SOMMAIRE

S. MARAKIS and S. DIAMANTOGLOU - Fungi isolation from

leaves of some Mediterranean evergreen sclerophyllous shrubs.

Enzymatic activity of the isolated fungi

V. FORET - Aspects métaboliques de la fructification d'Agaricus

bisporus (Lange) Imbach ... Бо

J.C. LÉGER - Etude critique et validation des espéces nouvelles

d'Hymenochaete décrites par G.A. Escobar ... RS

B.M. TROEUNG et H. GOSSET - Contribution à l'étude

écophysiologique de l'anthracnose de la luzerne au Maroc oriental .

A.F. MOUSTAFA - Some preliminary observations on the

competitive colonization of filter-paper by cellulose-decomposing

fungi ... jM

Analyses bibliographiques

Table du Tome 11 ...

CONTENTS

S. MARAKIS and S. DIAMANTOGLOU - Fungi isolation from

leaves of some Mediterranean evergreen sclerophyllous shrubs.

Enzymatic activity of the isolated fungi .. n

V. FORET - Metabolic aspects of the fruiting of Agaricus к

(Lange) Imbach (In French) .

J.C. LEGER - Critical studies and validation of the new species of

Hymenochaete described by G.A. Escobar (In French) К

B.M. TROEUNG et H. GOSSET - Contribution to ecophysiological

study of Lucerne anthracnose in eastern Morocco (In French) .........

А.Е. MOUSTAFA - Some preliminary observations on the

competitive colonization of filter-paper by cellulose-decomposing

fungi .... ips

Bibliography

Table of Volume 11 ....

243

255

289

313

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Source : MNHN. Paris

CRYPTOGAMIE

MYCOLOGIE

TOME 11 Fascicule 4 — 1990

Ancienne Revue de Mycologie. Dirigée par Roger HEIM

DIRECTEUR SCIENTIFIQUE : Madame J. NICOT

AIRE DE REDACTION : Mme M.-C. BOISSELIER. ÉDITEUR : A.D.A.C.

Publié avec le concours du Muséum National d'Histoire Naturelle

CRYPTOGAMIE, MYCOLOGIE est indexé par : Biological Abstracts, Current Contents,

Publications bibliographiques du CDST (Pascal).

Bibliothèque Centrale Muséum

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Cryptogamie, Mycol. 1990, 11 (4): 243-254 243

FUNGI ISOLATION FROM LEAVES

OF SOME MEDITERRANEAN EVERGREEN

SCLEROPHYLLOUS SHRUBS.

ENZYMATIC ACTIVITY OF THE ISOLATED FUNGI

by S. MARAKIS and S. DIAMANTOGLOU

University of Athens, Institute of General Botany,

157 84 Athens, Greece.

ABSTRACT - The young leaves of Olea europaea L. var. silvestris Brot., Ceratonia

siliqua L., Quercus coccifera L. and Pistacia lentiscus L. are richer in nitrogen and

tannins but poorer in carbohydrate contents compared to those of mature leaves.

Forty fungal species belonging to 27 genera were isolated. The species isolated from

mature leaves were about 2-4 times greater in number than the ones isolated from

young leaves, Alternaria alternata, Aspergillus carbonarius and Penicillium glabrum

were the most common fungi isolated during the survey. The greater number of fun-

gal species was isolated from O. europaea leaves, while the smaller from Q. coccifera.

Many fungi were common saprophytes while others were plant pathogens. The leaf

tannin fraction precipitated by Tween 80 favored the growth of the fungi isolated

from leaves rich in this tannin fraction. The tannase activity depended on fungal spe-

cies and the leaves where fungi were isolated. The fungi isolated from Q. coccifera

leaves presented the higher tannase activity. Trichoderma viride and A. carbonarius

presented the higher cellulase and tannase activity respectively.

RÉSUMÉ - Les jeunes feuilles d” Olea europaea L. var. silvestris Brot., Ceratonia

siliqua L., Quercus coccifera L. et Pistacia lentiscus L. sont plus riches en azote et

en tanins mais plus pauvres en glucides que les feuilles âgées. Quarante espèces

fongiques appartenant à 27 genres ont été trouvées. Les espèces fongiques isolées des

feuilles âgées sont 2-4 fois plus nombreuses que celles des jeunes feuilles. Alternaria

alternata, Aspergillus carbonarius et Penicillium glabrum sont les champignons les

plus communs. Le plus grand nombre d'espèces fongiques est isolé des feuilles d' O.

europaea, tandis que le plus petit nombre correspond à Q. coccifera. Plusieurs cham-

pignons sont des saprophytes communs tandis que d'autres sont des pathogènes des

plantes. La fraction des tanins des feuilles, précipitée par le Tween 80, favorise la

croissance des champignons isolés des feuilles riches en cette même fraction.

L'activité tannase dépend des espèces fongiques et des feuilles d'où proviennent les

champignons. Les champignons des feuilles de Q. coccifera présentent la plus haute

activité en tannase. Trichoderma viride et A. carbonarius présentent respectivement la

plus haute activité en cellulase et en tannase.

KEY WORDS : Maquis fungal flora, tannins, tannase, cellulase.

Source : MNHN, Paris

244 S. MARAKIS and S. DIAMANTOGLOU

INTRODUCTION

Aiming the microbial degradation of tannins and lignocellulose, we un-

dertook a fungal screening from leaves of some evergreen sclerophyllous

shrubs (Ceratonia siliqua L., Quercus coccifera L., Pistacia lentiscus L., Olea

europaea L. var. silvestris Brot.). These “maquis” were preferred for the sig-

nificant tannin content of the first three species. Consequently, fungi with

high tannin-lignocellulolytic activity could be isolated. Fungi with such abili-

ties could be used for upgrading carob bean value. Deseeded carob pod

contains: water soluble sugars (60%), lignin 12.5%, tannins 6%, cellulose

% and hemicelluloses 4.8% (Marakis, 1980; Marakis et al., 1987).

The carob bean fungal flora was determined by Charpentié & Marakis

(1980). Some of these fungi presented high tanninolytic activity (Marakis,

1980, 1985).

Saccardo (1898) carried out the first fungal survey on C. siliqua. He

cited several fungi e. g. Phyllosticta ceratoniae Berk., Septoria carrubi Pass.

and Sphaerella ceratoniae Pass. Sixty years later, several phytopathologists

isolated some pathogenic fungi as: Oidium ceratoniae Comes. (Graniti, 1958),

Glomerella cingulata (Stonem.) Spauld. & v. Schrenk (Martelli, 1961) and Di-

plodina ceratoniae Sarejanni (Demetriades et al., 1959). Recently, fungal spe-

cies, belonging to 12 genera, were isolated from carob leaves and fruits for

the first time in Portugal (Moreira, 1987). The fungus-host index for Greece

(Pantidou, 1973) includes fungal species isolated from O. europaea, C. siliqua,

P. lentiscus and Q. coccifera.

The above mentioned studies (besides that of Charpentié & Marakis,

1980) have to be mainly with parasitic and pathogenic fungi. Yet, the dis-

tribution of fungi occurring on leaves of the under study evergreen sclero-

phyllous shrubs in Greece, as well as the tannino-cellulolytic activity of these

fungi have not been studied.

Aim ef this study is to determine fungi occurring on the young, mature

and fallen leaves (litter) of O. europaea var. silvestris, C. siliqua, P. lentiscus

and Q. coccifera shrubs, as well as the tannase and cellulase activity of the

isolated fungi.

MATERIALS AND METHODS

Preparation of leaf extract and TPT fraction

The tannin fraction precipitated by Tween 80 (TPT fraction) was pre-

pared as follows: 0.4kg of freeze-dried and milled (2mm sieve) leaves of each

examined shrubs was mixed with 2.51 of deionized water and autoclaved for

30 min at 121°C. The slurry was passed through cheesecloth and the ex-

tracted leaves resuspended in 1.51 of deionized water and autoclaved once

again. 0.15g sodium pyrosulfite has been added to prevent tannin oxidation,

and the two filtrates were combined (leaf extract).

Source - MNHN, Paris

FUNGI ISOLATED FROM "MAQUIS^ 245

The TPT fraction was precipitated by addition of Sml Tween 80 per li-

tre of leaf extract. This tannin fraction was filtrated and dried by lyophiliza-

tion.

Media

I. For isolation of fungi, many common standard or selective media

[Czapek-Dox, potato dextrose, malt extract, lupin stems, corn meal, oatmeal,

hay-infusion agar, etc. (Miller et al., 1957; Raper & Fennell, 1965; Booth,

1971; von Arx, 1981; Burns & Slater, 1982)] were used. The media Al-4 (of

Czapek-Dox type) also used, contained 10% w/v leaf powder rather than 3%

sucrose. So, the indexes 1,2,3,4 represent the leaf powder of O. europaea, C.

siliqua, Q. coccifera and P. lentiscus respectively. Chloramphenicol (0.05

mg/ml of medium) was added in order to supress bacterial growth.

2. Medium B, contained (g/l): TPT fraction, 20; (NH4)2 SOs, 5; Ka

HPOs, 1; MgSOy.7H20, 0.5: KCl, 0.5: ZnSO4, 0.01; CuSO,.5H20, 0.005;

biotin, 0.04; thiamine, 1; pyridoxine hydrochloride, 0.5; and nicotinic acid,

0.5. The pH was adjusted to 5-5.5.

3. Medium C: the salts of medium were the same with those used by

Peitersen (1975), supplemented with 2% cellulose.

4. Medium D: its composition was the same with the medium used by

Yamada et al. (1968).

The media were sterilized by autoclaving (15 min., 121°C).

Isolation of fungi

During the spring of 1985, 150 leaves [50 of each: fallen (usually dry-

ing or decaying), mature and young] were sampled from various parts of

each shrub, and brought to the laboratory in sterilized glass bottles. Then,

the leaves were aseptically cut into pieces 0.5-1.5cm long. Samplings were re-

peated the next two years from the same shrubs and season, from several

districts of Greece.

Five pieces from the leaves of each category were mixed with 10ml of

medium (43°C) into a petri dish by simultaneous stirring. Another five leaf

pieces were placed on solid medium. The petri dishes were grouped accord-

ing to the used growth medium. Duplicates of each petri dish group were in-

cubated at ten different temperatures (between 22.5-45°C). The growing colo-

nies were purified by several methods (direct isolation, dilution-plate etc.) as

they are described by Raper & Fennell (1965), Booth (1971), Waterhouse

(1971) and Charpentié & Marakis (1980).

The pure fungal isolates were preserved by lyophilization (Marakis,

1980). These fungi were identified according to the classification tables by

Raper & Thom (1949), Barnett (1955), Raper & Fennell (1965), Ainsworth et

al. (1973), von Arx (1981). In some cases more specialized monographs or

descriptions of fungal species were used. No attempt was made to deter-

mine relative frequency of occurrence of any fungal species in a leaf sample.

Source : MNHN, Paris

246 S. MARAKIS and S. DIAMANTOGLOU

Batch cultivation

1. Fungal growth in medium B: the fungi were grown in 300ml Erlen-

meyer flasks containing 50ml of medium B. These flasks were inoculated

with 105 spores/ml of medium and incubated on reciprocal shaker (120

strokes per min) for 96 h at optimum temperature for each fungal species.

The biomass was harvested by method of Marakis (1985). Each of the

above experiments was run in triplicate (3 flasks per run). The results were

presented as mean values + standard error.

2. Enzyme production: the culture conditions for cellulase production

in medium C were the same as those above mentioned with an incubation

time extension to 5 days. For tannase production, the fungi were cultured in

medium D under conditions which have been described by Yamada et al.

(1968). The enzyme tests were made in triplicate at least on two different oc-

casions.

All isolations belonging to the same fungal species were examined in

order to reveal any strain relative to biomass production and enzyme activ-

ities.

Analytical methods

- Water soluble total sugars in leaf extracts were determined by the

method of Dubois et al (1956) after tannin removal according to the Associ-

ation of Official Agricultural Chemists (AOAC, 1970) method.

- Total nitrogen (TN) was estimated by the method of Varley (1966).

- Protein nitrogen (PN) was calculated by comparing non protein nitro-

gen (NPN), to TN. For the calculation of NPN, hexosamines and nucleic

acids were assumed to contain 7.8 and 15% N, respectively (Smith et al.,

1975).

- Hexosamines were determined by the method of Rondle & Morgan

(1955).

- Nucleic acids were extracted by the method of Delaney et al. (1975).

RNA was estimated by the method of Gottlieb & Van Etten (1964) and

DNA by the diphenylamine method (Dische, 1955) using baker's yeast RNA

and calf thymus DNA as standards.

- Tannins were determined according to Marakis (1985).

- Cellulose was estimated by the method of Updegraff (1969).

Enzyme assays

- Filter paper (F.P.) cellulase activity was determined by the Peitersen

(1975) method. One filter paper unit (U.ml*) corresponds to 1 mg/ml/h glu-

cose.

- Tannase activity was determined by Yamada et al. (1968) method.

Source : MNHN, Paris

FUNGI ISOLATED FROM "MAQUIS^ 247

RESULTS AND DISCUSSION

Composition of leaves

The results (composition of young and mature leaves presented in Ta-

ble I reveal that:

Shrubs O. europaea C. siliqua P. lentiscus _ | Q. coccifera

Total nitrogen | 2.6 | 20 | 25 | 18 | 28 | 09 | 25 | 08

Protein nitrogen] 19 | 1.5 | 17 | 10 | 19 | 03 | 18 | 02

Water

soluble sugars | 21 | 3.6 | 18 | 38 | 16 | 3.5 | 17 | 35

Cellulose 18.9 | 324 | 178 | 30.1 | 153 | 284 | 173 | 392

Total tannins | 5.7 | 3.0 | 162 | 81 | 171 | 88 | 193 | 111

TPT fraction | 02 | 001 | 48 | 10 | 73 | 12 | 86 | 21

Table I. - Composition (% on dry weight) in nitrogen, water soluble sugars, cellulose

and tannins of young and mature leaves of O. europaea Var. silvestris, C. sili-

qua, P. lentiscus and Q. coccifera.

Tableau I. - Composition (% sur poids sec) en azote, sucres solubles dans l'eau , cel-

lulose et tanins des feuilles jeunes et âgées d’ O. europaea var. silvestris, C. sili-

qua, P. lentiscus et Q. coccifera.

1) The nitrogen percentage generally decreases with the development of

the leaves. This is in agreement with the data reported by Diamantoglou &

Kull (1988). The nitrogen content is similar between the young leaves of all

four shrubs examined, while the total nitrogen content of the mature leaves

in O. europaea and C. siliqua was about twofold of that in P. lentiscus and

Q. coccifera.

2) Significant variations in the water soluble sugar content either be-

tween young leaves or the mature ones were not observed. The soluble sugar

percentage of the mature leaves was about twofold of that of the young

leaves. Diamantoglou & Meletiou-Christou (1980) indicated that the soluble

sugars in mature leaves were higher than those of young leaves in Pistacia

vera and P. terebinthus.

3) The cellulose content was found higher than 69-127% in mature

leaves compared to that of young leaves. This difference was as expected.

The higher cellulose percentage (39.2%) was observed in mature leaves of Q.

coccifera, while the lower one (28.4%) was in P. lentiscus mature leaves. This

is in agreement with the raw fibre contents reported by Diamantoglou &

Kull (1988) for the mature leaves of the above shrubs.

4) The leaves of Q. coccifera, P. lentiscus and C. siliqua contain about

threefold total tannins compared to those of O. europaea leaves. The per-

centage of total tannins was 74-100% higher in the young leaves than in the

mature ones. But, if the tannin content is calculated on fresh weight of

leaves, the above difference of the tannin percentage between young and ma-

ture leaves is significantly lower (20-50%). The TPT fraction, which possibly

consists of condensed tannin precursors, was ranged between 3.5-45% (on

Source : MNHN, Paris

248 S. MARAKIS and S. DIAMANTOGLOU

total tannins) in young leaves and 0.3-19% in mature leaves. This tannin

fraction is significantly lower in O. europaea leaves compared to that of the

other examined shrubs. This is in accordance with the results reported by

Christodoulakis (1984) with the exception of O. europaea leaves where the

histochemical reactions he employed were negative. The higher concen-

trations of tannins in the young leaves are possibly an additional protection

for these leaves at a stage of their life when they have not yet been hard-

ened. This protection is effective not only against drought but also against

herbivores. However, the presence of tannins in the leaf epidermis of most

of the evergreen sclerophyllous species (Mitrakos & Christodoulakis, 1981)

indicates the role of tannins which seems to be equally significant for the

mature leaves. The development of other protective mechanisms (hairs, spi-

ny margins, etc.) possibly decrease the importance of the tannins in the ma-

ture leaves.

Fungal species

Table II presents the fungi isolated from young, mature and fallen

leaves of some evergreen sclerophyllous shrubs. Some of these (Colletotric-

hum gloeosporioides, Phomopsis oblonga, Epicoccum nigrum, Trichoderma rose-

um, Alternaria alternata, etc.) were isolated from the examined shrubs for the

first time in Greece. Many species occurred on more than one shrub species,

while others were isolated from only a single species. The fungal species iso-

lated from the young leaves of a certain shrub, most of the time occurred on

the mature and fallen leaves of the same shrub species. The fungal species,

we isolated from mature leaves were about 2-4 times greater in number than

the ones isolated from young leaves. This is due perhaps to the short period

of time of the existence of young leaves or to their higher TPT fraction con-

tent, which may affect the growth of the isolated fungi in different ways re-

lated to the concentration of this particular tannin fraction in the leaves (see

Tab. II). Many of fungi isolated during this study have been previously re-

ported from the examined shrub species (Maire & Politis, 1940; Pantidou,

1973; Charpentié & Marakis, 1980; Moreira, 1987).

Alternaria alternata was isolated from all categories of examined

leaves. It would be expected, because this microorganism is a cosmopolitan

saprophytic colonist of plant surfaces (decaying leaves, fruits, etc.). The spe-

cies Aspergillus carbonarius and Penicillium glabrum occurring on the leaves

of tannin rich shrubs, have been isolated from carob beans (Charpentié &

Marakis, 1980). Trichoderma harzianum often occurred in warm districts,

while T. viride was isolated from cool regions. On leaves, where Trichoderma

species were isolated, less isolates of other species were recorded. This is

possibly due to Trichoderma, which, as fast-growing microorganisms, use the

nonstructural carbohydrates in a fast way; or fungi may secrete inhibitors,

antagonistic for other fungal species. C. gloeosporioides was isolated from

dark brown lesions on the carob leaves. This fungus would be considered as

a part of the surface fungal flora (mainly leaf-inhabiting fungus) of C. siliqua

because it is presented on the premature, mature and fallen leaves. P. oblon-

Za possibly sporulates as a saprobe in dead host materials and then infects

young and mature leaves. Most infections of Taphrina caerulescens occurred

Source : MNHN, Paris

249

FUNGI ISOLATED FROM “MAQUIS”

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Source : MNHN, Paris

250 S. MARAKIS and S. DIAMANTOGLOU

Examined parameters Biomass Tannase F.P. cellulase

dry weight total units (U.ml)

Fungi (mg/flask) (x103)

Acremonium strictum 16.0+0.9 10.8 0.8.

Alternaria alternata (O.e.) 5 0.9 NP

Alternaria alternata (C.s.) 25.6 0.4

Alternaria alternata 40.2 1.7

Aposphaeria lentisci NP 0.9

Aspergillus carbonarius 175.3 1.1

Aspergillus flavus 354 NP

Aspergillus fumigatus NP 0.4

Aspergillus niger (O.e.) 0.6 NP

Aspergillus niger 16.1 0.7

Aspergillus terreus 0.8 1.8

Capnodium lentisci NP NP

Capnodium oleae NP NP

Coccomyces tentatus 12.1 2.1

Cladosporium herbarum 02 0.7

Cladosporium cladosporioides 15: 7.9 NP

Colletotrichum gloeosporioides| 27.5+1.4 142 NP

Coleophoma sp. NG NP 0.8

Coniothyrium quercinum 25.642.1 133 22

Cycloconium oleaginum 2.8+0.6 0.3 NP

Diplodia ceratoniae 9441.1 54 NP

Epicoccum nigrum 7.24 0.6 2.1 04

Fusarium moniliforme NG NP 1.9

Mucor genevensis 75.4+1.9 41.2 NP

Mucor mucedo 181412 9.3 2.0

Mucor racemosus 6.2+0.8 0.4 NP

Paecilomyces variotii 20.6+1.7 10.1 1.8

Penicillium cyclopium 4.5+0.9 0.7 NP

Penicillium frequentans 98.641.8 135.1 22

Penicillium funiculosum NG 0.3 13

Penicillium notatum 5.81.1 0.9 NP

Phoma herbarum 3.0+0.7 0.4 0.6

Phoma lentisci 7.941.0 4.5 NP

Phomopsis oblonga 80.0+1.5 65.7 2.1

Phyllosticta oleae 3240.7 0.2 NP

Phytophthora megasperma NG NP 1.2

Rhizopus nigricans 9.241.3 4.3 0.9

Septoria sp. 3.6+0.8 0.3 NP

Septoria pistaciae 6231.0 13 NP

Taphrina caerulescens 76.1+1.2 453 23

Trichoderma harzianum 2414 16.1 32

Trichoderma viride NP 3.7

Trichoderma roseum NP NP

О.е., C.s. = fungi isolated from O. europaea and C. siliqua leaves respectively,

NG= no growth, NP= microorganisms did not present enzyme activity.

Table III - Biomass dry weight of the isolated fungi cultured in medium B for 96h,

and their enzyme activity (tannase and F.P. cellulase).

Tableau III - Poids sec de biomasse des champignons isolés cultivés en milieu B pen-

dant 96h, et activités de leurs enzymes (tannase et P.F. cellulase).

Source : MNHN. Paris

FUNGI ISOLATED FROM “MAQUIS” 251

on leaves after emergence from buds. Thus, the presence of this microorgan-

ism on young leaves may be justified due to the fact that undifferentiated

tissues are more susceptible.

Fungal growth and enzyme activities

Table III shows the fungal growth in medium B and the tannase and

filter paper (F.P.) cellulase activities of the isolated fungi. The species, iso-

lated from young leaves of tannin rich shrubs (C. siliqua, Q. coccifera, P. len-

tiscus), presented the greater biomass production (75-136 mg/flasks), while

those isolated from O. europaea leaves or from some leaf samples of other

examined shrubs failed to grow or usually presented a much lower growth

(> 10mg/flask). However, the fungal species: Cladosporium cladosporioides,

Acremonium strictum, Coccomyces tentatus, Mucor mucedo, Paecilomyces var-

iotii, Coniothyrium quercinum, Colletotrichum gloeosporioides, Trichoderma har-

zianum, Aspergillus niger and A. flavus isolated from mature and fallen leaves

presented a noticeable biomass ranging between 15-45 mg/flask. Several

plant pathogen species, mainly those isolated from Q. coccifera, presented

higher than 15mg of dry biomass per flask. The fungi grown in medium B

might possess an enzyme system for degradation and utilization of the TPT

fraction. This tannin fraction did not favor the growth of isolated fungi

from leaves with poor TPT content. This is possibly due to the different ad-

aptation of the isolated fungi from leaves containing various concentrations

of TPT fraction. An increase of incubation time for all cultures did not

change the results. The chemical analysis of the TPT fraction may possibly

elucidate the way in which this tannin fraction is assimilated by the isolated

fungi.

The isolations from different leaf categories belonging to the same fun-

gal species presented similar growth and enzyme activity except the isolates

of Alternaria alternata and Aspergillus niger. This study revealed three strains

of A. alternata and two of A. niger. The strains of these fungal species iso-

lated from O. europaea leaves presented much lower values of the examined

parameters compared to those of the strains isolated from leaves of tannin

rich shrubs.

The tannase activity depended on the fungi species and the leaves whe-

re fungi were isolated from. The differences of tannase activity between fun-

gal species presented similar variations to those of the biomass growth. So,

fungal species produced high biomass growth showed high tannase activity.

A. carbonarius and P. glabrum presented the higher tannase values, 175.3 and

135.1 total units (x 107), respectively. The plant pathogen species P. oblonga

and T. caerulescens presented high tannase activity as well. It is noticeable

that fungi isolated from Q. coccifera leaves presented higher tannase activity.

This is possibly due to the fact that Q. coccifera leaves are richer in tannins

than those of other examined shrubs. Tannase activities higher than 20 total

units(x 10%) of some microfungi is in accordance with the tanninolytic ability

of fungi belonging to the same species isolated from carob bean (Marakis,

1980). The tannase activity [45 total units (x 10°)] of A. flavus is lower than

that reported by Yamada et al. (1968) for a strain of this fungal species.

Source : MNHN, Paris

252 S. MARAKIS and S. DIAMANTOGLOU

Twenty four fungal species, 60% of those isolated, presented cellulase

activity. All fungi isolated from fallen drying and decaying leaves showed

considerable cellulolytic activity. Trichoderma presented the higher values

(3.2-3.7 U.mI") of F.P. cellulase. This should be expected, because these fun-

gal species are considered to be among the cellulolytic microorganisms. In

preliminary experiments these fungi presented a low ligninolytic activity.

Thereafter, it is someway enigmatic that in spite of the considerable cellulo-

lytic activity of Trichoderma species their ability to degrade lignin is weak.

These species although can utilize a diverse range of substrates, T. viride

cannot grow in medium B. The saprophytes generally presented a higher cel-

lulase activity, but some plant pathogens (C. tentatus, C. quercinum, P. oblon-

ga and T. caerulescens) showed a noticeable cellulolytic activity (72 U.ml 1)

as well. These pathogens fungi presented a high tannase activity. A research

on the relationship between tannin-lignocellulolytic ability and pathogenicity

of these fungal species is useful to be undertaken.

CONCLUSION

The isolated fungal species generally presented an adaptation to their

environment. So, fungi isolated from leaves of tannin rich shrubs showed

higher tannase activity than that of the fungal species isolated from other

leaf categories examined. The smaller number of fungal species occurred on

the tannin rich leaves. This is perhaps due to the inhibitory effects that tan-

nins have on microbial growth.

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ASPECTS MÉTABOLIQUES DE LA FRUCTIFICATION

D'AGARICUS BISPORUS (LANGE) IMBACH

Valérie FORET

Laboratoire de Mycochimie - Institut de Chimie et

de Biologie Cellulaire et Moléculaire - Université.

Claude Bernard, 69622 Villeurbanne Cedex.

RÉSUMÉ - Les modalités de la fructification du champignon de couche Agaricus

bisporus (Lange) Imbach sont encore mal connues en dépit des nombreux articles

publiés sur le sujet. Cependant, un travail important a déjà été réalisé sur certains

aspects métaboliques de Іа fructification de cette espèce, dont la revue

bibliographique qui suit donne une synthèse. Après une analyse détaillée de la com-

position chimique du carpophore, les modifications biochimiques associées, d'une

part, au développement du carpophore et d'autre part, au cycle de fructification -

phénomène des volées - sont passées en revue, avec une attention plus particulière

envers les hydrates de carbone non structuraux (mannitol, tréhalose et glycogène) et

les métabolites azotés solubles (urée, acides aminés libres et composés affines) et non

solubles (protéines, chitine et acides nucléiques). Le rôle du métabolisme des

hydrates de carbone dans le déterminisme des volées est également considéré, à la

lumière de récentes découvertes.

ABSTRACT - The modalities of fruiting of the cultivated mushroom Agaricus bispo-

rus (Lange) Imbach are still unknown despite the numerous papers referring to them.

However, much work has already been done on some metabolic aspects of the fruit-

ing of this species of which the following bibliographic review gives a synthesis. Af-

ter a detailed analysis of the sporophore chemical composition, the biochemical

changes related on one hand to the fruitbody development and, on the other hand,

to the fruiting cycle - flushing - are reviewed with particular attention drawn to non-

structural carbohydrates (mannitol, trehalose and glycogen) and soluble- (urea, free

amino acids and related compounds) and non-soluble (proteins, chitin and nucleic

acids) nitrogen compounds. The role of carbohydrates metabolism in the determin-

ism of flushes is also considered in the light of recent discoveries.

MOTS CLES : Agaricus bisporus, revue bibliographique, fructification, carpophore,

biochimie, volée, hydrates de carbone non structuraux, metabolites azotés.

INTRODUCTION

Le champignon de couche Agaricus bisporus (Lange) Imbach a fait et

continue de faire l'objet de nombreux travaux scientifiques en raison de son

importance économique d'une part, et des modalités particuliéres de sa

fructification d'autre part. En effet, certains aspects de la biologie de ce

Source : MNHN. Paris

256 V. FORET

champignon ne sont pas complétement élucidés: on ne connait pas, par

exemple, la nature exacte des facteurs qui contrôlent l'initiation des

carpophores (fructifications); il en est de méme pour les facteurs gouvernant

le processus de fructification rythmée du champignon (phénoméne des

volées).

Les nombreuses recherches fondamentales menées dans cette voie

(Hayes & Nair, 1975; Elliott, 1985 a, b; Flegg & Wood, 1985; Gaze, 1985)

ont donné la preuve que l'on ne peut dissocier les différentes étapes de la

physiologie du champignon (fructification en particulier) des modifications

biochimiques, ou d'un point de vue gènéral, métaboliques, subies par celui-

ci.

Ainsi, une meilleure connaissance du métabolisme de la fructification

d'Agaricus bisporus a été acquise au cours des vingt derniéres années, dont

nous proposons la synthése dans la revue bibliographique qui suit.

COMPOSITION CHIMIQUE DU CARPOPHORE

1- Analyse sommaire

La composition chimique du champignon de couche fait régulièrement

l'objet de publications scientifiques pour deux raisons majeures:

- une connaissance approfondie de la valeur nutritive du champignon

s'avère nécessaire étant donné l'importance croissante de celui-ci dans l'ali-

mentation humaine,

- la composition chimique du champignon est difficile à évaluer à cau-

se de sa grande variabilité, due à des facteurs extrinsèques (composition du

substrat de croissance, méthode de culture, imprécision relative des

méthodes d'analyse...) et intrinsèques (caractères génétiques de la souche

utilisée, stade de développement et partie du carpophore considérés, phase

du cycle de récolte...).

Dans le carpophore d'Agaricus bisporus, la matière sèche ne représente

pondéralement que 10 % environ de la matière fraîche (Tab.l); elle est

constituée à près de 80 % de protéines s.l. et d'hydrates de carbone

(glucides); les lipides y sont en nette minorité.

La disparité des valeurs du taux de protéines entre les différentes publi-

cations refléte, dans une large mesure, le manque de précision des méthodes

de dosage usuelles. La conversion du taux d'azote total par un facteur de

6,25 donne, selon Hayes & Haddad (1976), une mauvaise estimation du taux

réel de protéines du champignon cultivé, pour deux raisons:

- les protéines brutes de l'Agaric, aprés purification, renfermeraient

moins de 16 % d'azote (11,79 % d’aprés Fitzpatrick et al., 1946),

- les composés azotés non protéiques (chitine principalement)

représentent une part non négligeable de l'azote total.

Source : MNHN, Paris

257

METABOLISME ET FRUCTIFICATION

*8h'8 X 0N) i!npoad a[ Jed anuaiqo jna[eA (a)

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(51404518 SDOINVSV) 38OHdONOdS 3Hl 40 NOIIISOdH02 38U3AV - I 31801

(SNYOdSIS SNITYVIV) JYOHAOdYYI NO 3NN3ADH ЗПОТЫТНО NOILISOdMO2 - I né318Vl

Source : MNHN. Paris

258

V. FORET

Ou bien l'on tient compte uniquement, comme Abou-Heilah et al.

(1987), du taux d'azote réel des protéines du champignon, et dans ce cas, le

facteur de conversion à utiliser devient 8,48 (— 100/11,79). Ou bien l'on

considère, comme Diem & Lentner (1970) et KreB (1986), que l'azote sous

forme de protéines représente 2/3 de l'azote total, et dans ce cas, le facteur

de conversion devient 4,17 (= 2/3 x 6,25).

L'étude comparative réalisée par Weaver et al. (1977), tendrait à prou-

ver que la méthode la plus fiable pour estimer le taux de protéines réel du

тана 1 - СООТ ООД DETAILLEE DU PONE. LASARICUS ISP

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+ еше ийме, пне, rhamnose,

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(ue et glucuroni quel

+ Trthalose Uusqu'à 20 D!

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A acides uiis Libres et apparentés

apritine, 322728

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+ кие (C8)

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* Stra et номе, бд з

+ шнш € dei d Баа

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+ Biycolipides, dont :

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Y Seres acttylés *

* Pogpolipites ent +

* Prosghatidyictaline (= Lécithioe)

1 Phsphatiy thao anne

| Prsphatiylstrine

Phosphatidyl inositol

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AAL, tge B Cl, Ory Ty My My Se

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J- Rochelle aL, 8

Tue e aL.

J flo À los, LES,

V iei at dl. 1986 b.

S Blow at al, 1986,

eode rena, I.

Te bye et dl. 1978.

+ Шон уш, НП.

+ Diea k Lentrer, 1970,

Y bis et al, I

Entre parenthèses : teneurs en pourcentage éu poids de matière sèche.

Ve Fil e al, 1982.

12- Goulston et alu 1975

Te ritin et al. , 1990,

Moe, i.

15- ament, 179 а.

Ie Нот а, 197,

Pashia et al., 1864,

кїн, 1971

I- Holta k Schisler, 1971,

Bh Mates, 182,

242 ages et al. 198.

2 lot,

2 Miss t a, Ы,

"e Kostelc k Hendry, 1881.

ears, i5

Be ritsit alae, 8.

т-м,

Lede k fast, 1878,

ui Das, 190.

Зе пен @ il. 188,

3i- N Connell t Esselen, 1907.

4 1976,

Уши

We Oa et a

T- Pyysalo,

а-о

He Van der Peer, 1387,

We Wao et al., 1580,

Мема at al. Л

Source : MNHN, Paris

MÉTABOLISME ET FRUCTIFICATION 259

champignon de couche, est celle basée sur le dosage des acides aminés

constitutifs des protéines (aprés hydrolyse chimique totale).

2- Analyse détaillée

Le tableau II donne la composition détaillée (mais cependant non ex-

haustive) des différentes fractions biochimiques du carpophore d’Agaricus

bisporus.

D'une façon générale, on retrouve chez A. bisporus la plupart des

composés typiquement fongiques; parmi ceux-ci, la chitine et son dérivé

désacétylé le chitosane, constituants de base de la paroi cellulaire des cham-

pignons (et représentants majeurs des fibres), le mannitol, le tréhalose et le

glycogène, glucides très largement répandus chez les champignons, l’ urée,

carbamide abondante chez de nombreux Basidiomyceétes, l^ ergostérol, stérol

localisé dans les membranes cellulaires et constituant la provitamine D»; il

faut citer également I’ octéne-1 ol-3, composé volatile responsable, pour

beaucoup, de l'odeur caractéristique de nombreux champignons - aussi

appelé "alcool de champignon".

TABLEAU III - COMPOSITION EN VITAMINES DU CARPOPHORE (AGARICUS BISPORUS)

ТАВЕЕ 111 - VITAMIN CONTENT OF THE SPOROPHORE (AGARICUS BISPORUS)

che)

VITAMINES HYDROSOLUBLES (en mg pour 100 g de partie consommable fr:

flavine thénate xine cobalamine bate

(B1) — (B2) (аў (BS) — (Bi (o (0 wo ву

Anderson & | 0,12 0,52

Fellers (1942)

Filios & Esse- | - 0,34-

è 3 $ - Q9 з,

len (1946) 0,35 :

Dies k Lentner | 0,10 0,44 — 2,100 0,05 - 0,05 5,00 0,018 2,20

(1970) |

Hayes & Hand | - - - 0,03- - - - -

(1981) 0,06

kowski et - - E £ t J

a1. (1986 b)

Kren 0,0 045 7,10 - = - 4,00 - 4,70

(1986)

Van der Meer | 0,10 0,44 2,16 = - 0,025 5400 0,016 5,20

(1987)

VITAMINES LIPOSOLUBLES (pour 100 g de partie consommable fraïche) |

(Van der Meer, 1987)

Vitanine À + 10 vg |

Vitamine D: 2 yg |

Vitamine E 0,078 pg |

Source : MNHN, Paris

260 V. FORET

Certains composés sont plus spécifiques du genre Agaricus voire de

l'espèce À. bisporus; il s'agit en général de métabolites secondaires: ce sont,

chez A. bisporus en particulier, Г agaritine ou y-glutamyl-4 hydro-

xyméthylphénylhydrazine et le GHB ou j-glutaminyl-4 hydroxybenzene, tous

deux dérivés de la voie du shikimate et assimilés à des acides aminés en rai-

son de la présence dans leur structure, d'un résidu d'acide glutamique

(Schütte et al., 1972; Stüssi & Rast, 1981).

La fraction minérale se caractérise par la prédominance du potassium et

du phosphore - les teneurs de ces éléments peuvent cependant varier

considérablement en fonction de la composition du substrat et de la souche

considérée (cf références du tableau). Certains éléments associés à la fonc-

tion de diverses enzymes sont présents en quantités non négligeables, en par-

ticulier le manganése, le magnésium, le fer, le cuivre et le zinc. Les métaux

lourds comme le mercure, le cadmium et le plomb, dont la toxicité chroni-

que pour le consommateur ne doit pas étre négligée, proviennent le plus

souvent d'une contamination du substrat par des pesticides (paille) ou des

médicaments vétérinaires (fumier de cheval).

Il faut signaler également la présence de vitamines indispensables dans

le métabolisme général du champignon... et celui du consommateur (Tab.

III). Parmi les plus abondantes, la vitamine C (acide ascorbique), la vitamine

PP ou B3 (niacine ou acide nicotinique), la vitamine B5 (acide

pantothénique), la vitamine B2 (riboflavine). Les vitamines liposolubles (A,

D, E) contrastent avec les vitamines hydrosolubles par leurs faibles teneurs

pondérales: ceci refléte sans doute la faible représentativité de la fraction

lipidique - quantitativement parlant - dans le carpophore d’ Agaricus bisporus.

MODIFICATIONS BIOCHIMIQUES LIÉES AU DÉVELOPPEME

DU CARPOPHORE

1- Cas des glucides non structuraux

Importance quantitative et principaux représentants

La part des glucides non structuraux - glucides ne participant pas à

l'édification des structures cellulaires telles que membranes, parois ete... - est

quasiment équivalente à celle des glucides structuraux (chitine et autres

polysaccharides) dans le carpophore d’Agaricus bisporus: elle représente en

moyenne 20 à 25 % du poids de matière sèche du carpophore.

Parmi les glucides non structuraux, quatre composés semblent jouer un

rôle prépondérant dans la croissance du carpophore: le glucose, le mannitol,

le tréhalose (dimére du glucose, liaison a-1,1) et un glucane soluble assimilé

à du glycogéne (résidus glucose polymérisés en a-1,4 avec des ramifications

en a-1,6).

Le mannitol, polyol le plus fréquemment rencontré dans les champi-

gnons (Lewis & Smith, 1967) est de loin le plus abondant des quatre

composés puisque sa teneur peut s'élever jusqu'à prés de 50 % du poids de

matière sèche du carpophore (Hammond & Nichols, 1976 a). Le tréhalose et

Source : MNHN, Paris

MÉTABOLISME ET FRUCTIFICATION 261

Figure 1 - Aspect des carpophores d' Agaricus bisporus aux stades morphogénétiques

définis par Hammond & Nichols (1976 a).

Figure 1 - Appearance of Agaricus bisporus sporophores at the morphogenetic stages

defined by Hammond & Nichols (1976 a).

le glycogène, également présents dans les levures et les spores de nombreux

champignons, représentent à eux-deux entre 5 et 10 % du poids de matière

sèche dans les carpophores de stade 2 (cf. Fig. 1) récoltés en milieu de volée

(Hammond & Nichols, 1979). Quant au glucose, sa teneur n'excéde pas |

% du poids de matiére séche dans le carpophore (Hammond & Nichols,

1976 a).

Répartition spatio-temporelle

La répartition tissulaire des hydrates de carbone solubles diffère d'un

composé à l'autre dans le carpophore en développement (Fig. 2). Le glucose

€t le mannitol s'accumulent principalement dans les parties stériles (stipe et

trame du piléus) tandis que le tréhalose et le glycogène sont uniformément

distribués dans le carpophore (Hammond & Nichols, 1976 a, b).

Si l’on écarte les valeurs extrêmes du taux de glycogène atteintes par les

jeunes carpophores récoltés à l'émergence d’une volée (jusqu’à 20 % du

poids de matière sèche, selon Hammond & Nichols, 1979), les teneurs

moyennes du polysaccharide passent de 2 - 4 % à 5 - 8 % du poids de

matière sèche entre le stade “bouton” et le stade "étalé^ (Hammond &

Nichols, 1976 b). Le glycogène est aussi présent dans le mycélium à des

concentrations voisines de celles des jeunes carpophores (environ 3,5 % du

Source : MNHN, Paris

% poids de matière sèche

262 V. FORET

MANNITOL TREHALOSE GLUCOSE

1,0

t k

30 Za È 0,5

Ë Е

20 e m $

e x 2

о 3 š

10 & =

NE *

КЕРЛЕРДИН ЕМ;

Y LY eg ee pan

Stade de développement Stade de développement Stade de développement

Légende : 4 Stipe ; m Chapeau ; @ Lamelles.

Figure 2 - Evolution du niveau des hydrates de carbone non structuraux au cours du

développement du carpophore (d'après Hammond & Nichols, 1976 a).

Figure 2 - Changes in non-structural carbohydrates content during the sporophore

development (from Hammond & Nichols, 1976 a).

poids de matiére séche); par ailleurs, il n'a pas été détecté dans les spores

(Lendenmann & Rast, 1978).

A l'inverse de celui du glycogéne, le taux du tréhalose chute dans le

carpophore, en début de croissance, et il semble que cette diminution soit la

poursuite d'un processus amorcé pendant la croissance végétative puisque les

teneurs maximales du disaccharide ont été enregistrées dans le mycélium au

moment du gobetage, soit plus de deux semaines avant l'apparition des pre-

miers carpophores. La répartition homogène du tréhalose entre mycélium et

carpophore suggère l'existence d'un processus de translocation du composé

dans le champignon (Hammond & Nichols, 1976 a).

En ce qui concerne le mannitol et le glucose, un net antagonisme sem-

ble exister entre les lamelles et les parties stériles du carpophore d'une part,

et, pour le mannitol seulement, entre le carpophore et le mycélium d'autre

part. En effet, tout au long du développement du carpophore, le niveau de

ces deux hydrates de carbone diminue dans les lamelles alors qu'il s'élève

dans le stipe et la trame du piléus; dans le mycélium, le mannitol reste à des

teneurs relativement basses (environ 3 % du poids de matière sèche) tant

pendant la croissance végétative que pendant la fructification (Hammond &

Nichols, 1976 a).

Rôle physiologique et métabolique

Deux observations ont permis d'établir un paralléle entre l'augmen-

tation de la teneur en mannitol dans le carpophore de A. bisporus en crois-

sance et l'augmentation d'activité de la voie des hexoses monophosphates

Source : MNHN, Paris

MÉTABOLISME ET FRUCTIFICATION 263

(voie des HMP) qui fournit le NADPH, cofacteur enzymatique nécessaire à

la synthèse du polyol (Ruffner et al., 1978):

* la participation de la voie des НМР dans l'oxydation du glucose de-

vient prédominante sur celle de la glycolyse pendant la croissance du

carpophore alors qu'elle est minoritaire pendant la croissance végétative (Le

Roux, 1967; Hammond, 1977),

* les lamelles, qui produisent moins de mannitol que le reste du

carpophore, montrent une activité plus faible de la voie des HMP que le

stipe et la trame du piléus (Le Roux, 1967; Hammond & Nichols, 1976 a).

Ces observations ont conduit à proposer des hypothéses intéressantes

quant au róle du mannitol dans le métabolisme de la fructification du

champignon de couche. En effet, on attribue généralement à la voie des

HMP, appelée aussi voie des pentoses phosphates, la fonction de produire

une réserve de NADPH, indispensable aux réactions de synthése réductrice

(lipogenése en particulier), ainsi que des pentoses activés, nécessaires à la

biosynthése des acides nucléiques.

S'il n'est pas surprenant, à premiére vue, qu'en phase de reproduction

sexuée, l'activité de la voie des HMP soit accrue dans le champignon - les

nombreuses divisions cellulaires de la sporogenése exigent la réplication de

l'ADN et l'élaboration de nouvelles membranes dont les constituants de

base sont des lipides - il est en revanche plus étonnant de constater, comme

l'ont fait Dütsch & Rast (1972) et plus tard Hammond (1985 a, b) que le ni-

veau de mannitol est corrélé de facon négative avec le rapport quantitatif

NADPH / NADPH + NADP appelé charge de réduction anabolique. Selon

l'hypothèse des auteurs, il pourrait exister une relation métabolique entre

Vactivité de la mannitol déshydrogénase, enzyme NADPH-dépendante

catalysant la synthése du polyol (Ruffner et al., 1978) et celle des deux

enzymes-clefs de la voie des HMP, la glucose-6-phosphate déshydrogénase et

la phosphogluconate déshydrogénase: dans les lamelles, oü les dépenses en

NADPH sont sans doute plus importantes que dans le reste du carpophore

(sporogenése), la baisse du rapport NADPH / NADPH + NADP entrai-

nerait une diminution de l'activité de la mannitol déshydrogénase d'oü la di-

minution du niveau de mannitol.

D'une facon plus générale, le mannitol, comme de nombreux polyols

acycliques végétaux, exercerait un contróle sur le métabolisme glucidique du

champignon (Lewis & Smith, 1967). Il reste cependant à établir la nature et

le rôle exacts de la relation métabolique entre la voie des HMP et la

synthèse du mannitol dans la fructification du champignon.

En ce qui concerne le rôle physiologique du mannitol, plusieurs auteurs

s'accordent pour attribuer au polyol une fonction osmorégulatrice dans les

hyphes du carpophore. En effet, Hammond & Nichols (1975) et Hammond

(1979 a) ont démontré que le mannitol, une fois synthétisé, n'est métabolisé

que dans des conditions "anormales^ de croissance ou dans des conditions

de survie, par exemple, aprés la récolte ou pendant la phase de sénescence

du carpophore. Dans les conditions habituelles de développement, le cham-

pignon ne semble pas utiliser le polyol comme substrat respiratoire ou de

Source : MNHN, Paris

264 V. FORET

croissance, car le turn-over du composé, dans le mycélium et le carpophore,

est trés lent. Les différences de concentration observées entre les différentes

parties du carpophore ne reléveraient que de variations de la vitesse de

synthése du composé.

Parallèlement à cette apparente inertie métabolique du mannitol,

Hammond & Nichols (1976 a) ont constaté que l'augmentation de la

concentration du polyol dans le carpophore est moins forte en proportion

du poids de matière fraîche qu'en proportion du poids de matière sèche: ceci

tendrait à prouver que le mannitol est maintenu à un niveau relativement

constant dans l'eau cellulaire grâce à un flux hydrique permanent en direc-

tion du carpophore. La haute concentration du mannitol dans les hyphes du

carpophore et plus particulièrement celles du stipe et de la trame du piléus

qui sont soumises à un allongement rapide, pourrait donc être une réponse

adaptative du champignon à l'important stress hydrique qu'il subit pendant

sa fructification, comme cela s'observe avec divers polyols chez les végétaux

chlorophylliens - algues notamment (Lewis & Smith, 1967).

Le tréhalose et le glycogène quant à eux, semblent avoir des fonctions

bien distinctes de celles du mannitol, à savoir celles de matériaux de crois-

sance.

Le tréhalose, dont la répartition tissulaire est quasi-homogène dans les

fructifications, serait synthétisé au niveau du mycélium et transporté - par

un mécanisme non encore élucidé - vers les carpophores en développement

où il constituerait une réserve de substrat hydrocarboné (glucose). La baisse

de la concentration du disaccharide observée dans le champignon dès la

phase d'induction de la fructification (ie. au gobetage) serait consécutive

non pas à un accroissement du catabolisme du composé mais plutót à une

diminution de sa vitesse de synthése; celle-ci pourrait s'effectuer, selon

Hammond & Nichols (1976 a), aux dépens de réserves glucidiques stockées

dans le mycélium.

Le glycogéne, dont les teneurs dans le mycélium et le carpophore sont

semblables, est probablement mobile, tout comme le tréhalose, à l'intérieur

du champignon (Hammond, 1979 b). Ce polysaccharide, bien que peu

étudié, pourrait participer, comme cela a été montré chez l'Agaric

Flammulina velutipes (Kitamoto & Gruen, 1976, cités par Manachère, 1988),

à la synthèse du tréhalose et du mannitol.

Nous verrons plus loin que les conditions qui gouvernent l'accumu-

lation et l'utilisation des trois composés semblent trés importantes dans le

contrôle endogène du phénomène des volées.

2- Cas des composés azotés

Aspects généraux

Le développement du carpophore implique un important prélèvement

d'azote de la part du mycélium, qui est réalisé en partie grâce à l’action des

diverses enzymes excrétées dans le compost par le champignon: comme de

nombreux Basidiomycétes, Agaricus bisporus est capable d'utiliser, via l'ac-

tion de diverses protéases extracellulaires, l'azote des protéines et des

Source : MNHN, Paris

MÉTABOLISME ET FRUCTIFICATION 265

TABLEAU IV - COMPARAISON DES TENEURS D'AZOTE TOTAL ET SOLUBLE DU CARPOPHORE A

DEUX STADES EXTREMES DE SON DEVELOPPEMENT (d'après les données numériques de

Konishi, 1967)

TABLE IV - COMPARISON OF THE TOTAL AND SOLUBLE NITROGEN CONTENT OF THE

SPOROPHORE AT TWO ENDS OF ITS DEVELOPMENT (numerical data from Konishi, 1967)

Carpophore de longueur | Carpophore de longueur

t= ns

Poids de matière sèche

(P.M. S.)

Azote total (Me)

Quantité | 24,9 ад ч

Concentration | 9.96 t PNS 7,08 X F.I.S.

Azote soluble (N.)

Quantité | 14,3 eg ag

Concentration | 4,52 1 PAKS. 2,66 % P.M.5.

Rapport (н.у) x 100 |

peptides liés à la fraction ligneuse des pailles, et également celui des

protéines microbiennes synthétisées pendant la phase de compostage

(Gerrits, 1969). Cependant, le champignon de couche peut aussi utiliser des

composés azotés solubles variés, tels les sels d'ammonium, l'urée ou encore

divers acides aminés (Casimir & Heinemann, 1953).

Entre le stade “bouton” (longueur L — 20 mm) et le stade sporulant

(longueur L = 118 mm), les taux d'azote total et soluble diminuent sensi-

blement (Tab. IV): la part pondérale des composés non azotés - hydrates de

carbone essentiellement - devient prépondérante sur celle des composés

azotés. Le rapport du poids d'azote soluble (azote sous forme non

polymérisée) au poids d'azote total diminue également, ce qui témoigne de

la synthése accrue de polyméres azotés tels que chitine, protéines, acides

nucléiques.. au cours de la maturation du carpophore. La part des

composés azotés solubles reste cependant importante, puisqu'en fin de crois-

sance, l'azote soluble représente encore plus de 30 % de l'azote total. Il est

possible, selon Latché (1970) que ces valeurs élevées du taux d'azote soluble

soient caractéristiques de la phase de fructification d'Agaricus bisporus, étant

donné que, dans le mycélium végétatif cultivé sur milieu synthétique, l'azote

soluble ne dépasse pas 20 à 30% de l'azote total.

Les taux d'azote soluble (exprimés en pourcentage du poids de “tissu”

sec) diminuent également dans les différentes parties du carpophore. Les

lamelles recueillent, jusqu'en fin de maturation, les taux les plus élevés, sui-

vies par la trame du piléus et le stipe (Fig. 3). L'évolution différentielle des

teneurs d'azote soluble à l'intérieur du carpophore, refléte, comme c'est le

cas avec les hydrates de carbone, des différences d’acti métabolique entre

parties fertiles (lamelles) et parties stériles (stipe et trame du piléus).

Source : MNHN, Paris

266 V. FORET

Lamelles 14

Matière sèche

^^ rame du

chapeau

matière sèche du carpi

Stipe

Есер

Azote soluble (% poids de "tissu" sec)

Hauteur du carpophore (mm)

Figure 3 - Evolution de la concentration pondérale d'azote soluble dans les

différentes parties du carpophore en développement (d'après les données

numériques de Konishi, 1967).

Figure 3 - Changes in soluble nitrogen concentration in different parts of the

developing sporophore (numerical data from Konishi, 1967).

L'étude des représentants majeurs des fractions azotées soluble et inso-

luble a permis de confirmer ces observations et d'apporter des précisions sur

le métabolisme azoté du carpophore.

Etude de la fraction azotée soluble

L'azote soluble est représenté en grande partie par des acides o-aminés

libres, opeptides et composés biochimiquement apparentés. Il faut y ajou-

ter l’ urée, produite en quantité relativement importante, ainsi que les bases

azotées, nucléosides et nucléotides libres divers, dont les teneurs, bien que

rarement évoquées dans la littérature, ne semblent pas négligeables (Kritskii

& Kulaev, 1963; Hashida et al.,1964; Nguyen et al., 1988).

a) Acides aminés libres et apparentés

* Représentativité dans la fraction azotée soluble:

L'azote des acides a-aminés libres représente environ 18 % de l'azote

total du carpophore (données de Maggioni et al, 1968, recalculées par

Manning, 1985) soit un peu plus de 40 % de l'azote soluble, si l'on admet

que cette dernière forme d'azote représente en moyenne 45 % de l'azote to-

tal - Latché (1970) donne des valeurs échelonnées entre 34 et 46 % selon la

volée considérée. La quantité d'azote total des carpophores ne représentant

en moyenne que 6 % du poids de matière sèche (cf Tab. I), les acides

a-aminés libres ne contribuent pondéralement qu'à 1,2 % de la matière

sèche.

Source : MNHN, Paris

MÉTABOLISME ET FRUCTIFICATION 267

Parmi les acides a-aminés libres détectés dans les carpophores de A.

bisporus, " acide glutamique, |’ acide aspartique, |’ a-alanine, |’ ornithine, |

arginine, la lysine, la proline et la sérine occupent une place importante. Les

sept acides aminés obtenus en retranchant l'arginine à la liste précédente,

représenteraient prés de 80 * de l'azote de l'ensemble des acides -aminés

libres, 20 à 25 % relevant uniquement de l' acide glutamique (Manning,

1985).

Les acides aminés tels que la thréonine, la valine, la leucine,

l'isoleucine, l'histidine, ainsi que les acides aminés soufrés (méthionine,

cystéine, cystine) et aromatiques (phénylalanine, tyrosine, tryptophane) sont

peu représentés dans la fraction azotée soluble comparativement aux

précédents (Latché, 1970).

Parmi les composés apparentés aux acides a-aminés (petits peptides in-

clus), certains ont été détectés dans le carpophore du champignon de couche

à l'état de traces, d'autres en quantités non négligeables, tels раг

exemple, 1’ agaritine et le GHB qui représentent à eux-deux près de | % du

poids de matière sèche.

La liste proposée ci-après (Tab. V) ne se veut ni définitive ni exhaus-

tive: d'une part, tous les composés azotés solubles sont loin d'avoir été

découverts, d'autre part, il est possible que la présence de certains composés

soit purement artéfactuelle; par exemple, la présence de L-canavanine

(rapportée par Altamura et al., 1967) a été contestée par Rosenthal & Davis

(1975).

* Variations quantitatives en fonction du stade de développement du

carpophore - Répartition spatiale:

Une étude détaillée a été effectuée par Latché (1970) dont il ressort les

résultats suivants:

- les teneurs en acides aminés libres sont élevées dans les jeunes carpophores

et augmentent nettement jusqu'à la formation des basidiospores; au moment

de la sporulation, on observe une chute marquée et générale de ces teneurs,

- les différentes parties du carpophore (stipe, trame du piléus et lamelles)

n'ont pas la méme composition en acides aminés libres: au stade I (poids

moyen du carpophore variant entre 2 et 3,5g, lamelles jaunâtres d'une

épaisseur de Imm environ), le stipe est plus riche en acides aminés basiques

(ornithine, arginine, lysine) que le piléus; dans celui-ci, les acides aminés li-

bres les plus représentés sont les acides aspartique et glutamique, l'alanine,

la valine, les leucines, les acides aminés soufrés et aromatiques; au stade I

(carpophores ayant atteint leur taille maximum, mais voile intact et

basidiospores pas encore formées), les différences entre stipe et piléus se

maintiennent en ce qui concerne la proline, l'arginine, la lysine, l'alanine, la

valine, les leucines et les acides aminés aromatiques; la glutamine et

lasparagine constituent avec l'urée la plus grande partie des substances

azotées solubles de la trame du piléus; l'hyménium, quant à lui, est riche en

proline, acides glutamique et aspartique, mais pauvre en acides aminés

basiques; au stade IIl (hyménium ayant achevé son développement,

sporulation ayant déja débuté), parallèlement à la baisse générale du niveau

des acides aminés libres, on constate que les proportions relatives des

Source : MNHN, Paris

268

TABLE V

V. FORET

TABLEAU V - ACIDES ANINES NON PROTEIQUES ET COMPOSES APPARENTES DETECTES

A L'ETAT LIBRE DANS LE CARPOPHORE (AGARICUS BISPORUS)

- FREE МОМ PROTEIC AMINO ACIDS &ND RELATED COMPOUNDS DETECTED IN THE

SPOROPHORE (AGARICUS BISPORUS)

sés présents en quantités

upérieures aux traces

N - acttylolucosaaine *

Allantoine *

Acide allantoique *

Agaritine (0,5 % P.M.S.*) #

Acide a-aninoadipique

Acide F-aminobutyrique (GABA) +.

Canavanine #

Carnosine »

Créatinine ©

Acide diaminobutyrique-2,4 »

Dihydrory-3,4 phenylalanine (DOPA) ©

Ethanolamine ©

r-Slutasinyl-& hydraxybenzéne (GHB) ©

r-Gluteminyl - dihydroxybenzéne-3,4 *

(DHE)

F-Slutamyl - éthanolaeine *

F-Glutanyl - glycine ?

F-Glutanyl - 5 - méthylcystéine ©

Honocystine ©

Honosérine o

Hyéroxylysine *

hydroxyproline ©

Kynurênine #

Méthionine-sulfone *

Néthionine-suLtotyde e«"

Phosphosérine ©

Saccharopine *

Sarcosine

Taurine ee

Acide urique *

+ P.M.S. = Poids de matière sèche

Références :

- Brunel, 1936.

- Hughes et al., 1958.

- Jadot et al., 1980.

Levenberg, 1961.

- Latché, 1963.

- Kissmeyer-Nielsen et al.,

1966.

nts à l'état de

près Latché (1970)

шга её а]. (1967)

Composts pr

traces d”

et/ou Ait

B-alanine =

Acide D-aninoisobutyrique «

Citrulline ven

Cystathionine =+#

Acide cystéique и.

Galactosamine *

Glucosasine ©

L - Lanthionine ©

meso - Lanthionine ©

Nethyl-1 bistidine ©

NMéthyl-3 histidine e

Phosphoéthanolasine © |

- Altaaura et al., 1967.

Latché, 1970.

= Szent-Gyorgyi et al., 1976.

- Oka et al., 1979.

= Oka et al., 1980.

Source : MNHN. Paris

MÉTABOLISME ET FRUCTIFICATION 269

différents acides aminés libres du stipe et de la trame du piléus tendent à

s'égaliser sauf en ce qui concerne la proline; dans les lamelles, l'acide

glutamique représente plus du tiers du total des acides aminés libres

détectés, l'acide aspartique et l'alanine étant également présents en quantités

notables.

Comme le suggére Latché (1970), les variations du niveau des acides

aminés libres enregistrées dans les différentes parties du carpophore rendent

compte, ou bien de changements métaboliques en rapport avec l'élaboration

des spores, ou bien de la modification des transferts de substances azotées

solubles entre mycélium et carpophore. Les parties stériles du carpophore -

stipe et trame du piléus - serviraient en quelque sorte d'organes" de réserve

et/ou d'intermédiaires entre le mycélium végétatif et l'hyménium en

développement. Les observations cytologiques de Vogel & Weaver (1972)

vont dans ce sens, car elles démontrent l'existence d'un processus de migra-

tion de matériel cellulaire - cytoplasme et mitochondries - vers les lamelles,

et ce, à partir du reste du carpophore.

Toutefois, il est possible, selon l'hypothèse de Konishi (1967), que ces

acides aminés libres, compte-tenu de leur faible teneur pondérale, ne partici-

pent pas directement à l'élaboration de constituants cellulaires, mais servent

d'activateurs dans certaines voies métaboliques voire d'intermédiaires dans la

synthèse d'éventuels facteurs de croissance, notamment le toujours

hypothétique (et non identifié) facteur d'allongement du stipe et d'expansion

du piléus. L'auteur a pu mettre en évidence un mouvement globalement as-

cendant des acides aminés libres dans le carpophore, qui pourrait étre

corrélé au mouvement descendant du facteur de croissance produit par les

lamelles.

L'acide glutamique, qui constitue un aliment azoté de choix, à la fois

pendant la croissance végétative du mycélium et le développement du

carpophore (Piquemal, 1970), semble occuper une place prépondérante dans

le métabolisme azoté du carpophore: cet acide aminé, qui est de loin le plus

abondant dans la fraction a-aminée libre et dans les protéines, est issu du

cycle de Krebs (Le Roux, 1966) et constitue le donneur préférentiel de grou-

pements -NH?2 dans les réactions de transamination conduisant à la synthèse

de nombreux acides aminés (Latché, 1970). Baldy (1975, 1976, 1977) a

démontré l'existence d'une dérivation du cycle de Krebs au niveau de l'acide

a-cétoglutarique, aboutissant à l'acide succinique par l'intermédiaire de l'aci-

de glutamique et de l'acide p- aminobutyrique; la fonction exacte de cette

dérivation n'est pas encore connue, mais il est possible, étant donné que cet-

te voie est plus active que les réactions conventionnelles du cycle de Krebs

entre l'a-cétoglutarate et le succinate, qu'elle soit utilisée dans la synthèse

des acides aminés.

b) Urée

La teneur en urée des carpophores du champignon de couche s'élève en

moyenne à 0,5 - 1 % du poids de matière sèche; d'après Iwanoff (1923), elle

ne cesserait d'augmenter au cours de la croissance, pour atteindre la valeur

de 6,18 % dans les carpophores mûrs de A. campestris (ici confondu avec A.

bisporus).

Source : MNHN, Paris

270 V. FORET

Les résultats d'Iwanoff ont été nuancés par Latché (1970): la concen-

tration en urée des carpophores resterait relativement stable au cours des

différents stades de croissance, la carbamide devenant, suite à la diminution

du niveau global des acides aminés libres, le composé azoté soluble

prépondérant dans les échantillons âgés. La carbamide, plus abondante dans

le piléus que dans le stipe des jeunes carpophores, tend à s'accumuler dans

les lamelles des carpophores mürs (Latché, 1970). Ce fait a également été

constaté par Moore (1984) chez Coprinus cinereus.

L'urée est un composé fréquemment rencontré chez les Basidiomycètes,

qui peut avoir pour origine, ou bien la dégradation aérobie des purines, is-

sues elles-mémes du catabolisme des acides nucléiques, ou bien le cycle de

Krebs - Henseleit ou cycle de l'ornithine, qui fonctionne chez les

Basidiomycétes de la méme facon que chez les animaux uréotéliques (i.e.

animaux excrétant l'azote sous forme d'urée). Chez 4. bisporus, il semble

que l'urée soit formée en majeure partie via le cycle de l'ornithine, car les

uréides glyoxyliques (allantoine et acide allantoique) sont produits en

quantités insignifiantes par rapport à la carbamide (Brunel, 1936; Reinbothe

& Tschiersch, 1962).

Le rôle physiologique de l'urée est encore mal connu chez les

Basidiomycètes, comme en témoignent les résultats parfois contradictoires de

différents auteurs.

Selon Iwanoff (dont les travaux de 1923 à 1927 sont résumés par

Foster, 1949), la formation d'urée dans les champignons, dépendrait d'un

excés de nutrition azotée intermédiaire et de l'absence ou d'un défaut

d'hydrates de carbone: l'urée ne s'accumulerait que dans les champignons

cultivés sur un milieu riche en azote et constituerait ainsi une réserve d'azo-

te, dans l'attente de conditions favorables pour son utilisation dans les pro-

cessus de croissance; les champignons cultivés sur milieu dépourvu de source

azotée ou seulement à base d'hydrates de carbone, ne produiraient pas

d'urée; la formation d'urée serait donc consécutive à un processus

d'autolyse.

Pour Reinbothe et al. (1967), l'urée, dans les carpophores de 4.

bisporus, serait un produit final du catabolisme et non une forme de substrat

azoté, comme cela semble être le cas chez Lycoperdon pyriforme; en effet,

dans les carpophores de ces deux espèces, l'existence de l'uréase - enzyme

catalysant l'hydrolyse de l'urée en gaz carbonique et en ammonium - a été

démontrée, mais en ce qui concerne À. bisporus, il n'a pas pu être prouvé

que l'azote de l'urée est réassimilé au cours de la synthèse protéique liée à la

sporogenése.

Une hypothése plus récente proposée par Moore (1984) suggére, chez

les Basidiomycètes ayant un cycle de l'urée fonctionnel, un contróle de la

morphogenése via l'activité de l'uréase: les faibles teneurs d'urée dans le stipe

de Coprinus cinereus seraient corrélées avec la forte activité de l'uréase dans

cette méme partie du champignon, la réciproque étant observée dans le

piléus. Selon l'auteur, l'activité accrue de l'uréase entrainerait la production

de gaz carbonique, composé connu pour son action positive sur la croissan-

ce du stipe chez 4. bisporus (Flegg & Wood, 1985). Par ailleurs, dans

Source : MNHN, Paris

MÉTABOLISME ET FRUCTIFICATION 271

l'hyménium de C. cinereus, la concentration d'urée (bien que plus élevée que

dans le reste du carpophore) reste pratiquement inchangée par rapport au

poids de tissu frais, ce qui pourrait signifier que l'urée y exerce une fonction

osmotique, à l'image de celle du mannitol dans les parties stériles du

carpophore de A. bisporus.

La confirmation d'une telle hypothése implique, selon Moore (1984), la

recherche des facteurs internes qui gouvernent l'amplification spécifique du

cycle de l'urée dans les piléus des carpophores en cours de croissance; cela

permettrait également de comprendre pourquoi l'urée a tendance à s'accu-

muler dans les carpophores de 4. bisporus aprés la cueillette (Hammond,

1979 a).

Etude de la fraction azotée insoluble

Parmi les composés de la fraction insoluble de l'azote (i.e. sous forme

polymérisée), les protéines sont sans doute ceux qui ont été les mieux étudiés

dans le carpophore de 4. bisporus. En effet, peu de données sont disponibles

en ce qui concerne le métabolisme des autres polymères azotés, chitine et

acides nucléiques principalement.

* Protéines:

Du point de vue qualitatif, la composition en acides aminés des

protéines du carpophore est trés voisine de celle de la fraction a-aminée li-

bre; elle peut varier selon la nature de la souche mycélienne (Weaver et al.,

1977; Bakowski et al, 1986 b) et/ou selon la nature des composés azotés

ajoutés au compost (Delmas & Poitou, 1965; Kissmeyer-Nielsen et al., 1966;

Kosson & Bakowski, 1984; Bakowski et al., 1986 a). Les acides aminés les

plus fréquents dans les protéines sont l'acide glutamique, l'acide aspartique,

l'a-alanine, la proline, la leucine et la lysine (Maggioni et al., 1968; Latché,

1970; Hayes &Haddad, 1976; Weaver et al., 1977). D'après Latché (1970), les

acides aminés tels que le glycocolle, la thréonine, la valine, la leucine,

l'isoleucine, l'histidine, la phénylalanine et la tyrosine, qui occupent une fai-

ble part des acides aminés libres, semblent occuper une place relativement

plus importante dans les protéines.

Du point de vue quantitatif, les protéines du carpophore renfermeraient

prés de 90 % de l'azote insoluble du carpophore - en utilisant l'acide

trichloracétique comme défécant (Latché, 1970); si l’on considère que ces

protéines représentent en moyenne 25 % du poids de matière sèche (en se

basant sur les données de Weaver et al., 1977) et qu'elles contiennent envi-

гоп 12 % d'azote (Fitzpatrick et al., 1946), alors l'azote qu'elles renferment

représenterait au total 3 % de la matière sèche du carpophore, soit 50 % de

l'azote total du carpophore (en se basant sur une teneur en azote total de 6

% du poids de matière sèche; cf. Tab. I).

Les protéines cytoplasmiques (dites “solubles” car on peut les extraire

par l'eau, contrairement aux protéines membranaires qui exigent le recours à

des détergents) ne sont pas uniformément réparties dans le carpophore: à

tous les stades de croissance, le piléus est plus riche en protéines solubles

que le stipe, et en fin de croissance (stade 7), les lamelles recueillent deux

fois plus de protéines que le stipe. Au cours du développement du

Source : MNHN, Paris

272 V. FORET

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Stade de développement

Figure 4 - Evolution du taux de protéines solubles dans les différentes parties du

carpophore en développement (d'aprés Hammond & Nichols, 1976 a).

Figure 4 - Changes in soluble protein content in different parts of the developing

sporophore (from Hammond & Nichols, 1976 a).

carpophore, le taux de protéines solubles (calculé par rapport au poids de

matiére séche) diminue dans le stipe et la trame du piléus, tandis qu'il aug-

mente dans les lamelles (Fig.4). Diverses explications à ces résultats peuvent

étre proposées:

- ou bien, comme l'ont suggéré Hammond & Nichols (1976 a), la bais-

se du taux de protéines solubles dans les parties stériles du carpophore

relève d'un processus de migration de matériel cellulaire en direction des

lamelles, confirmant par là-même les observations cytologiques de Vogel &

Weaver (1972) - déjà mentionnées plus haut,

- ou bien, cette diminution est provoquée par un phénomène de

protéolyse analogue à celui qui a été observé chez Flammulina velutipes

(Chao & Gruen, 1987).

Des variations d'activité protéolytique intracellulaire se produisent au

cours du développement du carpophore, chez А. bisporus, mais elles ne sont

pas corrélées de facon positive avec celles du taux de protéines solubles, pen-

dant les stades précoces de croissance: les résultats expérimentaux de Burton

(1988) montrent, en effet, qu'entre les stades 2 et 5, il y a simultanément, di-

minution du taux de protéines solubles et de l'activité des protéases

intracellulaires dans la cuticule et la trame du piléus. Pour Burton, la baisse

des teneurs en protéines solubles au cours du développement précoce (les

mesures étant exprimées par rapport au poids de matière fraîche et non de

matière sèche) serait due à un phénomène de dilution, consécutif à une ac-

cumulation d'eau dans les hyphes du carpophore.

Source : MNHN, Paris

MÉTABOLISME ET FRUCTIFICATION 273

Cependant, au cours des stades ultimes du développement du

carpophore (stades 5 à 7), un net accroissement de l'activité protéasique

intracellulaire a été observé (Wood, 1979; Burton, 1988), qui pourrait être,

selon Wood (1979), un moyen de diriger des peptides ou des acides aminés

vers des régions oü la synthése protéique est active, les lamelles en particu-

lier.

* Chitine:

La chitine, qui représente entre 0,5 et 0,6 % du poids de matière fraî-

che du carpophore chez À. bisporus (Manning, 1985), est le constituant struc-

tural de base de la paroi des hyphes et de celle des spores chez la plupart

des champignons; c'est un polymère non ramifié de la N - acétyl - D -

glucosamine, qui forme, avec son dérivé désacétylé, le chitosane (polymère

de la D - glucosamine), des microfibrilles dont le rôle de soutien est tou

fait comparable à celui de la cellulose, chez les végétaux chlorophylliens

(Crisan & Sands, 1978; Novaes-Ledieu & Mendoza, 1981).

Chez A. bisporus, la synthèse de chitine est catalysée par une enzyme

présente dans le mycélium et les carpophores, la chitine synthase (ou chitine

synthétase), dont les propriétés biochimiques sont très voisines de celles de

la chitine synthase des autres champignons (Craig et al., 1981; Hänseler et

al., 1983); la synthèse de chitine a lieu dans des vésicules cytoplasmiques

appelées chitosomes (Bartnicki-Garcia et al., 1978).

L'activité de la chitine synthase est étroitement liée aux processus de

croissance cellulaire, car l'application de Polyoxine D, inhibiteur de

lenzyme, bloque la croissance du mycélium et le développement du

carpophore (Wood & Hammond, 1977); par ailleurs, Craig et al. (1981) ont

constaté que la chitine synthase est plus active dans la région supérieure du

stipe - oü l'allongement cellulaire est maximal - que dans la région basale

du stipe.

* Acides nucléiques:

Les acides désoxyribonucléiques (ADN) et ribonucléiques (ARN)

représentent à eux-deux prés de 3 % du poids de matière sèche du

carpophore (Li & Chang, 1982); la teneur en ADN des noyaux est faible,

comparée à celle des autres Eucaryotes, ce qui est une caractéristique

générale des champignons (Arthur et al., 1982).

Il existe une évolution différentielle des teneurs en acides nucléiques

des différentes parties du carpophore en cours de croissance qui refléte,

comme c'est le cas avec les hydrates de carbone non structuraux ou les

protéines solubles, des différences d'activité métabolique: les teneurs en

ADN et ARN du stipe et de la trame du piléus ne montrent pas de chan-

gements majeurs, alors que celles des lamelles augmentent fortement au

cours du développement du carpophore; le taux d'ARN des lamelles

(exprimé en pourcentage du poids de “tissu” sec) augmente de façon conti-

nue entre les stades 1 (primordium) et 8 (sénescent), et leur taux d'ADN

double entre les stades 2 ("bouton") et 3 ("coupe fermée”), période qui pour-

rait correspondre à la méiose ou aux divisions post-méiotiques associées à la

sporogenèse (Minamide & Hammond, 1985). Il est à noter que ces obser-

Source : MNHN, Paris

274 V. FORET

vations ne concernent que les carpophores émergeant du compost en phase

(ie. pendant une méme volée). Dans les lamelles des carpophores émergeant

en dehors des volées, les taux d'acides nucléiques stagnent (ADN) voire di-

minuent (ARN), sans doute, d'aprés les auteurs, sous l'effet des variations

intervenant dans la disponibilité du substrat au cours du cycle de

fructification - épuisement du compost et compétition entre carpophores.

MODIFICATIONS BIOCHIMIQUES LIÉES AU PHÉN

DES VOLÉES

ТЕМ

1- Généralités

Le champignon de couche, comme plusieurs champignons supérieurs,

est caractérisé par une fructification périodique: au cours du cycle de récolte

- étalé sur 40 jours environ, à compter de l'apparition des premiers

carpophores - vont se succéder tous les 6-12 jours, 5 à 6 poussées successives

de carpophores appelées volées, d'une durée de 3 à 6 jours chacune. En

général, la deuxième volée (voire la troisième) est la plus productive, à la

fois en nombre et en poids de carpophores; ensuite, les rendements baissent

progressivement et la fructification cesse lorsque le substrat est

complètement épuisé (Fig. 5).

Les modifications de la qualité des champignons d'une volée à l'autre

sont un fait bien connu des producteurs: elles reflétent les changements

biochimiques qui se produisent dans les carpophores tant au niveau du

métabolisme azoté que carbone.

L'étude des modifications biochimiques en rapport avec le phénoméne

des volées présente un intérét particulier au plan fondamental; en effet, une

connaissance approfondie du métabolisme des carpophores s'impose si l'on

Rendement de carpophores (kg)

Jour de récolte

Figure 5 - Représentation d'un cycle de fructification d’Agaricus bisporus (d'après

Speroni et al., 1983). Chaque pic numéroté représente une volée.

Figure 5 - Example of a fruiting cycle of Agaricus bisporus (from Speroni et al.,

1983). Each numbered peak represents a flush.

Source : MNHN, Paris

MÉTABOLISME ET FRUCTIFICATION

veut élucider les facteurs internes et externes qui gouvernent le cycle de

fructification du champignon. Les recherches effectuées dans ce sens, notam-

ment par Hammond et ses collaborateurs, ont permis d'avancer certaines

hypothèses en ce qui concerne le déterminisme du rythme de fructification

d' Agaricus bisporus.

2- Influence des volées sur quelques constituants du carpophore

Cas des composés azotés

D'une façon générale, les carpophores issus des 2ème et 3ème volées

sont caractérisés par un optimum du taux d'azote total (Bakowski et al.,

1986 a); les teneurs élevées de ce taux relèvent à la fois d'une augmentation

du taux d'azote protéique (Kissmeyer-Nielsen et al., 1966; Latché, 1970;

Kosson & Bakowski, 1984) et du taux d'azote soluble (Latché, 1970). Latché

(1970) rapporte que le taux d'azote insoluble (i.e. précipitant dans l'acide

trichloracétique à 10 %) reste inférieur à celui d'azote soluble tout au long

du cycle de fructification, la différence tendant par ailleurs à s'accentuer en

fin de cycle.

Le niveau total des acides aminés des protéines subit des variations sen-

sibles d'une volée à l'autre, la 3éme volée étant généralement la plus riche

(Baldy et al., 1967; Latché, 1970).

Au plan qualitatif, la composition centésimale en acides aminés des

protéines reste relativement stable (Baldy et al., 1967; Maggioni et al., 1968;

Latché, 1970); cependant, certains auteurs ont noté une baisse du taux de

lysine (Maggioni et al, 1968; Bakowski et al., 1986 a) et une augmentation

du taux d’arginine (Hughes & Rhodes, 1959). Hughes et al. (1958) et

Paranjpe et al. (1978) ont remarqué une chute du taux de tyrosine en fin de

cycle de culture, contredisant en apparence les résultats de Kissmeyer-

Nielsen et al. (1966), Baldy et al. (1967) et Maggioni et al. (1968), qui rap-

portent une multiplication par un facteur 3 du taux de cet acide aminé entre

les lère et 3ème volées; selon Hughes et al. (1958), la plus forte teneur en

tyrosine des carpophores issus des volées précoces pourrait expliquer la plus

grande sensibilité de ceux-ci au brunissement après récolte: la tyrosine - bien

que cela soit remis en question par Rast et al. (1981) - est reconnue pour

être un des substrats naturels de la tyrosinase, enzyme produite par le cham-

pignon en phase de fructification (Turner, 1974), qui catalyse la synthèse des

pigments (mélanines) responsables du brunissement des couches externes - et

également des lamelles - dans les carpophores mûrs et les jeunes carpophores

fraîchement récoltés.

En ce qui concerne la fraction azotée soluble, on ne dispose de

données que sur les acides aminés libres, l'urée et les formes inorganiques

d'azote.

Comme c'est le cas pour la teneur en protéines, la teneur globale en

acides aminés libres atteint son optimum dans les carpophores de 3ème

volée. Latché (1970) a cependant constaté des variations très nettes des te-

neurs relatives de certains constituants de la fraction o-aminée libre:

Source : MNHN, Paris

276 V. FORET

- les taux d'acide aspartique et d'a-alanine sont optimums dans les

carpophores de 2éme volée,

- en 3ème volée, il y a accumulation de proline, d'arginine et, à un

moindre degré, de sérine, thréonine, y-aminobutyrate (GABA) et glycine,

- le taux de méthionine sulfoxyde est optimum en 4ème volée,

- les taux de lysine et d'ornithine diminuent au cours des volées succes-

sives - ce qui peut être mis en parallèle avec l'augmentation du taux

d’arginine, dont l'ornithine constitue le précurseur (cf le cycle de Krebs-

Henseleit),

- enfin, les amides libres, asparagine, glutamine et urée, sont en concen-

tration maximum dans les carpophores des 2ème et 4ème volées, où elles

représentent plus de 40 % de l'azote soluble.

L'acide glutamique, qui demeure le plus abondant de tous les acides

aminés libres dosés (Latché, 1970) dans les carpophores de lére et 3éme

volées, voit sa teneur relative baisser dans les carpophores de 3éme volée.

Les résultats obtenus par Latché (1970) concordent avec ceux de

Kissmeyer-Nielsen et al. (1966), Baldy et al. (1967) et Maggioni et al. (1968)

en ce qui concerne l'accumulation de proline (en 3éme volée) et d'urée (en

2éme volée), et également avec ceux de Hughes & Rhodes (1959) et Paranjpe

et al. (1978) en ce qui concerne la baisse des taux de tyrosine et de

phénylalanine dans les carpophores issus des derniéres volées.

Les taux de nitrates et de nitrites des carpophores - relativement bas

par rapport à ceux de certains végétaux (soit de l’ordre de 0,1 mg/100 р,

pour les nitrites, et 5 mg/100 g de matière fraîche pour les nitrates) - au-

raient tendance à augmenter en fin de cycle de fructification, selon Bakowski

et al. (1986 a).

Si l'on ne peut tirer de règle générale quant aux fluctuations du niveau

de certains composés azotés des carpophores au cours du cycle de

fructification, c'est sans doute parce qu'il existe une relation étroite entre la

composition du compost et celle des carpophores. En effet, la nature et la

concentration de la source azotée fournie au champignon peut avoir une in-

fluence notable, en particulier sur la composition de la fraction azotée solu-

ble. Delmas & Poitou (1965) rapportent que l'addition d'acide glutamique

au compost entraine une augmentation générale du niveau des acides aminés

libres du carpophore - acide glutamique compris -, tandis que l'addition

d'asparagine a les effets inverses. La supplémentation du compost avec des

mélanges complexes tels que la gélatine ou l'hydrolysat de caséine, entraine

des modifications dont les plus importantes portent sur les teneurs en acide

aspartique, acide glutamique, glycocolle, sérine, proline, histidine et urée

(Kissmeyer-Nielsen et al., 1966). La nature méme du compost joue un róle

important: à titre d'exemple, les carpophores poussés sur compost à base de

fumier de cheval ont des teneurs en nitrates et en nitrites deux fois plus fai-

bles que les carpophores de méme âge et de même souche poussés sur

compost à base de lisier de poulet (Bakowski et al., 1986 a).

Source : MNHN, Paris

MÉTABOLISME ET FRUCTIFICATION 271

Ainsi, comme le souligne Latché (1970), il existerait en fonction du

phénomène des volées, des variations, soit dans la perméabilité aux substan-

ces dissoutes, soit dans le déroulement de certains processus métaboliques.

L'activité des transaminases qui donnent naissance à un certain nombre

d'acides aminés, est accrue dans les volées oü ces mémes acides aminés sont

en plus forte concentration à l'état libre - en général; la 3ème volée: cela

pourrait expliquer, en grande partie, l'observation selon laquelle les acides

cétoniques qui servent de substrat aux transaminases (glyoxylate, pyruvate,

hydroxypyruvate, oxalacétate, a-cétoglutarate et phénylpyruvate), sont en

concentration plus faible dans les carpophores de 3ème volée que dans ceux

de lère et 2ème volées (Latché, 1970). L'accumulation de certains acides

aminés libres dans les carpophores, au cours du cycle de récolte, pourrait

donc être attribuée, au moins en partie, à une augmentation des processus

de biosynthèse - cas de l'arginine, qui est issue du cycle de l'ornithine, elle-

méme dérivant de l'acide glutamique. Pour d'autres acides aminés, tels la

proline, l'accumulation observée pourrait relever d'une élévation du taux

d'absorption du composé à partir du compost (Latchė, 1970).

Cas des hydrates de carbone solubles

Comme cela a été observé avec certains métabolites azotés, les modifi-

cations du niveau de certains hydrates de carbone solubies du carpophore en

rapport avec le phénoméne des volées, dépendent plus ou moins de la nature

du compost. Le taux de tréhalose augmente fortement entre la lére et la

6ème volée dans les carpophores cultivés sur compost à base de fumier de

cheval, tandis qu'il fluctue de façon irrégulière dans les carpophores formés

sur compost à base de fumier de plumes de poule grillées; le taux de

glucose, qui reste quasiment constant au cours du cycle de récolte, dans les

carpophores développés sur fumier de cheval, fluctue entre les différentes

volées (en marquant un maximum dans les carpophores des 2ème et Sème

volées), sur fumier de plumes de poule; quant au mannitol, il a tendance à

s'accumuler en plus forte concentration dans les carpophores des Séme et

6ème volées, et ce, quelle que soit la nature du compost (Bakowski et al.,

1986 c).

3- Róle du métabolisme hydrocarboné dans le déterminisme des volées

Si l'on cerne mieux aujourd'hui la nature des facteurs qui déterminent

le processus des volées chez Agaricus bisporus, c'est en grande partie gráce

aux progrès considérables réalisés dans la connaissance du métabolisme des

hydrates de carbone du champignon.

Une voie de recherche a été ouverte par Parrish et al. (1976), qui ont

démontré l'existence d'une relation directe entre la teneur en mannitol des

carpophores récoltés pendant une volée et le rendement de la volée. Les

résultats, obtenus avec d'autres composés par différents auteurs, permettent

à présent d'avoir une représentation éloquente des événements métaboliques

en rapport avec le phénomene des volées (Fig. 6):

- avant le départ de la volée, il y a accumulation de tréhalose et de

glycogène dans les initiales de carpophores encore à l'état dormant

Source : MNHN, Paris

278 V. FORET

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Temps (jours)

(а) e) mannitol

(b) (e) tréhalose et (A) glycogène

Figure 6 - Evolution, au cours d'un cycle de récolte, des teneurs en mannitol (a),

tréhalose et glycogéne (b) dans des carpophores de stade 2 issus d'un méme

plateau de compost (d'après Hammond & Nichols, 1979).

Figure 6 - Changes, during a cropping cycle, in mannitol (a), trehalose and glycogen

(b) content in sporophores from stage 2 grown on the same tray of compost

(from Hammond & Nichols, 1979).

(Hammond & Nichols, 1979) et parallélement, on observe une activité mini-

male de la glycogene phosphorylase et de la tréhalase (Hammond, 1986;

Wells et al., 1987); il semble que les niveaux cumulés des deux hydrates de

carbone déterminent le rendement de la volée à venir; par ailleurs, à ce sta-

de, le mannitol est à son niveau minimum,

- pendant la croissance de la volée, on observe un affaiblissement des te-

neurs en tréhalose et en glycogène, sans doute en réponse aux besoins

énergétiques accrus des carpophores (Hammond & Nichols, 1979): les

activités de la tréhalase et de la glycogéne phosphorylase sont alors maxi-

males (Hammond, 1986; Wells et al., 1987); l'accumulation de mannitol dans

les carpophores s'accompagne d'une élévation de la teneur en eau de ceux-ci,

d'où l'accroissement considérable de la biomasse (Hammond & Nichols,

1979),

- aprés la récolte de la volée, la demande en hydrates de carbone est

considérablement réduite, et il faut alors attendre un certain laps de temps

avant l'émergence de la volée suivante (durée d'une inter-volée) pour que les

niveaux des hydrates de carbone retournent à leurs valeurs initiales

(Hammond & Nichols, 1979).

Source : MNHN, Paris

MÉTABOLISME ET FRUCTIFICATION 279

Parallélement à ces observations, il a été constaté un changement dans

l'équilibre des voies d'oxydation des hexoses au cours du cycle de

fructification: Hammond (1981, 1986) rapporte en effet, que l'activité de la

glucose-6-phosphate déshydrogénase, enzyme-clef de la voie des hexoses

monophosphates (HMP), est 20 fois plus élevée dans les carpophores de sta-

de 2 récoltés en début de volée, que dans ceux récoltés au méme stade en

milieu de volée; l'augmentation d'activité des enzymes de la voie des HMP,

permettant la production de NADP réduit, donc la synthése du mannitol

(activité de la mannitol déshydrogénase), assurerait ainsi le démarrage de la

volée.

Chanter (1979) a proposé un modèle mathématique rendant compte des

événements métaboliques survenant au cours du cycle de fructification: l’au-

teur suggère qu'un substrat hypothétique est absorbé et accumulé par le

mycélium jusqu'à ce qu'un certain niveau-seuil soit atteint et permette l'ini-

tiation des carpophores; la croissance de la volée entrainerait alors une dimi-

nution des réserves de substrat intramycélien en-dessous du niveau-seuil, em-

péchant ainsi l'émergence d'une nouvelle volée; aprés la récolte, le substrat

en question pourrait à nouveau s'accumuler et initier une nouvelle volée.

Le tréhalose et le glycogéne paraissent se comporter comme le substrat

hypothétique de Chanter, si l'on s’en tient aux seuls résultats de Hammond

& Nichols (1979). Cependant, les résultats plus récents de Claydon et al.

(1988) semblent indiquer qu'on a affaire à un modéle plus complexe. En ef-

fet, il est quasiment prouvé que le glycogéne et le tréhalose sont synthétisés

par le champignon à partir des sucres relargués dans le compost via l'activité

de certaines hydrolases extracellulaires, notamment celle de l'endocellulase -

enzyme catalysant l'hydrolyse en glucose des constituants cellulosiques du

compost. Or, contrairement à l'hypothèse de Chanter, les résultats

expérimentaux de Claydon et al. démontrent que:

- le prélèvement d’hydrates de carbone par le champignon ne semble

pas être un processus à vitesse constante: à chaque volée, correspond un pic

d'activité de l'endocellulase, l'activité de l'enzyme étant par ailleurs direc-

tement proportionnelle à la biomasse produite,

- il semble qu'il n'y ait pas de gros changements de la biomasse

mycélienne dans le compost, donc des réserves en substrat intramycélien, au

moment de la fructification - comme cela a été montré chez Flammulina

velutipes - puisqu'à ce stade, le mycélium est en limitation de croissance.

Ainsi, comme le suggèrent Claydon et al., l'activité des enzymes assu-

rant l'apport carboné vers le mycélium, serait régulée par la biomasse des

carpophores; ce mécanisme permettrait d'établir un équilibre entre les

dépenses d'hydrates de carbone pendant la construction des carpophores et

les apports via l'activité des hydrolases extracellulaires.

Si la preuve est donnée que le champignon de couche, comme d'autres

Basidiomycétes saprophytes, peut réguler l'activité de certaines enzymes

extracellulaires pendant la morphogenése des carpophores, la nature exacte

de la régulation reste, en revanche, à déterminer. En ce qui concerne

Vacti de l'endocellulase extracellulaire d’ Agaricus bisporus, il est possible,

Source : MNHN. Paris

280 V. FORET

comme le suggére Wood (1985) - faisant référence aux travaux de Hammond

- que la régulation soit exercée par les niveaux intramycéliens d'hydrates de

carbone solubles tels que ceux du glucose ou du tréhalose; les changements

de concentration en sucres dans le mycélium, dus à l'exportation de ceux-ci

vers les carpophores en développement, pourraient constituer un mécanisme

de contrôle de la production. de l'enzyme: en effet, l'endocellulase de 4.

bisporus appartient au type de cellulases fongiques induites par la cellulose

(substrat) et à répression catabolique (Manning & Wood, 1983).

L'activité de la laccase - phénoloxydase majeure excrétée dans le

t par le mycélium - suit le modele inverse de celui de l'endocellulase:

de l'enzyme augmente jusqu'à l'émergence de la premiére volée de

carpophores puis diminue ensuite rapidement (Turner, 1974; Wood &

Goodenough, 1977). La perte d'activité de la laccase, due semble-t-il, à une

inactivation suivie par une dégradation, pourrait correspondre à une

réassimilation des acides aminés de la protéine par le champignon, étant

donné que celle-ci représente 2 % des protéines mycéliennes, soit 0,7 % de

la biomasse fongique (Wood, 1980 a, b); selon une autre hypothèse - ne

contredisant pas forcément la précédente -, l'inactivation de la laccase au

moment de la fructification permettrait de lever l'inhibition exercée

éventuellement sur le développement des carpophores par certains produits

de l'acti enzymatique, incluant des quinones - d'où un rôle possible de la

laccase dans l'induction de la fructification.

En conclusion, le modèle développé par Chanter (1979) a ouvert de

nouvelles perspectives de recherche dans l'étude des facteurs contrólant le

phénomène des volées. Il est aujourd'hui admis qu'une régulation de la

biomasse des carpophores s'opère via les réserves de substrat stockées dans le

mycélium - hydrates de carbone solubles essentiellement. Cependant, le

modèle n'explique pas le caractère endogène du rythme de fructification du

champignon; il a en effet été constaté qu'en l'absence de cueillette, la pro-

duction de carpophores conserve sa périodicité, les volées étant toutefois trés

espacées dans le temps et la biomasse (en nombre de carpophores)

considérablement réduite; la cueillette des carpophores résulte en une

accélération du rythme de fructification, accompagnée d'une augmentation

du rendement des volées, l'accélération étant d'autant plus grande que le sta-

de de maturité des carpophores à la récolte est plus précoce (Cooke &

Flegg, 1965). L'hypothèse selon laquelle une (ou plusieurs) substance(s)

inhibitrice(s) serai(en)t émise(s) par les spores des champignons ou le

mycélium dans le compost (Cooke & Flegg, 1965) reste tout-a-fait plausible

- bien qu'elle n'ait pas été confirmée à ce jour -, et elle ne contredit pas celle

d'une régulation ultime de la croissance des volées par les niveaux endogènes

d'hydrates de carbone solubles.

CONCLUSION

Grâce à l'amélioration considérable des techniques d'observation et

d'analyse, on est en mesure aujourd'hui, de prédire les grands changements

de la composition biochimique des carpophores d'Agaricus bisporus lies aux

processus de croissance et au phénomène des volées.

Source : MNHN, Paris

MÉTABOLISME ET FRUCTIFICATION 281

Cependant, certaines questions fondamentales restent encore sans

réponse, sans doute, dans une large mesure, à cause des difficultés techni-

ques rencontrées dans la maîtrise de la fructification du champignon in vitro

(ie. sur milieu axénique, défini). Une fois ce problème résolu, on pourra

explorer de façon plus approfondie et surtout plus rationnelle, les interac-

tions champignon - substrat, et ainsi mieux comprendre les mécanismes phy-

siologiques et métaboliques de la reproduction sexuée du champignon.

Ces recherches doivent naturellement trouver des applications prati-

ques: amélioration de la valeur nutritive et gustative des champignons,

contrôle du phénomène de brunissement après récolte ou, pourquoi pas,

production de substances d'intérêt pharmaceutique, phytosanitaire ou autre...

Une chose est sûre néanmoins: les progrès dans la gestion du rendement et

de la qualité des récoltes, ne pourront se faire sans l'appui d’une solide

connaissance fondamentale de la biologie, et plus précisément, de la biochi-

mie du champignon.

REMERCIEMENTS

J'adresse tous mes remerciements au Professeur Noël ARPIN, Directeur du

Laboratoire, qui m'a suggéré l'idée de cette publication et qui a accepté de critiquer,

de facon constructive, mon manuscrit.

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Source : MNHN, Paris

Source : MNHN. Paris

Cryptogamie, Mycol. 1990, 11 (4): 289-312 289

ÉTUDE CRITIQUE ET VALIDATION

DES ESPECES NOUVELLES D'HYMENOCHAETE

DECRITES PAR G.A. ESCOBAR

J.C. LÉGER

Laboratoire de Mycologie, Université Claude

Bernard - Lyon I, Bât. 405, 43 bd du 11 novembre

1918. F-69622 Villeurbanne Cedex.

RÉSUMÉ - Etude critique et validation des dix espèces nouvelles d'Hymenochaete

décrites en 1978 par Escobar mais non publiées validement (nom. inval.); parmi ces

espèces Hymenochaete dendroidea, nom. illegit. est appelée H. escobarii nov. sp. et

Hymenochaete weldenii est synonymisée avec H. anomala Burt. Deux sections

proposées par Escobar sont validées, une est amendée; une section nommée

Paragymnochaete nov. sect. est proposée.

ABSTRACT - The ten new species of Hymenochaete described by Escobar in 1978

without a valid publication (nom. inval.) are critically studied and validated.

Among these species Hymenochaete dendroidea, nom illegit. is named H.escobarit

nov. sp. and H. weldenii is placed in synonymy with H. anomala Burt. Two sections

proposed by Escobar in the genus are validated, one is emended. A new section

named Paragymnochaete is proposed.

MOTS CLÉS : Hymenochaete, systématique.

Dans le cadre d'une révision mondiale des espéces du genre

Hymenochaete, l'auteur a pu étudier les espéces nouvelles décrites par G.A.

Escobar dans un mémoire de Thèse soutenue devant l'Université de

Washington (Etats-Unis) en 1978 et intitulé “Contributions towards a

monograph of the neotropical species of Hymenochaete”; malheureusement

ces especes, ainsi que les trois sections proposées dans le genre, ne sont pas

considérées comme valides selon les critéres du Code international de'no-

menclature botanique puisque ces résultats n'ont pas été publiés. Le présent

travail a donc un double objectif: permettre la validation des espéces et sec-

tions décrites par Escobar et d'autre part présenter une étude personnelle de

ces espèces comprenant pour chacune une description et une discussion.

Source : MNHN, Paris

290 J.C. LÉGER

ИЙТ iy

a TR

AVINA

VI SECTION

contexte HYMENOCHAETE

cortex

couche

sétigère SECTION

FULTOCHAETE

contexte == â =

couche SECTION

sétigère GYMNOCHAETE

PLN couche SECTION

sétigere

PARAGYMNOCHAETE

lcortex

Fig. 1 - Représentation schématique de la structure des sections proposées dans le

genre Hymenochaete.

Fig. 1 - Schematic representation of the structure of the sections proposed in the

penus Hymenochaete.

Source : MNHN, Paris

VALIDATION D'ESPÉCES D'HYMENOCHAETE 291

LES SECTIONS DANS LE GENRE HYMENOCHAETE

C'est à Burt (1918) que revient le mérite d'avoir indiqué l'importance

de la structure du basidiome dans l'étude des espéces du genre Hymenochaete

et d'avoir utilisé l'anatomie pour les distinguer. Burt a défini ainsi un

"degree of differentiation" de la structure: dans le cas le plus simple, la

fructification présente des spinules (ou soies ou setae) réparties dans toute

l'épaisseur du basidiome depuis la base jusqu'à l'hyménium; le basidiome est

donc réduit à une couche sétigère; à un niveau supérieur de différenciation,

la couche sétigère repose sur une couche dépourvue de spinules (“hyphal

layer” de Burt); enfin dans l'état le plus complexe d'organisation, la couche

hyphale est elle-même différenciée en une couche intermédiaire et une zone

plus dense et plus sombre (qui sera nommée ultérieurement cortex ou

cuticule). Les espèces étudiées par Burt (37 dont 10 nouvelles) se trouvent

ainsi réparties en 3 groupes suivant l'organisation de leur structure interne.

G.H. Cunningham (1957) reprend le découpage de Burt en créant des

sections qu'il désigne par I, II et III.

Escobar (1978) propose d'établir de facon formelle ces sections en leur

donnant un nom:

sect. Gymnochaete pour les espéces présentant une couche sétigére reposant

directement sur le support (que ces espéces aient ou non un cortex).

sect. Fultochaete pour les espéces sans cortex dont la couche sétigère est

portée par une couche hyphale dépourvue de spinules (Escobar nomme

contexte cette couche sans spinules).

sect. Hymenochaete pour les espéces pourvues d'une couche sétigére repo-

sant sur un contexte et montrant un cortex.

Ces sections n'ayant pas été publiées validement sont reconnues et

décrites ici. L'une d'entre elles, la section Gymmochaete est amendée et cet

amendement entraîne la création d'une section nouvelle nommée

Paragymnochaete. Une représentation schématique des structures de chacune

des 4 sections que nous proposons est donnée Fig. 1.

HYMENOCHAETE Lévy. sect. Hymenochaete:

Cortex (— cuticule) présent formé d'hyphes trés serrées, souvent

Cimentées, trés généralement sombres. Couche sétigère reposant sur un

contexte (= couche d’hyphes dépourvue de spinules).

Type: Hymenochaete rubiginosa (Dicks.: Fr.) Lév. (Léveillé, 1846).

Basionyme: Helvella rubiginosa Dicks.

HYMENOCHAETE Lév. sect. Fultochaete Escobar ex Léger:

Contexto praesenti; strato setoso super contexto insidenti; cuticula

absenti. Typus: Hymenochaete damaecornis (Link ex Fries) Léveillé.

Basionyme: Stereum damaecorne Link. (Escobar, 1978: 20).

Contexte présent; couche sétigére reposant sur un contexte; cuticule (—

Cortex) absente.

Nous acceptons cette section sans modification.

Source : MNHN, Paris

292 J.C. LÉGER

HYMENOCHAETE Lév. sect Gymnochaete Escobar ex Léger emend.

Stratum setosum super substrato insidens; contextus et cortex (=

cuticula) absentes.

Typus: Hymenochaete corrugata (Fr.) Lév. (Léveillé, 1846).

Basionyme: Thelephora corrugata Fr.

Couche sétigére reposant sur le substrat; contexte et cortex (— cuticule) ab-

sents.

De la section créée par Escobar nous excluons les espéces possédant un

Cortex pour lesquelles est proposée la section Paragymnochaete.

HYMENOCHAETE Lév. sect. Paragymnochaete nov. sect.:

Stratum setosum super substrato insidens; contextus absens; cortex (=

cuticula) praesens.

Typus: Hymenochaete sphaerospora Lég. et Lanq. (Léger & Lanquetin, 1987).

Couche sétigère reposant sur le substrat; contexte absent; cortex ( —cuticule)

présent.

ÉTUDE DES ESPÈCES NOUVELLES D'HYMENOCHAETE

DÉCRITES PAR ESCOBAR

Note: dans nos descriptions personnelles, le terme contexte désigne une

couche hyphale dépourvue de spinules et le terme trame désigne l’ensemble

des parties du basidiome visibles sur une coupe transversale, à l'exception de

l'hyménium. Nous suivons donc la terminologie utilisée par Escobar.

Hymenochaete aberrans Escobar ex Léger

Hymenochaete aberrans Escobar, Contr. Hymenoch.: 29, Fig. 1, 2, 1978, nom.

inval.

Holotype: Brazil, B.V. Skvortzov 301 (WTU).

- Diagnose:

"Basidiocarpo resupinato, velutino vel cereo, in sicco Brunneo-aurantiaco (6C4 )

vel "Cognac" (6E7); hymenio laevi; margine gradatim. decrescenti. Trama

40-90ит crassa; ex hyphis intertextis 3-4ит crassis; cuticula absenti. Strato

setoso super substrato insidenti, 75-I80um crasso, ex setis numerosis dispersis

constanti; setis lanceolatis, nudis vel in parte vaginatis, 75-130 x 7,5-1lum,

usque ad 90um eminentibus. Hymenio ex basidiis et basidiolis constanti; basidiis

subcylindricis vel clavatis, tetrasporis, 12-17 x 4-5um; sporis brevi-ellipticis,

5-6,5 х 3-3,5um. Holotypus B.V. Skvortzov 301 im herbario Universitatis

Washingtonii conservatus.” (Escobar, 1978). у

- Etymologie: l'adjectif aberrans (aberrant, qui sort de la norme) a vrai-

semblablement été choisi pour souligner le contraste entre le basidiome min-

ce et les spinules trés grandes.

- Description personnelle (Fig. 2):

Basidiome résupiné, adhérent, lisse, trés mince (40-75um), brun pále

légèrement orangé à cannelle terne (7,5 YR 6/6 du Code Munsell), à marge

amincie, concolore.

Source : MNHN, Paris

VALIDATION D'ESPÉCES D'HYMENOCHAETE 293

Fig. 2 - Hymenochaete aberrans Esc. ex Lég. (paratype, Escobar 5134). Coupe trans-

versale dans le basidiome.

Fig. 2 - Hymenochaete aberrans Esc. ex Lég. (paratype, Escobar 5134). Transverse

section through the basidiocarp.

Trame monomitique formée d'hyphes brun-jaune clair x 4-4,5-(5)um,

ramifiées et septées, enchevétrées en tous sens, à paroi légèrement épaissie et

dont les ramifications verticales de méme diamétre mais à paroi mince

constituent l'hyménium. Ni contexte, ni cortex, ni tomentum. Spinules

lancéolées, élancées, aigués, assez nombreuses, dispersées dans toute la hau-

teur du basidiome depuis la base, 80-120 x 7,5-Jum, assez souvent septées de

1-3 cloisons minces, nues ou entourées de quelques hyphes hyalines grêles (x

1-1,5um), dépassant l'hyménium de 9Oum maximum.

Hyménium formé de basidioles et de basides légèrement clavées, 12-18 x

4-5um, à 4 stérigmates de 3-4um.

Spores elliptiques, hyalines, 4 paroi mince, non amyloide, 5-6 x 2,5-3,2um.

- Spécimens examinés: les deux seules récoltes citées par Escobar,

"Н. aberrans Escobar, nov. sp. Brazil: Parque do Estado, Instituto de

Botanica, Estado de Sao Paulo, 1970, B.V. Skvortzov 301. Holotype.”

(WTU).

“H. aberrans Escobar, nov. sp. El Salvador: Finca Las Piletas, Ikm NW of

Santa Ana, Dpto. de Santa Ana, 27 july 1973, G.A. Escobar 5134.

Paratype.” (NY).

A noter que l'holotype est de trés petite taille tandis que le paratype est un

très beau spécimen mais dont la base est localement envahi par des

Dématiacées.

- Répartition géographique: Brésil, Salvador.

Source : MNHN, Paris

294 J.C. LÉGER

- Discussion: Hymenochaete aberrans Esc. ex Lég.

- appartient à la section Gymnochaete Esc. ex Lég. emend.

- est bien caractérisé par les longues spinules élancées, trés exsertes, associées

à un basidiome trés mince.

- présente une ressemblance certaine avec Hymenochaete innexa G.H. Cunn.

(à spinules plus courtes, 55-80ит et n'émergeant que de 65um au plus) et

surtout avec Hymenochaete hauerslevii Léger, espéce immédiatement recon-

naissable cependant à ses pseudoacanthophyses hyméniennes.

Hymenochaete alabastrina Escobar ex Léger

Hymenochaete alabastrina Escobar, Contr. Hymenoch.: 33, Fig. 3, 4, 1978,

nom. inval.

Holotype: Brazil, B.V. Skvortzov 85 (WTU).

= Hymenochaete ceratophora Job, Revista Invest. Agropecu., Ser. 5, Patol.

Veg. 9 (20): 146, 1985.

- Diagnose:

"Basidiocarpo resupinato, cereo, in sicco aurantiaco-cinereo (5B2); hymenio

laevi vel tuberculato; margine gradatim decrescenti. Trama 25-75um crassa; ex

hyphis intertextis 1-2,5um crassis; cuticula absenti. Strato setoso super substrato

insidenti in basidiocarpis normalibus, 55-140um crasso, ex setis ordinate

dispositis stratum singulare fascientes; setis lanceolatis, midis vel vaginatis, 50-90

x 5,5-9um, usque ad 60um eminentibus. Hymenio ex basidiis et basidiolis

constanti; basidiis clavatis, tetrasporis, 10-14 x 4-4,5um; sporis brevi-ellipticis

vel suballantoideis, 4-5,5 x 2-2,5um. Holotypus B.V. Skvortzov 85 in herbario

Universitatis Washingtonii conservatus.” (Escobar, 1978).

- Etymologie: alabaster = couleur d'albâtre.

- Description personnelle (Fig. 3):

Basidiome résupiné, adhérent, mince (70-180um), aride, gris clair légèrement

rosâtre (7,5 YR 7/2 du Code Munsell), lisse à tuberculé (mais la minceur du

basidiome qui s'est développé sur une écorce grenue explique l'aspect

tuberculé). Marge amincie, concolore.

Trame dimitique contenant des masses cristallines (atteignant 30 x 15um) et

formée d’hyphes enchevétrées assez lâchement en tous sens: hyphes

génératrices hyalines à paroi mince, abondamment ramifiées et septées, sou-

vent anastomosées entre elles, x 2-3um; hyphes squelettiques de type

dichofibres, jaune clair, à paroi épaissie, non septées, x 2,5-3-(4)um, pour-

vues d'assez nombreuses mais courtes ramifications dont certaines atteignent

l'hyménium; elles affleurent mais ne dépassent presque jamais l'hyménium.

Contexte, tomentum et cortex absents.

Spinules disposées dans toute la hauteur du basidiome mais naissant souvent

du sous-hyménium, assez espacées, lancéolées, aiguës, très souvent engainées

d'hyphes gréles et hyalines, 60-105 x (6)-8-1Oum et émergeant jusqu'à 60m

au-dessus de l'hyménium.

Hyménium formé, outre les abondantes ramifications des dichofibres, de

basidioles et de basides claviformes 12-15 x 3-4um, à 4 stérigmates grêles de

4,5-5um de long.

Source : MNHN, Paris

VALIDATION D'ESPÉCES D'HYMENOCHAETE 295

000 | 5 pm

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Fig. 3 - Hymenochaete alabastrina Esc. ex Lég. (holotype). Coupe transversale dans

le basidiome.

Fig. 3 - Hymenochaete aiabastrina Esc. ex Lég. (holotype). Transverse section

through the basidiocarp.

Spores cylindriques un peu déprimées à suballantoïdes, hyalines, à paroi

mince, non amyloïde, 4-5-(5,5) x 2-2,5-(2,8)um.

- Spécimens examinés: les trois récoltes citées par Escobar,

^H. alabastrina Escobar sp. nov. Fungi of Brazil. Parque do Estado,

Instituto de Botanica, Estado de Sao Paulo, 1970: B.V. Skvortzov 85

(WTU, holotype), 84 (NY, paratype), 278 (WTU, paratype).

Spécimens abondants et en excellent état.

- Répartition géographique: Brésil, Argentine.

- Discussion: Hymenochaete alabastrina Esc. ex Lég.

- appartient à la section Gymnochaete Esc. ex Lég. emend.; ce point ne souf-

fre aucune discussion et nous nous étonnons des termes employés par

Escobar tant dans sa diagnose latine ("in basidiocarpis normalibus^) que dans

la description (“setigerous layer normally seated on the substratum’). Faut-il

comprendre qu'il existerait des basidiomes anormaux (sous-entendu:

basidiomes avec contexte bien développé)? .. rien dans ce que nous avons

observé ne porte à le croire.

- est bien caractérisé par sa couleur claire, son dimitisme avec hyphes

squelettiques (dichofibres) dont les ramifications forment, au niveau de

l'hyménium, des hyphes paraphysoides 1-2 fois ramifiées (donc bien moins

ramifiées que des vraies dichophyses) et la présence de cristaux dans la tra-

me; ces deux derniers caractéres n'ont pas été observés par Escobar.

Remarque: Nous avons pu étudier un fragment du type de H.

ceratophora Job (Parque Nacional Iguazü, Misiones, Argentina, 1/11/1982,

leg. Wright, BAFC 28292). Ce spécimen est en tous points identique à H.

Source : MNHN, Paris

296 J.C. LEGER

alabastrina à l'exception de la couleur de la surface hyménienne qui est jau-

nátre ce qui nous parait une différence insuffisante pour justifier la création

d'une espèce nouvelle; nous plaçons donc H. ceratophora en synonyme de H.

alabastrina.

Hymenochaete crustacea Escobar ex Léger

Hymenochaete crustacea Escobar, Contr. Hymenoch.: 76, Fig. 23, 1978, nom.

inval.

Holotype: Costa Rica, A.L. Welden 3278 (NO).

- Diagnose:

"Basidiocarpo resupinato, crustaceo, cereo vel lignoso, crasso, in sicco Brunneo-

cinereo. (6C2) vel Griseo-brunneo (7D3) ad centro et concoloro vel Griseo-

aurantiaco (6B5) ad margine; hymenio laevi, radiatim rimoso ad centro;

margine abrupto. Trama 350-1600um crassa, ex hyphis agglutinatis 2,5-5um

crassis; cuticula absenti. Strato setoso super substrato insidenti, 370-1630um

crasso, e stratis numerosis et imbricatis ex setis. dense compactis; setis

lanceolatis, nudis, 30-70 x 5-8um, usque ad 35um eminentibus. Hymenio ex

hyphis, basidiis et basidiolis constanti; hyphis filiformibus, usque ad 2um crassis;

basidiis clavatis, tetrasporis, 12-17 x 4-5,5um; sporis obovatis, 4-5 x 2,5-3,5um.

Holotypus A.L. Welden 3278 in herbario Universitatis Tulanei conservatus.”

(Escobar, 1978).

- Etymologie: crustaceus = formant une croûte, encroûtant.

- Description personnelle (Fig. 4):

Basidiome résupiné, formant une croûte brun rougeátre (5 YR 4,5/4 du

Code Munsell), tuberculé et craquelé radialement, à bordure concolore ou

légérement plus claire, à marge se terminant de facon trés abrupte.

Trame monomitique de 200 à 1200um d'épaisseur formée d'hyphes verti-

cales, trés serrées, collapsées-agglutinées, à paroi légérement épaissie,

ramifiées ét abondamment cloisonnées (articles courts de 4 à 6um de long),

x 2-4um, et contenant de nombreux amas cristallins (20-25 x 15-20um). Ni

contexte, ni cortex, ni tomentum.

Spinules depuis la base, lancéolées, peu pointues, nues ou plus souvent

engainées d’hyphes gréles (x 1,5-2um), 35-50 x (4)-6-7-(9)um, émergeant de

25-(30)um au-dessus de l'hyménium.

Hyménium constitué de basidioles, d'hyphes paraphysoides simples (x 24m)

et de basides clavées 13-18 x 4-5um, à 4 stérigmates de 4um.

Spores subovoides, hyalines, à paroi mince, non amyloide, 4-5 x 3-3,5jm.

- Spécimen examiné:

^H. crustacea Escobar sp. nov. Venezuela. Trail from Los Pocitos, 1,5 hours

walking towards Santa Isabel, NW Irapa, Estado Sucre. Coll. K.P. Dumont,

R.F. Cain, G.J. Samuels, G. Morillo and J. Farfan, 11 july 1972, VE-4704,

paratype.” (NY).

C'est, outre l'holotype, la seule récolte de cette espèce.

- Répartition géographique: Costa Rica, Vénézuela.

- Discussion: Hymenochaete crustacea Esc. ex Lég.

- appartient à la section Gymnochaete Esc. ex Lég. emend.

Source : MNHN, Paris

VALIDATION D'ESPÉCES D'HYMENOCHAETE 297

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Fig. 4 - Hymenochaete crustacea Esc. ex Lèg. (holotype). Coupe transversale dans le

basidiome.

Fig. 4 - Hymenochaete crustacea Esc. ex Lég. (holotype). Transverse section through

the basidiocarp.

- est caractérisé à la fois par son aspect externe (surface craquelée ra-

dialement et marge trés abrupte) et sa microscopie: spinules de taille moyen-

ne, trame d'hyphes agglutinées et nombreux cristaux, hyphes paraphysoides

simples et spores subovoides.

- est à rapprocher, par de nombreux points (basidiome épais, jusqu'à

1600um selon Escobar, taille et forme des spinules et des spores) de H.

lignosa G.H. Cunn. Cette espèce appartient à la section Fultochaete et mon-

tre un basidiome presque noir, à surface non fendillée et trés épais (jusqu'à

0,8-1cm).

Hymenochaete escobarii nov. sp.

= Hymenochaete dendroidea Escobar, Contr. Hymenoch.: 92, Fig. 27, 1978,

nom. inval. et illegit., non H. dendroidea Berk. et Br. (attribué à Berk. et

Curt.) = Sebacina dendroidea (Berk. et Br.) Lloyd.

Holotype: Venezuela, J.A. Steyermark et J.J. Wurda 1115 (NY).

- Diagnose:

" Basidiocarpo. sessili-pileato, circulari, pendulo et confluenti, coriaceo, in sicco

fragili, pileo usque ad 2,5cm lato; pagina adaxiali sericea, zonata, im sicco

Source : MNHN, Paris

298 J.C. LÉGER

rA:

A iB а

pu)

Fig. 5 - Hymenochaete escobarii nov. sp. (holotype). Coupe transversale dans le

basidiome.

Fig. 5 - Hymenochaete escobarii nov. sp. (holotype). Transverse section through the

basidiocarp.

Brunneo-pallida (7D4) vel “Somalis” (7E5); hymenio laevi vel corrugato, in

sicco Brunneo-cinereo (6C3) vel "Caramel brown" (6C6). Trama 300-500um

crassa, ex hyphis intertextis. 2-2,5um crassis; cuticula praesenti, ex hyphis

Juscatis et dense compactis. Strato setoso super contexto insidenti, 100-350um

crasso, ex massis irregularibus crystallinis et 2-5 stratis discretis ex setis

ordinate dispositis; setis lanceolatis, nudis vel vaginatis, (30)-50-80 x

(4)-6-Sum, usque ad 40um eminentibus. Hymenio ex dendrophysibus, basidiis et

basidiolis constanti; dendrophysibus usque ad 2,5um crassis; basidiis et sporis

Source : MNHN, Paris

VALIDATION D'ESPÉCES D'HYMENOCHAETE 299

non inventis. Holotypus J.A. Steyermark et J.J. Wurdack 1115 in herbario

Horto Botanico Novi- Yorkii conservatus." (Escobar, 1978).

- Etymologie: espéce que nous dédions à G.A. Escobar.

- Description personnelle (Fig. 5):

Basidiome à chapeau sessile, circulaire, confluent, cassant sur le sec, attei-

gnant environ 2,5cm de large et 600um d'épaisseur. Face supérieure du cha-

peau très sillonnée, brun assez vif dans l'ensemble, les stries les plus sombres

brun-rouge foncé (2,5 YR 2/4 -3/4 du Code Munsell = chesnut brown de

Ridgway), les plus claires bai brunâtre (2,5 YR 4/4 = Mars brown R.).

Marge concolore, lobée. Face hyméniale rouge brique claire à testacée (2,5

YR 5/4, 6/4, 6/6 de Army brown à vinaceous Fawn R.) ou bai

ferrugineux YR 5/4 = Mikado brown R.), a la fois sillonnée concentri-

quement et trés contournée, tourmentée, parfois avec quelques verrues, le

point d'attache se manifestant sur cette face hyméniale par un ombilic.

Trame monomitique de 300-6001/m d'épaisseur, comprenant:

- une couche sétigére de 100 à 300um d'épaisseur, stratifiée: chacune des 4

ou 5 strates débute à la base par une zone sombre de 20-30um d'épaisseur,

formée d'hyphes x 2,5-3,5um., à paroi trés épaisse, fortement enchevétrées,

évoquant un cortex. Cette zone est surmontée d’une couche faite d'hyphes

verticales, x 2-2,5 um, à paroi un peu épaissie, bien ramifiées et septées, et

surtout de très nombreuses dendrophyses ainsi que de spinules assez

espacées. Des masses cristallines sont visibles cà et là.

- un contexte de 60-130um, formé d’hyphes parallèles à la surface, à paroi

très épaisse, septées, peu ramifiées, x 2,5-3-(4)um.

- un cortex de 25 à 80um d'épaisseur, formé d'hyphes à paroi très épaisse,

très serrées et orientées à peu près parallèlement à la surface, x 2,5-3,5um.

- un tomentum (70-120um) d'hyphes brun jaune, septées, à paroi épaisse, x

3-4um.

Spinules lancéolées, élancées, 30-75 x 4-8jm, nues ou plus souvent engainées

d'hyphes gréles (x 1-1,5um), émergentes jusqu'à 30-(40)um. Elles naissent de

la zone sombre de chaque strate de la couche sétigère; çà et là se ren-

contrent, nées également de cette zone sombre, quelques très petites spinules

(environ 15 x 3um).

Dendrophyses nombreuses, x 1,5-2,5um.

Hyménium absent: ni basides ni spores observées.

- Spécimen examiné:

“The New York Bot. Gard. Chicago Natural History Museum Expedition.

Chimanta Massif. Toronto-tepui, Estado Bolivar, Venezuela. N°1115.

South-facing forested shapes above valley of South Cano, on summit. Alt.

1955-2090 meters. Feb. 23, 1955. Coll. J.A. Steyermark, J.J. Wurdack.

Hymenochaete dendroidea Escobar, sp. nov., holotype." (NY).

Cette espèce n'est connue que par le spécimen type.

- Répartition géographique: Vénézuela.

- Discussion: Hymenochaete escobarii nov. sp.

- appartient à la section Hymenochaete. р

- est aisément reconnaissable car il s'agit de la seule espéce de cette section

qui posséde à la fois un basidiome à chapeau et des dendrophyses. H.

Source : MNHN, Paris

300 J.C. LÉGER

cruenta (Pers. ex Fr.) Donk, à port essentiellement résupiné à étalé-réfléchi,

présente aussi des dendrophyses et peut former parfois, localement, quelques

très petits chapeaux (de 1-4mm selon Jahn, 1971) mais sa microscopie et la

couleur rouge de sa surface permettent une distinction aisée.

Hymenochaete globispora Escobar ex Léger

Hymenochaete globispora Escobar, Contr. Hymenoch.: 104, Fig. 31, 32, 1978,

nom. inval.

Holotype: Columbia, Dumont- CO 899 (NY).

- Diagnose:

"Basidiocarpo resupinato, cereo vel velutino, facile separabili ex substrato, in

sicco "Camel" (6D4) vel "Cocoa Brown" (6E6) ad centro et concoloro aut

Aurantio pallido (5A4) vel Cinereo-aurantiaco (5B4) ad margine; hymenio laevi

vel tuberculato; margine. gradatim. decrescenti. Trama 180-350um crassa, ex

hyphis intertextis 2.5-3um crassis; cuticula praesenti, ex hyphis fuscatis et dense

compactis. Strato setoso super contexto insidenti, 130-180um crasso, ex setis

numerosis dispersis constanti; setis lanceolatis, nudis vel vaginatis, vulgo cum

crystallis dispersis, 50-125 x 6,5-10um, usque ad 95um eminentibus. Hymenio ex

basidiis et basidiolis constanti; basidiis clavatis, bisporis vel tetrasporis, 13-17 x

5-6,5um; sporis globis, 4-5.5um diametro. Holotypus K.P. Dumont, J.H. Hai-

nes, J.M. Idrobo et L.F. Velasquez CO 899 in herbario Botanico Novi- Yorkii

conservatus.” (Escobar, 1978).

- Etymologie: globisporus = a spores globuleuses.

- Description personnelle (Fig. 6):

Résupiné, épais de 200-650um, facilement séparable du support, a surface

tuberculée, brun rouge foncé (5 YR 3,5/4 du Code Munsell — spadiceus Fr.)

ou plus clair et moins rouge (7,5 YR 5,5/4 soit un plus sombre que

avellaneous Ridgway). Marge amincie, 0,5-2mm, jaune orangé clair (10 YR

6/8 = yellow ocher R., mais pâle) à jaune pâle (10 YR 8/6 = alutaceus Fr.),

localement concolore, ternissant avec l'âge.

Trame monomitique comprenant de bas en haut:

- un tomentum ras (30-50-(100)um), formé d'hyphes jaunes à paroi épaisse,

septées, x 3um.

- un cortex (25-40um) brun rouge sombre constitué d'hyphes à paroi trés

épaisse, fortement enchevétrées-agglutinées, x 3-3,5um.

- un contexte d'hyphes brun jaune à paroi épaissie, septées et ramifiées, assez

densément enchevétrées en tous sens mais à orientation d'ensemble plutôt

paralléle au support, x 2,5-3um.

- une couche sétigère pouvant atteindre 150um, avec spinules réparties

uniformément entre des hyphes verticales, brunes, assez serrées, à articles

courts, x 4-Sum.

Spinules lancéolées, engainées d’hyphes hyalines (x 2m), avec quelques pe-

tits cristaux vers le sommet, 55-110 x 7-11-(15)um, dépassant l'hyménium de

80um.

Hyménium formé de basidioles assez larges (x 4-5um) et de basides 15-18 x

4,5-5,5um, à 4 stérigmates de 3-4um. Présence de cristaux dans l'Ayménium

et le sous-hyménium, ce dernier plus sombre.

Source : MNHN, Paris

VALIDATION D'ESPÉCES D'HYMENOCHAETE 301

Fig. 6 - Hymenochaete globispora Esc. ex Lég. (holotype). Coupe transversale dans

le basidiome.

Fig. 6 - Hymenochaete globispora Esc. ех Lég. (holotype). Transverse section

through the basidiocarp.

Spores globuleusés, hyalines, à paroi mince, non amyloide, 4-5,5-(6)um de

diamétre.

- Spécimens examinés:

“Fungi of Columbia. N° Dumont-CO 899. H. globispora Escobar, sp. nov.

On unidentified branch. Vicinity km 44 from Fomeque, road between Calera

and Fomeque, Dpto. Cundinamarca. Coll. K.P. Dumont, J.H. Haines, J.M.

Source : MNHN, Paris

302 J.C. LÉGER

Idrobo, L.F. Velasquez, 9 july 1974. Det. С.А. Escobar, 4/11/1978.

Holotype.” (NY).

“Fungi of Peru. N° Dumont-PE 1366. H. globispora Escobar, nov. sp. On

undet. wood. Ca. 143km from Huancayo, on the Huancayo-Satipo Rd.,

Dpto. Junin. Elev. 10000 ft. Coll. K.P. Dumont, S.E. Carpenter, M.A.

Sherwood, P. Buritica, 9 july 1976. Det. G.A. Escobar 4/23/78. Paratype.”

(NY).

Ce sont les deux seules récoltes connues de cette espéce.

- Répartition géographique: Colombie, Pérou.

- Discussion: Hymenochaete globispora Esc. ex Lég.

- appartient à la section Hymenochaete.

- est trés bien caractérisé par ses spores globuleuses. Parmi toutes les

espèces du genre, seul Hymenochaete sphaerospora Lég. et Lanq. montre

également des spores d'une telle forme mais présente par ailleurs plusieurs

caractéres permettant une distinction aisée (couleur gris clair du basidiome,

deux groupes de spinules selon leur taille, trés grandes basides, spores

légèrement plus grandes et surtout appartenance à la section

Paragymnochaete).

Hymenochaete lenta Escobar ex Léger

Hymenochaete lenta Escobar, Contr. Hymenoch.: 112, Fig. 35, 36, 1978, nom.

inval.

Holotype: Costa Rica, A.L. Welden 2957 (NO).

- Diagnose:

“Basidiocarpo sessili-pileato, flabelliformi vel dimidiato, coriaceo, lento, in sicco

fragili, pileo usque ad 5,5ст lato; pagina adaxiali sericea vel tomentosa, nitida,

cum pilis in cursu radialibus, zonata, in sicco "Raw Sienna" (6D7) vel "Cocoa

brown” (6E6); hymenio laevi vel corrugato, in sicco Aurantiaco-griseo (5B2)

vel Brunneo-aurantiaco (6C4). Trama 200-500um crassa, ex hyphis intertextis

3-6um crassis; cuticula praesenti, ex hyphis fuscatis et dense compactis. Strato

setoso super contexto insidenti, 50-1lÜum crasso, ex setis numerosis dispersis

constanti; setis lanceolatis, aliquando cilindrico-ventricosis, apice vulgo cum

crystallis minutis obtecto, 45-65 x (7,5)-8,5-16-(20)um. usque ad 30um

eminentibus. Hymenio ex basidüs et basidiolis. constanti; basidiis clavatis,

tetrasporis, 9-12 x 3,5-4um; sporis allantoideis, 4-5 x 1-1, Sum. Holotypus A.L.

Welden 2957 in herbario Universitatis Tulanei conservatus.” (Escobar, 1978).

- Etymologie: lentus = souple, flexible.

- Description personnelle (Fig. 7 et 8) :

Basidiome à chapeau sessile flabelliforme ou dimidié, mince (200-6005 m) et

souple mais coriace et cassant sur le sec, atteignant 5,5cm de diamètre. Face

supérieure du chapeau légèrement soyeuse mais terne, à tomentum peu

développé formé de poils appliqués radialement, avec quelques grands

sillons concentriques irréguliers, de couleur cannelle (7,5 YR 5/6 à 6/6 du

Code Munsell) Surface hyménienne bosselée irrégulière avec quelques plis

en relief faible correspondant à ceux de la face supérieure du chapeau, de

couleur gris-brun clair (7,5 YR 6/4 — avellaneous Ridgway) à gris-brun

Source : MNHN, Paris

VALIDATION D'ESPÉCES D'HYMENOCHAETE 303

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5 pm | Ca

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AY 4 43

Fig. 7 - Hymenochaete lenta Esc. ex Lég. (holotype). Coupe transversale dans le

basidiome.

Fig. 7 - Hymenochaete lenta Esc. ex Lég. (holotype). Transverse section through the

basidiocarp.

orangé clair (5 YR 6/3 à 6/4 = Fawn R.) un peu plus claire sur le

centimètre de bordure.

Trame monomitique comprenant de bas en haut:

- un tomentum (150-300um) formé d'hyphes brun jaunâtre, à paroi

légèrement épaissie, septées et ramifiées, x 3,5-6,5um.

~- un cortex trés marqué (15-40um) d'hyphes brun rouge vif, à paroi très

épaisse, enchevétrées et agglutinées, x 4-5,5um; cette couche évoque un

puzzle.

- un contexte (100-300um) d'hyphes jaune clair ou translucides, à paroi min-

ce ou épaissie, septées et ramifiées, orientées parallèlement à la surface, x

2,5-4,5um. Au sommet du contexte (cóté hyménien), les hyphes sont serrées

entre elles, créant une zone dense de (60)-80-(120)um; le reste du contexte,

Source : MNHN, Paris

304 J.C. LÉGER

Fig. 8 - Hymenochaete lenta Esc. ex Lég. (holotype). Spinules.

Fig. 8 - Hymenochaete lenta Esc. ex Lég. (holotype). Setae.

(40)-100-(200)um, a un aspect curieux: les hyphes ont une nette tendance à

se grouper par 4-8 pour former des cordons entre lesquels se trouvent des

plages trés claires car presque dépourvues d'hyphes.

Spinules peu serrées à espacées (1-5 spinules sur une section de 1004m), la

plupart difformes, trés obtuses, souvent ventrues, à lumiére importante

(jusqu'à 10um), certaines avec un petit capuchon de cristaux, 40-55-(60) x

(7)-9-15-(16,5)um, entourées d'hyphes à la base, exsertes jusqu'à 35um mais

souvent moins (10-15um).

Hyménium de basidioles et de basides 14-16 x 2-3um à 4 stérigmates étroits

de 4um de long.

Spores allantoïdes étroites, hyalines, à paroi mince, non amyloïde, 4-5 x

1-1, Sum.

- Spécimen examiné:

"Fungi of Costa Rica n? 7160. №. luteo-badia (Fr.) H. et L. Woods below

volcan Poas, 2700m elevation. 21.1.1968. Leg. A.L. Welden 2957. Det. A.L.

Welden. Hymenochaete lenta Escobar, sp. nov. (Holotype). Annotated by

G.A. Escobar, Mar. 21, 1978." (NO).

C'est la seule récolte de cette espèce.

- Répartition géographique: Costa Rica.

- Discussion: Hymenochaete lenta Esc. ex Lég.

- appartient à la section Hymenochaete.

Source : MNHN, Paris

VALIDATION D'ESPÈCES D'HYMENOCHAETE 305

- est une belle espèce à aspect de Н. luteo-badia (Fr.) v. Hóhn. et Litsch.

mais est dépourvu des hyphes paraphysoïdes incrustées de granules si

caractéristiques de ce dernier. H. luteo-badia possède en outre des spinules

lancéolées et beaucoup moins larges et des spores plus larges. Escobar signa-

le que 7. lenta se situe à proximité du groupe H. rigidula - H. tabacina - H.

obesa mais qu'aucun de ceux-ci ne possède un basidiome en forme de grand

chapeau sessile. Nous ajouterons que bien d’autres caractères permettent de

caractériser H. lenta par rapport aux autres espèces à spores allantoïdes de la

section Hymenochaete et d'affirmer en conséquence qu'il s'agit d'une bonne

espèce; les caractéristiques majeures de H. lenta portent, outre le port, sur les

spores très étroites, les spinules difformes, très larges, à grande lumière et à

sommet largement arrondi, et relativement peu nombreuses (contrairement à

ce que dit Escobar).

Hymenochaete microspora Welden ex Léger

Hymenochaete microspora Welden in Escobar, Contr. Hymenoch.: 133, Fig.

42, 1978, nom. inval.

Holotype: Columbia, A.L. Welden 4365 (NO).

- Diagnose:

"Basidiocarpo resupinato, cereo vel velutino, in sicco griseo-aurantiaco

(5B3-5B4) ad centro et "champagne" (443) ad margine; hymenio laevi vel

tuberculato; margine gradatim decrescenti. Trama 70-170um crassa, ex hyphis

intertextis 2-2,5um crassis et. massis irregularibus crystallinis; cuticula absenti.

Strato setoso super contexto insidenti, 35-100jum crasso, e 1-2 stratis ex setis

numerosis dispersis constanti; setis lanceolatis, mudis vel vaginatis, 35-70 x

3-7Z5um, usque ad 35m eminentibus. Hymenio ex basidiis et basidiolis

constanti; basidiis clavatis, tetrasporis, 9-12 x 3,5-4.5um; sporis ovatis vel brevi-

ellipti : um. Holotypus A.L. Welden 4365 in herbario

Universitatis Washingtonii conservatus.” (Escobar, 1978).

- Etymologie: microsporus = à petites spores.

- Description personnelle (Fig. 9):

Basidiome résupiné, mince (80-170um), aride, tuberculé, brun clair-cannelle

(7,5 YR 6/4 du Code Munsell — avellaneous Ridgway), à marge (1-2mm)

amincie, appliquée à très légèrement décollée, jaunâtre-chamois (10 YR 7/6,

c'est-à-dire un peu plus jaune que champagne qui est 10 YR 7/3-7/4). Trame

monomitique sans tomentum ni cortex et comprenant:

- un contexte de 35 à 70um d'épaisseur, formé d'hyphes jaune clair,

ramifiées et septées, à paroi mince, lâchement enchevêtrées en tous sens, x

1,5-3um et contenant çà et là des masses cristallines.

- une couche sétigère de 30um d'épaisseur généralement mais pouvant attein-

dre 100um localement.

Spinules lancéolées, nues ou parfois engainées d'hyphes grêles, implantées

plus densément au niveau des petits tubercules de la surface qu'entre ceux-ci,

(38)-40-55 x 5,5-7um, exsertes jusqu'à Зит.

Hyménium composé de basidioles et de basides clavées 10-12 x 3-4um, а 4

stérigmates de 3um de long.

Source : MNHN, Paris

306 J.C. LÉGER

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Fig. 9 - Hymenochaete microspora Esc. ex Lég. (paratype, Dumont-EC 1079). Cou-

pe transversale dans le basidome.

Fig. 9 - Hymenochaete microspora Esc. ex Lés

Transverse section through the basidiocarp.

(paratype, Dumont-EC 1079).

Spores ovoides à elliptiques courtes, hyalines, à paroi mince, non amyloide,

(2,5)-3 x 1,8-2um.

- Spécimen examiné:

“Fungi of Ecuador. N° Dumont-EC 1079. On undet. wood. Ca. 17km from

Pinas, toward Machala, on the Arenillas-Loja Road, Prov. El Oro. Elev.

3200 ft. Coll. K.P. Dumont, S.E. Carpenter, P. Buritica, 29 july 1975.

Annotated by G.A. Escobar, Apr. 23, 1978: Hymenochaete microspora

Welden, sp. nov. Paratype.” (NY).

C'est, outre l'holotype, la seule récolte de cette espéce.

- Répartition géographique: Colombie, Equateur.

- Discussion: Hymenochaete microspora Esc. ex Lég.

- appartient à la section Fultochaete Esc. ex Lég.

- est à rapprocher, dans cette section, de H. anomala Burt. Cependant ce

dernier est de couleur différente, beige (c'est-à-dire d'un gris brunátre trés

pále — vinaceous buff Ridgway) et surtout présente des cystides incrustées

ce qui permet une distinction immédiate. Rappelons que H. anomala et H.

fulva. Burt sont les deux seules espéces du genre à montrer des cystides

incrustées.

Remarque: la seule différence notable entre notre description et celle

d'Escobar porte sur la taille des spinules; dans le paratype ici observé, celles-

Source : MNHN, Paris

VALIDATION D'ESPÉCES D'HYMENOCHAETE 307

ci ne dépassent pas 55um alors que d’après l'inventeur de l'espèce elles peu-

vent atteindre 70um.

Hymenochaete papyracea Escobar ex Léger

Hymenochaete papyracea Escobar, Contr. Hymenoch.: 146, Fig. 47, 48, 1978,

nom. inval.

Holotype: Columbia, N° Dumont-CO 904 (NY).

- Diagnose:

“Basidiocarpo effuso-reflexo vel sessili-pileato, irregulariter — flabelliformi,

aliquando imbricato, tenui, in sicco papyraceo, pileo usque ad 1,2cm lato; pagina

adaxiali laevigata, zonata, in sicco Griseo-brunnea (6E3) vel "chocolate brown"

(6F4); hymenio valde rimoso, in sicco Aurantio-griseo (5B2) vel

Brunneo-griseo(6C3). Trama 150-450um crassa, ex hyphis agglutinatis 2,5-3um

crassis; cuticula praesenti, ex hyphis et setis fuscatis et dense compactis. Strato

setoso super substrato insidenti, 170-480um crasso, ex setis dispersis constanti

sed versus hymenium abundantioribus; setis lanceolatis vel subcylindricis,

plerunque cum lumine septate, apice vulgo cum. crystallis. minutis. obtecto,

(120) x (5j-6-10-(12,5)um, usque ad 35um eminentibus. Hymenio ex

basidiis et basidiolis constanti; basidiis subcylindricis, bisporis vel tetrasporis,

9-13 x 3-3,5um; sporis allantoideis, 4-5 x 1-1,5um. Holotypus K.P. Dumont,

J.H. Haines, J.M. Idrobo et L.F. Velasquez CO 904 in herbario Horto

Botanico Novi- Yorkii conservatus." (Escobar, 1978).

- Etymologie: papyraceus — papyracé, à consistance de papier.

- Description personnelle (Fig.10):

Basidiome sous forme de petits chapeaux sessiles d'environ lcm, minces

(300-450um), enroulés sur eux-mêmes sur le sec, à consistance papyracée;

face supérieure du chapeau brun sombre chocolat (5 YR 3/2,5 du Code

Munsell) presque noire, terne, glabre, avec quelques stries concentriques.

Hyménium bai ferrugineux (5 YR 5/4 = Mikado brown Ridgway)

profondément crevassé en petites aréoles de forme variée.

Trame monomitique, duplex (sensu Reeves & Welden, 1967), sans tomentum

et comprenant:

- un cortex basal rouge sombre de 35-70-(90)um d'épaisseur, formé d'hyphes

à paroi trés épaisse, agglutinées-cimentées, à orientation plutôt parallèle à la

surface, x 4-5um. Ce cortex contient des spinules horizontales.

- au-dessus du cortex, une couche claire de 70-110um formée d’hyphes

hyalines ou jaune très pâle, ramifiées, à paroi mince, à orientation parallèle

à la surface et peu serrées, x 3-4um. Cette couche contient d'assez nom-

breuses spinules et des hyphes sétoides.

- au-dessus de la couche horizontale précédente, une couche plus sombre,

220-300um, formée d'hyphes verticales ramifiées, serrées, à paroi mince, x

2,5-3um et de nombreuses spinules verticales.

Spinules lancéolées, peu pointues ou obtuses au sommet, assez souvent

septées de 1-4 cloisons et de deux types suivant leur localisation: spinules du

cortex et de la couche d'hyphes horizontales lancéolées-élancées, de 50 à

1204m de long et de 6 à 15ит de large, nues, à paroi épaisse et lumière

étroite; spinules de la couche d'hyphes verticales plus courtes, lancéolées plus

Source : MNHN, Paris

1C. LÉGER

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VALIDATION D'ESPÉCES D'HYMENOCHAETE 309

trapues, 35-60 x 6-10um, souvent recouvertes d'un capuchon de cristaux de

5-6um d'épaisseur sur le 1/3 ou la 1/2 apicale, exsertes jusqu'à 35um.

Hyménium de 15-20um d'épaisseur formé de basidioles et de basides 10-12 x

2,5-3um à 4 stérigmates de 3um.

Spores allantoides étroites, hyalines, à paroi mince, поп amyloïde, 4-5 x

1-1,2um.

- Spécimen examiné:

“Fungi of Columbia. The NY Bot. Gard. N° Dumont-CO 904. On

unknown substrate. Vicinity km 44 from Fomequé, road between Calera and

Fomeque, Dpto. Cundinamarca. Coll. K.P. Dumont, J.H. Haines, J.M.

Idrobo and L.F. Velasquez, 9 july 1974. H. papyracea nov. sp., holotype, det.

G.A. Escobar, 4/14/1978.” (NY).

C'est la seule récolte de cette espèce.

- Répartition géographique: Colombie.

- Discussion: Hymenochaete papyracea Esc. ex Lég.

- appartient à la section Paragymnochaete Lég. puisque son basidiome à

spinules réparties dans toute la hauteur posséde un cortex bien développé.

- ne ressemble à aucune autre espéce du genre.

- était placé par Escobar à la fois dans la section Gymnochaete (que nous

avons amendée, voir plus haut) et dans la section Hymenochaete à cause de

la présence de spinules dans le cortex, proposition qui ne nous semble pas

justifiée.

Hymenochaete ustulata Escobar ex Léger

Hymenochaete ustulata Escobar, Contr. Hymenoch.: 206, Fig. 71, 72, 1978,

nom. inval.

Holotype: Brazil, B.V. Skvortzov 565 (WTU).

- Diagnose:

"Basidiocarpo resupinato, cereo, in sicco. Brunneo-cinereo (6D2) vel Aurantio-

brunneo (7E7); hymenio laevi vel tuberculato; margine gradatim decrescenti.

Trama 35-lÜ0um crassa, ex hyphis intertextis. 1,5-2,5um crassis et massis

irregularibus | crystallinis; cuticula praesenti, ex hyphis fuscatis et dense

compactis. Strato setoso super substrato insidenti, 60-140um crasso, ex setis

numerosis dispersis constanti; setis lanceolatis vel subulatis, nudis, 55-85 x

6,5-Qum, usque ad 45um eminentibus. Hymenio ex basidüs et basidiolis

constanti; basidiis clavatis, bisporis vel tetrasporis, 10-12 x 3-5um; sporis brevi

ellipticis 4-5 x 2-Jum. Holotypus B.V. Skvortzov 563 in herbario Universitatis

Washingtonii conservatus.” (Escobar, 1978).

- Etymologie: ustulatus (de ustulare) — brülé.

- Description personnelle (Fig. 11): Y "T à

Basidiome résupiné, mince (50-150um), à surface sublisse à tuberculée, brun

terne (7,5 YR 5/2 à 5/4 — vers brunneus Fr.), à marge amincie concolore.

Trame monomitique, sans contexte ni tomentum et comprenant: ré А

- un cortex très mince (7-20um) d'hyphes brun rouge sombre, à lumière très

réduite, x 2,5-3um.

Source : MNHN, Paris

310 J.C. LÉGER

Fig. 11 - Hymenochaete usrulata Esc. ex Lég. (holotype). Coupe transversale dans le

basidiome.

Fig. 11 - Hymenochaete ustulata Esc. ex Lég. (holotype). Transverse section

through the basidocarp.

- une couche sétigère de 40-140um d'épaisseur, formée d'hyphes densément

enchevétrées en tous sens, brun jaune à brun rouge, septées et ramifiées, à

paroi mince, x 2,5-3um et de nombreuses spinules. à et là, présence de

masses cristallines pouvant étre localement abondantes, parfois de taille im-

portante (50-55 x 30-604 m), généralement plus nombreuses en haut de la tra-

me et interrompant méme assez souvent l'hyménium.

Spinules lancéolées aigués, réguliéres, la plupart de celles qui émergent

engainées d’hyphes (x 1,5um), (45)-50-70-(85) x 6-9um, exsertes jusqu'à

45um..

Hyménium formé de basidioles et de basides clavées, 10-12 x 3-4um à 4

stérigmates de Зит.

Spores elliptiques à suballantoides, hyalines, à paroi mince, non amyloide,

4-5 x 2-2,5um.

- Spécimen examiné:

"Fungi of Brazil. Hymenochaete ustulata Escobar, sp. nov. Loc. Parque do

Estado, Inst. de Botanica, Estado de Sao Paulo. Coll. B.V. Skvortzov 565

(duplicate of 379), 1970. Holotype." (WTU).

C'est la seule récolte de cette espéce.

- Répartition géographique: Brésil.

- Discussion: Hymenochaete ustulata Esc. ex Lég.

- est à placer dans la section Paragymnochaete Lég.

Source : MNHN, Paris

VALIDATION D'ESPÉCES D'HYMENOCHAETE 311

- est à rapprocher (par la taille des spinules et des spores, les cristaux dans

la trame...) de H. dissimilis G.H. Cunn. qui se distingue cependant par sa

surface abondamment fendillée, sa marge abrupte, l'épaisseur du basidiome

(atteignant 750um), la trame d'hyphes agglutinées en pseudoparenchyme et

l'absence de cortex.

En ce qui concerne la dixième et dernière espèce décrite comme nou-

velle par Escobar, Hymenochaete weldenii (Escobar, 1978: 213), nous avons

pu examiner toutes les récoltes citées:

“Fungi of Brazil. Hymenochaete weldenii Escobar, sp. nov. Loc. Parque do

Estado, Instituto de Botanica, Estado de Sao Paulo. Coll. B.V. Skvortzov

563 (duplicate 23), 1970. Holotype.” (WTU).

“Fungi Mexicani ex herb. Univ. Tulane 08824. H. weldenii Escobar, sp. nov.

(paratype). Very disturbed tropical forest filled with Acacia on highway

between Tuxtepec and Palmares, ca. 5km from Bethania toward Tuxtepec,

Oaxaca. 26 jul. 1977. Leg. A.L. Welden 4191. Det. G.A. Escobar.” (NO).

"Fungi Mexicani ex herb. Univ. Tulane 8825. Idem, leg. A.L. Welden

4194." (NO).

"Fungi of Jamaica 08864. Hymenochaete weldenii Escobar, sp. nov.

(paratype). Tributary of Rio Grande on road to Milbank, Portland Parish, 2

jun. 1960. Coll. A.L. Welden 1272. Der. Escobar, mar. 10, 1978.” (NO).

De notre étude nous tirons les conclusions suivantes:

- le paratype jamaicain 08864 de H. weldenii (A.L. Welden 1272) est en

réalité un spécimen de H. separabilis Lég. (Léger, 1981).

- l'holotype Skvortzov 563 du Brésil ainsi que les deux paratypes 08824

(A Welden 4191) et 8825 (A.L. Welden 4194) de H. weldenii sont des

spécimens de H. anomala Burt dont ils présentent toutes les caractéristiques:

- méme couleur du basidiome résupiné, granuleux, finement fendillé.

- méme type de structure correspondant à la section Fultochaete (bien que

les exemplaires jeunes de H. anomala puissent, selon Escobar, être dépourvus

de contexte).

- même caractéristiques des spinules (taille, forme lancéolée et très souvent

ondulée-sinuée, faible émergence au-dessus de l'hyménium).

- présence de masses amorphes de matiére brun rouge sur et entre les hyphes

du contexte et aussi présence de cystides incrustées (15-20 x 6-8-(15)um) au

niveau de l'hyménium; la présence de cystides n'avait pas été notée par

Escobar.

- spores elliptiques du même ordre de grandeur (3,5-4,5 x 1,5-2um).

A noter que l'espèce la plus proche d'H. anomala Burt est H. raunkiaeri

Bres. que nous plaçons dans la section Fultochaete et qui possède également

des masses amorphes brunes dans un contexte lâche mais a des spinules plus

grandes, (40-55-(80) x 5-7um), jamais sinuées et ne montre aucune cystide.

Source : MNHN, Paris

312 J.C. LÉGER

Nous adressons nos remerciements à messieurs les Conservateurs des herbiers

NO, NY et WTU pour le prét des spécimens ainsi qu'à Monsieur le Professeur J.

Boidin pour la lecture critique de notre manuscrit.

BIBLIOGRAPHIE

BURT E.A., 1918 - The Thelephoraceae of North America. X. Ann. Missouri Bot.

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CUNNINGHAM G.H., 1957 - Thelephoraceae of New Zealand. XIV. The genus

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Source : MNHN, Paris

Cryptogamie, Mycol. 1990, 11 (4): 313-319 313

CONTRIBUTION À L'ÉTUDE ÉCOPHYSIOLOGIQUE

DE L'ANTHRACNOSE DE LA LUZERNE

AU MAROC ORIENTAL

Bun Meng TROEUNG et Huguette GOSSET

Univ. Mohamed Ier, Faculté des Sciences,

Oujda, Maroc.

RESUME - L'anthracnose de la luzerne sévit sporadiquement dans le Maroc orien-

tal, malgré l'aridité du climat. Des évaluations au champ indiquent que les attaques

peuvent étre importantes au début du printemps et en automne, quand les conditions

climatiques deviennent favorables aux agents pathogènes, Colletotrichum

destructivum et C. trifolii. L'étude in vitro d'une souche de chacune des espèces

isolées de la région précise l'influence de la température sur le développement de ces

parasites fongiques. A 35°C, la croissance est trés lente pour le premier et nulle pour

le second, l'espèce la plus pathogène, d'où l'absence de dégâts en été. En revanche, la

température optimale de croissance se situe pour les 2 espèces entre 25 et 30°C,

températures qui sont celles du printemps et de l'automne dans la région; selon les

années, les rares précipitations intervenant à l'une ou l'autre de ces saisons, on assis-

te alors à une explosion de la maladie.

ABSTRACT - Anthracnose is a very serious, but sporadical lucerne disease in East-

ern Morocco, despite the arid climate. Estimates in field indicate that damage can be

considerable in spring and in autumn, when climatic parameters become favorable

for the pathogenic agents, Colletotrichum trifolii and C. destructivum. A study in vi-

tro of one strain of each species isolated from the region defines the influence of tem-

perature on the development of the two fungal parasites. At 35°C, C. destructivum

shows very slow growth and C. trifolii, the more pathogenic species, no growth -

consequently there is no summer damage. In contrast, the optimal growth temper-

ature for the two isolates is between 25° et 30°C, spring and autumn temperatures in

the country. Thus, when rain falls during one of these seasons, anthracnose epide-

mies will occur.

MOTS CLÉS : Anthracnose, Colletotrichum, écophysiologie, luzerne.

INTRODUCTION

La baisse de la production mondiale en luzerne attribuable à

Colletotrichum trifolii a été longtemps sous-estimée. Barnes et al. (1969) ont

été les premiers à attirer l'attention sur l'importance des dégâts dus à

l'anthracnose. Par la suite, les travaux de sélection menés en Australie ont

permis d'obtenir des descendants à bon niveau de résistance vis-à-vis de cette

Source : MNHN, Paris

314 B.M. TROEUNG et H. GOSSET

maladie (Irwin et al., 1980). De même aux U.S.A. où, grâce à l'utilisation

de variétés résistantes, une augmentation notable du rendement a été

observée, prouvant ainsi a contrario les pertes en fourrage imputables à

Colletotrichum spp. (Elgin et al., 1981).

Quelles que soient les régions du globe, les attaques sévères sont tou-

jours signalées à des périodes à la fois chaudes et humides. Nous avons

pourtant observé l'anthracnose au Maroc dans la région d'Oujda, proche de

la frontiére algérienne, au climat aride malgré sa proximité de la cóte

méditerranéenne. En effet, les paramétres climatiques propres à certaines

années y favorisent les agents pathogénes de la fin de l'automne au début du

printemps. Nous avons tenté d'évaluer le développement au cours du temps

de la maladie, due principalement à C. trifolii, l'autre espèce que nous iso-

lons fréquemment, C. destructivum, s'étant avérée peu pathogène (Troeung &

Gosset, 1987). Parallèlement aux observations faites au champ, et en vue de

préciser l'influence de la température sur la croissance des deux espèces de

Colletotrichum, une étude in vitro a été réalisée.

MATÉRIEL ET MÉTHODES

1- Evaluations au champ de la sévérité des symptómes

De 1986 à 1989, les observations se sont échelonnées de Novembre à

Avril, chez un agriculteur de Sidi-Yahya, localité située à 10km à ГЕЯ

d'Oujda. C'est délibérément qu'une exploitation de type traditionnel a été

choisie, comme représentative de l’ensemble des luzernières de la région. Les

champs sont divisés en petites parcelles d'environ 15m?. Ils sont récoltés au

rythme de 20 jours en été contre 45 jours durant la période froide de

l'année.

Chaque évaluation porte sur 800 à 1000 repousses d'une vingtaine de

jours. Les tiges sont sectionnées au niveau du sol, sur une bande de 10cm de

large, le long d'une diagonale. A chaque tige est attribuée une note, suivant

l'échelle suivante: l: pas de symptôme; 2: quelques points nécrotiques,

inférieurs à 2mm, sur la tige; 3: taches nécrotiques plus grandes sur la tige,

mais dépourvues d'acervules; 4: plante encore verte, mais taches nécrotiques

couvertes d'acervules; 5: plante morte.

2- Etude au laboratoire de la croissance des Colletotrichum spp-

Deux isolats sont retenus, un de C. destructivum (C.01) et un de C.

trifolii (C.09). Ils sont ensemencés sur deux milieux gélosés à 2%:

- M: extrait de malt (20g/1)

- PSA: bouillon de pommes de terre (200g/l) additionné de saccharose

(208/1).

Des implants de 4mm de diamètre sont prélevés à la périphérie d'une

préculture âgée d'une semaine, réalisée sur les 2 milieux pour chacune des

espèces. Ils sont placés au centre de boites de Pétri contenant le milieu cor-

respondant à la préculture, à raison de 10 boites pour chaque milieu et cha-

Source : MNHN, Paris

ANTHRACNOSE DE LA LUZERNE 315

que température d'incubation (20, 23, 25, 27, 30 et 35°C). Une humidité re-

lative proche de 100% est maintenue dans l'étuve.

Deux mesures de croissance diamétrale sont effectuées toutes les 24h

sur chacune des 10 boîtes, d'où 20 répétitions.

RÉSULTATS

1 - Evaluations au champ de l'impact de la maladie sur la luzerne

Les figures 1, 2 et 3 sont établies selon les relevés décadaires de la sta-

tion météorologique d'Oujda: précipitations, températures maximales et mi-

nimales, températures minimales au sol. Y sont également indiqués les dates

de récolte et le pourcentage de tiges sévèrement attaquées (du stade 3 au sta-

de 5).

L'observation A de 1986 (Fig. 1) est à l'origine de nos travaux. Cette

manifestation soudaine de l'anthracnose (43% de tiges très atteintes) se situe

une vingtaine de jours après des pluies orageuses permettant la dissolution

des gelées sporiféres et la contamination de nombreuses plantes par

éclaboussures. Les températures diurnes ont favorisé la germination des

spores, tandis que les températures nocturnes ne constituaient pas un facteur

limitant.

Au cours de la campagne 1987-1988 (Fig. 2), les pluies sont assez bien

réparties et l'humidité suffisante. Les observations B, C et D donnent des

pourcentages respectifs de plantes malades de 13, 14 et 22%: le parasite de-

meure donc présent, mais relativement discret. En effet, les températures ne

sont pas propices à son développement: les maxima restent inférieurs à 20*

et les minima au sol sont compris entre 0 et 5°C. C'est au mois de mars

qu'a lieu une recrudescence de l'anthracnose (observation. E: 46%),

consécutive à une élévation de la température diurne.

De même, novembre 1988 (observation F, de la Fig. 3) connaît des

températures favorables, mais c'est la faible pluviométrie qui ne permet pas

une extension de la maladie comparable à celle de novembre 1986 (11%

contre 43%). En décembre, lors de l'observation G (16% de tiges fortement

attaquées), c'est la température maximale inférieure à 20°C qui ne donne pas

au pathogène le moyen de s'exprimer.

Après un hiver assez rude (2 mois de gel), l'inoculum initial s’est trouvé

réduit et, en mars 1989, les chutes de pluie et l'élévation des températures

n'ont pas autorisé une reprise rapide du parasite (observation H: 13%). II

faut attendre avril pour assister à une “explosion” de la maladie (observation

1: 77%).

Pour établir une relation plus précise entre l'évolution de la maladie au

champ et les facteurs climatiques, une étude de l'influence de la température

Sur la croissance in vitro du parasite s'avérait nécessaire.

Source : MNHN, Paris

316

B.M. TROEUNG et H. GOSSET

Yde plantes malades

Temperature

noise de 28 51 Figure t- CAMPAGNE

Pluietmm) | зе

To ч»

PES

z^ Ji No

SIE я

отм RE =

fente 1

ae 2.

% я es

la ee taera a T CAMPAGNE 5

% sé

т Figures = CAMPAGNE

Source : MNHN, Paris

то

во

ANTHRACNOSE DE LA LUZERNE

2- Etude in vitro

Les figures 4 et 5 donnent, pour

moyen des cultures en fonction du temps.

Figure 4 — Miley Psa

зо 4

317

chaque température, le diamétre

отт

Figure 5 - Milieu M

30°C

270

25°

C. desiructivum

сео

Jours

Figure 4 et 5 - Croiss:

de C. destructivum et C. trifolii. Fig. 4,

gélosé.

ice diamétrale journalière cumulée (moyenne de 20 mesures)

sur PSA. Fig. 5, sur extrait de malt

Fig. 4 and 5 - Diametrical daily growth (average of 20 repetitions) of C. destructivum

and C. trifolii.

medium.

Figures 1, 2 et 3 - Pourcentages de plantes

Fig. 4, on potato saccharose agar, Fig. 5, on malt extract

atteintes d'anthracnose (avec taches

nécrotiques de plus de 2mm) observées au champ d'octobre 1986 à mai 1989,

en relation avec les données météorologiques décadaires: précipitations (en

mm), températures maximales et minimales, températures minimales au sol (en

eC),

Figure 1, 2 and 3 - Percentages of anthracnose attacks (plants with necrotic spots

measuring more than 2mm) observed in field from october 1986 to may 1989,

in relation with meteorological data:

rain (mm), maximal and minimal

temperatures, minimal temperatures on ground level (°C).

Source : MNHN, Paris

318 B.M. TROEUNG et H. GOSSET

Sur PSA (Fig. 4) comme sur M (Fig. 5), les 2 isolats se distinguent net-

tement par leur vitesse de développement, C. destructivum présentant une

croissance diamétrale beaucoup plus rapide que C. trifolii. A 35°C, la crois-

sance de C. destructivum devient très faible (3,2mm + 1,0 / jour sur PSA

contre 1,8mm + 0,6 sur M), et elle est totalement stoppée pour C. trifolii.

Pour les isolats des 2 espéces, la température optimale de croissance se

situe entre 25* et 30*C.

DISCUSSION ET CONCLUSIONS

Au Maroc Oriental, il est remarquable qu'aucun symptóme ne se mani-

feste pendant l'été, contrairement à de nombreuses autres observations. C'est

ainsi qu’aux U.S.A. Frosheiser et al. (1981) considèrent cette maladie com-

me la principale cause de “summer decline” dans le Middle Atlantic et les

Etats du Sud-Est, tandis qu’Allen et al. (1985) la nomment comme la com-

posante la plus importante du “summer killing” dans l'Etat de Virginie. De

même, Watkins et al. (1981) remarquent que les chaleurs humides de la fin

de l'été la favorisent au Nebraska. En France, la moitié Nord est le plus

souvent épargnée alors que, dans la moitié Sud, plus chaude, l'anthracnose

peut entraîner des dégâts de juin à septembre (Raynal & Guy, 1977; Raynal,

1982), suite à des pluies orageuses ou à l'irrigation.

L'étude in vitro indique que la croissance de l'espèce pathogène C.

trifolii est nulle à 35°C. En outre, Welty & Rawlings (1980) ont prouvé que

la germination des spores est inhibée dès que la température excède 27°.

Pour notre part, nous avons remarqué que des essais en chambre de culture

échouaient quand la température s'élevait à 30°C dans les heures suivant la

contamination (Gosset et al, 1989). Dans notre région, plusieurs facteurs

peuvent alors expliquer l'absence de symptômes durant l'été: des

précipitations quasiment nulles (moyenne sur 10 ans de 2 à 3mm en juillet et

août), des températures très élevées (moyenne sur 10 ans des températures

maximales absolues de 44,5 à 44,9°C), ainsi que des récoltes si rapprochées

(tous les 20 jours) que le parasite n’a pas le temps de faire des dégâts sur les

repousses.

En revanche, toujours dans le Maroc Oriental, les symptômes les plus

sévères s'observent, selon les années, en automne (novembre 1986) ou au

printemps (mars 1988 et avril 1989), périodes où températures et hygrométrie

redeviennent favorables à l'anthracnose. Ces saisons sont d'ailleurs reconnues

en Australie comme favorables dans les Etats du Sud-Est, proches de

l'Océan, et dans les régions méridionales irriguées par aspersion (Stovold &

Francis, 1988).

Dans tous les cas, ce sont les effets conjugués de précipitations et de

températures favorables qui entrainent une progression trés rapide de

lanthracnose. Pour pallier une telle situation épidémique, nous avons

commencé à sélectionner des cultivars de type méditerranéen à bon niveau

de résistance (Troeung & Gosset, 1989) et adaptés aux conditions pédo-

climatiques locales.

Source : MNHN, Paris

ANTHRACNOSE DE LA LUZERNE 319

REMERCIEMENTS

Nous adressons nos remerciements à Monsieur JAMAL Mohamed, chef du

Service de Météorologie d'Oujda, pour les informations précises qu'il nous a ai-

mablement communiquées, Monsieur RAYNAL Guy pour ses conseils scientifiques

et Hajj TAJ Mimoun qui, complaisamment, nous a permis de travailler sur ses

propriétés depuis plusieurs années.

BIBLIOGRAPHIE

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Ecology of Alfalfa Anthracnose in Oklahoma. P/. Dis. 69: 248-251.

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Source : MNHN, Paris

Source : MNHN. Paris

Cryptogamie, Mycol. 1990, 11 (4): 321-328 321

SOME PRELIMINARY OBSERVATIONS ON THE

COMPETITIVE COLONIZATION OF FILTER-PAPER

BY CELLULOSE-DECOMPOSING FUNGI

A.F. MOUSTAFA

Department of Botany, Faculty of Science,

Suez Canal University, Ismailia, Egypt.

ABSTRACT - The main objective of the present work has been to study the impact

of growth-rate and cellulolytic ability on the competition between cellulose-decom-

posing fungi during colonization of cellulosic materials. For this reason, species of

different growth-rates and of different cellulolytic abilities have been grown opposite

each other in pairs and triads on filter paper. According to their competitive growth,

cellulose-decomposing fungi were classified into 3 groups namely, strong, moderate,

and weak competitors. It is suggested that members of the first 2 groups are those

which might actively participate in the break down of cellulosic materials in the soil.

The results also revealed that fungi of similar cellulolytic abilities or growth rates do

not necessarily have equal competitive potentialities.

RÉSUMÉ - L'objectif principal de ce travail a été d'étudier l'influence de la vitesse

de croissance et de l'activité cellulolytique dans la compétition des champignons

décomposant les substrats cellulosiques. Des espèces à taux de croissance et activité

cellulolytique différents ont été confrontées par deux ou trois, sur du ier filtre.

Selon leur efficacité dans la colonisation, les champignons ont été classés en forts,

modérés et faibles compétiteurs. On suggére que les membres des deux premiers grou-

pes sont ceux qui participent activement à la décomposition des matériaux

cellulosiques dans le sol. Les résultats révélent aussi que les champignons d'activité

cellulolytique ou de taux de croissance semblables n'ont pas forcément les mémes

potentialités dans la compétition.

MOTS CLÉS : cellulose-decomposing fungi, competition.

INTRODUCTION

In a previous study (Moustafa & Sharkas, 1972) species potentially able

to colonize filter paper cellulose were isolated, from the tidal mud-flats of

Kuwait, and their cellulolytic activities were tested. It was noticed that there

is no coincidence between the frequency of occurrence of a particular

species, on the isolation plates, and its cellulolytic activity in pure culture

ie. high frequency fungi on the filter paper are not necessarily very active

cellulose decomposers while less frequent species might be.

Source : MNHN, Paris

322 A.F. MOUSTAFA

For cellulose decomposing fungi, it is most probable that their

competitive saprophytic ability rather than their cellulolytic activity

determine their contribution to the process of cellulose decomposition in the

soil. Also, the success of any fungus in competitive colonization is known to

depend on 3 factors: its competitive ability, its inoculum potential, and

environmental conditions, both biotic and abiotic (Griffin, 1972). The

attributes contributing to the competitive saprophytic ability of a fungus

(Garret, 1956) are: its growth rate, enzyme production, and production or

tolerance of inhibitors produced by its competitors.

The present investigation was initiated therefore to study the ability of

cellulose-decomposing species to colonize filter paper cellulose under

competitive conditions in order to:

- ascertain the importance of both cellulolytic activity and growth-rate

in the process of cellulose decomposition.

- seek an answer to a fundamental question: do fungi of equal

cellulolytic activities and/or growth-rates also possess equal competitive

saprophytic abilities?

- assess the reliability of using cellulose-decomposing ability, in pure

culture, as a parameter to express fungal activity in the soil.

MATERIALS AND METHODS

Forty-four species, potentiality able to utilize cellulose, were grown (in

triplicates) at 27°C on Whatman N° | filter paper to differentiate between

their cellulelytic abilities and growth-rates. Czapek agar medium (without

sugar) supplemented with 0.5% yeast extract was used. Linear-growth rate

(Trinci, 1971; Garrett, 1980) as a growth criterion has been adopted. The

daily growth rate of all species, inoculated singly, was followed over a period

of 10 days thereafter final colonies diameters were measured and compared.

Delineation of fast and slow-growing species:

According to the daily rate of growth, fungi showing growth rate of

lcm or more per day were considered “fast growers". Others showing growth

of less than lcm per day are regarded as “slow growers”.

Delineation of high and low cellulolytic ability species:

Dry weight loss (Garrett, 1983) was adopted. Fungi were grown singly

on damp filter paper (soaked in mineral solution) for a period of 3 weeks at

27°С. То keep humidity inside plates as constant as possible, a few drops of

mineral solution were added every 2 or 3 days. Fungi which caused a loss

of 10% or more in the dry weight of filter paper were considered "high

cellulolytic species", while those showing a loss in dry weight less than 10%

were regarded as “low cellulolytic species”.

Source : MNHN, Paris

CELLULOSE-DECOMPOSING FUNGI 323

Interaction between fungi in mixed cultures:

Species of different cellulolytic abilities and others of different growth-

rates were inoculated opposite each other (lcm apart) in pairs and triads in

order to study the eventual interaction between soil fungi during competitive

colonization of cellulosic materials. For every species, 30 tests have been

carried out, 15 pairs and 15 triads. The species used in these tests have been

selected to fulfil the following cases of interactions:

a) Interaction between fungi of similar and different cellulolytic

abilities i.e: high x high, high x low, low x low.

b) Interaction between fungi of similar and different growth-rates, i.e.:

fast x fast, fast x slow, slow x slow.

RESULTS AND DISCUSSION

The fungi studied in the present investigation are listed in Table 1,

where they have been arranged, according to their growth rates, in 2 groups

namely, fast and slow growing. "Fast-growing group" comprised 20 species

showing varying degrees of cellulolytic ability. Only 7 species are highly

cellulolytic. The first two members of this group namely, Trichoderma

koningii and Lasiobolidium orbiculoides are extremely fast i.e. quickly covering

the whole plates within 2 or 3 days. L. orbiculoides is a well known dung

fungus (Malloch & Benny, 1973) recently recorded seyeral times from the

desert soils of Kuwait (Moustafa & Sharkas, 1982; Moustafa & Khosrawi,

1983).

“Slow-growing group” contained 24 species, of which only 8 are highly

cellulolytic while 16 are low. The last four species of this group namely,

Alternaria alternata, Cladosporium cladosporioides, Scopulariopsis brevicaulis

and Ulocladium consortiale are very slow growers i.e. their colonies remain

restricted in size and never exceed | or 2cm after 10 days.

Effect of cellulolytic-ability and growth-rate on the interaction-between fungi:

The results of interaction studies between fungi of different growth ra-

tes and others of different cellulolytic abilities suggest that the potential for

competition is not fully dependant upon these 2 factors. It was evident that

high cellulolytic ability or fast growth rate of some fungal species does not

imply that these species are strong competitors as might be expected. Species

such as Myrothecium verrucaria, Stachybotrys atra, Chaetomium globosum,

Graphium penicillioides, through active cellulose decomposers, are weak

competitors. On the contrary, 4. flavus, A. egyptiacus, A. .nidulans, P.

cyclopium, P. funiculosum proved to be good competitors though all are weak

cellulose decomposers.

Source : MNHN, Paris

324

A.F. MOUSTAFA

Table 1 - Cellulose decomposing fungi arranged according to their growth-rates and

cellulolytic abilities*

Tableau 1 - Classement des champignons selon leur vitesse de croissance et leur

activité cellulolytique*

Fast-growing species Cellulolytic

ability

Trichoderma koningii Oudem. 18.5

Botryotrichum piluliferum Sacc. & March 16.4

Graphium penicillioides Corda 15.2

Fusarium oxysporum Schl. ex Fr. 13.6

Chaetomium brasiliense Batista & Mont. 12.8

Lasiobolidium orbiculoides Mall. & Benny 11.6

Corynascus sepedonium (Emmons) V. Arx 10.2

Paecilomyces variotii Bain. 4.2

Aspergillus tamarii Kita 4.1

Penicillium funiculosum Thom 3.6

P. cyclopium Westling 3.3

A. quadrilineatus Thom & Raper 31

A. flavus Link ex Fr. 2.8

A. fumigatus Fres. 24

A. niger Van Tieghem 1.8

Narasinhella hyalinospora (Kuehn et al.) V. Arx 1.5

Rhizopus arrhizus Fischer 0.6

Cunninghamella phaeospora Boed. 04

Syncephalastrum verruculosum Misra 03

Actinomucor elegans (Eidam.) Benj. & Hessel 03

Slow-growing species Cellulolytic

ability

Myrothecium verrucaria Ditmar ex Fr. 16.4

Stachybotrys atra Corda 15.6

Chaetomium cochlioides Palliser 14.8

C. globosum Kunze ex Fr. 13.2

C. olivaceum Cooke & Ellis 11.8

C. virginicum Ames 11.4

C. gracile Udagawa 11.2

C. rectopilium Freg. & Amelung 10.3

Ascotricha bosei D. Hawksw. 5.8

Phoma fimeti Brunaud 4.2

Arachniotus dankaliensis (Cast.) V. Beyma 3.4

Aspergillus ustus (Bain.) Thom & Church 32

A. egyptiacus Moub. & Moustafa 3.0

A. nidulans (Eidam) Wint. 2

A. terreus Thom 2:9.

A. sydowii (Bain. & Sart.) Thom & Church 1.7

Drechslera spicifera (Bain.) V. Arx 1.4

A. ochraceus Wilhelm 12:

A. unguis (Emile Weil & Gau.) Thom & Raper 0.9

Alternaria chlamydospora Mouchacca 0.6

A. alternata (Fr.) Keissler 0.4

Cladosporium cladosporioides (Fres.) de Vries 0.4

Scopulariopsis brevicaulis (Sacc.) Bain. 0.3

Ulocladium consortiale (Thüm.) Simmons 0.2

* For growth-rate and cellulolytic abilities see Materials and Methods.

Source : MNHN, Paris

CELLULOSE-DECOMPOSING FUNGI

The interaction between species, when grown opposite each other in

pairs or triads, varied markedly from one case to another. The following

Observations are the most important:

l- On the whole, interactions between pairs of species seemed to be

very specific ie. in many cases, a particular species A may completely

overgrow species B, however, it may completely fail with species C. For ins-

tance, Lasiobolodium orbiculoides dominated over its opponents in all pair

tests but was completely overgrown by Trichoderma koningii.

2- In triad tests, on the other hand, the interactions are less specific.

Complete overgrowth of any fungus over its two associates was never

reported. In all cases species A either partly dominate over or co-exist with

species B and C, e.g. Botryotrichum piluliferum partly dominated over

Graphium penicillioides and Corynascus sepedonium but co-existed fairly well

with Fusarium oxysporum and Chaetomium rectopilium. The presence of a

third organism sharing the association most probably reduce the deleterious

effect resulting from specific interaction. Such buffering action created by

fungi growing in populations is a factor of great ecological significance

contributing to the regulation of biological equilibrium in the soil.

Therefore, a group of species (more than 3) in mixed culture would certainly

be better and more realistic in competitive studies to avoid specific interac-

tions, a phenomenon which does not exist in the soil. However, a technique

whereby a population of several organisms can be introduced into the

substrate at a time is currently not available.

3- Species belonging to one genus do not necessarily possess similar

potentialities. This was prominant in species of Chaetomium and Aspergillus.

Seven species of Chaetomium were tested but the most competitive were only

C. brasiliense, C. virginicum, C. cochlioides. Also, Aspergillus is represented

by 12 species but the best competitors were A. flavus, A. egyptiacus, A.

nidulans, and A. quadrilineatus although all are not highly cellulolytic.

4- Trichoderma koningii proved to be the most powerful fungus among

all species tested. It completely overgrew its opponents in the majority of

pair and triad tests. Its growth however, was partly inhibited in few cases,

namely when grown in triad associations with any of the following species:

A. fumigatus, A. flavus, Fusarium oxysporum and Syncephalastrum

verruculosum.

5- The results clearly showed that not all fast-growing and/or high

cellulolytic ability species are good competitors, on the contrary many fungi

of low cellulolytic ability and/or slow growth-rate are able to show good

competition. Such observation many point to a fact that there must be some

factors beside cellulolytic activity and growth-rate that enables these fungi to

complete successfully and develop their colonies in the presence of strong

cellulose decomposers. Most probably such species are able either to secrete

and/or tolerate the inhibitory effect of metabolites excreted by their

associates. It is likely that both factors may have little influence upon

competition between cellulose-decomposers. Each of these factors may be

involved rather as a privilege than a limiting factor during competition. This

agrees well with the findings of Tribe (1966) who concluded that “cellulolytic

Source : MNHN, Paris

326 A.F. MOUSTAFA

activity is secondary to other competitive characters". A further, evidence

was given by Garrett (1983) during a study of filter paper decomposition by

different cellulolytic species. He noticed that growth rate in some species

came in the reverse order to their cellulolytic activity.

6- According to the behaviour of species when grown in pairs and

triads, several growth patterns have been recorded according to which

cellulose decomposing fungi could be "tentatively" classified into 3 groups as

follows (Table 2):

Table 2: Cellulose decomposing fungi classified into groups and arranged in

decreasing order of dominance (*) according to their interactions in pairs and

triads,

Tableau 2 - Classement des champignons en 3 groupes selon les résultats des

confrontations (à 2 ou 3) et arrangement en ordre décroissant de dominance*.

Group "A^ Group “B”

% %

Species domi- Species domi-

nance nance

Trichoderma koningii 100 || Fusarium oxysporum 46

Chaetomium brasiliense 86 Chaetomium rectopilium 43

Lasiobolidium orbiculoides 5 Corynascus sepedonium 43

Botryotrichum piluliferum 63 Graphium penicillioides 40

Aspergillus flavus 53 Chaetomium virginicum 40

C. cochlioides 40

Aspergillus egyptiacus 40

A. nidulans 36

A quadrilineatus 33

Penicillium cyclopium 30

P. funiculosum 26

Group “С”

% %

Species domi- Species domi-

nance nance

Chaetomium globosum 23 |A. niger 6

C. olivaceum 22 A. ochraceus 6

C. gracile 20 |A. sydowii 5

Arachniotus dankaliensis 16 A. ustus 4

Stachybotrys atra 13 tamarii 4

Myrothecium verrucaria 13 | Narasinhella hyalinospora 3

Phoma fimeti 10 — | Cunninghamella phaeospora 3

Aspergillus unguis 10 — | Actinomucor elegans 3

Paecilomyces variotii 10 Ascotricha bosei 3

Syncephalastrum verruculosum 10 Cladosporium cladosporioides 2

Rhizopus arrhizus T Ulocladium consortiale 2

Scopulariopsis brevicaulis 7 Alternaria chlamydospora 2

Aspergillus terreus 7 A. alternata 2

A. fumigatus 7 Drechslera spicifera 2

* For % dominance see text (Materials & Methods)

Source : MNHN. Paris

CELLULOSE-DECOMPOSING FUNGI 327

Group A, Strong competitors: assigned to this group species which

completely predominated over their associates їп 50% ог more of cases.

Only 5 species belong to this group. Except for A. flavus all members are

highly cellulolytic and fast growers.

Group B, Moderate competitors: consists of species which showed

predominance or co-existence (in approximately equal colonies) with others

in 25% - 50% of cases. This group comparses ll species of various

characters i.e. fast and slow growth rates, high and low cellulolytic abilities.

Group C, Weak competitors: includes species which showed just existen-

ce in the form of small restricted colonies in less than 25% of cases. Most

fungi tested (28 out of 44) belong to this group.

With regard to this categorization it has to be expected that members

of Groups A and B are those which participate actively in the breakdown of

cellulosic materials in the soil much more than members of Group C can do

although the latter group constitutes species of well known cellulolytic

activity like Stachybotrys, Myrothecium and some species of Chaetomium.

These species however failed to exercise their cellulolytic activity under

competitive condition. For this reason, the use of cellulose decomposing

ability of a species, in pure culture, as a parameter to express it activity in

the soil is not reliable.

As cellulose-decomposing fungi differ in their competitive abilities, they

possibly follow a sort of autonomic succession during cellulose colonization

i.e. some species may anticipate others. The first wave is expected to compri-

se those species which possess fast growth rate. It is possible that members

of this wave have no or little ability to produce or to tolerate metabolites.

Therefore, growth rate here is an advantageous factor enabling such species

to anticipate others during colonization in order to escape severe

competition. The second wave consists of fungi which are able to interfere

with others and overgrow them depending mostly upon their ability to

produce and/or to tolerate the effect of metabolites. A similar pattern of

succession has been reached by Tribe (1960) in his follow-up of succession

of fungi during colonization of cellulose film in various Canadian soils, and

by Park (1959) during a study of colonization of grass leaves and clover

stolens.

There is no doubt that using unnatural substrates like filter paper in

this study and others (Garrett, 1956; Park, 1975, 1976 a,b; Forbes &

Dickinson, 1977; Deacon & Henry, 1978) or cellulose film (Tribe, 1960,

1966; Griffith & Jones, 1963; Deacon, 1979) is open to criticism nevertheless,

it might give a clue to what happens between cellulose decomposing species

in the soil. However, what happens in vitro cannot signify what occur in vivo

where pure substrates do not exist and fungi always present in large popula-

tion and not in pairs or triads. Also, bearing in mind technique limitations

and in addition that the soil is a complex environment inhabited by vast

numbers of micro-organisms, our study is a preliminary one until such tech-

nique is available whereby a mixed population of organisms could be

introduced at a time into a controlled soil system to imitate what is actually

present in nature.

Source : MNHN, Paris

328 A.F. MOUSTAFA

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nomiques de Gembloux, 621p., 26 pl. coul., 33 ph., 130 fig., 44 tab.

Cet important traité, fruit d'un travail collectif, est structuré en 4 ensembles de

chapitres, précédés d'une introduction sur les maladies des plantes: concepts généraux

(J. Semal) qui, aprés un rappel de terminologie et un bref historique de la

phytopathologie, présente la symptômatologie générale (avec 14 pl. coul.), précise les

notions de dégâts et de pertes, et analyse l'impact socio-économique de la protection

des plantes.

Un premier ensemble de 6 chapitres est consacré à l'étiologie. Il débute par

l'étude des causes non parasitaires des maladies (R. Impens): facteurs climatiques,

radiatifs, édaphiques et trophiques, atmosphériques (pollutions), etc. Vient ensuite la.

présentation des virus et viroïdes phytopathogènes (J. Kummert & J. Semal) qui insis-

te sur les natures, structures et stratégies de réplication propres aux divers groupes:

phytovirus 4 RNA messager, antimessager ou bicaténaire, virus et RNAs satellites,

phytovirus 4 DNA, mycovirus et viroides. Les procaryotes sont répartis sur 4 sous-

chapitres: bactéries phytopathogenes (J. Viseur), bactéries glaçogènes (J. Semal),

“dysphagobactéries”, terme nouveau proposé pour désigner les procaryotes à paroi

trilamellaire qui colonisent les tissus conducteurs des plantes (J. Semal) et mollicutes

phytopathogenes, c’est-a-dire ensemble des “mycoplasma-like organisms” et

spiroplasmes (J. Semal & Vanderveken). Le problème des protozoaires

phytopathogénes est briévement évoqué (J. Semal), suivi de la présentation des cham-

pignons phytopathogènes (M. Meulemans) puis de celle des phanérogames

phytopathogénes (J. Vanderveken). Les impacts symptómatologiques des déve-

loppements de quelques bactéries, champignons et phanérogames phytopathogènes

sont illustrés par 11 pl. coul.

Les 3 chapitres suivants sont consacrés aux facteurs de développement des ma-

ladies chez les végétaux: les relations hóte-parasite (P. Lepoivre & J. Semal)

présentées essentiellement dans le cadre des champignons et procaryotes

phytopathogénes, le cas des molécules infectieuses ayant été traité dans le chapitre

consacré aux virus et viroides, les modalités de transmission des phytovirus (J. Semal

& J. Vanderveken) et, enfin, l'épidémiologie des maladies parasitaires des végétaux (Р.

Lepoivre).

Un ensemble de 8 chapitres développe ensuite les méthodes de lutte contre les

maladies des plantes: diagnostic des maladies parasitaires (P. Lepoivre & 1.

Kummert), règles générales de lutte contre les maladies des plantes (J. Зета),

réglementation phytosanitaire (P. Lepoivre), pratiques culturales et leurs effets sur la

maladies des plantes (P. Lepoivre), amélioration génétique de la résistance aux agents

phytopathogénes (P. Seilleur), cultures de tissus et phytopathologie (P. Lepoivre & J.

Semal), lutte biologique en phytopathologie (P. Lepoivre & J. Semal) et aspects

phytopathologiques de la chimiothérapie (P. Lepoivre).

Le dernier volet, intitulé "phytopathologie et agronomie", réunit 4 chapitres:

phytopathologie et bioingénierie (J. Semal), phytopathologie et économie (P.

Lepoivre), la protection des végétaux dans les pays en développement (J. Fraselle) et

les grands problèmes de la phytopathologie contemporaine (J. Semal). L'ouvrage se

termine par une bibliographie regroupée par thèmes, un glossaire et un index général.

On dispose véritablement, avec. cet ouvrage, d'une présentation actualisée et

largement illustrée par des exemples concrets de l'ensemble des acquis, tant fonda-

mentaux qu'appliqués, relatifs aux ‘agents phytopathogènes et à la pathologie

Source : MNHN. Paris

330 ANALYSE D'OUVRAGES

végétale. Il a en outre le mérite de mettre en valeur la grande variété des situations,

consécutives à la diversité des facteurs de maladies et des contextes agronomiques, et

qui entraine évidemment une multipli des stratégies de protection des cultures. Il

analyse, enfin, les problémes qui subsistent et les perspectives méme si, pour certai-

nes de ces dernières, il est encore difficile d'estimer l'importance de leurs impacts fu-

turs.

P. Joly

DISSING H., HANSEN L., KNUDSEN H., OLSON L.W. and SOCHTING U.,

1989 - Mycological studies dedicated to Morgen Lange. Opera Botanica 100:

1-274, ill.

En introduction aux 30 contributions mycologiques de collègues scandinaves et

européens, R. Watling nous présente la carrière scientifique (depuis 1944) et le per-

sonnage qu'est Morgen Lange. Editeur en chef d'Opera Botanica, il est considéré

comme le pilier de la mycologie scandinave, partageant son enthousiasme pour les

cryptogames tant avec les professionnels qu'avec les amateurs. Si les études

taxonomiques et de répartition dominent l'ensemble des contributions présentées, les

aspects génétiques, chimiques ou cytologiques sont aussi abordés. Quelques articles

abordent les problèmes écologiques: stratégie de vie ou rôle de certains champignons

dans l'évolution de leurs substrats. De plus on y remarque un article concernant les

lichens de l'Arctique et un autre résumant l'histoire de la mycologie en Islande. Sa-

crifiant à l'aimable coutume, Schumacher et Hols ont dédié un Lambertella nouveau,

de Norvége, à Morten Lange.

D. Lamy

KUHN P.J., TRINCI A.P.J., JUNG M.J., GOOSEY M.W. and COPPING L.G.,

1990 - Biochemistry of cell walls and membranes in fungi. Berlin, Heidelberg,

Springer-Verlag 327p.

Au chapitre 1, signé par P.J. Kuhn & A.P.J. Trinci: "Cell walls and Membra-

nes in Fungi-An introduction“, font suite 18 autres chapitres consacrés à l'étude des

parois (ch. 2 å 7) et des membranes (ch. 9 à 18), le chapitre 8 traitant des protéines

glycosylées chez S. cerevisiae (W. Tanner).

Pour aborder l'étude des parois fongiques J.F. Pederby présente une revue

documentée où il expose et discute l'ensemble de nos connaissances sur ces structu-

res. Au lecteur pressé, nous recommandons vivement la lecture de ce ch. 2: il aura,

en une vingtaine de pages, une vue précise et synthétique du sujet, sous les pri:

pales rubriques suivantes: composition, structure, synthèse des polymères, stabi

régénération (protoplastes), génétique, rôle (surface de reconnaissance et de protec-

tion), cibles d'antibiotiques. Plusieurs de ces thèmes sont détaillés dans les chapitres

suivants.

Ainsi les synthèses des polymères sont-elles traitées dans les ch. 3 et 7; E.

Cabib et al. (Ch. 3) rapportent leurs surprenants résultats: la chitine synthétase

CHSI, reconnue jusqu'ici comme essentielle dans la synthèse de chitine, ne joue en

réalité qu'un rôle secondaire par rapport à une nouvelle chitine synthétase, CHS2,

nouvellement mise à jour et dont le rôle primordial a été définitivement prouvé par

des expériences de génétique. A la différence de la plupart des autres champignons

inférieurs et supérieurs, les Oomycétes n'ont pas de chitine. Les expériences de M.

Fevre et al. (Ch. 7) montrent bien que la synthése des glucanes (f/ 1 — 3 et $ 1 — 4)

a lieu à l'extrémité apicale des hyphes et non dans les structures membranaires, ce

que confirment les expériences de régénération des parois par les protoplastes. Ces

synthèses résultent de l'activité de fj 1 — 3 et B 1 — 4 glucanes synthases qui

présentent des caractéristiques structurales et fonctionnelles différentes.

La synthèse de la chitine s'avère tout naturellement une cible privilégiée pour

les agents antifongiques, tels les polyoxines, utilisés en abondance, au champ, depuis

de nombreuses années. G.W. Gooday (Ch. 5) expose les recherches sur le sujet, indi-

Source- MNHN. Paris

ANALYSE D'OUVRAGES 331

que les modalités de résistance de ces antibiotiques et souligne l'intérêt de la

découverte des allosamidines, inhibiteurs des chitinases à rôle morphogène.

Comment concilier la rigidité de Ia paroi avec la nécessaire croissance hyphale?

Pour comprendre le mécanisme global, J.G.H. Wessels et al. (Ch. 6) exposent leur

“steady-state theory”: les B 1 > 3 et B 1 — 4 glucanes déposés à l'extrémité de

l'hyphe en croissance subissent un étirement lors de leur migration vers les régions

externes de la paroi, ce qui maintient constante son épaisseur lors de l'extension.

Avec le temps, les liaisons reliant les polyméres individuels augmentent la rigidité; les

processus de bourgeonnement et de ramification résultent d'évaginations consécutives

à un ramollissement de la paroi.

S. Bartniki-Garcia et al. nous proposent, dans le ch. 4, un modèle fort

ingénieux - et convainquant - pour expliquer la croissance hyphale et, d'une façon

fort générale, toute morphogenèse fongique (germination sporale, bourgeonnement,

divers types de croissance). La clé de ce système repose sur le déplacement linéaire,

plus ou moins rapide, d'un "Vesicle Supply Center” (VSC), qui fournirait le matériel

nécessaire à la croissance hyphale; le déplacement et le contrôle initial de la

morphogenèse fongique reposent sur des éléments du cytosquelette autorisant la mi-

gration du VSC.

Bien qu'encore limitée, notre connaissance actuelle des membranes fongiques

indique que celles-ci sont bâties à partir des mêmes matériaux (lipides et protides) et

fonctionnent selon le même modèle général que chez les autres Eucaryotes. D.M.

Losel (Ch. 9) rassemble les informations relatives aux systèmes membranaires (struc-

ture, composition et transfert vésiculaire du matériel vers les extrémités hyphales

(chitosomes)). Beaucoup trop de données concernant des extraits globaux ne permet-

tent pas de connaitre la composition réelle de chaque type membranaire; des travaux

plus récents sur des levures et quelques champignons filamenteux, réalisés à partir de

préparations membranaires purifiées, apportent des informations beaucoup plus fines

et spécifiques. Globalement, glycérophospholipides et stérols constituent l'essentiel de

la fraction lipidique, mais leurs teneurs respectives peuvent varier profondément se-

lon l'espéce, la nature de la membrane, l'état de différenciation et les conditions

environnementales; les chapitres ultérieurs seront consacrés à leur étude (biosynthèse

et inhibition de biosynthèse).

Les levures constituent un matériel de choix pour analyser les mécanismes de

biosynthèse et le rôle des glycérophospholipides membranaires. A l’aide de mutants

de Saccharomyces cerevisiae et S. pombe, affectés dans la synthèse de leurs

phospholipides, J.E. Hill et al. (ch. 16) étudient les mécanismes génétiques régulant

les voies de biosynthése; de tels mutants permettent de mieux apprécier le rôle de

chaque constituant membranaire et la possibilité d'une éventuelle substitution par

d’autres phospholipides proches (substitution permise si même charge électrique).

Compte-tenu que la biosynthèse des phospholipides fongiques emprunte des voies

identiques à celles des autres eucaryotes, l'existence. d'inhibiteurs spécifiques aux

champignons parait surprenante. Cependant la validamycine - antibiotique

aminoglycosidique - et les organophosphorés de type edibenphos et iprobenfos, agis-

sent tous deux, aux faibles concentrations, comme paramorphogènes, c'est-à-dire

augmentent les ramification sans diminuer la vitesse spécifique de croissance. Leur

action se manifeste en modifiant la composition phospholipidique des champignons

sensibles: chute de la phosphatidylinositol chez Rhizoctonia cerealis avec la

validamycine, chute de la phosphatidylcholine avec l'edibenphos chez Fusarium

graminearum (G.D. Robson et al., Ch. 17).

Certaines protéines membranaires font l'objet d'études fouillées: il s'agit tout

d'abord des récepteurs membranaires assurant la transduction de signaux externes en

évènements biochimiques (intervention de Ca** comme second messager des

inositides phosphates, des protéines kinases); le ch. 18 (D. Pitt & A. Kaile) fait le

point sur ce sujet; par ailleurs, dans le ch. 19, C.L. Slayman et al. analysent l'ensem-

Source - MNHN. Paris

332 ANALYSE D'OUVRAGES

ble des caractéristiques structurales et fonctionnelles de l'ATPase membranaire de

Neurospora crassa.

Une des questions les plus intrigantes dans le domaine de la biochimie des

membranes concerne le remplacement du cholestérol des cellules animales par des

stérols présentant une substitution sur le C5, (stérols des végétaux) avec, en plus,

pour l'ergostérol des champignons, une double liaison supplémentaire dans le cycle B.

du squelette. Vanden Boscche (ch. 10) récapitule les expériences conduites, pour la

plupart sur des levures, avec des systèmes vésiculaires, des mutants auxotrophes vis-

ä-vis des stérols, des azotes inhibiteurs de leur synthèse. Les résultats démontrent le

rôle essentiel de ce stérol alkylé qu'est l'ergostérol dans la fluidité membranaire. L'in-

hibition de sa synthèse entraîne de profondes altérations, comme l'arrêt de l'assem-

blage de l'actine, d'où les dépôts délocalisés de chitine, l'accumulation des vésicules

de sécrétion. L'ergostérol est en somme impliqué dans une grande variété de fonc-

tions cellulaires et l'inhibition de sa synthèse se traduit finalement par l'arrêt de

croissance, puis la mort de la cellule. La synthèse complexe de ce composé met en jeu

plusieurs compartiments cellulaires (reticulum endoplasmique et mitochondries). Fi-

nalement l'auteur tente de répondre à la question du choix, par les champignons, de

l'ergostérol, au cours de l'évolution. Outre les propriétés déjà mentionnées sur la

fluidité membranaire et ses conséquences, ne pourrait-il pas être à l'origine de la

synthèse d’une molécule assurant la croissance, appelée SERF pour “Sparking

Ergosterol Replacement Factor. Compte-tenu de l'importance des travaux

enzymologiques et chimiques consacrés aux stérols fongiques et végétaux, les ch. 11 à

15 traitent des voies de biosynthése de ces derniers: R.H. Abeles examine les

modalités enzymologiques (substrats, inhibiteurs) assurant le passage de

l'Hydroxy-Méthyl-Glutaryl-CoA (HMG-CoA) à l'IsopenténylPyrophosPhate (IPP),

les séquences allant de l'IPP au squalène sont revues раг C.D. Poulter: la

caractérisation bichimique de cette voie reste, pour l'essentiel, à réaliser. Le rôle cen-

tral du squaléne dans la biosynthèse des stérols est bien connu et sa transformation

obligée en époxyde de squalène est présentée par N.S. Ryder. Cette enzyme s'avère

une cible privilégiée pour tous les agents antifongiques et certains (les allylamines)

exercent une stricte activité fongicide. Enfin les aspects enzymologiques et génétiques

relatifs au passage du lanostérol à l'ergostérol sont analysés par S.L. Kelly et al.

Dépassant le cadre strictement fongique, A. Rahier et al. analysent les processus

d'inhibition des stérols de végétaux supérieurs et démontrent l'importance, dans le

mécanisme d'action des inhibiteurs, des interactions électrostatiques au niveau des si-

tes enzymatiques.

Ecrit par des spécialistes mondialement renommés, ce livre fournit donc une

mise au point sérieuse de notre savoir sur les membranes et parois fongiques. On

note une bonne complémentarité entre les chapitres avec un minimum de redondan-

ce. Le texte et les illustrations (88 fig. et 46 tab.) sont soignés et ne comportent que

trés peu de coquilles (signalons celles concernant le squelette des stérols p. 136). Une

place importante est faite aux inhibiteurs qui ont permis de réels progrés dans la

connaissance des voies métaboliques; les chercheurs, de plus en plus sollicités - et

financés - par les groupes industriels, progressent dans la mise au point et la

compréhension des mécanismes d'action des fongicides. Dans un tel contexte on peut

regretter l'absence d'une discussion sur les possibilités et les limites de leur utilisation

in natura.

N. Arpin

SINGER R., 1989 - New Taxa and New Combinations of Agaricales (Diagnose

Fungorum Novorum Agaricalium IV). Fieldiana Bot., N.S., 133p.

Ce fascicule réunit plus de 300 diagnoses latines validant des taxons spécifiques

et infraspécifiques étudiés par l'Auteur dans divers travaux déjà parus ou à paraître

prochainement. L'introduction apporte d'ailleurs toutes les précisions utiles sur les

ouvrages et articles auxquels il faut se référer pour avoir des informations d'ordre

taxinomique ou écologique sur les espéces envisagées. A la lumiére des mémes expli-

Source : MNHN. Paris

ANALYSE D'OUVRAGES 333

cations, on comprendra aussi qu'aucune discussion critique détaillée ni aucune illus-

tration n'accompagne le répertoire des descriptions présentées.

Les diagnoses, reprenant évidemment, pour chaque espéce ou variété, les

caractéristiques macro- et microscopiques ainsi que la désignation du type, concer-

nent de nombreux Agarics sens. lat., également un Pleurote, des Rhodocybe, quelques

Bolets, enfin plusieurs Russules et un Lactaire. Les spécimens étudiés proviennent

des différents continents mais, dans leur grande majorité toutefois, sont d'origine

centre- et sud-américaine. La classification, enfin, suit exactement celle utilisée par

l'Auteur dans la 4ème édition (1986) de “The Agaricales in Modern Taxonomy” dont

cette liste, avec les trois précédentes consacrées comme elle à une actualisation

nomenclaturale, vient constituer un complément documentaire indispensable.

J. Perreau

FARR D.F., BILLS G.F., CHAMURIS G.P. and ROSSMAN A.Y., 1989 - Fungi

on Plants and Plant Products in the United States. St. Paul, Minnesota, Amer.

Phytopathol. Soc. Press, 1252p.

La Société Phytopathologique Américaine a manifesté, au cours de ces

dernières années, une activité franchement marquée dans le domaine de l'édition de

livres portant sur divers sujets en rapport avec la Mycologie. Sa dernière contribu-

tion est un énorme ouvrage, réalisé par 4 chercheurs du Systematic Botany and

Mycology Laboratory (Beltsville, U.S.A.). Il est destiné à remplacer l'ancien index

officiel multidisciplinaire des maladies des plantes aux USA, paru en 1950-52. Le

document proposé a un contenu informatif d'une amplitude colossale. On y trouve

une liste de 13000 noms de champignons admis par la communauté scientifique,

impliqués dans près de 80000 liens de toute nature avec des plantes-hôtes, recensés

après analyse de plus de 4000 publications concernant uniquement les Etats-Unis.

L'introduction est composée de trois sections: une présentation des objectifs

majeurs de l'ouvrage et des particularités de son contenu informatif, des instructions

détaillées sur le mode d'utilisation des informations présentées, et un rappel des li-

gnes directrices suivies pour la compilation et la synthèse des observations retenues.

ll est impératif d'assimiler le contenu de cette introduction si l'on désire accéder rapi-

dement à l'information. L'utilisation de moyens informatiques dans le traitement des

données collectées permet leur présentation multiforme. Ainsi les deux parties essen-

tielles de l'ouvrage traitent respectivement des cas d'associations répertoriées hótes-

champignons (553p.), suivi des activités respectives des espèces fongiques incriminées

(447р.).

Dans la premiére partie, les plantes-hótes sont présentées par ordre

alphabétique, par familles et genres respectifs. Pour chaque genre est fournie une lis-

ie numérotée des espéces recensées, parfois avec mention de synonymies connues,

accompagnée du ou des noms usuels employés dans les divers états américains. Suit

la liste des champignons associés, chacun étant pourvu d’une annotation numérique,

renvoyant à l'espèce végétale, et de la mention de la maladie fongique induite. Sont

également reproduites des précisions sur la répartition géographique et les clefs

numériques des références bibliographiques appropriées.

La deuxième partie présente les champignons également en ordre alphabétique

par genres, avec indication du groupement taxonomique dont ils relèvent, et espèces.

Pour chaque espèce, les auteurs fournissent une liste assez exhaustive des synonymes

connus, des notes sur sa répartition géographique et ses liens de nature

phytopathologique. L'ouvrage se complète par une liste numérotée des références

bibliographiques s'étalant en double colonne sur 64 pages, un index des genres des

plantes-hótes, celui des noms communs des plantes citées et, enfin, des binomes de

champignons accompagnés de leurs noms d'auteurs.

Globalement cet index exhaustif des champignons et de leurs plantes-hôtes aux

Etats-Unis, est remarquable par la qualité de sa présentation et reste d'un prix abor-

dable. Le texte est clair, aéré et permet un balayage visuel rapide. Le niveau scientifi-

Source : MNHN. Paris

334 ANALYSE D'OUVRAGES

que de l'information fournie est également excellent et cela malgré la masse énorme

de données traitées, plusieurs spécialistes y ayant largement contribué. Cet ouvrage

se révéle être un outil essentiel de référence, à l'échelle mondiale, pour tous les pro-

fessionnels d'horizons divers intéressés de près ou de loin par les champignons.

J. Mouchacca

BON M., 1990 - Flore Mycologique d'Europe 1. Les Hygrophores. Doc. Mycol.,

Mém. H. S. N° 1, 99p., 6 col. pl.

This is the first of a proposed series of monographic accounts on European

macromycetes. It is presented as a soft-cover volume, containing detailed, illustrated

keys. The general format closely follows the now familiar pattern established by

Marcel Bon in his many accounts within the journal, Documents Mycologiques, but

with the addition of colour plates depicting original water-colour illustrations by the

author. Three genera are recognized in the family Hygrophoraceae, namely

Cuphophyllus ( — Camarophyllus ss auct. pl), Hygrocybe and Hygrophorus. This

contrasts with the account published at about the same time by Kovalenko

(Definitorum Fungorum URSS. Ordo Hygrophorales, 1989) who also included

Camarophyllopsis, Gliophorus, Neohygrocybe, and Pseudohygrophorus, all of which

are transferred to the Tricholomatales by Bon. Both authors, however, maintain

Hygrophoraceae as the only family of the order Hygrophorales, whilst the Flora

Aparicina Neerlandica, 1988, chose to include the Hygrophoraceae genera within

Tricholomataceae.

The first 23 pages deal with the definition and characteristics of the family,

and each character, both macro- and micro-, are usefully tabulated to readily

provide the reader with information on which species are bisporic, have widely

spaced lamellae, or have a bitter taste. Each species description is built into the key,

together with references to illustrations and other accounts, appearing in abbreviated

form. In addition, the descriptions are accompanied by a small line-drawing

depicting spores, and often cuticular structure, basidia, and/or cystidia for each

species. The genus Cuphophyllus contains, somewhat surprisingly, two lignicolous

species, Omphalina wynnei (Berk. & Br. P.D. Orton and Chrysomphalina

chrysophylla (Fr.) Clémengon. In the final chapter the author attempts to offer some

views on the phylogeny of Hygrophoraceae, always a risky business in the absence of

consideration on the tropical mycoflora.

This is an easy to use account, and once the reader is accustomed to the system

of abbreviations, the considerable amount of information available is much

appreciated. The colour illustrations offer a decided advantage over other accounts,

with 54 species arranged on six pages. The delicate paintings generally illustrate at

least two basidomes for each species, together with a vertical section. An extremely

useful publication for the field mycologist and one looks forward to further volumes

in the series.

D.N. Pegler.

ANNONCE

Le onzième congrès de la Sociéte Internationale de Mycologie humaine et ani-

male (ISHAM 1991) se tiendra à Montréal du 24 au 28 juin 1991 (secrétariat du

congrès: c/o JPdL Multi Management Inc. 1410 Stanley, Suite 609, Montréal,

Québec, Canada H3A 1P8).

The 11th Congress of the Internation Society for Human and Animal Mycology

will be held in Montréal (Québec, Canada) on June 24-28, 1991 (Congress

secrétariat: clo JPdL Multi Management Inc., 1410 Stanley, Suite 609, Montréal,

Québec, Canada H3A 1P8).

Source : MNHN, Paris

Cryptogamie, Mycol. 1990, 11 (4): 335-336 335

TABLE DU TOME 11

ABDEL-GAWAD K.M. - Keratinophilic fungi associated with horse hoofs in

Egypt

ADHIKARI M.K. - History of mycological explorations in Nepal .

BELLEMÈRE A., MALHERBE M.C., CHACUN H. et MELÉNDEZ-

HOWELL L.M. - L'étude ultrastructurale des asques et des ascospores de

l'Urnula helvelloides Donadini, Berthet et Astier et les concepts d'asque

suboperculé et de Sarcosomataceae .. ү

BERNILLON J. - voir BOUILLANT M.L.

BIZEAU C., MOREAU C., MICHEL P. et PONCHANT D. - Micoflore

fongique de la carposphére de pommes à cidre ...

BLANCO M.N. - voir MANJON J.L.

BOIDIN J. - Répertoire des données utiles pour effectuer les tests

d'intercompatibilité chez les Basidiomycites. Vl. Aphyllophorales non

porées (Premier supplément) ..

BOUILLANT M.L., BERNILLON J., FAVRE-BONVIN J., SOULIER L.

et SALIN N. - Etude comparative des diméres du dihydroxy-5,8

naphtalène précurseurs des mélanines chez les champignons .

CHACUN H. - voir BELLEMÈRE A.

DEGIORGIS L. - voir DESPOULAIN B.

DESPOULAIN B., SEIGLE-MURANDI F, STEIMAN R. et

DEGIORGIS L. - La flore fongique des drèches blanches de maïs . CA

DIAMANTOGLOU S. - voir MARAKIS S.

ESTEVE-RAVENTOS F. y HEYKOOP M. - Notas micologicas. I.

Hebeloma vaccinum Romagn. y Hebeloma vaccinum var. cremeopallidum

var. nov. X

FAVRE-BONVIN J. - voir BOUILLANT M.L.

FORET V. = Aspects métaboliques de la fructification d’Agaricus bispons

(Lange) Imbach .

GOSSET H. - voir TROEUNG B.M.

HEYKOOP M.- voir ESTEVE-RAVENTOS F.

JANEX-FAVRE M.C. - voir PARGUEY-LEDUC A.

LAHBIL F. - voir ORCIVAL J.

LANQUETIN P. - voir LEGER J.C.

LÉGER J.C. et LANQUETIN P. - Morphologie et caractéres culturaux

d'Hymenochaete adusta (Lév.) Hariot et Patouillard .

LÉGER JC. - Etude critique et validation des espèces nouvelles

d'Hymenochaete décrites par G.A. Escobar

MALHERBE M.C. - voir BELLEMÉRE A.

111

175:

167

157

289

Source : MNHN. Paris

à 7 JAN. 1991

336 TABLE DU TOME 11

MANJON J.L., BLANCO M.N. y MORENO G. - Estudios micológicos en

el Parque Natural de Montfragüe (Extremadura, España). Il.

Aphyllophorales .. г

MARAKIS S. and DIAMANTOGLOU S. - Enrichment of deseeded carob

pod with fungal protein ...

MARAKIS S. and DIAMANTOGLOU S. - Fungi isolation from leaves of

some mediterranean evergreen sclerophyllous shrubs. Enzymatic activity of

the isolated fungi .. is

MELENDEZ-HOWELL L.M. - voir BELLEMERE A.

MICHEL P. - voir BIZEAU C.

MONTANT C. - voir PARGUEY-LEDUC A.

MOREAU C. - Les mycotoxines à effets trémorgéniques ..

MOREAU C.- voir BIZEAU C.

MORENO G. - voir MANJON J.L.

MOUCHACCA J. - Fungos do Brazil découverts dans l'Herbier

Mycologique de Nouvelle-Calédonie .... :

145

189

MOUSTAFA A.F. - Some preliminary observations on the competitive

colonization of filter-paper by cellulose-decomposing fungi t

ORCIVAL J. et LAHBIL F. - Organisation infrastructurale du mycélium et

des protoplastes de Nectria haematococca (Berk. et Ber.) Wr. aprés

traitement par la cytohélicase . =

PARGUEY-LEDUC A., JANEX-FAVRE M.C. et MONTANT C. - L'ap-

pareil sporophytique et les asques du Tuber melanosporum Vitt. (Truffe

noire du Périgord, Discomycètes) … Г

PONCHANT D. - voir BIZEAU C.

SALIN N. - voir BOUILLANT M.L.

SEIGLE-MURANDI F. - voir DESPOULAIN B.

SOULIER L. - voir BOUILLANT M.L.

STEIMAN R. - voir DESPOULAIN B.

TROEUNG B.M. et GOSSET H. - Contribution à l'étude écophysiologique

de l'anthracnose de la luzerne dans le Maroc oriental .

313

.. 69, 153, 239, 329

Analyses bibliographiques ....

Instructions aux auteurs ....

по 58611

Commission parit

Dépôt légal n° 15313 - Imprimerie de Montligeon

Sortie des presses le 20 décembre 1990

Imprimé en France

Éditeur : A.D.A.C. (Association des Amis des Cryptogames)

Président : A. Couté; Secrétaire : D. Lamy

Trésorier : R. Baudoin; Directeur de la publication : H. Causse

Source : MNHN, Paris

CRYPTOGAMIE — MYCOLOGIE

BUREAU DE RÉDACTION

MM. DURRIEU G., pour les articles traitant d'Écologie et de Phytopathologie

Laboratoire de Botanique, Faculté des Sciences,

Allées Jules Guesde, 31 000 Toulouse (France).

JOLY P., pour les articles traitant de Systématique

Laboratoire de Cryptogamie, Muséum National d'Histoire Naturelle

12, rue de Buffon, 75005 Paris (France).

MANACHERE G., pour les articles traitant de Physiologie

Laboratoire de Mycologie, Université de Lyon 1,

43, Bd du 11 Novembre 1918, 69622 Villeurbanne Cedex (France).

Mmes ZICKLER D., pour les articles traitant de Cytologie

Laboratoire de Génétique, Université de Paris Sud,

Bát. 400, Centre d'Orsay, 91405 Orsay (France).

ROQUEBERT M.F., s'occupera des autres spécialités.

Laboratoire de Cry ptogamie, Muséum National d'Histoire Naturelle

12, rue Buffon, 75005 Paris (France).

COMITÉ DE LECTURE

BOIDIN J., Lyon (France) MONTANT Ch., Toulouse (France)

CHEVAUGEON J., Orsay (France) MOREAU Cl., Brest (France)

GAMS W., Baarn (Hollande) PEGLER D.N., Kew (Grande-Bretagne)

HENNEBERT G., Louvainla-Neuve SUTTON B., Kew (Grande-Bretagne)

(Belgique) TURIAN G., Genève (Suisse)

LACOSTE L., Paris (France)

Les manuscrits doivent être adressés (en 2 exemplaires) directement à

un membre du Bureau de Rédaction, choisi pour sa spécialité. Le Bureau

peut demander l'avis d'un lecteur choisi pour sa spécialité, méme s'il n'ap-

partient pas au Comité de lecture.

Bien qu'étant avant tout une revue de langue frangaise, les articles

rédigés en Anglais, Allemand et Espagnol sont acceptés.

Les recommandations aux auteurs sont publiées dans le ler fascicule de

chaque tome.

Source : MNHN, Paris

ABONNEMENTS A CRYPTOGAMIE

Tome 12, 1991

CRYPTOGAMIE comprend trois Sections:

Algologie, Bryologie-Lichénologie, |, Mycolagie.

Abonnement à l'une ou l'autre Section) pour 1991;

France .....« : «(326 F ht)” 332,85 F ttc

Étranger «ny Ж 72.240 351.00 В

Abonnement aux 3 Sections pour 19917

France ....... кшмнен (OES. FD ota ЛЕРД

Étranger о Quee EDU AR

Les anciens tomes et fascicules séparés de la REVDE DE MYCOLOGIE er de

CRYPTOGAMIE-MYCOLOGIE sont toujours disponibles.

MÉMOIRES HORS SERIF

NO 2 (1942), Les matières colorantes des champignons, par |.

Pastac, 88 pages : 15 F,

NO 3 (1543). Les constituants de la membrane chez les champi-

gnons, par R. Ulrich, 44 pages: 18 F;

N° 6 (1958). Essai biotaxonomique sur les Hydnés résupinés et les

Corticiés, par J, Boidin. 390 pages, pl, et fig. : 120 Е,

N97 (1959). Les champignons et nous (Chroniques) (1I), par G

Becker. 94 pages : 25 F.

NO 8 (1966). Catalogue de la Mycothèque de la Chaire de Cryptoga-

mie du Muséum National d'Histoire Naturelle. (1) Micromy

cètes. Macromycètes (première partie): 68 pages 1 25 F.

N9 9 (1967). Table des Matiéres (1936-1965), 85 pages : 20 F. —

(1966-1975),30 pages : 10 F.

FLORE MYCOLOGIQUE DE MADAGASCAR ET DÉPENDANCES

publiée sous la direction de M. Roger HEIM

Tome 1. Les Lactario-Russulés, pat Roger Hei | 1938) (épuisé )

Tome 1l. Les Rhodophylles, par Henri Romagnesi (1941). 164 pages,

46 fig. : 90 F.

Tome Ill. Les, Mycènes, Ge Metrod (1949). 144 ^

ec Гане тее mq ) pages

Tome IV. Les Discomycétes de Madagascar , par Marcelle Le Gal

(1953). 465 pages, 172 fig. : 150 F.

Tome V. Les Urédinées, par Gilbert Bouriquet et J.P. Bassino

(1965). 180 pages, 97 fig., 4 pl. horetexte + 90 Е.

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par virement postal au nom de A,D.A.C. - CRYPTOGAMIE

12 rue Buffon, 75005 Paris, C.C.P. La Source 34 764 058.

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