SOMMAIRE

C. DUPRÉ et G. CHEVALIER - Analyse électrophorétique des

protéines fongiques de différents Tuber en association ou non avec

Corylus avellana .. 243

J. MOUCHACCA and B.C. SUTTON - The genus Chlamy-

dosporium Peyronel .. 251

R. GALÁN - Estudios micologicos en el parque natural de

Monfragüe (Extremadura, España). V. Leotiales (= Helotiales

auct.), Ascomycotina .... bs 257

V. GOURP et J-Cl. PARGNEY - Immunocytolocalisation des

phosphatases acides de Pisolithus tinctorius L. lors de sa confron-

tation avec le systéme racinaire de Pinus sylvestris (Pers.) Desv. ....... 293

A.LL ABDEL-HAFEZ - The incidence of dermatophytes and

keratinophilic fungi in playground of schools and house dust in

upper Egypt 305

Analyses bibliographiques .... 315

Table du Tome 12 ..... 319

CONTENTS

C. DUPRÉ and G. CHEVALIER - Comparison of polypeptides

electrophoregrams between non-mycorrhizal Corylus avellana roots,

roots mycorrhized E several Tuber sp. and free-living Tuber

mycelia. On French) 243

J. MOUCHACCA and B.C. SUTTON - The genus ES A

Peyronel . 251

R. GALÁN. - Mycological studies in the Natural Park of Monfragiie

(Extremadura, Spain) V. Leotiales Helotiales auct.), Asco-

mycotina. (In Spanish) .. Kg 251

V. GOURP and J.-Cl. PARGNEY. - Acid phosphatases

immunocytolocalization of Pisolithus tinctorius L. during its

confrontation with Pinus sylvestris (Pers.) Desv. root system «......... 293

A.LL. ABDEL-HAFEZ - The incidence of dermatophytes and

keratinophilic fungi in playground of schools and house dust in

upper Egypt .... Fe a 305

Bibliography ... 315

Index of yolume 12 319

Source : MNHN, Paris

CRYPTOGAMIE

MYCOLOGIE

TOME 12 Fascicule 4 1991

Ancienne Revue de Mycologie. Dirigée par Roger HEIM

jeit

MUSE UAS]

RARE

S DIRECTEUR SCIENTIFIQUE : Madame J. NICOT

SECRETAIRE DE REDACTION : Mme M.-C. BOISSELIER. EDI1

R : A.D.A.C.

Publié avec le concours du Muséum National d'Histoire Naturelle

CRYPTOGAMIE, MYCOLOGIE est indexé par: Biological Abstracts,

Current Contents, Current Awareness in Biological Sciences.

Publications bibliographiques du CDST (Pascal)

Bibliothèque Centrale Muséum

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Cryptogamie, Mycol. 1991, 12 (4): 243-250 243

ANALYSE ELECTROPHORÉTIQUE DES PROTÉINES

FONGIQUES DE DIFFERENTS TUBER EN ASSOCIATION

OU NON AVEC CORYLUS AVELLANA

par Chantal DUPRÉ et Gérard CHEVALIER *

* Station d'Agronomie, Unité de Mycologie,

LN.R.A., 12 avenue du Brézet, 63039 Clermont-

Ferrand Cedex, France.

RÉSUMÉ - La composition protéinique des mycéliums de différents Tuber, en cultu-

re pure ou en association avec Corylus avellana s'avére un critére hautement

spécifique, utilisable en taxonomie. Cultures pures et mycorhizes sont riches en

polypeptides mais le contenu protéinique du mycélium isolé est qualitativement

supérieur à celui des mycorhizes. L'isolement d'un groupe de polypeptides spécifiques

à Tuber melanosporum cst la premiére étape de la mise au point d'une méthode

d'identification rapide du matériel fongique et symbiotique par la voie

immunologique.

ABSTRACT - Two different types of Tuber mycelia - i.e. free-living vs associated

with Corylus avellana - have been studied for their protein composition, using SDS-

PAGE electrophoresis. This protein diversity appeared to be a highly specific taxo-

nomical criterion. The pure cultures as well as the mycorrhizae both displayed a

large number of polypeptide bands. However the protein diversity of the isolated

mycelium was richer. The characterization of a group of T. melanosporum-specific

polypeptides will be the first step in designing a new rapid identification method, in-

volving immunological techniques, to be used for fungal and mycorrhizal material.

MOTS CLES : ectomycorhizes, électrophorése, Corylus avellana, Tuber, taxonomie.

INTRODUCTION

Les méthodes basées sur la morphologie classique (examen des corps

fructiféres, des mycéliums en culture ou des mycorhizes) ne permettent pas

toujours d'identifier avec certitude toutes les espéces du genre Tuber (truffes)

(Chevalier et al, 1985). Certaines espéces ont des corps fructiféres qui

présentent une forte similitude; il en est ainsi de Tuber aestivum Vitt. (Truffe

d'été) et T. uncinatum Ch. (Truffe dite de Bourgogne), de T. brumale Vitt. et

T. hiemalbum Ch., de T. rufum Pico (“Nez de chien”) et de T. ferrugineum

Vitt.

Les cultures mycéliennes des Tuber présentent également une telle ana-

logie que l'identification de l'espéce en cause est difficile.

Source : MNHN, Paris

244 C. DUPRÉ et G. CHEVALIER

Enfin, les mycorhizes peuvent donner lieu á des phénoménes de

convergence morphologique; ainsi, celles de T. magnatum Pico (Truffe blan-

che du Piémont), comestible de grande valeur, sont identiques a celles de T.

albidum Pico ("Blanquette" des Italiens), comestible médiocre.

L'utilisation de méthodes d'identification autres que celles basées sur la

morphologie classique s'avére donc nécessaire.

Dans un travail préliminaire, Mouchés et al. (1981), puis Dupré ei al.

(1984) ont montré qu'il existe des différences importantes entre les

protéinogrammes des corps fructiféres d’espéces différentes de Tuber et que

ce caractére peut constituer un critére taxonomique, mais les problémes de

la variation intraspécifique et de la composition protéinique des mycéliums

et des mycorhizes n'ont pas été abordés.

A la méme époque, l'existence de protéines spécifiques d'un état

symbiotique a été largement mise en évidence chez les associations du type

Légumineuses- Rhizobium (Legocki & Verma, 1980; Strozycki et al., 1985).

L'apparition de polypeptides spécifiques de l'état infecté a également

été observée dans le cas des relations plante-pathogéne (Gianinazzi, 1985;

Collinge & Slusarenko, 1987). Récemment, Hilbert & Martin (1988) ont

utilisé l'électrophorése bidimensionnelle pour caractériser les niveaux d'ex-

pression des polypeptides fongiques et racinaires.

La rareté des travaux sur la biosynthése des protéines par le complexe

champignon-racine nous a incités à tenter d'appliquer l'électrophorése à la

mise en évidence d'éventuels polypeptides spécifiques de la symbiose chez les

Tuber. Nous avons donc comparé les profils polypeptidiques des protéines

totales extraites, soit d'ectomycorhizes résultant de la symbiose entre le

noisetier commun (Corylus avellana L.) et différentes truffes (Tuber

melanosporum Vitt., Truffe dite de Périgord; T. brumale Vitt; T. uncinatum

Ch.; T. magnatum Pico), soit de racines non mycorhizées, soit de cultures

mycéliennes de différents isolats de la même espèce ou d'espèces différentes

de Tuber.

MATÉRIEL ET MÉTHODES

Matériel végétal

Les plantules de Corylus avellana issues de semis et mycorhizées avec

des suspensions sporales suivant une technique maintenant classique (Cheva-

lier et al, 1973) ont été élevées en serre, en pots ouverts, dans de la

vermiculite arrosée avec une solution nutritive (Dupré et al, 1982). Les

plants témoins (non inoculés) ont été élevés dans les mémes conditions.

Quatre mois aprés l'inoculation qui a eu lieu en avril 1989, les

mycorhizes sont bien développées. Elles sont prélevées individuellement sous

la loupe binoculaire puis débarrassées des débris attenant à leur surface par

passage environ 45 secondes dans une cuve à ultrasons. Elles sont ensuite

lavées à l'eau courante pendant 18 heures et rincées par 3 passages dans de

Source : MNHN, Paris

DIFFERENCIATION CHIMIQUE DES TRUFFES 245

Veau désionisée stérile. Le prélèvement et le nettoyage des radicelles non

mycorhizées s’opèrent de la même façon.

L'extraction des protéines est effectuée à partir de 350 à 450 mg de

matériel frais.

Matériel fongique

Les essais ont porté sur des isolats de cinq espèces de Tuber: Tuber

melanosporum, T. brumale, T. aestivum, T. uncinatum, T. albidum, pour des

comparaisons interspécifiques et sur cing isolats issus de carpophores d'ori-

gine géographique différente (isolats 3, 10, mel 20) ou de mycorhizes (isolats

1015, 1017) de T. melanosporum, pour des comparaisons intraspécifiques.

Les cultures mycéliennes ont été réalisées en flacons stériles à usage

unique de type “Corning” (Polylabo), à surface de culture de 75 cm?, dans

30ml de milieu nutritif liquide (malt a 1%, pH: 5,6).

Les thalles âgés de 4 mois ont été débarrassés de la pastille gélosée

d'inoculum, rincés 3 fois à l’eau bipermutée et essorés dans du papier filtre.

L'extraction des protéines a été réalisée à partir de 430 à 592 mg de

mycélium frais.

Extraction des protéines

L'extraction des protéines a été effectuée selon la méthode décrite par

Hilbert & Martin (1988).

Le dosage de la quantité de protéines a été réalisé à l'aide du réactif

préconisé par Biorad, d'après la technique de Bradford (1976).

Les protéines sont solubilisées par reprise du culot protéique dans 4041

de tampon de Laemmli (1970): tris-HCI 0,0625 M pH 6,8; glycérol 10%;

sodium dodécyl sulfate 2%; mercaptoéthanol 5%; bleu de bromophénol

0,01%. L'ensemble est chauffé á 100°C pendant 5 minutes. Les extraits re-

froidis sont conservés au congélateur a -18°C.

Electrophorése

L'électrophorése monodimensionnelle sur gels de polyacrylamide est

réalisée verticalement en plaque de 180 x 160 x 15 mm dans une cuve

“Lagon” thermostatée; elle est dénaturante.

La composition des gels en acrylamide-bisacrylamide est celle décrite

par Hilbert (1985); seule la concentration de Temed a été modifiée. La com-

position du gel de concentration des protéines (5%) est la suivante:

acrylamide a 30% (p/v), 3,34ml; bisacrylamide a 1% (p/v), 5,20ml; tris-HCI

0,5M (pH 6,8), Sml; SDS á 20% (p/v), 0,10ml; persulfate d’ammonium a

10% (p/v) 0,10ml; Temed, 0,017ml; eau ultrapure, 6,25ml; total, 20ml. Celle

du gel de séparation des protéines (15%) est: acrylamide à 30%, 20ml;

bisacrylamide à 1%, 3,47ml; tris-HCL 1,5M pH (8,8), 10,80ml; SDS a 20%,

0,20ml; persulfate d’ammonium a 10%, 0,20ml; temed, 0,020ml; eau

ultrapure, 5,33ml; total, 40ml.

Source- MNHN, Paris

246 C. DUPRÉ et G. CHEVALIER

Aprés la polymérisation du gel de séparation, haut de 11,5cm, le gel de

concentration est coulé sur une hauteur de 4,5cm et un peigne de 20 puits

destinés à contenir les dépóts protéiques y est inséré. On dispose dans cha-

que puits 20ul de dépôt contenant respectivement pour les mycorhizes, les

racines témoins et les thalles mycéliens: 8-11, 6-8 et 6-8ug de protéines.

La masse moléculaire des sous-unités protéiques est déterminée à l'aide

de “Kit” de calibrage LWM (Pharmacia) contenant 6 marqueurs protéiques.

Le tampon de migration électrophorétique est celui de Laemmli (1970).

L'électrophorése s'effectue à voltage constant: 90 volts, durant le passage des

polypeptides dans le gel de concentration et 70 volts durant le passage dans

le gel de séparation. La température du gel est constante (14°C); la durée de

l'électrophorèse est de 16 h. Ces conditions se sont avérées favorables à une

bonne résolution des bandes (séparation, netteté, horizontalité).

La révélation des protéines est effectuée par coloration argentéique de

Heukeshover & Dernicks (1985) simplifiée par Damerval et al. (1987).

RÉSULTATS

* Comparaison entre les profils polypeptidiques de racines mycorhizées et ceux

de racines témoins.

A l'électrophorése des protéines membranaires, les racines mycorhizées

présentent de 23 à 28 bandes majeures (dont 16 communes à tous les pro-

fils), les racines témoins 20 bandes majeures (Fig. 1).

Les profils obtenus à partir des racines mycorhizées prélevées sur des

noisetiers du même âge et élevés dans les mêmes conditions sont

reproductibies, quelle que soit l'origine génétique des plantules.

Dix bandes majeures sont communes aux profils des mycorhizes et des

racines non mycorhizées (Fig. 1, flèches).

* Comparaison entre les profils polypeptidiques des cultures mycéliennes.

Le nombre des polypeptides du mycélium en culture pure est élevé: 35

à 40 bandes majeures, selon l'espèce.

La comparaison des profils polypeptidiques de cinq isolats d'espèces

différentes de Tuber montre que, comme dans le cas des corps fructifères, le

spectre protéinique des mycéliums en culture pure peut constituer un critère

de différenciation des espéces, utilisable en taxonomie; par ailleurs, la com-

paraison des profils de cinq isolats de T. melanosporum d'origine

géographique différente (France et Italie) montre que les spectres

protéiniques offrent une très grande similitude, puisqu'environ 80% des ban-

des principales sont communes. Il a été possible de sélectionner un groupe

de polypeptides spécifiques a T. melanosporum; cette bande ms

(melanosporum spécifique) a les caractéristiques suivantes: PM = 67 KD; Rf

= 0,195 (Fig. 2). Son absence, dans le profil 4, qui correspond, comme le

Source : MNHN, Paris

DIFFERENCIATION CHIMIQUE DES TRUFFES 247

4 5 6 7

1 2 3 m

Clin

Fig. 1: Comparaison entre les profils polypeptidiques de racines de Corylus avellana

mycorhizées par différents Tuber et ceux de racines témoins non mycorhizées (1

: T. melanosporum; 7: T. uncinatum; 9: T. magnatum; 2; 4, 6,

8: racines témoins). Les bandes communes sont signalées par une flèche.

Comparison between polypeptides electrophoregrams from short roots of

Corylus avellana mycorrhized by several Tuber and those of non-mycorrhizal

short roots (1 and 3: T. brumale; 5: T. melanosporum; 7: T. uncinatum; 9: T.

magnatum; 2, 4 , 6, 8: non-mycorrhizal short roots). The common bands are

indicated with an arrow.

profil 5, à un extrait de l'isolat 1017, mais plus ancien, est attribuée à la

mauvaise conservation des protéines.

DISCUSSION ET CONCLUSIONS

Le contenu protéinique des mycorhizes est plus riche que celui des ra-

Cines témoins, mais la quantité de polypeptides dans les mycorhizes est

moins importante que celle du mycélium en culture (23 à 28 groupes de

protéines au lieu de 35 à 40); il y aurait donc répression de certaines

protéines fongiques dans la mycorhize. Ce phénomène confirme les obser-

vations biochimiques de Martin et al. (1987) et les observations microsco-

Piques de Dexheimer et al. (1986) qui démontrent que des modifications

sont induites par l'établissement de la symbiose mycorhizienne.

Source : MNHN, Paris

248

Fig. 2

Fig.

C. DUPRE et G. CHEVALIER

= 67kD

e EP

- -30

E20

-14

2: Mise en évidence d'un groupe de polypeptides spécifiques ms (PM: 67 000;

Rf: 0, 195) dans les mycéliums en culture pure de 5 isolats de Tuber

melanosporum d'origine différente (1 — isolat 10, 2 = isolat 3, 6 = isolat mel

20, obtenus à partir d'ascocarpes; 3 = isolat 1015, 4 et 5 = isolat 1017, obte-

nus à partir de mycorhizes; 1, 2: ascocarpes provenant d'Italie; 3, 5, 6:

ascocarpes ou mycorhizes d'origine frangaise).

2: Characterization of a group of ms specific polypeptides (PM: 67 000; Rf: 0,

195) in pure culture mycelia of 5 T. melanosporum strains obtained through

different ways (1 = strain 10, 2 = strain 3, 6 = strain mel 20, isolated from

ascospores; 3 = strain 1015, 4 and 5 = strain 1017, isolated from mycorrhizae;

1, 2: ascocarps originating from Italy; 3, 5, 6: ascocarps or mycorrhizae

originating from France).

La technique utilisée ne permet pas cependant d'étudier de maniére ap-

profondie les modifications quantitatives et qualitatives de matériaux aussi

riches en polypeptides. Parmi les solutions apportées afin de poursuivre ce

travail, le fait d'avoir isolé un groupe de polypeptides spécifiques a incité à

choisir la voie immunologique.

Un travail est en cours, en collaboration avec le Laboratoire de recher-

ches sur les symbiotes racinaires de l'I.N.R.A. de Montpellier. L'objectif est

de mettre au point une méthode immunologique d'identification rapide du

champignon en culture ou en association avec la racine, lorsque les critères

morphologiques traditionnels d'identification s'avèrent insuffisants.

Source - MNHN. Paris

DIFFERENCIATION CHIMIQUE DES TRUFFES 249

Ce travail implique Vutilisation de mycorhizes obtenues par association

entre un matériel fongique sélectionné isolé par bouturage de fragments

d'ascocarpes et un matériel végétal homogéne obtenu par clonage.

Une première application pourrait être la différenciation des

mycorhizes de T. magnatum de celles de T. albidum et celle des mycorhizes

de T. aestivum et T. uncinatum, espéces présentant toutes un intérét

économique certain mais de qualité gustative très inégale.

BIBLIOGRAPHIE

BRADFORD M.M., 1976 - A rapid and sensitive method for the quantification of

microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding.

Analytical Biochem. 72: 248-254.

CHEVALIER G., GRENTE J. et POLLACSEK A., 1973 - Obtention de

mycorhizes de différents Tuber par synthèse à partir de spores en conditions

gnotoxéniques et partir de cultures pures de mycélium en conditions

axéniques et gnotoxéniques. Ann. Phytopathol. 5: 107-108.

CHEVALIER G., RIOUSSET L. et DUPRE C., 1985 - Taxonomie des truffes

européennes. /n: V. Gianinazzi-Pearson & S. Gianinazzi, Aspects physiologi-

ques et génétiques des mycorhizes. Paris, 1.N.R.A.: 631-63

COLLINGE D.B. and SLUSARENKO A.J., 1987 - Plant gene expression in

response to pathogens. Pl. Molec. Biol. 9: 349-410.

DAMERVAL C.,, LE GUILLOUX M., BLAISONNEAU J

1987 - A simplification of Heukeshoven and Derni

proteins. Electrophoresis 8: 158-159.

DEXHEIMER J., AUBERT-DUFRESNE M.P., GERARD J., LE TACON F. et

MOUSAIN D., 1986 - Etude de la localisation ultrastructurale des activités

phosphatasiques acides dans deux types d'ectomycorhizes: Pinus nigra nigricans

|. Hebeioma crustuliniforme et Pinus pinaster | Pisolithus tinctorius. Bull. Soc.

Bot. France, Lettres bot. 133: 343-352.

DUPRE C., CHEVALIER G., MORIZET J. et LEBLEVENEC L., 1982 - Influen-

ce de l'azote et du phosphore sur la mycorhization de Quercus pubescens par

Tuber melanosporum en conditions contrôlées. /n: S. & V. Gianinazzi, Les

Mycorhizes: biologie et utilisation. Paris, LN.R.A.: 147-153.

DUPRE C., CHEVALIER G. et BRANLARD G., 1985 - Caractérisation des Tuber

par électrophorése de leurs protéines. Jn: Compt. Rend. ler Colloque Natl. sur

les Technologies de purification des protéines (Paris, 1-3 octobre 1984). Paris,

D.P.LC. - LN.P.L.: 465-467.

GIANINAZZI S., 1985 - Genetic and molecular aspects of resistance induced by in-

fections or chemicals. /n: T. Kosuge & E.W. Nester, Plant-Microbe Interac-

tions. New-York, Macmillan Publ. Comp.: 312-342.

HEUKESHOVEN J. and DERNICK R., 1985 - Simplified method for silver

staining of proteins in polyacrylamid gels and the mecanism of silver staining.

Electrophoresis 6: 103-112.

HILBERT J.L., 1985 - Caractérisation par électrophorése bidimensionnelle des

protéines synthétisées durant la morphogénése de l'Ascomycéte Sphaerostilbe

repens. D.E.A. Université Nancy I, 60 p.

nd DE VIENNE D.,

silver staining of

Source - MNHN. Paris

250 C. DUPRE et G. CHEVALIER

HILBERT J.L. et MARTIN F., 1988 - Modification des profils polypeptidiques lors

de l'établissement de la symbiose ectomycorhizienne. Cryptogamie, Mycol. 9:

221-232.

LAEMMLI U.K., 1970 - Cleavage of structural proteins during the assembly of the

head of bacteriophage T4. Nature (London) 227: 680-685.

LEGOCKI P. and VERMA D.P.S., 1980 - Identification of “nodule-specific” host

proteins (nodulins) involved in the development of Rhizobium-lgume

symbiosis. Cell 20: 153-163.

MARTIN F., RAMSTEDT M. and SODERHALL K., 1987 - Carbon and nitrogen

metabolism in ectomycorrhizal fungi and ectomycorrhizas. Biochimie 69:

569-581.

MOUCHES DUTHIL P., POITOU N., DELMAS J. ct BOVE J.M., 1981 -

Caractérisation des espéces truffiéres par analyse de leurs protéines en gels de

polyacrylamide et application de ces techniques à la taxonomie des champi-

gnons. Mushroom Sci. XI: 819-831.

STOZYCKI P., KONIECZNY A. and LEGOCKI A.B., 1985 - Identification and

Synthesis in vitro of plant-specific proteins in yellow lupin root nodules. Acta

Biochim. Polon. 32: 21-34.

Source - MNHN. Paris

Cryptogamie, Mycol. 1991, 12 (4): 251-255 251

THE GENUS CHLAMYDOSPORIUM PEYRONEL

by Jean MOUCHACCA«* and Brian C. SUTTON**

* Laboratoire de Cryptogamie, Muséum National

d'Histoire Naturelle, 12 rue Buffon, F-75005 Paris

** International Mycological Institute, Ferry Lane,

Kew, Surrey TW9 3AF, UK

ABSTRACT - The type and only species of. Chlamydosporium Peyronel, C. submer-

sum Peyronel is shown to be the chlamydosporic state of Phoma eupyrena Sace. The

relationships of Chlamydosporium 10 Scytalidium Pesante and Pevronellaea Goida-

nich ex Goidanich are discussed and the nomenclatural implications described.

RÉSUMÉ - L'espèce-type du genre monospécifique Chlamydosporium, C. submersum

Peyronel, s'est révélée correspondre à la forme chlamydosporée de Phoma eupyrena

Sace. Les liens entre les genres Chlamydosporium, Scytalidium Pesante et

Peyronellaca Goidanich ex Goidanich sont analysés et les implications nomen-

claturales qui en découlent précisées.

KEY WORDS : Chlamydosporium, Scytalidium, Phoma eupyrena, taxonomy.

INTRODUCTION

For his degree in natural science, Peyronel (1913) presented a treatise

in which he described in general terms the main results of several cultural

experiments he made on “The atmospheric germs of fungi with Mycelia”.

The laboratory work was conducted at the Istituto Botanico (Padua) under

the guidance of Prof. P.A. Saccardo whose experience of microscopic fungi

benefited Peyronel. The thesis was accompanied by 90 plates of hand-col-

oured illustrations depicting elements of all species encountered. The printed

part comprised two sections, the second of which reported the diagnoses of

two new genera and thirty new species. Amongst these was Chlamydosporium

nov. gen. with a single species, C. submersum sp. nov., isolated from the at-

mosphere in a Larix wood in Riclaretto (Pinerolo), It. bor.

Chlamydosporium was introduced with the following generic diagnosis:

‘(Etym. a chlamydospora) Hyphis radiatim repentibus et in gelatina submersis,

ramosis, septatis, hyalinis, chlamydosporas fuscas irregulariter intercalares geren-

libus. Conidiophora genuina desunt. Genus paradoxum, sed cui adscribam ger

cio. The sole species and therefore the holotype, C. submersum, was de-

scribed as follows: Hyphis radiantibus, repentibus, in agaro omnino submersis

maculamque fuligineam. efformantibus, hyalinis, septatis, 7-I0um crassis, inter-

Source : MNHN, Paris

252 J. MOUCHACCA and B.C. SUTTON

dum gemmis lateralibus chlamydosporisque intercalaribus, fuligine

7-10um praeditis, ramosis; ramis tenuioribus, 2,5-4um crassis, hyalini:

chlamydosporis fuligineis, crassioribus, solitariis, binis vel ternis, oblongis vel

subglobosis, 6-10 x 3-6 crebre interruptis.”

The genus was not placed in any suprageneric rank and there is little

additional information on it or the single species since they were introduced.

Trotter in Saccardo (1931) repeated the diagnoses and assigned the genus to

the Deuteromycetae, Dematiaceae. Clements & Shear (1931) regarded the

genus as dubious but noted that they had not seen the original publication.

Carmichael et al. (1980), in a compilation of hyphomycete generic names,

repeated the brief comment by Clements & Shear (1931). In a list of hypho-

mycete genera recorded from soil but excluded from the group of acceptable

genera Barron (1968) assigned Chlamydosporium to the Mycelia Sterilia.

There have been no subsequent descriptive accounts of the taxa

MATERIALS AND METHODS

An isolate of C. submersum was retrieved from the oil collection in the

IMI Culture Collection. It was first accessed in June/July 1956 and received

from B. Peyronel. It was originally isolated by Anna Mosca from soil of a

Larix decidua planting in Italy in 1954. Records in IMI state that the isolate

was identified by Peyronel so the dried material filed in Herb. IMI is au-

thentic for the name C. submersum Peyronel. No material of the species is

preserved in Herb. PAD (Gola, 1930) and it is therefore presumed that there

Is no extant holotype. Although the dried IMI material and the culture in

the IMI Culture Collection have no formal nomenclatural standing, since

this culture was identified by the original author of the species as belonging

to that species it is here proposed to designate the dried sample IMI 62531

as neotype for the name Chlamydosporium submersum Peyronel.

After retrieval the isolate was grown on MA, PCA and PDA for 6

weeks at 25°C under alternating periods of 12h dark/I2h near UV. De-

scriptions of culture appearance are based on these treatments. Colour ter-

minology and standards are according to Rayner (1970).

RESULTS

Colony appearance

On PDA aerial mycelium abundant, compact and dense to the margin

but not fluffy or tufted, with contrasting grey olivaceous strands of hyphae,

finally colonies mouse grey to pale mouse grey with a central greyish sepia

area. There is some indistinct zonation, particularly with respect to conidio-

matal formation which is more abundant towards the margin where conidio-

mata are semi-immersed.

d On MA aerial mycelium abundant, compact and dense, isabelline but

slightly paler in the centre, thinning out towards the periphery where it fi-

nally becomes immersed to give colonies a wide sepia margin. There is al-

Source - MNHN, Paris

CHLAMYDOSPORIUM PEYRONEL 253

most no sign of zonation. Conidiomata are scattered in the aerial mycelium

except at the margin where they are superficial on the agar.

On PCA aerial mycelium sparse, thin, appressed to the surface of the

agar, relatively more abundant at the centre but very thin towards the mar-

gin, distinctly zonate and associated with regions of conidiomatal formation,

lavender grey in the centre, immersed mycelium fuscous black becoming

greyish sepia at the margin.

Morphology

Conidiomata, conidia and chlamydospores formed on all media.

Conidiomata pycnidial, single not aggregated, spherical to ampulliform, thin-

walled, pale brown, composed of textura angularis, 60-250um diam, with a

central, circular, sometimes slightly papillate ostiole up to 30um diam.

Conidiophores absent. Conidiogenous cells ampulliform to doliiform, hyaline,

4-7 x 4-5um, formed from the inner cells of the conidiomatal wall. Conidia

hyaline, ellipsoid to cylindrical, straight, frequently biguttulate, 3-5 x

22.5um (PDA and PCA), 3.5-6 x 2-3um (MA). Chlamydospores pale, medi-

um to dark brown, smooth, terminal or intercalary, sometimes catenate, 9-12

x 4-7um (intercalary), 7.5-11.5 x 4-7.5um (terminal).

DISCUSSION AND CONCLUSIONS

In all treatments and cultural conditions the isolates produced chlamy-

dospores and fertile pycnidial conidiomata. The morphology and dimensions

of the conidiomata, conidiogenous cells and conidia, and details of coni-

diogenesis clearly place the species in Phoma Sacc., according to the account

given by Sutton (1980). The number of Phoma species producing chlamydos-

pores in culture is few and this particular isolate keys out readily to P. eu-

pyrena Sacc. It agrees with the accounts by Dorenbosch (1970), Boerema

(1976) and Sutton (1980). Although the range in conidial size was mar-

ginally greater than reported by these authors, this taxonomic feature is very

dependent on culture conditions (Sutton, 1964) and is not regarded as an

impediment to the identification of this isolate as P. eupyrena. This species

1S reported by Sutton (1980) from 30 generic plant host substrata and from

soil, sewage, sand and veterinary sources, and is known from several lo-

cations in Europe. Some IMI records from soil are from coniferous planta-

tions in the UK. Dorenbosch (1970) regards it as one of the most common

soil-inhabiting species of the genus. The inclusion of this Italian isolate

therefore is in no way at variance with existing data on the species. Peyronel

(1913) described lateral chlamydospores as 5.5-10 x 7-104m and terminal and

intercalary ones as 6-10 x 3-6um. These approximate to the dimensions ob-

tained from the culture under study. The chlamydospores of P. eupyrena are

morphologically much simpler than those of some Phoma species which

have been placed in Peyronellaca Goidanich ex Goidanich. This genus was

based on Phoma-like pycnidial fungi which produce multicellular chlamydos-

pores with a superficial resemblance to the dictyospores found in the dema-

tiaceous hyphomyeete genera Alternaria Nees, Stemphylium Wallroth and Co-

Source - MNHN. Paris

254 J. MOUCHACCA and B.C. SUTTON

Fig.1. Phoma eupyrena (Chlamydosporium submersum) (IMI 62531). A, conidia from

pycnidia on PDA; B, conidia from pycnidia on MA; C, mycelial chlamydos-

pores on MA.

niothecium Corda. Boerema et al. (1965) reduced Peyronellaea to synonymy

with Phoma.

The binomial Chlamydosporiwm submersum provides a name for the

chlamydospore state of Phoma eupyrena but the implications of this conclu-

sion are rather wider-reaching. Sigler & Carmichael (1976) accepted the

name Scytalidium Pesante (1957) for several taxa without pycnidial states

and also for the chlamydospore state of Hendersonula toruloidea Nattrass. In

a revision of Hendersonula Sutton & Dyko (1989) adopted this conclusion al-

though they found it necessary to make nomenclatural changes resulting

from type studies. H. toruloidea became Nattrassia mangiferae (H. Sydow E

Sydow) Sutton & Dyko and Scytalidium dimidiatum (Penz.) Sutton & Dyko

was taken up for the chlamydospore state. The problem clearly is that Chla-

mydosporium Peyronel (1913) antedates Scytalidium (1957) and should cor-

rectly be taken up for the several species now formally ascribed to this gen-

us. Type studies in Scytalidium are beyond the scope of the present work

and formal placement of these taxa in Chlamydosporium must await a fur-

ther revision of Scytalidium species. An alternative, which would provide the

stability in nomenclature that should be strived for, is to propose conserva-

tion of Scytalidium over Chlamydosporium.

Source : MNHN. Paris

CHLAMYDOSPORIUM PEYRONEL 255

ACKNOWLEDGEMENTS

Dr Laura Zucconi is kindly acknowledged for the xerox copy of the article by

B. Peyronel. The authors are grateful to Mrs M. Zahoor for technical assistance.

REFERENCES

BARRON G.L., 1968 - The Genera of Hyphomycetes from Soil. Baltimore, Williams

& Wilkins Co., 364p.

BOEREMA G.H., 1976 - The Phoma species studied in culture by Dr. R.W.G. Den-

nis. Trans. Brit. Mycol. Soc. 67: 289-319.

BOEREMA G.H., DORENBOSCH M.M.J. and VAN KESTEREN H.A., 1965 -

Remarks on species of Phoma referred to Peyronellaca. Persoonia 4: 47-68.

CARMICHAEL J.W., KENDRICK W.B., CONNERS IL. and SIGLER L., 1980

- Genera of Hyphomycetes. Univ. Alberta Press, 386 p.

CLEMENTS F.E. and SHEAR C.L., 1931 - The Genera of Fungi. New York, Haf-

ner Press Ltd, 496 p.

DORENBOSCH M.M.J., 1970 - Key to nine ubiquitous soil-borne Phoma-like fun-

gi. Persoonia 6: 1-14.

GOLA G., 1930 - L’Erbario Micologico di P.A. Saccardo: Catologo. Atti Accad. Sci.

Venet. Trent. Istr. 21, Suppl. 1: 1-329.

PESANTE A., 1957 - Osservazioni su una carie del platano. Ann. Sperim. Agrar. 11

(suppl): CCLXI-CCLXV.

PEYRONEL B., 1913 - I Germi Atmosferici dei Funghi con Micelio. Contributo

all'acrospermologia degli Eumiceti. Univ. Padova, 27p.

RAYNER R.W., 1970 - A Mycological Colour Chart. Kew, IMI & Brit. Mycol.

Soc.

SACCARDO P.A., 1931 - Sylloge Fungorum 25: 757-758.

SIGLER L. and CARMICHAEL J.W., 1976 - Taxonomy of Malbranchea and some

other hyphomycetes with arthroconidia. Mycotaxon 4: 349-488.

SUTTON B.C., 1964 - Phoma and related genera. Trans. Brit. Mycol. Soc. 47: 497-

509.

SUTTON B.C., 1980 - The Coelomycetes. Kew, C.M.1., 696 p.

SUTTON B.C. and DYKO B.J., 1989 - Revision of Hendersonula. Mycol. Res. 93:

466-488.

Source : MNHN. Paris

Source - MNHN. Paris

Cryptogamie, Mycol. 1991, 12 (4): 257-291 257

ESTUDIOS MICOLOGICOS EN EL PARQUE NATURAL DE

MONFRAGUE (EXTREMADURA, ESPANA)

. LEOTIALES (= HELOTIALES auct.), 4ASCOMYCOTINA*

R. GALÁN

Departamento de Biología Vegetal (Botánica)

Universidad de Alcalá de Henares, Madrid, España.

RESUMEN - Se da cuenta de 29 especies de discomicetos inoperculados (princi-

palmente Leotiales) procedentes, en su mayoría, del Parque de Monfragüe y excep-

cionalmente de otras zonas limítrofes. Algunas representan nuevas citas para Espa-

Mollisia amenticola (Sacc.) Rehm, Pyrenopeziza muelleri-argoviensis (Rehm)

comb. nov. (= Niptera muelleri-argoviensis Rehm), Dasyscyphella montana Raitv.,

Hamatocanthoscypha laricionis (Vel.) Svrcek, Ciboria viridifusca (Fuck.) Höhn. y

Torrendiella ciliata Boud. Además, se propone Tapesia zarza Galán, como nueva es-

pecie para la ciencia, Se aportan descripciones, observaciones y/o fotografias de las

más interesantes.

ABSTRACT - Twenty nine species of inoperculate Discomycetes (mainly Leotiales)

from the Natural Park of Monfragüe and near areas are reported. Some of them are

recorded for the first time from Spain: Mollisia amenticola (Sacc.) Rehm, Pyrenopez-

iza muellero-argoviensis (Rehm) comb. nov. (= Niptera muellero-argoviensis R=hm),

Dasyscyphella montana Raitv., Hamatocanthoscypha laricionis (Vel.) Syrcek, Ciboria

viridifusca (Fuck.) Hóhn. and Torrendiella ciliata Boud. Besides, Tapesia zarza

Galán is described as a new species to science. Descriptions, observations and/or

photomicrographs show the characters of the more interesting taxa.

KEY WORDS : Leotiales, Inoperculate Discomycetes, Taxonomy, Chorology, Spain.

INTRODUCCION

El Parque Natural de Monfragúe, que cuenta actualmente con 17.852

hectáreas protegidas, se encuentra en torno al caudaloso rio Tajo, en su en-

cuentro con el Tiétar (provincia de Cáceres, Comunidad Autónoma de Ex-

tremadura). La continentalidad del clima mediterráneo se dulcifica aquí no

sólamente por la importante red fluvial que lo recorre, sino por la influencia

del cercano Atlántico.

*: Comunicación presentada en la “V Reunión Conjunta de Micología”, Barcelona

(1-3 de Octubre, 1990).

Source : MNHN, Paris

258 R. GALÁN

La vegetación, asentada sobre terrenos ácidos, es la típica mediterránea

y cuenta aquí con uno de sus más privilegiados ejemplos, dignos de un es-

fuerzo conservacionista. Aquella se hace dense, - incluso a veces impene-

trable -, y tapiza agrestes cimas que apenas superan los 500m de altitud, asi

como multitud de valles recorridos por infinidad de arroyos (Rodriguez J.L.,

1985).

Este parque ya era internacionalmente conocido por su importante ri-

queza faunistica (principalmente ornitológica), pero sólo muy recientemente

se viene prestando interés al componente micológico de la zona:

Aphyllophorales (Manjon et al., 1989, 1990; Blanco et al., 1989; Moreno et

al., 1990a), Agaricales (Moreno & Esteve-Raventos, 1988a, b: Moreno et al.,

1990b,c), Gasterales (Calonge, 1990), Dothideales (Barrasa £ Checa, 1991),

basidiomicetes y ascomicetes hipogeos (Moreno et al, en prensa) y

mixomicetes (Moreno et al., 1990d), son algunos de los grupos estudiados.

Por consiguiente, los micromicetes - y particularmente los ascomicetes

~ de este área y, por extensión, de Extremadura están muy poco estudiados,

hallándose citas dispersas en artículos de indule divulgativa (p.ej: Gil &

Die, 1989).

En esta oportunidad, se presentan los resultados obtenidos despuės de

numerosas visitas al parque, - la primera en el año 1987 -, con vistas a cono-

cer algunos de los innumerables discomicetes inoperculados (principalmente

Helotiales auct.) que habitan en los tipicos ecosistemas vegetales de la zona

en cuestión: alcornocales (Quercus suber), encinares (Q. ilex subsp. ballota

= Q. rotundifolia), madroñeras (Arbutus unedo), alisedas (Alnus glutinosa),

castañares (Castanea sativa), asi como pinares (Pinus sylvestris, P. pinaster,

P. pinea) y eucaliptales (Eucalyptus globulus, E. camaldulensis) de repo-

blación, además de las comunidades arbustivas que las acompañan o susti-

tuyen y que caracterizan al auténtico bosque y matorral mediterráneos.

Algtinos pocos especimenes (RG 6583, 6532, 6585, 6579, 6580 £ 6581)

no han sido incluidos en el presente trabajo por estar siendo objeto de un

más detenido estudio - en colaboración con los Dres. R.P. Korf, W.R.

Arendholz y A. Raitviir -, para dilucidar su definitiva clasificación.

MATERIAL Y METODO

Las preparaciones microscópicas de rutina se han observado en un

microscopio binocular marca Zeiss Jena, modelo Laboval 2 (+ 160x-1600x),

de óptica planacromática, con contraste de fases incorporado. Las

macrofotografías han sido realizadas en un microscopio binocular Nikon,

modelo Optiphot, equipado con sistema automático de fotografía, contraste

de fases, y contraste diferencial “Nomarski”.

La mayoría de las preparaciones microscópicas fueron efectuadas utili-

zando la técnica del “squash”, habiendo sido rehidratadas inicialmente en

KOH (5%), para después ser embebidas en reactivo de Melzer o en Azul de

Lactofenol (según los casos). Los montajes en agua fueron empleados excep-

Source : MNHN, Paris

PARQUE NATURAL DE MONFRAGUE. V. 259

cionalmente para comprobar la presencia de masas resinosas o cristalinas en

la superficie de los pelos de ciertos hialoscifáceos.

Las descripciones que se acompañan se han basado en nuestras propias

observaciones. Sólo se incluye el protólogo completo de aquellas especies

más desconocidas en España, incluyendo algunos de los sinónimos más re-

presentativos.

El grueso del material estudiado se encuentra incluido en el herbario

particular del autor (RG), depositado en el departamento de Biología Vege-

tal (Botánica) de la Universidad de Alcalá de Henares, listo para cualquier

solicitud de préstamo que pudiera llegar. Además, se da cuenta de colec-

ciones procedentes del parque, incluidas en el herbario de Mr. J.T. Palmer

(JTP), - Sutton Weaver, Inglaterra -, recogidas e identificadas por él mismo.

LOCALIDADES ESTUDIADAS

el mapa adjunto se indican los límites naturales del parque, asi

como la localización geográfica de las zonas prospectadas. Hay que destacar

que no se han despreciado los especimenes procedentes de otros enclaves

más o menos próximos y que, de igual manera, se sitúan en el mapa.

Parque de Monfragüe:

Loc. l: Poblado de los Saltos de Torrejón

Pinares de repoblación

Loc. 2: Puente sobre el arroyo Barbaón

Aliseda: Scrophulario scorodoniae-Alneto glutinosae

Loc. 3: Frente al cerro La Cantera, próximo a la Bazagona

Alcornocal adehesado: Sanguisorbo agrimonioidis-Querceto suberis

Loc. 4: Sierra de la Umbria

Madrofal: Phyllireo angustifoliae-Arbutetum unedonis

Loc. 5: Inmediaciones a Villarreal de San Carlos

Eucaliptal de repoblación

Loc. 6: La Bazagona

Pinar de repoblación

Loc. 7: Arroyo Malvecino, bajo el Puerto del Fresno

Bosque mixto (eucaliptos y encinas)

Otras localizaciones proximas:

Loc. 8: Provincia de Cáceres, localidad sin especificar

Jaral: Genisto hirsutae-Cisteto ladaniferi

Loc. 9: Puerto de los Castaños (Cáceres)

Eucaliptal de repoblación

Sierra de Bernabé del Piornal de Tormantós (Cáceres)

Castañares de repoblación

Loc. 11: Arroyo el Llanillo, Hervás (Cáceres)

Castañares de repoblación

Source : MNHN, Paris

260 R. GALÁN

Parque Natural de Monfragüe (Cáceres)

Source : MNHN, Paris

PARQUE NATURAL DE MONFRAGUE. V. 261

CATALOGO DE ESPECIES

Familia Geoglossaceae Cord.

Geoglossum cookeianum Nannf. 1942

G. glabrum Pers.: Fr. 1821 s. auct. plur.

= G. ophioglossoides (L.) Sace. 1889

Terricola, en humus de Quercus ilex subsp. ballota y Cistus, Loc. 8,

1-1987, RG 6588.

Observaciones. - El taxon en cuestión presenta problemas nomencla-

turales que, una vez más, han sido recientemente puestas de manifiesto por

Spooner (1987), quien se inclina por considerar el nombre G. glabrum como

ambiguo y, por tanto, a rechazar en favor de G. cookeianum.

Sus características diagnósticas más relevantes se basan en la

morfología de las paráfisis, de extremos “caprichosos” (capitadas o no, fuli-

ginosas, débilmente curvadas y patentemente adheridas en sus ápices), en el

tamaño (55-80 x 6-7,64m), número de septos (regularmente 7) y morfología

(claviformes o cilindrico-claviformes) de las ascósporas (Figs. 1-5).

La distribución de la especie en España se circunscribe a Barcelona

(c.f. Sierra, 1987), Guadalajara (Galan, 1985), Mallorca (Siquier E

Constantino, 1982) y ahora Caceres; por otra parte Unamuno (1941) consig-

na Citas previas de la especie para Portugal.

Familia Dermateaceae Fr.

Mollisia amenticola (Sacc.) Rehm 1891

Sobre viejos amentos femeninos de Alnus glutinosa, Loc. 2, 15-XI-1986,

RG 6529.

Descripción. - Apotecios acopados, sésiles-subsésiles, exteriormente

pardo-grisáceos y cinéreos en el márgen (en donde se observan minúsculos

pelos). Disco concoloro al receptáculo u ocráceo en seco, de 0,2-0,8mm de

diámetro.

Ectal excipulo de “textura globulosa”: células pardo amarillentas, de

6,2-12, 44m en diám., proyectandose al exterior en auténticos pelos margi-

nales. Ascos octospóricos, cortamente pedicelados, débilmente amiloides, de

44-54 x 5-6um. Paráfisis mazudas (x 2,5-3)um, ramificadas en la base y que

apenas superan el nivel de los ascos. Áscósporas oblicuamente uniseriadas o

irregularmente biseriadas, unicelulares, elipsoides, rectas o más comúnmente

alantoides, de (6,2-)7,4-8(-9,3) x 1,8-2,2(-2,4)um.

Observaciones. - En idéntico hábitat y en la misma localidad, hemos

detectado la presencia de Ciboria viridifusca y " Pezizella" alniella, de las que

se diferencia macroscópicamente por el caracter (sub)sésil de las fructifi-

caciones, además del color pardo grisáceo del receptáculo, cinéreo y peloso

en los márgenes. Aunque Mollisia amenticola figura consignada en los catá-

Source : MNHN, Paris

262 R. GALÁN

Figs. 1-5: Geoglossum cookeianum. - Figs. 1

variabilidad de los extremos de las paráfisis.

scósporas; Figs. 3-5: muestra de la

Source : MNHN, Paris

PARQUE NATURAL DE MONFRAGUE. V. 263

logos micológicos de gran parte de los paises europeos (p.ej: Matheis, 1976;

Breitenbach & Kranzlin, 1981; Baral & Krieglsteiner, 1985...), es la primera

ocasión en que se cita de España.

Mollisia melaleuca (Fr.) Sacc. 1889

?= Tapesia strobilicola (Rehm) Sacc. 1889

?= Mollisia fallax (Desm.) Gill. 1879

En la superficie de las escamas de estróbilos de Pinus pinaster, convi-

viendo con “Lasiostictis” fimbriata, Loc. 1, 15-X1-1989, RG 7578.

Descripción. - Apotecios discoides, anchamente sésiles, de 0,5-1,2mm

de diám., soportados por un subiculo aracnoideo, pardo y patente. Recep-

táculo tomentoso, pardo oscuro; disco crema amarillento (en seco) y márgen

involuto.

Ectal excipulo de “textura globulosa”: de células con gruesas paredes,

pardas, que miden 6-124m de diam. y se prolongan en células (de paredes

más delgadas y menos pigmentadas) claviformes en los márgenes. Hifas del

subículo más o menos flexuosas, ramificadas, pardas, de paredes gruesas y

lisas, que miden 3-7,5um de diam. Ascos octospóricos, débilmente

amiloides, cilindrico-claviformes, pedicelados, de 53-62 x Sum. Paráfisis ci-

lindricas, obtusas (x 3-3,74m). Ascósporas unicelulares, inequiláteras, excep-

cionalmente rectas y más comúnmente alantoides (e incluso sigmoides), de

morfología (eliptico-fusiformes, claviformes..) y magnitudes (74-ll x

2-24um) muy oscilantes.

Observaciones. - El táxon clasicamente conocido como “Mollisia”

melaleuca, que ya fue ampliamente tratado por mi mismo (Galán, 1985), es

una especie banal, de la que sólamente queremos destacar en esta oportu-

nidad la inclusión de un nuevo taxon en la larga lista de sinónimos; se trata

de “Peziza” fallax Desm. (1845), un hongo relativamente poco mencionado

en la literatura micológica y que fue ampliamente redescrito por Le Gal &

Mangenot (1960) y, en menor medida, por Thind & Singh (1970) y Thind &

Sharma (1983), entre otros.

Le Gal & Mangenot (op. cit.) tuvieron la oportunidad de estudiar el

material tipo de Desmaziéres (”... sur cónes et rameaux secs de Pinus

sylvestris”) y compararlo con otras colecciones halladas sobre madera de

angiospermas. Años más tarde, Le Gal £ Mangenot (1966) designan y des-

criben un lectótipo de Mollisia melaleuca ("se rencontre aussi bien sur

Cornus que sur Cerasus, sur Hedera que sur Ilex etc...) y que a nuestro jui-

cio no difiere básicamente de la descripción de M. fallax. Además, es curio-

so constatar que en ambos trabajos tratan de diferenciar las especies de refe-

rencia con M. discolor, sin que en ningún caso comparen las dos primeras

entre sí (sic).

Por lo demás, resulta también de interés destacar como los hongos

mollisiáceos hallados sobre estr”bilos de coníferas son, unas veces, identifi-

cados como Tapesia strobilicola y otras como Mollisia fallax, sin que en un

mismo artículo aparezcan comentados ambos táxones. Sólo Baral &

Source- MNHN, Paris

264 R. GALÁN

Krieglsteiner (1985), al citar esta última indican "? Unterschied zu T.

strobilicola".

No nos cabe ninguna duda que “Peziza” melaleuca Fr. (1822) es un cla-

ro representante del género Tapesia (c.f. Aebi, 1972), si bien la propuesta de

esta autora, en el sentido de sinonimizar ambos géneros (en favor de este úl-

timo), no ha tenido muchos adeptos y posiblemente el nombre Mollisia pase

à ser nomina conservanda al cabo de algunos aiios.

A los datos corológicos referidos a España, apuntados por Galán

(1985) hay que anadir la cita de Garcia-Gonzales ( 1987) para Navarra.

Pyrenopeziza muelleri-argoviensis (Rehm) Galán, comb. nov.

Niptera muelleri-argoviensis Rehm, Ann. Mycol. 4: 340 (1906).

Sobre hojas muertas de Quercus ilex subsp. ballota, emergiendo del

envés de la hoja pero no de los nervios: Loc. 2, 15-X1-1989, RG 6552; Loc.

3, 16-X1-1989, RG 6567, 6568 p.p.

Descripción. - Apotecios gregarios, superficiales, discoides, anchamente

sésiles, de 0,2-0,5(-0,65)]mm de diámetro. Disco + convexo, translúcido,

cinéreo (algo más blanquecino en el centro) y crema en seco. Receptáculo

pardo, tomentoso, con cortos “pelos” que se agregan - en el márgen - por

sus extremos en grupos y le confieren un aspecto denticulado.

Ectal excipulo de “textura globulosa”: de células más pardas cuanto

más externas, de 10-14jum. “Pelos” cilindricos a claviformes, pardos, de 15-45

x 6-lOjm, unicelulares a pluriseptados (0-4 tabiques), frecuentemente for-

mados por células + arrosariadas, con paredes delgadas y lisas. Ascos

octospóricos, cilindrico-claviformes, indistintamente pedicelados o no,

usualmente curvos en la base y de extremos tronco-cónicos y fuertemente

amiloides, de 31-43(-50) x 5-6,2um. Paráfisis cilindricas a claviformes (x

25-34um en la parte más ancha), de extremos obtusos, simples o ramifi-

cadas en la base y que penas superan el nivel de los ascos. Ascósporas fusi-

formes, permanentemente uniseptadas (incluso dentro del asco), rectas o

débilmente arqueadas, de (8-)9,3-11,8(-12,4) x 1,5-2um (Figs. 6-11).

Observaciones. - Los caracteres más sobresalientes de nuestros ejem-

plares son, - desde el punto de vista macroscópico -, su hábitat foliicola,

además del caracter “anchamente sésil” y manifiestamente peloso de las fruc-

tificaciones; los prominentes pelos pluricelulares y emergentes, los ascos vi-

vamente J+ y las ascósporas constantemente uniseptadas, resultan las carac-

terísticas microscópicas más relevantes.

La especie Pyrenopeziza nervicola (Desm.) Boud. - varias veces citada en

España bajo esta u otras denominaciones: Mollisia nervicola (Desm.) Gill.,

Pyrenopeziza foliicola (Karst.) Sacc. var. quercina Sacc. y Mollisia rabenhorstii

(Auersw.) Rehm - es ciertamente un taxon próximo al que ahora tratamos,

por lo que es probable que ambas especies se hayan confundido o mezclado

en repetidas ocasiones; siendo el caracter esporal (forma, tamaño y

presencia/ausencia de septos) el más evidente para su separación. Aún asi,

para valorar este y otros caracteres diferenciales, solicitamos al Dr. Heinz

Source - MNHN, Paris

PARQUE NATURAL DE MONFRAGUE. V. 265

TEESE d

Figs. 6-11: Pyrenopeziza muelleri-argoviensis. - Figs. 6-8: Pelos marginales; Figs.

9-10: Ascos y ascósporas (nótese el septo esporal); Fig. 11: Ascos y paráfisis

(nótese la anchura relativa de ambos).

Source - MNHN. Paris

266 R. GALÁN

Fig. 12-14: Pyrenopeziza nervicola. - 12: Células del excípulo ectal. Figs. 13-14: Pelos

del receptáculo; Fig. 15: Hifa del subículo; Figs. 16-17: Himenio.

Source : MNHN, Paris

PARQUE NATURAL DE MONFRAGUE. V. 267

Engel (Germany) una muestra de lo que en Europa se viene identificando

como Pyrenopeziza nervicola. De esta manera nos fue remitida una exsiccata

(Herb.: MTB 6034 = RG 6590) que contenia un fragmento de hoja de

Quercus rubra con algunas fructificaciones de P. nervicola. Tras confirmar la

identificación original (Figs. 12-17), procedimos a compararla con el mate-

rial cacereño, resultando lo siguiente:

“Niptera” muellerizargoviensis no emerge de ningún subiculo y sus fruc-

tificaciones se insertan sobre una base más ancha. Además, los “pelos” mar-

ginales emergen en mayor medida, lo que confiere al apotecio un aspecto

denticulado que no se manifiesta asi en Pyrenopeziza nervicola.

Microscópicamente, se confirma la mayor longitud de tales “pelos” (en el

primero de los casos); los ascos son manifiestamente amiloides (caracter este

no observado en P. nervicola); las paráfisis tienden a hacerse claviformes y

no sublageniformes (como sucede en P, nervicola) y, por último, las esporas

son siempre fusiformes, uniseptadas y mayores (8-124 x 1,5-2um), mientras

que en P. nervicola son cilindricas a elipsoides, permanentemente

unicelulares y miden: 6-10 x 1,5-2(-2,5)um (cf. Grelet, 1932-1959; Hutter,

1958; Engel et al., 1982...

En cuanto al género Pyrenopeziza Fuck., tal y como ha puesto recien-

temente de manifiesto Muller (1989) - recogiendo opiniones de otros autores

~, posee limites ambiguos con otros géneros de Dermateaceae (ie: Mollisia-

Tapesia, Niptera, Beloniopsis-Pirottaea...); por consiguiente, el nümero de es-

pecies correctamente en él incluidas es ambiguo. De acuerdo a Nannfeldt

(1986) Niptera Fr. debe ser reconocido como un género distinto a cualquier

otro de los antes citados (incluso de Belonopsis) por el particular modo de

vida de sus especies -restos de plantas acuaticas (Carex, Phragmites, Juncus,

Scirpus,... etc.) - y por sus esporas - ”...broadly ellipsoid to elongate, always

at least I-septate, commonly more" (Dennis, 1978) -, además de la inexisten-

cia de pelos libres en los margenes, asi como de cristales de Oxalato calcico

sobre los apotecios (comunes en Belonopsis s.s.).

“Niptera” muellerizargoviensis Rehm, originariamente descrita de Fran-

cia, fue citada y redescrita - y con ello rescatada del olvido -, por Graddon

(1976), con material de las Islas Británicas, siendo estas las dos únicas refe-

rencias que conocemos sobre su distribución mundial.

Tapesia zarza Galán, sp. nov.

Apothecia gregaria, discoidea, sessilia, basi in subiculo arachnoideo, fusco

inmersa. Receptaculum pruinosum, fuscum; margine clariori, griseum, fimbriata.

Discus plano-concavus, usque Imm diam., pallide luteis. Excipulum Ectale ex

textura globulosa, cellulis 6-13um diam., brunneis, muris crassis, ad marginum

In. pilis septatis, cylindrici vel clavatis ad 25um longis excurrentibus. Medullare

Excipulum ex textura intrincata vel textura epidermoidea. Asci octospori,

cylindro-clavati, apicaliter iodo caerulescenti, 43-56 x 6,8-8um. Paraphyses ad

basim ramosi, cylindricae, hyalini, 1,8-34m latae, ascos subaequantes.

Ascosporae 11-16 x 2,5-3,7um, hyalinae, ellipsoideae, unicellulatae vel

uniseptatae.

Source : MNHN, Paris

268 R. GALÁN

Habitat: In caulibus emortuis Rubi ulmifolii; In Sierra de la Umbria, Par-

que Natural de Monfragüe, in provincia Caceres, in Hispania; Legit R. Galan

(14-X1-1989); Holotypus: in RG 6554,

Sobre ramas caidas de Rubus ulmifolius Schott, Loc. 4, 14-X1-1989, RG

6554 (holótipo).

Descripción. - Apotecios gregarios, discoides, anchamente sésiles, que

muestran una reacción ionomidótico positiva (pardo-amarillenta), sopor-

tados por un subiculo aracnoide, pardo amarillento. Receptáculo igualmente

pardo, pruinoso, sensiblemente fimbriato y cinéreo en los márgenes

(involutos). Disco crema amarillento, de hasta Imm de diámetro.

Hifas del subículo pardas, delgadas (x 3-4um), pluriseptadas. Ectal

excipulo de “textura globosa” (a “textura prismática” en las inmediaciones al

márgen), cuyas células (de 6-13um de diámetro) presentan paredes + engro-

sadas, pardo oscuras, y se prolongan hacia el márgen en pelos emergentes,

también pardos, cilíndricos a cilindrico-claviformes (i.e.: 25 x 6,24m),

pluricelulares, de paredes delgadas. Excípulo medular de “textura intrincata-

epidermoidea”. Ascos octosp'ricos, cilindrico-claviformes, indistintamente

pedicelados o no, de extremos vivamente amiloides, de 43-56 x 6,8-Sum.

Paráfisis no superantes, cilindricas (x 1.8-3um), ramificadas en la base.

Ascósporas unicelulares a excepcionalmente uniseptadas, elipsoides, rectas,

ligeramente alantoides e incluso sigmoides, de magnitudes muy oscilantes:

(11-)12,4-15(-16) x 2,5-3,1(-3,7)um. (Figs. 18-25).

Observaciones. - Los hongos “mollisiáceos” que viven sobre tallos de

Rubus, son relativamente frecuentes y bien conocidos desde antiguo, a los

que Gremmen (1954) les dedicó un artículo monográfico en el que trató

cuatro especies: Mollisia rubi (Fr.) Karst. (= Pyrenopeziza rubi (Fr.) Rehm),

M. escharoces (Berk. & Br.) Gremmen (= P. escharodes (Berk. & Br.)

Rehm), M. clavata Gremmen y M. revincta (Karst.) Rehm. También mencio-

nó Pyrenopeziza rubicola Losa España, descrita originariamente en 1949, con

esporas de 5-6 x 2-3um.

Anos después se han descrito otros dos hongos con idéntico substrato:

Bulbomollisia stromatica (Graddon) Graddon (= “Mollisia” stromatica) y B.

radiata Graddon (c.f. Graddon, 1984).

Tapesia zarza es distinta a todas ellas por sus esporas conside-

rablemente mayores.

Adicionalmente Tapesia lividofusca (Fr.) Rehm, T. rosae (Pers.) Fuck. y

Mollisia dilutella (Fr.) Gill. (= Niptera dilutella (Fr.) Rehm) pueden compar-

tir, a veces, el mismo hábitat. De estas últimas, sólo la primera ha sido des-

crita con ascósporas de magnitudes "comparables" (ie: 4-14 x 2-3um -

Aebi, 1972 - o de (7-)10-11(-16,5) x 1,3-2um - Le Gal & Mangenot, 1960 -),

aunque constantemente unicellulares). No obstante, la constitución del re-

ceptáculo es distinta, particularmente en lo que respecta a la carencia de pe-

los emergentes (incluso en los márgenes de las fructificaciones).

Por consiguiente los caracteres más representativos de esta nueva espe-

cie que ahora se propone son: el substrato, la presencia de subículo, la parti-

Source : MNHN, Paris

PARQUE NATURAL DE MONFRAGUE. V. 269

marginales; Figs. 21-24: Asco conteniendo esporas, y paráfisis (marcada con la

flecha); Fig. 25: Ascósporas liberadas (nótese la ocasional presencia de un

septo).

Source : MNHN, Paris

270 R. GALÁN

cular constitución del ectal excipulo y la considerable magnitud y ocasional

septación de las ascósporas.

Familia Hyaloscyphaceae Nannf.

Arachnopeziza aurelia (Pers.: Fr.) Fuck. 1870

Restos diversos (ritodoma, hojas...) de Eucalyptus camaldulensis, Loc. 5,

15-X1-1986, RG 6566.

Observaciones. - Macroscópicamente se caracteriza por sus fructifi-

caciones discoides, sésiles, de diámetro inferior a Imm, pálido amarillentas

en su totalidad, que se elevan de un subiculo aracnoide patente, blanco y/o

amarillo-anaranjado en seco. Los flancos y márgenes de las fructificaciones

aparecen ornamentados por largos pelos (> 150um), de color “azafrán”,

poco densos y cementados por grupos en sus extremos, de manera que en

un examen acelerado pueden dar la falsa aparencia de setas. Desde el punto

de vista microscópico, son de destacar sus ascósporas elipsoides a cilindrico-

claviformes, indistintamente rectas o arqueadas, inicialmente unicelulares o

monoseptadas pero finalmente provistas de tres tabiques trasversos, que pre-

sentan uno o dos apéndices gelatinosos en los extremos y miden: (11-)

13-16(-18,6) x 3-3,4um. Esas prolongaciones polares de las esporas son ver-

daderamente difíciles de detectar, incluso en contraste de fases y a 1600 au-

mentos, hecho este al cual también se refirió Korf (1951). No obstante, es

más fácil evidenciarlas porque, a veces, las esporas se hallan "inexpli-

cablemente” próximas a ciertas estructuras, sin que las corrientes del medio

líquido donde se encuentran inmersas consiguan arrastrarlas.

Esta especie ha sido citada con anterioridad de las siguientes provincias

españolas: La Coruña (Unamuno, 1941), Cádiz (Bertault, 1974), Barcelona

(Rodriguez N. B., 1985; Sierra, 1987), Albacete (Torres, 1986; Torres et al.,

1988), Gerona (Sierra, 1987) y Tarragona (Sierra £ Cambra, 1987). Asi mis.

mo, Niessl (1884) primero y después Unamuno (op. cit.) mencionan la es-

pecie en diferentes localidades de Portugal. Por otra parte Bertault (op. cit.)

destaca su frecuente aparición en Marruecos, sobre restos de Eucalyptus y

Quercus suber; y nos remitidos a Korf (op. cit.) si se pretende un estudio

corológico exhaustivo.

Su identificación no ofrece ninguna dificultad y, junto a Arachnopeziza

obtusipila y A. aurata, constituyen las tres especies del género citadas en Es-

paña hasta el momento.

Arachnopeziza obtusipila Grelet 1922

= A. zonulata (Rolland) Boud. 1907 s. Korf 1981

Sobre estróbilos de Pimus pinaster, posiblemente conviviendo con

"Lasiostictis" fimbriata, Loc. 9, 19-1-1990, RG 6561.

Observaciones. - Este taxon fue descrito y ampliamente comentado en

una ocasión anterior (Galán, 1985). No obstante, resulta de interés aportar

Source : MNHN, Paris

PARQUE NATURAL DE MONFRAGUE. V. 271

LLG AD

Figs. 26-29: Arachnopeziza obtusipila. - Fig. 26: Fragmento de un apotecio visto

desde abajo; Fig. 27: Detalle del ectal excípulo; Fig. 28: Asco conteniendo

esporas; Fig. 29: Pelos del receptáculo.

Source : MNHN, Paris

272 R. GALÁN

las primeras fotografías en las que se muestran algunos caracteres microscó-

picos de la especie (Figs. 26-29).

A las provincias donde se hallaba repartido (op. cit.) hay que sumar

Albacete (Torres, 1986), Barcelona y Gerona (Sierra, 1987), además de

Cáceres.

Calycellina albida (Grelet & Crozals) Galan & Moreno 1985

Hojas muertas de Quercus ilex subsp. ballota: Loc. 4, 14-X1-1986, RG

6544; Ibidem, 14-X1-1989, RG 6543; Loc. 6, 18-1-1990, RG 6559.

Observaciones. - Como ya señalaron Galán £ Moreno (1985) es una

especie que acompaña fiélmente a la hojarasca de los encinares españoles y,

por extensión, mediterráneos. Torres (1986) también lo cita sobre hojas de

Quercus coccifera. En cuanto a su distribución europea conocida cabe seña-

lar que, a parte de Francia y España, también se halla en Checoslovaquia

(inéd.). Concretamente, cuando años atrás estudiaba el lectótipo de

"Lachnum" claviculatum — Vel, aparecieron entremezclados numerosos

apotecios de la especie en cuestión que en nada diferían al tipo de

"Belonidium" albidum Grelet & Crozals, a pesar de las fructificaciones algo

inmaduras y las ascósporas consecuentemente unicelulares y permanen-

temente encerradas en los ascos.

“Cistella” acuum (Alb. & Schw.: Fr.) Svrcek 1959

Peziza acumm Alb. & Schw.: Fr. 1822

Discocistella acuum (A. & S.: Fr.) Svrcek 1962

Clavidisculum acuum (A. & S.: Fr.) Kirschst. 1938

Dasyscyphus acuum (A. & S.: Fr.) Sacc. 1889

Sobre aciculas caidas y semienterradas de Pinus pinaster, Loc. 6,

20-1-1990, RG 6556 (Dupl. in herb. W.R. Arendholz).

Descripción. - Apotecios acopados, de 0,2-0,8mm de diámetro, cor-

tamente pedicelados - la longitud del pie es inferior o excepcionalmente

igual al diámetro del disco -, completamente blancos y exteriormente ador-

nados de cortos pelos también blancos.

Ectal excipulo de “textura prismática” (de células hialinas, + 11 x

454m). Pelos unicelulares o bicelulares, hialinos, subcilindricos o

claviformes, de paredes delgadas, exteriormente granulosas - ya sea en toda

su longitud o sólamente en la porción apical -, de 10-15 x 4-Sum. Ascos J+,

octospóricos, cilindrico-claviformes, indistintamente pedicelados o no, de

30-39 x 4-Sum. Paráfisis filiformes, obtusas (x 24m), que no superan a los

ascos. Ascósporas unicelulares, elípticas o más raramente pediformes, de

4,3-5 x 1,8-2um. (Figs. 30-36).

Observaciones. - El género Cistella (= Clavidisculum Kirschst. =

Discocistella Syrcek), tipificado con "Peziza" dentata (Pers.: Fr) Quél, se

aplica a los hialoscifáceos con pelos cortos, obtusos, hialinos, usualmente

claviformes y sólo apicalmente granulosos (c.f. Nannfeldt, 1932; Dennis,

1949; Raitviir, 1970, 1978; Spooner, 1987...).

Source - MNHN. Paris

PARQUE NATURAL DE MONFRAGUE. V. 273

“istella” acuum. - Fig. 30: Himenio desorganizado y sus constituyentes;

Fi 3rupo de ascósporas libres; Figs. 32-34: Pelos del receptáculo (nótese

la superficie granulada de los mismos); Fig. 35: Ascos conteniendo esporas.

Source : MNHN, Paris

274 R. GALÁN

"Peziza" acuum posee fructificaciones macroscópicamente indistin-

guibles a las de otras especies con idéntico substrato (c.f. Arendholz &

Raitviir, 1988), como es el caso de Hamatocanthoscypha laricionis. Sin em-

bargo, desde el punto de vista microscópico, las características de los pelos

son diagnósticas.

No obstante, en la muestra estudiada hemos apreciado la enorme fre-

cuencia de pelos - unicelulares o bicelulares - enteramente granulados y la

escasa proporción de aquellos “unicamente granulosos en el ápice” (si bien

tal ornamentación afectaba a más de 1/4 de la longitud total de los mis-

mos). Esas mismas observaciones han sido previamente apuntadas por

Arendholz & Raitviir (op. cit. : 356) en especimenes europeos y, de alguna

manera también, por Dennis (1949: 34) o Breitenbach £ Kranzlin (1981:

184) quienes, por este motivo encuadran el taxon en el género Daxyscyphus

(actualmente Lachnum). Por otra parte Korf (1973) consideró Cistella como

sinónimo a este último, mientras que Spooner (1987) insiste en la necesidad

de restringir el género Cistella para aquellos táxones “with short, thin-walled,

0-2 septate, apically granulate, frequently clavate hairs as generically distinct

from Lachnum, in which the hairs are wholly granulate, cylindric or tapered,

usually comparatively long and multiseptate." Por consiguiente la correcta

ubicación de esta especie en uno u otro género es aün incierta.

La identificación de la muestra cacerena ha sido confirmada por el Dr.

W.R. Arendhoz ('resembles Cistella acuum..."), quien además nos puso en

alerta sobre un caracter que no estaba en concordancia con esta especie:

“The ascospores are + thick-walled (or with a slimy envelope) and hang

together outside the ascus” (Arenholz, com. pers.). Desafortunadamente no

pudo evidenciar este caracter en todos los especímenes estudiados, aunque

los sumergió en diferentes medios. Efectivamente, hemos comprobado como.

las jóvenes esporas (que aún se hallan dentro de los ascos) presentan una en-

vuelta de apariencia gelificada alrededor de la pared esporal, posiblemente

como consecuencia del particular mecanismo de diferenci n de aquellas.

Sin embargo, las ascósporas maduras no muestran esa vaina o, desde luego,

pasa completamente desapercibida incluso a grandes aumentos.

La cita que para esta especie señalan Honrubia et al. (1983), no se co-

rresponde con el taxon en cuestión, sino con una especie de

Hamatocanthoscypha que sera estudiada en breve (Herb. MHG 943). Más

recientemente Sierra £ Cambra (1987) han citado una vez más este hongo,

de la provincia de Tarragona; siendo estas las únicas referencias corológicas

de que disponemos en España. Por lo demás, en el resto de Europa sí se en-

cuentra ampliamente repartido

Dasyscyphella montana Raity. 1977

Tocón de Castanea sativa, Loc. 11, 2-V-1989, RG 6563.

Observaciones. - Los especimenes estudiados difieren del material tipo

(cf. Raitviir, 1977) por el hecho de que la porción lisa de los pelos afecta no

sólo a la célula apical de los mismos, sino también a la inmediatamente in-

ferior (Figs. 36-39); además de poseer ascósporas algo menores (6-8 x

1,8-2um) y constantemente claviformes. No obstante lo anterior, segün

Source : MNHN, Paris.

PARQUE NATURAL DE MONFRAGUE. V. 275

Figs. 36-39: Dasyscyphella montana. - Figs. 36-37: Pelos del receptáculo; Fig. 38: As-

cos y paráfisis (marcadas); Fig. 39: Extremo liso y claviforme de los pelos del

receptáculo.

Source : MNHN, Paris

276 R. GALÁN

Raitviir (com. pers.), quien confirmó su identidad, estos caracteres no son

tan importantes como para crear una categoría taxonómica distinta y no

muestran sino una variabilidad geográfica (-” I have seen several collections

from Swiss and Italian Alps growing on Quercus which are just intermediate

between the Middle Asian population on Picea schrenkiana and your fungus

on Castanea”-).

Raitviir & Sacconi (1987), efectivamente, redescriben la misma especie

y encuentran ejemplares con ascósporas considerablemente más largas que

en el holótipo (*7,8-10 x 1,8-2,24m”) y paráfisis marcadamente lanceoladas

("X 4-4,5um”) que superan extraordinariamente la longitud de los ascos (“up

to 30um’).

Con todo ello, el material español no sólo viene a ampliar el hábitat y

la distribución de la especie, sino también a incrementar sus limites de va-

riación.

Difiere de Dasyscyphella nivea (Fr.) Raitv. por las fructificaciones que

no se tornan anaranjadas en seco y de D. angustipila Raitv. por el marcado

caracter claviforme de los pelos, además de presentar ascósporas más estre-

chas.

Hamatocanthoscypha laricionis (Vel.) Svrcek 1977

= Uncinia laricionis Vel. 1934

= Unciniella laricionis (Vel.) K. Holm. & L. Holm. 1977

- Hyaloscypha curvipila Grelet 1951

Sobre las aciculas semidescompuestas de Pinus sylvestris y P. pinaster,

Loc. 1, 15-XI-1989, RG 6553.

Descripción. - Apotecios acopados, cortamente pedicelados, comple-

tamente blancos, disco inclusive (« 0,5mm), asi como los pelos que emergen

del receptáculo y márgenes.

Ectal excipulo de células hialinas, alargadas y estrechas (“textura

porrecta-prismática”), + 6,4 x 2,5um, que se prolongan al exterior en lla-

mativos pelos hialinos, de paredes lisas y delgadas, pluricelulares (2-3

tabiques desplazados hacia la base), cilíndricos o subfusiformes - aunque de

extremos obtusos -, y permanente uncinados, de: 20-30 x 3-4um. Ascos

tetrasporicos a octospóricos, cilindrico-claviformes, no pedicelados, re-

lativamente anchos, de 22-27 x 4-6,24m, provistos de un largo y estrecho ca-

nal apical, débilmente amiloide. Paráfisis filiformes o mazudas (x 1,54m), de

igual longitud a los ascos. Ascósporas unicelulares, irregularmente distri-

buidas en los ascos, de variada morfologia (ovoides, clavadas, lacrimoides,

naviculares,...), pero más usualmente obnaviculares, de 5-6,2(-7,4) x 1,5-2um.

(Figs. 40-46).

Observaciones. - El género Hamatocanthoscypha, caracterizado por los

pelos uncinados que emergen del exterior de las fructificaciones, - que fuera

considerado por Svrcek (1977) para sustituir a Uncinia Velen. (1934, non

Uncinia Pers. 1805, fam. Cyperaceae) -, cuenta en la actualidad con, al me-

nos, siete especies merced a las recientes aportaciones de Huhtinen (1990),

Source - MNHN, Paris

PARQUE NATURAL DE MONFRAGUE. V. 217

Figs. 40-46: Hamatocanthoscypha laricionis. - Fig. 40: Apotecio visto de perfil, Figs.

41, 42, 45 & 46: Pelos marginales (nótese el caracter uncinado); Figs. 43-44:

Ascos conteniendo un número variable de esporas.

Source : MNHN, Paris

278 R. GALÁN

de las que “Uncinia” laricionis es la especie tipo. A pesar de que se encuentra

ampliamente extendida en Europa, incluso en paises vecinos como Francia o

Italia, es la primera oportunidad en que se cita de España. Es digno de des-

tacar que en la muestra estudiada hemos observado ascos con un número

variable de esporas (4-8), lo que nunca ha sido puesto de manifiesto en las

frecuentes descripciones que de esta especie figuran en la literatura

micológica.

Lachnum fuscescens (Pers.: Fr.) Karst. 1885

= Peziza fuscescens Pers.: Fr. 1822

— 'Dasyscypha" brunneola (Desm.) Sace. 1877

= Peziza brunneola Desm. 1842

Hojas caidas de Quercus ilex subsp. ballota, conviviendo con “Niptera”

muelleri-argoviensis Rehm, Loc. 3, 16-X1-1989, RG 6568.

Observaciones. - Sin lugar a dudas se trata del mismo hongo que

iconografió Boudier (Icon. Myc. IIl: Pl. 507) bajo la denominación de

Dasyscypha brunneola, clásicamente considerado como sinónimo de Lachnum

fuscescens, a pesar de que Le Gal (1939) manifestara que aquella represen-

tación no se ajusta a su concepto de D. brunneola ni a la "variedad fagicola”.

Por otra parte, el material en cuestión se ajusta bien a la descripción

que hace Dennis (1949) de D. fuscescens basada en colecciones foliicolas (ti-

picamente sobre hojas de Fagus y Quercus) quien, además, defiende la postu-

ra de considerar D. fuscescens como una especie colectiva y variable en con-

tra de erigir nuevas especies o variedades en base a pequeñas diferencias. En

el mismo sentido parecen haber optado Raitviir (1970) o Korf (1985), al no

considerar la “variedad fagicola.” En cambio Le Gal (op. cit.) o más recien-

temente Baral £ Krieglsteiner (1985) no optan por esa via e incluso, estos

últimos, llegan a catalogar aquellos dos táxones como especies distintas,

incluyendolas en el nuevo género Brunnipila Baral & K rieglsteiner.

En lo que compete a nuestra propria experencia, anteriormente tu-

vimos la oportunidad de describir la especie en cuestión (Galán, 1985),

basandonos en especimenes encontrados sobre hojas de Quercus pyrenaica.

Ahora hemos comparado ambas colecciones y llegamos a la conclusión de

que deben considerarse coespecificas, aunque se han observado pequeñas di-

ferencias, tales como: mayor longitud e irregular persistencia de cristales en

los pelos del receptáculo, mayor anchura de las paráfisis (excepcionalmente

afiladas) y superiores magnitudes esporales - (7,4-)9,3-11,8(-12,4) x 1,8-2um -,

todo ello en el material que ahora nos ocupa.

La distribución en España de este hongo es aparentemente amplia. A

las citas recopiladas por Galán (1985) hay que añadir: Madrid (Torre, 1974),

Murcia (Torres et al., 1986), Barcelona y Gerona (Sierra et al., 1987).

Neodasyscypha cerina (Pers.: Fr.) Spooner 1987

= Peziza cerina Pers.: Fr. 1882

Dasyscyphus cerinus (Pers.: Fr.) Fuck. 1870

= Lachnum cerinum (Pers.: Fr.) Nannf. 1932

Source : MNHN, Paris

PARQUE NATURAL DE MONFRAGUE. V. 279

errotia cerina (Pers.: Fr.) Svrcek 1962

= Pi

= Belonidium cerinum (Pers.: Fr.) Raitviir 1970

Sobre madera descortezada de Eucalyptus globulus, Loc. 9, 19-1-1990,

RG 6557.

Observaciones. - Aunque la identificación del taxon no ofrece dificul-

tad alguna, no es asi en lo que se refiere a su posición taxonómica dentro de

Hyaloscyphaceae. Efectivamente, la “textura globulosa” del ectal excipulo,

asi como la caracteristica ornamentación y reacción frente al lodo de los pe-

los del receptáculo, hacen dificil su inclusi^n en uno u otro género, de tal

manera que hasta ahora no existia acuerdo ni tendencia generalizada sobre

su situación taxonómica. Spooner (1987) ha erigido el taxon como especie

tipo de Neodasyscypha, cuyos caracteres diferenciales respecto a géneros

próximos (i.e: Lachnum, Lasiobelonium) se basan en la pigmentación e in-

crustación de los pelos, asi como en la particular textura del receptáculo.

A la amplia lista de provincias españolas de donde se ha citado la es-

pecie (c.f. Galán, 1985), hay que añadir ahora: Albacete (Honrubia et al.,

1985; Torres, 1986), Jaén (Torres, 1986), Gerona (Sierra, 1987; Sierra et al.,

1987) y Barcelona (Sierra et al., op. cit.). Además, tenemos noticias de su

presencia en el Archipiélago Canario (inéd.).

“Pezizella” alniella (Nyl.) Dennis 1956

Peziza alniella Nyl. 1869

Hymenoscyphus alniellus (Nyl.) O. Kuntze 1898

Ombrophila alniella (Nyl-) Boud. 1908

Calycina alniella (Nyl.) Baral & K rieglsteiner 1985

Sobre amentos femeninos de Alnus glutinosa, Loc. 2, 15-XI-1986, RG

6530; ibidem, 15-X1-1989, RG 6531.

Descripción. - Apotecios turbinados o acopados, minúsculos (+ 0,2mm

de diám.), cortamente pedicelados, completamente blancos (excepto el pie

pardo), exteriormente pilosos.

Ectal excipulo de “textura prismática”; pelos emergentes unicelulares o

bicelulares, hialinos, de paredes lisas y delgadas, con contenido granular

denso y dextroinoide, de morfología variable (: subcilindricos, subclavi-

formes, uncinados...), + 15,5 x 3,5um. Ascos octospóricos, no pedicelados,

cilíndrico-claviformes, con el ápice vivamente amiloide, de 54-59 x 6,2um.

Paräfisis cilindricas a subclaviformes (x 2,5m), pluriseptadas, que igualan o

a penas exceden el nivel de los ascos y contienen gránulos densos en la re-

gión apical. Ascósporas irregularmente biseriadas en los ascos, fusiformes,

unicelulares, rectas o muy débilmente alantoides, de (6,8-)7,4-11,7 x

1,8-2,4um (Figs. 47-48).

Observaciones. - Este hongo ha sufrido, a lo largo de la historia, diver-

sas interpretaciones y aún hoy se duda de su correcta ubicación en un

género u otro (de los cerca de media docena hasta ahora considerados), e in-

cluso a cerca de la familia adecuada. Asi Dennis (1956) propuso su transfe-

rencia a Pezizella Fuckel, género este con más de cuatrocientas especies mal

Source : MNHN, Paris

280 R. GALÁN

Figs. 47-48: " Pezizella" alniella. Fig. 47; Excipulo ectal y pelos marginales. Fig. 48:

Ascos conteniendo esporas. Fig. 49: Hymenoscyphus caudatus (esporas); Fi

50: Hymenoscyphus lutescens (esporas).

Source - MNHN. Paris

PARQUE NATURAL DE MONFRAGUE. V. 281

conocidas y cuya tipificación y limites son igualmente controvertidos, de

manera que muy recientemente Arendholz (1989) manifiesta: “Nearly all

species bearing the name Pezizella have to removed from the genus and to

be transfered to existing and/or many times in newly-to-be-founded genera”.

Carpenter (1981) quien manifiesta haber estudiado el holótipo en cuestión,

lo sitúa dentro de Hymenoscyphus S.F. Gray, como hiciera más recien-

temente Korf (1985).

En cualquier caso no se habia dudado de su exclusión de la familia

Leotiaceae (= Helotiaceae auct.), hasta que Baral & Krieglsteiner (1985) lo

transfieren a Calycina Nees ex Gray, incluyendo en Hyaloscyphaceae.

Particularmente considero que aún no se ha apuntado ningún género

acertado para englobar a la especie en cuestión, si bien los “pelos hifoides” a

los que se refiere Carpenter (op. cit.) y la naturaleza del ectal excipulo nos

parecen de entidad suficiente como para manifestarnos en favor de su defi-

nitiva consideración como hongo hialoscifáceo.

Boudier (Icon. Myc. II, PI. 437) iconografió muy acertadamente la es-

pecie en cuestión, mientras que Breitenbach £ Kranzlin (1981) lo fotogra-

fian y redescriben.

Con anterioridad, en España sólo ha sido recogido una vez, en la pro-

vincia de Gerona, por Heim et al. (1934), sobre idéntico substrato. Compar-

te el hábitat con Ciboria viridifusca y Mollisia amenticola, también halladas

en la misma localidad.

Polydesmia pruinosa (Jardon in Berk. & Br.) Boud. 1885

Sobre un viejo estroma pirenomicético desarrollado, a su vez, sobre

madera de Quercus faginea, Loc. 4, 18-1-1990, RG 6574.

Observaciones . - A las frecuentes citas de esta especie en la mitad nor-

te de España, resumidas por Galán (1985), hay que sumar aquellas otras

procedentes de Albacete (Torres, 1986; Torres et al., 1988), Barcelona (Sierra

et al., 1987) y ahora Cáceres. También figura consignada en el Archipiélago

Canario (Korf, 1978; Beltran-Tejera, 1980).

En cuanto a su posición sistemática, la tendencia más aceptada es su

inclusión entre los miembros de Hyaloscyphaceae.

Psilachnum chrysostignum (Fr.) Raitv. 1970

= Pezizella chrysostigma (Fr.) Sacc. 1889

= Micropodia pteridina (Nyl.) Boud. 1907

En la base del raquis de las frondes muertas de Preridinium aquilinum,

Loc. 4, 14-XI-1986, RG 6548; ibidem, 14-X1-1989, RG 6547.

Observaciones. - La especie se caracteriza por sus minüsculos apotecios

blancos o con reflejos rosados, de márgenes pubescentes y hábitat perma-

nentemente pteridicola. Posee ascósporas fusoides o más comünmente

cilindrico-claviformes e inequiláteras (comparables a las de ciertas especies

Source - MNHN. Paris

282 R. GALÁN

del género Orbilia), de 6,2-8,6 x 1,5-1,8um, y paráfisis relativamente anchas

(x 2-2,5um), cilindricas, que igualan el nivel de los ascos.

A las citas españolas recopiladas por Galán (1985), hay que sumar las

de Calonge et al. (1986), Sierra (1987) y Calonge et al. (1990), todas en

Cataluña. Esta cita viene a confirmar su pretendida presencia en toda la ge-

ografía peninsular, hasta ahora restringida a su mitad oriental, siempre li-

gada a la distribucion de Preridium aquilinum.

Familia Leotiaceae Corda

— Helotiaceae auct.

Bisporella citrina (Batsch: Fr.) Korf & Carpenter 1974

Ramas descortezadas de Arbutus unedo, Loc. 4, 14-XI-1986, RG 6545,

6546; ramas descortezadas de Quercus pyrenaica, Loc. 10, 1-X1-1990, RG

6599.

Observaciones. - Especie fácilmente reconocible a simple vista por el

color citrino de sus fructificaciones, que tienden a confluir; siendo por lo de-

más subsésiles y de apariencia algo gelificada. Su distribución en la Peninsu-

la Ibérica es muy amplia (Galán, 1985).

Hymenoscyphus caudatus (Karst.) Dennis 1964 s. Dennis

Sobre hojas semidescompuestas de diversa naturaleza: Quercus ilex

subsp. ballota (Loc. 4, 10-X1-1987, RG 6537; ibidem, 31-X-1990, RG 6600),

Alnus glutinosa (Loc. 2, 15-X1-1986, RG 6533, 6534) y Phillyrea angustifolia

(Loc. 4, 18-1-1990, RG 6572).

Observaciones. - Se trata de un taxon exclusivamente foliicola, de pe-

queños apotecios (regularmente hasta Imm de diám.), blanquecinos o

pálido-amarillentos y patentemente pedicelados. Desde el punto de vista mi-

croscópico son de resaltar las esporas unicelulares o bicelulares, excepcio-

nalmente deprimidas en el centro, de dimension muy oscilantes (15,5-23,5 x

4,3-5,5um), pero de morfologia regular; esto es, con un extremo afilado y

otro redondeado, a la vez que apiculado (Fig. 49).

Su distribución en España es muy amplia (Galán, 1985).

Hymenoscyphus fructigenus (Bull.: Fr.) Gray 1821

Sobre frutos (cüpulas o superficie de aquenios) de Quercus ilex subsp.

ballota y Q. suber: Loc. 4, 10-XI-1987, RG 6560; ibidem, 14-XI-1989, RG

6541; ibidem, 31-X-1990, RG 6601; Loc. 7, 24-XI-1988, RG 6586; Loc. 2,

15-X1-1989, RG 6540.

Observaciones. - Es una especie extraordinariamente común en el par-

que, asi como en el resto de la geografía española (Galán, 1985). Siempre

con apotecios manifiestamente pedicelados y de aspecto “seco”, que la dife-

rencian macroscópicamente de H. lutescens, que ocasionalmente puede com-

partir el mismo hábitat.

Source : MNHN, Paris

PARQUE NATURAL DE MONFRAGUE. V. 283

Hymenoscyphus lutescens (Hedw.: Fr.) Phill. 1887

Sobre restos vegetales de muy distinta naturaleza (: ramas, hojas, fru-

tos, ritidoma...) procedentes de: Quercus ilex subsp. ballota (Loc. 4,

14-X1-1989, RG 6542, 6539), Q. suber (Loc. 7, 24-XI-1984, RG 6587), Pinus

sylvestris (Loc. 1, 15-XI-1989, RG 6538), P. pinaster (Loc. 6, 18-1-1990, RG

6558), Eucalyptus globulus (Loc. 9, 19-1-1990, RG 6571), y E. camaldulensis

(Loc. 5, 15-XI-1986, RG 6573).

Observaciones. - Los pequeños apotecios, cortamente pedicelados, ama-

rillos y de apariencia gelificada son caracteres que permiten reconocer esta

especie tan común. La “textura prismática” de su ectal excipulo, que se torna

selectivamente pürpura al contacto con el lodo y se prolonga al exterior en

hifas filiformes con contenido granular denso; además de los ascos casi

inamiloides y, sobre todo, las tipicas esporas (de 11-15,5 x 3-3,7um)

unicelulares o monoseptadas, de morfología peculiar (Fig. 50), son carac-

teristicas microscópicas que permiten confirmar con certeza la identidad del

taxon en cuestión.

Hoy dia se confirma como una de las especies de Leotiales más fre-

cuentes en la vegetación mediterránea, - al menos en lo que respecta a Espa-

ña - aunque era prácticamente desconocida hace tan sólo unos años (Galán,

1985)

Familia Sclerotiniaceae Whetzel ex Whetzel

Ciboria sp.

“Aparentemente” emergiendo del suelo, entre restos de Eucalyptus

camaldulensi;, Loc. 5, 24-X1-1988, JTP 4400.

Observaciones. - La muestra en cuestión, recogida y estudiada por J.T.

Palmer (com. pers.), se reduce a un único apotecio amarillo, largamente

pedicelado, que por el momento ha sido imposible de identificar con preci-

sión, dada la escasez de material.

Ciboria americana Durand 1902

= Ruistroemia americana (Durand) White 1941

Sobre frutos semidescompuestos de Quercus suber y probablemente

también de Q. ilex subsp. ballota, Loc.4, 14-X1-1986, RG 6570; Loc. 3,

16-XI-1989, RG 6515, 6520 p.p.

Observaciones. - Esta especie ya fue ampliamente tratada por mi mis-

mo (Galán, 1985), sin que hasta la fecha haya vuelto a ser citada en Espana.

Como es sabido, sus habitats naturales pueden ser tanto los viejos involu-

cros de Castanea sativa, como los frutos estromatizados de Quercus spp.

Ciboria caucus (Rebent.) Fuck. 1870 f. sp. alnicola Schumacher 1978

Sobre amentos masculinos estromatizados de Alnus glutinosa, Loc. 2,

24-X-1988, JTP 4485.

Source : MNHN. Paris

284 R. GALÁN

Observaciones. - Fue J.T. Palmer (com. pers.), quien amablemente nos

remitió los datos arriba expuestos, el que recolect” y determin” la muestra

en cuestión. Esta especie ya fue ampliamente tratada por nosotros (Galán,

1985) y citada de las provincias de Avila, Granada y Alava. Con posterio-

ridad, primero Sierra (1987) y después Calonge et al. (1990) la han vuelto a

citar de Cataluña (provincias de Gerona y Barcelona, respectivamente) y,

por último, Mendaza y Diaz (1987) hacen lo propio de Vizcaya.

Ciboria viridifusca (Fuck.) Hóhn. 1926

Sobre viejos amentos femeninos de Alnus glutinosa, Loc. 2, 15-X1-1986,

RG 6526; ibidem, 24-X1-1988, JTP 4399.

Descripción. - Apotecios acopados (+ Imm diám.), largamente

pedicelados, externamente pálido-amarillentos o blanquecinos y pruinosos.

Excipulo ectal de “textura globulosa”, prolongandose en cortos pelos

marginales. Ascos octospóricos, subcilindricos, provistos de un pedicelo

poco patente, con bóveda ancha y extremo muy débilmente amiloide, que

miden: 62-70 x 6-7um. Paráfisis mazudas, pluriseptadas, ramificadas en la

base (x 1.8-2,4um en el ápice). Ascosporas uniseriadas o irregularmente

biseriadas, elipsoides o pediformes, usualmente rectas, unicelulares, de

7,4-10,5 x 3,4-3,7um.

Observaciones. - Se trata de una de las aproximadamente media docena

de especies de discomicetos permanentemente ligadas a los amentos femeni-

nos de Alnus en Europa (c.f. Kutorga, 1989).

Es la primera vez en que se cita el hongo de España, aunque Palmer

(com. pers.) recogió e identificó como tal otras muestras procedentes de la

misma localidad y que ahora se encuenrtan en su herbario personal.

C. viridifusca ha sido descrita e iconografiada convenientemente por

Breitenbach £ Kranzlin (1981), procedente de Suiza. Su distribución en

Europa es muy amplia (: Francia, Inglaterra, Suiza, Lithuania, Alemania,

Checoslovaquia...).

Lanzia echinophila (Bull.: Fr.) Korf 1982

= Rutstroemia echinophila (Bull.: Fr.) Hóhn. 1917

Sobre frutos estromatizados de Quercus suber (unas veces en las

cúpulas, otras en la cara interna de la cutícula del glande): Loc. 3, 16-XI-89,

RG 6514, 6517, 6520 p.p.: Loc. 4, 25-X1-1988, JTP 4489.

Observaciones. - Esta especie, de distribución exclusivamente europea,

no sólo se encuentra sobre viejos involucros (“erizos”) de castaño, a los que

alude su epiteto especifico, sino que también ha sido regularmente asociada

a frutos de Quercus, aunque es la primera vez que se consigna en Espana

este particular hábitat. Por lo demás, se encuentra ampliamente repartida en

la geografía española (Galán, 1985) e incluso ha aparecido en el

Archipiélago Canario (Bañares-Baudet & Beltran-Tejera, 1987).

Source : MNHN. Paris

PARQUE NATURAL DE MONFRAGUE. V. 285

A parte de la microanatomía de los apotecios, son diagnósticas la

morfología y tamaño esporales.

Rutstroemia firma (Pers.: Fr.) Karst. 1871

Sobre ramas de Quercus spp. (Loc. 4, 14-X1-1986, RG 6524; ibidem,

25-XI-1988, JTP 4478; ibidem, 14-X1-1989, RG 6518) y Castanea sativa (Loc.

10, 11-XI-1987, RG 6536, 6539).

Observaciones. - Este hongo comun, se halla ampliamente distribuido

en España (Galán, 1985), si bien hay que añadir las provincias de Jaén (To-

rres, 1986) y ahora Cáceres, si se desea conocer su repartición exacta. Junto

con "Rutstroemia" echinophila, son los dos miembros de Sc/erotiniaceae mejor.

conocidos en España.

Torrendiella ciliata Boud. in Boud. & Torrend 1911

En fragmentos de hojas de Quercus suber, Loc. 4, 24-X-1988, JTP 4488.

Observaciones. - Este infrecuente esclerotiniáceo fue hallado e identifi-

cado por Palmer (com. pers.), quien también tuvo la ocasión de encontrarlo

en sus visitas a Pontevedra - sobre el mismo substrato - (JTP 4381, 4382) y

más recientemente a Canarias.

El hongo en cuestión fue descrito, como especie tipo de Torrendiella

Boud., procedente de la vecina Lisboa y, hasta la fecha, se dispone de una

corología tan incompleta como dispersa, ya que sólo se ha mencionado en

la literatura una vez más, en esa ocasión de las Islas Británicas (Graddon,

1979).

ADDENDA

Familia Rhytismataceae Chev.

Cyclaneusma sp.

(cf. C. niveum (Pers.: Fr.) DiCosmo et al. 1983 - C. minus (Butin)

DiCosmo et al. 1983)

(= Naemacyclus niveus (Pers.: Fr.) Sacc. - N. minor Butin)

Aciculas de Pinus pinaster, Loc. 6, 18-1-1990, RG 6582.

Observaciones. - Dado que sólo hemos encontrado vestigios de

ascocarpos muy envejecidos, en los que ha sido imposible detectar ascos,

esporas... etc. resulta imposible su plena identificación.

Las dos especies han sido tratadas por Dicosmo et al. (1983); además

ambas se han citado repetidamente en España (c.f. Sierra, 1987), nos atre-

vemos a indicar que sin un excesivo rigor, por lo que es aunque probable

que se hallen, a menudo, confundidas y mal identificadas. Tanto es asi que

es muy difícil encontrar artículos en donde ambas sean tratadas y/o diferen-

ciadas.

Source : MNHN, Paris

286 R. GALÁN

Por otra parte, las dos especies han sido excluidas de Naemacyclus,

para ingresar en Cyclaneusma, principalmente por la peculiar dehiscencia de

los ascocarpos.

Naemacyclus fimbriatus (Schw.) DiCosmo, Peredo & Minter 1983

Stictis fimbriata Schw. 1834

Naemacyclus fimbriatus (Schw.) Baüml. 1901

Naemacyclus pinastri (DeLac. in Desm.) Fuck. 1873

= Propolis pinastri Delacroix, in Desm. 1861

En la cara interna y externa de escamas de viejos estróbilos de Pinus

pinaster, Loc. 1, 15-X1-1989, RG 6575, 6577.

Descripción. - Ascocarpos urceolados, + circulares, profundamente in-

mersos al principio y después + emergentes, con el disco pardo-grisáceo y

pruinoso (+ 0,5-0,8mm de diám.), superado por un márgen blanco,

pruinoso, manifiestamente desbordantes y estrellado (+ 5-10 lacinias). Re-

ceptáculo permanentemente pardo oscuro, aparentemente gelificado.

Ascos octospóricos, J-, cilindricos, terminados en una papila apical ca-

racteristica (-- 84-92 x 7,5um). Paráfisis filiformes (x 1,24m). Ascosporas

hialinas, filiformes, con un extremo más agudo que otro, pluriseptadas, de

53-73 x 2-2,5um.

Observaciones. - El desarrollo y constitución de los ascocarpos, sobre

todo en lo que se refiere al receptáculo y márgenes, es muy complejo, y ha

sido detenidamente estudiado e iconografiado por DiCosmo et al. (1984).

Se trata de un taxon muy común del orden Phacidiales s.l. (cf.

DiCosmo et al., op. cit.), durante casi un siglo aceptado como única especie

de Lasiostictis (Sacc. & Berl) Sacc. y, como tal, unas veces referido a

Phacidiaceae (Sherwood, 1974) y otras a Rhytismataceae (Korf, 1973;

DiCosmo, 1979). Más recientemente ha sido considerado entre los sinónimos

de Naemacyclus Fuck. - una idea varias veces apuntada durante los últimos

cincuenta años - y precisamente “Stictis” fimbriata se ha selectionado como

especie tipo del mismo.

Dejando a parte estos complejos aspectos sistemático-nomenclaturales,

hay que resaltar la presencia del hongo en la provincia de Cáceres, si bien

ya habia sido citado en numerosas ocasiones de distintas provincias españo-

las: Navarra (Perez-Losantos et al., 1983), Albacete - Murcia (Honrubia et

al., 1983) y Gerona (Sierra, 1987), siempre sobre estróbilos de Pinus spp. J.

Girbal (Mycot. Hisp. n° 362) distribuyó este hongo viviendo sobre aciculas

de Pinus, un habitat que, efectivamente, no parece ser infrecuente (DiCosmo

et al., 1984). De acuerdo a datos aún inéditos, estamos en condiciones de ex-

tender su distribución a Málaga, Granada y Segovia.

Propolomyces versicolor (Fr.) Dennis 1982

= Propolis versicolor (Fr.) Fr. 1849

Sobre la corteza o el leño de Quercus spp., Loc. 4, 14-XI-1986, RG

6551; ibidem, 14-X1-1989, RG 6549, 6550.

Source : MNHN, Paris

PARQUE NATURAL DE MONFRAGUE. V. 287

Observaciones. - Taxon cosmopolita y ubiquista, cuya inclusión en el

orden Leotiales ha sido puesta en duda en innumetables ocasiones desde que

Sherwood (1977) lo incluyese entre Rhytismatales, bajo la denominación de

Propolomyces farinosus (Pers.: Fr.) Sherwood; posición esta que ha sido acep-

tada por Eriksson £ Hawksworth (1987), entre otros.

Deuteromycotina

Harknessia spermatoidea Galan, Moreno & Sutton 1986

Sobre viejas “cúpulas” de Eucalyptus globosus, Loc. 9, 19-1-1990, RG

6355.

Observaciones. - Se trata de un celomiceto, que fuera recientemente

descrito como nuevo para la ciencia, procedente de Pontevedra (Galán et

al., 1986). Además, tenemos noticias de su reciente hallazgo en Cataluña

(Sierra et al., 1988).

AGRADECIMIENTOS

Este trabajo ha sido posible gracias a la financiación, por parte de la

-C.Y.T., del proyecto de investigación (n* PA86-0063): "Estudio de los hongos que.

fructifican en el Parque Natural de Monfragúe (Cáceres)”, bajo la dirección del Dr.

G. Moreno, a quien expreso mi agradecimiento por su colaboración y apoyo en la re-

lizacion del presente estudio. Mi más profunda gratitud a Mr. J.T. Palmer, por po-

ner a mi disposición sus datos inéditos asi como numerosas colecciones espanolas. A.

los Drs. R. A. Maas Geesteranus, W. R. Arendholz, A. Raitviir y H. Engel, por sus

mentarios sobre especies conflictivas y/o préstamos de herbario. A la Sociedad

lidroeléctrica Española, S.A., y particularmente a D. Gonzalo Pérez y a D.

Enrique Pinto, por facilitar parte de sus instalaciones anejas a la Central

Hidroeléctrica de Torrejón, durante nuestras campañas micológicas. Mi reco-

nocimiento al Dr. F. Esteve-Raventós y M. Heykoop por sus oportunas aclaraciones

en lenguas extranjeras. Finalmente a la Dra. M.N. Blanco por poner a mi dispo-

sición el mapa presentado y a D. Carlos Illana por su colaboración en aspectos

informáticos.

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

AEBI B. 1972 - Untersuchungen über Discomyceten aus der Gruppe Tapesia-

Trichobelonium. Nova Hedwigia 23: 49-112.

ARENDHOLZ W.R., 1989 - The genus Pezizella. L: Nomenclature and history.

Mycotaxon 36: 283-303.

ARENDHOLZ W.R. and RAITVIIR A., 1988 - A new species of Hyaloscyphaceae

on needles of Picea (Pinaceae). Mycotaxon 32: 353-364.

BANARES-BAUDET A. y BELTRAN-TEJERA E., 1987 - Adiciones a la flora

micológica canaria V. Actas VI Simp. Nac. Bot. Criptog. (Granada): 201-211.

BARAL H.O. und KRIEGLSTEINER G.J., 1985 - Bausteine zu einer

Askomyzeten-Flora der Bundesrepublik Deutschland: In Süddeutschland

gefundene inoperculate Diskomyzeten mit taxonomischen, ókologischen, und

chorologischen Hinweisen. Beih. Mykol. 6: 1-160.

Source : MNHN, Paris

288 R. GALÁN

BARRASA J.M. y CHECA J., 1991 - Dothideales del Parque Natural de

Monfragüe (Caceres). 1. Bol. Soc. Micol. Madrid 15: 91-102.

BELTRAN-TEJERA E., 1980 - Catálogo de los hongos saprófitos presentes en el

Archipiélago Canario. /nst. Estud. Canar. Monogr. Secc. 4, 17: 1-47.

BERTAULT R., 1974 - Contribution à la Flore Mycologique de l'Andalousie. 11.

Collect. Bot. ( Barcelona) 9: 25-44.

BLANCO M.N., HJORTSTAM K., MANJON J.L. y MORENO G., 1989 - Estu-

dios micológicos en el Parque Natural de Monfragúe (Extremadura, España)

VIL. Aphyllophorales. Cryptogamie, Mycol. 10: 217-225.

BOUDIER E., 1905 -1910 - /cones Mycologicae ou Iconographie des Champignons de

France. Paris, Klincksiek, 171p. 600 pl

BREITENBACH J. et KRANZLIN F., 1981 - Champignons de Suisse, tome 1: Les

Ascomycètes. Lucerne, J. Breitenbach & F. Kränzlin, 310p.

CALONGE F.D., ROCABRUNA A., TABARES M. y SIERRA M.D., 1986 -

Contribución al estudio de los Ascomycotina españoles. II. Un género y ocho

especies nuevas para el catálogo. Butl. Soc. Catalana Micol. 10: 35-47.

CALLONGE F.D., 1990 - Contribución al estudio de los Gasteromycetes de Extre-

madura. Soc. Micol. Extremeña 1: 24-25,

CALONGE F.D., CARRASCOSA G. y SAU E., 1990 - Contribución al estudio de

Ascomycotina españoles. V. Sobre cuatro especies encontradas en Cataluña

Bol. Soc. Micol. Madrid 14: 43-48.

CARPENTER S.E., 1981 - Monograph of Crocicreas (Ascomycetes, Helotiales,

Leotiaceae). Mem. New York Bot. Gard. 33: 1-290.

DENNIS R.W.G., 1949 - A revision of the British Hyaloscyphaceae, with notes on

related European species. Mycol. Pap. 32: 1-97.

DENNIS R.W.G., 1956 - A revision of the British Heloriaceae in the herbarium of

the Royal Botanic Gardens, Kew, with notes on related European species.

Mycol. Pap. 62: 1-216.

DENNIS R.W.G., 1978 - British Ascomycetes. 2nd. ed. Vaduz, Cramer: 585p.

DICOSMO F., 1979 - Lasiostictis reassessed. Canad. J. Bot. 57: 1838-1840.

DICOSMO F., PEREDO H. and MINTER D.W., 1983 - Cyclaneusma gen. nov.,

Naemacyclus and Lasiostictis, a nomenclatural problem resolved. Eur. J. Forest

Pathol. 13: 206-212.

DICOSMO F., NAG RAJ T.R, and KENDRICK W.B., 1984 - A revision of the

Phacidiaceae and related anamorphs. Mycotaxon 21: 1-234.

ENGEL H., ENGELHARDT K., HARTL W. und OSTROW H., 1982 -

Pilzneufunde in Nordwestoberfranken und seinen angrenzenden Gebicten 1982,

I. Teil. Die Pilzflora Nordwestoberfrankens 6: 43-77.

ERIKSSON O.E. and HAWKSWORTH H.L., 1987 - Outline of the Ascomycetes.

1987. Systema Ascomycetum 6: 259-337.

GALAN R., 1985 - Contribución al estudio del orden Helotiales (Ascomycotina) en

España. Tesis Doctoral, Univ. Alcalá de Henares, Madrid, 387p.

GALAN R. y MORENO G., 1985 - Dos especies descritas por J.L. Grelet poco co-

nocidas, Calycellina albida (Grelet & Crozals) Galán & Moreno comb. nov. y

Lachnellula robusta Grelet ex Baral & Matheis, en España peninsular.

Cryptogamie, Mycol. 6: 21-28.

Source : MNHN, Paris

PARQUE NATURAL DE MONFRAGÜE. V. 289

GALAN R., MORENO G. and SUTTON B.C., 1956 - Harknessia spermatoidea sp.

nov. from Spain. Trans. Brit. Mycol. Soc. 87: 636-640.

GARCIA-GONZALES B., 1987 - Micoflora otoñal e invernal en repoblaciones de

Pinus nigra Arnold navarras. Resúmenes VII Simp. Nac. Bot. Criptog. (Ma-

drid): 118.

GIL J.R. y DIE P., 1989 - Guía de setas de Extremadura. 2, Madrid, Fondo Natu-

ral, 112p.

GRADDON W.D., 1976 - Discomycete notes and records. Trans. Brit. Mycol. Soc.

66: 169-172.

GRADDON W.D., 1979 - Discomycete notes and records. 2. Trans. Brit. Mycol.

Soc. 73: 180-188.

GRADDON W.D., 1984 - Some new Discomycetes species. 6. Trans, Brit, Mycol.

Soc. 83: 377-382.

GRELET L.J., 1932-1959 - Les Discomycétes de France d'après la classification de

Boudier. Royan, Société Botanique du Centre-Ouest, réed. 1979, 709p.

GREMMEN J., 1954 - Taxonomic notes on Mollisiaceous fungi. I. A study on some

Dutch species growing on Rubus stems, Fungus 24: 1-8.

HEIM R., FONT-QUER P. et CODINA J., 1934 - Fungi Iberici, Observations sur

la Flore Mycologique Catalane. Treb. Mus, Ci, Nat. Barcelona, Ser. Bot., 15:

1-146,

HONRUBIA M., BERTAULT R. et LLIMONA X., 1983 - Contribution à la

connaissance des champignons du Sud-Est de l'Espagne. Xll. Discomycetes

inoperculés. Bull. Soc. Mycol. France 99: 285-300.

HONRUBIA M., LARIOS J.M. y GALLEGO E., 1985 - Notas sobre Ascomycotina

en el S.E. de España Peninsular. Anales Jard. Bot. Madrid 42: 39-48.

HUHTINEN S., 1990 - A monograph of Hyaloscypha and allied genera. Karstenia

29: 45-252.

HUTTER R., 1958 - Untersuchungen über die Gattung Pyrenopeziza ¡“uck.

Phytopathol. Z. 33: 1-54.

KORF R.P., 1951 - A monograph of the Arachnopezizeae. Lloydia 14: 129-180.

KORF R.P., 1973 - Discomycetes and Tuberales. In: G.C. Ainsworth, F.K. Sparrow

& A.S. Sussmann, The Fungi. New York, Academic Press, 4A: 249-319.

KORF R.P., 1978 - Revisionary studies in the Arachnopezizoideae: A monograph of

the Polydesmieae. Mycotaxon 7: 457-492.

KORF R.P., 1985 - Révision des espèces illustrées par Boudier dans les tomes II et

lll des Icones Mycologicae. In “Zcones Mycologicae. V” Lausanne, Ed.

Plantanida : 209-252.

KUTORGA E., 1989 - Discomycetes inhabiting various parts of Alnus. Scripta

Mycol. 17: 66.

LE GAL M., 1939 - Florule mycologique des Bois de la Grange et de l'Etoile.

Discomycétes. 11. Rev. Mycol. (Paris) 4: 25-63.

LE GAL M. et MANGENOT F., 1960 - Contribution à l'étude des mollisioidées.

IIL. (2e série). Rev. Mycol. (Paris) 25: 135-214.

LE GAL M. et MANGENOT F., 1966 - Contribution à l'étude des mollisioidées. V.

(de série). Rev. Mycol. (Paris) 31: 3-44.

MANJON J.L., BLANCO M.N. y MORENO G., 1989 - Odonticium monfragüense

sp. nov. Corticiaceae. Cryptogamie, Mycol. 10: 135-140.

Source : MNHN, Paris

290 R. GALÁN

MANJON J.L., BLANCO M-N. y MORENO G., 1990 - Estudios micológicos en el

Parque ‘Natural de Monfragiie (Extremadura, España). Il. Aphyllophorales.

Cryptogamie, Mycol. 11: 145-152.

MATHEIS W 1976 - Beitráge zur Kenntnis der Discomycetenflora des Kantons

Thurgau. Il: Einige Discomyceten vom Barchertsee. Mitt. Thurganischen

Naturf. Ges. 41: 6-22.

MENDAZA R. y DIAZ G., 1987 - Las Setas. Vizcaya, Ed. Iberduero, 932 p.

MORENO G. and ESTEVE-RAVENTOS F., 1988a - Boletus aemilii Barbier, B.

permagnificus Poder and Xerocomus truncatus Singer, Shell & Dick in Spain.

Lazaroa 10: 253-258.

MORENO G. y ESTEVE-RAVENTOS F., 1988b - Estudios micológicos en el Par-

que Natural de Monfragiie (Extremadura, España). I. Agaricales. Bol. Soc.

Micol. Madrid 12: 67-83.

MORENO G., BLANCO M.N. and MANJON J.L., 1990a - Mycological studies

from the Natural Park of Monfragüe (Extremadura, Spain). VI. Mycotaxon 39-

351-360.

MORENO G., ESTEVE-RAVENTOS F. y ILLANA C., 1990b - Estudios

micoldgicos en el Parque Natural de Monfragiie y otras zonas de Extremadura

(España). IV. Agaricales. Bol. Soc. Micol. Madrid 14: 115-142.

MORENO G., ESTEVE-RAVENTOS F., ILLANA C. and HEYKOOP M., 1990c

= More agarics from xerophytic grasslands in central Spain. Mycol. Res. 94:

781-788.

MORENO G., ILLANA C. and HEYKOOP M., 1990d - Contribution to the study

of the Myxomycetes in Spain. I. Mycotaxon 37: 1-24.

MORENO G., GALAN R. and MONTECCHI A., in press - Hypogeous fungi from

Peninsular Spain. Il. Mycotaxon

MULLER E., 1989 - Two new and unusual mollisioid Discomycetes. Mem. New

York Bot. Gard. 49: 311-314.

NANNFELDT J.A., 1932 - Studies über die Morphologie und Systematik der

nichtlichenisierten inoperculaten Discomyceten. Nova Acta Regiae Soc. Sci.

Upsal., sér. IV, 8: 1-368.

NANNFELDT J.A., 1986 - Niptera, Trichobelonium and Belonopsis, drei noch zu

erläuternde Gattungen der mollisioiden Discomyceten. Sydowia 38: 194-215.

NIESSL G. von, 1884 - Contribuciones ad Floram mycologicam lusitanicam. IV.

Mem. Inst. Coimbra sér. 2. 31: 133-143.

PEREZ-LOSANTOS A., BASCONES J.C., EDERRA A. y LOPEZ M.L., 1983 -

Catálogo de Ascomycetes de Navarra. Publ. Biol. Univ. Navarra, Ser. Bot, 3:

1-33.

RAITVIIR A., 1970 - Synopsis of the Hyaloscyphaceae. Scripta Mycol. 1: 1-115.

RAITVIIR A., 1977 - The genus Dasyscyphella. Eesti NSV Tead. Akad. Toimet.,

Biol., 26: 29-35.

RAITVIIR A., 1978 - Genus Cistella. Scripta Mycol. 8: 147-159.

RAITVIIR A. and SACCONI S., 1987 - Some interesting Hyaloscyphaceae from

North Italy. Mycol. Helvetica 2: 165-171.

RODRIGUEZ N.B., 1985 - Nueva contribución al estudio de los Ascomycetes de

España. Tesis Doctoral, Univ. Autónoma de Madrid.

Source : MNHN, Paris

PARQUE NATURAL DE MONFRAGUE. V. 291

RODRIGUEZ J.L., 1985 - Guia del Parque Natural de Monfragiie. Madrid, Fun-

do Natural.

SHERWOOD M.A., 1974 - Taxonomic studies in the Phacidiales: Stictis maritima

and the genus Lasiostictis. Mycotaxon 1: 41-44.

SHERWOOD M.A., 1977 - Taxonomic studies in the Phacidiales: Propolis and

Propolomyces. Mycotaxon 5: 320-330.

SIERRA M.D., 1987 - Aportación al conocimiento de los ascomicetes

(Ascomicotina) de Cataluña. Barcelona, Ed. Soc. Catalana Micol. 481p.

SIERRA M.D. y CAMBRA J., 1987 - Notes Micológiques l: Ascomicets del

Torrent de la Sequera (Tarragona). Butl. Soc. Catalana Micol. 11: 73-82.

SIERRA M.D., ROCABRUNA A. y TABARES M., 1987 - Aportación al catálogo

de ascomicetes de Catalunya. Butl. Soc. Catalana Micol. 11: 99-110.

SIERRA M.D., SANZ M. y CAMBRA J., 1988 - Celomicetes interesantes para la

peninsula Ibérica. Resúmenes IV Reunión Conj. Micol. (La Manga): 190.

SIQUIER J.L. y CONSTANTINO C., 1982 - Aportación de nuevas especies a la

flora micológica de la isla de Mallorca. Boll. Hist. Nat. Balear 26: 157-167.

SPOONER B.M., 1987 - Helotiales of Australasia: Geoglossaceae, Orbiliaceae,

Sclerotiniaceae, Hyaloscyphaceae. Biblioth. Mycol. 116: 711p.

SVRCEK M., 1977 - New or less known Discomycetes IV. Ceska Mykol. 31: 8-14.

THIND K.S. and SHARMA M.P., 1983 - Inoperculate Discomycetes: The genus

Mollisia (Fr.) Karst. ( Dermataceae) in India. Biblioth. Mycol. 91: 221-242.

THIND and SINGH H., 1970 - The Helotiales of India XI. Res. Bull. Punjab

U 1-57.

TORRE M. de la, 1974 - Estudio sistemático, ecológico y corológico de Ascomicetes

españoles. Tesis Doctoral, Univ. Complutense de Madrid.

TORRES P., 1986 - Estudio de los discomicetos saprófitos en el S.E. español. Tesina

de Licenciatura, Univ. de Murcia, 177p.

TORRES P. HONRUBIA M. y LARIOS J.M. 1986 - Notas sobre Ascomycotina

spaña peninsular II. Nuevos datos sobre Discomicetos

eye Int. J. Mycol. Lichenol. 3: 91-106.

TORRES P., HONRUBIA M. y DIAZ G., 1988 - Notas sobre Ascomycotina en el

SE, de España peninsular IV. Nuevas citas de Discomicetos saprófitos. Int. J.

Mycol. Lichenol. 3: 319-335.

UNAMUNO L.M., 1941 - Enumeración y distribución geográfica de los ascomicetos

de la Peninsula Ibérica y de las Islas Baleares. Mem. Real Acad. Ci. Exact. Ma-

drid 8: 1-403.

Source : MNHN. Paris

E E

nS m Ey) vm.

e FUA

y EE

è eh SE

in e e. GEN

D tv

Ee ` legen uer

A A A BAC

GA 2x NT «he uita Tüngisgpibullo. Mni ka Ted Akad: Hogne

suivi DAA IES Ceras Cala: Sólo dl E AA

a. A. Mi SAQUONF 5; 194) - Xp itenim Hjakscsalacair aai

Marg Imt. Myr, Habits à FORUM.

KOREA Np; Hi i Nh Corina Ot a

Fate. Fes Ear, > Wite, Aula We Madrid.

da Re fori ee nec Ve

Cryptogamie, Mycol. 1991, 12 (4): 293-304 293

IMMUNOCYTOLOCALISATION DES PHOSPHATASES

ACIDES DE PISOLITHUS TINCTORIUS L. LORS DE SA

CONFRONTATION AVEC LE SYSTEME RACINAIRE DE

PINUS SYLVESTRIS (PERS.) DESV.

Violaine GOURP et Jean-Claude PARGNEY

Laboratoire de Biologie des Ligneux

Université de Nancy I, BP 239

54506 Vandocuvre-les-Nancy Cedex - France

RESUME - La confrontation du mycélium de Pisolithus tinctorius (souche H 445)

avec le systéme racinaire de Pinus sylvestris se caractérise par la mise en place de

fibrilles polysaccharidiques unissant les surfaces fongique et racinaire. La formation

de ces fibrilles est la conséquence de la reconnaissance des deux partenaires et elle

correspond à la phase d'accrochage du champignon sur la plante-hôte qui conduit à

la formation de mycorhizes. La localisation, par immunocytochimie, des

phosphatases acides fongiques montre une bonne spécificité: des phosphatases

pariétales, plasmalemmiques, vacuolaires et cytoplasmiques sont mises en évidence

uniquement au niveau du champignon. Des phosphatases extracellulaires, sécrétées

dans le milieu, sont détectécs autour des hyphes; elles sont toutefois absentes dans

l'espace qui sépare les hyphes de la surface racinaire.

ABSTRACT - The interface of Pisolithus tinctorius mycelium (strain H 445) with

the Pinus sylvestris root system is characterized by the development of polysacchar-

ide fibrilla which join together fungal and root surfaces. The development of such fi-

brilla is the result of partners/mutual recognition and corresponds to the fungus-

clinging phase to the host plant, leading to mycorrhizae formation. The fungal acid

phosphatase localization by immunocytochemistry demonstrates a proper specificity:

parietal, plasmalemma, vacuolar and cytoplasmic phosphatases were evident only at

the fungus level. Extracellular phosphatases secreted in the medium were detected

around hyphae; however, they were absent in the space separating hyphae from the

root surface.

MOTS CL Phosphatases acides, Immunolocalisation, Pisolithus tinctorius, Re-

connaissance des partenaires.

INTRODUCTION

L'effet bénéfique de la symbiose mycorhizienne sur la croissance de la

plante-hóte résulte en grande partie de l'amélioration de sa nutrition

phosphatée (Hatch, 1937). Différentes hypothèses sont avancées pour expli-

quer cette amélioration (cf. Mousain, 1989). L'une d'elles envisage une sti-

Source : MNHN. Paris

294 V. GOURP et J.-C. PARGNEY

mulation de l'activité fongique impliquée dans l'utilisation des formes orga-

niques et inorganiques du phosphate rhizosphérique, par augmentation des

activités — phosphatasiques des symbiotes (Woolhouse, 1969). Les

phosphatases acides interviendraient notamment dans les transferts entre le

champignon et la plante-hóte au cours du fonctionnement biototrophique de

la mycorhize (Lei, 1988).

L'existence de fortes activités phosphatasiques acides est signalée par

divers auteurs tant au niveau du champignon isolé, que dans les

ectomycorhizes (Barlett & Lewis, 1973; Bieleski, 1973; Ho & Zak, 1979;

Calleja et al., 1980; Antibus et al, 1981). Chez les champignons

ectomycorhiziens, différents types d'activités phosphatasiques acides ont été

décrits: activités pariétales, cytomembranaires, solubles et excrétées (Calleja

et al., 1980; Mousain & Salsac, 1982; Mousain, 1989). Leur localisation

ultrastructurale a toutefois été peu recherchée: quelques études

cytoenzymologiques ont été réalisées chez les mycorhizes (Dexheimer et al.,

1986; Lei & Dexheimer, 1988; Lei, 1988) et sur des champignons

mycorhiziens isolés (Lacaze, 1983; Lei, 1988). Elles permettent de révéler les

sites d'action des phosphatases par mise en évidence de leurs activités. Tou-

tefois, les formes inactives de ces enzymes ne peuvent étre ainsi détectées. Il

faut alors avoir recours à des techniques immunocytochimiques permettant

la localisation précise des enzymes et non de leur activité, méme si celle-ci

est localement inhibée.

MATÉRIEL ET MÉTHODES

1 - Matériel

Aprés désinfection par une solution d'hyplochlorite de calcium a 29 %,

les graines de Pinus sylvestris sont mises á germer dans des boites de pétri

sur milieu de Melin-Norkrans modifié par Marx (1969). Les jeunes plants

âgés de 2 a 3 semaines sont repiqués dans de grandes boîtes de pétri renfer-

mant le milieu de Shemanakova modifié par Chilvers et al. (1986). Des l'ap-

parition des racines secondaires, ¡ls sont inoculés par des implants gélosés de

Pisolithus tinctorius (souche H 445, isolée en Australie sous Eucalyptus et

cultivée sur milieu de Pachlewski).

2 - Techniques de fixation et d'inclusion

Après quelques jours, les jeunes racines en contact avec les implants

sont fixées pendant 16 heures a 4°C par le glutaraldéhyde à 2,5 % dans le

tampon PIPES 0,1 M à pH 7, en présence de chlorure de calcium a 200

mM. Les échantillons sont ensuite lavés dans le tampon puis sont incubés à

4°C pendant | heure dans une solution de chlorure d'ammonium à 50 mM

dans le tampon PIPES (Bienz et al., 1986). Après lavages par le tampon, ils

sont déshydratés par l'éthanol à température basse ( 15°C). L'imprégnation

et l'inclusion sont réalisées par la résine LR white (Newman et al. 1985;

Newman, 1987). La polymérisation se fait à - 15°C sous rayonnement UV

direct.

Source : MNHN, Paris

PHOSPHATASES ACIDES DE PISOLITHUS 295

3 - Techniques de contróle de la compatibilité des symbiontes

La compatibilité de mycorhization entre deux partenaires se manifeste

précocement par la production de fibrilles polysaccharidiques dans l'espace

qui les sépare (Lei, 1988). La possibilité de symbiose peut donc être

contrôlée sur des coupes fines en les contrastant par le test PATAg révélant

la présence, entre les symbiontes, d'un matériel d'accrochage de nature

polysaccharidique (Thiéry, 1967).

4 - Techniques d'immunocytolocalisation

Les techniques de marquage utilisées sont de type indirect; elles corres-

pondent à la détection et à la localisation d'un antigène (phosphatase acide

de Pisolithus tinctorius) à l'aide de son anticorps purifié; ce dernier est lui-

méme détecté aprés réaction avec un second anticorps marqué à l'or.

Des anticorps polyclonaux sont préparés contre la phosphatase acide

majoritaire de la fraction soluble de Pisolithus tinctorius, à partir d'isolats de

thalles cultivés sur milieu carencé en orthophosphate (Bousquet, 1987;

Bousquet et al., 1987). Le sérum obtenu un mois après la première injection

présente une forte concentration d'anticorps. L'étude comparative de la

réactivité des milieux de culture de différents champignons ectomycorhiziens

par le test ELISA, montre que le sérum présente une haute spécificité pour

Pisolithus tinctorius (Bousquet et al., 1987).

Immunolocalisation sur coupes semi-minces

Des coupes de 0,5um d'épaisseur sont recueillies sur des lames de verre

gélatinées. Afin de bloquer les sites antigéniques non spécifiques, elles sont

traitées pendant 30 mn par du NGA (normal goat serum) inactivé par la

chaleur et en solution à 5 % dans le tampon TBS-T-BSA. Ce tampon est

préparé à partir d'une solution de BSA (bovine serum albumine) à 1 % dans

le tampon TBS-T (tris buffer saline-tween).

Les coupes sont ensuite incubées dans un immunosérum “primaire”

contenant l'anticorps antiphosphatase, tamponné par le tampon TBS-T-BSA

et utilisé à des concentrations de 1/100 et 1/1000, a la température de 4°C,

pendant une nuit. Des témoins sont réalisés en incubant les sections dans du

sérum ne renfermant pas l'anticorps.

Apres ringage par le tampon TBS-T-BSA froid, les coupes sont soumi-

ses a un deuxieme immunosérum dit "secondaire" couplé à des particules

d'or colloidal et dilué à la concentration 1/10 dans sa solution de

TBS-T-BSA; l'incubation se fait alors à la température du laboratoire et

pendant | heure. Les coupes sont à nouveau rincées par le tampon TBS puis

par de l'eau ultra-pure.

Comme les particules d'or ne sont pas visibles en microscopie

photonique, le marquage est amplifié par la formation de précipités d'argent

sur les particules d'or (Janssen Chimica). Aprés 8 mn de traitement, les cou-

pes sont rincées à l'eau permutée, puis colorées par la fuschine basique à 3

Source : MNHN, Paris

296 V. GOURP et J.-C. PARGNEY

Immunolocalisation sur coupes fines

Les coupes sont recueillies sur des grilles en or recouvertes d'un film de

collodion carboné. Le blocage des sites antigéniques non spécifiques se fait

comme pour les coupes semi-minces. L'incubation dans l'anticorps primaire

tamponné par la solution de TBS-T-BSA est réalisée à des concentration de

1/1000 et 1/10000, à la température de 4°C et pendant une nuit. Le témoin

est réalisé en incubant les sections dans du sérum ne contenant pas les anti-

corps antiphosphatases.

Aprés rincage par le tampon TBS-T-BSA froid, les coupes sont soumi-

ses à l'anticorps secondaire dilué à la concentration 1/10 dans la solution de

TBS-T-BSA; l'incubation se fait alors à la température du laboratoire et

pendant | heure. Aprés ringage par du tampon TBS et l'eau ultra-pure, les

coupes sont contrastées à l'acétate d'uranyle à 2 % pendant 10 minutes.

RESULTATS

Sept jours aprés l'inoculation, les racines courtes, simples ou

dichotomiques du Pin sont enrobées d'un manchon mycélien assez

développé. Afin d'observer les premiers contacts entre les deux partenaires,

des mycorhizes plus jeunes sont prélevées (après 4-5 jours d'inoculation). Le

manteau fongique est alors en cours d'installation et le réseau de Hartig est

absent (Fig. 1).

Un test PATAg effectué sur une coupe fine, montre un fort marquage

des parois fongiques (Fig. 2). Les hyphes éloignées de la racine, qu'elles

soient isolées (Fig. 2A) ou groupées (Fig. 2B), ne montrent pas de fibrilles

polysaccharidiques dans leur voisinage; seul un mucilage peu sensible au test

PATAg les recouvre (Fig. 2B). Par contre, à proximité de la racine une

quantité importante de fibrilles réactives sont présentes entre les hyphes

(Fig. 2C) assurant ainsi leur accrochage entre elles. De nombreuses fibrilles

polysaccharidiques relient également les hyphes les plus proches de la racine

à la surface racinaire (Fig. 2D).

Après traitement immunocytochimique des coupes semi-minces, les

particules d'argent qui visualisent les phosphatases acides de Pisolithus

tinctorius, marquent les hyphes, mais pas la racine (Fig. IA). Sur le témoin

traité par du sérum ne renfermant pas d'anticorps, le champignon et la raci-

ne ne sont pas marqués (Fig. 1B).

Aprés traitement immunocytochimique des coupes fines, les particules

d'or qui visualisent les phosphatases acides, sont localisées au niveau des

hyphes éloignées (Fig. 3A) et proches de la racine (Fig. 3B). Le marquage

est présent dans les parois, le long du plasmalemme et dans le cytoplasme

notamment à l'intérieur des zones vacuolaires. La fixation et l'inclusion

utilisées ne permettent toutefois pas une identification trés précise des

organites et, à l'exception des vacuoles, le cytoplasme est dense; des surchar-

Bes pondérales peuvent parfois apparaitre et correspondre à des

ultrastructures riches en phosphatases (formations plasmalemmiques,

lysosomes, par exemple). Des particules d'or sont également détectées á

Source - MNHN. Paris

PHOSPHATASES ACIDES DE PISOLITHUS 297

Fig. 1 - Coupe longitudinale semi-fine de racines de Pinus sylvestris en présence

d'hyphes de Pisolithus tinctorius. A- Immunolocalisation des phosphatases aci-

des fongiques. La racine n'est pas marquée. B- Préparation témoin. Les hyphes

et la racine ne sont pas marquées.

Fig. 1 - Semi-fine longitudinal section of Pinus sylvestris root colonised by Pisolithus

tinctorius. A- Immunolocalization of fungal acid phosphatases. The root is

not reactive. B- Control showing absence of reaction on the fungal cell.

Vextérieur des hyphes, dans leur voisinage immédiat, au niveau des zones

granuleuses ou non (Fig. 3B). Elles visualisent les phosphatases excrétées

vers l'extérieur de la mycorhize. Dans l'espace plus ou moins important qui

sépare les hyphes de la surface racinaire, les particules d'or sont absentes

(Fig. 3B). La racine ne présente également aucun marquage. Sur les sections

témoins incubées dans le sérum dépourvu d'anticorps, il n'y a pas de mar-

quage (Fig. 3C).

DISCUSSION ET CONCLUSIONS

Les modalités d'approche du champignon vers la plante-hóte, qui se

traduisent au niveau ultrastructural par la production de fibrilles

polysaccharidiques entre les deux symbiontes, présentent des similitudes avec

les observations effectuées par Lei (1988) de la méme souche fongique en

présence d’Eucalyptus urophylla. Toutefois, d'autres souches de la méme

espèce (H 270, par exemple) ne produisent pas avec l'Eucalyptus la méme

Source : MNHN. Paris

Fig. 2 - Coupes fines de l'association marquées par le test PATAg. A- Hyphe isolée,

éloignée de la racine. B- Hyphes groupées, éloignées de la racine. C- Hyphes

proches de la surface racinaire (SR) et fibrilles polysaccharidiques (fléches). D-

Détail des fibrilles reliant les hyphes (H) à la surface racinaire (SR).

Fig. 2 - Fine sections of the association stained by PATAg test. A- Isolated hypha.

B- Grouped hyphae far from the root. C- Hyphae close to the root surface

(SR) and polysaccharid fibrils (arrows). D- Detail of the fibrils which span

between hyphae (H) and the root surface (SR).

Source : MNHN, Paris

PHOSPHATASES ACIDES DE PISOLITHUS 299

Fig. 3 - Immunolocalisation sur coupes fines des phosphatases acides fongiques. A-

Hyphe éloignée de la racine. B- Hyphes proches de la surface racinaire (SR).

C- Traitement témoin.

Fig. 3 - Immunolocalization of fungal acid phosphatases on fine sections. A- Single

hyphae not connected to root. B- Hyphae close to the root surface (SR). C-

Control.

Source : MNHN, Paris

300 V. GOURP et J.-C. PARGNEY

réponse: les fibrilles sont absentes entre les deux partenaires et les hyphes ne

forment pas de manteau bien organisé (Lei, 1988). La production de fibrilles

polysaccharidiques semble donc étre en corrélation-avec leur possibilité de

mycorhization. Elles matérialisent la reconnaissance entre les symbiontes et

leur assurent un moyen d'accrochage. Si de nombreux auteurs ont signalé

que les fibrilles de la surface cellulaire jouent un róle important dans la re-

connaissance des partenaires des associations symbiotiques (Callow, 1984;

Day, 1984; Gianinazzi-Pearson et al., 1986; Lei, 1988; Ba, 1990), les proces-

sus qui précedent cet accrochage restent á préciser.

La localisation, par la technique d'immunomarquage des phosphatases

acides uniquement au niveau du champignon, montre que le sérum

polyclonal anti-phosphatases acides de Pisolithus tinctorius présente une bon-

ne spécificité. La paroi, le plasmalemme et les vacuoles fongiques en sont es-

sentiellement pourvus; localement, le cytoplasme en renferme également.

L'immunolocalisation de phosphatases acides pariétales a également été

mum chez un champignon endomycorhizien, Erica hispidula L. (Straker et

, 1989); le sérum polyclonal utilisé est préparé à partir d'une phosphatase

acide trouvée dans des fractions de parois partiellement purifiées, associées à

des fractions extracellulaires de ce champignon et, de ce fait, le marquage

cytoplasmique est pratiquement absent.

La présence de phosphatases acides dans des hyphes isolées (Lacaze,

1983; Lei, 1988) et dans des ectomycorhizes (Dexheimer et al., 1986; Lei &

Dexheimer, 1988; Lei, 1988) a déjà été montrée gráce à l'utilisation de tech-

niques cytoenzymologiques détectant les activités de ces enzymes. Celles-ci

ont été localisées le long du plasmalemme et à la surface des hyphes et des

mycorhizes; elles peuvent étre assimilées respectivement aux phosphatases

cytomembranaires et aux phosphatases excrétées, localisées par

immunocytechimie.

Les techniques cytoenzymologiques ne permettent cependant pas de

révéler la présence d'activité au niveau des parois fongiques tant chez les

Basidiomycétes (Lacaze, 1983; Lei, 1988) que chez les Ascomycètes

(Yamamoto et al., 1969; Wakao et al., 1975; Rainina et al., 1979). Dans des

ectomycorhizes, des activités phosphatasiques acides ont pu être détectées

dans le ciment qui unit les hyphes mais pas dans la paroi fongique

(Dexheimer et al., 1986; Lei, 1988); ces auteurs estiment cependant que

l'activité ainsi localisée pourrait correspondre à des phosphatases pariétales.

L'absence de localisation par voie cytoenzymologique des activités des

phosphatases pariétales pourrait correspondre à une inactivation de ces

enzymes lors de leur migration à travers les parois et/ou à une impossibilité

de dépôts des précipités de phosphate de plomb liée à la composition chimi-

que des parois fongiques (Lacaze, 1983; Mousain, 1989). Leur localisation

par immunocytochimie confirme les résultats obtenus par Mousain (1989)

qui, par l'analyse des différentes fractions cellulaires de mycélium de

Pisolithus tinctorius, a montré qu'une carence en phosphate du milieu stimule

les activités phosphasiques totales et essentiellement l'activité pariétale.

Par immunocytochimie, des phosphatases acides excrétées sont

également détectées. Lors de sa confrontation avec les racines de Pinus

Source : MNHN. Paris

PHOSPHATASES ACIDES DE PISOLITHUS 301

sylvestris, Pisolithus tinctorius montre une excrétion polarisée et les

phosphatases acides ne présentent aucune relation avec les fibrilles

polysaccharidiques reliant le champignon à la surface racinaire. Dans cette

espèce fongique, leur activité a été mesurée par Mousain (1989) et, comme

les activités phosphatases des autres fractions cellulaires, elle est fortement

augmentée par une carence du milieu en phosphate, La sécrétion de telles

enzymes dans le milieu de culture a également été constatée dans d'autres

micro-organismes (Patni & Aaronson, 1974; Patni et al., 1977; Nahas et al.,

1982). Les phosphatases excrétées sont essentiellement de nature

glycoprotéique (Mizunaga, 1979; Kruzel & Morawiecka, 1982;

Schweingruber & Schweingruber, 1982); chez Pisolithus tinctorius, celles qui

ont été isolées semblent l'étre également (Berjaud, 1986). Ces enzymes, com-

me toute protéine, ont une origine cytoplasmique: aprés leur synthése, elles

quittent le cytoplasme et migrent à travers la paroi pour étre sécrétées à

l'extérieur de la cellule. Cependant, à l'approche du partenaire symbiotique,

le transfert des phosphatases est soit polarisé, soit partiellement réprimé; les

phosphatases émises du cóté de la plante-hóte sont alors bloquées au cours

de leur migration pariétale. Hilbert & Martin (1988) ont notamment montré

que l'établissement d'une association ectomycorhizienne entraine des modifi-

cations au niveau des profils polypeptidiques fongiques. Tout se passe com-

me si des molécules “messagers” excrétées par la plante-hôte parviennent à

induire au niveau des hyphes l'apparition de polypeptides spécifiques, l'aug-

mentation ou la diminution d'autres polypeptides déjà présents dans le

champignon isolé. La migration pariétale des phosphatases acides peut

également étre affectée par modification de la structure des parois fongiques

à la suite de la confrontation des deux partenaires. La présence de la plante-

hóte au voisinage des hyphes peut contribuer à transformer chimiquement et

localement les parois, ce qui entrainerait le blocage de certains transferts.

Chez les Levures notamment, des auteurs ont montré que des modifications

des conditions de cultures ont des conséquences sur la structure pariétale et,

en particulier, sur la teneur et la structure des mannanes (Bonaly &

Reisinger, 1971; San Blas & Cunningham, 1974a, 1974b; Touimi-Benjelloun

& Bonaly, 1975).

REMERCIEMENTS

Les auteurs remercient Mme V. Gianinazzi-Pearson qui leur a permis d’effec-

tuer les techniques d'immunocytochimie 4 la Station d’Amélioration des Plantes de

l'INRA de Dijon, et M.D. Mousain du Laboratoire de Recherches sur les Symbiotes

des Racines de l'INRA de Montpellier où fut préparé le sérum.

BIBLIOGRAPHIE

ANTIBUS R.K., CROXDALE J.G., MILLER O.K. and LINKINS A.E., 1981 -

Ectomycorrhizal fungi of Salix rotundifolia. 11. Resynthetized mycorrhizal

complexes and their surface phosphatase activities. Canad. J. Bot. 59:

2458-2465.

BA A.M., 1990 - Contribution à l'étude de la symbiose ectomycorhizienne chez deux

espèces forestières d'Afrique intertropicale: Afzelia africana Sm. et Uapaca

Source : MNHN, Paris

302 V. GOURP et J.-C. PARGNEY

guineensis Müll. Arg. Thèse de Doctorat, Univ. Sciences et Techniques du

Languedoc.

BARLETT E.M. and LEWIS D.H., 1973 - Surface phosphatase activity of

mycorrhizal roots of beech. Soi/ Biol. Biochem. 5: 249-257.

BERJAUD C., 1986 - Effet de la carence en phosphore sur les phosphatases acides

d'un champignon ectomycorhizogéne Pisolithus tinctorius. Thèse de Doctorat,

Univ. Sciences et Techniques du Languedoc.

BIELESKI R.L., 1973 - Phosphate pools, phosphate transport and phosphate

availability. Annual Rev. Pl. Physiol, 24: 225-252

BIENZ K., EGGER D. and PASANONTES L., 1986 - Electron microscopic

immunocytochemistry. Silver enhancement of colloidal gold marker allows dou-

ble labelling with the same primary antibody. J. Histochem. Cytochem. 30:

1337-1342.

BONALY R. ct REISINGER O., 1971 - Etude des modifications chimiques et

ultrastructurales de la paroi de trois levures du genre Rhodotorula cultivées sur

deux milieux différents. Compr. Rend. Hebd. Séances Acad. Sci., sér. D, 272:

2309-2312.

BOUSQUET N., 1987 - Etude immunoenzymatique de phosphatases acides de

champignons ectomycorhiziens. Thése de Doctorat, Univ. Sciences et Techni-

ques du Languedoc.

BOUSQUET N., CLEYET-MAREL J.C., BERJAUD C. and MOUSAIN D., 1987

- Use of immunoenzymatic techniques for characterization of ectomycorrhizal

fungi. Bull. O.E.P.P. 17: 306-307.

JA M., MOUSAIN D., LECOUVREUR B. et d’AUZAC J, 1980 - Influen-

de la carence phosphatées sur les activités phosphatases acides de trois

champignons mycorhiziens: Hebeloma edurum Metrock, Suillus granulatus (L.

et Fr.) O. Kuntze, Pisolithus tinctorius (Pers.) Coker et Couch. Physiol. Vég.

18: 489-504.

CALLOW JA., 1984 - Cellular and molecular recognition between higher plants

and fungal pathogens. /n: H.F. LINSKENS & J. HESLOP-HARRISON,

Eneyclopedia of plant physiology. New series, vol. 17 Cellular interactions.

Springer-Verlag: 212-237,

CHILVERS G.A., DOUGLAS P.A. and LAPEYRIE F.F, 1986 - A paper-

sandwich technique for rapide synthesis of mycorrhizas. New Phytol. 103:

397-402.

DAY P.R., 1984 - Genetics of recognition systems in host-parasite interactions. /n:

H.F. LINSKENS & J. HESLOP-HARRISON, Encyclopedia of plant

physiology. New series, vol. 17 Cellular interactions. Springer-Verlag: 134-147.

DEXHEIMER J., AUBERT-DUFRESNE M.P., GERARD J., LE TACON F. et

MOUSAIN D., 1986 - Etude de la localisation ultrastructurale des activités

phosphatasiques acides dans deux types d'ectomycorhizes: Pinus nigra

nigricans/ Hebeloma crustuliniforme et Pinus pinaster]Pisolithus tinctorius, Bull.

Soc. Bot. France 133 ( Lettres Bot.): 343-352.

GIANINAZZI-PEARSON V., BONFANTE-FASOLO P. and DEXHEIMER T

1986 - Ultrastructural studies of surface interactions during adhesion and in-

fection by ericoid endomycorrhizal fungi. /n: B. LUGTENBERG, Recognition

in microbe-plant symbiotic and pathogenic interactions. NATO ASI series.

Berlin, Heidelberg, Springer-Verlag: 273-282.

HATCH A.B., 1937 - The physical basis of mycotrophy in the genus Pinus. Black

Rock Forest Bull. 6: 1-168.

CAL

Source : MNHN, Paris

PHOSPHATASES ACIDES DE PISOLITHUS 303

HILBERT J.L. et MARTIN F., 1988 - Modifications des profils polypeptidiques

lors de l'établissement de la symbiose ectomycorhizienne. Cryptogamie, Mycol.

9; 221-231,

HO I. and ZAK B., 1979 - Acid phosphatase activity of six ectomycorrhizal fungi.

Canad. J. Bot. 57; 1203-1205.

KRUZEL M. and MORAWIECKA B., 1982 - Acid phosphatase of potato tuber

(Solanum tuberosum L). Purification properties, sugar and amino acid compo-

sition. Acta Biochem. Polon. 29: 321-330.

LACAZE B., 1983 - Localisation cytochimique des activités phosphatasiques acides

de champignons mycorhiziens développés sur milieu complet ou carencé en

phosphate. Canad. J. Bot. 61: 1411-1414,

LEI J., 1988 - Etude expérimentale des systèmes symbiotiques mycorhiziens de quel-

ques essences ligneuses. Application pratique à la mycorhization de vitroplants.

Thèse de Doctorat, Univ. Nancy L

LEI J, ct DEXHEIMER J., 1988 - Etude des variations, en fonction de l’âge, de la

localisation ultrastructurale des activités phosphatasiques dans deux

ectomycorhizes à Basidiomycètes et dans un champignon non associé,

Phytomorphology 38: 9-20.

MARX D.H., 1969 - The influence of ectotropic mycorrhizal fungi on the resistance

Of pine roots to pathogenic infections. 1. Antagonism of mycorrhizal fungi to

root pathogenic fungi and soil bacteria, Phytopathology 59: 153-163.

MIZUNAGA T., 1979 - Some properties of phosphate repressible and constitutive

acid phosphatases of baker's yeast. Agric. Biol, Chem. 43: 1211-1218.

MOUSAIN D. et SALSAC L. 1982 - Nutrition phosphatée et activités

phosphatases acides des symbioses ectomycorhiziennes cultivées isolément ou

en association. Les Colloques de l'INRA 13: 87-100.

MOUSAIN D. 1989 - Etude de la nutrition phosphatée de symbiotes

ectomycorhiziens. Thése de Doctorat d'Etat, Univ. Sciences et Techniques du

Languedoc

NAHAS E., TERENZII H.F. and ROSSI A., 1982 - Effect of carbon source and

PH on the production and secretion of acid phosphatase (EC 3.1.32.) and

alkaline phosphatase (EC 3.1.3.1.) in Neurospora crassa. J. Gen. Microbiol.

182: 2017-2021.

NEWMAN G.R., JASANI B. and WYN FORD-THOMAS D. 1985 -

Immunoreagent penetration into plastic sections, Histochemical J. 17: 837-842.

NEWMAN G.R., 1987 - Use and abuse of LR white. Histochemical J. 19: 119-120.

PATNI N.J. and AARONSON S., 1974 - Partial characterization of the intra- and

extracellular acid phosphatase of an alga, Ochromonas danica. J. Gen.

Microbiol. 83: 9-20.

PATNI N.J, FHAWALME S.W. and AARONSON S. 1977 - Extracellular

phosphatases of Chlamydomonas reinhardi and their regulation. J. Bacteriol.

130: 205-211.

RAININA E.l., ZUBATOV A.S., BUCHNOLOW I.B. and LUZIBOV V.N., 1979 -

Acytochemical study of the localization of acid phosphatase in Saccharomyces

cerevisiae at different growth phases. Histochem. J. 1: 299-310.

SAN BLAS G. and CUNNINGHAM W.L., 1974a - Structure of the cell wall and

exocellular mannans from the yeast Hansenula holstii. 1, Mannans produced in

phosphate-contening medium. Biochem. Biophys. Acta 354: 233-246.

Source: MNHN. Paris

304 V. GOURP et J.-C. PARGNEY

SAN BLAS G. and CUNNINGHAM W.L., 1974b - Structure of the cell wall and

exocellular mannans from the yeast Hansenula holstii. II. Mannans produced

in phosphate-limited medium. Biochem. Biophys. Acta 354: 247-253.

SCHWEINGRUBER A.M. and SCHWEINGRUBER M.E., 1982 - Purification

and identification of inactive forms of repressive and constitutive acid

phosphatase in yeast. Biochem. Biophys. Acta 717: 203-209.

STRAKER C.J., GIANINAZZI-PEARSON V., GIANINAZZI S., CLAYET-

MAREL J.C. and BOUSQUET N., 1989 - Electrophoretic and immunological

studies on acid phosphatase from a mycorrhizal fungus of Erica hispidus L.

New Phytol. 111: 215-221.

THIERY J.P., 1967 - Mise en évidence des polysaccharides sur coupes fines en

microscopic électronique. J. Microscop. 6: 987-1017.

TOUIMI-BENJELLOUN A. et BONALY R., 1975 - Etude des parois des levures

Rhodotorula. V. Influence des conditions de culture sur les phosphatases de

Rh. rubra. Biochem. Biophys. Acta 392; 39-50.

WAKAO N., SAKURAI Y., SHIOTA H. and TANIMURA L, 1975 -

Cytochemical localization of acid and alkaline phosphatase in Aspergillus

oryzae. J. Gen. Appl. Microbiol. 21: 233-249.

WOOLHOUSE H.W., 1969 - Differences in the properties of the acid phosphatases

of plant roots and their signification in the evolution of adaptive ecotypes. In:

R.H. ROBINSON, Ecological aspects of the mineral nutrition of plants. Proc.

9th Symp. Brit. Ecol. Soc.: 357-380.

YAMAMOTO S., MINODA Y. and YAMADA K., 1969 - Localization of acid

phosphatase activity in mycelia of Aspergillus terreus at electron microscope

level. Agric. Biol. Chem. 33: 1351-1356.

Source : MNHN. Paris

Cryptogamie, Mycol. 1991, 12 (4): 305-314 305

THE INCIDENCE OF DERMATOPHYTES,

KERATINOPHILIC AND SAPROPHYTIC FUNGI

IN PLAYGROUND OF SCHOOLS AND HOUSE DUST

IN UPPER EGYPT

A.LI. ABDEL-HAFEZ

Botany Department, Faculty of Science, Sohag,

Assiut University, Sohag, Egypt

ABSTRACT - 50 dust samples collected from school playgrounds and houses from

Upper Egypt (Assiut and Sohag Governorates) were examined for the presence of

dermatophytes, keratinophilic and saprophytic fungi using sterile human-hair frag-

ments as baits at 25°C. 33 species and 2 varieties belonging to 17 genera were col-

lected. A large number of these fungi were cither well-known agents of human and

animal mycosis or have been frequently encountered from human and animal le-

sions, Dermatophytes were represented by 3 species: Microsporum gypsum, Tricho-

phyton mentagrophytes and T. terrestre. Keratinophilic fungi closely related to der-

matophytes are represented by Arthroderma cuniculi, Chrysosporium asperatum, C.

lobatum, C. indicum, C. keratinophilum, C. pannicola and C. tropicum. Other sapro-

bic moulds were also collected: Acremonium (2 species), Alternaria (1 species), Asper-

gillus (5 species + 1 var.), Chaetomium (2 species), Fusarium (3 species), Penicillium

(3 species), Scopulariopsis (1 species) and several others. These fungi varied in their

Presence in the two environments and several species are well-known mycotoxin-pro-

ducing fungi.

RESUME - Une recherche de champignons dermatophytes, kératinophiles et

saprophytes a été effectuée dans des poussiéres de terrains de jeux et de maisons (50

échantillons), en Haute Egypte. Pour cela, des fragments de cheveux ont été utili

comme pièges. 33 espèces et 2 variétés appartenant à 17 genres ont été recensées.

Nombre d'entre eux sont connus comme agents de mycoses humaines et animales ou

pour avoir été isolés de lésions. Les dermatophytes sont représentés par 3 espèces:

Microsporum gypseum, Trichophyton mentagrophytes et T. terrestre, les kératinophiles

sont: Arthroderma cuniculi, Chrysosporium asperatum, C. lobatum, C. indicum, C.

keratinophilum, C. pannicola et C. tropicum. D'autres moisissures saprophytes ont

été isolées: Acremonium (2 esp.), Alternaria (1 esp.), Aspergillus (5 esp. et 1 var.),

Fusarium (3 esp.), Penicillium (3 esp.), Scopulariopsis (1 esp.) et plusieurs autres. Ces

champignons varient suivant le substrat où ils ont été isolés et plusieurs espèces sont

potentiellement productrices de mycotoxines.

KEY WORDS : dermatophytes, keratinophilic fungi, saprophytic fungi, Egypt.

Source : MNHN, Paris

306 A.LI. ABDEL-HAFEZ

INTRODUCTION

The occurrence and distribution of dermatophytes and other keratino-

philic fungi in soils and other substrates have been studied in many parts of

the world by numerous researchers (Al-Doory, 1967; Alteras & Evolceanu,

1969; Ajello & Padhye, 1974; Caretta et al., 1977; Bojanovsky et al., 1979;

Abdel-Fattah et al., 1982; Ali-Shtayeh £ Asa'd Al-Sheik, 1988; Abedl-Hafez

et al., 1989 a, b; Youssef et al., 1989; Karm El-Din et al., 1990). These fungi

have been recognized as causal agents of human and animal diseases (Fran-

ger & Belsan, 1975; Frey et al, 1979; Rippon, 1982; Frelier et al., 1985:

Mitchell et aL, 1987). The present work has been carried out to study the

incidence of these fungi in playground of schools and house dust in Upper

Egypt.

MATERIALS AND METHODS

Fifty dust samples were collected from playground of various schools

(elementary and preparatory) and from houses (25 samples from each envi-

ronment) at Assiut and Sohag Governorates (Upper Egypt). Each dust sam-

ple was put in a clean polyethylene bag, transferred to Mycological labora-

tory and stored at 2°-5°C till fungal analysis.

The dust samples were analysed chemically for the estimation of organ-

ic matter ant total soluble salts contents (Jackson, 1958). A pH-meter was

used for estimation of dust pH. The electrode was immersed in the dust sus-

pension with a ratio of 1:5 (w/v).

Isolation of keratinophilic fungi:

The air baiting technique was employed as recommended by Vanbreu-

seghem (1952). 50g of dust were put in a sterile plate and 5 plates were used

for each sample. A sufficient quantity of sterile distilled water was added to

rise the moisture content of dust to about 25-30% and mixed throroughly.

Sterile human-hair fragments were scattered on the dust surfaces. Plates were

incubated at 25°C for 12-14 weeks. Five bait fragments (from each) plate

were transferred to the surface of Sabouraud’s glucose agar medium (Moss

& Mc Quown, 1969) supplemented with choramphenicol (0.05 mg/ml) and

actidione (0.5 mg/ml). Plates were incubated at 25°C for 3-4 weeks and the

developing fungi were counted, identified (based on macro- and microscopic

characteristic) and the numbers were calculated per 25 hair fragments for

each sample. The relative importance value (RIV) was calculated for each

fungal genera and species (Ali-Shtayeh & Asa'd Al-Sheikh, 1988).

The following references were mainly used for the identification of fun-

gi: Carmichael (1962), Raper & Fennell (1965), Booth (1971), Ellis (1971),

Frey et al. (1979), Domsch et al. (1980), Van Oorschot (1980) and Ramirez

(1982).

Source : MNHN. Paris

FUNGI IN EGYPT

RESULTS AND DISCUSSION

307

The amount of organic matter and total soluble salts in dust samples

were very low and fluctuated between 0.5-1.1% and 0.3-0.8%, respectively.

The pH values of playground and house dust samples were alkaline and

ranged between 7.1-7.8. The total numbers of isolates of dermatophytes and

other keratinophilic and saprophytic fungi in playground of schools and

house dust varied between 3-11 and 2-9 colonies/25 hair fragments, respec-

tively (Table 1). Results show that there was no correlation between the tot-

al number of isolates in each sample and number of genera and species, but

in several samples the high number of isolates coincided with high numbers

of genera and species and vice versa. This agrees the results obtained by Ab-

del-Hafez & Shoreit (1985) and Abdel-Hafez et al. (1986).

Table 1. - Total isolates (TC: calculated per 25 hair fragments) and number of gen-

era (NG) and species (NS) recorded in play-ground and house dust particles

baited with human hair at 25°C.

Tableau 1. - Nombre total d'isolats (TC), de genres (NG) et d'espéces (NS) isolés de

pous

veux humains (25 fragments) à 25°C.

ère de terrains de jeux et de poussières domestiques, piégés avec des che-

Schoolplayground House dust

Sample

number TC NG NS Te NG NS

1 6 2 2 5 z 3

2 4 d 1 = 1 2

3 4 3 3 B 3 4

4 9 4 5 6 2 2

5 3 1 1 7 3 ?

6 7 3 3 5 P 2

7 10 4 6 EN 1 1

8 5 1 2 5 2 2

9 8 3 4 6 2 3

10 7 2 2 8 4 4

1 8 3 3 6 3 3

12 9 4 4 4 1 2

13 6 2 3 7 3 3

14 8 3 4 5 2 2

15 9 4 4 6 3 3

16 n 5 6 4 2 2

17 6 1 2 3 1 1

18 7 2 3 8 3 4

19 9 3 5 2 1 1

20 8 3 4 B 2 à

21 7 2 2 3 1 1

22 9 4 >: 9 4 5

23 7 2 3 4 2 2

24 8 3 4 7 3 3

25 6 D 2 3 1 2

Source : MNHN, Paris

308 A.LL ABDEL-HAFEZ

Thirty-three species and 2 varieties belonging to 17 genera were col-

lected from playgrounds (14 genera and 26 species + 2 varieties) and house

dust particles (10 genera and 18 species + 1 variety) using human hair frag-

ments as baits at 25°C (Tables 2, 3, 4). Dermatophytes and related fungi

comprised four genera: Arthroderma, Chrysosporium, Microsporum and Tri-

chophyton.

Table 2 - Percentage incidence (%I: calculated per 25 samples), Percentage count

(%C: calculated per total fungal isolates) and number of species (NS) of vari-

ous fungal genera recovered from playground and house dust particles baited

with human hair at 25°C.

Tableau 2 - Fréquence (% I calculée sur 25 échantillons), pourcentage (^o C calculé

sur le nombre total d'isolats) et nombre d'espéces (NS) des différents genres.

Schoolplayground House dust

Genera NS "ol %C NS “ol Wis

Acremonium (2) 2 12 2.4, 1 16 4,5

Alternaria (1) 1 8 11 * = E

Arthroderma (1) 1 8 1.6 x $ $

Aspergillus (5+1 variety) a+ |da | 201 | 341] 40 | 258

Chaetomium (2) 5 e “ ES 12 3.0

Chrysosporium (6) 6 60 | 38.6 4 52 | 409

Emericella (1 +1 variety) 1+1 12 1.6 E E 5

Fusarium (3) E 24 6.0 1 16 3.8

Geotrichum (1) $ E F 1 8 1.5

Microsporum (1) 1 4 1.1 £ t E

Paecilomyces (1) 1 8 1.6 t t =

Penicillium (3) 2 28 7.1 3 20 6.8

Scolecobasidium (1) I 4 1.1 z t 5

Scopulariopsis (1) 1 20 49 1 16 4.5

Sterile mycelium A 24 6.0 E 8 38

Trichoderma (1) - - - 1 4 0.8

Vrichophyton (2) $ 1.6 1 4 0.8

Trichothecium (1) 1 8 1.6 - = S

Unknown . 16 33 = 12 3.8

Total number of genera = 17 14 100 10 100

Total number of species = 26 +2 varieties 18 +1 variety

33 + 2 varieties

Figures between parenthesis refer to the number of species.

Chrysosporium was the most common keratinophilic genus and was re-

covered from 60 and 52% of playground and house dust samples comprising

38.6 and 40.9% of total fungal isolates and had the RIV’s of 98.6 and 92.9,

respectively. It was represented by 6 species of which C. indicum, C. keratino-

philum and C. tropicum were the most prevalent in the two environments.

They occurred in 24-44% and 16-40% of the samples contributing 8.2-14.7%

and 8.3-17.4% of total isolates in the two substrates and possessed the RIV’s

of 32.2-58.7 and 24.3-57.4, respectively. C. asperatum in playground and

house dust; and C. lobatum and C. pannicola in playground samples were

less frequent. C. indicum, C. keratinophilum and C. tropicum have world-wide

Source : MNHN, Paris

FUNGI IN EGYPT 309

distribution in soils (Padhye et al., 1967; Alteras £ Evolceanu, 1969; Ajello

& Padhye, 1974; Piontelli & Caretta, 1974; Marsella & Mercantini, 1986;

Ali-Shtayeh & Asa'd AlSheikh, 1988). These three species were isolated

from Egyptian soils, but with different occurrence (Abdel-Fattah et al., 1982;

Abdel-Hafez et al., 1989 a, b; Abdel-Mallek et al., 1989; Youssef et al., 1989;

Karam El-Din et al., 1990). Abdel-Hafez et al. (1989a) isolated C. aspera-

tum from soils (8% of the samples) of Sinai Governorate (Egypt). It oc-

curred in 4.2% of the floor dust samples of Arab kindergarten shcools in

the west bank of Jordan (Ali-Shtayek & Asa'd Al-Sheikh, 1988). C. pannicola

occurred in 5% of the mud samples of Ibrahimia canal in Egypt (Abdel-Ha-

fez et al., 1989b).

Table 3 - Total counts (TC; calculated per 625 hair fragments), number of cases of

isolation (NCI: out of 25 samples) and the relative importance value (RIV) of

dermatophytes and closely related fungi recovered from playground and house

dust particles baited with human hair at 25°C.

Tableau 3 - Nombre total des espéces de dermatophytes (TC calculé sur 625 frag-

ments de cheveux), nombre de cas d'isolement (NCI sur 25 échantillons) et im-

portance relative (RIV) des espéces.

Schoolplayground| House dust

Genera and species Te NCI RIV] TC NCI RIV

Arthroderma cuniculi Dawson PEE etal a Il Ns

Chrysosporium 71 | 15 |9&.6| 58 | 13.1929

C. asperatum Carmichael ZIEL eras Us TIS [s

C. lobatum Scharapov Ga | ly a |

C. indicum (Randhwa & Sandhu) Garg 15 | 6 11 | 4 |243

C. keratinophilum (Frey) Carmichael ETE 18 | 7 | 41.6

C. pannicola (Corda) Van Oorschot

& Stalpers zo e ea ed E

C. tropicum Carmichael 21 | 8 [|434| 23 | 10 | 574

Microsporum gypseum (Bodin) Guiart

& Grigorakis |) oer) |e 2

Trichophyton 3 | 2 ]96] 1] 1 | 48

T. terrestre Durie & Frey am. eoe es penal

T. mentagrophytes (Robin) Blanchard SRM lee te a

Total isolates 79 59

Number of genera 4 2

Number of species 9

Occurrence remarks: High occurrence, between 13-25 cases (out of 25 samples); mod-

erate occurrence, between 7-12 cases; low occurrence, between 4-6 cases; rare occur-

rence, between 1-3 cases.

Microsporum (1 species) and Trichophyton (2 species) were the only der-

matophytes isolated in the present study: M. gypsum (RIV 5.1) and T. terres-

tre (RIV 9.6) in school playgrounds; and T. mentagrophytes (RIV 4.8) in

house dust particles. M. gypseum has world-wide distribution in soils (Crozi-

er, 1980; Mc Aleer, 1980; Sur & Gosh, 1980; Abdel-Fattah et al., 1982; Ab-

Source : MNHN, Paris

310 A.L.I. ABDEL-HAFEZ

Table 4 - Total count (TC: calculated per 625 hair fragments), number of cases of

isolation (NCI: out of 25 samples) and the relative importance value (RIV) of

saprophytic fungi recovered from playground and house dust particles baited

with human hair at 25°C.

Tableau 4 - Nombre total des espéces de saprophytes (TC calculé sur 625 fragments

de cheveux), nombre de cas d'isolement (NCI sur 25 échantillons) et impor-

tance relative (RIV) des espéces.

Schoolplayground| ^ House dust

Genera and species TC NCI RIV] TC NCI RIV

Acremonium Sc hes geleet

A. kiliense Gruetz ze e LES ie e hae

A. strictum W, Gams 3 | 2 |96| 6 | a Laus

Alternaria alternata (Fr.) Keissler E EE E 2

Aspergillus 37 11 [64.1 | 3 10 | 65.8

A. flavus Link 2 E suas ae

A. flavus var. columnaris Link A 4 18.7 8 3 18.1

A. fumigatus Fresenius 15 | 8 |402| 10 | 7 |356

A. niger Van Tieghem A 5x al E

A. terreus Thom EM 0 EE

A. versicolor (Vuill.) Tirab. pp a ECK s

Chaetomium - - H 4 3 15.0

C. globosum Kunze ex Fries - - - 3 2 10.3

C. spirale Zopf zt eee [res | e er o

Emericella EN A nes

E. nidulans (Eidam) Vuill. E E

E. nidulans var. latus Thom & Raper "PST S bech es

Fusarium l 6 30.0 5 19.8

F. moniliforme Sheldon UN epe! Sm ES eee AnA

F. oxysporum Schlecht 3 pots ores e MR lu

F. solani (Mart.) Sacc. 52 5 rss S ot

Geotrichum candidum Link E E eS

Paecilomyces variotii Bainier 3023 epang fra eA

Penicillium 13 | 7 [351] 9 | 5 |268

P. chrysogenum Thom 8 | 3 |163| 6 | 4 |205

P. funiculosum Thom NAAA ES

P. variabile Sopp A E dts

Scolecobasidium constrictum Abbott ls es

Scopulariopsis brevicaulis (Sacc.) Bainier 9 | 5 |249| 6 | 4 | 205

Sterile mycelium u | é 1300| 5 | 2 Jars

Trichoderma viride Pers. ne cas red IT 8

Trichothecium roseum (Pers.) Link i esie eem s

Unknown 6 | 4 |205| 1 | 1 | 48

Total isolates 105 73

Number of genera 10 8

Number of species 17+2 var. 1242 var.

Occurrence remarks: High occurrence, between 13-25 cases (out of 25 samples); mod-

erate occurrence, between 7-12 cases; low occurrence, between 4-6 cases; rare occur-

rence, between 1-3 cases.

Source : MNHN, Paris

FUNGI IN EGYPT 311

del-Hafez et al., 1989a, b; Youssef et al., 1989; Karam El-Din et al., 1990)

and a causal agent of different types of tinea (Frey et al., 1979). T. terrestre

was encountered from various substrates, but in different numbers and fre-

quencies, in many parts of the world by several researchers (Jana et al.,

1979; Marsella & Mercantini, 1986; Abdel-Hafez, 1989a, b; Youssef et al.,

1989; Karam El-Din et al., 1990). T. mentagophytes isolated from soils, man

and animals in many parts of the world and a causal agent of tinea and

onychomycosis (Frey et al., 1979).

Arthroderma cuniculi was recovered from 2 samples of school play-

grounds (out of 25) and had RIV of 9.6. Abdel-Hafez et al. (19892) encount-

ered the above keratinophilic species in 6% of the soil samples collected

from Sinai Governorate (Egypt).

The most common moulds other than dermatophytes and related (kera-

tinophilic) fungi were Acremonium (2 species in school playground and

house dust), Aspergillus (5 species + 1 variety), Fusarium (3 species), Penicil-

lium (3 species), Scopulariopsis (1 species) and sterile mycelium. Although the

method used in this research (human hair baits) does not allow to perform a

quantitative analysis, it permits to detect their presence. Their presence fluc-

tuated between 12-44% and 8-40% of the playground and dust samples con-

tributing 2.7-20.1% and 3.8-25.8% of total isolates and RIV's of 14.7-64.1

and I1.8-65.8, respectively. The most common saprobic species on the two

environments were Acremonium strictum (RIV 9.6 and 20.5), Aspergilllus fla-

vus (RIV 34.5 and 34.6), A. flavus var. columnaris (RIV 18.7 and 18.1), A. fu-

migatus (RIV 40.2 and 35.6), Fusarium solani (RIV 15.3 and 19.8), Penicillium

chrysogenum (RIV 16.3 and 20.5), P. funiculosum (RIV 24.9 and 9.5), Scopu-

lariopsis brevicaulis (RIV 24.9 and 20.5) and sterile mycelium (RIV 30 and

11.8). The above species were encountered, but with different numbers and

occurrence, from Egyptian and Saudi Arabia air-dust particles on glucose-

and cellulose-Czapek’s agar plates at 28°C as reported by Abdel-Hafez &

Shoreit (1985) and Abdel-Hafez et al. (1986). Most of the previous species

were isolated from grain dust from New Orleans (Palgren et al., 1983). Also

these species were isolated from soils in many parts of the world using hu-

man hair fragments as baits as reported by several workers. The remaining

species were less frequent (Table 4).

Numerous fungi were isolated from any of the two substrates: Chaeto-

mium (2 species, RIV 15), Geotrichum (1 species, RIV 9.5) and Trichoderma

(1 species, RIV 4.8) in house dust particles; and Alternaria (1 species, RIV

9.1), Emericella (1 species and 1 variety, RIV 13.6), Paecilomyces (1 species,

RIV 9.6), Scolecobasidium (1 species, RIV 5.1) and Trichoderma (1 species,

RIV 4.8) in school playgrounds. These fungi are well known as saprobes on

various substrates by numerous researchers.

In conclusion, school playgrounds and house dust particles have been

contaminated with numerous fungi which are either well-known human and

animal mycotic agents (Microsporum gypsum, Trichophyton mentagrophytes

and T. terrestre) or have been isolated from human and animal lesions (AL

ternaria alternata, Arthroderma cuniculi, Aspergillus flavus, A. fumigatus, A. ni

ger, Chrysosporium tropicum, Emericella nidulans, Fusarium moniliforme, F. ox-

Source : MNHN, Paris

312 ALI. ABDEL-HAFEZ

ysporum, F. solani, Geotrichum candidum, Penicillium spp., Scopulariopsis

brevicaulis and several others) as reported by several researchers (Ainsworth

& Austwick, 1959; Carmichael, 1962; Salkin et al., 1975; Collins & Rinaldi,

1977; Frey et al., 1975; Rippon, 1982; Frelier et al., 1985; Mitchell et al.,

1987). Also numerous of the above species (as members of Aspergillus, Emer-

icella, Fusarium and Penicillium) are well-known mycotoxin-producing fungi.

Hence precautions must be taken by students and families for avoid contam-

ination.

REFERENCES

ABDEL-FATTAH H.M., MOUBASHER A.H. and MAGHAZY S.M., 1982 - Ker-

atinolytic fungi in Egyptian soils. Mycopathologia 79: 49-53.

ABDEL-HAFEZ S.I.I. and SHOREIT A.A.M., 1985 - Mycotoxoxins-producing

fungi and mycoflora of air-dust from Taif, Saudi Arabia. Mycopathologia 92:

65-71.

ABDEL-HAFEZ S..l., SHOREIT A.A.M., ABDEL-HAFEZ A.LI. and EL-MA-

GHRABY O.M.O., 1986 - Mycoflora and mycotoxin-producing fungi of air-

dust particles from Egypt. Mycopathologia 93: 25-32.

ABDEL-HAFEZ A.Ll., MAZEN M.B. and GALAL A-A., 19893 - Keratinophilic

and cycloheximide resistant fungi in soils of Sinai Governorate, Egypt. Crypto-

gamie, Mycol. 10: 265-273.

ABDEL-HAFEZ A.L.I., BAGY M.M.K. and SHOREIT A.A.M., 1989b - Keratino-

lytic fungi in mud of Ibrahimia Canal, Egypt. Cryptogamie, |

275-282.

ABDEL-MALLEK A.Y., BAGY M.M.K. and MOHARRAM A.M.A., 1989 - Ker-

atinolytic fungi of Wadi Qena in Egypt. Folia Microbiol. 34: 37-41.

AINSWORTH G.C. and AUSTWICK P.C.K., 1959 - Fungal diseases of animals.

Bucks, England, Commonwealth Agriculture Bureau, Farnham Royal.

AJELLO L. and PADHYE A., 1974 - Keratinophilic fungi of the Galapagos Is-

lands. Mykosen 17: 239-243.

AL-DOORY Y., 1967 - The occurrence of keratinophilic fungi in Texas soil. Myco-

pathol. Mycol. Appl. 33: 105-112.

ALLSHTAYEH M.S. and ASA’D AL-SHEIKH B.S., 1988- Isolation of keratino-

philic fngi from the floor dust of Arab kindergarten schools in the West Bank

of Jordan. Mycopathologia 103: 69-73.

ALTERAS 1. and EVOLCEANU R., 1969 - A ten years survey of Romanian soil

Screening for keratinophilic fungi (1958-1967). Mycopathol. Mycol. Appl. 38:

151

BOJANOVSKY A., MULLER U. and FREIGANG K., 1979 - Occurrence of der-

matophytes and other keratinophilic fungi in children’s playgrounds. Mykosen

22: 149-159,

BOOTH C., 1971 - The genus Fusarium. Kew, England, CMI.

CARETTA G., FRAT G.D., PIONTELLI E. and TODARO F., 1977 - Distrib-

ution of keratinophilic fungi in the soil of Volcano Etan (Sicily). Rivista Parasi-

tol. 38: 115-127.

CARMICHAEL J.W., 1962 - Chrysosporium and some other Aleruiosporic Hypho-

mycetes. Canad. J. Bot. 40: 1137-1172.

Source - MNHN, Pans

FUNGI IN EGYPT 313

COLLINS M.S. and RINALDI M.G., 1977 - Cutaneous infection in man caused by

Fusaruim moniliforme. Sabouraudia 15: 151-160.

CROZIER W.J., 1980 - The prevalence of geophilic dermatophytes in soils of Illa:

warra area of new South Wales. Austral. J. Dermatol. 21: 89-95.

DOMSCH K.H., GAMS W. and ANDERSON T., 1980 - Compendium of Soil Fun-

gi. London, Academic Press.

ELLIS M.B., 1971 - Dematiaceous Hyphomycetes. Kew, England, CMI.

FRANGER P. and BELSAN I., 1975 - Scopulariopsis Bainier as causative agent of

onychomycosis (Mycological and clinical study). Acta Univ. Carol. Med. 20:

333-358.

FRELIER P.F., SIGLER L. and NELSON P.E., 1985 - Mycotic pneumonia caused

by Fusarium moniliforme in an alligator. J, Med. Veterin. Mycol. 23: 399-402.

FREY D., OLDFIELD R.J. and BRIDGER R.C., 1979 - A Colour Atlas of Patho-

genic Fungi. London, Wolfe Medical Publ.

JACKSON M.L., 1958 - Soil chemical analysis. London, Constable and Co.

JANA M., KURES L., GUESSOUS N., BIAVA M.F. and PERCEBOIS G., 1979 -

Keratinophilic micromycetes isolated from various sites in Marrakesh and Cas-

ablanca (Morocco). Bull. Soc. Fran. Mycol. Méd. 8: 225-257.

KARAM EL-DIN A.A., HASSANEIN S.M. and YOUSSEF Y.A., 1990 - Occur-

rence of keratinophilic fungi and related dermatophytes in soil in Cairo, Egypt.

J. Egypt. Veterin. Med. Assoc. 50: 93-104.

MARSELLA R. and MARCANTINI R., 1986 - Keratinophilic fungi isolated from

soil of the Abruzzo National Park, Italy. Mycopathologia 94: 97-107.

Mc ALEER R.R., 1980 - Investigation of keratinophilic fungi from soils in Western

Australia. A preliminary survey. Mycopathologia 72: 155-165.

MITCHELL R.G., CHAPLI A.J. ans MACKENZIE D.W.R., 1987 - Emericella ni-

dulans in a maxillary sinus fungal mass. J. Med. Veterin. Mycol. 25: 339-341.

MOSS E.S. and Me QUOWN A.L., 1969 - Atlas of Medical Mycology. 3rd Ed.,

Baltimore, Williams & Wilkins Co.

PADHYE A., PAWAR V.H., SUKAPURE R.S. and THIRUMALACHER M.,

1967 - Keratinophilic fungi from marine soils of Bombay, India. Hindustan An-

tibiot. Bull. 10: 138-141.

PALMGREN M.S., LEE L.S., DELUCCA A.J. and CIEGLER A., 1983 - Prelimi-

nary study of mycoflora and mycotoxins in grain dust from New Orleans area

grain elevators. Amer. Hyg. Assoc. J. 44: 485-488.

PIONTELLI T. and CARETTA G., 1974 - Ecological consideration in some geomy-

cetes isolated on keratin substrates in mountainous localities in the Chilean An-

dis. Rivista Patol. Veg. 10: 261-314.

RAMIREZ C., 1982 - Manual and Atlas of the Penicillia. New York, Elsevier

Biomedical Press.

RAPER K.B. and FENNEL D.l., 1965 - The Genus Aspergillus. Baltimore, Wil-

liams and Wilkins Co.

RIPPON J.W., 1982 - Medical mycology. Philadelphia, W.B. Sanders Company.

SALKIN 1.F., GORDON M.A. and STONE W.B., 1975 - Daul infection of a

white-tailed deer by Dermatophilus congalensis and Alternaria alternata. J.

Amer. Veterin, Med. Assoc. 167: 571-573.

Source

MNHN, Paris

314 A.LI. ABDEL-HAFEZ

SUR B. and GHOSH G.R., 1980 - Keratinophilic fungi from Orissa India. I. Iso-

lation from soils. Sabouraudia 18: 275-280.

VANBREUSEGHEM R., 1952 - Biological technique for the isolation of dermato-

phytes from soil. Ann. Soc. Belge Med. Trop. 32: 173.

VAN OORSCHOT C.A.N., 1980 - A revision of Chrysosporium and allied genera.

Stud. Mycol. 20: 1-87.

YOUSSEF Y.A., KARAM EL-DIN A.A. and MOHAMED A., 1989 - Survey of

soil for human pathogenic fungi from Ismailia Governorate, Egypt. I. Isolation

of keratinophilic fungi. Mans. Sci. Bull. 16: 153-163.

Source : MNHN. Paris

Cryptogamie, Mycol. 1991, 12 (4): 315-318 SI

ANALYSES BIBLIOGRAPHIQUES

CASTANEDA R.F. & KENDRICK B., 1990 - Conidial Fungi from Cuba I

& IL. Univ. Waterloo, Biology Series, n* 32 (53 p.) & n° 33 (61 p.).

Les deux derniers fascicules de cette intéressante série de documents. portant

sur des disciplines biologiques diverses, édités par l'Université de Waterloo au Cana-

da, traitent des champignons microscopiques “conidiens” de Cuba. Ils sont la

résultante d'un début de collaboration entre des mycologues appartenant à ces deux

pays. Si la réputation de l'auteur canadien dans le domaine de la taxonomie des

champignons n'est plus à démontrer, celle de R.F. Castañeda s'est affirmée depuis

1985. A son crédit diverses publications sur les hyphomycétes de cette grande ile des

Caraibes, publications faisant suite à l'ouvrage d'Angel Mercado Sierra, sur les

micromycètes dématiés de la Sierra de Rosario (1984).

Dans ces deux fascicules, les auteurs nous présentent une étude taxonomique

d'un certain nombre d'éléments de la mycoflore microscopique de Cuba, mycoflore

qui demeure encore peu connue, malgré les travaux déjà réalisés. Il en est pour preu-

ve la proportion marquée de taxons, inédits pour la Science, parmi les récoltes

cubaines étudiées. Ainsi, le texte proposé comporte les diagnoses de 16 genres nou-

veaux et de 30 entités spécifiques. Sont également proposés 17 combinaisons nou-

velles et 56 binómes, venant élargir le spectre de champignons connus pour ce terri-

toire néotropical.

Les qualités de présentation des numéros actuels de cette série perpétuent la

tradition de ses particularités distinctives. On y trouve un texte clair et aéré,

présentant des descriptions morphologiques élaborées pour chaque taxon considéré,

suivies d'une discussion concise intégrant les connaissances les plus récentes sur cha-

que genre abordé. Le texte s'accompagne d'une iconographie abondante de dessins

au trait, remarquables par leur degré de précision, en somme des dessins parlants qui

font défaut à bon nombre de publications dans ce domaine.

La masse d'informations de nature taxonomique, rapportée dans un volume re-

lativement réduit, témoigne du souci des auteurs de fournir un texte analytique

dépourvu du superflu. Il est à croire que d'autres contributions de cette nature sont

en chantier; celles-ci proposeront aussi sans conteste d'autres taxons inédits pour la

Science. Ces derniers viendront ainsi consolider le postulat des auteurs présenté dans

l'introduction du fascicule n° 32: la Mycologie est encore au stade de la découverte;

ceci est en particulier valable pour le groupe de champignons anamorphes

d'Ascomycétes et de Basidiomycétes, qui s'est enrichi de plus de 300 genres au cours

des seules dix dernières années. Il ne reste alors aux mycologues où qu'ils soient,

qu'à relever le défi.

J. Mouchacca

PFISTER D.H., BOISE J.R. and EIFLER M.A., 1990 - A bibliography of

taxonomic mycological literature 1753-1821. Berlin, Stuttgart, J.

Cramer in der Gebrüder Borntraeger Verlasb. Mycologia Memoir n*

17, 161 p. ISBN 3-443-76007-4.

En reportant le point de départ de la nomenclature des champignons au ler

mai 1853, date de publication du "Species plantarum" ed. | de C. Linné, les

mycologues se doivent de connaitre un corpus bibliographique qu'ils avaient jusque-

là néglipé: à savoir les travaux publiés entre 1753 et 1821. L'abandon des travaux de

Source - MNHN. Paris

316 ANALYSES BIBLIOGRAPHIQUES

Persoon (1802) et Fries (1821-1832) comme points de départ a été longuement

discuté et a donné lieu aux modifications de l'Art. 13.1 (d) du Code International de

Nomenclature Botanique (Sydney, 1983 et Berlin, 1988).

La bibliographie publiée par D.H. Pfister et al, doit faciliter l'accès aux travaux

botaniques de la fin du XVIIIème siècle, dans lesquels les noms de champignons et

de lichens sont désormais valides et légitimes. Les références ont été réunies à partir

des citations de Persoon et de Fries et aussi en utilisant les grandes bibliographies.

Tous les documents cités ont été vérifiés et consultés.

Chaque référence est annotée d'informations concernant les champignons et les

lichens qui y sont étudiés, ainsi que d'informations purement bibliographiques (cxi

tence de traductions, de microéditions, présence de l'ouvrage à l'Université

d'Harvard, ou dans de grands centres mycologiques (Kew, Munich...)). Des tableaux

donnant les dates de parution de certains ouvrages publiés en fascicules (comme

"I'Herbier de France" de Bulliard ou l'"English Botany^ de Smith), et une liste de

périodiques cités (abréviation titre développé, dates extrémes de parution, existence

en microformes) complétent cet ouvrage quasi exhaustif (les auteurs, avec modestie,

attendent les additions et corrections).

La parution de cette compilation, réunissant des références pour la plupart

dans le ^Taxonomic Literature” ed. 2, interdira dorénavant à tout mycologue

taxonomiste sérieux de citer de façon incorrecte ou même erronée les travaux de cette

période.

D. Lamy

BREITENBACH J. & KRÄNZLIN F. Ed., 1991 - Champignons de Suisse -

Tome 3. Bolets et champignons à lames lère partie. Lucerne, Edition

Mykologia, 364 p., 3 pl. fig. au trait, 450 fig., 450 phot. col., 2 cartes.

ISBN 3-85604-130-3. SFr. 148.

Avec une facture tout aussi soignée que celle des deux premiers volumes - res-

pectivement consacrés aux Ascomycètes et aux Basidiomycètes sans lames -, ce

troisième tome des “Champignons de Suisse” traite des Bolets et d'une partie des

espéces à hyménophore lamellé. Bien sür, l'agencement de l'ouvrage suit le modèle

adopté dés le début pour cette collection.

Une longue introduction donne les caractéristiques. des ordres étudi

Polyporales à lamelles, Boletales, Agaricales avec Hygrophoraceae et

Tricholomataceae, tout en offrant un tableau d'ensemble des penres qui y sont

classés. Les Auteurs proposent également de nombreux renseignements d'ordre

méthodologique, en particulier sur la mesure des basidiospores; à ce sujet, ils rappel-

lent fort judicieusement que de multiples facteurs, par exemple l'áge du basidiocarpe,

la sécheresse ou l'humidité du temps, peuvent influer sur les dimensions de ces

éléments. Plusieurs listes ont été établies pour les abréviations usuelles et les symbo-

les, les noms d'auteurs et les dénominations des végétaux; elles accompagnent un

substantiel glossaire complété par des schémas très clairs illustrant divers caractères

macro- et microscopiques. Toutes ces indications concourent au même but, celui de

permettre la meilleure utilisation possible du répertoire floristique; elles aideront aus-

Si certains à parfaire leurs connaissances de base en mycologie. Ce sera l'occasion

d'apprendre, par exemple, que “legit” signifie "a récolté” et non pas “a légué” ou que

“paroi” et membrane” désignent depuis longtemps des structures différentes.

Précédée par une série de clés d'identification et suivie des index, la partie des-

criptive et iconographique se rapporte à 450 espéces. Chacune de celles-ci est étudiée

en détail: nomenclature, synonymie, habitat, caractéristiques, remarques,

authentification des récoltes. Les particularités microscopiques essentielles sont

dessinées et jointes à une photographie représentant deux ou bien, en général, plu-

sieurs basidiocarpes à différents stades de développement, sous divers angles et dans

leur station naturelle. Les échelles pour l'estimation des dimensions réelles, clai-

Source : MNHN, Paris

ANALYSES BIBLIOGRAPHIQUES 317

rement indiquées, sont souvent variables d'un document á l'autre et obligent la vue á

un petit exercice de modification en continu du grossissement. L'illustration dans son

ensemble est superbe, tant pour la netteté que pour la délicatesse et la fidélité des

teintes.

Réalisé avec sérieux, cet ouvrage comporte cependant, au fil des pages, quel-

ques coquilles (rématodes pour nématodes, gléoplère pour gloéoplére, et

imprécisions (fasciculé n'est pas cespiteux,...). Parmi les noms d'auteurs, pas tou-

jours abrégés de facon orthodoxe, on retrouvera aisément ^M.A." Libert et G.

"Métrod^. Par contre, beaucoup ne feront peut-être pas le rapprochement entre Che-

valier, cité au moins depuis la deuxième édition de “The Agaricales in Modern

Taxonomy” (R. Singer, 1962) comme référence pour les Boletaceae et François

Fulgis Chevallier - avec deux 1 - (1796-1840), auteur en 1826 d'une Flore générale

des Environs de Paris où, sous le nom d'Ordre des Boletaceae”, il range, non seu-

lement des bolets tels qu'on les comprend actuellement, mais aussi la fistuline ct

"Polyporus sulphureus, P. betulinus, P. hirsutus, P. ovinus, etc.”. Par ailleurs, dans le

glossaire, la définition de la méiose pourrait souligner: division cellulaire avec

réduction “du nombre” des chromosomes tandis que l'explication concernant les

mycorhizes (ou mycorrhizes) serait à reprendre. En effet, les ectomycorhizes sont

formées par le manteau fongique et le réseau-de Hartig dont la partie profonde est

en contact avec les cellules corticales vivantes de la racine. L'existence du réseau de

Hartig doit être vérifiée pour considérer une espèce fongique comme véritablement

impliquée dans une ectomycorhize.

Les mycologues qui avaient déjà apprécié la valeur de cette collection, ne seront

pas déçus par ce troisième tome; les autres ne manqueront pas de reconnaître la

qualité d'une documentation dont l'intérêt s'étend bien au-delà des frontières de la

Suisse,

J. Perreau

CHELKOWSKI J., 1989 - Fusarium. Mycotoxins, Taxonomy and

Pathogenicity. Topics in secondary metabolism, vol. 2. Amsterdam,

Oxford, New York, Tokyo, Elsevier, 492 p. ISBN 0-444-87468-2. US $

171.

Oser publier de nos jours un gros livre sur les Fusarium relèverait de la gageure

si ce n'était, comme dans le cas présent, l'oeuvre collective d'une trentaine d'auteurs

particuliérement qualifiés, chacun dans sa spécialité.

Que le lecteur ne s'attende pas à trouver une oeuvre exhaustive dans un domai-

ne où les travaux évoluent à une vitesse vertigineuse; seuls sont traités ici les sujets

d'une brülante actualité.

C'est ainsi que la taxonomie occupe une place modeste: nous n'en sommes plus

aux querelles opposant les partisans de Wollenweber et ceux de Snyder. Nous trou-

vons cependant des clés d'identification des principales espèces européennes, l'une sj

noptique, l'autre dichotomique: le cas particulier du Microdochium nivale est abordé.

Les phytopathologistes seront peut-être déçus de trouver peu d’allusions aux

trachéomycoses. Par contre, les maladies fusariennes des céréales et des pommes de

terre sont abondamment étudiées. Plusieurs chapitres apportent des éléments

intéressants sur le rôle joué dans la pathogenése par des phytohormones d'une part,

les enzymes dégradant la paroi cellulaire d'autre part, que peuvent élaborer certains

Fusarium.

Les mycotoxines et les problèmes qui s'y rapportent constituent le thème essen-

tiel très longuement développé dans cet ouvrage. Sans doute les trichothécènes, la

zéaralénone et ses dérivés occupent-ils une place majeure, mais la fusarine C,

récemment isolée du F. moniliforme, n'est pas négligée. La présence de ces

métabolites secondaires dans les produits agricoles, leur transformation dans l'orga-

Source : MNHN, Paris

318 ANALYSES BIBLIOGRAPHIQUES

nisme animal ainsi que les éventuelles possibilités d'élimination et de détoxification

(encore malheureusement peu prometteuses) font l'objet de plusieurs chapitres.

Un glossaire et un index fort bien fait terminent cette excellente mise au point

qui doit trouver place dans toutes les bibliothèques mycologiques.

C. Moreau

CRANE J.L. and SHEARER C.A., 1991 - A nomenclator of Leptosphaeria

V. Cesati & G. de Notaris (Mycota-Ascomycotina-Loculoascomycetes).

Illinois Natural History Survey Bulletin 34 (3): iv, 195-355. ISSN

0073-4918.

Ce "Nomenclator de Leprosphaeria est un index alphabétique des noms

publiés dans le genre (jusqu'à 1989) avec la référence bibliographique, l'historique

nomenclatural, le substrat et/ou l'hôte, et la localisation géographique de chaque

espèce. Cet index est complété par d'autres (l'hôte, les familles d'hôtes, les pays, avec

liste des espèces y afférant), et par 4 appendices: histoire des divisions taxonomiques

du genre, les genres historiquement alliés à Leptosphaeria, les synonymes du genre et

les anamorphes qui lui sont attribués.

Le genre Leptosphaeria a été établi par Cesati et de Notaris en 1863 avec 26

espéces, il en compte actuellement 1689. Cet index devrait servir de bas

révision compléte du genre comme le suggérait déjà Wehmeyer en 1942: "Many of

the species show minor difference of spore structure, often correlated with the host.

In the descriptive literature, these details are not always given. Large numbers of

species have been described, (...). As a result it is difficult to be sure of species

determinations without a comparative of the entire genus". (Bibliographie de 5p.).

D. Lamy

L' Association fancaise de lichénologie (A.F.L.) organisera à Paris, du 13 au

15 mai 1993, un colloque, ouvert au plan international, sur le théme:

Ascomycètes lichénisants ou non:

progrès et perspectives en systématique

Ce colloque comportera des exposés synthétiques, des discussions et des

posters. Pour toute information, écrire à:

Association française de lichénologie,

Université Pierre et Marie Curie.

Laboratoire de Cryptogamie B.P. 33

7 quai Saint-Bernard

F-75252 Paris Cedex 05 (France)

Télécopie: (33.1 / 44 07 15 85)

Source - MNHN. Paris

Cryptogamie, Mycol. 1991, 12 (4): 319-320 319

TABLE DU TOME 12

Analyses bibliographiques . , 160, 241, 315

ABDEL-HAFEZ A.LI. - The incidence of dermatophytes and Europe

fungi in playground of schools and house dust in upper Egypt .. 05

ABDEL-MALLEK A.Y. - voir BAGY M.M.K.

ALBERTINI L. - voir SY A.A.

ALTÉS A. and MORENO G. - Tulostoma striatum (Gasteromycetes,

Basidiomycotina) new for Europe .. 149

BAGY M.M.K. and ABDEL-MALLEK A.Y. - Fungi on the hair of small

mammals in Egypt 63

BHATNAGAR K. - voir SHARMA B.S.

BOIDIN J. et GILLES G. - Basidiomycetes aphyllophorales de l'ile de la

Réunion. XVI. Les genres Hyphoderma, Hyphodermopsis, Chrysoderma

nov. gen. et Crustoderma ... 15297

BOUTEKRABT A. et PARGNEY J.C. - Etude ultrastructurale de Tuber

melanosporum Vitt. en culture isolée et en association avec des vitroplants

de Quercus (Q. robur et Q. pubescens) .... E25.

CHEVALIER G. - voir DUPRÉ C.

CONTU M. - Studi sulle Lepiotaceae - 1l. Alcune note sul genere

Sericeomyces Heinem. in Sardegna ... s

DUPRÉ C. et CHEVALIER G. - Analyse électrophorétique des protéines

fongiques de différents Tuber en association ou non avec Corylus avellana .. — 243

ESTEVE-RAVENTOS F. - voir MORENO G.

GALÁN R. - Estudios micologicos en el parque natural de Monfragüe —

(Extremadura, España). V. Leotíales (= Helotiales auct.), Ascomycotina .. 257

GILLES G. - voir BOIDIN J.

GOURP V. et PARGNEY J.C. - Immunocytolocalisation des phosphatases

acides de Pisolithus tinctorius L. lors de sa confrontation avec le systéme

racinaire de Pinus sylvestris (Pers.) Desv. ep

HAMANT C. - voir SY A.A.

HASSAN S.K.M. - Chytrids in Egypt: | - Saprophytic species of the

Cladochytriaceae from water streams ..

HASSAN S.K.M. - Chytrids in Egypt: Il - New records

Entophlyctidaceace ....

HONRUBIA M. - voir TORRES P.

ILLANA C. - voir MORENO G.

Instructions aux auteurs

JANEX-FAVRE M.C. - voir PARGUEY-LEDUC A.

MOLETTI M. - voir SY A.A.

293

211

of species of

227

Source : MNHN, Paris

320 TABLE DU TOME 12

MONTANT C. - voir PARGUEY-LEDUC A.

MORENO G., PODER R., ILLANA C. and ESTEVE-RAVENTOS F. -

Some interesting agarics and a rare species of Scleroderma presented at the

I and IHI mycological stages of Esplugas de Llobregat (Barcelona, Cataluña) 193

MORENO G. - voir ALTÉS A.

MOUCHACCA J. and SUTTON B.C. - The genus Chlamydosporium Peyronel 251

MURUGANANDAM V., VENKATACHALAM S. and SURYANA-

RAYANAN R.S. - Potassium enhances thigmotropically stimulated

appressorium formation in Colletotrichum capsici … a

NOTTEGHEM J.L. - voir SILUÉ D.

ODIER E. - voir PHAM T.T.T.

PARGNEY J.C. - Cytochimie ultrastructurale des interfaces présentes dans

association ectomycorhizienne Tuber melanosporum Vitt.) Corylus avellana L. 47

PARGNEY J.C. - voir BOUTEKRABT A.

PARGNEY J.C. - voir GOURP V.

PARGUEY-LEDUC A., JANEX-FAVRE M.C. et MONTANT C. -

‘ascocarpe du Tuber melanosporum Vitt. (Truffe noire du Périgord,

Discomycétes): structure de la glébe. II Les veines stériles ....

PATHAK V.N. - voir SHARMA B.S.

PHAM T.T.T., SLEZEC A.M. and ODIER E

squalens (Karst) Reid .

PODER R. - voir MORENO G.

SHARMA B.S., PATHAK V.N. and BHATNAGAR K. - Morphological,

cultural and pathogenic variations in Sclerotium rolfsii Sacc. causing root

rot of sugarbect

SILUE D. et NOTTEGHEM J.L. - Compatibilité et ferti de souches de

Magnaporthe grisea, agent de la pyriculariose du riz .... M

165

- Fruiting in Dichomitus

SLEZEC A.M. - voir PHAM T.T.T.

SURYANARAYANAN R.S. - voir MURUGANANDAM V.

SUTTON B.C. - voir MOUCHACCA J.

SY A.A., ALBERTINI L, MOLETTI M. et HAMANT C. - Mécanisme:

potentiels régissant le contrôle biologique des agents phytopathogènes

TORRES P. y HONRUBIA M. - Dinamica de crecimiento y caracterizacion

de algunos hongos ectomicorricicos en cultivo ..

VENKATACHALAM S. - voir MURUGANANDAM V.

133

183

Commission paritaire n» 58611

Dépôt légal ne 15828 - Imprimerie de Montligeon

Sortie des presses le 20 décembre 1991

Imprimé en France

Éditeur : A.D.A.C. (Association des Amis des Cryptogames)

Président : R. Baudoin; Secrétaire : D. Lamy

Trésorier : J. Dupont: Directeur de la publication : H. Causse

Source : MNHN, Paris

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partient pas au Comité de lecture. D

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Source : MNHN. Paris