CRYPTOGAMIE

Mycologie

ANCIENNE REVUE DE MYCOLOGIE

Fondée par R. Heim en 1936

Directeur scientifique: Mme J. Nicot

Secrétaire de Rédaction: Mme M.C. Boisselier

Editeur: A.D.A.C. - 12 rue Buffon F-75005 Paris.

BUREAU DE RÉDACTION

Ecologie et Phytopathologie: G. Durrieu (Laboratoire Botanique et Forestier, 39 Allées

Jules Guesde, F-31062 Toulouse Cedex) - Systématique: P. Joly (Laboratoire de Cryptogamie,

Muséum National d'Histoire Naturelle, 12 rue Buffon, F-75005 Paris) - Physiologie: G.

Manachère (Laboratoire de Mycologie, Université de Lyon I, 43 bd du 11 Novembre 1918,

F-69622 Villeurbanne Cedex) - Cytologie: D. Zickler (Laboratoire de Génétique, Université Paris

Sud, Centre. d'Orsay, Bát. 400, F-91405 Orsay) - Autres spécialités: M.F. Roquebert (Laboratoi-

те de Cryptogamie, Muséum National d'Histoire Naturelle, 12 rue Buffon, F-75005 Paris).

COMITÉ DE LECTURE

J. Boidin (Lyon), J. Chevaugeon (Orsay), J. Fayret (Toulouse), W. Gams (Baarn), G.L.

Hennebert (Louvain-la-Neuve), Ch. Montant (Toulouse), Cl. Moreau (Brest), D.N. Pegler (Kew),

B. Sutton (Kew), G. Turian (Genève).

MANUSCRITS

Les manuscrits doivent étre adressés directement à un membre du Bureau de Rédaction,

choisi pour sa spécialité. Le Bureau peut demander l'avis d'un lecteur, même s'il n'appartient pas

au Comité de Lecture. Bien qu'étant une revue de langue française, les articles rédigés en anglais,

allemand, italien et espagnol sont acceptés. Les disquettes de micro-ordinateur (IBM, IBM com-

patible, et MacIntosh) sont vivement souhaitées. Les recommandations aux auteurs sont publiées

dans le fascicule 1 de chaque tome. Les auteurs recevront 25 tirés-à-part gratuits; les exemplaires

supplémentaires seront à leur charge.

TARIFS DES ABONNEMENTS Tome 14, 1993

CRYPTOGAMIE comprend trois sections: Algologie, Bryologie-Lichénologie, Mycologie.

Pour une section: France: (326 F ht) 332,85 F tte - Étranger: 357,00 F

Pour les 3 sections: France: (918 F ht) 937,28 F ttc - Étranger: 1000,00 F

Paiement par chèque bancaire ou postal à l'ordre de:

A.D.A.C. - CRYPTOGAMIE (CCP La Source 34 764 05 S),

adressé à: A.D.A.C. 12, rue Buffon, F-75005 Paris.

CRYPTOGAMIE, Mycologie est indexé par Biological Abstracts, Current Contents,

Publications bibliographiques du CNRS (Pascal).

Source : MNHN, Paris

СНҮРТОСАМЕЕ

MYCOLOGIE

TOME 13 FASCICULE 4 1992

CONTENTS

OLUFOLAJI D.B. - Effects of aeration, light and temperature on spore

germination and germ tube growth of Curvularia pallescens Boed. ...

HEYKOOP M., ESTEVE-RAVENTOS F. y MORENO G. - Some interesting

Agaricales collected in the province of Guadalajara (Spain). (In

Spanish) i act NET:

PONCET S., MONTROCHER R. and COUBLE A. - Electrophoretic

isoenzyme patterns of some yeast strains used in wine industry. .........

MORENO G., ILLANA C. and HEYKOOP M. - Spanish Myxomycetes. VI

Four interesting species belonging to the Stemonitales. ....... :

LEGER J.C. et LANQUETIN P. - Hymenochaete pseudoadusta nov. sp.

(Basidiomycetes Aphyllophorales): description and cultural

characteristics. (In French) ............. шан

CHINNARAJ S. - Higher marine d of L;

Quintaria lignatilis.

HARIDY M.S.A. - Yeast flora of raw milk in El-Minia city, Egypt.

BENKHEMMAR O., LAHLOU H., BOMPEIX G., DUPONT J., EL MNIAI

H. et BOUBEKRI C. - Rud contamination of dessert grapes held in

cold storage. (In French) . ^

шиг Islands and a note on

Bibliography .....

Index of volume 13

265

283

295

342

Bibliothèque Centrale Muséum

3 3001 002268805 fce - MNHN. Paris

Source : MNHN. Paris

Cryptogamie, Mycol, 1992, 13 (4): 259-263 259

EFFECTS OF AERATION, LIGHT AND TEMPERATURE ON

SPORE GERMINATION AND GERM TUBE GROWTH OF

CURVULARIA PALLESCENS BOED.

D.B. OLUFOLAJI

Department of Crop Production, Federal University of Technology,

РМВ. 704, Akure, Nigeria.

ABSTRACT - Spore germination and germ tube growth of Curvularia pallescens were studied

under various light and dark regimes, by observing spores in suspension drops on glass slides

without coverslips, with normal coverslips, or with shimmed coverslips. These studies were car-

ried out at temperatures: 10, 15, 20, 25 and 30°C. Light (1,133 lux) good aeration and temper-

atures of 25-30°C significantly promoted spore germination and intercalary outgrowth, By con-

trast post germination elongative growth was also promoted regardless of light or dark conditions

RÉSUMÉ - La germination des spores et la croissance du tube germinatif de Curvularia

pallescens ont été étudiées en régimes lumineux ou obscurs en comparant à des températures

échelonnées entre 10 et 30°C leur développement en suspension dans des gouttes dépourvues ou

couvertes de lamelles appliquées telles quelles ou surélevées par des débris de celles-ci. La

lumière (1.133 lux), une bonne aération et des températures de 25-30°C ont stimulé de manière

significative tant la germination que l'émergence intercalaire de tubes. Par contraste, l'élongation

post-germinative des tubes a été aussi stimulée mais indépendamment de l'alternative lumière-

obscurité

KEY WORDS : Curvularia pallescens, spore germination.

INTRODUCTION

The ability of plant pathogenic fungi to infect their hosts depends upon the

germinability of their spores and the vigour of germ tube growth. Environmental con-

ditions may alter the ability of fungi to produce germ tubes and infection structures.

The spores of some fungi do germinate and produce appressoria under low ox-

ygen tensions or high concentrations of gases such as CO, (Buston et al., 1966; Scha-

nel, 1976), Oxygen tension and CO, concentration during spore germination could be

modified by different methods of coverslip placement on a spore suspension or by not

placing a coverslip (Russo et al., 1979). Light is necessary for spore germination and

germ tube growth of some fungi (Cole & Geeligs, 1977; Khan, 1977). Laboratory

techniques could be used to test the effect of light quantity and quality on spore ger-

mination (Cochrane, 1958; Ekpo & Esuruoso, 1977; Lapp & Skoropad, 1976).

Curvularia pallescens Boed. with multi-celled conidia, has the capability of

producing more than one germ tube, and this attribute is believed to contribute to the

success of C. pallescens as a pathogenic fungus (Mabadaje, 1969).

Source : MNHN, Paris

260 D.B. OLUFOLAJI

The purpose of this study was to determine effects of aeration, light and tem-

perature on spore germination and germ tube growth of C. pallescens. This study was

motivated by the idea that the information obtained might provide a basis for manipu-

lation of the fungus in future physiological studies involving growth and infection pro-

cesses.

MATERIALS AND METHODS

The isolate of C. pallescens used during the study was obtained from infected

maize leaves at the experimental plot of the National Cereals Research Institute, More

Plantation, Ibadan, Nigeria.

Spore suspensions were prepared by flooding with sterile deionized water, 12

day-old sporulating cultures of C. pallescens and dislodging spores with a bent glass

rod, The suspensions were filtered through a double layer of sterile muslin cloth, to re-

move the hyphae. The filtered suspensions were poured into McCartney bottles and

centrifuged at 2,750 g for 5 mins. After washing three times, the spore suspensions

were standardised to 1.0 x 10* spores per ml of deionized water with the aid of a

Fusch's Rosenthal haemocytometer counting apparatus supplied by NAAFCO Scientif-

ic Supplies Nig. Limited (Lagos, Nigeria), Spore suspension drops of about 0.1ml

were placed on glass microscope slides above moistened filter paper in petri-dishes.

The suspension was left uncovered (UC) or covered with a coverslip (CC) or with

shimmed coverslips (SC) and incubated at temperatures of 10, 15, 20, 25 and 30°C up

to 24 hours, under continuous cool-white fluorescent light (1,133 lux) or in complete

darkness. The experiment was replicated five times. Shims were made by placing il

tact coverslips on droplets of spore suspension surrounded by pieces of broken cover-

slips. The procedure increased aeration and gas exchange in the spore suspension and

was similar to the method used by Russo et al. (1979). Gallenkamp incubators with

and without illumination were used for controlling the various temperature regimes

and light conditions

Observations were made at 6, 12, 18 and 24 hours after incubation similar to

the method described by Russo et al. (1979). Three microscope fields each were exam-

ined along three axes: 0.3mm (LI), 4-7mm (L2), and 8-11mm (L3) from the approxi-

mate centre of coverslips for CC and SC. A different method was applied to the UC

since the droplets did not disperse until the coverslips were placed on them before

viewing. Coverslips were carefully applied onto the suspension, to prevent extensive

dispersal of spores. Observations were made in the same manner as for the CC and SC

treatments. Percentage spore germination, germination in more than one cell of the

spore (intercalary germination), number of germ tubes and average length of main

tubes per spore were recorded.

RESULTS

The results were similar for all incubation periods, and therefore only results

obtained at 24 hr after incubation are presented. The effects of light and gaseous ex-

change on C. pallescens were significant at all incubation temperatures. However, tem-

perature effect was major and significant up to 25°C, after which there was no signif-

icant effect due to further increase in temperature (Fig. 1). Spores incubated under

light germinated better than those in the dark (Fig. 1). Furthermore, SC under light

incubation significantly promoted spore germination more than SC under dark as well

Source - MNHN. Paris

CURVULARIA PALLESCENS 261

Dark

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Fig. 1. The effect of light, gaseous exchange and temperature regimes on germination and germ

tube growth of Curvularia pallescens spores after 24 hours of incubation in droplets

without coverslips (UC), normal coverslips (CC) and shimmed coverslips (SC)

Fig. 1 - Effet de la lumière, des échanges gazeux et de la température sur la germination des

spores et la croissance du tube germinatif de Curvularia pallescens après 24h

d'incubation dans des gouttes non couvertes de lamelles (UC), couvertes de lamelles

(CC) ou lamelles surélevées (SC)

Source : MNHN. Paris

262 D.B. OLUFOLAJI

as light and conditions with UC or CC. Intercalary germination followed this same

trend.

Elongation as well as branching of the germ tubes were not significantly dif-

ferent under either light or dark regimes, but spore suspension in the SC treatment

produced significantly longer germ tubes than those formed with UC or CC. In all the

light and temperature treatments, branching and elongation were least without cover-

slips (UC) (Fig. 1), but here, spores lying close to the edge of the suspension drops

did differ markedly from the inner ones.

Due to the fact that the fungus did not produce appressoria throughout the in-

vestigations, no record of this structure was included in the data.

DISCUSSION

The effects of temperature, light and aeration on spore germination and germ

tube growth of fungi can not be under-estimated. The impact of temperature on germi-

nation and growth of several pathogenic fungi has already been stressed by Cochrane

(1958). The effect of gaseous exchange (Medeiros & De Ti Alvin, 1967; Russo et al.,

1979; Wallace et al., 1976), and the importance of light or dark incubation on spore

germination and germ tube growth and development has been reported (Ekpo & Esu-

ruoso, 1977; Russo et al., 1979; Wallace et al., 1976).

Some fungi prefer light to dark period for germination and growth (Russo et

al., 1979) and the results of this study indicate that light may be one activator agent of

spore germination in C. pallescens. However, light or dark apparently have little or no

effect on post germination growth and development of C. pallescens. Temperature

played a major role in fungal germination and the optimum temperature of 25-30°C

needed no doubt favoured enzymatic reactions involved in germination processes (Jef-

feries & Young, 1976), Intercalary germination was promoted by the same light, gase-

ous exchange and temperature conditions.

Spore germination with the SC treatment was significantly higher than with

other treatments. Gaseous exchange can promote spore germination (Toler et al., 1966)

while poor gaseous exchange may inhibit spore germination (Macko et al., 1976). It

could be that since spores of C. pallescens sank in water, the UC treatment could not

provide conditions of good gaseous exchange in the spore suspension. The placing of

shimmed (SC) as well as normal coverslips (CC) breaks the surface tension of the wa-

ter and allows more aeration than no coverslips (UC). Although germ tubes of C. pal-

lescens developed equally well under light or dark, growth was better in the SC treat-

ment presumably because of better aeration. This result confirms a previous study

(Russo et al., 1979). However, temperature was the major factor since it influenced

post germination growth as well as spore germination (Cochrane, 1958). Thus, for in-

fection of the host, C. pallescens would need optimum environmental conditions be-

fore leaf spot disease of maize could maximally develop. Germination of C. pallescens

spores may be aided by light, gaseous exchanged and optimum temperatures, while

germ tube growth and development may be promoted by aerobic conditions at an opti-

mum temperature in either the light or the dark. The quantity and quality of gaseous

exchange and light are areas that need further investigation.

Source - MNHN. Paris

CURVULARIA PALLESCENS 263

LITERATURE CITED

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COLE 15. апі GEELIGS J.W.G., 1977 - Time lapse photograph of formation and release of co-

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EKPO EJ.A. and ESURUOSO O.F., 1977 - Factors affecting spore germination in cowpea iso-

late of Cercospora cruenta Sacc. Phytopathol. Z. 89: 249-255.

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mination in Piptocephalis unispora prior to infection. Arch. Microbiol. 107: 99-107.

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LAPP M.S. and SKOROPAD W.P., 1976 - A mathematical model of conidial germination and

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MABADEIE S.A., 1969 - Curvularia leaf spot of maize. Trans. Brit. Mycol. Soc. 52: 267-271.

MACKO V., STAPLES R.C., YANI 7. and GRANADOS R.R., 1976 - Self-inhibitors of Fungi

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Sons.

MEDEIROS A.G. and DE TI ALVIN P., 1967 - Influence of CO; and air humidity on sporula-

tion of Phytophthora palmivora (Butl). Bult Turrialba 17: 18-22.

RUSSO V., ANDERSON C. and PAPPELIS A., 1979 - Effect on germination and post-germina-

tion development of Colletotrichum dermatium var. circinans due to light and dark incu-

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TOLER R.W., DUKES P.D. and JENKINS S.F., 1966 - Growth response of Fusarium oxysporum

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WALLACE D.R., MACHEOD D.M., SULLIVAN C.R., TYRELL D. and DE LYZER A.J., 1976

- Induction of resting spore germination in Entomophthora aptidis by long day light con-

ditions. Canad. J. Bot. 54: 1410-1418,

Source : MNHN. Paris

Cryptogamie, Mycol. 1992, 13 (4): 265-281 265

ALGUNOS AGARICALES INTERESANTES DE LA

PROVINCIA DE GUADALAJARA (ESPANA PENINSULAR)

M. HEYKOOP, F. ESTEVE-RAVENTOS y G. MORENO

Dpto de Biología Vegetal (Botánica), Universidad de Alcalá de

Henares, 28871 Madrid, España,

RESUMEN - Se describen o comentan 26 táxones de Agaricales s.l. recogidos en diversas loca-

lidades de la provincia de Guadalajara. Seis táxones no han citados previamente en la Península

Ibérica: Calocybe fallax, Clitocybe acicola, Cortinarius bataillei, Entoloma undulatosporum,

Hygrocybe substrangulata e Hygrophorus pseudodiscoideus var. cistophilus. Se aportan fotogra-

fías de las características más representativas.

ABSTRACT - 26 taxa of Agaricales s.l., collected in several localities of the province of Guada-

lajara, are described or commented. Some of them are figured with photographs of the most out-

standing characteristics. Six taxa have not been recorded previously in the Iberian Peninsula: Cal-

ocybe fallax, Clitocybe acicola, Cortinarius bataillei, Entoloma undulatosporum, Hygrocybe

substrangulata and Hygrophorus pseudodiscoideus var. cistophilus.

KEY WORDS : Taxonomy, Chorology, Agaricales s.l., Guadalajara, Spain.

INTRODUCCION

Con este trabajo pretendemos contribuir al conocimiento, tanto taxonómico

como corológico, de los Agaricales s.l. de la provincia de Guadalajara (España). A

pesar del gran interés ecológico de esta provincia, debido a la gran diversidad de eco-

sistemas mediterráneos diferentes que podemos encontrar (encinares, melojares, jarales,

pinares, sabinares etc.), y de su riqueza micológica pocos han sido los trabajos

micológicos llevados a cabo en esta provincia castellana. Aparte de citas esporádicas

de algunos táxones, podemos destacar las aportaciones, más amplias, de López de los

Mozos (1982), López de los Mozos € Calonge (1982), Blanco (1985) y Blanco &

Moreno (1986). Los resultados, parciales, que aquí se publican forman parte de la tesis

doctoral de uno de nosotros (M. H.) sobre los Agaricales s.l. de esta provincia, y re-

cogen una serie de táxones que tienen interés científico por su rareza, sobre todo para

la Península Ibérica, aunque, en algunos casos, también para el resto de Europa.

Las fotografías al microscopio óptico han sido realizadas con un microscopio

Nikon modelo Optiphot con sistema incorporado automático de fotografía. Las

fotografías al microscopio electrónico de barrido fueron realizadas con un microscopio

Zeiss modelo 950. El material se ha estudiado en agua destilada, solución de hidróxido

amónico al 10%, hidróxido potásico al 5%, solución de rojo congo amoniacal y reacti-

vo de Melzer. Ha sido depositado en el Herbario del Departamento de Biologia Vege-

tal (Botánica) de la Universidad de Alcalá de Henares (Madrid) -H.AH-

Source : MNHN, Paris

266 M. HEYKOOP, F. ESTEVES-RAVENTOS y G. MORENO

CATALOGO DE ESPECIES

Agaricus mediofuscus (Müller) Pilát, Sborn. Nár. Mus. v Praze, Rada B. Prir. Vedy

7(1): 8, 1951

Material estudiado: Codes, bajo Quercus faginea, 18-XI-90, leg. F. Esteve-

Raventós & V. González, H.AH 13136.

Los ejemplares estudiados concuerdan perfectamente con la descripción de Ca-

pelli (1983, 1984). En España sólo se conoce la cita de Navarra (García Bona, 1982,

1987).

Amanita echinocephala (Vit) Quél., Champ. Jura Vosges I, Mém. Soc. Emul.

Montbéliard, Sér. 2, 5: 321, 1872.

Material estudiado: Horna, en humus de Quercus rotundifolia, 30-IX-90, leg. J.

Alvarez, M.N. Blanco, F. Esteve-Raventós & Heykoop, H.AH 12889.

Bolbitius reticulatus (Pers.: Fr.) Ricken, Die Blätterpilze 1: 68, 1915.

Material estudiado: Arroyo de la Nava de la Obceca, Sigüenza, bajo Quercus

faginea, 12-XI-88, leg. J. Alvarez & F. Esteve-Raventós, H.AH 13037.

Este taxon se caracteriza por su pequeño porte y superficie pileica más o me-

nos rugosa y reticulada, con colores grisáceo-lilacinos y aspecto de un pequeño Plu-

teus.

Watling (1982) considera Bolbitius aleuriatus como sinónimo de B. reticulatus,

Moser (1983) indica que B. aleuriatus es una especie independiente cuya diferencias

principales son la superficie del píleo no reticulada y que tiene esporas de tamaño lig-

eramente inferior, siendo de 9-10,5 x 4-5 im para B. aleuriatus y 10-11 x 5-6 lim para

B. reticulatus. Nuestro material presenta esporas intermedias, cuyo tamaño está com-

prendido entre (8,5)9-10 x 5,5-6,5 Jm. Además presenta la supreficie del píleo bas-

tante rugosa y reticulada por lo que consideramos a esta como un taxon variable.

Boletus lupinus Fr., Epicr. Syst. mycol.: 416, 1838.

Material estudiado: Baides, en bosque mixto de Quercus rotundifolia y Junipe-

rus thurifera, 30-IX-90, leg. J. Alvarez, М.М. Blanco, F. Esteve-Raventós & M. Hey-

koop, H.AH 12790. Idem, H.AH 12891. Idem, 28-IX-90, leg. J. Alvarez H.AH 12791

Idem, 9-X-90, leg. G. Moreno, N. Ayala & C. Ochoa, H.AH 12779 y H.AH 12792.

Nuestras recolecciones coinciden con las descripciones de los trabajos

monográficos de Engel et al. (1983) y Alessio (1985).

En España, se conoce sólo del País Vasco (Anónimo, 1981; Mendaza & Diaz,

1988)

Boletus pulchrotinctus Alessio, Fungi Europaei 2: 231, 1985.

Material estudiado: Baides, en bosque mixto de Quercus rotundifolia y de Ju-

niperus thurifera, 9-X-90, leg. G. Moreno, N. Ayala & C. Ochoa, H.AH 12787. Idem,

H. AH 12780

Taxon descrito recientemente por Alessio (1985), perteneciente a la sección

Luridi Fr. Se caracteriza por presentar un sombrero en la juventud con tonos

rosa-carmín sobre fondo grisáceo-blanquecino claro a beige. El pie es amarillo, con to-

nos rosados concoloros al sombrero y con retículo evidente. La care y los tubos del

Source : MNHN, Paris

AGARICALES DE GUADALAJARA. 267

himenio son de color amarillo limón y azulean al corte. Los poros tienen un color roji-

zo sobre fondo amarillo.

Esta especie sólo ha sido recogida con anterioridad, en nuestro país, en

Cataluña (Vidal & Pascual, 1989; Rocabruna, com. pers.)

Calocybe fallax (Sacc.) Sing. ex Redhead & Sing., Mycotaxon 6: 501, 1978. (Fig.

eS),

Fig. 1-8. Calocybe fallax (Sacc.) Sing. ex Redhead £ Sing. (H.AH 14416). 1: Cuerpos fructíferos.

2: Sección de pileipellis. 3: Pilcipellis. 4: Himenio. 5-6: Fibulas. 7-8: Esporas.

Source : MNHN. Paris

268 M. HEYKOOP, F, ESTEVES-RAVENTOS y G. MORENO

Material estudiado: Guadalajara: Majaelrayo, bajo Cistus laurifolius, 26-X1-89,

leg. P. Cantero, F. Esteve-Raventós £ M. Heykoop, H.AH 12722. Madrid:

Exposición micológica de Madrid, 1-XII-90, leg. anónimo, H. AH 14416.

El material estudiado presenta un píleo convexo a aplanado convexo, de

1,5-2,5 cm de diámetro, liso, muy higrófano, de color anaranjado-amarillo. Láminas

apretadas, muy amarillas y levemente escotadas, junto con lamélulas concoloras, Pie

cilíndrico a aplastado en los ejemplares más viejos, de 2-3,5 x 0,2-0,6 cm, amarillo

(canaranjado), más o menos concoloro con las láminas. Carne amarillenta, con olor

fúngico agradable. Esporada blanca. Esporas de 3,5-4,5 x 2-2,5(3,5) ит, elipsoidales,

lisas, по amiloides. Basidios de 18-20 x 4-5 um, con esterigmas de 2-3 um de longi-

tud, tetraspóricos, cilíndricos a ligeramente claviformes, con granuclación siderófila, fi-

bulados. Cistidios no observados. Pileipellis himeniforme, formada por células más o

menos claviformes a esferopedunculadas de 13-18 x 8-13 jm, con paredes refringentes

en agua y contenido intracelular amarillento en KOH al 5%; pileitrama formada por

hifas entremezcladas de forma laxa y provistas también de un contenido intracelular

amarilliento en KOH al 5%, fíbulas presentes en los septos. Caulocistidios de 25-47 x

4-5,5 um, cilíndricos, hialinos, ligeramente ensanchados en el ápice, en grupos densos

(sobre todo en el ápice del pie).

Moser de Julich (1987) aportan una fotografía muy ilustrativa de esta especie,

aunque con el nombre de C. naucoria. Posteriormente, estos mismos autores (Moser

& Jülich, 1989) vuelven a ilustrar este taxon, ya bajo la denominación de C. fallax. El

problema nomenclatural fue resuelto por Redhead & Singer (1978). Los caracteres de

esta especie son las esporas pequefias y cutícula himeniforme, los cuales la diferencian

de C. chrysenteron (Bull.: Fr.) Sing, (que presenta también coloraciones naranja-amar-

illentas), asf como la presencia de fíbulas en todo el carpóforo, Calocybe fallax, según

la bibliografía consultada, es la primera vez que se cita para la Península Ibérica.

Clitocybe acicola Sing. ex Sing., Z. Mykol. 56(1): 6, 1990. (Fig. 9-12).

= C. obsoleta s. Métrod, Bull. Soc. Mycol. France 55 (1): 110, 1939.

Material estudiado: Sigüenza, bajo Pinus pinaster y Pinus sylvestris, 20-XI-91,

leg. G. Moreno & M. Heykoop, H.AH 14178.

Especie propuesta por Singer (1943), aunque no válidamente publicada, al no

aportar una diagnosis latina. Posteriormente Romagnesi (1989) acepta la especie de

Singer, aunque sin validarla, Recientemente Singer (1990), en un estudio sobre el

complejo Clitocybe obsoleta la valida aportando además una descripción.

Esta especie, pertenece a la sección Fragantes Harm.; nuestro material se car-

acteriza por presentar un píleo de 1,5-4 cm de diámetro, higrófano, con el margen es-

triado, de color beige-caramelo claro en estado húmedo que toma un color beige-

grisáceo pálido al secar; pie más o menos concoloro al sombrero, de 2-3 x 0,3-0,4 cm.

Las láminas son netamente decurrentes y tienen un color blanquecino-crema. Presenta

un fuerte olor a anís y la carne tiene un sabor suave, algo dulzaino. Presenta esporas

de 5-6 x 3-3,5 jim, elipsoidales, hialinas. Cistidios ausentes. La pileipellis es una cutis

filamentosa con hifas fibuladas que no muestran pigmento incrustante.

Este taxon es muy próximo a C. obsoleta (Batsch) Quél., pero difiere de él por

su color algo más pálido, el margen del píleo claramente estriado en estado húmedo y

sus esporas más pequeñas (6-8 х 32-4 um en C. acicola frente a (6)7-10 х

(2,5)3,5-5,3 um en C. obsoleta). Nuestro material se ajusta bastante bien a la

descripción de Singer (1990) aunque sus esporas son ligeramente menores. Clitocybe

fragrans (With.: Fr.) Kumm. también presenta un fuerte olor a anís, pero, sin embar-

Source : MNHN. Paris

AGARICALES DE GUADALAJARA 269

Fig. 9-12. Clitocybe acicola Sing. ex Sing. (H.AH 14178). 9-10 y 12: Himenio. 11: Esporas.

go se diferencia por el color pardo más oscuro en el centro del píleo, con el margen

beige-gris más claro, y por sus esporas mayores. Segün Singer (1990) C. acicola

estaría ampliamente distribuido, aunque es esporádico en Europa. En España no ha

sido citado aunque creemos que probablemente haya sido confundido con C. obsoleta

0 con C. fragrans.

Clitocybe cistophila Bon & Contu, Doc. Mycol. 60: 43-44, 1985.

Material estudiado: Majaelrayo, bajo Cistus laurifolius, 26-XI-89, leg. Р.

Cantero, F. Esteve-Raventés & M. Heykoop, H.AH 12735.

Especie típica y frecuente en los jarales de toda España. Se caracteriza por su

pequefio porte y fuerte olor a anís. Es probable que se trate tan sólo de una var.

ecológica del grupo Clitocybe obsoleta.

Conocybe mesospora Kühn ex Kühn. & Watl., Notes Roy. Bot. Gard. Edinburgh 38:

336, 1980.

Material estudiądo: El Rebollar de Carabias, Sigüenza, en praderas calizas en

borde de camino, 12-XI-88, leg. J. Alvarez & F. Esteve-Raventós, H.AH 12982. Idem,

entre hierba de rebollar aclarado, H.AH 12983.

Nuestro materíal coincide perfectamente con la descripción de Kühner (1935).

Sólo ha sido citado con anterioridad en nuestro país en Cataluña por Singer (1947).

Cortinarius bataillei (Favre ex Moser) Hgiland, Opera Bot. 71: 86, 1983. (Fig. 13-

16).

= Dermocybe bataillei Favre ex Moser, Schweiz. Z. Pilzk. 54: 147, 1976.

Material estudiado: Entre Condemios de Abajo y Aldeanueva de Atienza, entre

Sphagnum sp. en turbera del río Pelagallinas, 4-X-91, leg. M. Heykoop & G. Moreno,

H.AH 13883.

Nuestro material presenta un pfleo de 1,6 cm de diámetro, mamelonado, con-

vexo, no higrófano, ligeramente escuamuloso en el margen, con aspecto afieltrado,

margen fuertemente fibriloso, de color amarillento tirando a pardo. Laminas adnatas,

primero muy amarillas, luego de color azafrán, sin tonos oliváceos. Pie de 5 x 0,3 cm,

cilíndrico, algo hueco, fibriloso en su parte externa, de color amarillento en la parte

superior, en el tercio interior de marcada coloración anaranja (-rojiza). Cortina no ob-

servada (según Høiland (1983) es de color amarillo pálido). La carne en el píleo es de

color amarillo pálido, siendo en el pie (sobre todo en la parte inferior) de color naran-

Source : MNHN, Paris

270 M. HEYKOOP, F. ESTEVES-RAVENTOS y G. MORENO.

Fig. 13-16. Cortinarius bataillei (Favre ex Moser) Hoiland (H.AH 13883). 13-15: Queilocistidios.

16: Esporas.

Ja-amarillento o rojizo. Esporas de 7,5-9,5 x 4,5-5,5 jim, en vista lateral amigdali-

formes, en vista frontal más o menos elipsoidales a ovoides, verrugosas, pardo ferrugi-

nosas. Basidios de 25-30 x 7-9 um, tetraspóricos, claviformes, hialinos o con un

contenido granular amarillento muy denso. Arista provista de queilocistidios clavi-

formes, Fíbulas presentes. Reacciones con KOH al 5%: cutícula del píleo pardo oscu-

ro; carne del píleo pardo-negruzco; carne del pie rojo-carmín.

Esta especie es próxima a C. croceus, a la cual recuerda mucho

macroscópicamente. Difiere de ella por el fuerte color naranja de la parte basal del pie.

Nuestra recolecta constituye la primera cita para el catálogo micológico español.

Entoloma chalybaeum (Fr.: Fr.) Noordel., Nordic J. Bot. 2: 163, 1982.

Material estudiado: Tamajón, bajo Cistus laurifolius, 25-X-90, leg. G. Moreno

& M. Heykoop, H.AH 12765.

Típica especie del subgénero Leptonia caracterizada por las tonalidades azula-

das en todo el carpóforo. Nuestro material se ajusta muy bien a la descripción de

Noordeloos (1984).

Entoloma cuspidiferum Kühn. & Romagn. ex Noordel., Persoonia 10: 461, 1980.

Material estudiado: Entre Condemios de Abajo y Aldeanueva de Atienza, entre

Sphagnum sp. en turbera del río Pelagallinas, 22-IX-91, leg. M. Ortega & M. Hey-

koop, H.AH 13822. Ibidem, 4-X-91, leg. M. Heykoop & G. Moreno, H. AH 13867.

Source : MNHN. Paris

AGARICALES DE GUADALAJARA 271

Especie típica de las turberas, hábitat que justifica su poco conocimiento en

nuestro país. Ha sido citado en la zona centro por Moreno (1976) y Barrio et al.

(1985). Nuestro material coincide con la descripción de Noordeloos (1980).

Entoloma undulatosporum Arnolds & Noordel., Persoonia 10: 295, 1979. (Fig. 17-

19).

Material estudiado: Riofrío del Llano, en pastizal, 22-XI-91, leg. M. de la

Cruz, H.AH 14199.

Píleo primero convexo, luego aplanado-convexo, hasta 2,5cm de diám., par-

do-negruzco, glabro. Láminas ligeramente decurrentes, más o menos grisáceas con

tintes rosados. Pie cilíndrico hasta 2 cm de longitud y hasta 0,5 cm de diám., pardo

oscuro, concoloro al píleo. Carne blanquecino-grisácea. Olor agradable. Esporas

10-11(12) x 6,5-7,5(8) jtm, nodulosas y de perfil típicamente ondulado, de color rosa.

Arista de la lámina fértil. Cistidios ausentes. Pileipellis una cutis con hifas de menos

de 10 ит de diám., con fuerte pigmento intracelular de color pardo. Fíbulas presentes

y abundantes.

Este raro Entoloma perteneciente a la sección Endochromonema (Larg. & Thi-

ers) Noordel. se caracteriza principalmente por su pequeño porte, sombrero muy oscu-

ro con abundante pigmento intracelular pardo oscuro y esporas de paredes finas, nodu-

losas y débilmente angulosas. Esta especie sólo era conocida hasta ahora de dos

localidades holandesas, Beilen y Axel (Noordeloos, 1988). Representa por tanto la

tercera localidad en que se recoge y una nueva cita para el catálogo micológico

español

Hygrocybe coccineocrenata (P.D. Orton) Moser, Rôhrlinge. Blätterpilze, 3. Aufl.: 68,

1967. (Fig. 20-24)

= Hygrophorus coccineocrenatus P.D. Orton, Trans. Brit. Mycol. Soc, 43: 262, 1960.

Material estudiado: Entre Condemios de Abajo y Aldeanueva de Atienza, entre

Sphagnum sp. en turbera del rfo Pelagallinas, 4-X-91, leg. G. Moreno & M. Heykoop,

H.AH 13861.

Píleo de 5-11 mm de diámetro, convexo a plano convexo con margen crenula-

do e involuto, de color rojizo-anaranjado en húmedo, decolorándose progresivamente a

amarillento-naranja, con la superficie central densamente cubierta de escamas marrones

bien adpresas o erectas. Láminas gruesas, espaciadas y fuertemente decurrentes, de co-

lor amarillento claro a amarillo cera. Pie cilíndrico, de 20-30 x 1,5 mm, de color rojo

escarlata en húmedo, decolorándose progresivamente a amarillo-naranja. Esporas de

Fig. 17-19. Entoloma undulatosporum Arnolds & Noordel. (H.AH 14199). Esporas.

Source : MNHN. Paris

272 M. HEYKOOP, F. ESTEVES-RAVENTOS y G. MORENO

Fig. 20-24. Hygrocybe coccineocrenata (P.D. Orton) Moser (H.AH 13861). 20-21: Cuerpos

fructíferos. 22: Pileipellis. 23-24: Esporas.

9-11 x 5,5-6,5 um, elipsoidales a ovoides, a menudo faseoliformes, algunas con

constricción central. Basidios de 36-47 x 7-10 Him, tetraspéricos, claviformes. Cistidios

nulos. Trama del himenóforo subregular. Pileipellis en el centro una tricodermis con

Source : MNHN, Paris

AGARICALES DE GUADALAJARA 273

pelos formados por cortos artículos de 10-17 um de diam., muchos de ellos con un

pigmento intracelular pardo.

Este taxon ha sido recogido anteriormente de la zona centro por Moreno

(1976).

Hygrocybe substrangulata (P.D. Orton) Moser, Róhrlinge. Blütterpilze, 4. Aufl.: 89,

1978. (Fig. 25-30)

Hygrophorus substrangulatus P.D. Orton, Trans. Brit. Mycol. Soc. 43: 269, 1960.

= Hygrocybe coccineocrenata (P.D. Orton) Moser var. sphagnophila (Peck) Arnolds,

Persoonia 12: 475, 1985, s. Boertman, 1990: 29.

= Hygrocybe coccineocrenata (P.D. Orton) Moser fo. ambigua Kühner, Bull. Soc. My-

col, France 92: 463, 1976, s. Boertman, 1990: 29.

Material estudiado: Entre Condemios de Abajo y Aldeanueva de Atienza, entre

Sphagnum sp. en turbera del río Pelagallinas, 4-X-91, leg. M. Heykoop & G. Moreno,

H.AH 13860.

Píleo de 1,5-3 cm de diam., convexo a aplanado convexo, higrófano, estriado

en el margen, de color rojo-anaranjado en húmedo, decolorándose progresivamente a

amarillo-anaranjado, con la superficie central levemente cubierta de escamas adpresas

concoloras con el píleo. Láminas gruesas, adnatas a subdecurrentes, de color amarillo

pálido a color carne, arista concolora. Pie de 4-7 x 0,2-0,4 cm, cilíndrico, de color nar-

anja-rojizo en húmedo, decolorándose pregresivamente a amarillo-naranja, pudiendo

quedar completamente amarillo al final. Esporas de 9-11(12,5) x 5-6(6,5) шт, elipsoi-

dales con ápice obtuso, en un elevado número están constreñidas en la zona central.

Basidios de 38-45 x 6-8 шт (О- б), tetraspéricos, claviformes. Cistidios nulos. Trama

del himenóforo más o menos regular formada por cadenas de elementos cortos de 60-

90 x 8-10 um. Pileipellis en el centro una tricodermis formada por pelos septados y

fibulados, con elementos de 30-60 x 7-11 pum, con pigmento intracelular ocráceo. La

estipitipellis presenta una cutis formada por hifas fibuladas.

Arnolds (1990) diferencia H. coccineocrenata var. sphagnophila de H. subst-

rangulata, entre otras razones por la presencia de escamas en el píleo en el primero y

la ausencia de ellas en la última. Sin embargo, nosotros coincidimos con Boertmann

(1990), quien propone la sinonimia de ambos táxones y aporta una iconografía muy

representativa. Esta especie no había sido citada previamente en España, aunque quizás

haya sido objecto de alguna confusión taxonómica.

Hygrophoropsis pallida (Cooke) Kreisel, Handb. Pilzfreunde 2 ed., 3: 150, 1977

Material estudiado: Entre Condemios de Abajo y Aldeanueva de Atienza, entre

Sphagnum sp. en turbera del río Pelagallinas, 4-X-91, leg. G. Moreno & M. Heykoop,

H.AH 13866.

Especie típica de turberas, aunque Arnolds (1982) establece una ecologia di-

ferente de pastizales hámedos (Molinio-Arrhenatheretea). En España ha sido citado

previamente en la zona centro por Barrio et al. (1985) y Esteve-Raventós (1987).

Hygrophorus pseudodiscoideus (Maire) Maleng. & Bertault var. cistophilus Bon,

Doc. Mycol. 72: 63, 1988.

Material estudiado: Majaelrayo, bajo Cistus Iaurifolius, 26-X1-89, leg. P.

Cantero, F. Esteve-Raventós $: M. Heykoop, H.AH 12736. Idem, H.AH 12737.

Source : MNHN, Paris

274 M

HEYKOOP, F. ESTEVES-RAVENTOS y G. MORENO

Fig. 25-30. Hygrocybe substrangulata (P.D. Orton) Moser (H.AH 13860). 25 Cuerpos fructíferos.

26-27: Pileipellis. 28: Himenio. 29-30: Esporas.

Este taxon, creado recientemente por Bon (1988), difiere principalmente de la

var. tipo por su porte más pequeño y grácil así como por su ecología típica de jarales

Source : MNHN, Paris.

AGARICALES DE GUADALAJARA 275

y maquis mediterráneo. Segün Bon (1990) la pileipellis también sería más gelificada

que en la var. tipo. Es posible que se trate simplemente de una forma ecológica, sin

embargo hasta que futuras recolectas no demuestren los posibles tránsitos entre uno y

otro taxon preferimos reconocer esta variedad. Hygrophorus pseudodiscoideus ha sido

citado en España de Cataluña (Malengon é: Bertault, 1971, 1976; Bertault, 1982).

Hypholoma elongatipes (Peck) Peck, Rep. New York State Mus. Nat. Hist. 29: 40,

1876

Material estudiado: Entre Condemios de Abajo y Aldeanueva de Atienza, entre

Sphagnum sp. en turbera del río Pelagallinas, 4-X-91, leg. M. Heykoop & G. Moreno,

H.AH 13872. Idem, H.AH 14286. Idem, 22-IX-91; leg. M. Ortega & M. Heykoop,

H.AH 14282

Nuestro material concuerda con la descripción de Barrio et al. (1985) quienes

recolectaron esta especie con anterioridad en turberas de la zona centro, fructificando

entre Sphagnum y otros briófitos.

Lepiota griseovirens Maire, Bull. Soc. Mycol. France 44: 37, 1928.

Material estudiado: Codes, en briófitos bajo Juniperus thurifera, 12-X-90, leg.

F. Esteve-Raventós, M.N. Blanco, J. Alvarez & M. Heykoop, H.AH 12893.

Típica especie mediterránea, ya recolectada previamente varias veces en la

Península Ibérica. Nuestro material se ajusta bien a la descripción de Candusso & Lan-

zoni (1990). En nuestro caso las medidas esporales son ligeramente mayores (8-11 x

3.5-4(4,5) jm) que las indicadas por estos autores, siendo el resto de los caracteres ig-

uales.

Lyophyllum amariusculum Clémengon, Mycotaxon 15: 68, 1982.

- L. immundum s. Kühn. & Romagn., 1953.

Material estudiado: Tamajón, en bosque mixto de Quercus rotundifolia y Juni-

perus thurifera, 25-X-90, leg. G. Moreno & М. Неукоор, Н.АН 12753.

El problema nomenclatural de este taxon ha sido resuelto recientemente por

Clémençon (1982).

Pluteus thomsonii (Berk. & Broome) Dennis, Trans. Brit. Mycol. Soc. 31: 206, 1948.

Material estudiado: Guijosa-Cubillos, Sigüenza, en pastizal de chopera y jaral,

12-Х1-88, leg. F. Esteve-Raventós & J. Alvarez, H.AH 13480.

Rhodocybe nitellina (Fr.) Sing., Mycologia 38: 687, 1946.

Material estudiado: Pista entre Peralejos de las Truchas y laguna de ТагауШа,

en pinar de Pinus nigra ssp. salzmanii, 7-X1-91, leg. M. Heykoop, C. Шапа & J. Al-

varez, H.AH 14134. Monte El Pinillo, entre Alcoroches y Alustante, 24-X-91, leg. J

Alvarez & C. Bartolomé, en bosque de Juniperus sabina y Pinus sylvestris, H.AH

14283.

Taxon con aspecto de "colibioide" que se caracteriza por sus colores vivos an-

aranjados, así como por su fuerte olor farinoso. Nuestro material concuerda perfecta-

mente con la descripción de Noordeloos (1988).

Rozites caperata (Pers.: Fr.) P. Karsten, Bidrag Kánnedom Finlands Natur Folk 32: 20,

1879.

Source : MNHN, Paris

276 М. НЕУКООР, Е. ESTEVES-RAVENTOS y С. MORENO

Material estudiado: Atienza, en bosque de Quercus pyrenaica próximo a Erica

scoparia y E. australis ssp. aragonensis, 8-XI-91, leg. M. de la Cruz, H.AH 14139.

La única especie europea de este género es muy frecuente en el norte de la

Península Ibérica y de Europa, pero sin embargo muy rara en el resto de España,

donde sólo se conoce una cita de la zona centro (Esteve-Raventós, 1987) en bosque de

Pinus sylvestris.

Russula thyrrhenica Sarnari, Boll. Gruppo Micol. G. Bresadola, Trento 27: 282, 1984.

(Fig. 31-35).

Material estudiado: Tamajón, bajo Cistus ladanifer, 25-X-90, leg. G. Moreno

& M. Heykoop, H.AH 12773.

Presenta sombreros pequeños, de 3-5,5 cm de didm., plano-convexos.

Cutícula de color rojo-vinoso y bordes rosa-violáceos, siendo fácilmente arrastrada

hasta la mitad. Margen acanalado. Pie de hasta 3 x 1 cm, curvado y de color blan-

quecino. Láminas de color crema pálido. Carne dulzaina, al final ligeramente picante

en las láminas. Esporada crema ocrdcea, Ild según la tabla de Romagnesi (1985). Pre-

senta la pileipellis con abundantes hifas primordiales incrustadas y septadas, entre-

mezcladas con otras estructuras intermedias entre dermatocistidios e hifas primordiales,

sin incrustaciones y con reacción dudosa a los reactivos sulfoaldehídicos como indica

Sarnari (1984). Esporas ovales, de 9-10 x 6,5-7 um, crestado-reticuladas. Al M.E.B. se

aprecia bien la ornamentación reticulada a subreticulada, con zonas más gruesas y bien

marcadas.

Russula thyrrhenica es una especie mediterránea descrita de Italia (Cerdeña) y

que aparece fuertemente ligada al género Cistus. Solamente se conoce en España de

las Islas Baleares (Llistosela, 1991).

Russula vinosopurpurea J. Schaeff., Russula-monografie: 260, 1952. (Fig. 36-42)

Material estudiado: Riba de Santiuste, bajo Quercus pyrenaica, 30-IX-91, leg.

M. de la Cruz, H.AH 14162.

El material examinado presenta el sombrero con un color rojizo púrpura a

melocotón con zonas maculadas dejando entrever coloraciones ocráceas, pie blanco y

láminas ocráceas. Esporada ocrácea, IV c según la tabla de Romagnesi (1985). Tiene

un sabor acre y pileipellis con abundantes dermatocistidios pluriseptados, cilíndricos y

con un contenido pardo vinoso. Esporas de 7-9 x 6-7 jum, ovoides a elipsoidales y pro-

vistas de gruesas espinas muy prominentes de hasta 2 ит de longitud y 1 jum de an-

chura.

Ha sido recolectada con anterioridad solamente en el País Vasco (Anónimo,

1981).

Tephrocybe mephitica (Fr.) Moser, Róhrlinge. Blátterpilze, 3. Aufl.: 115, 1967.

Material estudiado: Tamajón, entre briófitos en bosque mixto de Quercus ro-

tundifolia y Juniperus thurifera, 25-X-90, leg. G. Moreno & M. Heykoop, H.AH

13484.

Nuestro material presenta el sombrero convexo a aplanado-convexo, de 0,8-1,8

cm de diam., blanquecino-grisáceo, recubierto por una pruinosidad blanca. Pie de 2-4,5

x 0,2-0,4 cm, grisáceo, recubierto totalmente por una pruinosidad blanquecino-grisácea

más o menos concolora al sombrero y que se quita al frotar. Láminas adnatas, pardo

claro a grisáceas. Olor fuertemente farinoso. Esporas de 4-5 x 2,5-3 um, subglobosas a

Source : MNHN, Paris

AGARICALES DE GUADALAJARA 277

Fig. 31-35. Russula thyrrhenica Sarnari (H.AH 12773). 31-33: Pileipellis. 34-35: Esporas.

elipsoidales, pequeñas, lisas, hialinas y no amiloides. Basidios de 18-27 x 4-5 шт,

letraspóricos, claviformes, con granulación carminófila en su interior. Cistidios nulos.

Fíbulas presentes.

Se trata de una rara especie que ha sido interpretada de diferentes maneras

(Nowsher et al., 1976) y que en la actualidad no parece aún del todo aclarada (Gubitz,

1986). En cualquier caso nuestro material encaja perfectamente con la plancha 45 B de

Source : MNHN, Paris

278 М. HEYKOOP, F. ESTEVES-RAVENTOS y G. MORENO

Fig. 36-42. Russula vinosopurpurea J. Schaeff. (H.AH 14162). 36-38: Pileipellis. 39-42: Esporas.

Source : MNHN, Paris

AGARICALES DE GUADALAJARA. 279

Lange (1936). En nuestro país sólo ha sido citado de Cataluña como Collybia mephiti-

ca por Maire (1937).

AGRADECIMIENTOS

Queremos expresar nuestro agradecimiento al Dr. Amolds por la confirmación de Ento-

loma undulatosporum. A A. Priego por su colaboración en microscopía electrónica. A Nikon Co.

(Rego & Cia., S.A., Madrid) por sus consejos fotográficos

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ELECTROPHORETIC ISOENZYME PATTERNS OF SOME

YEAST STRAINS USED IN WINE INDUSTRY

Simone PONCET, Robert MONTROCHER and Andrée COUBLE

Institut de Chimie et Biologie Moléculaire et Cellulaire, Université Cl

Bernard - LYON I, 43 Boulevard du 11 novembre 1918,

69622 - VILLEURBANNE Cedex, France.

ABSTRACT - 12 strains of Saccharomyces cerevisiae sensu Yarrow (1984) were studied by gel

electrophoresis for 11 isofunctional enzymes. These enzymes included three oxidoreductases (al-

cohol deshydrogenase, glucose-6-phosphate déshydrogenase, malate deshydrogenase), seven hy-

drolases (alkaline and acid phosphatases, and various esterases - a and B naphtyl acetate, $ na-

phtyl propionate, @ naphtyl butyrate, indoxyl acetate) and one lyase (aldolase). Polymorphism

was evident for most of the enzymes tested, and each strain had a unique pattem when all en-

zymes were considered. The numerical analysis of the electrophoretic patterns supported the con-

clusion that all strains were physiological variants of a single taxon. Enzyme electrophoresis was

confirmed to be a useful criteria in clarifying taxonomic relationship in yeasts.

RÉSUMÉ - Le comportement enzymatique de 12 souches de Saccharomyces cerevisiae sensu

Yarrow (1984) utilisées dans l'industrie du vin a été analysé par électrophorèse en gel de

polyacrylamide. L'investigation a porté sur 11 enzymes différentes: trois oxydo-réductases (alcool

déshydrogénase, glucose-6-phosphate déshydrogénase, malate déshydrogénase), sept hydrolases

(phosphatases acide et alcaline, et diverses estérases - œ et B naphtyl acétate, B naphtyl

propionate, а. паріму! butyrate, indoxyl acétate) et une lyase (aldolase). Le polymorphisme est

évident pour la plupart des enzymes recherchées et un profil caractéristique peut être rapporté à

chaque souche. L'analyse numérique des profils enzymatiques permet de conclure que toutes les

souches étudiées sont en fait des variants physiologiques d'un seul et même taxon. Cette étude

confirme la valeur chimiotaxonomique du critère électrophorétique pour la classification des

levures.

KEY WORDS : Isoenzymes, Saccharomyces cerevisiae, taxonomy, yeasts.

INTRODUCTION

Commercially produced strains of yeast are being widely utilize in the wine

industry. Although many factors are involved to determine the qualities of alcoholic

beverages, the yeast contribute significantly to the development of their flavor or aro-

ma as well as their organic composition.

Consequently, seeding with dry yeasts, made it necessary to assess more acu-

rately the characterization of these new selected microorganisms. As most of the

strains belong to the Saccharomyces cerevisiae group, conventional criteria such as

morphological and physiological tests commonly employed in yeast taxonomy are not

always reliable.

Source : MNHN, Paris

284 5. PONCET, R. MONTROCHER and A. COUBLE

More advanced techniques including serology (Tsuchiya et al., 1965, 1974;

Montrocher, 1982), DNA base composition (Nakase & Komagata, 1971; Poncet &

Fiol, 1972), proton magnetic resonance spectra of the mannans components (Spencer

& Gorin, 1969), co-enzyme Q system (Yamada et al., 1976, 1977), cytochrome spectra

(Montrocher & Claisse, 1987) have been applied successfully for yeast characteriza-

tion,

More recently, electrophoresis of total soluble cell proteins (Van Vuuren &

Van Der Meer, 1987; Degré et al., 1989) or macromolecules excreted (Bouix & Le-

veau, 1983) have been used to distinguish between yeast strains, as well as chromo-

some electrophoresis (Lalande et al., 1987; Degré et al., 1989; Kaneko & Banno,

1991) or long-chain fatty acid composition (Cottrell et al., 1986; Trédoux et al., 1987;

Viljoen et al., 1988).

Comparisons of nucleic acids such as nuclear DNA/DNA reassociation (Meyer

& Phaff, 1972; Price et al., 1978; Vaughan Martini & Kurtzman, 1985; Vaughan Mar-

tini & Martini, 1987; Kurtzman, 1989a; Kaneko & Banno, 1991) as well as DNA fing-

erprinting (Pedersen, 1986; Degré et al., 1989), fragment patterns of mitochondrial

DNA (Mac Arthur & Clark-Walker, 1983; Dubourdieu et al., 1987) or sequences of

18S and 25S RNA molecule (Lane et al., 1985; Kurtzman, 1989b; Kurtzman & Rob-

nett, 1988, 1991) provide insight into the yeast taxonomy.

Electrophoretic comparison of isoenzymes is a current approach of molecular

taxonomy. Such analysis have been applied in various fields: bacteria (Faure-Raynaud

et al., 1990), fungi (Chen et al., 1991) and yeasts (Sidenberg & Lachance, 1983; Ya-

mazaki & Komagata, 1981, 1982, 1983; Yamazaki et al., 1983; Yamazaki & Goto,

1985; Yamada & Nagakawa, 1988).

In the present paper, twelve commercial strains of Saccharomyces cerevisiae,

from various origin and commonly used in wine industry were investigated for electro-

phoretic enzymes comparison.

MATERIALS and METHODS

1. Microorganisms studied:

Twelve yeast strains were investigated. They all belonged to the species Sac-

charomyces cerevisiae (sensu Yarrow, 1984). They were obtained from Dr. Cuinier

(Institut Technique du Vin, Tours, France). The strains, their sources and origin are

listed in Table 1.

2. Preparation of free-cell extracts:

The strains were grown aerobically on GYP liquid medium containing glucose

5817, yeast extract 2g.1.! and bacto-peptone 2g.l:!, for 24 hr on a rotary shaking ta-

ble, at 25°C.

The cells were harvested by centrifugation at 10,000g (4°C) for 15 mn, and

the pellets were washed three times in distillated water.

Cells were disrupted with 0.5 mm glass beads in a Braun homogeneizer for

3mn in Tris-HCl 0.06M pH 6.8 with chilling in ice.

The extracts were centrifugated at 10,000g for 15 mn at 4°C and the superna-

tants centrifuged again for 2 hrs using the Ti rotor of a Beckman ultracentrifuge at

100,000g. The enzyme preparations were stored at -20°C until analysis.

Source : MNHN, Paris

ISOENZYME PATTERNS IN WINE YEASTS. 285

Table 1: Strains of Saccharomyces cerevisiae studied.

Tableau 1; Souches de Saccharomyces cerevisiae étudiées.

STRAINS TESTED SOURCE TRADE MARK

Strain A ТТМ 10 Joc-Lalvin

Strain B ВТОМУ 12105, Lalvin

Strain © LT.V., L-1090 Lalvin

Strain D LEN LLL Fermivin

Strain E LTN 1395 Fermichamp

Strain E LT.V., L-434 Levuline

Strain G LT.V., L-448 Levuline

Strain H LT.V., L-1077 5841

Strain 1 LT.V., L-2056 L-2056

Strain. J LT.V., L-2266 L-2266

Strain K LT.V., L-28 L-28

Strain E LT.V., L-905 L-905

* LT. V.— Institut Technique du Vin, Tours, France

Protein rate was determinated by the Bradford method (1976), with BSA as

standard.

3. Enzyme systems tested:

Eleven enzymes were examinated: aldolase (ALD; EC 41213), alcohol deshyd-

rogenase (ADH; EC 1111), glucose-6-phosphate deshydrogenase (G6PD; EC 11149);

malate deshydrogenase (MDH; EC 11137), acid phosphatase (ACP; EC 3132), alkaline

phosphatase (AKP; EC 3131) and esterases (EC 3111) a- naphtyl acetate (EST 1), in-

doxyl acetate (EST 2). B- naphtyl acetate (EST 3), B- naphtyl propionate (EST 4) and

&- naphtyl butyrate (EST 5).

All first six enzymes were chosen for their location on the main pathways for

carbohydrate metabolism; the last one (esterases) for the great polymorphism they

showed in a lot of microorganisms.

Source : MNHN, Paris

286 S. PONCET, R. MONTROCHER and A. COUBLE

4. Polyacrylamide gel electrophoresis:

Protein samples were submitted to vertical electrophoresis on a 1.5 mm thick,

7.5% non denaturing polyacrylamid gel overlaid with a 4.5% polyacrylamide stacking

gel using the discontinous buffer system of Laemmli (1970).

The concentrations of protein preparations were adjusted for each enzyme test-

ed (50 to 200 Hg/100u1) in order to obtain the best resolution and equal volumes of

sample buffer (3041) were loaded into each lane of the gel.

Electrophoresis was carried out at 10°C with a constant 15 mA current per

slab until the tracking dye (bromophenol blue) reached the bottom of the gel.

5. Staining procedures of enzymes:

After electrophoresis, the gel slabs were placed directly into substrate solutions

for the revelation of enzymatic activity. Histochemical reactions on the polyacrylamide

gel were similar to those described in Pasteur et al. (1987).

6. Numerical analysi

The relative electrophoretic mobilities (Rm) of the enzyme bands were calcu-

lated as the ratio of the distance-migration of the enzyme from the origin to that of the

tracking dye.

The different patterns (i.e. electromorphs) observed for each enzyme were

numbered from decreasing anodal mobility, and the electromorph diversity (H) esti-

mated by the H coefficient, (H = 1- Sx,?, where i is the frequency of the ith electro-

morph).

Jaccard similarity coefficients for all possible pairs of isolates were calculated

according to Gardes et al. (1987) and the relatedness between the strains determinated

by the UPGMA method - Unweighted Pairwise Grouping Mathematical Average - (Pi-

ung Li, 1981) that was then used to generate a dendrogram (Sneath & Sokal, 1973).

RESULTS

Zymograms of the twelwe Saccharomyces cerevisiae strains tested are illus-

trated in schematic diagrams (Fig. 1).

All strains exhibited activity for all the enzymes studied. The number of elec-

tromorphs observed per enzyme as well as the electromorph diversity are showed in

Table 2.

The Rm of aldolase (ALD) ranged from 0.18 to 0.38. Strains D and E showed

two isoenzymes bands and strain F eight. Nine distinct electromorphs were noted with

a H diversity of 0.88.

The Rm of alcohol deshydrogenase (ADH) were distributed from 0.19 to 0.45.

Two bands (strain I) to ten (strain G) were observed, leading to ten different electro-

morphs (H= 0.89).

Glucose-6-phosphate deshydrogenase (G6PD) showed four isoenzyme bands

very narrowly ranged (Rm 0.27 to 0.30) and most of the strains exhibited only one

band (0.28 or 0.30) common respectively to eight or seven strains. Six electromorphs

were observed (H= 0.81).

Source - MNHN, Paris

ISOENZYME PATTERNS IN WINE YEASTS 287

мэ хон E мон ace АКР

ABCOEFGMIJKL ABCDÉFGMIUKL ABCOEFGMIJKL ABCDEFGHIIKL ABCDEFONIJxL Aacoerouiaxt

ШТ [TT т 11

HF Al 3 | | | |

НН E HFH L HIIH THA

Ha ul HJIH ¡|

H 1 842508: H Ї Ї | |

AR Н 8 | | Ї

| | | |

| | |

| Ш| ШИШ! |

est? EsTa 22 E

ABCDEFGHIJKL ABCOEFGHIJKL

TET

І Ши

Figure 1: Diagram of the zymogram patterns of the 12 Saccharomyces cerevisiae strains studied,

Figure 1: Diagramme des profils enzymatiques des 12 souches de Saccharomyces cerevisiae

étudiées.

Malate deshydrogenase (MDH) gave nine different bands ranged from Rm

0.20 to 0.41. Two bands (strain F) to five (strains C,G,K,L) were detected in one yeast

leading to a great diversity of electromorphs (H= 0.87).

From all the enzymes tested, acid and alkaline phosphatases (ACP and AKP)

exhibited the less high diversity with respectively three and four distinct electro-

morphs. Rm were distributed from 0.28 to 0.37 (ACP) and from 0.26 to 0.34 (AKP),

no more than three different isoenzymes bands - and often only one - being detected

in the strains.

Esterases showed the more anodal mobilities of all the enzymes studied. The

Rm were widely ranged from 0.41 to 0.60 (EST 1), 0.32 to 0.63 (EST 2), 0.28 to 0.51

(EST 3), 0.15 to 0.65 (EST 4) and 0.22 to 0.63 (EST 5). The lowest diversity was ob-

served for EST 2 (H= 0.74) and the highest for EST 4 with 10 distinct electromorphs

(H= 0.89).

DISCUSSION

As shown in Figure | and Table 2, all strains of Saccharomyces cerevisiae

tested exhibited a great diversity of electrophoretic isoenzymes banding patterns, thus

Suggesting a large strain heterogeneity. This diversity was clearly underlined for en-

zymes such as ALD, ADH, MDH or EST 3, 4, where eight to ten different electro-

Source : MNHN, Paris

288 S. PONCET, R. MONTROCHER and A. COUBLE

Table 2: Electromorph diversity of enzymes.

Tableau 2: Diversité des profils électrophorétique des enzymes.

Strains | ALD ADH G6PD MDH АСР AKP ESTI EST2 EST3 EST4 ESTS

A 2 4 2 6 1 4 4 1 1 6 4

B 2 4 4 9 і 4 4 6 1 10 4

С 3 6 4 3 2 3 E E 5 9 6

р 4 2 5 10 1 2 4 2 7 8 1

Е 4 10 і 2 1 2 4 i 2 8 4

F 1 3 1 5 1 2 Z 4 6 2 4

6 9 d 3 1 3 1 1 3 4 7 3

H 7 5 6 7 1 2 2 1 8 4 4

1 8 8 6 8 1 4 2 1 8 3 2

4 8 1 6 4 1 4 2 1 5 1 4

к 6 9 6 1 E 1 1 3 E 5 5

15 5 9 6 1 E 1 1 $ З 5 5

n° of strains | 12 12 12 12 12 12 12 12 их НЫ 12

lelectromorphs| 9 10 6 10 5 4 5 6 8 10 6

H diversity | 0,88 0,89 0,81 0,87 051 0,71 0,75 0,74 0,86 0,89 0,77

morphs were detected with high H diversity coefficients narrowly ranged (0.86 to

0.89). However, this suggested heterogeneity was less obvious with enzymatic systems

such as ACP or AKP which exhibited only three or four distinct electromorphs and

low H coefficients (0.51 and 0.71 respectively).

When examined on the basis of precise conventional taxonomic criteria (Mar-

tins et al. 1990; Barnett et al., 1991), the main difference between all these yeasts was

the assimilation of galactose, positive in strains B, C, D, G, I, J and L and negative in

strains A, E, F, H and K. So, according to Van Der Walt (1970) they could be assig-

nated into two clusters, the first ones in a "Saccharomyces cerevisiae" sub-group, and

the last ones in a "Saccharomyces bayanus" sub-group.

To determine further the extend of relatedness between all the strains studied,

the triangular matrix of Jaccard similarity coefficients was established (Table 3). The

strains, all together, exhibited a relatively low similarity coefficient (0.14), the highest

-0.82- being K/L ("S. bayanus" / "S. cerevisiae"), and the lowest -0- ("S. cerevisiae"

strain C/ all other strains, B excepted). The so-called "S. bayanus" strains were found

related to 0.19 average, with a range of distribution from O (K/A,E, F) to 0.36 (E/F).

The so-called "S. cerevisiae" strains were also divergent with an average similarity co-

efficient of 0.09, with values from 0 (C/ other "S. cerevisiae" strains, B excepted) to

0.54 (UJ).

Indeed, "S. cerevisiae" and "S. bayanus" strains were widely overlaping and

our results agreed quite well with numerical analysis -85 to 90% similarity between

these two yeasts- (Campbell, 1972), cell wall antigenic structure -antigens 1, 10, 18, 2,

3, 14, 31 -(Tsuchiya et al., 1974), G + C content -38.8 to 40.2- (Nakase & Komagata,

1971) or pulsed field electrophoresis (Kaneko & Banno, 1991) and confirmed conclu-

sions of Yarrow (1984) who considered $. cerevisiae and 5, Бауапих as synonyms.

Referring to the triangular matrix, similarity average values were calculated by

the UPGMA method, and strains were included in the resulting dendrogram (Fig. 2)

Source : MNHN. Paris

ISOENZYME PATTERNS IN WINE YEASTS 289

Table 3: Matrix of pairwise Jaccard similarity coefficient between strains.

Tableau 3: Matrice des coefficients de similarité inter-souches (coefficients de Jaccard)

ШОГ”: gsm

5 3 UN

в то

С 0,09 [1,00

D слів | ооо | т

t от | оо оз | 100

Хар ола | обо | олв розе | To

о ооо ого | 000000 | 000 | 106

H 0,18 | 000 f 018 | 036 | 027| 000| 59.

т 0,18 | 000: 009 | бл8 | vo | co os | 100

J 227: 000 | 9,99 | 036 Гоа [0.00 [036 [0.53 100

x [ooo] oco | до | 000] 000| 000 045 | 005 | 009 | 009 | Гоо

1 [oof ooo f ooo | ооо | 050 | 00 | 036 | 009 | 003 | 009 037 tron

ок

mé

Е D F E но 1 B A G L K

Figure 2: Dendrogram of 12 Saccharomyces cerevisiae strains studied on the basis of similarity

average values (UPGMA method).

Figure 2: Dendrogramme des 12 souches de Saccharomyces cerevisiae, établi à partir des coeffi-

cients de similarité (calcul UPGMA).

With the exception of strain C, all other strains could be assignated into two clusters,

the first one including strains G, L and K and the second one the remaining yeasts. In

the first cluster, strains K ("S. bayanus") and L ("S. cerevisiae") revealed a high simi-

larity value (82%) and were related to strain G ("S. cerevisiae") at 40% matching coef-

ficient. In the second cluster, strain A ("S. bayanus") and B ("S. cerevisiae") were the

most closely related (64%). Strains I and J ("S. cerevisiae") matched at 54% and were

both related at 40% with strain H ("S. bayanus"). Strains E and F ("S. bayanus") -36%

of similarity average value- were related to strain D ("S. cerevisiae") at 27%; it was

Source : MNHN. Paris

290 5. PONCET, R. MONTROCHER and A. COUBLE

approximately the same -25.5%- for A, B/ H, I, J, while all the strains here included

matched at 21%. No relationship closer than 3% matching was noted between these

two clusters, while strain C ("S. cerevisiae") matched no more 1% with both them. So,

numerical analysis clearly showed mutually wide matching coefficient between all

these yeasts without allowing an obvious discrimination into two separate taxa.

However, when examined for deoxyribonucleic acid relatedness, 5. cerevisiae

and S. bayanus showed non substantial DNA homology -5% (Vaughan-Martini &

Kurtzman, 1985; Vaughan Martini & Martini, 1987, Kaneko & Banno, 1991). Fur-

ther, Kurtzman & Robnett (1991) reported distinct partial sequences of 18S and 25S

ribosomal RNA for these two species. So, even if some differences can be shown

among these yeasts, all the strains here investigated must be considered merely as phy-

siological variants of a same species, S. cerevisiae.

CONCLUSION

As an evidence, yeast classification mainly based on phenotypic characters such as

morphological and physiological properties or biochemical reactions is not always sat-

isfactory, especially in the delineation of closely related organisms. Because of strain

variability in standard hydrocarbon assimilation and fermentation tests, the Saccharo-

myces sensu stricto species offer a good example of this problem. Molecular biology

techniques such as electrophoretic comparison of enzymes or total soluble cell proteins

as well as nuclear DNA reassociations, restriction patterns of mitochondrial DNA or

sequences of larger ribosomal RNA may provided increased informations to assess

more acurately relatedness among species.

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Source : MNHN. Paris

Cryptogamie, Mycol. 1992, 13 (4): 295-303 295

SPANISH MYXOMYCETES. VI. FOUR INTERESTING

SPECIES BELONGING TO THE STEMONITALES

G. MORENO, C. ILLANA & M. HEYKOOP

Dpto. Biología Vegetal, Universidad de Alcalá de Henares, 28871

Alcalá de Henares, Madrid, Spain

ABSTRACT - Comatricha pellucida sp. nov. from Spain, is described and figured. C. afroalpina

Rammeloo, described from Africa, and C. anomala Rammeloo, described from Belgium, are new

records from Spain. They both have a distinctive spore ornamentation, especially when observed

under the scanning electron microscope. We have added photographs of Macbrideola macrospora

(Nann.-Brem.) Ing, which was obtained in a moist chamber culture.

RESUMEN - Se describe e ilustra Comatricha pellucida sp. nov. como taxon nuevo para la cien-

cia, procedente de España. C. afroalpina Rammeloo, descrita de Africa, y С. anomala Rammeloo,

descrita de Bélgica, constituyen nuevos registros para España. Ambas se caracterizan por tener

una ornementación esporal típica, especialmente bajo el microscopio electrónico de barrido. Apor-

tamos fotografías de Macbrideola macrospora (Nann.-Brem.) Ing, obtenido en cultivo de cámara

húmeda

KEY WORDS : Myxomycetes, Stemonitales, Comatricha pellucida, Comatricha afroalpina, Co-

matricha anomala, Macbrideola macrospora.

The terminology of Dérfelt & Marx (1990) is used.

Comatotricha afroalpina Rammeloo, Bull. Jard. Bot. Belg. 53: 297, 1983 (Figs. 1-10)

Sporocarps scattered, generally a few only, stalked, 1-2mm tall. Sporophores

globose, dark brown. Stalk cylindrical, reddish-blackish, fibrous at base, mostly up to

Imm long. Columella a continuation of the stalk reaching about the centre of the spo-

rophore, its apex merging into the thick capillitium branches. Capillitium scanty, pale

brown, attached perpendicularly to the columella along its whole length, branches

thick and anastomosing freely, especially towards the periphery, forming an incom-

plete surface net. Spores globose, pale brown, 8-10 jim diam., baculate/warted all over

(SEM shows baculae with lobed apices).

All the collections were obtained in moist chamber culture. The identities of

Specimens AH 12085 and 12871 were confirmed by Dr. Rammeloo. Collection AH

13285 has ellipsoid spores which are up to 11 pm diam.

The outstanding characters of this species are the structure of the capillitium

and spores. The capillitium is differentiated into strong primary branches which ramify

in thinner filaments, anastomosing especially near the periphery. The spores are pale

Source : MNHN. Paris

296 G. MORENO, C. ILLANA and M. HEYKOOP

Fig. 1-6: Comatricha afroalpina Rammeloo (AH 12871). l: sporocarp. 2-5: sporophores. 6

spores.

Source : MNHN. Paris

SPANISH MYXOMYCETES 297

Fig. 7-10, Comatricha afroalpina Rammeloo. 7-8 (AH 12871) and 9-10 (AH 13285): spores.

and baculate. Buyck & Rammeloo (1983) discussed the relationships of this species

with others. It has only been recorded previously from Africa.

Material examined:

GUADALAJARA: on wood of Quercus faginea, cerro Alto Llano, Turmiel,

27-Х1-1990, АН 12871.

MADRID: on bark of Vitis sp., in moist chamber after 18 days, 13-VIII-1990,

Quinta Cervantes, Alcalá de Henares, AH 12085. On bark of Vitis sp., in moist cham-

ber from 24-IV-1991 to 16-V-1991, quinta Cervantes, Alcalá de Henares, AH 13285

Source : MNHN, Paris

298 G. MORENO, C. ILLANA and M. HEYKOOP

Fig. 11-16. Comatricha anomala Rammeloo. 11 (AH 12647): sporocarp. 12 (AH 12932): capilli-

tium. 13-15 (AH 12932): spores and ornamentation. 16 (AH 13025): spore.

Comatotricha anomala Rammeloo, Bull. Jard. Bot. Belg. 46: 237, 1976 (Figs. 11-16)

Sporocarps in small groups of 5-20, cylindrical with convex apex, stalked,

0.2-0.35 cm tall. Hypothallus membranous, translucent, with a clear colour. Stalk

short, 1/3 to 1/4 of the total height, dark brown, with a fibrous base. Peridium early

evanescent. Columella attenuate from base to apex. Capillitium abundant, reddish-

Source : MNHN, Paris

SPANISH MYXOMYCETES 299

brown, thin, with a scarcely developed peridial net and with numerous free ends.

Spores pale brown, globose, 7.5-10 lim diam., densely warted; because of the coales-

cence of the warts, some partial reticulation, more or less extensive in some zones, can

be observed.

Rammeloo (1976) indicated in his original description that the spore size was

9-10 ит diam. Kowalski & Demaree (1987) collected this species in California and

they especially noted the smaller spore size of their specimen, i.e. 8-9 um. This

agrees better with our collection AH 13025 in which the spores are 7.5-9 um diam.

Comatricha anomala is a species with a unique spore ornamentation in this

genus, consisting of warts which coalesce into a nearly complete reticulation.

It has been recorded from Belgium (Rammeloo, op. cit.), Norway (Johannesen,

1984), Germany (Neubert & Baumann, 1986), USA (Kowalski & Demaree, op. cit.)

and now for the first time from Spain, where it has always been collected on dead

wood.

Material examined:

BADAJOZ: On a branch of Nerium oleander, arroy Argallón, Azuaga, leg

LR. Garcia, 10-X-1990, AH 13025.

CASTELLON: on unidentified wood, Castellón, leg. A Burguete, 31-1-1990,

AH 12932. On a stem of Genista scorpius, Fuente la Reina, leg. A. Burguete,

12-X-1990, AH 12647.

Comatricha pellucida Moreno & Illana, sp. nov. (Figs. 17-26)

(Etym.: from the Latin pellucidus because of the pale translucent capillitium)

Sporocarpia glomerata, caespitosa, globosa, stipitata, brunneo-rubra, 0,3mm

diam. et 0,4-1,2mm alta. Stipes niger, erectus, ad summum usque ad tertiam partem al-

titudinis totalis surgens, basis valde lata gradatim versus apicem minuens. Peridium

fugax. Columella crassa gradatim macrescens, dimidium sporocarpium attinens. Capill-

itium valde ramosum et anastomosans filamentis valde angustis constitutum minus

quam ] um diam. latis, pallido-brunneis, multas ramificationes liberas, papillas parvas

et nullum nodulum latum habentibus. Sporae 7-9 um diam., verrucosae, S.E.M. explo-

ratae longa bacula inaequaliter distributa exhibentes.

Habitat: In foliis Ulmi minoris, Fuente la Reina, Castellón, leg. A. Burguete,

31.1.1990, AH 12867 Holotypus. (Isotypus in herbario privato Nannengae-Bremekamp,

sub n° 16.690)

Sporocarps in small clusters, gregarious, stalked, 0.4-1.2 mm tall. Sporo-

phores globose, about 0.3 mm diam., red-brown. Hypothallus discoid, black. Stalk

black, nearly half the total height, base very wide, attenuated upwards, reaching to the

centre or a little over in the sporophore, where it splits into a few capillitium branches,

slightly webbed at the base between the branches. Capillitium dense, thin, less than 1

Hm diam., pale brown, (Rayner) rosy buff, with very abundant small papillae, joined

perpendicularly to the columella along its whole length, branched and anastomosing,

axils not widened, base, except on the apex, not webbed, forming 2-3 somewhat elon-

gate meshes on the radius, and with about 35-45 um long free ends pointing outwards.

Spores globose, pale rosy or pale brown, 7-9 шт diam., irregularly, minutely baculate

(SEM; under the light microscope appearing spinulose) the baculae (spinules) less than

0.5 um long. Plasmodium not observed.

Source : MNHN, Paris

300 G. MORENO, C. ILLANA and M. HEYKOOP

| 10pm

Fig. 17-22. Comatricha pellucida Moreno & Illana (Holotypus). 17: ѕрогосагр. 18: sporophore.

19: hypothallus. 20-22: capillitium and spores.

Source : MNHN, Paris

SPANISH MYXOMYCETES 301

Fig. 23-26. Comatricha pellucida Moreno & Ilana (Holotypus): spores and ornementation.

Habitat: on leaves of Ulmus minor, Fuente la Reina, Castellón, leg. A. Bur-

Buete, 31-1-1990, AH 12867 Holotypus. (Isotypus in the private herbarium of Nannen-

ga-Bremekamp sub n° 16.690).

Comatricha pellucida belongs to the subgenus Laxaria Nann.-Brem. It is char-

acterized by redbrown sporophores, thin, pale, profuse, radiating from the columella

capillitium net and rather pale spores. These characters separate it from any other

known species of Comatricha.

Macbrideola macrospora (Nann.-Brem.) Ing, Trans. Brit. Mycol. Soc. 78: 444, 1982.

(Figs. 27-30)

Macbrideola cornea var. macrospora Nann.-Brem., Proc. Kon. Ned. Akad.

Wetensch., Ser. C, 74: 363, 1971.

____ Nannenga-Bremekamp (1971) described M. cornea var. macrospora as charac-

terized by bigger spores: 12-14 um diam., darker colour and spinulose spore ornemen-

‘ation than in M. cornea. Ing (1982) raised it to specific rank.

Source : MNHN, Paris

302 G. MORENO, C. ILLANA and M. HEYKOOP

| 10pm

Fig. 27-30. Macbrideola macrospora (Nann.-Brem.) Ing (AH 13060). 27-28: sporocarps. 29: ca-

pillitium. 30: spores.

This taxon has been recorded before from Spain, from Barcelona (Llistosela &

Aguasca, 1986).

Material examined:

CACERES: on bark of Quercus pyrenaica, in moist chamber from 1-II-1991

to 18-11-1991, Sierra de Bernabé del Piomnal de Tomantés, 27-IV-1990, AH 13060.

Source : MNHN, Paris

SPANISH MYXOMYCETES 303

ACKNOWLEDGEMENTS

We wish to express our gratitude to Dr. J. Rammeloo for the revision of all the species

and for confirming, together with Mrs N.E. Nannenga-Bremekamp, C. pellucida as new to sci-

ence. To Prof. Granada-Godoy for providing the latin diagnosis. To the "Consejo Social” of the

University of Alcalá de Henares (C. Ilana) and to the "Ministerio de Agricultura, Pesca y

Alimentación, Programa Nacional sobre Sistemas y Recursos Forestales" (G. Moreno) for the fi-

nancial support which enabled us to visit these specialists. To Mrs. Nanenga-Bremekamp for

going carefully through the manuscript. To Mr. A. Priego, technician of the University of Alcalá

de Henares, for the SEM photographs.

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Source : MNHN, Paris

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HYMENOCHAETE PSEUDOADUSTA NOV. SP.

(BASIDIOMYCETES APHYLLOPHORALES): DESCRIPTION

ET CARACTERES CULTURAUX

par J.C, LEGER et P. LANQUETIN

Laboratoire de Biotaxinomie et Nuisances fongiques, Univ. Claude

Bernard-Lyon I, Bat. 405, 43 Bd du 11 Novembre 1918, F-69622

Villeurbanne Cedex.

RÉSUMÉ - Description d'Hymenochaete pseudoadusta nov. sp. récolté en Thaïlande et dont le

basidiome évoque fortement celui d'H. adusta (Lév.) Har. et Pat; par contre les caractères

culturaux permettent de les distinguer aisément.

ABSTRACT - Description of Hymenochaete pseudoadusta, a new species collected in Thailand,

the basidiocarp of which greatly resembles H. adusta (Lév.) Har. et Pat; on the contrary their

cultural characteristics are very different.

MOTS CLÉS : Aphyllophorales, Hymenochaete, systématique, cultures.

DESCRIPTION

Hymenochaete pseudoadusta nov. sp.

Basidiomata sessili-pileata gradati-imbricata, basi confluentia, tenuia, lenta,

fragilia. Superficies pilei subtiliter hirsuta, castanea (omnino nigra ubi madida),

permultis angustis. stris. concentricis obscurissime rubro-brunneis ай dilutiore

castaneas, margine crenato-undulata, badia, tenui. Superficies hymenii nonnullis plicis

concentricis praedita, subrubro-grisea ubi sicca, obscure castanea ubi madida, margine

tenuissima, sericea, vivide cinnamomea. Tomentum ex hyphis rubro-brunneis, paulum

ramosis, tunica incrassata, septis autem tenuibus, x 4-(5)um. Cortex deest. Contextus

ex hyphis ramosis, tunica incrassata, septis autem tenuibus, nonnihil confertis, ad.

superficiem. parallele jacentibus, in dimidio inferiore hymenii oblique desinentibus,

extremitatibus submoniliformibus. Setae subulatae, uniseriatae vel in setigero strato

40um crasso dispositae, parum confertae, plerumque exilibus hyphis circumcinctae,

33-45 x 5,5-7-(8)um, usque ad 25ym eminentes. Hymenium e basidiolis et basidiis

16-18 x 3-3,5 m, 4 sterigmatibus 3m longis. Sporae ellipticae vel cylindricae,

3,5-4,8-(5) х 1,5-1,8-(2)um, tunica tenui, haud amyloideae, uninucleatae, in massa

albae.

Holotypus: LY-L611, Parc Kao Yai (Korat), Thailande, leg. A. David, 10

Janvier 1990. Paratypus: LY-L 689, id. 7 aoüt 1990.

Source : MNHN. Paris

J.C. LÉGER et P. LANQUETIN

306

===

<= 7 1 у

2 МЛ |

Source : MNHN. Paris

HYMENOCHAETE PSEUDOADUSTA 307

Basidiome piléé, sous forme de chapeaux sessiles, de 10-40mm de rayon,

étagés subimbriqués, confluents à la base, minces, flexibles mais fragiles. Surface du

chapeau de couleur générale brun-chataigne (vers 2,5 YR 3/2 du Code Munsell =

castaneus Sacc. = bone brown Ridgway) et virant au noir quand imbue, finement

hirsute avec de très nombreuses stries concentriques, étroites, allant de brun rouge

foncé (2,5 YR 2/2) à chatain (2,5 YR 3/6); marge ondulée-crénelée, bai (vers 2,5 YR

4/6 = badius Fr.). Surface hyménienne présentant quelques plis concentriques, grisâtre-

rougeátre (5 YR 5/2 = benzo-brown) sur le sec et chatain foncé (2,5 YR 3/2) quand

imbue; marge soyeuse, très mince (0,5mm), cannelle vif (7,5 YR 6/8).

Coupe haute de 300-4001m, monomitique, montrant un tomentum, un contex-

te dépourvu de spinules, une couche sétigère et un hyménium mince, pas de cortex.

Tomentum de 200-250]m d'épaisseur mais pouvant atteindre parfois 600m,

formé d'hyphes brun-rouge peu ramifiées, à paroi épaisse mais à cloisons très minces,

х 4-(5) ут.

Contexte de 120-150um d'épaisseur, jaunâtre en son centre, brun-rougeâtre et

plus sombre dans les 30-40jtm situés sous l'hyménium et sous le tomentum. Hyphes

ramifiées, x 3-4um, orientées parallèlement à la surface du chapeau et relativement

serrées, à paroi épaisse mais cloisons très minces, se terminant obliquement dans la

noitié inférieure de l'hyménium ou bien affleurant la surface (et parfois la dépassant

le Sum environ); les 10-201m terminaux de ces hyphes (ainsi que leurs courtes ra-

mifications ascendantes) sont trés souvent submoniliformes.

Spinules subulées, 33-45 x 5,5-7-(S)um et exsertes de 25um maximum,

disposées sur un seul rang ou formant une couche sétigère de 404m d'épaisseur,

espacées, la plupart engainées d'hyphes gréles (Ium).

Hyménium d'une quinzaine de jm d'épaisseur, formé de basidioles et de

basides 16-18 x 3-3,5jm, a 4 stérigmates de 31m.

Spores elliptiques à cylindriques, 3,5-4,8-(5) x 1,5-1,8-(2)um, à paroi mince,

10n amyloïde, uninucléćes (Giemsa), blanches en masse.

Holotype: LY-L 611, Pare Kao Yai (Korat), 150km N-E de Bangkok,

Thailande, leg. A. David, 10 janvier 1990, Paratype: LY-L 689, id., 7 aoüt 1990.

Discussion:

Hymenochaete pseudoadusta est une espéce piléée sessile qui trouve sa place

“ans la section Fultochaete Escobar ex Léger (Léger, 1990); cette section regroupe les

espèces présentant un contexte (=couche d'hyphes dépourvue de spinules et nommée

"yphal layer par Burt, 1918) mais sans cortex. Les espéces piléées sessiles de la sec-

tion Fultochaete sont: H. adusta (Lév.) Har. et Pat., H. attenuata Lév., H. berkeleyana.

(Mont) Cke, H. borealis Burt, H. cacao (Berk.) Berk., H. paucisetosa Léger et Lanq.,

H. perpusilla Pat., H. rheicolor (Mont.) Lév. et H. subferruginea Bres. et Sydow.

Fig. 1 > Hymenochaete pseudoadusta nov. sp. (LY-L 611, type). Coupe transversale dans le

basidiome et spores observées sur sporée dans le mélange phloxine-KOH 5%

Fis. 1- Hymenochaete pseudoadusta nov. sp. (LY-L 611, type). Transverse section through the

basidiocarp and spores observed on a spore print in 5% KOH-phloxine.

Source : MNHN, Paris.

308

J.C. LÉGER et P. LANQUETIN

10 рт

Fig. 2 - Cultures d'Hymenochaete pseudoadusta nov. sp. (LY-L 611, type). Mycélium aérien. A:

spinules. B: spinules groupées par C: hyphe pseudosétoide à sommet arrondi. D

hyphes sétoides.

Fig. 2 - Cultures of Hymenochaete pseudoadusta (LY-L 611, type). Aerial mycelium. A: setae.

B: groups of 2-3 setae. C: pseudosetoid hypha with rounded tip. D: setoid hyphae.

Source : MNHN. Paris

HYMENOCHAETE PSEUDOADUSTA 309

H. pseudoadusta nov. sp. est à rapprocher des espèces à spinules courtes

(45um de long maximum), comme Н. adusta, H. cacao et H. paucisetosa: H.

paucisetosa est caractérisé par ses spinules trés rares dont 1096 sont par ailleurs de for-

me trés curieuse (Léger & Lanquetin, 1983); H. cacao possede à l'inverse des spinules

trés nombreuses, trés serrées et formant une couche sétigère épaisse. C'est sans contes-

te H. adusta (voir Léger & Lanquetin, 1990) qui présente le plus de ressemblances tant

morphologiques qu'anatomiques avec la nouvelle espèce ici décrite: cependant H.

adusta s'en distingue par plusieurs caractères: spinules fusiformes très courtes (20-25 x

4-Spim), engainées d'un étui hyalin et dépassant très peu l'hyménium (15um maxi-

mum), tomentum ras (100um maximum) d'hyphes couvertes de granulations non cris-

tallines et enfin spores 3-3,5 x 1,5-1,8um, donc plus courtes que celles de Н.

pseudoadusta. H. adusta est une espèce asiatique, récoltée aux Philippines (type), au

Vietnam (Patouillard, 1923 et 1928), au Japon (Imazeki, 1940; Ito, 1955; Aoshima &

Furukawa, 1966) et en Thaïlande (Léger & Lanquetin, 1990); Н. pseudoadusta de

Thaïlande s'avère une espèce très ressemblante et de localisation géographique sem-

blable

CARACTÈRES CULTURAUX (LY-L 611)

Spores: uninucléées.

Monospermes: les spores obtenues à Lyon, trois semaines après la récolte,

germent au bout de 24 heures. Les 7 cultures monospermes étudiées cytologiquement

sont formées d'une part d'hyphes principales, x 4-5,5j1m, aux articles contenant le plus

souvent 4-5 noyaux, mais aussi 6-8 noyaux et d'autre part d'hyphes secondaires, х

2-2,5-(3)um, montrant généralement des articles à 2-3-(4) noyaux. Les monospermes

ayant des hyphes aux articles plurinucléés comme les polyspermes, l'espèce est

présumée homothalle. Le comportement nucléaire de H. pseudoadusta est plutôt fai-

blement holocénocytique: en effet, les articles binucléés sont trop peu nombreux pour

que l'on puisse parler de comportement nucléaire normal avec des irrégularités comme

C'est trés souvent le cas chez les Hymenochaete.

Polysperme:

- croissance: extrêmement lente, 30-40mm en 6 semaines.

- aspect: marge irrégulière; sur la bouture, mycélium duveteux, alutacé pâle

(10 YR 8/3) puis mycélium subtomenteux teinté de cannelle (7,5 YR 6/6), localement

brun ferrugineux (SYR 5/6), recouvrant le milieu plus foncé. Avec l'âge, les teintes

Sont plus uniformes, allant de rubiginosus Fr. (7,5 YR 5/6) à brun ferrugineux (5 YR

5/8 et 5/6). Revers: bruni; odeur faible.

- Microscopie:

* mycélium aérien montrant:

- des hyphes hyalines, x 1,5-2,5-(3)um, régulières à paroi mince;

- de nombreuses hyphes brun-rougeátre, x 1,5-2-(2,5)um, à paroi épaisse, faisant pen-

3er à des fibres peu ou pas ramifiées et portant souvent des masses résinoides.

- des spinules lisses (Fig. 2A), peu nombreuses, à paroi épaisse et base plutót rétrécie,

(32)-47-62 x (4,5)-5-6um. Elles sont quelquefois groupées par 2-3 (Fig. 2B).

Outre les spinules, peuvent être parfois observées des hyphes pseudosétoïdes, brunes, À

paroi peu épaissie et à sommet arrondi (Fig. 2С). Sur milieu au malt Difco et bacto-

agar Difco, les jeunes cultures monospermes ont montré de belles hyphes sétoïdes bru-

nés, à paroi épaisse, (65)-70-105-(130) x (3)-4-5-(6)um (Fig. 2 D).

Source : MNHN, Paris

310 J.C. LÉGER et P. LANQUETIN

Quant aux hyphes soudées en puzzle - typiques des cultures d'Hymenochaete -

elles n'ont jamais été observées sur milieu de Nobles; le mycélium d' H. pseudoadusta

est cependant capable d'en produire sur d'autres milieux.

* mycélium submergé: la coupe radiale, trés sombre en surface, avec d'impor-

tantes masses solidifiées souvent rougeátres, est hyaline, en profondeur: dans la gélose

très brunie, s'observent des hyphes brunes, peu régulières, x 1,5-3,5-(4)um, à contenu

hétérogène, à paroi un peu épaissie et quelques hyphes plus larges, plus sombres, attei-

впапі брт de diamétre mais rétrécies à 4jm vers le sommet, à paroi peu ou

irréguligrement épaissie; plus en profondeur, les hyphes, x 2-4jm, sont hyalines,

subréguliéres, à paroi mince.

- Cytologie: hyphes aux articles plurinucléés, contenant (2)-3-6-(8) noyaux

avec parfois des séries d'articles à 3-4-5 noyaux. Les cultures en milieu liquide au

malt, sous film de collodion, ont permis d'observer des drépanocytes contrairement aux

cultures sur milieu de Nobles.

- Oxydases: acide gallique: +++++, 0 gaiacol: +++, 0

paracrésol: - tyrosine: -, 0

CODE (selon Nobles, 1965 et divers compléments regroupés dans Nakasone,

1990):

2a - 6 - 17 - (18) - 21 - 32 - 37 - 39 - 47 - (53) - (57) - (66).

Remarque: De l'espéce voisine H. adusta, dont les caractéres mycéliens ont été

décrits par Léger & Lanquetin (1990), les cultures de H. pseudoadusta se distinguent

aisément par la croissance extrémement lente, par la formation de spinules peu nom-

breuses mais toujours présentes et enfin par l'absence de dendrophyses caractéristiques

du mycélium de H. adusta.

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HIGHER MARINE FUNGI OF LAKSHADWEEP ISLANDS

AND A NOTE ON QUINTARIA LIGNATILIS

S. CHINNARAJ

Biological Oceanography Division-National Institute of Oceanography

Dona Paula, Goa-403004, India.

ABSTRACT - The dead and decayed mangroves, Seagrasses and drift wood samples collected

from Lakshadweep Islands were examined for fungi and yielded 32 species of higher marine fun-

gi which includes 23 Ascomycetes, 1 Basidiomycete and 8 Deuteromycetes. This is the first re-

Port of higher marine from Lakshadweep Islands. A gelatinous sheath has been observed in fresh

ascospores of Quintaria lignatilis.

RESUME - Un premier inventaire sur le littoral des îles Lakshadweep a permis de répertorier 32

espèces de champignons dont 23 Ascomycètes, 1 Basidiomycète et 8 Deutéromycètes sur des

végétaux en cours de dégradation et des bois flottants. Un manchon gélatineux a été observé au-

tour des jeunes ascospores de Quintaria lignatilis.

KEY WORDS : Higher marine fungi, Lakshadweep Islands.

INTRODUCTION

The role of marine fungi in the decomposition of organic matter in the marine

environment is well documented (Fell & Master, 1980). The occurrence and distrib-

ution of marine fungi from the Indian Ocean has been studied to a certain extend

(Borse, 1988; Hyde, 1988, 1989, 1990; Hyde & Jones, 1988; Hyde et al., 1990; Jones

& Kuthubutheen, 1989; Kohlmeyer, 1984; Jones & Hyde, 1990; Kohlmeyer & Volk-

mann-Kohlmeyer, 1991b; Leong et al., 1991). However, nothing is known about the

occurrence of marine fungi from the Lakshadweep Islands. The present study was car-

Tied out to known the occurrence and distribution of marine fungi from the Lakshad-

weep Islands (Laccadive Islands).

MATERIALS AND METHODS

The dead and decayed mangroves seagrasses and drift wood samples from the

intertidal regions of Agatii, Androth, Cheriyam, Kalpeni, Kavaratti, Kadmat and Mini-

coy Islands (Fig, 1) were collected in clean polythene bags during an oceanographic

cruise to Lakshadweep Islands (R.V.G. Cruise No. 225, 5/2/92 to 20/2/92). The sam-

ples were examined for fungi after 7 to 10 days of incubation in a moist chamber.

Identifications were made using standard keys and original descriptions. All the identi-

fied samples were deposited in the Taxonomy Reference Center at National Institute of

Oceanography.

Source : MNHN, Paris

314

S. CHINNARAJ

72”Е 30 73° зо! e

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| Bingaram | 5

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Androth |

Kavaratti | .

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72*E зо! ise зо" 74

Fig. 1 - Map of Lakshadweep Islands (study area).

Source : MNHN, Paris

HIGHER MARINE FUNGI 315

OBSERVATIONS

Ascomycetes

Ascocratera manglicola Комп,

Recorded on unidentified dead shoreline tree wood collected from Kadmat Is-

land, (14/2/92 Herb. No. S.C.R. 340).

Arenariomyces majusculus Kohlm. et Volkm.-Kohlm.

Recorded on the dead Avicennia marina (Forsk.) Vierh. wood heavily dam-

aged by wood borers collected from Minicoy Island (10/2/92 Herb. No. S.C.R. 324)

Biatriosporia marina Hyde et Borse

Recorded on dead Avicennia marina (Forsk.) Vierh. wood collected from Min-

icoy Island (10/2/92, Herb. No. S.C.R. 346, 350).

Dactylospora haliotrepha (Kohlm. et Kohlm.) Hafellner

Recorded on dead Ceriops tagal (Perr.) C.B. Rob. wood collected from Mini-

coy Island (10/2/92 Herb. No. S.C.R. 327, 316).

Halosarpheia abonnis Kohlm.

Recorded on the dead Avicennia marina (Forsk.) Vierh. pneumatophore col-

lected from Minicoy Island (10/2/92 Herb. No. S.C.R. 331).

Halosarpheia marina (Cribb et Cribb) Kohlm.

Recorded on dead Ceriops tagal (Perr.) C.B. Rob. wood collected from Mini-

coy Island (10/2/92 Herb. No. S.C.R. 312).

Halosphaeria quadricornuta Cribb et Cribb

Recorded on shoreline tree Pemphis acidula Forst. wood collected from Kalpe-

ni Island (6/2/92 Herb. No. S.C.R. 304), eroded coconut tree from Kavaratti Island

(8/2/92 Herb. No. S.C.R. 306a), unidentified drift wood collected from intertidal re-

gion of Kavaratti Island (8/2/92 Herb. No. S.C.R. 306b).

Leptosphaeria australiensis (Cribb et Cribb) Hughes

Recorded on dead shoreline tree Scaveola taccada (Gaertn.) Roxb. wood col-

lected from Minicoy Island (10/2/92 Herb. No. S.C.R. 313, 315), shoreline tree Sca-

veola taccada (Gaertn.) Roxb. wood collected from Cheriyam Island (6/2/92 Herb. No.

S.C R. 333).

Lignincola laevis Hóhnk

Recorded on dead shoreline tree Pemphis acidula Forst. wood collected from

Cheriyam Island (6/2/92 Herb. No. S.C.R. 341), Androth Island (17/2/92 Herb. No.

S.CR. 345).

Lindra thalassiae Orpurt et al.

Recorded on drifted seagrass Thalassia testudinum Konig. collected from Kal-

peni Island (8/2/92 Herb. No. S.C.R. 308).

Lophiostoma mangrovei Kohlm. et Vittal

Recorded on dead bark of Avicennia marina (Forsk.) Vierh. collected from

Minicoy Island (10/2/92 Herb. No. 352).

Source : MNHN, Paris

316 S. CHINNARAJ

Lulworthia grandispora Meyers

Recorded on dead intertidal Avicennia marina (Forsk.) Vierh. wood collected

from Minicoy Island (10/2/92 Herb. No. S.C.R. 320).

Lulworthia spp. (spore length 300 to 40 um)

Recorded on dead intertidal Avicennia marina (Forsk.) Vierh. stem and pneu-

matophores collected from Minicoy Island (10/2/92 Herb. No. S.C.R. 323, 323a),

dead shoreline tree Pemphis acidula Forst. wood collected from Minicoy Island

(10/2/92 Herb. No. S.C.R. 325).

Marinosphaera mangrovei Hyde

Recorded on dead shoreline tree Scaveola taccada (Gaertn.) Roxb. collected

from Kadmat Island (14/2/92 Herb. No. S.C.R. 348), pneumatophores of Ceriops tagal

(Perr.) C.B. Rob. collected from Minicoy Island (10/2/92 Herb. No. S.C.R. 347).

Massarina thalassiae Kohlm. et Volkm.-Kohlm.

Recorded on dead shoreline tree Pemphis acidula Forst. wood collected from

Kalpeni Island (6/2/92 Herb. No. S.C.R. 302), dead Ceriops tagal (Perr.) C.B. Rob.

wood and pneumatophore collected from Minicoy Island (10/2/92 Herb. No. S.C.R.

318, 328).

Massarina velatospora Hyde et Borse

Recorded on intertidal Ceriops tagal (Perr. C.B. Rob. wood collected from

Minicoy Island (10/2/92 Herb. No. S.C.R. 337)

Massaria sp.

Recorded on shoreline tree Scaveola taccada (Gaertn.) Roxb. wood collected

from Androth Island (16/2/92 Herb. No. S.C.R. 326).

Payosphaeria minuta Leong et al.

Recorded on dead intertidal Ceriops tagal (Perr.) C.B. Rob. wood and Avicen-

nia marina (Forsk.) Vierh. wood collected from Minicoy Island (10/2/92 Herb. No.

8.С.В. 342, 343).

Quintaria lignatilis (Kohlm.) Kohlm. et Volkm.-Kohlm.

This species was first described under the genus Trematosphaeria (Kohlmeyer,

1984). Later on, this fungus was described as new genus Quintaria (Kohlmeyer &

Volkmann-Kohlmeyer, 19912) in both studies, there was no mention of the gelatinous

sheath around the ascospore. But our collections from Lakshadweep, Maldives, Anda-

man and Nicobar Islands (when the fresh ascocarps are observed) show a distinct gela-

tinous sheath around the ascospores (Plate 1).

Recorded on dead intertidal Ceriops tagal (Perr.) C.B. Rob. wood collected

from Minicoy Island (10/2/92 Herb. No. S.C.R. 314), dead shoreline tree Pemphis aci-

dula Forst. wood collected from Minicoy Island (10/2/92 Herb. No. S.C.R. 319, 321).

Sarvoryella lignicola Jones et Eaton

Recorded on unidentified drift wood collected from Kavaratti Island (8/2/92

Herb. No. S.C.R. 309), dead intertidal shoreline tree Saveola taccada (Gaertn.) Roxb.

stem collected from Androth Island (16/2/92 Herb. No. S.C.R. 330).

Savoryella paucispora (Cribb et Cribb) Koch

Source : MNHN, Paris|

HIGHER MARINE FUNGI 317

Plate 1 - A-D: Quintaria lignatilis. A-B: Gelatinous sheath around the ascospore (1100 x). C-D:

Ascus (275 x).

Recorded along with Monodictys pelagica (Johnson) Jones on unidentified

drift wood collected from Kavaratti Island (8/2/92 Herb. No. S.C.R. 310).

Torpedospora radiata Meyers

Recorded on dead shoreline tree Pemphis acidula Forst. wood collected from

Kalpeni Island (6/2/92 Herb. No. S.C.R. 305).

Verruculina enalia (Kohlm.) Kohlm. et Volkm.-Kohlm.

Recorded on dead shoreline tree Pemphis acidula Forst. wood collected from

Kalpeni Island (6/2/92 Herb. No. S.C.R. 301) unidentified drift wood and Pemphis aci-

dula Forst. wood collected from Minicoy Island (10/2/92 Herb. No. S.C.R. 317, 322,

529), dead shoreline tree Scaveola taccada (Gaertn.) Roxb. wood collected from Che-

пуат Island (6/2/92 Herb. No. S.C.R. 334).

Basidiomycetes

Halocyphina villosa Kohlm. et Kohlm.

Recorded on dead intertidal Ceriops tagal (Perr.) C.B. Rob. wood collected

‘fom Minicoy Island (10/2/92 Herb. No. S.C.R. 338, 339).

Deuteromycetes

Cirrenalia basiminuta Ragukumar et al.

Source : MNHN, Paris

318 S. CHINNARAJ

Recorded on drifted coconut frond collected from Kavaratti Island (8/2/92

Herb. No. S.C.R. 332).

Cirrenalia pygmea Комп.

Recorded on dead intertidal pneumatophore of Ceriops tagal (Perr.) C.B. Rob.

collected from Minicoy Island (10/2/92 Herb. No. S.C.R. 347).

Humicola alopallonella Meyers et Moore

Recorded on dead intertidal pneumatophore of Ceriops tagal (Perr.) C.B. Rob.

collected from Minicoy Island (10/2/92 Herb. No. S.C.R. 3474).

Monodictys pelagica (Johnson) Jones

Recorded on unidentified drift wood collected from Kavaratti Island (8/2/92

Herb. No. S.C.R. 310).

Periconia prolifica Anast.

Recorded on dead intertidal shoreline tree Pemphis acidula Forst. wood col-

lected from Kalpeni Island (6/2/92 Herb. No. S.C.R. 303).

Trichocladium achrasporum (Meyers et Moore) Dixon

Recorded along with Humicola alopallonella Meyers et Moore on dead pneu-

matophore of Ceriops tagal (Perr.) C.B. Rob. collected from Minicoy Island (10/2/92

Herb. No. S.C.R. 3474).

Zalerion maritimum (Linder) Anast.

Recorded along with Cirrenalia basiminuta Ragukumar et al. on coconut frond

collected from Kavaratti Island (8/2/92 Herb. No. S.C.R. 332).

Zalerion varium Anast.

Recorded on unidentified drift wood collected from Kavaratti Island (8/2/92

Herb. No, S.C.R. 307).

ACKNOWLEDGEMENTS

1 am thankful to Dr. A.G. Untawale Asst. Director for his encouragement, the Head Bi-

ological Oceanography Division N.LO, for laboratory facilities, Prof. J. Kohlmeyer for reviewing

the manuscript, Dr. Hyde for identification of Q. lignatilis and C.S.LR. for financial assistance.

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YEAST FLORA OF RAW MILK IN EL-MINIA CITY, EGYPT

Mamdouh S.A. HARIDY

Botany Depart., Faculty of Science, El-Minia University, El-Minia,

Egypt.

ABSTRACT - 126 yeast strains were isolated from raw milk samples collected from milk sellers

at Al-Minia city, upper Egypt. On the basis of 24 morphological and physiological merkmals, the

isolated yeast strains were assigned to 13 genera. Debaryomyces hansenii and Clavispora lusitani-

ле мете the most dominant species followed by Trichosporon beigelii and Rhodotorula mucilagi-

nosa. Kluyveromyces marxianus, a lactose fermanting species, was also isolated. It is worthmen-

Mioning that the presence of the pathogenic species Trichosporon beigelii and Rhodotorula

mucilaginosa constitutes a public health hazard and care should be taken for free milk from these

human pathogens before being used

RÉSUMÉ - A El-Minia, en Haute-Egypte, 126 souches de levures ont été isolées de lait frais,

vendu par Jes commerçants de la ville. Sur la base des caractéristiques morphologiques et physio-

logiques, 24 espèces, réparties dans 13 genres, ont été répertoriées. Les plus répandues sont

Debaryomyces hanseni et Clavispora lusitaniae, suivies de Trichosporon beigeli et de

Rhodotorula mucilaginosa. On dénombre également Kluyveromyces marxianus qui fermente le

actose, II convient d'indiquer que la présence d'espéces nuisibles comme Trichosporon beigelii et

Rltodotorula mucilaginosa représente un problème pour l'hygiène publique et nécessite la purifi-

cation du lait avant sa consommation

KEY WORDS : yeast, milk, human pathogens, Trichosporon beigelii, Rhodotorula mucilaginosa.

Raw milk represents an ideal growth medium for bacteria, mould and yeasts

(Dombrowski, 1910). Although intensive studies were carried out on spoilage of milk

with moulds and bacteria, few studies were performed on the role of yeasts in this

process. Recently, microbiologists have focused their attention on yeasts as food spoi-

lage causative organisms in raw milk and milk products such as cheese, yoghourt and

butter (Davis, 1975; Busse, 1978; Kielwein, 1982; Spillmann & Ceiges, 1983). Along

lhat line, yeasts were found to produce volatile acids (Hosono & Tokita, 1970; Kang

et al., 1976; Engel, 1980; Winkelmann, 1989; Lenoir, 1984), hydrolyse proteins and

fats (Schmidt et al., 1979; Alifax et al., 1982; Schmidt, 1982) and ferment lactose

forming CO, which leads to swelling and blowing off the product container (Kiss et

al., 1966; Davis, 1970; Kroger, 1976; Busse, 1978: Spillmann & Ceiges, 1983).

Although the occurrence of yeasts in raw milk was reported by some investi-

Bators in several countries (Bridge Cooke & Brazis, 1968; Nakanishi & Arai, 1968,

1969; Rey Fernandez, 1972; Deiana et al, 1977; Haridy, 1987), few investigations

Were carried out along that line in Egypt and were mainly concerned with cheese and

butter (Fahmy & Youssef, 1974: El-Gendy et al., 1979; El-Bassiony et al., 1980; Se-

Source : MNHN, Paris

322 M.S.A. HARIDY

ham et al., 1982; Zein et al., 1983), whereas none was performed on yeast flora of raw

milk. In this paper we report on the yeast flora of raw milk samples collected from El-

Minia city in upper Egypt in an attempt to evaluate the role of yeasts in spoilage of

raw milk in this locality.

MATERIALS AND METHODS

Raw milk samples were collected from milk sellers in sterile test tubes and

were directly transported to the laboratory. Sampling was performed 2-3 times every

month for a period of one year starting January 1990 to January 1991. For isolation

and identification of yeast strains, 0.2 ml portions of raw milk were aseptically with-

drawn and directly spread on YM-agar plates adjusted to pH 3.5 (Lodder, 1970) or

mixed in a test tube with 0.8 ml sterile distilled water and decimal dilutions were pre-

pared for counting purposes. Inoculated plates were inoculated at 28°C for 2-3 days

Developing yeast colonies were counted and after microscopic examination, strains

were isolated, purified and preserved on YM-agar slants at 4°C. Identification of yeast

strains was performed according to the standard keys of yeast identification (Lodder,

1970; Barnett et al., 1983; Kreger van Rij, 1984).

RESULTS AND DISCUSSION

Table 1 shows the total yeast count of raw milk at different months during the

sampling period and the level of occurrence of isolated species. All the tested samples

contained yeast cells with a total count ranging between 1.8 x 10? and 2 x 10* cells

per | ml raw milk. The highest count of yeast cells was recorded in April, May and

September while the lowest number of yeast cells was found in December. In Italy,

yeast count of milk was 2 x 10% ml (Fatichenti et al., 1977).

Table 2 shows that a total of 126 yeast strains were isolated from milk sam-

ples and identified to the species level and these were found to belong to 13 genera

which are: Debaryomyces (27 isolates), Clavispora (24 isolates), Trichosporon (22 iso-

lates), Rhodotorula (16 isolates), Kluyveromyces (10 isolates), Torulaspora (8 isolates),

Cryptococcus (6 isolates), Hansenula (4 isolates), Saccharomyces (4 isolates) and Can-

dida (2 isolates). Each of the genera Dekkera, Schwanniomyces and Sporidiobolus

were represented by a single strain. Debaryomyces hansenii and Clavispora lusitaniae

were more frequently isolated and occurred in high numbers of cells (table 1). Trichos-

poron beigelii and Rhodotorula mucilaginosa were regularly isolated but with low

numbers of cells. Data indicated that these four species were capable of substantial

growth in raw milk. These species were isolated by Haridy (1987) from raw milk in

west Germany and the species Debaryomyces hansenii was the most dominant.

Kluyveromyces marxianus, a lactose fermenting species, was also isolated and

was represented by 7.9% of the total isolates. The occurrence of this species in raw

milk is previously reported by several investigators (Ingram, 1958; Nakanishi & Arai,

1968, 1969; Walker & Ayres, 1970; Peppler, 1976; Haridy, 1987).

The remaining yeast species listed in table 1 were sporadically isolated with

few cell numbers and therefore were considered as contaminants that were unable to

be established in raw milk.

Data in table 2 shows that, fermentation of glucose, assimilation of lactose and

building of ascospores and true mycelium represented the differential merkmals for

Debaryomyces hansenii, Clavispora lusitaniae, Trichosporon beigelii and Rhodotorula

Source : MNHN, Paris

323

YEAST FLORA OF RAW MILK

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Source : MNHN, Paris

M.S.A. HARIDY

324

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Source : MNHN. Paris

YEAST FLORA OF RAW MILK 325

mucilaginosa which are the most dominant species. Building of arthrospores and asex-

ual reproduction of fission were additive characteristics for Trichosporon beigelii.

Building of pigmented colonies, which are shiny, pink or red with entire margin, was

of value in case of Rhodotorula mucilaginosa.

Of particular interest was the isolation of Trichosporon beigelii and Rhodoto-

rula mucilaginosa in considerable numbers. These two species were reported as human

pathogens by Hurley et al. (1987). Their presence in raw milk may be deleterious to

human health and care should be taken to insure that raw milk should be free from

them before being used.

ACKNOWLEDGEMENT

1 thank Prof. Dr. Mohamed A. Elnaghy, Vice President, Minia University, for reading of

the manuscript and continuous guidance during the work.

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LES CONTAMINANTS FONGIQUES DU RAISIN DE TABLE

MAROCAIN CONSERVE AU FROID

O. BENKHEMMAR!, H. LAHLOU!, G. BOMPEIX?, J. DUPONT?,

H. EL MNIAÏ et C. BOUBEKRI

1. Université Mohammed V, Fac. Sci. Rabat, Dép. Biologie, B.P.

1014, Rabat, Maroc

2. Univ. Pierre et Marie Curie, Lab. Biochimie et Pathologie Végétale,

Place Jussieu, 75252 Paris, France.

3. Lab. Cryptogamie, Muséum National d'Histoire Naturelle, 12 rue

Buffon, 75005 Paris, France.

4. Domaines Royaux, Direction Générale, 40 Avenue Ibn Toumert,

Casablanca, Maroc.

5. Société de Développement Agricole (SO.DE.A), Dép. Participations,

Direction Générale, Cité Agdal, Rabat, Maroc.

RÉSUMÉ - Les champignons Rhizopus stolonifer, Mucor racemosus, Alternaria alternata,

Botrytis cinerea, Aspergillus niger et divers Penicillium, notamment Penicillium expansum, sont

responsables d'une grande partie des dégâts observés sur le raisin de table marocain conservé au

froid. La contamination s'effectue à la fois au champ et dans l'entrepôt frigorifique où sont

onservés d'autres types de fruits. A 0°C le Rhizopus stolonifer et l'Aspergillus niger ont une

croissance nulle. En revanche les autres champignons sont capables de se développer. Le froid

seul est donc insuffisant pour assurer une bonne conservation du raisin de table.

ABSTRACT - Rhizopus stolonifer, Mucor racemosus, Alternaria alternata, Botrytis cinerea, As-

ergillus niger and various Penicillium mainly Penicillium expansum were responsible for a great

extent of deterioration on grapes held in cold storage. Contamination takes place in the field and

in the storage room where other fruits have been stored. All the fungi cited above are capable to

grow at 0°C, except Rhizopus stolonifer and Aspergillus niger, so that cold only is not sufficient

MOTS CLÉS : raisin de table, conservation frigorifique, moisissures.

INTRODUCTION

Le développement des moisissures sur le raisin de table, au cours de la conser-

ation frigorifique, provoque des dégâts très importants. Dans le but d'éviter ou au

moins de minimiser ces dégâts, plusieurs travaux de recherche ont été réalisés au Ma-

roc (Benkhemmar et al., 1990; Boubekri et al., 1987) et dans d'autres pays (Flanzy et

al., 1982; Paulin, 1977).

L'efficacité de la lutte contre le développement de ces moisissures dépend de

Plusieurs facteurs. En effet, en plus de l'état initial du raisin à conserver (Benkhemmar

сі al, 1989), l'identification des contaminants du raisin, la connaissance de leurs

Source : MNHN. Paris

328 O. BENKHEMMAR et al.

particularités biologiques et la détermination des sources de contamination s'avèrent in-

dispensables pour choisir un moyen de lutte approprié et efficace.

Ce travail a été entrepris au Maroc afin d'apporter d'autres informations pou-

vant contribuer à l'amélioration et à la maitrise de la conservation frigorique du raisin

de table.

MATÉRIEL ET MÉTHODES

Matériel végétal

Ce travail a été réalisé durant quatre campagnes consécutives (de 1986 à

1990), le raisin de table provenant de la collection viticole UP 5015 appartenant à la

Société de Développement Agricole (SO.DE.A) située dans la région de Fès à une alti-

tude de 560m et une latitude de 33°50. Plusieurs traitements fongicides sont effectués

régulièrement dans cette collection, notamment des traitements contre le Botrytis,

l'Excoriose, le Mildiou et l'Oïdium. Après chaque cueillette, et pour les quatre campa-

gnes, le raisin a été conservé à une température de 0°C et à une humidité relative de

90%. La conservation est effectuée dans une chambre froide de l'entrepót frigorifique

de la SO.DE.A qui se trouve à El Hajeb à 50 km de la collection viticole. Cet entrepôt

frigorifique est utilisé aussi pour conserver d'autres fruits, en particulier les pommes,

les poires et les oranges.

Isolement et identification des champignons responsables de pourritures sur le

raisin de table

Afin de déterminer la source de contamination du raisin conservé, des

prélèvements ont été réalisés d'une part au champ, d'autre part dans le couloir qui

sépare les chambres froides de l'entrepôt frigorifique (température comprise entre 10°

et 15°C) et enfin à l'intérieur de la chambre froide.

Le piégeage des spores est réalisé avant de mettre le raisin dans l'entrepôt fri-

gorifique en exposant pendant sept heures (de 9 heures du matin à 16 heures de

l'après-midi) dans différents endroits de chacun des lieux cités précédemment 20 boîtes

de Pétri ouvertes contenant un jus de raisin gélosé de la variété Valency et un antibio-

tique (Chloramphenicol). Au laboratoire de Botanique de la Faculté des Sciences de

Rabat, et avant de porter ces boîtes de Pétri à 25°C, une préincubation à 10°C est

effectuée pour réduire le développement des champignons qui envahissent rapidement

les milieux de culture. Le développement des thalles isolés est contrôlé chaque jour

pour éviter leur chevauchement. Les thalles qui se sont développés sont prélevés et

repiqués séparément par bouturage sur le jus de raisin gélosé à raison d'une seule bou-

ture par boîte de Pétri.

Des grappes de raisin moisies et non moisies ont été récoltées séparément dans

le vignoble et placées dans des sachets individuels en polyéthylène pour les analyser

au laboratoire. Des grappes de raisin moisies ont été également régulièrement

prélevées dans la chambre froide durant toute la période de conservation. Au laboratoi-

re, les pellicules des baies de ces grappes prélevées sont enlevées stérilement. La face

externe de ces pellicules est placée au contact du jus de raisin gélosé dans les boîtes

de Pétri. Les rafles de ces grappes sont découpées en petits fragments et introduits

dans ce même milieu. De la même façon que précédemment ces boîtes sont incubées

d'abord à 10°C, ensuite à 25°C et les thalles qui se sont développés sont prélevés

séparément.

Source : MNHN, Paris

CONTAMINANTS DU RAISIN 329

Les thalles isolés ont été purifiés, dénombrés et identifiés. La purification de

ces thalles est obtenue apres plusieurs repiquages successifs et clonage monospore sur

le jus de raisin gélosé. Le dénombrement des thalles isolés a permis de déterminer le

pourcentage qui représente la fréquence avec laquelle chaque type de Шайс a été

rencontré dans les différents lieux d'isolement lors des prélèvements. Ce pourcentage

(P) est déterminé de la façon suivante:

Nombre de thalles d'un champignon donné dans un lieu donné

Nombre total des thalles de tous les champignons isolés dans ce même lieu

L'identification des champignons isolés a été effectuée au laboratoire de

Cryptogamie du Muséum National d'Histoire Naturelle à Paris par examen au micro-

scope optique des prélèvements de structures conidiennes obtenues sur milieux

appropriés (Ellis, 1971; Pitt, 1979; Raper & Fennell, 1965; Zycha et al., 1969).

Etude de l'influence du milieu de culture et de la température sur la croissance

des champignons isolés

Des boutures des champignons retenus pour la réalisation de cette étude ont

été prélevées avec un emporte-pièce et déposées au centre des boîtes de Pétri de

90mm de diamètre, à raison d'une bouture par boîte, sur les milieux suivants:

- le milieu malté: 20g d'extrait de malt, 20g d'Agar et 1000ml d'eau distillée.

- le milieu de Czapek: NaNO;: 2g, KH;PO, lg, MgSO,7H;O: 05g, KCI:

0,5g, FeSO,7H;O: 0,01g, ZnSO,7H;O: 001g, CuSO, 5H;O: 0,005g, Saccharose: 30g,

Agar: 20g et 1000ml d'eau distillée.

- les jus de raisin filtrés et non dilués d'une variété blanche (le Valency) et

d'une variété noire (la Kings Ruby). A chacun de ces jus, 20g d'Agar par litre sont

ajoutés avant d'ajuster leur pH à 6,5.

Deux lots de dix boites de Pétri sont préparés pour chaque milieu et pour cha-

que champignon. Un de ces deux lots est incubé à 0*C correspondant à la température

de la chambre froide, l'autre lot à 25°C qui correspond en moyenne à la température

ambiante pendant l'été au Maroc. La croissance des thalles de ces champignons, au

cours du temps, a été mesurée régulièrement.

Inoculation des champignons isolés du raisin de table

Dans le but de s'assurer que les champignons isolés sont effectivement respon-

sables des dégáts observés sur le raisin de table conservé au froid, une inoculation a

été réalisée sur les variétés King's Ruby et Valency.

Les baies sont préalablement désinfectées par l'alcool puis rincées à l'eau

stérile. Une seule blessure de Smm de longueur par baie est réalisée à l'aide d'une

lame de rasoir neuve et désinfectée. Sur les baies blessées et non blessées, des sus-

pensions conidiennes de 105 conidies/ml d'eau stérile de chacun des champignons rete-

nus ont été pulvérisées séparément. Des baies témoins blessées et non blessées non

inoculées sont placées dans les mémes conditions. Pour chacun de ces cas 100 baies

ont été utilisées. Les baies inoculées et non inoculées sont incubées pendant 10 jours à

25°C dans de petits sachets en polyéthyléne, à raison d'une baie par sachet. L'impor-

tance du développement de chacun de ces champignons sur les baies a été déterminée

en évaluant, 10 jours aprés inoculation, la surface apparente envahie par rapport à la

surface totale de la baie.

Source : MNHN, Paris

330 О. ВЕМКНЕММАК et al.

RÉSULTATS ET DISCUSSIONS

Les isolements réalisés ont permis de déceler la présence de différents champi-

gnons (Domsch et al., 1980):

Rhizopus stolonifer ((Ehrenb. ex Link) - Lindner 1913), Mucor racemosus

(Fresenius 1850), Alternaria alternata ((Fr) Keissler 1912), Botrytis cinerea (Pers. ex

Nocca et Balb 1812), Aspergillus niger (Van Tieghem 1867) et divers Penicillium no-

tamment Penicillium expansum (Link ex Gray 1821).

Ces champignons ont été décrits par plusieurs auteurs dans d'autres pays

(Rumbos, 1982; Stojanovicm & Jurcevic, 1982; Zironi et al., 1982) comme étant des

contaminants du raisin de table conservé au froid. La fréquence de ces champignons

dans un lieu d'isolement donné est présentée dans le tableau I. L'analyse des résultats

groupés dans ce tableau montre que les Penicillium sont les plus fréquents. Cependant

aucune conclusion prématurée ne doit étre tirée de cette constatation car le

dénombrement des thalles isolés peut n'exprimer que l'aptitude à la sporulation d'une

espéce. En effet, les champignons dont la sporulation est modérée, seront moins

fréquents lors des isolements que ceux qui ont une sporulation active et qui sont faci-

les à détecter. Par ailleurs, les traitements contre le Botrytis effectués au champ durant

les quatre campagnes consécutives, ont certainement réduit le développement de cette

espéce, ce qui expliquerait son faible pourcentage dans les prélévement réalisés au

champ. Par contre, ce pourcentage est plus important à l'intérieur de la chambre froide.

puisque B. cinerea est capable de se développer activement entre -2°C et 5°C (Pitt &

Hocking, 1985). Notons aussi que R. stolonifer et A. niger sont plus abondants au

champ et absents dans l'air de la chambre froide, ce qui peut étre expliqué par le fait

que la basse température (0°C) réduit beaucoup leur développement et leur sporulation.

En effet, les températures minimales de croissances sont de 6° à 8°C pour A. niger et

de 4,5 à 5°C pour R. stolonifer (Pitt & Hocking, 1985).

L'analyse de ces pourcentages doit être effectuée avec beaucoup de prudence

et il ne faudrait sous-estimer aucun des contaminants isolés même s'il est faiblement

Tableau 1: Fréquence (en %) des champignons isolés dans différents lieux de prélèvement.

Table 1: Frequency (%) of fungi isolated in several places

CHAMPIGNONS ISOLES VIGNOBLE DANS LE COULOIR | DANS LA CHAMBRE

DEL'ENTREPOT FROIDE.

Danstair | Surteraisin | FMOORIFQUE | Danspair | Surte raisin

Rhizopus stolonifer 18,12 38.08 495 о 605

Mucor racemosus 694 5 045 153 1902

Alternaria alternata 406 3.08 259 026 749

Botrytis cincrea. 206 077 27 17,56 3602

Aspergillus niger. 32.94 оп 202 0 433

Penicillium spp 35,88 3096 6299 30,15 2109

NOMBRE TOTAL DES

COLONIESANALYSEES | 3400 520 889 nm 347

Source : MNHN. Paris

CONTAMINANTS DU RAISIN 331

représenté. Les champignons isolés au champ, dans le couloir de l'entrepôt frigorifique

et dans l'air de la chambre froide sont aussi présents sur le raisin conservé. Cette

constatation permet de supposer que le champ et l'entrepôt frigorifique, dans lequel

sont conservés d'autres types de fruits, constituent deux sources importantes de conta-

mination pour ce raisin.

Hormis les autres champignons isolés, seul P. expansum a été identifié et rete-

nu parmi les divers Penicillium dans la première partie de ce travail. La détermination

des autres Penicillium fera l'objet de la 2ème partie de cette étude qui sera publiée

ultérieurement. P. expansum qui produit de ma patuline, mycotoxine dangereuse pour

la santé humaine (Fremy, 1983; Stray, 1978), s'est avéré trés fréquent sur le raisin

conservé, raison pour laquelle nous lui avons accordé une importance particulière.

Les résultats figurant dans le tableau 2 montrent que l'accroissement à 25°C

(mesures effectuées chaque jour jusqu'au 6ème jour) et à 0°C (mesures effectuées sur.

des périodes de 5 jours successives jusqu'au 31ème jour) de toutes les espèces étudiées

est relativement plus important sur le jus de raisin gélosé des deux variétés que celui

effectué sur les autres milieux de culture. Autrement dit, le jus de raisin constitue un

milieu naturel très favorable au développement de ces champignons.

Les résultats de ce tableau montrent aussi qu'à 25°C R. stolonifer se développe

rapidement sur les quatre milieux de culture par comparaison avec les autres espèces.

En effet, les boîtes de Pétri contenant chacun de ces milieux ont été complètement en-

vahies par cette espèce après 2 jours de culture. Cependant, malgré la rapidité de son

développement, nous avons constaté que les filaments mycéliens formés par ce cham-

pignon sur le milieu de Czapek sont trés peu abondants par rapport à ceux des autres

milieux. R. stolonifer est incapable d'assimiler les nitrates se trouvant dans ce milieu

(Domsch et al., 1980) ce qui expliquerait en partie cette constatation. Par ailleurs, l'ac-

croissement de tous les champignons sur les quatre milieux à 0*C, ne démarre qu'à

partir du 6ème jour après le repiquage.

A l'exception d' A. niger et de R. stolonifer, dont la croissance est totalement

inhibée à 0°C, les autres champignons ont pu se développer à cette température mais

beaucoup moins activement qu'à 25°C. Dans l'ensemble les vitesses de croissance sont

assez constantes à 25°C jusqu'au 6ème jour et à 0°C jusqu'au 31ème jour. Une légère

accélération peut parfois être observée en fin de culture. Il apparaît clairement que le

froid seul est insuffisant pour éviter le développement de ces contaminants d'où la

nécessité de combiner le froid à un traitement du raisin avec un fongicide approprié et

efficace.

Les résultats groupés dans le tableau 3 permettent de constater que tous les

champignons se sont développés sur les baies de Valency et de King's Ruby. La surfa-

ce apparente envahie par chacun de ces champignons chez les baies blessées de la

variété noire Kingss Ruby est moins importante que celle des baies blessées de la

variété blanche Valency. Cette différence de développement pourrait être due à la ri-

chesse de King's ruby en polyphénols. En effet, l'analyse des jus de ces deux variétés,

réalisée à notre demande par l'Institut des Produits de la Vigne de l'LN.R.A. de

Narbonne (France), montre que 251,5mg de polyphénols totaux exprimés en acide

gallique sont présents dans un litre de jus de King's Ruby, alors que la même quantité

du jus de Valency n'en contient que 93,1mg.

Signalons enfin qu'aucun développement des espèces inoculées n'est constaté

sur les baies non blessées des deux variétés. La présence des blessures sur le raisin

semble être un facteur primordial pour l'installation et la prolifération de ces contami-

nants (Benkhemmar et al., 1989). Par ailleurs, nous remarquons que tous les champi-

Source : MNHN, Paris

O. BENKHEMMAR et al.

Tableau 2: Effet du milieu de culture et de la température sur l'accroissement des champignons

responsables de pourritures sur le raisin.

Table 2: Culture medium and temperature effects on fungal growth.

CHAMPIGNONS ISOLES

MILIEUX DE CULTURE

ACCROISSEMENT DIAMETRAL

A 25°C (En mm)

Улс 35:97

Rhisopus King's Ruby 34104

Stotonifer” Malt 2240.7

Crapek 24104

Valency 17:03

Mucor Kings Ruby 18104

pe Malt 1040,1

Старк 13:03

Valeney 6104

Kings Ruby 610,6

Malt 50,6

Старк 5103

Valency 75105

Boris King's Ruby 715201

p Malt 55:06

Старк 33301

Vilecy 11403

Aspergillus Kings Ruby 11406

шва" Malt 5402

Crapek 6540.1

Valency 417

Penicillium Kings Ruby 4103

expansum® Malt 3301

Сарк 35:02

CHAMPIGNONS ISOLES

MILIEUX DE CULTURE

ACCROISSEMENT DIAMETRAL

A 0°C (En mm)

Valen

Rhisopus King's Ruby

Stolonifer” Malt

Crapek

Valency

duc King's Ruby

racemosus” Malt

Старк

Vilency

Altemaria Kings Ruby

m Malt

Crapek

Valency

Botrytis Kings Ruby

sinasa” Malt

Crapek

Valency

Aspergillus

niger?

Стара

Улсасу

Penicillium King's Ruby

харшлын” Matt 25102

Crapek 15:02

* : Chaque valeur représente la moyenne de dix répétitions suivie de son écart type.

(1) Mesures effectuées entre le ler et le 28 jour, (2) entre le 22 et le 32 jour et (3) entre le 68 et

Je 11è jour (l'accroissement entre le ler et le 62 jour est presque nul).

Source : MNHN. Paris

CONTAMINANTS DU RAISIN

Tableau 3: Développement des champignons sur les baies 10 jours aprés inoculation.

Table 3: Development of fungi on grapes ten days after inoculation.

CHAMPIGNONSINOCULES | VARIETES — |ETATINITIAL |POURCENTAGE DES RAIES AYANTUNE|

AURAISIN DESBAIES | SURFACE APPARENTE ENVAIIE PAR

LECHAMPIGNON

зак se | 1 sicsac 2 sı |sa>2 si

e ls 3 3

B o 2 7

Valency 3

Rhizopus stolonifer нь 0 S 0

B 61 39 0

King's Ruby

NB o 0 o

B 0 57

Valency e

NB 0 0 0

Mucor racemosus B 72 28 0

Kings Ruby

NB 0 о 0

B 63 3 3

22 i»

Alternaria alternata 2 D A

B 16 0

Kings Ruby

NB 0 0 0

B 15 59 26

Уйссу

Botrytis cinerea MB 1 p

B т 23 0

King's Ruby

NB 0 0 0

Ji B 7 6 29

ку

NB 0 0 0

Aspergillus niger

XD B 75 25 0

ing's Ruby

нв o 0 o

B т 28 1

Valeney

Penicillium expansum НЬ $ 3 0

B 87 13 0

Kings Ruby

NB 0 0 0

B: Blessées, NB: Non Blessées, Sa: surface apparente envahie par le champignon, St: Surface 10-

tale de la baie.

gnons isolés dans ce travail, connus comme des agents pathogènes d'autres fruits

(Botton et al, 1990), sont capables de se développer sur le raisin de table et de le

détériorer aprés inoculation. Ces champignons sont donc responsables au moins d'une

grande partie des dégáts observés sur le raisin conservé au froid.

CONCLUSION

Dans les conditions de ce travail, Rhizopus stolonifer, Mucor racemosus,

Alternaria alternata, Botrytis cinerea, Aspergillus niger et Penicillium expansum appa-

raissent comme des contaminants responsables au moins d'une grande partie des dégats

observés sur les raisins de table conservés au froid. Le champ de la collection viticole

et l'entrepót frigorifique dans lequel sont conservés d'autres types de fruits, sont deux

sources importantes de contamination de ce raisin. De méme, il apparait clairement

d'une part que le froid seul est insuffisant pour empécher le développement de ces

contaminants, d'autre part, que la présence des blessures sur les baies du raisin est un

Source : MNHN, Paris

334 О.ВЕМКНЕММАК et al.

facteur primordial pour leur développement. Afin de réduire les dégâts enregistrés sur

le raisin conservé, il est donc nécessaire de combiner au froid un traitement du raisin

avec un fongicide comme le SO, (Benkhemmar et al., 1989; Paulin, 1977) et de s'as-

surer si possible que les baies des grappes à conserver ne soient ni blessées, ni

moisies, ni mouillées et possèdent un indice réfractométrique proche de 18

(Benkhemmar et al., 1989; Paulin, 1977). La présence de ces champignons sur le

raisin avec des pourcentages différents nous a incités à envisager l'étude de la concur-

rence entre ces contaminants pour envahir un même milieu. Par ailleurs, on note la

présence fréquente du P. expansum qui produit normalement de la patuline dans les

pommes (Fremy, 1983; Stray, 1978). Des études sont entreprises pour détecter

éventuellement la présence de cette toxine dans le jus de raisin.

REMERCIEMENTS

Nous remercions le Professeur ROQUEBERT au Muséum National d'Histoire Naturelle

de Paris, Monsieur TANTAOUI-ELARAKI, Professeur à l'Institut Agronomique et Vétérinaire

Hassan Il de Rabat, Monsieur BOURZEIX et Monsieur HERIDA à l'Institut des Produits de la

Vigne de l'LN.R.A. de Narbonne, et Monsieur BENCHAKRI au Laboratoire de Botanique de la

Faculté des Sciences de Rabat, de nous avoir aidés à réaliser ce travail.

BIBLIOGRAPHIE

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Source : MNHN. Paris

Source : MNHN, Paris

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Commencée avec les collections de rouilles de A.B. Seymour (1881-1886) et

des mildious de T.J. Burrill (1882-1885), la collection mycologique de l'Illinois

Natural History Survey comprend 47500 spécimens (champignons supérieurs et

inférieurs). Le catalogue donne les références complètes (bibliographie, substrats,

récolteur) de 300 types présents dans les collections.

HUHNDORF SM. 1992 - Systematics of Leptosphaeria species found on the

Rosaceae. Illinois Natural History Survey Bulletin 34(5): 479-534, 21 fig.

L'examen minutieux (asques, ascospores, hamathecium, centrum et surface de

la paroi de l'ascocarpe) des 55 espèces de Leptosphaeria décrites sur Rosaceae, permet

à l'auteur de les répartir selon leurs affinités avec les Pléosporales (Leptosphaeriaceae

(clé aux 5 Leptosphaeria reconnus), Phaesphaeriaceae, Lophiostomataceae), les

Mélanommatales, les Dothidéales (Dothioraceae, Pseudosphaericeae), et les

Hyménoascomycètes (Clypeosphaeriaceae, Diaporthaceae, Amphisphaeriaceae). Pro-

position de nouv. combinaisons: Paraphaeosphaeria concentrica (J.B. Ellis & B.M.

Everhart) (= Leptosphaeria c.), P. pomona (P.A. Saccardo) (= Leptosphaeria p.), P.

lucilla (P.A. Saccardo) (= Leptosphaeria l), P. thomasiana (P.A. Saccardo & C.

Roumeguére)(= Leptosphaeria t.), Kalmusia coniothyrium (L. Kuckel) (= Sphaeria c.),

Lophiostoma subcutanea (M.C. Cooke & J.B. Ellis) (= Sphaeria s.), Saccothecium

sepincola var. abbreviata (M.C. Cooke) (= Sphaeria abbreviata), Diadema sieversiae

(C.H. Peck) (= Lophiostoma s.), Discotroma fuscella (M.J. Berkeley & C.E. Broome)

(= Sphaeria f). L'importance de la spécificité de l'hôte ou de la préférence de substrat

dans la délimitation des espèces ou des genres a besoin d'une clarification ultérieure

(nécessité de récoltes nombreuses, de cultures pures, d'une étude précise de la distribu-

tion des substrats).

NANNENGA-BREMEKAMP N.E,, 199] - A Guide to temperate myxomycetes (An

English translation by A. Feest and Y. Burggraaf of De Nederlandse

Myxomyceten). Bristol, Biopress Ltd., 409p. ill. (Biopress Ltd, The Orchard,

Clanage Road, Bristol BS3 2JX Avon, England, 60.00 £).

Le travail commun traducteurs/auteur a permis de compléter très largement

l'édition de 1974, et de proposer au lecteur non seulement les Myxomycètes des Pays

Bas, mais encore la quasi totalité des Myxomycètes de la zone tempérée. Les clés

(illustrées) aux familles et aux genres précèdent un traitement taxonomique illustré et

commenté des espèces de Myxomycètes. La langue anglaise étant plus répandue que le

néerlandais, l'immense travail de Mme Nannenga-Bremekamp ne pourra rester ignoré.

Source : MNHN. Paris

338 ANALYSES BIBLIOGRAPHIQUES

PENNYCOOK S.R., 1989 - Plant Diseases Recorded in New Zealand. Vol. 1: 1-176;

vol. 2: 1-502; vol. 32: 1-180. Plant Disease Division, Department of Scientific

and Industrial Research, Private Bag, Auckland, New Zealand. ISBN

0-477-02547-1.

Cette publication constitue une révision approfondie des compilations

précédentes des maladies de plantes, recensées en Nouvelle-Zélande et dont la derniere

a été rédigée par Dingley en 1969. L'ouvrage proposé rassemble également les obser-

vations d'ordre phytopathologiques enregistrées depuis cette date et jusqu'en décembre

1987. Au total, plus de six mille annotations de divers types de désordres

phytopathologiques affectant 1856 espèces végétales sont référencées. Ces désordres

sont induits par plus d'un millier de pathogènes fongiques, soixante-dix organismes

bactériens, seulement sept espèces d'algues et, enfin, près de cent cinquante virus. Une

lecture rapide des seuls épithètes reproduits concernant des champignons, confirme que

l'auteur n'a pas épargné ses efforts pour une mise à jour taxonomique correcte, en

fonction des dernières dispositions du Code International de Nomenclature, des

binomes des phanérogames cités et des cryptogames impliqués dans ces désordres

phytopathologiques.

Le document est organisé en cinq parties, chacune contenant plusieurs sections

en relation mutuelle, conçues pour répondre aux besoins d'utilisateurs issus d'horizons

divers. La première partie, qui constitue aussi le volume n° 1, comporte la liste des

espèces végétales hôtes annotées en Nouvelle-Zélande. Les binomes des plantes sont

arrangées par ordre alphabétique des genres représentés et chaque binome est suivi par

une liste exhaustive des pathogènes respectifs, regroupés en fonction de leur nature:

champignon, algue, bactérie et virus. Ce volume comporte également un catalogue des

mêmes plantes-hôtes regroupées selon des affinités d'ordre systématique: ordre, famille

et genre. Cet arrangement favorise une vision élargie des problèmes pathologiques

prévalents à des niveaux taxonomiques divers. La dernière section est un index

alphabétique des noms communs des plantes vertes, très pratique pour celui qui

démarre une recherche à partir d'un binome comportant quelques doutes quant à sa

validité.

Le second volume, comparativement le plus épais, traite des seuls affections

d'origine fongique. Le corps de cet ouvrage est une liste des champignons reconnus

pathogènes arrangés en ordre alphabétique par genres. Chaque binome fongique com-

porte le nom de l'autorité non abrégé - une disposition qui évite les erreurs de trans-

cription - et la date de première publication, suivi par une liste bien référencée des

noms des plantes-hôtes respectifs. Ce volume se complète par une liste bibliographique

des publications analysées, un catalogue systématique des champignons pathogènes et,

enfin, un index des épithètes spécifiques de ces mêmes microorganismes. Enfin, le

troisième volume rassemble les parties traitant des désordres ayant une origine algale,

bactérienne ou virale. Chaque partie est établie sur le même schéma que

précédemment et son objectif est de répondre aux besoins des spécialistes respectifs

intéressés par les algues, les bactéries ou les virus.

Les trois volumes de cet index des maladies phytopathologiques induites, plus

particuligrement par les cryptogames rassemble une masse trés importante d'infor-

mations bien synthétisées. Le format sélectionné, type livre de poche, et la

présentation bien aérée du texte sont de nature a favoriser un balayage visuel rapide

des pages imprimées et une consultation aisée du document à la recherche d'une quel-

conque information. Nul doute que cet index qui vient s'ajouter à ceux récemment pa-

rus pour d'autres pays, sera d'une grande utilité pour les chercheurs et administratifs

s'occupant des maladies végétales d'origine cryptogamique travaillant non seulement

Source : MNHN, Paris

ANALYSES BIBLIOGRAPHIQUES 339

dans des institutions de l'hémisphère sud mais aussi en Europe et en Amérique du

Nord.

J. Mouchacea

WEBSTER R.K. and GUNNELL P.S., 1992 - Compendium of rice diseases. St Paul,

Minnesota, APS Press, viii, 62 p. 13 fig. et 135 phot coul. ISBN

0-89054-126-4.

Ce compendium présente la description technique et illustrée des maladies af-

fectant le riz; ceci dans le but de permettre leur identification rapide, et un meilleur

contrôle de ces maladies qui limitent la disponibilité en riz, aliment de base de mil-

lions d'homme. Les informations les plus récentes, l'état des recherches mais aussi les

perspectives sont exposées pour des maladies aux formes très variées. Toutes les par-

ties de la plante peuvent étre atteintes par des agents pathogènes biologiques transmis-

sibles et par des agents non biotiques. Glossaire, index.

REISSER W., 1992 - Algae and symbioses: plants, animals, fungi, viruses, interactions

explored. Bristol, Biopress Ltd, xii, 746p., ill. (Biopress Ltd, The Orchard,

Clanage Road, Bristol BSB 2JX, England)

De nombreux organismes vivent en associations s.l. avec les algues. Celles-ci,

en tant que producteurs primaires, ont un rôle dominant dans tous les écosystèmes

aquatiques. L'ouvrage, publié sous la direction de W. Reisser (de Góttingen) et com-

prenant 35 chapitres, est axé sur les phénomènes d'interactions algues/autres organis-

mes, en excluant la dépendance écologique classique et le niveau "organelle", La for-

mation symbiotique, facteur important de l'évolution conduisant à des recombinaisons

intertaxonomiques, est perçue comme un des concepts les plus stimulants en biologie.

Les interactions sont décrites dans leurs formes symbiotiques au niveau cellu-

laires ou subcellulaires [le classement en habitats dulçaquicoles, marins ou terricoles

permet de brosser un large panorama des organismes impliqués: protozoaires ou

invertébrés, foraminifères ou ascidies, bryophytes ou champignons], et dans leurs for-

mes épi- et endobiotiques [implication des différents groupes d'algues].

Les mécanismes spécifiques à ces interactions sont évalués en termes de types

d'échanges de signaux [reconnaissance entre les organismes, régulation, reproduction].

Enfin la formation symbiotique est envisagée dans son rôle sur l'évolution algale.

Dans ce qui suit, il ne sera question que des interactions Algae/Fungi. Les

différents types de relations champignons/algues sont évoqués par R. Honegger

(Lichens: mycobiont-photobiont relationships, pp. 235-275). La morphologie du thalle

et la nature de l'interaction apparaissent corrélées. Dans ces symbioses, il y a quatre

lypes de transferts de métabolites du phycobiote autotrophe vers le mycobiote

hétérotrophe (G.B. Feige & M. Jensen, Basic carbon and nitrogen metabolism of

lichens, pp. 277-299). Ces types de transferts sont liés à la nature du phycobiote. G.B.

Feige & M. Jensen abordent aussi le métabolisme particulier des céphalodies et celui

de l'azote. Pour ces auteurs, si les périodes sèches et les phases de réhumidification

jouent un rôle important dans la croissance des lichens, la translocation et le rôle

nutritif du champignon ne doit pas être oublié. В. Büdel (Taxonomy of lichenized

procaryotic blue-green algae, pp. 301-324) et G. Gartner (Taxonomy of symbiotic

eukaryotic algae, pp. 325-338) proposent les éléments nécessaires à une bonne identifi-

cation du photobiote. Si celle des cyanobactéries n'est possible dans la plupart des cas

qu'au niveau du genre, des cultures sur agar s'avèrent nécessaire pour une bonne iden-

tification des algues eucaryotes (clé aux genres sur la base de critères morpholo-

Source : MNHN, Paris

340 ANALYSES BIBLIOGRAPHIQUES

giques). D. Mollenhauer ( Geosiphon pyriforme, pp. 339-351), consacre un chapitre à

ce phycomycète particulier, dont les hyphes incorporent des filaments d'une

cyanobactérie. Le Geosiphon est considéré comme un classique de la syncyanose.

L'article de E. Van Donk & K. Bruning (Ecology of aquatic fungi in and on

algae, pp. 567-592) lie l'aspect taxonomique des champignons aquatiques croissant sur

et dans des algues, à l'aspect écologique de ces champignons parasites. Les auteurs

mettent en évidence les facteurs influencant la relation algues/champignons, et esti-

ment nécessaires de nouvelles recherche afin de quantifier le rôle des champignons

aquatiques dans le contrôle de la croissance de l'algue et dans la succession

saisonnière.

Enfin, dernier volet de cette mise au point de l'étude de ces interactions

algues/champignons, l'essai d'explication des mécanismes de ces échanges. V.

Ahmadjian (Basic mechanisms of signal exchange, recognition, and regulation in

lichens, pp. 676-697), expose les différents types de signaux émis par les biotes des

lichens, signaux présents dans toutes les phases de la symbiose: reconnaissance des

partenaires, transport de nutriment, reproduction. Il conclut en disant: "les lichens sont

des associations hautement co-évoluées dont les biotes sont presque totalement

dépendant l'un de l'autre, et répondent l'un à l'autre par une variété de signaux dont

nous sommes seulement au début de la compréhension et de l'appréciation".

Cet ouvrage de synthèse sur les interactions algues/autres organismes est donc

trés complet, chaque chapitre comporte une large bibliographie, un index de 12p. en

facilite l'accès. Pour les mycologues, il apporte des informations nouvelles sur la

symbiose lichénique, notamment pour l'identification et la mise en évidence du róle du

photobiote.

D. Lamy

JF. PEDERBY, C.E. CATEN, JE. OGDEN & J.W. BENNETT, 1991 - Applied

molecular genetics of fungi. Cambridge University Press, Cambridge, 187p

ISBN 0-521-41571-3.

Cet ouvage émane du Symposium “Fungal Molecular Biology" organisé par la

British Mycological Society à l'Université de Nottingham en Avril 1990. Il représente

une sélection de 11 publications parmi les 29 présentées, dont les thèmes concernent le

transfert de gènes et les techniques de clônage chez les champignons et leurs applica-

tions en biotechnologie.

Les trois premiers chapitres traitent de méthodologie. Dans le premier, intitulé

"Gene transfer systems and vector development", van den Hondel & P.J. Punt nous ex-

pliquent simplement les techniques qui permettent d'introduire un DNA exogene dans

une cellule fongique par l'intermédiaire d'un vecteur et ensuite de sélectionner les cel-

lules qui l'ont incorporé. L'avantage de tels procédés est avant tout d'isoler des genes,

de les caractériser et d'analyser leur fonction. G. Turner développe ce thème dans le

second chapitre "Strategies for cloning genes from filamentous fungi". Il nous précise

qu'une liste des gènes clônés est publiée dans "Fungal genetics Newsletter" et mise à

jour tous les ans. Les retombées industrielles sont primordiales et une meilleure

connaissance de la biologie des organismes et de leur taxonomie se dégage. Le

troisième chapitre est très étonnant et s'apparente plutôt à la balistique ! JW. Watts бо

N.J. Stacey décrivent deux nouvelles méthodes percutantes, le fusil à particules et

l'électroporation, qui ont l'avantage d'introduire les particules de DNA au travers de la

paroi cellulaire sans avoir recours aux protoplastes.

Source : MNHN. Paris

ANALYSES BIBLIOGRAPHIQUES 341

Les 8 autres chapitres sont des exemples d'applications de ces méthodologies

dans les grands domaines de l'industrie.

Les premiers candidats à ces manipulations génétiques ont été les levures;

Saccharomyces cerevisiae dont le métabolisme, les caractéristiques et les procédés de

fermentation sont connus de longue date a représenté un système de choix pour l'ex-

pression de protéines hétérologues (chapitre 4 de J.E. Ogden, chapitre 7 de R.A. Veale

& P.E. Sudbery), pour sa conversion en souche amylolytique capable d'utiliser direc-

tement l'amidon en fermentation (chapitre 10, A.W.M. Strasser). L'amélioration des.

levures de brasserie fait l'objet du chapitre 8. E. Hinchliffe souligne la difficulté de

recombiner ces organismes complexes tout en maintenant les caractères existants.

Trois chapitres traitent de la recombinaison des champignons filamenteux

d'importance industrielle, M. Pentillä et al. détaillent au chapitre 5 la biologie

moléculaire de Trichoderma reesei en vue d'améliorer les productions de complexes

cellulasiques et d'essayer la sécrétion de protéines hétérologues. Parmi les Aspergillus,

c'est Aspergillus nidulans véritable organisme de laboratoire qui a été choisi à l'origine

pour le développement des systèmes d'expression et sécrétion de protéines étrangères.

Depuis, de nouveaux hôtes sont testés: Aspergillus niger et oryzae, Neurospora crassa

(chapitre 6, R.W. Davies). Au chapitre 9, P.H. Skatrud et al. développent les

hypothèses évolutives de la synthèse des antibiotiques du groupe des B-lactams émises

grâce à la recombinaison des souches.

R.P. Oliver et al. consacrent le dernier chapitre aux progrès réalisés en

phytopathologie, notamment dans la compréhension des interactions hôtes-parasites.

Cet ouvrage passionnant aborde les domaines de recherches les plus actuels

dont le souci est l'amélioration des productions industrielles et la compréhension des

mécanismes de pathogénicité et d'avirulence en phytopathologie. On y découvre des

retombées fondamentales quant à l'évolution des systèmes biologiques et à la connais-

sance de leur fonction.

Il est à recommander vivement à tous les mycologues professionnels ou ama-

teurs qui trouveront une importante bibliographie très à jour et pourront estimer l'im-

pact de la génétique moléculaire des champignons.

Joëlle Dupont

Source : MNHN, Paris

Cryptogamie, Mycol. 1992, 13 (4): 342-344

TABLE DU TOME 13

ABDEL-HAFEZ A.LL and EL-MAGHRABY O.M.O. - Fungal flora and aflatoxin

associated with cocoa, roasted coffee and tea powders in Egypt. .......

ALBALADEJO J. - voir DIAZ G.

ALBERTINI L. - voir MOSTAFA M.

ANDARY C., COSSON L., BOURRIER MJ., WYLDE R. et HEITZ A, - Chimio-

taxinomie des bolets de la section Luridi ..............

ARAGNO M. - voir JOB D.

BARRAULT G. - voir MOSTAFA M.

BELLEMERE A, JANEX-FAVRE MC, MELENDEZ-HOWELL LM. et

PARGUEY-LEDUC A. - Diversité ultrastructurale de la paroi ascosporale chez

quelques Eupyrénomycttes ...... Хас

BENKHEMMAR O., LAHLOU H., BOMPEIX G., DUPONT J., EL MNIAI H. et

BOUBEKRI C. - Les contaminants к du raisin de table marocain

conservé au froid ..

BETTUCCI L. and SILVA S. - ide interactions between wood SUE Ema

from old standing trees

BOISSELIER M.C. - voir PERREAU J

BOMPEIX G. - voir BENKHEMMAR O.

BOUBEKRI C. - voir BENKHEMMAR O.

BOURRIER MJ. - voir ANDARY С.

BUSCOT F. - Stratégies écologiques et biologiques des morille

CHAUVET E. - De la biologie des Hyphomycètes aquatiques à l'écologie des rivières

CHEVALIER G. - voir FORTAS Z

CHINNARAJ S. Re marine ee of Lakshadweep Islands and a note on Ciara

lignatilis ......

CONTU M. - Cortinarius алаг spec. nov, una nuova specie del subgen:

Phlegmacium dalla Sardegna meridionale RS ENNE PSA ds

COSSON L. - voir ANDARY C.

COUBLE A. - voir PONCET S.

DIAZ G., ROLDAN A. y ALBALADEJO J. - Influencia del tipo de suelo sobre las

pautas de colonizacion y eficiencia en la simbiosis micorricica de seis especies

de Glomus ... Us

DUPONT J. - voir BENKHEMMAR О.

DUPUY J., LE BARS J. et LE BARS P. - Mycotoxinogentse de souches de Fusarium:

contrainte en vue de leur utilisation dans la lutte biologique 2

DURRIEU G. et HASAN S. - Les San seni de lutte als contre les

mauvaises herbes

EL MNIAI H. - voir BENKHEMMAR O.

EL-MAGHRABY O.M.O. - voir ABDEL-HAFEZ A.LI

ESTEVE-RAVENTOS F. - voir HEYKOOP M.

Source : MNHN, Paris

103

215

171

203

313

159

149

TABLE DU TOME 13

FORTAS Z. et CHEVALIER G. - Caractéristiques de la germination des ascospores de

Terfezia arenaria (Moris) Trappe, récolté en Algérie

GROSCLAUDE C. - Les dégâts de champignons lignivores sur AA

HARIDY M.S.A. - Yeast flora of raw milk in El-Minia city, Egypt

HASAN S. - voir DURRIEU G

HEITZ A. - voir ANDARY C.

HEYKOOP M. ESTEVE-RAVENTOS F. y MORENO G. - Algunos E

interesantes de la provincia de Guadalajara (España peninsular)

KEYKOOP M. - voir MORENO G.

HINZELIN F., JACOB F.H., PERRIER J. et VERNER M.C. - Evolution de la flore

levurienne au cours du traitement des ordures ménagères …

ILLANA C. - voir MORENO G.

JACOB F.H. - voir HINZELIN F.

JANEX-FAVRE M.C. - voir BELLEMERE A.

JOB D. and ARAGNO M. - Nutritional growth requirements for submerged cultures of

the ectomycorrhizal fungi Cenococcum geophilum Fr. алла

LAHLOU H. - voir BENKHEMMAR O.

LAMBOURDIERE J. - voir PERREAU J.

LANQUETIN P. - voir LÉGER J.C.

LE BARS J. et LE BARS P. - Contamination данина de salaisons séches de viande:

origine, conditions d'apparition, prévention ........

LE BARS J. - voir DUPUY J

LE BARS P. - voir DUPUY J.

LE BARS P. - voir LE BARS J.

LÉGER J.C. et LANQUETIN P. - Hymenochaete pseudoadusta nov. sp.

(Basidiomycètes Aphyllophorales): description et caractères culturaux ……….

MELENDEZ-HOWELL L.M. - voir BELLEMERE A.

MERCÉ J. - Variations altitudinales de la flore fongique parasite dans le sud de

l'Espagne (Uredinales, Erysiphaceae, Ustilaginales). Aspects quantitatifs

MISHRA R.R. - voir SHUKLA A.K.

MONTROCHER R. - voir PONCET S.

MORENO G., ILLANA C. and HEYKOOP M. - Spanish мВ У. Four

interesting species belonging to the Stemonitales .. o

MORENO G. - voir HEYKOOP M

MOSTAFA M., BARRAULT G. et ALBERTINI L. - Lutte biologique contre Drechslera

teres: action in vitro de ша antagonistes sur la croissance

mycélienne et la germination ............-

OLUFOLAJI D.B. - Effects of aeration, light and temperature on spore 5 and

germ tube growth of Curvularia pallescens Boed. m

PARGUEY-LEDUC А. - voir BELLEMERE A.

PERREAU J., LAMBOURDIERE J. et BOISSELIER M.C. - Mycena rosea et le com-

plexe Mycena pura E n :

PERRIER J. - voir HINZELIN F.

343

181

321

265

193

305

295

Source : MNHN. Paris

344 TABLE DU TOME 13

РОМСЕТ S., MONTROCHER R. and COUBLE A. - конічна isoenzyme зва

of some yeast strains used in wine industry . 283

ROLDAN A. - voir DIAZ G.

SHUKLA A.K. and MISHRA R.R. - Influence of soil management systems on the

microfungal communities of potato field . 135

SILVA S. - voir BETTUCCI L.

SUBRAMANIAN C.V. - Пеи саа ваар ші Ho new

Hyphomycete 65

SUBRAMANIAN C.V. - Three interesting new Hyphompestes from south east Asia ...... 115

VERNER M.C. - voir HINZELIN F.

WYLDE R. - voir ANDARY C.

ZUCCONI L. - Mycological exsiccata from Borneo, collected E Odoardo Beccari, di

in the Herbarium Cesatianum (RO) .. 57

Analyses bibliographiques . 69, 145, 253, 337

Instructions aux auteurs .. 77

Commission paritaire 16-1-1986 - N° 58611 - Dépôt légal 4 trimestre 1992 - Imprimerie F. Paillart

Sortie des presses le 30 décembre 1992- Imprimé en France

Éditeur : A.D.A.C. (Association des Amis des Cryptogames)

Président : В. Baudoin ; Secrétaire : D. Lamy

Trésorier : J. Dupont; Directeur de la publication : H. Causse

Source : MNHN. Paris

CRYPTOGAMIE

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LE PÉRIODIQUE FRANÇAIS

CONSACRÉ A LA CRYPTOGAMIE

CRYPTOGAMIE est un périodique édité

par l'A.D.A.C. (Association des Amis des

Cryptogames), dont le siège est au Labo-

ratoire de Cryptogamie du Muséum Na-

üonal d'Histoire Naturelle. Les cher-

cheurs de tous pays y publient leurs

travaux en francais, allemand, anglais, es-

pagnol et italien, aprés accord des

Comites de Lecture constitués de

spécialistes de réputation internationale.

CRYPTOGAMIE propose trois sections:

Cryptogamie, Algologie

Cryptogamie, Mycologie

Cryptogamie, Bryologie-Lichénologie

Chaque section publie 4 numéros par an

(irage: 450 exemplaires).

THE FRENCH JOURNAL

DEVOTED TO CRYPTOGAMY

CRYPTOGAMIE is a periodical

published by A.D.A.C. (Association des

Amis des Cryptogames), settled at Labo-

ratoire de Cryptogamie, Muséum National

d'Histoire Naturelle. Research workers

from the whole world publish their papers

in French, German, English, Spanish and

ltalian, after acceptation by a selection

commettee that comprises experts of inter-

national renown.

CRYPTOGAMIE offers to its subscribers

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Cryptogamie, Algologie

Cryptogamie, Mycologie

Cryptogamie, Bryologie-Lichénologie

Each section publishes 4 numbers a year

(printing: 450 ex.).

E Europe

Amérique

Шале

Basie

O australe

Origine des 453 articles publiés de 1986 à 1991

Europe

Amérique

Afrique

Bl Asie

Répartition des articles publiés de 1986 à 1991 selon la langue

Ej Francais

Anglais

ED Espagno!

O Allemand

W tanien

Source . MNHN, Paris

SOMMAIRE

OLUFOLAJI D.B. - Effects of aeration, light and temperature on spore

germination and germ tube growth of Curvularia pallescens Boed. .......

HEYKOOP M. ESTEVE-RAVENTOS F. y MORENO G. - Algunos

Agaricales interesantes de la provincia de Guadalajara Espana

peninsular) ..

PONCET S., MONTROCHER R. and COUBLE A. -

isoenzyme patterns of some yeast strains used in wine industry ..

MORENO G., ILLANA C. and HEYKOOP M. - Spanish ro МІ.

Four interesting species belonging to the Stemonitales ..

LÉGER LC. et LANQUETIN P. - Hymenochaete pM nov. sp.

(Basidiomycètes Aphyllophorales): description et caractères culturaux ~-

CHINNARAJ S. - Higher marine fungi of Lakshadweep Islands and a note on

Quintaria lignatilis ........

HARIDY M.S.A. - Yeast flora of raw milk in El-Minia city, Egypt

BENKHEMMAR O., LAHLOU H., BOMPEIX G., DUPONT J., EL MNIAI

H. et BOUBEKRI C. - Les contaminants fongiques du raisin de table

marocain conservé au froid. .,

Analyses bibliographiques ....

Table du Tome 13 .

Cryptogamie, Mycol. 1992, 13 (4): 259-344.

265

283

295

313

321

327

337