SOMMAIRE

F. GOURBIERE. — Utilisation de sucres et de ae par la о

d’Abies alba Mill. 1. Mucorales. . 3

A. POULARD & L. SIMON. — La microflore levurienne du vignoble

STRATE CANS E p E EE MM 13

A. PARGUEY-LEDUC & M.C. JANEX-FAVRE. — Etude ultrastructu-

rale des asques et des ascospores de Truffes du genre Tuber. I. Les

Eques E EOS Re E NE UU 37

G. VIENNOT-BOURGIN. — Un nouveau Puccinia à spores «diorchi-

Hsc EN S NN. IN MEET 55

J. PELHATE. — Mycoflore seminicole des m; II. Conservation en

Re : а

C.V. SUBRAMANIAN & C. RAJENDRAN. — de P

logy of Ascomycetes. VII Fennellia flavipes. ................. 85

ANALYSES BIBIJOGRAPATOURS Li a m TM ERE 101

Les manuscrits doivent être adressés à Madame M.F. ROQUEBERT, Laboratoire de

Cryptogamie, 12 rue de Buffon, 75005 Paris.

Source : MNHN. Paris

CRYPTOGAMIE

MYCOLOGIE

TOME 2 Fascicule 1. 1981

Ancienne Revue de Mycologie. Dirigee par Roger HEIM

COMITE DE LECTURE

MM. BOIDIN J. (Lyon), C UX R. (Paris), Mme CHARPENTIE M.J. (Paris)

MM. GAMS W. (Baarn inde), JOLY P. (Paris), MANGENOT F. (Nancy)

MOUCHACCA J. (Paris), Mme NICOT J. (Paris), M. PEGLER D.N. (Kew, G.B.), Mme

PERREAU J. (Paris), Mme ROQUEBERT M.F. (Paris), M. SUTTON B.C. (Kew, G.B.)

DIRECTEUR DE LA PUBLICATION: Madame J. NICOT

ADMINISTRATION : Mme LOCQUIN-LINARD M. et M. ZAMBETTAKIS Ch

SECRÉTAIRE DE RÉDACTION: Mme М.Е. ROQUEBERT. ÉDITEUR : A.D.A.C

Bibliothèque Centrale Muséum

zZ 0227793 6

Source : MNHN. Paris

CRYPTOGAMIE

MYCOLOGIE

CONTENTS

(Tome 2, Fasc. 1, 1981)

F. GOURBIERE. — Utilization of sugars and polyols by Abies alba

Hay co flore A 3

A. POULARD & L. SIMON. — Nantes country vineyard yeasts. ...... 13

A. PARGUEY-LEDUC & M.C. JANEX-FAVRE. — Ultrastructural

studies of asci and ascospores in Truffles (g. Tuber). 1. The asci. .... 37

G. VIENNOT-BOURGIN. — A new Puccinia with «diorchidioid» teleu-

a Enea eat eet 55

J. PELHATE. — Mycoflora of corn grains. II. Keeping of corn cobs. ... 61

C.V. SUBRAMANIAN & C. RAJENDRAN. — Developmental morpho-

logy of Ascomycetes. VII Fennellia flavipes. ................. 85

BIBLIOGRAPHY ee ee a 101

Source : MNHN. Paris

UTILISATION DE SUCRES ET DE POLYOLS

PAR LA MYCOFLORE D’ABIES ALBA MILL. 1. MUCORALES

par F. GOURBIERE*

RESUME. — Utilisation de 25 sucres et polyols par 12 Mucorales de la litiére d'Abies alba

Mill. Conséquences écologiques possibles des différences observées, en particulier entre

les Mortierella subg. Micromucor (M. ramanniana, ...) et les Mortierella subg. Mortierella

(M. parvispora, pulchella, ...).

SUMMARY. — Utilization of 25 sugars and polyols by 12 Mucorales from Abies alba

Mill. litter. Ecological significance of observed differences, especially between Mortierella

subg. Micromucor (M. ramanniana, ...) and Mortierella subg. Mortierella (M. parvispora,

pulchella,

Les microflores fongiques jouent un réle important dans la dégradation des

débris végétaux. De nombreux travaux se sont attachés à décrire les successions

de microorganismes colonisant ces substrats mais peu de recherches ont été

menées dans le but de comprendre les mécanismes de ces successions et leur

place exacte dans le processus de dégradation.

L'étude de la nutrition in vitro des champignons peut contribuer à la compré-

hension de leur róle; méme si l'on ne doit pas en attendre l'explication immé-

diate des faits observés dans la nature, du moins peut on espérer mettre en évi-

dence des groupes physiologiques et les comparer aux groupes successionnels.

Cette comparaison entre la distribution dans le temps des espéces et leurs

aptitudes physiologiques peut être conduite à la lumière de deux hypothèses,

en partie complémentaires, mais aussi partiellement contradictoires.

* Laboratoire d'Écologie Végétale, Université Lyon I, Bat. 741, 43 Bd du 11 novembre

1918, 69622 Villeurbanne Cedex, France.

CRYPTOGAMIE, MYCOLOGIE (Cryptog. Mycol.) TOME 2 (1981).

Source : MNHN. Paris

4 F. GOURBIERE

1 - Les groupes successionnels sont des groupes nutritionnels homogènes,

c’est-à-dire qu’à un moment donné les colonisateurs présents utilisent le même

type de substrat puis, celui-ci épuisé, d’autres champignons prennent la relève

pour dégrader une autre fraction du matériel végétal (dégradation séquentielle

du substrat).

2- Un groupe nutritionnel est forme d’un ensemble d'espèces vivant dans un

même milieu, donc en état de compétition. Dans ces conditions leur coexistence

implique au contraire leur différenciation nutritionnelle, chacun exploitant

une fraction différente du matériel végétal.

Reconnaissons que cette problématique est destinée à l'analyse du type de

résultats présentés ici, mais lors d'une synthèse écologique il faudrait tenir

compte d’autres facteurs de ségrégation des espèces (topographiques, saison-

niers...).

Nous avons pour notre part étudié les microflores fongiques associées A la

dégradation des aiguilles de Sapin (GOURBIERE, 1980) et nous abordons ici

l'étude de leur nutrition, en occurence l'utilisation de carbohydrates simples:

sucres et polyols.

Ce premier travail portant sur les Mucorales permettra de savoir si un groupe

relativement bien défini au point de vue systématique et successionnel est

homogène sur le plan nutritionnel vis-à-vis des substrats étudiés. Choix d'autant

plus justifié que ces champignons sont réputés étre des «sugars fungi» secon-

daires, utilisant les composés simples libérés du substrat par d'autres décompo-

seurs.

I, — MATÉRIEL ET MÉTHODE

A.- MATÉRIEL

Les souches étudiées ont été isolées de la litiére d'Abies alba dans notre

station (GOURBIERE, 1979). Nous avons suivi GAMS (1977) pour la systé-

matique du genre Mortierella en donnant toutefois la synonymie avec le travail

de ZYCHA et al. (1969). Toutes les identifications ont été confirmées par le

CentraalBureau voor Schimmelcultures (Baarn). Les numéros de souches sont

ceux de notre mycothéque.

Famille Mucoraceae :

Mucor hiemalis Wehmer (A8)

Absidia coerulea Bainier (A13)

Famille Mortierellaceae

subg. Micromucor

Mortierella isabellina Oudemans (A26)

Mortierella ramanniana (Moeller) Linnemann (A36)

Source - MNHN. Paris

MYCOFLORE D'ABIES ALBA. 1. MUCORALES 5

Mortierella ramanniana var. angulispora (Naumov) Linnemann (A7)

subg. Mortierella

section alpina

Mortierella alliacea Linnemann (A40)

section bygropbila :

Mortierella bainieri Costantin (A41)

Mortierella hyalina (Harz) W. Gams (= M. hygrophila Linnemann)

(A37)

section stylospora :

Mortierella verticillata Linnemann (= M. marburgensis Linnemann)

(A25)

section spinosa

Mortierella pulchella Linnemann (A2)

Mortierella parvispora Linnemann (A35)

Mortierella exigua Linnemann (A62)

B.- MÉTHODE

1. Milieu de culture

(NH4)2504 . .

KH2PO4 +...

ксі .

MgSO4, 7 H30

CaCl, 2 H20

yeast-extract «DIFCO» .......... 0,58

glucose

етсен ее ME 100 ml

Le pH du milieu est de 5,1. Les autres sucres et polyols (produits PROLABO

où ROTH) sont dosés de façon à apporter la méme quantité de carbone (4g

par litre).

Pratiquement ce milieu est préparé en deux fractions (sels et extrait „de

levure d'une part, sucre d'autre part) stérilisées séparément 15 minutes à 120°C,

puis réunies aseptiquement pour reconstituer 20 ml de milieu par tube de 22

x 220 mm.

2. Inoculum et culture

L'inoculum est préparé à partir d’une culture de 15 jours sur extrait de malt

liquide (2%) dans un tube incliné contenant une dizaine de billes de verre (1mm

de diamètre). Une simple agitation rapide au Vortex permet d'obtenir une sus-

pension (spores + mycélium) servant d’inoculum à raison de 0,5 ml par tube.

Les tubes (3 par essai) sont inclinés pour obtenir une surface de culture

maximale et incubés à 20 + 1°C à la lumière diffuse. Cette variante de la culture

en surface sur milieu liquide non agité s'est révélée bien adaptée à la réalisation

Source : MNHN. Paris

6 F. GOURBIERE

d'un grand nombre d'essais et comparable aux expériences classiques en erlen-

meyers.

3. Détermination du poids sec

Le mycélium est recueilli par filtration sur filtre Durieux n? III (5,5cm de

diamètre) pesé au préalable (après dessiccation à l’étuve). L'ensemble est lavé,

séché à l'air puis à l'étuve à 75°C pendant 12 h. Les pesées sont faites après

refroidissement des filtres au dessicateur. La précision est de 0,1 mg.

C.- INTERPRÉTATION DES RÉSULTATS

La inéthodologie idéale consisterait à optimier le milieu (pH et source azotée

en particulier) pour chaque espèce et à rechercher pour chaque substrat le temps

optimum de culture. Le choix plus ou moins arbitraire d’un milieu et d'un temps

de culture conduit à s'écarter du poids maximal de mycélium formé, ce qui

pose des problémes d'interprétation souvent exprimés en terme de bonnes ou

mauvaises sources de carbone. Nous avons accordé quelque attention à ce

probléme.

1. Précision des mesures

Nous avons calculé l'écart type pour chaque essai (3 répétitions) et nous

pouvons en tirer les conclusions suivantes :

- l'intervalle de confiance au risque 0,05 (2 écarts type) est presque toujours

inférieur à 10 mg (6 exceptions sur 312 essais),

- il est le plus souvent (277 essais sur 312) inférieur à 5 mg, soit une erreur

relative de 10% sur un essai positif de 50mg et de 100% sur un essai négatif de

5 mg (l'écart type ne semble pas dépendre beaucoup de la valeur de l'essai).

2. Croissance sur glucose (Tab. 1)

Jours de culture OS CE TS a b

M. isabellina 79 6 63 62 61 0,79 038

M. ramanniana 38 64 65 62 60 096 03

M. ram. var. angulispora 49 71 70 67 63 094 0,34

M. hiemalis 31 32 38 41 43 096 0,20

A. coerulea 64 63 59 61 61 095 0,30

M. alliacea 45 50 45 37 37 074 0,24

M. bainieri 54 62 56 51 49 082 029

M. hyalina 44 42 37 25 39 0,80. 0,21

M. verticillata 45 4 4 43 42 092 022

M. pulchella 28 4 5 51 50 097 0,25

M. parvispora 52 61 62 58 52 093 0,30

M. exigua 2 18 26 27 зо 092 044

Tableau 1. — Croissance sur glucose. Poids sec en mg pour 200mg de substrat apporté. a:

rapport poids sec à 28 jours/poids sec maximum. b: rapport poids sec maximum/poids

de substrat apporté.

Source : MNHN, Paris

MYCOFLORE D’ABIES ALBA. 1. MUCORALES 7

Crest elle qui a servi de test pour le choix du milieu et du temps de culture.

Le rapport poids sec maximum/poids de matière organique fournie (210 mg)

est compris entre 0,20 et 0,38 (sauf pour M. exigua : 0,14). PERLMAN (1965)

donne des valeurs de 0,20 à 0,40 pour le rapport poids de mycélium formé/

poids de matière organique utilisée (donc à priori supérieur au précédent).

Le milieu utilisé semble donc satisfaisant, sauf pour une espèce.

3. Temps de culture

Le tableau 1 montre que, compte tenu de la précision des mesures, le maxi-

mum de croissance est atteint en 14 jours (sauf à nouveau pour M. exigua). Nous

avons toutefois retenu une incubation plus longue (28 jours) pour tenir compte

d'éventuels phénomènes d'adaptation enzymatique ou de croissance plus lente

que sur glucose. Le rapport poids de mycélium à 28 jours/poids maximum de

mycélium formé (toujours supérieur à 0,75) montre que lon n’a pas, dans le

cas présent, à craindre des phénoménes d’autolyse trop importants.

4. Signification des résultats

Pour interpréter les poids de mycélium formés sur les différents substrats

nous avons retenu les critères suivants :

- 0-9 mg: pas d'utilisation du substrat (154 cas)

- 9 -14mg : substrat probablement non utilisé (6 cas)

- 15- 19 mg : substrat probablement utilisé (7 cas)

- 20 et plus : substrat utlilisé (133 cas).

On constate que fort heureusement les valeurs ambigués sont restées rares

et dans la discussion seul le cas du ribose sera exclu, les résultats étant par trop

incertains.

Il est à noter que si 4 des valeurs intermédiaires sont isolées, les autres se

regroupent sur trois substrats: D-arabinose (3), D-ribose (5) et glycérol (2)

un peu marginaux: le D-arabinose n'est pas un isomére naturel, le D-ribose

est un constituant d'acides nucléiques et le glycérol de glycérides.

II. — RÉSULTATS ET DISCUSSION

Des conclusions définitives nécessiteraient l'étude de plusieurs souches de

chaque espèce et l’extension à d’autres espèces. Toutefois certaines hypothèses

peuvent être proposées, d'autant plus que les espèces voisines présentent des

comportements similaires.

Toutes les Mucorales étudiées utilisent les hexoses glucose, fructose, mannose,

galactose, les disaccharides maltose et tréhalose et le glycérol (exception de

M. exigua qui n’utilise pas le galactose et le tréhalose). L'érythritol et l'inositol

ne sont jamais utilisés.

Source : MNHN, Paris

8 F. GOURBIERE

Ber CAP NES

E oRBon dem dm m c d

ЕРЛЕР ee S

ая ez

témoin 4 4 4 3 4 2 2 2 2 3 4 3

monosaccharides

glucose 62 62 67 41 61 36 51 35 43 51 58 26

fructose 63 66 66 41 65 38 57 38 39 52 60 22

mannose 65 61 61 45 60 40 56 37 42 EL 58 30

galactose 68 63 62 47 61 39 48 31 41 38 54 3

L-sorbose 44 50 56 4 T 4 3 4 3 5 3 3

L-rhamnose 68 56 72 4 8 4 3 4 5 5 5 4

xylose 63 53 52 54 46 4 1 4 1 4 3 1

L-arabinose 62 54 46 41 6 3 4 1 4 1 3 2

D-arabinose 34 20 15 19 1 4 3 4 4 3 4 1

ribose 50 39 22 50 19 5 21 п п 22 19 13

disaccharides

maltose 54 63 62 27 27 39 57 22 20 42 23 25

tréhalose 65 65 6l 42 30 41 46 38 42 50 58 2

lactose 64 54 67 4 6 2 В 4 3 6 5 1

cellobiose 62 67 63 32 38 4 4 5. 9 6 Z 2

saccharose 7 58 66 4 5 3 4 2 3 6 4 2

mölibiose 3 58 61 5 4 3 4 7 5 7

trisaccharides

raffinose 3 60 66 = 4 4 4 4 4 3 4

melezitose 68 51 SA 16 D 3 3 4 u 8 5

polyols

glycérol 53 62 67 20 17 30 30 42 38 46 56 17

erythritol 3 7 7 5 12 4 4 4 4 2 4 7

ribitol 67 59 5 51 $ 3 3 5 3 3 3 3

glucitol 67 60 71 5 59 4 5: 5 3 5 5 4

mannito] 67 64 62 5 66 3 4 6 5 4 4 3

galactitol 62 10 4 7 3 4 6 4 5 4 1

inositol Ф 4 6 4 6 3: 4 2 3 3 5 2

Tableau 2. — Croissance sur différents sucres et polyols. Poids sec à 28 jours de culture

pour 200mg de substrat (glucitol = sorbitol, ribitol = adonitol, galactitol =dulcitol).

Source : MNHN. Paris

MYCOFLORE D’ABIES ALBA. 1. MUCORALES 9

Les autres substrats permettent de distinguer deux groupes de champignons:

- les espéces du sous-genre Mortierella n’utilisant aucun autre substrat,

- les espéces du sous-genre Micromucor utilisant tous les autres substrats

sauf le galactitol qui n'est utilisé que par M. isabellina, qui en revanche n’utilise

pas le saccharose, le mélibiose et le raffinose.

Notons que l'utilisation de ces trois derniers sucres est liée, les deux disaccha-

rides étant des produits d’hydrolyse du raffinose. De nombreux cas semblables

ont été analysés chez les levures (BARNETT, 1976).

Les deux représentants de la famille des Mucoraceae apparaissent intermé-

diaires entre les deux sous-genres de Mortierellaceae. Il faudrait tester d’autres

souches et d'autres espéces avant de conclure.

stades de décomposition Lo г F1 F2

M. ramanniana 0 0 162 238

M. ram. var. angulispora 0 0 08 0

M. isabellina 0 0 0,8 0

M. hiemalis 04 2,6 8,6 9,3

A. coerulea 0 07 0,3 32

M. parvispora 0 0,7 47 222

M. pulchella 0 1,7 11,6 2,6

M. verticillata 0 0 0 5,1

M. hyalina 0 0 0 22

M. alliacea 0 0 03 1,0

M. bainieri 0 0,3 1,0 0,7

M. exigua 0 0,3 0 0

Tableau 3. — Pourcentage d'aiguilles d'Abies alba Mill. colonisées par chaque espèce en

fonction du stade de décomposition de l'aiguille (d'après GOURBIERE 1974, 1975, 1979).

D’après nos travaux antérieurs (GOURBIERE 1974, 1975, 1979) les Muco-

rales étudiées paraissent avoir une distribution semblable dans la Sapinière

(Tab. 3). Absentes de la phyllosphére vivante et sénescente, elles apparaissent

dans la litiére et atteignent leur maximum dans la couche de fermentation (F1

et surtout F2). Il existe peut-être des variations saisonnières (M. ramanniana

espèce du printemps, M. hiemalis d'automne) mais nos résultats à ce sujet

devraient être vérifiés. Après stérilisation superficielle des aiguilles, ces espèces

ne sont plus isolées (résultats à paraître), ce qui laisse supposer que ce sont

des colonisateurs externes, comme l'ont déjà montré PARKINSON et al. (1967)

chez Pinus nigra.

Nous admettrons toutefois la coexistence réelle de ces espèces, ce qui est

le cas dans la plupart des prélèvements (GOURBIERE, 1979). Dans ces condi-

tions nos deux hypothèses de départ semblent vérifiées, mais à des niveaux

différents.

En effet, d'une part le groupe des Mucorales est bien différencié en deux

(au moins) groupes, l'un trés riche (Micromucor), l'autre trés pauvre (Mortie-

Source : MNHN, Paris

10 F. GOURBIERE

rella) en possibilités nutritionnelles. Toutefois comme ce schéma devrait con-

duire à l'élimination du plus pauvre si les sucres étaient le seul point de compé-

tition, il est probable que sur d'autres plans, la situation doit étre inversée en

faveur des espèces du sous-genre Mortierella. La faiblesse numérique des espèces

intermédiaires fait penser à un phénomène d'exclusion par les deux ensembles

extrêmes.

Mais par ailleurs, à l'intérieur de chaque groupe nutritionnel, la concurrence

apparaît réelle et efficace, ne laissant la place qu'à une espèce principale. Ceci

est très net pour les Micromucor où le groupe est dominé massivement par M.

ramanniana var, ramanniana. Chez les Mortierella c'est M. parvispora qui est

largement dominant, l’autre espèce abondante M. pulchella étant d'ailleurs

légèrement décalée dans le temps (maximum en F 1).

La signification des espèces mineures dominées, mais de capacités nutrition-

nelles identiques aux espèces dominantes pose un problème. Peut être s'agit-il

de «contaminations» venues de microsites voisins : racines (les Mucorales sont

abondantes sur les racines de Pinus (KUHLMAN, 1969) ou humus (PARKIN-

SON et al. (1967) ont trouvé des différences assez nettes entre Mucorales de la

litière, de l’humus et des horizons minéraux d'un sol sous Pinus nigra).

II. — CONCLUSIONS

La démarche commencée dans cette note apparaît prometteuse, une diffé-

renciation nutritionnelle très nette ayant pu être mise en évidence dans un

groupe de champignons que l'analyse des successions faisait considérer comme

homogéne. Le cas est d'autant plus intéressant que la microflore étudiée est

très générale dans les litières de conifères (voir par exemple PARKINSON et

al. (1967), SODERSTROM et BAATH (1978)) et que les groupes nutritionnels

mis en évidence y sont toujours représentés, avec des différences spécifiques

dont la signification est à rechercher.

La suite de nos recherches étendra ces résultats à d’autres constituants de

la microflore et à d'autres types d'activité. Toutefois les informations obtenues

sur les Mucorales nous engagent à rechercher dés maintenant une explication

écologique aux différences nutritionnelles observées dans ce groupe.

Ce travail a été réalisé dans le cadre de l'Équipe de Recherches associée au CNRS 848

«Écologie microbienne».

Nous remercions tout particulièrement Mme Colette MOULIN pour sa collaboration

technique au cours de ces travaux.

Source : MNHN, Paris

MYCOFLORE D’ABIES ALBA. 1. MUCORALES 11

BIBLIOGRAPHIE

BARNETT J.A., 1976 — The utilization of sugars by yeasts. Advan. Carbohydrate Chem.

Biochem. 32: 125-234.

GAMS W., 1977 — A key to the species of Mortierella. Persoonia 9 : 381-391.

GOURBIERE F., 1974 — Les champignons microscopiques lies aux aiguilles de Sapin

(Abies alba Mill.). 2. Variations saisonniéres de la microflore des aiguilles tombantes.

Bull. Soc. mycol. Fr. 90 : 325-333.

GOURBIERE F. 1975 — Les champignons microscopiques liés aux aiguilles de Sapin

(Abies alba Mill.). 3. Microflore des aiguilles vivantes. Bull. Soc. mycol. Fr. 91: 429-441.

GOURBIERE F., 1979 — Les champignons microscopiques liés aux aiguilles de Sapin

(Abies alba Mill.). 4. Microflore de la litière. Bull. Soc. mycol. Fr. 95: 23-33.

GOURBIERE F., 1980 — Les champignons microscopiques liés aux aiguilles de Sapin

(Abies alba Mill.). 5. Synthése des études précédentes. Bull. Soc. mycol. Fr. 96: 35-42.

KUHLMAN E.G. 1969 — Mucorales isolated from Pine root bark and wood. Cam. J.

Bot. 47: 1719-1723.

PARKINSON D. and BALASOORIYA I., 1967 — Studies on fungi in a pinewood soil.

I, Nature and distribution of fungi in the different soil horizons. Rev. Ecol. Biol. Sol.

4: 463-478.

PERLMAN D., 1965 — The chemical environment for fungal growth. 2. Carbon sources.

In «The Fungi, an advanced treatise», AINSWORTH G.C. and A.S. SUSSMAN ed.,

Academic Press, New York and London, vol. 1: 479-489.

SODERSTROM B.E. and BAATH E., 1978 — Soil microfungi in three Swedish coniferous

forests. Holarctic Ecology 1: 62-72.

Source : MNHN. Paris

LA MICROFLORE LEVURIENNE DU VIGNOBLE NANTAIS

par A. POULARD et L. SIMON*

RÉSUMÉ. — Au cours des années 1976 et 1977, 748 souches de levures représentant 14

genres (6 ascosporogénes et 8 non ascosporogénes) et 40 espéces, ont été isolées dans les

principales zones viticoles de la région nantaise; parmi celles-ci, ont été mises en évidence

des levures rarement signalées dans la littérature cenologique et appartenant au groupe 3 de

BRECHOT : Aureobasidium pullulans, Endomycopsis vini, Pichia rhodanensis, Pichia vini,

Rhodotorula pilimanae, Torulopsis gropengiesseri, Trichosporon cutaneum. Nous avons

en outre isolé deux espèces inconnues jusqu'à ce jour dans les écosystèmes viticoles : Tricho-

sporon penicillatum et Exophiala jeanselmei.

Le genre Saccharomyces est toujours dominant, comme dans toutes les fermentations

classiques. La succession des espèces au cours de la fermentation alcoolique s'établit comme

suit: Metschnikowia pulcherrima, Kloeckera apiculata, Saccharomyces ellipsoideus, Saccha-

romyces bayanus; elle est en tout point comparable à celle de la microflore des regions

situées à la limite nord de la culture de la vigne (Touraine, Franconie, Slovaquie, Allemagne

de l'Est).

En 1976, année chaude et sèche, les espéces fermentatives sont trés abondantes dans

les jus et moûts de raisin; l'année 1977, froide et humide, a favorisé la colonisation par des

levures à caractère oxydatif dominant.

INTRODUCTION

Le contrôle scientifique et technique d’une région viticole implique une

connaissance parfaite des processus de la vinification et, en particulier, de la

omposition de la microflore levurienne autochtone qui conditionne, non

seulement les différentes étapes de la fermentation alcoolique, mais est parfois

responsable au chai, d'accidents fermentaires redoutables pour le producteur.

Des études ont été progressivement réalisées dans ce domaine de recherche

pour différentes régions viticoles.

* Laboratoire de Biologie Végétale, U.E.R. des Sciences de la Nature, Le Petit Port, 44300

Nantes

CRYPTOGAMIE, MYCOLOGIE (Cryptog. Mycol.) TOME 2 (1981).

Source : MNHN. Paris

14 A.POULARD & L. SIMON

DESCOFFRE (1904) a été l'un des premiers à s'intéresser à l'origine et

au mode de dissémination de la microflore levurienne de la région des Charentes.

Plus tard, BIDAN et ANDRÉ (1954) ont repris les études microbiologiques

entreprises par PASTEUR (1864) sur les vins jaunes du Jura. Dans le vignoble

bordelais, les travaux de DOMERCQ (1956) ont permis d'améliorer les connais-

sances concernant les levures responsables des différentes étapes de la vinifi-

cation. Les études de GALZY (1958) et celles de CAZES (1961) se rapportent

respectivement aux levures du Languedoc et du vignoble de Gaillac; BRECHOT

et coll. ont recensé successivement les espèces du Beaujolais (1962) et de la ré-

gion champenoise (1968) tandis que celles des vins de Clairette de Die ont été

isolées par BIDAN (1969). La microflore des jus et moûts de Nord du Roussillon

a été identifiée par ROSET (1970), celle des vins doux naturels a été mise

en évidence un peu plus tardivement par SAPIS-DOMERCQ et GUITTARD

(1976). Les crus de Rivesaltes (GUITTARD, 1973) et du vignoble de Cognac

(CASTELLI, 1971; PARK, 1974) ont fait l'objet d'études microbiologiques

et écologiques approfondies; en Touraine et dans la région de Chinon, des re-

cherches comparables ont été également effectuées par CUINIER (1978, a et b).

Les premiers travaux microbiologiques concernant le Vignoble nantais sont

anciens (RENAUD, 1941) et malgré quelques études commencées en 1975

par CUINIER (travaux de PI.T.V., non publiés), la flore levurienne de cette

région demeurait encore pratiquement inconnue; les recherches que nous avons

entreprises en 1976 ont permis la détermination qualitative et la répartition

quantitative des espèces fermentaires et oxydatives de ce vignoble (POULARD,

1979).

Il. — LE VIGNOBLE

D'une superficie de 22 165 ha, il est essentiellement localisé au Sud et Sud

Est de la Loire Atlantique où il constitue un paysage de réelle monoculture;

les principales zones viticoles occupent des sols bruns lessivés ou du sols d’allu-

vions fluviatiles.

L'encépagement est varié, composé essentiellement de 4 cépages nobles

(Muscadet, Gros Plant, Gamay, Cabernet) ainsi que de nombreux hybrides

provisoirement autorisés; le Muscadet, principale production, est récolté sur

les zones de Sèvre et Maine, des Côteaux de la Loire et dans certains terroirs

des Cöteaux d’Herbauges.

III. — MATÉRIEL ET TECHNIQUES

Des prélèvements de jus et moüts ont été effectués, au cours des vendanges

de 1976 et 1977, dans les trois principales régions viticoles de Loire-Atlantique:

Source : MNHN. Paris

LES LEVURES DU VIGNOBLE NANTAIS 15

Sévre et Maine, Coteaux de la Loire, Pays de Retz; deux stations expérimentales,

situées au Landreau, et géographiquement implantées au milieu des vignobles

ont été choisies pour le Sèvre et Maine; une station (Oudon) a été retenue

pour les Côteaux de la Loire et cing stations (Le Pellerin, Les Moutiers, Roche-

servière, Corcoué (1) et (2)) ont fait l'objet de recherches pour le Pays de Retz,

de superficie plus étendue et d'une plus grande diversité en vins. Des préléve-

ments-témoins ont été effectués, au laboratoire, sur une vigne exempte de

traitements fongicides.

Dix sept échantillons de moüts provenant des cépages blancs de Muscadet

et Gros Plant et des cépages rouges de Gamay Beaujolais, Cabernet Sauvignon,

Grolleau, Plantet et Baco n° 1 ont été prélevés dans 11 exploitations viticoles

dont la localisation est précisée sur la figure 1.

ILLE ET VILAINE

MORBIHAN

ATLANTIQUE

MAINE

De Pellerin NODE

Les Moutiers Corcoué

oP mS nor

Y Фоо

3 *

viii `

Rochsservière 3

SS.

VENDEE

Fig. 1.— Stations de prélèvements et nature des échantillons. - GP: Gros Plant; GL: Gamay;

GY: Grolleau; MS: Muscadet; CS: Cabernet Sauvignon; BR: Baco rouge; PT: 5455.

Source : MNHN, Paris

16 A. POULARD & L. SIMON

Les prélévements aseptiques de jus de raisin ont été effectués, au cours

du pressurage, le jour de la vendange; ceux de moûts ont été effectués réguliè-

rement dans le temps, au cours de la fermentation, à la partie supérieure des

cuves ou au robinet du dégustateur. Après homogénéisation des prélèvements,

le dénombrement des souches de levures vivantes a été effectué selon la tech-

nique de S. DOMERCQ (1967).

L'identification des espéces a nécessité de nombreux tests morphologiques

et physiologiques (LODDER, 1970; DE HOOG et Coll., 1977...)*. Les espèces

identifiées ont été réparties en trois groupes principaux selon les caractères

proposés par BRECHOT en 1962:

- Groupe 1: levures sporogènes à caractère fermentatif dominant (Saccharo-

myces),

- Groupe 2: levures apiculées sporogénes et anascosporogénes (Hanseniaspora,

Kloeckera).

- Groupe 3: levures sporogènes et anascosporogénes à caractère oxydatif

dominant (Aureobasidium, Rhodotorula, Torulopsis).

IV. — CARACTERES CLIMATIQUES

Les données climatiques des deux années au cours desquelles nous avons

réalisé notre travail sont trés différentes et ont affecté de facon importante

le cycle végétatif de la vigne ainsi que la fructification et la qualité de la récolte.

L'année 1976 a été exceptionnellement chaude et séche, les durées d'insolation

mensuelles observées durant la période végétative représentent au minimum

250 heures; à l'inverse, l'année 1977 a bénéficié de peu d'ensoleillement; notons

en particulier que durant le mois de juin, la durée d'insolation mensuelle a été

inférieure de 150 heures à celle de l'année précédente mais, en fin de matu-

ration et jusqu'à la récolte, l'ensoleillement a été important ce qui a eu pour

effet de réduire les invasions par le Botrytis cinerea (POULARD, 1979).

L'année 1976 a été caractérisée par une grande sécheresse: les températures

trés élevées, alliées à de faibles précipitations durant le cycle végétatif, ont

entraîné des vendanges très précoces. A l'inverse, l'année 1977 a été marquée

par des gelées importantes (fin mars) qui ont anéanti de nombreux bourgeons

à fruit, et des précipitations qui ont accompagné, durant l'été, le cycle végétatif

et reproducteur de la vigne; les vendanges ont débuté avec plus d'un mois de

retard par rapport à celles de l'année précédente. D'une maniére générale, on

peut observer, d'une année à l'autre, des variations considérables de pluviométrie

se chiffrant autour de 200 à 250 mm d'eau selon les stations (POULARD,

1979).

* Pour le détail de ceux-ci, voir le chapitre «Matériel et Techniques» (POULARD, 1979).

Source : MNHN, Paris

LES LEVURES DU VIGNOBLE NANTAIS

V. — RESULTATS EXPERIMENTAUX

1. LES ESPECES DES JUS ET MOUTS DE CEPAGES BLANCS

TABLEAU I

Microflore des jus et moûts de Muscadet de Sévre et Maine

SEVRE ET MAINE

Station du Landreau

1976 1977

Saccharomyces ellipsoideus 7 Saccharomyces ellipsoideus

Kloeckera apiculata 4 Kloeckera apiculata

Saccharomyces bayanus 4 Metschnikowia pulcherrima

Aureobasidium pullulans 3 Saccharomyces bayanus

Saccharomyces rosei 2 Aureobasidium pullulans

Torulopsis candida 2 Trichosporon cutaneum

Torulopsis gropengiesseri 1 Saccharomyces chevalieri

Kloeckera javanica 1 — Saccharomyces uvarum

Rhodotorula glutinis 1^ Saccharomyces rosei

Hanseniaspora uvarum

Candida krusei

Candida valida

Torulopsis candida

Torulopsis colliculosa

Rhodotorula glutinis

TABLEAU 2

Microflore des jus et moats de Muscadet des Coteaux de la Loire

COTEAUX DE LA LOIRE

Station d’Oudon

1976

Saccharomyces ellipsoideus 22

Kloeckera apiculata

Saccharomyces bayanus

Saccharomyces rosei

Saccharomyces chevalieri

Saccharomyces italicus

Kloeckera javanica

Saccharomyces exiguus

Rhodotorula glutinis

Torulopsis colliculosa

Saccharomyces diastaticus

CRE

1977

Saccharomyces ellipsoideus

Saccharomyces uvarum

Kloeckera apiculata

Metschnikowia pulcherrima

Hanseniaspora uvarum

Torulopsis lactis-condensi

Saccharomyces rosei

Exophiala jeanselmei

Rhodotorula glutinis

Aureobasidium pullulans

Trichosporon cutaneum

неее

HK KKK NHS

Source : MNHN. Paris

A.POULARD & L. SIMON

Microflore des jus et moüts de Muscadet des Cöteaux d’Herbauges

TABLEAU 3

COTEAUX D'HERBAUGES

Station de Corcoue

1976

Saccharomyces ellipsoideus

Kloeckera apiculata

Hanseniaspora uvarum

Torulopsis colliculosa

Metschnikowia pulcherrima

Saccharomyces rosei

Saccharomyces uvarum

Saccharomyces italicus

Kloeckera javanica

Torulopsis candida

Candida sorbosa

1977

11 Saccharomyces ellipsoideus

10 Hanseniaspora uvarum

3 Metschnikowia pulcherrima

3 Saccharomyces rosei

3 Kloeckera apiculata

2 Kloeckera javanica

2 Saccharomyces chevalieri

1 Torulopsis colliculosa

1 Pichia rhodanensis

TABLEAU 4

Microflore des jus et moûts de Muscadet : Vigne témoin

LABORATOIRE : Vigne expérimentale

1976

Saccharomyces rosei

Saccharomyces ellipsoideus

Kloeckera apiculata

Pichia membranaefaciens

Rhodotorula glutinis

Rhodotorula rubra

Aureobasidium pullulans

Microflore des jus et moûts de Gros Plant du Sèvre et Maine

1976

Saccharomyces ellipsoideus

Saccharomyces rosei

Kloeckera apiculata

Saccharomyces uvarum

Saccharomyces bayanus

Metschnikowia pulcherrima

Saccharomyces capensis

Saccharomyces italicus

7 Saccharomyces chevalieri

2 Metschnikowia pulcherrima

2 Kluyveromyces veronae

1 Candida krusei

1 Candida intermedia

TABLEAU 5

SEVRE ET MAINE

Kee RANE

Station du Landreau

1977

Saccharomyces ellipsoideus

Saccharomyces uvarum

Saccharomyces bayanus

Saccharomyces chevalieri

Kloeckera apiculata

Hanseniaspora uvarum

Aureobasidium pullulans

Trichosporon penicillatum

Torulopsis candida

Source : MNHN. Paris

Fees MEN DR Ge

MON MRC

LES LEVURES DU VIGNOBLE NANTAIS

TABLEAU 6

Microflore des jus et moúts de Gros Plant des Cóteaux d’Herbauges

COTEAUX D'HERBAUGES

Station du Pellerin

1976

Saccharomyces ellipsoideus

Saccharomyces rosei

Saccharomyces chevalieri

Saccharomyces uvarum

Saccharomyces exiguus

Metschnikowia pulcherrima

Kloeckera apiculata

Hanseniaspora uvarum

Saccharomyces ellipsoideus

Kloeckera apiculata

Hanseniaspora uvarum

Saccharomyces rosei

Saccharomyces uvarum

Candida valida

Metschnikowia pulcherrima

Kloeckera javanica

1976

Saccharomyces ellipsoideus

Metschnikowia pulcherrima

Saccharomyces chevalieri

Saccharomyces bailii

Saccharomyces capensis

Torulopsis candida

Saccharomyces italicus

Saccharomyces diastaticus

Saccharomyces globosus

Candida intermedia

Kloeckera apiculata

1977

Saccharomyces ellipsoideus

Kloeckera apiculata

Hanseniaspora uvarum

Aureobasidium pullulans

Saccharomyces bayanus

Saccharomyces chevalieri

Kleockera africana

Kloeckera javanica

Metschnikowia pulcherrima

Pichia vini

Rhodotorula rubra

Station de Corcoué

NNNNA

Saccharomyces ellipsoideus

Saccharomyces bayanus

Hanseniaspora uvarum

Kloeckera apiculata

Metschnikowia pulcherrima

Saccharomyces rosei

Saccharomyces uvarum

Saccharomyces chevalieri

Kloeckera africana

Aureobasidium pullulans

Torulopsis candida

TABLEAU 7

Microflore des jus et moûts de Gros Plant du Pays de Retz

PAYS DE RETZ

ESSE M ie

Station des Moutiers

1977

Saccharomyces ellipsoideus

Saccharomyces chevalieri

Rhodotorula glutinis

Exophiala jeanselmei

Hanseniaspora uvarum

Ree eee

Pe dee ong Ree lon

Source : MNHN. Paris

20 A. POULARD & L. SIMON

Dans sept caves des principales zones productrices de vins blancs secs du

département, nous avons isolé 498 souches de levures et organismes levuri-

formes dont nous communiquons, sous forme de tableaux, la nature et la répar-

tition selon l'année de récolte et le cépage cultivé; les tableaux 1 à 4 présentent,

pour chaque station de prélèvement, l'inventaire des espèces et le nombre de

souches identifiées dans les échantillons de Muscadet; les tableaux 5 à 7 pré-

sentent l'inventaire des espèces identifiées dans les échantillons de Gros Plant.

2. LES ESPECES DES JUS ET MOUTS DE CÉPAGES ROUGES ET ROSÉS

250 cultures pures ont été obtenues à partir de 10 échantillons de jus et

moúts issus de 6 caves. L’inventaire des espèces est fourni, comme pour le para-

graphe précédent, sous forme de tableaux précisant à la fois l'origine, la répar-

tition et le nombre de souches. Les tableaux 8 à 11 présentent pour chaque

station l'inventaire des espèces et le nombre de souches isolées dans les cépages

rouges ou rosés de Cabernet, Gamay, Plantet, Grolleau ou Baco. Notons que

les vinifications en rosé (cépages Gamay-Beaujolais et Grolleau) ont été effec-

tuées dans les caves des stations d’Oudon et du Pellerin.

TABLEAU 8

Microflore des jus et moûts de Cabernet - Sauvignon rouge de Sèvre et Maine

SEVRE ET MAINE

Station du Landreau

1976 1977

Saccharomyces chevalieri 4 Saccharomyces ellipsoideus 11

Saccharomyces ellipsoideus 3 Saccharomyces chevalieri 5

Saccharomyces rosei 3 Saccharomyces bayanus 3

Metschnikowia pulcherrima 3 — Hanseniaspora uvarum 3

Saccharomyces uvarum 1 Saccharomyces diastaticus 1

Saccharom yces bayanus 1 Saccharomyces rose 1

Aureobasidium pullulans 1 Candida sake 1

Candida krusei 1

Candida intermedia 1

TABLEAU 9

Microflore des jus et moüts de Gamay, Plantet et Grolleau du Pays de Retz

PAYS DE RETZ

Station des Moutiers Gamay

1976 1977

Saccharomyces rosei 12 Saccharomyces ellipsoideus 27

Saccharomyces ellipsoideus 2 Hanseniaspora uvarum 6

Torulopsis candida 2 Metschnikowia pulcherrima 4

Source : MNHN. Paris

LES LEVURES DU VIGNOBLE NANTAIS

Station des Moutiers

1976

Torulopsis gropengiesseri

Saccharomyces chevalieri

Rhodotorula rubra

Metschnikowia pulcherrima

Station de Rocheserviére

Saccharomyces ellipsoideus

Saccharomyces italicus

Saccharomyces chevalieri

Kloeckera apiculata

Metschnikowia pulcherrima

Saccharomyces rosei

Rhodotorula rubra

Torulopsis colliculosa

Brettanomyces intermedius

Station du Pellerin

Saccharomyces ellipsoideus

Saccharomyces rosei

Saccharomyces heterogenicus

Candida valida

RR Ny y

Gamay

1977

Saccharomyces bayanus

Kloeckera apiculata

Aureobasidium pullulans

Saccharomyces chevalieri

Saccharomyces diastaticus

Saccharomyces uvarum

Endomycopsis vini

Rhodotorula pilimanae

Plantet N (rouge)

Hanseniaspora uvarum

Saccharomyces ellipsoideus

Saccharomyces bayanus

Metschnikowia pulcherrima

Aureobasidium pullulans

Kloeckera apiculata

Grolleau (rosé)

TABLEAU 10

Microflore des jus et moûts de Gamay (rosé) des Coteaux de la Loire

COTEAUX DE LA LOIRE

Station d’Oudon

1976

Saccharomyces ellipsoideus

Kloeckera apiculata

Metschnikowia pulcherrima

Saccharomyces bayanus

Saccharomyces chevalieri

Candida valida

Saccharomyces rosei

Aureobasidium pullulans

Kloeckera javanica

Hanseniaspora valbyensis

RK RRR EUR A

1977

Saccharomyces ellipsoideus

Metschnikowia pulcherrima

Hanseniaspora uvarum.

Saccharomyces bayanus

Saccharomyces chevalieri

Saccharomyces italicus

Aureobasidium pullulans

Saccharomyces rosei

KOR Rt

Mew OS

ROS NS hg À 6

Source : MNHN. Paris

22 A.POULARD & L. SIMON

TABLEAU 11

Microflore des jus et moüts de Васо № 1 de la vigne témoin

LABORATOIRE : Vigne expérimentale

1976

Saccharomyces ellipsoideus 6 Saccharomyces italicus 1

Kloeckera apiculata 5 Candida krusei 1

Saccharomyces rosei 2 Aureobasidium pullulans 1

3. REPARTITION DES ESPECES SELON LA CLASSIFICATION DE BRECHOT

ll nous a semblé intéressant de comparer, pour chaque station de prélèvement

et en fonction de l'année, les pourcentages des souches isolées pour chaque

groupe de levures et de préciser pour chacun de ceux-ci l'espèce dominante

du milieu (Tableau 12).

Les espèces du groupe 1

Des différences quantitatives et parfois qualitatives ont été observées pour

la microflore des jus de raisin et des moûts de deux récoltes successives.

En 1976, les espèces sont généralement plus nombreuses qu'en 1977: Saccha-

romyces ellipsoideus est, le plus souvent, l'espèce dominante, mais a été supplan-

tée en 1976, dans les jus et moûts de raisin rouge par Saccharomyces chevalieri

(Le Landreau) et par Saccharomyces rosei (Les Moutiers).

Dans les jus et moûts du cépage Muscadet, on observe pour les différentes

stations un pourcentage de levures inférieur (37,5% à 71%) à celui des jus

et moûts de raisin rouge (38,4% à 84%). Saccharomyces ellipsoideus demeure

l'espèce dominante des moûts à l'exception de ceux de la station d'Oudon où

il est en compétition avec Saccharomyces uvarum qui le supplante et réalise

la phase de fin de fermentation. A la station de Corcoué 2, on rencontre les

pourcentages les plus faibles du groupe (42% et 37,5%).

Dans les jus et moûts de Gros Plant, les levures du groupe 1 sont toujours

bien représentées (45,1% à 89,4% des souches), Saccharomyces ellipsoideus

est toujours l'espèce prépondérante. Les caves les plus riches en espèces de ce

groupe sont celles du Landreau et des Moutiers (74,1% à 87,2%); la station

de Corcoué 1 montre le pourcentage levurien le plus faible, notamment en 1976

(45,1%).

Tableau 12

Comparaison des pourcentages des souches de chaque groupe dans les jus et moüts en 1976

<t1977. À gauche de chaque pourcentage, est notée l'espèce dominante du groupe.

Source : MNHN, Paris

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Source : MNHN. Paris

24 A. POULARD & L. SIMON

Les espéces du groupe 2

Comme pour le groupe précédent, il existe, selon les stations, des différences

d'ordre qualitatif et quantitatif dans la répartition des levures apiculées,

Dans les jus et moüts de cépages rouges, Kloeckera sp. est remarqué en 1976

à Oudon et Rocheserviére; l'année suivante Hanseniaspora sp. domine trés

largement la microflore du groupe 2 dans toutes les stations. Les levures de

ce groupe sont absentes des moüts du Landreau et des Moutiers en 1976, mais

sont très abondantes dans les moüts de Plantet vinifié à Rocheserviére en 1977.

Dans les Muscadet, les levures du groupe 2 sont bien représentées (16% à

38,2% des souches). Kloeckera sp, est toujours présente, sauf à la station de

Corcoué 2 où, en 1977, domine Hanseniaspora uvarum. Dans cette dernière

station, le pourcentage des espèces de ce groupe présente la valeur la plus forte.

Dans les jus et moûts de Gros Plant, la proportion des souches varie entre

2,8% et 41,8%. Comme dans les jus et moüts de raisin rouge, Kloeckera sp.

est mieux représentée en 1976 tandis que l'inverse est observé pour Hansenia-

spora sp. La station des Moutiers est particuliérement pauvre en levures de ce

groupe (2,8% à 3,2%), celle de Corcoué 1 en est bien pourvue (19,6% à 41,8%).

Les espèces du groupe 3

Ces espèces levuriennes sont très diverses mais leur pourcentage reste classi-

quement faible, L'espèce principale, Metschnikowia pulcherrima, colonise les

jus et moûts de cépages rouges, sauf aux Moutiers en 1976 et au Landreau en

1977, où elle est respectivement remplacée par Torulopsis sp. et Candida sp.

Dans les jus et moûts de cépages blancs elle entre en concurrence, ou est tota-

lement supplantée par Aureobasidium, Torulopsis, Rhodotorula ou Candida

(jus et moúts de Muscadet, Le Landreau, Oudon 1976, Corcoué 2 1976) ou par

Exophiala et Rhodotorula (jus et moüts de Gros Plant, les Moutiers 1977).

Les pourcentages des souches de ce groupe sont relativement importants

dans les stations suivantes: Le Landreau (rouges, 33,6% en 1976), Muscadet

(28% en 1976, 41,6% en 1977), Oudon (rouges, 29,6% en 1977), Muscadet

(29,7% en 1977).

4. MICROFLORE DES JUS ET MICROFLORE DES MOUTS

Les cépages blancs

Les résultats concernant le nombre de souches observées pour chaque espéce

levurienne, la moyenne des pourcentages, et leur répartition dans les jus (avant

fermentation) ou dans les moüts (pendant la fermentation) ont été rapportés

dans le tableau 13.

- 20 espèces ont été isolées dans les jus de raisin mais parmi celles-ci, les

espèces du groupe 3 de BRECHOT sont les mieux représentées du point de

vue de la diversité. Par leur nombre, les souches de Saccharomyces ellipsoideus

(22,9% de Vensemble des souches), S. rosei (13%), Kloeckera apiculata (15,3%)

Source : MNHN. Paris

TABLEAU 13

Répartition des levures dans les jus et moüts de raisin blanc

GRouPE l

Saccharomyces ellipsoideus

Saccharomyces rosei

Saccharomyces chevalieri

Saccharomyces bayanus

Saccharomyces uvarum

Saccharomyces italicus

Saccharomyces capensis

Saccharomyces bailit

Saccharomyces diastaticus

Saccharomyces eziguua

Saccharomyces globosus

GROUPE 2

Kloeckera apiculata

Kloeckera javanica

Kloeckera africana

Hansentacpora uvarun

GROUPE 3

Aureobasidium pullulans

Candida intermedia

Candida krusei

Candida sorbosa

Candida valida

Ezophiala jeanselmei

Kluyveromyces veronae

Metschnikowia pulcherrima

Pichia membranaefaciens

Pichia rhodanensis

Pichia vini

Rhodotorula glutinis

Rhodotorula rubra

Zorulopsis candida

Torulopsis collieulosa

Torulopsis gronengiessert

Torulopets lactis-Condensí

Trichosporon eutaneum

Trichosporon pentcillatun

AVANT FERMENTATION FERMENTATION

Nombre de| Moyenne [Nombre de] Moyenne

souches des souches des

observées 2 observées z

25 22,9 162 43,3

21 13,0 14 4,5

E 38 21 3

o o 24 6,9

1 0,6 18 5,5

1 0,5 4 0,8

П 0,9 3 0,8

o o 3 0,7

o o 2 0,3

1 0,7 1 0,1

o o 1 0,2

23 15,3 42 11,0

6 3,4 4 0,9

o o 2 0,3

8 6,1 19 4,9

7 4,9 6 d

1 0,9 1 0,3

1 0,8 1 0,3

o o 1 0,2

o o 4 1,0

o o 2 0,2

o o 1 0,3

14 14,2 14 3,9

o o 2 0,6

o o 1 o,

o o 1 0,1

4 2 3 0,7

2 1,5 o o

3 2,4 6 1,9

4 3,0 2 0,5

1 0,5 o o

2 1,9 o o

o o B 0,8

o o 1 0,3

Source : MNHN. Paris

26 A.POULARD & L. SIMON

et Metschnikowia pulcherrima (14,2%) dominent le milieu.

Parmi les espèces rencontrées de façon sporadique, on note Hanseniaspora

uvarum (6,1%), Kloeckera javanica (3,4%), divers Torulopsis (7,9%) et Aureo-

basidium pullulans (5%).

- 31 espèces ont été isolées au cours des fermentations alcooliques, amorcées

le plus souvent par des levures à faible pouvoir alcoogène parmi lesquelles nous

avons noté des levures apiculées (Kl. apiculata, 11%, Hanseniaspora uvarum,

(4,9%) et Metschnikowia pulcherrima, moins abondante que dans les jus de

raisin (3,9%); ces espéces sont accompagnées par divers Torulopsis (T. candida,

T. colliculosa) et par Aureobasidium pullulans. Les stades fermentaires suivants

sont assurés par Saccharomyces ellipsoideus (43,3%), S. chevalieri (5,3%), S

uvarum (5,5%) et S. bayanus (6,9%); 5. rosei est rencontré moins fréquemment

(4,5%) que dans les jus de raisin; ces espèces représentent 65% des souches

isolées au cours de la fermentation alcoolique.

Les levures à caractère oxydatif dominant appartiennent aux genres Candida

(1,9%: C. intermedia, C. krusei, C. sorbosa, C. valida), Pichia (1,1%: P. membra-

naefaciens, P. vini, P. rhodanensis), parfois Rhodotorula (0,7%: Rh. glutinis)

et Exophiala (0,2%: E. jeanselmei).

Les cépages rouges

Le tableau 14 présente la liste des espèces levuriennes rencontrées dans les

jus de raisin et moûts en fermentation, leur importance numérique et leur

répartition.

- Les espèces isolées dans les jus de raisin sont nombreuses (15) et assez

équitablement représentatives des trois groupes de BRECHOT. Saccharomyces

ellipsoideus et Metschnikowia pulcherrima sont les espèces les plus fréquentes

(19,3% et 18,6%), puis viennent Kloeckera apiculata, Hanseniaspora uvarum

et Aureobasidium pullulans (9,9% à 11,1%). Les pourcentages des divers Toru-

lopsis (T. candida, T. colliculosa, T. gropengiesseri) sont voisins de ceux qui

ont été rencontrés dans les jus de raisins blancs (8,575); par contre, Saccharo-

myces rosei est nettement moins bien représenté (3,4%).

- Dans les moüts en fermentation, on observe une plus grande variété d'es-

péces; la diversité des levures du groupe 3 est moins importante que dans les

moûts de vins blancs; on remarque le faible pourcentage des levures apiculées

où Hanseniaspora uvarum (7,58%) représente l'espèce dominante; Aureobasi-

dium pullulans n'est apparu qu'épisodiquement et les levures du genre Torulopsis

sont absentes: Candida valida, C. intermedia et C. sake représentent 3,94%

de l'ensemble des souches isolées dans les moûts mais n'ont pas été identifiées

dans les jus.

Les levures rencontrées au cours de la phase tumultueuse de la fermentation

alcoolique appartiennent essentiellement à 5 espèces, Saccharomyces ellipsoi-

deus, S, bayanus, S. chevalieri, S. italicus et S. rosei qui constituent à elles seules

73% de la population totale.

Source: MNHN. Paris

LES LEVURES DU VIGNOBLE NANTAIS 27

TABLEAU 14

Repartition des levures dans les jus et moüts de raisin rouge

AVANT FERMENTATION FERMENTATION

Nombre de| Moyenne |Nombre de| Moyenne

souches des souches des

observées 1 observées 1,

Groupe 1

Saccharomyces ellipsotdeus п 1935 79 BS

Saccharomyces roset 2 3,4 2T 18,9

jaecharomyces chevalieri 5 8,4 14 6,8

‚charomyces bayanus o o 13 6,9

Saccharomyces italicus o o 6 855

Saccharomyces uvarum 1 1,6 1 0,2

jaccharomyces diastaticus о o 2 0,6

'accharomyces heterogenicu: 0 о 1 0,7

Groupe 2

Kloeckera apiculata 7 9,9 9 515

Kloeckera javanica 1 0,8 o o

ianseniaspora uvarım 6 1124 17 D

eniaspora valbyensis 1 0,8 0 0

Groupe 3

Aureobasidium pullulans 6 10,7 0,4

tanomyces intermedius 0 1 0,6

Candida intermedia о 1 0,9

candida krusei 2 0 о

Jandida sake o 1 0,4

vandida valida 0 3 SS)

indomycopsis vini 0 1 0,2

Metschnikowia pulcherrima 12 13 6,1

lotorula pilimanae o 1 0,2

Rhodotorula rubra 1 1 0,6

Torulopsis candida 2 о o

Torulopsis colliculosa 1 o o

orulopsis gropengiessert 1 o 0

Source : MNHN. Paris

28 A.POULARD & L. SIMON

D'autres levures ont été rencontrées d'une maniére sporadique: c'est le

cas de S. uvarum, S. diastaticus et S. heterogenicus. La microflore du groupe 3

est plus riche en espéces mais quantitativement plus réduite que dans les jus

de raisin où les Candida sont accompagnées de Rhodotorula rubra, Rh. pili-

manae et Brettanomyces intermedius. Le genre Pichia n'a pas été décelé.

Diverses levures sont spécifiques de la microflore des cépages rouges : Saccha-

romyces heterogenicus, Hanseniaspora valbyensis, Brettanomyces intermedius,

Endomycopsis vini, Rhodotorula pilimanae.

D'autres espèces sont particulières aux jus et moûts de raisin blanc : Saccha-

romyces bailii, S. capensis, S. exiguus, S. globosus, Kloeckera africana, Candida

sorbosa, Exophiala jeanselmei, Kluyveromyces veronae, Pichia membranae-

faciens, Pichia rhodanensis, P. vini, Torulopsis lactis-condensi, Trichosporon

cutaneum, T. penicillatum.

VI. — DISCUSSION

Au cours des recherches entreprises sur le vignoble nantais 748 souches,

reprósentant 40 espéces levuriennes, ont été isolées (Tableau 15). Parmi les

14 genres identifiés, 6 sont ascosporogénes (Endomycopsis, Hanseniaspora,

Kluyveromyces, Metschnikowia, Pichia, Saccharomyces) et 8 non ascosporo-

gènes (Aureobasidium, Brettanomyces, Candida, Exophiala, Kloeckera, Rhodo-

torula, Torulopsis, Trichosporon).

Le genre Saccharomyces est dominant comme dans toute fermentation

de type classique; 12 espèces ont été identifiées, soit 62,5% de l'ensemble

des souches, Saccharomyces ellipsoideus représente, à lui seul, 37% des indi

dus; cette levure elliptique peut être accompagnée de 5 autres espèces impor-

tantes: S. rosei (8,5%), S, chevalieri (5,6%), S. bayanus (575), S. uvarum (2,8%),

S. italicus (1,475). L'association Kloeckera sp. (ou Hanseniaspora sp.) et Metschni-

howia pulcherrima est remarquable en début de fermentation alcoolique.

Des différences qualitatives et quantitatives apparaissent entre les espéces

principales du groupe 1 selon les années de recherche; d'une maniére générale

remarquée dans 5075 des stations, ce type de microflore est plus abondant en

1976, surtout en ce qui concerne les jus et moüts de Muscadet; cette dissem-

blance est atténuée pour les cépages rouges et le Gros Plant où les pourcentages

apparaissent globalement plus élevés. Saccharomyces ellipsoideus, l'espèce domi-

nante des moúts, a été supplantée en 1976, au Landreau, par S. chevalieri et

aux Moutiers par S. rosei; en 1977, S. ellipsoideus assure, conjointement avec

S. uvarum, la fermentation des moûts de Muscadet,

Les levures du groupe 2 peuvent être absentes des moûts (Le Landreau et

les Moutiers, 1976, rouges) ou présentes: les espèces prépondérantes sont,

dans ce cas, Kloeckera apiculata et Hanseniaspora uvarum. En 1976, la première

de ces deux espèces est identifiée dans toutes les stations de prélèvement, son

Source : MNHN, Paris

LES LEVURES DU VIGNOBLE NANTAIS 29

TABLEAU 15

Répartition des espéces et nombre des souches lévuriennes isolées en 1976 et 1977

Nombre de|Présence LEVURES Nombre de [Présence

, rapportée à rapportée

VURES ASCOSPOROGENES | ches [1000 soumes. NON ASCOSPOROGENES | souches NO00 souche:

vint 1 1,3 \Aunsobaeidium pulZulane, n 28,1

intermedius 1

spora uvarum 50 66,8 |érettanomyo i

? 9

в batt

4 5,3

»ourcentage est élevé dans les Muscadet (20-36,8%) mais plus faible dans les

ros Plant et les rouges (à l'exception des moüts de Corcoué 1 et Oudon);

association Kloeckera apiculata et Hanseniaspora uvarum n'a été observée que

ins une station (Le Pellerin, Gros Plant). En 1977, Hanseniaspora uvarum

omine d'une maniére significative dans les moûts de cépages rouges élaborés

: n'existe, en ce qui concerne les cépages blancs, que dans ceux du Muscadet

Jorcoué) et du Gros Plant (Le Landreau, Les Moutiers, Corcoué 1) ou elle

t associée à Kloeckera apiculata dans ce dernier cas.

De nombreuses espéces à faible pouvoir fermentaire ou à métabolisme

trictement oxydatif, appartenant aux genres Candida, Pichia et Rhodotorula

groupe 3) ont été fréquemment trouvées dans les jus de raisin avant fermen-

ition. Dans plusieurs cas, nous avons mis en évidence la présence de levures

ares (POULARD et SIMON, 1980) ou encore jamais signalées dans les jus et

notits de raisin: Pichia rhodanensis (Corcoué, 1977), Pichia vini (Le Pellerin,

1977), Endomycopsis vini (Les Moutiers, 1977), Exophiala jeanselmei (Oudon,

es Moutiers, 1977), Rhodotorula pilimanae (Les Moutiers, 1977), Torulopsis

ropengiesseri (Le Landreau, Les Moutiers, 1976), Trichosporon cutaneum

Oudon, Le Landreau, 1977), Trichosporon penicillatum (Le Landreau, 1977).

Source : MNHN. Paris

30 A.POULARD & L.SIMON

L'association fréquente d’Aureobasidium pullulans, de Trichosporon peni-

cillatum et T. cutaneum a été remarquée en 1977.

Selon la méthode de regroupement, proposée par BRECHOT (1962) les

748 souches isolées dans le vignoble sont réparties comme suit :

Groupe 1 : 62,8% Groupe 2 : 19,3% Groupe 3 : 17,8%

La valeur du rapport groupe 2/groupe 1 x 100 est un indice, classiquement

utilisé en cenologie, qui permet de comparer les vignobles français les uns par

rapport aux autres; les valeurs observées décroissent généralement en fonction

de la septentrionalité des vignobles (BRECHOT, 1962); dans la région nantaise,

la valeur de ce rapport s'élève à 30,7%: nous le comparerons, en fin de chapitre,

avec ceux qui ont été obtenus par CUINIER dans la région, et par d'autres

auteurs dans d'autres vignobles francais ou étrangers.

A) Les travaux régionaux précédant notre étude

88 levures appartenant à 8 genres différents ont été isolées en 1975 par CUI-

NIER et coll. (1980) à partir de fermentations aseptiques réalisées au Labora

toire; les espèces les mieux représentées sont Metschnikowia pulcherrima (23,8%

de l'ensemble des souches) et Kloeckera apiculata (30,4%). Une troisième

espèce dominante, Saccharomyces ellipsoideus est mise en évidence dans des

moûts vinifiés en grand volume à la propriété. Les résultats que nous avons

obtenus à partir de moûts des vendanges de raisin blanc, sont en a

ceux de cet auteur; la réprésentation numérique des Saccharomyces est, en

particulier, tout à fait homologue; 15 espèces levuriennes sont communes à

nos deux recherches.

cord avec

Metschnikowia pulcherrima, Saccharomyces bayanus, S. ellipsoideus, S.

chevalieri, S. globosus, S. italicus, S. rosei, Kloeckera apiculata, Aureobasidium

pullulans, Brettanomyces intermedius, Candida sake, C. sorbosa, Rhodotorula

glutinis, Rh. rubra, Torulopsis candida.

Notons qu'Aureobasidium pullulans a été isolé par CUINIER et coll. uni

quement à partir d'épicarpes de raisin; nous l'avons remarqué, en plus, dans

les moûts issus de plusieurs terroirs (SIMON et POULARD, 1979). L'inter-

vention des Torulopsis dans les processus fermentaires (à l'exception de celle

de T. ernobii et de T. lactis-condensi) s'est produite durant les deux années

(Tableau 16), mais ni CUINIER, ni nous-méme, n'avons observé Torulopsis

stellata parmi la microflore du vignoble.

TABLEAU 16

Présence des Torulopsis dans le vignoble en fonction des années

CUINIER et coll. POULARD

Torulopsis candida 1975-1976-1977 1976-1977

Torulopsis colliculosa 1975 1976-1977

Torulopsis ernobii 1976

Torulopsis gropengiesseri 1975 1976

Torulopsis lactis-condensi 1977

Source : MNHN. Paris

LES LEVURES DU VIGNOBLE NANTAIS 31

Si CUINIER et coll. ont mis en évidence plusieurs espéces que nous n’avons

pas rencontrées, nous avons, par contre, isolé le cortège suivant :

Saccharomyces uvarum, S. capensis, S. bailii, S. diastaticus, Kloeckera java-

nica, Hanseniaspora uvarum, Candida intermedia, C. krusei, C. valida, Exophiala

jeanselmei, Kluyveromyces veronae, Pichia membranaefaciens, P. rhodanensis,

P. vini, Torulopsis lactis-condensi, Trichosporon cutaneum, T. penicillatum.

Il existe donc quelques différences entre les résultats de notre étude et ceux

de CUINIER et coll.

- d'ordre quantitatif concernant la composition de la microflore et le nombre

les souches du groupe 1; en année chaude (1976), nous avons isolé 11 espéces

lont 5 seulement ont été remarquées en 1977; les résultats de CUINIER appa-

aissent plus constants au cours des deux années d’étude;

- d'ordre qualitatif pour le groupe 2: nous avons isolé Kloeckera javanica

^t Hanseniaspora uvarum, non observées par cet auteur;

d'ordre générique dans la composition du groupe 3: nous avons isolé

es genres Exophiala, Kluyveromyces et Trichosporon.

Ces differences sont vraisemblablement en rapport avec les techniques de

ravail que nous avons l'un et l’autre adoptées; comme nous l'avons remarqué

récédemment, CUINIER a étudié des fermentations aseptiques en petit volume

: nous avons, nous-méme, opéré sur de grands volumes, dans les conditions

le la pratique viticole.

B) Les travaux réalisés dans les vignobles septentrionaux

ll nous a paru intéressant de comparer nos résultats avec ceux qui ont été

btenus par divers auteurs, dans des vignobles situés à la limite Nord de la

ulture de la vigne: Touraine, Champagne, Allemagne (Franconie), Tchecoslo-

iquie (Skalika-Zahorie, Bohème, Slovaquie), République Démocratique Alle-

iande (Saale-Unstrutt).

Dans la region champenoise, BRECHOT (1968) a isole, au cours de 4 anndes

uccessives, 511 souches de levures à partir de moüts de Chardonnay (Cramant)

Pinot Noir (Verzenay). La fermentation est généralement amorcée par divers

orulopsis (T. candida, T. dattila, T. stellata) auxquels succèdent des levures

métabolisme alcoogène plus élevé (Saccharomyces ellipsoideus, S. florentinus);

loeckera apiculata n'est intervenu qu'au cours des années chaudes et Metschni-

»wia pulcherrima est absente.

Dans la région de Chinon, CUINIER et GUERINEAU (1978) ont travaillé

partir d'échantillons recueillis dans deux types de cuves (bois et acier) et

nt isolé 32 espéces de levures. L'importance du pourcentage de Saccharomyces

varum (2995), la faible représentation de S. ellipsoideus et la présence de

:ombreuses levures à métabolisme oxydatif dominant ont été remarquées par

es auteurs; de façon exceptionnelle, Metschnikowia pulcherrima a pu être

identifiée jusqu'au 9ème jour de fermentations lentes; Saccharomyces bayanus

: été isolé dans les deux types de cuves en fin de phase fermentaire.

Source - MNHN. Paris

32 A.POULARD & L. SIMON

En Allemagne du Sud, I. BENDA (1964) a observé sur les raisins et dans

les moúts la prédominance de levures à faible pouvoir fermentaire (Tableau 17);

l'auteur signale aussi l'important pourcentage de l'association Metschnikowia

pulcherrima - Kloeckera apiculata (75% des souches fermentatives). Saccharo-

myces ellipsoideus, S. rosei et S. uvarum représentent les principales espèces

du genre; la proportion des Torulopsis varie de 7 à 10% selon les années; au

cours des deux années de recherche effectuées par l'auteur, 1133 souches d'Au-

reobasidium pullulans (= Dematium pullulans) ont été isolées dans les moüts

en fermentation.

TABLEAU 17

Pourcentage de quelques espèces levuriennes isolées dans les régions viticoles septentrionales

Les colonies établies de la gauche vers la droite respectent la continentalité de plus en plus

grande des vignobles

z 3 4 5 + 7 RFI

France а REA Ücheensuovaavır RDA,

A E n "m з 54,6 n? m "m

Études effectuées par 1: Poulard (1976-77); 2: Cuinier (1978); 3: Brechot (1968); 4: Benda

(1964); 5-6-8: Minarik (1971); 7: Laho (1970).

LAHO et coll. (1970) ont isolé plus de 3700 souches de levures dans diffé-

rentes régions viticoles de la Slovaquie. Metschnikowia pulcherrima (9,2%) et

Kloeckera apiculata (13,7%) assurent toujours le début de la fermentation

alcoolique (Tableau 17); parmi les nombreuses espèces qui accompagnent

Saccharomyces ellipsoideus (64,4%), on remarque S. bayanus (5,2%) et S.

uvarum (3,1%).

La microflore des régions viticoles périphériques de Tchécoslovaquie (Skalica-

Zahorie, Bohème) et de la République Démocratique Allemande (Saale-Unstrutt)

a été étudiée par MINARIK (1971). Ces régions, comme les zones citées ci-

dessus, sont caractérisées par des conditions climatiques extrêmes pour la culture

de la vigne, oà l'association Metschnikowia pulcherrima - Kloeckera apiculata -

Saccharomyces ellipsoideus régne et engendre la fermentation spontanée des

moüts; c'est en RDA (Saale-Unstrutt) que Metschnikowia pulcherrima atteint

son pourcentage le plus élevé (19,8%) (Tab. 17).

Source : MNHN. Paris

LES LEVURES DU VIGNOBLE NANTAIS 33

Nos travaux, en accord avec ceux de CUINIER, montrent bien que les regions

de la Loire, situées à la limite Nord de la culture de la vigne, possèdent une

microflore caractérisée par la présence de Metschnikowia pulcherrima et Kloec-

kera apiculata associées de façon constante au départ des fermentations. Cette

association rappelle celle des vignobles septentrionaux (à l'exception de ceux

de la région champenoise) oà Metschnikowia pulcherrima -Kloeckera apiculata -

Saccharomyces ellipsoideus réalisent les phénomènes fermentaires.

La richesse en espèces de la microflore oxydative (notamment en 1977)

ct la présence d’Aureobasidium pullulans dans de nombreux terroirs soulignent

une certaine similitude entre la composition floristique des moûts nantais et

celle d'autres vins des pays de Loire (CUINIER et coll, loc. cit.) et de Franconie

I, BENDA, 1964). Au cours des années 1976 et 1977, nous avons isolé plusieurs

souches de cette espèce dans le sol des vignobles, les fleurs de vigne, les moüts en

fermentation, puis dans les vins embouteillés (SIMON et POULARD, 1979).

ete espèce avait été remarquée par CUINIER et coll, (1980) sur les épicarpes

des raisins de 3 terroirs situés sur des aires d’appellations (A.O.C. Vouvray,

^.O.C. Touraine, A.O.C. Montlouis) où elle représentait 23% des souches; dans

le terroir de Montlouis, Aureobasidium pullulans était accompagné de Trichospo-

»n cutaneum que nous avons, nous-méme, identifié dans les moüts des stations

lu Landreau et d’Oudon, Plus tard, les mêmes auteurs, ont isolé cette espèce

nouveau sur des épicarpes de raisins récoltés dans une vigne du Loir et Cher.

Les valeurs du rapport (R) proposé par BRECHOT (1962) que nous avons

itées précédemment, permettent de comparer entre elles 3 series de vignobles

éaniques, continentaux et méridionaux :

Vignobles océaniques Vignobles continentaux Vignobles méridionaux

Bordelaist R=58,2 Beaujolais R=13,4 Baixas R

Cognac R=25,1 Champagne R=11,6 Banyuls R

Nantais R=30,7 Chinonais R= 9 Régions

italiennes*

Les valeurs les plus fortes caractérisent les vignobles où l'influence océanique

rédomine (Bordelais, Nantais, Cognac); la valeur observée dans les régions

taliennes (76,4%) doit être interprétée, les prélèvements n'ayant pas toujours

té effectués systématiquement durant la phase tumultueuse de la fermentation

CASTELLI, 1974). Les valeurs notées dans les vignobles continentaux et meri-

lionaux sont plus faibles; ceci permet de constater, comme on pouvait s'y

tendre, que la microflore du vignoble nantais est d’un type océanique classique

sù R présente une valeur élevée dûe à une forte proportion de la microflore

lu groupe 1.

Nous remercions Mademoiselle R, REBERTEAU de sa collaboration technique,

valeurs calculées par BRECHOT,

Source : MNHN, Paris

34 A. POULARD & L. SIMON

BIBLIOGRAPHIE

BENDA 1., 1964 — Die Hefeflora des Frankischen Weinbaugebietes. Weinberg und Keller

11:67-80.

BIDAN P., 1969 — Procédés d'élaboration technologique et caractéristiques des vins mous-

seux. Bulletin de l'O.I.V. 455: 34-52.

BIDAN P. et ANDRÉ L., 1954 — Étude sur les levures à voile des vins jaunes du Jura.

Xème Congrès international des Industries agricoles et alimentaires, Madrid, 10 p.

BRECHOT P., CHAUVET J. et GIRARD H., 1962 — Identification des levures d’un moat

de Beaujolais au cours de sa fermentation. Annales de Technologie agricole 11: 235-244,

BRECHOT P., CHAUVET J. et GIRARD H., 1968 — Identification des levures de moûts

de Champagne au cours de la fermentation. Iléme Congrés international des Levures,

Bratislava, 14 p.

CASTELLI T., 1971 — L'écologie des levures. Colloque international d'Oenologie, Vignes

et Vins N spécial: 19-25.

CASTELLI T., 1974 — L'écologie des levures. Colloque international d'Oenologie, Arc et

Senans, Vignes et Vins N° spécial : 19-25.

CAZES P.Y., 1961 — Essai de sélection des levures pour un vin mousseux naturel. Thèse

de Docteur-Ingenieur, Toulouse, 96 p.

CUINIER C. et GUERINEAU L., 1978 — Evolution de la microflore au cours de la vinifi-

cation des vins de Chinon. Vignes et Vins 268: 29-41.

CUINIER C. et PUISAIS J., 1978 — Influence des traitements antifongiques sur la flore

levurienne. Étude détaillée dans le cadre d'un vignoble du Loir et Cher à Oisly. Compte

Rendu des Travaux de l'I.T V., Montmélian. Résultats non publiés, 8 p.

CUINIER C. et PUISAIS J., 1978 — Identification des levures responsables de la fermenta

tion du Pineau de la Loire dans trois terroirs viticoles de Touraine. Compte Rendu

des Travaux de 1'1.T.V,, Montmélian. Résultats non publiés.

CUINIER C., BRELET M. et PUISAIS J., 1980 — Influence des traitements antifongiques

sur la flore levurienne; étude détaillée dans le cadre d'un vignoble de Loire Atlantique

Vignes et Vins (sous presse).

DE HOOG G.S. and HERMANIDES-NIJHOF E.S., 1977 — The black yeasts and allied

hyphomycetes. Studies in Mycology 15: 222 p., Barn.

DESCOFFRE A., 1904 — Etude sur les levures œnogènes de Charente. Thèse de Pharmacie,

Bordeaux.

DOMERCQ S., 1956 — Etude et classification des levures de vin de la Gironde. Thése de

Docteur-Ingénieur, Bordeaux, 114 р.

DOMERCQ S., 1967 — Isolement et identification des Levures, Connaissance de la Vigne

et du Vin 2: 39-50.

GALZY P., 1958 — Origine de la microflore des vins. Le Progres agricole et viticole 3:

58-65.

GUITTARD A., 1973 — Identification des levures du cru de Rivesaltes. Mémoire, Diplôme

national d'Oenologue, Bordeaux.

LAHO L., MINARIK E. et NAVARA A., 1970 — Chimie, microbiologie et analyse des

vins. Ed. V.S.A.V., 150 p., Bratislava.

LODDER J., 1970 —The yeasts, a taxonomic study. North-Holland Publishing Company,

Amsterdam, 1385 p.

Source : MNHN. Paris

LES LEVURES DU VIGNOBLE NANTAIS 35

MINARIK E., 1971 — Étude de la flore levurienne des régions périphériques en Tchécoslo-

vaquie. Connaissance de la vigne et du vin 2: 185-198.

PARK Y.H., 1974 — Contribution à l'étude des levures de Cognac. 1. Étude et classification

des levures de Cognac. Connaissance de la vigne et du vin : 253-278.

PASTEUR L., 1864 — Les études sur le vin. C. R. Ac. Sc. LVIII : 142150.

POULARD A., 1977 — Contribution à l'étude de la flore levurienne du vignoble nantais:

fin de phase fermentaire. Vignes et Vins 264: 53-60.

POULARD A., 1979 — Recherches sur la microflore levurienne, fermentaire et oxydative

du vignoble nantais. Thése de Doctorat d'Université, Nantes, 196 р.

POULARD A. et SIMON L., 1980 — Mise en évidence de deux espèces de levures nouvelles

dans les moüts de raisin. Revue Frangaise d’Oenologie 78 (sous presse).

RENAUD J., 1941 — Les levures des vins du Val de Loire. Recherches morphologiques,

biologiques et cytologiques. These de Sciences naturelles, Paris, 126 p.

ROSET M., 1970 — Etude de quelques levures dites «sauvages». Essais en vue de leur

emploi dans l'industrie des jus de raisin. Thèse de Docteur-Ingénieur, Toulouse, 136 p.

SAPIS-DOMERCQ S., 1969 — Comportement des levures apiculées au cours de la vinifi-

cation. Connaissance de la vigne et du vin 4 : 379-392.

SAPIS-DOMERCQ S., GUITTARD A., 1976 — Etude de la microflore levurienne du Rous-

sillon. Connaissance de la vigne et du vin 1: 1-21.

SIMON L. et POULARD A., 1979 — Présence d'Aureobasidium pullulans (de Bary) Arnaud

dans le vignoble nantais. Bulletin de la Société des Sciences naturelles de l'Ouest de

la France 1: 57-68.

Source : MNHN. Paris

ETUDE ULTRASTRUCTURALE DES ASQUES

ET DES ASCOSPORES DE TRUFFES DU GENRE TUBER

1. LES ASQUES

par A.PARGUEY-LEDUC et M.C. JANEX-FAVRE*

RÉSUMÉ. — L'organisation des asques présente une grande homogénéité chez les espèces

de Truffes étudiées (Tuber aestivum, T. bituminatum, T. dryophilum, T. excavatum, T.

melanosporum, T. mesentericum, T. rufum). Les caractéres les plus originaux de ces asques

sont: - leur forme globuleuse; - l'existence de polarités successives dans la répartition de

leurs constituants internes; - le mode de délimitation individuel de leurs ascospores; - la

présence d'un sac post-sporal autour de ces ascospores.

SUMMARY. — Ultrastructural studies of asci and ascospores in Truffles (g. Tuber). 1.

The asci — In the species of Tuber here studied (Tuber aestivum, T, bituminatum, T.

Iryophilum, T. excavatum, T. melanosporum, T. mesentericum, T. rufum), the ascus

organization is homogeneous, The most original features of the asci are : - a globular shape;

successive polarities in the components distribution; - individual process of ascospore

delimitation; - occurence of a post-sporal membrane surrounding the ascospores.

Ayant eu la possibilité d'effectuer des observations chez diverses Truffes

du g. Tuber (Tuber aestivum, T. bituminatum, T. dryophilum, T. excavatum,

T. melanosporum, T. mesentericum, T. rufum), nous nous proposons, au terme

de notre étude - dont certains résultats ont déjà été publiés (JANEX-FAVRE

et PARGUEY-LEDUC, 1976; PARGUEY-LEDUC et JANEX-FAVRE, 1977

a et b; JANEX-FAVRE, 1977; JANEX-FAVRE et PARGUEY-LEDUC, 1980) -

de comparer ces diverses espèces entre elles, quant à la structure de leurs asques

et de leurs ascospores, en microscopie électronique.

* Laboratoire de Cryptogamie, Université Pierre et Marie Curie; 9 quai Saint-Bernard,

75005 Paris.

CRYPTOGAMIE, MYCOLOGIE (Cryptog. Mycol.) TOME 2 (1981).

Source : MNHN. Paris

38 A. PARGUEY-LEDUC & M.C. JANEX-FAVRE

1. FORMATION DES ASQUES

Les asques se forment à l'extrémité de filaments ascogènes dicaryotiques

dont la cellule terminale se transforme en cellule ascogéne. Selon la rógle, celle-ci

forme un bec, puis une anse (fig. 1 et 2) par laquelle le noyau du bec va rejoindre

celui de la cellule sous-jacente (= cellule-pied). Cette dernière, ainsi que le bec,

a un contenu très clair et trés vacuolisé. Au contraire, la cellule pro-ascale

terminale apparait beaucoup plus sombre. Elle renferme, outre ses deux noyaux,

diverses inclusions, réparties irróguliérement, parmi lesquelles des vacuoles,

peu nombreuses et de taille inégale, quelques globules lipidiques et des vesicules

à contenu moyennement dense aux électrons. Sur les cloisons séparant la cellule

pro-ascale du bec ou du pied sont parfois visibles des corps synaptiques très

denses aux électrons (fig. 2). La paroi de la cellule pro-ascale, peu épaisse,

comporte un exoascus mince et sombre et un endoascus plus épais et plus clair.

Ensuite la cellule pro-ascale commence à s'élargir et une zonation horizontale

de ses constituants apparaît, variable selon les espèces. Chez le Tuber rufum

(fig. 3) la partie sommitale de la cellule pro-ascale est essentiellement occupée

par de nombreuses et volumineuses mitochondries à longues crêtes parallèles.

Sa partie moyenne contient des éléments du réseau endoplasmique. Sa partie

basale renferme les deux noyaux, des vacuoles, petites et plus ou moins con-

fluentes, et des globules lipidiques. D’autres vacuoles sont réparties dans tout

le volume de la cellule pro-ascale, De volumineux lomasomes y sont également

visibles. Chez le Tuber excavatum (fig. 4) la partie sommitale de la cellule

pro-ascale, beaucoup plus claire, est pratiquement remplie de très volumineuses

vacuoles,

2. L'ASQUE AVANT L'ASCOSPOROGENESE

a) L’élargissement de la cellule pro-ascale s'étant poursuivi, le jeune asque

devient approximativement globuleux (fig. 5 et 6), avec un pied, plus ou moins

marqué selon les espèces. Les deux noyaux du dicaryon fusionnent en un noyau

unique, diploïde, situé au sein d'une zone cytoplasmique périnucléaire assez

dense aux électrons. En dehors de cette zone la polarité de répartition des consti-

tuants disparait; les vacuoles se dispersent dans tout le volume de l'asque: entre

elles sont reconnaissables des rosettes de glycogène.

b) Par la suite, une accumulation continue de glycogène se produit dans

Vasque, au détriment des vacuoles (fig. 7). Les rosettes présentent souvent

une disposition rayonnante autour des plages vacuolisées. En méme temps

la paroi ascale s'épaissit, sans que sa constitution soit modifiée (fig. 8).

c) Ensuite le noyau de fusion migre dans la partie sommitale de Vasque

(fig. 9). Corrélativement une nouvelle polarité de répartition des constituants

s'établit. Les vacuoles se localisent principalement autour du noyau, dans le tiers

supérieur de l’asque, tandis que le glycogène est très abondant dans tout le reste

de Pasque.

Source - MNHN. Paris

ULTRASTRUCTURE DES ASQUES DU G. TUBER 39

d) Le noyau de fusion subit une première division (fig. 10). Les deux noyaux

qui en résultent, entourés d'une zone péri-nucléaire commune, se situent tout

au sommet de l'asque, trés prés du plasmalemme. Corrélativement apparaît

dans chaque vacuole un volumineux globule, très dense aux électrons (= sans

doute un granule métachromatique).

De plus, chez quelques espéces (Tuber aestivum, T. rufum, et surtout T.

mesentericum) il se forme au sommet de l’asque une calotte apicale : différenciée

: partir de lomasomes, cette calotte double intérieurement, à trés faible dis-

tance, le plasmalemme sommital. Elle est constituée de deux feuillets, très

proches l'un de l'autre mais bien distincts sur ses bords oà ils s'écartent, ce qui

leur donne, en coupe, l'aspect d'une ampoule (fig. 10, 11 et 12).

3. L'ASQUE AU MOMENT DE L'ASCOSPOROGENESE

Les futurs noyaux sporaux sont formés à la suite d'une ou de deux divisions

iucléaires supplémentaires. Ils se répartissent dans toute la zone sommitale,

à se localisent les vacuoles à précipités. Entourés chacun d'une zone périnu-

cléaire propre, ils demeurent proches du plasmalemme (fig. 13).

Lors de l'ascosporogénése, un sac pro-sporal se forme autour de chacun de

es noyaux. Il est constitué par un simple feuillet issu d’un lomasome générateur,

lifférencié sur le trajet du plasmalemme (fig. 14). La transformation du sac

pro-sporal en paroi ascosporale, puis l'évolution de celle-ci seront détaillées

lans la seconde partie de ce travail.

4. L'ASQUE AU STADE SUB-ADULTE

Après leur délimitation, les ascospores, au nombre de trois à cing, se re-

soupent au centre de l'asque, où elles sont entourées par un sac post-sporal.

Déjà observée chez le Tuber aestivum et le Tuber rufum (PARGUEY-LEDUC

et JANEX-FAVRE, 1977 a) cette formation trés originale a été retrouvée chez

toutes les espèces examinées (fig. 15 19).

Le sac post-sporal (flèches) sépare l'épiplasme en deux régions concentriques,

d'aspect très différent, la région interne, qui contient les ascospores, appa-

raissant généralement plus claire que la région externe. Cette dernière contient

essentiellement du glycogène, qui tend d’ailleurs à disparaître au cours de la

maturation de Vasque. L’épiplasme interne, dépourvu de glycogène, renferme

des éléments du réticulum endoplasmique et des masses irrégulières, opaques

aux électrons, qui sont probablement constituées par des substances en voie

de lyse (fig. 17).

5. L'ASQUE ADULTE

A l'état adulte, l'asque demeure limité par une paroi peu épaisse, formée

Source : MNHN. Paris

40 A.PARGUEY-LEDUC & M.C. JANEX-FAVRE

de deux couches dont l'externe (= exoascus) tend à disparaître.

En méme temps que le volume des ascospores augmente le sac post-sporal,

qui les contient, doit également s’accroitre; il se trouve ainsi progressivement

repoussé vers la périphérie de l'asque. L’accroissement du sac résulte de l'incor-

poration d'éléments du réseau endoplasmique (fig. 20).

Le sac post-sporal présente fréquemment, sur sa face externe, des globules

de taille variable, moyennement denses aux électrons et irrégulièrement répartis

(fig. 15, 17 et 21). Sur les coupes traitées par la technique de Thiéry (fig. 21)

la surface de ces globules est soulignée par un liseré plus opaque aux électrons.

Ces globules semblent se former à l’intérieur de certaines ampoules du réseau

endoplasmique puis s'accoler au sac et le traverser (fig. 22). Ils peuvent demeurer

indépendants (fig. 21) ou confluer entre eux et former une masse sphérique,

parfois trés volumineuse (fig. 17).

Lorsque les asques commencent à dégénérer, alors que le sac demeure très

net, des résidus de la lyse des divers constituants se groupent sur la face externe

de celui-ci (fig. 18 et 23); ils s'ajoutent ainsi aux globules précédemment décrits.

CONCLUSION

Chez les Truffes, l'organisation de l'asque présente une grande homogénéité.

Si certains de ses caractères sont ceux de la majorité des Ascomycètes, d'autres,

par contre, sont originaux. Parmi ces derniers, on doit noter :

1) La forme globuleuse du corps de l’asque.

Caractéristique de quelques Tubérales, du genre Tuber en particulier, elle

n'est pas réalisée d'emblée. En effet la cellule pro-ascale issue, de façon classique,

d'une dangeardie ascogéne, est primitivement cylindrique et elle ne se renfle

que secondairement, au moment de la fusion des noyaux du dicaryon.

2) La polarité dans la répartition des constituants internes (schémas).

La cellule pro-ascale présente une zonation horizontale, qui disparait dans

le jeune asque, au moment de la fusion des noyaux, mais réapparaít aprés

la migration du noyau de fusion au sommet de l'asque. Deux zones superposées

sont alors remarquablement distinctes. La zone sommitale renferme le noyau

de fusion, entouré par un cytoplasme à nombreuses petites vacuoles. Dans la

zone inférieure s'accumulent des réserves, sous forme de rosettes de glycogene

tassées les unes contre les autres.

Une polarité différente s'établit après la migration des ascospores vers le

centre de Vasque et la formation du sac post-sporal. Les constituants sont

alors répartis en zones concentriques. De l'extérieur vers l'intérieur de l'asque se

succèdent: la paroi ascale, l'épiplasme externe, le sac post-sporal et l'épiplasme

interne.

Source : MNHN. Paris

Evolution des asques de Truffes: modifications de la polarité des constituants. — A,

cellule pro-ascale & zonation horizontale; B, jeune asque au moment de la fusion des

noyaux: disparition de la polarité; С, asque uninucléé: zonation horizontale; D, asque au

moment de l'ascosporogénése: zonation identique (n: noyau; ss: sac pro-ascal); E, asque

adulte à zonation concentrique (asp: ascospore; ee: épiplasme externe; ei: épiplasme

interne; gl: globule du sac; sps: sac Do

Source : MNHN. Paris

42 A.PARGUEY-LEDUC & M.C. JANEX-FAVRE

3. Le mécanisme de l'ascosporogénése.

1l présente des caractéres remarquables. Les divisions du noyau de l'asque

donnant les futurs noyaux sporaux se produisent toujours dans la zone sommi-

tale de l'asque, lorsque se sont formés dans les vacuoles les précipités métachro-

matiques. Ensuite, contrairement à ce qui se passe classiquement chez les Eu-

Ascomycétes, les ascospores sont délimitées, non pas à partir d'une vésicule

ascale, mais individuellement, comme c'est le cas chez les Hémi-Ascomycétes.

En effet chaque futur noyau sporal est entouré par un sac pro-sporal, qui est

formé par des diverticules issus de lomasomes et devient ensuite la paroi pri-

mordiale d'une ascospore.

Au stade adulte les asques ne renferment jamais huit ascospores mais un

nombre inférieur, variable et allant de un à cinq, rarement six.

4. La présence d'un sac post-sporal.

Fine membrane développée autour de l'ensemble des ascospores aprés leur

regroupement au centre de l'asque, cette formation est tout à fait originale.

Elle partage l'épiplasme en deux régions trés différentes, l'externe contenant

les réserves, principalement sous forme de glycogène et l'interne, oà se trouve

le réticulum endoplasmique. L'origine du sac post-sporal n'a pu être déterminée,

mais le réseau endoplasmique joue un róle important dans l'accroissement de

ce sac et la formation de ses globules.

REMERCIEMENTS

Nous remercions vivement R. CAILLEUX, G. CHEVALIER, B. DARCHEN, H. FRO-

CHOT, F. MAGNE et G. MALENÇON de nous avoir procuré et déterminé les Truffes

utilisées pour ce travail, et nous avons plaisir à rappeler la précieuse collaboration technique

de C. BIDOUX, C. FOURNIGAULT et N. JAMPSIN.

BIBLIOGRAPHIE

JANEX-FAVRE M.C. et PARGUEY-LEDUC A., 1976 — La formation des ascospores

chez deux Truffes: Tuber rufum Pico et Tuber aestivum Vitt. (Tubéracées). C. R. Acad.

Sc. Paris, 283: 1173-1175.

JANEX-FAVRE M.C., 1977 — La paroi des ascospores du Tuber rufum Pico. Bull. Soc.

Mycol. Fr. 93: 407-424.

JANEX-FAVRE M.C. et PARGUEY-LEDUC A., 1980 — Formation et évolution des

ascospores du Tuber mesentericum Vitt. Bull. Soc. Mycol. Fr. 96: 225-237.

PARGUEY-LEDUC A. et JANEX-FAVRE M.C., 1977a — L'organisation des asques de

deux Truffes: Tuber rufum Pico et Tuber aestivum Vitt. Rev. de Mycol. 41: 1-32.

PARGUEY-LEDUC A. et JANEX-FAVRE M.C., 1977b — L’ornementation des ascospores

chez le Tuber aestivum Vitt. Société française de Phytopathologie, Travaux dédiés à

G. VIENNOT-BOURGIN, 307-323.

Source : MNHN. Paris

ULTRASTRUCTURE DES ASQUES DU G. TUBER 43

LEGENDES DES FIGURES

Pour toute cette étude nous avons utilisé la double fixation par le glutaraldéhyde, puis

étroxyde d'osmium; les coupes ont été contrastées par Pacétate d'uranyle et le citrate

ie plomb, ou traitées par la technique de Thiery (fig. 12, 14 et 21).

Fig. 1 et 2. — Formation des asques au moyen de dangeardies ascogènes: cellule pro-

scale binucléée, cellule-pied et bec. 1: Tuber mesentericum. 2: Tuber melanosporum.

chelle : 1 Um.

Fig. 3 et 4. — Évolution de la cellule pro-ascale: élargissement et zonation horizontale

es constituants internes. 3: Tuber rufum. 2: Tuber excavatum. Échelle : 1 m.

Fig. 5 et 6. — Jeune asque globuleux; en 5 sont encore visibles la cellule-pied et le bec.

Tuber melanosporum. 6: Tuber dryophilum. Échelle : 1 um.

Fig. 7 et 8. — Jeune asque, au moment de l'accumulation du glycogène; en 8, détail

: la paroi ascale : exoascus, endoascus et plasmalemme distincts. 7: Tuber rufum, échelle:

uum. 8: Tuber bituminatum, échelle 0,54m.

Fig. 9 et 10. — Jeune asque, avec zonation horizontale de son contenu. En 9: noyau

e fusion dans la zone sommitale vacuolisée, surmontant la zone à glycogène. En 10: le

»yau s'est divisé, les vacuoles contiennent chacune un globule dense aux électrons; la ca-

tte apicale est visible. 9: Tuber aestivum. 10: Tuber mesentericum. Échelle: 2m.

Fig. 11 et 12. — Details de la calotte apicale. 11: Tuber rufum; 12: Tuber mesenteri-

m. Échelle: 0,5 um.

Fig. 13. — Asque au moment de l'ascosporogénése: à gauche de la photo, ascospore

voie de délimitation par un sac pro-sporal encore ouvert. Tuber mesentericum. Échelle:

im,

Fig. 14. — Formation du sac pro-sporal a partir d’un diverticule issu d'un lomasome et

tige vers un noyau. Tuber aestivum. Échelle: 0,54m.

Fig. 15. — Le sac post-sporal (flèche) sépare l’épiplasme externe, bourré de glycogène,

l'épiplasme interne, dans lequel est visible une ascospore en voie de maturation. Tuber

elanosporum. Échelle : 2 Him.

Fig. 16 et 17. — Détails du sac post-sporal (flèches). En 17, les constituants épiplas-

iques sont bien visibles ainsi qu'un volumineux globule sur la face externe du sac. 16:

uber rufum; 17: Tuber aestivum. Echelle: 1pm.

Fig. 18 et 19. — Détail du sac post-sporal (fléches), montrant des résidus de lyse accu-

iulés sur sa face externe. 18: Tuber bituminatum; 19: Tuber dryophilum. Echelle: 1m.

Fig. 20 et 21. — Details du sac post-sporal. En 20, accolement d'éléments du réseau

idoplasmique, permettant l'allongement du sac. En 21, mise en évidence de la structure

s globules associés au sac. 20: Tuber rufum; 21: Tuber melanosporum. Échelle: 0,54m.

Fig. 22 et 23. — Détails du sac post-sporal. En 22, participation des ampoules du réseau

idoplasmique à la formation des globules du sac. En 23, le sac post-sporal demeure par-

aitement visible alors que l'épiplasme a dégénéré. 22: Tuber rufum; 23: Tuber melanospo-

«m. Échelle: 0,54m.

Source : MNHN. Paris

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Source : MNHN, Paris

Source : MNHN. Paris

UN NOUVEAU PUCCINIA A SPORES «DIORCHIDIOIDES»

par G. VIENNOT-BOURGIN*

RÉSUMÉ. — Différents types d'anomalies de structure ont été signalés et figures pour les

réleutospores des espèces du genre Puccinia. Une conformation diorchidioïde permet de

caractériser plusieurs d'entre elles vivant aux dépens de Graminées de régions tropicales.

Ce fait est confirmé par la description du Puccinia cyphochlaenae sp. nov. découvert

& Madagascar sur Cyphochlaena madagascariensis Hack.

ABSTRACT. — A new species of Puccinia with diorchidioid teleutospores, discovered

in Madagascar island living on Cyphochlaena madagascariensis (Graminea) is described

as P. cyphochlaenae.

La reconnaissance d'une espèce du genre Puccinia parmi les Urédinées ou

rouilles des végétaux, fait appel à un certain nombre de caractères formels qui

ne sont toutefois perceptibles dans leur totalité que lorsque l'on se trouve en

présence d'une espéce eu-cyclique, autoxéne ou hétéroxéne. On constate tout

d'abord la présence d'un Aecidium qui comporte des spermogonies hypophylles

ou amphigànes en situation subépidermique, ventrues ou piriformes, à ostiole

prononcé mais étroit. La formation des écidies, qui intervient ensuite, débute

sous l'épiderme rapidement rompu en méme temps que l'enveloppe péridiale

du conceptacle. Celui-ci, plus ou moins inclus dans l'hóte, cratériforme, puis

en cuvette, délimité par une collerette provenant de la lacération du péridium,

est écidioide lorsqu'il produit des écidiospores disposées en chaînes: il est urédi-

noide si ces spores se forment à l'extrémité d'un pédicelle.

Les sores A urédospores et a téleutospores, punctiformes, naviculaires ou en

tablettes plus ou moins confluentes, se constituent sous l'épiderme. Ils sont

précocement déhiscents pour les sores à urédospores monocellulaires; ils restent

souvent clos ou seulement fissurés s'ils produisent les téleutospores portées

* Laboratoire de Cryptogamie du M.N.H.N., 12 rue Buffon, 75005 Paris.

CRYPTOGAMIE, MYCOLOGIE (Cryptog. Mycol.) TOME 2 (1981).

Source : MNHN. Paris

56 С. VIENNOT-BOURGIN

par un pedicelle axial, cylindrique, rigide (rarement flexueux), constituées

de deux probasides superposées, séparées par une cloison transversale, chaque

cellule présentant un pore germinatif.

Dans de nombreux cas, cette définition du genre Puccinia ne se vérifie que

de façon fortuite. C’est ainsi que, lorsqu'il s’agit d’une espèce eu-cyclique auto-

xène, le temps nécessaire à l'apparition des formes évolutives successives est

bien souvent tel qu'au moment de l'achévement du cycle, marqué par la présence

des teleutospores, les écidies, et parfois aussi les sores à urédospores sont flétris

ou devenus infertiles. Lorsque dans les conditions naturelles se développe une

espèce eu-cyclique hétéroxène, la nécessité d'affirmer la présence de l'hôte

écidien, différent de l'hôte télien, complique singulièrement l'établissement

du cycle. Mais cependant, la coexistence des deux plantes-hôtes apporte une

certitude quant à la détermination de l'espèce, celle-ci ayant été préalablement

définie à la suite d’une infection expérimentale devenue positive.

On sait aussi que, en dehors des eu-cycliques autoxénes ou hétéroxènes

appartenant au genre Puccinia il en est un grand nombre qui se comportent

en opsis-cylindriques par absence de stade urédospore ou encore en brachy-

cycliques par suite du manque d'écidies et d’urédospores. Les seuls éléments

de détermination certaine sont alors constitués par l'observation structurale

de la teleutospore.

Inversement, a défaut de la perception des téleutospores, qu’elle appartienne

au genre Puccinia ou à tout autre genre de Pucciniacées, l'Urédinée est, selon

les cas, rangée parmi les Aecidium ou les Uredo.

La présence de deux cellules unies en une téleutospore est la caractéristique

essentielle des Puccinia.

Cependant pour un nombre appréciable d'espèces, se manifestent des ano-

malies de structure qui constituent, en raison de leur constance, des éléments

de détermination spécifique complémentaires. Ces anomalies ont été signalées,

À diverses reprises, par de nombreux mycologues. C'est ainsi qu'on a décrit,

mélées à des téleutospores normales de Puccinia, des spores monocellulaires

comparables à celles d'un Uromyces, désignées sous le nom de mésospores,

des spores que nous désignerons phragmidioides constituées par 3 ou plus de

3 cellules superposées, rappelant ainsi la conformation des Phragmidium. Enfin

on a défini des spores diorchidioides dont la septation est longitudinale comme

chez les Diorchidium.

Les mésospores sont sans doute les plus fréquemment observées et signalées

dans les diagnoses. Pour une espéce donnée elles possédent les caractéristiques

reconnues par l'examen des spores normales bicellulaires : structure, ornemen-

tation et couleur de l'exospore, conformation de l'apex. Seules les dimensions

sporales ne sont pas comparables (FISCHER, 1904, ARTHUR, 1934). Elles

S'observent constamment pour le Puccinia porri (Sow.) Wint. des Allium, de

méme que pour le Puccinia hordei Otth des Hordeum. En ce qui concerne la

première espèce, GAUMANN (1959) précise que près de 100% des téleutospores

sont monocellulaires si bien que la distinction entre ce Puccinia et Uromyces

Source : MNHN. Paris

PUCCINIA CYPHOCHLAENAE SP. NOV. 57

ambiguus (DC.) Lév. n'est pas réalisable immédiatement, ceci d'autant plus que

ces deux Urédinées possèdent des hôtes communs : Allium scorodoprasum L.,

A. sphaerocephalum L. ou A. ursinum L. On doit alors faire appel à d’autres

caracteres distinctifs; les urédospores du P. porri sont plus grosses (28-32 x 21-

284m) que celles de PU. ambiguus (20-27 x 17-20um). De plus le pédicelle

de la téleutospore du Puccinia est ordinairement caduc tandis que pour l’Uro-

myces il est persistant, pouvant atteindre 30m de longueur.

Pour le Puccinia hordei = P. simplex (Koern.) Erikss. et Henn. qui est une

espéce hétéroxéne eu-cyclique, dont l'haplonte se constitue sur de nombreuses

espèces de Liliacées du genre Ornithogalum tandis que le dicaryophyte est

hébergé par des Hordeum spontanés et cultivés, la proportion de mésospores

est également très élevée. Elle peut atteindre plus de 80% sur Hordeum vulgare

L. en Israel (mai 1961) tandis qu'en Europe moyenne ce pourcentage varie

entre 40 et 9975 (observations personnelles). Une corrélation morphologique

peut, de ce fait, être établie entre ce Puccinia et Uromyces mysticus Arthur

= U. jacksonii Arth. = U. hordeastri Guyot décrit sur les Hordeum spontanés

tant aux États-Unis qu’en Europe ou au Moyen-Orient (VIENNOT-BOURGIN,

1958).

Des mésospores, peu nombreuses mais constantes, ont été remarquées pour

in grand nombre de Puccinia vivant aux dépens des plantes les plus diverses.

Citons celles du Puccinia obscura Schroet. des Luzula, du P. striiformis Westend.

»u du P. recondita Rob. ex Desm. vivant sur les Triticum etc.

Ajoutons que la germination des mésospores peut étre obtenue dans les

mémes conditions et dans une proportion identique à celle des spores norma-

lement constituées.

L'exemple du P. tasmanica Diet. ou rouille australienne de plusieurs espèces

le Composées du genre Senecio occupe une position intermédiaire entre les

'uccinia mésosporés et ceux dont certaines téleutospores sont constituées par

lus de deux cellules superposées correspondant ainsi au type phragmidioïde,

n effet, aux dépens du Senecio vulgaris L., en particulier, on constate, dans

ine proportion cependant toujours réduite, des téleutospores anormales, les

ines monocellulaires (de 2 à 875), les autres formées de trois cellules sensible-

nent équivalentes (de 2 à 3%).

Parmi les Puccinia européens, il est de nombreux exemples d'espèces à spores

»hragmidioides. FISCHER (1904) en a observé pour le P, thalictri Chev. sur

Thalictrum flavum L. Après cet auteur, GAUMANN (1959) en signale pour

primulae (DC.) Duby sur Primula acaulis Jacq. Nous en avons nous-même

onstaté pour P. albescens (Grev.) Plowr. sur Adoxa moschatellina L., asperu-

ae-odoratae Wurth sur Asperula odorata L., P, bulbocastani (Cum.) Fck. sur

3unium alpinum Waldst. et Kit., malvacearum Mont. sur Althaea hirsuta L.,

Lavatera arborea L. et Malva rotundifolia L. Ce dernier exemple est particu-

ièrement intéressant du fait que cette anomalie s'observe sur des spores préle-

ées sur les plantes-hôtes très diverses récoltées dans des localités éloignées

jui impliquent des conditions écologiques dissemblables. La présence de telles

spores peut être ainsi considérée comme un caractère spécifique.

Source : MNHN. Paris

58 G. VIENNOT-BOURGIN

Le terme de «diorchidioide» désigne une conformation comparable à celle

des téleutospores du genre Diorchidium décrit par KALCHBRENNER (1882)

avec D. woodii Kalchb. et Cke pour espéce-type. Cette spore est constituée

de deux cellules sensiblement égales, symétriques par rapport à une cloison

strictement verticale dans le prolongement du pédicelle. Selon CUMMINS

(1971), le cycle des Diorchidium est généralement celui d'une Urédinée eu-

cyclique autoxène qui débute par l'apparition d’un stade écidien dont les sper-

mogonies sont subcuticulaires (et non subépidermiques comme chez les Pucci-

nia).

Les Diorchidium appartiennent aux régions tropicales; on en connait actuel-

lement (selon AINSWORTH, 1971) 12 espèces inféodées pour la plupart à des

Légumineuses.

Des téleutospores de type diorchidioïde ont été signalées et figurées par

FISCHER (1904) pour le Puccinia dubyi Müll. Arg. qui est un micro-Puceinia

parasite des Androsace en zones alpines. C'est également à FISCHER que

l'on doit l'observation de téleutospores diorchidioides pour le Triphragmium

ulmariae (Schum.) Wint. sur Spiraea ulmaria L. Dans une importante monogra-

phie des Puccinia decrites sur des Gramindes de la tribu des Panicées, RAMA-

CHAR et CUMMINS (1965), s'appuyant principalement sur l'orientation de la

cloison qui sépare les deux cellules de la téleutospore donnent deux exemples du

passage nécessaire dans le genre Puccinia d'une espéce d'abord décrite comme un

Diorchidium. C'est le cas de D. orientale P. et H. Syd. et Buttl. sur Panicum

(1907) devenu P. orientalis (P. et H. Syd.) Arth. et Cumm. (1936), et de D.

flaccidum Berk. et Br. (1898) — D. levigatum Syd. (1907) sur Oplismenus qui a

été rétabli dans sa dénomination première: P. flaccida Berk. et Br. (1873). Par

ailleurs la présence de téleutospores diorchidioides est une caractéristique du P.

nyasaensis Cumm. (1956) sur Panicum pectinatum Rendle au Malawi (ancien-

nement Nyassaland).

A ces exemples de Puccinia presentant des teleutospores diorchidioides,

nous ajoutons celui d’une espéce nouvelle que nous décrivons sous le nom de

Р. cyphochlaenae sp. nov. en provenance de l’île de Madagascar, récoltée a plu-

sieurs reprises par J. BOSSER sur une Graminée endémique: Cyphochlaena

madagascariensis Hack., en sous-bois de forêt tropophile. Les caractéristiques

morphologiques de ce Puccinia sont les suivantes :

urédosores: sores hypophylles, trés petits, punctiformes ou cratériformes,

ou faiblement cupulés, épars, jaune-orangé;

urédospores: globuleuses, fortement échinulées-verruculeuses, brun-fauve,

paroi de lum d'épaisseur, 3-4 pores germinatifs; dimensions moyennes : 17-23um.

téleutosores : sores hypophylles, petits, ovalaires, disposés sans ordre, ou en

séries orbiculaires, précocement déhiscents, pulvérulents, brun-roux foncé.

téleutospores : nées solitaires sur un long pedicelle persistant, hyalin, attei-

gnant 50um; formées de 2 cellules inégalement adhérentes entre elles séparées

par une cloison verticale (rarement horizontale); apex très épaissi (2,5 à 3,2um);

un pore germinatif par loge.

Source : MNHN. Paris

PUCCINIA CYPHOCHLAENAE SP. NOV. 59

Fig. l.— A: Fragment de Cyphochlaena porteur de sores à téleutospores. — B : Différents

aspects des téleutospores; on remarquera que la jonction des deux cellules constitutives

n'est pas constante.

Source : MNHN. Paris

60 G. VIENNOT-BOURGIN

Dimensions de chaque cellule : 20-32 x 10-16um! .

La diagnose latine de cette nouvelle espéce s'établit comme suit :

Uredosoris hypophyllis, minutis, lenticularis, punctiformis, sparsis, dehis-

centis, pulverulentis, fulvis. Uredosporis globosis, echinulatis-verruculosis;

membranis subflavis, 1um crassis; poris germinationis 3-4 sparsis. Teleutosoris

atri-brunneis, amphigenis, punctiformis v. oblongis, late dehiscentis. Teleuto-

sporis 2 cellularibus, membranis levibus, castaneo-brunneis, 1,5-2,5um crassa;

ad apicem 3-6um transversali vel longitudinali 1- septatis; quaque cellula: 20-

32 x 10-16um. Poro germinationis singulo ad apicem vel juxta apicem cellulae

sito instructa dilatato. Pedicello persistenti, hyalino, 20-50um longo.

Hab. in foliis Cyphochlaenae madagascariensis Hack., forét du Zombitsy,

Sakaraha, février 1963, n° 17-705, leg. J. BOSSER (specimen typicum). Mon-

tagne des français (Nord Madagascar), 13 avril 1970, n° 20.168.

En terminant il doit être précisé que, à ce jour, aucune espèce d’Urédinée

n’a été signalée sur Cyphochlaena.

BIBLIOGRAPHIE

AINSWORTH G.C., 1971 — Dictionary of the fungi. Commonwealth mycol. Institute, Kew.

ARTHUR J.C., 1934 — Manual of the rusts in United States and Canada. Purdue Research

Foundation, Lafayette, Indiana.

CUMMINS G.B., 1971 — The rusts fungi of Cereals, Grasses and Bamboos. Springer Edit.

Berlin, Heidelberg, New York.

FISCHER E., 1904 — Die Uredineen der Schweiz. Berne.

GAUMANN E., 1959 — Die Rostpilze Mitteleuropas. Beitr. Kryptogamenflora d. Schweiz

12. Verlag Biichler Bern, 1407 S.

RAMACHAR P. and CUMMINS G.B., 1965 — The species of Puccinia on the Paniceae.

Mycopathologia and Mycologia applicata 25 : 5-60.

VIENNOT-BOURGIN G., 1958 — Contribution à la connaissance des champignons de

PIran. Ann. Epiphyties : 97-120.

1. Nous remercions J. BOSSER du Laboratoire de Phanérogamie du Muséum d'Histoire

naturelle qui nous a confié l'étude de cette Urédinée jointe à ses nombreuses récoltes

botaniques en provenance de Madagascar. Nous adressons également nos vifs remerciements

au Professeur G.B. CUMMINS (Tucson, Arizona) qui a examiné ce parasite et nous a fait

bénéficier de sa grande expérience relative aux Urédinées graminicoles.

Source : MNHN. Paris

MYCOFLORE SEMINICOLE DES MAIS

II. CONSERVATION EN EPIS

par J. PELHATE*

RESUME. — La conservation des mais en épis peut encore constituer la premiére étape

transitoire du stockage. Le procédé traditionnel consiste simplement en un séchage complé-

mentaire, très graduel, à l'air libre; dans ces conditions, l'incidence déterminante du climat -

Humidité Relative notamment - sur le comportement du complexe grain mycoflore en

limite l'application pratique.

Toutefois, les cortèges floristiques très cosmopolites ne varient guère d'une région à

l'autre; quelques entités écologiques constantes définissent ainsi une phytocénose très

caractéristique : Fusarium spp. et Epicoccum purpurascens au titre de la flore du champ,

Cladosporium spp., Mucorales et Trichoderma spp. pour la flore intermédiaire, Penicillium

spp. conventionnellement rapportés à la flore «de stockage», Des variantes qualitatives ou

«faciès» consistent en substitutions d'espèces à l'intérieur de ces groupes élémentaires et les

fluctuations quantitatives sont régies par les paramètres de l'environnement.

La dynamique des espèces dominantes est interprétée comme la colonisation progressive

des épis démunis de leurs spathes au moment de la récolte. L'installation simultanée des

flores du champ et intermédiaire ne constitue guère qu'une seule séquence tant que la

siccité relative des grains ne favorise électivement les espèces plus xérophiles dites «de sto-

ckage» (Penicillium spp. et Aspergillus spp.).

Mots clés: conservation des grains, cribs, écologie des moisissures, stockage, mais (Zea

mays), épis:

SUMMARY. — Keeping unshelled corn in cribs can constitute a temporary stage of storage.

The technique essentially consists in a complementary outdoor drying; consequently its

applying is limited by climatic incidence - namely Relative Humidity - on the grain +

mycoflore behaviour.

However, ubiquitous series of constant ecological groups lead to an homogeneous

typical phytocenosis: Fusarium spp. and Epicoccum purpurascens as field fungi, Cladospo-

rium spp., Mucorales and Trichoderma spp. as intermediate flora, Penicillium spp. named

storage fungi; qualitative changes of which consist in substitution of similar species and

quantitative fluctuations are governed by environment parameters.

* Laboratoire d’Agrobiologie, Faculté des Sciences et Techniques, 29283 Brest Cédex.

CRYPTOGAMIE, MYCOLOGIE(Cryptog., Mycol.) TOME 2 (1981).

Source : MNHN. Paris

62 J. PELHATE

Dynamics of the most important agents is regarded as a gradual colonization of husked

ears after harvest time. Simultaneous contamination by field and intermediate flora consists

of a single sequence before grains become dry enough for storage fungi interference.

Key words : corn (Zea mays), cribs, grain storage, mold ecology, unshelled maize.

INTRODUCTION

Les contröles phytosanitaires ponctuels, effectués sur mais-grains les plus

divers par leur provenance ou leur conditionnement antérieur, conduisent a

des cortéges floristiques plus ou moins complexes dont l'apparentement ou sim-

plement linterprétation ne sont pas toujours évidents (KOEHLER, 1938;

LICHTWARDT et al., 1958; QASEM et CHRISTENSEN, 1958, 1960; LAGRAN-

DEUR et POISSON, 1968; NOBLE et RICHARDSON, 1968; GILL, 1969;

MISLIVEC et TUITE, 1970; BOTHAST et al., 1973; CAHAGNIER et POISSON,

1973; PELHATE, 1973; ZENTENI-ZEVADA et ULLOA, 1977). Aussi, la

meilleure approche au déterminisme écologique suppose-t-elle la délimitation

de séquences respectives auxquelles peut-être soumis le complexe grain-micro-

flore aprés récolte (PELHATE, 1979).

Le maintien des mais en épis constitue une premiére étape - d'ailleurs facul-

tative et transitoire - du stockage. Bien que le procédé soit encore largement

utilisé en régions maïsicoles traditionnelles, il n'a guère suscité d'études systé-

matiques; fondé sur l'empirisme, il a pour but la surmaturation de la céréale

par un séchage complémentaire d'épis le plus souvent dépouillés de leurs spathes.

Les réalisations techniques ne varient guére: cages grillagees fixes, de grande

contenance tout en restant étroites, et vulgarisées sous le terme de «cribs»

(GRATAUD et JAUBOURG, 1979); éléments plus réduits, amovibles et super-

posables (RICHEY et PEART, 1973; GRATAUD et al., 1979 a); meules plus

compactes sur pilotis (POINTEL, 1969)... Les mêmes préoccupations inspirent

d’ailleurs les stockeurs: maintenir la récolte en plein air, à l'abri cependant

des pluies, des prédateurs animaux et, indirectement sans doute, des micro-

organismes.

Nous considérons, en la présente étude, les contaminations fongiques et

les comportements de maïs en cribs, au cours de plusieurs campagnes et en

diverses régions de France.

MATÉRIEL ET TECHNIQUES

A. ÉCHANTILLONNAGE DES MAÏS

Entre autres récoltes contrôlées, nous retiendrons celles de trois provenances,

soit deux régions maïsicoles traditionnelles : le Sud-Ouest (Pyrénées-atlantiques)

et la Limagne (Puy-de-Dôme); une zone de culture marginale: la Bretagne

Source : MNHN. Paris

MYCOFLORE SEMINICOLE DES MAIS 63

(Ille-et-Vilaine).

Les observations portent sur les années 1974 à 1980.

En chaque crib, ont été effectués 5 à 6 prélévements mensuels depuis la

récolte (septembre à novembre) jusqu'à l'utilisation des grains (février à avril);

mais l'un des stocks pourra étre suivi pendant deux années consécutives.

Ces prélévements supposent un échantillonnage diversifié pour tenir compte

de l'inévitable hétérogénéité des récoltes en épis, de par leur nature (degré de

maturité, subsistance partielle des spathes) ou l'environnement (localisation

précise dans la masse ou à la périphérie du stock, orientation par rapport au

vent ou a Pinsolation...). Le prélévement élémentaire (ou échantillon propre-

ment dit) comporte 10 épis.

Au cours des divers:s campagnes, environ 500 échantillons seront examinés.

B. INVENTAIRE DE LA MYCOFLORE

L'isolement des espèces procède de techniques antérieurement mises en

oeuvre et, en particulier, lors de la prospection sur épis avant récolte (PELHATE,

1979).

Pour Pensemencement direct, en chaque condition de milieu nutritif, 50

grains sont prélevés individuellement, pour moitié, respectivement au sommet

et à la base de chaque épis ou bien ils proviennent d’un mélange après égrenage.

Parallèlement, la même quantité de grains subit, avant ensemencement sur milieu

gélosé, une désinfection superficielle (NaOCI à 0,5% de chlore) pendant 5

minutes, suivie de 3 rinçages à l’eau stérile et d’une déshydratation à l'alcool;

cette méthode a pour but de recenser les contaminations internes des grains

par rapport à leur flore totale.

Notons qu'il n'est pas procédé à un inventaire quantitatif par numération

de «germes», celle-ci s'étant révélée peu fidèle pour traduire l'essor d'espèces

colonisatrices et hétérogènes (thalles respectivement mycéliens ou sporulés).

Deux milieux de culture sont essentiellement utilisés: extrait de malt (2%)

gélosé et ce même substrat additionné de NaCl (675); éventuellement, le premier

est rendu plus sélectif par adjonction d’antibiotiques (streptomycine et pénicil-

line d’une part, actidione d’autre part).

Une seule température d’incubation a été retenue (22°C) pour une durée

d'incubation d'environ 1 semaine.

C. TENEUR EN EAU DES ÉPIS

Les épis sont dissociós en grains (reliquats aprés prélévement pour ense-

mencement) et rafles. Aprés un préséchage à 40°C pendant 24 h, les grains sont

maintenus à 130°C pendant 36h (AFNOR, 1976), les rafles à 105'C jusqu'à

poids constant.

Source : MNHN. Paris

J. PELHATE

Les teneurs en eau sont exprimées en % de la substance humide,

RESULTATS

A. RELEVES FLORISTIQUES

Après identification, les espèces fongiques sont inventoriées sur chaque échan-

tillon. Leur fréquence correspond au nombre d’épis par échantillon (échelle de

1 à 10) ou au pourcentage d'échantillons pollués en cas de contrôles plus nom-

breux; leur abondance correspond toujours au pourcentage de grains contaminés.

Pour comparaison d'échantillons diversifiés par leur provenance ou leur condi-

tionnement, les inventaires de fin de stockage sont rapportés au tableau 1.

Les fig. 1 et 2 précisent respectivement la fréquence et l'abondance des espéces

recensées sur 26 échantillons.

DISTRIBUTION DES ESPECES

A. flavus

A.niger

A.ochraceus

A.versicolor

E.herbariorum

P.brevicompactum|

P.claviforme

P.thonii

P.variabile

P. viridicatun

A.lichtheimii

A.pullulans

G. candidum

M.circinelloides

f.griseo-cyanus

P.chrysogenum

P. frequentans

P. funiculosum

P.granulatum

Flore

A de stockage

B du champ

HISTOGRAMME

FREQUENCE

gea e Lm уау

P. cyclopium

* P.puberulum 4

P.variotii @ | Chaetomium spp. P.janthinellum p iferum

A [T.cladosportoides |

S. racemosum Hyalodendron sp] |P.oxalicum — 4 Mose den

T.elegans G.simplex 4 P.spinulosum — | [P-pulvillorum À M.hiemalis $

T. roseum M.racemosus H.acremonioides | [Rhodotorua sp. | |R.stolonifer

V. tenerum Papulaspora sp. | [Trichoderma spp] [V.lecanii 9 [A.tenuissima

A.montagnei A.strictum A.alternata F-oraminearum | [E-purpurascens 4

" * 9 [F.sacchari var.

B.cinerea F.culmorum K-oryzae ит |F:poae

0à20 21à 40 41 à 60 61 à 80 81 à 100% des échantillons

Fig. 1. — Fréquence des espèces (pollution totale).

Les espèces recensées sur 26 échantillons (13 cribs de 3 régions x 2 répétitions) sont

distribuées en 5 classes ou degrés de présence. La courbe unimodale atteste l'homogé-

néité du cortége floristique.

DEGRES DE PRESENCE

Source : MNHN. Paris

CONTAMINATION PROVENANCES

(des grains) © O

)

Sf Pyrénées "

A 5 Atlantiques Puy-de-Dome

dE 8 $

AES è sé

g Е se

3 HET è à

E Бе "s

$ o в =

| des tiore č: £

25, eg Totale e о

à à з 8 $

т $ 3

ui Š =

a a

interne | E

т =

ol rt =

À FLORE DU CHAMP

75] 8 $

: ic

à $ $ 3

5 3 $ à

à à $

3 9

| $ $ 2

50) 8 2 8 =

; Н

5 o

3 9

2 E

KT Я 8

g 3

$ = 9 g

E e S

5 s =

а а

o : Ы P ы E

FLORE INTERMEDIAIRE Е

= à

a E 5 Е

5 3 IS 3

$ 3 a |5 Е

Е E € E 3.

§ & $ 5 а

ri & 5 a 58

HEN EE 2 ЕЕ es &

& 2 Е 3 E а 3 8 à

CI NI E: Seis cus

COT tee 3 Ў ME =

о ЕС Ses в = =

3 . 2 S 5 3 GU S 3

5 a: 2 es ое Е

> ‘| Ser à à i

d i

$ <

olE3 =

FLORE DE STOCKAGE

Fig. 2. — Abondance relative des principaux constituants de la mycoflore.

Le regroupement des espèces en entités écologiques replacées elles-mêmes en leur caté-

gories (flore du champ, intermédiaire et de stockage) souligne l'analogie des cortèges

ne présentant, selon les 3 provenances, que des variantes.

Source : MNHN. Paris

66 J. PELHATE

B. DYNAMIQUE DES FLORES

La fig. 3 permet de suivre la succession floristique sur un crib d’Ille-et-Vilaine,

pendant deux années consécutives (1975-1977). La colonisation plus habituelle

CONTAMINATIONS

4 (%des grains)

1004

so.

60.

50]

r. glaucus, O

+ em

10.

1 1 1 1 1 1 1 1 Ü 1 Т T T 1 Y T 1 T 1 1 Ta

т tom wey VI VII Vll TX x XE xn too om Iv V

TENEUR EN EAU en ME

ak (ЗН, ee Е 81 и A

Sa) |

30. і A МЫ

lll f | E "mr

| +——

sol | 241 a

101 | |

Fig. 3. — Succession floristique au cours de 2 années.

Crib d'Ille-et-Vilaine (1975-1977). Noter le comportement original de la flore au cours

de la 2ème année de stockage, en fonction de la siccité des grains.

Source : MNHN. Paris

MYCOFLORE SEMINICOLE DES MAIS 67

des grains en épis (pollution totale et contamination interne) par les constituants

essentiels de la mycoflore est traduite sur la fig. 4 (exemple choisi dans la méme

région).

DISCUSSION, CONCLUSIONS

A. MYCOFLORE CARACTERISTIQUE DES MAIS EN CRIBS

1.- Cortèges cosmopolites

L'ensemble des inventaires répartis dans le temps et dans l’espace ne révèle

que moins d’une centaine d’espèces soit, essentiellement, les éléments présents

au moment de la récolte (CAHAGNIER et POISSON, 1973; HESSELTINE

et BOTHAST, 1977; PELHATE, 1979) et facilement répartis en leurs catégories

antérieurement définies : flores du champ, intermédiaire et «de stockage», encore

que cette derniére ne répond plus strictement à la définition qu'on en donne

généralement (tableau 1).

La flore du champ, bien que peu spécifique du mais, reste trés peu diversifiée;

on y remarque, par ordre d'importance décroissante, les Fusarium spp., l'Epi-

coccum purpurascens, puis quelques espèces secondaires comme le Botrytis

cinerea, le Khuskia oryzae, etc.

Mais l'incidence des diverses espèces ne transparaît qu'en leur appliquant

respectivement les critères de fréquence (fig. 1) et d'abondance (fig. 2). Ainsi,

les agents les plus fidèles comme Alternaria tenuissima, Epicoccum purpurascens

ou Fusarium poae n’atteignent-ils jamais une grande abondance; le premier

exemple est, a ce titre, le plus démonstratif, en comparant le mais aux céréales

«petits grains» (MACHACEK et al., 1951; CHRISTENSEN, 1972); et nous

en avons proposé une interpretation (PELHATE, 1979). Au contraire, des

espèces à répartition plus localisée, soit les Fusarium spp. autres que l'espèce

précitée, l’Acremonium strictum..., representent des variantes floristiques

précisément en raison de leur grande abondance. Enfin, d'autres éléments de

fréquence moyenne ont un développement très fluctuant selon les conditions

de l'environnement; tel est le cas de Botrytis cinerea et Khuskia oryzae.

La flore intermédiaire constitue une gamme plus importante mais que l'on

peut encore réduire à un nombre limité d'entités par affinité écologique :

- les Cladosporium spp. (principalement C. cladosporioides) dominent, du

moins en début de stockage, et leur cosmopolitisme reste inégalable;

- les Mucorales comportent plusieurs espèces dont les deux plus fidèles

sinon constantes et parfois abondantes (Rhizopus stolonifer et Mucor hiemalis);

tandis que les autres restent secondaires (M. racemosus) ou sporadiques même

(Absidia lichtheimii, M. circinelloides, Syncephalastrum racemosus et Thamni-

dium elegans);

- les éléments «divers» regroupent une dizaine d'espèces qui, avec le genre

Source : MNHN. Paris

68 J. PELHATE

Tableau 1. — Inventaire floristique en fin de stockage

Provenances А en E Puy-de-Dôme is

Nombre d'échantillons (2x6) (2x5) (2x2)

Espèces a wb) [a b(b) a b(b)

FLORE DU CHAMP

Acremonium strictum W.GAMS - ? 70 |+ (12,5)| - Е

Alternaria tenuissima(NEES ex FR.)WILT. | 92 + (5,7) | 80} + (3,2) | 100| + (4,

Alternaria alternata(FR. )KEISS. 42 | + (2,8) | 50| 2 (0,4) | 25| 2? (0,

Apiospora montagnei SACC. 17 | + (iz) | 20| + (0,5) | - -

Botrytis cinerea PERS. _| 8 | 0,400) = = 50| 6,5(2,2)

Epicoccum purpurascens EHR.ex SCHL. 100 | 14,6(4,9) | 90 | 8,0(1,4) | 100 | 32,8(21

Fusarium culmorum(W.6.SMITH)SACC. = - 20 | 1,3(0,2) | 100 | 51,5(26

Fusarium graminearum SCHW. 100 | 23,4(15,8)| 40 |17,4(4,1) | - =

Fusarium poae(PECK)WOLL. 83 | + (3,2) | 70 | 3,2(0,8) | 100] + (5,

A o E = | -

Khuskia oryzae HUDSON 83 | ?(5.)| 10| ? (0 25| 1

FLORE INTERMEDIAIRE

Absidia lichtheimii(LUc.et COST.)LEND.) | 17 | 0,400) | - - - -

Aureobasidium pullulans(DE BARY)ARNAUD | 25 + (2,5) | - E E =

Cladosporium) ee 100 | 76,0(0,5) [100 |92,5(1,2) | 100 | 57,5(3,

Chaetomium spp. 33 | 21,6) | 30] 2 (1,3) | 50) 201,

Geotrichum candidum LINK var | - 25| « (0)

Hyalodendron sp. | +w |- = 25| + (0)

Gonatobotrys simplex CORDA 8| + (0) | 50| 8,5(0) - -

Harzia acremonioides (HARZ)COST. 67 |_8,3(0) | 30 | 5,4(0) 50 | 6,2(0)

ree aa aS cyane SCHIPPER Е m i

Mucor hiemalis WEHMER 83 | 15,6(5,4) | 70 | 7,4(3,2) | 100 | 35,2(5,

Mucor racemosus FR. 33 | 2,6(0) | 20| 0,80) 25| 7,50

Paecilomyces variotii BAINÍER 17 | 0,6(0,2) | - - 25| 0,200

Papulaspora sp. 25 | 4,1(0) | 30| 5,2(0) 25| 3,800

Rhizopus stolonifer(EHRENB.ex FR.)LIND |100 | 8,6(0,3) | 70 | 4,7(0) | 100| 7,4%

Rhodotorula sp. 100 | + (0) | 50) + (0) 3 =

Syncephalastrum racemosum COHN ex SCHROET.| 8 | 0,2(0) | - - = =

Thamnidium elegans LINK ex WALLR. 8} 0,4(0) | 10| 0,6(0) 25 | 0,3(0

Trichoderma spp. 92 | 12,8(0,4) | 30] 3,1(0) 25 | 3,2(0

Trichothecium roseum LINK = - - - 25| 1,2(0

Verticillium lecanii(ZIMM. JVIEGAS se | 8,6(0) | 60 | 12,5(0) 75 | 14,2(0)

Verticillium tenerum(NEES ex PERS.) LĪNK + (1,2) | - - - -

Source : MNHN. Paris]

MYCOFLORE SEMINICOLE DES MAIS 69

Pyrénées- A Meet

Р N -de-

rovenances ие Puy-de-Döme ar

Nombre d'échantillons (2x6) (2x5) (2x2)

Espèces

FLORE"DE STOCKAGE" |

Aspergillus flavus LINK

Aspergillus niger VAN TIEGHEM

b(b) b(b)

1,2(0,4) | 10. | 0,3(0) - -

0,8(0,2) | 10 | 0,2(0) - -

- 10 | 0,8(0,)) | 50| 3,4(1,2)

- 20 | 0,4(0,2)| - -

- 40 | 4,200) - -

Aspergillus ochraceus WILHELM

Aspergillus versicolor(VUILL.)TIR.

Eurotium herbariorum MALL.et CAIN

Penicillium brevi-compactum DIERCKS

Penicillium claviforme BAINIER

Penicillium chrysogenum THOM

5,6(0,4) 4,4(0,31

Penicillium eyclopium WESTL,

+ P. puberulum BAINIER

, 13,5(2,6) 24,5(7,3)

Penicillium frequentans WESTL. (0 2,6(0) - -

Penicillium funiculosum THOM 11,6(1,3) | 30 | 2,3(0) - -

Penicillium granulatum BAÍNIER 2,70) | 20 | 1,2(0) 25| 0,4(0)

Penicillium janthinellum BIOURGE 17,5(3,7) | 40 | 3,2(0,2) | - -

Penicillium oxalicum CURRIE et THOM 6,6(1,2) | 60 | 4,7(0,8) | - | -

Penicillium pulvillorum TURFITT 12,8(2,5) | 70 | 9,8(1,2)| 50| 4,0(0,5)

Penicillium spinulosum THOM 2,3(0,2) | 50 | 5,5(0,4) | 100| 53,2(1,8)

Penicillium stoloniferum THOM 9,4(0,6) | 90 | 27,5(2,3) | 100| 64,7(5,8)

Penicillium thomii MATRE )

Penicillium variabile SOPP )

Penicillium viridicatum WESTL

Observations effectuées en mars-avril 1979 à raison de 2 prélévements par crib (centre et

périphérie). Chaque prélévement de 10 épis est égrené et homogénéisé. - Pour chaque espèce

recensée, lire : colonne a: la fréquence (% d'échantillons pollués); colonne b(b): l'abondance

(% des grains respectivement concernés par pollution totale ou par contamination interne).

?: présence vraisemblable mais non confirmée; +: présence difficile à chiffrer; -: non observé.

Trichoderma, se comportent en épiphytes superposables aux espèces du champ;

toutefois, leur comportement écologique propre peut en expliquer la répartition

originale; ainsi les Trichoderma spp. (T. viride Pers. ex S. F. Gray, T. harzianum

Rifai et T. koningii Oud. notamment) caractérisent-ils, par leur abondance

relative, un faciès assez particulier au Sud-Ouest français. À l'inverse, le Verti-

cillium lecanii est largement représenté dans les trois régions prospectées. Les

levures, abondantes au moment de la récolte (CAHAGNIER et POISSON, 1973;

PELHATE, 1979) sont vite masquées par les espèces filamenteuses à croissance

rapide; par suite, il ne subsiste guère que Aureobasidium pullulans et Rhodoto-

rula sp. On interprète plus difficilement une certaine régularité des Chaetomium

spp. (C. dolichotrichum Ames, C. funicolum Cooke, C. globosum Kunze) cepen-

dant réduits à l'état de traces.

Source : MNHN. Paris

70 J. PELHATE

- enfin, les autres constituants se developpent d’autant mieux que la désorp-

tion hydrique des grains est plus lente et, par suite, l'installation des espéces

dites de stockage est différée.

Ces espèces intermédiaires constituent un ensemble très caractéristique des

maïs conservés en cribs et nous en donnons une illustration graphique sur

planches hors texte.

La flore de stockage ne comporte guère que des Penicillium spp. dont les

deux espèces majeures recensées au moment de la récolte se succèdent très

généralement : P. stoloniferum puis P. cyclopium; mais la siccité oscillante des

grains entraine une diversification avec notamment l'interposition du P. spinu-

losum ou méme la dominance du P. janthinellum, à telle enseigne que l'une

CONTAMINATION

(%des grains)

P stoloniferum

totale

- нев

ipurpurasi

AE.

Fig. 4. — Dynamique des principaux constituants de la mycoflore.

Observation en Ille-et-Vilaine (campagne 1978-79). Noter le maintien des espéces pré-

installées (flores du champ et flore intermédiaire) et la superposition tardive de la flore

de stockage.

Source : MNHN. Paris

MYCOFLORE SEMINICOLE DES MAIS 71

et l’autre espèce ont une valeur de faciès pour les provenances III et I respecti-

vement (fig. 2). Le P. funiculosum peut accompagner la seconde espèce. Le

P. pulvillorum. plus réguliérement présent s'impose aussi par sa relative abon-

dance. Le P. frequentans et le P. oxalicum perdent en fréquence, le P. chryso-

genum en abondance; d'autres, enfin, restent rares (P. brevicompactum, P.

claviforme, P. thomii, P. viridicatum).

Les Aspergillus spp. - et notamment les A. gr. glaucus (— E. herbariorum) -

insignifiants à la récolte (TUITE, 1961), n’interviennent que faiblement dans

les limites habituelles du temps de conservation; par contre, un stock a pu

révéler, au cours de la deuxiéme année, une importante invasion (fig. 3).

En résumé, le contróle systématique de mais en épis révéle une flore carac-

téristique bien que constituée d'espéces cosmopolites; son homogénéité est

révélée par la distribution statistique des espéces (fig. 1) ou par leur abondance

relative (fig. 2). On se trouve donc en présence d'une association ou phytocénose

susceptible de variantes qualitatives - «faciés» - et de fluctuations quantitatives;

les premiéres consistent en la substitution d'espéces à l'intérieur des genres

(Fusarium, Penicillium) ou de genres comme Trichoderma à l'intérieur d'entités

plus larges (flore intermédiaire); les secondes sont l'expression du déterminisme

écologique qu'une étude dynamique permet de mieux analyser.

2.- Dynamique de la flore

La sélection des espèces et leur dominance éventuelle (fig. 4) sont régies

par le jeu de paramètres écologiques qui relèvent aussi bien de l'environnement

que d'interrelations spécifiques.

L'incidence des premiers - paramétres physiques - peut étre analysée à travers

les données météorologiques :

- les humidités relatives afférentes à la période habituelle de conservation,

d'une part, leur répercussion sur les courbes de désorption des grains (HUB-

BARD et al., 1957), d'autre part, sont rapportées pour les régions concernées

(fig. 5); les 3 régimes climatiques différent suffisamment entre eux (courbes

enveloppantes) pour qu'on puisse comparer les possibilités de séchage des

épis et de limitation de la mycoflore soumise à désorption (PELHATE, 1978;

SPILLANE et PELHATE, 1978). En premiére approximation, les teneurs en

eau des grains restent pendant plusieurs mois au-dessus des seuils requis pour la

croissance des champignons (PELHATE, 19684) et les rafles d'épis, relais

possibles pour diverses espéces, se revelent plus humides encore. Ce sont donc

les espèces hygrophiles, inscrites à la flore du champ et à la flore intermédiaire,

qui vont étre électivement favorisées. En réalité, elles colonisent d'autant plus

activement le substrat qu'elles sont. pré-installées et que les épis démunis de

leurs spathes au moment de la récolte constituent un libre champ d’invasion.

Ce n’est donc qu'après quelques mois de stockage (soit février, mars ou avril

selon les stations respectives) que les teneurs en eau deviendront insuffisantes

pour ces espèces colonisatrices alors dépassées par la flore de stockage plus

compétitive, soit essentiellement les Penicillium spp. (P. stoloniferum et. D.

Source : MNHN. Paris

72 J. PELHATE

cyclopium pour ne citer que les deux espèces majeures). Dans le cas plus rare

d’une conservation prolongée, on a pu noter, au cours de la deuxième année,

l'envahissement du stock par les Aspergillus glaucus (fig. 3). Cette présélection

trés large de la flore par l’hygrométrie est parachevée par l'effet température

puis, en dernier ressort par les interactions spécifiques.

- les températures différentielles expliquent largement les faciès floristiques

plus où moins régionaux. L'explication en est facilitée à l'examen de la fig. 6.

Considérant, pour chaque station représentative d’une région prospectée, les

amplitudes thermiques, il est possible de tracer, pour les espèces majeures,

les courbes théoriques de croissance en fonction des températures moyennes.

Il apparaît ainsi qu'en I, station la plus chaude, le Fusarium sacchari (accom-

pagné du F. graminearum et, parfois, de Trichoderma spp.) et le Penicillium

janthinellum, espèces les plus thermopréférentes dans leur entité respective,

prennent un essor précoce et décisif; mais le F. sacchari sera stoppé en période

hivernale tandis que le P. janthinellum et d’autres Penicillium spp. seront indi-

rectement favorisés. Il en résulte un équilibre final entre les Fusarium spp.

(F. sacchari et F. graminearum) toujours abondants, les éventuels Trichoderma

spp. et les Penicillium spp. (dont P. janthinellum). En station 11, climatiquement

plus contrastée, les températures, encore élevées en début de stockage, favo-

risent divers Fusarium spp. (dont F. sacchari) qui céderont bientöt la place

aux Penicillium spp. (P. stoloniferum accompagné de P. cyclopium) eux-mémes

inhibés par le froid hivernal; le faciès floristique s'en trouve simplifié et les

taux de contamination des grains atténués. En station Ill, les éléments domi-

nants: Fusarium culmorum et Epicoccum purpurascens pour la flore du champ,

Mucorales de la flore intermédiaire, Penicillium stoloniferum, P. spinulosum

et P. cyclopium au titre des espéces de stockage poursuivent leur croissance

tout au cours du stockage; le faciés de Bretagne est alors caractérisé par des

taux élevés de ces divers constituants.

- les interactions spécifiques interviennent enfin, de facon plus complexe,

dans la dynamique des cortéges floristiques. Nous avons noté antérieurement

le privilège inhérent aux «premiers occupants» sans méconnaitre toutefois

l'effet thermique sur les taux de croissance, atouts dans la compétition. L'ap-

titude compétitive intrinsèque transparaît pourtant chez certaines espèces

tandis qu’elle manque chez d’autres (PELHATE, 1968 b). C'est ainsi, par exem-

ple, que nous n’avons pas considéré, pour comparaison des faciès régionaux,

les Cladosporium spp. toujours fréquents mais dont l'abondance relative n’est

que le reflet d'une compétition active d’autres éléments (flore du champ re-

couvrante, flore de stockage inhibitrice). On comprendra encore qu'à exigences

Fig.5.— Humidité relative et courbes de désorption des grains.

L'équilibre hydrique entre l'ambiance et la teneur en eau des grains entraine un décalage

des courbes de désorption pour les 3 stations représentatives des régions considérées.

Source : MNHN. Paris

MYCOFLORE SEMINICOLE DES MAIS 73

HUMIDITES RELATIVES(%)

(moyennes mensuelles)

TEMPS

IX x XI XII 1 Ш u (mois)

Source : MNHN. Paris

CROISSANCES (mm/jour)

$ TEMPERATURES MOYENNES

4 4 (maximales -minimales)

PAU- UZEIN.

CLERMONT- AULNAT.

X RENNES -S' JACQUES

z To

El c NM a 5 >

à д

(mois)

Source : MNHN. Paris

MYCOFLORE SEMINICOLE DES MAIS 75

comparables en eau et en température, les Penicillium spp. mésophiles (P. stolo-

niferum, P. pulvillorum ou P. spinulosum) Vemportent sur des Aspergillus

spp. (A. versicolor...) moins compétitifs. Mais, au sein méme d'identités éco-

logiques, existent des rapports concurrence ou dépendance plus subtils comme

ceux qui régissent la succession déjà évoquée: P. stoloniferum, P. spinulosum

et P. cyclopium, ou l'association étroite: Fusarium culmorum et Epicoccum

purpurascens.

Ainsi, l'aptitude compétitive peut-elle surpasser les influences d’autres para-

métres essentiels. Tel est le cas plus général d'espéces intermédiaires épiphytes,

aux exigences diversifiées mais cependant capables d'occuper la méme niche

écologique en se superposant notamment à la flore du champ.

En résumé, la dynamique des cortéges consiste en une colonisation active

d'un substrat réceptif, par la flore pré-installée; elle ne comporte guére qu'une

seule séquence tant que la siccité du grain ne vient limiter cette flore primaire

hygrophile au profit de la flore de stockage mésophile À xérophile. La série

dynamique ne présente d'ailleurs pas, en amont comme en aval, de délimi-

tation bien précise. En effet, le cortège d'espèces préexiste, pour l'essentiel,

au moment de la récolte; et celle-ci ne constitue aucune rupture de l'équilibre

floristique sur maïs récoltés immatures, à l'inverse de la plupart des autres

grains. Au terme du stockage, cette flore primaire a pu être limitée par le jeu

de paramètres climatiques à variation continue tandis que la longévité relative

des espèces (PELHATE, 1969) accentue le caractère très graduel de l’atténuation

(fig. 3 et 4).

Le schéma moyen de ce dynamisme est traduit sur la figure 7.

B. VALIDITÉ DU PROCÉDÉ DE STOCKAGE

- Fondement biologique

L'appréciation objective d'un tel procédé traditionnel et consacré par l'empi-

risme ne peut guére appeler que des critéres biologiques, savoir : l'intervention

de micro-organismes. Or, il parait, a priori, curieux de stabiliser des grains ne

comportant pas moins de 30 à 35% d’eau (STOLOFF et al., 1975) alors que

les seuils hydriques requis par les champignons spoliateurs se situent de 13 à

25% selon les espéces et les substrats (GUILBOT et POISSON, 1963; PELHATE,

1968a; CHRISTENSEN, 1974). Cette disparité entre la disponibilité en eau

du substrat et la demande des épiphytes apporte sans doute un premier élément

Fig. 6. — Croissances comparées des espèces majeures en 3 stations.

Pour chaque région, l'amplitude thermique est délimitée par les moyennes mensuelles

maximales et minimales (zone en grisé). Les courbes de croissance théorique des espèces

dominantes (rapportée aux moyennes compensées : maximales + minimales) y sont super-

posables. ee

Source : MNHN. Paris

FLORE DU_CHAMPI

Fusarium

graminearu

poae

epicoccum py, o,

x : Le,

nium Stric fas, %

wo Ч >

FLORE INTERMEDIAIRE \

ciadosporium sp,

werticilliUM fegg,

REGRESSIVE

SERIE

Penicillium

stoloniferum

pinulosum }

Y janthinehum

cyclopium

pulvillorum

oxalicum

! Aspergillus spp.

FLORE DE STOCKAGE 1

GRADIENTS

< thermique |]

hydrique `

Fig. 7. — Interprétation générale de la dynamique des flores.

La désorption graduelle des grains conduit à une série régressive (avec apparition aléa-

toire des espèces xérophiles). La flore initiale puis les gradients thermique et hydrique

expliquent les faciès régionaux.

Source : MNHN. Paris

MYCOFLORE SEMINICOLE DES MAIS ИТ

Че réponse (PELHATE, 1968 c). En effet, la distinction unanimement reconnue

entre flore du champ et flore de stockage (CHRISTENSEN, 1957) doit plutôt

reposer sur le comportement différentiel des champignons face à l'activité

de l'eau que sur leur simple origine. Ainsi, la première, flore du champ à ten-

dance parasitaire, peut seule surmonter la résistance active de la plante et infec-

ter éventuellement les grains immatures; la seconde, flore de stockage saprophyte

par définition, ne peut contaminer ces grains qu'à un stade latent corrélatif

d'une insuffisante siccité leur faisant perdre la résistance active (PELHATE,

1968 d). L'état de sécurité du caryopse réside précisément dans le compromis

entre une forte humidité le rendant résistant vis-à-vis d'espèces parasites hygro-

philes et la faible teneur interdisant la croissance des espèces de stockage méso-

philes 4 xérophiles. Dès lors, le risque subsiste en présence d'espèces intermé-

diaires antérieurement reconnues (PELHATE, 1968) et dont la réalité se trouve

ici confirmée. Sans doute, ces mêmes espèces ont-elles été mentionnées au titre

des «advanced decay fungi», comme partie intégrante de la flore du champ

(CHRISTENSEN et KAUFMAN, 1965). Toutefois, le concept de «flore inter-

médiairey semble préférable lorsqu'il regroupe indistinctement des especes

du champ et des éléments réputés de stockage. Dans ces conditions, la sécurité

des grains n'est plus évidente d'autant que les conditions hydriques changent

graduellement en cours de conservation.

Le succès présumé du procédé repose encore sur l'atténuation progressive

des espéces soumises au régime de désorption hydrique. Comme nous l'avons

vérifié en divers essais (PELHATE, 1978; SPILLANE et PELHATE, 1978),

il suffit qu’un cortège floristique, complexe par définition, soit soumis à des

variations continues de l'environnement, c'est-à-dire à des conditions progressi-

vement suboptimales puis défavorables, pour que ses constituants soient succes-

sivement limités, sinon dans leur développement, du moins dans leur activité

dégradante; et s'ils subsistent à la mesure de leur survie, ils s’opposent préci-

sément à l'installation d'espèces qui devraient théoriquement occuper la niche

écologique modifiée; ainsi de proche en proche, chaque agent peut-il éliminer

son successeur habituel ou en différer l'intervention. On parle alors de succession

ou série dynamique «régressive» qui inverse l'ordre habituel «progressif» et

commandé par l'effet de masse; celui-ci consiste en l'intégration des résultantes

métaboliques (accumulation d'eau et de calories, de gaz carbonique... et, corré-

lativement, рее d’oxygene...); tandis que, dans le cas présent, ces effets sont

dissipés et ne modifient pas la niche écologique (voir fig. 7). Ce sont alors

essentiellement les espèces épiphytes superposables aux éléments colonisateurs

qui vont intervenir, comme l'inventaire général l'a révélé. Et, si un contaminant

atteint cependant le grain, il y reste généralement superficiel en raison des

barrières structurales que constituent les téguments, du moins lorsque la récolte

mécanisée en a conservé la stricte intégrité. Le meilleur comportement des

grains en épis réside aussi dans le fait que les hiles, voie préférentielle de péné-

tration des thalles fongiques, ne sont pas directement accessibles; seules les

espèces à infection généralisée peuvent alors les atteindre en empruntant l’axe

de l’épi (Fusarium spp., Khuskia oryzae notamment).

Source : MNHN. Paris

78 J. PELHATE

Des incertitudes subsistent donc. En particulier, l'élimination ou la répression

mutuelles d'espéces n'excluent pas le (ou les) premiers(s) occupant(s) qui peu-

vent être d'actifs colonisateurs comme les Fusarium spp. et, parfois, l'Epicoccum

purpurascens, des Penicillium spp... C'est pourquoi une réduction sensible de

la teneur en eau des grains, en début de stockage, est un facteur de réussite.

Inversement, lorsque l'évapo-transpiration est ralentie par environnement clima-

tique ou par confinement des épis au centre des stocks et que les températures

basses ne concourent pas à inhiber les champignons, la spoliation est inévitable.

C'est rappeler la grande incidence des paramètres climatiques inéluctables et

l'hétérogénéité résultante des produits contrólés. Et si l'amélioration technique

des structures (caractéristiques des cribs) peut étre envisagée, le procédé ne

restera pas moins aléatoire en zones maisicoles du nord et de l'ouest de notre

pays.

2.- Imperfections et risques

Quelle que soit la destinée des grains - consommation ou semences - l'enva-

hissement par les moisissures compromet gravement leur qualité (CHRISTEN-

SEN, 1957; PELHATE et GALLOU, 1979). Plus précisément, pour les mais

en cribs, on peut craindre une baisse de qualité technologique et l'émission

de toxines par les espéces majeures: Fusarium spp. et Penicillium spp. Des

enquétes conduites en France (GRATRAUD et al., 1968b; GAY, 1980) ont

révélé que la zéaralénone engendrée par les premiéres méritait seule attention,

surtout aprés les automnes pluvieux, mais que les taux de toxine atteignaient

rarement les seuils de tolérance. Parallélement, nos observations sur semences

montrent clairement l'effet dépressif puis létal même des secondes espèces

s'ajoutant souvent à l'infection fusarienne.

Il en résulte, en conséquence, une certaine déconsidération des récoltes

maintenues en cribs, même de façon transitoire; et les contrôles microbio-

logiques corroborent souvent les moindres qualités technologiques ou biolo-

giques des grains et semences respectivement. Il reste que des impératifs écono-

miques actuels, sous l'angle du gain d'énergie, feront maintenir le procédé;

cet intérêt immédiat va-t-il alors susciter des améliorations techniques?

REMERCIEMENTS

Il nous est agréable de remercier les Producteurs et les Organismes Stockeurs de maïs

qui ont bien voulu, pour la présente étude, procéder à des prélèvements et envois réguliers

d'échantillons. Nous sommes aussi reconnaissant aux Stations de météorologie qui nous

ont aimablement communiqué les données climatiques utiles.

Source : MNHN. Paris

MYCOFLORE SEMINICOLE DES MAIS 79

BIBLIOGRAPHIE

AFNOR, 1976 — Mais: determination de la teneur en eau. NF V 03-708.

BOTHAST R.J., ROGERS R.H., HESSELTINE C.W., 1973 — Microbial survey of corn

in 1970-71. Cereal Sci. Today 18: 22-24

CAHAGNIER B., POISSON J., 1973 — La microflore des grains de maïs humides; compo-

sition et évolution en fonction de divers modes de stockage. Rev. de Mycol. 38 : 23-43.

CHRISTENSEN C.M., 1957 — Deterioration of stored grains by fungi. Bot. Rev, 23:

108-134.

CHRISTENSEN C.M., KAUFMANN H.H., 1965 — Deterioration of stored grains by fungi.

Ann. Rev, Phytopathology 3: 69-84.

CHRISTENSEN C.M., 1972 — Microflora and seed deterioration, in «Viability of seeds»,

Ed. ROBERT Е.Н. : 59-93. Syracuse Univ. Press, Chapman and Hall Lmt, USA.

CHRISTENSEN C.M., 1974 — Microflora, in «Storage of cereal grains and their Products».

Am. Ass. Cer, Chem, St Paul, Minn. USA, ch. 4: 158-192.

GAY J.P., 1980 — Les mycotoxines sur les maïs français. Doc. AGPM (non publié).

GILL N.S., 1969 — Deterioration of corn (Zea mays) seed during storage. Thesis Mississipi

State University, State College, USA.

GRATRAUD J., FEUILLOLEY P., DEGOS J.C., DIRYS S., 1979a — Étude d'une nouvelle

voie de conservation: les caisses-palettes, in «Le maïs en cribs d'hier à aujourd’hui».

Études du CNEEMA, 449-450: 41-44.

GRATRAUD J., FEUILLOLEY P., DIRYS S., DEGOS J.C., LIDONE G., 1979b — Le

séchage et la conservation des épis dans les cribs, in «Le maïs en cribs d'hier à aujour-

d'hui». Études du CNEEMA, 449-450 : 21-38.

GRATAUD J., JAUBOURG J., 1979 — La construction des cribs, in «Le maïs en cribs

d'hier à aujourd'hui». Études du CNEEMA, 449-450: 5-14.

GUILBOT A., POISSON J. 1963 — Conditions de stockage et durée de conservation

des grains. Journ. d'études sur la conservation des grains. L.T.C.F. Paris : 15-27.

HESSELTINE C.W., BOTHAST R.J., 1977 — Mold development in ears of corn from

tasseling to harvest. Mycologia 69 : 328-340.

HUBBARD J.E., EARLE F.R., SENTI F.R., 1957 — Moisture relations in wheat and corn.

Ger. Chem. 34: 422-433.

KOEHLER B.C. 1938 — Fungus growth in shelled corn as affected by moisture. J. Agr.

Res. 56:291-307

LAGRANDEUR G., POISSON J., 1968 — La microflore du mais, son évolution en fonction

des conditions hydriques et thermiques du stockage en atmosphère renouvelée. Int.

Alim. Agric. 6-7 : 775-788.

LICHTWARDT R.W., BARRON G.L., TIFFANY L.H., 1958 — Mold flora associated

with shelled corn in Iowa. Iowa state coll. J. Sci. 33: 1-11.

МАСНАСЕК J.E., CHEREWICK W.J., MEAD H.W., BROADFOOT W.C., 1951 — A

study of some seed-borne diseases of cereal in Canada. II. Kinds of fungi and prevalence

of diseases in cereal seed. Scient. Agric. 31: 193-206.

MISLIVEC P.B., TUITE J., 1970 — Species of Penicillium occuring in freshly -harvested

and in stored dent corn kernels. Mycologia 62: 67-74.

NOBLE M., RICHARDSON M.J., 1968 — An annoted list of seed-borne diseases. Proc.

Source : MNHN. Paris

80 J. PELHATE

LS.T.A. 33: 53-57, 157-163.

PELHATE J., 1968a — Recherche des besoins en eau chez quelques moisissures des grains.

Mycopath. et Mycol. Applicata 36: 117-128.

PELHATE J., 1968b — Étude expérimentale des interactions de moisissures caractéristiques

des grains. Rev. de Mycol. 33: 43-70.

PELHATE J., 1968c — État thermodynamique de l'eau dans les grains de blé sains ou

altérés. Ann. Technol. Agric. 17: 227-236.

PELHATE J., 1968 4 — Résistance du caryopse de blé à l'envahissernent par les moisissures.

Soc. Bot. Fr. 115:82-91.

PELHATE J., 1968e — Inventaire de la mycoflore des blés de conservation, Bull. Soc,

Mycol. Fr. 84: 127-143.

PELHATE J., 1969 — Longévité des espèces et maintien de la mycoflore des grains. Phyto-

pathol. Z. 64: 7-20.

PELHATE J., 1973 — Moisissures des maïs-grains en cours de conservation. Leur inhibition

par l'acide propionique. Bull. Soc. Mycol. Fr. 89: 53-65.

PELHATE J., 1978 — Biological basis preservation of wet grain. 3e Congrés Int. Pathologie

végétale, Munich, sect. 7: 274.

PELHATE J., 1979 — Mycoflore séminicole des mais I. Contamination avant récolte.

Rev. de Mycol. 43: 109-129.

PELHATE J., GALLOU J., 1979 — Mycoflore des semences et qualité germinative. Bull.

Soc. Mycol. Fr. 94: 335-353.

POINTEL J.G., 1969 — Essai et enquête sur greniers à maïs togolais. L'Agronomie Tropi-

cale 24: 709-718.

QASEM S.A., CHRISTENSEN C.M., 1958 — Influence of moisture content, temperature

and time on the deterioration of stored corn by fungi. Phytopathology 48: 544-549.

QASEM S.A., CHRISTENSEN C.M., 1960 — Influence of various factors on the deterio-

ration of stored corn by fungi. Phytopathology 50: 703-709.

RICHEY C.B., PEART R.M., 1973 — Pallet system of harvest, handling and storing ear

corn. Trans, of the ASAE, Jan-feb.

SPILLANE P.A., PELHATE J., 1978 — Changes in quality and in microbiological activity

during extended storage of high moisture grain. 6th Int. Cereal and Bread Congress,

Winnipeg.

STOLOFF L., MISLIVEC P., KULIK M.M., 1975 — Susceptibility of freshly picked ear

corn to invasion by fungi. Appl. Microbiol. 29: 123124.

TUITE J.F., 1961 — Fungi isolated from unstored corn seed in Indiana in 1956-1958

Pl. Dis. Rep. 45: 212-215.

ZENTENI-ZEVADA M., ULLOA M., 1977 — Mycoflora in corn ear (Zea mays L.).1.

Rev, Latino-am, Microbiol, 19: 27-31.

Source : MNHN. Paris

MYCOFLORE SEMINICOLE DES MAIS 81

Planches 1 à 4. — 1: Absidia lichtheimii (Lucet et Cost.) Lendner, A: aspect général des

sporocystes; B: détail. — 2: Aureobasidium pullulans (de Bary) Arnaud, aspects bourgeon-

nant et fumagoide du thalle. — 3: Chaetomium dolichotrichum Ames, A: aspect général

du périthéce; В: asques et ascospores. — 4: Cladosporium spp.; A: C. cladosporioides

(Fres.) de Vries; B: C. herbarum (Pers.) Link ex Fr.

Source : MNHN. Paris

82 J. PELHATE

es 5 à 8.— 5:Geotrichum candidum Link, thalle arthrosporé

orda; A: aspect cultural; B: appareil sporifére. — 7: Harzia

ect cultural; B: thalle sporulé (macroconidies); C: microc

le sporule.

Source : MNHN. Paris

MYCOFLORE SEMINICOLE DES MAIS 83

Planches 9 à 12. — 9: Mucor spp., sporocystes; A: M. circinelloides van Tiegh. f. griseo-

cyanus Schipper; B: M. hiemalis Wehmer; C: M. racemosus Fr. — 10: Papulaspora sp.,

A: aspect cultural; B: mycélium et microsclérotes. — 11: Trichoderma spp., aspect cultural

et appareils sporifères; A: T. koningii Oud.; B: T. viride Pers. ex Fres. — 12: Trichothe

cium roseum Link, A: aspect cultural; B: Thalle sporulé.

Source : MNHN. Paris

84 J. PELHATE

Planches 13 à 16. — 13: Verticillium lecanii (Zimm.) Viegas, A: aspect cultural; B:

appareil sporifére. — 14: Verticillium tenerum (Nees ex Pers.) Link; A: aspect cultural;

B: appareil sporifére. — 15: Rhizopus stolonifer (Ehrenb. ex Fr.) Lind., A : aspect cultural;

halle stolonifère; C: sporocystes. — 16: A: Syncephalastrum racemosum Cohn et Schroet.

«mésosporanges»; B: Thamnidium elegans Link ex Wallr, sporocyste et «sporangioles».

Source : MNHN. Paris

DEVELOPMENTAL MORPHOLOGY OF ASCOMYCETES

VII. FENNELLIA FLAVIPES

par C. V. SUBRAMANIAN and C, RAJENDRAN*

This paper is the seventh in a series on the developmental morphology of

Ascomycetes and deals with Fennellia flavipes Wiley & Simmons. The culture

used in the present study is the type and it was received from Dr. E.G. SIM-

MONS, Department of Botany, University of Massachussetts, Amherst, USA,

under the N° QM 9131.

The fungus was grown on malt extract agar medium and the various stages

of the teliomorph development were studied by making tease mounts stained

with 0.1% lactofuchsin as recommended by CARMICHAEL (1955) and sec-

tioning the material by the paraffin method as described by JOHANSEN (1940)

and PURVIS, COLLIER and WALLS (1964). For the study of the anamorph,

RIDDELL’s (1950) slide culture technique was used and the fungus was stained

with 0.5% solution of trypan blue in lactophenol (BOOTH, 1971) for 15 mi-

nutes.

DESCRIPTION OF THE FUNGUS

Colonies on malt extract agar at room temperature (23-25°C) attaining a

diameter of 6cm in 20 days, Lemon chrome in colour, consisting of a basal

felt with a few radiating sectors. Exudate present.

Hyphae more or less hyaline to pale yellow, branched, variable in thickness,

remotely to closely septate. Racquette hyphae present. Hyphal fusions often

noticed between ordinary hyphae, or narrow hyphae, or between ordinary

Memoir N° 258 from the Centre for Advanced Study in Botany, University of Madras.

* Centre for Advanced Study in Botany, University of Madras, Madras-600 005, India.

CRYPTOGAMIE, MYCOLOGIE (Cryptog. Mycol.) TOME 2 (1981).

Source : MNHN. Paris

86 C.V. SUBRAMANIAN & C. RAJENDRAN

Y JS

Не NE

Lu AY

SRE AN

Pa D €

qm e

dos

a: early stage in the development of a stroma (section); b-h:

cogonium; i: section of a stroma showing ascogonia

stages in the development of an

Fig. 1. — Fennellia flavipes.

stages in the development of the as

and development of Hülle cells in the periphery; j-m::

ascocarp (sections) - note the ascogonium in the centre.

Source : MNHN. Paris

VII. FENNELLIA FLAVIPES 87

Fig. 2. — Fennellia flavipes. a-z’: stages in the development of Hülle cells.

Source : MNHN. Paris

88 C.V. SUBRAMANIAN & C. RAJENDRAN

hyphae and racquette hyphae. Ascocarps developing within ascostroma. Asco-

stroma globose to elongate, prosenchymatous, enveloped by masses of Hülle

cells, up to 600 x 850um. Hülle cells rounded to elongate, Pinard yellow to

Empire yellow in colour, up to 22.5um long, 481m broad (Fig. 2, az). Asco-

gonia produced within stroma, 1-15 in number, globose to subglobose or some-

times elongate, each with a short stalk and a straight, septate trichogyne-like

extension up to 50um long; globose ascogonia 7-8um in diameter; elongate

ascogonia up to 20m long and 5.0-7.5um wide (Fig. 1, c-h; Plate I, 1). Mature

ascocarps 60-160um long and 50-100um broad, each with a peridium consisting

of a few layers of thin walled narrow cells. Asci formed from croziers, in groups,

irregularly disposed, globose to subglobose, thin-walled, mostly with 4 asco-

spores each, occasionally with eight, 10-12.5um in diameter (Fig. 5, il). Asco-

spores hyaline to pale yellow, globose to subglobose, smooth, 6-8 x 5-7um,

each with an inconspicuous equatorial groove, tending to stick together in

groups (Fig. 6, c & d). Conidial heads radiate to loosely columnar (Fig. 7, v;

Plate 1, 8), white or nearly so. Phialophores up to 900um long and normally

5-8um wide, smooth, subhyaline with an apical vesicle. Vesicles globose to sub-

globose, and phialides. Metulas mostly 4-6um long. Phialides produced in groups

of a few at the tip of each metula, mostly 5-9 x 2.5-3.04m. Conidia typically

dry, globose, smooth, 2.5-3.5um in diameter and catenate (Fig. 7, w). Gangliar

conidia present, globose, produced singly or in groups from normal hyphae or

racquette hyphae.

DEVELOPMENT OF THE TELIOMORPH

The development of the teliomorph is observed in 4-5 days old cultures on

malt extract agar medium, and is marked by the production of a prosenchyma-

tous stroma, formed by the aggregation of a group of profusely branched inter-

woven system of narrow hyphae produced from the vegetative mycelium (Fig.1,

a).

A few short, erect, setose hyphal branches develop within the stroma. These

branches grow to a length of around 40-60um and develop a few septa (Fig. 1,

b). These hyphal branches are wider below and gradually taper above to a

pointed tip. The lowest cell of each of these hyphae swells and becomes a glo-

bose to subglobose or elongate structure, the ascogonium (Fig. 1, c-h; Plate I:

1). The basal part of the setose structure becomes the stalk, while the terminal

portion remains as a pointed free end of the ascogonium. Several ascogonia

are produced within a stroma; they do not appear at the same time, but succes-

sively and in an irregular manner. Hyphal branches may arise from the stalk of

each ascogonium and the basal part of its setose portion (Fig. 1, g). No anthe-

ridium was observed.

As the ascogonia develop within the stromatic tissue, the hyphal branches

at the peripheral region of the stroma develop intercalary or terminal sw ellings

(Fig. 1, i Fig. 2, ac, fi). Each of these swollen hyphal portions fully expands

and, in due course, develops a thick wall layer enclosing a central lumen; these

Source : MNHN. Paris

Fig. 3. — Fennellia flavipes. a: stroma containing young ascocarps (section) - note the cons-

picuous development of Hülle cells all around; b: a septate ascogonium, ascogenous hy-

phae and croziers; c, d: ascogenous hyphae; e: developing ascocarp showing ascogenous

hyphae around ascogonium - note multilayered ascocarp wall (section); f: a portion of

a septate ascogenous hypha - note the enlarged cell.

Source : MNHN, Paris

90 C.V.SUBRAMANIAN & C. RAJENDRAN

become the characteristic Hülle cells (Fig. 2, j-z). Sometimes, before or during

the formation of these hyphal swellings, hyphal fusions appear to occur between

adjacent hyphae so that a hyphal network is formed (Fig. 2, d & e). Swellings

may then develop at regular or irregular intervals on these hyphae. Each swelling

develops in a Hiille cell. The characteristically thick wall of the Hiille cell is

apparently laid down centripetally, but the mechanism of wall formation is not

fully understood. The shape of the Hülle cells varies from globose to elongate

or sometimes irregular, and the Hülle cells form branched chains (Fig. 2, az).

Collectively, the Hülle cells constitute a covering for the stroma (Fig. 3, a).

The next stage in the development leads to the formation of the ascocarps

within the stroma. As Hiille cells formation proceeds in the peripheral part

of the stroma, the ascogonia produced within the stromatic tissue attain their

characteristic shape and size. The hyphae surrounding each ascogonium now

branch more densely and develop more septa. They also appear now more

compactly arranged around each ascogonium than before and form a thick,

several-layered outer covering around the ascogonium (Fig. 1, j-m; Plate 1, 4).

In the formation of this dense covering, the lateral branches produced from

the stalk and the terminal portion of the ascogonium may also participate.

There is continuous addition of Hiille cells all round. The size of the developing

ascocarps within the stroma increases, followed by increase in thickness of

the wall layers of the ascocarps. A section of the stroma at this stage shows

several scattered young ascocarps in various stages of development enveloped

by the fully developed Hülle cells (Fig. 3, a; Plate I, 3).

During the further development of the ascocarps, each ascogonium is cut

off into two or three cells by the formation of one or two septa (Fig. 3, b).

From any point on each of these cells, groups of hook-like structures (the

croziers) and also a few narrow, thin and elongated hyphae (the ascogenous

hyphae) develop (Fig. 3, b). Later, the ascogenous hyphae assume a curious

aspect, being wider here and narrower there, become profusely branched, and grow

around the ascogonium (Fig. 3, c-f). As the growth of the ascogenous hyphae

around the ascogonium proceeds, the croziers produced directly from the

ascogonium may also proliferate further to produce secondary or tertiary

croziers, etc. (Fig. 5, a). Now the inner wall layers of the ascocarps slowly

disintegrate resulting in the formation of a cavity around the ascogonium.

Within this cavity the ascogenous hyphae grow further and crozier formation

continues (Fig. 4, a & b; Plate I, 5 & 6).

Finally a stage is reached when there is no further extension or branching

of the ascogenous hyphal system. At this stage, the ascogonium which lies

embedded within the weft of the ascogenous hyphae slowly disintegrates.

Certain portions of the ascogenous hyphae now become swollen and are cut off

into individual cells by the formation of septa (Fig. 3, f). From each of these

cells, another group of croziers develops, the morphology of which is the same

as that of those produced directly from the ascogonium (Fig. 5, b).

The next stage in the development of the ascocarp leads to the formation

of asci. Asci are produced either from croziers formed directly from the asco-

Source : MNHN. Paris

root

Fig. 4, — Fennellia flavipes. a: later stage in the development of ascocarps within a stroma

(section); b: ascocarp showing ascogenous hyphae in the central part.

Source : MNHN, Paris

92 C.V. SUBRAMANIAN & C. RAJENDRAN

gonium or from croziers formed from the ascogenous hyphae; from both these

groups of croziers, asci appear to be produced more or less at the same time.

By septation, each crozier is divided into three cells: the basal, the penultimate

and the tip cell (Fig. 5, c). The penultimate cell of the crozier enlarges and

becomes the young ascus (Fig. 5, d-f). No case of fusion between the basal

and the tip cells of the crozier was observed. The young ascus usually has a

large vacuole in or about the centre, so that the protoplasm is confined to the

periphery of the ascus (i. e., close to the ascus wall). Later, 4 or 8 ascospores

become differentiated within each ascus.

Since a group of asci develops from each group of croziers (Fig. 5, i), the asci

developing from different groups of croziers naturally lie scattered irregularly

throughout the central cavity of the ascocarp (Fig. 5, h). The tip cell of each

crozier usually remains attached to the related ascus even after its maturation,

giving the appearance of a stalk (Fig. 5, j & k). The asci are thick-walled when

young, thin-walled at maturity. Finally, the asci deliquesces so that the asco-

spores get released into the central cavity of the ascocarp. No ostiole was obser-

ved for the ascocarp.

As these developments occur, the stroma (with its Hülle cells covering)

attains its final size and characteristic shape. Concurrently, the individual asco-

carps within the stroma enlarge further and, at maturity, get pressed against

each other so that their wall layers get compressed and the ascocarps coalesce;

as a result, it might appear as if two neighbouring ascocarps have common

wall layers. A section of the mature stroma at this stage may show several

mature ascocarps united and surrounded by Hülle cells (Fig. 6, a; Plate 1, 7);

and each ascocarp having a peridium of a few layers of thin-walled elongated

narrow cells (Fig. 6, b).

Ascospore germination was not observed in spite of repeated study.

DEVELOPMENT OF THE ASPERGILLUS STATE

The development of the Aspergillus state starts with the production of

phialophores. The phialophores arise as small protuberances from specialized

hyphal cells, the foot cells (Fig. 7, a). The phialophore grows to varying lengths

before forming a vesicle at its tip. As growth ceases, the apex of the phialophore

swells to form a globose to subglobose vesicle (Fig. 7, c). The wall of the phialo-

phore and the vesicle increases in thickness. Occasionally, the phialophore

may develop a few septa. The mature phialophores are simple, erect or slightly

bent and thick-walled.

When the vesicle has attained its final size and shape, minute protuberances

arise from its surface (Fig. 7, d) possibly synchronously. Each protuberance

swells and elongates and is cut off from the vesicle by a septum (Fig. 7, e).

The protuberances elongate further (Fig. 7, f) and a second septum now cuts

off each of them into an apical and a basal cell (Fig. 7, g). The basal cell corres-

ponds to the metula; the apical cell is the phialide. A second phialide is now

produced as a lateral extension from the metula just below the septum separa-

Source : MNHN, Paris

VII. FENNELLIA FLAVIPES

Fig. 5. — Fennellia flavipes. a: development of croziers from ascogonium; b: development

of a group of croziers from an ascogenous hypha; c-f: ascus development by crozier for-

Pm cR qu uu m uu UD

the persistent tip cell of the crozier; h: ascocarp with developing asci (section); i: group

of asci; j-l: mature asci.

Source : MNHN. Paris

nool

dor

Fig. 6. — Fennellia flavipes. a: mature stroma with a group of several ascocarps (section); b:

single ascocarp enlarged to show ascospores, multilayered peridium and Hülle cells (sec

tion); c: ascospores tending to stick together in clumps; d: mature ascospores:

Source : MNHN. Paris

VII. FENNELLIA FLAVIPES 95

Fig. 7

and phialides; i-k: development of the first conidium

in fig. i and development of a second phialide on metula in fig. k; Lu: development of

Fennellia flavipes. a-h: development of phialophore, terminal vesicle, metulae

note rupture of phialide wall

basipetal chain of conidia - note distinct isthmus between adjacent conidia; v: a mature

phialophore with a conidial head; w: a chain of conidia.

Source : MNHN. Paris

VII. FENNELLIA FLAVIPES 97

rating it from the first phialide; this phialide is eventually cut off by a septum

(Fig. 7, h & k). This process is repeated so that several phialides are borne on

each metula.

The development of the first phialide from each of the metulae on a vesicle

appears to be synchronous; similarly, the development of the second phialide

from each of the metulae, in most cases, also appears to be synchronous.

The conidia develop as follows: the initial of the first conidium appears as

a small protuberance at the apex of each phialide (Fig. 7, i). The protuberance

increases in size and becomes the initials of the first conidium. During further

development the wall of the protuberance which is continuous with that of the

phialide wall breaks at a presumably weak point located between the swollen

tip and the body of the phialide (Fig. 7, & К). Аз the first conidium is diffe-

rentiated, a second conidium initial appears below the first conidium (Fig. 7,

1), a third one below the second, and so on, so that a basipetal chain of conidia

is produced (Fig. 7, m-u). Each conidium in the chain is separated from adja-

cent conidia by an isthmus. The isthmi are small and sometimes inconspicuous.

The first formed conidium in a chain, usually has the part of the wall of the

protuberance within which it has first differentiated as an inconspicuous cap

enveloping it (Fig. 7, j). The region of the break of the wall of the protuberance

corresponds in diameter to the width of the open end of the phialide itself,

as this is the region where it got broken off from the phialide apex. No colla-

rette is observed at the open and of the phialide.

TAXONOMY

The genus Fennellia Wiley and Simmons (WILEY & SIMMONS, 1973) is

based on F. flavipes Wiley and Simmons. The development of the teliomorph

and anamorph of this fungus was studied from type material. The results pre-

sented here are the first detailed account of the developmental morphology

of this species.

The ascocarps develop within a mass of loosely interwoven narrow hyphae.

This mass of loosely interwoven hyphae is interpreted here as an ascostroma

which is prosenchymatous. The ascocarps are found to occur in groups enve-

loped by numerous Hiille cells which collectively constitute a hard, thick outer

covering. Each ascocarp has its own pseudoparenchymatous peridium of 2-4

layers of cells. In its structure, therefore, this fungus is unique among the species

Plate 1. — Fennellia flavipes. 1: stages in the development of ascogonia, x 1400. 2: sectional

view of 2 mature ascogonia in a stroma, x 1050. 3: stroma containing young ascocarps

(section), x 110. 4: stages in the development of ascocarps in a stroma (section). Note

ascogonium in ¿he centre in each ascocarp, x 1420. 5: a portion of a stroma (enlarged)

showing developing ascocarps, x 960. 6: a stroma containing young ascocarps (section).

Note the conspicuous development of Hülle cells all around, x 180. 7; mature stroma

with a group of several ascocarps (section) with free ascospores within, x 330. 8:a typi-

cal mature phialophore showing the conidial head, x 440.

Source : MNHN. Paris

98 C.V. SUBRAMANIAN & C. RAJENDRAN

we have discussed so far. The initiation of the ascocarp is by the development

of several scattered ascogonia within the distinct mass of hyphae (i. e. the stro-

ma) already referred to. The ascogonia are peculiar, globose to subglobose or

sometimes elongate, each with a short stalk and a straight, septate trichogyne-

like extension (Fig. 1, c-f). As far as we know, such ascogonia have not been

reported for any of the teliomorph of Aspergillus and so are interesting, Each

ascocarp is the product of development of one ascogonium. The asci are pro-

duced from croziers on ascogenous hyphae which have a characteristic morpho-

logy (Fig. 3, c & d). Croziers have also been seen on what appear to be very short

ascogenous hyphae arising from the ascogonium. Croziers may also arise directly

from the ascogonium.

The developmental morphology of the anamorph of Fennellia flavipes has

been studied in detail here and it is a good Aspergillus.

The conspicuous presence of Hülle cells in Fennellia flavipes at once recalls

the genus Emericella Berk. and Br. in which also the ascocarps are enmeshed

by Hülle cells. Unfortunately, Emericella was not investigated by the author.

No detail account of the developmental morphology of the type species, Emeri-

cella variecolor Berk. and Br., is available for comparison. Therefore, we have

to rely entirely on informations available in EIDAM’s (EIDAM, 1883) paper

on E. nidulans Eidam. From this observations, it would appear that the ascocarp

in E. nidulans has a pseudoparenchymatous peridium and the asci are globose

to subglobose, avanescent and scattered within the ascocarp. In these features,

Fennellia flavipes resembles Emericella nidulans. However, from EIDAM's

description, the ascogonia in Emericella nidulans are not globose. The difficulty

is: for a proper comparison with Emericella, we must have complete informa-

tions on the developmental morphology of its type species, E. variecolor. Un-

fortunately, as already indicated, no such information is available. If the asco-

gonium in E. variecolor proves to be similar to that in Fennellia flavipes and,

additionally, the ascocarps are found to develop in groups or singly in a stroma

becoming finally collectively or singly enclosed in an envelope of Hiille cells,

the basic similarity in developmental morphology between Fennellia and Emeri-

cella would be complete. At present, however, we need further informations

on important features of the developmental morphology of Emericella variecolor

to find support for this possible conclusion (though the ascospores of E. varie-

color are quite distinct from those of F. flavipes in that they are crested in the

former, but only grooved in the latter).

We are grateful to Dr. E.G. Simmons for the type culture of Fennellia flavipes on which

the present study is based,

Source : MNHN. Paris

VII. FENNELLIA FLAVIPES 99

REFERENCES

BOOTH C., 1971 — Methods in Microbiology, vol. 4, New York.

CARMICHAEL J.W., 1955 — Lacto-fuchsin:a new medium for mounting fungi. Mycologia

47: 611.

EIDAM E., 1883 — Zur Kenntnis der Entwicklung beiden Ascomyceten. 111, Sterigmato-

cystis nidulans n. sp. Beitr. Biol. Pfl. 3: 392-411

JOHANSEN D.A., 1940 — Plant Microtechnique, McGraw Hill Book Company, Inc.,

New York and London, 524 p.

PURVIS M.J., COLLIER D.C. & WALLS D., 1964 — Laboratory Techniques in Botany.

Butterworths, London, 371 p.

RIDDELL R.B., 1950 — Permanent stained mycological preparations obtained by slide

cultures. Mycologia 42: 265-270.

WILEY B.J. & SIMMONS E.G., 1973 — New species and a new genus of Plectomycetes

with Aspergillus states. Mycologia 65: 934-938.

Source : MNHN. Paris

101

ANALYSES BIBLIOGRAPHIQUES

PITT J.L, 1979 — The genus Penicillium and its Teleomorphic States Eupenicil-

lium and Talaromyces. Academic Press, London, 634 p.

137 espèces reconnues en 1949 par RAPER et THOM dans le classique

«Manual of the Penicillia»; 113 taxa nouveaux recensés entre 1949 et 1968

(KULIK M.M., 1968 - A compilation of descriptions of new Penicillium species.

Agric. Handbook n? 351, U.S. Dpt. Agr.); le nombre de créations progressant

d’année en année; de multiples synonymies; la persistance dans la littérature

de dénominations désuètes comme «Penicillium glaucum», telle est la situation

qui s'offrait jusqu'ici au chercheur confronté à la détermination d'un Penicillium.

Au cours de la derniére décade, la révision d'un certain nombre de groupes

a été entreprise de facon méthodique par les spécialistes du C.B.S. de Baarn

(cf. STOLK, SAMSON, SCOTT...) en particulier celle des Penicillium ascosporés

rapportés à trois genres d'Eurotiales: Eupenicillium, Talaromyces et Hami-

gera. Ces travaux sont conduits de façon classique, par l'examen de nombreuses

souches cultivées sur les milieux standard: Czapek-Dox et malt-agar. C'est une

simplification appréciée des utilisateurs; mais ces publications dispersées dans

plusieurs revues, ne constituent pas une monographie du genre, et elles sont

encore loin d'en couvrir toutes les espéces.

L'auteur de la «somme» qui nous est maintenant proposée s'est imposé à

notre attention dés 1973 par un article* qui laissait préssentir une conception

différente de la classification des Penicillium. J.I. PITT, en effet, met l'accent

sur des caractéres physiologiques jusqu'alors sous-estimés, et principalement

sur la capacité de développement du champignon à des températures et des

teneurs en eau du milieu qui s'écartent des conditions optimales de croissance.

Cette publication préliminaire fait ressortir un rapport certain entre la végétation

des souches de Penicillium dans ces conditions particuliéres, et leur attribution

à l'une ou l'autre des sections ou sous-sections de Raper et Thom; en d'autres

termes, l'auteur reconnait une corrélation entre la morphologie des appareils

conidiens (degré de ramification) et le comportement de la moisissure en culture,

en particulier sa tendance à l'osmophilie. A ce titre, les critères physiologiques

choisis méritent d'étre retenus, à cóté des caractéres morphologiques, comme

* PITT J.1., 1973 — An appraisal of identification methods for Penicillium species: novel

taxonomic criteria based on temperature and water relations. Mycologia 45: 1135-1157

Source : MNHN. Paris

102 ANALYSES BIBLIOGRAPHIQUES

une aide à l'identification des espèces de Penicillium et pour une meilleure

compréhension de leurs affinités réelles, Par ailleurs, les limites entre espéces

sont mieux définies si l’on prend en compte un plus grand nombre de caractères.

Sur ces bases, l’auteur n’admet plus que 150 espèces, qu’il répartit en trois

genres. Deux sont des Ascomycètes eurotiacés dont la forme imparfaite (ana-

morphe) est de type Penicillium: Eupenicillium Ludwig (37 espéces) et Talaro-

myces Benjamin (16 espéces dont 4 nouvelles); le nom de Penicillium est réservé

aux formes dépourvues de stade ascosporé, soit 97 espéces dont une dizaine

sont nouvelles pour la science.

En ce qui concerne les Eupenicillium les conclusions de PITT sont, sur le

fond, en accord avec celles des spécialistes du C.B.S. Quant a la forme, on voit

apparaitre dans la série «javanica», en application rigoureuse des lois internatio-

nales qui régissent la double nomenclature, des changements de dénomination

spécifique déroutants. Ainsi Eupenicillium javanicum (van Beyma) Stolk et

Scott a pour anamorphe, non pas Penicillium javanicum qui est son nom d’ori-

gine, mais P. indonesiae Pitt sp. nov. La même politique s'affirme plus loin dans

la nomenclature des formes conidiennes de Talaromyces. Ce légalisme aboutit

à une singulière confusion, qui ne facilite pas la tâche de l'utilisateur.

Pour les Talaromyces l’auteur innove, non seulement dans la nomenclature,

mais aussi dans sa conception du genre. Il conteste en effet la coupure fondée

sur la disposition des asques (isolés ou en chaînes) qui conduit STOLK et SAM-

SON (1971) à distinguer, à côté des Talaromyces, le genre Hamigera. Ce rejet

a cependant peu de répercussions dans le présent ouvrage, qui traite seulement

des Talaromyces à forme conidienne Penicillium; or Pauteur exclut de ce genre

le P. avellaneum, anamorphe de l'espèce type d'Hamigera, pour en faire par

ailleurs le type de Merimbla gen. nov. (PITT, 1979); seul Hamigera striata

Stolk et Samson est ici transféré dans le genre Talaromyces.

C'est dans le traitement des Penicillium s. str. que s'exprime davantage

l'originalité de l'ouvrage. L'auteur propose un découpage en quatre sous-genres,

fondés essentiellement sur la morphologie du pinceau conidiogène. A l'intérieur

des sous-genres, la reconnaissance des espèces groupées sur la base de similarités

morphologiques en sections et séries, repose essentiellement sur l'observation

macroscopique des colonies, dans des conditions de culture non seulement

précises mais variées. Le diamètre des colonies (mesuré à 7 jours) exprime

la capacité de la souche à se développer, d’une part dans des conditions «nor-

matives»: à 25°C sur milieu de Czapek enrichi à l'extrait de levure (CYA) et

sur malt-agar (MEA); d’autre part à la même température sur un milieu hyper-

tonique à 25% de glycérol (G25N); enfin sur CYA à deux températures limites:

5°C et 37°C. La morphologie microscopique et les caractères biométriques

interviennent en dernier lieu dans la description des espèces.

Ainsi la démarche de l’auteur est sensiblement la même que celle de RAPER

et THOM; les conditions de culture sont, pour une part, comparables. Mais

la hiérarchie des caractères est interprétée différemment, de sorte que la classi-

fication apparaît, au premier abord, profondément modifiée.

Source : MNHN. Paris

ANALYSES BIBLIOGRAPHIQUES 103

Les sous-genres Aspergilloides, à phialides insérées directement sur le stipe,

et les Biverticillium, où un verticille de métules s'interpose entre le stipe et

les phialides étirées, correspondent sensiblement aux sections «Monoverticillatay

et «Biverticillata symmetrica» de RAPER et THOM. Le sous-genre Furcatum

regroupe les espèces régulièrement ou irrégulièrement biverticillées, mais à phia-

lides ventrues et (secondairement) à croissance plus rapide que celle des Biverti-

cillium sur un milieu hypertonique a 25% de glycérol; chez RAPER et THOM,

on trouve ces espèces dispersées parmi les sections et sous-sections: Divaricata,

Velutina, quelques Monoverticillata ramigena, et même Biverticillata symmetrica

(ser. herquei). Sans nul doute, la définition de ce sous-genre et plus particu-

ligrement de la section divaricatum, à pinceaux irréguliers, est opportune;

la difficulté d'attribution des souches aux catégories «divariqués» ou «ramifiés»

se trouve heureusement levée.

Le sous-genre Penicillium, le plus vaste et le plus diversifié, accueille toutes

les espèces à pinceau dissymétrique compact, de structure complexe (trois

niveaux de ramification et parfois plus), c’est a dire la plupart des Assymetrica

du «Manual». Mais les critéres retenus pour diviser le sous-genre en sections

et sous-sections, et parvenir à des «séries» d'un petit nombre d'espéces similaires,

sont autres que ceux adoptés aux mêmes fins par RAPER et THOM. Comme

SAMSON et al. (1976), PITT accorde un intérét mineur à la texture des colo-

nies, qui fonde la division classique en velutina, funiculosa et fasciculata. Les

sections sont ici définies par les particularités microscopiques de l'appareil

conidien.

А l'exception de quelques espèces assignées aux sections cylindrosporum

(P. italicum et aff.), Inordinate et Coronatum (chacune une seule espèce), tous

les Penicillium sous-genre Penicillium possédent un méme type de pinceau à

conidies sphériques ou ellipsoides portées par des phialides ampulliformes;

en outre, la plupart se développent bien sur milieu hypertonique; aucun

ne pousse à 37°C. La section Penicillium qui englobe ces formes typique-

ment représentatives du genre est la plus vaste, avec 16 espèces groupées en

quatre séries seulement (au lieu de 11 séries chez THOM et RAPER). Les espèces

sont définies en termes plus larges mais plus homogènes que dans le «Manual»

et, en principe, leur identification devrait être plus aisée. Malheureusement,

les synonymies reconnues par l'auteur ne sont pas exactement celles qu'ad-

mettent SAMSON et al. et, dans un certain nombre de cas, il faudra faire un

choix inconfortable entre la révision proposée par les spécialistes néerlandais

et celle de PITT. Celui-ci convient d'ailleurs que le sous-genre reste «taxonomi-

quement difficile»; à ce propos, on lira avec profit le chapitre final intitulé

«Polyglotta», où il envisage en premier lieu «ce qu'il faut faire lorsque les clés

ne marchent pas».

Une remarque encore sur la nomenclature. L'auteur, soucieux de traditions

authentiques, s'est intéressé aux espèces proposées au début du siècle par le

belge DIERCKX, et remarquablement analysées par son disciple BIOURGE

(1923). Il est ainsi amené à reconnaître dix des espèces «dierckxiennes» qui,

dans quelques cas, ont la priorité sur des binômes universellement adoptés

Source : MNHN. Paris

104 ANALYSES BIBLIOGRAPHIQUES

dès les premiers travaux de THOM. Ainsi réapparaît fort heureusement le P.

griseo-fulvum (P. patulum Bain.) déjà réhabilité par SAMSON et al.; mais le P.

cyclopium Westl., une des espèces les plus répandues et les plus fréquemment

citées, s'efface en faveur d'un P. aurantio-griseum Dierckx au nom beaucoup

moins évocateur. On pourra regretter aussi la disparition de P. frequentans, P.

nigricans et quelques autres qui nous étaient devenus familiers.

En marge du traitement taxinomique des Penicillium qui fait l'objet principal

de cet ouvrage, il faut souligner l'intérét des informations qui concernent l'éco-

loge et la physiologie de ces moisissures, leur présence dans l'alimentation

humaine et leur toxicité potentielle. On appréciera aussi la table qui résume

clairement la capacité de croissance des 150 espèces dans les conditions définies

dans le texte, le glossaire des termes spécifiques, ainsi que les index et la biblio-

graphie qui complètent le volume. Enfin une typographie aérée, un plan rigou-

reusement établi pour chaque description d'espèce, sont des attraits non négli-

geables.

La présente monographie comble un vide de trente ans et, ce titre, elle

était vivement attendue, S'imposera-t-elle désormais comme le système de réfé-

rence fondamental pour la détermination des Penicillium? Au premier abord, la

méthode parait trés contraignante, avec ses trois milieux de culture et ses trois

températures d'incubation; et les changements de nomenclature ont de quoi

déconcerter ou irriter. Mais, à notre avis, il vaut largement la peine d'essayer. Il

est indispensable, certes, d'expérimenter consciencieusement le «système», sans

en négliger aucune étape; sans préjugés aussi, et sans lui demander plus qu’il

n'a la prétention de fournir, c'est à dire un outil commode pour l'attribution

d'une dénomination spécifique à une souche particuliére de Penicillium. L’au-

teur lui-même reconnaît ce que cette démarche comporte toujours de subjec-

tivité : «... Penicillium species, like beauty, lie in the eye of the beholder».

J. Nicot

K.T. VAN WARMELO and B.C. SUTTON, 1981 — Coelomycetes VII -Stegon-

sporium. Mycological Papers n° 145, C.M.I, Ed., Kew, 45 p., 13 pl.

Révision du genre Stegonsporium qui se voit limité à deux espèces: S. pyri-

forme (Hoffm. ex Fr.) Cda et S. acerinum Peck. Les autres représentants du

groupe sont répartis dans les genres Stigmina Sacc., Myxocyclus Riess., Cory-

neum Niess, Camarosporium Schulz (avec trois combinaisons nouvelles), Trim-

matostroma Cda, Dictyodesmium Hughes, Neohendersonia Petrak, Stigmella

Lév., Shearia Petrak., Thyrostromella Höhn., Melanconium Link. ex Fr., Cama-

rosporellum Tassi. Deux nouveaux genres: Stegonsporiopsis et Kaleidosporium

sont proposés. М.Е. В.

Commission paritaire 15-8-1980 N° 58611

Dépôt légal n° 10894 - Imprimerie de Montligeon

Sorti des presses le 15 mai 1981

Source : MNHN. Paris

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Corticiés par J. Boidin. 390 pages, pl. et fig. : 70 F.

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Becker. 94 pages :25 F.

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gamie du Muséum National d'Histoire Naturelle. (1) Micro-

mycètes. Macromycètes (première partie). 68 pages : 25 Е.

NO 9 (1967). Table des Matières (1936-1965) 85 p. 20 F. - (1966-

1975) 40р. 10Е.

№ 10 (1969). 1е genre Panaeolus. Essai taxinomique et physiolo-

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Source : MNHN. Paris

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