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sentação de trabalhos originais que contribuam para o progresso nos campos das

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ceitos emitidos são de inteira responsabilidade dos autores.

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MEMÓRIAS

INSTITUTO BUTANTAN

Volume 52, número 3, 1990

São Paulo, SP — Brasil

1990

SciELO

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Mem. Inst. Butantan,

52(3), 1990

SUMÁRIO/CONTENTS

Presas grandes e serpentes jovens: quando os olhos são maiores que

a boca.

Large prey and young snakes: when the eyes are bigger than the belly.

Ivan SAZIMA & Márcio MARTINS. 73

Maloclusão dentária em colônia de cobaias (Cavia porcellus).

Malocclusion in guinea pigs colony.

Luziane C.A.G. CHAGURI; Sueli Blanes DAMY; Ubimara P. RO¬

DRIGUES; Fernando SOGORB S. 81

Coletânea de resumos de trabalhos publicados pelos pesquisadores

do Instituto Butantan (1989)

Collection of sumaries of articles published by the scientific staff of

Instituto Butantan (1989). 89

Lista remissiva dos trabalhos publicados nas Memórias do Instituto

Butantan, 47/48-51, 1983/84-1989.

Remissive list of papers published in Memórias do Instituto Butantan,

47/48-51, 1983/84-1989 . 107

BOLETIM DE BIOTECNOLOGIA. 1

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Mem. Inst. Butantan

52(3): 73-79, 1990.

PRESAS GRANDES E SERPENTES JOVENS:

QUANDO OS OLHOS SÃO MAIORES QUE A BOCA

Ivan SAZIMA*

Márcio MARTINS**

RESUMO: Cinco casos de colubrídeos jovens tentando ingerir presas

exageradamente grandes, em encontros naturais ou provocados, são

descritos do sudeste brasileiro: Helicops modestus (2), Liophis alma-

densis, L. miliaris e Oxyrhopus guibei. Tentativas de ingerir presas exa¬

geradamente grandes podem ser comuns em serpentes jovens que se

alimentam de presas pouco perigosas, como anuros e peixes, habitual¬

mente engolidas vivas. A manipulação de presas exageradamente gran¬

des pode envolver desperdício de tempo e energia, além de aumentar

o risco de morte por engasgamento ou predação. Entretanto, caso seja

bem-sucedida, a serpente adquire quantidade considerável de energia

de uma só vez (ainda que sua locomoção possa assim ser prejudica¬

da). Esse comportamento pode estar relacionado a disponibilidade de

presas, aprendizado em lidar eficientemente com presas e/ou otimiza¬

ção na aquisição de energia.

UNITERMOS: Colubridae, história natural, comportamento alimentar,

fase juvenil.

INTRODUÇÃO

Serpentes são predadores que capturam presas relativamente grandes, inge¬

ridas íntegras 7 ' 1 T23 Estrutura, disposição e mobilidade dos ossos cranianos e

da glote, bem como capacidade de distensão dos tecidos, são alguns dos atribu¬

tos que permitem esses hábitos 1 ' 11 . (A capacidade de ingerir uma dada presa

é limitada pela relação entre o perímetro da região mais volumosa da presa e o

grau de distensão da região cervical da serpente, no seu local mais estreito 15 ' 16 ,

bem como pela abertura bucal máxima 1 ). A tendência a ingerir presas grandes

por vezes é levada ao extremo, sendo conhecidos casos de serpentes encontra¬

das mortas após abocarem presa acima da sua capacidade de ingestão 14 ' 15 ' 16 ' 19 .

Departamento de Zoologia, Universidade Estadual de Campinas, 13081 Campinas, São Paulo.

Pós-Graduação em Ecologia, Instituto de Biologia, Universidade Estadual de Campinas.

Recebido para publicação em 25/6/1990 e aceito em 1/8/1990.

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SAZIMA, I. & MARTINS, M. Presas grandes e serpentes jovens; quando os olhos são maiores que

a boca. Mem. Inst. Butantan, 52(3): 73 - 79, 1990.

O comportamento de capturar presas exageradamente grandes parece ser mais

freqüente em indivíduos jovens 14 , o que poderia ser parcialmente explicado pe¬

la menor disponibilidade de presas com porte adequado para esta fase de vida

da serpente 23 . Além disso, abocar animais muito grandes pode representar um

erro na avaliação do tamanho da presa, pela serpente 15 ' 16 .

Apresentamos aqui exemplos de serpentes jovens que capturaram presas exa¬

geradamente grandes e comentamos prováveis causas desse comportamento e

suas desvantagens. Também, relacionamos essas capturas com o tipo de presa

e o modo de subjugação usado pela serpente.

PROCEDIMENTO

Devido à casualidade de observações sobre atividade alimentar de

serpentes 10 ' 23 , o presente estudo está baseado em registros feitos ao longo de

cinco anos de atividade de campo, na região de Campinas, São Paulo (c. 22°

49' S, 47° 06' W). As ocorrências de predação foram estudadas em encontros

naturais ou provocados na natureza 27 e as observações foram diretas, com

amostragem de ''todas as ocorrências'' 21 e documentação fotográfica. Um es¬

pécime de Helicops modestus e sua presa, Geophagus brasiliensis, estão depo¬

sitados no Museu de História Natural, Universidade Estadual de Campinas (ZUEC

642). As medidas usadas (cm) são comprimento total (CT) para as serpentes,

comprimento rostro-anal (CRA) para os anuros, comprimento-padrão (CP) para

os peixes e comprimento de cabeça mais corpo (CC) para os mamíferos. Os no¬

mes dos animais seguem o uso corrente, com exceção da espécie de Oxyrho-

pus: o nome O. guibei é aqui usado para designar os espécimes do sudeste

brasileiro, antes denominados de O. trigeminus 29 .

RESULTADOS

Encontros naturais

Liophis almadensis (Pedro Américo, Campinas, São Paulo, 15 abril 1985, c.

1500h). Um jovem de L. almadensis (c. 35cm CT) foi encontrado mantendo pre¬

sos, na mordida, o pé e a tíbia de um macho adulto de Hyla albopunctata (c.

5cm CRA), em meio à vegetação (Figura IA). O anuro estava com os pulmões

inflados e movimentava a perna livre, empurrando a cabeça da serpente; ocasio¬

nalmente emitia gritos de angústia (''distress call" cf. Hòdl & Gollmann 18 ), que

levaram à descoberta do predador e sua presa. No decorrer da documentação,

a serpente soltou o anuro e se afastou.

Helicops modestus (Sousas, Campinas, São Paulo, 8 maio 1988, c. 2000 h).

Um jovem de H. modestus (1 7cm CT) foi encontrado abocando a cabeça de um

espécime jovem de acará, Geophagus brasiliensis (3,5cm CP), na porção rasa

de um açude. O peixe estava recém-morto, o que torna pouco provável a possi¬

bilidade de necrofagia, conhecida para essa serpente 28 . A serpente havia con¬

seguido avançar suas maxilas somente pouco além do opérculo da presa (Figura

1 B), soltando-a após passados c. 15 min de observação. Ambos os animais fo¬

ram coletados.

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SAZIMA, I. & MARTINS, M. Presas grandes e serpentes jovens; quando os olhos são maiores que

a .boca. Mem. Inst. Butantan, 52(3): 73 - 79, 1990.

Liophis miliaris (Santa Genebra, Campinas, São Paulo, 25 maio 1988). Um

jovem de L. miliaris(c. 40cm CT) foi encontrado mantendo presos, na mordida,

o pé e a tíbia e parte posterior do corpo de uma fêmea imatura de rã-pimenta,

Leptodactylus labyrinthicus (c. 8cm CRA). O anuro não se movimentava e apre¬

sentava lacerações ao longo do flanco esquerdo, provavelmente causadas pelos

avanços frustrados das maxilas da serpente. Após c. 20min adicionais de mani¬

pulação e tentativa de ingestão, sem avançar além da região abdominal do anu¬

ro, a serpente soltou a presa e afastou-se. O anuro apresentava laceração no

ventre, expondo parte do intestino, tendo sido encontrado morto mais tarde.

Encontros provocados

Helicops modestus (Sousas, Campinas, São Paulo, 29 outubro 1988, c.

2000h). Um jovem de H. modestus (c. 25cm CT) foi encontrado estacionário

na parte rasa de um açude. Um exemplar jovem de Geophagus brasiliensis (5,5cm

CP), atordoado por compressão da cabeça, foi colocado defronte à serpente, que

abocou o peixe pela região anal. Em seguida soltou a presa para abocá-la na re¬

gião cefálica, iniciando movimentos de ingestão. Conseguindo alcançar a região

opercular, continuou com movimentos maxilares por alguns minutos, soltando

a presa a seguir. Um segundo exemplar de G. brasiliensis, maior (7cm CP), foi

oferecido à mesma serpente, tendo sido abocado em condições semelhantes às

do peixe anterior. A serpente conseguiu abocar apenas parte da cabeça (Figura

1D), manipulou o peixe por c. 10 min e soltou-o a seguir.

Oxyrhopus guibei (Santa Genebra, Campinas, São Paulo, 14 fevereiro 1990,

1950h). Um jovem de O. guibei (63cm CT, 31 g) foi encontrado deslocando-se

no chão de mata. Um macho adulto de camundongo, Mus musculus (9cm CC,

31 g), foi solto próximo e à frente da serpente. O camundongo foi imediatamente

perseguido pela serpente, abocado pela região escapular e constringido. Cerca

de 3 min após, a serpente abocou a presa pela cabeça e iniciou os movimentos

de ingestão. Ultrapassada a região do focinho da presa, a serpente fazia grande

esforço para continuar a deglutição, as maxilas totalmente abduzidas e próximas

do "ponto de ruptura" (cf. Arnold 1 ) e a região guiar muito distendida (Figura

1C). A serpente empurrava a cabeça contra a presa, retida entre as voltas do

seu corpo, tendo refeito as voltas duas vezes, provavelmente num esforço de

melhor ajeitar o camundongo. Após c. 25 min, a serpente pareceu perturbada

e afastou-se, mantendo o camundongo na boca (nesse momento foi capturada

para tomada de medidas).

DISCUSSÃO

Nos casos que relatamos, as serpentes eram jovens e estavam apresando suas

presas habituais, porém exageradamente grandes. (Serpentes adultas também

capturam presas acima da sua capacidade de ingestão 15 ' 16 ' 19 , em especial as

Boidae 2 , porém esse comportamento parece ser menos frequente que em jo¬

vens). O comportamento de capturar presas exageradamente grandes pode es¬

tar relacionado à menor disponibilidade de presas 9 ' 23 , bem como às maiores

proporções da cabeça da serpente jovem 14 , em relação às do adulto. Talvez es¬

ses fatores possam influir em erro de avaliação do tamanho da presa, como su¬

gerido por Hailey & Davies 15 ' 16 .

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Fig. 1 — Exemplos de serpentes jovens capturando presas acima da sua capacidade de

ingestão (A-B ocorrências naturais; C-D encontros provocados). A: Liophis almadensis

(seta) retendo um macho adulto de Hyla albopunctata; B: Heticops modestus tentando

engolir um jovem de Geophagus brasiliensis; C: Oxyrhopus guibei tentando engolir um

macho adulto de Mus musculus, estando a abertura bucal da serpente próxima do "pon¬

to de ruptura"; D: Helicops modestus abocando um adulto de G. brasiliensis, sem possi¬

bilidade sequer de acomodar as maxilas para o início da deglutição (compare com abertura

bucal em B).

Em indivíduos jovens de diversas espécies de serpentes, foi demonstrada a

existência de preferência inata por determinados tipos de presa, isto é, a escolha

da presa habitual teria componentes geneticamente fixados 3 ' 8 ' 17 ' 24 . Por outro la¬

do, na escolha quantitativa (dimensões relativas da presa), podem influir tanto

aspectos relacionados à experiência em lidar com a presa 22 , como à otimiza¬

ção na aquisição de energia 15 ' 16 . Parece-nos difícil reconhecer isoladamente es¬

ses ou outros componentes, cuja interação provavelmente é complexa 4 ' 15 ' 16 .

As vantagens mais evidentes, de lidar com presas exageradamente grandes,

seriam adquirir grande quantidade de energia de uma só vez e, assim, prevenir-

-se contra eventual escassez de alimento 15 '1 6 . Entretanto, há diversas desvan¬

tagens, como maior vulnerabilidade a predadores e desperdício de tempo e energia

14 . O período de manipulação, com posterior rejeição, é variável 15 ' 16 e pode re¬

presentar desperdício. Mesmo que a serpente consiga engolir uma presa muito

grande, o período de manipulação é muito superior ao habitual 1 ' 15 ' 16 , aumen¬

tando sua exposição a predadores potenciais. Além disso, quanto maior a presa

ingerida, presumivelmente mais prejudicada fica a locomoção da serpente 12 . Há

ainda o risco "mecânico" durante ingestão e locomoção, oferecido por presas

com estruturas'rígidas e salientes ou pontiagudas, risco esse ampliado por pre¬

sas exageradamente grandes.

As serpentes subjugam e matam suas presas por constrição, envenenamen¬

to, ou ambos os modos, ou então tragam as presas vivas 7 ' 25 . Essas táticas po¬

dem estar relacionadas tanto a aspectos filogenéticos do predador, quanto ao tipo

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a boca. Mem. Inst. Butantan, 52(3): 73 - 79, 1990

de presa e o seu grau de periculosidade 5 ' 6 ' 13 ' 25 . Acreditamos haver relação en¬

tre o modo que uma dada serpente emprega na subjugação de sua presa e a

tendência a apresar presas exageradamente grandes.

Aparentemente, o comportamento de capturar presas acima da sua capaci¬

dade de ingestão é mais frequente em serpentes que se alimentam de presas

pouco perigosas (como anuros e peixes) habitualmente engolidas vivas 1 ' 14 ' 15 ,! 6 .

Acreditamos que a captura de presas exageradamente grandes seja menos fre-

qüente em serpentes que lidam com presas mais perigosas, como roedores 5 .

Nossa sugestão pode ser melhor fundamentada com observações de um núme¬

ro maior de espécies, com variados modos alimentares e táticas de subjugação

da presa. Diversas serpentes viperídeas usam a tática de envenenar e soltar a

presa 5 ' 6 ' 27 e possuem a capacidade de ingerir presas muito volumosas 26 . Essas

características poderiam parecer favoráveis à tendência de capturar presas aci¬

ma da capacidade de ingestão. No entanto, não temos conhecimento de que

esse comportamento de fato ocorra, possivelmente devido a discriminação mais

refinada, na escolha de presa, em Viperidae 6 ' 20 .

Em conclusão, o comportamento de capturar presas exageradamente gran¬

des parece ser encontrado com maior freqüência em indivíduos jovens, de ser¬

pentes que se alimentam de presas pouco perigosas e habitualmente engolidas

vivas. Esse comportamento, embora possa ocasionalmente trazer vantagens, tam¬

bém envolve riscos e desperdícios. Na captura de presas exageradamente gran¬

des pode haver componentes relacionados a otimização na aquisição de energia,

bem como aprendizado, no decorrer do desenvolvimento do indivíduo. Algumas

das idéias que aqui apresentamos podem ser testadas com observações adicio¬

nais, incluindo estudo de serpentes comuns e de manutenção simples ern cati¬

veiro, como espécies de Liophis ou Helicops.

ABSTRACT: Five instances of young colubrid snakes attempting to eat

exceedingly large prey, during natural or staged encounters in the field,

are described from southeastern Brazil: Helicops modestus (2), Liophis

atmadensis, L. miliaris, and Oxyrhopus guibei. Attempts to take exceed¬

ingly large prey may be common in young snakes which feed on non-

dangerous prey such as frogs and fishes, usually swallowed alive. Han-

dling exceedingly large prey may involve time and energy waste, be-

sides increasing the risk of death by choking or predation. However,

if successful the snake can benefit from a considerable energetic intake

at once (though its locomotion may thus become impaired). This be-

havior may be related to prey availability, to learning to handle prey ef-

ficiently, and/or to foraging optimization.

KEYWORDS: Colubridae, natural history, feeding behavior, juvenile stage.

AGRADECIMENTOS

Somos gratos a Augusto S. Abe e Célio F.B. Fjaddad por valiosas críticas e

sugestões ao manuscrito; Otávio C. Oliveira, Éllen C. Pombal, José P. Pombal

Jr., Christine Strüssmann e os vigias da Mata de Sta. Genebra por auxílio no tra¬

balho de campo; Fundação José Pedro de Oliveira e Sociedade dos Amigos do

Jardim Botânico por permissão para estudos em terras sob sua responsabilida¬

de; CNPq (proc. 300992/79) e FAP-UNICAMP (procs. 59/87 e 524/88) por au¬

xílio financeiro (IS).

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SAZIMA, I. & MARTINS, M. Presas grandes e serpentes jovens; quando os olhos são maiores que

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MALOCLUSÃO DENTÁRIA EM COLÔNIA DE COBAIAS

(CA VIA PORCELLUS) *

Luziane C.A.G. CHAGURI

Sueli Blanes DAMY

Ubimara P. RODRIGUES

Fernando SOGORB S.

RESUMO: Surtos de uma síndrome mencionada na literatura como ma-

loclusão dentária foi verificada em cobaias do Biotério Geral do Institu¬

to Butantan entre janeiro de 1986 a junho de 1990. Os resultados

evidenciam correlação positiva entre o aparecimento do surto com o

consumo da ração de determinados moinhos. Os autores relacionam

o fato à intoxicação crônica pelo flúor associado à hipovitaminose C.

UNITERMOS: Cobaias, maloclusão dentária, flúor, vitamina C.

INTRODUÇÃO

Surtos de uma síndrome mencionada na literatura como maloclusão dentária

ou ''baboseira'', cujos sintomas são aumento do crescimento dos dentes, difi¬

culdades de apreensão e deglutição dos alimentos, perda de peso, pelagem ás¬

pera, sialorréia intensa, dispnéia, caquexia, convulsão na fase final, com evolução

de cinco a 20 dias, foram descritos por vários autores 5 - 6 - 11 - 12 , correlacionando-

-os à deficiência ou excesso de algum componente na ração, presença de subs¬

tâncias tóxicas, ou origem genética 7 - 9 - 1 h 14 - 15 .

A etiologia nutricional fundamenta-se na observação de surtos da doença em

colônias alimentadas com ração contendo flúor em altos níveis 5 originário de ro¬

chas fosfatadas, cujos sintomas correlacionam-se com intoxicação crônica por

aquela substância 1 .

Observou-se, ainda, similaridade entre sintomas de fluorose crônica e escor¬

buto em cobaias, uma vez que o flúor parece interferir com o ácido ascórbico

nas suas funções no organismo 8 - 12 .

Excesso de gordura, insuficiência de cálcio e vitaminas foram relacionados com

o aparecimento da doença 4 . Algumas estruturas ósseas e dentárias se alteram

Trabalho apresentado no I o Congresso Brasileiro de Animais de Laboratório, Salvador, Bahia

Seção de Biotério Geral. Instituto Butantan.

Recebido para publicação em 09/8/1990 e aceito em 01/10/1990.

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CHAGURI, L.C.A.G.; DAMY, S.B.; RODRIGUES, U.P.; SOGORB S., F. Maloclusão dentária em colô¬

nia de cobaias (Cavia porcellus). Mem, Inst. Butantan, 5213): 81-86, 1990.

nos casos de fluorose assim como avitaminoses A,C e D. Entretanto, inter-relações

básicas entre estes componentes continuam desconhecidas e em nenhuma es¬

pécie foi possível curar ou prevenir fluorose por meio da administração destas

vitaminas 8 .

Na colônia de cobaias do Biotério Geral do Instituto Butantan, casos de ani¬

mais com sintomas semelhantes à síndrome descrita observavam-se desde ja¬

neiro de 1986, quando se utilizava ração comercial balanceada para esta espécie,

fabricada pelo moinho A. Em dezembro de 1987, o fornecimento passou para

o moinho B, tendo-se observado um aumento do número de casos, atingindo

níveis elevados entre junho e agosto de 1988. Entretanto, com nova alteração

do fabricante, para o moinho C, o número de casos foi diminuindo gradativa¬

mente, desaparecendo por completo 15 dias após a introdução da mesma, per¬

manecendo neste patamar.

Com o retorno da ração fabricada pelo moinho A, em agosto de 1989,

observou-se novo surto, com subseqüente diminuição e desaparecimento do nú¬

mero de casos, após 15 dias da introdução da-ração fabricada pelo moinho D,

em dezembro de 1989 e moinho C em março de 1990.

Assim, o presente trabalho tem como objetivo detectar a etiologia desta

síndrome.

MATERIAL E MÉTODOS

Durante o período de janeiro de 1986 a junho de 1990 foram observadas uma

média mensal de 3.000 cobaias, albinas, não consangüíneas, raça inglesa, aca¬

saladas em regime poligâmico de cinco fêmeas e um macho, criadas em gaiolas

de polipropileno, com cama de maravalha de pinho. A higienização consistiu em

duas trocas de gaiolas semanais, sendo as mesmas submetidas à desinfecção

com detergente e água sob pressão a aproximadamente 80°C.

Ração e água foram fornecidos ad libitum e forragem verde irregularmente.

No período de observação a ração teve quatro origens, com amostras submeti¬

das a análise química, bromatológica e microbiológica pelo Instituto Adolfo Lutz.

Os animais mortos com sintomatologia característica da síndrome foram ne-

cropsiados e fragmentos de órgãos conservados em formol a 10% foram enca¬

minhados para exame histológico na Faculdade de Medicina Veterinária e

Zootecnia da Universidade de São Paulo e Instituto Biológico.

RESULTADOS

Na necrópsia observou-se:

A: MACROSCOPICAMENTE: grave depleção de depósitos de gordura, aumento

de conteúdo gastrintestinal, hemorragias petequiais subcutâneas; figado e glân¬

dulas adrenais aumentados de tamanho; rins, intestino delgado, útero, pulmão

e caixa torácica hemorrágicos; caquexia. Na cavidade bucal: gengivas hemorrá¬

gicas, dentes molares inferiores com supercresçimento em direção à língua; os

superiores, com supercresçimento em direção ao palato duro (Fig. 2), estas alte¬

rações provocavam a maloclusão dos incisivos, impedindo a deglutição pela im¬

possibilidade de livre movimentação da mandíbula e língua. Em conseqüência

a saliva flui para o exterior, umedecendo as regiões mentoniana, ântero-cervical,

peitoral e ântero-abdominal (Fig. 1), com mau odor e cor esverdeada, constituin¬

do o principal sinal desta síndrome.

B: MICROSCOPICAMENTE:: o exame histológico indicou na maioria dos ca¬

sos: pneumonia intersticial de discreta a intensa; hemorragia pulmonar; edema

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Fig. 1. Aspecto ventral de uma cobaia apresentando a síndrome de maloclusão

Fig. 2. Vista lateral do crescimento divergente dos dentes molares superiores e conver¬

gentes dos inferiores.

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CHAGURI, L.C.A.G.; DAMY, S.B.; RODRIGUES, U.P.; SOGORB S., F. Maloclusão dentária em colô¬

nia de cobaias (Cavia porcellus). Mem. Inst. Butantan, 52(3): 81-86, 1990.

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CHAGURI, L.C.A.G.; DAMY, S.B.; RODRIGUES, U.P.; SOGORB S., F. Maloclusão dentária em colô¬

nia de cobaias (Cavia porcellus). Mem. Inst. Butantan, 52(3): 81-86, 1990.

pulmonar; nefrose tubular; hemorragia renal focal; hemorragia glomerular; de¬

generação vacuolar hepática; hepatite focal crônica; enterite crônica com necro¬

se de vilosidades intestinais; hemorragias periadrenais.

C: RAÇÕES: os resultados estão representados na tabela 1

TABELA 1

Análise química, bromatológica e microbiológica das rações, 1990.

DETERMINAÇÕES DIVERSAS

RAÇÕES

GRAMA/CENTO

Substâncias voláteis a 105°C

9,95

8,33

11,10

7,58

Carboidratos totais

53,57

56,19

52,94

54,91

Extrato etéreo

7,89

5,52

4,04

3,69

Protídios

18,35

22,19

26,66

24,71

Resíduo mineral fixo

8,17

8,59

8,96

—

Cálcio

—

1,30

1,10

—

Fósforo

—

0,76

0,70

—

Flúor (mg/quilo)

N? DE BACTERI AS/G RAMA

Em placa a 37°C/48 horas

I.IxIO 5

1,2x10 4

5,4x10 2

1,3x10 4

Grupo coliforme

5,30

24,00

0,91

9,30

Grupo coliforme de origem fecal

neg.

Salmonela sp

neg.

Flúor não detectado. Sensibilidade do método 5,0 mg/kg.

1988

1989

1990

RAÇÕES C A D

Fig. 3. Inter-relação entre surtos de maloclusão, meses do ano e fabricantes de ração for¬

necidas às cobaias do Biotério Geral, Instituto Butantan, SP, 1990.

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CHAGURI, L.C.A.G.; DAMY, S.B.; RODRIGUES, U.P.; SOGORB S., F. Maloclusão dentária em colô¬

nia de cobaias (Cavia porcellus). Mem. Inst. Butantan, 5213): 81-86, 1990.

DISCUSSÃO E CONCLUSÃO

As alterações macro e microscópicas verificadas são idênticas às encontra¬

das por diversos autores. Pesquisas 13 indicaram o surto não determinando a etio¬

logia. Outro trabalho 11 atribuiu a fator não identificado presente na ração. Outros

autores 6 ' 7 concluíram que a síndrome era sugestiva de fluorose crônica, acom¬

panhada por alterações dependentes de hipovitaminose C subaguda. Entretan¬

to, outro autor 15 comprovou origem genética em colônia de cobaias isogênicas.

Hemorragias gengivais, pulmonar, renal, glomerular, subcutâneas e intestinais

sugerem quadro de hipovitaminose C 3 ' 16 .

Nefrose tubular, hemorragia renal focal, hemorragia glomerular, degeneração

vacuolar hepática são compatíveis com intoxicação crônica por flúor 10 .

Os resultados das análises das rações indicam que as mesmas não apresenta¬

vam quantidades altas de flúor, quando comparadas ao encontrado por um

autor 5 , onde houve um aumento de 38 para 300ppm na quantidade deste

elemento.

A etiologia genética foi eliminada por trabalhos preventivos de controle e sele¬

ção, e também quando cobaias originárias de outras colônias apresentaram sin¬

tomas da síndrome.

A análise da figura 3, entretanto, evidencia correlação positiva entre o apare¬

cimento do surto da doença com o consumo da ração de determinados moinhos.

O fato da dosagem de flúor encontrada nas rações ser mais baixa do relatado

por outros autores 7 ' 5 não permite eliminar uma provável intoxicação crônica, da¬

da a sensibilidade das cobaias a baixos níveis de flúor 7 associados à inabilidade

de este animal sintetizar vitamina C 2 . Por outro lado, variações podem ser devi¬

das a diferentes origens do mineral flúor.

ABSTRACT: An outbreak of a syndrome mentioned in the literature as

malocclusion was noted in the guinea-pigs of the Biotério Geral - Insti¬

tuto Butantan, from january 1986 until june 1990. The results make

evident the relation between consumption of commercial diet from cer-

tain producers. The authors relating this fact to a chronic fluorosis as-

sociated with the vitamin C deficiency.

KEYWORDS: Guinea-pigs, malocclusion, fluor, vitamin C.

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

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COLETÂNEA DE RESUMOS DE TRABALHOS

PUBLICADOS PELOS PESQUISADORES DO

INSTITUTO BUTANTAN

( 1989 )

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Mem. Inst. Butantan

52(3): 89-105, 1990.

COLETÂNEA DE RESUMOS DE TRABALHOS

PUBLICADOS PELOS PESQUISADORES DO

INSTITUTO BUTANTAN

( 1989 )

1. ABDALLA, F.M.F.; HIRAICHI, E.; PICARELLI, Z.P.; PREZOTO, B.C.

Kallikrein-kinin system in the plasma of the snake Bothrops jararaca.

Brit. J. Pharmacoi, 98: 252-58, 1989.

Abstract:

1 — Bothrops jararaca venom (BJV) caused a fali in the carotid artery blood pressure of the anaesthetized snake.

This effect was tachyphylactic and was potentiated by captopril, a kininase II inhibitor; it was partially

antagonized by promethazine plus cimetidine and was not affected by atropine.

2 — Similar hypotensive effects were obtained by administration of trypsin or a partially purified BJV kininogenase

to the snake.

3 — Incubation of Bothrops jararaca plasma (BJP) with trypsin released a substance (or substances) that produced

hypotension in the snake but not in the rat; this hypotensive effect was also potentiated by captopril.

4 — The trypsinised plasma cohtracted Bothrops jararaca isolated uterus, a pharmacological preparation weakly

sensitive to bradykinin. Trypsinised plasma was inactive on pigeon oviduct and rat uterus and displayed

a weak action on the guinea-pig ileum. Similar effects were observed with incubates of a fraction of BJP,

containing globulins, with a partially purified BJV kininogenase.

5 — Like mammalian kinins, the substance(s) was(were) dialysable, thermostable in acid but not in alkaline

pH, and inactivated by chymotrypsin but not by trypsin. Its(their) inactivation by BJP or BJP kininase II

was inhibited by captopril.

6 — These findings strongly suggest that, besides releasing histamine, BJV or trypsin release a kininlike substance

(or substances) from the snake plasma.

7 — Since BJV and other kininogenases active on mammalian plasmas were shown to be unable to release

kinins from BJP, in experiments conducted on pharmacological preparations suitable for the assay of

mammalian kinins, these data also suggest that the snake Bothrops jararaca, like birds, may have developed

its own kallikrein-kinin system.

Resumo:

1 — O veneno de Bothrops jararaca (BJV) causa uma queda da pressão arterial da serpente anestesiada. Esse

efeito foi taquifilático e potenciado por captopril, um inibidor de cininase II; foi parcialmente antagonizado

por prometazina + cimetidina e não foi afetado por atropina.

2 — Efeito hipotensor semelhante foi obtido por administração de tripsina ou de uma cininogenase de BJV,

parcialmente purificada, à serpente.

3 — Incubação do plasma de Bothrops jararaca (BJP) com tripsina produz liberação de substância(s) que

causa(m) hipotensão na própria serpente mas não no rato, este efeito hipotensor também foi potenciado

por captopril.

4 — 0 plasma de Bothrops jararaca tripsinizado contraiu o útero isolado da serpente, uma preparação

farmacológica muito pouco sensível à bradicinina. O plasma tripsinizado foi inativo em oviduto de pomba

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COMISSÃO EDITORIAL. Coletânea de resumos de trabalhos publicados pelos pesquisadores do Instituto

Butantan (1989). Mem. Inst. Butantan, 52(31:89-105, 1990

e útero de rata e teve fraca atividade no (leo de cobaia. Efeitos semelhantes foram observados com incu¬

bados de uma fração de BJP, que contém globulinas, com a cininogenase de BJV, parcialmente purificada.

5 — Do mesmo modo que as cininas de mamíferos, a(s) substância(s) foilraml dializável(eis), termoestável(eis)

em pH ácido mas não em pH alcalino e inativada(s) por quimotripsina mas não por tripsina. Sua ativação

por BJV ou cininase II de BJP foi inibida por captopril.

6 — Estes dados sugerem que, além de liberar histamina, BJV ou tripsina liberam do plasma da serpente uma

substância (ou substâncias) semelhantels) a cininas.

7 — Uma vez que já havia sido demonstrado, em experimentos feitos com preparações farmacológicas usadas

para ensaio de cininas de mamíferos, que BJV e outras cimnogenases ativas sobre plasma de mamíferos

eram incapazes de liberar cininas de BJP, os dados acima também sugerem que a serpente Bothrops jara¬

raca, como as aves, desenvolveu um sistema calicreína-cininas próprio.

2. BRODSKYN, C.I.; SILVA, A.M.M.; TAKEHARA, H.A.; MOTA, I.

IgC subclasses responsible for immune clearance in mice infected with Trypanosoma cruzi.

Immunol. Cell. Bioi,, 67:343-348, 1989.

Abslract: To examine the role of different immunoglobulin subclasses in the immune clearance of Trypanoso¬

ma cruzi, mice containing bloodstream trypomastigotes were injected intravenously with immune serum, IgG-

depleted serum, or with the IgGI or lgG2 fractions and the rate of removal of the parasites from circulation

was delermined. Using IgG concentrations similar to those found in the immune serum, the rate of clearance

mediated by lgG2 was six-fold higher than that obtained with IgGI. This difference did not appear to be due

to differences in antibody specificity, as Western blotting showed that each isotype recognized a similar set

of antigens extracted from the parasite. However, the T. cruzi specific antibody content of the lgG2 was ap-

proximately five-fold higher than IgGI. When the dose of IgG was adjusted to equalize the antibody content,

the clearance ability of the IgGI and lgG2 was very similar. It is concluded that the two subclasses have a

similar clearance ability.

Resumo: A fim de examinar a função das diferentes subclasses de imunoglobulinas no "clearance" imune

dos tripomastigotas sanguíneos do T. cruzi (Btrys) camundongos contendo Btrys na circulação foram injeta¬

dos por via intravenosa com soro anti-T, cruzi não tratado ou depletado de IgG ou com as frações IgGI ou

lgG2 obtidas do mesmo e a velocidade de remoção dos parasitas da circulação determinada em cada situação.

Usando-se concentrações de IgG semelhantes àquela encontrada no soro imune, a velocidade do clearance

mediado por lgG2 foi 6 vezes mais rápida do que aquela obtida por IgGI. Esta diferença não parece ser devida

a diferenças na especificidade dos anticorpos desde que análise por Western blotting mostrou que cada isótipo

reconhece os mesmos antígenos parasitários. Entretanto, o conteúdo em anticorpo especifico da lgG2 foi apro¬

ximadamente 5 vezes maior do que o da IgGI. Quando a dose de IgGI ou lgG2 aplicada foi ajustada para

igualar o teor de anticorpo a capacidade de clearance da IgGI e lgG2 foi igual. Sugere-se que as duas subclas¬

ses têm o mesmo poder de clearance.

3. BRUNNER JR., A.

Ultrastructural aspects of the final stage of hemoglobin biosynthesis.

Brazilian J. Med. Bioi. Res., 22:1051-1064, 1989.

Abslract Electron microscopic observations on rabbit embryo, adult rabbit, guinea pig, and human immature

erythroid cells showed characteristic hemoglobinized organelles distinguisheable from mitochondria by their

highly dense matrix, two or three longitudinally arranged double lamellae, and smaller diameters. The presence

of hemoglobin (Hb) within those organelles was also demonstrated by electrophoresis of the concentrated su-

pernatant from the isolated, washed and osmotically lysed organelle fraction. The term hemosome has been

suggested for these organelles due to their Hb content. We propose that they are the sites of heme integration

into the four polypeptide globin chains.

The frequency of hemosomes is higher in the peripheral blood erythroid cells of embryos than in the liver erythroid

cells, coinciding with the higher Hb synthesis rate in peripheral blood than in the liver. Peripheral blood reticulo-

cytes of rabbits with anemia induced by bleeding presented a lower hemosome frequency than normal reticulo-

cytes. The decrease paralleled the decay of Hb biosynthesis activity. Moreover, Hb biosynthesis induced in

HeLa cells and epithelial cell tissue cultures was always associated with the formation of hemosomes,

Hemosomegenesis was studied in epithelial tissue culture cells experimentally induced to synthesize Hb, allow-

ing the Identification of several stages of hemosome formation in erythroid cells. The morphological data sug-

gest that mitochondria are successively modified to lamellated bodies, prehemosomal vesicles, prohemosomes

and hemosomes.

These organelles have also been detected in erythroid cells of representative specimens from other vertebrate

classes.

Resumo : Observações letromicroscópicas em células eritróides imaturas de embrião de coelho, coelho adulto,

cobaia e humanas mostraram organelos hemoglobinizados característicos, distinguíveis das mitocôndrias pela

sua matriz de elevada densidade, por conterem duas ou três lamelas duplas dispostas longitudinalmente e por

apresentarem diâmetros menores. A presença de hemoglobina (Hb) nesses organelos foi também demonstra¬

da por eletroforese do sobrenadante concentrado dos organelos isolados, lavados e lisados osmoticamente.

Foi sugerido o termo hemossomo para esses organelos devido ao seu conteúdo em Hb. Propusemos a hipóte¬

se segundo a qual o hemossomo seria a entidade morfológica.em que ocorreria a integração do grupo hemo

às quatro cadeias polipeptldicas de globina.

A frequência da hemossomos nas células eritróides do sangue periférico de embriões é maior que nas células

eritróides do fígado, coincidindo com a maior atividade de síntese de Hb no sangue periférico comparativa¬

mente ao fígado. Reticulócitos do sangue periférico de coelhos com anemia induzida por sangrias sucessivas

apresentaram uma frequência de hemossomos significativamente menor que em reticulócitos de coelhos nor-

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COMISSÃO EDITORIAL. Coletânea de resumos de trabalhos publicados pelos pesquisadores do Ins¬

tituto Butantan (1989). Mem. Inst. Butantan, 52(31:89-105, 1990.

mais. Esta diminuição em hemossomos por reticulócito é acompanhada por uma queda de atividade na síntese

de Hb. Além disso, a biossíntese de Hb induzida em células HeLa e em células epiteliais, em cultura de tecidos,

mostrou uma constante associação com a formação de hemossomos.

A hemossomogênese foi estudada em cultura de tecido de células epiteliais experimentalmente induzidas à

biossíntese de Hb, possibilitando a identificação das várias fases de formação do hemossomo nas células eri-

tróides. Os dados morfológicos sugerem que as mitocôndrias são modificadas, sucessivamente, em corpos

lamelados, vesículas prehemossômicas, prohemossomos e hemossomos. Estes organelos têm sido detecta¬

dos também em células eritróides de espécimes representativos de outras classes de vertebrados.

4. CARMONA, E.; ARAUJO-VIEL, M.S.; PICARELLI, Z.P.; PRADO, E.S.

Bothropain: a novel cysteine peptidase from plasma of the snake Bothrops jararaca.

Comp. Biochem. Physiol., 936(41:781-788, 1989.

Abstract : 1. Bothropain, a novel cysteine peptidase isolated from Bothrops jararaca plasma, was shown to

be a 780kDa glycoprotein, not dissociated by SDS.

2. Inhibition of bothropain was complete with low M, cysteine proteinase inhibitors but only partial with kinino-

gens. L-trans-epoxysuccinyl-L-leucylamido-(4-guano)-butane was used for the enzyme active site titration.

3. Primary specificity of bothropain for arginine and lysine was demonstrated in the hydrolysis of

peptidyl-4-nitroanilides and oligopeptides. Protein substrates for bothropain were no't found yet.

Resumo: 1. Foi demonstado que a bothropaina, uma nova peptidase isolada do plasma de Bothrops jararaca,

é uma glicoprotefna de 780kDa, não dissociada por SDS.

2. Bothropaina foi completamente inibida por inibidores de cisteino-proteinases de baixo peso molecular, mas

apenas parcialmente inibida por cíninogênios. L-trans-epoxysuccinil-L-leucilamido-(4-guano)-butano foi usado

para a titulação do sítio ativo da enzima.

3. A especificidade primária da bothropaina por arginina e lisina foi demonstrada pela hidrólise de

peptidil-4-nitroanilidas e oligopeptides. Ainda não foram encontrados substratos protéicos para bothropaina.

5. CARNEIRO, C.R.M.;.SARUWATARI, A.A.; RAW, I.; SCHMIDT, B.J.; DIAMENT, A.J.

Lithium — a new method for the release of lysosomal enzymes for the diagnosis of inborn errors.

In: SCHMIDT, et ai. eds. Current trends in infanti screening. Amsterdam, Elsevier Sciençe Publishers, 1989.

p. 419-422.

Abstract: lt was shown that incubation of leukocytes with 20 mM lithium acetate releases lysosomal enxymes.

Hexosaminidases and arylsulfatases was measured in lekocytes treated with lithium and by sonnication, show-

ing identical results.

Resumo: Foi demonstrado que a incubação de leucócitos com 20mM de acetato de lítio libera enzimas lisossô-

micas. Hexosaminidases e arylsulfatases foram medidas em leucócitos tratatos com lítio e por sonicação, mos¬

trando resultados idênticos.

6. CHUDZINSKI, A.M.; SAMPAIO, M.U.; OLIVA, M.L.V.; SAMPAIO, C.A.M.

A Bothrops jararaca plasma cysteine-proteinase inhibitor related to mammalian kininogen.

Brazilian J.Med.Biol.Res., 22:945-948, 1989.

Abstract: A kininogen-like protein was purified from Bothrops jararaca plasma by DEAE-Sephadex ion-exchenge

and carboxy-methyl-papain-Sepharose affinity chromatography. The molecular weight, estimated by SDS-gel

electrophoresis, is about 100,000 and a species of about 75,000 is formed after incubation with horse urinary

kallikrein. After incubation with trypsin, only traces of biological activity were detected in tests on guinea pig

ileum. The purified protein inhibits papain and bromelain, does not correct the clotting time of a kininogen-

depleted human plasma, and does not affect the clotting time of plasma from Waglerophis merremii, a non-

poisonous snake; the same type of inhibitor was found in this nonpoísonous snake. The dissociation constant

IKi) for the papain-inhibitor complex is approximately 1.6 nM.

Resumo: Uma proteína com características semelhantes ao cininogênio foi purificada do plasma de Bothrops

jararaca por cromatrografia de troca iônica em DEAE-Sephadex e de afinidade em carbqximetil-papaína-

-Sepharose. O peso molecular estimado por eletroforese em gel de poliacrilamida-SDS é de cerca de 100 KDa

e uma banda de cerca de 75 KDa é formada após a incubação com calicreína urinária equina. Após incubação

com tripsina, apenas traços de atividade biológica foram detectados no teste em íleo isolado de cobaia. A pro¬

teína purificada inibe papaína e bromelalna, não corrige o tempo de coagulação de um plasma humano deple-

tado de cininogênio, e não afeta o tempo de coagulação do plasma de Waglerophis merremii, uma serpente

não peçonhenta; um inibidor similar foi encontrado no plasma desta serpente não peçonhenta. A constante

de dissociação (Kil para o complexo papalna-inibidor é de aproximadamente 1,6 nM.

7. CIANCIARULLO, A.M.; SPADACCI MORENA, D.D.; MORENA, P.; JARED, C.; BRUNNER JR., A.

Comparative ultrastructure oTmaturing toad IBufo ictericus I and rabbit {Oryctolagus cuniculusl erythroid cells

with regard tohemoglobin biosynthesis.

Comp. Biochem. Physiol. 944(31:525-529, 1989.

Abstract: Toad and rabbit maturing erythroid cells were comparatively analysed with regard to their ultrastruc-

tural modifications involved in hemoglobin (Hbl biosynthesis. The mitochondrial inner membrane differentiates

to a lamellated body that, successively, gives rise toprehemosomal vesicles, prohemosomes, and to

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COMISSÃO EDITORIAL. Coletânea de resumos de trabalhos publicados pelos pesquisadores do Ins¬

tituto Butantan (1989). Mem. Inst. Butantan, 52(31:89-105, 1990.

hemoglobinized organalles called hemosomes. The prehemosomal vesicle involves ferruginous inclusions, taken

as iron sources for heme biosynthesis, as well as the polypeptidic globin chains, assembling themselves in the

course o( volume reduction. From the prohemosomal stage onwards, where possibly heme biosynthesis oc-

curs, hemosomes are formed; these organelles are presumably sites where the final Hb biosynthesis could take

place.AII development stages leading to hemosome formation are similar in toad and rabbit erythroid cells, ex-

cept that in the toad, the structural prohemosoma characteristics persist in hemosomes. Through toad erythoid

cell fractionation and eletroforesis of the organelle lysate supernatant, a wide 8 weak cytoplasmic Hb bands

were obtained; the latter coincides with the intraorganellar Hb band.

Resumo: Células eritróides imaturas de sapo e coelho foram analisadas comparativamente quanto òs modifica¬

ções ultra-estruturais envolvidas na biossíntese de hemoglobina (Hb). A membrana mitocondrial interna

diferencia-se em corpo lamelado que se modifica, sucessivamente, em vesículas prehemossômicas, prohe-

mossomos e em organelos hemoglobinizados, chamados hemossomos. A vesícula prehemossômica envolve

inclusões ferruginosas, consideradas como fonte de ferro para a biossíntese de hemo, assim como as cadeias

polipeptídicas de globina, aproximando-as no decorrer da redução em volume. Da fase prohemossômica em

diante, na qual possivelmente ocorre a biossíntese, de hemo, hemossomos são formados; nestes organelos

ocorreria, presumivelmente, a biossíntese final da Hb.

Todas as fases de desenvolvimento que levam à formação do hemossomo são similares nas células eritróides

do sapo e do coelho, exceto que no sapo as características estruturais do prohemossomo persistem no hemos¬

somo. Através do fracionamento das células eritróides do sapo e eletroforese do sobrenadante do lisado dos

organelos, uma forte e outra fraca bandas de Hb citoplasmática foram obtidas; esta última coincide com a

banda de Hb intra-organelar.

8. DAIMON.T. & SANO-MARTINS.I.S.

Alterationsof wheat-germ agglutinin binding pattern on cell surface of blood platelets after thrombin stimulation.

Histochemistry, 9f.461-467, 1989.

Abstract: An attempt was made to demonstrate wheate-germ agglutinin (WGA) binding sites on platelet sur-

faces after thrombin stimulation, by means of a post-embedding cytochemical technique using colloidal gold

as marker at an ultrastructural levei. In unstímulated platelets washed with EDTA, an intense uniform labeling

of WGA-gold complexes was (pund on the surface membrane. When washed platelets were stimulated by

thrombin in the absence of Ca 2 + , only a release reaction was induced. WGA labeling on the surface mem-

branes of these platelets decreased dramatically. However, the labeling intensity of WGA-gold complexes on

the surface membrane of aggregated platelets induced by thrombini the presence of Ca 2 * increased signifi-

cantly compared to that of thrombin-stimulated platelets in the absence of Ca 2 + . In contrast to the uniform

labeling on the surface membranes of unstimulated platelets, clusters of gold labei were often found on the

surface membrane of the aggregated platelets, although there was no significam quantitativa difference in the

labeling intensity between these two groups. Thus, we present direct morphological evidence demonstrating

qualitative and quantitativa alterations of WGA labeling on the surface membrane of platelets after thrombin

stimulation. The possibility is considered that WGA-binding glycoproteins in the surface membrane are involved

in the aggregation response after thrombin stimulation.

Resumo: Foi feito um estudo ultra-estrutural das ligações da lectina WGA nas membranas das plaquetas hu¬

manas após ativação por trombina utilizando-se da técnica citoquímica de pós-embebição e usando-o ouro

coloidal como marcador.

As plaquetas lavadas e não ativadas apresentaram uma marcação intensa, com distribuição uniforme de WGA

na surperfície da membrana. Quando estas plaquetas foram estimuladas por trombina na ausência de Ca 2 + ,

verificou-se secreção de substâncias intraplaquetáhas, porém não houve agregação. As ligações de WGA na

membrana dessas plaquetas diminuíram significativamente quando comparadas com plaquetas não ativadas

e, também, com as agregadas por trombina. Ao contrário da distribuição uniforme das marcações de ouro

coloidal nas membranas das plaquetas normais, verificou-se agrupamentos de ouro coloidal nas plaquetas agre¬

gadas por trombina, embora não apresentando diferença quantitativa entre estes dois grupos. Assim, a ativa¬

ção por trombina induziu uma alteração quantitativa e qualitativa de ligações de WGA nas membranas de

plaquetas, sugerindo uma possibilidade das glicoproteínas das membranas das plaquetas que se ligam á WGA

estarem envolvidas com a agregação induzida pela trombina.

9. DIAMENT, A.; CARNEIRO. C.R.M.; RAW,t.; SCHIMIDT, B.J.

Arylsulfatase-A determination in patients with confirmed or suspected metachromatic leukodystrophy.

In: SCHIMIDT, B.J. et al. eds. Current trends in infant screening.

Amsterdam, Elsevier Science Publishers, 1989. p. 415-418.

Abstract: Arylsulfatase — A was determined in leukocytes using methyl-umbeliferyi-sulfate as substrate and

silver ions to distinguish between isoenzymes. This methods was used on a groups of 22 patients with con¬

firmed leucodistrophy, 39 suspected cases and 91 patients with other neurological diseases. The method was

unsafe to detect heterozygotes but allowed to distinguish the suspected group, containing enzyme deficient

and heterozygote cases, from the normais.

Resumo: Arilsulfatase — A foi determinada em leucócitos usando metil-umbeliferil sulfato como substrato e

ions de prata para distinguir isoenzimas. 0 método foi usado num grupo de 22 pacientes com leucodistrofia,

39 casos suspeitos, e 91 pacientes com outras doenças neurológicas. O método não é seguro para detectar

heterozigotos, mas permitiu distinguir o grupo suspeito, contendo pacientes com deficiência enzimática e he-

terozigotos dos normais.

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tituto Butantan (1989). Mem. Inst. Butantan, 52(31:89-105, 1990.

10. DORCE, V.A.C. & PALERMO-NETO, J.

Hormônios sexuais femininos e sistemas dopaminérgicos centrais.

Ciência e Cultura, 47(5): 421-426, 1989.

Abstract: Female sexual hormones and dopaminergic brain systems. The relations between dopaminergic Sys¬

tems and female sexual hormones were analysed. Several references were presented suggesting not only that

tuberoinfundibular dopaminergic system is related to pituitary hormonal secretion but also that female sexual

hormones can modify dopaminergic neurotransmission. The higher incidence of tardy dyskinesias observed

in women after menopause was associated to the development of central dopaminergic supersensitivity.

Resumo: Foram analisadas as relações entre sistemas dopaminérgicos centrais e hormônios sexuais femini¬

nos. O trabalho discute não apenas as evidências que mostram estar o sistema dopaminérgico túbero-infundibular

díretamente ligado a secreções hormonais hipofisárias, como também aquelas que apontam efeitos dos hor¬

mônios sexuais femininos na atividade dos sistemas de neurotransmissâo dopaminérgica. 'Associou-se a maior

incidência de discinesias tardias, observada em mulheres após a menopausa, ao desenvolvimento e supersen-

sibilidade dopaminérgica central.

11. HISS, H.; SALVADORI, D.M.F.; BEÇAK, W.; RIBEIRO, L.R.

An indirect evaluation of liquid insecticide concentrations in atmospheres for mutagenicity experiments.

Arq. Biol. Tecnol., 321 41:787-791, 1989.

Abstract: A method for the generation of a dichlorvos atmosphere to be used in mutagenicity experiments is

proposed, based on a simple device which allows indirect estimation of insecticide concentration. The system

can also be applied to other kinds of liquid insecticides, since it is simply based on the weight lósses of the

flask during vaporization.

Resumo: É proposto um método para a geração de uma atmosfera de diclorvos, a ser utilizada em experimen¬

tos mutagênicos baseado em um dispositivo simples, e que permite uma estimativa indireta da concentração

do inseticida.

O sistema também pode ser aplicado a outras espécies de inseticidas líquidas, tendo em vista de que o mesmo

é simplesmente baseado nas perdas de peso do frasco durante a vaporização.

12. KAMIGUTI, A.S. & CARDOSO, J.L.C.

Haemostatic changes caused by the venoms of South American snakes.

Toxicon, 27(91:955-963, 1989.

Abstract: Changes in the haemostic mechanism caused by venoms of Bothrops, Crotalus and Lachesis snakes

from Central and South America in human accidents are reviewed. Changes in the blood coagulation mechan¬

ism' could found depending in the action of the venom on clotting factors.

Resumo: Foi revista a literatura sobre alterações nos mecanismos de hemostasia provocadas pelos venenos

das serpentes Bothrops, Crotalus e Lachesis da América Central e do Sul.

Alterações nos mecanismos de coagulação sanguínea podem ser encontradas, dependendo da ação do vene¬

no sobre os fatores da coagulação.

13. LEITE, L.C.C. & AUGUSTO, O.

DNA alterations induced by the carbon-centered radical derived from the oxidation of 2-phenylethylydrazine.

Arch. Biochem. Biophys., 2701 21:560-572, 1989.

Abstract: The possible significanoe of carbon-centered radicais in hydrazíne-induced carcinogenesis is explored

by studies of the interaction between the 2-phenylethyl radical and DNA. The radical is efficiently generated

during oxidation of phenelzine (2-phenylethyl-hydrazine) promoted by oxyhemoglobin or ferricyanide, as demon-

strated by spin-trapping experiments and analysis of the reaction products. In the ferricyanide promoted oxida¬

tion, ethylbenzene formation accounts for about 40% of the initial drug concentration, from 5 to 100 mM

phenelzine. By contrast, product formation in the presence of oxyhemoglobin depends on the enzyme concen¬

tration due to the fact that the prosthetic heme is destroyed during catalytic turnover. Covalent binding of the

2-phenylethyl radical to oxyhemoglobin is demonstrated by experiments with 2- t 3 HJ phenelzine, where triti-

um incorporation to the protein is inhibited by the spin-trap, a-(4-pyridyl-1-oxide)-N-fert-butylnitrone. The

2-phenylethyl radical is also able to alkylate DNA as suggested by electrophoretic studies with plasmid DNA,

and proved by experiments with 2- [ 3 Hl-phenelzine. The carbon-centered radical has a preference for attack-

ing guanine residues as demonstrated by the use of sequencing techniques with 32 P-DNA probes. The results

indicate that the 2-phenylethyl radical is an important product of phenelzine oxidation and that this species

can directly damage protein and DNA.

Resumo: O papel de radicais de carbono na carcinogenicidade de derivados de hidrazina foi investigado atra¬

vés de estudos da interação entre o radical 2-feniletila e DNA. O radical é eficientemente gerado durante a

oxidação de fenelzina (2-feniletilidrazina) promovida por oxiemoglobina ou ferricianeto, como demonstrado por

experimentos de captação de spin e análise de produtos de reação. Na oxidação promovida por ferricianeto,

a formação de etilbenzeno corresponde a 40% da concentração inicial, entre 5 e 100 mM de fenelzina. Em

contraste, a formação de produto na presença de oxiemoglobina depende da concentração da enzima devido

ao fato do heme prostético ser destruído durante a catálise. A ligação covalente do radical 2-feniletila à oxie¬

moglobina é demonstrada através de experimentos com 2- 3 H-fenelzina, onde a incorporação de trítio é inibi-

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COMISSÃO EDITORIAL. Coletânea de resumos de trabalhos publicados pelos pesquisadores do Ins¬

tituto Butantan (1989). Mem. Inst. Butantan, 52(31:89-105, 1990.

da pelo captador de spin, a -(4-piridil-1-óxido)-N-tert-butylnitrona. O radical 2-feniletila também é capaz de

alquilar o DNA, como é sugerido por estudos com eletroforese de DNA de plasmldeo, e comprovado por expe¬

rimentos com 2- 3 H-fenelzina. Estudos utilizando técnicas de seqüenciamento de sondas de 32P -DNA demons¬

traram que o radical de carbono tem preferência por ataque a resíduos de guanina. Estes resultados demonstram

que o radical 2-feniletila é um produto importante na oxidação da fenelzina e que esta espécie pode danificar

diretamente proteína e DNA.

14. LUCCHIARI, M.A.; LONGO, M.A.; PEREIRA, C.A.

Nonfatal demyelinating encephalomyelitis induced by coronavirus (JHM strainl infection in mice.

Brazilian J. Med. Biol. Res., 22.77-80, 1989.

Abstract: C3H mice infected intravenously with the JHM strain of coronavirus showed high incidence of demye-

lination (44,8%) and low incidence of encephalitis-induced mortality (6,9%). High titers of virus were detecta-

ble in the brain and liver of mice only during the first 3 to 12 days of infection (10 3 and 10 4 PFU/g, respectivelyl.

Most of the animais recovered from the first phase of disease and some (11,1%) carne down with paralysis

6 to 7 weeks after the infection, with no histological changes or virus detectable in their tissues.

Resumo: Camundongos, C3H infectados por via intravenosa com a cepa JHM de coronavirus, mostraram alta

incidência de desmielinizaçêo (44,8%) e baixa incidência de mortalidade induzida por encefalite. Altos títulos

de virus foram detectados no cérebro e fígado dos camundongos durante os primeiros 3 a 12 dias de infecção

(10 3 e 10 4 PFU/g, respectivamentel. A maioria dos animais se recuperaram da primeira fase da doença e al¬

guns (11,1%) morreram com paralisia 6 a 7 semanas após a infecção, sem alterações histológicas ou virus

detectável nos seus tecidos.

15. LUCCHIARI, M.A. & PEREIRA, C.A.

A major role of macrophage activation by interferon-gamma during mouse hepatitis virus type 3 infection. I.

Genetically dependent resistance.

Immunobiol., 180: 12-22, 1989.

Abstract: Resistance of mice to mouse hepatitis virus type 3 (MHV3f infection is genetically determined. Nor¬

mal adult A/J mice are resistam, and BALB/c mice are susceptible. Higher titers of virus and interferon (IFN)

in vivo were found in MHV3--infected BALB/c mice compared with A/J mice. In vitro activation of macrophages

IM*I by lipopolysaccharide (LPS) delayed MHV3 replication only in cells that originated from A/J mice, although

cell populations from both A/J and BALB/c mice were able to synthesize comparable amounts of IFN-a/?

Using specific antibodies, we have shown that the delayed MHV3 replication in LPS-activated A/J M was

due, in part, to IFN- a/3. A/J M* were found to be more sensitive to IFN-ythan to IFN- a|3, and BALB/c M*

did not develop an antiviral State to either IFN. Cultured spleen cells from A/J mice synthesized more IFN-y

than BALB/c spleen cells after specific or non-specific stimulation. The results indicate that IFN-activated M*

may play a crucial role in the resistance to MHV3 infection. Since IFN-y is produced in large amounts by A/J

spleen cells after specific stimulation with MHV3 and is efficient in activating the A/J M», a T cell-dependent

mechanism is likely to be involved.

Resumo: A resistência de camundongos à infecção pelo virus da hepatite murina tipo 3 (MHV3) é genetica¬

mente determinada. Camundongos A/J adultos normais são resistentes, e BALB/c são susceptíveis. Altos títu¬

los de v(rus e interferon (IFN) "in vivo" foram encontrados em camundongos BALB/c infectados com MHV3

quando comparados com camundongos A/J. A ativação "in vitro" de macrófagos com LPS retardou a replica-

ção dos MHV3 somente em células originadas de camundongos A/J, embora células de ambas linhagens de

camundongos foram capazes de sintetizar quantidades comparáveis de IFN alfa beta. Usando anticorpos espe¬

cíficos, mostramos que a replicaçâo retardada dos MHV3 em macrófagos A/J.ativados com LPS, era devida

em parte ao IFN alfa beta. Macrófagos A/J mostraram-se mais sensíveis ao IFN gama do que ao IFN alfa beta,

e macrófagos BALB/c não desenvolveram um estado antiviral para IFN. Culturas de células do baço de camun¬

dongos A/J sintetizaram mais IFN gama do que células de camundongos BALB/c após estimulo especifico ou

não especifico. Os resultados indicam que macrófagos ativados por IFN gama podem desempenhar um papel

crucial na resistência à infecção por MHV3. Como IFN gama é produzido em grandes quantidades por células

do baço de camundongos A/J após estímulo específico como MHV3 e é eficiente na ativação de macrófagos

A/J, um mecanismo T-dependente parece estar envolvido.

16. MANDELBAUM, F.R.; SERRANO, S.M.T.; SAKURADA, J.K.; RANGEL, H.A.; ASSAKURA, M.T.

Immunological comparison of hemorrhagic principies present in venoms of the Crotalinae and Viperinae subfa-

milies.

Toxicon, 27{ 21:169-177, 1989.

Abstract: Antibodies were raised against hemorrhagic factors HF,, HF 2 'and HF 3 isolated from the venom of

Bothrops jararaca and NHF a b from the venom of Bothrops neuwiedi. Crude venoms of different species of

snakes were assayed with the rabbit antisera specific for the hemorrhagic factors. Results of immunodiffusion,

neutralization of hemorrhagic activity and micro-complement fixation indicated that there is an immunological

relationship between the venom hemorrhagic components of the Bothrops species and those of other species

of the Crotalinae subfamily. The factors of Bothrops species seem to be structurally similar. The hemorrhagic

proteins from the venoms of Lachesis, North American Crotalus, Asian Trimeresurus and Akistrodon species

Show some resemblance of the Bothrops factors. The venom hemorrhagic principies from snakes of the Viperi¬

nae subfamily (6/f/s and Vipera species) might have few epitopes similar to those of Bothrops species as

the only relation shown was the partial neutralization by the immune sera.

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COMISSÃO EDITORIAL. Coletânea de resumos de trabalhos publicados pelos pesquisadores do Ins¬

tituto Butantan (1989). Mem. Inst. Butantan, 52(31:89-105, 1990.

Resumo: Foram produzidos anticorpos contra os fatores hemorrágicos.HF,, HF 2 e HF 3 isolados do veneno de

Bothrops jararaca e NHF, b , de veneno de Bothrops neuwiedi. Venenos brutos de diferentes espécies de ser¬

pentes foram testados com os soros de coelhos específicos para esses fatores hemorrágicos. Resultados de

imunodifusâo, neutralização de atividade hemorrágica e fixação de microçomplemento indicaram que existe

uma relação imunológica entre os componentes hemorrágicos de venenos das espécies Bothrops e os de ou¬

tras espécies da subfamília Crotalinae. Os fatores das espécies Bothrops parecem ser estruturalmente simila¬

res. As proteínas hemorrágicas dos venenos de Lachesis de Crotalus norte-americanos de várias espécies de

Thmeresurus e Agkistrodon asiáticos mostram alguma semelhança com os fatores das Bothrops. Os princípios

hemorrágicos de venenos de serpentes da subfamília Viperinae (espécie Bitise Vipera podem ter alguns epito-

pos similares aos das espécies Bothrops, pois a única relação mostrada foi a neutralização parcial pelos soros

imunes.

17. MIYAKI, C.; PRAL, M.M.; GALLINA, N.M.F.; RIZZO, E. de

Micoplasma como contaminante de culturas celulares mantidas em laboratórios de instituições particulares

e oficiais.

Rev. Saúde Públ., S. Paulo, 23111:39-44, 1989.

Resumo: Foi realizado estudo sobre a incidência de contaminação por micoplasma em 29 tipos de linhagens

celulares pertencentes a sete laboratórios de instituições particulares, oficiais e de ensino superior. Utilizando

o método de cultivo direto e oito passagens seriadas em meios específicos, líquido e sólido, verificou-se que,

do total de 106 amostras, 48 apresentaram-se contaminadas por micoplasma (45,28%), o que constitui ele¬

vado índice de contaminação. O fato indica que testes periódicos para a determinação da presença de mico¬

plasma nas culturas em utilização é recomendável e que as culturas contaminadas devem ser eliminadas para

evitara disseminação do microrganismo. Outras medidas preventivas devem ser adotadas, como a eliminação

da pipetagem bucal, execução de técnicas assépticas mais estritas no manuseio das células, controle dos so¬

ros de origem animal, da tripsina e de outros componentes dos meios de cultura utilizados em cultura celular.

O estudo mostrou que, ao invés das oito passagens seriadas propostas inicialmente, cinco foram suficientes

para a detecção dos micoplasmas, o que representa economia de tempo e de materiais de custo elevado, re¬

duzindo de 848 para 530 o número de passagens e a duração do teste, de oito para cinco semanas.

Abstract: Mycoplasma is one of the most serious contaminants of cell cultures. Its detection is very important

in virology, as well as its eradication. The aim of this study was to verify the incidence of mycoplasma in cell

lines maintained in seven laboratories of private, government and college institutions of the State of São Paulo,

Brazil, for the t purposes of research, production of reagents for diagnosis and production of biologicals for hu-

man and animal use. Of the 29 cell lines, eight were derived from human tissues and 21 from other animal

species (dog, rabbit, mouse, hamster, monkey, pig, chicken and ox). Using the direct method with specific

liquid and solid mfedia for detection of mycoplasma, 48 out of the 106 cell samples tested were positive, cor-

responding to a contamination index of 45.28%. The incidence of contamination among the 35 cell samples

. of human origin was 51.43% (18 positive). Of the 71 samples originated from other species, 30 were positive

(42.25%). The high incidence of contamination found calls for the adoption of measures for the prevention

of this hazard: the elimination of mouth pipetting, the use of aseptic techniques and a rigid control of trypsin,

serum and other components of cell culture media. The substitution of mycoplasma-free cultures for all Con-

faminated ones and the performance of periodical tests for mycoplasma detection must also be carried out

to prevent and avoid the dipsemination of these organisms. Data obtained showed that contamination appeared

in the 2 nd (72.92%), in the 3 ,<J (20.83%) and in the 4 ,h passage (6.25%). By using this technique, five pas¬

sages are sufficient to detect mycoplasma and allow a safety margin, thus shortening the length of the test,

saving reagents and providing satisfactory and reliable results. If a similar stüdy were carried out establishing

five as the number of serial passages for each mycoplasma detection test, the original number of passages

would be reduced from 848 to 530 and the time spent on the test would be teduced from eight weeks to five.

18. MOTA, I. & UMEKITA, L.F.

The effect of C3 depletion on the clearance of Trypanosoma cruzi induced by IgG antibodies.

Immunology Letters, 21: 223-226, 1989.

Abstract: Passive transfer of homologous immune serum or IgG anti Trypanosoma cruzi antibodies to normal

mice containing circulatíng T. cruzi bloodstream trypomastigotes (Bfrys) induces a very fast clearance of the

parasites. Previous work from this laboratory has shown that F(ab')2 fragments obtained from IgG anti-T. cruzi

antibodies retain the ability to induce lysis of the Btrys but are uhable to induce clearance of the parasites.

This suggests that the clearance is dependent on the Fc region. The removal of the Btrys may then be effected

by attachment of the antibodies to the parasites and removal of the opsonízed parasites by the mononuclear

phagocytic System. Attachment of the opsonized parasites to macrophages may be effected either through

the Fc receptor that binds specifically to the heavy chain of IgG or through C3b fragments after cleavage of

C3 by C3-convertases. In order to find out the possible role of C3b in this phénomenon the clearance of Btrys

was determined in mice depleted of C3 by previous treatment with cobra venom factor. The results of these

experiments showed that depletion of C3 completely abolished the immune clearance induced by anti-T. cruzi

antibodies. It is suggested that C3 is required for the clearance of Btrys from circulation.

Resumo: A transferência passiva de soro imune homólogo contendo anticorpos anti-T. cruzi para camundon¬

gos normais contendo tripomastigotassangüíneos circulantes, produz um ''clearance" extremamente rápido

dos parasitas. A remoção destes pode ser efetuada pela ligação dos anticorpos aos parasitas e sua remoção

pelas células do sistema mononuclear fagocítico (SMF). A ligação dos parasitas opsonizados às células do SMF

pode ser efetuada através do receptor do Fc, que liga-se especificamente à cadeia pesada da IgG ou através

COMISSÃO EDITORIAL. Coletânea de resumos de trabalhos publicados pelos pesquisadores do Ins¬

tituto Butantan (1989). Mem. Inst. Butantan, 52(31:89-105, 1990.

do fragmento C3b após clivagem do C3 pelas C3 convertases. A fim de verificar o possível papel dos recepto¬

res para o C3b neste fenômeno o "clearance" dos tripomastigotas foi determinado em camundongos depleta-

dos de C3 por tratamento prévio com o fator do veneno da cobra (COF). Os resultados dos experimentos

mostraram que a depleção de C3 abole o "clearance" imune induzido por anticorpos anti-T. cruzi.

19. PREZOTO, B.C.; HIRAICHI, E.; ABDALLA, F.M.F.; LAVRAS, A.A.C.; PICARELLI, Z.P.

Effect of the substance(s) released in vitro by the interaction of Bothrops jararaca (BJ) venom or trypsin and

BJ plasma on BJ blood pressure and uterus.

Advan. experim. med. biol., 247: 419-424, 1989.

Abstract: Release of a substance(s), hypotensive in BJ and contracting BJ uterus, was elicited by inçubating

BJ plasma or its globulin fraction with trypsin or a partially purified snake venom kininogenase. Like mammalian

kinins, tbis(ese) substance(s) was (ere) dialysable, thermostabile in acid but not in alkaline pH, inactivatéd by

chymotrypsin and BJ kininases but not by trypsin.

The released substancelsl was (ere) shown to be inactive on rat blood pressure or uterus and weakly active

on pigeon oviduct.

This strongly suggests that the released material is different from ornithokinin and frpm mammalian kinins, in-

dicating that snakes may have developed a specific kallikrein-kinin System.

Resumo: Uma substância que contrai o útero de Bothrops jararaca e produz hipotensão nessa' serpente foi

liberada pela incubação do plasma da serpente ou da fração globuKnica desse plasma com trlpsina ou uma

cininogenase parcialmente purificada de seu veneno. Como as cininas de mamíferos, essa substância foi diali-

sável, termoestável em pH ácido mas não em pH alcalino, inativada por quimotripsina e cininases de Bothrops

jararaca mas não por tripsina.

A substância liberada é inativa na pressão arterial ou útero de rato e fracamente ativa no oviduto de pombo.

Estes dados sugerem que o material liberado é diferente de ornitocinina e das cininas de mamíferos, indicando

que as serpentes podem ter desenvolvido um sistema calicreína-cininas especifico.

20. RIBEIRO, L.A. & JORGE, M.T.

Alteração do tempo de coagulação sanguínea em pacientes picados por serpentes Bothrops jararaca adulta

e filhote.

Rev. Hosp. Clín. Fac. Med. S. Paulo. 441 41:143-145, 1989.

Resumo: Trezentos e quarenta e oito casos de acidentes por Bothrops jararaca adulta (grupo Al atendidos no

Flospital Vital Brasil, no período de 1975 a 1984, foram comparados com 623 casos de acidentes pela mesma

serpente porém filhote, atendidos no mesmo local e período (grupo B). Não houve diferença estatisticamente

significante entre os dois grupos no que se refere à faixa etária dos pacientes ou ao tempo decorrido entre

o acidente e o atendimento. O grupo B, entretanto, apresentou incoagulabilidade sanguínea mais frequente¬

mente do que o grupo A. Conclui se que os filhotes de Bothrops jararaca são mais capazes do que as adultas

de causar incoagulabilidade sanguínea em suas vítimas humanas.

Abstract: Three hundred and forty eight cases of bites by adult Bothrops jararaca (group A) were admitted

to the Flospital Vital Brazil between 1975 and 1984. These cases were compared to 623 cases of bites by

young snakes of the same species (group B) during the same period and at the same hospital.

There was no difference between groups regarding age or time between bite and admittance to the hospital.

Flowever in group B blood incoagulability was more frequent when compared to group A.

We conclude that bites caused by young Bothrops jararaca are more likely to cause blood incoagulability in

humans than bites caused by adult Bothrops jararaca.

21. RIZZO, E. de: TENÓRIO, E.C.N.; MENDES, I.F.; FANG, F.L.W.; PRAL, M.M.; TAKATA; C.S.; MIYAKI, C.; GAL-

LINA, N.M.F.; TUCHIYA.H.N.; AKIMURA, O.K.

Sorbitol-gelatin and glutamic acid-lactose Solutions for stabilization of reference preparations of measles virus.

Buli. PAHO, 23(31:299-305, 1989.

Abstract: The work reported here sought to assess the protection afforded, by two stabilizing Solutions (sorbitol-

gelatin and glutamic acid-lactose) in preserving the potency of freeze-dried Schwarz strain rheasles virus during

storage with a view to the production of reference preparations and working lots of virus suspensions. Stabi-

lized virus suspensions and control suspensions were stored at - 70°C or were freeze-dried and stored at -

20°C, and their potency was determined over a storage period of 21 months. It was found that the sorbitol-

gelatin imparted more satisfactory stability (r = + 0.181 to the freeze-dried virus suspensions than did the

glutamic acid-lactose. The results also indicate that sorbitol-gelatin, used under the conditions of this' study,

is an effective stabilizer in the preparation of freeze-dried suspensions of Schwarz strain measles virus employed

as reference preparation working lots.

Resumo: Os Autores realizaram o estudo descrito neste artigo com o objetivo de avaliar o efeito protetor pro¬

porcionado por duas soluções estabilizadoras ao vírus do sarampo, cepa Schwarz-sorbitol-gelatina e ácido

glutâmico-lactose - submetido à liofilização, com vistas à produção de preparações referência lotes trabalho.

O efeito da estocagem a -20“C ou -70°C sobre a potência de suspensões virais estabilizadas, liofilizadas ou

não, foi avaliado durante 21 meses tendo as amostras sido tituladas quanto à potência, em paralelo com um

vírus padrão obtido de laboratório credenciado pela Organização Mundial da Saúde.

Depois de comentar e comparar as várias feses do estudo, tipos de células empregadas, meios estabilizadores,,

como foram estocadas as suspensões, a titulação dos vírus estabilizados etc., os Autores concluem ter ficado

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tituto Butantan (1989). Mem. Inst. Butantan, 52(31:89-105, 1990.

demonstrado que a solução de sorbitol-gelatina proporcionou estabilidade mais satisfatória (r = + 0.18) às

suspensões virais que foram liofilizadas e mantidas a -20°C, sendo, portanto, considerada como estabilizador

eficiente na preparação de vírus referência do sarampo lotes trabalho, liofilizados.

22. RUIZ, I.R.G. & BRISON, 0.

Methylation of ribosomal cistrons in diploid and tetraploid Odontophrynus americanus (Amphibia, Anura).

Chromosoma, 98: 86-92, 1989.

Abstracl: Odontophrynus americanus (Amphibia, Anura), genomic DNA from diploid and tetraploid specimens

was treated with restriction enzymes sensitive to cytosine and adenine methylation (5 meC and 6 meA). In

both diploids, and tetraploids a high proportion of the total DNA was not cleaved by 5 meC-sensitive enzymes

as observed on agarose gels stained with ethidium bromide. The DNAs were transferred to nitrocellulose filters

and hybridized with cloned fragments containing sequences of Xenopus iaevis 28S and 18S ribosomal DNA

(rDNA). A high levei of menthylation oi the ribosomal repeat units was revealed by 5 meC — sensitive enzymes

in blood, liver, kidney and testis tissues. Adenine was methylated to a lesser degree and similarly in the rDNA

from both germinative and somatic tissues. Comparison of the results obtained with DNA of diploids and

tetraploids showed that methylation of ribosomal genes was increased in tetraploid genomes of adult frogs,

but exact quantitative determinations could not be performed by this methodology. Cloning of the 28S region

of the rDNA repeat unit was performed in the X gtWES X C vector. Restriction patterns obtained with

methylation-sensitive enzymes using diploid and tetraploid derived clones confirmed the high levei of methyla¬

tion of the corresponding region of the ribosomal repeat unit in genomic DNAs. The implications of these results

in the regulation of expression of the ribosomal genes in diploids and tetraploids are discussed.

Resumo: Clivou-se o DNA genômico de O. americanus 2n e 4n (Amphibia, Anura) com enzimas de restrição

sensíveis à metilação de citosina e adenina (5meC e 6meA). Uma alta proporção de DNA total não foi clivado

pelas enzimas sensíveis à 5meC, tanto em diplóides como tetraplóides, quando observamos os géis corados

com brometo de etídio. Os DNAs foram transferidos para filtros de nitrocelulose e hibridizados com fragmentos

clonados contendo sequências de DNA ribossômicos (rDNA) 28S e 18S. Observou-se um alto grau de metila-

çâo das unidades de repetição ribossômicas através das enzimas sensíveis à metilação de citosina em tecidos

como sangue, fígado, rim e testículos. A metilação de adenina no rDNA foi menor, tanto em tecidos somáticos

como germinativo. A comparação dos resultados obtidos com DNA de diplóides e tetraplóides evidenciou um

aumento da metilação dos genes ribossômicos nos sapos tetraplóides adultos, mas determinações quantitati¬

vas exatas não foram possíveis por esta metodologia. A região 28S da unidade repetida do rDNA foi clonada

no vetor gtWES C. Os padrões de restrição obtidos com enzimas sensíveis à metilação usando clones

com insertos de origem diplóide e tetraplóide confirmaram o alto grau de metilação da região correspondente

na unidade de repetição ribossômica dos DNAs genômicos. Discutem-se as implicações destes resultados na

regulação da expressão dos genes ribossômicos em diplóides e tetraplóides.

23. SALVADORI, D.M.F.; RIBEIRO, L.R.; HISS.H.; BEÇAK, W.

Activity of four organophosphorus ínsecticides in the mouse sperm morphology test.

Rev. Soc. bras. Toxicol., 2(2): 21-28, 1989.

Abstract: The effect of four organophosphorus Ínsecticides (malathion, diazinon, dichlorvos and trichlorfon)

on mouse sperm head morphology was studied. The animais were treated dermally (malathion), intraperitoneally

(diazinon, trichlorfon and dichlorvos) and by inhalation (dichlorvos) during 5 consecutive days.

A statistically significant increase in the frequency of sperm abnormalities was observed in mice dermally ex-

posed to the highest tested dose of malathion (1000 mg/kg), in mice exposed via inhalation to dichlorvos (0.24

and 0.32 mg/l) and in mice intraperitoneally exposed to the highest dose of diazinon (100 mg/kg). However,

no statistically significant increase was observed in mice intraperitoneally exposed to dichlorvos and trichlorfon.

Resumo: O efeito de 4 inseticidas organofosforados (malation, diazinon, diclorvos e triclorfon) foi avaliado em

camundongos, através do teste de morfologia de espermatozóide. Os animais foram expostos aos inseticidas,

por via intraperitoneal (diazinon, diclorvos e triclorfon), via dérmica (malation) e por inalação (diclorvos) duran¬

te 5 dias consecutivos.

Um aumento significativo na frequência de espermatozóides anômalos foi observado quando os animais foram

expostos ao malation (1000 mg/kg) ao diazinon (100 mg/kg) e ao diclorvos, por inalação (0,24 e 0,32 mg/l).

Contudo, nenhum aumento significativo foi observado com relação ao triclorfon e ao diclorvos quando os ani¬

mais foram expostos por via intraperitoneat.

24. SANDOVAL, M.R.L. & PALERMO-NETO.J.

Behavioral aspects of GABAergic — dopaminergie interactions in the central nervous System.

European J. Pharmacol., 167: 117-125, 1989.

Abstract: GABAergic-dopaminergic relationships in rats were analysed quantitatively by means of behavioral

studies. Acute and long-term haloparidol administration induced significant leftward displacement of the con-

trol dose-response curves for picrotoxin but not those for strychnine or 3 mercaptopropionic acid (3-MPA).

Apomorphine given acutely increased the sensitivity of the animal to strychmine but not to picrotoxin or 3-MPA.

In animais that presented convulsion a stereotyped gnawing and/or licking behavior was observed immediately

after the ictus activity as a consequence of the combined acute administration of haloperidol and picrotoxin.

Long-term haloperidol treatment increased the gnawing and/or licking behavior immediately before and/or af¬

ter the ictus activity induced by picrotoxin (1 and 72 h after haloperidol withdrawal) or 3-MPA (72 h after with-

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tituto Butantan (19891. Mem. Inst. Butantan, 52(31:89-105, 1990.

drawal). A possible effect of the drugs employed on the DA-nígroamygdaloid and/or the GABA-striatonigral

fiber Systems is discussed.

Resumo: Interrelações GABAergica-dopaminérgica, em ratos, foram analisadas quantitativamente por meio de

estudos comportamentais. Administrataçâo aguda e crônica de haloperidol induziram desvios para a esquerda

da curva dose-resposta para picrotoxina mas não para estriquinina ou ácido 3-mercaptopropiônico (3-MPA).

Administração aguda de apomorfina aumentou a sensibilidade do animal à estriquinina mas não à picrotoxina

ou 3-MPA. Em animais que apresentaram convulsão, foi observado comportamento de morder e/ou lamber,

imediatamente após o ictus, como consequência da administração aguda da combinação haloperidol e picro¬

toxina. Tratamento crônico com haloperidol aumentou o comportamento de morder e/ou lamber imediatamente

antes e/ou após o ictus induzido por picrotoxina (1 e 72 horas após a retirada do haloperidol) ou 3-MPA (72

horas após a retiradal. É discutido um possível efeito das drogas empregadas nas fibras dos sistemas DA-

-nigroamigdaloide e/ou GABA-estriatonigral.

25. SANTOS, M.C. dos; YAMAGUCHI, I.K.; CARICATTI, C.P.; HIGASHI, H. G.; DIAS da SILVA, W.

Immunization of equines with phospholipase A 2 protects against the lethal effects of Crotalus durissus terrifi-

cus venom.

BrazWan J. Med. Biol. Rés., 22: 509-512, 1989.

Abstract: Equines (2 horses and 2 donkeysl immunized with whole Crotalus durissus terriflcus venom or its

phospholipase A2 component either presented an increased survival time determined 3 days after challenge

or were totally resistant to a challenging lethal dose of 200 mg crude venom 270 days after the initial immuni¬

zation or 90 days after the last booster injection. The resistance was demonstrable on the basis of a good corre-

lation with antibody titers determined by the ELISA method but not with the flocculation and neutralization

assays. Since phospholipase A2 is essentially nontoxic, it can be used as a substitute for whole venom for

the production of commercial antisera and as an immunizing agent in prophylactic programs.

Resumo: Os equinos (2 cavalos e 2 muaresl imunizados com o veneno de C.d. terrificus ou seu componente

fosfolipase A2, ambos apresentaram um aumento do tempo de sobrevida determinado 3 dias depois do desa¬

fio ou foram totalmente resistentes para uma dose desafio letal de 200 gramas de veneno bruto 270 dias após

a imunização inicial ou 90 dias após a última inoculação de reforço. A resistência foi demonstrada com base

numa boa correlação com título de anticorpos determinado pelo método de ELISA mas não pelo método de

floculação e neutralização.

Desde de que fosfolipase A2 é essencialmente atóxica, pode ser usada como um substituto de o veneno total

para produção de antissoro comercial e como um agente imunizante no programa profilático.

26. SANTOS, R.C.S. dos; OHTSUBO, I.; MOURA, J. W.; CASTRO, N.H.C. de; BARNABE, V.H.; VISINTIN, J. A.;

PERES, C. de A.; BEÇAK, W.

Prospective study of the effects of the 1 /29 Robertsonian translocation upon the fertility of marchigiana males.

Rev. Fac. Med. Vet. Zootec. Univ. S. Paulo, 26(11: 111-120, 1989.

Abstract: The effects of the 1 /29 translocation on fertility of Marchigiana males were investigated on a prospective

study. We have compared normal Nelore females artificially inseminated by an heterozygote Marchigiana sire

(experimental group) with those resulting from a normal male insemination (control group). We could observe:

1. higher mean number of A.l./conception in the experimental group; 2. significam reduction of pregnant fe¬

males at first Service, in the experimental group; 3. no difference in the period between the A.l.(s) or in abortion

rates, in both groups; 4. F1 obtained from experimental group were analysed and the 1/29 distribution does

nor differ from 1:1. The reduction of fertility may be due to zygotic loss and/or production of aneuploid ga-

metes. We have performed a meiotic and spermatic study in two heterozygote 1/29 translocated males result¬

ing from Marchigiana x Nelore crossbreed. We found alterations in the spermatic characteristics of the

heterozygote, mainly reduction of sperm concentration/mm3. Meiotic analysis of a translocated male shows

no association between any autosome and the sex vesicle.

Resumo: O presente estudo refere-se aos efeitos da translocaçâo 1 /29 sobre a fertilidade de bovinos machos

Marchigiana, de forma prospectiva. Comparamos fêmeas Nelore normais, inseminadas artificialmente com sê¬

men de touro Marchigiana heterozigoto (grupo experimental) com aqueles resultantes de inseminação com

sêmen de touro normal (grupo controle). Os resultados revelaram: 1 " n° médio significantemente aumentado

de Inseminações Artificiais/concepção, no grupo experimental; 2. redução significante de fêmeas prenhes ao

1 0 serviço, no grupo experimental; 3. comparando-se os grupos experimental e controle, não se verificou dife¬

rença nas taxas de aborto ou no período entre inseminações; 4. a distribuição de translocados 1 /29 não diferiu

da proporção 1:1, dentro da F1 obtida do grupo experimental. A redução de fertilidade pode ser devida a perda

zigótica e/ou produção de gametas aneuplóides. Desenvolvemos estudos meióticos e espermáticos em 2 tou¬

ros heterozigotos 1/29, resultantes do cruzamento Nelore x Marchigiana. Pudemos verificar alterações nas

características espermáticas do heterozigoto, principalmente redução da concentração de espermatozóides/mm3.

A análise meiótica de um macho F1 translocado mostrou não haver associação entre autossomos e a vesícula

sexual.

27. SCHMIDT, B.J.; TOPZEWSKI, A.; PINTO JR., W.; RAW, I.; CARNEIRO, C.R.M.

Tay-sacks disease: cdmments on a case after skin fibroblast transplantation.

In: — Current trends in infant screening. Amsterdam, Elsevier Science Publishers, 1989. p. 409-413.

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COMISSÃO EDITORIAL. Coletânea de resumos de trabalhos publicados pelos pesquisadores do Ins¬

tituto Butantan (19891. Mem. Inst. Butantan, 52(31:89-105, 1990.

Abstract: A 18 month infant with Tay-Sachs disease was treated by normal fibroblast transplatation. There

was an increase in hexosaminidase A and B activities in serum and leukocytes, with clinicai improvement.

Resumo: Uma criança de 18 meses com doença de Tay-Sachs foi transplantada com fibroblastos normais.

Este tratamento resultou num aumento de hexosaminidase A e B no sero e leucócitos, com uma melhoria clinica.

28. SILVA, A.M.da; GOMES, S.L.; MAIA, J.C.C.; JULIANI. M.H.

Phosphorylation of ribosomal protein S6 is dependent on cyclic AMP in Dictyostelium discoideum.

Second Messengers Phosphoproteins, 72(5/61:271-280, 1988/89.

Abstract: Extracts of aggregation-competent cells of Dictyostelium discoideum have an S6 protein kinase ac-

tivity which is inhibited in the presence of the inhibitor of the cAMP-dependente protein kinase. The phosphory¬

lation of S6 is rapide, and decays rapidiy. The S6 kinase activity is detectable in the 150000g supernatant

only in the presence of phosphatase inhibitors known for preserving the S6 kinase in other Systems, indicating

that the activated form of the enzyme is phosphoryiated by the cAMP-dependent protein kinase. S6 kinase

elutes as a peak from DEAE-Sephacel at 100 mM NaCI, with an activity that is cAMP-dependent.

Resumo: Extratos de células de Dictyostelium discoideum competentes para a agregação possuem uma ativi¬

dade de proteína quinase de S6, a qual é inibida na presença do inibidor da proteína quinase dependente de

cAMP. A fosforilação de S6 é rápida e decai também rapidamente. A atividade de S6-quinase é detectável

no sobrenadante após 150.000 xg apenas na presença de inibidores de fosfatase conhecidos por preservar

a S6-quinase em outros sistemas, indicando que a forma ativada da enzima é fosforilada por uma quinase de¬

pendente de cAMP. A S6-quinase é eluída de uma DEAE-Sephacel com 100mM de NaCI com uma atividade

que é dependente de cAMP.

29. SILVA, A.M. da & KLEIN, C.

Characterization of a glycosyl-phosphatidylinositol degrading activity in Dictyostelium discoideu membranes.

Exp. CeURes., 785:464-472, 1989.

Abstract: Antigen 117 is a glycolipid-anchored cell surface protein implicated in cell-cell cohesion of Dictyostelium

discoideum amoebae. Previous studies have demonstrated that during cell aggregation some of the protein

is released from the cell surface. Here we report the characterization of the enzymatic activity involved in the

117 antigen release. The data indicate that the releasing enzyme is a phosphatidylinositol phospholipase C.

The data also indicate that structural features of glycolipid anchors are conserved in a variety of organisms.

Resumo: O antígeno 117 é uma proteína ancorada à superfície celular através de um glicolipidio e que está

implicada na coesão celular da ameba Dictyostelium discoideum. Estudos prévios demonstraram que durante

a agregação celular parte da proteína é liberada da superfície celular. Neste trabalho relatamos a caracteriza¬

ção da atividade enzimática envolvida na liberação do antígeno 117. Os resultados indicam que a enzima libe-

radora é uma fosfolipase C específica para glicosil-fosfatidil-inositol. Os resultados também indicam que as

características estruturais de âncoras glicolipidicas são conservadas em uma variedade de organismos.

30. SILVA, A.M.M. da; BRODSKYN, C.I.; TAKEHARA, H.A.; MOTA, I.

Differences in the antigenic profile of bloodstream and cell culture derived trypomastigotes of Trypanosoma cruzi.

Rev.lnst.Med.trop.São Paulo, 31131:146-150, 1989.

Abstract: A comparative study of the antigenic profile of bloodstream and cell culture derived trypomastigotes

showed many differences in their components. Using mouse anti-T. cruzi antibodies the diferences were located-

mostly in the 120 kDa band, whereas using chagasic patient sera the differences were located in the 85 and

52 kDa bands. These findingsmight explain known physiological differences between trypomatigotes obtained

from cell culture and from infected blood. A brief report of this work has already been published 9 .

Resumo: 0 estudo comparativo do perfil antigênico de tripomastigotas sangüícolas e tripomatigotas obtidos

por cultura celular do Trypanosoma cruzi revelou que estas formas apresentam diferenças em alguns de seus

componentes. Utilizando-se anticorpos provenientes da infecção murina, as diferenças foram detectadas na

região de 120 kDa enquanto soros de pacientes chagásicos detectaram diferenças nas regiões de 85 e 52

kDa. Estas observações podem oferecer uma explicação a diferenças fisiológicas que ocorrem entre os tripo¬

mastigotas sangüícolas e os obtidos de cultura celular.

31. SILVA, A.M.M. da & TANIZAKI, M.M.

Antigenic relationship among antihemorrhagic factors from snake and opossum plasmas.

Brasilian J.Med.Biol.Res., 22. 717-719, 1989.

Abstract: Immunological relationships among antihemorrhagic factors (AHFI present in the plasma of different

snakes and a mammal (opossum) were studied. Antibodies were prepared against purified Bothrops jararaca

and Didelphis marsupialis aurita (opossum) AHF. The antigen-antibody reaction was determined by directy ELI¬

SA and by the competition of homologous antigen-antibody reaction with a heterologous competitor antigens.

Plasmas from several snakes and from opossum were used as antigens. Anti-AFIF IB. jararaca) reacted only

with snake plasmas. Antibody against opossum AFIF was detectable only when the homologous antigen was

used. Differences in the reactivity of snake plasmas with antibodies against 8. jararaca were demonstrable only

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COMISSÃO EDITORIAL. Coletânea de resumos de trabalhos publicados pelos pesquisadores do Ins¬

tituto Butantan (1989). Mem. Inst. Butantan, 52(31:89-105, 1990.

when a competition assay was used 8 . altematus showed a reaction pattern similar to that of 8 . jararaca while

Crotalus durissus terrificus and the nonvenomous snake, Wanglerophis merremii, presented reduced reactivity.

Resumo: Reatividade cruzada entre fatores anti-hemorrágicos (AHF) do plasma de diferentes serpentes e de

um mamífero, o gambá D. marsupialis aurita foi estudado. Os anticorpos foram preparados contra AHF purifi¬

cados do plasma da 8 . jararaca e do gambá. A reação antlgeno-anticorpo foi determinada por ELISA direto

e por competição da reação antlgeno-anticorpo homólogo com um antígeno heterólogo competidor. Plasma

de diversas serpentes e do gambá foram usados como antígeno. 0 anti AHF de 8 . jararaca reagiu somente

com antlgenos de serpentes e o anticorpo contra AHF do gambá foi detectável somente contra antígeno homó¬

logo. Diferença na reatividade de antlgenos de diferentes serpentes foi demonstrado por ensaio de competi¬

ção: 8 . anternatus mostrou um padrão de reação semelhante à da 8 . jararaca enquanto C. durissus terrificus

e Wanglerophis merrem/r apresentaram baixa reatividade cruzada.

32. Takehara, H.A.; Silva, A.M.M. da; Brodskyn, C.I.; Mota, I.

A comparative study of anb-Trypanosoma cruzi serum obtained in acute and chronic phase of infection in mice.

Immunology Letters, 23: 81-86, 1989-1990.

Abstract: The IgG antibody content, specificity, lytic activity, clearance capacity*and protective ability of mouse

anti-Trypanosoma cruzi serum was determined during the course of infection. The IgG antibody content in-

creased during the course of infection,.reaching its highest levei in the serum collected in the chronic phase

of the infection. The T. cruzi antigens recognized by antibodies using the protein transfer technique also in-

creased with time of infection. Antibodies present in day 22 post-infection (p.i.) serum were already able to

recognize all the antigens detected by antibodies present in serum from the chronic phase. The lytic and clear¬

ance ability were not detected on day 7 p.i., but appeared on day 14 p.i. and reached their highest levei on

day 45 p.i. The protective ability was present in serum of the chronic phase, but was absent from the acute

serum. The IgG antibody content of the acute serum was four times less than that of the chronic serum. When

the IgG antibodoy concentration of the acute serum was equalized to that of the crhonic serum, the acute

serum was as able to protect the infected animais as the chronic serum. It is suggested that the disagreement

between the protective ability of anti-T, cruzi antisera collected in the acute or in the chronic phase of the infec¬

tion is due to a quantitative rather than a qualitative difference.

Resumo: Estudou-se o conteúdo, a especificidade, a atividade Iftica, a capacidade de induzir "clearance” e

a atividade protetora de soro anti-T. cruzi obtido durante o curso da infecção. Os anticorpos IgG aumentaram

durante o curso da infecção atingindo seu máximo no soro coletado na fase crônica da infecção. Os antlgenos

do T. cruzi reconhecidos por anticorpos usando a técnica de transferência de proteínas também aumentaram

no curso da infecção. Os anticorpos presentes no 22? dia da infecção já eram capazes de reconhecer todos

os antlgenos reconhecíveis pelos anticorpos da fase crônica. As atividades lltica e de clearance somente foram

detetadas no 14? dia da infecção atingindo o máximo no dia 45? dia. A atividade protetora estava presente

no soro crônico mas ausente no soro agudo. 0 conteúdo de anticorpos IgG no soro agudo era quatro vezes

menor do que no soro crônico. Quando a concentração dos anticorpos IgG do soro agudo foi igualada àquela

do soro crônico, ele tornou-se igualmente eficiente para proteger contra a infecção. Foi concluído que a dispa¬

ridade no poder protetor do soro crônico e agudo é devido a uma diferença quantitativa e não qualitativa.

33. TANIZAKI, M.M.; ZINGALI, R.B.; KAWAZAKI, H.; IMAJOH, S.; YAMAZAKI, S.; SUZUKI, K.

Purification and some characteristics of a zinc metalloprotease from the venom of Bothrops jararaca (jararaca).

Toxicon, 27(7): 747-755, 1989.

Abstract: A metalloprotease from Bothrops jararaca venom (J protease) was purified by DEAE - Sephacel, CM-

cellulose, Sephacryl S-200 and Sephadex G-75 chromatograph. The proteolytic activity wes inactivated by

EDTA, o-phenanthroline and DTNB. Phosphoramidon and cysteine protease inhibitors (leupeptin, E 64 and its

derivatives) were inactive on this enzyme. J protease was activated by calcium ahd the metal content analysis

showed the presence of one mole each of tightly bond zinc and calcium per mole of this J protease. The amino

acid composition, N-terminal amino acid sequence (29 residues) and the cleavage sites on the oxidized insulin

B chain and angiotensein I were determined.

Resumo: J protease, uma metaloprotease do veneno da Bothrops jararaca foi purificada por: DEAE Sephacel,

CM-celulose, Sephacryl S-200 e Sephadex G-75. A atividade proteolltica da enzima foi nativada por EDTA, o-

-fenantrolina e DTNB. Phosphoramidon e inibidores de cisteina proteases (leu-peptin, E 64 e derivados) nâoinati-

varam a enzima. J protease foi ativada por Ca^ + e a análise do conteúdo de metal mostrou a presença de 1

mol de Zn^ + e 1 mol de Ca^ + por mol fortemente ligados à enzima. A composição de aminoácidos N-terminal

e a sequência (29 resíduosl e os sítios de clivagem da cadeia B da insulina e angiotensina I foram determinados.

34. TAVARES DE LIMA, W. : TEIXEIRA, C.F.P.; SIROIS, P.;.JANCAR, S.

Involvement of eicosanoids and paf in immune-complex alveolitis.

Brazilian J. Med. Biol. Res., 22: 745-748, 1989.

Abstract: An immune-complex-mediated hypersensitivity reaction induced in the rat lung was followed by release

of the eicosanoids thromboxane, prostaglandin E 2 and leukotriene B 4 into the bronchoalveolar space. Con-

comitantly, there was a decrease in the number of circulating platelets. The thrombocytopenia was inhibited

by a cyclo-oxygenase inhibitor (indomethacinl, a platelet activating factor (PAF) antagonist (BN-52021) and

an inhibitor of thromboxane (econazole), but was not affected by a lipoxygenase inhibitor (NDGAI. These results

suggest the involvement of eicosanoids and PAF in the immune complex hypersensitivy reaction in the rat lung

and indicate the occurrence of interactions between PAF and thromboxane.

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COMISSÃO EDITORIAL. Coletânea de resumos de trabalhos publicados pelos pesquisadores do Ins¬

tituto Butantan (1989). Mem. Inst. Butantan, 52(31:89-105, 1990.

Resumo: A reação de hipersensibilidade mediada por imune-complexo, induzida em pulmão de rato, foi acom¬

panhada pela liberação dos eicosanóides tromboxana, prostaglandina E 2 e leucotrieno B 4 no espaço broncoal-

veolar. Concomitantemente ocorreu decréscimo do número de plaquetas circulantes. Essa trombocitopenia

foi inibida por um inibidor da cicloxigenase (indometacina), um antagonista do fator ativador de plaquetas (PAF),

0 BN 52021 é um inibidor de trombosana (econazol), mas não foi afetada por inibidor de lipoxigenase (NDGA).

Esses resultados sugerem 0 envolvimento de eicosanóides e PAF na reação de hipersensibilidade por imune-

-complexo induzida em pulmão de rato, e indicam a ocorrência de interações entre 0 PAF e tromboxana.

35. TENÓRIO, E.C.N.; FANG, F.L.W.; AKIMURA, O.K.; YANO, A.F.B.; RIZZO, E. de; STRUFALDI, B.; HIRATA,

M.; ABDALLA, D.S.P.; ISHIZUKA, M.M.

Caracterização bioquímica de soros de bezerros utilizados na manutenção de culturas celulares usadas em vi-

rologia.

fíev. Saúde públ. S. Paulo, 23(2): 162-9, 1989.

Resumo: Oito lotes de soros de bezerros com idade maior ou menor de seis meses, usados para suplementar

meios de cultivo de linhagens de células de uso difundido em virologia, foram testados quanto à sua capacida¬

de promotora de crescimento (CPC) e classificados como bons promotores ou promotores pobres. Foram pes¬

quisados parâmetros relacionados com macronutrientes para estabelecer o perfil bioquímico daqueles lotes.

Os resultados obtidos podem ser considerados valores normais para animais aparentemente sadios. As varia¬

ções que ocorreram para um mesmo parâmetro bioquímico, entre os resultados da pesquisa e os de alguns

estudos existentes na literatura, podem ser atribuídas à metodologia utilizada, à raça e idade dos animais, ou

mesmo à própria dieta regional. A análise estatística, realizada pela aplicação do teste "t" de Student aos

valores das médias e dos desvios-padrão, demonstrou que, com relação às frações séricas, não ocorreram

diferenças significantes entre soros de CPC celular boa ou pobre, considerando-se t c = 2,45, enquanto que

para soros animais maiores ou menores de seis meses, apenas os resultados relativos às frações alfa e beta

(t = 2,68 e 2,61, respectivamente) apresentaram significância, sendo superiores ao t crítico. Ficou evidencia¬

do que a avaliação do conjunto de parâmetros bioquímicos pesquisados não permite diferenciar soros perten¬

centes aos dois grupos de animais, isto é, identificar soros de boa ou de pobre CPC, ou soros de bezerros

maiores ou menores de seis meses de idade.

Abstract: Eight lots of the calf sera employed to suplement culture media for the cultivation of animal cells,

of widespread use in virology obtained from calves above and below six months of age were rated as good

or as poor celi growth promoters according to their growth promoting capacity (GPC). Parameters related to

macronutrients contained in these serum lots were then evaluated with the purpose of establishing their bi-

ochemical profiles. The results obtained can be considered as normal values for apparently healthy animal donors.

Fluctuations found between the data of this investigation and those mentioned in the literature for certain bi-

ochemical parameters are probably due to the methodology employed, the breed and age of the animais, or

even to regional diet. Student's "t" test was applied for the statistical analysis of the results and demonstrated

that, as far as serum fractions were concerned, no significant differences occurred between sera rated as good

and poor cell growth promoters, taking t c = 2.45. For calf sera from animais above and below six months

of age, two tests relating to alfa and beta fractions were significant (t = 2.68 and: 2.61 respectively). It was

demonstrated that the evaluation of the biochemical parameters mentioned "per se" neither leads to the Iden¬

tification of calf sera presenting good or por GPC, nor of sera harvested from calves younger or olden than

six months.

36. TORRES, D.M.A.G.V.; OLIVEIRA, M.l. de; FUZIHARA, T.O.; DIAS, R.M.D.S.; MANGINI, A.C.S.; ANTUNES,

J.L.F.; CORRÊA, F.M.A.

Correlação entre giardíase e grupo sanguíneo (Sistema ABO) no Município de São Caetano do Sul, SP.

Rev. Inst. Adolfo Lutz, 49(1):69-73, 1989.

Resumo: Foram analisadas amostras de fezes e sangue de 580 escolares do Municínio de São Caetano do

Sul, São Paulo, com vistas ao estudo da frequência de giardíase naquele grupo populacional e sua correlação

com 0 Sistema ABO. Foi testada, através de metodologia estatística, a hipótese aventada pela literatura espe¬

cializada, segundo a qual a giardíase apresentaria incidência mais elevada entre os indivíduos do grupo sanguí¬

neo A. Foram utilizados como grupos-controle 0 conjunto de escolares incluídos na investigação e a população

das cidades de São Paulo e Santo André. Ao exame parasitológico de fezes, verificou-se que 102 (17,59%)

escolares estavam parasitados por Giardia lamblia ; 166 (28,62%) apresentavam outras enteroparasitoses, e

312 (53,79%) não manifestaram quaisquer infecções parasitárias. A distribuição por grupo sanguíneo dos es¬

colares com giardíase não variou significativamente (p>0,05) em relação à mesma distribuição dos grupos

populacionais selecionados para controle. Tais resultados diferem daqueles divulgados por outras comunica¬

ções científicas, e indicam a necessidade de novos e mais extensos levantamentos populacionais, bem como

estudos imunológicos, que confirmem ou descartem definitivamente a hipótese em questão.

Abstract: Blood and stool samples from 580 schoolchildren living in São Caetano do Sul, São Paulo State,

Brazil, were examined to test the hypothetical correlation between the prevalence of giardiasis and population-

al distribution by blood group (ABO System). The stool examination showed that 102 (17.59%) students were

infected by Giardia lamblia, 166 (28.62%) presented other enteroparasitosis and 312 (53.79%) did not present

any parasitic infection. The distribution by blood group of the students with giardiasis did not vary significantly

(p<0,05) in relation to the same distribution of others populational groups selected as standard, by means

of control: the compíex whole of students included in this investigation and the population of São Paulo and

Santo André cities. Such results differ from those established by others scientifical comunications, and show

the necessity of new and more extensive populational inquiries that should definitely confirm or reject the hypothe-

sis in question.

101

2 3

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COMISSÃO EDITORIAL. Coletânea de resumos de trabalhos publicados pelos pesquisadores do Ins¬

tituto Butantan (19891. Mem. Inst. Butantan, 52(31:89-105, 1990.

37. UMEKITA, L.F. '& MOTA, I.

In-vitro lysis ot sensitized Trypanosoma cruzi by platelets: role of C3b receptors.

Parasite Immunology, 7 7:561-566, 1989.

Abstract: Incubation of Trypanosoma cruzi bloodstream trypomastigotes (Btrysl with C5-deficient blood in the

presence of anti-T. cruzi immune mouse serum (IMS) or its IgG fraction resulted in an immediate formation

of small clumps in which one could easily see platelets adhered to the parasites. After 4 h of incubation most

of the clumps had disappeared and the number of the parasites was considerably reduced. Twenty-four hours

later there were only a few remaining parasites. This same sequence of events was also observed when the

parasites were incubated with isolated platelets in presence of IMS or its IgG fraction. When the parasites were

incubated with plasma in the presence of IMS or its IgG fraction but in the absence of platelets there was strong

agglutination of the parasites but no reduction in their number. Incubation of the parasites with platelets and

IMS or its IgG fraction in C3-depleted plasma prevented adherence of the platelets to the parasites and their

subsequent lysis. It is concluded that platelets are able to induce in-vitro lysis of the Btrys and that this phenome-

non is dependem on the platelet' receptor for C3b.

Resumo: Incubação dos tripomastigotas sanguíneos do T. cruzi (Btrys) com sangue deficiente em C5 na pre¬

sença de anticorpos IgG anti-T. cruzi resulta na imediata formação de grumos nos quais se pode ver facilmente

plaquetas aderidas nos parasitas. Após 4 horas de incubação a maioria do grumos tinham desaparecido e o

número dos parasitas estava consideravelmente reduzido. Vinte e quatro horas depois restavam apenas pou¬

cos parasitas. Esta mesma sequência de eventos foi também observada quando os parasitas eram incubados

com plaquetas isoladas na presença de anticorpos IgG anti-T. cruzi. Quando os parasitas eram incubados com

plasma na presença de anticorpos mas na ausência de plaquetas ocorreu aglutinação dos parasitas porém sem

redução no seu número. Incubação dos parasitas com plaquetas e anticorpos em plasma depletado de C3

impediu a aderência das plaquetas nos parasitas e sua lise. Sugere-se que as plaquetas são capazes de induzir

lise dos parasitas em presença de anticorpos e que esse fenômeno depende do C3.

38. UMEKITA, L. F. & MOTA, I.

Role of the mononuclear phagocytic System in the immune and nonspecific clearance of Trypanosoma cruzi

bloodstream trypomastigotes.

Brazilian J. Med. Biol. Res., 22.T489-1495, 1989.

Abstract: 1. The removal of T. cruzi bloodstream trypomastigotes (BTRYS) from the circulation is mediated

mostly by the mononuclear phagocytic System (MPS). In the present study we investigated the nonspecific

and the immune clearance of BTRYS in groups of 4 mice whose MPS activity was either enhanced by BCG

treatment or depressed by silica treatment.

2. Treatment with BCG resulted in a significam increase in the nonspecific clearance of both carbon particles

(100% after 6 min) and BTRYS (60% after 5 min) 28 days after BCG treatment but there was no change in

the immune clearance of the parasites.

3. Pretreatment of the animais with silica induced a significam reduction of the colloidal carbon clearance (80%

less than control 15 min later) but did not alter the nonspecific or the immune clearance of BTRYS.

4. We conclude that the removal of the opsonized parasites from the circulation is due to a mechanism differ-

ent from that of the nonspecific clearance.

Resumo: A remoção dos tripomastigotas sangüíneos do T. cruzi (Btrys) da circulação é mediada principalmen¬

te pelo sistema mononuclear fagocltico (SMF). No presente trabalho nós investigamos o "clearance" imune

e inespecífico dos Btrys em 4 grupos de camundongos nos quais a atividade do SMF estava aumentada por

tratamento com BCG ou diminuída por tratamento com silica. O tratamento com BCG resultou em um aumento

significante do clearance inespecífico de partículas de carvão e dos Btrys 22 dias após o tratamento com BCG

porém sem nenhuma mudança no clearance imune dos parasitas. Pre-tratamento dos animais com silica resul¬

tou em uma significante redução do clearance do carvão coloidal porém não alterou o clearance não-específico

ou imune dos Btrys. Sugere-se que a remoção dos parasitas opsonizados da circulação é devida a um mecanis¬

mo diferente daquele do clearance inespecífico.

39. ZANETTI, C.R.; FAVORETTO, S.R.; TINO, M.S.; ALBAS, A.: VALENTINI, E.J.G.; PEREIRA, O.A. de C.

Reduced schedule of human antirabies immunization with fuenzalida & palacios vaccine.

Rev. Inst. Med. trop. Sào Paulo, 31 (1): 23-27, 1989.

Abstract: The present study evaluates the humoral and cellular immune responses in 35 volunteers submited

to short antirabies vaccination schedules with the Fuenzalida & Palacios vaccine based on the administration

of doses on non consecutive days.

The volunteers were divided into two groups. The first group received a total number of five doses given on

days 0, 4, 7, 20 and 35. The other group received four doses, the first one being a double dose given on

day 0 and than three other single doses on days 7, 20 and 35.

The evaluation of humoral immune response was carried out by serum neutralization (SN) and indirect im-

munofluorescense (IIF) teats, while the cellular immune'response was evaluated by lymphoblastic transforma-

tion assay (LTA) and skin tesf(ST).

According to our results these reduced schedules elicited early and effective humoral and cellular immune

102

SciELO

10 11 12 13 14 15 16

COMISSÃO EDITORIAL. Coletânea de resumos de trabalhos publicados pelos pesquisadores do Ins¬

tituto Butantan (1989). Mem. Inst. Butantan, 52(3):89-105, 1990.

responses to rabies antigen suggesting that new reduced schedules should be extensively studied in order

to give the proper bases to the proposition of changes in the current long-term schedule.

Resumo: O objetivo do presente trabalho foi estudar um novo esquema de vacinação anti-rábica humana, com

um menor número de doses, administradas em dias não consecutivos (5 doses nos dias 0, 4, 7, 20 e 35).

A avaliação da resposta imune humoral foi feita pela prova de soroneutralização e pela reação de imunofluores-

cência indireta, enquanto que a resposta imune celular foi avaliada pela transformação linfoblástica em cultura

de sangue total e pelo teste cutâneo de leitura tardia.

Foi estudado um total de 35 voluntários, submetidos ao esquema reduzido de vacinação, e os resultados en¬

contrados permitem afirmar que, embora o número de casos seja relativamente pequeno, este novo esquema

de vacinação mostrou-se capaz de induzir a produção de imunoglobulinas anti-rábicas, bem como de elicitar

a resposta imune celular ao antígeno rábico.

(1988)*

40. LABROUSSE, H.; NISHIKAWA, A.K.; BON, C.; AVRAMEAS, S.

Development of a rapid and sensitive enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) for measuring venom anti-

gens after an experimental snake bite.

Toxicon, 26(12): 1157-1167, 1988.

Abstract: We describe a new ELISA which allows the measurement of the concentration of venom antigens

in whole blood. The assay can be performed in less than 20 min and requires a 200 ul sample of blood. It

allows the accurate evaluation of concentrations of Vipera ammodytes venom in quantities smaller than I ng/ml

of blood. Using this ELISA, we were able to fallow in rabbits the kinetcs of experimental envenomation with

non-lethal doses of venom. This ELISA was also used to measure post mortem the levei of venom antigens

in various tissues such as liver, kidnei, muscles and abdominal serosity of a rabbit. The method, which might

be adapted to measure envenomation by other snake species, seems to be sufficiently rapid and sensitive to

allow routine evaluation of the gravity of a snake bite in humans and to estimate the efficacy of immunotherapy.

Resumo: Descrevemos um novo teste Elisa que permite quantificar a concentração de veneno em sangue to¬

tal. O teste pode ser realizado em menos de 20 minutos e requer uma amostra de 200 I de sangue. Isto

permite a avaliação precisa da concentração do veneno de Vipera ammodytes em quantidades menores do

que 1 ng/ml de sangue. Através deste teste, fomos capazes de acompanhar a cinética de um envenenamento

experimental em coelhos com doses não letais de veneno. Este teste ELISA também foi usado para medir o

nível de veneno em vários tecidos como o fígado, rim, músculos e serosidade abdominal de um coelho "post

mortem".

O método, que pode ser adaptado para quantificar o envenenamento por outras espécies de serpentes, parece

ser suficientemente rápido e sensível que permite a avaliação rotineira da gravidade de uma picada de serpen¬

tes em humanos e para estimar a eficácia da imunoterapia.

41. LAPORTA-FERREIRA, I.L.; SALOMÃO, M. da G.; SAWAYA,P.; PUORTO.G.

Mecanismo de tomada de alimento por serpentes tropicais moluscófagas (Sibynomorphus neuwiedi e Sibyno-

morphus mikani). Adaptações morfofisiológicas do esqueleto cefálico.

Boi. Fisiol. Anim., S. Paulo, 72:81-88, 1988.

Resumo: Sibynomorphus neuwiedi e Sibynomorphus mikani, (Colubridae, Dipsadinae) que se diferenciam não

só pela distribuição geográfica (a primeira restrita ao litoral e a segunda ao continente), como também pela

folidose, foram aqui consideradas. São espécies que se distinguem também pela disposição e dimensões dos

ossos da cabeça. Observou-se, além disso, que o índice esquamosal-quadrado é significativamente diferente

em cada uma das duas espécies, ao contrário do que se verifica com os índices dentário-mandibular e maxilar-

-transverso. Tais diferenças não foram observadas nos animais jovens dessas espécies. Esses dados contribuí¬

ram substancialmente para explicar a possibilidade de o Sibynomorphus neuwiedi retirar moluscos gastrópodes

das conchas sem fraturá-las. O mesmo não acontece com Sibynomorphus mikani, cujo alimento preferido são

moluscos desprovidos de conchas, geralmente da família Veronicellidae.

Abstract: Tropical snakes S. neuwiedi and S.mikani. (Colubridae-Dipsadinae) revealed differences not only in

the head osteology but, also a significant difference between the rate squamosal — quadrate for the two spe¬

cies, but there is no difference for the rate dentary-mandible and maxillary — ectopterygoid. Such differences

were not observed in the youngs. The structure and disposition of those bones can explain the possibility forS.neu-

wiedi to remove the molluscs Bradybaena and Biomphalaria, their unique food source, from their shells which

are left intact. On the other hand S.mikani eats only molluscs without shells, chiefly those on the family

Veronicellidae.

42. SANTOS,R. C.S. dos; OHTSUBO, I.; MOURA, J.W.; CASTRO,N.H.C. de; BARNABE.R.C.; BEÇAK.W.

A translocação 1/29 em bovinos: características e consequências.

Comun. cient. Fac. Med. Vet. Zootec. Univ. S. Paulo, 12(1):71 -81, 1988.

Resumo: Os principais estudos realizados sobre as características da translocação Robertsoniana 1/29 em bo¬

vinos são discutidos, de maneira a enfatizar as conseqüências deletérias do uso de portadores 1/29 em siste¬

mas de inseminação artificial e a consequente disseminação da anomalia.

Abstract: The authors present a review and discussion of the characteristics and effects of the Robertsonian

translocation 1/29 in cattle. The deleterious consequences of 1/29 carriers in Artificial Insemination Programs

are emphasized in order to prevent its dissemination.

* Trabalhos que não constaram do v. 51(4): 239-254,1989.

103

2 3

5 6

11 12 13 14 15 16

ÍNDICE DE AUTOR/AUTHOR INDEX

ABDALLA, D.S.P., .101

ABDALLA, F.M.F.,.89,95

AKIMURA, O.K.,.96,101

ALBAS, A., .102

ANTUNES, J.L.F.101

ARAUJO-VIEL, M.S., .90

ASSAKURA, M.T.,.94

AUGUSTO, O.,.93

AVRAMEAS, S.103

BARNABE, R.C.,.103

BARNABE, V.H.98

BECAK, W., .93,97,98,103

BON, C., .103

BRISON, O.,.96

BRODSKYN, C.I., . . . .90,99,100

BRUNNER JR., A., .90,91

CARDOSO, J.L.C.,.93

CARICATTI, C.P.,.98

CARMONA, E.,.90

CARNEIRO, C.R.M., . . .91,92,98

CASTRO, N.H.C. de . . . .98,103

CHUDZINSKI, A.M.91

CIANCIARULLO, A.M.,.91

CORRÊA, F.M.A.,.101

DAIMON, T.92

DIAMENT, A., .92

DIAMENT, A.J.,.91

DIAS, R.M.D.S.,.101

DIAS da SILVA, W.,.98

DORCE, V.A.C.,.92

FANG, F.L.W., .96,101

FAVORETTO, S.R.102

FUZIHARA, T.O., .101

GALLINA, N.M.F.,.95,96

GOMES, S.L.,.99

HIGASHI, H.G., .98

HIRAICHI, E., .89,95

HIRATA, M., .101

HISS, H., .93,97

IMAJOH, S., .100

ISHIZUKA, M.M.,.101

JANCAR, S., .100

JARED, C., .91

JORGE, M.T.,.96

JULIANI, M.H., .99

KAMIGUTI, A.S.93

KAWAZAKI, H., .100

KLEIN, C., .99

LABROUSSE, H.103

LAPORTA-FERREIRA, l.l_103

LAVRAS, A.A.C.,.95

LEITE, L.C.C..93

LONGO, M.A.,.93

LUCCHIARI, M.A.,.93,94

MAIA, J.C.C., .99

MANDELBAUM, F.R.,.94

MANGINI, A.C.S., .101

MENDES, I.F., .96

MIYAKI, C.,.95,96

MORENA, P.,.91

MOTA, L, ...90,95,99,100,102

MOURA, J.W.,.98,103

NISHIKAWA, A.K.,.103

OHTSUBO, I.,.98,103

OLIVA, M.L.V..91

OLIVEIRA, M.l. de .101

PALERMO-NETO, J.,.92,97

PEREIRA, C.A.,.93,94

PEREIRA, O.A. de C.,.102

PERES, C. de A.,.98

PICARELLI, Z.P., .89,90,95

PINTO JR., W., .98

PRADO, E.S.,.90

PRAL, M.M.,.: 95,96

PREZOTO, B.C., .89,95

PUORTO, G.103

RANGEL, H.A.,.94

RAW, I., .91,92,98

RIBEIRO, L.A.96

RIBEIRO, L.R.,.93,97

RIZZO, E. de .95,96,101

RUIZ, I.R.G.96

SAKURADA, J.K., .94

SALOMÃO, M.G.,.103

SALVADORI, D.M.F., _93,97

SAMPAIO, C.A.M.,.91

SAMPAIO, M.U., .91

SANDOVAL, M.R.L.,.97,

SANO MARTINS, I.S., .92

SANTOS, M.C. dos .98

SANTOS, R.C.S. dos . . . .98,103

SARUWATARI, A.A.91

SAWAYA, P.,.103

SCHMIDT, B.J.,.91,92,98

SERRANO, S.M.T.,.94

SILVA, A.M.'da.90,99

104

], | SciELO

SILVA, A.M.M. da . . .

. . .99,100

SIROIS, P.,.

.100

SPADACCI MORENA, D.D., . .91

STRUFALDI, B.,.

.101

SUZUKI, K..

.100

TAKATA, C.S.,.

.96

TAKEHARA, H.A., . . .

90,99,100

TANIZAKI, M.M.

. . .99,100

TAVARES de LIMA, W

.100

TEIXEIRA, C.F.P., . . . .

.100

TENÓRIO. E.C.N.

. . .96,101

TINO, M.S.,.102

TOPZEWSKI, A., .98

TORRES, D.M.A.G.V., .101

TUCHIYA, H.N.,.96

UMEKITA, L.F.,.95,102

VALENTINI, E.J.G., ....... 102

VISINTIN, J.A., .98

YAMAGUCHI, I.K.98

YAMAZAKI, S., .100

YANO, A.F.B.,.101

ZANETTI, C.R., .102

ZINGALI, R.B.,.100

105

11 12 13 14 15 16

Mem. Inst. Butantan

52(3): 107-111, 1990.

LISTA REMISSIVA DOS TRABALHOS PUBLICADOS NAS

MEMÓRIAS DO INSTITUTO BUTANTAN, 47/48-51,

1983/84-1989

ANATOMIA COMPARADA

954. GOMES, N. Osteologia comparada de duas espécies do gênero Crossodactylodes Cochran, 1938 (Amphi-

bia. Anura, Leptodactylidae). Mem. Inst. Butantan; 50 (2): 51-61, 1988.

ANATOMIA PATOLÓGICA

955. DENARO-MACHADO, L; KFOURI, S.A.; OGATA, T.R.P.; MACHADO, J.C.; PAULA, G.A.; BARBOSA, L.S.;

FERREIRA, R.F.G.; PRETELLA, S.M.C.N. Variação do comportamento biológico do tumor humano KB,

heterotransplantado seriadamente em ratos "nude" atímicos. Mem. Inst. Butantan, 51 (4): 169-176,

1989.

956. VEINERT, T.; BELLUOMINI, H.E.; IIZUKA, H.; FEDULLÓ, J.D.L. Necrose de ponta de cauda em Eunectes

notaeus Cope, 1862 (Serpentes, Boidae, Boinae). Mem. Inst. Butantan, 47/48: 189-194, 1983/84.

ARACNÍDEOS E ARTRÓPODES

957. EICKSTEDT, V.R.D. von. Escorpionismo por Tityus stigmurus no Nordeste do Brasil. (Scorpiones, Buthi-

dael. Mem. Inst. Butantan, 47/48:133-137, 1983/84.

958. LEVI, H.W. & EICKSTEDT, V.R.D. von. The Nephilinae spiders of the neotropics (Araneae: Tetragnathidae).

Mem. Inst. Butantan, 51 (2): 43-56,'1989.

959. LOURENÇO, W.R. & EICKSTEDT, V.R.D. von. Contribuição ao conhecimento taxonômico dos escorpiões

associados ao grupo Tityus melanostictus Pocock, 1893 (Scorpiones, Buthidac). Mem. Inst. Butantan,

49 (3): 87-95, 1987.

960. LUCAS, S.; KNYSAK, L; ZVEIBIL.L. O gênero Rachias Simon, 1892, Araneae, Ctenizidae, Nemesieae. Mem.

Inst. Butantan, 47/48: 5-11, 1983/84.

961. MATTHIESEN, F.A. Anomalias morfológicas externas em escorpiões brasileiros. Mem. Inst. Butantan, 51

(2): 63-67, 1989.

BACTERIOLOGIA

962. ALEXANDRE, S.R.; LOPES, S.F.; RIGHETTI NETO, C.; MALUCELLI, M.I.C. Isolamento e identificação de

bactérias intestinais de camundongos N:NIH (S), destinados a testes biológicos de vacinas bacterianas.

Mem. Inst. Butantan, 51 (2): 57-62, 1989.

BIOLOGIA

963. HEITZMANN-FONTENELLE, T.J. Bionomia comparativa de triatomfneos. II. Triatoma brasiliensis Neiva, 1911

(Hemiptera, Reduviidae). Mem. Inst. Butantan, 47/48: 157-164, 1983/84.

964. HEITZMANN-FONTENELLE, T.J. Bionomia comparativa de triatomfneos. V. Triatoma lenti Scherlock & Se¬

rafim, 1967 (Hemiptera, Reduviidae). Mem. Inst. Butantan, 47/48: 165-174, 1983/84.

965. HEITZMANN-FONTENELLE, T.J. Bionomia comparativa de triatomíneos. VI — Híbridos de Triatoma brasi¬

liensis Neiva, 1911. X. Triatoma. lenti, Sherlock & Serafim, 1967 (Hemiptera, Reduviidaeb Mem. Inst.

Butantan, 47/48: 175-181, 1983/84.

966. HEITZMANN-FONTENELLE, T.J. Bionomia comparativa de triatomíneos. VII — Rhodnius neglectus Lent,

107

ÓciELO

0 11 12 13 14 15 16

COMISSÃO EDITORIAL. Lista remissiva dos trabalhos publicados nas Memórias do Instituto Butan-

tan, 47/48-51, 1983/84-1989.

1.954 (Hefniptera, Reduviidae). Mem. Inst. Butantan, 47/48: 183-188, 1983/84.

967. LIZAZO, N.M. Ectoparasitismo em serpentes: observações gerais e algumas considerações sobre o gênero

Ixobióides Fonseca, 1934 (Acarinal. Mem. Inst. Butantan, 47/48: 143-155, 198^/84.

968. OBA, M.S.P. & SCHUMAKER, T.T.S. Estudo da biologia de Amblyomma rotundatum (Koch, 19441 em in¬

festações experimentais de Bufo marinus (L., 1758) sob condições variadas de umidade relativa e de tem¬

peratura do ar. Mem. Inst. Butantan , 47/48: 195-204, 1983/84.

BIOTÉRIO

969. IIZUKA, H.; CANTER, H.M.; OLIVEIRA, E.P.T. de; HIGASHI, H.G.; ROLIM ROSA, R. Estomatite ulcerativa

infecciosa em Boa constrictor constrictor mantidas em cativeiro. Mem. Inst. Butantan, 47/48: 113-120,

1983/84.

970. LEINZ, F.F.; DAMY, S.B.; ISHIZUKA, M.M.; FERREIRA, M.A.M. Aspectos de produção de cobaias I Cavia

porcellus I. I. Efeitos estacionais que afetam a reprodução. Mem. Inst. Butantan, 49 121: 47-54, 1987.

971. LEINZ, F.F.; DAMY, S.B.; ISHIZUKA, M.M.; CHAGURI, L. do C.A.G. Aspectos de produção de cobaias (Ca-

via porcellus I. II. Análise de produtividade. Mem. Inst. Butantan, 49 (21: 55-61, 1987.

BIOQUÍMICA

972. KOCHVA, E.; BDOLAH, A.; GRAUR, D.; WOLLBERG, Z. Sarafotoxins, a new group of cardiovascular modu-

lator from snake venom. Mem. Inst. Butantan, 51 (41: 205-210, 1989.

973. REICHL, A.P.; SERRANO, S. de T.; ASSAKURA, M.T.; MANDELBAUM, F.R. Isolation and properties of a

phospholipase A 2 from the snake Bothrops moojeni (Caissaca). Mem. Inst. Butantan, 51 (4): 225-237,

1989.

974. TU, A.T. & MILLER, R.A. Biochemical studies of the sea snake neurotoxins. Mem. Inst. Butantan, 51

(4): 177-193, 1989.

COLETÂNEA DE TRABALHOS

975. Coletânea de resumos de trabalhos publicados pelos pesquisadores do Instituto Butantan.

(1978-1986) - Mem. Inst. Butantan, 49(3): 99-141, 1987

50(3): 111-115, 1988

(19871 — Mem. Inst. Butantan, 50(3): 103-110, 1988

51(4): 250-251, 1988

(1988) — Mem. Inst. Butantan, 57(4): 239-254, 1989

52(31: 103, 1990

ENGENHARIA GENÉTICA E VACINAS

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in Escherlchia coli of C-DNA sequences encoding foot-and-mouth disease virus VP1. Mem. Inst. Butan¬

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ENTOMOLOGIA

990. MORAES,R.H.P. & VEIGA,R.M. de O. Sobre uma rara anomalia em genitália de Lutzomyia migonei (França,

1920) (Diptera-Psychodidae-Phlebotominae). Mem. Inst. Butantan, 501 21:41-45, 1988.

108

SciELO

10 11 12 13 14 15 16

COMISSÃO EDITORIAL. Lista remissiva dos trabalhos publicados nas Memórias do Instituto Butan-

tan, 47/48-51, 1983/84-1989.

991. MORAES,R.H.P.; VEIGA.R.M. de O.; MARASSÁ.A.M. Adaptações em armadilha entomológica luminosa

de sucção. Mem. Inst. Butantan, 57(31:79-84, 1989.

FISIOLOGIA

992. CHUDZINSKI.A.M.; SEELAENDER.M.C.L.; KELEN.E.M.A. Standardization of anesthesia with pentobarbital

in the snake Bothorops jararaca. Mem. Inst. Butantan, 57(41:147-152, 1989.

993. VITAL BRAZIL.O. & FONTANA,M.D. Ações pré-juncionais e pós-juncionais da peçonha da cobra coral Mi-

crurus coralhnus na junção neuromuscular. Mem. Inst. Butantan, 47/48: 13-26, 1983/84.

GRIPE - VACINA

981. MANCINI.D.A.P.; VILELA, C.A.; MOREIRA,M.M. Avaliação "in vivo" da vacina bivalente contra a gripe,

produzida no Instituto Butantan. Mem. Inst. Butantan, 491 11:21-24, 1987.

IMUNOLOGIA

SOROS

994. DIAS da SILVA,W.; GUIDOLIN.R.; RAW.L; HIGASHI.H.G.; CARICATI.C.P.; MORAIS,J.F.; LIMA.M.L.S.R.;

YAMAGUCHI.I.K.; NISHIKAWA.A.K:; STEPHANO.M.A.; MARCELINO.J.R.; PINTO,J.R.; SANTOS.M.J.

Cross-reactivity of horse monovalent antivenoms to venoms of ten Bothrops species. Mem. Inst. Butan¬

tan, 57(41:153-168, 1989.

995. DIAS.W. de O.; ESTEVES.M.I.; FURUTA.J.A.; HIGASHI.H.G.; MARCELINO.J.R.; OISHI.N.Y.; PRADO,S.M.A.;

TANAKA.A.M.; UEDA.C.M.P.M.; RAW,I. Chromatographic purification of antivenoms and antitoxins. Mem.

Inst. Butantan, 57(41:195-203, 1989.

996. GUIDOLIN.R.; DIAS da SILVA.W.; HIGASHI.H.G.; CARICATI.C.P.; LIMA.M.L.S.R.; MORAIS.J.F.; PINTO,

J.R.; MARCELINO.J.R. HiperimunizaçSo de cavalos soro-produtores com venenos botrópicos e crotálico

tratados por glutaraldeido. Mem. Inst. Butantan, 57(31:85-90, 1989.

997. HIGASHI.H.G.; GUIDOLIN.R.; NISHIKAWA.A.K.; YAMAGUCHI.I.K.; STEPHANO.M.A.; JOSÉ dos SAN¬

TOS,M.; DIAS da SILVA.W.; UEDA.C.M.P.M. Produção de anticorpos antiveneno total de Crotalus duris-

sus terrificus em cavalos por fosfolipase A 2 . Mem. Inst. Butantan, 57(31:91-100, 1989.

998. HIGASHI.H.G.; GUIDOLIN.R.; NISHIKAWA.A.K.; YAMAGUCHI.I.K.; LIMA.M.L.S.R.; MORAIS.J.F.; DIAS da

SILVA.W. Venenos botrópicos pré-tratados com inibidores ativos para os sítios enzimáticos de proteases

e com substância quelante preservam seu poder imunogênico. Mem. Inst. Butantan, 5 7(31:107-115, 1989.

999. HIGASHI.H.G.; MORAIS.J.F.; GUIDOLIN.R.; MARCELINO.J.R.; Dl SALVIO.V.M.P. Soro anti-rábico heteró-

logo de uso humano. Anticorpos inespeclficos. Mem. Inst. Butantan, 50(11:21-27, 1988.

1000. HIGASHI.H.G.; OLIVEIRA.E.P.T. de; ROLIM ROSA.R.; SILVA,M.A. da; FRATELÜ.F.; ENOKI.N.; IIZUKA.H.

Preparação e teste da toxina botulínica tipo "E" e do seu antisoro específico. Mem. Inst. Butantan,

57(11:5-13, 1989.

1001. MEBS.D. & KORNALIK.F. Studies on the cross-reactivity of snake venom anti-sera. Mem. Inst. Butantan,

57(41:127-132, 1989.

1002. OISHI.N.Y.; UEDA.C.M.P.M.; DIAS.W. de 0; LATRILHA.C.M.L; RAW.I. The possible role of para-pepsin

in the preparation of anti-venom sera. Mem. Inst. Butantan, 49(21:41-45, 1987.

1003. VITAL BRAZIL.O. History of the primordia of snake-bite accident serotherapy. Mem. Inst. Butantan, 491 11:7-20,

1987.

MICROSCOPIA ELETRÓNICA

1004. SPADACCI-MORENA.D.D.; MORENA,P.; CIANCIARULLO.A.M.; BRUNNER JUNIOR, A. Hemoglobin biosyn-

thesis in bone marrow and peripheral blood erythroid cells of the snake Waglerophis merremii (Reptilia,

Ophidia, Colubridae). Mem. Inst. Butantan, 57(41:133-139, 1989.

OBITUÁRIO

1005. KARL HEINRICH SLOTTA. Mem. Inst. Butantan, 50(11:5-14, 1988.

1006. LAURO PEREIRA TRAVASSOS FILHO. Mem. Inst. Butantan, 57(31:73-78, 1989.

1007. ROSA PAVONE PIMONT. Mem. Inst. Butantan, 47/48: 1-2, 1983/84.

1008. WOLFGANG BUCHERL. Mem. Inst. Butantan, 47/48: 3-4, 1983/84.

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■SciELO

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COMISSÃO EDITORIAL. Lista remissiva dos trabalhos publicados nas Memórias do Instituto Butan-

tan, 47/48-51, 1983/84-1989.

OFiDIOS

BIOLOGIA

1009. LEINZ.F.F.; JANEIRO-CINQUINIJ.R.F.; ISHIZUKA.M.M.; LANG.L.V. Sobrevivência de Bothropsjararacus-

su (Serpentes, Viperidae, Crotalinael mantidas em cativeiro. Mem. Inst. Butantan, 57(0:33-38, 1989.

1010. MANZANI.P.R. & ABE.A.S. Sobre dois novos métodos de preparo do hemipênis de serpentes. Mem. Inst.

Butantan, 50(0:15-20, 1988.

1011. OLIVEIRA,C.M.de; CARDOSO JUNIOR.R.P.; BRUNCKHORST.C.S.; HOGE.A.Y.A. Cesariana e enterotomia

em cascavel, Crotalus durissus collilineatus (Viperidae-Crotalinael. Mem. Inst. Butantan, 50(31:71-75,

1988.

1012. SAZIMA, I. Um estudo de biologia comportamental de jararaca, Bothrops jararaca, com uso de marcas natu¬

rais. Mem. Inst. Butantan, 50 (31:83-99, 1988.

956. VEINERT.T.; BELLUOMINI, H.E.; IIZUKA.FL; FEDULLO, J.D.L. Necrose de ponta de cauda em Eunectes

notaeus Cope, 1862 (Serpentes, Boidae, Boinae). Mem. Inst. Butantan, 47/48: 189-194, 1983/84.

PARASITOLOGIA

1016.

969

1013. ARTIGAS.P.T. & UETA, M.T. Sobre a evpluçâo de Ascaris lumbricoides Linnaeus, 1758, na fase larvar en-

dovular. Mem. Inst. Butantan, 51(0:15-24, 1989.

1014. ARTIGAS.P.T. 8i PAULINO.R.C. Zeferlnella vazi n.g.n. sp. (Plagiorchiidae), parasito de cavidade bucal e esô¬

fago de Erythrotampus aesculapii (Ophidia, Colubridae). Mem. Inst. Butantan, 50(31:63-69, 1988.

1015. CORDEIRO.N.S.; ARTIGAS.P.T.; GIOIA.L; LIMA, R.S. Henneguya psicilorme N. SP.; mixospoddeo parasito

de brânquias do lambari Hyphessobrycon anisitsi. (Pisces, Characidae). Mem. Inst. Butantan, 47/48: 61-69,

1983/84.

De BIASI.P.; CARDOSO JUNIOR.R.P.; SANTOS,S.M. de A. Presença de Hepatozoon plimmeri (Sambon,

1909) — Coccidia, Haemogregarinidae — em exemplar de Bothrops jararaca (Wied, 1824) — Serpentes,

Viperidae, Crotalinae — mantido em cativeiro. Mem. Inst. Butantan, 57(31:117-121, 1989.

. IIZUKA.FL; CANTER, H.M.; OLIVEIRA.E.P.T. de; HIGASHI.H.G.; ROLIM ROSA.R. Estomatite ulcerativa in¬

fecciosa em Boa constrictor constrictor mantidas em cativeiro. Mem. Inst. Butantan, 47/48:113-120,

1983/84.

967. LIZAZO.N.M. Ectoparasitismo em serpentes: observações gerais e algumas considerações sobre o gênero

Ixobioides Fonseca, 1934 (Acarina). Mem. Inst. Butantan, 47/48: 143-155, 1983/84.

1017. MACHADO,S.M.P.; CORDEIRO,N. da S.; ARTIGAS.P.T.; MAGALFIÂES.L.A. Algumas considerações sobre

cercárias naturalmente encontradas em Biomphalaha tenagophila (Orgbigny, 1835), capturadas em Lou-

veira, SP. Mem. Inst. Butantan, 49(31:79-86, 1987.

990. MORAES, R.H.P. & VEIGA, R.M. de 0. Sobre uma rara anomalia em genitália de Lutzomyia mlgonei (França,

1920) (Diptera-Psychodidae-Phlebotominael. Mem. Inst. Butantan, 50(21:41-45, 1988.

991. MORAES, R.FI.P.; VEIGA, R.M. de O.; MARASSÁ, A.M. Adaptações em armadilha entomológica luminosa

de sucção. Mem. Inst. Butantan, 57131:79-84, 1989.

968. 0BA, M.S.P. & SCF1UMAKER, T.T.S. Estudo da biologia de Amblyomma rotundatum (Koch, 1944), em in¬

festações experimentais de Bufo marinus <L., 1758) sob condições variadas de umidade relativa e de tem¬

peratura do ar. Mem. Inst. Butantan, 47/48: 195-204, 1983/84.

QUÍMICA ORGÂNICA

1018. MATtDA, A.K.; RABENHORST, E.; ZELNIK, R. A ocorrência de ácido ursólico em Citharexylum myhanthum

(Verbenaceae). Mem. Inst. Butantan, 47/48. T39-142, 1983/84.

1019. MATIDA, A.K.; ZELNIK, R.; OLIVEIRA, E.C.de. Identificação e caracterização de manitol em Sargassum cymo-

sum Agardh, uma alga parda do litoral brasileiro. Mem. Inst. Butantan, 50(2): 47-50, 1988.

1020. SILVA, M. de F.A.da, LANDSHOFF, F.M.; BU0N0NAT0, M.; ZELNIK, R. A ocorrência de taurina na anêmona-

-do-mar Phyllactis flosculifera Lesueur 1817, Mem. Inst. Butantan, 50(3): 77-81, 1988.

1021. ZELNIK, R.; MARTELLINI-LANDSHOFF, F.; RABENFIORST, E. Chemistry of the brazilian Labiatae. Terpe-

noids constituents of Lepechinia speciosa (Sr. Hil.) Epling. Mem. Inst. Butantan, 57(3): 101-106, 1989.

1022. ZELNIK, R.; SILVA, M. de F.A.da; MARTELLINI-LANDSHOFF, F.; HAIDER, A. The occurrence of N-

-Methyltaurine in the sea anemone Bunodosoma caissarum. Mem. Inst. Butantan, 57(41:141-146,1989.

VACINA PERTUSSIS

1023. MALUCELLI, M.I.C. & CARVALHO, J.P.P. Produção de vacina pertussis por diferentes processos. Níveis

de proteção e aspectos econômicos. Mem. Inst. Butantan, 47/48. 81-94, 1983/84.

VENENOS

ARACNlDICOS

1024. CICARELLI, R.M.B.; SILES VILLARROEL, M.; LUCAS, S. Avaliação da atividade tóxica do veneno de Lycosa

erythrognatha em termos de DL 50 e titulação do antiveneno em camundongos. Mem Inst Butantan

47/48: 45-53, 1983/84.

110

SciELO

10 11 12 13 14 15 16

COMISSÃO EDITORIAL. Lista remissiva dos trabalhos publicados nas Memórias do Instituto Butan-

tan, 47/48-51, 1983/84-1989.

1025. CICAREttl, R.M.B.; SILES VÍLLARROEL, M.; ZELANTE, F. Avaliação da atividade tóxica do veneno de Lo-

xosceles gaúcho, em termos de DL 50 e titulação do antiveneno específico em camundongos. Mem. Inst.

Butantan, 47/48:45-53, 1983/84.

1026. CICARELLI, R.M.B.; SILES VÍLLARROEL, M.; ROLIM ROSA, R. Avaliação da atividade tóxica do veneno de

Phoneutria nigriventer em termos de DL 50 e titulação do antiveneno em camundongos. Mem. Inst. Bu¬

tantan, 47/48: 27-32, 1983/84.

1027. CICARELLI, R.M.B.; SILES VÍLLARROEL, M.; GUIDOLIN, R.; CRIVELLARO, O. Estudo imunoquímico dos

venenos araneicos das espécies. Loxosceles gaúcho, Phoneutria nigriventer e Lycosa erythrognatah. Mem.

Inst. Butantan, 47/48: 33-43, 1983/84.

1028. VITAL BRAZIL, O. Spidervenoms acting on the sodium Channel. Mem. Inst. Butantan, 49(11:25-33, 1987.

VENENOS OFÍDICOS

1029. BERCOVICI, D.; CHUDZINSKI, A.M.; DIAS, W. de O.; ESTEVES, M.I.; HIRAICHI, E.; OISHI.N.Y.; PICAREL-

Ll, Z.P.; ROCHA, M.C. da; UEDA, C.M.P.M.; YAMANOUYE, N.; RAW, I. A systematics fractionation of

Crotalus durissus terrificus ven om. Mem. Inst. Butantan, 49(31:69-78, 1987.

1030. GUTIÉRREZ, J. M. & LOMONTE, B. Local tissue damage induced by Bothrops snake venoms. A review.

Mem. Inst. Butantan, 57(4): 211-223, 1989.

1031. PERRONE, M.A.L.; SILES VÍLLARROEL, M.; FURTADO,M.de F.D. Estudo comparativo entre os venenos

de serpentes do gênero Bothrops, procedentes do Estado de São Paulo e do Estado do Paraná com algu¬

mas espécies morfologicamente duvidosas. Mem. Inst. Butantan, 57(11:25-32, 1989.

VENENOS OFÍDICOS

1032. SILVA, M.V.da & BUONONATO, M.A. Relato clínico de envenenamento humano por Philodryas olfersii. Mem.

Inst. Butantan, 47/48: 121-126, 1983/84.

1033. VIEIRA, E.G.J.; ROLIM ROSA, R.; IIZUKA, H.; FURTADO, M. de F.D.; FERNANDES, W. Influências sazonal

e do processo de extração sobre a produção, toxicidade do veneno e sobrevida de Bothrops jararaca (Wied,

1824). Mem. Inst. Butantan, 50(11:29-35, 1988.

Obs.: Os números das referências que aparecem repetidos indicam que esses trabalhos aparecem em mais de um

assunto.

1 1 1

2 3 4

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BOLETIM DE

BIOTECNOLOGIA

VOLUME 1-1990

ISSN 0103-6548

Secretaria de Estado da Saúde

Coordenação dos Institutos de Pesquisa

Instituto Butantan

COMISSÃO EDITORIAL

Rosalvo Guidolin

Wilmar Dias da Silva

Isaias Raw

Henrique Moisés Canter

Luiz Sebastião Prigenzi

Denise Maria Mariotti

SUMÁRIO

EDITORIAL

Suero antilatrodectus: esquema reducido para hiperinmunizacion de equinos 5

Antilatrodectus serum: reduced scheme for equine immunisation

C. Gómez

G. Guillén

J. Bernagozzi

N. Stanchi

J. Garabano

Purificação de plasma anticrotálico de origem eqüina 11

Equine anti-crotalus plasma purification

R. Guidolin

M.A. Stephano

H. G. Higashi

O. V. Ferreira

W. Dias da Silva

Boi. Biotecnol., 1, p. 1 — 15, 1990

2 3

5 6

11 12 13 14 15 16

Boi. Biotecnol., 1, 1990

EDITORIAL

Ao lançar o BOLETIM DE BIOTECNOLOGIA, o Instituto Butantan visa oferecer

a oportunidade de apresentações breves e atualizadas de desenvolvimentos tec¬

nológicos e pesquisas dirigidas à produção de imunobiológicos. É prática comum,

especialmente entre técnicos que militam nas áreas de produção, aproveitamen¬

to de informações recolhidas no dia-a-dia de trabalho que, apesar de não se re¬

vestirem com o planejamento da pesquisa científica, constituem bases sobre as

quais se alicerçam as diretrizes para a preparação e controle de produtos biológi¬

cos. Espera-se que estas informações de inestimável valor prático não se per¬

cam, tornando-se acessíveis a técnicos e pesquisadores que se dedicam à

produção e ao controle de produtos biológicos.

Bypublishing the Biotechnology Bulletin, the Institute Butantan expects to offer

an opportunity for the divulgation of brief papers in the research and develop-

ment of immunobiological products. It is a common sense that those involved

in the manufacture of these products gather, in their daily activities, informations

which, although not planned as for an original research, may provide data for

the yield and control of such products. We hope that these worthwhile informa¬

tions will be available to technicians and investigators who are active in this field.

2 3

5 6

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cm l

SciELO

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Boi. Biotecnol.

í: 5-9, 1990

SUERO ANTILATRODECTUS: ESQUEMA REDUCIDO

PARA HIPERINMUNIZACION DE EQUINOS

C. GÓMEZ*

G. GUILLEN*

J. BERNAGOZZI*

N. STANCHI**

J. GARABANO*

RESUMO: Executou-se diferentes esquemas para produção de soro an-

tilatrodectus, com o objetivo de reduzir a quantidade de antígeno, as¬

sim como o tempo necessário para a obtenção de altos títulos de

anticorpos neutralizantes. Os resultados foram comparados com os ob¬

tidos pelo esquema clássico de hiperimunização usado até o presente

pelo Laboratório Central de Saúde Pública da província de Buenos Ai¬

res (Argentina). De acordo com os resultados obtidos, o esquema re¬

duzido apresenta uma sensível economia no tempo e quantidade de

antígeno usado, assim como mediante elevação dos títulos nos testes

de neutralização.

UNITERMOS: Soro antilatrodectus, hiperimunização, esquema reduzido.

INTRODUCCION

En la produción de inmunosueros, ya sea terapêuticos o profilácticos una de

las preocupaciones fundamentales, es la obtención de los mismos, con alta es-

pecificidad, en el tiempo más corto, con el más bajo consumo de antígeno, y

utilizando el menor número de animales. Lo relacionado al antígeno es de vital

importância cuando éste es de difícil obtención por el productor de inmunosue¬

ros o debe ser obtenido a través de terceros.

Este es el caso particular de Latrodectus mirabilis (Holmberg, 1876) para la

producción de suero antilatrodectus por el Laboratório Central de Salud Pública

de la Província de Buenos Aires.

El presente trabajo se realizó con el propósito de comparar esquemas de in-

Laboratório Central de Salud Pública. Peia Buenos Aires — Argentina.

Becario Comision Investigaciones Científicas. Província de Buenos Aires.

Recebido para publicação em 14.11.1989 e aceito em 27.9.1990.

'SciELO

0 11 12 13 14 15 16

GÓMEZ, C.; GUILLEN, G.; BERNAGOZZI, J.; STANCHI, N.; GARABANO, J. Suero antilalrodectus:

esquema reducido para hiperinmunizacion de equinos. Boi. Biotecnol., 1:5 — 9, 1990.

munización cortos con dosis reducidas de antígeno frente a los utilizados rutina-

riamente en este laboratorio para la elaboración de dichos inmunosueros en

equinos.

MATERIALES Y MÉTODOS

1. Aparatos de Latrodectus mirabilis (anteriormente clasificada como Latro-

dectus mactans ) 1 ' 4 fueron provistos por el Laboratorio y Museo de Animales Ve¬

nenosos (LYMAV) de la Facultad de Ciências Médicas de la Universidad Nacional

de Las Plata. Los mismos se obtuvieron por disección bajo lupa estereoscópica

y fueron conservados em desecador con sílica gel y al vacío.

2. Titulación de toxicidad:

a) Por observación bajo lupa se procedió a la separación y conteo de aparatos

de manera de obtener luego una suspensión que contuviera 4 aparatos/ml.

b) Los aparatos fueron triturados en mortero estéril y suspendidos en solución

fisiológica tamponada pH 7,2-7,4 estéril.

c) La suspensión fue centrifugada a 1500 rpm a temperatura ambiente, du¬

rante 2 min.

d) Con el sobrenadante se realizaron 5 diluciones en factor 2, con la misma

solución salina utilizada en el punto b.

e) Las diluciones fueron inoculadas previa incubación a temperatura ambiente

por 60 min, por via intraperitoneal a ratones albinos de 18-20 g de peso y de

un mismo sexo, a razón de 0,5 ml por animal, utilizándose 4 animales por dilución.

f) La DL 50 se definió como la cantidad de aparatos necesaria para provocar

la muerte dei 50% de los animales inoculados en 96 horas y calculadas por el

método de Spearmaq-Karber . 3

3. Animales productores de suero: Equinos machos castrados, entre 300 y

400 kg, nunca antes utilizados en la elaboración de sueros hiperinmunes, vacu-

nados con toxoide tetânico (dos dosis con intervalo de cuatro semanas), y con

serología negativa para Anemia Infecciosa Equina (prueba de inmunodifusión de

Coggins).

4. Obtención de antivenenos:

4.1. Esquemas de inmunización: se inocularon seis equinos en cada esquema

4.1. Esquema clásico: El plan consistió en seis inoculaciones via subcutânea

en la región dorsal de los equinos, con siete dias de intervalo entre ellos. En la

primeira se emulsiono 2 dos aparatos en adyuvante completo de Freund y los si-

guientes cuatro, ocho, dieciseis, treinta y dos, y sesenta y cuatro aparatos tritu¬

rados y suspendidos en solución salina estéril.

4.2. Esquema reducido: El plan consistió en seis inoculaciones via subcutâ¬

nea en la región dorsal de equinos. La primeira consistió en tres aparatos tritura¬

dos y suspendidos en solución salina estéril: 5 ml, adicionado de 5 ml de

Adyuvante Completo de Freund (Sigma Corp.), en dos punto de inoculación.

La segunda consistió en cinco aparatos triturados y suspendidos en solución

salina estéril con el agregado de 5 ml de Adyuvante incompleto de Freund (Sig¬

ma corp), e inoculado en la misma forma que las anteriores. La tercera fue reali¬

zada en la misma forma que la segunda pero utilizando 10 aparatos. La cuarta

se realizó con cinco aparatos triturados y suspendidos en solución salina estéril

sin el agregado de adyuvantes e inoculado en torno a los granulomas de las in-

yecciones anteriores. La quinta y sexta inoculación se realizaron en la misma for¬

ma descripta para la cuarta.

Los intervalos de inoculaciones fueron de 7 dias entre las tres primeras dosis

y de dos dias para las restantes.

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GÓMEZ, C.; GUILLEN, G.; BERNAGOZZI, J.; STANCHI, N.; GARABANO, J. Suero antilatrodectus:

esquema reducido para hiperinmunizacion de equinos. Boi. Biotecnol., 1:5 — 9, 1990.

5. Sangrias:

Sangria exploratriz: Consistió en extracciones por punción yugular de 20 a 30

ml de sangre de cada animal, recogidas en tubos de ensayo estéril sin anticoagu-

lante, relizadas 7 dias después de la última inoculación.

Sangria parcial: Cada animal fue sangrado en un volumen de 9 litros por trocar

en la yugular y recepcionado en un frasco estéril con citrato de sodio al 15%

(250 ml) como anticoagulante. El plasma se separó luego de 24 horas por de-

cantación espontânea y luego se purificó según el método dei Instituto Clodomi-

ro Picado de Costa Rica, preconizado por la O.M.S. 2 ' 3 ’ 5 . 6 7

6 . Determinación de la capacidad neutralizante de los inmunosueros:

a) Por observación bajo lupa se separaron y contaron aparatos completos de

manera de preparar luego una suspensión que contuviera 2 DL50 por animal a

inocular.

b) Se preparó una suspensión por trituración en mortero estéril de los apara¬

tos, los que posteriormente se suspendieron en solución fisiológica estéril tam-

ponada a pH 7, 2-7, 4 y se centrifugraron a 1500 rpm durante 2 min a temperatura

ambiente.

c) De acuerdo al título esperado en el suero a valorar, utilizando una dilución

1/100 dei mismo, se enfrentaron cantidades crecientes de esta dilución, de ma¬

nera de cubrir estimaciones de títulos desde 1000 DLso/ml a 5000 DLso/ml apro¬

ximadamente, manteniendo fija la cantidad de veneno a inocular como se indica

en el punto

a) y completando el volummen con solución fisiológica estéril tamponada.

d) La mezcla se incubo a temperatura ambiente durante 60 min, como así tam-

bién el control de la DL 50 que se prepara simultáneamente como se describió

en el punto 2 .

e) Posteriormente se inoculan 4 ratones albinos por dilución, por via intraperi-

toneal y de las mismas características dei punto 2 e.

f) Se registraron las muertes diariamente durante 96 horas y se calculó la DL50

por el método de Spearman-Karber 3 , expresándose en DL 50 neutralizadas por

ml de suero.

RESULTADOS

La cantidad de aparatos utilizados en la inmunización en los planes clásico y

reducido, así como también el tiempo en dias insumido y los títulos de anticuer-

pos expresados en DL 50 neutralizadas/ml de suero se detalla en la tabla 1 .

Los títulos de anticuerpo netrualizantes fueran superiores en el plan reducido

con respecto al plan clásico. La cantidad de aparatos utilizados en el esquema

base dei plan reducido fueron un tercio dei utilizado en el plan clásico. El tiehnpo

total de inmunización en dias fue la mitad en el plan reducido.

Tabla 1

Número de aparatos utilizados, tiempo en dias y títulos de anticuerpos neutrali-

zantes en suero, en los esquemas clásico y reducido de hiperinmunización.

Plan de

inmunización

clásico

reducido

N° de aparatos

Tiempo en

Título dei suero

utilizados

dias

DL 50 neutralizante/ml

126

964

1480

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GOMEZ, C.; GUILLEN, G.; BERNAGOZZI, J.; STANCHI, N.; GARABANO, J. Suero antilatrodectus:

esquema reducido para hiperinmunizacion de equinos. Boi. Biotecnol., 1:5 — 9, 1990.

DISCUSION

Piroski y col 9 ya elaboraban este suero en 1940, inoculando cefalotórax en

cantidades progresivas a intervalos semanales utilizando en planes de inocula-

ción basal 1436 cefalotórax y en los de refuerzo 820 de los mismos, siendo el

período de realización de 90 y 50 dias respectivamente.

En 1982 el Laboratorio Central de Salud Pública comenzó con la elaboración

de suero anti-latrodectus en equinos, consistiendo el plan en seis inoculaciones

con 7 dias de intervalo entre ellas, con un insumo total de 126 aparatos de Latro-

dectus.

Los resultados obtenidos por investigadores dei Instituto Butantan y de Salud

de México 8 ' 10 en sueros anti-veneno ofídico con la utilización de planes cortos

de inmunización nos llevaron a la aplicación de planes reducidos para la produc-

ción de sueros antibothrópicos con buenos resultados.

Posteriormente los mismos investigadores experimentaron planes rápidos en

arácnidos con Lycosa erytronatha, Phoneutria sp., Loxoceles sp. (11). Los lor-

gros alcanzados por ellos, nos llevaron a su aplicación en la inmunización con

Latrodectus mirabilis para la producción de suero antilatrodectus por este labo¬

ratorio con los resultados detallados.

De acuerdo a los resultados obtenidos, el método representa una sensibile eco¬

nomia de tiempo, de animales suero-productores y de antígeno utilizado en la

hiperinmunización, así como también la obtención de anticuerpos neutralizantes

a título satisfactorio en el esquema de base. No fueron observadas reacciones

locales intensas como absesos o necrosis en los puntos de inoculación de los

antígenos para ambos esquemas con excepción de un equino dei esquema clási-

co en la última aplicación.

AGRADECIMIENTOS

Se agradece al Sr. Carlos Grisolía, Jefe dei Laboratorio y Museo de Animales

Venenosos, por la provisión de aparatos de Latrodectus mirabilis. A la Dra. Nora

Dellepiane, Jefe Dto. Contralor, Instituto Nacional de Microbiologia "Carlos Mal-

bran", y Dr. Ramón de Torres, por sus observaciones y por la revisión dei ma¬

nuscrito. Al Sr. Alfredo Navarro, Técnico Químico dei Sector Productos

Bacterianos dei Depto. Control de Calidad dei Laboratorio Central de Salud Públi¬

ca por la asistencia técnica prestada.

ABSTRACT: Different equine immunization schemes for production of

antilatrodectus serum were carried out in order reduce the amount of

antigen as well as the time needed obtain high neutralizing titers. The

results were compared with those of the classical hiperimmunization

scheme used at the present by Public Health Laboratory (Buenos Aires

Province, Argentina). According to the obtained resuits, the reduce sche¬

me presents a sensitive decrease in the time spent, in the antigen used,

and as well as, an immediate elevation in the neutralizing titers test.

KEYWORDS: Antilatrodectus serum, hiperimmunization, reduced

scheme

REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

1. ABALOS, J.W. Las aranãs dei género latrodectus de Argentina. Centenário dei Museo

de La Plata. 1981. v.6.

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Inst. Butantan, 44/45: 259-270, 1980-1981.

11. ROLIM ROSA, R.; SILES VILLARROEL, M.; VIEIRA, E.G.J.; IIZUKA, H.; NAVAS, J.

Produção de soro antiaracnídico polivalente mediante inoculações simultâneas de

venenos em um mesmo animal. Mem. Inst. Butantan, 44/45 : 253-258, 1980-81.

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Boi. Biotecnol.

1: 9 11 - 15, 1990

PURIFICACAO DE PLASMA ANTICROTÁLICO DE

ORIGEM EQÜINA

Rosalvo GUIDOLIN*

Marco Antonio STEPHANO*

Hisako Gondo HIGASHI*

Odila Victor FERREIRA**

Wilmar Dias da SILVA**

RESUMO: Demonstra-se que algumas modificações introduzidas na téc¬

nica básica descrita por Pope e outros, de purificação de soros hiperi-

munes heterólogos, proporcionam rendimentos específicos acima de

60% de antiveneno (soro anticrotálico)

UNITERMOS: Soro anticrotálico, purificação, rendimentos

INTRODUÇÃO

Os soros imunes heterólogos (origem eqüina) para utilização humana, são pu¬

rificados industrialmente pelo processo de digestão enzimática (pepsina), segundo

a técnica descrita por Pope 6 ' 7 ' 8 ou por modificações dessa técnica 2 .

Os rendimentos médios, em número de unidades recuperadas no soro final,

variam dentro de uma faixa de 40% a 50%. Em face ao elevado custo de produ¬

ção, observado na preparação dos soros hiperimunes, persiste constantemente

a necessidade de pesquisas de novos métodos ou de variações que, introduzi¬

das nas técnicas básicas, proporcionem rendimentos mais elevados.

Os autores, objetivando uma redução de perdas inerentes ao método de puri¬

ficação, introduziram algumas alterações na técnica básica de Pope cujos resul¬

tados indicaram possibilidades de rendimentos substancialmente maiores no

processamento do soro anticrotálico.

Seção de Concentração e Fracionamento de Soros.

Laboratório Especial de Imunoquímica

Instituto Butantan — CP 65 — 01051 — São Paulo-SP-Brasil

Recebido para publicação em 01.3.90 e aceito em 12.10.90.

'SciELO

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GUIDOLIN, R.; STEPHANO, M.A.; HIGASHI, H.G.; FERREIRA, O.V.; DIAS da SILVA, W. Purificação

de plasma anticrotálico de origem equina. Bol. Biotecnol., 1: 11-15, 1990.

Plasmas: consistiu de uma amostra de plasmas de não menos do que 40 ca¬

valos hiperimunizados com veneno de Crotalus durissus terrificus crotamina po¬

sitivo, sangrados assepticamente 3 .

Desfibrinação do plasma: foi obtida pela adição de 20ml de solução a 20%

de cloreto de cálcio (CaCy, por litro e agitação por sistema de hélice (250 rpm).

A cada 15 minutos o material mantido a 37°C era agitado por 3 a 4 minutos,

durante 3 horas. O precipitado foi eliminado por filtração em papel tipo What-

man n° 50.

Primeira precipitação: foi efetuada pela adição lenta de 1 volume de solução

a 24% p/v de sulfato de amónio, (N 1 - 14)2 SO 4 comercial, e 1, 8 % p/v de cloreto

de sódio (NaCI) p.a., a 1 volume de plasma desfibrinado, pH ajustado a 7,0. A

mistura foi mantida em agitação ( 200 rpm) durante a adiçãq e por mais 60 minu¬

tos, à temperatura ambiente. 0 material foi armazenado em repouso a 5°C du¬

rante uma noite e, em seguida, filtrado em papel tipo Wathman n° 50.

Segunda precipitação: foi obtida pela adição lenta de sulfato de amónio sólido

ao sobrenadante da primeira precipitação, cujo pH havia sido ajustado a 7,0. A

adição do sulfato de amónio, sob agitação constante ( 200 rpm), foi feita até atin¬

gir a concentração de 24% p/v. Após a adição mencionada 0 material continuou

em agitação por mais 60 minutos e, em seguida, mantido em repouso a 5°C

durante uma noite. Na manhã seguinte foi filtrado em papel tipo Whatman n°

50 e 0 precipitado recolhido.

Diálise: o precipitado de 1 litro de plasma foi ressuspenso em 50 a 60ml de

solução salina-fenolada (0,3% v/v) e colocado em saco de papel celofane* es¬

pecial para diálise.

Aproximadamente 2/3 do material ficaram por 48 horas em contato com 20

litros de solução salina adicionada de 0,3% de fenol v/v. A solução salina-fenolada

era substituída a cada 12 horas.

Cálculos de índices de Purificação e Rendimentos: segundo Harms 2

Determinação da concentração de proteína: segundo método de Lowry e col . 5

Digestão enzimática: ao material dialisado foi adicionado 1g de pepsina

(1/10.000) para cada 57g de proteína do dialisado, cujo pH foi previamente ajus¬

tado a 3,9 com solução 2,5M de ácido clorídrico. A ação da pepsina durou 40

minutos, dos quais os 10 primeiros, sob agitação de 200rpm e os 30 minutos

restantes em repouso, e o material foi sempre mantido a 37°C. Imediatamente

após esse período, 0 pH foi reajustado a 5,2 com solução a 20% de hidróxido

de sódio p.a. p/v e a mistura aquecida a 55°C, durante 60 minutos. A elevação

da temperatura do material, que estava a 37°C, atingiu os 55°C em aproxima¬

damente 60 minutos.

Terceira precipitação: obtida pela adição lenta de 28% p/v de sulfato de amó¬

nio sólido, sob agitação constante de 200rpm, pH 5,2, à temperatura ambiente.

Completada a adição, 0 material permaneceu sob agitação (200 rpm),durante

60 minutos e foi armazenado, em repouso, a 5°C durante uma noite e, em se¬

guida, filtrado em papel tipo Whatman n° 50.

O precipitado foi submetido à diálise como acima indicado.

Verificação da Concentração de Albumina no Soro final: por eletroforese . 4

• Papel celofane EMBLEMA 350 P

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GUIDOLIN, R.; STEPHANO, M.A.; HIGASHI, H.G.; FERREIRA, O.V.

de plasma anticrotálico de origem eqüina. Boi. Biotecnol., 1:

; DIAS da SILVA, W. Purificação

11-15, 1990.

Determinação do título antiveneno crotálico: por doseamento em camundon¬

gos albinos de 18 a 22g de peso. Foram preparadas soluções de veneno crotáli¬

co de referência, contendo 5 DL 50 e incubados com volume igual de diferentes

diluições do soro em teste (fator da diluição 1,2), a 37°C, durante 30 minutos.

Misturas-controles, contendo 0,15M de NaCI, em lugar do soro, correram para¬

lelamente. Oito camundongos, por diluição ou para a mistura-controle, foram ino¬

culados intraperitonealmente com 0,5ml de cada solução. Os animais foram

observados por 48 horas e 0 número de sobreviventes anotado. Os resultados

foram obtidos através do método de cálculo dos probitos 1 .

RESULTADOS E DISCUSSÃO

A Tabela 1, resume os resultados obtidos com a técnica proposta, com duas

partidas distintas de plasmas de cavalos diferentes.

TABELA 1

Resultados de análises químicas, biológicas, índice de purificação e rendimentos

obtidos pela purificação de dois plasmas anticrotálicos diferentes.

Preparação n°

Volume

inicial de

Plasma ml

Título

inicial do

Plasma

mg/ml

Albumina no

Soro Final

Título do

Soro Final

mg/ml

índice de

Purificação

Rendi¬

mento

09-89-30

11-89-46

600

1.480

0,6

0,74

1,0

< 1,0

1,2

1,77

1,87

3,51

68,6

64,6

O estudo eletroforético da preparação final n° 11-89-46 demonstrou concen¬

tração de albumina inferior a 1 % e fração alfa acentuadamente reduzida. As re¬

giões Beta e Gama apresentaram-se aumentadas, em cujas frações encontram-se

as imunoglobulinas eqüinas.

Os dados numéricos obtidos eletroforeticamente nos permitiram concluir que,

com a técnica empregada, foi eliminada grande parte das proteínas imunologi-

camente inativas, conservando-se 94,6% das frações globulínicas.

ABSTRACT: lt was been shown that some modifications introduced on

the basic technique, described by Pope and others for heterologous hype-

rimmune sera purification, induced over 60 per cent of specific antive-

non yields (anti-crotalus serum)

KEYWORDS: Anti-crotalus serum, purification, yields

REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

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sera. I — True digestion of the proteins. Brit. J. exp. Path., 20: 132, 1939.

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sera. II — Heat denaturation after partial enzyme action. Brit. J. exp. Path.,

20: 201, 1939.

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15 16

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1. Somente serão aceitos trabalhos inéditos e que se destinem exclusivamente à revista. É proibida a reprodução

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go, nome(s) do(s) autor(cs) c filiação científica. Texto: introdução, material c métodos, resultados, discussão,

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unitermos (palavras ou expressões que identificam o conteúdo do artigo; devem ser incluídas até um limite máxi¬

mo de três, em português e inglês).

4. As referências bibliográficas deverão ser ordenadas alfabeticamente e numeradas.

Exemplqs:

Para livros: autor, título, edição, local de publicação, editor, ano, páginas.

7. BIER, O. Microbiologia e imunologia. 24.ed. São Paulo, Melhoramentos, 1985. 1234p.

Para artigos: autor, título do artigo, título do periódico, volume, página inicial e final, ano.

8, MACHADO, J.C. & SILVEIRA F.°, J.F. Obtenção experimental da pancreatite hemorrágica aguda no cão

por veneno escorpiônico. Mem. Inst. Butantan, 40/41: 1-9, 1976/77.

As citações no texto devem ser por números-índices correspondentes às respectivas referências bibliográficas.

Exemplos:

... método derivado de simplificação de armadilha de Disney 1

... segundo vários autores 2 3,4

5. As ilustrações (fotos, tabelas, gráficos etc.) deverão ser originais e acompanhadas de legendas explicativas. As le¬

gendas serão numeradas e reunidas em folha à parte. Os desenhos deverão ser a nanquim e as fotografias bem

nítidas, trazendo no verso o nome do autor e a indicação numérica da ordem a ser obedecida no texto. As ilustra¬

ções deverão ser organizadas de modo a permitir sua reprodução dentro da mancha da revista (22 x 12,5cm).

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sion, condusions, acknowledgments, references, abstraets (in Portuguese and English), and keywords. A maximal

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*l. Referentes in alphabetital order should be numbered consecutively.

Examples:

Books

7. BIER, O. Microbiologia e imunologia. 24.ed. São Paulo, Melhoramentos, 1985- 1234p.

Articles

8. MACHADO, J.C, & SILVEIRA F.°, J.F. Obtenção experimental da pancreatite hemorrágica aguda no cão

por veneno escorpiônico. Mem. Inst. Butantan, 40/41: 1-9, 1976/77.

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... método derivado de simplificação de armadilha de Disney 1

... segundo vários autores 2,3,4

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