudo de Parasilologia Comparada. Através

a colaboração de cêrca de dois mil fornecedores de serpentes e animais silvestres

de todo o sul e centro do Brasil, conseguiu organizar uma coleção parasitológica

de perto de dez mil lotes.

Além dos trabalhos sôbre ácaros, publicou vários outros sôbre Protozoologia,

Entomologia Médica, Riquetsioses e Vírus. Trabalhou com Henrique Aragão na

revisão da fauna neotrópica de Ixodidas, publicando juntos uma dezena de

trabalhos.

É de se assinalar que nos seus trabalhos sôbre Malária confirmou a hipótese

da importância exercida pelos anofelinos do gênero Kerteszia na transmissão da

malária nas matas e serras, o que por mais de 40 anos fôra pôsto em dúvida.

Dentre as inúmeras espécies de Protozoários por êle descritas, destaca-se o

achado da segunda espécie de Plasmódio de Malária de Primatas, no continente

americano.

Seus trabalhos sôbre Riquetsias e os Ixodidas transmissores da Febre Ma-

culosa Brasileira foram básicos para o esclarecimento da infecção no Brasil e

para o preparo da vacina contra a Febre Maculosa.

Foi fundador da Sociedade Brasileira de Entomatologia, do Clube Zoológico

do Brasil c da Fundação do Parque Zoológico de São Paulo; membro da Socie¬

dade Brasileira de Biologia e da Royal Society of Enlomology, na Inglaterra.

Era membro do Comitê Internacional da Revista de Acarologia e igualmente da

revista “Ciência” do México.

★

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5 6

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DR. EDUARDO VAZ (1898-1963)

Faleceu em São Paulo, Brasil, no dia 8 de maio de 1963, o Dr. Eduardo

Vaz, ex-assistente e ex-diretor do Instituto Butantan.

Nascido em São Paulo a 13 de outubro de 1898, formado em Medicina em

1923, pela Faculdade de Medicina do Rio de Janeiro, onde foi interno da 4. a

Cadeira de Clínica Médica do Prof. Aloysio de Castro. Foi também interno

no Hospital São João Batista de Niterói e do Instituto de Proteção à Infância.

Foi subassistente do Instituto Vital Brazil em Niterói, sob a direção do Prof.

Arlindo de Assis em 1924, fazendo nessa ocasião estudos sôbre raiva e imunidade

local, assunto que serviu para a sua tese de doutoramento em 1921.

Foi assistente do Instituto Butantan de 1925 a 1928, tendo realizado traba¬

lhos sôbre imunologia e bacteriologia. Preparou nesse período a primeira amos¬

tra de BCG em São Paulo e introduziu o emprego da vacinação “per os” contra

as infecções tífico-disentéricas. Participou com trabalhos das Conferências de

Higiene em São Paulo e em Pernambuco.

Fm 1928, com os Drs. Mario Pereira e. Pedro Romeiro, fundou o Instituto

Pinheiros, que dirigiu por 19 anos. Nesse Instituto organizou pela primeira vez

no Brasil um Serviço Antirrábico Descentralizado, que já prestou socorro a mais

de 30.000 vítimas de animais raivosos na própria localidade dos pacientes, graças

a remessa pronta da vacina pelos 230 postos espalhados no Brasil, Paraguai e

Bolívia, em um trabalho de fundo social. Sob os auspícios do Ministério da

Guerra, criou o primeiro Banco de Plasma do Brasil. Durante a Revolução

Constitucionalista de 1932, organizou e dirigiu o laboratório de campanha no

setor Sul do Estado de São Paulo. Organizou e dirigiu o Serviço de Vacinação

BCG da Liga Paulista contra a Tuberculose, tendo edificado a sua sede, graças

a colaboração do Rotary Club de São Paulo, do qual era membro.

Em 1947 foi nomeado diretor do Instituto Butantan, cargo que exerceu até

1951. Pela Organização Mundial de Saúde foi convidado a realizar estudos sôbre

a Administração de Laboratórios de Saúde Pública nos Estados Unidos da Amé¬

rica, no Canadá e em vários países da Europa. No seu regresso foi convidado

pelo Ministério da Saúde Pública a colaborar na Campanha Nacional contra a

Tuberculose no setor técnico e administrativo.

Publicou 40 trabalhos de investigação científica e de divulgação, principal¬

mente nos temas de imunização antidisentérica, de BCG e raiva.

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5 6

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Mem. Inst. Butantan, PAULO DE TOLEDO ARTIGAS e MARIO DEMAR PEREZ

31 : 5 - 8 , 1964 .

C AT ADI SCUS ELDORADIENSIS n. sp., TREM AT 00 A, RARA i\I RI II ST OMA TA

DE LERTODACTYLUS OCELLATUS

PAULO DE TOLEDO ARTIGAS E MARIO DEMAR PEREZ

Secção de Parasitologia, Faculdade de Farmácia e Bioquímica, Universidade de

São Paulo e Instituto Butantan, São Paulo, Brasil

Introdução

Em dois exemplares de Leptodactylus ocellalus, um proveniente de São Paulo,

capital do Estado e o outro de Eldorado Paulista (SP), tivemos ensejo de encon¬

trar o trematódeo, assunto da presente nota. Em uma das verificações, o parasito

em apreço foi observado em parasitismo misto, compartilhado com Choledocystus

elegans iTrav., 1926) ; na outra verificação o parasitismo era isolado.

Na necropsia número 293, do batráquio oriundo de São Paulo, colhemos sete

exemplares de C. eldoradiensis; na necropsia número 346. da rã proveniente de

Eldorado Paulista, obtivemos um único exemplar do trematódeo citado. 0 Lcpto-

dactylus de Eldorado Paulista foi capturado em abril de 1958 e o de São Paulo

em dezembro do mesmo ano. A presente descrição é baseada no estudo desses

oito exemplares.

Descrição

Trata-se de um trematódeo pequeno, brancacento, pouco espesso, de cutícula

lisa. Ventosa oral relativamente pequena e provida de dois divertículos. Pré-

faringe delgada. Faringe pouco desenvolvida, de situação pré-cecal. Esôfago prà-

ticamente nulo. Cecos curtos, não atingindo o plano mediano do corpo. Testículo

único, volumoso, situado no plano equatorial, num campo parcialmente deslocado

da linha mediana. Bôlsa do cirro bem desenvolvida. Ovário e glândula de Meblis

contíguos, situados os dois órgãos no campo testicular, em zona imediatamente

posterior, colocados paramedialmente. Vilclinos em grandes massas foliculares, em

numero reduzido, situados na mesma zona testicular e em campo lateral, à esquer¬

da. Poro genital disposto na zona da bifurcação dos cecos. Alças uterinas nu¬

merosas, os ovos se distribuindo em lôda a área do corpo situada entre os cecos

até a extremidade posterior do corpo; ovos numerosos e operculados. Ventosa

posterior potente, grande, terminal, na extremidade posterior e com uma prega ou

espessamento bem observado em um dos exemplares examinados.

Recebido para publicação em junho de 1964.

SciELO

.0 11 12 13 14 15 16

CATADISCUS ELDORADIENSIS n. sp„ TREMATODA.

PARAMPHISTOMATA DE LEPTODACTYLUS OCELLATUS

Catadiscus eldoradiensis Artigas et Perez, 1964.

Discussão

Trata-se, evidentemente, de um trematódeo paramfistomídeo que apresenta as

características gerais do Catadiscus e que poderia ser classificado como C. cohni

Trav., 1926., não fôsse a curiosa circunstância de apresentar a massa vitelínica

unilateral, aparentemente um complexo ímpar de glândulas vitelogênicas.

O fato de havermos encontrado o trematódeo em tela em dois hospedeiros,

embora da mesma espécie, mas provenientes de-lugares distantes (Eldorado Pau¬

lista, que ainda há poucos anos tinha a denominação de Xiririca, dista da capital

do Estado cêrca de 250 quilômetros) e a circunstância dos oito exemplares pos¬

suírem morfologia nitidamente superponível, parecem-nos elementos suficientes para

erigir uma nova espécie hem definida de Catadiscus.

1, | SciELO

Mem. Inst. Butantan, PAULO DE TOLEDO ARTIGAS e MARIO DEMAR PEREZ 7

31 : 5 - 8 , 1964 . 1

No seguinte quadro relatamos as medidas de quatro helmintos, tomadas após

coloração pelo carmim e montagem em bálsamo.

TABELA

Exemplares do lote 562

Exemplar do

lote 666

Comprimento .

3,00 mm

2,24 mm

2,16 mm

2,50 mm

Largura máxima .

1,00 mm

0,80 mm

1,04 mm

1,00 mm

Ventosa oral .

ISO X 250 /i

—

100 X 160 /I

—

Divertículo da ventosa

oral .

120 X 120 jl

100 X 100 11

130 X 100 n

—

Pré-faringe .

250 /x

—

340 ji

—

Faringe .

180 X 100 /i

200 X 180 Jl

130 X 100 ji

180 X 130 ji

Cecos .

800 X 100 ji

620 X 120 ji

610 X 120 ji

640 X 130 ji

690 X 160 ji

670 X 130 n

510 X 180 ji

500 X 160 ji

Testículo .

600 X 400 ji

460 X 410 ji

550 X 350 n

350 X 220 ii

Bolsa do cirro .

420 X 120 /i

160 X 110 ji

—

Ovário .

100 X 80 /i

—

200 X 140 /*

Glândula de Mehlis . ..

90 X 60 n

—

Acetábulo .

750 X 630 /i

600 X 650 ji

600 X 560 n

600 X 870 /i

Folículos vitelínicos . .

100 X 80 /i

—

83 X 63 ji

Ovos (média de 10) . .

74 X 30 /t

82 X 31/i

60 X 32 /i

62 X 32 /i

A disposição dos vitelinos nas espécies do gênero Catadiscus não é uniforme;

C. dolichotyle, C. pygmaeus, C. iiruguayensis, C. inopinatus, C. mirandai e C.

jreilaslenti apresentam dois grupos simétricos de glândulas. C. marinholutzi e C.

propinquus apresentam os vitelinos dispostos em faixa transversal. No caso ver¬

tente de C. eldoradiensis n. sp., os vitelinos, cuja disposição é o elemento diferen¬

cial específico, se dispõe unilateralmente.

SciELO

CATADISCUS ELDORADIENSIS n. sp., TREMATODA,

PARAMPH1STOMATA DE LEPTODACTYLUS OCELLATUS

I) a d o s b io I

i olo gico s

Hospedeiro: Leptodactylus ocellatus

Habitat parasitário: Intestino delgado.

Proveniência: Eldorado Paulista (SP), antiga Xiririca (localidade tipo) e

São Paulo (SP), Brasil.

0 material que se utilizou no presente trabalho acha-se depositado na coleção

helmintológica do Departamento de Parasitologia da Faculdade de Farmácia e Bio¬

química da l niversidade de São Paulo, soh os números 562 e 666.

Resumo

É descrita uma nova espécie de paramfistomídeo, Catadiscus eldoradiensis,

cujo principal característico, único no gênero, é a situação unilateral dos vitelinos.

O novo trematódeo foi encontrado em dois exemplares de Leptodactylus ocellatus,

provenientes, um de Eldorado Paulista (localidade tipo) e o outro de São Paulo

(Estado de São Paulo). Brasil.

SüMMARY

This paper describes a nevv species of Catadiscus. The name Catadiscus eldo¬

radiensis is proposed for this new species. The most conspicuous differential

character of C. eldoradiensis n. sp. consists in lhe unilateral situation of lhe vitel-

laria, an unknown aspeet in other species of the genus. The new trematode lias

been found in Leptodactylus ocellatus captured in São Paulo (SP) and Eldorado

Paulista (SP), Brasil.

Bibliografia

1. Freitas, J. F. T. — Novo trematódeo paramphistomídeo parasito de rã. Cata-

discus inopinatus n. sp. Rev. Brasil. Biol., 1(2) :121-123, 2 figs., 1941.

2. Freitas. J. F. T. — Catadiscus mirandai n. sp., parasito de Hemipipa carvalhoi,

Mr. Rib. Rev. Brasil. Biol., 3(4) :411-412, 1 fig., 1943.

3. Freitas, J. F. T. & Lent, H. — Revisão do gênero Catadiscus Cohn 1904 ( Tre-

matoda: Paramphistomoidea). Boi. Biolotj. (N.S.), 4(2) :305-315, 20 figs.,

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4. Freitas, J. F. T. & Dobbin Jor., J. E. — Novo parasito de rã — Catadiscus

propinquus sp. n. ( Trematoda : Paramphistomoidea). Rev. Brasil. Biol., lfi

(4):439-441, 2 figs., 1956.

5. Ruiz, J. M. — Catadiscus freitaslenti sp. n. ( Trematoda : Paramphistomoidea)

parasito de ofídio neotrópico; observação sõbre a presença de dois canais

eferentes no gênero Catadiscus Cohn 1904. Mem. Inst. Butantan, 17:29-34.

2 figs., 1943.

6. Ruiz, J. M. — Considerações sôbre o gênero Choledocystus Pereira e Cuocolo,

1941 ( Trematoda. Plar/iorchiidae). Rev. Brasil. Biol.. 9(2) :167-174, 10 figs..

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7 Travassos, L. — Catadiscus cohni, nova espécie. Novo trematódeo de batráquio.

Sciencia Medica, 4(6) :278-279, 1 fig., 1926.

8. Travassos. L. — Synopse dos Paramphistomoidea, Mem. Inst. Oswaldo Cruz, 29

(1) :19-178. 86 figs., 1934.

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Mc-m. Inst. Butantan

31 : 9 - 14 , 1964 .

A. BRUNNER JR. e A. VALLEJO-FEEIRE

ESTRUTURAS LAMELARES EM RET1CUL0CIT0S

A. BRUNNER JR. E A. VALLEJO-FREIRE

Serviço de Microscopia Eletrônica, Secção de Virulogia, Instituto Butantan,

São Paulo, Brasil

Introdução

Recentemente têm sido evidenciadas em reticulocitos de mamíferos, algumas

das estruturas comuns às demais células, como mitoeôndrios (1-6) e retículo endo-

plasmático agranular (3-6). As ribonucleoproteínas se encontram difusas no cito¬

plasma, o que se evidencia, após coloração pelo Giemsa, pela basofilia uniforme

característica. Quando a coloração pelo Giemsa é precedida de tratamento pelo

verde Jenus B, resulta uma basofilia reticulada devido à precipitação das ribonu¬

cleoproteínas e do corante em tôrno dos mitoeôndrios (7). A dissolução dos mi-

tocôndrios, retículo endoplasmático e ribonucleoproteínas, devido à perda de suas

funções na síntese de hemoglobina e o aumento da concentração desta, definem o

fim do processo de diferenciação da hemácia. Estas observações foram feitas em

pacientes com anemia hemolítica, em cobaios e coelhos com anemia provocada por

sangrias sucessivas ou por intoxicação plúmbica e em ratos intoxicados com p-dime-

t i la mi no-azobenzeno.

É o propósito desta comunicação demonstrar a existência de estruturas seme¬

lhantes às constituintes do aparelho de Golgi, em reticulocitos de cobaios com in¬

toxicação plúmbica ou com anemia provocada por sangrias sucessivas.

Material e métodos

Uma reticulocitose em tôrno de 15% foi obtida em cobaios de 350 a 400 g

de pêso, por sangrias cardíacas diárias de 4 a 5 ml durante 5 dias, sem que fôssem

observados eritroblastos na circulação. Reticulocitoses superiores a 50% foram

obtidas em cobaios intoxicados com acetato de chumbo em solução aquosa a 1%

por injeções subcutâneas diárias de 1 ml, durante 9 dias.

Em ambos os casos o sangue foi colhido por punção cardíaca ou por corte

da unha das patas (8) e fixado imediatamente com OsO, a 1% em tampão ve-

ronal-acetato, isotônico, de pH 7,4, durante 20 a 30 minutos. À desidratação pela

Recebido para publicação em dezembro de 1962.

SciELO

.0 11 12 13 14 15 16

ESTRUTURAS LAMELARES EM RETXCULOCITOS

série alcoólica seguiu-se a inclusão em butil-metil metacrilatos na proporção de

7:3. As trocas dos meios para a desidratação e inclusão dos glóbulos foram feitas

por centrifugações a baixa rotação e decantações sucessivas. Os cortes foram ob¬

tidos num micrótomo Porter-Blum e examinados num microscópio Siemens ÜM 100 b

com tensão de 60 KV e aumentos de X7200 e X15000.

Resultados f. discussão

Os eritroblastos possuem lôdas as estruturas somuns às demais células, per¬

dendo o núcleo na fase acidofílica com movimentos ativos executados pelo proto¬

plasma, segundo documentações microcinematográficas feitas por Albrecht (9) e

Bessis e Bricka(lO). O núcleo, após sofrer deslocamentos devidos às intensas

contrações, permanece ligado à célula por meio de um fino cordão citoplasmático,

durante alguns minutos, libertando-se em seguida.

Uma das fases dêsse processo pode ser observada no eritroblasto da figura 1,

de cobaio com intoxicação plúmbica. Chama a atenção a frequência com que se

observam alguns mitocôndrios próximos à membrana do núcleo em fase de extru-

são; em eritroblastos aparentemente não em fase de extrusão nuclear, os mitocôn¬

drios não se dispõem com essa proximidade em relação ao núcleo. A membrana

nuclear não possui mais poros, possivelmente por ter o núcleo perdido sua função.

Êste fato pode ser melhor constatado nos cortes tangenciais.

A célula passa assim a constituir um reticulocito, com os elementos citoplas-

máticos remanescentes e sofre progressivas transformações ao mesmo tempo que

acumula crescentes quantidades de hemoglobina sintetizada. A síntese se processa

mais intensamente nêste período da diferenciação, segundo determinações microes-

pectrofotométricas feitas por Seno (4) em eritroblastos e reticulocitos de coelho.

Estas alterações podem se evidenciar pela perda das várias estruturas citoplasmá-

ticas e pelo aumento de densidade aos eletrons, transformando-se a célula numa

hemácia adulta.

Foram confirmados os achados anteriores em reticulocitos de cobaios com

anemia aguda provocada por sangrias sucessivas e de cobaios com intoxicação

plúmbica (1-3). Além de mitocôndrios e retículo endoplasmálico em fase de in-

volução, foi possível, em alguns reticulocitos jovens, localizar sistemas de mem¬

branas com características morfológicas do sistema constituinte do aparelho de

Golgi (Fig. 2). A distância entre uma membrana e outra varia, aproximada¬

mente, entre 10 e 18 m/x. Êste sistema de membranas é muito semelhante aos

dictiosomos de espermálides de ‘"Helix aspersa” e “Lumbricus terrestris”, descritos

por Dalton e Felix (11). Não se observam os demais componentes do aparelho

de Golgi, vesículas e vacúolos.

Na Fig. 3 a distância entre as membranas é maior, variando de 28 a 40 m/x,

dispondo-se algumas vesículas junto ao sistema de membranas. Esta hemácia jo¬

vem provavelmente se encontra numa fase de maturação em que tem início o

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Fi S- 1 — Erythroblast of guinea-pig vvith lead poisoning; N —

nucleus in phase of extrusion; m — mitochondria; re — endo-

plasmic reticulum; mp — plasma membrane; mn — nuclear

membrane.

Reticulocytes of guinea-pigs vvith lead poisoning.

^ Reticulocytes of guinea-pigs vvith lead poisoning. Dic-

tiosome (d) disposed near a mitochondria (m) of enlarged volume

and disorganized trabecular structure.

Fig. 3 — Reticulocytes of guinea-pigs vvith lead poisoning — (1 —

dictiosome; v — vesicles; m — mitochondria; re — endoplasmic

reticulum.

Fig. 4 — Reticuloeyte of guinea-pig with anemia caused by sue-

cessive bleedings, containing a system of membranes (M), vesicles

(v) and a mitochondria (m); re — endoplasmic reticulum. The

density to the electrons ls accented due to the concentration of

hemoglobin already synthetized.

Fig. 5 — Reticuloeyte of guinea-pig with lead poisoning contain¬

ing a structure constituted of concentric lamellae (1) of elliptie

section; m — mitochondria; f — ferritine.

Mem. Inst. Butantan,

A. BRUNNER JR. e A. VALLEJO-FREIRE

31 : 9 - 14 , 1964 .

processo de reabsorção ou dissolução dos seus constituintes estruturais (3), como

se pode observar no mitocôndrio com membrana limitante e trabéculas, incompletas.

Seno, Kawai e Nishikawa (12) verificaram que na intoxicação plúmbica o

período de maturação do reticulocito é maior que o normal bem como o número

de células degeneradas irrecuperáveis. Êstes dois fatores aumentaram a probabili¬

dade de surpreender aquelas estruturas, desde a fase de atividade até a de disso¬

lução gradativa. Vallejo-Freire e Brunner (3) verificaram que as estruturas mem-

branosas dêsses reticulocitos se mostravam mais contrastadas em comparação com

o normal. Êste fato pode ser explicado admitindo-se ter havido uma impregnação

polo chumbo, “fixando-as”, total ou parcialmente, dependendo da fase do período

de intoxicação, ou seja, do maior ou menor teor de chumbo na circulação.

A observação de que a região que circunda o vacúolo contrátil de certos pro¬

tozoários reduz o ácido ósmico, da mesma maneira do que ocorre com o aparelho

de Golgi das células de vertebrados, levou Nassonov (13) a sugerir a existência

de uma homologia entre as duas estruturas. Esta observação foi confirmada em

exames eletromicroScópicos de protozoários e espongiários, por Gatenby, Dalton

e Felix (14). A homologia aparente entre estas estruturas implica na participação

do aparelho de Golgi no controle do equilíbrio osmótico das células. A concen¬

tração de sódio, potássio, cálcio e fósforo nos reticulocitos é maior do que nas

hemácias adultas (15-17) e o teor em água é de cêrca de 5% maior que o dos

eritrocitos (18, 19). Durante o processo de maturação aqueles solutos diminuem

portanto, em concentração, do que resulta a necessidade de perda de água da

hemácia para manter o equilíbrio osmótico em relação ao plasma. Pode-se con-

jecturar sôbre a possibilidade das estruturas descritas no reticulocito possuirem

uma função ativa nêsse sentido. No reticulocito da Fig. 4, de cobaio com anemia

provocada por sangrias sucessivas, o espaço entre as membranas do sistema de

Golgi varia ao redor de 120 m/t, observando-se algumas vesículas próximas ao

sistema. O falo dêsse reticulocito conter ainda remanescentes do aparelho de Golgi,

embora já apresente uma elevada densidade aos elelrons, devido ao conteúdo em

hemoglobina, sugere que êste sistema de membranas tem uma função ainda na

fase anucleada, pré-adulta. Os “corpos nucleares” descritos por Golgi (20) em

hemácias adultas, humanas e de outros animais, não correspondem a estas estru¬

turas que existem somente nas hemácias jovens, ainda em fase de diferenciação;

o glóbulo vermelho maturo não possui no seu interior nenhuma estrutura cor¬

puscular.

Estruturas lamelares reticulares, concêntricas e espiraladas têm sido descritas

em mieloeitos basófilos (21), epitélio do tubo contornado proximal de camundon¬

gos (22) e células L-GO em culturas de tecido (25) e em epitélio branquial de

salamandra (24), respectivamente. A função dessas estruturas não é conhecida.

A estrutura lamelar do reticulocito da Fig. 5, assemelha-se às lamelares concêntricas

descritas. As lamelas se dispõem de modo a dar uma secção elíptica ao conjunto,

tendo as mais periféricas se destacado num dos polos da elipse, ou as internas

sofrido uma retração.

2 3

5 6

11 12 13 14 15 16

ESTKUTURAS LAMELARES EM RETICULOCITOS

Resumo

Em reticulocitos de cobaios normais ou com intoxicação plúmbica, são des¬

critas estruturas lamelares semelhantes aos dietiosomos constituintes do aparelho de

Colgi. Uma estrutura lamelar concêntrica, descrita em vários tipos de células, de

função desconhecida, é também apresentada.

Trabalho executado com o auxílio do f undo de Pesquisas do Instituto Butantan.

SuMMARY

In reticulocytes of normal guinea-pigs or with lead poisoning, lamellar struc-

lures similar to the dictiosomes which constitute the Colgi apparatus, are described.

A concentric lamellar structure of unknown function, described in several kinds

of cells, is also presented.

Bibliografia

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Kurozumi in Intern, Rev. Cytol,, vol. XI, p. 32 e 33, 1961.

SciELO

10 11 12 13 14 15 16

WOLFGANG BÜCIIERL

Mem. Inst. Butantan,

31 : 15 - 54 , 1964 .

LOXOSCELES E LOXOSCELISMO NA AMÉRICA DO SUL

V. AS ESPÉCIES SUL-AMERICANAS DO GÊNERO LOXOSCELES

HEINECKEN E LOWE 1832*

WOLFGANG BÜCHERL

Secção de Artróyodos Peçonhentos, Instituto Butantan, São Paulo, Brasil

Simon (1) foi o primeiro a elaborar uma chave sistemática dos Loxoscelídeos

sul e centro-americanos, conhecidos até o ano de 1907. O grande mérito desta

chave consiste na importância que o autor deu aos palpos maxilares, ao bulbo e

êmbolo dos machos adultos, para a diferenciação das espécies; o grande defeito

é que foram menosprezadas por êle as fêmeas das mesmas espécies, não coordena¬

das sistematicamente e que não foi dada importância alguma às medidas das

pernas de ambos os sexos.

A tentativa de uma segunda chave sinóptica das espécies sul-americanas, feita

por C. de Mello-Leitão (2), em 1918, resultou em fracasso. Uma nova sistemati¬

zação, publicada pelo mesmo autor (3), em 1934, repetiu o bom critério dos

palpos dos machos, introduzido por Simon, aliado a ilustrações, feitas dos perfis

dos palpos, que elucidam melhor as figuras que Simon fizera sob outro ângulo;

os caracteres específicos para as fêmeas, julgados bons por Mello-Leitão, entretan¬

to, são destituídos de valor.

Em 1958 foi publicado por W. J. Gertsch (4) um estudo sôbre os Loxosce¬

lídeos da América do Norte, Central e das índias Ocidentais, com a aferição de

15 espécies, 3 das quais sul-americanas também e 10 descritas como novas.

O principal valor dêste trabalho consiste no estudo comparativo dos receptá¬

culos seminais das fêmeas, como importante caráter auxiliar na especificação das

mesmas. Além disso, foram comparados também os palpos maxilares dos machos,

como segundo caráter importante de especificação. Finalmente ofereceu o autor

as medidas exalas dos artículos das pernas de machos e fêmeas e o colorido. Não

se trata propriamente de uma revisão das espécies do gênero, mas antes de mais

nada da descrição de 10 espécies novas e mais 3 espécies, descritas alguns anos

antes pelo mesmo autor em colaboração com Mulaik (5), tcudo sobrado apenas

* Apresentado no Congresso de Zoologia em São Paulo, em julho de 1962.

Recebido para publicação em 8/6/1962.

SciELO

10 11 12 13 14 15 16

LOXOSCEI.ES E LOXOSCELISMO NA AMÉRICA DO SUL

2 espécies antigas. A elaboração de uma chave sinóptica das espécies norte a

centro-americanas será tarefa extremamente difícil, senão impossível, pois Gertsch

não deu importância alguma à fórmula das pernas, que considera de valor apenas

para áreas restritas; as excelentes ilustrações dos palpos dos machos demonstram

claramente que foram feitas muitas espécies novas, que merecem no máximo apenas

o valor de populações da mesma espécie; os receptáculos seminais das fêmeas, como

foram ilustrados, parecem-nos em parte incompletos e por outra parte cheios de

pequenos detalhes individuais, que jamais podem justificar espécies, mas apenas

populações.

Pelos nossos estudos comparativos, feitos durante 2 anos e com abundante

material, procedente de muitos lugares da América do Sul, chegamos à conclusão

que existem caracteres morfológicos, realmente aproveitáveis para a sistematização

das espécies e que, portanto, é possível elaborar-se uma chave sistemática razoa¬

velmente prática para as mesmas, abrangendo-se tanto os machos como as fêmeas.

Os caracteres específicos são os seguintes:

a) As dimensões dos artículos dos palpos dos machos, incluindo o bulbo e o

êmbolo ;

b) 0 aspecto da fenda genital e dos recptáculos seminais das fêmeas;

c) As medidas das pernas em machos, fêmeas e filhotes;

d) Certas particularidades de colorido, principalmente no cefalotórax, nos artí¬

culos dos palpos e das pernas anteriores.

Êsles quatro caracteres unidos e aferidos cuidadosamente, identificam qualquer

Loxoscelídeo adulto e são tanto mais seguros, quanto maior fôr o número de

exemplares comparados.

Material

Para a revisão sistemática das espécies sul-americanas vimos Loxoscelídeos

conservados no Museu Nacional do Hio de Janeiro, no Departamento de Zoologia,

Ipiranga, São Paido e na Coleção do Instituto Butantan.

Os exemplares mais antigos destas 3 coleções, mais ou menos até o ano de

1934, já tinham sido estudados por Cândido de Mello-Leitão, de maneira que nos

pudemos inteirar dos critérios que êste autor usava para a sistematização.

Entramos em contato com o Museo Argentino de Ciências Naturales ‘‘Bernar-

dino Rivadavia”, com o Departamento de Zoologia da Universidade de Montevidéo,

Uruguai, com o Instituto Malbran, em Buenos Aires, Argentina, com o Departa¬

mento de Pasitologia da Universidade da Santiago do Chile, com o Dr. Jean

Vellard, da Universidade de San Marcos, em Lima, Perú, com alguns coleciona-

SciELO

10 11 12 13 14 15 16

1 Mem. Inst. Butantan, WOLFGANG BÜCHERL

j 31:15-54, 1964.

I dores na Bolívia (Santa Cruz de la Sierra, Sucre e

La Paz) e recebemos a lite- 1

[ ralura

descritiva original de algumas

espécies, como

também abundante material

1 comparativo. Empreendemos várias dezenas de excursões

para captura, ao redor |

I da Capital de São Paulo, ao Litoral

Paulista, Rio i

de Janeiro, conseguindo cen- |

t lenas de exemplares. No Instituto Butantan encontram-se

conservados os seguintes

[ espécimes, com os seguintes números

da Coleção, a

procedência, data da captura

1 e sexo:

266 —

Riacho da Cruz, Minas

— 3/ 5/1935 —

fémea; !

I 267 —

Ourinhos, São Paulo

— 12/ 9/1934 —

fêmea; 1

268 —

São Simão, Rio Grande do Sul

— 12/ 7/1934 —

fêmea; 1 macho, 1 filhote; '

269 —

São Paulo, Capital

— 9/ 8/1935 —

macho; 1 filhote;

270 —

Francisco Sodré

— 18/ 9/1934 —

filhote;

271 ~

Inst. Butantan

— 20/ 9/1937 —

macho; 1

272 —

Cerqueira César, São Paulo

— 11/11/1936 —

fêmea, 1 macho; 1 filhote; I

276 -

Lagoa, Santa Catarina

— 11/ 2/1935 —

fêmea, 1 fêmea; |

277 —

São Carlos, São Paulo

1934 —

fêmea, 1 macho; |

278 —

Corumbataí, São Paulo

— 18/ 9/1935 —

filhote; j

279 —

São Paulo, Capital

— 22/ 5/1935 —

fêmea; 1

280 —

Corumbataí, São Paulo

— 18/ 9/1935 —

filhote;

281 —

Lagoa, Santa Catarina

— 13/ 9/1935 —

fêmea; |

282 —

Barcelos, Rio de Janeiro

— 16/ 6/1936 —

fêmeas; i

428 —

Capital, São Paulo, Casa Verde

— 14/11/1950 —

filhote; |

593 —

Montevidéo, Uruguai

— 24/10/1951 —

fêmeas; ,

| G28 —

Montevideo, Uruguai

— 11/12/1951 —

fêmeas; 11 machos; 15 fi- I

lhotes;

630 —

Santo Ângelo, Rio Grande do Sul

— 26/12/1951 —

fêmea; 1 macho; 3 filho- i

tes; 1

631 —

Montevidéo, Uruguai

— 27/12/1951 —

fêmeas; 3 machos; 12 fi- ]

lhotes;

1.232 —

Quilombo, Rio Grande do Sul

— 5/ 9/1952 —

fêmea; 1 macho; 1 filhote;

1.308 —

Montevidéo, Uruguai

— 23/ 7/1956 —

fêmeas; 7 machos; 24 fi¬

lhotes;

1.469 —

Cotia, São Paulo

— 9/11/1959 —

fêmea; i

1.475 —

São Paulo, Capital, centro

— 9/12/1959 —

macho;

1.477 —

Inst. Butantan

— 16/ 1/1960 —

macho;

1.498 —

São Paulo, Capital, Morumbi

— 3/ 3/1960 —

240

fêmeas; 120 machos; 320

filhotes; I

1.495 —

Inst. Butantan

— 5/ 3/1960 —

fêmea; j

1.504 —

São Paulo, Capital, Morumbi

— 23/ 3/1960 —

322

fêmeas; 115 machos; 275 j

filhotes; 1

1.506 —

Vina dei Mar, Chile

— 12/ 5/1959 —

1 íêmea; 1 macho; 1 filhote; !

1.509 —

Montevidéo, Uruguai

— 2/ 4/1960 —

fêmeas; 8 machos; 8 fi- |

lhotes; 1

1.511 —

São Paulo, Capital, Morumbi

— 29/ 3/1960 —

124

fêmeas; 73 machos; 111 fi- j

lhotes; 1

1.518 —

São Paulo, Capital, Morumbi

— 5/ 4/1960 —

fêmeas; 35 machos; 110 fi- 1

lhotes; ]

1.529 —

Inst. Butantan

— 22/ 4/1960 —

fêmeas; 14 machos; 80 fi- 1

lhotes; I

1.530 —

Caxingui, São Paulo

— 23/ 4/1960 —

fêmeas; 8 machos; 1

1.534 —

São Roque, São Paulo

— 30/ 4/1960 —

fêmeas; 17 machos; 141 fi- 1

lhotes; I

1.535 —

São Paulo, Capital

— 2/ 5/1960 —

fêmea; ]

1.544 —

Caxingui, São Paulo

— 17/ 5/1960 —

fémeas; 14 machos; 35 fi- 1

lhotes; j|

1.556 —

São Paulo, Capital

— 9/ 6/1960 —

fêmeas; 1

1.557 —

Inst. Butantan

— 9/ 6/1960 —

fêmeas; 25 machos; 40 fi- 1

lhotes; i

1.558 —

São Paulo, Capital, centro

— 11/ 6/1960 —

fêmeas; 8 machos; I

I 1.560 —

São Paulo, Capital, Pedreira

— 14/ 6/1960 —

fêmeas; 17 machos; 1

SciELO

10 11 12 13 14 15 16

LOXOSCELES E LOXOSCELISMO NA AMÉRICA DO SUL

—

Inst. Butantan (sob bambu)

—

30/

5/1960 —

1900

fêmeas; 1300 machos; 2000

filhotes;

1.51)7 —

La Serena, Chile

—

8 /

3/1950 —

fêmeas; 3 filhotes;

1.5(77 —

Santiago do Chile

—

8 /

6/1960 —

fêmeas;

1.51)7 —

Santiago do Chile

—

8 /

6/1960 —

machos;

1.56S —

Santiago do Chile

—

11 /

7/1960 —

machos; 1 filhote;

1.568 -

La Serena, Chile

—

2/1950 —

macho;

1.508 —

Santiago do Chile

—

8 /

6/1960 —

fêmeas; 1 macho; 1 fi¬

lhote;

1.5(1!) —

Atibaia, São Paulo

—

30/

6/1960 —

macho;

1.576 —

Santo André, São Paulo

—

25/

7/1960 —

filhote;

1.579 —

Inst. Butantan

—

28/

7/1960 —

fêmeas; 6 machos; 3 fi¬

lhotes;

1.582 —

Taipas, São Paulo

—

8/1960 —

3000

fêmeas; 1000 machos; 800

filhotes;

1.5 NU —

Taipas (outro local)

—

13/

8/1960 —

3000

fêmeas; 1500 machos; 1300

filhotes;

1.584 —

Vifia dei Mar, Chile

—

18/

8/1960 —

fêmea;

1.585 —

Coquimbo, Chile

—

11 /

8/1960 —

fêmeas;

1.585 —

Santiago do Chile

—

11 /

8/1960 —

fêmeas;

1.586 —

Tarapacá, Chile

—

11 /

8/1960 —

fêmeas; 1 macho; 2 filho¬

tes;

1 .589 —

Taipas (3i local)

—

23/

8/1960 —

220

fêmeas; 95 machos; 40 fi¬

lhotes;

1.590 —

Taipas (4 1 ) local)

—

25/

8/1960 —

140

fêmeas; 80 machos;

1.581 —

Inst. Butantan

—

26/

8/1961 —

1000

fêmeas; 340 machos; 750

filhotes;

1.593 —

Taipas (5? local)

—

30/

8/1961 —

120

fêmeas; 51 machos; 112 fi¬

lhotes;

1.595 —

Belo Horizonte, centro

—

2 /

9/1960 —

macho; 1 filhote;

1.610 —

Planaltina, Goiás

—

16/

7/1960 —

fêmea; 2 filhotes;

1.612 —

San Bartolo, Peru

—

10/10/1960 —

fêmeas; 5 machos;

1.015 —

São Paulo, Capital, centro

—

9/11/1960 —

macho;

1.621 —

Interlagos, São Paulo

—

22 /

1/1961 —

fêmea;

1.025 —

São Paulo, Capital, centro

—

í/

2/1960 —

fêmea;

1.049 —

Pôrtc Alegre, Rio Grande do

Sul

—

17/

2/1961 —

fêmeas; 6 machos; 8 fi¬

lhotes;

1.651 —

Inst. Butantan (bambu)

—

20 /

4/1961 —

fêmeas; 4 machos; 22 fi¬

lhotes;

1.051 —

Inst. Butantan (bambu)

—

30/

5/1961 —

fêmeas; 25 machos; 12 fi¬

lhotes;

1.058 —

Pôrto Alegre, Rio Grande do

Sul

—

6 /

6/1961 —

fêmeas; 6 machos; 3 fi¬

lhotes;

1.070 —

Valinhos, São Paulo

—

14/

6/1961 —

fêmeas; 8 machos; 7 fi¬

lhotes;

1.678 —

Pôrto Alegre, Rio Grande do

Sul

—

17/

6/1961 —

fêmeas; 4 machos; 25 fi¬

lhotes;

1.080

Buenos Aires, Argentina

—

6 /

7/1961 —

fêmeas; 1 macho;

1.687 —

Sucre, La Paz, Bolívia

—

6 /

7/1961 —

fêmeas; 2 machos;

1.089

Butantan, Hospital

—

18/

7/1961 —

fêmea;

1.693 —

Taipas <6v local)

—

8/1961 —

fêmeas; 3 machos; muitos

filhotes;

1.094 —

Caxingui, São Paulo

—

8/1961 —

fêmeas; 1 macho;

1.701 —

Ribeirão Prêto, São Paulo

—

22 /

8/1961 —

filhotes;

1.714 —

Pôrto Alegre, Rio Grande do

Sul

—

23/

9/1961 —

fêmeas; 5 machos;

1.717 —

Butantan (Hospital)

—

22/10/1961 —

fêmea;

1.742 —

São Paulo, Capital

—

13/

3/1962 —

2000

fêmeas; 800 machos; cen¬

tenas de filhotes;

1.746 —

São Roque, São Paulo

—

21 /

3/1962 —

600

fêmeas; 300 machos; cen¬

tenas de filhotes;

1.759 —

Iguape, São Paulo, litoral

25/

4/1962 —

fêmeas; 3 machos; 8 filho¬

tes.

Mem. Inst. Butantan,

31 : 15 - 54 , 1964 .

WOLFGANG BÜCHERL

As remessas espontâneas por fornecedores e as excursões para capturas con¬

tinuam. A maioria dos exemplares é usada para a feitura do sôro anti-loxoscé-

lico polivalente, conservando-se, entretanto, de cada lote nm certo número de

exemplares.

Método

O colorido dos espécimens foi aferido em várias dezenas de exemplares. Para

a obtenção de medidas, as mais exatas possíveis, desarticulamos as pernas de

exemplares conservados em meio alcoólico e medimos artículo por artículo, com o

auxílio da lupa, tendo o cuidado de aplicar o mesmo método de medições a tôdas

as aranhas, pois uma ligeira alteração de posição de um artículo já pode modi¬

ficar as medidas que devem ser exalas pelo menos até meio milímetro.

O mesmo cuidado foi dispensado às medições dos artículos dos palpos do

macho, do bulho e êmbolo. Particular atenção merecem as tíbias, os tarsos e a

curvatura do êmbolo, que foram ilustrados de perfil, com vista dorsal, apical e

ventral, pois constituem elemento decisivo para a diferenciação segura, específica,

dos machos.

A exposição dos receptáculos seminais das fêmeas foi praticada sob a lupa

binocular, com 10 a 20 vêzes de aumento, tanto em material recente como con¬

servado em meio alcoólico. Após cuidadosa incisão lateral, destacou-se tôda a

região genital, inclusive a fenda transversal; em seguida retirou-se a cobertura

dos pelinhos e foi destacada a pele externa (com a peça submersa em álcool a

80%) ; depois afastavam-se as camadas musculares e os epitélios, de maneira que

se tinha, ao fim da operação, apenas os dois receptáculos, juntamente com as ar¬

cadas quitinosas que sustentam a fenda genital (quando elas existem), que podiam

ser estudados tanto pelo lado de cima como pelo de baixo, de perfil ou levantados,

tomando-se ao mesmo tempo suas medidas exatas e reproduzindo seu aspecto por

ilustrações ampliadas.

Cento e trinta exemplares, machos, fêmeas e filhotes, de cada lote, cujo nú¬

mero de coleção foi dado anteriormente, juntamente com a procedência, a data

da captura e o sexo, foram estudados conforme os detalhes enumerados neste ca¬

pítulo. Além disto, conferimos em cada exemplar as dimensões dos olhos, suas

distâncias (entre si, da fronte, da linha mediana, da margem lateral), a pilosidade

do corpo, das pernas (se existe ou não o que Mcllo-Leitão chamou de “escópulas”

e se estas se localizam em áreas determinadas ou não), a dentição das garras e

os comprimentos das fiandeiras.

SciELO

10 11 12 13 14 15 16

1 20 LOXOSCELES

■ a) Fórmulas das pernas

I N'- 1 269: I

■ fêmur 7,40

I patela 1,5

| tíbia 8,7

[ metatarso 8,00

1 tarso 1,90

I E LOXOSCELISMO NA AMÉRICA DO

Resultados

ambulatórias: — “Espécie A” (fig. 1)

Machos

II III

mm 8,50 mm 7,00 mm

1,70 1,50

10,90 7,40

13,50 8,00

2,00 1,30

SUL

7,60 mm

1.50

8,20

8.50

1.50

Total

27,50

36,60

25,20

27,30

Fórmula — 2, 1 = 4,

Paipo:

fêmur

2,00 mm compr.

0,50 mm largo

patela

0,60

0,50

tíbia

1,00

0,85

tarso

0,85

0,65

bulbo

0,50

êmbolo

1,10

serpentiniforme

Total

4,45 mm (não se computam bulbo e

êmbolo)

Nv 428

III

ÍV

! fêmur

7,20

mm 8,30 mm

6,80 mm

7,40 mm

patela

1,40

1,60

1,40

tíbia

8,50

10,70

7,20

8,00

metatarso

7,80

13,20

7,80

8,30

tarso

1,80

1,90

1,30

1,50

Total

26,70

mm 35,70 mm

24,50 mm

26,60 mm

Fórmula — 2, 1 = 4,

Palpo:

fêmur

1,90 mm compr.

0,45 mm largo

patela

0,40

tíbia

0,80

0,65

tarso

0,85

0,50

bulbo

0,60

0,55

embolo

1,20

serpentiniforme I

Total

3,90 mm

Nv 1477

III

IV I

fêmur

6,70

mm 8,00 mm

6,20 mm

7,00 mm |

patela

1,20

1,20 1

I tíbia

7,70

9,20

5,70

6,90 |

! metatarso

8,20

11,60

7,20

8,60 i

tarso

1,70

1,60

1,10

1,20 9

Total

25,50

mm 31,60 mm

21,40 mm

24,90 mm j

Fórmula — 2, 1 ± 4,

Palpo:

fêmur

2,00 mm compr.

0,50 mm larg. {

patela

0,55

0,50

tíbia

0,80

0,75

tarso

0,90

0,65

bulbo

0,55

êmbolo

1,20

serpentiniforme 1

Total

4,25 mm

SciELO

10 11 12 13 14 15 16

Mem. Inst

Butantan,

WOLFGANG BÜCHERL

31:15-54, 1964.

N» 1511 —

Pernas:

Palpo:

fêmur

5,70

6,90

5,70

6,20

1,80 X 0,40

patela

1,20

1,30

1,20

0,35 X 0,40

tíbia

6,50

7,90

5,00

6,C0

0,80 X 0,70

metatarso

7,30

9,40

6,40

7,20

0,80 X 0,60

tarso

1,20

1,70

1,20

1,30

0,50 X 0,50

1,30 serpentiniforme

Total

21,90

27,20

19,50

21,90 mm

Fórmula

— 2, 1 = 4, 3

N* 1511 —

Pernas:

Palpo:

fêmur

6,70

8,00

6,30

6,70

1,90 X 0,42 mm

patela

1,40

1,20

1,30

0,45 X 0,40

tarso

7,50

9,10

5,70

6,90

0,83 X 0,72

metatarso

8,10

11,40

7,20

8,30

—

tarso

1,40

1,80

1,10

1,40

0,80 X 0,62

bulbo 0,50 X 0,50

êmbolo 1,35 serpentiniforme

Total

25,10

31,70

21,50

24,60 mm

Fórmula

— 2, 1, 4, 3

N* 1511 —

Pernas:

Palpo:

fêmur

6,20

7,00

5,70

6,40

1,80 X 0,40 mm

patela

1,30

1,40

1,10

1,30

0,43 X 0,39

tíbia

7,20

8,10

5,10

6,10

0,81 X 0,70

metatarso

7,60

9,90

5,50

7,80

—

tarso

1,40

1,30

1,10

1,40

0,75 X 0,59

bulbo 0,45 X 0,45

Total

23,70

27,70

18,50

23,C0 mm

êmbolo 1,10 serpentiniforme

Fórmula

— 2, 1, 4, 3

N» 1535 —

Pernas:

Palpo:

fêmur

5,80

6,90

5,60

6,00

1,70 X 0,36 mm

patela

1,20

1,10

1,20

0,40 X 0,39

tíbia

6,50

7,70

4,90

6,00

0,75 X 0,70

metatarso

7,20

10,00

6,50

7,10

—

tarso

1,40

1,00

1,40

0,70 X 0,55

bulbo 0,40 X 0,40

Total

22,10

27,20

19,10

21,70 mm

êmbolo 0,90 serpentiniforme

Fórmula

N* 1535 —

Pernas:

Palpo:

fêmur

6,00

7,20

5,90

6,50

1,80 X 0,40 mm

patela

1,20

1,30

1,10

0,45 X 0,40

tíbia

7,00

8,20

5,20

6,10

0,82 X 0,70

metatarso

7,50

10,10

6,50

7,50

—

tarso

1,50

1,40

1,20

0,74 X 0,58

bulbo 0,40 X 0,40

êmbolo 1,15 serpentiniforme

Total

23,20

28,30-

20,10

22,40 mm

Fórmula

— 2, 1, 4, 3

LOXOSCELES E

LOXOSCELISMO

NA AMÉRICA DO SUL

N* 1535 —

Pernas:

Palpo:

fêmur

6,00

7,20

5,80

6,10

1,77 X 0,40 mm

patela

1,20

1,30

1,00

0,45 X 0,36

tíbia

6,90

8,20

5,30

6,20

0,82 X 0,74

metatarso

7,70

10,20

6,40

7,90

—

tarso

1,50

1,30

1,20

0,70 X 0,56

bulbo 0,40 X 0,40

Total

23,30

28,40

19,80

22,40 mm

êmbolo

1,15

serpentiniforme

Fórmula

— 2, 1, 4, 3

N» 1569 —

Pernas:

Palpos:

fêmur

6,80

8,10

6,50

7,30

1,90

x 0,45 mm

patela

1,30

1,40

0,60

X 0,50

tíbia

7,90

10,00

6,00

7,00

0,90

X 0,80

metatarso

8,30

12,00

7,10

8,30

—

tarso

1,70

1,80

1,20

1,30

bulbo

0,90

0,50

X 0,60

X 0,40

Total

26,00

32,20

22,10

25,30 mm

êmbolo

1,40

serpentiniforme

Fórmula

— 2, 1, 4, 3

Médias aritméticas:

a) dos comprimentos das pernas: 24,50 mm — 30,73 mm — 22,17 mm — 24,01 mm

b) dos artículos dos palpos (comprimento e largura):

fêmur

— 1,86X0,43

patela

— 0,47X0,40

tíbia

— 0,83X0,73

tarso

— 0,80X0,60

êmbolo

— 1,17 mm -

— serpentiniforme

Fêmeas (íig. 4)

N 1 ) 266 — Comprimento das pernas: N* 1469 (filhote):

fêmur

7,20

8,10

6,50

7,20 mm

6,00

6,20

5,30

6,00 mm

patela

1,00

1,10

1,00

1,50

1,60

1,30

1,40

tíbia

7,90

9,00

5,80

7,10

6,00

6,40

4,60

5,80

metatarso

7,50

9,00

7,00

8,40

6,30

6,50

5,50

6,50

tarso

1,90

1,60

1,40

1,60

1,40

1,50

1,10

1,30

Total

25,5

28,8

21,7

25,30 mm

21,20

22,20

17,80

21,00 mm

Fórmula — 2,

1 = 4,

2, 1 =

= 4, 3

Nv 1498 (filhote):

1498:

fêmur

6,30

7,00

5,80

6,20 mm

6,90

.7,40

5,80

6,50 mm

natela

1,50

1,40

1,60

1,70

1,60

1,40

tíbia

6,30

7,00

5,00

6,00

6,80

6,00

4,90

6,00

metatarso

6,30

7,00

5,80

6,60

6,40

5,80

5,10

6,80

tarso

1,50

1,20

1,10

1,40

1,30

1,50

Total

21,9

23,6

19,1

21,60 mm

22,00

22,40

18,90

21,20 mm

Fórmula — 2,

1 = 4,

2, 1,

4, 3

1, | SciELO

Mem. Inst. Butantan,

31:15-54, 1964.

WOLFGANG BÜCHERL

N» 1498 (filhote):

N* 1504:

fêmur 6,20

5,80

5,00

5,60 mm

7,40

7,70

6,60

7,30 mm

patela 1,30

1,30

1,20

1,70

1,90

1,70

tíbia 5,50

5,80

4,20

5,10

7,20

7,80

5,70

7,00

metatarso 5,30

5,80

4,60

4,70

7,60

8,00

6,60

7,60

tarso 1,30

1,30

1,10

1,30

1,40

1,30

1,20

1,40

Total 19,60 20,00

16,10

18,90 mm

25,30

26,70

21,80

25,00 mm

Fórmula

— 2,

1, 4, 3

2, 1 =

4, 3

N* 1518 (filhote):

N*?

1518

(filhote):

fêmur 2,70

2,80

2,30

2,60 mm

3,60

3,90

3,00

3,60 mm

patela 0,70

0,80

0,60

0,80

1,00

0,60

0,70

tibia 2,40

2,40

1,90

2,20

3,40

3,60

2,80

3,05

metatarso 2,30

2,40

2,00

2,40

3,85

3,60

2,80

3,30

tarso 1,00

1,10

0,90

0,80

1,20

1,00

1,10

Total 9,00

9,50

7,70

8,60 mm

12,30

13,30

9,90

11,70 mm

Fórmula

— 2,

1, 4, 3

2, 1,

4, 3

N* 1530 (filhote):

1535:

fêmur 2,40

2,70

2,20

2,30 mm

5,20

5,60

4,80

5,20 mm

patela 0,70

0,70

0,60

1,20

tibia 2,30

2,70

1,90

2,20

5,10

5,30

4,00

4,80

metatarso 2,25

2,70

2,10

2,20

5,00

5,80

4,50

5,40

tarso 1,00

1,10

0,90

1,00

1,20

1,00

1,10

Total 8,70

9,90

7,70

8,30 mm

17,70

19,10

15,50

17,70 mm

Fórmula

— 2,

1, 4, 3

2, 1 =

: 4, 3

Médias aritméticas dos comprimentos das pernas:

22,60 mm —

23,80

— 19,23 mm

— 22,17 mm;

11,90 mm —

12,90

— 10,20 mm

— 11,60 mm.

“Espécie B

(fig-

Machos

Comprimentos dos artíc. das pernas:

N* 268:

Comprimento e largura dos palpos:

fémur

6,00

7,00

6,00

7,20 mm

3,70 X 0,50 mm

patela

1,50

1,40

1,50

1,10 X 0,50

tibia

6,60

6,40

5,20

6,60

2,60 X 0,90

metatarso

7,00

7,50

6,50

7,80

—

tarso

2,00

2,20

1,80

2,20

0,50 X 0,54

Total

23,10

24,50

20,90

25,40 mm

7,90 mm

bulbo 0,50 X

Fórmula — 4,

2, 1,

êmbolo 1,45 m

SciELO

10 11 12 13 14 15 16

I 24

| N* 271:

| fêmur 6,30

O patela 1,50

1 tíbia 6,80

| metatarso 7,10

I tarso 2,00

LOXOSCELES E LOXOSCELISMO NA AMÉRICA DO SUL

7,30 6,10 7,40 mm 4,00 X 0,50 mm

1,50 1,30 1,50 1,30 X 0,60

6,70 5,50 7,00 2,60 X 1,10

7,60 6,60 8,00 —

2,20 1,80 2,30 0,60 X 0,65

I Total

23,70

25,20

21,30

26,30 mm

8,50 mm

bulbo 0,50 X 0,70 mm

Fórmula — 4,

2, 1, 3

êmbolo 1,40 mm — recurvo

j 272 — Comprimento das

pernas:

Palpos (comprimento e largura):

| fêmur

6,50

7,00

6,30

7,00 mm

3,90 X 0,45 mm

1 patela

1,50

1,40

1,30

1,60

1,20 X 0,50

1 tíbia

7,00

7,50

5,80

7,00

2,50 X 0,90

| metatarso

6,90

7,80

6,90

8,60

—

tarso

2,00

1,80

2,00

0,50 X 0,50

Total

23,90

25,80

20,10

26,10 mm

8,10 mm

Fórmula -

- 4, 2,

1, 3

bulbo 0,45 X 0,53 mm

i Cefalotórax — 4,90 X 4,20

êmbolo 1,50 mm — recurvo

Nq 272: macho, filhote, com o tarso periforme, ainda sem bulbo:

fêmur

4,00

4,40

3,80

4,70 mm

patela

1,20

1,10

1,30

tíbia

4,00

4,20

3,20

4,30

Fase evolutiva — Uma ecdise antes da

metatarso

4,00

4,40

3,80

5,40

idade adulta.

tarso

1,50

1,80

1,60

Fórmula — 4, 2 = 1, 3

Total

15,70

15,90

13,40

16,30 mm

Cefalotórax — 3,40 X 3,20 mm

N» 276:

fêmur

6,00

7,00

6,00

7,50 mm

3,70 X 0,60 mm j

patela

1,80

1,50

1,70

1,30 X 0,70 I

tíbia

7,00

7,50

5,80

7,20

2,30 X 0,90 I

metatarso

6,90

7,70

6,80

9,10

— 1

tarso

1,30

1,40

1,20

1,50

0,50 X '0,50 j

Total

23,00

25,40

21,30

27,00 mm

7,80 mm |

Fórmula —

- 4, 2, 1, 3

bulbo 0,50 X 0,50 mm |

Cefalotórax

— 5,00 X 4,20

êmbolo 1,20 mm recurvo 1

N° 277:

fêmur

6,80

7,50

6,80

7,50 mm

4,00 X 0,40 mm 1

patela

1,80

1,40

1,10

1,50

1,20 X 0,50 H

tíbia

7,20

7,50

7,00

7,20

2,70 X 0,90 1

metatarso

7,90

8,00

6,80

8,60

- 1

| tarso

2,00

1,80

2,10

0,70 X 0,70 I

Total

25,70

26,40

23,50

26,90 mm

8,60 mm 1

Fórmula —

- 4, 2, 1

., 3

bulbo 0,40 x 0,50 mm 1

Cefalotórax

: — 4,80 X 4,10

êmbolo 0,80 mm — recurvo 1

SciELO

10 11 12 13 14 15 16

Mem. Inst. Butantan,

WOLFGANG BÜCHERL

31:15-54, 1964.

No 628 (íilhote):

fêmur 4,80

5,20 4,60

5,70 mm

1,40 X 0,35 mm

patela 1,20

1,30 1,20

1,40

0,60 X 0,40

tíbia 4,60

5,00 4,00

5,30

1,30 X 0,40

metatarso 4,40

4,90 4,20

5,80

—

tarso 1,50

1,60 1,50

1,80

0,30 X 0,35

Total 16,50

18,00 15,50

20,00 mm

2,60 mm

Fórmula —

4, 2, 1, 3

bulbo 0,35 X 0,35

Cefalotórax

— 3,70 X 3,20

êmbolo 0,75 mm —

recurvo

No 1145 — Pinciamonhangaba, São Paulo

— 2/10/1950:

fêmur 5,20

6,00 5,10

5,50 mm

3,30 X 0,35 mm

patela 1,50

1,50 1,40

1,50

1,20 X 0,50

tíbia 5,90

6,70 5,00

6,30

2,20 X 0,80

metatarso 6,00

7,00 6,40

8,00

—

tarso 1,80

1,90 1,60

2,10

0,40 X 0,70

Total 20,40

23,10 19,50

24,40 mm

7,10 mm

Fórmula —

4, 2, 1, 3

bulbo 0,60 X 0,60

Cefalotórax

— 4,50 X 4,10

êmbolo 1,20 mm —

recurvo

1308:

fêmur 6,60

7,30 6,50

7,40 mm

3,80 X 0,40 mm

patela 1,80

1,50 1,40

1,70

1,30 X 0,60

tíbia 7,00

7,40 6,20

7,80

2,70 X 0,95

metatarso 7,00

7,50 6,80

8,20

—

tarso 1,90

1,90 1,80

2,00

0,80 X 0,80

Total 24,30

25,60 22,70

27,10 mm

8,60 mm

Fórmula —

4, 2, 1, 3

bulbo 0,50 X 0,50

Cefalotórax

— 5,30 X 4,80

êmbolo 1,40 mm —

recurvo

No 1308 (filhote, ainda sem bulbo):

fêmur 4,90

5,00 4,50

5,50 mm

patela 1,20

1,20 1,20

1,20

tíbia 4,70

4,90 3,80

5,00

metatarso 4,60

5,00 4,70

6,00

Fórmula —

- 4, 2, 1, 3

tarso 1,80

1,70 1,40

1,60

Total 17,20

17,80 15,60

19,30 mm

Nv 1308:

fêmur 5,70

6,50 5,50

6,70 mm

3,00 X 0,35 mm

patela 1,30

1,30 1,20

1,30

1,10 X 0,40

tíbia 6,10

6,80 5,00

6,60

2,00 X 0,80

metatarso 6,10

7,30 5,30

8,10

—

tarso 1,90

1,80 1,60

1,90

0,60 X 0,65

Total 21,10

23,70 18,60

24,60 mm

6,70 mm

Fórmula —

4, 2, 1, 3

bulbo 0,60 X 0,65

Cefalotórax

— 4,50 X 4,10

êmbolo 1,00 mm —

recurvo

26 LOXOSCELES I

LOXOSCELISMO NA AMÉRICA DO

SUL

N« 1475:

fêmur 6,50

7,30

6,70

7,70 mm

4,00 X 0,40 mm

patela 1,60

1,60

1,50

1,70

1,30 X 0,45

tíbia 7,20

8,00

6,10

7,50

2,45 X 0,90

metatarso 7,20

8,50

7,50

9,30

—

tarso 2,10

2,10

1,50

2,00

0,70 X 0,70

Total 24,60

27,50

23,30

28,20 mm

8,45 mm

Fórmula —

4, 2,

1, 3

bulbo 0,50 X 0,50

Cefalotórax

— 4,50 X 4,00

êmbolo 1,40 mm —

- recurvo

N9 1506 (Vina dei

Mar, Chile):

fêmur 5,00

5,00

4,70

5,80 mm

4,00 X 0,40 mm

patela 1,40

1,40

1,30

1,40

1,00 X 0,40

tíbia 4,60

4,80

3,80

5,00

2,50 X 0,80

metatarso 4,60

5,00

4,50

6,20

—

tarso 1,40

1,50

1,20

1,40

0,80 X 0,80

Total 17,00

17,70

15,50

19,80 mm

7,80 mm

Fórmula —

4, 2,

1, 3

bulbo 0,70 X 0,70

Cefalotórax

— 5,00 X 4,60

êmbolo 1,60 mm —

recurvo

N? 1509 (Montevideo) — filhote:

fémur 3,60

4,00

3,50

4,30 mm

patela 1,00

0,90

0,80

1,00

1,40 X 0,30 mm

tíbia 3,65

3,80

3,00

3,90

0,50 X 0,30

metatarso 3,50

4,00

3,40

4,80

1,00 X 0,50

tarso 1,40

1,50

1,10

1,50

—

0,70 X 0,65

Total 13,10

14,20

11,80

15,50 mm

2,60 mm

Fórmula —

4, 2,

1, 3

Cefalotórax

— 3,00 X 2,40

sem bulbo

N» 1529:

fêmur 6,80

7,70

6,70

8,00 mm

4,00 X 0,40 mm

patela 1,70

1,80

1,50

1,70

1,20 X 0,50

tíbia 7,20

7,90

6,00

7,40

2,80 X 0,80

metatarso 7,00

8,30

7,10

9,70

—

tarso 2,00

2,000

1,60

2,00

0,60 X 0,60

Total 24,70

27,70

22,90

28,80 mm

8,60 mm

Fórmula —

4, 2,

1, 3

bulbo 0,6 X 0,5 mm

Cefalotórax

— 5,00 X 4,20

êmbolo 1,50 mm —

pouco recurvo

N* 1534:

fêmur 6,00

6,80

6,00

7,10 mm

3,80 X 0,40 mm

patela 1,50

1,60

1,40

1,70

1,30 X 0,60

tíbia 6,50

7,40

5,50

6,90

2,40 X 0,86

metatarso 6,80

7,90

6,70

8,60

—

tarso 1,80

2,00

1,60

1,90

0,60 X 0,60

Total 22,60

24,70

21,20

26,20 mm

8,10 mm

Fórmula —

4, 2

1, 3

bulbo 0,50 X 0,60

Cefalotórax

— 4,20 X 3,70

êmbolo 1,50 mm —

recurvo

Mem. Inst. Butantan,

WOLFGANG BÜCHERL

27 I

31:15-54, 1964.

! N» 1534 (filhote, ainda sem

i bulbo):

fêmur 4,60

4,80

4,30

5,20 mm

patela 1,10

1,10

1,00

1,20

tibia 4,30

4,60

3,60

4,90

Fórmula — 4,

2, 1,

metatarso 4,20

4,80

4,20

5,70

Cefalotórax —

3,50 X

3,20 mm

tarso 1,40

1,60

1,20

1,70

Total 15,60

16,90

14,30

18,70 mm

1 N» 1534 (filhote de muito

pouca idade):

fêmur 2,30

2,40

2,10

2,60 mm

1 patela 0,70

0,70

0,50

0,70

tíbia 1,90

2,10

1,70

2,30

Fórmula — 4,

2, 1,

metatarso 1,80

1,90

1,70

2,60

Cefalotórax —■

2,70 X

2,40 mm

tarso 0,90

1,10

0,70

1,20

Total 7,60

8,20

6,70

9,40 mm

N? 1568 (Santiago

do Chile):

fêmur 6,30

7,10

6,20

7,20 mm

3,80 X 0,60 mm

patela 1,50

1,50

1,30

1,60

1,35 X 0,70

tíbia 6,80

7,60

5,50

7,00

2,45 X 1,00

metatarso 7,00

7,50

6,80

8,60

—

tarso 1,80

1,90

1,50

2,00

0,70 X 0,70

Total 23,40

25,60

21,30

26,40 mm

8,30 mm

Fórmula —

4, 2,

1, 3

bulbo 0,70 X 0,60

Cefalotórax

— 5,10 X 4,40

êmbolo. 1,50 mm —

- recurvo

N* 1568:

[ patela 6,00

6,60

5,70

7,20 mm

3,60 X 0,50 mm

1 fémur 1,30

1,40

1,20

1,50

1,10 X 0,50

tíbia 6,50

7,10

5,50

7,00

2,00 X 0,95

1 metatarso 6,60

7,50

6,40

8,20

—

1 tarso 1,80

1,90

1,50

2,00

0,70 X 0,70

I Total 22,20

24,50

20,30

25,90 mm

7,40 mm

E Fórmula —

4, 2,

1, 3

bulbo 0,65 X 0,65

1 Cefalotórax

— 5,00 X 4,45

êmbolo 1,15 mm —

- recurvo

j N*? 1568 (filhote, ainda sem

i bulbo):

i fêmur 5,00

5,50

5,00

5,90 mm

1,90 X 0,50 mm

I patela 1,20

1,20

1,30

1,00 X 0,80

1 tibia 4,90

5,00

4,10

5,40

1,10 X 0,60

1 metatarso 4,60

5,00

4,50

6,20

—

I tarso 1,60

1,70

1,50

1,80

1,60 X 0,80

1 Total 17,30

18,40

16,30

20,60 mm

5,60 mm

1 Fórmula —

4, 2,

1, 3

■ Cefalotórax

— 3,90 X 3,40

SciELO

10 11 12 13 14 15 16

■ 28 LOXOSCELES E LOXOSCELISMO NA AMÉRICA DO

SUL 1

1 N* 1568 (b)

— La Serena,

Chile:

I íêmur 5,80

6,50

4,90

6,90 mm

3,50 X 0,40 mm

I patela 1,60

1,70

1,40

1,70

1,30 X 0,50

1 tíbia 6,30

6,80

4,10

6,70

2,10 X 0,90

| metatarso 6,40

7,30

5,20

8,10

—

1 tarso 1,80

1,90

1,50

2,00

0,80 X 0,80

1 Total 21,90

24,20

17,10

25,40 mm

7,70 mm

1 Fórmula —

4, 2, 1, 3

bulbo 0,65 X 0,65

I Cefalotórax

— 5,00

X 4,60

êmbolo 1,00 mm —

- recurvo

[ Nv 1568 (b)

— La Serena,

Chile:

[ fêmur 6,50

7,60

6,50

8,10 mm

4,30 X 0,50 mm

1 patela 1,80

2,00

1,70

1,80

1,20 X 0,70

tíbia 7,60

8,20

6,10

7,90

2,70 X 0,90

1 metatarso 7,70

8,60

7,40

9,50

—

| tarso 2,00

2,00

1,80

2,00

0,80 X 0,80

Total 25,60

28,40

23,50

29,30 mm

9,00 mm

Fórmula —

4, 2, 1,

bulbo 0,70 X 0,70

Cefalotórax

— 5,20

X 4,30

êmbolo 1,25 mm —

- recurvo

No 1568 (e)

— Santiago, Chile (filhote,

sem bulbo):

fêmur 4,00

4,50

4,00

4,90 mm

patela 1,00

1,10

1,00

1,10

tíbia 3,90

4,30

3,40

4,70

Fórmula — 4,

2, i, 3

metatarso 4,00

4,30

3,90

5,30

Cefalotórax —

3,80 X 3,40 mm

tarso 1,60

1,70

1,50

1,70

Total 14,50

15,90

13,80

17,70 mm

No 1585 — Santiago

do Chile:

fêmur 6,00

7,00

6,00

7,20 mm

4 00 X 0,45 mm

patela 1,60

1,70

1,50

1,80

1,10 X 0,60

tíbia 6,90

7,30

5,40

7,00

2,40 X 0,90

metatarso 7,00

8,00

7,00

8,90

—

tarso 2,00

2,00

1,60

2,00

0,75 X 0,75

Total 23,50

26,00

21,50

26,90 mm

8,25 mm

Fórmula —

4, 2, 1

. 3

bulbo 0,50 X 0,50

Cefalotórax

— 4,10

X 3,60

êmbolo 1,20 mm —

- recurvo |

No 1585 (V.)

— Santiago,

Chile (filhote,

sem bulbo) :

fêmur 3,90

4,10

3,70

4,50 mm

patela 1,00

1,20

1,00

1,20

tíbia 3,60

3,60

2,90

4,10

Fórmula — 4,

2, 1, 3 1

metatarso 3,70

3,90

3,50

5,00

Cefalotórax —

3,60 X 3,00 mm 1

tarso 1,50

1,60

1,30

1,60

Total 13,70

14,40

12,40

16,40 mm

SciELO

10 11 12 13 14 15 16

i Mem. Inst. Butantan,

WOLFGANG BÜCHERL Oq

31:15-54, 1964.

I N* 1585 (V)

— Santiago, Chile (filhote,

sem bulbo):

I fêmur 5,00

5,20

4,70

6,70 mm

1 patela 1,40

1,40

1,20

1,40

tíbia 4,60

4,70

3,80

5,00

Fórmula — 4, 2, 1, 3

I metatarso 4,80

4,90

4,30

6,20

Cefalotórax — 4,40 X 3,90 mm

1 tarso 1,60

1,80

1,30

1,80

Total 17,40

18,00

15,30

21,10 mm

Nv 1585 (II)

— Santiago (filhote):

N9 1585 (II) — Santiago (filhote):

fêmur 5,50

6,00

5,30

6,50 mm

5,00 5,50 4,80 5,80 mm

patela 1,60

1,70

1,50

1,60

1,50 1,60 1,40 1,50

tíbia 5,40

5,80

4,60

6,00

4,70 5,00 4,30 5,20

metatarso 5,40

6,00

5,70

7,60

4,70 5,00 4,70 6,20

tarso 1,70

1,80

1,40

1,80

1,60 1,60 1,50 1,70 |

Total 19,60

21,30

18,50

23,50 mm

17,50 18,70 16,70 20,40 mm

Fórmula —

4, 2,

1, 3

4, 2, 1, 3 j

í Cefalotórax

— 4,30 X 3,90

4,20 X 3,90 mm

N? 1612 — Perú

fêmur 7,00

7,80

7,00

8,20 mm

4,50 X 0,50 mm

patela 1,90

1,90

1,70

1,90

1,30 X 0,70

tíbia 8,00

8,60

6,80

8,30

2,80 X 0,90

metatarso 7,60

8,90

7,40

10,50

—

! tarso 1,80

1,90

1,70

2,00

0,80 X 0,80

I Total 26,30

29,10

24,60

30,90 mm

9,40 mm

1 Fórmula —

4, 2,

1, 3

bulbo 0,70 X 0,70 mm

I Cefalotórax

— 5,30 X 4,80

êmbolo 1,35 mm — recurvo

N? 1686 — :

Buenos Aires:

fêmur 6,00

6,70

5,90

7,10 mm

4,00 X 0,45 mm

patela 1,50

1,60

1,40

1,60

1,10 X 0,60

tíbia 6,60

6,90

5,40

6,90

2,50 X 0,80

metatarso 6,60

7,60

6,80

8,60

- 1

tarso 1,70

1,80

1,50

1,90

0,60 X 0,80

Total 22,40

24,60

21,00

26,10 mm

8,20 mm j

Fórmula —

4, 2,

1, 3

bulbo 0,60 X 0,40 mm j

Cefalotórax

— 4,10 X 3,60

êmbolo 1,30 mm — recurvo I

SciELO

10 11 12 13 14 15 16

LOXOSCELES E LOXOSCELISMO NA AMÉRICA DO SUL

Médias aritméticas dos machos:

1. Dos comprimentos das pernas:

a) Em adultos: 23,15 mm — 25,24 mm — 21,04 mm — 26,37 mm;

b) Em filhotes: 15,47 mm — 16,47 mm — 14,20 mm — 18,24 mm.

2. Dos comprimentos e larguras dos artículos dos palpos (adultos):

fêmur

— 3,60

0,44

patela

— 1,13

0,53

tíbia

— 2,33

0,84

tarso

— 0,64

0,67

Fêmeas

Aferição dos comprimentos dos artículos das pernas:

Ne 268

São Simão, R. G. do Sul:

fêmur 6,00

6,20

5,80

6,50 mm

patela 1,80

2,00

1,70

2,00

tíbia 5,80

6,20

5,00

6,50

metatarso 5,80

6,60

6,00

7,60

tarso 1,60

1,70

1,60

2,00

Total 21,00

22,70

20,30

24,60 mm

Fórmula —

4, 2, 1,

Cefalotórax

— 5,10

X 4,50

Ne 272 — Cerqueira

César:

fêmur 6,20

6,20

6,00

7,20 mm

patela 1,80

2,00

1,80

tibia 6,10

6,20

5,00

6,50

metatarso 5,90

6,20

5,70

7,80

tarso 1,60

1,80

1,50

1,90

Total 21,60

22,40

20,00

25,40 mm

Fórmula —

4, 2, 1,

Cefalotórax

— 5,80

X 4,70

Ne 279 — São Paulo, Capital:

fêmur 5,50

5,90

5,50

6,50 mm

patela 1,50

1,80

1,70

1,80

tíbia 5,50

5,70

4,50

6,00

metatarso 5,50

5,80

5,40

7,00

tarso 1,70

1,80

1,30

1,80

Total 19,70

21,00

17,40

23,10 mm

Fórmula —

- 4, 2, 1, 3

Cefalotórax

— 5,00

X 4,00

Ne 270 — Francisco Sodré, São Paulo

(filhote):

4,30

4,80

4,20

5,00 mm

1,10

1,20

1,00

1,10

4,00

4,30

3,50

4,70

4,20

4,50

4,00

5,50

1,20

1,50

1,10

1,40

15,80

16,30

13,80

17,70 mm

4, 2,

1, 3

4,40 :

x 3,10 mm

277 -

— São Carlos:

6,00

6,10

5,10

6,70 mm

1,40

1,60

1,40

1,60

5,60

6,70

4,60

6,00

5,60

6,00

5,70

7,20

2,00

1,80

2,10

20,20

22,10

18,20

23,10 mm

4, 2,

1, 3

5,00

X 4,20 mm

281 -

- Lagoa,

Santa Catarina:

6,80

7,00

6,30

7,60 mm

2,00

1,80

2,10

6,80

7,00

5,30

7,00

6,80

7,00

6,60

8,50

1,80

1,50

1,60

24,20

24,80

21,50

26,80 mm

4, 2, 1, 3

6,00 X 5,20 mm

SciELO

10 11 12 13 14 15 16

Mem. Inst. Butantan,

WOLFGANG BÜCHERL

31:15-54, 1964.

N? 282 — Barcelos,

Rio:

N<*

282:

fêmur 5,80 6,00

5,60

6,50 mm

5,30

5,80

5,10

6,20 mm

patela 1,90 2,00

1,90

2,00

1,80

1,70

1,80

tíbia 5,80 6,00

4,80

6,00

5,30

5,70

4,50

6,00

metatarso 5,50 6,00

5,50

7,20

5,20

5,70

5,00

7,00

tarso 1,80 1,80

1,50

1,80

1,70

1,50

1,80

Total 20,80 21,80

19,30

23,50 mm

19,40

20,70

17,80

22,80 mm

Fórmula — 4, 2,

1, 3

4, 2,

1, 3

Cefalotórax — 4,80

X 4,00

5,00

X 4,00 mm

N» 593 — Montevidéo (filhote):

N*>

1308

—• Montevidéo:

fêmur 3,30 3,60

3,10

3,90 mm

5,80

5,90

5,40

6,20 mm

patela 1,00 1,00

0,90

1,00

1,60

1,50

tíbia 3,00 3,20

2,50

3,50

5,60

5,80

4,50

6,00

metatarso 2,80 3,20

2,80

4,00

5,10

5,70

5,20

7,00

tarso 1,40 1,40

1,40

1,50

1,40

1,50

1,30

1,60

Total 11,50 12,40

11,10

13,90 mm

19,50

20,50

17,90

22,30 mm

Fórmula — 4, 2,

1, 3

4, 2,

1, 3

Cefalotórax — 2,80

X 2,40

5,00

X 4,00 mm

N* 1495 — Butantan

1509

— Montevidéo:

fêmur 5,50 5,70

5,30

6,30 mm

6,70

6,20

5,70

6,90 mm

patela 1,60 1,70

1,40

1,60

1,80

1,70

1,80

tíbia 5,50 5,70

4,50

5,80

6,00

4,80

6,20

metatarso 5,30 5,40

5,10

6,50

5,80

6,00

5,70

7,20

tarso 1,40 1,40

1,30

1,60

1,70

1,80

1,60

1,90

Total 19,30 19,90

17,60

21,80 mm

20,80

21,80

19,50

24,00 mm

Fórmula — 4, 2,

1, 3

4, 2,

1, 3

Cefalotórax — 5,00

X 4,00

5,30

x 4,70 mm

N9 1509 — Filhote:

1509

— Filhote:

fêmur 3,80 4,00

3,50

4,40 mm

3,60

3,80

3,30

4,00 mm

patela 0,90 0,90

1,00

0,80

0,90

0,70

1,00

tíbia 3,60 3,70

2,90

4,00

3,10

3,50

2,80

3,80

metatarso 3,50 3,50

3,40

4,50

3,00

3,20

4,40

tarso 1,20 1,30

1,20

1,60

1,30

1,40

1,20

1,40

Total 13,00 13,40

12,00

15,50 mm

11,80

12,80

11,20

14,60 mm

Fórmula — 4, 2,

1, 3

4, 2,

1, 3

Cefalotórax — 3,50

X 3,10

3,00

X 2,40 mm

N° 1529 — Butantan

(filhote):

1534

— Fazenda Butantan:

fêmur 2,60 2,90

2,00

3,00 mm

5,00

5,10

4,80

5,50 mm

patela 0,80 0,90

0,70

0,80

1,30

1,40

1,30

tíbia 2,40 2,50

2,00

2,80

4,50

4,80

3,70

5,00

metatarso 2,00 2,30

2,20

3,00

4,30

5,00

4,70

6,00

tarso 1,20 1,20

1,00

1,20

1,30

1,40

1,20

1,60

Total 9,00 9,80

7,90

10,80 mm

16,40

17,70

15,70

19,40 mm

Fórmula — 4, 2,

1, 3

4, 2,

1, 3

Cefalotórax — 2,30

X 2,00

4,50 X 4,00 mm

32 LOXOSCELES E

LOXOSCELISMO NA AMÉRICA DO

SUL

N* 1534 — Fazenda

Butantan:

1534

— Fazenda Butantan:

íémur 4,60

5,00

4,40

5,60 mm

5,90

6,00

5,70

6,00 mm

patela 1,30

1,30

1,20

1,50

1,30

1,20

1,50

tíbia 4,80

4,70

4,00

4,90

6,10

6,20

5,40

6,00

metatarso 4,80

5,00

4,50

5,70

6,00

6,10

5,70

6,80

tarso 1,30

1,30

1,60

1,30

1,40

1,30

Total 16,80

17,30

15,40

19,30 mm

20,60

21,00

19,30

21,60 mm

Fórmula —

4, 2,

1, 3

4, 2,

1, 3

Cefalotórax

— 4,60

X 4,20

5,00

X 4,60 mm

N? 1534 — Muito jovem:

1534

— Filhote:

lêmur 2,20

2,20

1,80

2,40 mm

2,90

3,30

2,70

3,20 mm

patela 0,70

0,80

0,60

0,70

0,80

1,00

0,90

tibia 2,00

2,00

1,60

2,60

2,80

2,00

3,10

metatarso 1,80

2,00

1,70

2,80

2,40

2,80

2,30

3,50

tarso 0,80

1,00

0,70

1,00

1,10

1,20

1,10

1,30

Total 7,50

8,00

6,40

9,50 mm

9,80

11,10

9,00

12,00 mm

Fórmula —

4, 2,

1, 3

4, 2,

1, 3

Cefalotórax

— 3,10

X 2,80

3,30

x 3,00 mm

N* 1567 (a)

— Santiago, Chile:

1567

(b) — Santiago, Chile:

fêmur 4,80

5,20

4,70

5,70 mm

4,50

4,80

4,20

5,20 mm

patela 1,20

1,40

1,30

1,60

1,30

1,20

1,30

tibia 4,80

4,90

4,00

5,10

4,30

3,60

4,80

metatarso 4,70

5,30

4,90

6,40

4,20

4,60

4,20

5,70

tarso 1,60

1,60

1,40

1,80

1,50

1,70

1,40

1,80

Total 17,10

18,40

16,30

20,60 mm

15,80

16,70

14,00

18,80 mm

Fórmula —

4, 2,

1, 3

4, 2,

1, 3

cefalotórax

— 4,50

X 4,00

3,60

X 3,20 mm

N* 1567 (c) -

— Santiago (filhote):

1567

(d) — Santiago (filhote):

fêmur 3,60

3,90

3,50

4,20 mm

4,20

4,60

4,00

5,00 mm

patela 1,00

1,10

0,90

1,00

1,10

1,20

1,00

1,20

tíbia 3,40

3,60

2,80

3,90

4,10

4,30

3,30

4,70

metatarso 3,20

3,80

3,20

4,40

4,00

4,40

4,00

5,60

tarso 1,40

1,40

1,30

1,40

1,50

1,30

1,70

Total 12,70

13,80

11,70

14,90 mm

14,90

16,00

13,60

18,20 mm

Fórmula —

4, 2,

1, 3

4, 2,

1, 3

Cefalotórax

— 3,40

X 3,00

3,65

X 3,20 mm

N9 1567 (e) -

— Santiago (filhote):

1567

(0 —

Santiago:

fémur 3,50

3,80

3,40

4,10 mm

5,80

6,20

5,70

6,80 mm

patela 0,90

1,10

0,90

1,00

1,60

1,70

1,40

1,70

tibia 3,20

3,40

2,80

3,70

5,70

6,00

4,70

6,10

metatarso 3,20

3,50

3,10

4,50

5,40

5,90

5,50

7,10

tarso 1,20

1,50

1,20

1,60

1,80

1,50

2,00

Total 12,00

13,30

11,40

14,90 mm

20,30

21,60

18,80

23,70 mm

Fórmula —

4, 2,

1, 3

4, 2,

1, 3

Cefalotórax

— 3,4C

X 3,10

5,20

X 4,30 mm

Mem. Xnst. Butantan,

31:15-54, 1964.

WOLFGANG BÜCHERL

N* 1567 (g) — Santiago: N« 1567 (h) — Santiago:

fêmur

patela

tíbia

metatarso

tarso

4,90

1,40

4.70

4,60

1.70

5,20

1,40

5,1®

4.80

1.80

4,80

1,20

4,00

4,40

1,60

5,70 mm

1,60

5,30

6,00

1,90

5,20

1,50

5,00

4,80

1,50

5,70

1,60

5,20

5,10

1,60

5,00

1,50

4,20

5,00

1,40

6,10 mm

1,50

5,70

6,80

1,80

Total

17,30

18,30

16,00

20,50 mm

18,00

19,20

17,10

21,90 mm

Fórmula —

4, 2,

1, 3

4, 2,

1, 3

Cefalotórax

— 4,50 X 4,00

5,30 5

< 4,40 mm

N* 1567 (i) -

- La Serena:

N o

1567

(j) — La Serena:

fêmur

6,70

7,20

5,80

7,50 mm

5,90

6,40

5,70

6,80 mm

patela

1,60

1,70

1,40

1,70

1,30

1,40

1,20

1,50

tíbia

6,50

6,60

5,10

6,70

5,70

6,20

4,50

6,10

metatarso

5,80

6,40

5,40

8,20

5,30

6,00

5,30

7,20

tarso

1,70

1,80

1,60

1,90

1,60

1,80

1,40

2,00

Total

22,30

23,70

19,70

25,00 mm

19,80

21,80

18,10

23,60 mm

Fórmula —

4, 2,

1, 3

4, 2,

1, 3

Cefalotórax

— 5,60 X 4,70

5,00 X 4,20 mm

N* 1567 (k)

— Santiago:

' 1585

— Santiago:

fêmur

5,50

6,10

5,40

6,30 mm

6,70

7,10

6,40

7,00 mm

patela

1,30

1,50

1,20

1,70

2,10

1,90

2,10

tíbia

5,30

5,70

4,50

5,90

6,70

5,20

6,90

metatarso

4,90

5,50

5,00

7,00

6,20

6,80

6,00

8,00

tarso

1,60

1,70

1,30

1,90

1,70

1,90

Total

18,60

20,50

17,40

22,80 mm

23,60

24,40

21,20

25,90 mm

Fórmula —

- 4, 2,

1, 3

4, 2,

1, 3

Cefalotórax

— 5,20 X 4,40

N* 1586 — Tarapaeá, Chile:

N«

' 1584 -

— Vina dei Mar, Chile:

fêmur

6,10

6,60

6,00

7,20 mm

5,80

6,00

5,70

6,80 mm

patela

1,60

1,70

1,60

1,80

1,50

1,80

1,50

1,80

tíbia

5,90

6,10

4,90

6,30

5,70

6,00

4,60

6,00

metatarso

5,80

6,20

5,60

7,50

5,60

6,00

5,40

7,30

tarso

1,60

1,80

1,50

1,80

1,70

1,80

1,60

1,80

Total

21,00

22,40

19,60

24,60 mm

20,30

21,60

18,80

23,70 mm

Fórmula —

- 4, 2,

1, 3

4, 2,

1, 3

Cefalotórax

— 6,10 X 4,50

5,20

X 4,30 mm

N« 1612 — San Bartolo, Peru:

' 1686

— Buenos Aires:

lêmur

5,80

6,20

5,70

6,80 mm

6,50

6,60

5,60

6,90 mm

patela

1,50

1,60

1,40

1,60

1,70

1,90

1,60

1,80

tíbia

5,70

6,00

4,70

6,10

6,20

5,90

6,20

metatarso

5,40

5,90

5,50

7,10

6,00

6,40

5,70

7,70

tarso

1,80

1,60

2,00

1,40

1,70

1,60

1,90

Total

20,20

21,50

18,90

23,60 mm

21,80

22,80

20,40

23,50 mm

Fórmula —

- 4, 2,

1, 3

4, 2,

1, 3

Cefalotórax

— 5,30 X 4,50

5, 10

X 4,50 mm

1, i SciELO

LOXOSCELES E

LOXOSCELISMO NA AMÉRICA DO SUL

N9 1687 —

Sucre, Bolívia:

fêmur 7,00

7,70

6,70

7,90 mm

patela 2,00

2,10

2,00

Fórmula — 4, 2, 1, 3

tíbia 6,90

7,40

6,70

7,00

Cefalotórax — 6,30 X 5,70 mm

metatarso 6,50

7,10

6,50

8,20

tarso 1,80

1,80

1,90

Total 24,20

26,10

23,70

27,00 mm

Médias aritméticas dos comprimentos das

pernas:

a) Em

27 fêmeas adultas: 20,86 mm ■ — 21,46 mm — 18,78 mm — 23,33 mm:

b) Em

8 fêmeas

jovens

: 13,44 mm

— 14,34 mm — 12,35 mm — 16,05 mm;

c) Em

3 filhotes: 8,76

mm — 9,63

mm — 7,70 mm — 10,76 mm.

“Espécie C”

Machos

(fig. 3)

Fórmulas das pernas:

Comprimentos e larguras (na patela e ti-

bia mediram-se as larguras apicais, que

são as maiores nesta espécie) dos artí-

N* 1714 —

Pôrto Alegre:

eulos dos palpos:

fêmur 5,7

6,8

5,1

5,8 mm

2,3 X 0,35 mm

patela 1,3

1,3

1,2

1,4

0,9 X 0,40

tíbia 5,9

7,6

4,5

5,3

1,3 X 0,42

metatarso 6,1

8,0

5,3

6,3

—

tarso 1,5

1,8

0,9

1,4

0,7 X 0,40

Total 20,5

25,5

17,1

20,2 mm

5,2 mm

Fórmula

— 4, 2, 1, 3

bulbo 0,60 X 0,43 mm

Cefalotórax — 4,70

X 4,30 mm

êmbolo 0,30 mm — curto, em gancho

No 1610 —

Planaltina Nova,

Goiás (perto

de Brasília):

fêmur 6,1

6,4

5,3

5,8 mm

2,45 X 0,36 mm

patela 1,1

1,3

1,0

1,1

1,00 X 0,40

tíbia 6,3

7,1

4,9

5,9

1,50 X 0,41

metatarso 6,3

7,1

5,5

6,6

—

tarso 1,8

1,9

1,3

1,8

0,80 X 0,40

Total 21,6

23,8

18,0

21,2 mm

5,75 mm

Fórmula

— 2, 1, 4,

bulbo 0,65 X 0,45 mm

Cefalotórax — 4,80

X 4,30 mm

êmbolo 0,30 mm — curto, curvo em gan-

cho

Mem. Inst. Butantan,

31:15-54, 1964.

WOLFGANG BÜCHERL

N* 1678 —

Pôrto

Alegre:

fêmur 5,0

6,1

4,2

5,0 mm

2,25 X 0,35 mm

patela 0,8

0,9

0,7

0,8

0,40 X 0,37

tíbia 5,7

7,3

4,5

5,4

1,25 X 0,42

metatarso 5,7

7,7

5,0

5,7

—

tarso 1,4

1,5

1,2

1,4

0,7 X 0,41

Total 18,6

23,5

15,6

18,3 mm

4,60 mm

Fórmula

— 2, 1

= 4, 3

bulbo 0,55 X 0,45

Cefalotórax — 4,60 x 4,20

êmbolo 0,30 mm —

- curto, curvo em

gan-

cho

1 N« 630 —

Santo Ângelo, Rio Grande do Sul (filhote, sem bulbo):

fêmur 3,7

4,0

3,4

4,0 mm

patela 1,0

1,2

0,8

1,0

I tíbia 4,0

4,5

3,0

4,0

Fórmula — 2,

1 = 4, 3

metatarso 4,1

4,6

3,2

4,1

Cefalotórax —

2,80 X 2,40

tarso 1,2

1,3

1,1

! Total 14,0

15,6

11,5

14,2 mm

N 1 ? 1232 —

Quilombo, Rio

Grande do

Sul:

fêmur 7,3

9,5

6,8

7,1 mm

2,60 X 0,30 mm

| patela 1,6

1,8

1,5

1,6

0,90 X 0,40

I tíbia 8,0

10,7

6,0

6,8

1,30 X 0,45

metatarso 8,5

11,5

7,0

7,8

—

tarso 1,7

1,9

1,6

1,7

0,80 X 0,40

Total 27,6

35,4

22,9

25,0 mm

5,60 mm

Fórmula

— 2, 1,

4, 3

bulbo 0,55 X 0,45

Cefalotórax — 4,90 X 4,40

êmbolo 0,55 mm —

- curvo em

gancho

N* 1232 —

filhote

(ainda sem bulbo):

fêmur 5,2

5,9

4,7

5,0 mm

patela 1,2

1,3

1,1

i,i

tíbia 5,0

6,0

4,0

5,4

Fórmula — 2,

1 = 4, 3

metatarso 5,0

6,1

4,6

5,3

Cefalotórax —

2,90 X 2,40

tarso 1,6

1,8

1,3

Total 18,0

21,1

15,7

18,1 mm

SciELO

10 11 12 13 14 15 16

36 LOXOSCELES E

LOXOSCELISMO NA

AMÉRICA DO

SUL

1 Média aritmética dos

comprimentos das

pernas:

perna I -

— 22,22;

perna II — 27,05;

perna III

— 18,40; perna

IV x-

- 21,17.

Média aritmética dos

comprimentos e larguras dos

artículos do palpo:

fêmur —

2,80 X 0,34 mm

patela —

0,80 X 0,40 mm

tibia —

1,30 X 0,43 mm

tarso —

0,75 X 0,40 mm

Fêmeas

(íig. 6)

N» 630 — Santo Ângelo:

630 —

Jovem:

fêmur 7,0

7,2

6,0

6,8 mm

4,0

4,5

3,8

4,2

patela 1,8

1,8

1,5

1,7

1,1

1,2

0,8

0,9

tibia 7,0

7,5

4,9

6,2

4,0

4,3

3,0

3,8

I metatarso 7,0

8,0

5,8

7,4

4,2

4,8

4,0

4,5

tarso 1,7

1,8

1,3

1,4

1,5

1,7

1,2

Total 24,5

26,3

19,5

23,5 mm

14,8

16,5

12,8

14,6

2, 1 =

4, 3

I Fórmula —•

2, 1, 4,

3,60 X

3,20 mm

Cefalotórax

— 5,00

X 4,00 mm

| No 1232 — Quilombo

(filhote):

1649 -

- Põrto

Alegre:

fêmur 4,5

4,6

4,1

4,4 mm

5,5

6,0

5,0

5,6

patela 1,1

1,1

1,0

1,4

1,5

1,4

1,2

tibia 4,2

4,3

3,5

4,2

5,5

6,1

4,3

5,3

metatarso 4,9

4,8

4,0

4,8

5,5

6,3

4,8

6,0

tarso 1,2

1,3

1,2

1,6

1,7

1.3

1,4

Total 15,9

16,1

13,9

15,6 mm

19,5

21,6

16,8

19,5

2, 1 =

4, 3

Fórmula —

2, 1 = 4, 3

4,60 X

4,20 mm

Cefalotórax

— 3,50

X 3,20 mm

No 1714 —

Põrto Alegre:

N»

1610 -

- Planaltina,

Goiás:

fêmur 5,0

5,5

4,7

5,0 mm

6,0

6,3

5,2

5,8

mm I

patela 1,3

1,4

1,3

1.1

1,2

1,0

1.1

tíbia 4,9

5,3

3,8

4,8

6,2

6,9

4,8

5,7

metatarso 5,1

5,6

4,6

5,4

6,2

7,0

5,4

6,5

, tarso 1,5

1,6

1,2

1,3

1,7

1,8

1,2

1,7

Total 17,8

19,4

15,7

17,8 mm

21,2

23,2

17,6

20,7

mm 1

2, 1 =

4. 3

Fórmula —

2, 1 = 4, 3

4,60 X

4,30 mm

Cefalotórax

— 4,30

X 3,90 mm

SciELO

10 11 12 13 14 15 16

Mem. Inst. Butantan,

31:15-54, 1964.

VVOLFGANG BÜCHERL

A respeito das dimensões dos receptáculos seminais das fêmeas e das curvatu¬

ras de seus canais eferentes, conseguimos aferir as seguintes medidas, como média:

Espécie A — - bôlsa vesicular apical — 0,08-0,1 mm;

canal eferente, retilíneo — 0,15-0,20 mm;

distância entre os dois canais — 0.60 mm;

distância entre as duas vesículas — 0,40-0,15 mm.

As duas arcadas genitais (Fig. 4-c), uma superior e outra inferior, são for¬

madas de trabéculas quitinizadas, tendo cada uma uma trave mediana horizontal, com

bifurcação de encaixe, em que se apoiam as trabéculas laterais, que se articulam

em seu extremo ínfero-posterior. A trave mediana horizontal tem em média

1,00 mm e os extremos ínfero-posteriores das trabéculas laterais estão afastados

entre si cêrca de 1,20 mm, medida esta que corresponde exatamente à da fenda

genital desta espécie.

A arcada genital pode ser destacada da formação quitinosa dos receptáculos

seminais, sendo possível separá-la em arcada superior e inferior (como mostra a

Fig. 4-c).

Na mesma articulação ínfero-posterior das duas arcadas encaixa-se também o

extremo posterior da formação quitinosa dos receptáculos seminais (Fig. 4-a). A

peça horizontal central mede cêrca de 0,80 mm e as duas peças laterais cêrca de

0,5 mm. As peças laterais estão escavadas, apresentando, bem visível, em seu átrio

a entrada (redonda) para os dois receptáculos. Por esta entrada penetram os

êmbolos do macho, no ato da transmissão dos espermatozóides, que são deposita¬

dos nos receptáculos seminais. A Fig. 4-b mostra a mesma peça total pelo lado

dorsal.

Espécie B — A arcada genital é tão delicada, que em muitas fêmeas não pode

ser vista contra o colorido dos músculos vizinhos. Não nos foi

possível separá-la em superior e inferior, como na espécie prece¬

dente, dada a sua grande delicadeza. A largura da peça mediana

é de 0,60 a 0,70 mm (Fig. 5-c).

As figuras 5 —a e b — apresentam os dois receptáculos seminais, vista ven-

tral e dorsal respectivamente; a vesícula apical é de um amarelo claro, medindo cêrca

de 0,07 mm de diâmetro; o canal aferente, ligeiramente curvo, com 0.5 mm de com¬

primento por 0,03 mm de largura, contém em seu interior um lúmen estreito,

que transparece por ser colorido de marrom. A peça central, que une os doi?

receptáculos, é extremamente delicada, podendo passar por imperceptível.

í, i SciELO

LOXOSCELES E LOXOSCELISMO NA AMÉRICA DO SUL

Palpo do macho

Fig. 1 — Espécie A

Fig. 2 — Espécie B

Fig. 3 — Espécie C

a) vista de perfil

b) vista dorsal, tibia/tarso

c) vista dorso-apical, tarso/bulbo

d) vista ventral, tíbia/bulbo

Mem. Inst. Butantan, WOLFGANG BÜCHERL

31:15-54, 1964.

Receptáculos seminais das fêmeas

Fig. 4 — Espécie A

Fig. 5 — Espécie B

Fig. 6 — Espécie C

a) vista ventral dos receptáculos

b) vista dorsal dos receptáculos

c) arcada genital

LOXOSCELES E LOXOSCELISMO NA AMÉRICA DO SUL

A arcada genital é tão delicada que não pode ser vista na maioria

dos espécimes (Fig. 6-c). Entretanto, é bem mais larga que nas

duas espécies precedentes, com cêrca de 1,20 mm de largura na

trave central e 1,40 mm entre os cantos ínfero-posteriores até

1.80 mm, em alguns espécimes. Esta medida corresponde à lar¬

gura da fenda genital, que é mais larga em tôdas as espécies.

As figuras 6 — a e b — apresentam os dois receptáculos seminais. O poro

de saída desemboca diretamente na dobra da fenda genital. Os canais dos dois

receptáculos quase nunca são simétricos, podendo um apresentar-se curvo em S e

o outro em arco. Além disso, são os receptáculos muito pequenos, significativa¬

mente menores do que nas duas espécies precedentes; o alargamento apical, vesi¬

cular tem apenas cêrca de 0,04 mm de diâmetro, os canais eferentes 0,025 mm de

diâmetro, abrangendo sua extensão apenas 0,35 a 0,40 mm. Não vimos uma peça

central que unisse as bases dos dois receptáculos.

Colorido — 0 colorido das três espécies é bastante uniforme. É necessário

adquirir-se experiência pela comparação de grande número de exemplares, a fim

de poder distinguir-se o que é privativo de uma espécie.

Em tôdas as espécies há de comum o seguinte: a fronte, as quelíceras e o

lábio são de côr de ferrugem; os rebordos anteriores do lábio e das apófises ma¬

xilares, em tôrno do lábio, são amarelo-claros; o ventre é amarelo sujo; o dorso

do abdômen cinza escuro.

Particularidades coloridas da espécie A — Há no cefalotórax, em machos e

fêmeas adultos, dos lados e por detrás da fronte, uma grande mancha central

amarela, que se destaca nitidamente das bordas laterais, que são marrons. Esta

mancha clara de espalha geralmente ao longo das estrias irradiantes, de maneira

que surge uma figura de estréia de seis pontas. Fêmur e patela dos palpos, a coxa

das pernas e o esterno são amarelo-cinza; a tíbia e o tarso dos palpos, o lábio,

os metatarsos e tarsos das pernas são amarelo-marrons. O metatarso do primeiro

par de pernas dos machos é reto. O bulbo dos machos é avermelhado. Em fi¬

lhotes apenas a ponta do tarso dos palpos é marrom, o resto amarelado.

Colorido particular da espécie B — Cefalotórax sem a figura “estelar" mais

clara, mas todo êle marrom. Fêmur e patela dos palpos amarelos, tíbia e tarso

vermelhos. As pernas são amareladas ou mesmo esverdeadas, com pêlos negros,

escurecendo em direção apical, apresentando-se os metatarsos e tarsos marrons; na

face anterior apical dos fêmures do primeiro par de pernas há uma mancha aver¬

melhada. O metatarso dos machos das pernas I é ligeiramente curvo. Em

filhotes todo o palpo é amarelo.

SciELO

10 11 12 13 14 15 16

Mem. Inst. Butantan,

31:15-54, 1964.

WOLFGANG BÜCHERL

Colorido particular da espécie C — Cefalotórax de colorido uniforme como

na espécie B. Todo o palpo é avermelhado. 0 êmholo dos machos é negro; o

bulho amarelo. As pernas apresentam colorido uniforme, marrom. A tíbia do

palpo dos machos é ligeiramente escavada na face superior.

Em aranhas conservadas em álcool mesmo por pouco tempo, esmaecem os

tons de ferrugem, o vermelho e o cinza. Quanto maior fôr o tempo de conser¬

vação em meio alcoólico, tanto mais a aranha se apresenta com uma tonalidade

única, amarelada.

Dimensões e posição dos olhos, revestimento piloso nas pernas, no abdômen e

no cefalotórax são uniformes nas três espécies. Não há espinhos nas pernas, mas

apenas pelinhos curtos e cerdinhas mais longas. As últimas estão dispostas em

oito fileiras longitudinais, duas superiores, duas inferiores, duas laterais anteriores

e duas laterais posteriores nos fêmures, nas tíbias e nos comêços dos metatarsos

das pernas. As quatro garras terminam em oníquo, no qual se inserem as duas

garras, que têm um número decrescente de dentes da frente para trás, isto é, cêrca

de onze a doze dentes na primeira, nove a dez, na segunda, seis na terceira, e

quatro e cinco na quarta perna.

Nome científico das três espécies

Em todo o abundantíssimo material estudado, procedente do Chile, Perú, Uru¬

guai, da Bolívia, Argentina e de várias dezenas de localidades do Brasil, que ofe¬

recem, portanto, um perfil verdadeiro e fiel sôbre os Loxoscelídeos realmente exis¬

tentes no grande sub-continente, encontramos apenas estas três espécies, e nada

mais. As mesmas oferecem nítida distinção morfológica, que não deixam dúvidas,

desde que se possa examinar sob a lupa, pelo menos um macho e uma fêmea

adulta, aferindo-se todos os caracteres, apontados em nosso trabalho como decisivos.

Os palpos dos machos e os receptáculos seminais das fêmeas adultas, isto é

importante, permitem sozinhos uma perfeita identificação de qualquer espécime c

podem ser aferidos também em exemplares conservados por longo tempo em meio

alcoólico.

A nossa espécie A, representada no tocante ao palpo do macho pela Fig. 1 —

a-b-c-d — e aos receptáculos seminais e arcadas genitais pela Fig. 4 — a-b-c —,

não é outra, senão a Loxosceles rufescens (Dufour) 1820, genotípica. Dufour

descrevera um macho, capturado perto de Sagunto, na província de Valência, na

Espanha. Andouin descreveu uma fêmea do Egito (1927). Walckenaer assinalou

em 1837. que o segundo par de pernas era o mais longo, o que coincide com a

nossa fórmula. Lowe fêz em 1835 um diagnóstico sumário de macho e fêmea,

sob o nome de Loxosceles citigrada.

A espécie fôra mal descrita; tipos e paratipos estão perdidos; tornou-se irre¬

conhecível quase, passando a chamar-se sucessivamente pelos nomes genéricos de

í, | SciELO

LOXOSCELES E LOXOSCELISMO NA AMÉRICA DO SUL

Scytodes, Omosita, Spermophora e finalmente Loxosceles. Seus nomes específicos

variavam ainda mais, desde erythrocephala Koch, 1937, pallida Blackwall 1865,

comoroensis Butler 1879, citigrada Lowe, marylandica Muma 1944, firmando-se fi¬

nalmente o velho nome rujescens, conforme a diagnose de um macho, feita por

Simon, em 1873. Keyserling reexaminou exemplares em 1887 e disse que o se¬

gundo par de pernas era visivelmente mais longo que o quarto; as tíbias dos

palpos do macho eram curtas e muito infladas. Houve redescrições da espécie,

sumárias ou mais detalhadas por Marx, 1890, Simon, 1893, Banks, 1904, Bosen-

berg e Strand, 1906, Petrunkevitch, 1911 (catálogo), Reimoser, 1913, Simon, 1914.

Chamberlin afirmou em 1916 que numerosos exemplares de ambos os sexos foram

capturados em Huadquina, Perú, a 5.000 pés de altura e que a espécie era muito

frequente nos dois hemisférios; Strand 1918, Petrunkevitch 1929, Bristowe 1938,

Roevver 1942 (catálogo), Bonnet 1954 (catálogo).

Gertsch (4) fêz uma diagnose minuciosa de uma fêmea, capturada em Alio

Douro, Portugal, com a seguinte fórmula de pernas — 2,4 = 1,3 (a diferença de

comprimento entre a quarta e a primeira perna é menos de meio milímetro) e com

receptacula seminalia, reapresentados pela ilustração N.° 73, cuja exatidão não nos

cabe julgar. O macho redescrito era de Roma, Itália, com a mesma fórmula

de pernas que a fêmea, havendo apenas 5 centésimos de milímetro entre a perna

1 e 4. As figuras 60-62 representam diversos aspectos do palpo do macho, êste

de Atlanta, na Geórgia, U.S.A., que coincidem singularmente com a nossa espécie

A (Fig. 1).

Bücherl(6) redescreveu o macho e fêmea, tendo à mão várias centenas de

exemplares, capturados em diversas localidades do Brasil, sob o nome de L. rujes¬

cens. Segundo aquela diagnose, feita em 1961, o segundo par de pernas é signi¬

ficativamente mais longo que o primeiro e quarto; o primeiro par ora é um

nada mais longo (não significativamente) que o quarto —- é o caso mais frequen¬

te — ora os dois pares são de igual comprimento ou o quarto par é um nada

mais longo que o primeiro (não significativamente) — o que é raro.

Os exemplares sul-americanos estão, pois, perfeitamente enquadrados no tocan¬

te à fórmula das pernas sob L. rujescens, que é espécie cosmopolita.

A esta espécie pertencem também os Loxoscelídeos, capturados em Iguape,

no litoral sul do Estado de São Paulo e descritos por Monkhaus, em 1898 (7) sob

o nome de Loxosceles similis. A fórmula das pernas de um macho (2, 4, 1, 3)

e o aspecto dos artículos do palpo do macho, representado na ilustração N.° 7 da

estampa V, conforme a qual o fêmur é cêrca de quatro vêzes mais longo que

largo, a tíbia curta, inflada, apenas mais longa que larga, o tarso, um nada mais

longo que a tíbia, bem mais longo que largo, inserindo-se o bulbo na metade

basal do tarso e o êmbolo retorcido, não permitem dúvidas. Além disso, reexa¬

minamos um lote N.° 1.759, capturado no local típico, que se tem revelado como

L. rujescens.

SciELO

10 11 12 13 14 15 16

Mem. Inst. Butantan,

31:15-54, 1984.

WOLFGANG BÜCHERL

Com a nova posição de L. similis Mõnekaus 1898 como sinônima de L. ru-

jescens (Dufour) 1820 cai por terra uma boa parte das argumentações de Simon

1,1927), de Mello-Leitão, 1918 e 1934, que tinham pôsto esta espécie em sinonímia

com L. lacta (Nicolet) e, conseqüentemente, tinham afirmado que lacta existia em

quase tôda a América do Sul.

A esta espécie pertence ainda Loxosceles surata Simon 1907 (1). Simon

diagnosticara um macho, capturado em Minas Gerais, Brasil: “...tibia valde

inflata (fere ut in L. rufescenti) , vix ^4 longior quam latior (Fig. — d); bulbo

depressiuculo; tarsus pedum maxillarium ovatus, longior quam latior; spina apical i

longa et curvata usque ad basin gracilis”. Esta descrição concorda perfeitamente

com as medidas das tíbias, dos tarsos, do êmbolo e bulbo, dadas por Gertsch (4)

e nós (6) para L. rujescens. Em 1918, Mello-Leitão (2) ainda não tinha visto

esta espécie, repetindo neste trabalho apenas as descrições de Simon; em 1934 (3)

redescreveu macho e fêmea, embora a caracterização da fêmea tenha sido total¬

mente confusa, baseada sôbre a ausência ou presença de escópulas na face inferior

dos tarsos e metatarsos e da forma peculiar da margem posterior da região cefá¬

lica. Êstes aspectos variam de indivíduo para indivíduo. O autor forneceu, en¬

tretanto, uma ilustração muito boa do palpo do macho, visto de perfil e que é a

reprodução exata do que foi desenhado por Gertsch e por nós para L. rujescens.

Diga-se de passagem que Mello-Leitão estava, ainda em 1936, tão desorientado

sôbre a sistematização de Loxosceles , que diagnosticou dois espécimes, os de N. oa

278 e 280, capturados pelo mesmo senhor Sílvio Burinam, no mesmo local, Co-

rumbataí, no mesmo dia 18/9/1935, como sendo, respectivamente, L. laeta, 1

exemplar e hirsuta o segundo,'embora fôssem em realidade L. rujipes.

À nossa espécie B cabe, por antiguidade e direito, o nome de Loxosceles

rujipes (Lucas) 1834. Lucas diagnosticara apenas uma fêmea, capturada em Gua¬

temala, em que os trocânteres, fêmures e patelas eram marrom-amarelados, as tí¬

bias e os tarsos dos palpos, respectivamente os metatarsos e tarsos das pernas erám

avermelhados; o quarto par de pernas era o mais longo. Tudo isto vem coinci¬

dindo com a nossa espécie B, a fêmea. Em 1849, diagnosticou Nicolet uma outra

fêmea desta espécie, capturada nos arredores de Santiago do Chile, com a seguin¬

te fórmula de pernas — 8,5 — 9-8-10 lineas, portanto, exatamente a mesma fór¬

mula da nossa, dizendo expressamente que se tratava da mesma espécie de Lucas,

diferente de laeta. Simon, Mello-Leitão e outros, confundidos pela L. similis, pu¬

seram a rujipes de Santiago em sinonímia com laeta, o que está positivamente

errado e não foi reconhecido por Keyserling e outros. Keyserling (8) fêz em 1877

uma diagnose minuciosa de uma fêmea, do Uruguai: ...pernas marrom-amare-

ladas com uma mancha avermelhada na base anterior do fêmur do primeiro par

e nos metatarsos e tarsos, principalmente das pernas anteriores. Pernas e palpos

de animais jovens são amarelados. Pernas cobertas densamente por pelinhos de¬

licados, dispostos em fileiras regulares. Fórmula das pernas — 4,2,1,3. Esta fór¬

mula e o colorido, descrito em minúcias, coincidem espetacularmente com a nossa

espécie B.

SciELO

10 11 12 13 14 15 16

LOXOSCELES E LOXOSCELISMO NA AMÉRICA DO SUL

Keyserling (9) assinalou cm 1891. que numerosos exemplares desta espécie

íoram capturados por von Ihering e por êle estudados no Rio Grande do Sul,

Brasil: Mõnckaus (7) capturou exemplares em São Paulo, no Bairro do Ipiranga.

No antigo registro de aracnídeos do atual Departamento de Zoologia, antigo Museu

Ipiranga, em São Paulo, consta a aranha N.° 631, de Iguape, colecionada em

24/13/1898 e identificada por Mõnckhaus como L. rufipes; em 1918, Mello-Leitão

diagnosticou-a como L. laeta. 0 exemplar, provavelmente uma fêmea, está desa¬

parecido. Simon (1) forneceu a primeira diagnose do macho: “Tibia fere duplo

longior quam latior, subtus valde convexa (fere ut in L. rufescenti ) ; tarsus trans-

versus, multo latior quam longior, intus prominulus et obtusissmus; bulbo depres-

siuculo, spina ajjicnli longa et curvata ad basin gracili. Espèce três répandue

dans le Sud des États-Unis, 1'Amérique Centrale et Méridionale.”

Mello-Leitão (2) repetira em 1918 a caracterização dada por Simon, deixando

impressionar-se pelo “subtus valde convexa”, com que Simon caracterizava a tíbia

do macho. “Subtus” significava para Mello-Leitão a parte apical ou basal da

tíbia. Em 1934 (3) ilustrou e recaracterizou o palpo do macho, fazendo uma

lamentável confusão com L. surala : "tíbia no máximo vez e meia mais longa que

larga; tarso pouco saliente além do bulbo; estilete menos recurvo; tíbia mais es¬

pessa” na “base”. Embora dissesse, então, que a espécie se encontrava no Rio

Grande, em São Paulo, talvez em São João d’El Rey (local típico de surata ) e em

tôda a América, nunca mais a pôde identificar, pois confundira-a com surata,

tornando-se responsável perante os autores estrangeiros, que os mesmos julgassem

que rujipes não se encontraria na América do Sul, como afirmou Gertsch (4),

em 1958.

Gertsch fêz em 1958 redescrições de macho e fêmea completamente novas

(,..“new appraisal”), não dando mais importância à primeira diagnose de Lucas,

nem à fórmula de pernas, dada por Nicolet, nem à redescrição de Keyserling.

Serviu-se de exemplares (poucos) recebidos de Panamá e Guatemala, ao todo de

4 fêmeas e 4 machos, conservados já há 13 anos em álcool e procedentes de três

localidades diferentes. A fórmula das pernas dos machos seria — 2.1 = 4,3 e das

fêmeas 2,4 = 1 = 3. A fêmea deve ter sido um filhote ainda. O fêmur do palpo

do macho é cêrca de 7 vêzes mais longo que largo, a patela 2 vêzes mais longa

que larga, a tíbia 2,5 vêzes mais longa que larga, o tarso um pouco mais largo

que longo, o êmbolo excede em cêrca de 3 vêzes o comprimento do bulbo, sendo

mais longo do que bulbo e tarso juntos. As medidas dos artículos do palpo con¬

cordam com as de nossa espécie B. Apenas Gertsch teve pouco material compa¬

rativo. Em 1961 (6) diagnosticamos macho e fêmea, insistindo então, no meta-

tarso flexuoso do primeiro par de pernas dos machos, na fórmula de pernas

— 4,2,1,3 (em concordância com Nicolet, Keyserling, etc.).

À esta espécie é idêntica a Scytodes nigella Nicolet 1849. de Santiago do

Chile, com a mesma fórmula de pernas — 4,2,1.3; a Omosita bicolor Holmberg

1876, que. segundo seu autor, é “muy abundante, la hemos tomado repetidas veces.

], | SciELO

LOXOSCELES E LOXOSCELISMO NA AMÉRICA DO SUL

sôl>re intermedia (Mello-Leitão) e sôbre a nossa terceira espécie (Fig. 3) impõem

a conclusão sôbre a identidade de intermedia com spadicea.

Idêntica a spadices é ainda Loxosceles ornata Mello-Leitão 1938 (11) e 1941

(12). Em 1938, Mello-Leitão diagnosticou uma fêmea, capturada em Cabana,

província de Córdoba, Argentina, com a fórmula das pernas 2,4 =1 = 3, palpos

marrons, colorido, idênticos a spadicea.

Em 1941, veio pelo mesmo autor, a diagnose de um macho, comum em Ca¬

bana, Potrerp de Loza, Agua de Oro e La Falda, província de Córdoba. Não

forneceu as medidas das pernas, mas em compensação descreveu minuciosamente

o palpo, ilustrando-o pela figura 2, cuja patela é cêrca de 2 vêzes mais longa que

larga, mais espêssa apicalmente, a tíbia é 3 vêzes mais longa que larga, também

mais espêssa no quinto distai; o tarso é mais longo que largo, sobressaindo além

do bulbo; o êmbolo é espiralado.

Em 1961 (6) já salientamos a sinonímia de ornuta com spadicea.

Posição sistemática das demais espécies sul-americanas

Loxosceles omosita (Walckenaer) 1837, de Guiana; pernas vermelho-escuras; o se¬

gundo par de pernas mais longo que o quarto. Não é L. rufipes, segundo

fazem supor os catálogos de Petrunkevitch, 1911, de Roewer, 1946 e de

Bonnet, 1952. Poderá ser ou rujescens ou spadicea. Precisa ser revista.

Loxosceles laeta (Nicolet) 1849, do Chile, sem indicação da localidade de captura.

Fórmula das pernas da fêmea (a única até hoje descrita) — 4,1,2,3; olhos

esverdeados, rodeados de negro; maxilares vermelhos, palpos amarelos, pernas

regularmente manchadas de pontos escuros. Simon(l), em 1907, julgou ter

descrito o primeiro macho desta espécie, dissertando apenas sôbre o palpo e

as quelíceras e sem mencionar a localidade de captura, mas julgando-a igual

a L. similis Mõnkhaus 1899 e dando como habitat Chile, Argentina e Sul

do Brasil. As quelíceras estariam cobertas de minúsculos grânulos. Era êste

o caráter específico mais importante. "Tibia pedum maxillarium longissima,

plus triplo longior quam latior; chelae antice granulosae”. A ilustração do

palpo em nada diferencia êste macho do de rufipes (Lucas). Pelas nossas

medições das tíbias dos palpos dos machos de rufipes aparece claramente que

estas podem ser 2 a 3 vêzes mais longas que largas. É falha a chave espe¬

cífica de Simon, que pretendeu poder separar as espécies, cuja tíbia seria 3

vêzes ou apenas 2y 2 vêzes mais longa que larga. Há variação dentro da

mesma espécie, que engloba tôdas estas medidas. A espécie seria frequente

no Chile, Argentina e no sul do Brasil. Em todo o abundante material exa¬

minado, só encontramos a rufipes, não mais a laeta. Mello-Leitão (2) re-

descreveu dois exemplares, de Iguape, como sendo laeta (Nicolet), sem dar

as medidas das pernas, mas insistindo: ‘'...quelíceras quase inteiramente co-

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Mem. Inst. Butantan,

31 : 15 - 54 , 1964 .

VVOLFGANG BÜCHERL

bertas de grânulos grossos, negros, desiguais, dispostos sem ordem”. Em

1934 (3) retratou-se, dizendo: “As granulações negras das quelíceras resultam

apenas da queda de pêlos e não têm valor diagnóstico que Simon, em 1907,

lhes atribuíra”. A redescrição e a ilustração do palpo do macho, fornecidas

neste ano, são perfeitamente idênticas a L. rufipes. A nossa revisão dos es¬

pécimes de Loxoscelídeos, classificados por Mello-Leitão como “ loeta ” ‘(não

“laeta”) nos convenceu, sem sombra de dúvida, de que êle (e Simon) des¬

creveram o macho de rufipes (Lucas) como sendo o macho de laeta (Nicolet).

Ambos estão errados. A presença de grânulos negros nas quelíceras é sinal

da ausência dos pêlos e da longa conservação em álcool; que a tíbia do palpo

do macho seja 3 vêzes mais longa que larga, é comum em rufipes.

Gertseh (4) redescreveu macho e fêmea de .“ laeta ”, com diagnósticos

aliás muito perfeitos e com ilustrações do palpo do macho e dos receptáculos

seminais da fêmea. Apenas a “laeta” de Gertseh não é a laeta de Nicolet.

mas sim a rufipes (Lucas), tão liem redescrita por Keyserling, em 1877 e

em nosso trabalho. É significativo que no próprio dizer de Gertseh, o local

típico de rufipes (Lucas) é a Guatemala e uma boa parte de sua “laeta”

seja da mesma Guatemala: “Guatemala city, males and females, San Pedro,

Yepocapa. immature, Chichicastenango, immature”. Ainda é significativo que

Gertseh tenha colocado a rufipes e a nigella em sinonímia com a laeta , quan¬

do o autor de nigella a viu diferente de laeta (de fato. é rufipes ) e quando

Nicolet disse expressamente, que êle apenas estava redescrevendo a rufipes

de Lucas.

A posição de Loxosceles laeta (Nicolet) 1849 foi por nós elucidada em

1960 (12) e 1961 (6). Se existir, é uma espécie boa, com fórmula de per¬

nas completamente nova, diferente da das 3 espécies até agora bem definidas,

isto é, 4,1,2,3. Isto justifica uma espécie nova. Há mister, entretanto, que

se encontrem novos exemplares, que façam jús à descrição original de Nicolet.

Loxosceles lutea Keyserling 1877 (8), uma fêmea, Santa Fé de Bogotá, Colômbia;

fórmula das pernas, 4 = 2,1,3. Seria a quinta espécie boa do gênero. Jul¬

gamos idêntica à esta a Loxosceles unicolor Keyserlig 1887 (13), um macho,

de Punta dei Agua, Novo México, com fórmula de pernas idêntica. As fór¬

mulas de pernas que Gertseh (4) atribuíra à unicolor nada mais têm a ver

com a descrição original, tão detalhada, dada por Keyserling.

Idêntica com L. lutea é ainda a L. pictithorax Strand 1914, uma fêmea

sumàriamente descrita, de Bogotá, o mesmo local de lutea.

Loxosceles variegata Simon 1897 (14), uma fêmea, filhote ainda, San Pedro, Pa¬

raguai. Sem descrição alguma. Nomen nudum.

Loxosceles longipalpis Banks 1908. uma única fêmea, sumàriamente diagnosticada.

Ilhas dos Galapagos.

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LOXOSCELES E LOXOSCELISMO NA AMÉRICA DO SUL

Loxosceles accepta Chamberlin 1920 (15); diagnose deficiente de macho e íêmea,

Huadquina, Perú. A descrição da forma do palpo do macho e as medidas

das patelas e tíbias das pernas parecem indicar, que esta espécie pertence

a L. lutea Keyserling, o que poderá ser decidido pela revisão do material de

Chamberlin e a competente redescrição. O mesmo se diga de L. nesophilu

Chamberlin, 1920, de Lobos de Tierra. Perú, que. segundo o autor, se dife¬

renciaria de accepta apenas pela posição dos olhos — que não constitui ca¬

ráter específico aproveitável.

Loxosceles jlavescens Simon 1893 e 1896 — Nomen nudum.

Discussão

O grande número de material, minuciosamente estudado e proveniente de

pontos geográficos, distantes entre si de milhares de quilômetros, mas que se

deixa reunir fàcilmente e sem dificuldades maiores nas seguintes espécies:

Loxosceles rujescens (Dufour) 1820,

Loxosceles rufipes (Lucas) 1834,

Loxosceles spadicea Simon 1907 e

Loxosceles lutea Keyserling 1877,

comprova o acêrto das fórmulas das pernas, em machos e fêmeas, da cuidadosa

aferição dos artículos dos palpos, principalmente da tíbia, do tarso, da inserção

do bulbo e da forma do êmbolo em machos e do aspecto da arcada genital e dos

receptáculos seminais das fêmeas, como caracteres decisivos da especificação dos

Loxoscelídeos da América do Sul. No julgamento dos receptáculos seminais

deve-se ter em mente que a forma dos mesmos pode mudar um tanto, de espécime

para espécime, conforme a idade da aranha ou se estão cheios de líquido fecun¬

dante ou não. Além dos 3 tipos ilustrados em nossas figuras 4, 5 e 6, podem

encontrar-se inúmeros outros aspectos, que divergem em minúcias. Certamente foi

isto, que levou Gertsch (4) a descrever inúmeras espécies novas para a América

do Norte e as Antilhas, espécies estas que, a rigor, poderão ser consideradas, no

máximo, como sendo apenas populações regionais. Esta nossa suspeita encontra

sua plena confirmação quando se consideram as ótimas ilustrações dos receptáculos

seminais e dos palpos dos machos, que acompanham o trabalho de Gertsch. Há

muitas semelhanças, quase que identidades, entre espécies ditas como novas.

A conclusão de Gertsch, de que as fórmulas das pernas: “...are very useful

for separation of species of “restricted” areas, but lhey are subject to “great

variation” within each species”, sugere-nos as seguintes considerações: não temos

constatado esta variação em tôda a América do Sul, mesmo através de regiões

distantíssimas, como se dá no caso de Loxosceles rajipes, de que temos estudado

exemplares do Perú. do Chile, da Bolívia, da Argentina, do Uruguai e de deze¬

nas de localidades do Brasil.

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Mem. Inst. Butantan,

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WOLFCANG BÜCHERL

Por outro lado procedeu Gertsch com demasiado rigor nas medições dos ar¬

tículos das pernas, aferindo mesmo centésimos de milímetro, o que não julgamos

necessário, nem mesmo aconselhável. 0 que interessa não é o comprimento real

da perna, que varia de espécime para espécime, mas a relação real dos compri¬

mentos das pernas entre si, isto é, a verificação, qual das quatro pernas é a mais

longa, quais são as pernas que têm mais ou menos comprimento igual. Dois ou

três décimos de milímetro podem mesmo ser desprezados, como ressalta significa¬

tivamente das médias aritméticas das fórmulas das pernas das três espécies minu¬

ciosamente aferidas. Mesmo assim constata-se que entre rujescens e spadicea não

há diferença na fórmula das pernas, embora se diferenciem facilmente pelos re¬

ceptáculos seminais das fêmeas e os palpos dos machos.

Quanto às descrições e excelentes ilustrações, feitas por Gertsch Í4) em 1958,

dos palpos e dos machos, devemos confessar com franqueza, que não conseguimos

distinguir diferença alguma entre L. reclusa e devia (il. 21-23 e 24-26), entre

arizonica e unicolor (il. 27-29 e 30 a 32), entre yucatana e zapoteca (il. 33-25

e 36 a 38), entre boneti e bolivan (il. 39-41 e 42-44). Suas ilustrações dos

receptáculos seminais das fêmeas não nos convencem; deve ter havido qualquer

êrro técnico de preparação. Não é possível que haja espécies com seis receptá¬

culos, como seria o caso com L. arizonica (Fig. 90), com quatro receptáculos

(Fig. 94), L. yucatana ou que os dois receptáculos das demais espécies tenham

no lado do canal eferente ou na peça quitinizada basal, um ou mais minúsculos

tubos “cegos’. Para que? Qual seria a sua função? Como se explicaria a

transmissão do líquido espermático, se o êmbolo é sempre o mesmo? Em todos

os exemplares sul-americanos temos constatado invariàvelmente a máxima unifor¬

midade no tipo de construção dos genitalia das fêmeas, nitidamente diferenciáveis

entre as três espécies. Não pretendemos diminuir com estas observações os tra¬

balhos de Gertsch. A êle cabe indubitavelmente o grande mérito de ter sido pio¬

neiro a chamar a atenção dos estudiosos sôbre o valor específico dos genitalia das

fêmeas na especificação de Loxosceles. Insistimos apenas, que êle foi longe de¬

mais, aferindo caracteres populacionais. As suas "espécies” seriam na realidade

apenas populações.

Politípismo das espécies

Julgamos conveniente que se estabeleçam diversos tipos regionais paar cada

uma das espécies, como Levi tem feito com as espécies de Latrodectus. Aliás

apresenta o gênero Loxosceles um impressionante paralelismo com Latrodectus , seja

no tocante à distribuição geográfica nas Américas, como em relação a seu habitat

e alguns importantes costumes de vida.

Para L. rujescens haveria os tipos na Europa do Sul, para a África do Norte,

para a América do Sul. Para o último sub-continente valeria o tipo, estabelecido

por Simon para L. surata.

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LOXOSCELES E LOXOSCELISMO NA AMÉRICA DO SUL

Para L. rujipes deve ser feito um neo-tipo para Guatemala, para o Chile,

para a Argentina, o Brasil, para Guatemala e Honduras. Para as duas últimas

regiões serviriam os exemplares que Gertsch designou como “laeta”.

Para L. spadicea serve o mesmo tipo de Simon para a Bolívia, o tipo de in¬

termedia para o Rio de Janeiro, o tipo de ornata para a província de Córdoba,

Argentina.

Para L. lutea pode empregar-se o tipo de Keyserling para Bogotá. Colômbia,

o tipo de Keyserling — unicolor, para Novo México.

Chave sistemática das espécies sul-americanas

O segundo par de pernas mais longo que o primeiro e o quarto par; o primeiro

e o quarto par aproximadamente iguais ou ora o primeiro ora o quarto par um

nada mais longo. Tarso do palpo do macho, visto dorsaimente, mais longo que

largo, sobressaindo além da inserção do bulbo; êmbolo torcido em serpentina 2

O quarto par de pernas mais longo que o primeiro, apenas pouco mais longo

ou igual ao segundo. Tarso do palpo do macho, visto de cima, aproximada¬

mente tão longo quanto largo, não sobressaindo sensivelmente além do bulbo.

Êmbolo não serpentiniforme, mas recurvo ou quase direito . 3

Tibia do palpo do macho curta, muito inflada, no máximo uma vez e meia

mais longa que larga, com a maior largura mais ou menos no meio do articulo;

tarso quase tão longo quanto a tíbia; fêmur cêrca de quatro vêzes mais longo

que largo. Genitália da fêmea consistindo em arcada genital dupla (visível,

quando se distende a fenda genital) e em arcada porta-receptáculos. Os dois

receptáculos seminais com forma de cachimbo, com vasos eferentes curtos e retos.

Loxosceles rufescens (Dufour) 1820

Tíbia do palpo do macho longa, não inflada, dorsalmente reta ou um pouco es¬

cavada, espêssa apicalmente, cêrca de três vêzes mais longa que larga; tarso

cêrca de duas vêzes mais curto que a tíbia; fêmur cêrca de seis a sete vêzes

mais longo que largo. Fenda genital da fêmea muito larga; arcada superior

pràticamente invisível; sem arcada porta-receptáculos; os dois receptáculos semi¬

nais pequeníssimos, reduzidos a dois delicados canais curvos ou serpentiniformes,

com pequena vesícula apical.

Loxosceles spadicea Simon 1907

Quarto par de pernas mais longo que o segundo; êste mais longo que o primeiro;

tíbia do palpo do macho três a cinco vêzes mais longa que larga, com a maior

largura aproximadamente no meio, estreitando-se apicalmente; êmbolo recur¬

vado em todo o seu percurso; tarso visto apicalmente tão longo quanto largo,

às vêzes um nada mais largo que longo; fêmur cêrca de oito vêzes mais longo

que largo. Metatarso do primeiro par de pernas do macho ligeiramente flexuoso.

Receptáculos seminais da fêmea sob a forma de dois “dedos" longos, quase

retos, que terminam em uma ampola apical.

Loxosceles rufipes (Lucas) 1834

O quarto par de pernas igual ao segundo; ambos mais longos que o primeiro

par; tibia do palpo do macho ventralmente inflada, dorsalmente reta, cêrca de

2,5 a 3,5 vêzes mais longa que larga; êmbolo quase direito; tarso tão longo

quanto largo ou um nada mais largo que longo.

Loxosceles lutea Keyserling 1877

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Sinonímia das espécies estudadas

1. Loxosceles rufescens (Dufour) 1820

Sinonímias: Sc. erythrocephala Koch 1837, Sc. palida Blackwall 1865; co-

moroensis Butler 1879, L. citigrada Lowe 1832/35, marylandica

Muma 1944, similis Mônckhaus 1898, aurata Simon 1907, laeta

Simon 1907 e Mello-Leitão, 1918 e 1934 (ad partem, no to¬

cante ao macho de similis).

2. Loxosceles rujipes (Lucas) 1834

Sinonímias: nigella (Nicolet) 1849, Omosita bicolor Holmberg 1876; laeta

Mello-Leitão 1918 e 1934, laeta Gertsch 1958. taeniopalpus

Simon 1907, hirsutus Mello-Leitão 1931.

3. Loxosceles spadicea Simon 1907

Sinonímias: L. intermedia Mello-Leitão 1934, L. ornata Mello-Leitão 1941.

4. Loxosceles lutea Keyserling 1877

Sinonímias: L. unicolor Keyserling 1887, L. pictithorax Strand 1914.

Espécies a serem reestudadas

Loxosceles omosita (Walckenaer) 1837; Guianas) ;

Loxosceles laeta (Nicolet) 1849; (Chile);

Loxosceles longipalpis Banks 1908; (Ilhas Galapagos) ;

Loxosceles accepta Chamberlin 1920; (Huadquina, Perú) ;

Loxosceles nesophila Chamberlin 1920; (Lobos de Tierra, Perú).

Conclusão

É perfeitamente possível determinar-se a espécie certa de qualquer Loxosce-

lideo adulto, capturado na América do Sul, usando-se os critérios diferenciais dos

palpos dos machos, dos receptáculos seminais das fêmeas e a fórmula das pernas,

apontados na chave sistemática dêste trabalho. Como critério secundário convém

observar-se o colorido do cefalotórax, dos artículos dos palpos e das pernas e a

forma do metatarso do primeiro par de pernas dos machos. Para filhotes há

apenas o recurso único das fórmulas das pernas, pois nem o colorido é igual

aos adultos.

Agradecemos ao Fundo de Pesquisas do Instituto Butantan pelo auxílio

prestado.

SciELO

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LOXOSCELES E LOXOSCELISMO NA AMÉRICA DO SUL

Resumo

De várias dezenas de exemplares jovens e adultos de Loxoscelídeos machos

e fêmeas, recebidos de diversas localidades do Brasil, Uruguai, Chile e Perú, da

Argentina e Bolívia, foram aferidas as medidas das pernas e o colorido geral;

dos machos adultos foram medidos os artículos dos palpos, o bulho e êmbolo,

prestando-se atenção especial, se o último é reto, curvo ou serpentiniforme, longo

ou curto; nas fêmeas adultas foram dissecados os receptáculos seminais e as ar¬

cadas genitais.

À mão dêste abundante material, conseguiu-se comprovar que tanto os palpos

do macho como a forma dos receptáculos seminais da fêmea e a fórmula das

pernas em ambos os sexos, podem e devem ser considerados como rigorosamente

específicos, permitindo que se coloque qualquer aranha dêste gênero na espécie

certa. Certas nuanças de colorido e a presença ou ausência de ligeira curvatura

no metatarso do primeiro par de pernas em machos, constituem caracteres menos

importantes, mas também de valor secundário.

As dimensões dos seis olhos, as distâncias interoculares, o recuo do par ante¬

rior e dos dois pares posteriores da fronte, respectivamente das margens e da

linha mediana do cefalotórax, o revestimento piloso da face inferior dos tarsos

e metatarsos, a forma triangular, pentagonal ou arredondada, com que a parte

cefálica costuma ser delimitada contra a porção torácica, foram igualmente estu¬

dados em lotes, procedentes do mesmo local de captura, chegando-se à conclusão

que não possuem valor sistemático.

Do vasto material, objeto dêste trabalho, fêz-se uma chave sinóptica específica,

que abrange machos, fêmeas adultos e filhotes, distribuídos para apenas quatro

espécies sul-americanas bem definidas, a Loxosceles rufescens, rufipes, spadicea e

lutea. Loxosceles omosita e L. laeta, ambas com fórmulas de pernas, que as di¬

ferenciam sem sombra de dúvida das quatro estudadas, são, por isso mesmo, re¬

conhecidas como espécies boas, aguardando, porém, novas capturas, cujo estudo

virá confirmar ou não sua posição sistemática. L. longipalpis, accepta e nesophila

devem ser reestudadas, segundo os três critérios acima citados. As demais espé¬

cies descritas do sub-continente sul-americano, catorze ao todo. são colocadas em

sinonímia com as quatro espécies, rufescens, rufipes, spadicea e lutea, ou declara¬

das como — nomina nuda.

SüMMARY

The general color, as well as the measures of the legs were closely observed

in many young and adult specimens of male and female Loxosceles, coming from

different regions of Brazil, Uruguay, Chile, Peru, Argentina and Bolivia; the

femur, patella. tibia, tarsus, bulbus and embolus of adult males were carefully

measured, and special attention was paid to the embolu’s curvature and length;

j | SciELO

Mem. Inst. Butantan,

31:15-54, 1964.

WOLFGANG BUCHERL

the receptacula seminalia and genital arches of the adult females were dissected

and studied morphologically.

With plenty of material at hand, it was possible to prove that the palps of

the male, as vvell as the receptacula seminalia form of the female and the légs

formula of both sexes, can and should be considered as strictly specific, since

their examination give sufficient information to place any spider of this genus

in lhe right species. Some nuances in the color and the presence or absence of

a slight curvature on the metatarsus of the first pair of male legs, have less im-

portant characteristics, but are of secondary importance.

The size of the six eyes, the interocular distances, the recoil of the anterior

and of lhe two posterior pairs of the forehead, respectively from the sides and

center line of the cephalothorax, the pilous covering of the inferior side of the

tarsus and metatarsus, the triangular, pentagonal and round form, with which

the cephalic part is generally delimited against the thoracic portion, were equallv

studied, according to the same capture place the animais arrived from, therefore,

we carne to the conclusion that they have no systematic value.

A specific synoptic key was made with the great amount of material studied

in this paper which concerns young and adult males and females, distrihuted to

only four well-defined South-American species, the Loxosceles refuscens, nijipes,

spadicea, and lutea. Loxosceles omosita and L. laeta, both with leg formulas,

which distinguish them without any doubt from the four species studied, there¬

fore, they are known as good species, waiting, however, for new captures which

will either confirm or not their systematic position. L. longipalpis, accepla and

nesophila should be reexamined, according to the three criteria above mentioned.

The other species described of the South-American sub-continent, 14 all told, are

placed as synonyms with the four species, rufescens, rujipes, spadicea and lutea.

or declared as — nomina nuda.

ZUSAMMENFASSUNG

Mehrere Dutzend von Spinnen der Gattung Loxosceles — SICARIIDAE, Mann-

chen sowohl wie Weihchen und noch nicht Erwachsene, welche im Laufe vou

mehreren Jahren aus vielen Teilen Brasiliens, Uruguays, Argentiniens, Boliviens,

Chiles and Perus nach Butantan gesandt worden sind, wurden in Bezug auf die

Lange ihrer Laufbeine vergleichend untersucht; bei den Mannchen wurden Femur,

Patella, Tibia, Tarsus, Bulbus and Embolus genau gemessen und die Kurvatur des

Embolus genau gemessen und die Kurvatur des Embolus besonders beriicksichtigt,

wie auch seine Lange; bei den Weihchen wurden die "receptacula seminalia”

sowie die inneren Genitalbogen histologisch herauspraepariert und vergleichend

morphologisch studiert.

An Hand dieses zahlreichen Materials konnte der Beweis erbracht werden,

dass erwachsene Mannchen und Weihchen sehr exakt nur durch die Palpen der

SciELO

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LOXOSCELES E LOXOSCELISMO NA AMÉRICA DO SUL

Mãnnchen oder die “receptacula seminalia’’ der Weibchen artlich hestimmt werden

konnen, wobei diesen Merkmalen auch ein besonderes Verháltnis der Laufbeinlan-

gen entspricht. Gewissen, mehr oder weniger deutlichen Farbnuancen, kann eine

sekundãre, spezifische Rolle nur bedingt eingeraunt werden. Sekimdar artlicb

wichtig ist auch noch das Aussehen des Metatarsus des ersten Beinpaares bei den

Mãnnchen.

I)ie Grõsse der Augen, der Abstand zwischen ibnen oder vou den beiden

vorderen zum Stirnrande oder zu den Seitenaugen, die Distanz letzterer von der

Mittelritze des Cephalothoraxes und dem Seitenrande desselben, die Ausriistung

mit Haarpolstern auf der Unterseite der Tarsen und Metatarsen der Laufbeine, die

dreieckige. runde oder fünfeckige Form. womil das Cephalon gegen das Thoracon

aiigegrenzt ist, wurden hesonders an vielen Tieren desgleichen Fundplatzes verg-

leichènd untersucht, wobei unwiederlegbar festgestellt wurd, dass allen diesen Merk¬

malen keinerlei spezifische Bedeutung zugemessen werden kann.

Mit dem zahlreichen südamerikanischen Material konnte ein Artenschlüssel

aufgestellt werden, der sowobl Mãnnchen, Weibchen wie auch Jugendformen erfasst

und nach dem die Loxosceliden dieses Sub-Kontinentes in folgende vier Arten

eingereiht werden: Loxosceles rujescens, ru jipes, spadicea und lutea. Die beiden

alten Arten, L. omosita (Walck.) 1837 und L. laeta (Nicolet) 1849 weisen, nach

der eindeutigen Beschreibung ihrer Autoren, zwei neue Beinformeln auf, besonder

lacta, dürften also zwei gute Arten abgeben, wenn sie wieder neu abgefunden

Und nach den hier angegebenen entscheidenden Merkmalen untersucht würden-

L. longipalpis Banks 1908. L. accepta und nesophila Chamberlin 1920 sollten nach

den hier angegebenen Merkmalen neu untersucht werden. Die übrigen 14, fiir

Siidamerika beschriebenen Loxoscelesarten wurden ais Synonym mit rujescens, ru-

jipes, spadicea und lutea und zwei ais “nomina nuda” erkannt.

Bibliografia

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DISTRIBUIÇÃO GEOGRÁFICA DOS ARACNÓIDES PEÇONHENTOS TEMÍVEIS

(CLASSE A RA CHNOM ORPHA , SUB-CLASSE A RACHNOl DE A, ORDENS

SCORPIONES E ARANE1DA) *

WOLFGANG BÜCHERL

Secção de Artrópodos Peçonhentos, Instituto Butantan, São Paulo, Brasil

Introdução

Para a perfeita compreensão dêste trabalho, devemos esclarecer que existem

alguns Aracnoides completamente não venenosos. A imensa maioria, entretanto,

é ativamente peçonhenta, com um par de glândulas veneníferas e um aparelho

vulnerante, inoculador da peçonha. Felizmente, porém, é a grande maioria dêste

grupo tão pouco intoxicante, ou tão raro, que não vem a constituir problema mé¬

dico. Uns e outros não são objeto desta exposição, que considera apenas aqueles

representantes temíveis do segundo grupo, cuja frequência numérica, ação do ve¬

neno sôbre homem e animais domésticos, aliados à sua qualidade de vulnerantes,

os qualificam como de importância médico-sanitária.

Quem aponta geralmente os Aracnoides temíveis é o próprio paciente ou mé¬

dico, procurado para o tratamento. Os investigadores confirmam a posteriori a

periculosidade do agente acusado, por aferições da intensidade e do modo de

ação da peçonha em animais sensíveis, pelo arrolamento de sua freqiiência nu¬

mérica em áreas geográficas restritas ou vastas, pelo estudo eco-biológico e do

contato, raro ou mais freqiiente, com o homem e pela elaboração de um sôro.

Seja desde já assinalado o fato curioso de que, dentro de um mesmo gênero,

possam existir espécies realmente temíveis, com picadas mortais e outras com ve¬

neno apenas levemente intoxicante. Mesmo dentro de uma e mesma espécie po¬

dem ocorrer intoxicações gravíssimas ou apenas leves, segundo as diferentes áreas

de dispersão do Aracnoide.

Trabalho apresentado nos VII Congressos Internacionais de Medicina Tropical e

Malária, Rio de Janeiro, setembro de 1963, sob os auspícios do Fundo de Pes¬

quisas do Instituto Butantan (FPIB).

Recebido para publicação em 19/6/63.

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DISTRIBUIÇÃO GEOGRÁFICA DOS ARACNÔIDES

PEÇONHENTOS TEMÍVEIS

Dispersão geográfica dos gêneros temíveis

A proposital dispersão das poucas espécies temíveis oferece interessante con¬

tribuição à conceituação clássica do que sejam as regiões geográficas e dos meios

da dispersão ativa e passiva durante as diversas eras geológicas.

Os escorpiões temíveis, por exemplo, lodos nitidamente criptozóicos, com apa¬

recimento na maioria das vêzes apenas insular, ora estão confinados à áreas bas¬

tante restritas, ora sobrepassam insòlitamente diversas regiões geográficas. So¬

bressai um fato singular: não há hoje nenhum gênero sequer no continente ame¬

ricano comum às demais regiões zoogeográficas do Velho Mundo e da Austrália!

Mesmo no continente americano existe nítida e rigorosa separação entre a região

neo-ártica (do México e da Califórnia para o norte), onde só na sub-família Ce\-

trurinae existem escorpiões perigosos, e a região neotrópica onde há represen¬

tantes temíveis apenas na sub-família Tityinae, com concentração máxima na sub-

região brasiliana e dispersão em leque em direção ao nordeste brasileiro e a

sub-região antilhense. Os Buthinae, ao contrário, espalharam-se através das três

regiões pale-árticas, etiópica e oriental, isto é, desde Marrocos até a Sibéria, o

Nilo Superior e a África do Sul.

Os três gêneros de “Aranhas caranguejeiras” perigosas, criptozóicas e esteno-

bióticas, acham-se distribuídos por três longínquos continentes, separados por imen¬

sos oceanos, Harpactirella na África do Sul, A t r a x na Austrália e Nova

Zelândia e T rec lio na na América do Sul.

Entre as poucas aranhas verdadeiras temíveis pode observar-se que a moradia,

enquanto esta é capaz de oferecer um optimum biológico nas variadas condições

de temperatura e umidade, vem a constituir um fator de dispersão primordial:

a) As aranhas errantes do gênero Phoneutria, que nunca constroem moradia, mas

apenas aproveitam lugares escuros fortuitamente achados, mesmo em residên¬

cias humanas, tem dispersão estenobiótica apenas na região neotropical (Brasil) ;

b) As aranhas caçadoras, mas semi-sésseis do gênero Lycosa , que constroem tú¬

neis dentro da terra, providos ou não de tampa protetora, lograram lornar-se

tropical e — subtropical — cosmopolitas, penetrando até áreas francamente

temperadas ou mesmo frias e oferecendo aos especialistas a mais variada

gama de sub-gêneros e sub-espécies;

c) As aranhas obrigatoriamente sedentárias do gênero Latrodectus, quase incapa¬

zes de se locomoverem livremente sôbre o solo e que vivem em certa socia¬

bilidade, embora individualmente separadas por suas teias, construídas nas

ramas escuras dos arbustos ou perto do sol, com eficientes refúgios contra a

luz, chuvas e o frio e onde hibernam, conquistaram contudo a Europa, Ásia.

África, América e Austrália, seja por dispersão ativa de seus filhotes, levados

pelos ventos em suas minúsculas teias, seja por dispersão passiva pelo homem;

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>1) As frágeis e pequeníssimas aranhas do gênero Loxosceles, criptozóicas e obri¬

gatoriamente noturnas, sedentárias em suas teias irregulares, construídas sem¬

pre ao abrigo da luz em cavernas naturais, em fendas de barrancos, sob as

raízes e entre as cascas de árvores, sob madeiramento e tijolos, armazenados

pelo homem em volta de suas casas, conquistaram os Continentes do Velho

e do Novo Mundo, principalmente por meio de dispersão passiva, levadas pelo

homem com as mercadorias.

Distribuição geográfica das espécies temíveis

I.“ Ordem — SCOKPIONES

l. a Família — BUTHIDAE

A. Sub-família — BuTHINAE

l.° gênero — Androctonus H. e E. 1829

Espécies temíveis — A. australis, A. acneas, A. amoreuxi, A.

Iioggarensis • — Velho Mundo, desde a índia e Pérsia até

ao Atlântico: Egito, Nilo Superior, Senegal, Saara, Algéria,

Marrocos.

2.° gênero — Buthacus Br. 1908

Espécie temível — B. arenicola

Líbia, Egito, Palestina, Síria.

Marrocos, Algéria, Saara,

3.° gênero

Buthotus Vach. 1948

Espécies temíveis — B. judaicus — Israel; B. jrazwerneri

Algéria, Marrocos.

4.° gênero — Buthus Leach 1815

Espécies temíveis — B. occitanus, atlantis, marroccanus — Me¬

diterrâneo europeu e africano desde o Atlântico até o Mar

Vermelho.

5. ° gênero — Leiurus (H. e E.) 1829

Espécie temível — L. quinquestriatus —

tina, Israel, Arábia, Iemen.

6. ° gênero — Bar a b u t h u s Poc. 1893

Turquia, Síria, Pales-

Espécies temíveis — B. villosus, B. liosoma e outras

do sul, oriental e ocidental até o Sudão.

África

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B. Sub-família — Centrurinae

7.° gênero — Centruróides M. 1889

Espécies temíveis — C. sculpturatus, gertschi, suffusus, noxius,

limpidus, infamatus, gracilis, etc. — Sul dos Estados Uni¬

dos da América do Norte, México, América Central. Anti¬

lhas (dispersão passiva para a América do Sul).

C. Sub-família — Tityinae . '

8.° gênero — T i ty u s C. L. Koch 1836

Espécies temíveis — T. serrulatus, bahiensis, trinitatis, trivitalus,

etc. — América do Sul, sub-região brasiliana desde o Tró¬

pico do Capricórnio até a ilha de Trinidad (dispersão pas¬

siva — América Central até Flórida e Califórnia e Buenos

Aires).

2. a Família — SCORPIONIDAE

1 I

A. Sub-família — Diplocentrinae

9.° gênero — N eh o Simon 1877

Espécie temível — N. hieronchonticus —- Turquia, Síria, Israel

até Arábia.

B. Sub-família — Scorpioninae

10. ° gênero — Heterometrus H. e E. 1829

Espécies temíveis — //. indus, cyaneus, scaber, bengalensis,

caesar, liuriis, longimanus, liophysa — Filipinas, Málaga,

Burma, Sumatra, Java, Ceilão, China, índia.

11. " gênero — Pandinus Thor. 1877

Espécies temíveis — P. imperator, dictator, arabicus, pallidus,

bellicosus, colei — África tropical e Arábia.

12. ° gênero — S cor pio L. 1758

Espécie temível — Sc. maurus — Marrocos, Algéria, Líbia,

Saara.

13. ° gênero — O pistho phth a l m u s C. L. Koch 1838

Espécies duvidosas — O. opinatus, carinatus, laticauda, pallipes,

capensis, granijrons, pictus, gigas, flavescens — África do

Sul, Oriental, Ocidental, Central.

2 3

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62 DISTRIBUIÇÃO GEOGRÁFICA DOS ARACNÓIDES

PEÇONHENTOS TEMÍVEIS

3.® Família — THERAPHOSIDAE

Sub-família — Theraphosinae

4. u gênero — Acanthoscurri a Auss. 1871

Espécies temíveis — A. atrox, gigantea, geniculata, ju-

ruenicola, violacea, sternalis — America do Sul: des¬

de o 25° lat. sul até América Central e Antilhas.

5. ° gênero — T h e r a p h o s a Tlior. 1870

Espécie temível — Th. leblondi — Pequenas Antilhas,

Venezuela, Guianas, Brasil: Amapá.

6. ° gênero — La. si odora C. Koch 1850

Espécies temíveis — L. klugii, curtior, differens, sacra,

spinipes, etc. — Brasil.

7. ° gênero — Mcgaphobema Poc. 1901

Espécie temível — M. robusta — Colômbia.

8. ° gênero — X enesthis Simon 1891

Espécies temíveis — .Y. imanis, monstruosa

Colômbia. Venezuela.

I> :

aiiama,

9. u gênero — P a m p hob e t e u s Poc. 1901

Espécies temíveis — P. tetracanthus, jortis, jerox, antinous,

augusti, insignis, rosais, ornatus, etc — America do

Sul, do 27° lat. sul até Panamá.

B. Sub-Ordem — LABIDOGNATHA = “Aranhas verdadeiras”

1.® Família — CTENIDAE

Sub-família — Cteninae

l.° gênero — Phoneutria Perty 1833

Espécies temíveis — Ph. fera, luederwaldti, ochracca, rufi-

barbis, paca, andrewsi, rcidyi — Brasil: São Paulo,

Paraná, Santa Catarina, Rio Grande do Sul, Rio de

Janeiro; Paraguai; Bolívia, Guianas.

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DISTRIBUIÇÃO GEOGRÁFICA DOS ARACNÓ1DES

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MECANISMO DA PICADA DAS ARANHAS PEÇONHENTAS PERIGOSAS *

WOLFGANG BÜCHERL

Secção cie Artrópodos Peçonhentos, Instituto Butantan, São Paulo, Brasil

Sistemática das aranhas brasileiras perigosas

As aranhas peçonhentas do Brasil, cujas picadas são perigosas para o homem,

pertencem comumente a um dos seguintes quatro gêneros: Loxosceles, sub-família

Loxosceunae, família SICARIIDAE ; Latrodectus, sub-família Latrodectinae, fa¬

mília THERIDIIDAE ; Lycosa, sub-família Lycosjnae, família LYCOSIDAE e Pho-

neutria, sub-família Cteninae, família CTENIDAE.

As espécies mais freqüentes e melhor estudadas e sua distribuição geográfica

na América do Sul são as seguintes: Loxosceles rujescens (Dufour) 1820, tropical

cosmopolita, encontrada também na Colômbia, no Perú e em diversas localidades

do Brasil: Minas Gerais, Rio de Janeiro, São Paulo, inclusive na Capital de São

Paulo; Loxosceles rujipes (Lucas) 1834, América Central (Panamá) e Sul: Co¬

lômbia, Perú, Bolívia, Chile, Argentina (a “araria homicida” de Buenos Aires),

Uruguai (considerada a mais perniciosa no país), Brasil: Rio Grande do Sul, Santa

Catarina, Paraná, São Paulo (na própria Capital), Rio de Janeiro, Minas Gerais,

Goiás; Loxosceles spadicea Simon 1907, Bolívia, Brasil: Rio Grande do Sul (Santo

Angelo), São Paulo (Santo André), Goiás (Brasília); Latrodectus geometricus C.

Koch 1841, tropical cosmopolita, encontrada em todos os países da América do

Sul e no Brasil em Pôrto Alegre, em diversas localidades do Rio de Janeiro, in¬

clusive nas praias, Minas Gerais, Bahia; Latrodectus mactuns mactans (Fabricius)

1775, sub-espécie americana desde os U.S.A., México, países da América Central,

Grandes Antilhas, Venezuela, Equador, Perú, Paraguai, rara no Brasil, tendo ha¬

vido capturas em Recife e em Pôrto Alegre; Latrodectus curacaviensis (Miiller)

1776, espécie americana, desde o Canadá até a Patagônia, Pequenas Antilhas (Cura-

çáu), Guianas, Venezuela, Galápagos, Chile, Chaco Paraguaio, Argentina (Chaco,

Patagônia, Colonia Dora, Santiago dei Estero), Brasil: praias da Guanabara, do

Estado do Rio de Janeiro (Piratininga, Itaipú, Itacoatiara, Itaipuassu, Cabo Frio),

Bahia (Caravelas); Lycosa auroguttata (Keyserling) 1891, São Paulo até o Rio

* Sob os auspícios do Fundo de Pesquisas do Instituto Butantan. Apresentado na

XV" Reunião Anual da S.B.P.C., Campinas, julho de 1963.

Recebido para publicação em setembro de 1963.

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MECANISMO DA PICADA DAS ARANHAS PEÇONHENTAS PERIGOSAS

Grande do Sul; Lycosa erythrognatha Lucas 1836, muito frequente em todo o

Estado de São Paulo; Lycosa nychlhcmera (Bertkau) 1880, o mesmo habitat da

espécie anterior, mas muito mais rara; Lycosa ornata Perty 1833, orla marítima

desde o Hio de Janeiro até o Paraná; Lycosa pardalina (Bertkau) 1880, regiões

altas do Estado do Rio de Janeiro; Lycosa poliostoma (C. Koch) 1848, Uruguai,

Paraguai, Argentina até a Patagônia, Chile; Lycosa thorelli (Keyserling) 1876,

em lodo o Brasil, com exceção da liiléia amazônica; 1‘honeutria fera Perty 1833,

desde o Rio de Janeiro, sul de Minas Gerais até o Rio Grande do Sul, relativa¬

mente frequente em lodo o Estado de São Paulo: vale do Paraíba, arredores da

Capital; Phoneutriu ochracea C. Koch 1818, Brasil; Phoneutria reidyi F. Cam-

hridge 1897, Santarém, Estado do Pará; Phoneutria rufibarbis Perty 1833, Uru¬

guai, Argentina; Phoneutria sanguínea (Walckenaer) 1837, Brasil.

Material e método

No intuito de verificar se entre os espécimes adultos destas espécies existem

ou não grandes variações nas dimensões do aparelho introdutor de veneno, toma¬

mos de cada espécie dez fêmeas adultas e aferimos os valores médios de seu com¬

primento total e do cefalotórax. Após dissecação e com o auxílio de microscópio

estereoscópico, aferimos os valores médios do comprimento e da largura de suas

quelíceras e dos ferrões, hem como a curvatura e a mobilidade lateral dos últimos.

Estas peças foram montadas em bálsamo do Canadá. Na medida que as disseca¬

ções progrediam, estudamos também a topografia dos feixes musculares das quelí¬

ceras e das glândulas de veneno, seus pontos de inserção e seu percurso. As glân¬

dulas de veneno foram igualmenlc medidas, como também os canais eferentes.

Muitas glândulas foram conservadas em bálsamo, de outras fizeram-se cortes lon¬

gitudinais e transversais corados com bematoxilina-eosina, para ulteriores estudos

histológicos.

Como resultado das medições obtivemos valores médios pràticamente iguais,

com diferenças mínimas, para tôdas as espécies citadas, enquanto estas pertencem

ao mesmo gênero. De gênero para gênero, entretanto, os valores medidos se mos¬

tram profundamente disparatados; a própria curvatura dos ferrões varia igual¬

mente de gênero para gênero, mas não significativamente de espécie para espécie.

Aparelho veneníeero

As aranhas citadas pertencem à sub-ordem das LAB1DOGNATHA, cujas que¬

líceras inoculadoras do veneno estão em posição diaxial em relação ao eixo longi¬

tudinal do corpo e os dois ferrões movimentam-se cm sentido horizontal de fora

para dentro e vice-versa. O aparelho de veneno (Figs. 1-4) consiste num par

de quelíceras, que, além de inocular o veneno, tem parte funcional em muitas

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!• lg. 1 Loxoscelcs rufipes — quelleeras com ferrões em repouso — 15 x aumentadas.

Fig. la — Loxosceles rufescens — quelieeras distendidas; um par de glândulas de veneno —

15 x aumentadas.

Fig. lb — Loxosceles spadicea — ferrão totalmente distendido — 45 x aumentadas.

Fig. 2 — Latrodectus mactans — quelieeras em posição de repouso — 15 x aumentadas.

Fig. 2a — Latrodectus curaçaviensis — quelieeras distendidas e glândulas de veneno —

15 x aumentadas.

Fig. 2b — Latrodectus curaçaviensis — ferrão completamente distendido — 45 x aumentadas.

Fig. 3 — Lycosa erythrognatha — quelieeras em posição de repouso — 15 x aumentadas.

Fig. 3a — Lycosa thorelU — quelieeras eompletamente distendidas — 15 x aumentadas.

Fig. 4 — Phoneutria fera — quelieeras em posição de repouse — 15 x aumentadas.

Fig. 4a — Phoneutria fera — quelieeras completamente distendidas — 15 x aumentadas.

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aranhas, para segurar e triturar o alimento e num par de glandular produtoras

do veneno, cada uma eom seu canal eferente. A glândula de veneno, de 1,7 a

2,0 mm de comprimento por 0,3 a 0,35 mm de largura em Loxosceles rufescens

e rufipes, 1,6 a 2,0 mm de comprimento por 0,32 mm de largura em Latrodectus

curacaviensis (Fig. 2a), 4,5 a 6,0 mm cm média de comprimento por 1,0 a 1.2 mm

de largura nas citadas espécies de Lycosa e de 8,0 a 10,0 mm de comprimento

por 2,4 a 2,7 mm de largura em Phoneutria /ura, tem em todos os gêneros a

forma de um pequeno cilindro (Figs. la e 2a) com leves eonstrituras. É de eôr

branco-amarelada, distinguindo-se por isto facilmente por entre os feixes muscula¬

res brancos. As duas glândulas são do mesmo tamanho e localizam-se dentro

do cefalotórax da aranha desde a fronte até a fóvea torácica, mais ou menos.

Cortes longitudinais mostram a mesma topografia nas glândulas dos quatro gê¬

neros, um manto muscular externo, a membrana basal de tecido conjuntivo e o

epitélio glandular com as células excretoras.

O manto muscular envolvente recobre, nos quatro gêneros, todo o corpo glan¬

dular desde o colo. É desdobrado em feixes musculares estriados, que correm em

volta da glândula, com os pontos de inserção e contra-inserção perlo do colo e em

volta do fundo da glândula respectivamente. Em cortes longitudinais pelas glân¬

dulas aparecem cortados ora transversal ora tangencialmente, sendo visíveis as lo-

nofibrilas de suas inserções em diferentes zonas da membrana basal.

A membrana basal parece ser dupla, pois em algumas zonas observam-se no

lado de fora as tonofibrilas do manto muscular e mais para dentro a membrana

peritoneal do epitélio glandular.

O epitélio glandular consiste nas células excretoras do veneno. Tôdas as cé¬

lulas assentam com a base na membrana peritoneal e se dirigem para o centro

da glândula, onde deixam vazio um espaço central, o reservatório do veneno ela¬

borado. As células jovens são cilíndricas, longas, com membrana envolvente ní¬

tida e com um grande núcleo na porção basal. O plasma contém apenas micro-

grânulos, localizados em volta do núcleo. Num outro trecho da glândula encon¬

tra-se um conjunto de células excretoras em fase funcional, já mais progredida,

em que os microgrânulos já avançaram em direção do ápice celular e novos grâ¬

nulos estão surgindo em volta do núcleo basal. Num terceiro conjunto, já se ob¬

servam uma ou mais massas aglutinadas de veneno, de posição apical ou sub-apical,

oriundas da fusão dos microgrânulos, enquanto que microgrânulos continuam a ser

produzidos na porção basal da mesma célula. Num conjunto ainda mais avança¬

do de produção de veneno, os ápices das células produtoras se apresentam rom¬

pidos e as massas aglutinadas de veneno penetrando no reservatório central. Na

porção basal ainda há a produção de novos microgrânulos. Finalmente observa-se

um conjunto de células excretoras, rompidas no ápice, apenas com os contornos

laterais, sem massas aglutinadas em seu interior e em sua porção basal, apenas

com um ou dois grânulos dc tamanho diferente. Deve tratar-se de células excre-

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MECANISMO DA PICADA DAS ARANHAS PEÇONHENTAS PERIGOSAS

loras esgotadas, que, ao que parece, uão mais se regeneram. Há, entretanto, em

Lycosa e Phoneutria, pequenas células, ao lado das esgotadas, aderentes à mem¬

brana basal, que poderão dar origem a novas células excretoras, renovando-se, pois,

em fases contínuas e sucessivas, lodo o epitélio glandular, Este fato é muito

importante para urna aranha que pode viver entre 3 a 6 anos.

Perto do colo da glândula, observamos em Lycosa e Phoneutria uma zona,

separada do resto das células excretoras por um seplo epitelial. As células excre¬

toras desta zona do colo formam apenas microgrânulos, que não se parecem fundir

em massas aglutinadas maiores, mas que difundem pelas paredes das células, che¬

gando assim em contato com o veneno aglutinado no lume central.

A coloração pela hematoxilina-eosina revela que o veneno acumulado no re¬

servatório central é acidófilo, enquanto que os microgrânulos dentro das células

excretoras são basófilos. É justo, pois, que se conclua, que pelo menos duas

substâncias diferentes concorram na elaboração do veneno e que o mesmo, ainda

dentro do lume central, receba ainda uma terceira substância das células do colo.

O canal eferente, que constitui a continuação do colo da glândula, percorre

os dois artículos das quelíceras e termina num poro de saída perto da ponta do

ferrão. Tem cêrca de 1,5 mm de comprimento em Loxosceles e Lalrodcctus, de

4,5 a 5,0 mm em Lycosa e entre 10 e 12 mm de comprimento em Phoneutria.

É sempre muito estreito, com menos de 0,05 mm de largura nos dois primeiros

gêneros e não muito mais nos dois últimos. Em Lycosa c Phoneutria, notamos

em alguns espécimes um alargamento vesicular de cêrca de 1.5 mm à altura da

dobradura do ferrão. () epitélio do duelo é simples, com células achatadas.

Musculatura do aparelho vexeníekro

A musculatura do aparelho venenífero, estudado nos quatro gêneros, se com¬

põe de feixes musculares extensores e flexores do ferrão, de feixes extensores e

flexores do artículo basal das quelíeras e da musculatura da glândula de veneno

e do dueto eferente. Os flexores e extensores do ferrão nascem de um a outro

lado da base do ferrão, atravessam a articulação e se inserem na membrana basal

do segundo artículo das quelíceras, sob a epiderme. Os flexores e extensores do

segundo artículo nascem na membrana basal da epiderme dêsle mesmo artículo,

dos dois lados, percorrem todo o artículo em sentido transversal e penetram pro¬

fundamente no cefalolórax, inserindo-se parcialmente na membrana basal da epi¬

derme do cefalolórax e parcialmente no endoesqueleto. Poderosos feixes flexores

e extensores do segundo artículo da quelícera nascem ainda na base interna e

externa dêste mesmo artículo, vindo a inserir-se ao lado dos feixes anteriores.

A musculatura da glândula de veneno consiste em feixes tonofibrilares de per¬

curso longitudinal, em Lycosa e Phoneutria, tem sua origem num robusto e fle¬

xível tendão, que vem desde a parte apical do ferrão, acompanha intimamente o

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percurso do dueto eferente e se desfaz, à altura da porção basal do segundo seg¬

mento da quelícera, em inúmeros feixes que se inserem na parte externa do manto

muscular envolvente da glândula. Em Lycosa alcançam o fundo da glândula de

veneno, em Phoneutria chegam até aquela porção da glândula de veneno, em que

o manto muscular se torna mais longitudinal.

No mesmo tendão nascem, dentro do artículo basal das quelíceras, os feixes

musculares dilatadores do duelo. Originam-se ao longo de lodo o dueto, atra¬

vessam tangencialmente o artículo, infiltrando-se por entre os feixes flexores e

extensores e inserem-se no membrana basal da epiderme do mesmo artículo.

No segundo artículo das quelíceras, na base, entre o cefalotórax e a entrada

do artículo, há em Lycosa e Phoneutria um espessamento e estreitamento do ar¬

tículo, com feixes musculares circulares, que mantêm a glândula de veneno no

lugar c impedem que a mesma, no momento da picada, avance para a frente.

Quando a aranha pica, isto c, quando tanto o ferrão, como o artículo basal

das quelíceras executam os movimentos de extensão e flexão e entram em jôgo

os músculos adutores e abdutores, então, por fôrça da tração exercida pelo tendão

principal, a glândula de veneno é puxada energicamente para a frente (pelos mús¬

culos que se inserem por fora do manto muscular) ; ao mesmo tempo o manto

muscular envolvente impede que a mesma se dilate pelos lados. Como consequên¬

cia dêste repuxamento, é o veneno impulsionado em jato para dentro do duelo.

Ao mesmo tempo e ainda por fôrça da tração do tendão, que envolve o dueto, é

o lúmen do dueto dilatado em todo o seu percurso, garantindo o jato de veneno

até o poro de saída (pelos músculos dilatadores do dueto).

FeKUÕES L ARTÍCULOS BASAIS IMS OULLÍCEK

Em Loxosceles rujipes, rufescens e spadicea medem os ferrões em tôrno de

0,45 mm e as quelíceras 1,45 mm de comprimento por 0,65 mm de largura (Eigs.

1 - la e lb). Os ferrões se apresentam bastante curvos, principalmente na ponta.

Na posição de repouso as pontas dos ferrões repousam, cada uma, sôbre a ponta

da apófise anterior interna da quelícera, não chegando nunca os ferrões a entre-

cruzar-se, nem mesmo na picada. A máxima distensão, de que os ferrões c as

quelíceras são capazes, no ato de morder, é de cêrca de 0,8 mm, de maneira que

os dois pontos de penetração dos ferrões no corpo da vítima seriam afastados um

do outro no máximo de apenas 0,8 mm e a profundidade de penetração seria no

máximo de 0,4 mm (Fig. 5).

Em Latrodcctus mactans e curacaviensis, com 0,35 a 0,45 mm de compri¬

mento dos ferrões e cêrca de 1 mm de comprimento das quelíceras, as pontas

dos ferrões se entrecruzam na posição de repouso. Quando uns e outros forem

totalmente distendidos, há uma distância entre as pontas dos ferrões, de cêrca de

1,2 mm apenas (Figs. 2-2a e 2b). As duas marcas de penetração, deixadas no

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MECANISMO DA PICADA DAS ARANHAS PEÇONHENTAS PERIGOSAS

corpo da vítima seriam, pois, distantes uma da outra apenas de cêrca de 1 mm

(Fig. 5) e sua profundidade de penetração não excederia mais de 0,4 mm.

Nas espécies de Lycosa erythrognatha, thorelli, nychthemera, etc., medem os

ferrões cêrca de 2,7 mm c o artículo basal das quelíceras de 4,5 a 5,5 mm. Em

posição de repouso os ferrões ou se entrecruzam ou ficam recolhidos na goteira

(Fig. 3) ; em posição de ataque podem as pontas dos ferrões deixar marcas na

vítima, distantes cêrca de 9 mm ao máximo, 6 mm em média e com uma profun¬

didade de cêrca de 2,5 mm (Figs. 3a e 5).

A temível espécie Phoneutria fera, apresenta 4,6 mm de comprimento de fer¬

rões e entre 6 a 7 mm de comprimento do artículo basal das quelíceras (Fig. 4).

O máximo da distância, que suas pontas de ferrões podem deixar na vítima é

de 17 mm (Figs. 4a e 5), com uma profundidade de cêrca dc 4 mm.

Discussão

Não está definitivamente esclarecida a estrutura histológica das glândulas dc

veneno das aranhas aqui tratadas, principalmente no tocante ao esgotamento de¬

finitivo e à degenerescência das células excretoras, como também não se sabe se o

produto final venenoso resulta do concurso de três misturas venenosas diferentes,

das quais duas seriam elaboradas pelas células excretoras do corpo glandular e a

terceira pelas células excretoras do colo glandular. O funcionamento do sistema

muscular das quelíceras e das glândulas de veneno, em que, aos movimentos de

vai-vem dos ferrões, correspondem simultâneamente o esvaziamento em jato da

glândula e a dilatação do dueto eferente para a propulsão do veneno e sua ex¬

pulsão explosiva quase pode ser considerada bastante patente e condizente com

o que se observa em experiências.

Quanto às distâncias máximas que os ferrões dos quatro gêneros de aranhas

temíveis podem deixar no corpo da vítima, há a assinalar que se poderiam con¬

fundir as picadas por Loxosceles e por Latrodectus de um lado e as por Lycosa e

neutria de outro lado. Nas regiões, entretanto, nas quais se. sabe não existir

Latrodectus, como é o caso geral no Brasil (com exceção de algumas praias do

Estado do Rio de Janeiro e da Guanabara) ou um dos gêneros da Lycosa ou

Phoneutria, seria perfeilamente possível, distinguir-se pelas distâncias dos dois pon¬

tos de penetração dos ferrões, entre uma Loxosceles e uma Lycosa ou Phoneutria.

Resumo

No presente trabalho são aferidas as médias das medidas de dez exemplares,

fêmeas adultas, das aranhas perigosas dos gêneros Loxosceles, Latrodectus, Lycosa

Phoneutria de outro lado. Nas regiões, entretanto, nas quais se sabe não existir

à possibilidade de distensão máxima dos ferrões no momento dc picar, à profun-

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didade de penetração dos mesmos no corpo de uma vílima e aos comprimentos e

larguras das glândulas veneníferas. É descrita também a interrelação entre o me¬

canismo de picada, quanto aos artículos fortemente quinitizados e os feixes mus¬

culares adutores e abdutores destes e a musculatura da glândula e do dueto de

veneno.

SUMMARY

In this paper is described lhe average size of lhe fangs, of the basal segments,

of the venomous glands and lhe maximum distances of the pits from the two fangs,

when biting, of ten adult female spiders belonging to the genera Loxosceles ( ru -

jipes, rufcscens and spadicea), Latrodectus (mactans and curaçaviensis), Lycosa

( erythrognatha, nychthemera, thorelli) and Phoneutria fera. The mechanisms of

expelling the venom from the glands and the duets hy different musclc-bundles

are also described.

Agradecimento — Agradecemos à Maria Aparecida de Toledo, técnica de labo¬

ratório, pela feitura dos cortes histológicos e da montagem das peças totais das

aranhas.

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WOLFGANG BÜCHERL

HISTOLOGIA DAS GLÂNDULAS DE VENENO DE ALGUMAS ARANHAS

E ESCORPIÕES *

WOLFGANG BÜCHERL

Secção de Artrópodos Peçonhentos, Instituto Butantan, São Pauto, Brasil

Morfologia do aparelho de veneno

Nas aranhas consiste o aparelho de veneno em um par de quelíceras e ura

par de glândulas de veneno. A posição paraxial das quelíceras em relação ao

eixo longitudinal do corpo e o movimento vertical das presas inoculadoras carac¬

terizam as aranhas que pertencem à subordem das “caranguejeiras” (ORTHOGNA-

THA), enquanto que a posição diaxial e movimentos horizontais são privativos das

aranhas “verdadeiras” da subordem LABIDOGNATHA. Ao primeiro grupo per¬

tencem, entre centenas de espécies, consideradas pràticamente inofensivas, as te¬

míveis representantes do gênero Atrax da Austrália e Tasmânia, as do gênero

Harpactirella da África do Sul e, na região neotropical, as aranhas de alçapão,

do gênero Actinopus e as aranhas com teias de funil, Trechona. A picada por

uma espécie pertencente aos primeiros dois gêneros, determina no homem intoxi¬

cação de média gravidade até gravíssima, inclusive a morte, como atestam recen¬

tes publicações especializadas. Nada se sabe no tocante a acidentes com os dois

gêneros neotropicais; publicações, entretanto, sôhre a ação tóxica do veneno de

Trechona e de Actinopus, feitas por V. Brasil e J. Vellard e outros, não deixam

dúvida, de que devem ser consideradas perigosas.

Entre os milhares de espécies de aranhas verdadeiras, apenas as seguintes

foram comprovadas como vulnerantes e com veneno bastante ativo sôhre o orga¬

nismo humano: as “viúvas negras”, incluindo diversas subespécies de Latrodectus

mactans das Américas, do Mediterrâneo, da África do Sul, de Madagascar, da

Austrália, de algumas ilhas do Pacífico, inclusive dt Havvaii, a Latrodectus cura-

caviensis, desde o Canadá até a Patagônia, costas do Rio de Janeiro até Pernam¬

buco, e Latrodectus geometricus, tropical cosmopolita, mas de veneno bem menos

ativo;

Trabalho referido no simpósio VENENOS E TOXINAS, na XVT Reunião Anual

da SBPC, Ribeirão Prêto, SP — 5 a 11 de julho de 1964, realizado sob os aus¬

pícios do FPIB e do National Institute of Health, U.S.A.

Recebido para publicação em 12/8/1964.

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78 HISTOLAGIA DAS GLANDULAS DE VENENO DE ALGUMAS

ARANHAS E ESCORPIÕES

as “ aranhas marrons”, com as principais espécies, Loxosceles rujescens e L.

rufipes, a primeira tropical cosmopolita, a segunda desde os Estados sulinos da

U.S.A., o México, América Central e a América do Sul;

as “ tarântulas ’ do gênero Lycosa, principalmente algumas espécies tropicais

e subtropicais maiores e finalmente

as “ aranhas armadeiras” do gênero Phoneutria, cujo representante típico é a

Phoneutria fera, de hábitos agressivos, que ataca ativamente e cujo veneno é de

ação intensiva sôbre o organismo humano.

Nos escorpiões encontra-se o aparelho de veneno no interior do telson, isto

é, no último artículo da cauda. Há também duas glândulas de veneno, mas ape¬

nas um ferrão inoculador. Os escorpiões perigosos, sob o ponto de vista da po¬

derosa ação de seu veneno sôbre o corpo humano e que também picam, pertencem

aos seguintes gêneros: Tityus (serrulatus, bahiensis, trinitatis ), na América do Sul,

Centruroides {sculpturatus, gertschi, gracilis, subgranosus, etc.). Na América Cen¬

tral, no México e no sul de U.S.A., Opistophthalmus e Hadogenes da África do

Sul, Androctonus, Buthacus, Buthotus, Buthus, Leiurus e Parabuthus da parte

africana e asiática da bacia do Mediterrâneo, o último gênero até a África do

Sul, Heterometrus, Pandinus e Scorpio, da Índia, Arábia e África, respectivamente.

Nas aranhas caranguejeiras as glândulas de veneno se localizam dentro do

artículo basal das próprias quelíceras, o canal eferente do veneno é curto, entre,

a glândula e a ponta do ferrão, onde se abre em fenda; nas aranhas verdadeiras,

entretanto, as duas glândulas de veneno estão bastante afastadas do aparelho ino¬

culador, situando-se na parte anterior do cefalotórax, ao lado do estômago. O

canal eferente percorre uma parte do cefalotórax, penetra entre a musculatura do

artículo basal da quelícera, percorre ainda o ferrão e vem a terminar também

numa fenda ao lado da ponta do mesmo. No telson dos escorpiões as duas glân¬

dulas de veneno são justapostas, separadas apenas por espessa camada muscular

e um septo divisório conjuntivo; os dois canais eferentes correm paralelamente

para trás, por dentro do ferrão e vêm a terminar independentemente um do outro,

perto da ponta, do lado, em uma fenda estreita.

Em aranhas e escorpiões é o aparelho inoculador do veneno, dois ferrões em

aranhas, um aguilhão nos escorpiões, constituído por um artículo robusto, forte¬

mente quitinizado a terminar sempre em ponta muito aguda, capaz de penetrar

facilmente pela cútis humana. A posição lateral dos poros, por onde sai o jato

de veneno, garante maior eficiência de inoculação, pois a ponta do ferrão abre

espaço adiante.

Nos três grupos a glândula de veneno surgiu por simples aprofundamento do

exoesqueleto, da epiderme e membrana basal. Isto é facilmente comprovado pelo

aspecto histológico do canal eferente, cujas porções distais mantém a mesma su-

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perposição das três camadas, mas em ordem inversa, isto é, a camada quitinosa

por dentro, seguido pelo epitélio e a terminar por fora pela membrana basal.

A glândula de veneno nos três grupos tem a forma de uma ampôla ou de

um saco, com a maior largura no meio ou no fundo, enquanto que na região do

colo há uma transição paulatina nas caranguejeiras e nos escorpiões da glândula

para o canal eferente, e abrupta, com estreitamento abrupto na base do canal, nas

aranhas verdadeiras. Esta diferença morfológica se explica pela localização da

glândula dentro do órgão inoculador ou longe do mesmo e ainda pela maneira

como é esvaziado o conteúdo glandular no exato e curto instante da picada, como

veremos adiante.

Nos três grupos existem poderosos feixes musculares, sempre de natureza es¬

triada, voluntários portanto. Têm duas funções. A primeira manter os canais

eferentes e as glândulas em seus respectivos lugares, a segunda garantir a expulsão

viva, a jato, do veneno no momento da picada, quer do lúmen central das glân¬

dulas, quer através do lúmen estreito do canal eferente. A terceira função da

musculatura das quelíceras é a de flexores e extensores da garra inoculadora.

Esta função é em geral exercida pelos mesmos feixes que nas caranguejeiras man¬

tém a glândula em seu lugar e ao mesmo tempo comprimem ou dilatam o volume

do canal; nas aranhas verdadeiras, os músculos flexores e extensores da garra

inoculadora, ou múscidos adutores e abdutores, exercem simultâneamente o papel

de dilatadores e compressores do lúmen do canal eferente. Nos escorpiões, ao

contrário, sendo o telson e o aguilhão venenífero constituídos de um só artículo,

rígido e sem motilidade própria, o papel de eriçar o telson para a picada é trans¬

ferido para os poderosos feixes musculares estriados, extensores e flexores do pró¬

prio artículo, sitos na própria base do mesmo. Para incrementar o vigor da pi¬

cada, é êste papel transferido sempre para os cinco artículos caudais antecedentes

que, no momento da picada são levantados todos conjuntamente, de maneira que

a cauda tôda vem a sobrepassar por cima do pré-abdomen e do próprio cefalotórax.

ficando o telson virado para baixo e para fora, com o ferrão prestes a ser proje¬

tado. qual catapulta, de encontro à pele da vítima.

Além dessa musculatura, que aciona o aparelho venenífero, mantém no lugar

e provê o transporte rápido do veneno pelo canal, existe nos três grupos uma

musculatura própria da glândula de veneno, também estriada e que envolve em

cada caso o saco glandular.

A musculatura do aparelho de veneno

a) Adutores e abdutores das quelíceras em aranhas — Nas aranhas as que¬

líceras consistem sempre de dois artículos móveis, o basal, robusto, largo e cilín¬

drico e o terminal ou garra, curvo, pontudo, que penetra na pele da vítima. 0

último não contém musculatura, a não ser em sua porção basal, exatamente na

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HISTOLAGIA DAS GLÂNDULAS DE VENENO DE ALGUMAS

ARANHAS E ESCORPIÕES

dobra dos dois segmentos. Existe nesta região um pequeno esclerito interarticular,

que é o responsável pela flexão ou pelo relaxamento do artículo terminal. Neste

esclerito inserem-se os adutores, contra-inseridos na base do artículo terminal. No

lado oposto, na porção basal do artículo terminal e na porção mediana do artículo

basal, inserem e contra-inserem-se os músculos abdutores das garras. Os abduto-

res e adutores do artículo basal se originem e terminam respectivamente dentro

do próprio artículo e dentro da porção anterior do cefalotórax. Nas aranhas ca¬

ranguejeiras — estudamos Actinopus, Trechona e várias dezenas de outras espé¬

cies — êstes mesmos músculos incluem parcialmente a glândula de veneno e, ao

funcionarem, promovem seu esvaziamento ou relaxamento. A própria glândula,

com aspecto de cenoura, com a porção mais larga na frente, não sai de seu lugar.

Em aranhas verdadeiras temos estudado Latrodectus curacaviensis, Loxosceles ru-

jescens, Lycosa erythrognatha e Phoneutria fera. Seus músculos abdutores e adu¬

tores dos dois artículos das quelíceras são essencialmente homólogos aos das ca¬

ranguejeiras, inclusive as inserções no esclerito interarticular, e as contra-inserções

ao longo da membrana basal do artículo basal. Como fato novo- encontramos neste

grupo fibras musculares, a abrirem-se em leque e que se inserem ao longo do

canal eferente do veneno, tendo suas contra-inserções num tendão longo, que corre

paralelo a êste canal e no qual terminam também fibras dos feixes adutores.

Desta maneira, ao se fecharem as quelíceras no momento de morder, é exercida

forte tração sôbre as paredes do canal, cujo lume forçosamente se dilata, dando

passagem ao veneno. O segundo fato novo, verificado nas aranhas verdadeiras,

é a presença de um esfincter muscular, isto é, um anel constritor, formado por

feixes musculares circulares, localizado exatamente na base do artículo basal das

quelíceras, na zona onde êste penetra na porção fronteira do cefalotórax. A êste

anel constritor corresponde exatamente o comêço do canal eferente. Dêste anel

partem fibras, parcialmente unidas por um tendão, penetram pelo cefalotórax a

dentro, e se contra-inserem na porção externa da muscularis da glândula de ve¬

neno. A contração dêstes músculos repuxa a glândula tôda para a frente, em

direção ao esfincter muscular. Como a glândula não pode passar daí, dá-se for¬

çosamente uma violenta contração da glândula, em sentido de trás para diante,

determinando a expulsão do veneno do lume central e sua passagem para o canal

eferente.

b) Musculatura do corpo glandular — As glândulas de veneno, tanto dos

escorpiões, como das aranhas em geral, são rodeadas externamente por um manto

muscular, que consiste em cerca de 30 a 150 feixes estriados e que, a começar

do colo glandular, rodeiam a glândula em forma de serpentina. As inserções e

contra-inserções das fibrilas se dão no sarcolema, que cobre feixe por feixe e a

muscularis inteira. Em nenhum caso foi vista uma muscularis própria dos canais

eferentes. No fundo do saco glandular os feixes são muito espêssos. Mantém

constante o volume glandular e, no momento de sua contração, promovem um es¬

vaziamento total da glândula.

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Histologia da glândula de veneno

A glândula de veneno consiste na muscularis externa, rodeada pelo sarcolenm,

na membrana basal e no epitélio excretor do veneno. A comparação de cortes

seriados pelas glândulas dos escorpiões Tityus serrulatus e Tityus bahiensis, das

aranhas verdadeiras, Loxosceles rufescens, Latrodectus curacaviensis, Lycosa ery-

thrognatha e Phoneutria fera, extraídas de animais anestesiados, fixados em Bouin

e- com 4 a 5 micra de espessura dos cortes, corados pela hematoxilina-eosina ou

segundo Mallory ou van Gieson, permite um estudo bastante comparável entre

êstes diversos grupos de artrópodos.

A membrana basal forma em glândulas de animais jovens uma camada sim¬

ples, contínua, a revestir por dentro a muscularis e a penetrar concêntricamente

para dentro do lúmen, cobrindo de espaço a espaço as células excretoras. Nas

glândulas mais velhas, em que as células epiteliais preenchem apenas ainda as

paredes ao longo da glândula, a membrana também é contínua.

0 epitélio excretor é do tipo simples. Nos escorpiões e nas aranhas caran¬

guejeiras existem dois ti[K>s de células: a primeira camada é formada por células

baixas, subcuboidais, com núcleos em repouso, dispostas ao longo da membrana

basal e espremidas contra a mesma pelo segundo tipo de células. São células de

substituição, isto é. irão substituir as células excretoras, quando estas se des¬

gastarem.

A segunda camada, a principal, é formada por células cilíndricas, colunares,

três a quatro vêzes mais longas que largas, que assentam na membrana basal e

penetram dentro do lúmen central. Em glândulas jovens preenchem quase intei¬

ramente o lúmen. Sua disposição é serpentiniforme e oblíqua em relação ao eixo

longitudinal da glândula. Nas células epiteliais jovens o núcleo se encontra na

porção basal; durante a produção de veneno, os núcleos migram ao meio e final¬

mente até a porção apical da célula excretora, aumentando proporcionalmente em

dimensão. No comêço da elaboração do veneno, vêm-se em volta do núcleo sub-

basal pequeníssimos grânulos. Êstes também migram aos poucos para o meio da

célula; aí já se apresentam como gotículas relativamente volumosas. Fazem pressão

contra as paredes laterais, de maneira que os contornos celulares agora são sa¬

lientes para fora. Em fase mais adiantada da elaboração do veneno, as gotículas

vêm a formar, por aglutinação, de uma a três ou mesmo cinco gôtas grandes, que

se reunem na porção apical da célula, enquanto que na porção mediana e basal

bá novas formações de novas gotículas ou novos grânulos de veneno. Finalmente,

por excesso de pressão, rompe-se uma pequena porção apical da célula excretora,

libertam-se as gôtas de veneno que são armazenadas no lume central. A célula,

mesmo rompida apicalmente, continua sua produção de veneno, enquanto houver

citoplasma e núcleo ativos. Após um certo tempo, entretanto, esgota-se a capa¬

cidade funcional da célula, seu núcleo é expulso juntamente com a última quan¬

tidade de veneno; ela degenera, sendo então substituida por uma das células "de

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HISTOLAGIA DAS GLÂNDULAS DE VENENO DE ALGUMAS

ARANHAS E ESCORPIÕES

substituição” já descritas. Êste tipo de células secretoras pode ser chamado do

tipo “ apócrino ”, com destruição parcial e finalmente total da célula e sua substi¬

tuição por uma nova.

Nas aranhas verdadeiras vimos, na porção apical da glândula, em tôrno do

colo, justamente onde termina a muscularis externa, um outro tipo funcional de

células excreloras. Não existem aí células de substituição. Tôdas são do tipo

cilíndrico, muito longas e estreitas, assentes na membrana basal e orientadas de

encontro ao lume central. Porém, suas secreções são sempre muito finas, granu¬

lares e migram como tais através da célula, desde sua base até ao ápice, onde

difundem através da membrana celular porosa, mas intacta, para o lúmen central.

Estas células não se rompem, pois, e devem ser consideradas como sendo do tipo

“merócrino”.

Discussão

Biicherl (1 e 2), Barth (3), Brazil e Vellard (4), Ancona (5), Millot (6),

Heese (7), Sampayo (8) e Vellard (9) foram os autores principais que se preo¬

cuparam com o aspecto morfológico, histológico e funcional das glândulas de ve¬

neno de aranhas, devendo salientar-se principalmente os estudos de Vital Brazil

e Vellard, em 1925, sôbre a Phoneutria nigriventer, e de Barth sôbre a Latro-

dectus mactans. Barth fala de um sistema duplo, da glândula de veneno de L.

muctans: do tipo merócrino nas glândulas de colo, e do tipo regiócrino, das glân¬

dulas celulares, interpretando as células subcuboidais por nós consideradas como

sendo de “substituição” às glândulas cilíndricas esgotadas, como sendo verdadeiras

glândulas em função ativa juntamente com as cilíndricas e que se esgotariam ao

mesmo tempo como estas. Concluiu então que o veneno elaborado pelas células

dos dois tipos irá durar a vida tôda da aranha, mesmo que as células glandulares

estivessem mortas já há muito tempo. O produto das células do colo irá “amole¬

cendo” sempre apenas pequenas porções de veneno “endurecido” dentro do lume

central da glândula, exatamente um volume tal que seria necessário para uma

picada.

Parece-nos que esta interpretação seria um tanto forçada, principalmente

quando se toma em consideração que há aranhas que vivem até 6 e 8 anos. Con¬

tinuamos, ao contrário, a considerar as células glandulares basais, subcuboidais,

como sendo células de reserva, que, ao se esgotar a célula principal, assumem o

papel desta, de elaborar veneno, sendo substituídas por seu turno por outras sub¬

cuboidais, que repousam ao longo da membrana basal.

Sôbre as glândulas de veneno de escorpiões pouco foi publicado desde Phi-

salix(lO) e em termos muito imperfeitos por Maurano(ll), Melo Campos (12)

e Magalhães (13).

Ulteriores estudos, principalmente no tocante às células de colo e à natureza

das células subcuboidais são necessários.

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Resumo

No presente trabalho é feito um estudo morfo- e histológico sôhre o aparelho

vulnerante, a musculatura e a glândula de veneno de Tityus serrulatus e T. ba-

hiensis, de algumas aranhas caranguejeiras, Actinopus sp. e Trechona venosa, bem

como das espécies Loxosceles rujescens, Latrodectus curacaviensis, Lycosa ery-

thrognatha e Phoneutria fera.

Agradecimento — Agradecemos à Da. Maria Aparecida de Toledo Soares, téc¬

nica em histologia, a feitura dos cortes e a coloração dos mesmos.

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Mem. Inst. Butantan,

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BIOLOGIA DE ARTRÓPODOS PEÇONHENTOS*

WOLFGANG BÜCHERL

Secção de Artrópodos Peçonhentos, Instituto Butantan, São Paulo, Brasil

Introdução

0 trabalho inclui apenas as duas ordens, Scorpiones e Araneida, e entre estas

apenas as poucas espécies, apontadas pela literatura especializada, como sendo real-

mente perigosas para o homem. São relatados apenas os dados biológicos mais

importantes, em grande parte incompletos ainda. A limitação do espaço nos im¬

pôs a omissão da literatura especializada, mesmo da mais importante, pois sua

citação bibliográfica ocuparia cêrca de 30 páginas. A classificação e distribuição

geográfica dos aracnóides peçonhentos é tratada sucintamente, pois em outro tra¬

balho de nossa autoria já foi considerada.

Refere-se ao acasalamento, gravidez e parturição, domicílios e alimentação,

quantidades de veneno que poderão ser injetadas por ocasião da picada e toxici¬

dade do veneno para camundongos. O último item deve ser interpretado apenas

como normativo, pois, evidentemente deverão prosseguir os estudos da toxicidade

em animais mais sensíveis.

I. Escorpiões perigosos

A. Classificação e distribuição geográfica

A família SCORPIONIDAE, subfamília Scorpio.ntnae abrange os gêneros pe¬

rigosos, // eterometru s (índia), P a n d i n u s (África), S cor pio (Medi¬

terrâneo) e Opisthophtalmus (África do Sul). Mais importantes são os

representantes da família BUTHIDAE, pertencendo à subfamília Buthinae os gê¬

neros : Androctonus, Buthacus, L e i u r u s, B u t h u s e P ar a b u t h u s

(Mediterrâneo, Ásia Menor, África do Norte até Pérsia e África do Sul. à sub¬

família Rhopalurinae o gênero Centruroides (México, U.S.A.: Estados do

Sul) e à subfamília Tityinae o gênero Tityus, com as espécies sul-americanas

perigosas: Tityus serrulatus, T. bahiensis e T. trinitatis.

* Sob os auspícios do FPIB e NHI. Apresentado no simpósio da XVP Reunião

Anual da SBPC, Ribeirão Prêto, 5 a 11 de julho de 1964.

Recebido para publicação em 12/8/1964.

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BIOLOGIA DE ARTRÓPODOS PEÇONHENTOS

B. Biologia dos escorpiões

1) Acasalamento — Detalhes do acasalamento, sem interpretação correta

foram descritos por Maccary. 1810, por Fabre, 1907, por Pawlowsky, 1924. Piza,

1939/40 e 1943.

Vachon, em 1952, descreveu a emissão de um órgão sexual pelo macho.

Bücherl, em 1955, Zolessi, em 1956, Alexander, em 1956/57, Shulow, em 1957/58.

descreveram finalmente o acasalamento em Tityus, Bothriurus, Opistophthalmus,

Leiurus e Buthotus respectivamente. O macho emite no acasalamento dois semi-

espermatóforos, que, ao serem expulsos, se unem em um tubo ôco, projetado sob

o ventie da fêmea. Segurando a esta pelas mãos ou pelas quelíceras. o macho

arrasta a mesma por sôhre a ponta apical do espermatóforo, de maneira que a

ponta terminal dêste órgão possa penetrar pelo orifício genital da fêmea e pro¬

mover o transporte do esperma. Após o acasalamento, macho e fêmea se sepa¬

ram. Parece que existem espécies hermafroditas. Mathiessen, em 1961, descre¬

veu Tityus serrulatus como hermafrodita, fato totalmente insólito, se se tomar em

consideração que do mesmo gênero Tityus se conhecem muitas outras espécies, com

os sexos separados e que vivem no mesmo biótopo, como por exemplo o Tityus

bahiensis.

2) Gravidez e parturição — Nos ovários de uma fêmea adulta existem

eêrea de 300 a 500 oócitos, em diversas fases de maturição. Cada óvulo é fixo,

fecundação e desenvolvimento embrionário verificando-se no mesmo local. Daí o

nome ovário-útero . A primeira zona dos vasos deferentes também não está fi¬

xamente delimitada, podendo amadurecer aí também óvulos. Portanto, os esper¬

matozóides migram, desde o orifício genital até uma certa porção ovariana, onde

são fecundados em cada período anual cêrca de 40 a 50 óvulos. Duas fecunda¬

ções e duas parturições anuais podem ocorrer em certas espécies. Uma vez fe¬

cundado um óvido e feitas as primeiras divisões celulares, aumenta o volume do

ôvo, que empurra a parede ovariana para fora. surgindo assim um “divertículo”

de forma esférica, unido ao útero por um pedúnculo. Com o ulterior desenvolvi¬

mento do embrião, o divertículo aumenta em dimensões, funcionando como uma

■'câmara de incubação”. No polo distai desta câmara surge aos poucos um “'cor¬

dão” cilíndrico, que termina num “botão umbilical” e cuja comunicação com a

câmara é regulada por uma “válvula”. O embrião é dirigido com a cabeça con¬

tra o cordão cilíndrico. Na fase final do desenvolvimento embrionário, a câmara

é tão grande e sua parede externa tão fina e transparente, que se pode observar

perfeitamente o embrião, após remoção da carapaça do pré-abdomen materno.

A esta altura o embrião ocupa também o pedúnculo, que agora é tão largo quanto

a câmara. Quando o embrião adquire mobilidade própria, êle se liberta do cor¬

dão e passa pelo pedúnculo, penetrando no lúrhen ovarial. O cordão degenera,

como também a câmara, inclusive o botão umbilical. O embrião caminha pelo

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dueto uterino, os vasos deferentes, a vagina e força a passagem pela abertura ge¬

nital. 0 botão umbilical, sob a forma de uma massa dura, marrom, é muitas

vezes encontrado na vagina. Ao nascer, já está rompida a película embrionária

ou a mesma é desfeita pela mãe. 0 embrião sobe em frente à bôea da mãe, por

entre as quelíceras, por cima do cefalotórax e se instala sôbre as reentrâncias do

pré-abdomen.

3) Fase larval — 0 embrião, ao nascer, pode ser chamado de larva, por¬

que sua forma externa ainda está longe de ser a de um exemplar adulto. Não

apresenta pêlos, suas garras não são completas, o ferrão não tem aberturas para

o esvaziamento das glândulas de veneno, etc. Apenas após a segunda troca de

pele, eles adquirem a forma definitiva, abandonam a mãe e fazem vida independente.

4) Alimentação — Todos os artrópodos e insetos são atacados, dominados

e comidos, com franca preferência dos de corpo mole. A caça é noturna e for¬

tuita, isto é, o escorpião sai à noite em busca de prêsa. Geralmente não enxerga

nem espreita a mesma, mas perambula com as mãos e os dedos distendidos, guiado

apenas pelos longos pêlos táteis aí existentes. Quando pressente algum animal

que se move, fecha os dedos resolutamente e apreende a prêsa. Só então toma

conhecimento das dimensões e do vigor da mesma. Mantém-na â distância de

seu próprio corpo e, quando a mesma se defende, dobra a cauda e o aguilhão de

veneno para a frente e injeta nela seu fulminante veneno; quando a mesma não

resiste, êle a leva diretamente às quelíceras, que arrancam pedaços. Os escor¬

piões podem alimentar-se quase todo o dia, mas também são capazes de jejuar

alguns meses. Água êles bebem com frequência.

5) Domicílios dos escorpiões — Há escorpiões de floresta, de campo, de

semi-deserto e de deserto. Os primeiros apresentam geralmente côr escura e são

pouco perigosos; os de campo chegam até a côr de chocolate e os últimos são

bem mais claros ou mesmo amarelos. Todos são capazes de escavar ativamente

o solo. transportar a terra removida, construir um corredor quase vertical ou in¬

clinado até a profundidade de 10 a 60 cm, com uma ou duas câmaras de aeração

e ventilação para equilibrarem o microclima. De dia estão nestes domicílios, de

noite caçam em volta dos mesmos. Os escorpiões semi-desérticos e desérticos e,

em escala menor, os de campo, mudam-se para residências humanas, quando a

ocasião fôr propícia e vivem aí perfeitamenle. Infestações por Tityas serrulatus

têm ocorrido em Ribeirão Prêto, em Belo Horizonte, por Tityus bahiensis em

Ouro Prêto principalmente, para citar apenas algumas cidades.

6) Aparelho de veneno — Consiste em um ferrão no fim da cauda, ponti¬

agudo e curvo para trás. Dos lados do ferrão, perto da ponta e em posição

francamente lateral estão os dois poros de saída do veneno, em forma de elipse.

No interior existem dois canais eferentes separados, cada um se originando de

uma glândula. As duas glândulas apresentam a forma de um saco com a parle

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BIOLOGIA DE ARTRÓPODOS PEÇONHENTOS

mais larga no meio.

Por fora cia glândula liá uma roliusta muscularis, às vêzcs

dupla. Segue-se uma delicada membrana basal e as células excretoras de veneno,

cilíndricas, nucleadas, que elaboram o veneno em finíssimos grânulos na porção

basal. Os grânulos migram aos poucos para o centro da célula, daí para a porção

apical, aumentando progressivamente em tamanho pela fusão de grânulos. Fi-

nalmente o veneno é despejado para o lúmen central por rompimento de uma

porção apical da parede celular. A célula mesmo assim continua funcionando e

elaborando nova porção de veneno e assim por diante até que o próprio núcleo

seja eliminado também para o lúmen central. A célula então degenera, sendo

substituída por uma célula basal adjacente, até aqui de aspecto cúbico.

7) Quantidades de veneno — 141.285 extrações elétricas de T. scrrulatus

e 45.990 de T. bahiensis, feitas durante os anos de 1953 a 1963, forneceram as

seguintes médias de veneno puro sêco por T. serrulatus — 0,62 mg e por T. ba¬

hiensis — 0,39 mg. Aferições individuais deram até 4 mg como valores máxi¬

mos para as duas espécies.

8) Toxicidade do veneno escorpiônico — Varia significativamente de animal

para animal. No homem sempre se manifesta uma dor pungente, forte, desde o

início da picada, perdurando cêrca de 5 a 7 horas, quando não neutralizada por

analgésicos. Em seguida há comprometimento rápido do sistema nervoso, princi¬

palmente o que regula a respiração, a sudorese e a inervação das glândulas e apa¬

relhos revestidos por musculatura lisa e que, em casos graves, pode evoluir rapi¬

damente até a inconsciência e morte por parada respiratória com tetanismo ime¬

diato. Intoxicação, progressão do veneno e sua eliminação no homem processam-se

sempre muito ràpidamente. Cêrca de seis horas após o acidente o veneno já se

encontra em fase de eliminação e neutralização. As picadas de Tityus serrulatus ,

/'. trinitatis , de 7 . bahiensis em parte, na América do Sul. de Centruroides noxius,

limpidus, su/jusus no México, de C. sculpturatus no Arizona, de C. vittatus e

gertschi no Texas, de Parabuthus granulatus, capensis e talvez de algumas espé¬

cies de Hadogenes e Opistophthalmus na África do Sul. de Androctonus aeneas,

amoreuxi, australis, crassicauda, marroccanus, de Bulhus occitanus, Buthotus ju-

daicus, de Leiurus quinquestriatus principalmente e ainda de Buthacus arenicolu,

todos êstes de Marrocos, Algéria, Líbia, Egito, Palestina, Síria, Arábia, Pérsia,

raras vêzes sul da Espanha e Itália, Crécia, etc., são consideradas como as mais

perigosas, podendo causar a morte humana. Wilson relatou em 1904 diversas

mortes no Sudão; segundo Sitt, em 1923, L. quinquestriatus causaria a morte em

50% das crianças acidentadas; Walerman estabeleceu uma quota de 25% de

mortalidade, em 1957, por picada por T. trinitatis; Bücherl, em 1952, calculou

a mesma percentagem em crianças, picadas em Ribeirão Prêto por T. serrulatus;

Magalhães, em 1935, enumerou 874 acidentes em Belo Horizonte, ocorridos com

o mesmo escorpião, com 100 mortes; segundo autores mexicanos verificaram-se

em Durango. durante os anos de 1890 a 1926. 1.608 mortes por picada escorpiônica.

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II. Aranhas perigosas (ordem Araneida)

A. Classificação e distribuição geográfica

Na subordem das CARANGUEJEIRAS (ORTHOGNATHA) existe a família

DIPLURIDAE, subfamília DiPLURlNAE, com o gênero sul-americano perigoso Tre-

cliona, e na subfamília Macrothelinae o gênero temível, Atrax. As carangue¬

jeiras gigantes, às vêzes com mais de 12 ou mesmo 20 cm de uma ponta da perna

à outra, pertencem à família THERAPHOSIDAE, subfamília Theraphosinae, com

os gêneros principais: Theraphosa, ao norte do Amazonas; Acanthoscurria, Rrasil

Central, Estado de São Paulo; Pamphobeteus, tôda a parte sêca, alta da América

do Sul até o Trópico do Capricórnio; Lasiodora, Rio de Janeiro, Bahia; ,Y enes-

this e Megaphobema, as maiores caranguejeiras da Colômbia até ao rio Purús,

mais ou menos. À subfamília das Aviculariinae pertence o gênero amazônico

da Avicularia, cujas principais espécies são dendrícolas e à subfamília Grammosto-

linae pertence o gênero Grammostola do Chile, Argentina, Uruguai, Paraguai e

sul do Brasil. À família BARYCHELIDAE, subfamília Leptopelmatinae pertence

o temível gênero sul-africano, Harpactirella.

Na subordem das aranhas verdadeiras (LAB1DOGNATHA) há comprovadas

quatro famílias com representantes perigosos: à família das SICARIIDAE perten¬

cem as famosas aranhas noturnas, de 6 olhos, do gênero Loxosceles, com as espé¬

cies mais importantes, L. rufescens da Espanha, Itália e América do Sul, L. rufipes

da América Central e Sul, L. reclusa dos Estados sulinos de U.S.A. e L. spadicea

do Rio Grande do Sul, além de outras. A família das THERIDIIDAE compreende,

entre outros, o conhecido gênero das “Viúvas Negras” — Lalrodectus — com as

seguintes espécies e subespécies principais:

Latrodectus geometricus — tropical e subtropical cosmopolita;

Lalrodectus curacaviensis — desde o Canadá até a Patagônia e

Latrodectus mactans mactans — desde os EI.S.A. até a Argentina e Chile, L.

mactans tredecimguttatus — Mediterrâneo até a Índia e África, Abissínia e

Arábia, L. m. cinctus da Abissínia, África Oriental e principalmente do Sul,

L. m. menavodi de Madagascar, /,. m. hasselti da Austrália, Nova Zelândia

ate a índia.

Da família LYCOSIDAE. de caráter tropical, subtropical e com invasão ativa

das zonas temperadas de todos os continentes, conhecem-se algumas espécies tro¬

picais e subtropicais mais ou menos perigosas, pertencentes ao gênero Lycosa.

L. erythrognutha é comum em todo o Brasil. A família CLUBIONIDAE inclui o gê-

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BIOLOGIA DE ARTRÓPODOS PEÇONHENTOS

aero Cheiracanthium, apontado também como tendo espécies venenosas. CTENIDAE

inclui o famoso gênero Phoneutria, com as espécies brasileiras mais conhecidas,

Phoneutria fera e ocharacea. ARANEIDAE compreende apenas o gênero Maslo-

phora ou Glyptocranium, com a famosa "aranha-bolas" dos vales viníferos do Perú.

B. Biologia

1) Acasalamento — Sôbre o acasalamento de Trechona, Atrax e Harpactirella

nada se sabe, senão por analogia para com os representantes de THERAPHOSIDAE,

que foram minuciosamente estudados por Bücherl, em longos anos desde 1949 a

1962. O macho adulto constrói uma teia “espermática”, derrama sôbre ela o lí¬

quido fecundante e carrega seus dois bulbos copuladores; procura então ativamente

uma fêmea; executa certas manobras pré-nupciais; segura então a consorte pela

frente e transmite os espermatozóides às espermatecas da mesma, sendo muitas

vêzes morto pela fêmea imediatamente depois. Nas aranhas verdadeiras o papel

ativo também é executado pelo macho; mas, após o acasalamento o mesmo vai

livremente embora, sem ser molestado pela fêmea, que fica como que "desmaiada",

principalmente em Phoneutria e Lycosa. Os machos costumam construir novas

teias espermáticas, preencher novamente seus bulbos e fecundar outras fêmeas.

Merece menção a “Viúva Negra”, em que o macho é cêrca de 10 vêzes menor

que a fêmea; é, por esta tolerado na teia, recebe alimento da mesma e costuma

demorar-se mesmo sôbre o ventre da gigantesca consorte, perto da abertura ge¬

nital da mesma. O bulbo em L. m. mactans e em L. curacaviensis ostenta um

êmbolo muito longo, frágil e enrolado, correspondendo ao mesmo um canal efe-

rente das espermatecas da fêmea também longo, enrolado como uma serpentina.

Compreende-se assim que, em muitas fêmeas, têm-se encontrado restos do êmbolo

quebrado do macho, que ficam dentro dos canais das espermatecas. Após o aca¬

salamento, o macho, segundo nossas observações, não é morto pela companheira,

mas morre naturalmente, achando-se então o cadáver dependurado na teia, fato

este que, provàvelmente, deu origem à lenda do uxoricídio nas viúvas negras.

2) Crescimento e duração de vida — Em Loxosceles nascem cêrca de 50 a

70 indivíduos após uma postura. As ootecas são transparentes, porque construí¬

das no escuro. Os filhotes, após a segunda muda de pele, tomam vida indepen¬

dente, perto dos esconderijos das mães, chegando assim a formar verdadeiras

colônias. Após cêrca de um ano ficam adultos, procriam por seu turno e morrem

naturalmente entre um ano e meio a dois anos após o nascimento. Pouco foi

observado sôbre os Loxoscelídeos.

As “Viúvas Negras ” foram melhor estudadas, se bem que nada ainda se saiba

sôbre o desenvolvimento post-embrionário e embrionário. As fêmeas de L. mactans

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e L. curacaviensis e geometricus, observadas por diversos anos em nossos labora¬

tórios, costumam construir, em dias sucessivos, entre 3 e 5 ootecas, completamente

esféricas, com um diâmetro entre 7 a 11 mm, brancas nas duas primeiras espé¬

cies e com superfície lisa, amareladas ou cinzentas e com “espinhos” em geome¬

tricus. Nas três espécies são as primeiras ootecas construídas com grande esmero,

enquanto que as últimas são menos cuidadas, fôfas e não mais tão esféricas. Fato

êste que levou Abalos a descrever espécies novas para Santiago dei Estero. O que

está errado. Os filhotes de Latrodectus, após a segunda troca de pele, trepam so¬

bre arbustos, tecem uma teia fôfa e se deixam levar pelo vento, às vêzes centenas

de quilômetros, em procura de um novo habitat. Cêrca de um ano após o nas¬

cimento ficam adultos, acasalam e procriam, vivendo as mães ainda em média

cêrca de 4 a 5 meses nas condições naturais. Em laboratório podem ser conser¬

vadas mais de 3 anos, sem macho. Não procriam mais, mas vivem e se alimen¬

tam perfeitamente.

As espécies de Lycosa trocam entre 8 a 12 vêzes de pele durante a juventude;

acasalam cêrca de 12 a 14 meses após o nascimento; após um único acasalamento

as fêmeas constroem sucessivamente, isto é, após a dispersão dos filhotes da pos¬

tura anterior até quatro ootecas esféricas, com cêrca de 1.000, 800, 600 e 300

ovos e mais uma quinta ooteca, em que entre os ovos perfeitos são depositados

também oocitos e restos foliculares até ao esgotamento completo dos ovários. As

ootecas são esféricas e afixadas nas fiandeiras. Os filhotes usam o corpo da mãe

como primeiro “trampolim” para a liberdade. As mães costumam morrer após

a última postura, geralmente quando os filhotes ainda estão sôbre seu corpo. Em

cativeiro, entretanto, temos constatado que se pode prolongar a vida média das

fêmeas (de 18 meses geralmente) por mais de um ano ou mesmo mais. Quanto

ao desenvolvimento dos filhotes, pudemos constatar que irmãos, sob as mesmas

condições de ambiente, temperatura, umidade e alimentação — pesquisas feitas em

cêrca de 3.000 exemplares — são influenciados pela alimentação. Os “comilões

trocam de pele em intervalos mais curtos, crescem mais depressa e atingem a

maturidade em tempo mais curto, procriam e morrem mais cedo; os “retardatá¬

rios” trocam de pele em intervalos mais longos, crescem mais devagar e ficam

maduros mais tarde, vivendo, portanto, mais tempo. A diferença é significativa,

pois perfaz de 2 a 3 meses.

O comportamento de Phoneutria é paralelo ao de Lycosa , com a diferença

que Phoneutria leva cêrca de 3 anos a 3 anos e meio até ficar adulta e procriar.

As fêmeas também costumam construir 3 a 4 ootecas sucessivas, se esgotam nos

cuidados maternos e morrem após a última cria em seu quarto ano de vida.

Nos quatro grupos foi visto que o ambiente de laboratório é muito mais fa¬

vorável às aranhas do que a vida na natureza.

3) Hábitos de vida — Loxosceles é estritamente noturna; as Viúvas Negras.

Lycosa e Phoneutria são vespertinas ou noturnas. Loxosceles é séssil a vida tôda

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BIOLOGIA DE ARTRÓPOBOS PEÇONHENTOS

em sua teia do tipo "lençol”, construída no escuro, sob telhas, tijolos, madeira¬

mento. em buracos e nas casas, nos cantos escuros, sob móveis, quadros, armários,

etc.; Latrodectus também é séssil em sua teia, construída parcialmente em lugar

escuro e com fios de captura de cêrca de 1 metro de comprimento ao longo do

solo: Lycosa é vagabunda na juventude e durante as estações mais quentes, fica

séssil nos meses de frio e enquanto as fêmeas cuidam da prole. Constroem, então,

funis de tecido dentro do solo até 10 ou 30 cm de profundidade, onde fazem

câmaras de maternidade e de onde saem à noitinha para as caçadas. Phoneutria

é vagabunda na juventude e depois das posturas, ficando séssil apenas durante os

trabalhos de maternidade. Não constroem teias nunca. Caçam à noite. Lycosa

e Phoneutria podem penetrar em casas humanas ativamente, Loxosceles passivamente.

4) Aparelho de veneno — Há em tôdas as aranhas duas pinças de veneno,

que se movimentam verticalmente nas Caranguejeiras e horizontalmente nas ara¬

nhas verdadeiras. Os canais eferentes dos venenos percorrem as pinças e termi¬

nam num poro na parte lateral perto da ponta. As glândulas de veneno se situam

nas Caranguejeiras no próprio artículo basal das quelíceras, enquanto que nas

aranhas verdadeiras o canal eferenle percorre também o artículo basal das quelí¬

ceras, apresentando em Lycosa e em Phoneutria um alargamento vesicular, uma

espécie de ampola coletora de veneno no artículo basal, situando-se as glândulas

de veneno dentro do cefalotórax. As glândulas têm aspecto de um saco; são afi¬

nadas posteriormente nas caranguejeiras, mais cilíndricas nas verdadeiras. A mus¬

culatura flexora e extensora das quelíceras, enquanto se contrai ou se distende,

exerce simultâneamente pressão ou tração sôbre as glândulas, provocando a ex¬

pulsão rápida e violenta tanto do veneno, armazenado no lúmen glandular, como,

nas aranhas verdadeiras, do veneno retido na ampola coletora do canal eferente.

As glândulas de veneno em Loxosceles medem em média 1,7 por 0,3 mm dc

comprimento e largura, em Latrodectus 1,6 por 0,3, em Lycosa 4,9 por 1,0 e em

Phoneutria 8,2 por 2.5 mm respectivamente. As glândulas de veneno apresentam

externamente uma muscularis robusta, constituída de feixes estriados serpentini-

fcrmes, inseridos na própria glândula e muitas vêzes sobreposta em 2 ou até 3

camadas, uma circular, outra tangencial, a terceira longitudinal. A membrana

basal é delicada, revestindo internamente a camada muscular. O epitélio é sim¬

ples, apresentando nas caranguejeiras dois tipos de células: células cilíndricas altas,

em processo ativo de elaboração do veneno, e células cúbicas, coladas à membrana

basal, ao lado das células altas e que irão substituir as últimas, quando degene¬

rarem. Nas aranhas verdadeiras temos observado igualmente êstes dois tipos de

células. Porém, na região do colo da glândula, onde termina a muscularis, há

um terceiro tipo de células excretoras de veneno, cilíndricas também, mas de du¬

ração e funcionamento permanentes. São merócrinas, enquanto que as do pri¬

meiro tipo podem ser consideradas como apócrinas.

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31:85-94, 1964.

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5) Quantidade de veneno — As quantidades médias e máximas de veneno

sêco, obtido por choque elétrico e guardado em vácuo, por aranha, são as seguintes:

TABELA 1 — QUANTIDADE DE VENENO SÊCO

OBTIDO POR CHOQUE ELÉTRICO DE ARANHAS

Aranhas

Veneno

em mg

Média

Máxima

Loxosceles .

0,100

1,500

Latrodectus .

0,100

1,500

Lycosa .

1,000

2,050

Phoneutria .

0,850

8,000

Trechona .

1,400

3,600

Acanthoscurria .

2,400

8,900

Pamphobeteus .

2,200

3,400

Lasiodora .

2,400

3,600

TABELA 2 — TOXICIDADE DE VENENOS DE ARANHAS DMM

PARA CAMUNDONGOS DE 20 g POR VIA VENOSA E CUTÂNEA

Aranhas

DMM em mg

Via venosa

Via cutânea

Trechona venosa .

0,030

0,070

Grammostola mollicoma .

0,500

1,000

Eurypelma rubropilosum .

0,350

0,850

Eupalaestrus tenuitarsus .

0,950

2,100

Pamphobeteus roseus .

0,850

1,700

Pamphobeteus tetracanthus ....

0,600

1,400

Acanthoscurria sternalis .

0,300

0,620

Lasiodora klugi .

0,640

1,200

Loxosceles rufipes e rufescens . .

0,200

0,300

Latrodectus curaeaviensis .

0,170

0,240

Latrodectus m. mactans .

0,110

0,200

Lycosa erythrognatha .

0,080

1,250

Phoneutria fera .

0,007

0,013

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Mem. Inst. Butantan,

31 : 95 - 102 , 1964 .

WOLFGANG BÜCHERL, SYLVIA LUCAS e

VERA DESSIMONI

ARANHAS DA FAMÍLIA CTENIDAE, SLBFAMILIA CTENINAE

I. REDESCRIÇÃO DOS GÊNEROS CTENUS WALCKENAER 1805 E

PHONEUTRIA PERTY 2833 *

WOLFGANG BÜCHERL, SYLVIA LUCAS E VERA DESSIMONI

Secção de Artrópodos Peçonhentos, Instituto Butantan, São Paulo, Brasil

Introdução

As aranhas dos gêneros Ctenus e Phoneutria chamam a atenção por possuí¬

rem veneno bastante ativo mesmo sôbre mamíferos superiores e o homem e por

picarem. Ctenus foi descrito em 1805 por Walckenaer (1) e Phoneutria em 1833

por Perty (2). 0 mesmo Walckenaer, em 1837 (3), Keyserling, em 1891 (4),

Simon, em 1897 (5), F. Cambridge, em 1897 e 1902 (6 e 7), Strand, 1907 (8),

Vital Brasil e Jehan Vellard, em 1924 (9) e, nos últimos decênios, Petrunkevitch,

Comstock, Roewer, G. Schmidt e outros, não tendo visto diferenças genéricas em

representantes de ambos, aboliram o nome Phoneutria, deixando valer apenas o

gênero Ctenus. C. Koch (10), que manteve a validade dos dois gêneros em 1848,

ocupava uma posição totalmente isolada. Mello Leitão, de adepto do gênero único,

passou a readmitir em 1936 (11) o Phoneutria, no que foi seguido por Caporiaco

em 1948 (12). Büeherl, em 1953 (13 e 14) e em 1956 (15 e 16) pressupunha

os dois gêneros como válidos, mas nenhum dos três últimos autores insistia em

recaracterizar a ambos.

Por outro lado, são patentes as profundas diferenças biológicas, as dimensões,

a agressividade, a feitura das ootecas, a maneira como as fêmeas cuidam das

mesmas, o ciclo de vida, a maneira de capturarem a prêsa, a convivência no

mesmo biótopo sem acasalamento algum, não deixando dúvidas sôbre a coexis¬

tência dos dois gêneros. Sob estas premissas impõe-se a redescrição morfológica

comparada para estabelecer os caracteres diferenciais dêstes dois importantes

gêneros.

Material e métodos

Centenas de exemplares de várias espécies de Ctenus e Phoneutria, machos

e fêmeas e também jovens, procedentes de cêrca de 50 localidades brasileiras di-

* Trabalho realizado com auxílio do Fundo de Pesquisas do Instituto Butantan

(FPIB) e referido na XV-> Reunião Anual da SBPC, Ribeirão Prêto, 5-11 de julho

de 1964.

2 3

5 6

10 11 12 13 14 15

ARANHAS DA FAMÍLIA CTENIDAE, SUB-FAMÍLIA CTEN1NAE

íerentes, desde Amazonas e Pará até o Rio Grande do Sul, foram minuciosamente

estudados no tocante à posição dos olhos, à dentição do sulco ungueal, ao colorido,

à espinulação das pernas e dos palpos, às escópulas dos tarsos, à dentição das

garras das pernas, às relações de medidas das pernas e da patela e tíbia I e IV

em relação ao comprimento e à largura do cefalotórax e, principalmente, no to¬

cante à forma do epígino das fêmeas e o bulho copulador dos machos.

Redescrição de Ctenus e Phoneutria

1. Caracteres semelhantes aos dois gêneros

Ambos pertencem à família CTENIDAE, com oito olhos em três filas (dois na

primeira, quatro na segunda e dois na terceira fila), com apenas duas garras nos

tarsos das pernas, parcialmente escondidas por entre os tufos subungueais, com

uma fímbria de pêlos longos na face interna dos lobos maxilares, que se estende

também pelo ápice, com seis fiandeiras, sem cribelo nem calamistro.

Pertencem ainda à mesma subfamília Cteninae, com lábio mais longo que

largo, dilatado um pouco no meio e escavado na base, que é mais estreita, atin¬

gindo em comprimento cêrca de meia altura dos lobos maxilares, pernas com

cinco (raras vêzes com apenas quatro) pares de espinhos negros na face ventral

das tíbias I e II e três pares nas tíbias III e IV, sendo um par apical e podendo

existir alguns espinhos laterais.

Entre os diversos gêneros desta subfamília, os dois, ora em estudo, ainda

têm em comum: margem inferior das quelíceras com 5 dentes desiguais, isto é,

o 5.° é quase obsoleto; a 2. a fila ocular apresenta-se procurva ou mesmo reta,

de maneira que uma reta, tangente à borda posterior dos médios, passa atrás dos

laterais ou é tangente também à sua borda posterior; o lábio atinge pelo menos

a metade do comprimento dos lobos maxilares; além dos cinco pares de espinhos

inferiores nas tíbias I e II — o par distai é menor — existem um ou dois espinhos

laterais nas faces anterior e posterior (as fêmeas têm menor número de espinhos

laterais do que os machos), o último artículo das fiandeiras superiores é mais

longo que o mesmo das fiandeiras inferiores; o perfil cefalotorácico atinge sua

maior elevação na região do sulco torácico, decaindo levemente em direção aos

olhos ou ambos estão à mesma altura; na margem superior das quelíceras há três

dentes, o médio grande, os restantes menores; a espinulação dos palpos e das

pernas diverge entre os dois sexos, mas é pràticamente igual nos dois gêneros.

Pernas I e II: entre 8 a 12 espinhos dorso-laterais, sem ventrais no fêmur; na

patela, sem ou com um espinho, nas fêmeas geralmenle, ou mesmo com um espinho

em cada face lateral nos machos; tíbia com 5 pares ventrais (um par distai,

menor, incluído) e com zero a um ou dois nas faces anterior e posterior (fêmeas

muitas vêzes com zero em ambas ou em uma face) ; metatarso com três pares

SciELO

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Mem. Inst. Butantan,

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WOLFGANG BÜCHERL, SYLVIA LUCAS e

VERA DESSIMONI

de espinhos inferiores; tarsos sem espinhos. Pernas III e IV com cêrca de II

espinhos dorso-laterais; patela com um espinho nas faces anterior e posterior;

tíbia com três pares ventrais, 1 par anterior, 1 par posterior e 3 dorsais; meta-

tarso III e IV com numerosos espinhos em Phoneutria e em muitas espécies de

Ctenus; em outras espécies do último gênero existem curtos espinhos negros do

tipo de espículas; tarsos sem espinhos. Escópulas nas faces ventrais dos artículos

das pernas: completas, isto é, desde o ápice até a base, em todos os tarsos; com¬

pletas ainda nos metatarsos I e II nas fêmeas e machos de Phoneutria e nas

fêmeas de Ctenus; nos machos dêste gênero só na metade apical em muitas espé¬

cies; nos metatarsos III e IV escópulas nos dois terços apicais do artículo nas

fêmeas, decrescendo nos machos, isto é, mais ou menos na metade distai no III

e na metade apical ou menos no IV, principalmente em Phoneutria; nos machos

de Ctenus as escópulas são mais ralas, em algumas espécies mesmo ausentes no

IV metatarso. Nas fêmeas de Phoneutria há escópulas até os dois terços apicais

na tíbia I e até a metade apical na tíbia II, o que não ocorre nos machos nem

em Ctenus.

Relações de medidas das pernas (tôdas as medidas foram aferidas em 11

exemplares para

cada

gênero

e cada

sexo) :

Comprimento das pernas em

Patela

+ tíbia

Compr. e largura do

III

cefalotórax (cm)

a) Phoneutria'.

fêmeas 4,44

4,22

3,60

4,75

1,78

1,66

1,43:1,09

machos 6,05

5,46

4,41

6,11

2,23

2,02

1,37:1,05

b) Ctenus:

fêmeas 2,64

2,43

2,14

2,95

1,04

1,03

0,80:0,64

machos 3,39

3,12

2,69

3,63

1,31

1,19

0,86:0,67

2. Caracteres que separam os dois gêneros

a) Escápula veludosa de pêlos nos palpos (fig. 1) — Todos os represen¬

tantes de Phoneutria, machos, fêmeas e filhotes, apresentam invariavelmente uma

densa escópula veludosa, formada por longos pêlos sedosos enfileirados e dirigidos

no mesmo sentido, presente na face interna do fêmur, patela, da tíbia e do tarso

dos palpos. Esta escópula não existe em Ctenus, em que, na mesma face, há os

pêlos comuns, longos e curtos, que nunca formam escópula uniforme.

í, i SciELO

ARANHAS DA FAMÍLIA CTENIDAE, SUB-FAM1LIA CTENINAE

Fig. 2 •— Phoneutria — epigino.

Fig. 1

a) Ctenus — desenho esquemático do

palpo direito do macho. Vista la¬

teral interna.

b) Phoneutria — desenho esquemático

do palpo direito do macho. Vista

lateral interna.

Fig. 3 — Ctenus — epigino.

2 3

6 SCÍELO 10 2.1 12 13 14 15 16

Mem. Inst. Butantan,

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WOLFGANG BÜCHERL, SYLV1A LUCAS e

VERA DESSIMONI

a) Phoneutria — desenho esquemático da tíbia e tarso

do palpo direito do macho. Vista ventral.

b) Ctenus —- desenho esquemático da tíbia e tarso do

palpo direito do macho. Vista ventral.

SciELO

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100

ARANHAS DA FAMÍLIA CTENIDAE, SLB-FAM1LIA CTENINAE

b) Aspecto dos epígirws nas fêmeas (íigs. 2 e 3) — Dimensões do epígino

nos dois gêneros (medidas em 10 fêmeas) :

Comprimento na linha mediana, longitudinal

Largura na frente .

Largura atrás .

Ctenus

(mm)

Embora possam variar os valores absolutos de espécime a espécime,

nao varia

esta relação diferencial entre o comprimento e as respectivas larguras. Em Pho-

neutria o epígino é minto mais longo que largo, em Ctenus, pelo contrário, é tão

ou mais largo que longo. A comparação das figuras 2 e 3 mostra a diferença

profunda entre os epíginos dos dois gêneros, dispensando qualquer comentário.

c) Tíbia e bulbo copulador dos machos (fig. 4) -— Embora a correta apre¬

ciação das diferenças genéricas da tíbia e do bulbo copulador dos machos exija

uma certa experiência é, contudo, possível separarem-se as espécies dos dois gê¬

neros, quando se tomam os caracteres em conjunto: a apófise tibial dos machos

de Phoneutria é uma só, não ultrapassando a metade do comprimento da tíbia;

o alvéolo do tarso é elipsóide e o êmbolo, dirigido para a frente, termina em

ponta aguda, simples, perto da borda anterior do alvéolo. Em Ctenus, ao con¬

trário, a apófise tibial é geralmente dupla, com um ramo curto e o outro longo

e sinuoso, quase tão longo quanto é o comprimento da própria tíbia, ou então,

há uma apófise tripla, sendo o terceiro ramo quase obsoleto. Nas poucas espécies

em que a apófise é única, ela é longa e sinuosa. Quando fôr mais ou menos

igual à de Phoneutria, tem implantação diferente na tíbia, o que lhe dá uma

posição diversa. O êmbolo em Ctenus tem, perto da ponta, uma ou duas apófises

laterais, pequenas e a própria ponta é curta e recurva, chegando a terminar longe

da borda anterior do alvéolo bulbar. Ademais, apresenta-se a borda superior do

alvéolo e do bulbo de Phoneutria coberta pela escópula veludosa já descrita, o

que nunca se verifica em Ctenus.

Discussão

Quando Walckenaer descreveu pela primeira vez o gênero Ctenus, referiu-se

apenas aos olhos, ao lábio e ao comprimento dos três primeiros pares de pernas.

Perty, autor do gênero Phoneutria, desconhecia a publicação de Walckenaer, pois

comparou seu gênero com Lycosa e não com Ctenus, com cuja descrição coincide

a sua, com exceção dos olhos laterais da segunda fila. É lógico, pois, que Wal¬

ckenaer, quando voltou ao assunto em 1837, e não tendo visto os espécimes de

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Mem. Inst. Butantan,

31:95-102, 1964.

WOLFGANG BÜCHERL, SVLVIA LUCAS e

VERA DESSIMONI

101

Perty, os tivesse colocado sob seu gênero Ctei

Especial destaque merece Koch

que, em 1848, conhecendo tanto os trabalhos de um como do outro autor, insistiu

no valor genérico de PhoneiUria, descrevendo uma espécie nova, Ph. ochracea.

A plêiade dos autores posteriores, não dando importância ou não sabendo inter¬

pretar o valor sistemático dos epíginos e dos bulbos copuladores e não tendo des¬

coberto a escópula na face interna dos artículos dos palpos em Phoneutria, de

fato, não podia distinguir ou separar os dois gêneros, pois, abstraindo-se dêstes

três fatos, nada há que realmente os separe. Os fatos biológicos separam pro¬

fundamente os dois gêneros. Milhares de espécimes do gênero Phoneutria foram

observados em laboratório e na natureza. Confusão com Ctenus não é possível.

Também a forma externa de Phoneutria não admite dúvida. É, em geral, duas

vêzes maior que Ctenus, suas pernas são duas vêzes mais longas; a implantação

dos espinhos negros em manchas brancas, nas fêmeas, é inconfundível, pelo menos

na espécie mais freqüente; sua agressividade de “armar o bote” quando se sente

melindrada e finalmente a imponente ação de seu veneno e sua ooteca inteiramente

branca e achatada como “dois pratos de sopa sobrepostos” não nos permitem

duvidar de que Phoneutria é gênero bom e válido, confirmado agora por três ca¬

racteres básicos, objetivos, morfológicos.

Resumo

No presente trabalho são redescritas as diferenças entre os gêneros Ctenus e

Phoneutria, ressaltando-se que Phoneutria é gênero bom e independente, embora apa¬

rentado com Ctenus. As escópulas na face interna dos artículos dos palpos, os

epíginos nas fêmeas e o conjunto das apófises tibiais e dos bulbos nos machos,

separam nitidamente os dois gêneros.

SUMMARY

Both genera, Ctenus and Phoneutria, are redescribed. The presence of scopula

on the inner face of the articles of the palpus in Phoneutria . the differences in

epigyna and the male palpai organ as well as the tibial spurs on the males, are

justifying the coexistence of both genera. The opinions of older

íthors

discussed.

ZUSAMMENFASSUNG

An Hand von vielen hunderten von Exemplaren aus ganz Brasilien, werden

in dieser Arbeit die charakteristischen Gattungsmerkmale von Ctenus und Phoneu¬

tria neu beschrieben, besonders um Phoneutria, zu dem die giftigsten Spinnen

Südamerikas und der Welt gehôren, wiederum definitif in die Systematik einzu-

fiihren.

SciELO

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102

ARANHAS DA FAMJLIA CTENIDAE, SUB-FAM1LIA CTENJNAE

Phoneutria unterscheidet sich von Cíenus durch folgende drei, grundlegende

Merkmale:

a) Das Vorhandensein an der Innenseite der Palpen einer samtigen Haarbe-

polsterung am Femur, Patella, Tibia und Tarsus;

b) Die Epigyne ist lang und vorne schmal und wird nur hinten lireiter,

wãhrend bei Ctenus dieselbe breiter ais lang ist und besonders vorne sehr breit

ist (siehe Figuren 2 und 3) ;

c) , Die Mánnehen von Phoneutria haben nur einen Tibialsporn an der Tibia

der Palpen; Ctenus hat manchmal drei, meistens zwei, nur sehr selten einen Tibial¬

sporn. Im letzten Falle ist dieser sehr lang, fast so lang wie die Tibia oder nur

wenig kiirzer. Der Embolus der Kopulationsbulben ist bei Phoneutria in der

Ruhestellung naeh vorne gewandt, hat eine einfache konische Spitze, die nahe am

Alveolus endet; bei Ctenus zeigt die Embolusspitze eine oder zwei Seitenapophysen,

die Spitze selber ist mehr nach innen gekrümmt und endet weit vom Alveolusrande.

Recebido para publicação em 28/7/1964.

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Mem. Inst. Butantan,

31:103-110, 1964.

T. M. C. M. CAVENAGHI and G. ROSENFELD

103

PRESERVATION OF BONE MARROW CELLS OF DOC WITH HEPARIN

AND EDTA *

T. M. C. M. CAVENAGHI ** and G. ROSENFELD

Laboratory of Hematology, Instituto Butantan, São Paulo, Brasil

The extension of the experimental works on blood and hone marrow cell

cultures in genetics, as well as in transplantation of the hone marrow has pointed

out the problem of a hetter study about an eventual activity of anticoagulants on

lhe viability of cells. Goerner (3) had reported that in the presence of 1% hepa-

rin, cells of carcinoma of Flexner-Jobling became not transplantable. Fisher(2)

observed that even 0.05% heparin prevented the cellular division of fihrohlasts

and condrioblasts of chicken embryo, and according to Heilbrunn and Wilson (4)

this same eoncentration inhibited the mitosis of eggs of Arbacis and Chaetopterus.

!h vivo, heparin was found hy Lippman (7) to produce mitotic inhibition of cells

of Ehrlich"s ascitic tumor. In experiments with human bone marrow, Kurnick,

Montano, Gerdes and Feder (6) verified that 5 unit concentrations, corresponHing

to 0.5 mg per ml of human hone marrow did not damage the cells, but this effect

was produced hy increased concentrations. Kreisler (5) reported that in trans¬

plantation of lymphosarcoma to mice, intravenous injections of heparin up to 15

units in intervals of 12 hours did not show any disadvantage, but this criterion

can not be applied in confront to lhe others above mentioned.

On the other hand, some experiments with EDTA were also published, as

those of McDonald and Kaufmann (9) in which ethylene-diamine tetracetate

(EDTA) at the eoncentration levei of 0.0004 to 0.002 M were found to cause

mitotic changes in cells of the onion root. This fact was also observed hy

Davidson (1).

Soon after the experiments reported in this paper had been finished, Lochte,

Ferrebee and Thomas (8) published results obtained through a comparative study

between the action of heparin and EDTA on the DNA synthesis “in vitro” hy

hone marrow cells. They observed that concentrations of 0.025 to 1.0 mg of he-

parin/ml did not have an inhibiting activity, while 0.5 mg of EDTA/ml depressed

* This work was supported by a grant of the Research Fund of the Instituto

Butantan (FPIB).

** Fellow of the National Council of Research (CNPq).

Received for publication in March, 7, 1963.

SciELO

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104

PRESERVATION OF BONE MARROW CELLS OF DOG VVITH

HEPARIN AND EDTA

the DNA synthesis after 4 hours of incubation, but this did not occur before ?>

hours. r I'hey also observed that the phenol sometimes added to heparin had an

inhibitory effect when in quantities above 0.01 g%.

The purpose of this work was to compare heparin and EDTA as to their

ability to preserve bone marrow cells when used as anticoagulants. This was

accomplished througli the number of cells found on several days to verify theii

resistance of survival.

Material and methods

Normal dogs were anesthetized with intra-peritoneal injections of 15 mg nem-

bufai and 10 mg morphine chlorhydrate per kg of body weight. Aspiration of

0.5 ml bone marrow was made from different ribs using needles with a lumen

of 10/10 mm and syringes already containing the anticoagulant. Glassware was

coated with silicone.

Commercial heparin for therapeutical use was employed in 1% Solutions

containing 0.18% of rnethyl p-hydroxybenzoate and 0.02% of propyl p-hydroxy-

benzoate. Jt was observed that 0.1 ml was the minimum volume required to

moisten the foremost part of a 20 ml syringe, this procedure was carricd oul

because it is the most frequently used. As a consequence, the heparin quantity

used was 2 mg per ml of marrow. As for EDTA, 0.05 ml of a 10% solution

of the disodic salt was used in the syringe, in the same way, corresponding to

10 mg EDTA concentration per ml of marrow.

The resulting suspension of aspirated marrow containing either heparin or

EDTA was distributed in two flasks, one being stored at +5°C and lhe olher at

—15°C. The cells were counted in a counting chamber and before drawing the

marrow from lhe flasks, they were throughly shaken for 1 minute. The cell

countings were carricd out immediately after obtaining the marrow suspensions

and at intervals of 24 hours for three days. Thereafter, flasks kept at — lõ^C

were defrosted at room temperature every day for the three days.

For observations of the red blood cells, six dogs were used and the same

number for the nucleated cells maintained at +5°C. Eour dogs were utilized for

counting of these cells in the bone marrow preserved at — 15°C.

Results

Bone marrow with heparin maintained at +5°C had a slightly increased

number of nucleated cells after 24 hours, afterwards it decreased and finally. on

the third day. it was very liltle below the initial number, but these modifications

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T. M. C. M. CAVENAGHI and G. ROSENFELD

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TABLE 1 — NUMBER OF NUCLEATED CELLS X Iff/mm 1 IN BONE MARROW

MAINTAINED AT +5°C

Heparin 2

mg/ml

EDTA 5

mg/ml

Dog number

Days at + 5°C

Dog number

Days at +15°C

1044

1262

958

1024

672

641

804

741

319

301

284

309

572

545

658

532

928

1034

956

889

854

1029

1074

939

1029

968

1088

984

827

878

1087

936

1247

1312

1320

1169

16C0

1909

1797

1626

628

638

534

722

633

552

633

Mean

866

919

874

818

Mean

874

939

995

901

TABLE 2 — NUMBER OF NUCLEATED CELLS X lOVmm 3 IN BONE MARROW

MAINTAINED AT —15°C

Heparin 2

mg/ml

EDTA 5

mg/ml

' Dog number

Days at

— 15°C

Dog number

Days at

—15°C

382

490

224

201

310

231

195

159

674

687

502

287

800

1114

8S9

506

567

114

519

490

555

401

465

353

165

123

680

534

461

520

Mean

522

411

235

164

Mean

577

592

525

396

SciELO

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NU C L CATE D CELLS X AO^/ynnx^

Graph 1 — Number of nucleated cells on bone marrow maintained at +5°C (mean

numbers of 6 dogs) and — 15°C (mean numbers of 4 dogs).

Curve

1 — EDTA +5°C

2 — Heparin + 5°C

3 — EDTA — 15°C

4 — Heparin — 15°C

ERyTHROCVTES a A(f

1 _

DAyS

Graph 2 — Number of red blood cells in bone marrow maintained at +5°C and — 15°C.

Mean numbers of 6 dogs each.

Curve

1 — EDTA +5»C

2 — Heparin + 5°C

3 — EDTA — 15°C

4 — Heparin — 13°C

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31 : 103 - 110 , 1964 .

T. M. C. M. CAVENAGHI and G. ROSENFELD

107

were found not to be significant (Table 1, graph 1, curve 2). With EDTA, the

increase of nucleated cells went forward until 48 bours and then decrease took

place on the third day, when the same quantity of cells was recorded as in the

beginning (Table 1, graph 1, curve 1), hut the changes observed were found

to be statistically non-significant.

Bone marrow kept at —15°C had a statistically significant decrease of nu¬

cleated cells, when mixed with heparin (Table 2, graph 1, curve 1), while the

changes observed with EDTA were found to be statistically non-significant until

the third day (Table 2, graph 1, curve 3).

As to the erythrocytes, their behavior was identical in regard to both anti-

coagulants. In the sample kept at +5°C, the number of cells diminished very

little (Graph 2, curves 1 and 2), while in the frozen marrow there was a very

marked decrease (Graph 2, curves 3 and 4).

DiscussioiV

According to Rosenfeld (10) 1 mg/ml is the best concentration for EDTA

to be used as anticoagulant when it is also able to preserve cells, as well as or

better than heparin, and if heparin is used, the best concentration is 0.1 mg

per ml of blood. In the experiments reported in this paper, greater quantities

were used in order to maintain the commonly used conditions for preparing bone-

marrow suspensions, such as syringe moistening with sterile Solutions of anticoa-

gulants, and also to give a better evidence on the unfavourable activity of these

substances on cells.

As to the erythrocytes preservation, no difference between the tvvo anticoa-

gulants was observed. The rapid decrease of cell number in the frozen sample

was obviously due to the successive thawing and freezing of samples. But in

what nucleated cells are concerned, EDTA showed advantages in relation to hepa¬

rin, not only because the increase of these cells went on for more time, indicating

a smaller inhibition on their multiplication, but also because of a better protection

in a period of three days.

It seems that EDTA can be used with advantages for replacing heparin as

an anticoagulant, when bone-marrow may not be immediately used for ]>urpose

of cells culture or transplantation. The one thing necessary is to use measured

quantities of any anticoagulant and not the syringe moistening, as it is usual, in

order to avoid variations or excess of substances that could disturb preservation

and viabilitv of cells.

SciELO

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108

PRESERVATION OF BONE MARROW CELLS OF DOG WITH

HEPARIN AND EDTA

SUHMARY

Dog bone marrow obtained by rib puncture was added to heparin in propor-

iion of 2 mg/ml or to EDTA, 10 mg/nil. Tbe samples were kept at +5°C or

— 15"C and the cell countings were made in 24 hours intervals np to the third day.

In marrow kept at +5°C, tbe number of nucleated cells seemed to increase

slightly during the first day, decreasing afterwards in the course, on the last day,

to values not far from the initial ones when heparin was used. With EDTA, the

increase of cells continued up to 48 hours, descending on the third day to almosl

the sanie quántity, as that found in the beginning. In the frozen samples, there

was a gradual decrease of the number of cells with heparin, while with EDTA

there was still a slight addition in 24 hours and smaller decay on the third day,

than with heparin. For erythrocyte preservation, there was no difference between

heparin and EDTA.

The usual method of moistening the syringe with the anticoagulant result in

the use of excess of substance that can he prejudicial, it is necessary to measure

the volume of the anticoagulant solution.

Resumo

Medula óssea de cão obtida pela punção de costelas foi adicionada de hepa-

rina na proporção de 2 mg/ml ou de EDTA na proporção de 10 mg/ml. O ma¬

terial foi conservado em temperatura de +5°C ou — 15°C e contagens de glóbulos

foram feitas com intervalos de 24 horas até o terceiro dia.

Na medula conservada a +5°C, o número de células nucleadas aumentou li¬

geiramente no primeiro dia, descendo depois no último dia para valor próximo

do inicial quando se usou heparina. Com o EDTA. o aumento das células con¬

tinuou até 48 horas depois, descendo no terceiro dia para uma quantidade quase

igual à inicial. No material congelado houve queda gradual do número de células

com heparina, enquanto que, com o EDTA ainda houve ligeiro acréscimo nas 24

horas e queda menor do que com a heparina no terceiro dia. Para preservação

de hemácias não houve diferença entre a heparina e o EDTA.

O EDTA apresentou algumas vantagens sôbre a heparina, permitindo uma

melhor multiplicação das células e, preservando-as melhor quando congeladas.

O método usual de umedecer a seringa com o anticoagulante resulta do uso

de quantidades excessivas que podem prejudicar, é necessário medir o volume da

solução anticoagulante.

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Mem. Inst. Butantan,

31 : 103 - 110 , 1964 .

T. M. C. M. CAVENAGHI and G. ROSENFELD

109

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Mem. Inst. Butantan,

31:111-114, 1964.

FLAVIO DA FONSECA

111

ATRICHOLAELAPS (. ISCHNOLAELAPS) MARIOI, sp. n.

FLAVIO DA FONSECA (t)»

Secção de Parasitologia, Instituto Butantan, São Paulo, Brasil

Em trabalho anterior tivemos oportunidade de apresentar o nosso ponto de

vista a propósito dos gêneros Haemolaelaps Berlese, Atricholaelaps Ewing e Ischno-

laelaps Fonseca, tendo opinado pela validade de todos, o primeiro como gênero

monotípico e o último como subgênero do segundo.

Nesta oportunidade descrevemos um novo Ischnolaelaps, que segundo tôdas as

probabilidades é parasita habitual de marsupial, o que é raro entre os Mesostigmata

neotrópicos, somente encontrado similar no Neoichoranyssus wernecki Fonseca, pa¬

rasita dos Didelphys. Talvez na Austrália, pátria dos marsupiais e de onde foi

descrito o Haemolaelaps marsupialis Berlese, 1910, achado sôbre um Pasameles

e agora encontrado por Womersley sôbre pássaro, se venha a verificar parasitismo

em outros dêsses primitivos mamíferos, que por ora foram mal estudados sob o

ponto de vista acarológico.

Dentre as espécies congenéricas e de gêneros afins, esta é facilmente caracte-

rizável pela particularidade de apresentar os pêlos do escudo dorsal de dimensões

exíguas.

Encontrada duas vêzes apenas, em ambas sôbre um pequeno didelfídeo car¬

nívoro, uma “Cuíca”, provàvelmente o seu hospedeiro natural. Êstes pequenos

predadores se mostram frequentemente infestados pelo Acari das suas vítimas oca¬

sionais, que comumente são ratos; no caso vertente, porém, o parasitismo do roedor

é menos provável, pois não só a espécie nunca foi encontrada sôbre animal dêsse

grupo, como também em ambas as capturas se achava parasitando “Cuícas ' pro¬

vàvelmente de localidades separadas por milhares de quilômetros. Além disso, a

espécie difere muito dos parasitos de roedores devido ao tarso I curto e às cerdas

minúsculas do escudo dorsal, fazendo crer tratar-se de espécie adaptada a mar¬

supiais.

Descrição da fêmea

É de dimensões médias, regularmente quitinizada e de patas finas, somente

o segundo par ligeiramente alongado.

* Publicação póstuma, não revista pelo autor.

Recebido para publicação em julho de 1963.

1 ^

SciELO

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112

A TlilCHOLA BLAPS ( 1SCHNOLAELAPS ) MARIOI, sp. n.

I d i O .

0 holótipo tem idiossoma quase perfeitamente elítico, medindo 884 micra de

comprimento por 625 micra de maior largura, sendo a extremidade perfeitamente

arredondada, sem a projeção habitual.

Face ventral — O bordo anterior da placa esternal é indistinguível da pré-

esternal que se lhe segue e que atinge a base, do tritoesterno, sendo deduzida a

sua posição pela das cerdas anteriores da placa. () bordo posterior da esternal

não apresenta concavidade, tendo limites pouco nítidos; a superfície é reticulada

e os pori repugnatori são muito finos. Cerdas anteriores com 62 micra, cerdas

médias com 78 micra e cerdas posteriores com 83 micra. A placa mede 156 micra

de comprimento na linha média e 161 micra de maior largura à frente das cerdas

médias. O tritoesterno é piloso desde a bifurcação. As cerdas metaesternais têm

50 micra. A placa genital mede 202 micra da base da cerda genital ao meio

do bordo posterior e 156 micra de maior largura, tendo a cerda genital 77 micra.

A placa anal dista 41 micra do bordo posterior da gênito-ventral, tendo um bordo

anterior quase reto e o ânus afastado dêsse bordo por uma distância igual ao

seu comprimento, apesar dêle ser alongado com 37 micra. As cerdas pares da

anal ficam implantadas pouco para trás do nível do meio do ânus e medem 47

micra. A cerda ímpar mede 72 micra. Cêrca de seis cerdas internas e seis pró¬

ximas dos bordos, além dos três pares habituais próximos da placa genital, ocorrem

na área descoberta da face ventral, sendo as anteriores bem mais curtas do que

é habitual.

Face dorsal — O escudo dorsal, com 858 micra X 550 micra, apenas deixa

descoberta estreita margem lateral e a área posterior um pouco mais larga. A

superfície não apresenta auréolas. Das cerdas somente as verticais anteriores e a

submediana marginal posterior são normalmente longas, tendo tôdas as outras di¬

mensões exíguas. A última mede 68 micra e a primeira 42 micra. A maior

cerda depois destas é a que se segue à submediana marginal posterior, na margem

do escudo, a qual tem 21 micra. As menores cerdas vistas no escudo tinham

cêrca de 10 micra. Duas marcas circulares arredondadas estão localizadas na

união do têrço posterior com os dois têrços anteriores do escudo.

F atas

As patas são finas, somente a pata II sendo ligeiramente alargada. As cerdas

das coxas são finas como nas restantes espécies do gênero. Na quetotaxia das

patas, apenas chama a atenção o aspecto da cerda anterior dos trocanteres, que

é espiniforme forte no trocanter I, chegando a parecer verdadeiro espinho nos

restantes. O tarso I, com seu pretarso, mede 156 micra e o da pata IV mede-

182 micra.

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Mem. Inst. Butantan, FL.AVIO DA FONSECA lli

31:111-114, 1964.

Fig. 1 — Atriocholaelaps ( Ischnolaelaps ) marioi, sp. n. Face dorsal.

Fig. 2 —• Atriocholaelaps ( Ischnolaelaps ) marioi, sp. n.

Face ventral.

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114

ATRICH OLAELAPS ( ISCHNOLAELAPS ) MARIOJ, sp. n.

Gnatossoma

Maxilicoxas relativamente curtas com a cerda média interna mais longa e

corniculi pouco quitinizado. Mandíbulas normais com pilus dentilis estreito no

ponto de emergência e logo depois muito dilatado, encurvando-se e afilando-se

no ápice.

Holótipo N.° 2039, proveniente de Biriguí, São Paulo, capturado em 20/1V/

1953 sóbre um didelfídeo, “Cuíca”, N.° 6397 do registro de hospedeiros do Ins¬

tituto Butantan.

Metátipo N.° 4786, capturado também sôbre um didelfídeo, “Cuíca”, prova¬

velmente do Estado do Pará, onde foi capturado a 15/IX/1936, tendo sido trazido

pelo Dr. Evandro Chagas, que o entregou ao Dr. H. Aragão, pelo qual foi ofere¬

cido ao autor a 29/IV/1950.

A espécie é dedicada ao meu Auxiliar Técnico e amigo Mário Valentini No¬

gueira, o qual, com desvelo e competência, vem trabalhando desde muitos anos

na montagem de material e na organização da coleção de acarianos.

Resumo

Atricholariups (Ischnolaelaps) marioi, sp. n., foi encontrada duas vêzes em

pequenos marsupiais não identificados, “Cuícas”, de Biriguí, São Paulo e prova¬

velmente do Estado do Pará, respectivamente. A espécie é reconhecida facilmente

pelos pêlos curtos do escudo dorsal e pelo tarso I mais curto de 156 micra. Ho¬

lótipo N.° 2039 de Biriguí.

SUMMARY

Atricholaelaps ( Ischnolaelaps ) marioi, sp. n., was found twice on small, un-

identified marsupiais, “Cuícas”, respectively from Biriguí, São Paulo, and probably

from the State of Pará, Brazil. The species is easily recognized by the very short

hairs of the dorsal shield and by the shortened tarsus, 156 micra long. Holotype

No. 2039 from Biriguí.

Bibliografia

1. Fonseca, F. da — Notes d'Acarologie. XLI. Haemolaelaps Berlese versus Atri-

cholaelays Ewing et Ischnolaelaps Fonseca; Órnithonyssus Sambon versus

Bdellonyssus Fonseca. Mem. Inst. Butantan, 28:45-54, 1957/1958.

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Mem. Inst. Butantan,

31:115-126, 1964.

SYLVIA LUCAS

115

ESTUDOS SÔBRE ARANHAS DA FAMÍLIA LYCOS1DAE

2. SÔBRE O COLORIDO DE ALGUMAS ESPÉCIES DA SUB-FAMÍLIA

LYCOSINAE

SYLVIA LUCAS

Secção de Artrópodos Peçonhentos, Instituto Butantan, São Paulo, Brasil

Introdução

As descrições de várias espécies antigas baseiam-se, geralmenle, em apenas

um único exemplar adulto, um macho ou uma fêmea, quando não se trata de

exemplares jovens. Dêste modo não puderam ser levadas em conta as variações

individuais, nem as variações devidas à idade e ao sexo. Pela conservação em

álcool os exemplares sofrem descoloração mais ou menos intensa, apresentando um

aspecto, muitas vêzes, bastante diferente daquele da aranha viva. Êstes fatores

contribuem para que as descrições originais nem sempre correspondam exatamente

ao exemplar em estudo.

Procuramos, neste trabalho, comparar as descrições originais com exemplares

vivos e também com aranhas conservadas da coleção do Instituto Butantan, a fim

de observar as variações surgidas. Não nos preocupamos com a sistemática das

espécies estudadas e assim conservamos seus nomes antigos.

Material e métodos

As espécies estudadas foram as seguintes:

1 — Lycosa erythrognatha Lucas 1816

2 — Tarentula nychtemera Bertkau 1880

3 — Tarentula auroguttata Keyserling 1891

4 -— Lycosa nordenskiõldii Tullgren 1905

5 — Tarentula sternalis Bertkau 1880

6 — Tarentula ornata Perty 1833

Recebido para publicação em 24/7/1962.

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116

ESTUDOS SÕBRE ARANHAS DA B'AM1LIA LYCOSIDAE

Observamos sempre que possível machos e fêmeas, além de exemplares jovens,

sob a lupa, a sêco e imersas em álcool.

São mantidas vivas no laboratório:

Lycosa erythrognatha — diversos exemplares, tanto machos como fêmeas.

Tarentula sternalis — um macho adulto.

Tarentula auroguttata — uma fêmea adulta.

Descrição do colorido

Lycosa erythrognatha Lucas 1836 (Fig. l-a-7)

Os exemplares da coleção procedem de São Paulo (tanto da capital como

do interior) ; Rio Grande do Sul (Santa Cruz e Pôrto Alegre) ; Paraná (Curitiba

e Barigui) e do Rio de Janeiro.

0 colorido e o desenho de Lycosa erythrognatha não diferem da descrição

original de Lucas (2), que teve à sua disposição tanto machos como fêmeas adul¬

tos. Infelizmente, Lucas (2) não mostra na sua descrição um desenho do epígino.

mas assim mesmo não há dúvida quanto ao reconhecimento da espécie.

Lucas (2) não descreveu o colorido do dorso do abdômen em detalhe. Pelo

desenho que acompanha a descrição original, o dorso do abdômen do macho

apresenta uma faixa em forma de ponta de lança no têrço anterior e, de cada

lado, basalmente, uma grande mancha escura. Quanto às fêmeas nada pôde afir¬

mar com certeza, por não possuir exemplares cujo abdômen estivesse em bom es¬

tado de conservação.

Nos exemplares que tivemos à disposição observamos:

O dorso do abdômen é amarelo-cinzento escuro com uma faixa lanceolada

no têrço basal. Contornando esta, há de cada lado, uma faixa formada por pêlos

claros, muito larga nos machos e atingindo a região posterior do abdômen (Fig.

1-d) e mais estreita nas fêmeas e geralmente restringindo-se apenas ao têrço an¬

terior (Fig. l/j). Nos machos, os pêlos que formam essas faixas claras são quase

brancos e nas fêmeas amarelos mais escuros. Exlernamente, à “ponta de lança”

há as duas manchas negras também observadas por Lucas. Após o desenho do

têrço anterior há um triângulo denegrido cujos vértices posteriores abrem-se em

arco, seguido de 4 ou 5 linhas transversais negras.

Pela conservação em álcool, as aranhas sofrem descoloração. O cefalotórax,

apesar de ainda mostrar as faixas claras contrastando com a côr de fundo, mais

escura, torna-se bem mais claro, marrom avermelhado e os pêlos brancos que

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Mem. Inst. Butantan,

31:115-126, 1964.

SYLVIA LUCAS

117

formavam as linhas radiantes, tendem a cair. Em aranhas vivas observa-se um

contraste em relação às estrias radiantes, que são mais claras e bem mais nítidas

nos machos (Fig. 1-a, 1-e).

0 ventre é superficialmente negro, o que concorda com a descrição de Lucas,

mas pela observação mais detalhada descobrem-se quatro fileiras longitudinais de

minúsculos pontos claros (Fig. 1-e). Êstes constituem pigmentação da própria

epiderme.

Tarentula nychtemera Bertkau 1880 (Fig. 2-a-d)

Tivemos à disposição apenas dois exemplares capturados nos arredores do

Instituto Butantan. Trata-se de duas fêmeas, sendo uma adulta e outra com epí-

gino em desenvolvimento.

Foram colocadas sob êste nome devido ao colorido e principalmente devido

ao aspecto do epígino, que concorda exatamente com o desenho feito por Bertkau.

0 colorido do ventre (Fig. 2 -b), cefalotórax (Fig. 2-c) e esterno (Fig. 2 -d)

é idêntico ao da fêmea descrita por Bertkau (1), como tipo. Esta descrição,

porém, confunde-se com aquela de Lucas (2), feita para Lycosa erythrognatha.

Os dois exemplares da coleção distinguem-se, porém, perfeitamente de Lycosa ery¬

thrognatha através do colorido do dorso do abdômen. Êste é manchado de ama¬

relo e de escuro, apresentando o desenho normal em forma de ponta de lança,

seguido de duas fileiras de pontos brancos (Fig. 2 -a). Os flancos igualmente,

também são manchados. Em Lycosa erythrognatha, sem dúvida, há algumas man¬

chas negras, porém, muito menores e menos abundantes. Os flancos são pràtica-

mente de côr amarelo-cinzento uniforme, levemente alaranjados próximo às fian¬

deiras.

Lucas (2), ao descrever Lycosa erythrognatha, não cita manchas negras no

dorso e Bertkau não dá maiores detalhes sôbre elas. Distinguimos, portanto, essas

duas espécies pelo colorido do dorso do abdômen e pelo epígino. Comparar Figs.

1 e 11.

Tarentula auroguttata Keyserling 1891 (Fig. 3 -a-d)

As aranhas desta espécie existentes em nossa coleção procedem das seguintes

localidades: São Paulo (Butantan, Caucaia do Alto, etc.); Rio Grande do Sul

(Pôrto Alegre); Paraná (Palmeiras); Minas Gerais (Pedra Corrida).

O tipo descrito por Keyserling é uma fêmea jovem de Rio Grande, Rio

Grande do Sul, cujo colorido, porém, não difere dos exemplares adultos observa¬

dos. Esta espécie apresenta um colorido muito característico, que torna fácil seu

reconhecimento. A aranha é escura, quase negra. O cefalotórax, castanho escuro,

SciELO

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118

ESTUDOS SÔBRE ARANHAS DA FAMÍLIA LYCOSIDAE

apresenta nas margens laterais pêlos claros, amarelos, em cluas faixas estreitas, que

vão se alargando à medida que se aproxima da região posterior (Fig. 3-a).

Na fêmea mantida viva no laboratório, a faixa mediana de pêlos claros não

percorre o cefalotórax em lôda a sua extensão, mas restringe-se ao quadrângulo

formado pelos quatro olhos posteriores. As fêmeas conservadas em álcool apre¬

sentam-na por inteira. Quanto aos machos, não pudemos examinar nenhum vivo.

Todos os conservados apresentam no cefalotórax três faixas claras, largas. Um

macho, fixado logo após a ecdise, apresenta o cefalotórax bem mais claro que os

demais, com três faixas amarelas muito largas, ocupando quase tôda sua largura.

O esterno (Fig. 3 -b) e as coxas de todos os exemplares observados, apresen¬

tam a mesma coloração do cefalotórax, isto é, pràticamente negra. Pela conser¬

vação em álcool podem sofrer descoloração, ficando manchados de amarelo, sob

fundo marrom avermelhado. Estas modificações podem surgir após curto tempo

de conservação. As quelíceras e os palpos acham-se cobertos de pêlos averme¬

lhados; da mesma côr são os que contornam os olhos da primeira e da segunda

fileira. Devido à ação do álcool podem tornar-se de côr menos viva, ou seja,

amarelados. 0 abdômen (Fig. 3-c), tanto em machos como em fêmeas, apresenta

no dorso a faixa normal, em forma de ponta de lança, delimitada dos lados por

uma faixa irregular de pêlos amarelos. Nos machos, estas são bem mais nítidas

que nas fêmeas e mais largas. Seguem-se em ambos os sexos, linhas escuras em

arco, que terminam com uma mancha amarela de cada lado. Assim, à primeira,

vista, o dorso do abdômen é negro com pares de manchas amarelo-douradas per¬

correndo-o longitudinalmente. Ventre (Fig. 3 -d) e flancos, como os descreveu

Keyserling, são salpicados de pontos amarelo-dourados. Logo após o sulco epigás-

trico há duas fileiras de pontos amarelos grandes, que não atingem as fiandeiras.

Seguem-se dos lados outras fileiras formadas por pontos menores. Tôda a região

à frente do sulco epigástrico é castanho escura, sendo os pulmões mais claros.

Pela conservação em álcool o ventre pode tornar-se mais claro. Porém, o

seu desenho típico não desaparece. Sempre é possível reconhecer-se esta espécie

devido ao ventre pintado de manchas amarelo-ouro, que lhe deu o nome de Ta-

renlula auroguttata.

Lycosa nordenskióldii Tullgren 1905 (Fig. 4-o-/)

Tullgren baseou sua descrição em exemplares da Bolívia. Esta espécie é tam¬

bém relativamente frequente no Brasil e na coleção temos exemplares de São Paulo

(Itapetininga, Ubatuba, Barirí) ; Minas Gerais (Belo Horizonte). Nesta espécie

ocorre notável dimorfismo sexual. O colorido dos exemplares observados concorda

de modo geral com a descrição de Tullgren, apesar de havermos notado ligeiras

variações. O esterno (Fig. 4-a) nas fêmeas é castanho escuro, uniforme, coberto

de pêlos negros muito densos. Nos machos (Fig. 4 -b) é amarelo-claro, coberto

], | SciELO

Mem. Inst. Butantan,

31 : 115 - 126 , 1964 .

SYLVIA LUCAS

119

de ptlos negros escassos, que deixam transparecer o fundo claro. Pode apresentar

uma faixa negra, longitudinal mediana, como observou Tullgren, mas também há

machos cujo esterno é amarelo uniforme ou com apenas algumas manchas dene¬

gridas de distribuição irregular. As coxas, tanto nas fêmeas como nos machos, são

da mesma côr do esterno. 0 dorso do abdômen apresenta a faixa em forma de

ponta de lança, que pràticamente não se distingue do colorido geral. Seguem-se

linhas em arco, que terminam de cada lado em pontos brancos sob fundo escuro

I Fig. 4-c). O ventre apresenta nas fêmeas (Fig. 4 -d) uma grande mancha negra,

que não atinge as fiandeiras. Os flancos são amarelos. Ao redor da mancha

negra do ventre há também alguns pontos negros. Na frente do sulco cpigástrico

há pêlos negros pouco densos, que deixam transparecer um fundo claro.

Os machos (Fig. 4-e) também possuem uma mancha negra no ventre, porém,

esta pode ser extremamente reduzida, e às vêzes, apresenta-se sob forma de uma

faixa negra mediana. Os flancos são de côr amarela, mais pálida que nas fêmeas.

Não há as pontuações negras ao redor da mancha no ventre.

Nos exemplares conservados em álcool surgem algumas modificações. As fê¬

meas conservam a mancha negra no ventre, mas nos machos esta pode tornar-se

tão clara que chega pràticamente a desaparecer. No dorso, tanto nas fêmeas como

nos machos os pontos brancos desaparecem devido à queda dos pêlos e em seu

lugar surgem as manchas escuras do fundo.

Tarentula sternalis Bertkau 1880 (Fig. 5 -a-d)

Lycosa sericovittata Mello Leitão 1939 (3)

Os exemplares observados desta espécie são do Paraná (Barigui) e São Paulo

(diversas localidades, tratando-se de uma espécie relativamente comum). Além

disso, o tipo descrito por Mello Leitão como Lycosa sericovittata está guardado na

coleção do Instituto Butantan, procedente de Pedra Corrida, Minas Gerais.

Bertkau (4) descreve apenas uma única fêmea de São João d’El Rei ou de

Teresópolis.

Nos exemplares examinados, notamos algumas diferenças quanto ao colorido.

Assim Bertkau (4) descreve o esterno como sendo marrom-avermelhado es¬

curo com estreitas faixas marginais claras. A maioria dos exemplares, porém,

possui o esterno marrom-avermelhado, percorrido longitudinalmente por uma faixa

mediana marrom escura. Esta, de modo geral, ocupa cêrca de um têrço da lar¬

gura, mas há casos em que é tão larga que deixa livre apenas duas estreitas

margens claras (Fig. 5 -b). 0 ventre corresponde à descrição de Bertkau. Os

machos não mostram diferenças em relação às fêmeas. As duas linhas escuras,

medianas, também podem fundir-se numa única (Fig. 5 -d). O dorso apresenta

í, | SciELO

120

ESTUDOS SÔBRE ARANHAS DA FAMÍLIA LYCOSIDAE

uma larga faixa de pêlos claros que o percorre em lôda sua extensão. Dentro

desta faixa há o desenho em forma de ponta de lança, seguido de linhas em arco.

Devido aos pêlos claros êste desenho nem sempre é muito vísivel. Em geral, ob-

serva-se apenas uma mancha escura, que corresponde ao ápice da “ponta de lança’’

e duas manchas que correspondem à hase. Das linhas em arco pode ver-se, ge¬

ralmente, apenas a região central ou uma leve somhra. Quando as aranhas estão

conservadas há algum tempo, os pêlos claros caem parcialmente e o desenho surge

mais nítido. Também as manchas negras na hainha da faixa clara, descritas por

Bertkau (4), apresentam-se mais visíveis então (Fig. 5-e).

Esta espécie não apresenta, quanto ao colorido, acentuado dimorfismo sexual.

Apresenta semelhanças com Tarentula ornata Perty, porém, distingue-se pelo

colorido do cefalotórax e dorso do abdômen. Enquanto que em Tarentula ster-

nalis as faixas claras no cefalotórax são marginais (vide Fig. a), em Tarentula

ornata são submarginais. Comparar com as Figs. 5 e 6.

Tarentula ornata Perty 1833 (Fig. 6-a-d)

Na coleção temos exemplares do litoral de São Paulo (São Sebastião, Ilha

Bela), além de exemplares dos arredores do Butantan. A descrição de Perty é

muito resumida, causando dificuldades quanto ao reconhecimento da espécie. As

aranhas estudadas foram colocadas sob êste nome devido ao colorido, principal¬

mente do cefalotórax. () cefalotórax das fêmeas é castanho escuro, apresentando

três faixas claras, uma mediana e duas laterais submarginais (Fig. 6-a). O es¬

terno é amarelo-claro e apresenta uma faixa longitudinal, mediana, negra, mais

larga na frente e terminando em ponta atrás (Fig. 6 -b). As coxas são de côr

amarela como o esterno. Os demais artículos são manchados de amarelo e cas¬

tanho escuro. O dorso do abdômen apresenta a faixa lanceolada e, de cada lado,

uma faixa de pêlos amarelados, pouco visível. Seguem-se linhas em arco (Fig. 6-c).

O ventre é amarelado-marrom. Logo após o sulco epigástrico há duas linhas es¬

curas, levemente convergentes, que terminam à frente das fiandeiras. Podem

fundi r-se numa única faixa mediana. Contornando o ventre há uma faixa for¬

mada por pontos negros, irregulares. Os flancos são manchados.

Em fêmeas jovens o esterno e as coxas apresentam pontuações negras. Além

disso, há no esterno a faixa longitudinal, também negra. A faixa lanceolada do

abdômen não é inteiramente escura, mas apenas nos seus bordos. De cada lado

há uma faixa larga de pêlos amarelos. Estas tornam-se menos nítidas à medida

que se aproximam da região posterior. O ventre apresenta pontuações negras e

o contorno é formado por faixa idêntica à existente nos adultos. Quanto aos ma¬

chos, tivemos apenas exemplares jovens à disposição. Estes apresentam colorido

igual ao das fêmeas jovens.

SciELO

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Mem. Inst. Butantan, SYLVIA LUCAS

31:115-126, 1964.

121

Fig. 1 — Lycosa erythrognatha

cefalotórax da fêmea

dorso do abdômen

fêmea

cefalotórax do macho

dorso do abdômen

macho

ventre da fêmea

esterno da fêmea

Fig. 2 — Tarentula nychtetnera

a) dorso do abdômen da fêmea

b) ventre da fêmea

e) cefalotórax da fêmea

d) esterno da fêmea

Fig. 3 — Tarentula auroguttata

a) cefalotórax da fêmea

b) esterno da fêmea

c) dorso do abdômen da fêmea

d) ventre da fêmea

2 3 4

SciELO

10 11 12 13 14 15

Fig. 4 — Lycosa nordenskiõldii

a) esterno da fêmea

b) esterno do macho

c) dorso do abdômen da fémea

d) ventre da fêmea

e) ventre do macho

f) cefalotórax da fêmea

Fig. 5 — Tarentula sternalis

a) cefalotórax da fêmea

b) esterno da fêmea

c) dorso do abdômen da fêmea

d) ventre da fêmea

e) dorso do abdômen de fêmea após conservação em álcool

Fig. 6 — Tarentula ornata

a) cefalotórax da fêmea

b) esterno da fêmea

c) dorso do abdômen da fêmea

d) ventre da fêmea

Mem. Inst. Butantan,

SYLVIA LUCAS

123

31:115-126, 1964.

Pela conservação em álcool, as aranhas sofrem descoloração. () cefalotórax

torna-se de colorido geral marrom avermelhado claro, portanto, as faixas tornam-se

menos contrastantes. A faixa negra no esterno torna-se muito clara e quase que

desaparece totalmente. O dorso do abdômen torna-se de colorido uniforme e do

desenho somente resta a faixa lanceolada, principalmente o contorno e uma som¬

bra das linhas em arco. No ventre o desenho pode desaparecer totalmente.

Discussão

Lycosa erythrognatha e Tarentula nychtemera apresentam colorido muito se¬

melhante. Distinguem-se, porém, pelas fileiras de manchas brancas, grandes e ní¬

tidas em Tarentula nychtemera, e pelos flancos muito manchados. Em Lycosa

erythrognatha, os flancos são de côr pràticamente uniforme com algumas pequenas

pontuações negras, escassas.

Tarentula sternalis e Tarentula ornata também apresentam semelhanças, mas

distinguem-se muito bem pelo colorido do cefalotórax, que apresenta faixas margi¬

nais, claras em Tarentula sternalis e submarginais em Tarentula ornata.

Lycosa nordenskiõldii e Tarentula auroguttata distinguem-se já à primeira

vista das demais espécies.

Dentro de uma mesma espécie podem surgir pequenas variações individuais,

que porém, não causam dificuldades para o reconhecimento da espécie. As va¬

riações de colorido observadas dentro de um mesmo lote devem-se, sem dúvida,

ao fato da existência de aranhas de diversas idades.

Os exemplares jovens podem apresentar colorido um pouco diferente dos adul¬

tos; os machos podem apresentar colorido um pouco diferente das fêmeas. Ge¬

ralmente, os machos possuem colorido mais intenso e mais nítido do que as fêmeas.

0 colorido sempre deve ser observado quanto ao aspecto geral e as ligeiras

variações devem ser desprezadas.

Baseado no colorido, é possível estabelecer-se a seguinte chave sinóptica das

espécies:

Ventre: totalmente negro, inclusive as fiandeiras; ou com uma grande mancha

negra que não atinge as fiandeiras, ou com fileiras de pontos amarelo-ouro 2

Ventre; claro com linhas convergentes escuras

Ventre totalmente negro, com fileiras de minúsculas pontuações claras, esterno

negro, cefalotórax com faixa mediana e linhas radiantes claras, mais nítidas

nos machos . -

Ventre com mancha negra e com fileiras muito nítidas de manchas amarelo-ouro;

ou mancha negra reduzida à área central

2 3

5 6

10 11 12 13 14 15

124

ESTUDOS SÔBRE ARANHAS DA FAMÍLIA LYCOR1DAE

Dorso cio abdômen com a faixa lanceolada normal seguida de pares de manchas

brancas, paramedianas, dorso e flancos inteiramente manchados de amarelo

e negro . Tarentula nyctemera Bertkau

Dorso do abdômen sem estas faixas paramedianas, porém, com a faixa em forma

de ponta de lança, dorso e flancos de côr amarelo-cinzenta, uniforme.

. Lycosa erythrognatha Lucas

Ventre negro com duas fileiras longitudinais paramedianas e várias colaterais

de manchas amarelo-ouro, cefalotórax escuro, quase negro, marginado de cada

lado por uma orla de pêlos amarelos, esterno negro.

. Tarentula auroguttata Keyserling

Ventre com a mancha negra reduzida à área central e menor ainda nos machos,

flancos amarelo-claros, cefalotórax claro com linhas pontuadas escuras, dorso

do abdômen claro com o desenho em ponta de lança muito pouco visível, esterno

negro nas fêmeas e manchado de claro nos machos.

. Lycosa nordenskiõlãii Tullgren

Cefalotórax com duas faixas claras marginais, esterno marrom-avermelhado com

faixa longitudinal escura, dorso do abdômen com larga faixa de pêlos claros.

. Tarentula sternalis Bertkau

Cefalotórax com duas faixas claras submarginais, esterno amarelo com faixa

mediana, longitudinal escura, dorso do abdômen sem a faixa larga de pêlos

claros . Tarentula ornata Perty 1SS3

Agradecemos ao Fundo de Pesquisas do Instituto Butantan pelo auxílio finan¬

ceiro, ao Dr. Wolfgang Biicherl pela orientação para a realização dêste trabalho

e ao Sr. Laureano Dourado pelo auxílio tcénico.

Resumo

1) É descrito o colorido de seis espécies de aranhas, a saber:

Lycosa erythrognatha Lucas 1836

Tarentula nychtemera Bertkau 1880

Tarentula auroguttata Keyserling 1891

Lycosa nordenskiòldii Tullgren 1905

Tarentula sternalis Bertkau 1880

Tarentula ornata Perty 1833

2) Tarentula nychtemera e Lycosa erythrognatha são espécies semelhantes, mas

distinguem-se pelo colorido do dorso do abdômen. Também Tarentula ornula

e Tarentula sternalis apresentam semelhanças, mas distinguem-se hem pelo co¬

lorido do cefalotórax.

3) Baseada no colorido, é elaborada uma chave sinóptica das 5 espécies obser¬

vadas.

SciELO

10 11 12 13 14 15 16

SciELO ^

Mem. Inst. Butantan,

31:127-134, 1964.

SYLVIA LUCAS

127

SÔBRE A POSIÇÃO SISTEMÁTICA DE ALGUMAS ESPÉCIES DE ARANHAS

VERDADEIRAS DO GÊNERO CUPIENNIUS, SIMON 1891, DA EAMÍLIA

CTEN1DAE, EM RELAÇÃO AO GÊNERO ANCYLOMETES, BERTKAU 1880,

DA FAMÍLIA PISAURIDAE *

SYLVIA LUCAS

Secção de Artróvodos Peçonhentos, Instituto Butantan, São Paulo , Brasil

Introdução

O gênero Ancylometes, Bertkau 1880, incluído pelo autor entre a família

LYCOSIDAE, reune as espécies cuja fórmula ocular lembra as CTEN1DAE (2-4-2),

mas que apresentam uma terceira garra nos tarsos.

Bertkau (1) dá grande importância a esta terceira garra e afirma mesmo

que tôdas as CTENIDAE que a apresentam devem ser incluídas entre as LYCOSIDAE.

Porém o gênero Cupiennius, Simon 1891 com fórmula ocular 2-4-2 também

apresenta três garras nos tarsos. Simon (2) diz que êste gênero distingue-se de

Ctenus pela plântula tarsal que apresenta uma pequena e aguda unha. Esta, po¬

rém. não é análoga àquela garra independente das PISAURIDAE, onde atualmente

está incluído o gênero Ancylometes.

Portanto êste caráter deve ser usado com cuidado e sem dúvida a distinção

dos dois gêneros através dêle traz grandes dificuldades, ocasionando algumas con¬

fusões.

Procuramos, neste trabalho, revendo as aranhas da coleção do Instituto Bu¬

tantan e comparando as descrições originais, encontrar um outro caráter que pos¬

sibilitasse uma distinção mais fácil entre os dois gêneros, tão semelhantes.

Na América do Sul foram descritas as seguintes cinco espécies de Cupiennius:

1 — Cupiennius argentinus (Holmberg) 1881

Argentina — Rio Capitan — 1 fêmea

2 — Cupiennius celerrirnus, Simon 1891

Brasil — Tefé — 1 fêmea e 1 macho

* Trabalho realizado sob a orientação do Dr. Wolfgang Bücherl e sob os auspícios

do Fundo de Pesquisas do Instituto Butantan.

Recebido para publicação em 6/2/1963.

2 3

5 6

10 11 12 13 14 15

1 OO SÔBRE A POSIÇÃO SISTEMÁTICA DE ALGUMAS ESPÉCIES DE ARANHAS

VERDADEIRAS DO GÊNERO CUPIENNIUS, SIMON 1891, DA FAMÍLIA...

3 —

■ Cupiennius diploccllatus, Mello Leitão 1936

Brasil — Terrenos — 1 fêmea

4 —

• Cupiennius exterritorialis, Strand 1909

América do Sid — 1 macho

5 —

• Cupiennius granadensis (Keyserling) 1876

Colômbia — Santa Fé de Bogotá — 1 fêmea e 1 macho

De Ancylometes foram descritas 17 espécies para a América do Sul

1 —

- Ancylometes amazonicus, Simon 1898

Amazonas — 1 macho

2 —

■ Ancylometes bahiensis (Strand) 1909 ,

Brasil — Bahia — 1 fêmea

3 —

- Ancylometes bogotensis (Keyserling) 1876

Brasil — Bolívia — Colômbia - — Panamá — Costa Rica —

1 fêmea e 1 macho

4 —

Ancylometes bolivianus, Tullgren 1905

Bolívia — 1 fêmea

5 —

Ancylometes caracassensis (Strand) 1909

Venezuela — 1 macho jovem

6 —

- Ancylometes demerarensis (F. Camhridge) 1897

Brasil — Demerara — 1 macho

7 —

Ancylometes gigas (F. Camhridge) 1897

Amazonas — 1 macho

8 —

Ancylometes hewitsoni (F. Camhridge) 1897

Brasil — Largo — 1 macho e 1 fêmea

9 —

Ancylometes orinocensis, Simon 1898

Venezuela — 1 macho

10 —

Ancylometes pulustris (F. Camhridge)

Ilha da Trindade — 2 machos

11 —

Ancylometes puracnsis (Strand) 1915

Brasil — 1 fêmea

12 “

- Ancylometes paraguayensis (Strand) 1909

Paraguai — 1 macho

13 —

Ancylometes pindareensis, Mello Leitão 1920

Brasil — 1 fêmea

2 3 L

5 6 SCÍELO 10 11 12 13 14 15 !

SciELO

10 11 12 13 14 15 16

Mem. Inst. Butantan,

31:127-134, 1964.

SYLVIA LUCAS

129

14 — Ancylometes saraensis (Strand) 1909

Bolívia — 1 fêmea

15 — Ancylometes selenkae (Strand) 1909

Brasil — 1 fêmea

16 — Ancylometes venezuelensis (Strand) 1909

Venezuela — 1 fêmea

17 — Ancylometes vulpes, Bertkau 1880

Brasil — 1 fêmea

Material e métodos

Revimos os exemplares da coleção do Instituto Butantan, cêrca de 80 fêmeas

e 30 machos, classificados sob Cupiennius, por apresentarem uma terceira garra

e fórmula ocular 2-4-2. As procedências dêste material são as seguintes: Rio

Grande do Sul (Santo Ângelo) ; Paraná (João Eugênio) ; São Paulo (Barretos,

Bragança Paulista, Caieiras, Jundiaí, São Sebastião, etc.) ; Rio de Janeiro, Mato

Grosso (Terrenos, Campo Largo, Rio das Mortes) ; Goiás (Ilha do Bananal) ; Pará

(Belém do Pará), etc.

Todos os exemplares foram reclassificados, observando-se especialmente a ter¬

ceira garra e também a forma do epígino da fêmea e do palpo do macho.

Verificamos que tôdas as aranhas estudadas apresentam uma terceira garra

independente, inerme, ao

lado das

duas principais

fortemente

denteadas

(ver figu-

ras 1 e

sultado i

2). Aferimos as

damos abaixo:

i medidas

das pernas

5 fêmeas e

3 machos

, cujo re-

Fêmeas:

Fêmur

Pateta

Tíbia

Metatarso

Tarso

Total

perna

12,5

7,0

11,0

9,0

5,0

44,5

perna

12,0

6,2

9,8

9,1

5,0

42,1

perna

III

11,0

5,5

8,3

9,3

4,7

38,8

perna

14,0

7,0

11,5

14,0

5,5

52,0

perna

11,6

6,0

10,0

7,5

4,9

40,0

perna

11,0

6,0

8,4

7,6

4,6

37,6

perna

III

10,8

5,0

7,5

8,0

4,5

35,8

perna

12,0

5,2

10,1

12,8

5,1

45,2

perna

12,0

6,1

9,9

8,0

5,0

41,0

perna

11,0

5,7

8,9

7,8

4,1 ’

37,5

perna

III

10,5

5,0

8,0

8,2

4,5

36,0

perna

12,6

5,7

10,1

12,5

6,0

46,9

perna

13,9

6,1

11,0

9,0

5,0

45,0

perna

12,8

6,2

9,5

8,9

4,6

42,0

perna

III

11,0

5,5

8,0

8,5

4,1

37,1

perna

13,2

5,7

11,0

14,1

5,5

49,5

perna

10,5

5,0

8,0

7,3

4,5

35,3

perna

9,0

4,5

7,1

7,0

4,5

32,1

perna

III

9,0

4,1

7,0

7,2

4,5

31,8

perna

12,0

5,0

9,2

11,5

5,0

42,7

1, | SciELO

-)Qf) SÔBRE A POSIÇÃO SISTEMÁTICA DE ALGUMAS ESPÉCIES DE ARANHAS

VERDADEIRAS DO GÊNERO CUPIENNIUS, SIMON 1891, DA FAMÍLIA...

Machos:

Fêmur

Pateta

Tíbia

Metatarso Tarso

Total

perna I

14,9

6,0

14,1

15,0

7,5

57,5

perna II

14,0

6,0

13,4

14,0

6,1

53,5

perna III

12,0

5,0

11,0

13,0

6,0

47,0

perna IV

15,0

5,0

14,0

19,0

7,5

60,5

perna I

13,5

6,0

12,0

11,5

6,1

49,1

perna II

12,0

6,0

11,1

11,0

6,1

46,2

perna III

12,0

5,0

9,1

11,0

5,0

42,1

perna IV

13,0

5,0

12,0

15,3

6,2

51,5

perna I

14,0

6,5

13,1

7,0

53,6

perna II

12,8

6,0

12,0

12,1

6,0

48,9

perna III

11,0

5,0

10,0

11,5

5,0

42,5

perna IV

13,2

6,5

13,0

16,0

7,0

55,7

machos apresentam, portanto, pernas bem mais

longas que as fêmeas, po-

rém, em

ambos os sexos

a perna

IV é a mais

longa e a fórmula

das pernas é

4 12 3

A espinulação das

pernas é a

seguinte:

Fêmeas -

— Todos

fêmures

com espinho

s fortes

distribuídos

dorso-lateral-

mente.

Patel

a I e II

sem

espinhos; III e IV com dois

: um lateral

interno e ou-

tro externo.

Tíhia I com

quatro

pares de espi

nhos ventrais (um sub-basal, dois

medianos e um apical). Sem espinhos laterais e nem dorsais. Tíhia II igual à tíbia

I porém apresentando dois espinhos laterais internos. Tíbias III e IV com três pares

de espinhos ventrais (sub-basal, mediano e apical), com dois espinhos laterais

internos e dois externos e três dorsais. Metatarso I e II densamente escopulados

até a base, com três pares de espinhos ventrais. Metatarso III e IV pràticamente

sem escópula, mas com espinhos muito numerosos. Tarsos I e II densamente es¬

copulados até a base, sendo a escópula dividida ao longo da região mediana, como

indica a figura 3. Com três garras. Tarsos III e IV com escópulas divididas e

numerosos espinhos curtos, principalmente na região ventral. Igualmenle com três

garras.

Machos — Os fêmures também com espinhos fortes. Patela I-IV com dois

espinhos, um lateral interno e outro lateral externo. Tíbias I e II com quatro

pares de espinhos ventrais, dois espinhos laterais internos, dois externos, três dor¬

sais. Tíbias III e IV com três pares de espinhos ventrais, dois laterais internos,

dois externos e três dorsais. Metatarsos I e II com três pares de espinhos ven¬

trais, além de laterais e escopulados. Metatarsos III e IV com espinhos numerosos

e fortes distribuídos por todo artículo. Tarsos I e II com escópula dividida c

três garras. Tarsos III e IV também escopulados e com espinhos curtos, ventrais

e três garras.

Quanto ao colorido, em geral êste fica muito alterado pela conservação em

álcool. As fêmeas apresentam um colorido menos contrastante que os machos.

1, | SciELO

Mem. Inst. Butantan,

31:127-134. 1964.

SYLVIA LUCAS

131

Fig. 1 — Ancylometes bogotensis: tarso 1 (fêmea), aspecto lateral.

Fig. 2 — Ancylometes bogotensis: tarso 1 (fêmea), aspecto ventral.

Fig. 3 — Ancylometes bogotensis: tarso 1 (fêmea, aspecto ventral, mostrando a escópula

dividida.

Fig. 4 — Ancylometes bogotensis: epigino da fêmea, aspecto frontal.

Fig. 5 — Ancylometes bogotensis: epigino da fêmea, aspecto de perfil.

Fig. 6 — Ancylometes bogotensis: epigino da fêmea, aspecto frontal.

Fig. 7 — Ancylometes bogotensis: epigino da fêmea em desenvolvimento.

Fig. 8 — Ancylometes bogotensis: palpo do macho.

2 3 4

SciELO

10 11 12 13 14 15

132

SÔBRE A POSIÇÃO SISTEMÁTICA DE ALGUMAS ESPÉCIES DE ARANHAS

VERDADEIRAS DO GÉNERO CUPIENNIUS. SIMON 1891, DA FAMÍLIA...

0 cefalolórax apresenta três faixas e estrias radiantes, partindo das faixas mar¬

ginais para a mediana. 0 abdome possui no dorso, no têrço anterior quatro pe¬

quenas depressões, cobertas por pêlos brancos em exemplares de conservação re¬

cente, escuras dispostas em dois pares. No têrço posterior há duas grandes manchas

redondas formadas por pêlos claros. 0 ventre é escuro, apresentando quatro linhas

claras, pontilhadas, que se iniciam logo atrás do sulco epigástrico e convergem

para as fiandeiras. As pernas apresentam os fêmures, dorsalmente, anelados de

claro e escuro.

0 epígino possui forma muito peculiar, sendo formado por uma peça mediana,

mais longa do que larga e muito saliente na região anterior, e duas peças laterais.

Vide: Figs. 4, 5 e 6. A figura 7 mostra uma fase de desenvolvimento.

O palpo do macho apresenta no ápice da tíbia duas apófises, sendo a interna

mais curva e menor (Fig. 8).

Discussão

Todos os exemplares estudados pelos caracteres apresentados não pertencem

ao gênero Cupiennius, mas ao gênero Ancylometes. Classificamos esta nossa espé¬

cie sob Ancylometes bogotensis (Keyserling) 1876.

Infelizmente não pudemos dispor de nenhum exemplar pertencente ao gênero

Cupiennius. Êste, além de se distinguir pela terceira garra, segundo Simon, um

caráter que necessita de reestudo, apresenta (pela descrição do gênero dada por

Cambridge (3) e pela dada por Keyserling (4) para Cupiennius sallei ) a perna I

mais longa de tôdas, sendo a fórmula 1 2 4 3.

1 — Ctenus originalis, Mello Leitão 1936

Revimos o tipo, uma fêmea de Itatiaia, que gentilmente nos foi cedido pela

direção do Museu Nacional do Rio de Janeiro.

0 exemplar apresenta:

1) uma terceira garra nos tarsos, independente e inerme;

2) fórmula das pernas 4 123;

3) escópulas tarsais densas e divididas na linha mediana;

4) margem inferior do sulco ungueal com quatro dentes, sendo o terceiro menor;

5) fórmula ocular 2 4 2;

SciELO

10 11 12 13 14 15 16

Mem. Inst. Butantan,

SYLVIA LUCAS

133

31:127-134, 1964.

6) dorso do abdômen com quatro pequenas depressões escuras no têrço anterior

e ventre com quatro linhas claras, pontilhadas, que convergem para as fian¬

deiras ;

7) epígino ainda não completamente desenvolvido, porém não se distinguindo da¬

quele apresentado por Ancylometes bogotensis.

Portanto, Ctenus originalis, Mello Leitão 1956 é sinônima de Ancylometes bo¬

gotensis (Keyserling) 1876.

2 — Cupiennius argentinus, (Holmberg) 1881

A fórmula das pernas é 412 3. Segundo o autor é uma aranha, que pelo

modo de vida e pelo aspecto lembra uma Lycosa. Pela descrição dada não a dis¬

tinguimos de Acylometes bogotensis, (Keyserling) 1876.

3 — Cupiennius diplocellatus, Mello Leitão 1936

Mello Leitão (5) coloca esta sua espécie no gênero Cupiennius, pois: “...en¬

tre as unhas há uma plântula com uma apófise curva, em forma de unha de gato”.

Infelizmente o tipo, uma fêmea de Terrenos, Mato Grosso, que consta estar na

coleção do Instituto Butantan, sob número 117, encontra-se perdido. Portanto, esta

terceira garra não pôde ser observada. Pela fórmula das pernas, a espécie per¬

tence à Ancylometes. Pelo colorido não se distingue de Ancylometes bogotensis,

com a qual a colocamos em sinonímia. Possuímos, da localidade, um tipo de maclio

jovem, que também classificamos sob Ancylometes bogotensis e ainda de Mato

Grosso (Campo Largo e Rio das Mortes) possuímos fêmeas e machos adultos,

todos pertencentes à mesma espécie.

4 — Cupiennius celerrimus, Simon 1891

Pela descrição original de Simon, autor do gênero e da espécie, não pudemos

identificar se se trata realmente de uma espécie boa pertencente ao gênero Cupien¬

nius. É necessário fazer uma revisão do tipo, a fim de esclarecer esta dúvida.

5 — Cupiennius granadensis, (Keyserling) 1876

Pela fórmula das pernas 4 12 3, trata-se de uma espécie pertencente ao gê¬

nero Ancylometes. Pelas medidas parece ser um exemplar jovem de Ancylometes

bogotensis.

2 3

5 6

10 11 12 13 14 15

1 o A SÕBRE A POSIÇÃO SISTEMÁTICA DE ALGUMAS ESPÉCIES DE ARANHAS

VERDADEIRAS DO GÉNERO CUPIENNIUS, SIMON 1891, DA FAMÍLIA...

6 — Cupiennius ahrensi, Schmidt 1959

A julgar pelas ilustrações e fórmula das pernas, fornecidas pelo autor, deverá

igualmente ser enquadrada sob Ancylometes.

Agradeço ao Dr. Wolfgang Bücherl, chefe da Secção de Artrópodos Peço¬

nhentos, a orientação prestada durante a elaboração dêste trabalho.

Resumo

1) Pelo presente trabalho são aferidos os principais caracteres diferenciais

entre os gêneros Ancylometes, Bertkau 1880 e Cupiennius, Simon 1891.

2) As espécies Ctenus originalis, Mello Leitão 1936; Cupiennius argenlinus,

(Holmberg) 1881; Cupiennius diplocellatus, Mello Leitão 1936; Cupiennius gra-

nadensis, (Keyserling) 1876; Cupiennius ahrensi, Schmidt 1959, são enquadradas

sob Ancylometes.

SuMMARY

1) This paper describes the principal differential characteristics between ge-

nera Ancylometes, Bertkau 1880 and Cupiennius, Simon 1891.

2) The species Ctenus originalis, Mello Leilão 1936; Cupiennius argentinus,

(Holmberg) 1881; Cupiennius diplocellatus, Mello Leitão 1936; Cupiennius gra-

nadensis, (Keyserling) 1876 and Cupiennius ahrensi, Schmidt 1951 are included

under the name Ancylometes.

Bibliografia

Bertkau , 1880 — Mem. Class. Sei., 43:114.

Simon, 1891 — Buli. Soc. Zool., France — Vol. XVI.

Simon, 1898 — Hist. Nat. Arair/n., 2(2) :207-208.

Cambridge, F., 1901 — Biol. Centr. Amer. Aran., 2:308.

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Mello-Leitão, 1936 — Festschr. Strand, 1:21.

SciELO

10 11 12 13 14 15 16

Mem. Inst. Butantan,

JESUS CARLOS MACHADO

135

31:135-142, 1964.

ALTERAÇÕES ESPONTÂNEAS DA RASE DE IMPLANTAÇÃO E DA TÚNICA

MÉDIA MUSCULAR DA AORTA DE CORAIAS. ASPECTOS MORFOLÓGICOS

SUGESTIVOS DO SEU DESENVOLVIMENTO E ESTUDO DA FREQUÊNCIA *

JESUS CARLOS MACHADO

Laboratório de Anatomia Patológica, Instituto Butantan, São Paulo, Brasil

A importância primordial das alterações cárdio-vasculares humanas, justificam

meritòriamente o relato das lesões ou formações encontradas nessas localizações, em

animais, principalmente nos de laboratório. Assim, quer aspectos vasculares dege¬

nerativos espontâneos, quer a presença de nódulos cartilaginosos e ósseos ocasio¬

nais, no coração, emergência da aorta e na aorta propriamente dita, têm sido re¬

latados frequente e justamente na literatura.

Hueper (6) descreveu focos cartilaginosos em coração de ratos e camundongos,

acentuando a semelhança dos mesmos àqueles encontrados em corações de mamí¬

feros (cavalo, carneiro, búfalo e coelho), aves (galinhas) por Reterer e Lellieve,

Kern, Hausotter, Favaro, Greil, Beddard e Mitchell. Stiefel e Benninghoff. Os

nódulos localizavam-se no anel fibroso da aorta na porcentagem de 3,3% nos

ratos (100 em 3.000) e 1,5% nos camundongos (15 em 1.000). Acrescenta

Hueper que êsses dados devem ser mais frequentes, mas que provàvelmente a

menor incidência decorre do fato de por vêzes os cortes não serem felizes, não

atingindo a região pretendida. Em outros trabalhos, Hueper (5, 7, 8) descreve-os

em coelhos, onde confirma os achados de Vanzetti (15), considerando-os junta¬

mente com êsse autor, como devido a metaplasia normoplástica, ao contrário de

Dratschinski (cit. Hueper (6)) que os associou à alteração patológica. Relatou

ainda a presença de tecido ósseo, com medula, na aorta de cão. Seegal e Seegal

(13) observaram idênticos achados em 1 coelho de 30 estudados. Jaffé e Ga-

valler (9) descreveram também nódulos cartilaginosos em coração e aorta de ratos.

Dentre centenas de ratos utilizados, ora como controle, ora servindo às mais di¬

versas experimentações, encontraram em 18 dêles, nódulos cartilaginosos com lo¬

calizações diversas, no endocárdio, musculatura papilar e base de implantação da

aorta, túnica média. Interpretaram os nódulos de localização miocárdica, conto

* Trabalho realizado com auxilio do Fundo de Pesquisas do Instituto Butantan.

Recebido para publicação em maio de 1963.

2 3

5 6

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136

ALTERAÇÕES ESPONTÂNEAS DA BASE DE IMPLANTAÇÃO E DA TÔNICA

MÉDIA DA AORTA DE COBAIAS. ASPECTOS MORFOLÓGICOS SUGESTIVOS.. .

consequência de pequenos enfartes instalados por alteração das coronárias. Su¬

puseram Jaffé e Gavaller(9), que “isso se deu porque a musculatura foi danifi¬

cada por falta de circulação do sangue, formando tecido conjuntivo, e êste, pos¬

teriormente, foi transformado em cartilagem que depois se calcificou”. Citam os

trabalhos de Willem e Sproul (16) que encontraram, também em corações de

ratos, focos de fibrose, correlacionados por êles com a esclerose das coronárias que

nos casos estudados, sempre foram paralelos à extensão da fibrose. Quanto à in¬

terpretação dos focos cartilaginosos na base de implantação da aorta, acentuam

ser difícil compreendê-la, acreditando que, talvez, se devam a “alteração focal

degenerativa” na musculatura do vaso, se bem que não tivesse sido encontrado

nenhum outro foco. Quanto à possibilidade de serem encontrados focos cartilagi¬

nosos em outras espécies animais, principalmente nos de laboratório, é admitida,

e mesmo sugerida, por Jaffé e Gavaller(9). Acreditam êsses autores que a ra¬

ridade de tais encontros se deva, provavelmente, à não realização de estudo siste¬

mático em animais mais idosos. Barasa e Gobetto (4) afirmam de modo geral,

que a presença de cartilagem cardíaca é constante em muitas espécies — rumi¬

nantes, equídeos, pequenos roedores e insetívoros — inconstante em outros —

carnívoros — pequena e inconstante nos primatas ou representando exceções ocor¬

rendo em raríssimos casos —- homem.

Pelos trabalhos aqui assinalados observamos que tem sido relatada, ocasional¬

mente ou de forma mais ou menos sistemática, nas diversas espécies animais, a

presença de nódulos cartilaginosos, seja no miocárdio, seja no chamado anel fi¬

broso da aorta. Os diversos autores, segundo a interpretação fisiopalológica desses

achados, podem ser agrupados da seguinte forma: o primeiro grupo, representado

por Vanzetti, Hueper, Barasa e Gobetto, acredita constituir essas formações simples

metaplasia normoplástica, enquanto que o segundo grupo, constituído por Drat-

schinski, Jaffé e Gavaller, Willem e Sproul, interpretam-nas como devidas ora a

fatores tensionais, ora secundários a outras alterações. Jaffé e Gavaller (9) lem¬

bram mesmo “a característica especial dos ratos em produzir cartilagem nos pro¬

cessos patológicos”. Enquanto Barasa e Gobetto (4) afirmam ser constante o en¬

contro dessas formações em pequenos roedores, Miller (11) afirma não tê-las encon¬

trado quer na musculatura cardíaca, quer na implantação da aorta em seus estudos

sôbre miocardites espontâneas em coelhos. Devemos desde já dissociar o que é

constante do que é frequente. O constante pressupõe continuidade e o freqiiente

descontinuidade. 0 fato de uma formação apresentar caráter constante não jus¬

tifica, somente por isso, a conclusão de que ela seja anatômica. Há na patologia

humana um exemplo análogo, qual seja a Arterioesclerose, que sendo constante

em tôdas aortas, em indivíduos acima dos 40 anos, é justamente interpretada como

sendo processo degenerativo e não fato anatômico. Devemos lembrar ainda que

as artérias dos animais são passíveis de sofrerem processos degenerativos.

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No tratado sôbre a ‘'Patologia especial dos animais de laboratório”, de Ernst

Joest, no capítulo sôbre artérias, dc Ackerknecht e Krause (3), é relatada a pre¬

sença de focos cartilaginosos, por vêzes ossificados na túnica média da aorta.

Devem-se êsses focos, segundo Ackerknecht e Krause a processo inflamatório-pro-

liferativo que ocasiona a metaplasia. Citam os trabalhos de Spiegel, na aorta de

um velho cão de caça e os de Wolkoff na aorta de papagaios. Chamam atenção

para a necessidade de proceder-se ao exame histopatológico do material suspeito,

porque há “espessamentos hialinos do tecido conjuntivo que podem perfeitamente

simular cartilagem”. No capítulo sôbre coração, de Ackerknecht (2), citando

Weish, comenta a presença de osso ou cartilagem no anel fibroso da aorta de

cavalos, bois, porcos e ainda cães e gatos, sem menção a qualquer interpretação

patogenética.

Nieberle (12), estudando a arterioesclerose dos animais domésticos, mostra em

dois desenhos a presença de metaplasia óssea em aorta de cavalos e lipoidose da

íntima com metaplasia cartilaginosa em aorta de papagaio. Tibiriçá (14), estu¬

dando a cicatriz do dueto arterioso do boi, descreveu alterações de calcificação “de

tôda espécie de fibra” da parede, precedida geralmente de esteatose ou de necrose.

Raramente encontrou nessas zonas “processos de homogeinização do tecido conjun¬

tivo proliferado com formação de cavidades (estádio menos raro) seguido de for¬

mação dc cartilagem e finalmente osso, com sistema de Havers e com medula

óssea amarela”.

Desta breve análise de vários trabalhos encontrados na literatura, não verifi¬

camos a descrição especifica de lais achados em cobaias, a despeito da afirmação

genérica de Barasa e Gobetto (4) de ser constante em pequenos roedores. Ainda

mais, que houve da parte dos pesquisadores ausência de estudo sistemático do

processo, nos pequenos roedores e que a descrição dos mesmos se refere, de modo

geral, a casos fortuitos revelando casuística inexpressiva, levando autores como

Jaffé e Cavaller(9), a acentuar dever ser mais frequente se melhor estudados.

Finalmente, devido à ausência de cortes sistemáticos, não há a verificação do¬

cumentada de possíveis alterações pregressas mostrando a evolução de tais pro¬

cessos, dificultando a exata interpretação fisiopatológica dos mesmos.

Pretendemos, neste trabalho, não só demonstrar que também em cobaias ocorre

a presença dessas alterações na média da aorta próxima à sua base de implantação

no miocárdio, mas também que a incidência destas alterações patológicas, em co¬

baias, diferem significativamente das outras espécies, até aqui estudadas. Ainda

mais que, o estudo sistemático dessa região, demonstra a possibilidade de se ob¬

servar alterações pregressas que possibilitam provável interpretação fisiopatológica

do início e evolução do processo.

SciELO

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138

ALTERAÇÕES ESPONTÂNEAS DA BASE DE IMPLANTAÇÃO E DA TÚNICA

MÉDIA DA AORTA DE COBAIAS. ASPECTOS MORFOLOGICOS SUGESTIVOS.. .

Material e métodos

Em tralialho que realizamos sôbre o quadro anátomo-patológico apresentado

por eoliaias inoculadas com Mycobacterium tuberculosis (em colaboração com a

Secção de Bacteriologia do Instituto Butantan — Dra. Jandyra P. do Amaral),

procedemos a cortes sistemáticos do coração, abrangendo a emergência da aorta.

Examinamos dessa forma, o coração e aorta de 90 cobaias subdivididas em três

grupos: 1 — controle (10 cobaias); 2 — grupo inoculado subcutâneamente com

Mycobacterium tuberculosis (58 cobaias) ; 3 — grupo vacinado prèviamente com

BCG por via oral e posteriormente inoculado subcutâneamente com Mycobacterium

tuberculosis (22 cobaias). O coração foi cortado à altura da emergência da aorta,

ao meio, no sentido do maior eixo, e totalmente incluído em parafina. Três a

quatro cortes de 7 micra foram estudados para cada bloco e corados pela hema-

toxilina-eosina.

Resultados

O estudo dêsse material revelou, indistintamente, nos três grupos de cobaias, a

existência de alterações degenerativas com grande frequência (Tabela 1), sem

qualquer substrato inflamatório pregresso, tanto na base de implantação como na

média muscular.

Observa-se que inicialmente aparece um espessamento localizado, do colágeno,

na base de implantação que se confunde com área hialinizada que compromete

também a média muscular (Fig. 1). Por vêzes, a hialinização adquire aspecto

carlilaginóide. ocupando extensa área (Fig. 2). Nas cobaias mais idosas — acima

de 360 dias de idade (Tabela 4) — notamos a presença já de áreas cartilaginosas

de matriz basófila, ora em meio a área hialinizada (Fig. 3), ora ao lado de área

osteóide (Fig. 4). A figura 5 revela aspecto transicional de zona cartilaginosa

para típica trave óssea, notando-se pequeno capilar neoformado. Achados ocasio¬

nais de nódulos sem aspectos transicionais pregressos são revelados pela figura 6.

Êsses aspectos foram encontrados em cobaias dos três grupos acima referidos.

TABELA 1

Degeneração hialina isolada . 30 casos

Nódulo cartilaginoso Isolado . 7 “

Nódulo cartilaginoso + Ossificação . 1 “

Total de casos . 38 “

Total de cobaias . 90

Porcentagem de . . 40,2%

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TABELA 2

Degeneração hialina isolada . 30 casos

Tótal de cobaias estudadas . 90

Porcentagem de . 33,3%

TABELA 3

Nódulo cartilaginoso (com ou sem ossificacão) .... 8 casos

Total de cobaias estudadas . 90

Porcentagem de . 8,8%

TABELA 4 — CASOS COM AS LESÕES OBSERVADAS SEGUNDO A IDADE DAS COBAIAS

Idade (dias)

Hialinização

base

implantação

Hialinização

média aorta

Cartilagem

hialina

Cartilagem

calcificada

Ossificacão

Até 80 dias .

—

De 80 a 150 .

+ +

—

De 150 a 360 .

+ +

—

De 360 a 520 .

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T4f) ALTERAÇÕES ESPONTÂNEAS DA BASE DE IMPLANTACAO E DA TÚNICA

MÉDIA DA AORTA DE COBAIAS. ASPECTOS MORFOLÓGICOS SUGESTIVOS. . .

Flgs. 1 a 6 — Cortes histológicos de aorta de cobaias.

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Discussão

A observação puramenle morfológica do quadro apresentado pelas diversas

cobaias nos sugere que estas lesões degenerativas têm caráter progressivo, de acôrdo

com a idade das cobaias. Inicia-se como simples degeneração hialina localizada

das fibras colágenas, comprometendo também a média muscular da aorta, evoluindo

para tecido cartilaginóide, constituindo posteriormente típicos nódulos cartilagino¬

sos com metaplasia óssea final. Essa interpretação só é possível analisando-se cortes

sistemáticos de grande número de animais, pôsto que o encontro de aspectos for¬

tuitos isolados, como o da figura 6, não nos poderia fornecer subsídios para essa

interpretação, o que geralmente ocorre, com a maioria dos trabalhos que encontra¬

mos a êsse respeito. Além do que, a grande freqüência dos nossos achados (Ta¬

belas 1, 2, 3) deve-se à sistematização do estudo.

O encontro dessas alterações nos três grupos de cobaias afasta possível etiolo¬

gia tuberculosa, mesmo porque não se observaram lesões inflamatórias específicas

ou inespecíficas nesses locais. Êsle falo é corroborado pelas observações de Jaffé

e Gavaller (10) nos seus 18 casos de ratos, onde verificaram o aparecimento de

lesões indistintamenle, tanto nos animais controle como nos de experimentação e

ainda pelos achados de Willens e Sproúl (16) em corações de ratos.

Êsses aspectos morfológicos das lesões da média muscular, sem comprometi¬

mento da íntima e adventícia, assemelha-se, a nosso ver, à médio-esclerose de

Mõnckberg das artérias da extremidade, e mais de longe, com as escleroses fun¬

cionais da média das artérias útero-ovarianas, segundo a descrição dêsses processos

por C. Benda (cit. Aschoff).

C. Benda (1) admite para a médio-esclerose de Mõnckberg, além dos Irans-

lôrnos metabólicos, um fator tensional, representado pela “sobrecarga estática que

pesa sôbre as extremidades inferiores”. Hueper (6) também crê para os animais

uma etiologia devido a fatores tensionais. Acreditamos também, pela ausência

de lesões inflamatórias e de focos necróticos na musculatura (como se obtém ex¬

perimentalmente pela Adrenalina c Vigantol — Aschoff (1)), essa hialinização

inicial deva-se a fatores tensionais que desencadeiam o processo. Pode êle chegar

até a ossificação se a cobaia atingir tempo de vida compatível.

Dessa forma, as observações dêste trabalho, registradas em aorta de cobaias,

nos permitem descrever não só a presença de nódulos cartilaginosos e traves ósseas

em tal espécie, com incidência bem maior do que aquelas citadas em outras espé¬

cies, bem como através documentação de aspectos morfológicos sugestivos da evo¬

lução de tal processo.

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ALTERAÇÕES ESPONTÂNEAS DA BASE DE IMPLANTAÇÃO E DA TÚNICA

MEDIA DA AORTA DE COBAIAS. ASPECTOS MORFOLÓGICOS SUGESTIVOS..

Resumo

Em cobaias normais, ou inoculadas com Mycobacterium tuberculosis ou com

BCG, foi observada a presença de nódulos cartilaginosos e traves ósseas na média da

aorta, logo após a emergência do miocárdio. Verificou-se ainda que a ocorrência

destas lesões em cobaias é superior a de outras espécies estudadas por outros au¬

tores. É discutida a origem e evolução dêste processo patológico.

SuMMARY

The presence of cartilagenous nodules and bone trabeculae in tlie muscuiaris

media of the aorta, immediately after the emergence of the pericardium, was found

in normal guinea-pigs and in guinea-pigs injected vvitb BCG or witb Mycobacterium

tuberculosis. The observed incidence of these lesions in guinea-pigs was found

lo be greater than lhe observed occurrence of the same pathological process iu

other animal spccies, as reported by previous authors. The origin and evolution

of this process is discussed.

Bibliografia

1. Aschoff, L. — Tratado de Anatomia Patológica, Ect. Labor S.A., 1034.

2. Ackerknecht, E. — Spez. Pathologie der Haustire, vol. IV, pg. 323 (Berlin —-

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L. F. MARTINS

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CONTRIBUTION TO THE STUDIES OF COAGULOGRAM IN

THOROUGHBRED HORSES*

L. F. MARTINS

Department of Histology and Embriology — School of Veterinary Medicin

University of São Paulo — Brasil

Referring to the literature 011 the subject, vve sec a few controvérsia] points

liave been established in relation to the coagulation phenomenon in borses. Souber

and Larrieu (55) suggested that borses’ blood had the coagulation factors on con-

centration similar to that of human beings but Bell et al. (11 and 12) carne to

the conclusion that notable difference exist between tliese factors of the tvvo men-

tioned species believing that horses’ blood is deficient in antihemophilic globulin.

Sjolin (52), disagreeing with the above writers, first admitted deficiency of

Christmas factor but afterwards (53) set a different concepl then accepting that

tliere was probaly an insufficiency of a factor quite similar or identical to Hage-

man’s. Barkhan et al. (7) aequieseed with the works of Bell et al. (11 and 12)

while Fantl and Marr (25), on lhe other side, eoncluded that the thromboplastinic

factors of the blood of human beings and horses markedly differ in quantity but

are quite similar in their action. Grecchi et al. (29), ratified BelFs et al. (12)

previous conclusion aboul the differences in thromboplastinic action.

Fantl and Marr (25) found out that it occurs greater activity of Factor V

in horses’ blood than in human blood, although Barkhan et al. (7) noticed no

differences between them in the whole prothrombinic complex.

Fantl and Ward (26) demonstrated that quantity of prothromhine in horses's

normal blood is similar lo that in man’s thrombocitopenic blood, which suits lhe

affirmation that animal lias inadequatc number of platelets thus presenting srnaller

tendency to free phospholipids (Fantl and Marr — 25).

Spontaneous hemorrbages rarely occur in horses (Miller — 37) whereas tliese

animais are entitled to liave hemophilioid diseases or others rclatcd to the processes

* Ph.D. thesis presented to the Department of Histology and Embriology, School

of Veterinary Medicin — U.S.P., 1962.

This work has been completed with the help of Research Funds of Instituto

Butantan, in the Laboratory of Hematology of the Same Institute.

Received for publication in July 24, 1964.

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CONTRIBUTION TO THE STUDIES OF COAGULOGRAM

IN THOROUGI1BRED HORSES

of coagulation or hemostasis in horses. Barkhan (6) calls lhe aüention to lhe

question even though hc did not yet observe any real case of it. The petequial

fever, morho maculoso or hemorrhagic purpura in horses, nosologic entity known

for a long time, having a discussed etiology vvould he a non-thrombocitopenic

purpura, as concluded hy Biggers et ai. (13). Hemorrhagic States after castration,

has heen object of study liy several aulhors I 19, 49, 64) and il has heen de-

nominated l>y Chapron (18), Castration Hemo])hiIy, who admitted that hormonal

disturhances should probably he lhe cause for il. Volkmar (60), also described

hemorrhagic diseases in various animais including horses, in whieh coagulation

time was loo long or at times blood coagulation didn’t even occur.

As to horses’ cpistaxls, whose origin is quite unknown, is not yet completely

set il to he independent of alterations in blood coagulation, as well as the infcccious

anemies in horses, which may alter the coagulation process (31 and 33).

Several authors (17. 18, 22, 24, 34, 40, 42, 57) have done qualitative studies

comparing blood coagulation in horses and other species.

Expcriments for avaliation of lhe blood coagulation phenomenon and deter*

mination of normal values for horses, were subject of a few written works which,

however, due to several reasons, cannot he used as standards for the whole specie

either because tesls have heen made with few or not accurately characterized

animais or because they were not perfectly padronized. Concerning literalure,

as follows: Adams(l), Aparici (2), Archer (4), Awad and Morcos (5), Bark¬

han (7), Behrens(9), Bell et al. (121, Burker (16), Diaz(23), Florio (28),

Schwayer (50), Sippel (51), Sopena (54), Vau Wassenhove (58), Villard (59),

Weiser (62).

So, in order to clarify facts w.hich would permit to precise the Irue charactcr

of the interrelated factors in blood coagulation in horses, as well as lo set th'.’,

real scheme of the different hemorrhagic syndromes in this whole specie, it seemed

lo us fundamenlally important lo determine the normal values for the commonest

lests used in the avaliation of blood coagulation. Thoroughbred Horses were cliosen

for this work because they have great clinic interest, they are a quite homogeneous

group and they offer great possibilities for investigation of hereditary factors if

any pathological process appears.

Contradictory notes can bc found about lhe hormonal influence on blood

coagulation (8, 21, 32, 36). So, in our experiment we aimed at the determination

of the average populational values for lhe lests of: coagulation time, coagulation

time of recalcified plasma, platelet counts, clol retraction, prothrombin time, throm-

boplastin generation test, at the same time that we tried to prove lhe nullity hypo-

thesis of non-difference between sex, in relation to the mentioned tests, adopting

the rejection levei of 5 r /c.

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Material and methods

The blood submitted lo different experiments at lhe Jockey Club of S. Paulo,

was taken out of fifly Thoroughbred horses 25 females and 25 male horses hetween

2 and 5 years, eonsidered healthy clinicai, neither presenting serious nor slighl

heinorrhages and all of ihcin vvcrc suhrnilled lo a similar dicl. The material was

collecled from lhe jugular vein, heing a siliconized syringe used after the animais

resl, Ihis is, lliree hours after lhe morning Iraining.

Coagulalion time — ll was performed hy according lo Lee White’s technique

(35), using two tubes of 100/13 mm and lhe reading was done every 60 seconds.

Coagulatwn lime of recalcijied plasma — The technique descrihed in Quick

(44. — pg. 363) was adopted. We obtained the plasma used hy centrifugation

at 1,500 r.p.m. during 10 minutes of oxalated blood at 10% with an aequeous

solulion of 0.1 M of sodium oxalate. The test was made wilhin the firsl hour

after the blood was taken out and the calcium used came from a 0.02 M solution

of calcium chloride. The test performed in two 100/13 mm tuhes had ils result

expressed hy lhe tuhe that coagulated in lhe firsl place.

Platelet counts — The blood for the platelet counts was collecled in siliconized

flasks containing the dissodie salt of the ethylenediaminotetracetic acid (EDTA

Na-_>) in a 10% solution and in the proportion of 5 mg of salt for 5 ml of blood.

The method of Feissly and Ludin (27) medified hy Rosenfeld (56) was followed.

The suspension was made in a hematimelric pipelle for leucocyte counts, in lhe

proportion of 1:20 and the count in the Neuhauer camera under phase rnicro-

scopy, in a 2 mm- arca.

C.lot relr/uiion - We measured according to the method preconized hy Ro¬

senfeld (46). The test was performed in a water-bath at the temperature of 37"C

and the reading made three hours after lhe coagulalion.

Prothromhin time (prolhromhin complex) — The method of a stage introduced

hy Quick (39) was followed in the performance of this test we used the same

oxalated plasma utilized for the coagulation time of recalcified plasma test. The

thromboplastin was prepared with lhe rabhiPs hrain according to Quick’s techni¬

que (41). The thromboplastin suspensions were preserved in the ice hox +5°C

and used in the maximum for 10 days, eonsidered adequate for the use when the

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TIME !N SECONCS

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lime of normal prothrombin, this is, 11 lo 12 seconcls was given lo lhe human

plasma. The calcium chloricle used was 0.02 M. The verifications were made

three limes and il was considercd as lhe residi which was repealed; when there

was a disagreement, new determinations were made until lhe values agreod. Curves

of prothrombin dilution were made for lhe transformation of lhe data in eon-

centration.

In order to perform this curve, plasma of 10 animais was obtained, which

presenled a prothrombin time near lo the médium value. Two series of dilutions

were prepared for eacli animal and the average of lhe values obtained in the first

and second were calculaled. The average of each concentration in the 10 animais

represented the normal index for lhal concentration. The same criterion descrihed

for lhe reading of prothrombin time is here followed. The final curve transcribed

lo the dilogarithmic paper, can be changed, permitting lhe extrapolation of the

values not within the amplitude of lhe data (graph. 1). The results expressed %

of time of the prolhrombinic complex.

FIGURE I

REFERENCE CURVE OF PROTIIROMBINIC ACTIVITY IN REI.ATION TO TIME IN

SECONDS AND PERCENTAGE OF CONCENTRATION, CONSTRUCTED WITIl

VAI.UES OBTAINED WITIl 10 TIIOROUGIIBRED HORSES.

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Consumption oj prothrombin — The technique oí Quick (43) was used modified

I>y Rosenfeld (48). 5 ml oí blood were taken out placed in lulies of 100/13 mm

and left in a water-bath at a temperature of 37°C. When it coagulated, the time

was marked and lhe displacement of the clot was promoted, 59 minutes after the

eoagulalion, the material was cenlrifuged for one minute and the supernatant was

taken off and afterwards kept, in ice-bath; the quantity of residual prothrombin

was tested by lhe time it took to coagulate the mixture of lhis serum willi thromho-

plastin and calcium, having as a resource of fibrinogenous oxalated plasma absorbed

hy barium sulphate, washed according to tbe technique described hy Biggs and

MacFarlane (15) used in the proportion of 0.1 g for 1 ml of plasma. The absorp-

lion took |)lace in the water-bath for 30 minutes; the tubes were agited from time

lo time and afterwards they were cenlrifuged at 2,500 r.p.m. during 10 minutes,

being lhe supernatant taken off. The plasma was considered adequate for use,

when its prothrombin time was more than 4 minutes. As a resource of calcium,

lhe 0.02 M solulion of calcium chloride was also adequate. Three tests were

performed, that followed lhe same criterion adopted for the reading of lhe pro¬

thrombin time. The limes obtained were transformed in concentration by means

of the curve of prothrombin dilution, and tbat represented the residual prothrombin

after the evolution of lhe eoagulalion process for 00 minutes. Knowing the per¬

centual quantity of lhe plasma prothrombin, lhe prothrombin was obtained —

consumed by lhe following calculations:

100 X 1!

D = 100— C

A Total prothrombin expressed in % of time.

B = Residual prothrombin expressed in r r.

C r Residual concentration ealeulated at a rate of 100% of total prothrombin

for the animal.

D = % of consumed prothrombin.

Thromboplastin generalion — I figgs and Douglass (14) technique was fol¬

lowed. The animais were divided in 2 groups of 24 and 26, formed of male

and female horses in equal numbers. In the first group, the test was performed

with suspension of the platelets of the own animal and in the second, the phospho-

2 3

5 6

10 11 12 13 14 15

TIME IN SECON

148

CONTRIBUTION TO THE STUDIES OF COAOULOGRAM

IN TIIOROUGHBRED IIORSES

lipids obtained of liuman cerebrum trealed by acetone, according lo Bell’s and

Alton’s (10) technique. The citrated plasma absorbed by lhe oxalaled plasma

Ireated wilb sulphate of barium, according to lhe rule above described. The

platelets for suspension carne from lhe blood collected wilh sodium citrate in a

pbysiological solution al .8.8% in tbe proporlion of 10% of lhe total volume.

The platelets were wasbed twiee in a solution conlaining 4.0 g of sodium citrate

and 0.1 g ol dissodie sall of tbe ethylenediariiinotctracetic aeid for 100 ml ol

distilled waler and aflerwards wasbed onee more wilb a pbysiological solution.

being finally suspended in tbe same solution obeying a eoneenlration, thal is about

tbree limes bigger than be one of tbe plasma. In tbe systems prepared witli

pbospholipids in substitution to tbe suspension of platelets, a preparation was used

tbat contained 0.12 mg of lhat material by ml, the most active concentration of

a tesled series. The resource of fibrinogen was plasma oxalaled from tbe own

animal, poor in platelets and of calcium, calcium chloride in a 0.2 M solution.

The test lated 8 minutes; two verifications were made for oach animal and the

FIGURE TL

CURVE OF THROMBOPLASTINIC ACTIVITY WITII PLATELETS SYSTEM IN

RELATION TO TIME IN SECONDS AND PERCENTAGE OF CONCENTRATION,

CONSTRUCTED WITJI VALUES OBTAINED WITII 5 TIIOROUGHBRED IIORSES.

2 3 4

5 6 SCÍELO 10 2.1 12 13 14 15 16

TIME IN SECONDS

Mcm. Inst. Butantan,

31:143-162, 1964.

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149

resull corresponded to the average of these tests. A thromhoplastin dilution curve

íor lhe Iransformation of the results in concentralions was huilt. For ihis, 5

Thoroughhred horses were used, chosen among a many others, which presented

in lhe thromhoplastin generation, an index of high activily. For every animal,

2 series of dilutions with platelets were prepared and 2 with cephaline, frotn

systems in which the generation was interrupted hy a sudden fali of the tempe¬

ra tu re in ice-bath, when the generation was at the maximum and eonsidered 100%.

Three determinations of activily for each concentration were done the average was

calculated. For every animal, one dilution curve for the platelets and another

for the cephaline was ohtained, given hy the average of every concentration in

tiú; two dilution series. The average of the curves in the 5 animais tested, provided

lhe standard-values, which could he checked on lhe dilogarithmic paper, permitling

the extrapolation of lhe values, not within the amplitude of the data (graphs 11

and III).

FIGURE ir

REFERENCE CURVE OF THROMBOPLASTINIC ACTIVITY WITH PHOSPHOLIPID

SYSTEM IN SECONDS AND PERCENTAGE OF CONCENTRATION, CONSTRUCTED

WITH VALUES OBTAINED WITH 5 THOROUGHBRED HORSES.

SciELO

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TABLE I - SUMMARIZED DATA OBTAINED FOR THOROFGHBRED HORSES, ACCORDING TO SEX, IN RELATION TO THE TESTS

PERFORMED AND TO THE CALCFLATED MEASURES OF POSITION AND VARIABILITY

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SciELO^o

Mem. Inst. Butantan,

31 : 143 - 162 , 1964 ,

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Results

The average values, the standard deviation, lhe median, Pearson’s coefficienl

of varialiility, as well as the estimations of lhe confidence interval of 95% for

lhe average was calculated for inale and female horses, in the different tests per-

formed. These sanie values were calculated, according lo lhe grouped data of

inale and female horses.

In table I, we can find the results ohtained in the tests of eoagulation time,

coagulation lime of recalcified plasma, platelet coimt, clot retraction, prothromhin

time and prothromhin consumption for male and female horses. In table II, tbere

are the results of the tests of thrombOplastin generation, concerning the minute

when the maximum generation occurred and the maximum activity was observetl

in male and female horses, expressed by lhe time il look lo coagulate lhe plasma

of the animal, poor in platelets plus calcium.

The results ohtained in all the tests performed, calculated according to the

grouped data of male and female horses, are summarized on table III, while ,on

table IV, we have lhe summary of lhe values found in the literalure for normal

equines, according lo the different authors, including our discoveries.

Craph IV and V illustrate the distribution of frequency of the P.S.I. equines

in function of the time in whicli the thromhoplastin generation in systems with

platelets and phospholipids, respeclively, was maximum.

FIGURE

FREQUENCIES DISTRIBUTION HISTOGRAM OF THOROUGHBRED

HORSES IN RELATION TO TIME OF MAXIMUM THROMBOPLASTIN

GENERATION WITH PHOSPHOUPID SYSTEM.

FIGURE ET

FREQUENCIES DISTRIBUTION HISTOGRAM OF THOROUGHHRFD

HORSES IN RELATION TO TIME OF MAXIMUM THROMBOPLASTIN

GENERATION WITH PLATELETS SYSTEM.

I 2 3 4 5 b 7

TIME IN MINUTES

| 2 3 • 4 5 6 7 8 •

TIME IN MINUTES

1, | SciELO

156

CONTRIBUTION TO THE STUDIES OF COAGULOGRAM

IN THOROUGHBBED HORSES

Discussion

Analysing lhe coagulalion phenoinenon in horses we find a series of contro-

versial aspects Iiolli in relation lo the thromboplastic faetors and lo the prothrom-

1'inie eomplex. On lhe olher side, hemorrhagic diseases have been appoinled even

ihough lhe real cause for lhese disturhances are slill iinknown.

It seems to lis that the greatest diffieulties in the characlerization of hemor-

rhagic syndromes in horses, are duo lo the fact that in lhe concerning literature

there is not a hasic work, where the difíerent tests applied in the diagnosis of

lhe errors of coagulalion, are perfectly padronized for this kind of animal and

whieh results ean be safely used as comparative standards.

The analysis of lhe consulted works either aimed al the delermination of

averages for horses or as comparative studies hetween horses and olher species,

showed that they cannot, in many cases, be laken as referencc, hecause they have

not laken into consideration important faetors for the perfect characterization of

the animais, such as race, etarium factor, moment of eollection in relation lo feed-

ing, size, etc. The importance of these faetors in the final results of the tests

ean be verified hy the works of Adams(l), Awad and Morcos(5), De Nicola et

al. (22), Diaz (23), Florio et al. (28), Kment (34) and Villard (59).

It can be noticed that there is an oscillation in the results when diversc

techniques or variations of the same leehnique werc used, however, even within

the same technique, work conditions such as temperature, cause great errors, fact

that can be easily understood if one rememhers that hlood coagulalion is an en-

zimatic process in many aspects. Works hy Adams(l), Burker(16), Schwayer

(50), Sippel (51) and Villard (59) perfectly demonstrate this fact.

Baserga and De Nicola (12) verified that it occurs modificalion in hlood

coagulalion after lhe injection of sexual hormones or after spontaneous modifica-

tions of the hormonal equilibrium, while Rosenfeld and Nalias (47) concluded that

the prothromhinic eomplex does not suffer any influence either hy the benzoate

or lhe hexahydrohenzoate of estradiol or hy the hexahidrobenzoate of tesosterona.

De Nicola (22) found variation in number and lessening of platelet thromboplas-

tinic activity while menstrutions took place and this has been confirmed hy In-

trozzi and De Nicola (32). These verifications took us lo look for eventual dif-

fcrences caused hy lhe sex in the results of the difíerent test made.

Considering mentioned points such as the fact that we have been working

on Thoroughbred Horses, that a definite direction has been followcd in selecting

the animais and applying lhe techniques, it seems to us that the results should

be as exact as possihle and this will make llieir indication possible, as standards

for a definite population within the limits of the used pattern.

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Examining lhe obtained results vve find that in all tesls lhe deperidence in-

tervals of 95% for lhe average populational values estimated for inale and female

liorses, always show a variation zone which indicates that lhe differences between

sex is not significant at lhe adopted rejection levei of 5%, confirming Archer’s (4)

suggestion. That fact allowed us to aggregate the obtained residis for male and

female liorses in each test, and estimate lhe dependence limits of 95% of the

average populational values.

In relation to the authors who worked on Thoroughbred Horses, our results,

for lhe test of blood coagulation time, are numerically inferior to Adams’s (1)

who used lhe same technique wilh slight modifications and coincide with Archer’s

(4) when analysing them in function of the value obtained for the first tube.

As for the people who worked wilh other races or no definite race, we mention

Bell et al. (12) and Fantl and Marr (25) who got values much higher than ours

using lhe same technique, though with few and heterogeneous samples. Burker

(16) and Villard (59) respectively found higher and lower values than ours, but

working at the temperature of 25°C. The results of Schwayer (50) and other

authors mentioned by him, Sippel (51) and Awad and Morcos (5) cannot be

compared lo ours duc lo the different applied techniques.

The differences that we have found between the results in lhe first and the

‘second test tuhe show that there is a technical problem. The realization of lhe

lest demands two or three test tubes, but it was never established which test tuhes

indicates the result; based on experimental facts, our results define that it should

he lhe first one, hecause the time is shorter and lhe variability of the residis is

lower. The second test tube should he observei! only as a control tube in order

to avoid occasional mistakes of great range.

The test of “Coagulation time of reealcified plasma” apparently lias not yet

heen done in Thoroughbred Horses. Results obtained by De Nicola (22) wilh

few samples, in common old and young horses, were lower than ours, respectively

in 60 and 110 seconds.

The method of Feissly and Ludin (27) lias nol yet heen used for platelet

counts in horses’s blood. It is vcry difficult lo critically analyse lhe results of

tliis lesl which jiresciils the higher variation according to the technique used.

Just as an illustration we’ve noticed found that our results were a little uiider

lhe ones finded hy Barkhan et al. (7) and Archer (4), who made determinations

in Thoroughbred Horses using melhods of direct counts. Hickmet (30), Reber-

nack(45), Sopena (54), Wirth(62), Wober (63) using Kochcr-Fonio’s technique,

Bchrens (9) using Neumann and MonrcaBs technique and Weiser (61) obtained

values markedly higher than ours.

The percentage of clot retraction that we registered is slightly lower than

Archcr’s (4) who utilized McFarlane’s technique though with very few samples.

2 3

5 6

11 12 13 14 15

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CONTRIBUTION TO THE STUDIES OF COAGULOGRAM

IN THOROUGHBRED HORSES

Our j)roíliroml)in times are only comparable to the ones l>y authors who

used thromboplastin of rabbit’s cerelirum (brain) for this is the most active one;

even thromboplastin of horscs cerebrum’s acting in homologous systems, is less

active as it lias been demonstrated by Diaz (23). As already known, ollier tlirom-

boplastins are notably less active (7). The resnlts given by us, in seconds, do

not differ from the ones ohtained by Diaz (23) in Tlioronghbred Horses, at rest,

utilizing thromboplastin of rabbit’s cerebrum; the averages of 8.6 seconds are

identical. We shonld yel consider that both samples were equivalent as to lhe

numher of animais, for that author worked with 60 animais. Barkhan et al. (7)

and Archer (4) ohtained higher results applying however, thromboplastin of

horses’s cerebrum. Comparing with results ohtained in horses of different raccs.

our prothrombin times are lower than Araujo’s (3) and Kment (34) with llirom-

boplastin of rabbit’s cerebrum, Van Wassenhove’s (58) with thromboplastin of

bovine’s lung. Villard (59) with thromboplastin plus calcium “Biolyon”, Doro-

schkin’s (24) with human thromboplastin and Pinkiewicz (38) with thrombpplastin

“Boche”. The percentual values are not comparable since lhey vary in function

of the standard considered as 100%.

The results of lhe test of usage of prothrombin indicate that over 75% of

the plasmatic prothrombin is consumed 60 minutes after the beginning of lhe

coagulation process and we could not find literature on the subject lo compare with.

The thromboplastin generation test will he considered under two aspects:

First with respect to the lime necessary to happen lhe maximum generation.

Examining the tables and graphs IV and V we verify that for male and female

horses, either applying platelets suspensions of the animal itself or phospholipids

of human cerebrum, the systems show maximum activity always between lhe second

and fifth minutes. In the systems with platelets suspension, lhe average was 3.4

minutes and for System with phospholipids 3.1 minutes. This results acquiece wilii

Archer’s (4) verifications, who utilizing phospholipids of horses, found lhe ma¬

ximum generation between lhe fourth and fifth minute. The applicalion of phos¬

pholipids of human and not horses’s cerebrum is eompletely explained in Barkhan

et al. (7) demonstration, by which, both the lipidic fraction of human or horses

cerebrum may substituto the platelets suspension as a sotirce of platelet thrombo-

plaslinic factors, with no spccificily of species.

The fact that lhe maximum generation always occurs between the second

and lhe fifth minutes makes possible our advice that the test shonld be dono within

this time interval, sufficient to orientate a clinic interpretation, grcatly simplifying

its realizalion.

The second aspect lo be considered is lhe verification of the thromhoplastinic

activity at lhe moment of its maximum generation, value which is expresscd by

the coagulation time of the oxalated plasm poor of platelets. One can casily rea¬

lize, by analysing the results, that though lhe minute in which the maximum

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generation occurs, is the same for either systems wilh platelets or phospholipids,

the thromboplastinic activity is greater in the last case, fact which lias been verified

in a general way l>y Bell and Alton (10) and might also confirmate Fantl and

Marr’s (25) conclusions. However, from these consideration, wc cannot get con-

clusions also bccause lhe experiments were nol done in a way lo permit comparisons

of the different methods. The thromboplastin activity in its maximum generation

in sysleras wilh human phospholipids, appointed as average, is a lillle higher than

the value for an animal found hy Archer (4). Percentual comparison is not pos-

sihle bccause it had to be done in function of the concentration curve which

depends on the standard considered as 100%.

There was nol carc taken in evidenciating sex differences when results were

changed inlo percentage, for this analysis was done though values expressed as

lime unity. As no meaningful differences were found, both male and female horses

were used lo determine the curve of thromboplastin dilution. Same points were

taken into consideration for prothrombin time.

SUMMARY

I he most usual test were carried onl lo the evaluation of the phenomeno of

blood coagulation in I horoughhred Horses 25 males and 25 females, wilh ages

between 2 and 5. No significant differences were found between sexes in the

results of different tests at the rejection levei of 5%. The average values found

aceording to the pooled data of males and females were: coagulation lime: first

tube: 7.5 minutes ± 1.1; second tube: 8.9 minutes ± 1.4; coagulation time of

recalcified plasma: 240.6 seconds ± 69.2; platelets: 105,000/mm 3 ± 33,000;

prothrombin time: a) 8.6 seconds ± 2.5; b) 120.5% ± 58.0; prothrombin

consumption : 78.5 ± 13.5; thromboplastin generation: A) System wilh human

brain extract: a) maxima generation minute: 3.1 ± 0.9; b) maxima activity

in coagulation time of substract plasma: 18.0 seconds ± 6.0; c) activity of

maxima concentration: 107.2% ± 20.5; B) System with platelets of the animal

itself: a) maxima generation minute: 3.4 ± 0.8; b) activity in coagulation

time of substract plasma: 35.9 seconds ± 10.3; c) activity of maxima concentra-

lion: 101.0% ifc 31.7.

The result of blood coagulation time to be considered when the Lee and

White technique is employcd using two tubes, shouhl be the one obtained wilii

the first tube, bccause the lime is shorter and the variability of results smaller

and the second tube ought to be observed only as a witness, lo avoid random

crrors of grale range.

Ackncnvledgment — We thank Dr. Gastão Rosenfeld of the Department of

Physiopathology of Instituto Butantan for his orientation in doing this work, to

Dr. Fernando P. Lima, Veterinarian of the Jockey Club of São Paulo, Institution

from which we obtained the material for the experiments and to everyone who

directly or indirectly helped us.

SciELO

10 11 12 13 14 15

160

C0NTÜ115UT10N TO THE STUDIES OF COAGULOGKAM

IN THOROUGIIBRED HORSES

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SciELO

10 11 12 13 14 15

162

CONTIÍIBUTION TO THE STUDIES OF COAGULOGRAM

IN THOROUGHBRED IIORSES

55. Soulier, J. P. — Larrieu, M. J. — Measurement of thromboplastic factors and

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Mem. Inst. Butantan,

31 : 163 - 170 , 1964 .

L. F. MARTINS, R. GRECCIII and G. ROSENFELD

163

THROMBOPLASTJN GENERATION TEST IN NORMAL HORSES AND

IIORSES 1NJECTED WITH TETA NIC TOXIN *

L. F. MARTINS **, R. GRECCHI »** and G. ROSENFELD ****

Laboratory of Hematology, Instituto Butantan, São Paulo, Brasil

It seems that Zimmermann (15) was lhe íirst author to call tlie attention

lo a possiblc slovvness of the process of blood coagulation in the horse. From

then onward, sevcral researchers demonstrated differences in lhe phenomenon in

the equine species when compared lo the human species, although Soulier and

Larrieu (14) declared lhat lhe concentration of coagulation factors are similar

in the two species.

The greatest difficulties are found in the factors that enter in the formation

of thromboplastin. Reli et col. (2, 3) believe that there is deficiency of anli-

hemophilic factor in the horse plasma, which was confirmed hy Barkhan et col. (1).

On the other hand Sjolin (12) first admitted deficiency of the Christmas factor

hut later on (13) he lhought of a probable insuficiency of a factor similar or

identical lo the Hageman factor.

Fanll e Marr (7) found a significant quantitative difference betwecn the

thromboplastinic factors of horse and human blood, although their activilies werc

similar. Fantl and Ward (8) also observed a low aetivity in the thromboplastic

component of the horse platelets.

Therefore, we thought it would be useful to make a comparative analysis of

lhe aetivity of the thromboplastinic factors, expressed by lhe thromboplastin ge-

neration test in equine and human plasma. Another investigation was about an

eventual difference in the generaling aetivity of thromboplastin among normal

animais and injected with tetanic toxin, and also whether there is an optimum

time in the thromboplastin generation test.

* This work was supported with a grant from the Research Fund of the Ins¬

tituto Butantan (FPIB).

** Department of Histology and Embriology, School of Veterinary Medicin, Uni-

versity of São Paulo.

*** Department of Pathological Anatomy, School of Veterinary Medicin, Univer-

sity of São Paulo.

**** Head of the Department of Physiopathology, Instituto Butantan.

Received for publication in July 29, 1964.

1, | SciELO

164

TIIROMBOPLASTIN GENERATION TEST IN NORMAL IIORSES

AND IIORSES INJECTED WITI1 TETANIC TOXIN

Material and methods

20 normal cquines were used, 14 malc castrated horses and 6 female, and

10 malc horses, also castrated, which had lieen uscd for lhe production of anti-

tetanie scrum. The age of lhe animais was helween 10 lo 20 ycars, all belonging

lo Instiluto Butantan, and lhey were suhmitted lo one same diet. The hlood

was collected with 10% of 0.1 M sodium oxalate frorn the jugular vein, while

the animais were resting and a silieonized syringc was used. The plasma was

obtained hy cenlrifugation of hlood for 10 minutes at 2.500 r.p.m.

The ihromhoplastin generation lest was performed according lo lhe method

of Biggs and Douglas (4) using a platelet suspension of lhe own animal as a

source of platelel-thromhoplastinic factors. The eitrated plasma of the original

technique was substituted hy the oxalated plasma ahsorhed hy barium sulphate,

washed according lo the technique described hy Biggs and Macfarlane (5) used

in a proportion of 0.1 g of lhe salt for 1 ml of plasma. The ahsorption was

made at 37"C for 30 minutes, shaking lhe lubes once in a while. Afterwards,

lhey were centrifuged at 2.500 r.p.m. for 10 minutes; lhe supernatant was removed

and diluled 1:5 lo he used.

The platelets for the suspension were obtained from hlood collected in 10%

of a 3.8% saline diluled sodium cilrate. Tliey were washed three times in saline,

finally suspended in the same solution according lo a concentration ahout 3 times

lhe one of the plasma.

The lest lasted 8 minutes for the normal animais and 5 for lhe animais in-

jected with tetanie loxin. In lhe first case lhe readings were performed every

minute, during the 8 minutes, and in the second case, from the second to lhe

fiflh minute. Two generation tests were done for eacli animal.

For transformation of data in concentration a thromhoplastin dilution curve

obtained with human plasma was used (figure 1). The values obtained in lhe

two experimenls, were transformed in concentration and lhe average, which ro-

presenled the results for each animal, was calculated.

The human values, used as comparison, consisted of lhe results ohlaincd in

lhe Department of Physiopathology of the Instituto Butantan, with 10 individuais,

hoth male and female and of different ages, using their own plalelets with a

similar technique and analysed according lo the same dilution curve.

The levei of rcjection adopled for a statistical comparativo analysis of lhe

groups was 5%.

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CL0TT1NG TIME IN SECONDS

Mem. Inst. Butantan,

31:163-170, 1964.

L. F. MARTINS, R. GRECCHI and G. ROSENFELD

165

FIGURE I

REFERENCE FIGURE 0F HUMAN TH ROMBO PLASTINIC

ACTIVITY WITH PLATELETS SYSTEM IN RELATION

TO TIME IN SECONDS AND PERCENTAGE OF

CONCENTR ATION.

Results

The results obtained, are summarized in lahle I. This tahle shows the mean

values, standard deviation, median, Pearson’s coefficient oí variability and the

estimations of 95% confidence intervals for the average, of the minute in which

the maximum thromboplastin generation and also the maximum activity of the

generated thromboplastin occurred. íl was revealed hy the clotting lime of the

substrate plasma hy the action oí ealcium chloride and of the system in lhat same

minute.

Figure 2 illustrates the distrihution of frequencies for each tested group,

showing also the mean curves of thromboplastin generation.

SciELO

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166

THROMBOPLASTIN GENERATION TE.ST IN NORMAL HORSES

AND HORSES INJECTED WITII TETANIC TOXIN

FIGURE 3E

FREQUENCY DISTRÍBUTION OF T. G.T. CURVES OF NORMAL HUMAN PLASMA, NORMAL

HORSE PLASMA AND PLASMA OF HORSES INJECTED WITH TETANIC TOXIN.

THROMBOPLASTIN %

IIO

IOO

10 -

JNormal humanV

Vormal horseA

Hnjected horsel

MINUTES

3 4

MINUTES

Discussion

ll was already demonstrated lhat the coagulation System of lhe equines shows

differences from lhat of lhe man, in what regards several different factors (6, 9,

11). However, more attention was given to the thromboplastinic factors, because

it is in relation to them lhat most opinions differ. While some (1, 2, 3) admit

that there is deficiency of anti-hemophilic glohulin in liorse plasma, when it is

compared to that of man, others admit deficiency of Christmas (12) or even Hage-

man (13) factor. What really scems to cxist is a quantitative difference of factors

in the two species (7) and not a qualitativo one. Anyway, when both species are

compared, a smaller activity of the thromboplastin generation System of the blood

of equines seems lo be evident, when measured altogether.

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Mem. Inst. Butantan,

31:163-170, 1964.

L. F. MARTINS, R. GRECCHI and G. ROSENFELD

1G7

TABLE I — SUMMARY OF THE RESULTS OBTAINED IN THROMBOPLASTIN GENERA-

TION TEST FOR MAN, NORMAL HORSES, AND INJECTED WITH TETANIC TOXIN,

CLASSIFIED ACCORDING TO THE TESTS PERFORMED AND OF THE MEASURES OF

POSITION AND CALCULATED VARIABILITIES

Minute of maximum

generation

Maximum activity in % of

clotting time

Human

Normal

horse

Injected

horse

Human

Normal

horse

Injected

horse

Average .

3,6

3,4

3,2 '

99,2

31,7

37,2

Standard deviation .

0,69

1,01

0,92

6,3

14,92

10,5

Median .

3,5

3,0

99,0

33,5

42,7

Pearson’s coef. of variab. % .

19,16

29 24

28,75

6,44

47,06

28,44

95% confidence interval foi

average .

3,07

4,12

2,96

3,93

2,51

3,89

94,38

104,01

24,54

38,86

29,23

45,17

The analysis of our resulls shows a wide linc of transvariation with lhe in-

tervals of confidence calculated for the minule in which lhe greatest ihrondioplastin

activity is developed in relation lo lhe human plasma, normal equine plasma and

plasma of horses injected with the tetanic toxine, thus demonstrating that there

is no significant difference for lhe levei of rejection adopted. Therefore, we can

conclude that the time which is necessary for this activity to develop is the same

for the man and horse, between the tliird and fourth minute, as was ohserved by

Martins (10).

In relation to lhe maximum aclivily of the generated thromboplastin, lhe

same transvariation is verified between the normal horses, and the ones injected

wilh tetanic toxin, however lhe confidence interval for these two groups of animais

is quite different from the one found for man, permitting us to assume that lhe

aclivily of the equine thromboplastin is much smaller than that of the man (fi¬

gure 2).

Therefore it is not necessary to make determinations before the second and

after lhe fifth minute, in the thromboplastin generation test of Biggs and Douglas.

SciELO

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168

THROMBOPLASTIN GENERATION TEST IN NORMAL IIORSES

AND IIORSES INJECTED WITII TETANIC TOXIN

SlJMMARY

Normal liorses liavc a smaller amount of thromboplastin than normal humans

when measurcd by the thromboplastin gencration tesl wilb tbe method of lüggs

and Douglas.

Horses injected with tctanic toxin for tbc preparation of byperimmune serum

liavc lhe samc thromboplastin activity as tbc normal animais.

The maximum thromboplastin gencration is observcd at tbc tbird or fourtb

minute with tbe method of lüggs and Douglas, in normal liorses and in horses

injected with tetanic toxin, and are tbe same times observed in normal humans.

Resumo

Cavalos normais têm menor quantidade de tromboplastina do que o homem

normal quando medida pelo teste de geração de tromboplastina, método de lüggs

e Douglas.

Cavalos injetados com toxina tetânica para preparação de sôro hiperimimc,

têm a mesma atividade tromboplastínica que os animais normais.

O máximo de geração de tromboplastina é observado no terceiro ou quarto

minuto com o método de lüggs e Douglas, tanto nos cavalos normais como nos

injetados com toxina tetânica e éste tempo é o mesmo que o observado no homem

normal.

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Mem. Inst. Butantan,

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G. ROSENFELD and F. G. DE LANGLADA

171

C0RTIC0STER01D AND ACTH IN EXPERIMENTAL P0IS0N1NG W1TM

ANIMAL VENOMS *

G. ROSENFELD and F. G. DE LANGLADA

Laboratory of Hematology, Instituto Butantan, São Paulo, Brasil

Corticosteroids or ACTH liave been utilized in the treatment of human beings

bltten by poisonous snakes. Some authors have attributed beneficiai activity lo

lliese liormones, wbile ollier workers have found not only unsatisfactory results,

but also have concluded that lhese drugs provoke inhibition of the activity of anti-

venom seruni. Russel and Emcry (6) made a report on the concerning literature.

Schottler (7) utilized ACTH, cortisone and hydrocortisone in mice, injected simul-

taneously with DL50 of snake venoms ( Bothrops jararaca or Crotalus durissus

terrijicus ) and did not observe change as concern either mortality or local reaction

of the bothropic venom. Doses form 2,5 to 25 mg/kg of adrenocorticotropic

hormone (ACTH) and cortisone and 2 mg/kg of hydrocortisone were used.

Deichmann and otliers (2) made experiments with venom of Crotalus adamanteus

in dogs, having observed the reduction of mortality with injections from 200 to

650 mg of hydrocortisone; lhe results were more satisfactory when immediate

treatment was applied and were still favourable, but not so good when corticoid

was injected 4 hours afler lhe venom. Russel and Emcry (6) cmployed methyl-

prednisolone and hydrocortisone in doses from 5 lo 500 mg/kg in mice, injecting

venom of Ancislrodon contortrix, they concluded that, not only lliere was no pro-

tcction, but also that the treatment seemcd to produce unfavourahle results, either

due lo the venom action or to the suppression of the immunizing mechanism of

defense.

As the existing discrepancics were so numerous, botli in clinicai ohservations

and experimental works, il seemcd necessary once more to test the action of cor-

licoids on animais injected with snake, spider and scorpion venoms, associating

or not the treatment with specific antivenom serum. The chosen venoms were

each diverse from another, so that it woidd be possible lo come lo a greater

generalization than the referred past works.

* This work was supported with a grant from the Research Fund of Instituto

Butantan (FPIB).

Received for publication in March 7, 1963.

2 3

5 6

11 12 13 14 15

172

CORTICOSTEROID AND ACT11 IN EXPERIMENTAL

POISONING WITH ANIMAL VENOMS

Material and metiiods

Venoms of Ratllcsnake ( Crotalus durissus tcrrijicus) and Jararaca ( Holhrops

jararaca), cxlracted hy pressing lhe glands, wcre ulilized. 'lhe spider (Phoneu-

tria /era) and scorpion ( Tityus serrulatus) venoms vvere obtained hy elcctric sliock

of the preys. All venoms wcre dried out in lhe vacuum and kept dry protected

from light, lhey wcre always a pooling obtained from a large number of animais

and lhe solnlion was rnade on the saine day lhey were injected.

Albino mice weighing from 20 lo 35 g were used. Venom and corticoids

were injected intravenously in the tail or intramuscularly into a thigh in order

lo have a 3 mm penetralion of lhe injected needle in all cases. They were kepl

under observation several days and vvere fed in the usual way. The results liere

reported concern the animal survival after one or two days, bccause no modifica-

lion of grealer importance was observed afler lhese periods. For eacli experiment,

on the same day, four groups of mice were used. The first group received only

venom and served as control for lhe second group which was injected wilh venom

and hormone; the tliird group received venom and specific antivenom serum for

controlling lhe fourth grouj) which was injected wilh venom, antivenom serum

and hormone.

Antivenom sera were specific for each inoculated venom and the ones ulilized

were of routine production in lhe Instituto Butantan. These sera are purified hy

pepsin hydrolysis and precipitation of lhe antihody-carrying fraction. The injected

doses corresponded to one lhe capacity of in vitro neutralization of lhe correspond-

ing inoculated doses of venom, and were introduced subcutaneously or intravenously

al the same time as the first injection of lhe hormones.

Zinc ACTíI of long action or Dexamcthasone-phosphate were used for intra¬

muscular or intravenous injections, wilh variable doses repeated afler 4, 8, 12 or

24 hours. Wilh lhe grealer doses of corticoid, some agitation could be noticed

in mice. They also showed polyphagia and a tendency lo attack otlier animais

presenting necrosis after lhe first day (inoculated wilh bothropic venom).

Hesults

Table 1 presents lhe results obtained in experiments done wilh snake, spider

and scorpion venoms and the respectivo treatment wilh antivenom serum and ACTH.

Table 2 presents lhe results obtained in experiments wilh lhe same venoms

and treatment wilh antivenom serum and Dexamethasone.

In Table 3 all results of Table 1 were accumulated and the data of each

group were compared wilh each other lo analyse the significance of the differenl

treatments. ACTH lias signifieantly diminished lhe mortality, when spider venom

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Mem. Inst. Butantan,

31 : 171 - 184 , 1964 .

G. ROSENFELD and F. G. DE LANGLADA

173

was injected without serumtherapy, liut produced a negative effect increasing lhe

mortality when antivenom serum was given with the same venom. No effect was

ohserved wilh crolalie, hothropic or scorpionic venom with or without serumtherapy.

In Tahle 4 all results of Tahle 2 were reported and analysed in the same

manner as in Tahle 3. Dexamethasone has significantly diminished the mortality

when spider and scorpion venoms were inoculated and antivenom was nol given,

but inereased the mortality when crotalic or spider venoms were injected and serum¬

therapy was given. No effect was seen with crotalic or hothropic venom without

serumtherapy and also with hothropic an scorpion venom when antivenom serum

was given.

In all experiments the results have shown a very significant protective activity

of the specific antivenom sera which were injected 15, 30 or 60 minutes after

the venom (Tables 3 and 4).

Discussion

Apparently results are contradictory, but a more careful analysis permits a

better understanding. Table 5 summarizes favourable, unfavourable and absence

of effects of hormone treatments according to their significance measured by the

Chi-square test.

ACTH did not have any significant activity as to mortality in experimental

envenomation of mice with venoms of Crotalus durissus terrificus and Bothrops

jararaca associated or not to treatment with specific antivenom serum. These re¬

sults agree with lhat of Schôttler (7) who studied the same venoms and with

Minton (4) who experimented the venom of Ancistrodon contortrix in mice, but

neither of them did associate serumtherapy. However, it was not the same for

spider venom ( Phoneutria fera ) and scorpion venom ( Tityus serrulatus). Mor¬

tality was significantly diminished by ACTH in animais injected only with the

spider venom (P. fera) while a markedly unfavourable result was obtained when

serumtherapy was associated. The beneficiai activity in the first case is possibly

due to a favourable action of the hormone on the pain stress caused by this venom

which is of great intensity in human cases. In the second case, the negative action

could be attributed lo an eventual neutralization of the serum effect as it was sug-

gested by Knyvett and Molphy (3) in human cases bitten by snakes having neuro-

toxic and hemolytic venom, or by Chang and Veinstein (1) in experiments with

tetanus toxin and cortisone associated or not to serumtherapy.

On the other hand, in experiments with lhe scorpion venom ( T. serrulatus)

ACTH had a slight protective action but not significant when not associated to

serumtherapy; this venom likewise that one of P. fera provokes intense pain,

nevertheless there was no negative action of ACTH by its association with serum.

1, | SciELO

TABLE 2 — MORTALITY OF MICE TREATED WITH VENOMS OF SNAKES, Crotalus durissus terrificus (C.d.t.), Bothrops jararaca (B.j.), SIPDER

Phoneutria fera (P.f.) AND SCORPION Tityus serrulatus (T.s.), ALONE OR IN ASSOCIATION WITH A CORRESPONDING DOSES OF SPECIFIC

ANTIVENOM SERUM, AND/OR DEXAMETHASONE. OBSERVATIONS MADE AFTER 24 HOURS

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180

CORTICOSTEROID AND ACTH IN EXPERIMENTAI.

POISONING WITH ANIMAL VENOMS

As for Dexamethasone in doses varying from 0.02 to 0,5 mg per mouse, lliere

vvas a significant negative adiou increasing mortality caused by crolalic veuoni

and a slight tendency lo this effect with hothropic venom, though there vvas no

activity similar lo ACTH when serumtherapy vvas not done. With spider venom

(/'. fera ) and scorpion venom I T. serrulatus) Dexamethasone shovved a marked

protection against lhese venoms, when serumlherapy vvas not given, hut likewise

the ACTH, it had a negative action on the spider envenomation when serumtherapy

was associated and no action al all was seen on lhe scorpion envenomation.

It does not seem that corticoids woidd aggravale these envenomations by sup-

pressing the mechanism of immunological defense as it has heen suggested by

Russel and Emery (6), for in none of the venom inoculated groups that have

heen treated only with hormones the mortality was increased; there vvas ahsence

of changes or beneficiai activity was observed as to spider and scorpion venoms.

On the other hand, the negative effect also can not be attributed to a neutraliza-

tion by corticoids of the antivenom serum effect according to a hypothesis of

Knyvett and Molphy (3) since the negative effect was not systemalic in the hor-

mone treated groups which have received associated serumthera|)y, as can be ob¬

served in Table 5.

In cases of spider and scorpion venoms not treated by serumtherapy in which

ACTH as vvell as Dexamethasone diminished mortality, this beneficiai effect can

be attributed to the decrease of the local pain by lhe anti-inflammatory action of

these hormones. It is known that these venoms have neurotoxins which provoke an

intense local pain and this pain stress contrihutes very much to aggravate the general

condition since the mere suppression of pain by other agents withdraws a whole

complex of symptoms in man as it was already stated by Rosenfeld et al. (5).

The fact that there was no similar action on crolalic and hothropic envenomation

can be explained since both venoms do not have pain provoking neurotoxins which

act directly on nerves; the one of Crotalus clarissas terríficas has neurotoxins act-

ing only on the central nervous System without causing any pain and the venom

of Rothrops jararaca causes local pain by the proteolytic action on tissues al lhe

site of the bite. Summarizing, hormones would not have a direct action on the

neurotoxins of spider and scorpion venoms, but they would mitigate the pain pro-

voked by lhese loxins and would thus remove its consequent stress.

The aggravation of the poisoning by 1‘honeutria fera when the treatment with

ACTH or Dexamethasone is associated to serumtherapy could be tentatively ex¬

plained by assuming that the venom alone would produce a discharge of both

hormones and lheir supplemental administration would come to reenforce this

venom action. When serumtherapy is not given, lhe.y do not shovv negative effect

since they mitigate the pain stress thus decreasing one of the aggravating compo-

nents of the poisoning. Together with the antivenom serum which eliminates and

diminished pain, hormones would only act through their harmful side synergically

with the venom. Envenomation by venom of Crotalus durissus terrijicus would

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TABLE 5 — SCHEMAT1C RESULTS OF EFFECTS OF TREATMENT WITH ACTH OR

DEXAMETHASONE ASSOCIATED OR NOT WITH SERUMTHERAPY ON THE MORTALITY

OF MICE BY THEIR STATISTICAL SIGNIFICANCE AS SHOWN BY THE CHI-SQUARE TEST

SUBSTANCES INJECTED

HORMONE

ACTH

Dexamethasone

Crotalus durissus terrificus + hormone .

None

Crotalus durisus terrificus + antivenom and hormone ..

None

Negative

Bothrops jararaca + hormone .

None

Bothrops jararaca + antivenom and hormone .

None

Possibly

favorable

Phoneutria fera + hormone .

Favorable

Phoneutria fera + antivenom and hormone .

Negative

Tityus serrulatus + hormone .

Possibly

favorable

Favorable

Tityus serrulatus + antivenom and hormone .

None

not be aggravated by ACTH administration only by that of Dexamethasone, because

this venoni would not provoke an ACTH discharge and only of corticoids. These

interpretations would lead lo assume that venom of Phoneutria fera provokes an

intensive ACTH and corticoids discharge, while that of Crotalus durissus terrificus

and Bothrops jararaca would only discharge corticoids. The other experimented

scorpion venom would not have either one of these actions.

Results show that no generalization is possihle as to indication or counter-

indication of corticoids in animal venoms poisonings. The table of results is Iike

a mosaic which as the utmost would permit generalization only for similar venoms.

Thus ACTH and Dexamethasone are useful and indicated in cases of spider and

scorpion envenomations, when lhe venoms are similar lo those of Phoneutria fera

and Tityus serrulatus. They are formally counterindicated in these same cases

when specific antivenom serumtherapy is given, Dexamethasone shall be counler-

indicated in envenomations by snakes having similar venoms to those of Crotalus

durissus terrificus, i.e., hemolytic and neurotoxic venoms.

An interpretation of the reasons for these apparently contradictory activities

will not only allow a better indication of these hormones, but will also be useful

to guide and suggest the physiopathogenic action of these venoms, besides permit¬

SciELO

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182

CORTICOSTEROID AND ACTII IN EXPERIMENTAL

POISONING WITH ANIMAL VENOMS

ling a better understanding of lhe action and indicalions of ACTH and corticoids

in envenomations.

A secondary observation to ibe purpose of this paper automatically obtained

due lo lhe seheme adopted for experiments is tlie cvidence that serumtherapy with

specific antivenom scra, without any auxiliary treatmenl is really able to diminish

mortality provoked by venonis.

Summary

Repeated intramuscular doses of ACTH did not change mortality in mice in-

jected with snake venoms ( Crotalus durissus terrificus and Bothrops jararaca)

Ireated or not with specific antivenom scrum. On tbe olher liand, it significantly

diminished mortality in animais injected with spider venoms ( Vhoneatria jeru)

but showing a negative effect on this kind of envenomation when serumtherapy

was associated. With scorpion venom ( Tityus serrulatus) ACTH demonstrated a

tendency to protect survival of animais when no serumtherapy was given and

ahsence of any modification when associated to serum.

Repetead intramuscular or intravenous doses of Dexamethasone did not change

mortality in mice injected with snake venoms (Crotalus durissus tcrrijicus and

Bothrops jararaca) not treated with serumtherapy. When associated to antivenom

.serumtherapy, it demonstrated an evident negative effect in the case of crotalic

venom and a tendency towards this effect with bothropic venom. With spider

venom ( Bhoncutria fera) and scorpion venom ( Tityus serrulatus) Dexamethasone

significantly diminished mortality when serumtherapy was not associated and when

it was given, mortality was increased in cases of spider venom and no modifica-

tions occur with scorpion venom.

ACTH and corticoid act differently according to lhe venom also when treat-

ment antivenom serumtherapy is associated.

Complementary, the efficacy of specific antivenom serumtherapy was de¬

monstrated since it significantly diminished mortality in mice injected with venoms

of Crotalus durissus tcrrijicus, Bothrops jararaca, Phoneutria jeru and Tityus ser¬

rulatus.

Resumo

O ACTH em doses repetidas injetadas por via intramuscular não modificou

a mortalidade de camundongos injetados com venenos de serpentes ( Crotalus du¬

rissus tcrrijicus e Bothrops jararaca), tratados ou não com sôro antiveneno espe¬

cífico. Ror outro lado, diminuiu significativamente a mortalidade nos animais

injetados com venenos de aranha ( Bhoncutria jeru), mostrando porém um efeito

negativo nêsse envenenamento quando se associou a soroterapia. Com o veneno

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de escorpião ( Tityus serrulatus), demonstrou uma tendência à proteção da sobre¬

vivência dos animais quando uão se fêz a soroterapia e ausência de qualquer mo¬

dificação quando foi dado também o sôro.

A Dexamctazona, em doses repetidas injetadas por via intramuscular ou in¬

travenosa, não modificou a mortalidade de camundongos injetados com venenos

de serpentes ( Crotalus durissus terrificus e Bothrops jararaca ) não tratados pela

soroterapia, quando se associou o tratamento pelo sôro antiveneno demonstrou um

efeito negativo no caso de veneno crotálico e uma tendência no mesmo sentido

com o veneno botrópico. Com os venenos de aranha ( Phoneutria fera) e de es¬

corpião (Tityus serrulatus) a Dexamctazona diminuiu significativamente a morta¬

lidade quando não foi feita a soroterapia e quando esta foi aplicada aumentou a

mortalidade no caso de veneno de aranha, não tendo produzido modificações com

veneno de escorpião.

() ACTH e os corlicóides agem diferentemente conforme os tipos de venenos

e também quando se associa o tratamento com soros antivenenos. Foi sugerida

uma hipótese para explicar essas ações aparentemente contraditórias.

Complementarmente foi demonstrada a eficiência da soroterapia específica que

diminuiu significativamente a mortalidade de camundongos injetados com venenos

de Crotalus durissus terrificus, Bothrops jararaca, Phoneutria fera e Tityus ser¬

rulatus.

ACKNOWLEDGEMENTS

We thank Dr. Wolfgang Bücherl for samples of venom of Phoneutria fera and

Tityus serrulatus, to Merck, Sharp & Dohme for the Dexamethasone and to Cia.

Farm. Organon do Brasil for the ACTH Zinc used in this work.

References

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DIFFERENCE BETWEEN LETHAL DOSES OF TOXIC SUBSTANCES

INJECTED INTRAVENOUSLY AND INTRA-ARTERIALLY

G. ROSENFELD and F. G. DE LANGLADA *

Laboratory of Hematology, Instituto Butantan, São Paulo, Brasil

According to Braier (1, 2), when a toxic hemolytic substance, such as ben-

zene, is injected intravenously in rabbits, 0,12 ml/kg provoke hemolysis and dealli

oí the animal in a few minutes, whereas this dose can be increased five times in

intra-arterial injection without producing such manifestations. This diversity in

the threshold of the toxic dose is due to the retention of the injected substance in

the region served by the artery, even if no interruption of venous efferent circula-

tion is made. This fact can also be observed with chloroform, saponin or non-

hemolytic toxics, such as strychnine sulphate, potassium chloride, potassium cyanide

and sodic luminal (1, 2).

In this paper, a comparison between these two routes of administration was

made, as regards the lethal potency on guinea-pigs of benzene, potassium cyanide

and venom of Bothrops jararaca.

Material and metiiods

Cuinea pigs were used. The animais were anesthetized intraperitoneally with

nembutal with doses of 15 mg/kg. Median laparotomy was made and the injec-

tions were given in the abdominal aorta or in the distai cava vein. Animais thus

treated, but not injected with toxics (controls) survived 48 hours. In the experi-

ments with dogs, injections were given in the femoral vein or femoral artery with¬

out anesthetics or skin incision.

The criterion of observation time for death varied according to the drug or

the kind of animal that had been used. In guinea pigs injected with benzene,

potassium cyanide and snake venom (Bothrops jararaca), the observation lime

was restricted to 30 minutes for the two first mentioned substances, and 60 minutes

for the last one; short times were selected because the animais were anesthetized

and laparotomized and the action of the drugs with such doses was very rapid.

Dogs injected with benzene were observed for 24 hours since they had not been

submitted to any traumatic operation.

* Fellow of the Research Fund of Instituto Butantan (FPIB).

Received for publication in March 7, 1963.

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DIFFERENCE BETWEEN LETHAL DOSES OF TOXIC SUBSTANCES

INJECTED INTRAVENOUSLY AND INTRA-ARTERIALLY

Results

Intravenously injected benzene killecl all guinea pigs from lhe dose of 0,2

ml/kg or higher, vvhile intra-arterially lhe same residis were observed only with

doses 32 times higher, i.e., 6,4 ml/kg (Table 1) : in dogs the inlravenous doses

of 0,2 ml/kg killed 3 animais in 3, 4, and 5 minutes respectively, surviving onlv

one animal: intra-arterially the same dose killed only one animal in 80 minutes,

having survived three of them (Table 2). For larger doses, mortality was the

same in both kinds of injections, but survival limes were markedly longer wben

doses until 0,8 ml/kg were injected arterially.

Potassium cyanide injected intravenously killed all guinea pigs with doses

starting from 10 mg/kg, while the same effect appeared only with 20 mg/kg

when injected intra-arterially (Table 1).

Snake venom of Bothrops jararaca injected intravenously, started killing all

guinea-pigs with 1 mg/kg, whereas only the dose of 4 mg/kg produced the same

effect when injected intra-arterially (Table 1).

Discussion

The intra-arterial route has been utilized in chemotherapy as lhe most direct

route for obtaining high concentrations of the therapeutical agent at the tumour

site, permitting even the inlravenous use of higher doses than usually, as it had

been reported. by Byron. Singh, Bierman and Kelly (1959). The principie in-

dicated by Braier(l, 2) however, is quite different: he demonstrated that doses

not imaginable as possible, conld be injected intra-arterially, based on the know-

ledge of the intravenous toxic dose.

Results reported in this paper completely confirmed Braier’s affirmations (1960-

1961) that to cause death by toxic substances, much higher doses are required

by intra-arterial than by intravenous injections. Probably, the explanation of this

fact is the retention or the better absorption of the substance by the tissues of

the arterial region, as it was BraieFs observation (1960-1961).

The toxic threshold for the arterial route in relation to the venous one, varied

with the injected substance, since its absorption must be different for eacli drug,

according to its affinity to the surrounding tissues. This fact shows that identical

results cannot be generalized or induced to other substances: an experimental ve-

rification for each drug is necessary in order to define the difference between

the venous and the arterial toxic dose for each one of them. Only then, the

arterial injection of high doses of lhe most suitable substances for this purpose

should be tried.

With this verification, new possibilities for chemotherapy can be foreseen, since

it will eventually be possible to inject cytotoxic drugs intra-arterially and regionally

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31:185-190, 1964.

in mucli higher doses than lhose utilized now, that would be lethal if injected

intravenously. This way, the attainment of sterilizing or total chemotherapy could

he possible for cases of localized tumours.

SummarY

Anesthetized and laparotomized guinea-pigs were injected intravenously in

the distai cava and intra-arterially in the abdominal aorta wilh several toxic subs-

tances. The observation time was 30 minutes for those injected with benzene

and potassium cyanide and 60 minutes for those injected with snake venom.

There is a great difference between mortal doses, when a toxic substance is

injected intra-arterially or intra-venously. The mortal dose was always greater

by intra-arterial injection, and also distinct for each substance. For benzene, it

was 0,2 ml/kg intravenously and 6,4 ml/kg intra-arterially. For potassium cya¬

nide, it was 10 mg/kg intravenously and 20 mg/kg intra-arterially, and for snake

venom ( Bothrops jararaca ), it was 1 mg/kg intravenously and 4 mg/kg intra-

arterially.

Dogs not anesthetized or traumatized by surgery, shovved twice more resistance

to benzene injected in lhe femoral artery than in the femoral vein.

Resumo

Cobaias anestesiadas e laparotomizadas foram injetadas por via venosa na

cava distai e por via arterial na aorta abdominal com várias substâncias tóxicas.

O tempo de observação foi de 30 minutos para as injetadas com benzeno e cia-

nureto de potássio, e de 60 minutos para as injetadas com veneno ofídico.

A dose mortal de benzeno foi de 0.2 ml/kg por via venosa e de 6,4 ml/kg

por via arterial. A dose mortal de cianureto de potássio foi de 10 mg/kg por

via venosa e 20 mg/kg por via arterial. () veneno de Bothrops jararaca foi

mortal nas doses de 1 mg/kg por via venosa e 4 mg/kg por via arterial.

Cães não anestesiados nem traumatizados cirurgicamente, injetados na veia

ou na artéria femoral com benzeno. mostraram resistência duas vêzes maior quan¬

do injetados por via arterial.

Rkfkrknces

1 . Braier. L. — Inyección Intra-arterial e Inyección Intravenosa de Substancias

Hemolíticas en et Conejo. Semana médica, 117:1232, 1960.

2. Braier, L. — Injection intraartérielle versus injection intraveineuse de substan-

ces hémolytiques chez le lapin. Arch. Ont. Pharmacodyn., 133:20, 1961.

3. Byron, R. L., Singlu B. P., Bierman, H. R. & Kelly, K. H. — Intra-aortic Nitro-

gen Mustard Therapy in Advanced Pelvic Malignancies. Surgery, 45:634,

1959.

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Mem. Inst. Butantan,

FERES SALIBÁ

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ESTUDO ANATOMOPATOLÓGICO DA EVOLUÇÃO DA NECROSE PRODU¬

ZIDA EXPERIMENTALMENTE POR VENENO DE BOTHROPS JARARACA.

INFLUÊNCIA DE SUBSTÂNCIA ÓRGANO-HEPARINÓIDE *

FERES SALIBA

Secção de Anatomia Patológica, Instituto Butantan, São Paulo, Brasil

O veneno de Bothrops jararaca (Wied, 1824) provoca extensas necroses no

local da inoculação experimental ou acidental. Amorim, Mello & Saliba (1) des¬

creveram experimentalmente o quadro macro e microscópico do processo em coe¬

lhos, demonstrando a existência de extensas sufusões hemorrágicas no hipoderma

e musculatura adjacente, necrose de coagulação gangrenosa no ponto de inoculação,

um estado de estase e pré-estase, além de capilares contendo trombos hialinos na

luz. Descreveram, também, forte edema e hemorragias peri-capilares e sufusões

hemorrágicas por confluência, como consequência do estado de peri-estase. Re¬

lataram também degeneração hialina de Zenker cm feixes musculares e ainda hia¬

lino-necrose de um pré-capilar. Na parte periférica, descreveram uma larga zona

de reação inflamatória exsudativa, caracterizada por intensa infiltração de granu-

lócitos neutrófilos e de linfócitos.

Eichbaum (7), estudando a ação dermatotóxica do mesmo veneno, concluiu

que, "a afinidade das dermatotoxinas para com o tecido cutâneo parece ser muito

grande, visto que a injeção de doses altas de antitoxina não conseguem neutralizar

o veneno injetado poucos minutos antes, no mesmo lugar”.

Inúmeros trabalhos clínicos (17, 16, 14, 6, 2, 8, 3, 9, 15, 4, 10 e 11) sôbre

o heparinóide de órgãos animais, afirmam sua capacidade de lesar trombos, de

reabsorver hematomas e de ter marcada influência sôbre a cicatrização cutânea

em vários tipos de lesões.

Degni & Langlada concluiram ter a substância heparinóide influência benéfica

sôbre a cicatrização cutânea das áreas necróticas produzidas pelo oleato de mono-

etanolamina injetado na orelha de coelho com o fim de determinar tromboses lo-

* Trabalho realizado com auxílio do Fundo de Pesquisas do Instituto Butan¬

tan (FPIB).

Recebido para publicação em maio de 1963.

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ESTUDO ANÁTOMO-PATOLÓGICO DA EVOLUÇÃO DA NECROSE

PRODUZIDA EXPERIMENTALMENTE POR VENENO DE

Nas experiências relatadas neste trabalho, estudou-se anátomo-patològicamente

a evolução da necrose produzida em coelhos pela injeção de veneno de B. jararaca

e verificou-se se o mesmo seria influenciado pela aplicação de anticoagulante de

pulmão de vitela (Hirudoid Luitpold-Werk).

Material e métodos

Neste trabalho foram utilizados 32 coelhos machos de 2,5 kg, cujas orelhas

tinham sido depiladas manualmente cinco dias antes do experimento. Na face

externa da região média de uma orelha de cada animal, injetava-se subcutânea-

mente 1,5 mg de veneno-padrão de B. jararaca (dose mínima mortal para pom¬

bos: 2 jiig), dissolvidos num volume de 0,15 ml de solução de cloreto de sódio a

8,5 °/oo • Seis horas após, cada animal recebia intravenosamente, antitoxina bo-

trópica em dose cinco vêzes superior à necessária para a neutralização do veneno

administrado. Os animais foram distribuídos, 48 horas após a administração do

veneno, em dois grupos de 16, recebendo cada animal do primeiro grupo uma

aplicação local diária de 1,3 g de pomada, contendo em 100 g, 1 g de substância

anticoagulante do tecido pulmonar de vitela, durante 7 dias. Os do segundo grupo

recebiam idêntico tratamento mas não se administrava a pomada.

No final do experimento todos êles foram sacrificados e as orelhas necrosadas

eram fixadas em formol neutro a 10%, incluindo-se em parafina um segmento

necrosado, corando-se os cortes resultantes pela hematoxilina-eosina ou, para de¬

monstrar pigmento hemosiderótico, pelo método de Mac Callum Hall.

Resultados

Aspecto macroscópico c desenvolvimento do processo

Tanto nos animais tratados como nos não tratados com a substância hepari-

nóide, 2 horas depois da inoculação havia intenso edema, e flexão da orelha para

baixo (Fig. 3A). Concomitantemente, notava-se forte hiperemia e a formação de

uma volumosa flietena que se rompia ao cabo de 24 horas. O rompimento da

flictena deixava em seu lugar uma área isquêmica de necrose. Em alguns casos

observavam-se hemorragias mais ou menos acentuadas, de curta duração, conse¬

quentes ao rospimento da flictena (Fig. 3A). Os vasos da orelha injetada apre¬

sentavam-se dilatados e repletos de sangue, e o edema agora atingia o máximo

de seu desenvolvimento. Sôbre a área isquêmica de necrose, formava-se uma

placa de fibrina, a qual, à medida que decorriam os dias ia-se transformando

numa crosta sêca (Fig. 4C). A necrose, nos casos mais graves, perfura a orelha,

comprometendo a cartilagem e o tecido correspondente ao lado oposto (Figs. 215

e 4B). O edema desaparecia gradualmente até que, por fim, nos casos tratados,

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êle quase se limitava a uma estreita faixa bem delimitada, que circundava o ponto

de inoculação, enquanto que na orelha dos coelhos não tratados, persistia numa

faixa maior e mal delimitada. Às vêzes a lesão se ramificava e se desmembrava

em dois ou três focos, no máximo, separados, porém próximos.

Macroscopicamente nos casos mais graves (Figs. 2 e 4), havia, sob a crosta

sêca, perda de tecido em grau acentuado com massas necróticas e às vêzes um

pouco de pus. Nos menos graves a crosta caía ao cabo de 6 a 7 dias e observa¬

vam-se nítidos sinais de cicatrização (Figs. 1 e 3).

No início, as alterações desenvolviam-se nos dois grupos de animais, com os

aspectos já referidos. Mais tarde, todavia, os tratados apresentavam algumas par¬

ticularidades favoráveis, como se pode ver na tabela I, caracterizadas por uma

evolução mais adiantada de cura em relação aos testemunhas. Na tabela, a in¬

tensidade dos processos é expressa de + a +++, sendo que + significa grau

moderado, H—b grau evidente e H—b+ grau intenso, dependendo da extensão da

lesão, medida em centímetros.

TABELA I — INFLUÊNCIA DA SUBSTÂNCIA ÕRGANO-HEPARINÓIDE SOBRE AS LESÕES

OBSERVÁVEIS MACROSCOPICAMENTE

Início da experiência

(2 dias)

Fim da experiência

(9 dias)

+ + +

+ +

+ + +

+ +

Não tratados

Necrose .

—

Edema .

—

Cicatrização .

—

Tratados

Necrose .

—

Edema .

—

Cicatrização .

—

Coelhos com pêso aproximado de 2,5 kg, injetados subcutãneamente com 1,5 mg de

veneno padrão de B. jararaca, dissolvido em 0,15 ml de solução de cloreto de sódio a 8,5»/

e tratados intravenosamente com antitoxina botrópica 6 horas após. Os animais do grupo

B recebiam, 48 horas depois, uma aplicação local diária de pomada contendo 1% de subs¬

tância anticoagulante do tecido pulmonar de vitela, durante 7 dias.

+ grau leve, + + grau médio, + + + grau intenso, 0 ausência.

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Figs. 1 a 4 — Coelhos injetados por via subcutânea na orelha com

1,5 mg de veneno de B. jararaca.

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FERES SALIBA

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Aspectos microscópicos

O exame microscópico, cujas lâminas foram examinadas ao acaso, com o fim

de evitar erros subjetivos, revelou, nos dois grupos de animais, nos casos mais

graves, o seguinte quadro: Na região da inoculação, havia uma extensa área de

necrose de coagulação do tecido, que penetrava profundamente, atingindo a hipo-

derma, chegando a ultrapassar, em alguns casos, a própria cartilagem, que se

apresentava rompida, permitindo que o processo se manifestasse também na face

interna da orelha (Fig. 5). Ao redor das massas necrólicas, havia regeneração

do tecido adjacente, caracterizada por intensa proliferação de tecido de granulação,

rico em vasos neoformados, apresentando numerosíssimos granulócitos eosinófilos

(Figs. 5 e 6). Havia forte edema, hiperemia intensa e quase sempre hemorra¬

gias difusas (Fig. 7), principalmente nas partes superficiais. Nos bordos ocorria

proliferação mais ou menos acentuada do epitélio de revestimento, notando-se no

tecido conjuntivo subcutâneo, focos inflamatórios de natureza Ieucolinfocitária es¬

parsos e perivasais. Quando o processo se estabelecia muito próximo de arterío-

las, notava-se uma intensa proliferação da adventícia. Na área necrosada, encon¬

travam-se raras vênulas trombosadas com hialinização das paredes, parcial ou

inteiramente destruídas.

Nos casos pouco graves, notava-se que a área de necrose era bem menor,

melhor demarcada por tecido de granulação e não apresentava as massas necró-

ticas centrais (Fig. 8). 0 tecido de granulação evidenciava intensa infiltração

eosinofílica. Os vasos apresentavam-se com sangue, não havendo, porém, hipere¬

mia acentuada. Havia edema hem circunscrito e pouco acentuado. No seio do

tecido notavam-se ainda pequenos focos inflamatórios de natureza leucocitária e

alguns perivasais. A reepitelização era bem evidente, chegando por vêzes a um

“restitutio ad integrum” (Fig. 9).

Em todos os cortes corados pelo método de Mac Callum Hall, havia deposição

de pigmento hemossiderótico em maior ou menor grau, demonstrando ter havido

hemorragias também nas adjacências da lesão (Figs. 10 e 11).

A tabela II mostra a intensidade e a frequência dos vários componentes das

lesões microscópicas mais características no grupo tratado e no grupo testemunha,

expressa nos símbolos já convencionados de + a +++. Nota-se particularidades

favoráveis aos animais tratados, no que se refere à necrose, edema, hemorragia,

hemosiderose, hiperemia, reepitelização e cicatrização, indicando que na altura

dos nove dias, nos animais testemunhas, o processo estava em evolução mais atra¬

sada do que nos animais tratados.

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ESTUDO ANÁTOMO-PATOLÓGICO DA EVOLUÇÃO DA NECROSE

PRODUZIDA EXPERIMENTALMENTE POR VENENO DE

por via subcutânea

Figs. 5 a 11 — Cortes histológicos das orelhas dos coelhos injetados

com 1,5 mg de veneno de B. jararaca.

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TABELA II — INFLUÊNCIA DA SUBSTÂNCIA ÓRGANO-HEPARINÓIDE SÕBRE AS LESÕES

OBSERVÁVEIS MICROSCOPICAMENTE

— Não

tratados

B —

Tratados

+ + +

+ +

+ + +

+ +

Necrose .

Edema .

—

Hemorragia .

—

Hemossiderose .

—

Hiperemia .

—

Reepitelização .

—

Cicatrização .

—

Coelhos com pêso aproximado de 2,5 kg, injetados subcutâneamente com 1,5 mg de

veneno padrão de B. jararaca, dissolvido em 0,15 ml de solução de cloreto de sódio a 8,5 °/ 00

e tratados intravenosamente com antitoxina botrópica 6 horas após. Os animais do grupo

B recebiam 48 horas depois, uma aplicação local diária de pomada contendo 1% de subs¬

tância anticoagulante do tecido pulmonar de vitela, durante 7 dias.

+ grau leve, + + grau médio, + + + grau intenso, 0 ausência.

As lâminas foram examinadas ao acaso, tendo-se o cuidado de identificá-las sõmente

no fim do exame.

Comentários

A análise das tabelas revelou: Necrose ; não apresentava, macroscopicamente,

diferenças muito significativas, eis que a ação altamente proteolítica do veneno

sempre ocasiona necroses graves. Mesmo assim, nos animais tratados, a necrose

mostrava-se ao final menos intensa. Havia 50% de casos graves contra 6,2%, nos

casos tratados. Os casos menos graves eram de ordem de 50% nos tratados e de

31,25% nos não tratados. Havia uma certa divergência entre o resultado das

observações macro e microscópicas, pois necroses mais profundas não reveladas

ao primeiro exame, manifestavam-se evidentes no segundo.

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ESTUDO ANÁTOMO-PATOLÓGICO DA EVOLUÇÃO DA NECROSE

PRODUZIDA EXPERIMENTAL MENTE POR VENENO DE

Pelos dados obtidos ao exame microscópico, havia 43,75% de casos leves nos

tratados e 31,25% nos não tratados; 25% de casos graves nos tratados, contra

50%, nos não tratados.

Edema — Os dados macro e microscópicos correspondiam-se aproximada¬

mente. Havia uma porcentagem de edema da ordem de 43,75% para os tratados

e de 81,25% para os testemunhas.

Hemorragia — Êste é o item mais importante e mais evidente da análise.

Existiam em dezesseis animais tratados, onze (68,75%) com pouquíssima ou ne¬

nhuma hemorragia, enquanto que nos não tratados existiam somente 6,2%. Êstes

números indicam que as hemácias extravasadas para os interstícios do tecido, eram

absorvidas mais cedo, razão pela qual. quase não se notava hemácias livres nos

casos tratados.

Hemosiderose — Quanto à presença de pigmento hemosiderótico nas adja¬

cências da área afetada, notava-se um certo equilíbrio de intensidade em todos

os casos examinados, quer tratados ou não. Nos grupos dos animais tratados

havia 68,75% de casos moderados (++) e 75% nos não tratados. Estas cifras

indicaram uma constância absoluta de hemosiderose, mostrando que nos trinta e

dois coelhos, havia hemorragias e hemólise no local da inoculação.

Hiperemia — Nos animais tratados havia 62% de casos onde se manifestava

hiperemia moderada, contra 6.2% dos não tratados. Em 87,5% dos casos teste¬

munhas havia hiperemia intensa, ao passo que havia 25% nos tratados. A hipe¬

remia, quando intensa, indicava haver um estágio de evolução mais atrasado, pois

a observação demonstrava que nos casos onde a cicatrização era mais avançada,

a hiperemia era menos intensa.

Reepitelizução — Era mais intensa nos casos tratados, que revelavam 31,25%

de reepitelização atrasada, em contraposição a 75% dos não tratados.

Cicatrização — Macroscopicamente havia 75% de boa cicatrização nos tra¬

tados e 43,75% nos testemunhas. A má cicatrização era da ordem de 6.2%

para os tratados e 43.75% para os não tratados, havendo correspondência com a

observação microscópica.

Resumo

Foram estudadas as lesões macro e microscópicas em 32 coelhos injetados

com 1,5 mg de veneno de R. jararaca (Wied, 1824), por via subcutânea, na face

externa do pavilhão auricular direito, tratados seis horas após, com 5 ml de sôro

específico. O primeiro grupo de 16 coelhos foi tratado, 48 horas depois, com

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substância órgano-heparinóide sob a forma cie pomada dermo-absorvível, durante

7 dias. O lote testemunha não foi submetido ao tratamento da referida substân¬

cia. A experiência durou 9 dias, ao cabo dos quais todos os coelhos foram sa¬

crificados.

0 estudo comparativo, realizado através do quadro macroscópico, revelou

edema, hiperemia e necrose, em graus variados, tanto no lote testemunha como

no lote tratado com a substância órgano-heparinóide. O quadro microscópico

evidenciou necrose de coagulação do tecido afetado, acompanhado de edema, hi¬

peremia, hemorragias difusas, focos inflamatórios esparsos e perivasais, proliferação

da adventícia arteriolar, raras tromboses de vênulas com hialinização das paredes.

Êste aspecto era acompanhado por processos regenerativos de proliferação de te¬

cido de granulação e por reepitelização. Em todos os cortes havia deposição de

pigmento hemosiderótico nas adjacências da lesão.

Nos animais tratados, a necrose teve cicatrização mais avançada, o edema foi

menos intenso, a reepitelização mais acentuada, a hiperemia menos intensa e as

hemorragias menos freqiientes. Em todos os casos observou-se pigmento hemosi¬

derótico nos cortes, denotando hemorragias na evolução do processo.

SlJMMARY

Macro and microscopic lesions were studied in 32 rabbits injected with 1,5 mg

of venom of Bothrops jararaca (Wied, 1824), subcutaneously, on the externa!

side of the right auricular pavillion, treated after six hours with 5 ml of specific

serum. The first group of 16 rabbits was treated 48 hours afterwards with organo-

heparinoid substance as a dermo-absorbable ointment for 7 days. The witness

lot was not treated with the above mentioned substance. The experiments- lasted

9 days, after which, all rabbits were sacrificed.

The comparative study, performed by means of the macroscopic picture re-

vealed oedema, hyperemia and necrosis in different degrees, in lhe witness lot as

well as in the lot treated with the heparinoid substance. The microscopic picture

showed coagulation necrosis of the affected tissue, followed by oedema, hyperemia,

diffused hemorrhages, dispersed and peri-vasal inflammatory focuses, proliferation

of the arteriolar adventitia, seldom thrombosis of the venulae with hyalinization

of the walls. lhe aspect was followed by regenerative processes of proliferation

of granulation tissue and reepithelization. In all the sections, we verified the de-

position of hemosiderotic pigments in the surroundings of the Iesion.

In the animais treated, the necrosis that always existed in all cases had a

more advanced cicatrization, the oedema was less intensive, the reepithelization

more accented. the hyperemia less intensive and the hemorrhages not so frequent.

In all cases, hemosiderotic pigment could be observed in the sections, showing

hemorrhages in the evolution of the process.

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RICKETTSIEMIA EXPERIMENTAL DA FEBRE MACULOSA DO BRASIL

A. VALLEJO-FREIRE e A. BRUNNER JR.

Serviço de Microscopia Eletrônica, Secção de Virulogia, Instituto Butantan,

São Paulo, Brasil

Introdução

Apesar de constantes tentativas realizadas em esfregaços corados pelos méto¬

dos de Giemsa e Macehiavello, a rickettsia da Febre Maculosa do Brasil não foi

até o presente momento identificada morfologicamente, quer no sangue de cobaios

utilizados para passagem do vírus, quer em experiências de laboratório.

Lemos Monteiro (1) concluiu que o agente infeccioso existe sob a forma gra¬

nular no meio circulante, representando uma das fases da evolução da rickettsia.

Trabalhando com macacos e cobaios infectados com Febre Maculosa das Mon¬

tanhas Rochosas, Rieketts (2) descreveu em 1909, em preparações coradas pelo

Giemsa, corpúsculos em forma de diplococos e, por vêzes, em formas bacilares.

Estas partículas, encontradas com frequência no sangue destes animais, eram

menos constantes no sangue dos doentes, onde só puderam ser localizadas mediante

a concentração do sôro. Em ovos de Dermacentor sp. foram encontradas forma¬

ções, que mostraram ser específicas em provas de aglutinação com sôro imune

de cobaios.

Nicolle, Blanc e Conseil (3) não observaram forma microbiana alguma em

sangue de cobaios infectados experimentalmente com Tifo Exantemático Europeu.

No sangue de doentes, Rocha Lima (4) encontrou partículas suspeitas apenas em

leucócitos, que, quanto à forma, tamanho e afinidade tintorial se assemelhavam

à Rickettsia prowazeki.

No presente trabalho apresentamos eletromicrografias de sangue de cobaios

infectados experimentalmente com Febre Maculosa do Brasil, e analisamos o signi¬

ficado das partículas suspeitas.

Recebido para publicação em fevereiro de 1963.

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RICKETTSIEMIA EXPERIMENTAL DA FEBRE MACULOSA DO BRASIL

Material e métodos

Foi utilizado sangue de animais no segundo e terceiro dias do período febril,

obtido por punção cardíaca. As provas de esterilidade eram feitas em tioglicolato,

caldo simples e Sabouraud. As provas de atividade consistiam na inoculação in-

traperitoneal de 1 ml de sangue, fazendo-se, no fim do período febril das cobaias

de prova, esfregaços peritoneais corados pelo método de Macchiavello.

Titulações — Eram determinadas pelo método de Reed e Muench, as DL 50 , do

sangue íntegro citratado, do sangue hemolisado, obtido por congelamento a — 20°C

e descongelamento e do plasma obtido por centrifugação a 500 g durante 15

minutos.

Réplicas — Imediatamente após o preparo dos esfregaços de sangue, para

exame ao microscópio eletrônico, faziam-se fixações por vapores de ácido ósmico.

Decorridos 40 a 60 minutos, os esfregaços eram mergulhados em solução de co-

lódio a 1% em acetato de amila e mantidos em posição inclinada na estufa a

40°C durante 30 a 40 minutos. Em seguida, os filmes eram destacados dos es¬

fregaços por meio de fitas gomadas de 5 mm de largura, aderidas aos mesmos,

em posição perpendicular ao comprimento da lâmina. A fita gomada, com uma

abertura quadrada de aproximadamente 3 mm de lado, era destacada juntamente

com o filme. O filme correspondente à região da abertura era colocado, em po¬

sição invertida, sôbre uma grade metálica, prèviamente mergulhada numa solução

diluída de goma em éter de petróleo.

Hemólise — A 10 ou 15 ml de água destilada era adicionado 1 ml de sangue.

Dez minutos após, adicionava-se 1 ml de solução aquosa de ácido ósmico a 1%,

prosseguindo a fixação por 10 a 15 minutos. As hemácias hemolisadas eram la¬

vadas com água destilada, por meio de centrifugações e decantações sucessivas

até a obtenção de um sobrenadante incolor. A suspensão de estromas era gote¬

jada sôbre grades metálicas prèviamente cobertas com um filme de colódio e o

excesso de líquido da gôta retirado por absorção em papel de filtro.

As preparações eram submetidas ao sombreamento metálico com cromo e

examinadas num microscópio eletrônico Siemens ÜM 100b, a 60 KV, com au¬

mentos de X7200.

Resultados e conclusões

Tôdas as partículas suspeitas observadas dispõem-se nos bordos da hemácia o,

com frequência, numa reentrância, como se o glóbulo vermelho tivesse sido com¬

primido. Mas figuras 1 e 2 observam-se réplicas de partículas suspeitas, com a

região central aparentemente sem colódio. Êste aspecto está em concordância com

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Figs. 1 and 2 — Replica of rickettsiae (r) disposed on the borders of the red blood cor-

puscles (h). The central reglon oí the replica of particles presents a hole corresponding

to the height of the rickettsla.

Fig. 3 — Rickettsla from a preparation of hemolysed blood, containlng a capsule (c);

the long shadow (s) shows the pronounced height of the partiele.

Figs. 4 and 5 — Pseudoreplicas containing rickettsiae (r) situated in a concavity on the

borders of the red blood corpuscles (h). The shadows are not long because the particles

are partially embedded in collodium.

Figs. 6 and 7 — Hemolysed red blood corpuscles with particles, of variable dimensions

and constant form, adsorbed on the stromas.

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RICKETTSIEMIA EXPERIMENTAL DA FEBRE MACULOSA DO BRASIL

a morfologia da rickettsia, como se verifica na figura 3. O sombreamento me¬

tálico indica uma acentuada saliência da região central da partícula, sendo possível

que parte do colódio possa ficar aderido nessa região quando o destaque da ré¬

plica é feito.

Estas partículas medem no seu eixo maior, de 720 a 620 m/x e no eixo menor,

de 540 a 330 m/x. As medidas feitas nas réplicas, não correspondem exatamente

às medidas reais da partícula, se se considerar as tensões que sofrem as mesmas,

quando destacadas do esfregaço e as devidas ao bombardeio eletrônico, quando

são submetidas ao exame.

Nas figuras 4 e 5 verifica-se um aspecto diferente dos anteriores, devido ao

fato de terem as partículas se destacado do bordo das hemácias, permanecendo

incluídas no colódio. Nestes casos foram obtidas somente as réplicas das hemá¬

cias, que mostram também a disposição das partículas em reetrâncias. Estas par¬

tículas medem 390 X 480 m/x.

Formas bacilares, como as que se observam em esfregaços peritoneais e de

membrana do saco vitelino corados pelo Macchiavello, nunca foram surpreendidas

no sangue de cobaios, mas apenas formas cocoidais isoladas (Figs. 1 e 4) ou pró¬

ximas, que dariam o aspecto de diplococoidais ao microscópio óptico (Figs. 2 e 5).

As dimensões, a forma, a disposição das partículas em relação à hemácia e o

título relativamente baixo do sangue (DL 50 = IO' 2,15 ), são fatores que podem ex¬

plicar as dificuldades na observação da rickettsia em esfregaços de sangue ao mi¬

croscópio óptico.

Suspensões de glóbulos vermelhos hemolisados foram examinadas com o ob¬

jetivo de concentrar as partículas presentes no sangue, desde que estivessem ad-

sorvidas aos estromas das hemácias. Nas figuras 6 e 7 observam-se estromas nos

quais estão adsorvidas partículas de forma constante, porém, de dimensões que

variam de 98 X 146 m/r a 200 X 630 m/x. O sombreamento metálico triangular,

cujo vértice corresponde aproximadamente ao centro das partículas, indica uma

saliência nesta região, à semelhança do que se observa nas rickettsias. Estas par¬

tículas não apresentam um envoltório ou cápsula visível como a rickettsia da fi¬

gura 3. Embora não tenham sido observadas em sangue de cobaios normais, não

se pode acreditar ainda na sua participação num processo de desenvolvimento que

a rickettsia provavelmente apresenta, levando-se em conta o seu pleomorfismo.

Nestas preparações nunca foram observadas formas típicas de rickettsia em estro¬

mas de hemácias, mas apenas isoladas. É possível, pois, que além da rickettsia

não ser adsorvida pelos estromas, seja também destacada da hemácia durante o

processo de hemólise osmótica. A aderência da partícula ao glóbulo vermelho

seria mantida somente no sangue íntegro. Isto está de acordo com observações

feitas por Vallejo-Freire (5), de que ocorre um aumento do título no sangue, man¬

tido a baixa temperatura (4°C) para conservação, quando se processa, em decor¬

rência, uma hemólise. Êste fato pode ser explicado por uma distribuição mais

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homogênea de rickettsias nas amostras quando duas ou três partículas aderidas a

uma hemácia se destacam, considerando-se possível o processo de desencadeamento

da infecção por uma única rickettsia. A DL 50 do sangue hemolisado por conge-

o que corrobora as considerações feitas

lamento e descongelamento foi de IO" 2

acima.

Resumo

Não tendo sido possível observar ao microscópio óptico o agente etiológico

da Febre Maculosa do Brasil na fase circulante, foram feitos exames de esfregaços

de sangue pelo método de réplicas. As rickettsias, geralmente granulares, se dis¬

põem nos bordos das hemácias e medem 390 X 480 m/r.

O baixo título, a forma e dimensões e sua disposição em relação às hemácias

são fatores que dificultam sua observação pelos métodos clássicos.

SüMMARY

It was not possible to observe the etiological agent of the Brazilian Spotted

Fever in the circulatory blood at the optic microscope, therefore, blood smears

were examined at the electron microscope by lhe replication method. The general-

ly granular ricettsiae dispose themselves on the borders of the red blood corpuscles

and measure about 390 X 480 m/i.

The low title, form and dimensões and the disposition in relation to the red

blood corpuscles, are factors that make the observation by the classical methods

difficult.

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