CRYPTOGAMIE

Mycologie

ANCIENNE REVUE DE MYCOLOGIE

Fondée par R. Heim en 1936

Directeur scientifique: Mme J. Nicot

Secrétaire de Rédaction: M. Bruno Dennetière

Editeur: A.D.A.C. - 12 rue Buffon F-75005 Paris.

BUREAU DE RÉDACTION

Ecologie et Phytopathologie: G. Durrieu (Laboratoire Botanique et Forestier, 39 Allées

Jules Guesde, F-31062 Toulouse Cedex) - Systématique: P. Joly (Laboratoire de Cryptogamie,

Muséum National d'Histoire Naturelle, 12 rue Buffon, F-75005 Paris) - Physiologie: G.

Manachére (Laboratoire de Mycologie, Université de Lyon I, 43 bd du 11 Novembre 1918,

F-69622 Villeurbanne Cedex) - Cytologie: D. Zickler (Laboratoire de Génétique, Université Paris

Sud, Centre d'Orsay, Bât. 400, F-91405 Orsay) - Autres spécialités: M.F. Roguebert (Laboratoi-

re de Cryptogamie, Muséum National d'Histoire Naturelle, 12 rue Buffon, F-75005 Paris),

COMITE DE LECTURE

J. Boidin (Lyon), J, Chevaugeon (Orsay), J. Fayret (Toulouse), W. Gams (Baarn), G.L.

Hennebert (Louvain-la-Neuve), Ch. Montant (Toulouse), Cl. Moreau (Brest), D.N. Pegler (Kew),

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MANUSCRITS

Les manuscrits doivent étre adressés directement à un membre du Bureau de Rédaction,

choisi pour sa spécialité. Le Bureau peut demander l'avis d'un lecteur, même s'il n'appartient pas

au Comité de Lecture. Bien qu'étant une revue de langue française, les articles rédigés en anglais,

allemand, italien et espagnol sont acceptés. Les disquettes de micro-ordinateur (IBM, IBM com-

patible, et MacIntosh) sont vivement souhaitées. Les recommandations aux auteurs sont publiées

dans le fascicule 1 de chaque tome. Les auteurs recevront 25 tirés-à-part gratuits; les exemplaires.

supplémentaires seront à leur charge.

TARIFS DES ABONNEMENTS Tome 14, 1993

CRYPTOGAMIE comprend trois sections: Algologie, Bryologie-Lichénologie, Mycologie.

Pour une section: France: (326 F ht) 332,85 Fttc - Etranger: 357,00 F

Pour les 3 sections: France: (918 F ht) 937,28 Fttc - Étranger: 1000,00 F

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A.D.A.C. - CRYPTOGAMIE (CCP La Source 34 764 05 S),

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CRYPTOGAMIE, Mycologie est indexé par Biological Abstracts, Current Contents,

Publications bibliographiques du CNRS (Pascal).

Source : MNHN. Paris

CRYPTOGAMIE

MYCOLOGIE

TOME 14 FASCICULE 1 1993

CONTENTS

DAILLANT O., CUVELIER J.J. and BRUN A.M. - Radium and radium decay

products in some macromycetes: first results .........

MATZER M. - Contribution to the knowledge of the ascomycete-genera

Globosphaeria, Roselliniopsis and Synaptospora (in German) .

JANEX-FAVRE M.C., PARGUEY-LEDUC A. et BRUXELLES G. -

Hymenium of Morchella deliciosa Fr. (Ascomycetes Discomycetes):

synanamorphs

Spain and Costa Rica .

Bibliography une

ultrastructural studies (in French) ........ 21

SUBRAMANIAN C.V. - Blastophragma gen. nov. for two interesting

hyphomycetes from southeast Asia ... š CU pt 39

SUBRAMANIAN C.V. - Phialicorona leonora gen. et sp. nov. and its

NUNEZ M. - Full compaibilty a and fenili of nu arcularius from

oy 55

HASAN H.A.H. - Differential action of Cercoran and Topsin-M on sensitive

and tolerant strains of toxigenic fungi .. 61

Instructions to authors

[sani DU

MUSEUM

Bibliothéque Centrale Muséum

"iii

33001 00228851 3

Source : MNHN, Paris

Cryptogamie, Mycol. 1993, 14 (1): 1-10 1

RADIUM AND RADIUM DECAY PRODUCTS IN SOME

MACROMYCETES: FIRST RESULTS

Olivier DAILLANT*, Jean-Jacques CUVELIER** and Anne-Marie BRUN***

* Néronde, 71250 Mazille, France.

** Université de Mons; Service de Biologie et d'Ecologie,

24 Av. du Champ de Mars, 7000 Mons, Belgium.

*** CRII-Rad (Commission de Recherche et d'Information

Indépendante sur la Radioactivité), 471, Av. Victor Hugo,

26000 Valence, France.

ABSTRACT - First results of measures of radium and radium decay products on some species of

fungi are presented here, These fungi could not really be used as bio-indicators, because in most

cases the transfer factor was inferior to one, but the health problem which might arise in some

cases is underlined. The fungi grew either in areas polluted by the uranium industry or in other

areas with very diversified biotopes. Apart from the radioactivity, measures were made on stable

lead and on the pH of the soils

RÉSUMÉ - Les premiers résultats de mesures de radium et de descendants du radium sur un cer-

lain nombre d'espéces de champignons sont présentés ici. Ces champignons ne peuvent pas

réellement étre utilisés comme bio-indicateurs, le facteur de transfert sol/carpophore étant

généralement inférieur à 1, mais le problème sanitaire potentiel est souligné. Les champignons

poussaient soit dans des zones polluées par l'industrie de l'uranium, soit dans d'autres zones avec

des biotopes très divers. Des dosages de plomb stable ont été réalisés dans certains cas et le pH

des substrats a été mesuré.

KEY WORDS : Natural radioactivity, Radium, Lead, Transfer factors, Uranium industry,

INTRODUCTION

Following the Chernobyl accident, many scientists studied the presence of fis-

sion products - in particular cesium isotopes - in fungi. The only natural radionuclide

which was taken into consideration was potassium (K 40) (Elstner et al., 1987; de Me-

ijer et al., 1988), because of its chemical affinity with cesium. However there are nu-

merous natural radioelements in the soil and human activities may concentrate them

and make them more available for living organisms. Some of these radionuclides are

very radiotoxic and their migration should be followed with care. First results of ab-

sorption of radium 226 and some of its daughter products by some species of fungi

growing on specific and differently contaminated soils are presented here. Instead of

adopting a statistical approach, which does not provide many informations about trans-

fer mechanisms, a case by case study was realised, as has also be done in some stud-

ies on radioactive cesium (de Meijer et al., 1988): each result represents only one

sample, but it is completed by the description and analysis of different parameters:

PARIS

Source - MNHN. Paris

O. DAILLANT et al.

general ecology, measurements of radioactivity and stable lead in the soil as well as in

the fruitbodies.

METHODS

The samples

Coprinus comatus (Müll: Fr.) Pers N° 1 and Coprinus atramentarius (Bull.:

Fr.) Fr. N° 1 were collected just a few meters from the fence surrounding a tip of resi-

dues of a yellow cake plant in Gueugnon (France). This place is now urban wasteland

partly rehabilitated as leisure area and was supposed to be very rich in all uranium de-

cay products. Hypholoma fasciculare (Huds.: Fr.) Kumm., was collected on a dead

branch burried on the tip itself. Its direct substrate, i.e. the branch, was not analysed,

but the earth at the exit of a rabbit burrow a few meters away was.

Agaricus campestris L.: Fr. and Macrolepiota excoriata (Sch.: Fr.) Wasser,

were collected in a meadow, about 100 meters from a repository for long lived nuclear

waste (officially only thorium 232 and radium 226) in Issy I'Evëque (France). Before

that, the site was a uranium mine and supposed to be rich in uranium and all its decay

products.

Leccinum versipelle (Fr. & Hók.) Snell and Coprinus atramentarius N° 2 were

collected on a slag heap called "terri! de l'Héribus" in Mons, Belgium. At present it is

mainly colonised by birches. Xerocomus chrysenteron (Bull.) Quél. and Xerocomus ba-

dius (Fr.) Kühn. ex E.J. Gilbert, were collected in a coniferous forest in Czechoslova-

kia, about 40 kilometers north of Brno; these were originally intended for the monitor-

ing of cesium from Chernobyl.

Hydnum repandum L.: Fr. and Coprinus comatus N°2 were collected in deci-

duous forests near Cluny, in Burgundy, France.

Except X. badius all fruitbodies (between 8 and 15) of each sample were taken

on the same spot and had to be sufficient to fill at least a Petri plate format container

after having been dehydrated and crushed.

For the two Coprinus of Gueugnon and for the Coprinus comatus of Cluny,

two samples of soil were analysed: one taken under the fungi, the other about three

meters away. In the case of Coprinus comatus of Gueugnon, we indicate both figures,

the first corresponding to the soil directly under the fungus. In the other cases, there

were no relevant differences. For these three samples, preliminary results had already

been published (Daillant, 1991), but for Coprinus atramentarius and Coprinus comatus

from Cluny, the samples were measured again to try to reduce the margin of error.

We report also the results of a Pb 210 measure on another C. comatus from

Saint Denis de l'Hôtel (Loiret, France).

The species of Coprinus, Hypholoma fasciculare, Agaricus campestris and Ma-

crolepiota excoriata are considered saprophytic fungi; Leccinum versipelle, Hydnum re-

pandum, Xerocomus badius and Xerocomus chrysenteron are mycorrhizal.

Radionuclides examined

The radionuclides examined here are all of the family of uranium 238, which

is one of the three natural radioactive families. It is presented on table 1.

Source : MNHN, Paris

RADIUM IN MACROMYCETES $

110 3ismuth 210. Lead 1104 -?glonium 216 4 3ismuth 214e

4) 223) (162 As) (19,3 m

Lead 206

(stable)

Table 1: Uranium 238, its decay products and their half-lives (only the main disintegrations are

shown here); the letters stand for the following periods: a: Year, d: Day, m: Minute, s:

Second.

Tableau 1: La famille de l'uranium 238, avec ses produits de filiation et leurs périodes (seules

les désintégrations principales figurent sur ce tableau); les lettres indiquent les périodes

suivantes: a: année, d: jour, m: minute, s: seconde.

The measurements were made in gamma-spectrometry: the apparatus used

were 3 hyper-pure germanium detectors of 2 types (1 Canberra type P, resolution 1,7

KeV at 1,33 MeV and an efficiency of 13% and one Ortec, type N with the same re-

solution and an efficiency of 24%).

Because of the method used, only the nuclides emitting gamma photons at suf-

ficiently high energies could be measured. Furthermore, the short-lived radon decay

products cannot be considered separately from radium. Thus the radionuclides exam-

ined here are radium 226 and, in some cases, lead 210. Thorium 234 was also meas-

ured but the results are not presented here.

Radium was either measured directly, using its 185 KeV line or indirectly us-

ing the lines of its daughter products:

- It was measured directly for the two species of Coprinus from Gueugnon and

the soil on which they were growing; however, the 185 KeV line is common to radi-

um 226 and uranium 235, so the latter has to be evaluated (according to the natural

proportions) and substracted; this explains partly the high margins of error.

- It is therefore preferable to measure radium 226 using its decay products, i.e.

bismuth 214 (609 KeV) and lead 214 (352 and 295 KeV), at least in some cases. This

was done for the other samples; to do so, it is necessary to allow the decay products

to reach equilibrium with radium 226; its first decay product is radon 222, a gas: it

diffuses easily. After dehydration at 105°, the samples were therefore sealed in a tight

container for at least four periods of radon 222, reaching thus 95% equilibrium be-

tween radium and the short lived decay products Pb 214 and Bi 214.

The results of the Ra 226 measures are on table 2: if measured directly, only

the figure is indicated, expressed in becquerel per kilo dry matter. If measured on the

line of bismuth 214, the symbol Bi is put into brackets after the figure. If measured on

the line of lead 214, the symbol Pb is put into brackets after the second figure. Bis-

muth was used first and lead is only indicated if it can reduce the margin of error: eg.

Agaricus campestris of Issy l'Evéque: although the margin of error for Bi 214 might

Source : MNHN, Paris

4 O. DAILLANT et al.

lead to a result as low as 15 Bq/Kg, the result for Pb 214 is: 49+/-23 which means

that the corresponding radium content is not inferior to 26 Bq/Kg and is written on the

table as: 37 +/-22 (Bi)

49 +/-23 (Pb)

Lead 210 was measured on its 46 KeV line; the results are reported on table

The count time ranged from 4 to 24 hours.

Total (inert) lead was also measured chemically on three samples of Coprinus

and the soil on which they grew: the digestion of samples was done at the University

of Mons, department of professor Piérart and the analysis (atomic absorption) was

done at the ARGUK laboratory, Oberursel (FRG), Dr Maraun.

The pH of the soil was also measured, using a conventional glass electrode.

Site species pH [Ra 226 In sol [Ra 225 In fungus | concentration

Gueugnon C. comatus 37 |216 9-30 [136 3-87 ES

and 157 4-27 | -

1 C. atramentarius sim. [245 +/- 35 135 +/- 110 0.5

H. fasciculare. : 5 ]« 18 (8)

Mons L versipelle 5.8 56 4- 9(B) |< 6,4 (Bi)

C. atramentarius — d. | 68 «- 18 (B) < 17 (Bj); < 7 Pb)

Cluny. C. comatus. I7 | 67-108) [66-72 1

H. repandum 45 | 43 «4-15 (B) |32 x- 14 (Bi)

Czechoslovakia |X. chrysenteron. 38 | 76 -13(B) [39 w- 22 (5)

X. badius sim. | sim. 22 +/- 10 (Bi)

Issy l'Evéque [A campestris [s3 [124 +;35 (B) [37 + 22 (Bi)

49 +/- 23 (Pb)

M. excoriata id jd. < 29 (Bi); < 26 (Pb)

Table 2 : Results of radium measurements in the soi!s and in the fungi, expressed in Bq/Kg (dry

matter) with the concentration factor and the pH of the soil. The abbreviation sim. me-

ans that the nature of the sample is similar to the preceding; the abbreviation id. means

that the nature of the sample is identical to the preceding.

*H. fasciculare does not grow on the ground; the soil a few meters away was neverthe-

less analysed and showed a contamination of 11 300 Bq/Kg of radium 226. The chemi-

cal symbols in brackets indicate whether radium was measured on the line of bismuth

214 (Bi) or on the lines of lead 214 (Pb). If measured directly on the line of radium,

nothing is added to the figure. In the case of C. comatus of Gueugnon, we indicate the

two results, the second corresponding to the soil 3 meters away of the fruitbodies.

Tableau 2: Résultats des mesures de radium dans les sols et les carpophores, exprimés en Bo/Kg

{matière sèche) avec le facteur de concentration et le pH du sol. L'abréviation sim. signi-

fie que la nature de l'échantillon est similaire au précédent; id. signifie que l'échantillon

est identique au précédent.

*H, fasciculare ne pousse pas sur le sol; un échantillon de sol à quelques mètres des

carpophores à néanmoins été analysé et présentait une contamination en radium 226 de

11 300 BqKg. Les symboles chimiques entre parenthèses indiquent si le radium a été

mesuré à partir des pics de bismuth 214 (Bi) ou du plomb 214 (Pb). S'il a été mesuré

directement, aucune indication ne figure après le chiffre. Dans le cas du substrat de C.

comatus de Gueugnon, nous indiquons deux résultats, le second correspondant à

l'échantillon de sol prélevé à 3 mètres des carpophores.

Source : MNHN, Paris

RADIUM IN MACROMYCETES 6

Site species pH [Pb 210 In soli [Pb 210 in fungus | concentration

Gueugnon C. comatus 37 108 4-17 |722 4-142 68

sim. [and 54 4/- 14 z

| [Gzechosiovakia |X. chrysanteron 36 | «29 387 4. 179 >13

X. badius sim. | sm. PTT] -

Cluny C. comatus 77 70 4/14 61.27.73 08

H. repandum | 45 53 I <78 -

St. Denis C. comatus | NR NR. [134 J- 83 5 i

Table 3: Results of measurements of lead 210 in some fungi and the corresponding soils, ex-

pressed in Bq/Kg (dry matter) with the pH of the soil; the concentration factor is only

indicated when the results allow it. As for radium, two results are mentioned for Gueu-

gnon, (sim. means that the sample is similar to the preceding. NR stands for not re-

corded)

Tableau 3: Résultats des mesures de plomb 210 sur quelques carpophores et les sols correspon-

dants, exprimés en Bq/Kg (matière sèche) avec le pH du sol; le facteur de concentration

n'est indiqué que si les résultats le permettent. Comme pour le radium, deux résultats

sont fournis pour le substrat de C. comatus de Gueugnon. (sim. signifie que l'échantillon

est similaire au précédent. NR signifie non relevé)

RESULTS

The results for 226 Ra are on table 2. The concentration factor is never superi-

or to 1, whether the fungi are saprophytic or mycorrhizal. In non polluted areas, the

order of magnitude is of some tens of becquerel per kilo dry matter. Table 3 shows

the results for 210 Pb, with a very high concentration factor in two cases and concen-

trations of hundreds of Bq/Kg. The total lead measures are on table 4 : the highest

concentration factor is 0,17.

DISCUSSION

The first comment which has to be made is that the margins of error are fairly

high, this is partly due to the measuring procedure which was mentioned in the meth-

ods, but there are other difficulties: the precision is proportional to the quantity of

sample material and to the count time.

The quantity of soil is not limited, but it is often very difficult to find enough

fungi of the same species on the same spot: the measurement procedure being much

more difficult as for - say - cesium 137 and cesium 134 measurements, a larger quan-

tity had to be gathered: as for cesium 300 g of fresh matter-are ideal and 30 or 40 g

may be sufficient if the count time is long enough, the ideal quantity of fresh sample

material is of at least 500 g for radium and its decay products. As an example, the

spectrum of Xerocomus chrysenteron (Fig. 1) with the main lines and the background

gives an idea of the added difficulty.

The results are nevertheless relatively concordant and make some first conclu-

sions possible even though the number of samples is still limited,

Source : MNHN, Paris

6 O. DAILLANT et al.

Figure 1: Spectrum of Xerocomus chrysenteron (Czechoslovakia). One can clearly see the back-

ground; the elements and the energies of the main lines are indicated below: 1) x emis-

sion of barium (decay product of cesium 137); not used for measurements. 2) Lead 210

(46 KeV) 3) Thorium 234 (63 KeV) 4) Uranium 235 (163 KeV) 5) Radium 226 and

uranium 235 (186 KeV) 6) Lead 212 (238 KeV) 7) Lead 214 (295 KeV) 8) Lead 214

(352 KeV) 9) Thorium 208 (583 KeV) 10) Cesium 134 (604 KeV) 11) Bismuth 214

(609 KeV) 12) Cesium 137 (661 KeV) 13) Bismuth 214 (1120 KeV) 14) Potassium 40

(1460 KeV).

Figure 1: Spectre de Xerocomus chrysenteron (Tchécoslovaquie). Le fond est clairement visible;

les éléments et les énergies correspondant aux principaux pics sont indiqués.

The origin of uranium and radium decay products in the soil:

The presence of these radionuclides is partly due to natural causes: uranium

and radium may be dissolved in groundwater and migrate upwards; radon emanations

have always existed and its main long-lived daughter product, Pb 210, sooner or later

deposits on the soil.

These radionuclides however enter also the biosphere due to human activities:

1) Activities related to the nuclear industry:

As is the case in Issy l'Evêque, there is obviously the extraction of uranium

ore, or its treatment and transformation as well as the disposal of tailings as in Gueug-

non. One can also think of the production of radium for medical or industrial use.

Military tests should also be mentioned: they have released 1,4 Megacurie (1

Curie = 37 billion Becquerel) into the atmosphere between 1958 and 1962 (Robbins,

1978).

2) Activities not related to the nuclear industry:

They may also release these radioelements in the environment; all types of

mining and drilling, the combustion of fossil fuels (Sheppard, 1980; Drosselmeyer,

Source : MNHN. Paris

RADIUM IN MACROMYCETES 7

1982) and, last but not least, agriculture: the phosphate used for fertilizers contains

about 1100 to 1500 Bq/Kg of radium (Drosselmeyer, 1982).

The concentration potential of radium by the fungi:

In some cases, such as the terril de l'Héribus (Mons), the concentration factor

is low. In the other cases, we had a concentration factor from 0,3 to 1. It may seem a

low concentration factor and is not sufficient for a use as bio-indicator. It is neverthe-

less very high compared with most phanerogamous plants, which have a concentration

factor of 0,1 to 0,01 (or the potential to eliminate) for radium (Sheppard, 1980; Dros-

selmeyer, 1982).

At first sight, the pH of the soil did not seem to be the main determining fac-

tor for the absorption; other ecological parameters are probably equally important:

among those parameters, one can think of the amount of available organic matter and

the specificity of the fungus metabolism. In the case of Mons (slag heap) it is plausi-

ble to think that radium present in a non-soluble form is trapped in coal particles of

carboniferous shales; these particles, being of high granulometry, the radium would not

be available.

The differences in absorption of radium and lead:

In some cases (in particular C. comatus of Gueugnon and X. chrysenteron of

Czechoslovakia) the activity of Pb 210 measured was much higher than that of other

elements of the uranium chain. In order to know whether C. comatus has a high con-

centration potential for lead, other results were looked for in literature and total lead

was measured in the two C. comatus (Geugnon and Cluny) and in C. atramentarius

(Geugnon). The results are on table 4. They clearly show that the analysed fungi do

not concentrate lead. Some other explanation had to be sought:

- The radioactive lead might be present under a different (and more available)

chemical form than stable lead. However, it was not possible to find a concentration

factor superior to 1 anywhere in the literature.

- The mass of Pb 210 is negligible compared with the mass of stable lead: one

gramme Pb 210 has an activity of 76 Ci (1 Ci = 3,7 x 10 E10 Bq). It might be that

the functioning of the fungal metabolism gives different results if in presence of mass-

es of totally different orders of magnitude. R.J. de Meijer et al. (1988) have reported

a different resorption of stable cesium and radioactive cesium but this could be ex-

plained by the fact that stable cesium is much more abundant, whereas we are con-

fronted with exactly the opposite situation here.

- There is nevertheless a third possible explanation which seems quite attrac-

tive: radon 222, the direct daughter product of Ra 226, is very soluble in water: 224

cm? radon/100 cm? of water at 25? (IARC study, 1988).

The mushrooms having between 80 and 93% water, they would absorb radon,

in solution in water if the soil is radiferous; this radon would then decay partly or tot-

ally to Pb 210 between growth and measurement (or consumption).

This hypothesis seems quite plausible: the concentration factor lies between

0,17 and 0,09 for stable lead. It is of the same order as the results presented by Mor-

nand (1990) and none of the other authors studied (Kuusi et al., 1981; Seeger et al.,

1976; Seeger, 1982) mention C. comatus as being particularly lead-greedy. On the oth-

er hand the concentration of Pb 210 was sevenfold for C. comatus (Gueugnon) and

Source : MNHN, Paris

8 O. DAILLANT et al

C. atramentarius 39,9

(Gueugnon)

C. comatus 47

(Gueugnon)

Concentration factor

ern

C. comatus 3,82

(Cluny)

Table 4: Total lead (ppm dry matter; margin of error « 595)

Tableau 4: Plomb total (exprimé en ppm sur la matière sèche; marge d'erreur < 596).

also quite considerable for X. chrysenteron, which grew in an area far from any source.

of lead pollution.

The largest quantity of Pb 210, i.e. the quantity corresponding to the differ-

ence between the concentration factor for total lead (i.e. overwhelmingly stable lead)

would come of the decay of radon. This makes the mushrooms unsuitable as bio-indi-

cators - as was hoped at first - but poses a serious health problem.

Health problem and legislation:

In the European Community (but some member countries have lower limits),

the annual limit for ingestion of Pb 210 is 3 000 Bq per year if it derives from a nu-

clear activity (Council directive N° 84/467). Obviously, legislation is not directly re-

lated to the health effect, since Pb 210 of other origins is exactly as radiotoxic as Pb

210 deriving from nuclear industry.

It must be added that this limit applies to the "added" Pb 210 only if there is

no other "added" natural or artificial radioelement taken in. If there is a mixture of ra-

dionuclides, which is almost always the case, the annual limits of intake of all the oth-

er elements must be taken into account in proportion.

Thus these limits only apply if the radioactivity has its origin in the nuclear

industry: it would be the case in Gueugnon (yellow cake plant) and in Issy l'Evêque

(uranium mining).

Lead 210 is considered very radiotoxic because it tends to accumulate in

bones: the biological half-life of lead in bones lies between 10 and 20 years (Seeger,

1982); the effective half-life (i.e. taking into account the radioactive decay) of Pb 210

in bones is of about 8 years (Drosselmeyer, 1982).

Radium is also very radiotoxic and also accumulates in bones; it has the same

chemical behaviour as calcium (Sheppard, 1980). If Coprinus comatus of Gueugnon

had been eaten - and assuming that at the time of consumption the activity of Pb 210

had been the same as at the time of measurement - the dose equivalent would have

been very high: using the model of the german Institut für Strahlenhygiene (Heinrich

et al., 1985), we can evaluate it as follows:

For adults, each becquerel of Pb 210 taken in delivers a dose of 2,2 x 10 E-5

Sv to the bone surface (1 sievert = 100 Rem of the former system); each becquerel of

Ra 226 taken in delivers a dose of 6,8 x 10 E-6 Sv to the bone surface.

According to the same model, the effective dose to the whole body would be:

Source : MNHN, Paris

RADIUM IN MACROMYCETES 9

For Pb 210 (adults): 1,5 x 10 E-6 Sv for each Bq taken in;

Thus, for 722 Bą: 1,08 mSv for 1 Kg dry matter, or approximately 0,1 mSv

for 1 Kg fresh matter, which means that a consumption of about 9,3 Kg is enough to

reach 1mSv.

For Ra 226 (adults): 3,6 x 10 E-7 Sv for each Bq, which means that for a

fungus with 136 Bq/Kg dry matter, the consumption of 1 Kg (dry) leads to a dose of

0,049 mSy, if no other radionuclide were present.

At the european level, the limit for people not involved in nuclear activities is

still 5 millisievert; some countries nevertheless already follow the recommendation of

the ICPR (International Radiological Protection Board), i.e. 1 mSv (100 millirem).

However, these calculations are valid only in the theoretical case in which

there is no other intake of other radionuclides; in practice, there is nearly always - as

here - a mixture: it must be taken into account and the limit of 1 mSv would be

reached with a consumption of fungi lower than 9,3 Kg.

Determining the added radioactivity:

When dealing with sites like Gueugnon or Issy l'Evêque, knowing which pro-

portion of radium and of its descendants is of natural or industrial origin makes it nec-

essary to know the radiological situation before the industrial extraction or transforma-

tion began. If it is not possible, the comparison between the different elements of the

family and the observation of an unbalance which cannot be explained by normal mi-

grations of radionuclides can sometimes give a clue.

CONCLUSION

Many (still) unknown parameters are influencing the absorption of these ra-

dionuclides and of many other radionuclides not studied here; research based on a sta-

tistical basis may complete these first results. Provisionally, it is possible to say that

none of the samples really concentrate radium: the fungi only absorb it without elimi-

nating it; it makes them unsuitable as bio-indicators. They are not suitable either as

bio-indicators for Pb 210 although some showed very high concentrations. On the

other hand, the potential health problem deriving from regular consumption of fungi

with levels of radioactivity as detected in some samples, in particular those growing

on potentially radiferous soils and near uranium extracting or uranium transforming fa-

cilities should by no means be underestimated.

ACKNOWLEDGEMENTS

The authors wish to express their thanks to Dr. G. Kirchner, University of Bremen and

to Dr, R. Courtecuisse, University of Lille for discussing the analytical techniques and reading

the manuscript.

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Source : MNHN, Paris

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BEITRAG ZUR KENNTNIS DER

ASCOMYCETENGATTUNGEN GLOBOSPHAERIA,

ROSELLINIOPSIS UND SYNAPTOSPORA

Mario MATZER

Institut für Botanik, Karl-Franzens-Universität, Holteigasse 6, A-8010

Graz, Austria

ZUSAMMENFASSUNG. - Globosphaeria, Roselliniopsis und Synaptospora sind ähnliche aber

unterscheidbare Ascomycetengattungen. Globosphaeria (1 Art) und Roselliniopsis (4 Arten)

enthalten nur lichenicole Arten, Synaptospora umfasst mur eine saprophytische Art

Bestimmungsschlüssel für die drei Gattungen und die vier Roselliniopsis-Arten werden

bereitgestellt. Folgende neue Kombinationen werden vorgeschlagen: Roselliniopsis gelidaria

comb. nov. (Syn: Polycoccum gelidarium), Roselliniopsis tartaricola comb. nov. (Syn.

Synaptospora tartaricola) und Endococcus buelliae comb. nov. (Bas.: Orbicula buelliae).

ABSTRACT - Globosphaeria, Roselliniopsis and Synaptospora are similar but distinct genera of

ascomycetes. Globosphaeria (1 species) and Roselliniopsis (4 species) comprise only lichenico-

lous species, Synaptospora includes one saprophytic species. Keys for the three genera and the

four species of Roselliniopsis are presented. The following new combinations are proposed: Ro-

selliniopsis gelidaria comb. nov. (syn.: Polycoccum gelidarium), Roselliniopsis tartaricola comb.

nov. (syn.: Synaptospora tartaricola) and Endococcus buelliae comb. nov. (bas.: Orbicula

buelliae).

KEY WORDS : Globosphaeria, Roselliniopsis, Synaptospora, lichenicolous and saprophytic asco-

mycetes, taxonomy.

EINLEITUNG

Die drei Ascomycetengattungen Globosphaeria, Roselliniopsis und Synaptos-

pora weisen einige gemeinsame Merkmale auf: Perithecien mit braunen Substrathy-

phen oder Zellplatten verbunden; Peridium ziemlich brüchig, relativ mächtig entwick-

elt, im Längsschnitt aussen aus mehr oder weniger polygonalen, weiter innen aus

tangential gestreckten Zellen aufgebaut; Ostiolarkanal mit Periphysen ausgekleidet; int-

erascale Filamente bleibend; Asci funktionell unitunikat, dünnwandig, schmal zylin-

drisch, lang gestielt; Ascosporen einreihig im Ascus angeordnet, zumindest bei Roselli-

niopsis-Arten und Synaptospora zu Gruppen verbunden.

Typusart und zugleich einzige Art von Globosphaeria ist die flechtenbewoh-

nende G. jamesii (Hawksworth, 1990). Roselliniopsis umfasste zunächst nur zwei li-

chenicole Arten: R. tropica (Typusart) und R. groedensis (Matzer & Hafellner, 1990).

Source : MNHN, Paris

12 M. MATZER

Die Typusart von Synaptospora ist S. petrakii, ein saprophytischer Holzbewohner. Als

zweite Art ist die lichenicole S. tartaricola in die Gattung gestellt worden (Cain,

1957).

Von allen erwähnten Arten sind die Typen und - wenn vorhanden - zusätzliche

Belege studiert worden. Es hat sich gezeigt, dass Globosphaeria, Roselliniopsis und

Synaptospora ähnliche aber unterscheidbare Gattungen sind. Globosphaeria (monotyp-

isch) und Roselliniopsis (derzeit vier Arten) enthalten nur lichenicole Arten, Synaptos-

pora umfasst nur die nicht-lichenicole Typusart.

SCHLÜSSEL ZU DEN GATTUNGEN

1 Asci an der Spitze stark abgeflacht, Ascuswand apikal konvex einwärts verdickt,

Ascosporen ohne Keimporen, eine saprophytische Art auf Holz ....... ga

2 ere .... Synaptospora (petrakii)

1* Asci an der Spitze abgerundet oder etwas abgeflacht, Ascuswand apikal nicht ver-

dickt, Ascosporen - zumindest teilweise - mit Keimporen, lichenicole Arten ........ 2

2 Ascosporen hyalin bleibend, 1-zellig, Perithecien mit relativ wenigen, hellbraunen

Substrathyphen verbunden, die kein dichtes Hyphennetz ausbilden .

2 Globosphaeria (jamesii)

2* Ascosporen reif kräftig braun, Perithecien mit zahlreichen, dunkelbraunen Substra-

thyphen - die auf oder im Wirtsthallus ein dichtes Hyphennetz ausbilden - oder mit

Zellplatten verbunden ... … Roselliniopsis

DIE GATTUNGEN UND IHRE ARTEN

1. GLOBOSPHAERIA HAWKSWORTH (1990: 301)

Die Gattung umfasst nur die Typusart:

Globosphaeria jamesii Hawksworth (1990: 303)

Beschreibung und Abb.: Hawksworth (1990).

Globosphaeria jamesii wächst lichenicol auf Normandina pulchella (Borrer)

Nyl. und ist bisher nur von der Typuslokalität in Tasmanien bekannt geworden. Leider

enthält der Typus nur sehr wenige Fruchtkörper, sodass nur eine fragmentarische Ana-

Iyse möglich war, um das Material entsprechend zu schonen. Diverse Feinmerkmale,

die für die vorliegenden Betrachtungen von Bedeutung sind, konnten daher nur

ungenügend erfasst werden. Trotzdem ist es unserer Meinung nach gerechtfertigt, Glo-

bosphaeria und Roselliniopsis als getrennte Genera zu führen. Hawksworth (1990) hat

vorgeschlagen, die Gattung Globosphaeria - vorläufig - den Xylariales zuzuordnen. Er-

iksson & Hawksworth (1991 a, b) rechnen sie den Sordariales zu.

Untersuchter Beleg: Australia, Tasmania, Waratah, on Normandina pulchella,

Feb. 1907, Flockton (NSW L4339 - Holotypus).

2. ROSSELLINIOPSIS MATZER & HAFELLNER (1990: 97)

Dieses Genus kann zur Zeit am ehesten den Sordariales zugeordnet werden; in

eine der bestehenden Familien dieser Ordnung lässt es sich jedoch nicht zwanglos

eingliedern. Ursprünglich umfasste die Gattung zwei Arten, derzeit sind vier Roselli-

niopsis- Arten bekannt, Diese lassen sich anhand unterschiedlicher Wirtsspezifitäten,

Source : MNHN, Paris

GLOBOSPHAERIA, ROSELLINIOPSIS, SYNAPTOSPORA 13

Abb. 1: Ascosporen von Roselliniopsis-Arten. A: R. gelidaria (Alaska, T.H. Nash 14614, GZU).

B: R. groedensis (Österreich, Kärnten, Vorderkrems, 20.1X.1989, W. Petutschnig, GZU).

C: R. tartaricola (K - Holotypus). D: R. tropica (UPS - Holotypus). MaBstrich = 10 um.

Fig. 1: Ascospores of Roselliniopsis-species. A: R. gelidaria (Alaska, T.H. Nash 14614, GZU). B:

R. groedensis (Austria: Kärnten, Vorderkrems, 20.1X.1989, W. Petutschnig, GZU). C: R.

tartaricola (K - holotype). D: R. tropica (UPS - holotype). Scale = 10 um.

Grösse der Perithecien und vor allem durch Merkmale der Ascosporen gut unterscheid-

en. Sporenzahl pro Ascus, Grösse und Form der Sporen, die Anzahl und Lage der

Sporensepten (vgl. Abb. 1) sind bei den einzelnen Arten verschieden.

Source : MNHN, Paris

14 M. MATZER

Ein bezeichnendes Merkmal zumindest einiger Arten der Gattung sind die

Keimporen an den Ascosporen (Matzer & Hafellner, 1990; Matzer & Pelzmann,

1991). Auch die Sporensepten kónnen Poren aufweisen. Die Keimporen konnten bei R.

tropica und R. groedensis relativ oft beobachtet werden, bei R. tartaricola nur selten.

An Ascosporen von R. gelidaria konnten wir keine Keimporen nachweisen. Bemerk-

enswert ist die Tatsache, dass besonders Arten der Gattungen Ochrolechia Massal.

und Pertusaria DC. Wirtsflechten für Roselliniopsis-Arten (R. groedensis, R. tartarico-

la, R. tropica) sind. Diese Arten dürften sehr nahe verwandt sein und weisen mehrere

gemeinsame Merkmale auf: Ascosporen zu 8 im Ascus, oft zu Gruppen vereinigt,

höchstens 3-zellig, mit Keimporen. Etwas stärker isoliert in der Gattung ist die auf

Placopsis gelida (L.) Linds. spezialisierte R. gelidaria: Asci 4-sporig, Ascosporen

nicht zu Gruppen vereinigt, schwach mauerförmig, ohne Keimporen.

Eine weitere lichenicole Art, die auf ihre Zugehörigkeit zu Roselliniopsis zu

prüfen wäre, ist Orbicula variolariae (Massal.) Saccardo (1891: 378); Bas.: Sphaeria

variolariae Massalongo (1855: 241). Leider konnte kein Material in VER gefunden

werden (Bianchini, in litt.). Von allen bekannten Roselliniopsis-Arten weicht O. vario-

lariae - gemäss dem Protolog - durch die kleineren Ascosporen ab. Orbicula buelliae

Dodge gehört in die Verrucariaceen-Gattung Endococcus Nyl. Am Typusbeleg wach-

sen die kleinen perithecienartigen Fruchtkörper dieses flechtenbewohnenden Pilzes auf

dem Thallus einer muscicolen Buellia; bei der Beschreibung von Orbicula buelliae

wird Buellia muscicola Dodge & Baker als Wirtsflechte angegeben (Dodge, 1948:

261). Endococcus buelliae (Dodge) Matzer comb. nov. [Bas.: Orbicula buelliae Dodge

(1948: 261)] ist nahe verwandt mit Endococcus propinquus (Koerb.) Hawksw. Die

beiden Arten sind gekennzeichnet durch kleine (bei E. buelliae ca. 8-13 x 6-8 um),

braune, zweizellige Ascosporen; die Sporenenden sind abgerundet, die Sporen am me-

dien gelegenen Septum nicht oder kaum eingeschnürt. E. propinquus wächst vor allem

auf Porpidiaceen-Gattungen, die Ascosporen sind glattwandig, die Fruchtkórper messen

meist 150-200 um im Durchmesser (Triebel, 1989). Die Sporen von E. buelliae sind

fein ornamentiert, die Ascomata sind meist um 100 um, seltener bis 200 um breit. Un-

tersuchter Beleg von Endococcus buelliae: Antarctica, Queen Mary Land, Possession

Nunatak, c. 66°45'S, 98*30'E, 15.Dec.1912, C.T. Harrisson (FH - Holotypus).

Schlüssel zu den bisher bekannten Roselliniopsis-Arten

l Asci 4-sporig, Ascosporen reif schwach mauerfórmig, meist 8-zellig, auf Placopsis

gelida ... … Roselliniopsis gelidaria

1* Asci 8-sporig, Ascosporen reif 1-, 2- oder 3-zellig, auf Ochrolechia- oder Pertusa-

ria-Arten ..... 2

2 Ascosporen (14)16-20 x (9)11-13 um, oft 3-zellig, aber auch 1- oder 2-zellig, mit

geraden Quersepten, auf Pertusaria corallina, P. lactea in Europa ..

. Roselliniopsis groedensis

z E meist weniger als 16 jum lang, bis 10 jum breit, auf anderen Wirtsfle-

chten ... 3

3 Perithecien 400-700 jtm im Durchmesser, Ascosporen selten mit Keimporen, meist

1- oder 2-zellig, sehr selten 3-zellig, mit geraden Quersepten, 9-14(16) x 8-10 um,

auf Ochrolechia tartarea, Pertusaria hemisphaerica in der Holarktis

. Roselliniopsis tartaricola

Perithecten 200-400 um im Durchmesser, Ascosporen oft mit Keimporen, meist 2-,

aber auch 1- oder 3-zellig, Septen oft schief eingezogen, (10)11-16(20) x (7)8-10

jim, auf steriler corticoler Krustenflechte (? Ochrolechia) in Tansania ..

e" ... Roselliniopsis tropica

Source : MNHN, Paris

GLOBOSPHAERIA, ROSELLINIOPSIS, SYNAPTOSPORA 15

Roselliniopsis gelidaria (Mudd) Matzer comb. nov.

Basionym: Sphaeria gelidaria Mudd (1861: 130). - Polycoccum gelidarium

(Mudd) Hawksworth (1983: 5). - Typus: British Isles: Teesdale, on Placopsis gelida

(ex herb. W. Mudd) (BM - Holotypus); zitiert nach Hawksworth & Diederich (1988:

301).

Beschreibung: Perithecien lichenicol, einzeln oder in kleinen Gruppen aus dem

Thallus oder den Cephalodien von Placopsis gelida hervorbrechend, schwarz, mit rau-

her Oberfläche, ca. 300-700 um im Durchmesser, basal und lateral mit dunkelbraunen

Zellplatten verbunden. Peridium relativ mächtig, dunkelbraun, im Längsschnitt bis ca.

140 um breit, aus vielen Zellagen aufgebaut, aussen mit polygonalen, weiter innen mit

tangential gestreckten Zellen. Periphysen vorhanden. Interascale Filamente bleibend.

Asci funktionell unitunikat, mehr oder weniger zylindrisch, deutlich gestielt, am Apex

abgerundet, mit durchgehend dünner Wand, 4-sporig, Sporen einreihig angeordnet, ca.

115-150 x 15-20 um. Ascosporen reif braun, breit ellipsoid bis subglobos, schwach

mauerförmig, meist mit 8 Zellen, mit 1 Querseptum, jede Sporenhälfte durch

Längssepten in 4 Zellen geteilt, Sporen nicht zu Gruppen verbunden, mit glatter

Oberfläche, ca. 17-21 x 10,5-14 um.

Roselliniopsis gelidaria erzeugt recht auffällige Infekte auf Placopsis gelida.

Ein einigermassen ähnliches Befallsbild auf dieser Wirtsflechte wird durch Polycoccum

squamarioides (Mudd) Arnold hervorgerufen. Die beiden lichenicolen Pilze können

auch gemeinsam am selben Thallusstück vorkommen (z.B. Santesson, 1988).

Auf die Tatsache, dass R. gelidaria innerhalb der Gattung etwas isoliert steht,

wurde bereits weiter oben hingewiesen.

Nachweise der Art liegen vor von den Britischen Inseln, Norwegen, den

Färöer Inseln, Grönland, Island und Alaska (vgl. die unten zitierten Belege; Mudd,

1861; Alstrup & Hawksworth, 1990).

Untersuchte Belege: Norway: Ankenes parish, between Rombaksbotn and the

railway station of Katterat, on rocks near the stream, partly close to a waterfall,

110-130 m, 30.VIIL1959, R. Santesson 13493a (GZU, zusammen mit Polycoccum

squamarioides). - W-Grönland: Disko, E-Fuss des Lyngmarksfjeld, 400 m,

31.VIL.1983, J. Poelt & H. Ullrich (GZU). - U.S.A.: Alaska, Keystone Canyon, 22 km

E of Valdez, exposed rock area adjacent highway 4, 61°0S'N, 146°10'W, on slate, 120

m, 21.V1.1977, T.H. Nash III 14614; Lich. exs. Arizona State Univ. no. 16, Placopsis

gelida (GZU).

Roselliniopsis groedensis (Zopf) Matzer & Hafellner (1990: 99)

Synonyme: Rosellinia groedensis Zopf (1896: 350). - Muellerella (Rosellinia)

groedensis (Zopf) Arnold (1897: 393). - Adelococcus groedensis (Zopf) Keissler

(1930: 311).

Beschreibung und Abb.: z.B.: Matzer & Hafellner (1990), Zopf (1897).

Dieser lichenicole Pilz ist bisher nur von vier Belegen (siehe unten) aus Mit-

tel- und Nordeuropa auf Pertusaria corallina (L.) Arnold und P. lactea (L.) Arnold be-

kannt geworden. Zur Nomenklatur von Pertusaria lactea siehe Schreiner & Hafellner

(1992: 228). Bezüglich irrtümlicher Angaben von Roselliniopsis groedensis vergleiche

Matzer & Hafellner (1990). Der Pilz verursacht auffällige Infekte auf den weit ver-

breiteten Wirtsflechten. Stigmidium eucline (Nyl.) Vezda induziert ähnliche Befalls-

bilder auf Pertusaria lactea, scheint aber weit häufiger zu sein als R. groedensis.

Source : MNHN, Paris

16 M. MATZER

Untersuchte Belege: Italien: Zwischen St. Ulrich und St. Peter in Gróden, Ti-

rol, auf Pertusaria lactea, VIIL1896 (M - Isotypus). - Norwegen: Hordaland, Gem.

Etne, Ákrafjorden, N-exponierte Hánge ca. 1 km NE vom Wasserfall Langfoss, Sili-

katblockhalde ober der Strasse, ca. 50 m, auf Pertusaria corallina, 19.VIII.1984, J.

Hafellner 12205 & A. Ochsenhofer (Hafellner). - Osterreich: Karnten: Vorderkrems,

auf Pertusaria lactea, 20.1X.1989, W. Petutschnig (GZU). Salzburg: Lungau, Schlad-

minger Tauern, Lessachtal, Weg von der Lasshofer Hütte zum Landschitzsee, Umge-

bung der Lasshofer Hütte, ca. 1300 m, MTB 8784, auf Pertusaria lactea, 09.IX.1981,

J. Poelt (GZU).

Roselliniopsis tartaricola (Nyl. in Leight.) Matzer comb. nov.

Basionym: Sphaeria tartaricola Nylander in Leighton (1871: 159). - Orbicula

tartaricola (Nyl. in Leight.) Cooke; vgl. z.B. Hawksworth (1975: 201). - Synaptospora

tartaricola (Nyl. in Leight.) Cain (1957: 6). - Typus: Wales, Festiniog Road, Dolgel-

ley, on Ochrolechia tartarea, 9.Aug.1866, W.A. Leighton, (K - Holotypus, H-NYL

7659 - Isotypus).

Beschreibung bzw. Abb.: z.B. Dennis (1981), Hughes (1951), Keissler (1930),

Leighton (1871), Vouaux (1912).

Diese Art ist erstmals bei Leighton (1867, als Sphaeria tartaricola) erwähnt,

aber erst später von Nylander in Leighton (1871) beschrieben worden. Unter Roselli-

niopsis tartaricola verstehen wir den lichenicolen Pilz, der auf Ochrolechia tartarea

(L.) Massal. und Pertusaria hemisphaerica (Flörke) Erichs. vorkommt. Belege auf an-

deren Wirtsflechten (Cain, 1957; Cannon et al., 1985; Hawksworth, 1975; 1978; 1983;

Hughes, 1951) werden an anderer Stelle behandelt oder könnten, wenn auf Placopsis

gelida, zu Roselliniopsis gelidaria gehören. R. tartaricola scheint - zumindest auf Per-

tusaria hemisphaerica - in Europa weiter verbreitet und nicht allzu selten zu sein. Die

bei Diederich & Roux (1991) unter Roselliniopsis tropica gemeldeten Funde ‚gehören

zu R. tartaricola (Diederich, pers. comm.).

Wie aus der Synonymik ersichtlich, ist die hier besprochene Art schon in meh-

teren Gattungen untergebracht worden. Sie kann jedoch weder bei Synaptospora (vgl.

im Gattungsschlüssel weiter oben) noch bei Orbicula verbleiben. Die Typusart von

Orbicula, O. parietina (Schrader) S. Sughes ist nicht lichenicol, die Perithecien sind

dünnwandig, die Ascosporen sind hyalin bis gelblich, die Asci sitzen einem basalen

Polster auf (nach eigenen Untersuchungen sowie Hughes, 1951).

Untersuchte Belege: British Isles: England: S. Hants., Pitts Wood, on Pertusa-

ria hemisphaerica, 1973, F. Rose (E). N. Hants., Froxfield, by road near. Bosing Park,

on Quercus, on Pertusaria hemisphaerica, 5.1X.1972, BJ. Coppins & F. Rose (IMI

185172). W. Sussex, South Harting, Up Park, on Quercus, on Pertusaria hemisphaeri-

ca, 10.11.1971, B.J. Coppins (E, IMI 165190). - Scotland: S. Aberdeen, Ballater,

Craigendarroch oakwood (with pine, birch & rowan), alt, 215-396 m, on Quercus, on

Pertusaria hemisphaerica, 23.V.1984, B.J. Coppins 10759 et al. (E). - Wales: Dolgel-

ley, Festiniog Road, on Ochrolechia tartarea, 9.Aug.1866, W.A. Leighton (K - Holo-

typus, H-NYL 7659 - Isotypus). - Deutschland: Schleswig-Holstein, Krs. Segeberg,

an einer alten Eiche im Achterholz bei Goldenbeck, auf Pertusaria hemisphaerica,

30.1V.1906, C.F.E. Erichsen (HBG).

Roselliniopsis tropica Matzer & R.Santesson in Matzer & Hafellner (1990: 103)

Beschreibung und Abb.: Matzer & Hafellner (1990); REM-Photographien der

Ascosporen bei Matzer & Pelzmann (1991).

Source : MNHN, Paris

GLOBOSPHAERIA, ROSELLINIOPSIS, SYNAPTOSPORA 17

Die Art ist bisher mit Sicherheit nur von der Typusaufsammlung aus Tansania,

auf einer sterilen, corticolen Krustenflechte (? Ochrolechia) wachsend, belegt. Anga-

ben aus Europa auf Pertusaria hemisphaerica (Diederich & Roux, 1991) rechnen zu

Roselliniopsis tartaricola (Diederich, pers. comm.).

Untersuchter Beleg: Tanzania, Tanga Prov., Usambara Mts, Amani, road to-

wards S.W., alt. 800-900 m, 5°8'S, 38°37'E, on a Plumieria acutifolia by a road, on ?

Ochrolechia spec., 11.1.1971, R. Santesson 23469 (UPS - Holotypus).

3. SYNAPTOSPORA CAIN (1957: 4)

Die Gattung enthält nach derzeitigem Wissen nur die Typusart S. petrakii, ei-

nen Saprophyten auf Holz. Bei der Beschreibung der Gattung ist auch die lichenicole

S. tartaricola mit aufgenommen worden (Cain, 1957). Diese Art gehört jedoch zur

Gattung Roselliniopsis.

Bezüglich der Stellung von Synaptospora im System der Ascomyceten gibt es

verschiedene Vorschläge. Cain (1957) hat vorgeschlagen, Synaptospora den Xylaria-

ceae zuzuordnen. Nach Jeng & Cain (1976) soll sie bei den Trichosphaeriaceae ein-

gegliedert werden. Barr (1990) rechnet die Gattung den Coniochaetaceae zu. Eriksson

& Hawksworth (1991b) führen Synaptospora unter "unitunicate ascomycetes, inc.

sed."

Synaptospora petrakii Cain (1957)

Beschreibung und Abb.: Cain (1957).

Synaptospora petrakii scheint bisher nur von den unten zitierten Belegen be-

kannt zu sein.

Untersuchte Belege: Canada: North of Bolton, Peel Co., Ont., on Berula papy-

rifera, 8.0ct.1955, R.F. Cain (TRTC 32168 - Holotypus). Ontario, Peel Co., N of Mis-

sissauga, Creditview Road, on decaying wood (probably hardwood), 11.XI.1987, L.A.

Novak 10 (TRTC 51203, zusammen mit Tapesia spec.). Ontario, Muskoka Dist., Hali-

burton Co., c. 11 km south of Dorset, on decorticated wood, Oct.1975, Deirdre Tighe

(TRTC 51205),

DANK

Wir danken Herm Dr. J. Hafellner (Graz) für die Durchsicht des Manuskripts und wert-

volle Diskussionen sowie den Kuratoren der Herbarien E, FH, H, HBG, IMI, K, M, NSW, TRTC

und UPS für die Ausleihe von Belegen.

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ETUDE ULTRASTRUCTURALE DE L'HYMENIUM DE

MORCHELLA DELICIOSA FR. (ASCOMYCETES,

DISCOMYCETES)

M.C. JANEX-FAVRE(U, A. PARGUEY-LEDUC'? et G. BRUXELLES

(1) Laboratoire de Biologie de la Reproduction des Végétaux,

Université Pierre et Marie Curie, 9 Quai Saint-Bernard, Boîte 32,

75252 Paris Cedex 05.

(2) 34, rue du Colonel Fabien, 60160 Montataire.

RESUME - L'évolution des asques et des ascospores, ainsi que les paraphyses de Morchella

deliciosa sont examinées en microscopie électronique à transmission. Les ascospores se forment

classiquement à partir de la fragmentation d'une vésicule ascale. La paroi ascosporale comporte

de l'intérieur vers l'extérieur: une épispore réguliére et stratifiée, une exospore formant une orne-

mentation peu développée, une périspore et une ectospore.

ABSTRACT - Evolution of asci and ascospores as well as paraphyses are studied with trans-

mission electron microscope in Morchella deliciosa Fr. Ascospores are delimited in the classical

way by fragmentation of an ascus vesicle. Ascospore wall comprises from the interior to the exte-

rior: a regular layered epispore, an exospore which forms small ornaments, a perispore and an ec-

tospore.

MOTS CLÉS : Morchella, asques, ascospores, paraphyses, ultrastructure.

Morchella deliciosa Fr., l'une des plus savoureuses Morilles, est une espèce

cosmopolite, répandue dans toute la France, de la plaine jusqu'en montagne, mais

également connue dans divers autres pays d'Europe, en Inde, etc.

Des récoltes répétées nous ont permis d'effectuer diverses observations micro-

scopiques. Les unes, en microscopie photonique, ont porté sur l'organogénèse dans

l'espoir de préciser davantage la position des Morilles au sein des Pézizales. Les au-

tres, que nous présentons dans cet article, ont été effectuées en microscopie

électronique par transmission et sont relatives aux asques. Elles pourraient constituer le

point de départ d'une étude comparative de diverses espèces de Morchella, afin de cla-

rifier la taxonomie de ce genre, encore très confuse. C'est ainsi que pour la Morille

étudiée, il s'agit, selon les auteurs, soit de l'espèce Morchella deliciosa Fr. (Fries,

1846-1849; Boudier, 1897; Grelet, 1932-1959; Jacquetant, 1984) soit d'une variété de

M. conica: M. conica Pers. var. deliciosa Fr. (Breitenbach & Kränzlin, 1981).

Source : MNHN, Paris

22 M.C. JANEX-FAVRE et al.

MATÉRIEL ET MÉTHODES

Les échantillons étudiés ont été récoltés dans le sud de la Picardie

(département de l'Oise), région de faible altitude (50 à 60 m), sur des coteaux calcaires

exposés au Sud-Ouest, herbeux ou peu densément boisés, au cours des hivers 1989 à

1991. Ils ont été traités par les méthodes cytologiques classiques: double fixation par

le glutaraldéhyde à 696 et le tėtroxyde d'osmium A 296, avec tampon de Sórensen, in-

clusion dans la résine de Spurr (1969). Les coupes, effectuées à l'aide d'un

ultramicrotome Reichert OMU 3, ont été contrastées par l'acétate d'uranyle et le citrate

de plomb (18 minutes) ou traitées par la technique de Thiéry (1967); des coupes semi-

fines, colorées par la pyronine, ont été observées au microscope photonique. Les ob-

servations en microscopie électronique ont été faites à l'aide d'un microscope Philips

30.15 sous une tension d'accélération de 80 kV.

RÉSULTATS

L'hyménium qui tapisse la surface des alvéoles est dense et formé d'asques, is-

sus de l'appareil sporophytique, et de paraphyses.

1. L'appareil sporophytique

Situé à la base de l'hyménium, il se distingue aisément de la partie inférieure

des asques et des paraphyses par la forme de ses éléments et leur contenu. Il apparaît

constitué de vésicules irrégulièrement boursouflées, ramifiées, et de boyaux fortement

constrictés par endroits (fig. 1); au niveau de ces constrictions la paroi présente un

début d'invagination, comme lors de la formation d'un septum classique, mais la com-

munication entre les deux articles successifs demeure toujours trés large. Le contenu

des éléments sporophytiques comprend plusieurs petits noyaux, de nombreuses

vacuoles de taille irrégulière et un cytoplasme dense et finement granuleux.

2. Les jeunes asques

Ils se forment suivant plusieurs processus (Chadefaud, 1949), la formation par

l'intermédiaire d'un crochet dangeardien (fig. 1) étant la plus rare. En microscopie

électronique les jeunes asques se reconnaissent à leur contenu: le cytoplasme finement

granuleux comprend de nombreuses petites vacuoles renfermant très souvent un globu-

le opaque. La base des asques est en relation avec la cellule distale d'une hyphe

ascogène par un pore généralement obturé du côté de l'asque par une formation

tronconique relativement opaque (fig. 2).

Très rapidement les asques deviennent longuement cylindriques, mais

légèrement amincis vers la base. Leur volume est presque entièrement occupé par des

vacuoles de taille diverse, contenant ou non un globule opaque. On peut noter que ces

formations ont été également observées dans les asques jeunes d'autres Pézizales

(Gibson & Kimbrough, 1988a; Kimbrough et al., 1990) et chez des Tubérales (Janex-

Favre & Parguey-Leduc, 1976, 1983, 1988; Parguey-Leduc et al., 1987, 1990).

L'ensemble du noyau, volumineux, et de sa zone périnucléaire, finement gra-

nuleuse (fig. 3), se situe vers le milieu de l'asque ou un peu plus haut. Progres-

sivement du glycogėne apparait dans l'asque uninucléé, d'une part dans sa partie

inférieure, au-dessous de la zone nucléaire et d'autre part dans sa partie sommitale où

il est le plus souvent rassemblé en une masse unique (fig. 9, 10, 22), comme cela a

déjà été observé chez Morchella esculenta et Helvella crispa (Merkus, 1976;

Samuelson, 1978d).

Source : MNHN, Paris

HYMENIUM DE MORCHELLA DELICIOSA 23

3. L'ascosporogénèse

Au terme du stade uninucléé, de très petits globules opaques apparaissent en

périphérie de la zone nucléaire, entre le plasmalemme fortement sinueux à ce niveau et

la paroi (fig. 5). Ces dépôts, très réactifs au Thiéry et donc de nature

polysaccharidique, et les sinuosités du plasmalemme s'étendent jusqu'à former une

mince couche (fig. 4, 6, 7). Sur le trajet du plasmalemme se différencient des

lomasomes (fig. 6) ou des enroulements membranaires (fig. 7). Ces dépôts et

différenciations sont en rapport avec l'édification de la vésicule ascale.

Un peu plus tard celle-ci est formée (fig. 8): disposée parallèlement au

plasmalemme, à très faible distance, elle se compose de deux membranes parallèles,

comme cela est classique chez les Euascomycètes. Elle se prolonge dans le

cytoplasme périphérique vers le bas de l'asque et - plus longuement - vers son som-

met; corrélativement le noyau ascal se divise (trois noyaux sont visibles sur la figure

9) et des réserves sont synthétisées: du glycogène, qui forme une plage de plus en plus

étendue parmi les vacuoles de la partie supérieure de l'asque et des lipides, présents

surtout dans le cytoplasme périnucléaire faiblement vacuolisé.

Au stade suivant (fig. 10) la vésicule ascale se subdivise et chacun des frag-

ments formés se replie vers l'intérieur, englobant un noyau et un peu de cytoplasme.

Ainsi ébauchée, l'individualisation des huit ascospores se poursuit: six d'entre elles

sont visibles sur le cliché de la figure 11; fortement tassées les unes contre les autres

elles ont alors une forme trés irréguliére, leur contour dessinant des sinuosités qui,

pour deux ascospores voisines, s'interpénètrent fréquemment. Trois des ascospores sont

encore incomplètement délimitées (fig. 12). Chaque fragment de vésicule ascale

refermé sur lui-même constitue finalement la paroi primordiale d'une ascospore,

formée de deux feuillets parallèles; sur leur trajet sont souvent visibles des lomasomes

(fig. 23) et des corps lamellaires (fig. 13). Le futur sporoplasme, entourant le noyau à

nucléole volumineux (fig. 11) est dense, comportant de petites vacuoles claires, le plus

souvent sans globule opaque, et des globules lipidiques (fig. 11 et 13). Des ilots de

glycogène sont présents dans l'épiplasme, appliqués contre la paroi des trés jeunes

ascospores (fig. 12 et 13).

4. Evolution des ascospores

Progressivement la forme de l'ascospore se régularise: elle devient globuleuse

(fig. 14); son contenu et l'épiplasme avoisinant demeurent inchangés.

Par la suite l'ascospore grossit et devient ellipsoidale (fig. 15) ^ Corré-

lativement la paroi ascosporale primaire se forme, par ėcartement des feuillets de la

paroi primordiale (fig. 16). D'abord peu épaisse et sinueuse, elle s'épaissit et se

régularise. Très rapidement se différencie la partie secondaire de la paroi. La périspore

apparaît sous forme de boursouflures du feuillet externe, qui devient l'ectospore. Ces

boursouflures, d'abord peu saillantes et espacées (fig. 17), se dilatent et tendent à

confluer (fig. 18). Cette périspore contient un dépôt réticulé faiblement opaque et à sa

base un alignement de dépôts plus sombres constituant l'exospore et délimitant, au-

dessous, l'épispore, claire et régulière, appliquée contre le plasmalemme (fig. 18).

Au stade adulte (fig. 19) l'épispore, toujours régulière, apparaît finement

stratifiée et le reste de la paroi forme une ornementation peu saillante, supportée par la

partie basale, opaque, mince et régulière de l'exospore. Cette lame basale produit à

l'intérieur de la périspore fortement rétractée des petites masses hémisphériques opa-

ques, irrégulières, que coiffe l'ectospore, dont le contour est de ce fait fortement si-

nueux.

Source : MNHN, Paris

24 M.C. JANEX-FAVRE et al.

5. Evolution de la paroi ascale

La paroi des jeunes asques est formée de deux couches, d'abord peu distinctes.

l'une de l'autre et d'épaisseur à peu prés semblable (fig. 20) puis mieux individualisées

(fig. 21-et 22), la plus interne claire étant plus épaisse. Ultérieurement (fig. 23) cette

couche interne devient finement stratifiée; la couche externe plus opaque est mal

délimitée vers l'extérieur car en continuité avec le gélin interascal.

Vers le sommet de l'asque, au stade uninucléé, la paroi s'amincit progres-

sivement: la couche: externe y est d'abord seule présente (fig. 21); ensuite la couche

interne apparait, puis s'épaissit tout en demeurant plus mince qu'ailleurs (fig. 22). On

peut noter que dans cette zone sommitale sont Souvent visibles de nombreux

lomasomes (fig. 21 et 22). Le futur opercule est délimité au sommet des asques lors-

que les ascospores sont proches de la maturité, par amincissement annulaire de la pa-

roi (fig. 24).

6. Les paraphyses

Les paraphyses, éléments stériles de l'hyménium, sont aisément identifiables

par rapport aux asques. En effet, elles sont typiquement pluricellulaires, avec une

septation particulièrement dense à la base (fig. 25), et parfois ramifiées. Leur paroi est

formée de deux couches d'épaisseur sensiblement égale, la couche interne étant plus

claire que la couche externe. Au niveau des septums, le pore médian demeure libre ou

est obturé par un bouchon opaque, plus ou moins développé (fig. 27 et 28); des

éléments cristallins, de section allongée ou à facettes, sont fréquemment visibles autour

du pore (fig. 26 à 28), par lequel ils peuvent passer d'une cellule à l'autre (fig. 26).

Le contenu cellulaire des paraphyses, qui peut étre trés différent d'une cellule

à la suivante, comporte très peu de glycogène, contrairement à celui des asques (fig.

26).

DISCUSSION ET CONCLUSION

Après avoir décrit nos observations en microscopie électronique sur les asques

de M. deliciosa, il convient de les comparer à diverses données antérieures. concernant

les asques de Discomycètes (à l'exception de ceux des Inoperculés, d'un type très

différent).

La paroi des asques adultes comporte, comme chez la plupart des Operculés,

deux couches (elles-mêmes subdivisées en deux selon Bellemère, 1977), dont l'externe

est en continuité avec un gélin interascal. Cette paroi s'amincit vers le sommet de

l'asque où se différencie l'opercule, selon un mode Voisin de celui décrit chez une au-

tre espèce de Morille, M. esculenta (Samuelson, 1978d) et chez Oridea leporina

(Samuelson, 1978b). Les lypes décrits chez les autres Pézizales (van Brummelen,

1978; Samuelson, 1978a, b, c et d, et Samuelson et al., 1980) sont plus complexes.

Les septums different selon leur localisation. Ceux observés chez M. deliciosa

entre la base de l'asque et la cellule distale de l'hyphe ascogène génératrice sont plus

simples que ceux antérieurement décrits chez diverses Pézizales (Kimbrough & Curry,

1985, 1986; Kimbrough & Gibson, 1989, 1990; van Brummelen, 1989). Les septums

des paraphyses sont différents. Les éléments cristallins allongés rencontrés chez

l'espèce étudiée ont également été observés dans les paraphyses de deux espèces de

Gyromitre par Kimbrough (1991) et des Corps hexagonaux chez Octospora euchroa

(Kimbrough & Curry, 1986); les auteurs les interprétent comme des corps de Woronin.

Source : MNHN, Paris

HYMENIUM DE MORCHELLA DELICIOSA 25

L'ascosporogénese suit le processus classique des Euascomycètes avec la for-

mation d'une vésicule ascale. Celle-ci se rompt ensuite et chaque fragment est à l'origi-

ne de la paroi primordiale de l'une des huit ascospores. Ce processus se retrouve chez

toutes les Pézizales qui ont été étudiées en microscopie électronique (Carroll, 1966,

1967, 1969; Reeves, 1967; Oso, 1969; Wells, 1972; Codron, 1974; Gibson &

Kimbrough, 1988a; Mims et al., 1990; Wu & Kimbrough, 1992). Rappelons que le

processus d'ascosporogénèse est totalement différent chez les Tubérales (Janex-Favre

& Parguey-Leduc, 1976, 1983, 1988; Parguey-Leduc & Janex-Favre, 1977, 1981;

Parguey-Leduc et al., 1987).

L'évolution de la paroi ascosporale est conforme à celle décrite, avec une ter-

minologie variable selon les auteurs (pour les équivalences, voir Bellemère et al.,

1992), chez diverses Pézizales: d'abord très mince (stade primordial), elle s'épaissit

progressivement tout en restant homogène (stade primaire) puis se subdivise (stade se-

condaire) et sa structure se complique. Au stade terminal, bien que les ascospores des

Morilles soient réputées lisses, l'étude en microscopie électronique à transmission de la

paroi ascosporale de M. deliciosa montre l'existence d'une ornementation, ce qui est en

accord avec les observations en microscopie à balayage effectuées chez plusieurs au-

tres espėces par Malloch (1973) et Berthet et al. (1975). Une ornementation rappelant

celle des ascospores de M. deliciosa a été décrite chez diverses Pézizales, par exemple

chez Gyromitra esculenta (Gibson & Kimbrough, 1988a), des Helvelles (Gibson &

Kimbrough, 1988b), des Gyromitres du sous-genre Discina (Kimbrough et al., 1990) et

Mycolachnea hemisphaerica (Wu & Kimbrough, 1992), mais chez ces espèces il s'agit

seulement d'un stade intermédiaire d'évolution de l'ornementation de la paroi

ascosporale: ultérieurement, en effet, une couche ornementale continue, régulière ou

non, se forme par confluence des masses opaques initialement éparses.

L'ensemble de ces comparaisons montre que l'organisation générale des asques

de M. deliciosa est conforme à celle classiquement décrite chez les Pézizales.

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Source - MNHN. Paris

28 M.C. JANEX-FAVRE et al.

LÉGENDES DES FIGURES

Les coupes utilisées pour cette étude ont été traitées par la technique de Thiéry, à l'ex-

ception de celles correspondant aux clichés 16, 20 et 27, contrastées par l'acétate d'uranyle et le

citrate de plomb.

Sections used in. this study have been treated with Thiéry's test, except those

photographed for figures 16, 20 and 27 (poststained with uranyl acetate and lead citrate).

Fig. 1-3: appareil sporophytique et jeunes asques. Fig. 1: boyau sporophytique et cro-

chet dangeardien; fig. 2: septum basal d'asque; fig. 3: zone médiane d'un jeune asque au stade

uninucléé, Echelle: 2 jum (fig. 1); 1 um (fig. 2 et 3).

Fig. 1-3: sporophytic apparatus and young asci. Fig. 1: sporophytic vesicle and crozier;

fig. 2: basal septum of an ascus; fig. 3: median area of a young uninucleate ascus. Scale: 2 um

(fig. 1); 1 pm (fig. 2 and 3).

Fig. 4-7: différenciation de la vésicule ascale en périphérie de la zone nucléaire. Fig. 4

et 5: apparition de dépóts polysaccharidiques dans l'espace périplasmique; fig. 6: différenciation

d'un lomasome sur le trajet du plasmalemme; fig. 7: vésicule ascale différenciée (flèches) en re-

lation avec un enroulement membranaire. Echelle: 2 um (fig. 4); 1 im (fig. 5); 0,5 um (fig. 5 et

Fig. 4-7: early formation of the ascus vesicle around the periphery of the nuclear zone.

Fig. 4 and 5: polysaccharidic deposits in periplasmic space; fig. 6: lomasome along the

plasmalemma; fig. 7: ascus vesicle (arrowheads) connected with a membranous coil. Scale: 2 um

(fig. 4); 1 um (fig. 5); 0,5 jum (fig. 5 and 7)

Fig. 8-10: évolution de la vésicule ascale. Fig. 8: détail de la vésicule ascale (fleche);

fig. 9: vésicule ascale en périphérie d'un asque plurinucléé (n: noyau; g: plage de glycogene);

fig. 10: invaginations de la vésicule ascale (n: noyau). Echelle: 0,5 um (fig. 8); 2 um (fig. 9 et

10).

Fig. 8-10: ascus vesicle evolution. Fig. 8: detailed view of the ascus vesicle (arrowhead);

fig. 9: ascus. vesicle around the periphery of a plurinucleate ascus (n: nucleus; g: glycogen); fig.

10: invaginated ascus vesicle (n: nucleus). Scale: 0,5 um (fig. 8); 2 um (fig. 9 and 10).

Fig. 11-13: ascosporogėnėse. Fig. 11: sur le cliché trois futures ascospores apparaissent

encore incomplétement délimitées; fig. 12 et 13: détails de la paroi primordiale de jeunes

ascospores (asp.); e: épiplasme. Echelle: 2 um (fig. 11); 025 um (fig. 12 et 13)

Fig. 11-13: ascosporogenesis. Fig. ll: the plate shows that delimitation is not yet

completed for three future ascospores; fig. 12 and 13: details of primordial walls in young

ascospores (asp); e: epiplasm. Scale: 2 um (fig. 11); 0,25 Hm (fig. 12 and 13).

Fig. 14-16: évolution des ascospores. Fig. 14: trës jeune ascospore globuleuse, avec pa-

roi primordiale; fig. 15: ascospore ellipsoidale; fig. 16: détail de la paroi primaire de deux

ascospores. Echelle: 1 Hm (fig. 14 et 15); 0,5 um (fig. 16).

Fig. 14-16: ascospore ontogeny. Fig. 14: globular very young ascospore with primordial

wall; fig. 15: ellipsoidal ascospore; fig. 16: detailed view of the primary wall of two ascospores.

Scale: 1 m (fig. 14 and 15); 0,5 um (fig. 16)

Fig. 17-19: évolution de la paroi ascosporale. Fig. 17: formation de la partie secondaire

de la paroi, composée de l'épispore (ep) interne, de la périspore (pe) en cours de différenciation et

de l'ectospore (ec); fig. 18: dilatation de la périspore et apparition de l'exospore (ex); fig. 19: pa-

roi ascosporale adulte avec ornementation exosporale. Echelle: 0,5 um.

Source : MNHN, Paris

HYMENIUM DE MORCHELLA DELICIOSA 29

Fig. 17-19: development of the ascospore wall. Fig. 17: the secondary part of the wall

comprises the nascent perispore (pe) and the ectospore (ec) onto the cpispore (ep); fig. 18:

inflated perispore and exospore (ex) initiation; fig. 19: adult ascospore wall with exosporal

ornaments. Scale: 0,5 um.

Fig. 20-24: évolution de la paroi de l'asque. Fig. 20: paroi d'une trés jeune asque; fig. 21

et 22: évolution des deux couches de la paroi dans le sommet d'asques jeunes; les flèches indi-

quent des lomasomes; fig. 23: détail d'une paroi plus âgée: fig. 24: délimitation du futur opercule

(entre les flèches). Echelle: 0,5 um (fig. 20 et 23); 1 um (fig. 21 et 24); 2 pm (fig. 22).

Fig. 20-24: development of the ascus wall. Fig. 20: wall of a very young ascus; fig. 21

and 22: development of the two layers of the wall in the apex of young asci; fig. 23: detailed

view of an older wall; fig. 24: the future operculum is delimited (between arrows). Scale: 0,5

um (fig. 20 and 23); 1 im (fig. 21 and 24); 2 um (fig. 22).

Fig. 25-28: paraphyses. Fig. 25: partie basale d'une paraphyse; fig. 26 à 28: septums

avec pore axial obturé ou non par un bouchon. Echelle: 3 um (fig. 25); 1 um (fig. 26 et 27);

um (fig. 28).

Fig. 25-28: paraphyses. Fig. 25: basal portion of a paraphysis; fig. 26-28: septa with

axial pore free or occluded by a plug. Scale: 3 um (fig. 25); 1 um (fig. 26 and 27); 0,5 um (fig.

28).

Source : MNHN, Paris

30 M.C. JANEX-FAVRE et al.

Source : MNHN. Paris

HYMENIUM DE MORCHELLA DELICIOSA 31

Source : MNHN. Paris

M.C. JANEX-FAVRE et al.

Source : MNHN. Paris

HYMENIUM DE MORCHELLA DELICIOSA 33

Source : MNHN. Paris

34 M.C. JANEX-FAVRE et al.

Source : MNHN. Paris

HYMENIUM DE MORCHELLA DELICIOSA 35

Source : MNHN, Paris

M.C. JANEX-FAVRE et al.

Source : MNHN, Paris

HYMENIUM DE MORCHELLA DELICIOSA 37

Source : MNHN, Paris

Source : MNHN. Paris

Cryptogamie, Mycol. 1993, 14 (1): 39-44 39

BLASTOPHRAGMA GEN. NOV. FOR TWO INTERESTING

HYPHOMYCETES FROM SOUTHEAST ASIA

C.V. SUBRAMANIAN

Cenual Institute of Medicinal and Aromatic Plants, Post Bag No. 1,

R.S.M. Nagar P.O., Lucknow-226016, India.

ABSTRACT - Two interesting dematiaceous hyphomycetes are described and their taxonomy dis-

cussed in this paper. Both share several features: simple mononematous conidiophores with inte-

grated apical polyblastic conidiogenous cells and solitary, acrogenous, distoseptate blastoconidia

produced on the conidiogenous cell and its sympodial proliferations. They are accommodated in a

new genus, Blastophragma as two new species: 1. B. subulata on dead twigs of an unidentified

plant from Malaysia, and 2. B. rostrata on dead twigs of Antidesma cuspidatum Muell. (Stilagina-

ceae) from Singapore.

RÉSUMÉ - Deux hyphomycètes dématiés sont décrits et leur taxonomie discutée dans cet article.

Les deux champignons ont des caractères communs: des conidiophores simples mononemés avec

des cellules conidiogènes apicales polyblastiques à proliférations sympodiales, des blastoconidies

acrogénes, distoseptées. Il sont regroupés dans un nouveau genre: Blastophragma en deux

espèces: B. subulata espèce-tÿpe sur rameaux morts non identifiés de Malaisie, et B. rostrata sur

rameaux morts de Antidesma cuspidatum Muell. (Stilaginaceae) à Singapour.

KEY WORDS : Blastophragma, hyphomycetes, taxonomy.

As part of the author's exploration of tropical microfungi, two interesting hy-

phomycetes were collected from south-east Asia during his stay at the National Uni-

versity of Singapore in 1986-87. They are described and their taxonomy discussed, in

this paper.

DESCRIPTION OF THE FUNGI

1. An interesting hyphomycete was collected on dead twigs of an unidentified

plant from the Cameroon Highlands, Malaysia.

The fungus produces effuse, greyish to brown, superficial colonies on the

substratum. The mycelium is composed of repent, branched, subhyaline to brown, sep-

tate hyphae 2-4 jm wide. The conidiophores (figs. 1, 2, 7) are macronematous, mo-

nonematous, crowded, caespitose, erect, straight, bent or flexuous, mostly simple, dark

brown, geniculate and slightly paler in the distal part, thick-walled, septate, 180-265

um long and 4.5-6.0 1 m wide. The conidiogenous cell is apical, integrated and polyb-

lastic (fig. 7). The conidia are acrogenous (fig. 2) on the conidiophore and its sympo-

dially produced successive proliferations (figs. 3-5, 7-9), blastic, solitary, nearly hya-

Source : MNHN. Paris

40 C.V. SUBRAMANIAN

(uU

Figs. 1-10 - Blastophragma subulata ex Type (S 121a). Fig. 1, conidiophores; Fig. 2-9, conidiog-

enesis: stages in the development of primary (Fig. 2) and later conidia (Fig. 3-9), Fig.

10, mature conidia.

Figs. 1-10 - Blastophragma subulata ex Type (S 121 a). Fig. 1, conidiophores; Figs. 2-9,

conidiogenèse: étapes du développement d'une première conidie (Fig. 2) et d'une sui-

vante (Figs. 3-9), Fig. 10, conidie müre.

line, subulate with a flat basal scar, gradually narrowing above, smoothly rounded at

the tip, straight but mostly with a dorsiventrality, smooth, several times (mostly

7-12)-distoseptate, sometimes somewhat constricted at one or more septa, dry,

(15)-19-25 jtm long, 4.5-6.0 um wide (fig. 10). The conidial wall is dark-coloured and

Source : MNHN. Paris

BLASTOPHRAGMA GEN. NOV. 41

dematiaceous; the basal scar of conidium is about 3 um wide. Conidiogenesis is illus-

trated in Figs 2-9.

2. Another interesting hyphomycete with somewhat similar features was col-

lected on dead twigs of Antidesma cuspidatum (Stilaginaceae) from Singapore. A de-

scription of the fungus is given below:

The fungus forms effuse, greyish brown, superficial colonies on the substra-

tum. The mycelium is composed of branched, septate, subhyaline to brown hyphae,

2.5-4.0 um wide. The conidiophores are caespitose, crowded, arising from a dark

brown pseudoparenchymatous stroma (fig. 11), erect, straight, flexuous or bent, dark

brown and thick-walled except in the distal part which is paler, subhyaline and thin-

walled, simple, with a stout basal cell, cylindrical below, somewhat geniculate and

wider above, septate, 80-360 um long and 4-6 jum wide. The conidiogenous part is

31-45 pim long, 4-7.5 jtm. wide. The conidiogenous cell is apical, integrated and polyb-

lastic. The conidia are blastic, solitary, acrogenous on the conidiogenous cell and its

successive sympodially developing, closely spaced proliferations (figs. 12-17), dry,

perfectly hyaline, subobclavate to subfusiform, straight of dorsiventral, smooth-walled,

mostly 4-distoseptate, narrowed to a flattened base below, rostrate at the apex (figs.

17,18), 40-50 um long and 7-10 jim wide. Width of conidial scars is 3-4 um.

TAXONOMY

Both fungi share certain features: both are dematiaceous and produce solitary

conidia blastically and acrogenously on the conidiogenous cell and its successive sym-

podially produced proliferations. The conidiogenous cell is integrated, apical, polyblas-

tic. The conidia are several times distoseptate and have flattened basal scars. Both fun-

gi invite comparison with the genera Pseudospiropes M.B. Ellis and Chionomyces

Deighton & Pirozynski, especially from the solitary phragmoconidia produced blasti-

cally and acrogenously on the conidiogenous cell and its successive sympodially prod-

uced proliferations. Chionomyces is typified by C. meliolicola (Ciferri) Deighton & Pi-

rozynski. It is a moniliaceous (completely hyaline) fungus and is a hyperparasite. The

conidiophores may proliferate both sympodially and percurrently. Three other species

described by Deighton & Pirozynski have similar features and are clearly congeneric.

The two fungi herein described by the author clearly cannot be placed in Chionomyces

since they are dematiaceous and are not hyperparasitic. In Pseudospiropes as typified

by P. nodosus (Wallr.) M.B. Ellis, the conidial scars and the scars on conidiogenous

cells are both cicatrized. These features are also seen in P. simplex (Kunze ex Pers.)

MBB. Ellis (Ellis, 1971). Cicatrized scars are not seen in the two fungi described here.

P. obclavatus M.B. Ellis (Ellis, 1976, fig. 161) has some features of the Malaysian

fungus herein described but in P. obclavatus the conidia may be rugulose or verrucu-

lose and not always smooth. The conidial size also differs. In P. obclavatus the coni-

dial scars do not seem to be cicatrized, but a redisposition of this species cannot be

made without further study. The genus Subulispora Tubaki as typified by S. procurva-

ta Tubaki (apud Tubaki & Yokoyama, 1971, Trans. Mycol. Soc. Japan 12: 20-21) was

also considered as a possible repository for the two fungi described here. In Subulispo-

ra the conidia are produced on an integrated, polyblastic conidiogenous cell, but the

conidia are euseptate and the conidiophore has a radially lobed basal cell typical of the

Beltranieae (see Pirozynski, 1972). The two fungi described here are out of place in

Subulispora also.

Since no genus of dematiaceous hyphomycetes is known to the author in

which the two fngi may be appropriately placed, and since they appear to be congen-

Source : MNHN, Paris

4 C.V. SUBRAMANIAN

Figs 11-18 - Blastophragma rostrata ex Type (S 101

ma; Fig. 12-13, conidiophore with aj

development of primary (Fig.

). Fig. 11, conidiophores arising from a stro-

pical conidiogenous cell. Fig. 14-17, conidiogenesis

14) and secondary (Fig. 15-17) conidia. Fig. 18, mature

conidia

Figs 11-18 - Blastophragma rostrata ex Type (S 101). Fi

stroma, Figs 12-13, conidiophore avec cellule conidiogéne apicale. Figs 14-17,

conidiogenèse: développement d'une première conidie (Fig. 14) et d'une suivante (Figs.

15-17). Fig. 18, conidie müre.

g. 11, conidiophore dressé à partir d'un

Source : MNHN, Paris

BLASTOPHRAGMA GEN. NOV. 43

eric, they are accommodated in a new anamorph genus Blastophragma as two new

species.

Blastophragma Subramanian anamorph gen. nov.

Dematiaceous hyphomycete producing blastic conidia. Conidiophores ma-

cronematous, mononematous, mostly simple, brown, septate. Conidiogenous cell inte-

grated, apical, polyblastic. Conidia hyaline or dematiaceous, solitary, dry, distoseptate,

acrogenous on conidiogenous cell with successive sympodial proliferations.

Hyphomycete dematiacea conidia blastica producens. Conidiophora macro-

nematosa, mononematosa, plerumque simplicia, fusca, septata. Cellula conidiogena in-

tegrata, apicali, polyblastica. Conidia hyalina vel fusca, solitaria, sicca, distoseptata,

acrogena ad cellula conidiogena cum successive sympodialiter proliferationes.

Etym. from Greek, blasto and phragma.

Species typica:

Blastophragma subulata Subramanian anamorph sp. nov.

Colonies superficial, effuse, greyish to brown. Conidiophores caespitose,

erect, straight, bent or flexuous, dark brown, geniculate and paler in the distal part,

thick-walled except in the distal part, septate, 180-265 um long, 4.5-6.0 um wide.

Conidiogenous cell integrated, apical, polyblastic. Conidia solitary, blastic, dry, acroge-

nous on conidiophore and successive sympodial proliferations, nearly hyaline (wall de-

matiaceous), subulate with flat scar, narrowed above, smoothly rounded at tip, straight,

mostly dorsiventral, smooth, 7-12-distoseptate, sometimes constricted at one or more

septa, (15)-19-25 um, 4.5-6.0 um wide.

Type: on dead twigs of unidentified plant, Cameroon Highlands, Malaysia, 7

May 1987, coll. C.V. Subramanian, No. S 121 (a).

Coloniae effusae, griseae vel brunneae. Conidiophora caespitosa, erecta, recta

vel flexuosa, fuscoatra, apicem versus pallidiora, crassitunicata, apicem versus tenuitu-

nicata vel geniculata, septata, 180-265 wm longa, 4.5-6.0 um lata. Cellula conidiogena

terminalia, in conidiophoris incorporata, polyblastica. Conidia acrogena ex cellula

conidiogena et sympodialiter proliferationes, solitaria, sicca, laevia, leniter dematiacea,

subulata, recta vel dorsiventralia, 7-12-distoseptata, nonnumquam vix constricta ad

septa, (15)-19-25ym longa, 4.5-6.0 wm lata.

TYPUS lectus ad ramulos emortuos ignota, Cameroon Highlands, Malaysia,

leg. C.V. Subramanian, 7 May 1987, subnumero S 121 (a).

Blastophragma rostrata Subramanian anamorph sp. nov.

Colonies superficial, effuse, greyish brown. Conidiophores caespitose, arising

from dark brown pseudoparenchymatous stroma, erect, straight, flexuous or bent, sim-

ple, cylindrical below, wavy and wider above, brown and thick-walled, geniculate and

paler and thinner walled distally, 80-360 um long, 4-6 tm wide; apical cell conidioge-

nous, polyblastic. Conidia solitary, dry, blastic, acrogenous on conidiogenous cell and

Successive sympodial proliferations, hyaline, subobclavate to subfusiform, rostrate,

mostly 4-distoseptate, straight or dorsiventral, smooth, with flat basal scar, 40-50 um

long, 7-10 um wide.

TYPE: on dead twigs of Antidesma cuspidatum Muell. (Stilaginaceae), McRit-

chie Reservoir, Singapore, Coll. C.V. Subramanian, 26 March 1987, No S 101.

Source : MNHN. Paris

4 C.V. SUBRAMANIAN

Coloniae effusae, griseo-brunneae. Conidiophora caespitosa, erecta, recta vel

flexuosa, simplicia, cylindrica, fusca, crassitunicata, apicem versus pallidiora vel tenui-

tunicata vel geniculata, 80-360 um longa, 4-6 m lata. Cellula apicali conidiogena, po-

lyblastica. Conidia solitaria, sicca, acrogena ad cellula apicali cum successive sympo-

dialiter proliferationes, hyalina, — subobclavata vel subfusiformis, rostrata,

4-distoseptata, recta vel dorsiventralia, laevia, 40-50 um longa, 7-10 ym lata, cum hi-

lum basali.

TYPUS lectus ad ramulos emortuos Antidesmae cuspidatae Muell. (Stilagina-

ceae), McRitchie Forest, Singapore, leg. C.V. Subramanian, 26 March 1987, subnume-

ro S 101.

ACKNOWLEDGEMENT

This work was carried out during the tenure of an INSA Senior Scientist Award to me

The CSIR supported a Project on Taxonomy and Distribution of Microfungi. I thank the Indian

National Science Academy and the Council of Scientific and Industrial Research for the support

and the Director, CIMAP, Lucknow for having me work here and for all facilities.

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Source : MNHN, Paris |

Cryptogamie, Mycol. 1993, 14 (1): 45-54 45

PHIALICORONA PLEOMORPHA GEN. ET SP. NO

AND ITS SYNANAMORPHS

C.V. SUBRAMANIAN

Central Institute of Medicinal and Aromatic Plants, Post Bag No. 1,

R.S.M. Nagar P.O., Lucknow-226016, India.

ABSTRACT - An interesting dematiaceous phialidic polymorphic hyphomycete collected on Ca-

narium littorale Blume (Burseraceae) from Singapore is described. The characteristic apical

crown of phialides, the slimy one-celled conidia and the robust mostly unbranched phialophores

are distinctive. In addition, the association of three synanamorphs, assigned here to Sporidesmiel-

la, Selenosporella and Heteroconium, is unique. The taxonomy of the fungus is discussed. It is

accommodated in a new genus, Phialicorona, as a new species, P. pleomorpha.

RÉSUMÉ - Description d'un hyphomycëte dématié phialidique (pléomorphe) récolté sur

Canarium littorale Blume (Burseraceae) à Singapour. La couronne apicale de phialides, des

conidies unicellulaires muqueuses et les phialophores robustes, généralement non ramifiés sont

caractéristiques. L'association de trois synanamorphes rapportées aux genres Sporidesmiella,

Selemosporella et Heteroconium est unique. Un genre nouveau: Phialicorona et une espèce nou-

velle, Ph. pleomorpha sont proposés.

As part of the programme of work on microfungi of the tropics, the author is

currently engaged in a study of his collections from Singapore made during his stay at

the National University of Singapore in 1986-87. An interesting fungus was collected

on bark of Canarium littorale Blume (Burseraceae). The fungus is described and its

taxonomy is discussed in this paper.

DESCRIPTION OF THE FUNGUS

The fungus forms brown to brackish velvetty colonies on the substratum. The

mycelium is superficial, composed of thin-walled, hyaline to subhyaline to straw-

coloured, septate, branched hyphae 2-4 um wide, becoming thick-walled and brown to

dark brown later. The conidiophores arise from the hyphae and are of three kinds

representing three morphs: a phialidic morph for which a name has to be found, a

gangliar morph which appears to be a Sporidesmiella, a third which is a

Selenosporella; yet another synanamorph, tentatively assigned to Heteroconium, may

also be present.

THE PHIALIDIC MORPH

The phialophores arise from cells of vegetative hyphae, often along with

Sporidesmiella conidiophores from the same hypha or from the same cell (Fig. 1, 2)

Source : MNHN, Paris.

46 C.V. SUBRAMANIAN

Figs. 1-8. Phialicorona pleomorpha and its synanamorphs. Figs. 1-3, phialophores showing

connection with Sporidesmiella (Fig. 1, 3) and Heteroconium (Fig. 1) synanamorphs, the

longer conidiophore in fig. 3 is a Sporidesmiella conidiophore in which a phialide

Cluster has developed from the conidiogenous and conidial cells. Figs. 4-7, phialide

clusters, conical (Fig. 4, 6), subglobose (Figs. 5, 7). Note slender filiform phialoconidia

attached to phialides in Figs. 5-7. Fig. 8, a Sporidesmiella conidiophore with

Selenosporella conidiogenous cells developing on the conidium. Figs. 2, 4-6 ex S 32,

the rest ex TYPE (No S 33). Bar connotes 10 um.

Source : MNHN, Paris

PHIALICORONA PLEOMORPHA GEN. ET SP. NOV. 47

quite often close to each other. The basal cell of the phialophore is often swollen and

large, 10-12 pm tall, 10-11 um wide. A number of simple rhizoid-like hyphae may

arise from the basal cell (Fig. 9) though often creeping or trailing on the surface of the

substratum. Such rhizoidal hyphae may not always be present (Fig. 2). The

phialophores are macronematous, mononematous, stout, erect, straight or bent, simple,

up to 7-septate, 50-100 um long, 4.5-9.0 um wide, 4.5-6.0 um wide at the tip, brown

to dark brown, thick-walled, cylindrical to subcylindrical, bearing a complex and com-

pact apical cluster of phialides directly on the phialophore (Fig. 4) or on the stipe and

its penicillus of branches, branches and phialides usually arising from immediately

below a septum (Fig. 14). The entire apical phialidic cluster simulates a cone in shape

(Fig. 4-6) or may be globose or subglobose (Fig. 1, 7), 13-40 um jtm tall, 13-40 um

wide, mostly the height exceeding the width. The phialides (Fig. 14) vary in shape but

typically they are lageniform or have a globose body and short narrow pointed neck,

hyaline to subhyaline, thin-walled, smooth, 5.0-7.5 um long, and 3-4 um wide. The

phialoconidia (Fig. 5-7, 20) are solitary, hyaline, small, bacillar, one-celled, thin-

walled, smooth, solitary, slimy, 4-5 um long and 1.5 um wide. The development of

phialides and phialide clusters is shown in Figs. 17-19.

Tt has not been easy to fing a suitable generic name for this phialidic fungus.

On the basis of its key features, viz., the simple phialophores crowned by a complex

and closely packed cluster of phialides and the solitary, slimy, one-celled

phialiconidia, it invites comparison with the following genera: Goidanichiella Arnaud

ex Barron, Gloiosphaera v. Hoehnel and Phialocephala Kendrick. In Goidanichiella

(type species G. scopula (Goidanich) Barron: Barron, 1968; Arnaud, 1953), the

phialides arise from a terminal globose swelling on the phialophore. The phialophore

in the present fungus lacks an apical swelling and so cannot be placed in

Goidanichiella. For this reason, it is also quite distinct from Stachybotrys Corda,

Gliocephalis Matruchot and the recently described Knoxdaviesia Wingfield, van Wyk

& Marasas (1988). In Gloiosphaera (type species: G. globulifera v. Hoehnel = G.

clerciana (Bondier) v. Hoehnel: Wang, 1971; Pollack & McNight, 1972) the

phialophore is hyaline, becoming pale yellow with age, simple and septate; the distal

and apical cells are fertile. Metulae arise from below septa, several per cell from each

of these cells and each metula in turn bears a cluster of phialides. The phialides are

subulate to filiform. The conidia are solitary, slimy, oval, hyaline and one-celled. In

the present fungus, the phialophores are distinctly dematiaceous and the phialides arise

directly on the phialophore at its tip and from below septa, several per cell (Fig. 14):

the apical cell and a few subterminal cells on the stipe are phialidiferous. Frequently,

short branches may arise from below septa from a few distal cells immediately below

the apical cell and these branches bear clusters of phialides at their apices and laterally

below septa when the branches are septate. The branches form a penicillus at the apex

of the phialophore (Fig. 13, 14). These features distinguish the present fungus from

Gloiosphaera and other genera. In Phialocephala (type species, P. dimorphospora

Kendrick) (Kendrick, 1961), the phialophore is simple and bears apically a penicillus

or system of primary and succession of superimposed branches and the ultimate bran-

Figs. 1-8. Phialicorona pleomorpha et ses synanamorphes. Figs. 1-3, phialophores montrant la

relation avec les synanamorphes de Sporidesmiella (Fig. 1, 3) et Heteroconium (Fig. 1).

Le long conidiophore (Fig. 3) est un Sporidesmiella où un bouquet de phialides s'est

développé sur des cellules conidiogènes et conidiennes. Figs 4-7, bouquets de phialides

coniques (Figs. 4, 6) et subglobuleuses (Figs. 5-7). Fig. 8, conidiophore de

Sporidesmiella avec des cellules conidiogènes de Selenosporella se développant sur la

conidie. Figs. 2, 4-6 ex S 32, les autres ex Type (N° S 33). Echelle = 10 Hm.

Source : MNHN Paris

48 C.V. SUBRAMANIAN

ches bear finger-like phialides each with a prominent cup-like collarette from within

which endogenously cleaved out and differentiated conidia are produced: the conidia

are 1-celled, subglobose, and slimy. The present fungus is clearly not congeneric with

P. dimorphospora.

Conidiogenesis in P. dimorphospora is also quite different (see Carroll &

Carroll, 1974; Subramanian; 1983, p. 70; Wingfield, van Wyk & Wingfield, 1978).

There are several genera of dematiaceous phialidic hyphomycetes in which the

phialophores are setiform, e.g. Kionochaeta Kirk & Sutton and Zanclospora Hughes &

Kendrick (Kirk & Sutton, 1985). The present fungus stands apart from all of them in

that the phialophore is not setiform and bears a complex apical cluster of phialides.

So far as the author is aware, there is no hyphomycete genus known in which

this phialidic anamorph can be appropriately placed. Accordingly, it is accommodated

in a new genus, Phialicorona as a new species, P. pleomorpha.

PHIALICORONA Subramanian anamorph. gen. nov.

(Etym. from Latin, Phialid — vessel, cup; corona = crown, apical cluster).

Dematiaceous hyphomycete producing phialoconidia. Mycelium composed of

branched, septate, subhyaline to brown hyphae. Phialophores macronematous,

mononematous, simple, erect, brown, septate, terminating in a compact cluster of

phialides. Basal cell of phialophore often subtended by simple, rhizoid-like radiating

hyphae. Phialides arising at the tip of the apical cell and from below septa on a few

subterminal cells, also from cells of penicillate, septate, short branches arising from

below septa on cells subterminal to the apical cell of the phialophore, lageniform,

hyaline to subhyaline. Conidia solitary, hyaline, one-celled, slimy.

PHIALICORONA Subramanian anamorph gen. nov.

Hyphomycete dematiacea phialoconidia producente. Mycelium ex hyphis

ramosis, septatis, subhyalinis vel brunneis compositum. Phialophora macronematosa,

mononematosa, simplicia, erecta, brunnea, septata, une racemi compacti phialides

terminata. Cellula basalis saepe e hyphis simplicis rhizoideis vel radiatis oriunda.

Phialides in apicibus phialophororum vel in cellulibus subterminalibus phialophororum

vel ramorum infra septa in verticillio evolutae, hyalinae vel subhyalinae, lageniformes.

Conidia solitaria, hyalina, continua, mucosa.

Synanamorphoses: Sporidesmiella, Selenosporella, Heteroconium.

Type species: Phialicorona pleomorpha Subramanian anamorph sp. nov.

Colonies velvetty, brownish to blackish. Mycelium superficial, composed of

thin-walled, smooth, hyaline to subhyaline, septate, reticulately branched hyphae 2-4

lim wide, becoming thick-walled, brown to dark brown later. Phialophores arising

from vegetative hyphae, often along with Sporidesmiella and/or Selenosporella

conidiophores. Basal cell swollen, large, often with simple, rhizoid-like, radiating

hyphae, 10-12 jm tall, 9-11 im wide. Phialophores macronematous, mononematous,

stout, erect, straight or bent, simple, up to 7-septate, 50-100 jtm long, 4.5-9.0 um

wide, 4.5-6.0 um at the tip, brown to dark brown, thick-walled, cylindrical to

subcylindrical, bearing a complex and compact apical cluster of phialides directly on

the phialophore or on the stipe and its penicillus and branches; branches and phialides

usually arising from immediately below septa. Phialide cluster cone-like or globose to

subglobose, 13-40 um tall, 13-40 um wide, the height usually exceeding the width.

Phialides lageniform or globose with short narrow neck, hyaline to subhyaline, thin-

Source : MNHN, Paris.

PHIALICORONA PLEOMORPHA GEN. ET SP. NOV. 49

walled, smooth, 5.0-7.5 jm long, 3-4 pm wide. Conidia solitary, small, hyaline,

bacillar, one-celled, thin-walled, smooth, slimy, 4-5 um, 1.5 m wide.

Synanamorphs present: Sporidesmiella, Selenosporella, Heteroconium.

Type: on bark of Canarium littorale Blume (Burseraceae), Botanical Garden,

Singapore, 12.ii.1987. Coll. C.V. Subramanian, Subnumero S 33.

Other Collection: on bark of Canarium littorale, Botanical Garden, Singapore,

12.11.1987, Coll. C.V. Subramanian, Sub numero S 32.

Descriptions of synanamorphs follow:

The Sporidesmiella synanamorph

The Sporidesmiella synanamorph is common and attracts immediate attention

not only by its conspicuousness but also its occurrence and origin from the same

hyphae from which the phialophores (of the Phialicorona state) or the Selenosporella

conidiophores arise (Fig. 1, 2, 9). The conidiophores are generally longer than the

phialophores (Fig. 1, 2, 9), 135-280 um long, 4.5-6.0 um wide, 3.7-4.5 um at the

apex, simple, macronematous, mononematous, erect, straight or bent, dark brown,

cylindrical, thick-walled, 6-11-septate, arising laterally from repent hyphae. The basal

cell is large, swollen, brown, thick-walled, 10-12 jm tall and 9-11 jum wide and may

be subtended by simple, radiating rhizoid-like hyphae (Fig. 10). The conidiogenous

cell is integrated, apical and percurrent (Fig. 11, 12, 22). The conidia are hyaline to

subhyaline, short-clavate, smoothly rounded at the apex, unequally 1-septate,

sometimes 2-3 septate, gangliar, solitary, acrogenous on the conidiogenous cell and its

percurrent proliferations (Fig. 11, 12). The one-septate conidia are 9-17 um long and

5-7 um wide and the 3-septate ones 30-35 pim long, 8-10 m wide. Some conidia

suggest an endogenous origin (Fig. 21) from the conidiogenous cell whose wall is split

to expose the developing conidium and the conidiferous part of the conidiogenous cell

then presents a cupular aspect (Fig. 11, 12, 22). Surprisingly, no detached or free

conidia have been seen and it looks as if they are not easily shed. And yet, the occur-

rence of one or two closely spaced annellations on the conidiogenous cell (Fig. 12)

suggests percurrent proliferation followed by conidiogenesis. A conidium may

sometimes be produced subterminally and laterally (Fig. 13, 23) from below the

septum cutting off the apical conidium. These conidia are also gangliar. Occasionally,

a few phialides or even clusters of phialides may be produced from the conidiogenous

cell, subterminal to the apical conidium (Fig. 24-26). A conidium may also produce in

situ Selenosporella (Fig. 28, 29) or Phialicorona conidiogenous cells (Fig. 24-26).

The taxonomic disposition of this synanamorph is not easy. Neither

Endophragmia Duvernoy & Maire (see Hughes, 1979) nor "Endophragmia auct" as

treated by Ellis (1971, 1976) is suitable. The closely annellated, integrated, apical

conidiogenous cell, the genesis of the conidia and their general morphology and

distoseptation suggest that the nearest, though not the best, disposition could be in

Sporidesmiella P.M. Kirk (1982). In the type species of this genus, S. claviformis P.M.

Kirk, the conidia are clavate and (2-)distoseptate as in the present fungus.

Accordingly, this synanamorph is assigned to Sporidesmiella, but tentatively, as

detached conidia have not been observed despite the abundance of conidiophores

bearing conidia.

The Selenosporella synanamorph

The Selenosporella synamorph is observed frequently, though it is not as

conspicuous as the Sporidesmiella synanamorph. The conidiophores are very much like

Source : MNHN, Paris

50 C.V. SUBRAMANIAN

Figs. 9-16. Phialicorona pleomorpha and its synanamorphs. Fig. 9, association of phialophores

with Sporidesmiella and Heteroconium morphs. Note rhizoidal hypahe radiating from

basal cell of phialophores and the Sporidesmiella conidiophore. Fig. 10, basal part of

Sporidesmiella conidiophore showing swollen basal cell and radiating, creeping thizoid-

like hyphae. Fig. 11, 12, Sporidesmiella conidiophores with attached conidia. Fig. 13,

phialide cluster showing disposition of phialides on main stipe and on the penicillus of

septate branches. Fig. 14, another phialide cluster (note conidium attached to a phialide)

and a Sporidesmiella conidiophore with a terminal conidium and a subterminal lateral

one. Fig. 15, 16, conidiophore and conidia of the Heteroconium synanamorph. Note in

Fig. 16 origin of the Heteroconium conidiophore from the hypha that gives rise to a

Phialicorona phialophore. Note also chain of Heteroconium conidia. Figs. 9-10, 12-16

ex Type (S 33), the rest ex N* S 32. Bar connotes 10 um.

Source : MNHN, Paris

PHIALICORONA PLEOMORPHA GEN. ET SP. NOV. 51

those of the phialidic and the Sporidesmiella morphs: the basal cell is conspicuous, up

to 10-12 um wide and 9-11 jim tall, and may be subtended by simple, rhizoid-like

hyphae. The conidiophores are generally longer than the Phialicorona phlialophores,

but slightly shorter than conidiophores of the Sporidesmiella morph, up to 6-septate,

110-160 jm long, 6.0-7.0 um wide, 3.7-4.5 um wide at the apex; they are

macronematous, mononematous, simple, erect, straight or bent, brown, cylindrical to

subcylindrical, thick-walled and septate. The conidiogenous cells (Fig. 27) are discrete

and form a terminal diverging cluster on the conidiophore: terminal on the apical cell,

and lateral and subseptal on a few subapical cells. They are polyblastic, somewhat

paler than the rest of the conidiophore, 10-18 jtm long, 3.0-5.2 um wide, each with up

to a dozen scars. The conidia are solitary, hyaline to subhyaline, obovate, thin-walled,

smooth, dry, 6.0-7.5 um long and 2-3 um wide.

The simple, brown, mononematous, septate conidiophores, the apical cluster of

characteristic polyblastic conidiogenous cells and the solitary, one-celled, dry conidia

suggest that Selenosporella could be a suitable genus to which this synanamorph can

be assigned. Selenosporella conidiogenous cells can arise sometimes from cells of

conidia of the Sporidesmiella morph (Fig. 28, 29), though this is rare.

The Heteroconium synamorph

What has been tentatively identified as a Heteroconium state is always present

- physically linked to hyphae from which conidiophores of the Phialicorona and the

Sporidesmiella states arise (Fig. 1, 9, 15, 16). The vegetative hyphae are pale to straw-

coloured, turning brown, branched, thin-walled, smooth, septate, connected directly to

thizoid-like hyphae or to vegetative hyphae of the Phialicorona or other state (Fig. 1,

16). The conidiophores are mononematous, short, mostly terminal on hyphae, up to 20

um long, 3-5 um wide, septate, subhyaline to brownish. The conidiogenous cell is

integrated, apical and monoblastic. The conidia are formed in simple acropetal chains,

separating easily, cylindrical, flattened or smoothly rounded at both ends, subhyaline

to brown, mostly 1-3-septate, sometimes up to 5-septate, smooth, dry, 10-20 jm long

and 3-4 uim wide (Fig. 15).

From mere observation of detached conidia one may be tempted to consider

this a Bahusakala or a Septonema. The relatively short and simple conidiophores and

the simple acropetal chains of blastic phragmoconidia suggest a Heteroconium rather

than a Septonema. The type species of Heteroconium Petrak, H. citharexyli Petrak

(see Ellis, 1971, 1976) is a foliicolous fungus: other species in this genus, viz. H.

chaetospira (Grove) M.B. Ellis, H. solaninum (Sacc. & Syd.) M.B. Ellis, and H.

tetracoilum (Corda) M.B. Ellis are quite distinct from Septonema and perhaps also

Figs. 9-16. Phialicorona pleomorpha et ses synanamorphes. Fig. 9, association de phialophores

avec les formes Sporidesmiella et Heteroconium. On note les hyphes rhizoidiennes

rayonnantes à partir de la base des phialophores et des conidiophores de Sporidesmiella.

Fig. 10, partie basale d'un conidiophore de Sporidesmiella montrant une cellule basale

élargie et des hyphes rhizoidiennes rayonnantes. Fig. 11, 12, conidiophores de

Sporidesmiella avec une conidie attachée. Fig. 14, bouquet de phialides montrant la po-

sition des phialides sur le stipe principal et sur les branches cloisonnées. Fig. 13, autre

bouquet de phialides (noter la conidie attachée à la phialide) et conidiophore de

Sporidesmiella avec une conidie terminale et une latérale subterminale. Fig. 15, 16,

conidiophore et conidie de la synanamorphe Heteroconium. Figs. 9-10, 12-16 ex Type

(S 33), les autres ex N° S 32. Echelle = 10 um

Source : MNHN, Paris.

52 C.V. SUBRAMANIAN

Figs. 17-29. Phialicorona pleomorpha and its synanamorphs. Figs. 17-19, development of

phialides and phialide cluster. Fig. 20, a phialide cluster with several conidia still

attached to the phialides. Figs. 21-22, development of Sporidesmiella conidia: note

endogenous development in Fig. 21. Fig. 23, a Sporidesmiella conidiophore with conidia

developing terminally and subterminally. Figs. 24-26, a Sporidesmiella conidiophore

showing the development of phialides thereon. Fig. 27, distal part of Selenosporella

conidiophore and the characteristic conidiogenous cells. Fig. 28, 29, a Sporidesmiella

conidiophore showing development of Selenosporella conidiogenous cells from the

conidia and conidiogenous cell. Note conidium attached to conidiogenous cell in Fig. 28

Figs. 20-23 ex N° S 32, the rest ex Type N° S 33. Bar connotes 10 um.

Source : MNHN, Paris

PHIALICORONA PLEOMORPHA GEN. ET SP. NOV. 53

from Heteroconium. The present fungus has also some features of Xylohypha (Fries)

Mason, especially the easy secession of the conidia, but Xylohypha by description has

typically l-celled (rarely 2-celled) conidia and the conidial chains may be branched

occasionally. Tentatively, this synamorph is assigned to Heferoconium.

Phialicorona pleomorpha Subramanian anamorph sp. nov.

Coloniae velutinae, brunneolae vel atrae. Mycelium superficiale, ex hyphis

tenuitunicatis, laevis, hyalinis vel subhyalinis, septatis, reticulatim ramosis, 2-4 um

latis, posterius crassitunicatis vel brunneis vel atrobrunneis compositum. Phialophora

ex cellulis hypharum mycelialium inflatis (circa 10-12 Wm altes, 9-11 ym latis)

lateraliter oriunda, macronematosa, mononematosa, robusta, erecta, recta vel flexa,

simplicia, usque ad 7 septata, 50-100 um longa, 4.5-9.0 um lata, 4.5-6.0 um lata ad

apicem, brunnea vel atrobrunnea, crassitunicata, cylindrica vel subcylindrica, une

racemi compacti phialides terminata; cellula basalis saepe e hyphis simplicis,

rhizoideis vel radiatis, 10-12 um latis, oriunda. Phialides in apicibus phialophororum

vel in cellulibus subterminalibus phialophororum vel ramorum infra septa in verticillis

evolutae, hyalinae vel subhyalinae, lageniformes, laeviae, 5.0-7.5 x 3-4 m. Conidia

solitaria, hyalina, bacillaria, continua, tenuitunicata, laevia, mucosa, 4.5 x 1.5 um.

Synanamorphosae: Sporidesmiella, Selenosporella, Heteroconium.

Typus: in cortice Canarii litorali Blume, (Burseraceae), horto botanico,

Singapore, leg. C.V. Subramanian, 12.2.1987 Subnumero S 33.

Alliae collectione: in cortice Canarii littorali Blume, horto Botanico,

Singapore, leg. C.V. Subramanian, 12.2.87 Subnumero S 32.

ACKNOWLEDGEMENT

This work was carried out during the tenure of an INSA Senior Scientist Award to me.

The CSIR supported a Project on Taxonomy and Distribution of Microfungi. I thank the INSA

and the CSIR for the support and the Director, CIMAP, Lucknow for having me work here and

for all facilities given.

REFERENCES

ARNAUD G., 1953 - Mycologie Concréte: Genera II (suite et fin). Bull. Soc. Mycol. France 69:

265-306.

Figs, 17-29. Phialicorona pleomorpha et ses synanamorphes. Figs. 17-19, développement des

phialides en bouquet. Fig. 20, bouquet de phialides avec conidies encore attachées aux

phialides. Figs. 21-22, développement des conidies de Sporidesmiella. On note le

développement endogene de la conidie figure 21. Fig. 23, conidiophore de

Sporidesmiella avec conidies terminale et subterminale. Figs. 24-26, phialides se

développant sur un conidiophore de Sporidesmiella. Fig. 27, partie distale d'un

conidiophore de Selenosporella avec cellules conidiogènes caractéristiques. Fig. 28, 29,

conidiophore de Sporidesmiella avec développement de cellules conidiogènes de

Selenosporella à partir de conidies et de cellules conidiogenes. Fig. 28, on note la

conidie encore attachée à la cellule conidiogène. Fig. 20-23 ex N° S 32, le reste ex

Type N° S 33. Echelle = 10 um

Source : MNHN, Paris.

54 C.V. SUBRAMANIAN

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ULL COMPATIBILITY AND FERTILITY OF POLYPORUS

ARCULARIUS FROM SPAIN AND COSTA RICA.

Maria NUNEZ

Department of Biology, Division of Botany, University of Oslo, P.O.

Box 1045, Blindern, N-0316 Oslo 3, Norway.

ABSTRACT - Monospore isolates of Polyporus arcularius Batsch:Fr. from Spain and Costa Rica

were paired and found to be genetically compatible. Basidiocarp formation following compatible

mating was achieved in one isolate. The basidiospore progeny was viable and responded to the

expected sexual polarity of the species. The taxonomic circumscription of P. arcularius based on

macro- and micromorphological characters is consistent with the results obtained from compat-

ibility tests.

RÉSUMÉ - Les mycéliums monospermes de Polyporus arcularius Batsch: Fr. d'Espagne et de

Costa Rica ont été confrontés et se sont révélés étre compatibles. La formation d'un basidiocarpe

a été obtenue après confrontation. La descendance des basidiospores est viable et répond à la

polarité typique de l'espèce. La délimitation taxonomique de P. arcularius basée sur des

caractères macro- et micromorphologiques est confirmée par les résultats des tests de

compatibilité.

INTRODUCTION

P. arcularius Batsch:Fr. is a cosmopolitan species with variable

morphological features (Gilbertson & Ryvarden, 1987). The species is heterothallic

and tetrapolar, and has heterocytic nuclear behavior (David & Romagnesi, 1972).

Basidiocarp production in culture from sympatric populations has been

reported (Kitamoto et al., 1968). However, the role of geographical isolation as a sour-

ce of genetic or morphological divergence in this species has never been evaluated.

MATERIALS AND METHODS

Basidiocarps of P. arcularius were collected from two localities:

- Bosque de la Hoja, Heredia Province, Costa Rica. 19 June 1991. MN63.

- Road from Miraflores to Puerto de La Morcuera. Madrid. Spain. 6 June

1991. MN68.

Voucher specimens are deposited in the Herbarium of Oslo University (O).

A spore suspension from sporeprints of each basidiocarp was spread over 9

cm Petri dishes with Water Agar (KEBO Lab AB).

Source ` MNHN Paris

56 M. NUNEZ

Germlings were picked under a binocular microscope and transferred to 2%

Malt Extract Agar (MEA).

Three monospore isolates each from Costa Rica and Spain, chosen at random

were paired at room temperature on 2% MEA (Table I). Polarity tests were not

performed with them beforehand.

ISOLATES 63.1 63.2 63.3

68.1 + + +

68.2 + + +

68.3 + + +

Table 1. - Pairings between monospore isolates from Spain (68) and Costa Rica (63).

Tableau 1. - Confrontation des mycéliums monospermes d'Espagne (68) et de Costa Rica (63)

Two weeks after contact between monospore mycelia had been established,

pairings were assessed for the presence of clamps. Mycelian nuclei were coloured

following the procedure described by Laane (1970).

Secondary mycelium from the interface zone of each pairing was subcultured

to confirm the constancy of clamps.

To achieve pilear development from one of the positive matings where a stipe

started to form, ventilation and humidity were controlled following Kitamoto et al.

(1968).

A polarity test was performed with nine monospore isolates from the

basidiocarp developed in culture to confirm the tetrapolar heterothallism previously

reported for this species (Vandendries, 1923).

RESULTS

Clamps and binucleate mycelium were consistently observed in all pairings

between monospores isolates from Costa Rica and Spain (Fig. 1). A stable, secondary

mycelium began to spread radially in the Petri dish (Fig. 2).

One week after the 63.2 x 68.1 secondary mycelium covered the Petri dish, a

stipe was initiated and a pileus was formed within five days (Fig. 3).

The polarity test performed with basidiospores from this basidiocarp gave the

results shown in Table 2. Occurrence of either common A or common B

incompatibility factors (Takemaru, 1961) was not detected.

A comparison between several morphological characters of the basidiocarps

from Costa Rica, Spain and the 63.2 x 68.1 isolate respectively shows that the radial

arrangement of pores and spore size are the only consistent characters (Table 3).

Source : MNHN. Paris

POLYPORUS ARCULARIUS 57

Figure 1. Hyphae from the secondary mycelium formed after compatible pairing of isolates from

Spain and Costa Rica (63.2 x 68.1). Two nuclei per cell, and clamps connections can be

observed.

Figure 1. - Hyphes du mycélium polysperme obtenues après la croissance compatible des cultures

d'Espagne et de Costa Rica (63.2-68.1). On peut observer des hyphes binucléées et des

boucles.

Figure 2. - Secondary mycelium formed after 63.2 x 68.1. The mycelial growth proceeds stably,

and no somatic incompatibility zone has been formed

Figure 2. - Mycélium polysperme obtenu après 63.2 x 68.1. Le mycélium se développe

uniformément. Aucune surface d'incompatibilité n'est formée.

Figure 3. Basidiocarp developed from the secondary mycelium shown in Fig. 2. The basidiocarp

was fertile (see text).

Figure 3. - Basidiocarpe obtenu à partir du mycélium polysperme de la Figure 2. Le basidiocarpe

est fertile.

Source : MNHN, Paris:

58 M. NUNEZ

iss | 6ss | 7ss | 8ss | 2ss | 4ss | 3ss | 5ss | 9ss

1ss - + + - = " s: A

6ss E * - - - - -

7ss - - - - - -

8ss - - - - -

2ss - * * *

4ss * + F

3ss = 3

5ss =

Table 2. Polarity tests between monospore isolates from the basidiocarp obtained in culture.

"Single spore isolate" is abbreviated as "ss". A - sign indicates incompatibility.

Tableau 2. - Tests de polarité entre des mycéliums monospermes du basidiocarpe obtenu en

Culture. "Culture monosperme" a été abrégée comme "ss". Le signe - indique

l'incompatibilité.

COLOUR PORES PEGS SIZE (um)

MN63 dark glabrous ciliate * * 1-2 7-9 x 2.5

brown per mm

MN68 yellow villose nude + - 1-2 d-9X 2-2.8

per mm

CULTURE | yellow | glabrous nude + - >1 7-9 x 2.5

per nm

Table 3. Comparison of morphological features between collections of P. arcularius from Costa

Rica (MN63), Spain (MN68) and the one produced in culture. A + sign indicates

presence of a feature. A - sign indicates absence.

Tableau 3. - Comparaison des caractères morphologiques entre des récoltes de P. arcularius de

Costa Rica (MN63), d'Espagne (MN68) et de celle obtenue en culture. Le signe + indi-

que la présence du caractère. Le signe - indique l'absence du caractère.

Source : MNHN, Paris

POLYPORUS ARCULARIUS 59

DISCUSSION

The concept of "biological species" in fungi (Vandendries, 1923) is widely

accepted as the basis of species delimitation (Boidin & Lanquetin, 1977; Hallenberg,

1984). Mating compatibility is considered sufficient to indicate cospecificity, due to

the difficulty of producing basidiocarps in culture (see opposite cites).

Ainsworth et al. (1992) provided evidence of genetic heterogeneity in the

secondary mycelia of outcrossing populations of Stereum, a case not found in P.

arcularius.

Compatibility tests are useful in delimiting the distribution area of a species on

a wide basis. As in the case of P. arcularius, geographic isolation may not be the

factor that initiates the speciation process, even if gene flow between allopatric popu-

lations is substantially nonexistent (Levin, 1979).

The observed morphological differences may be due to phenotypic adaptations

to environmental factors, or to genetic differences that do not interfere with mating

processes (Vilgalys, 1991).

Production of basidiocarps and viable basidiospores after positive mating of P.

arcularius demonstrates that compatibility in this species also comprises fertility.

ACKNOWLEDGEMENTS

J. Santos is acknowledged for providing material from Spain, C. Whist for taking the

photograph in Fig. 3, and L. Ryvarden, A. Masuka and A.D.M. Rayner for comments that

improved this manuscript. The Norwegian Agency for Science and Humanities and the Spanish

Ministery of Foreign Affairs provided financial support.

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DIFFERENTIAL ACTION OF CERCORAN AND TOPSIN-M

ON SENSITIVE AND TOLERANT STRAINS

OF TOXIGENIC FUNGI

H.A.H. HASAN

Botany Department, Faculty of Science, Assiut University,

Assiut, Egypt.

ABSTRACT - The effect of Cercoran and Topsin-M, on physiological activity and mycotoxin

production by sensitive strain of Aspergillus fumigatus and tolerant strain of A. flavipes, was stud-

jed in both liquid medium and maize grains. Cercoran and Topsin-M inhibited the mycelial

growth and sterigmatocystin production by À. fumigatus in liquid medium and maize grains at

oncentrations varying from 0.5 to Sppm and 5 to 50 ppm, respectively. Respiration was en-

anced at 1 ppm of Cercoran and 1 and 5 ppm of Topsin-M, and inhibited at higher concen-

trations, Citrinin production by A. flavipes was completely inhibited by Topsin-M at 250 ppm in

liquid medium and 500 ppm on maize grains. Cercoran at 100 ppm induced 100 % inhibition in

itrinin production in both liquid medium and maize grains. Mycelial respiration of A. flavipes

vas significantly promoted with the higher treatments of both Cercoran and Topsin-M. Fatty ac-

ids content of maize grains was decreased after 10 days of infection.

RÉSUMÉ - L'effet du fongicide Cercoran et d'un de ses composés, Topsin-M, a été étudié sur

l'activité physiologique et la production de mycotoxine par une souche sensible d'Aspergillus

fumigatus et une souche résistante d'Aspergillus flavipes, à la fois en milieu liquide et sur grains

le mais. Dans les 2 conditions de culture, les 2 produits inhibent la croissance mycélienne et la

production de stérigmatocystine par A. fumigatus, à des concentrations de 0,5 à 5 ppm et 5 à 50

»pm respectivement. La respiration, accrue à 1 ppm de Cercoran et 1 à 5 ppm de Topsin-M, est

inhibée aux concentrations plus élevées. La production de citrinine par A. flavipes est totalement

inhibée par 250 ppm de Topsin-M en milieu liquide et 500 ppm sur grains, et dans les deux

conditions par 100 ppm de Cercoran. La respiration d'A. flavipes a augmenté de façon significa-

live en présence de concentrations élevées en Cercoran et Topsin-M. Le contenu en acides gras

des grains de mais a diminué aprés 10 jours d'infection

KEY WORDS : Cercoran, Topsin-M, sterigmatocystin, citrinin.

INTRODUCTION

Fungal deterioration of stored grains is a common phenomenon reducing both

its quality and inducing hence its commercial value. Citrinin occurred as co-contami-

nants in cereals associated with porcine nephropathy (Krog et al., 1973). Ciegler et al.

(1977) and Arai & Hibino (1983) has shown citrinin to be teratogenic in chicken

embryos and inducing renal tumors in rats. Sterigmatocystin is reported to be both he-

patotoxic and carcinogenic (Lillehoj & Ciegler, 1968; Purchase & Van Der Watt,

1968). Therefore, citrinin and sterigmatocystin are regarded as important mycotoxins

Which may be ingested by man and animals.

Source : MNHN, Paris

62 H.A.H. HASAN

Because of the widespread occurrence of fungi and mycotoxins in agricultural

commodities, effective control measures by chemicals or fungicides (which are rela-

tively safe) for post-harvest treatment are still in need. Cercoran is composed of two

components, Topsin-M (Tiphanate group) and Thiram (Dithiocarbamate group). Thio-

phanate group represented a new era in fungicide use when they were introduced in

the late 1960's. They are effective at relatively low doses for the inhibition of a broad

range of fungi. Topsin-M converted in solution into methyl benzimidazole carbamate

(MBC) (Aelbers, 1971; Bollen, 1972) which was toxic 10-fold more than that of par-

ent compound (Vonk & Sijpesteijn, 1971). Ueda & Yoshizawa (1988) found that

Topsin-M resulted in the remarkable decrease in contamination levels of trichothecene

toxins produced by F. graminearum on wheat and barley grains. Dithiocarbamate

group represents the most effective fungicide against various mycotoxin-producing

fungal isolates (Waginger et al., 1982). Thiram is employed to control fusarial wilt of

wheat mould of corn seeds, polysporiosis of flax, ascochitosis of peas, etc.

Experiments were undertaken to determine if, and to what extent, Cercoran

and its component Topsin-M affect fungal growth, respiration and mycotoxin pro-

duction (citrinin and sterigmatocystin) by toxigenic isolates (sensitive and tolerant to

benzimidazole), both in liquid medium and on maize grains. Also, they were undertak-

en to determine the quantitative change in fatty acids content of maize grains.

MATERIALS AND METHODS

Liquid medium:

50ml portion of Czapek-Dox medium were dispensed into each of 250 ml Er-

lenmeyer conical flasks. The flasks were sterilized at 1.5 atmosphere for 30 min. Fun-

gicides [Topsin-M or Thiphanate-methyl 70 96 (1,2-bis(3-methoxy carbonyl-2-thiourei-

do) benzene) and Cercoran or Thiophanate-methyl 5096 + Thiram 30% (Bis (dimethyl

thio-carbomoyl) disulphide)] were dissolved in ethanol and incorporated to the steri-

lized medium. The solvent without fungicide was added to the control. Spore suspen-

sion of benzimidazole-sensitive strain of A. fumigatus and tolerant strain of A. flavipes

was made separately in sterile distilled water. One ml (approx 10° spores) was intro-

duced under aseptic conditions into the flasks. The cultures were incubated at 28°C for

7 days as stationary cultivation. Six flasks of each treatment and control were used

for analysis.

1 - Determination of mycelial dry weight

The mycelial of 7 days old cultures were harvested by filtration, washed twice

with distilled water, dried over night at 80°C, allowed to cool in a desiccator and then

weighed.

2 - Determination of CO, evolved

Mycelial respiration was measured by continuous air current method adopted

by Kyo Sato (1981). CO, evolved from mycelia of treated and untreated fungal spe-

cies was adsorbed in 0.5 N NaOH solution. Titration was carried out for the unneutral-

ized NaOH with 0.5 N HCl after addition of an excess amount of 3 N BaCl;.

Source : MNHN. Paris

CERCORAN AND TOPSIN-M 63

3 - Mycotoxin analysis

a. Extraction procedure

The culture of each treatment was extracted with chloroform, and the extract

was concentrated in vacuum. The dry material was transferred to l-dram vials with

small amounts of chloroform, and the solution was evaporated to dryness under a

stream of nitrogen.

b. Chemical detection of mycotoxins

Mycotoxins were dissolved in the chloroform and separated by thin-layer chro-

matography on Silica Gel 60-coated plates using chloroform-methanol (97:3) as sol-

vent for stregmatocystin and ethanol-25% ammonia-water (80:4:16) for citrinin. Sterig-

matocystin was determined according to the method of Josefsson & Müller (1977).

Citrinin was visualized under long wavelength UV light, scraped off TLC plates and

quantified by the colorimetric method of Damodaran et al. (1973).

Maize grains:

25 g of moistened (40% H,O) autoclaved maize grains in 250 ml Erlenmeyer

flask were treated with different concentrations of Topsin-M and Cercoran on the basis

of active ingredient. The flasks were inoculated with spore suspension of each A. fumi-

gatus and A. flavipes. The cultures were incubated at 28°C for 10 days for evaluating

citrinin and sterigmatocystin productions and changes in fatty acids content.

1 - Mycotoxins analysis

The samples were extracted with chloroform on rotary shaker for 24 h. The

chloroform extract was filtered, concentrated, cleaned up and determined as previously

mentioned.

2 - Fatty acid analysis

The infected grains were homogenated in chloroform-methanol (2:1). The sus-

pension was filtered through a G, glass filter. Fatty acids (as oleic acid) were deter-

mined spectrophotometrically by phosphovanillin method of Zöllner & Kirsch (1962).

Statistical analysis of the results

The least significant difference analysis (L.S.D.) was employed for statistical

analysis of the results.

RESULTS AND DISCUSSION

The effect of Cercoran and Topsin-M on mycelial dry weight, respiration and

productions of stregmatocystin by Aspergillus fumigatus and citrinin by A. flavipes in

liquid medium was shown in table 1. The growth of A. fumigatus was significantly in-

hibited by Topsin-M at concentrations of 1, 5, 10 and 25 ppm and completely elimi-

nated at 50 ppm. The growth of A. flavipes was significantly enhanced at 50 ppm, in-

hibited at 250 ppm and completely eliminated at 500 ppm.

Rama Devi & Polasa (1984) reported that Bavistin (MBC) at concentration of

25-100 ppm enhanced the growth of A. versicolor. At 250 ppm there was an inhibi-

tion of growth. MBC interferes with nuclear division of A. nidulans (Davidse, 1973,

1976). Also, Bielenin (1987) found that the susceptible isolates of Pezicula alba were

Source : MNHN. Paris.

H.A.H. HASAN

“əpinbt| əxmmitnə uə sədtani/ `V 1ə snp5nu

-nf y sed um op 19 əunsKoolpuušuə)s ap uonənpo3d | 19 uonentdsə; p| 'əuuətl95tu əouesslox2 e[ ms tm)O313O np 19 IW-utSdo l. np 19JJd :1 neəlqe1

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"Lana $6 3e [04302 9Q3 03 pojeduoo a2u249jj1p jue21j1UDIS sueay .

0000 — «070 - 000 «00 07001 »0*0 - 0001 +0'0 07001

6°08 +0'68£ »9'ttz 6'99 0'922 07001 x00 = toai »070 0°05 T

8'24 x07655 +6'26 = x0°8S/ 0:001 ¥0°0 - 0'00l +0'0 0700 E

8'2v ¥0°99LL »L'86 E 02 07001 »0*0 - ool +0'0 o's 5

0:61 ¥0°€S9L 2'£8 š x0*0£L S'EL +0:92 «l'llz 8'£2 »0'6S O'l E

601 0'8l8l 0'25 Ë 0'502 2°95 +6'20 lop G8 x0 bli $70 Š

= 0*6012 Usp ë 0'169 = »0'pll 6'£9 a 0'708 l'O

0°00L 0°0 = 0001 »0°0 0*00L +0'0 - 0001 x00 07008

0001 — «00 +2'SvL 9“ LV +0'86£ 0*001 *0°0 = 0001 x00 0:0S2

VS »0'0£6 x8796 E »0'85L 0*00L »070 - 0001 +0°0 0705 x

Bree x0" vSGL xL = 0'2lL 07001 »070 »t'lb 0726 «0'bLt 0'852 Š

5 01512 $99 9'S 0*tb9 0*00L »070 x2'2€ 670b »0'l9b — 0'OL 2

S 076212 l'év 82 0'£99 0*00L x0°0 +8:59 0702 +0'629 O'S 8

= 0: t£22 2'£v Br 0*0/9 5 Er gl 6'£9 0791 +0'SS9 O'L

= 0*0b02 v'8b E 0'289 s 0°86 wos - 0°082 0

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-tqıyu 73^ Kup b/6n b/óu -iqtqu] [w oor /5bu u135A9 6/6w -iqtuu] qu 001/Pw

X utut t3 209 4 “qm hag PL193S 02 x "m Aug

sedraerz ^v snaebrung *V

Source : MNHN. Pari:

CERCORAN AND TOPSIN-M 65

completely inhibited at 0.1 ppm of Benomyl, but the resistant isolate was not affected

at 1000 ppm of Benomyl and Bavistin.

CO, evolution by mycelia of the sensitive isolate of A. fumigatus exhibited

two significant responses of activation at 5 ppm and inhibition at 10 and 25 ppm Top-

sin-M. The respiration of the tolerant isolate of A. flavipes was increased at 25, 50 and

250 ppm. Stimulation of respiration has been observed by Naguib et al. (1982).

They demonstrated that the low gain in dry weight by patoran treatment was coupled

with remarkable increase in respiration. Naguib (1969) found that sevin inhibited res-

piration and mycelial growth of R. solani. Buchanan et al. (1987) recorded that Mico-

nazole inhibited respiration and altered mitochondrial ultrastructure.

Sterigmatocystin production by A. fumigatus was enhanced at 1 ppm, but

10096 inhibited at 5 ppm Topsin-M. Citrinin production by A. /lavipes was inhibited

by 23.8, 54.5 and 10066 at concentrations of 50, 250 and 500 ppm, respectively. Rama

Devi & Polasa (1984) noted that Bavistin at lower concentrations stimulated aflatoxin

production. At 250 ppm, Bavistin inhibited stregmatocystin production in synthetic liq-

uid medium. Sevin, Carbofuran and Metalkamate (Carbamate insecticides) at 100 ppm,

inhibited aflatoxin production by 55, 47 and 97% respectively, in YES broth (Draugh-

ton et al., 1983).

Cerconan (Topsin-M + Thiram) was toxic 10-fold more than Topsin-M (table

1). It inhibited the mycelial growth of A. fumigatus at 0.5, 1 and 5 ppm. The mycelial

growth of A. flavipes was enhanced at concentrations of 0.1 to 10 ppm, but inhibited

by 66.9 % at 50 ppm. Stimulation of growth has been observed in A. flavus IMI 89717

cultures treated with 10 and 100 ppm of Rizolex-Thiram (Hasan, 1988). Waginger et

al. (1982) found that a mixture of different Dithiocarbamate fungicides proved to be

most effective against various mycotoxin-producing fungal isolates.

Respiration was significantly promoted in mycelia of both aspergilli, at differ-

ent concentrations of Cercoran, 0.1 and 1 ppm in A. fumigatus and 5, 10 and 50 ppm

in A. flavipes. Respiration was stimulated by Linuron at 5 to 20 ppm in P. funiculo-

sum (Bakalivinov, 1972), by Afugan at 18 ppm in P. chrysogenum and by Brominal at

32.4 ppm in A. niger (Omer, 1991).

Sterigmatocystin and citrinin productions were increased at lower concen-

trations of Cercoran treatment. At higher levels, sterigmatocystin was inhibited by

73.5% at | ppm and citrinin was inhibited by 72.8% at 10 ppm. Sharma & Padwal

Desai (1989) stated that Benomyl and Carbendazim stimulated biosynthesis of aflatox-

ins at 0.8 ppm, while they were inhibited at higher concentrations. It is assumed that

Benzimidazoles, near the minimal inhibitory concentration, reduce the activity of tricar-

boxylic acid cycle, This may lead to an accumulation of acetyl coenzyme A, which is

an essential intermediate in the biosynthesis of aflatoxin. Hasan (1988) found that Ri-

zolex-Thiram inhibited production of citrinin by P. chrysogenum and P. corylophilum

at 100 ppm and aflatoxin by A. flavus IMI 89717 at 25 ppm.

The effect of Topsin-M and Cercoran on production of sterigmatocystin by A.

fumigatus and citrinin by A. flavipes on maize grains, in addition to the changes in fat-

ty acids content of grains were shown in table 2. Sterigmatocystin was inhibited by

65.5% at 5 ppm of Topsin-M and by 70.9% at 1 ppm of Cercoran. Citrinin was inhib-

ited at 250 ppm of Topsin-M by 69.6% and by Cercoran at 50 ppm by 54.2%.

Inhibition of mycotoxin production had been previously discussed by Rama

Devi & Polasa (1984). They concluded that Carbendazim inhibited sterigmatocystin

production by A. versicolor on maize grains and its flour at 500 ppm. Draughton &

Churchville (1985) reported that Maneb (Dithiocarbamate), Carbofuran, Metalkamate

Source : MNHN. Paris

H.A.H. HASAN

fumigatus

flavipes

Fungi- — Conc.

cies 0 0 SS T MA Fatty acid

ppm — ug/50g % mg/g seed ug/S0g — & mg/g seed

e TM w Tar

0 — 23.0 - 32.4 694.0 - 29.9

1.0 23.8 - 30.8 722.0 - 27.0

M 5.0 — 7.7* 66.5 37.4" — 736.0 - 25.5

š 10.0 — $.4* 76.5 39.2* 666.0 4.0 26.9

Ž 25.0 — 3.8* 83.5 40.1* — 583.0* 16.0 27.8

£ 50.0 — 0.0 100.0 42.0* — 416.0* — 40.0 29.4

250.0 0.0 100.0 44.0* — 21.0* 69.6 34.4*

500.0 — 0.0 100.0 44.0* 0.0* 100.0 44.0*

0.1 24.5 - 664.0 4.3 27.1

0.5 23.0 - 672.0 3.2 30.4

1.0 6.7* 70.9 708.0 - 34.2

5.0 — 0.0* 100. 597.0* — 14.0 38.9"

10.0 — 0.0* 100.0 541.0* — 22.0 41.0*

50.0 — 0.0* 100.0 318.0* — 54.2 43.1*

100.0 — 0.0* 100.0 0.0 100.0 44.0*

* Means significant difference compared to the control

at 5$ level.

Table 2: Effect of Topsin-M and Cercoran on mycotoxin production and fatty acids content by

the toxigenic aspergilli on maize grains.

Tableau 2: Effet du Topsin-M et du Cercoran sur la production de mycotoxines et le contenu en

acides gras par les Aspergillus toxiques sur grains de mais.

and Sevin (Carbamate) inhibited zearalenone by F. roseum var. graminearum in corn

kernels by 100, 97, 77 and 94%, respectively. Also, Ueda & Yoshizawa (1988) found

that Topsin-M resulted in the remarkable decrease in trichothecene levels produced by

F. graminearum on wheat and barley grains.

Utilization and degradation of fatty acids by each of A. fumigatus and A. fla-

vipes on maize grains was suppressed at different concentrations of Topsin-M and Cer-

coran. Treatment of banana fruits with Bavistin at a concentration of 2000 ppm pre-

vented fruit decay and mycotoxin production by various

Gourishankar, 1983; Ved Ram & Dharm Vir, 1984).

fungi (Reddy &

Source - MNHN. Paris.

CERCORAN AND TOPSIN-M 67

CONCLUSION

Ten-fold more toxicity of Cercoran, compared to Topsin-M, is due to Thiram.

This result agrees with the finding of Lo (1978). He reported that Homai (Cercoran)

gave a better control of seed-borne organisms than Topsin-M. A. fumigatus was sensi-

tive 10-fold more than A. flavipes to both fungicides. Martin et al. (1984) have re-

ported that Rhizoctonia solani and binucleate Rhizoctonia- like fungi were sensitive to

Benomyl (EDs) 10 ppm), whereas isolates of P. zeae were tolerant of Benomyl (EDs)

ppm). Gessler et al. (1980) concluded that adsorption of MBC in sub-lethal rates was

higher in mycelium of MBC-sensitive strains of Botrytis cinerea and F. lycopersici

than in resistant ones.

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Source : MNHN. Paris

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Source : MNHN, Paris?

Cryptogamie, Mycol. 1993, 14 (1): 69-74 69

ANALYSES BIBLIOGRAPHIQUES

GULDEN G., JENSSEN K.M., STORDAL J., 1985 - Arctic and Alpine Fungi - 1 -

Oslo, Soppkonsulenten (Wesselsgt. 3, 0165 Oslo 1, Norway), 62 p., 25 fig., 25

phot. col. (ISBN 82-991301-0-7). NOK 125,-

GULDEN G. and JENSSEN K.M., 1988 - Id. - 2 - Ibid., 58 p., 25 fig., 25 phot. col.

(ISBN 82-991301-1-5). NOK 210,-

SENN-IRLET B., JENSSEN K.M., GULDEN G., 1990 - Id. - 3 - Oslo, Sopp-

konsulenten A/S (Lyngveien 3, N-1430 Ás), 58 p., 25 fig., 25 phot. col. (ISBN

82-991301-2-3). NOK 200,-

SCHUMACHER T. and JENSSEN K.M., 1992 - Id. - 4 - Ibid., 66 p., 25 fig., 25

phot. col., 2 pl. SEM (ISBN 82-991301-3-1). NOK 200,-.

Créée en 1985, la collection "Arctic and Alpine Fungi" qui est dotée d'une il-

lustration photographique trës réussie, vient de publier sa quatriëme livraison. Celle-ci

est consacrée aux Discomycëtes alors qu'auparavant, seuls des Basidiomycëtes avaient

été présentés. Le nombre des espëces considérées jusqu'ici, réparties dans 46 genres,

se trouve donc porté à une centaine puisqu'un fascicule comprend 25 fiches descrip-

tives, toutes établies sur le même modèle et amovibles.

Pour chaque espèce, la fiche propose l'analyse des caractères macro- et micro-

scopiques observés chez les carpophores. Ces indications sont accompagnées d'une

photographie en couleurs prise sur le terrain et de dessins au traits montrant les

particularités des structures hyméniales. Enfin, aux notes sur l'écologie, la distribution

géographique et la nomenclature s'ajoutent diverses remarques concernant notamment

les taxons voisins.

De nombreux renseignements sur la flore fongique des régions élevées en alti-

tude comme en latitude sont apportés sous forme de généralités, mais aussi d'études

régionales qui permettent de mieux mettre en évidence les aspects mycologiques dis-

tinctifs de ces milieux à climat rigoureux et à végétation si remarquable. Ainsi, deux

contrées norvégiennes, un domaine alpin dans le canton de Berne et, bien au-dessus du

cercle polaire arctique, l'île principale du Spitzberg, dans l'archipel du Svalbard, ont

été examinés. Outre leur intérêt pour la connaissance de la répartition mondiale des

champignons, ces observations ont également une réelle importance au point de vue

taxinomique. En effet, quelques combinaisons nouvelles sont proposées par les Au-

teurs, tandis que les genres sont envisagés plus précisément sous l'angle de leur

représentation en zones arctico-alpines. Il apparait alors que Arrhenia, Clitocybe,

Cortinarius, Entoloma, Galerina, Helvella, Hygrocybe, Lactarius, Omphalina, par

exemple, y possédent un bon développement.

En complément de travaux sur le méme sujet, cette collection de belle facture

offre véritablement une documentation de grande qualité.

J. Perreau

Source : MNHN, Paris

70 ANALYSES BIBLIOGRAPHIQUES.

NOORDELOOS M.E., 1992 - Entoloma sl. Fungi Europaei n° 5. Italie, 21047

Saronno, Libreria editrice Giovanna Biella, 760 p., 288 fig., 88 pl. col. (texte

en italien; traduction en anglais des généralités, clés et descriptions).

Aprés Agaricus, Boletus, Tricholoma et Lepiota, la série des Fungi Europaei

s'attache, pour son cinquième volume, au vaste ensemble des Entolomes, Ces

Basidiomycètes à spores roses si particulières dans leur configuration sont représentés

sous toutes les latitudes, depuis les régions tropicales jusqu'aux zones alpines. En Eu-

rope, près de 250 espèces ont été distinguées par l'Auteur au cours de plus de quinze

ans de récoltes et d'observations. Mais un tel inventaire n'est peut-être pas exhaustif,

En effet, le concept d'espèce a été établi uniquement sur des critères morphologiques,

sans tenir compte pour l'instant d'autres considérations, notamment phylétiques ou

biochimiques, qui, lorsqu'elles seront envisagées, amèneront vraisemblablement quel-

ques retouches dans la systématique de ces champignons.

En tant que monographie générique, l'ouvrage ne s'écarte pas de la tradition-

nelle division en trois grandes parties. Débutant par l'historique des connaissances sur

les Entolomes, les généralités exposent les caractères macro- et microscopiques des

basidiocarpes. Elles apportent également des indications sur la distribution

géographique et les exigences écologiques des espèces dont certaines constituent des

mycorrhizes avec des arbres dans les haies ou en forêt.

La partie taxinomique comprend plusieurs clés qui conduisent d'abord à la dis-

tinction des sous-genres et des sections, puis à la détermination au niveau spécifique.

Ainsi est introduite l'analyse descriptive proprement dite de chaque taxon, illustrée,

pour les espéces, de dessins au trait et d'une aquarelle. L'iconographie en couleurs - de

fort belle facture, comme toujours dans cette collection - constitue la troisième partie

d'une étude détaillée qui s'achève sur une abondante bibliographie et des index. On no-

tera que le nom latin de l'Entolome livide, bien connu pour sa toxicité, redevient E.

sinuatum (Bull. ex Pers.: Fr.) Kummer.

Avec cette remarquable contribution à la compréhension d'un groupe impor-

tant, les mycologues disposent donc pour assez longtemps d'une synthése taxinomique

et nomenclaturale de valeur.

J. Perreau

SOCIETAT CATALANA DE MICOLOGIA, Ed. - Bolets de Catalunya. 1992, XI

col.lecció, 50 pl. col. (n? 501 à 550) sous encart. LS.S.N. 0212-3460.

La Société Catalane de Mycologie poursuit la publication de son atlas des

champignons de Catalogne avec un nouvel ensemble de cinquante superbes photogra-

phies en couleurs, représentant aussi bien des Basidiomycètes que des Ascomyedtes.

Chaque planche plastifiée fait office, au verso, de fiche descriptive tandis que, sur l'en-

cart, sont donnés divers renseignements accompagnant les indispensables conseils de

récolte.

J. Perreau

CONSTANTINESCU O., 1991 - An Annotated List of Peronospora Names.

Thunbergia N° 15. 110 p. Distributed by Botanical Museum, Uppsala

University.

Des entités génériques regroupées dans l'ordre des Péronosporales, le genre

Peronospora Corda (1837) est celui qui comporte le plus grand nombre de binómes

connus. Ainsi des 787 espèces de Peronospora proposées à ce jour, les descriptions de

Source : MNHN, |

ANALYSES BIBLIOGRAPHIQUES 71

551 d'entre elles satisfont aux exigences du Code de Nomenclature Botanique. Ces

laxons ont été à l'origine proposés comme étant des champignons parasites de 271

genres de plantes supérieures appartenant à 48 familles. Il est toutefois probable que le

nombre de plantes-hótes susceptibles d'étre parasitées par des Peronospora soit plus

élevé. Les Peronospora révèlent une large distribution géographique, surtout dans les

régions tempérées et certains sont responsables d'importantes maladies de cultures in-

dustrielles et vivrières.

Actuellement, il n'existe pas d'ouvrage taxonomique moderne traitant de l'en-

semble des Peronospora connus. En 1923, Gaumann publiait une monographie portant

sur 243 espèces seulement. Ce document demeure encore largement consulté de nos

jours. Dans ce contexte, cette importante compilation des noms de Peronospora, de-

vient un document essentiel pour des recherches plus approfondies sur la systématique

de ces champignons. Ces recherches devront surtout résoudre les problèmes de

typification des binômes et, ensuite, envisager une série d'études comparatives des

champignons parasitant, par exemple, une seule famille végétale. En effet, et au regard

du nombre de binômes répertoriés pour ce genre, une étude monographique exhaustive

représente une entreprise de très longue haleine.

Comme le souligne l'auteur, les mycologues ont pendant longtemps souscrit à

l'hypothèse qu'une plante-hôte était parasitée par une seule espèce. Cette pratique sou-

vent non fondée, conduit à nommer des spécimens sur la simple base du nom du sup-

port végétal, sans examen microscopique approfondi; elle conduit également, dans le

cadre des études taxonomiques entreprises, à négliger le réexamen de matériel authen-

tique de binômes publiés depuis longtemps.

Cette synthèse des noms publiés des Peronospora est une analyse critique des

informations de base connues pour chaque espèce rattachée à ce genre. Pour chaque

binôme est précisé le nom de l'auteur, la référence bibliographique de la description,

l'hôte, la localité d'origine et la localisation géographique des spécimens authentiques,

le tout quelquefois accompagné de commentaires sur la position taxonomique réelle,

Un système simple de codage, précisé dans l'introduction, est employé pour désigner la

localisation des spécimens, le statut nomenclatural et la validité taxonomique. Dans la

plupart des cas, l'auteur a vérifié la localisation géographique du spécimen original et

de sa source bibliographique. Enfin, des binômes recensés, 653 représentent des

Peronospora; la description d'une centaine ne répond pas toutefois aux critères de no-

menclature. Par ailleurs, des 134 taxons n'appartenant pas au genre Peronospora, 88

relèvent d'autres genres rattachés au même ordre. Enfin, deux combinaisons nouvelles

sont proposées.

Cet excellent travail taxonomique de base est le fruit d'une importante recher-

che, patiemment menée sans défaillance, depuis de nombreuses années. Les moyens

informatiques actuels facilitent sans conteste ce type d'étude que seule une

persévérance continue permet toutefois de mener à terme. En mycologie, il existe mal-

heureusement encore beaucoup de genres comme Peronospora, pour lesquels il est ur-

gent de préparer d'abord des documents de cette nature.

J. Mouchacca

BLANCARD D., LECOQ H. et PITRAT M., 1991 - Maladies des Cucurbitacées: Ob-

server, Identifier, Lutter. Institut National de Recherches Agronomiques, 17

rue de l'Université, 75007 Paris, 301 p.

Le but principal de cet ouvrage est de "permettre au lecteur d'identifier les ma-

ladies parasitaires et non parasitaires des principales Cucurbitacées cultivées et de l'in-

Source : MNHN. Paris

72 ANALYSES BIBLIOGRAPHIQUES

former sur les méthodes de lutte à mettre en oeuvre pour les combattre". Sa concep-

tion paraît originale, puisque l'organisation de l'ouvrage n'est pas établie en fonction de

la nature des agents responsables des maladies mais plutôt en fonction des symptômes

qui les caractérisent; il s'adresse donc à un public bien particulier, habitué à une recon-

naissance aisée des divers types d'altérations induits par le développement des

microorganismes, responsables de la plupart de ces maladies. La presque totalité des

maladies parasitaires (ou non parasitaires) sévissant sur Concombre, Courges, Melon et

Pastèque dans le bassin méditerranéen et en Europe y sont traitées et sont facilement

identifiables.

Après une courte préface et une introduction, les auteurs présentent deux pa-

ges d'un texte clair introduisant le mode particulier d'utilisation de cet ouvrage. Vien-

nent ensuite quelques informations générales sur les modes de lutte. Le corps de l'ou-

vrage comporte deux parties. La première, relativement la plus importante, rassemble

deux cents pages; elle est conçue pour être un véritable outil de diagnostic facilitant

l'observation des plantes malades, grâce à une iconographie rassemblant 412 photogra-

phies en couleur et plusieurs figures au trait. Cet outil est aisément consultable; il fait

intervenir des symptômes définis simplement. Il est également pédagogique et devrait

permettre au lecteur d'acquérir progressivement la démarche et les nombreux réflexes

indispensables pour établir un diagnostic fiable. Sont ainsi traitées les anomalies et les

altérations des divers organes de la plante: feuilles (forme, coloration, flétrissement et

desséchement), racines, collet, portion de tiges proches du sol, fleurs et fruits. Dans la

seconde partie (qui regroupe prés d'une cinquantaine de pages) et une fois l'identifica-

tion effectuée, le lecteur trouvera pour chaque micro-oraganisme parasite, une fiche

comportant des données sur ses principales caractéristiques biologiques ainsi que les

méthodes de lutte à mettre en oeuvre. En plus des mesures immédiates suggérées, des

recommandations sont également formulées, lorsque cela est possible, pour prévenir la

maladie au cours de la culture suivante. Des chapitres sont alors consacrés aux divers

types d'agents pathogènes: bactéries, champignons attaquant les feuillages ou respon-

sables de maladies racinaires, vasculaires et de pourritures des fruits, nématodes et, en-

fin, virus répartis en fonction de leur mode de transmission.

L'ouvrage se complète par trois courtes annexes et un index. Les annexes trai-

tent brièvement des maladies des jeunes plantules, des dégâts causés par les principaux

ravageurs des Cucurbitacées et de Cuscutte, des genres de Cucurbitacées cultivées et

des variétés résistantes de leurs espèces. L'index répertorie séparément les micro-

organismes cités, les maladies parasitaires, les prédateurs et les photos afférentes à

chaque type d'anomalie.

Comme on peut s'y attendre pour ce type d'ouvrage, les photos en couleur se

remarquent par leur abondance et leur qualité. Le choix approprié du papier d'impres-

sion permet un rendu très satisfaisant de cette remarquable iconographie, résultat d'une

sélection rigoureuse au niveau de la représentativité du document. Le texte accompa-

gnant les photos est clair, précis et bien aéré.

Il ne fait nul doute que cet ouvrage de qualité, bien illustré, répondra très lar-

gement aux besoins pour lesquels il a été conçu. Une édition en langue espagnole et

également anglaise élargissent le champ d'utilisation de cet ouvrage à vocation agrico-

le. Il ne pouvait étre que le "fruit" de plusieurs auteurs spécialistes réputés dans leurs

domaines et des contributions non moins importantes mais bien soulignées par les pre-

miers, de divers collaborateurs.

J. Mouchacca

Source : MNHN. Pari:

ANALYSES BIBLIOGRAPHIQUES 73

WATANABE M. and MALLA S.B., 1990 - Cryptogams of the Himalayas, vol. 2.

Central and Eastern Nepal. Department of Botany, National Science Museum,

Tsukuba, Japan, X 4 212 p.

Cet intéressant ouvrage pluridisciplinaire rapporte les résultats scientifiques de

l'expédition botanique japonaise de 1988 dans les montagnes de l'Himalaya et des

régions avoisinantes. L'expédition fut organisée par le National Science Museum (Ja-

pon) en collaboration avec le Département de Foresterie et de Recherche Botanique du

gouvernement du Népal. Le financement de ce projet a été assuré par le Programme

MONBUSHO de Recherche Scientifique Internationale. L'expédition comportait onze

participants japonais travaillant dans diverses institutions de recherches nippones.

Le premier volume de cet ouvrage, paru en 1988, comportait les observations

résultant de l'étude des spécimens de cryptogames, collectés par la première expédition

botanique japonaise, dans la seule vallée de Kathmandou deux années plus tôt. La se-

conde expédition a prospecté une zone comparativement plus étendue et a permis de

rapporter plus de huit mille spécimens de cryptogames et cinq cents échantillons de

sols. Cette exploration de la flore cryptogamique himalayenne demeure un excellent

exemple de coopération scientifique intemationale.

Dans une courte préface, le responsable du Département de Botanique du Na-

tional Science Museum du Japon, souligne le faible niveau de notre connaissance des

cryptogames de cette région si l'on considère les nombreux travaux parus sur les

phanérogames de la partie est de l'Himalaya. Suit une description rapide des sites

visités, quelques photos en couleur très remarquables des montagnes de l'Himalaya et

également de certains éléments de sa flore cryptogamique.

Sur les plantes non vasculaires de cette région la plus élevée du globe, l'ou-

vrage présente le contenu de seize contributions scientifiques rédigées par les membres

de l'expédition et des collaborateurs externes. Il ne fait aucun doute que ces travaux

ne traitent que d'une faible partie du matériel collecté; d'autres publications aussi

intéressantes sont donc attendues. Les recherches réalisées ne se focalisent pas seu-

lement sur la biodiversité de divers groupes de cryptogames, particuliers à cette région.

Sont également proposées des observations marquantes sur la cytologie, les nombres

chromosomiques et profils flavonoïdes de certains composants de ce groupe biologi-

que.

Les seize articles de cet ouvrage, de volume inégal, permettent de combler

quelque peu nos lacunes sur la connaissance des éléments des divers groupes de

cryptogames. Ces articles traitent successivement de certaines bactéries, algues,

myxomycètes, champignons, mousses, lichens et fougères. Sur les champignons, on y

trouve une étude approfondie des Entomophthorales du Népal, sur quelques

Ascomycètes remarquables, une synthèse sur les Uredinales du genre Coleosporium et

sur les rouilles graminicoles et, enfin, sur les Russules de ces hautes terres. Les tra-

vaux réalisés rapportent également des données récentes sur la répartition

géographique des champignons et des fougères; ils mettent aussi en relief des voies de

dissémination insoupçonnées de parasites de plantes.

L'ouvrage se distingue par une excellente qualité de présentation avec un texte

imprimé sur un support papier relativement épais, des reproduction photographiques de

haute qualité de définition et d'excellentes illustrations au trait. Nul doute que ce se-

cond volume sur les cryptogames de l'Himalaya deviendra très rapidement un ouvrage

de référence et cela non seulement pour les champignons, algues et autres groupes

cryptogames de cette région, les informations présentées débordant largement le cadre

régional. II reste, enfin, à souligner la rapidité de parution de ce second volume. En

Source : MNHN, Paris

74 ANALYSES BIBLIOGRAPHIQUES

général, le décalage entre la collecte du matériel sur le terrain et l'impression des

résultats acquis court le plus souvent sur plusieurs années.

J. Mouchacca

Le Congrés de la Société Mycologique de France se tiendra à La Roche-sur-

Yon du 15 au 22 octobre 1993 (Informations générales: M. Giraud, 15 rue Descartes,

85000 La Roche-sur-Yon).

The Congress of the "Société Mycologique de France" will be held at La

Roche-sur-Yon from October 15 to 22, 1993 (Informations: Mr. Giraud, 15 rue

Descartes, 85000 La Roche-sur-Yon, France).

Source : MNHN. Paris

INSTRUCTIONS AUX AUTEURS

CRYPTOGAMIE, Mycologie publie tous les travaux apportant une information fonda-

mentale nouvelle, au plan de la systématique ou de la biologie des Champignons. La revue ac-

cepte les articles rédigés en français, anglais, allemand, espagnole et italien.

TEXTE. - Les manuscrits doivent étre fournis en double exemplaire, dactylographiés à

double interligne, sans rature ni surcharge, sans mots coupés et avec des marges de 4cm de cha-

que cóté. Chaque manuscrit devra comporter:

- le titre de l'article, dans la langue du manuscrit, et sa traduction en anglais;

- le titre courant (haut-de-page) de 50 signes au maximum;

- les noms, prénoms et adresses des auteurs;

- deux résumés, l'un dans la langue du manuscrit, l'autre en français ou en anglais, d'environ 180

mots ou 15 lignes, faisant ressortir les résultats essentiels exposés dans l'article;

- des mots-clés qui seront sélectionnés par le Comité de Lecture;

- des légendes explicites des figures, planches et tableaux dans la langue du manuscrit et en an-

glais (ou francais);

La présentation du texte devra faire apparaître clairement ses subdivisions et leur

hiérarchie, ainsi que le début des paragraphes Les notes infrapaginales seront numérotées et

placées à la fin du texte.

RÉFÉRENCES. - La liste bibliographique devra se faire par ordre alphabétique des au-

teurs et chronologique par auteurs sans tenir compte des auteurs secondaires. Les titres des

périodiques devront être abrégés suivant le B-P-H (Botanico-Periodicum-Huntianum, Pittsburg:

Hunt Botanical Library, 1968), les ouvrages cités selon F.A. Stafleu & R.S. Cowan, 1976- ...

Taxonomic literature. Ed. 2 Utrecht/Antwerpen: Bohn, Scheltema & Holkema (Regnum vegetabile

94, 98, 105, 110...). Les références devront être présentées selon les modèles suivants:

PATOUILLARD N., 1881 - Sur l'appareil conidial de Pleurotus ostreatus. Bull. Soc.

Bot. France 27: 125.

HEIM R., 1957 - Les champignons d'Europe. Paris, Boubée et Cie, 2: 571 p.

MANDELS G.P., 1965 - Kinetics of fungal growth. /n : G.C. AINSWORTH & A.S.

SUSSMAN, The fungi. N.Y. & London, Academic Press, I: 599-612.

Les renvois à la liste bibliographique se feront par le nom de l'auteur et l'année de publi-

cation (utiliser "et al.” lorsque l'article est signé par plus de deux auteurs) et non par les renvois

numériques.

ILLUSTRATIONS. - Toutes les illustrations, y compris les tableaux, doivent étre des

originaux de qualité suffisante pour la reproduction directe en offset. Elles devront comporter les

échelles (les grandissements x ... sont prohibés), les symboles nécessaires à leur compréhension,

et être numérotées dans l'ordre d'appel dans le texte. Les tableaux devront être dactylographiés

clairement, sans rature ni surcharge, en s'assurant de la qualité de la frappe. Les documents pho-

tographiques doivent être montés par planches. Les dimensions des originaux ne devront pas

excéder le triple de celle de leur reproduction définitive (justification de la revue: 11,5 x 17,5cm)

et les auteurs choisiront l'épaisseur des traits et la taille des caractères en fonction de la réduction

éventuelle.

Pour diminuer les délais de parution, envoyez à la rédaction la version finale de votre

article, enregistrée sur disquette au "format texte". Cette disquette devra être utilisable sous DOS

(IBM) ou MacIntosh.

Tirages à part: limités à 150, dont 25 gratuits.

Conformément à la règle, les auteurs décrivant une espèce nouvelle doivent déposer le

matériel type (échantillon sec ou culture) dans un herbier officiel: P.C. (Paris, Cryptogamie),

CAB-IMI (Kew, Surrey) ou une collection de souches: L.C.P. (Lab. Cryptogamie, Paris),

CAB-IMI, C.B.S. (Baarn, Hollande), etc.

Source : MNHN, Paris

INSTRUCTIONS TO AUTHORS

CRYPTOGAMIE, Mycologie publishes the results of scientific research in systematics

and biology of fungi. The journal accepts manuscripts written in French, English, German,

Spanish, and Italian.

TEXT. - Two copies of the manuscripts, typed in double-spacing on one side paper

with margins of 4cm, should be sent to the Redaction. Each typescript should include:

- the title, in the language of the manuscript, and its translation in English;

- the running title, of no more than 50 letters;

- the name and first name(s) of each author, and their complete address;

- two summaries, the first in the text language, the other in French or in English, of no more than

180 words or 15 lines, pointing out the main results of the paper;

- key words, chosen by the Review Comittee;

~ legends of text-figures, plates and tables should be self-explanatory, and listed together; written

in the text language, and in English or in French.

The presentation of the text should point out very clearly its subdivisions and their

hierarchy, as well as the beginning of each paragraph. The foot-notes should be numbered and

collected at the end.

REFERENCES. - The references should be listed at the end of the text, arranged

alphabetically and chronologically according to the first author. The titles of the journals should

be abbreviated according to B-P-H (Botanico-Periodicum-Huntianum, Pittsburgh: Hunt Botanical

Library, 1968), the books, cited according to F.A. Stafleu & R.S. Cowan, 1976- Taxonomic

literature. Ed. 2. Utrecht/Antwerpen: Bohn, Scheltema & Holkema. In the list of the references,

the following outline should be adopted:

PATOUILLARD N., 1881 - Sur l'appareil conidial de Pleurotus ostreatus. Bull. Soc:

Bot. France 27: 125.

HEIM R., 1957 - Les champignons d'Europe. Paris, Boubée et Cie, 2: 571 p.

MANDELS G.P., 1965 - Kinetics of fungal growth. In: G.C. AINSWORTH & A.S.

SUSSMAN, The fungi. N.Y. & London, Academic Press, I: 599-612.

The corresponding references in the text should figure by the name of the author and the

year of publication (use "et al.", for more than two authors). The numeric refer is prohibited.

ILLUSTRATIONS. - Each illustration, included tables, should be original ones, clearly

drawn or typed, and of good quality, ready for direct reproduction by offset. They should include

the scale bars, symbols necessary for their understanding, and they should be numbered

consecutively, according to the order in the text. The photographs should be mounted on light

carbocard, ready for reproduction. Originals should not be more than three times the size of the

final reproduction (11.5x17.5cm). The authors should choose very carefully the corresponding

thickness of lines, or characters size.

The publication of color plates is at the charge of the authors.

For shortening the delays of the publication, the author can send to the Redaction, the

corrected version of his manuscript, on diskette in "text format". That diskette should be used

under DOS (IBM) or Macintosh.

Separata: not more than 150, of which 25 free copies.

Source : MNHN Paris

Commission paritaire 16-1-1986 - N° 58611 - Dépôt légal 1“ trimestre 1993 - Imprimerie F. Paillart

, Sortie des presses le 30 mars 1993- Imprimé en France

Éditeur : A.D.A.C. (Association des Amis des Cryptogames)

Président : D. Lamy; Secrétaire : B. de Reviers

Trésorier : E. Bury; Directeur de la publication : H. C;

Source : MNHN. Paris.

CRYPTOGAMIE

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LE PÉRIODIQUE FRANÇAIS

CONSACRÉ A LA CRYPTOGAMIE

CRYPTOGAMIE est un périodique édité

par l'A.D.A.C. (Association des Amis des

Cryptogames), dont le siège est au Labo-

ratoire de Cryptogamie du Museum Na-

tonal d'Histoire Naturelle. Les cher-

cheurs de tous pays y publient leurs

travaux en français, allemand, anglais, es-

pagnol et italien, après accord des

Comités de Lecture constitués de

spécialistes de réputation internationale.

CRYPTOGAMIE propose trois sections:

Cryptogamie, Algologie

Cryptogamie, Mycologie

Cryptogamie, Bryologie-Lichénologie

Chaque section publie 4 numéros par an

(lirage: 450 exemplaires).

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DEVOTED TO CRYPTOGAMY

CRYPTOGAMIE is a periodical

published by A.D.A.C. (Association des

Amis des Cryptogames), settled at Labo-

ratoire de Cryptogamie, Muséum National

d'Histoire Naturelle. Research workers

from the whole world publish their papers

in French, German; English, Spanish and

Italian, after acceptation by a selection

commettee that comprises experts of inter-

national renown.

CRYPTOGAMIE offers to its subscribers

three sections:

Cryptogamie, Algologie

Cryptogamie, Mycologie

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Each section publishes 4 numbers a year

(printing: 450 ex.).

E Europe Mari C Australie

Amérique Asie

Origine des 453 articles publiés de 1986 à 1991

El Europe Mario

Amérique E Asle

Répartition des articles publiés de 1986 à 1991 selon la langue

[Francais espanol Ml italien

Bangiais C Alemana

Source : MNHN, Paris.