SOMMAIRE

G.L. HARRISON and A. STEWART — Cultural variation in Mycosphae-

rella fragariae (Tul.) Lindau ...........................:. 87

J. SALIBA et A. DAVID — Apports des caractères culturaux et des con

frontations dans l'étude des représentants européens du genre Stecche-

rinum (Basidiomycètes, Aphyllophorales) .................... 93

V.A. ADISA — Some nutritional requirements of spoilage molds of pine-

ee de sete MT AI ee min ae 111

D. DIROL — Dégradation par des champignons lignivores de la paroi

cellulaire de pin traité à des doses sub-létales de produit de préserva-

OEEO ne Res ka AE TIT

M.C. JANEX-FAVRE — Étude ontogénique et structurale des périthéces

du Dictyotrichiella semiimmersa Candoussau et Sulmont (Pyrénomy-

cètes, Herpotrichiellaceae) : ............................. 133

T. HADAR — The host specificity of Urophlyctis leproides (Trab.) Magn. . 153

L. BETTUCCI, S. LUPO and S. SILVA — Control growth of wood-rotting

fungi by non-volatile metabolites from Trichoderma spp. and Glio-

En rene N ee 157

Analyses bibliographiques «eee meme 167

CONTENTS

G.L. HARRISON and A. STEWART — Cultural variation in Mycosphae-

vella fracariza (Tib Tandadı de 208 sie Ga sol hee Sok 87

J. SALIBA et A. DAVID — Use of cultural characters and compatibility

in the study of european Steccherinum (In French) .............. 93

V.A. ADISA — Some nutritional requirements of spoilage molds of pine-

Sn cS ROME Ero cO Mac ON RM Seo T 111

D. DIROL — Decaying fungi action on the wood cell-wall pine treated

with sub-lethal amounts of a chlorated preservative. (In French) ..... 117

M.C. JANEX-FAVRE — Perithecium development and structure in Dictyo-

trichiella semiimmersa Candoussau et Sulmont (Pyrenomycetes Herpo-

trichiellaceae) (In French) ......:.........44.4..+4.4..... 133

T. HADAR — The host specificity of Urophlyctis leproides (Trab.) Magn. . 153

L. BETTUCCI, S. LUPO and S. SILVA — Control growth of wood-rotting

fungi by non-volatile metabolites from Trichoderma spp. and Glio-

cladiumvirens ......... Po Le > 157

Bibliography .

Source - MNHN. Paris

CRYPTOGAMIIE

MYCOLOGIE

TOME 9 Fascicule 2 1988

Ancienne Revue de Mycologie. Dirigée par Roger HEIM

ALA

BIRL.DU

MUSEUM

\ PARIS

\ x

DIRECTEUR SCIENTIFIQUE : Madame J. NICOT

SECRÉTAIRE DE RÉDACTION : Mme M.C. BOISSELIER. ÉDITEUR : A.D.A.C

Publié avec le concours du Muséum National d'Histoire Naturelle

CRYPTOGAMIE, MYCOLOGIE est indexé par : Biological Abstracts, Current Contents,

Publications bibliographiques du COST (Pascal).

Bibliothèque Centrale Muséum

UNI

3 3001 SHERZZ’AÄNHN. Paris.

Source : MNHN. Paris

Cryptogamie, Mycol. 1988, 9 (2) : 87-92 87

CULTURAL VARIATION

IN MYCOSPHAERELLA FRAGARIAE (TUL.) LINDAU.

by G.L. HARRISON and A. STEWART*

ABSTRACT. — A detailed study on the cultural characteristics of 6 isolates of M. fragariae

(Tul) Lindau collected in the Auckland region from the strawberry variety Tioga was

carried out. All isolates could be distinguished when grown on PDA at 25°C in darkness for

21 days, using the following characteristics ; colour of mycelium, texture of mycelium,

spore production, growth rate, and pigment exudation both onto the mycelium and into the

growth medium.

Cultural variation within isolates was also studied. M. fragariae was found to be extre-

mely variable in culture, variation of juvenile colonies from parents in appearance ranging

from 0-40 % between replicates. Ali combinations of mycelial colour (red, grey, pink,

white), dye production (profuse, slight, none) and ability to colour the growth medium

were observed.

RÉSUMÉ. — Les caractéristiques culturales de 6 isolats de Mycosphaerella fragariae (Tul.)

Lindau sont étudiées. Ils ont été prélevés sur la variété de fraisier Tioga dans la région

d'Auckland. Tous les isolats sont distincts après culture sur PDA pendant 21 jours à 25°C

dans l'obscurité, sur la base des caractères suivants : couleur et texture du mycélium, pro-

duction de spores, croissance, exudations pigmentées en surface et dans le milieu.

La variation des isolats en culture a été étudiée. M. fragariae présente un taux de varia-

tion trés élevé; il est compris entre 0 et 40 % suivant les repiquages, pour les différences

entre colonies juvéniles et parentales. Toutes les combinaisons de couleurs (rouge, rose, gris,

blanc), de production de pigment (profuse, faible, nulle), et de capacité à colorer le milieu

de culture ont été observées.

KEY WORDS : Strawberry, Mycosphaerella fragariae, Fragaria, leaf-spot, cultural variation:

INTRODUCTION

Strawberry Leaf Spot or Frog Eye disease caused by Mycosphaerella fragariae

(Tul.) Lindau, is one of the most common fungus diseases affecting strawberries

worldwide (PLAKIDAS, 1964; ALEXANDER, 1982). During a study of the

pathogenicity of various M. fragariae isolates on a range of strawberry varieties,

extreme cultural variation was observed both between and within isolates of

* Dept. of Botany, University of Auckland, Private Bag, Auckland, New Zealand. — Present

Address : Dept. of Medicine, University of Auckland, Private Bag, Auckland, New Zealand.

Source - MNHN. Paris

88 G.L. HARRISON and A. STEWART

the fungus. The existence of variants of M. fragariae distinguishable in culture

by macroscopic and microscopic characteristics has been established previously

(PALCHEFSKY & ALLISON, 1950; BOLTON, 1958, 1962; NEMEC, 1969).

PALCHEFSKY & ALLISON (1950) claimed to have isolated two distinct

cultural types of M. fragariae from different leaflets of a single leaf. BOLTON

(1962) however, recognised forty-nine unique cultural variants of M. fragariae

and proposed that it was the variety of strawberry from which the isolate was

derived that determined the cultural characteristics of that isolate.

This paper describes the isolation of M. fragariae from different sources in

the Auckland region of New Zealand, and evaluates the cultural characteristics

of each of the isolates.

MATERIALS AND METHODS

Isolation of M. fragariae.

Leaves of the variety Tioga showing mature Leaf Spot symptoms were col-

lected from four strawberry plantations in the north Auckland area. The deta-

ched leaves were washed in 3 % sodium hypochlorite for 4 min and subsequently

rinsed in sterile distilled water (SDW). Leaf spots were then dissected out and

cut in half. The halves were placed vertically onto Potato Dextrose Agar (PDA)

and incubated at 25°C in the dark. White tufts of conidiophores could be seen

growing from the cut edges of the leaf spots above the agar after 2 days. Conidia

were picked off under a dissecting microscope using a sterile needle, placed onto

fresh PDA plates and incubated at 25°C in darkness. In this way four isolates

were obtained and were designated 101, 102, 103 and 104 respectively. Isolate

103 which often failed to grow on PDA, was maintained on a stock culture of

autoclaved Tioga leaves which were placed on the top of a thin layer of PDA in

petri dishes, while the remaining isolates were maintained on PDA, at 25°C in

darkness.

The two isolates designated 8028 and 6M were supplied by Dr W. Hartill,

Plant Diseases Division, DSIR, Auckland.

Growth of M. fragariae colonies.

Single colonies for observation and comparison were obtained either by

subculturing 2 mm diameter mycelial discs, or by plating out single spores which

had been germinated in a solidified 1 % glucose/1.8 % agar mix containing the

spore suspension. Single spores were picked out from these plates after 4 days

with the aid of a dissecting microscope (BOLTON, 1962). All observations

were made on 21 day old colonies grown on PDA in darkness at 25°C.

Cultural characteristics.

Observations on colour of mycelium, surface texture, and pigment exudation

onto the surface of the mycelium were made for colonies grown from mycelial

discs.

Source : MNHN, Paris

M. FRAGARIAE CULTURAL VARIATION 89

The exudation of pigment into the agar medium was measured for colonies

grown from single spores using the following method. Four 1 cm diameter discs

of agar were cut from around the growing edge of 5 replicate colonies per iso-

late. Each disc was placed in a test tube containing 3 ml of SDW and left over-

night at 3°C to allow the pigment to diffuse from the agar. The solution was

filtered and absorbance recorded using a Perkin spectrophotometer at 480 nm

and 360 nm against appropriate controls.

Colony growth was assessed for each isolate by measuring the diameter of

12 replicate colonies.

Conidial production was determined by detaching the colonies from the

agar surface using forceps and placing each in a test tube containing 2 ml of

SDW. The tubes were agitated on a vortex mixer until a consistent spore count

was recorded using a haemocytometer.

Variation of juvenile colonies from the parent was assessed by comparing

the colour, texture, and level of pigment production of a number of single

spore colonies with that of the parent colony.

Variation in colony characteristics was also observed over a period of 18

months. Variants obtained were subcultured and held in a stock collection for

comparison with parent colonies.

RESULTS

Individual isolates were able to be distinguished on the basis of the characte-

tistics shown in Table 1. Isolate 6M was unique in both mycelial colour and

texture (Fig. 1A), no other isolate having such a pale colour and matted appea-

reance, Isolate 101 was also easily distinguished by the formation of large

pigment droplets on the mycelial (Fig. 1B). Isolate 8028 was unique in its

formation of a darker band around the edge of the colony (Fig, 1C), while

isolates 102, 103, and 104 were all similar in appearance (Fig. 1D).

Isolates 8028 and 6M both had high growth rates but were poor sporulators.

Greatest sporulation was observed for isolate 103, although problems were en-

countered in culturing this isolate on PDA.

The ability to colour the medium varied considerably between isolates, with

greatest pigment exudation by isolates 101 and 102.

Attempts to quantify the degree of variation in visual characteristics of

juvenile colonies from their parents met with little success. The percentage of

colonies differing from parent colonies ranged from 0-40 % between replicates

carried out over time. It was possible, however, to distinguish some isolates by

the sectors they commonly produced (a sector being a spontaneous change in

either the colour or texture of the mycelium). Isolate 101 produced white

sectors almost exclusively while isolate 8028 produced sectors with a matted

texture which were pale in colour.

The rate at which variant sectors appeared also varied over time. Isolate 8028

produced four variants within the first six months of observation. It then remai-

Source - MNHN. Paris

90 G.L. HARRISON and A. STEWART

Isolate

8028 om 101 102 103 104

Characteristics

Colour of mycelium pink with palepirk edwin red with geytlOSmm rdwm

red border grey border grey border then red grey border

Texture of tent matiedt on ten te ten

mycelium

Pigmented droplets few none many tew tow few

(no. and diameter in mm) P 2-3 <= 2-4 e

Colony diameter 103 76 68 76 78 68

(mm) (14) 02) (06) 02) (19) (14)

Conia production 120 120 120 2.00 5.00 233

(105) (0.14) (0.19) (0.43) (0:16) (070) (022)

Pigment Exudation 070 105 177 1.73 " 065

(A480nm - 360nm) (0.01) (032) (0.49) (0.56) (0.22)

Common sectors matted deep red white none matted tur none

observed or matted orwhi telt

1 A ong stranded mycelia colony with he aerial mycelium matted together ike wet fur

t Mycelium short and dense (lee)

m Colonies tailed to grow on PDA.

Table 1 — Characteristics of M. fragariae isolates grown on PDA at 25°C in darkness for 21

days. Numerical values shown are means (with SD)

Tableau 1 — Caractères des isolats de M. fragariae après culture pendant 21 jours sur PDA à

25°C dans l'obscurité.

ned stable for four months before all remaining colonies of the parent type

changed to a pale pink colour. Isolate 6M in contrast, remained stable for six

months and then produced three variants in the space of three weeks. From the

six isolates held in culture over 18 months, variants exhibiting almost all combi-

nations of mycelium colour (red, white, grey, pink), pigment production (pro-

fuse, slight, none), and ability to colour the growth medium were observed.

Variants obtained included a white nonsporulating colony with no aerial myce-

lium derived from 6M, and a variant identical in appearance to 6M but having

an extremely fast growth rate.

Variants differed in stability also, some remaining stable in culture for many

months, while others quickly reverted to their parent form or to yet another

variation. The stability of any particular variant was unrelated to its cultural

characteristics.

DISCUSSION

All six isolates of M. fragariae studied could be distinguished using the seven

cultural characteristics tested i.e. colour and texture of the mycelium, spore

production, growth rate, pigment exudation (both onto the mycelium and into

Source : MNHN, Paris

M. FRAGARIAE CULTURAL VARIATION 91

Figure 1 — Three week old colonies of Mycosphaerella fragariae grown on PDA at 2

darkness. Isolates (A) 6M, (B) 101, (C) 8028, (D) 103. Scale bar : 1 cm.

Figure 1 — Colonies de 3 semaines de Mycosphaerella fragariae cultivées sur PDA à 25°C

dans l'obscurité. Isolats (A) 6M, (B) 101, (C) 8028, (D) 103. Échelle : 1 cm

the medium), and sectors produced. Many of the variations seen in these charac-

teristics are similar to those previously reported in the literature for M. fragariae

(PALCHEFSKY & ALLISON, 1950; BOLTON, 1958), indicating that the di-

versity of this fungus in New Zealand is as extensive as that seen elsewhere.

Spontaneous changes in macroscopic characteristics also occurred readily in

culture, some isolates exhibiting a greater frequency of change than others.

Variation usually occurred by sector production and occasionally by whole

colony changes soon after subculturing.

Such extreme variation in culture is not limited to M. fragariae. Mycosphae-

rella nubilosa (Cooke) Hansf. (GANAPATHI, 1979), Botrytis cinerea Pers, ex

Fr. (JARVIS, 1977), and Penicillium species (BRIDGE & al., 1986) have also

been noted for the heteromorphic nature of their colonies. The mechanism for

such changes in M. fragariae has not been determined, though in Penicillium it

has been suggested to be parasexual recombination (BURNETT, 1976)

The variation shown in the cultural characteristics both between and within

isolates of M. fragariae raises several points. Firstly, it brings into doubt claims

that the isolate type is determined by the variety of strawberry from which it

is obtained (BOLTON, 1962), as all six of the isolates used in this study were

Source : MNHN, Paris

92 GL. HARRISON and A. STEWART

from the variety Tioga. In contrast however, it has also been shown that varia-

tion in cultural type can be introduced early in the subculturing process, per-

haps explaining the isolation of two distinct cultural types from one leaf by

PALCHEFSKY & ALLISON (1950). Secondly, it has previously been shown

that variations within isolates can have an effect on morphological and physiolo-

gical characteristics, and on secondary metabolite production (SANSOME,

1949; SCHAREN & KRUPINSKY, 1970). It is possible that variation in culture

is therefore occurring with those characteristics that affect survivorship and

adaptability in the field such as growth and sporulation rates. Though BOLTON

(1962) showed that the cultural characteristics of M. fragariae isolates did not

cortelate with pathogenicity when using freshly obtained isolates, the question

of the reliability of pathogenicity tests using isolates held in culture for some

time remains. Under conditions of repeated culture and preservation many

changes may occur in the characteristics of an isolate. It may therefore differ

significantly from the isolate taken from the field by the time pathogenicity

trials or other observations are carried out.

Finally, the question of how isolate variation occurring in the field affects

disease development is raised. Is it this particular characteristic of M. fragariae

which has allowed it to remain a serious pathogen on a wide range of strawberry

cultivars worldwide, despite the constant development of new varieties of

strawberry and new fungicides for its control ? If so, then this particular cha-

racteristic of M. fragariae warrants further investigation if a successful disease

management strategy is to be maintained.

REFERENCES

ALEXANDER G.P., 1982 — The Strawberry - An indepth review of research up to 1980-81.

Whangarei, New Zealand, Ministry of Agriculture and Fisheries, 112 p.

BOLTON A.T., 1958 — Cultural variation in Mycosphaerella fragariae. Canad. J. Bot. 36 :

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BOLTON A.T., 1962 — Pathogenic variation in Mycosphaerella fragariae. Canad. J. Bot. 40 :

647-650.

BRIDGE P.D., HAWKSWORTH D.L., KOZAKIEWICZ Z., ONIONS A.H.S. and PATER-

SON R.R.M., 1986 — Morphological and biochemical variation in single isolates of Peni-

cillium. Trans, Brit. Mycol. Soc. 87 : 389-396.

BURNETT J.H., 1976 — Fundamentals of mycology. London, Edward Arnold, 544 p.

GANAPATHI A., 1979 — Studies on the etiology of the leaf blotch disease of Eucalyptus

Spp. caused by Mycosphaerella nubilosa (Cke.) Hansf, PhD Thesis, Auckland University,

New Zealand.

JARVIS W.R., 1977 — Botryotinia and Botrytis species : taxonomy, physiology and patho-

genicity. Research Branch, Canada Department, Ottawa. Monograph n° 15,195 p.

NEMEC S., 1969 — Determination of leaf spot races in southern Illinois strawberry plan-

tings. PL Dis. Reporter 53 : 94.97

PALCHEFSKY J. and ALLISON C.C., 1950 — Variations in pigment formation and other

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thology 40 :22.

PLAKIDAS A.G., 1964 — Strawberry diseases. Biological Series No 6. Baton Rouge, USA,

Louisiana State University Press, 632 p.

SANSOME E.R., 1949 — Spontaneous mutation in stantard and Gigas forms of Penicillium

notatum Strain 1249 B21. Trans. Brit. Mycol. Soc. 32 : 305-314.

SCHAREN A.L. and KRUPINSKY J.M., 1970 — Cultural and inoculation studies of Septo-

ria nodorum, cause of glume blotch of wheat. Phytopathology 60 : 1480-1485.

Source : MNHN. Paris

Cryptogamie, Mycol. 1988, 9 (2) : 93-110 93

APPORTS DES CARACTERES CULTURAUX

ET DES CONFRONTATIONS DANS L’ETUDE

DES REPRESENTANTS EUROPEENS DU GENRE

STECCHERINUM (BASIDIOMYCETES, APHYLLOPHORALES)

par J, SALIBA et A, DAVID*

RÉSUMÉ. — L'emploi des tests d'intercompatibilité a permis de montrer que Steccherinum

ochraceum (Pers..Fr.) S.F Gray est formé de trois espèces biologiques interincompatibles.

Le nom de Steccherinum bourdotii est proposé pour Steccherinum dichroum Pers. sensu

Bourdot et Galzin non Steccherinum dichroum Pers., lui aussi incompatible avec Steccheri-

num rhois (Schw.) Banker et Steccherinum robustius (J. Erikss. et Lund.) J. Erikss., deux

bonnes espèces isolées génétiquement.

ABSTRACT — Three new species are described, among them two sibling species of Stecche-

rinum ochraceum (Pers.:Fr.) S.F. Gray and the third one, Steccherinum bourdotii nov. sp.

similar to Steccherinum dichroum Pers. sensu Bourdot et Galzin non Steccherinum di-

chroum Pers. The use of intercompatibility tests has shown that Steccherinum rhois (Schw.)

Banker, Steccherinum bourdotii nov. sp. and Steccherinum robustius (J. Erikss. et Lund.) J.

Erikss. are three good species different of the ultraspecies Steccherinum ochraceum!

MOTS CLÉS : Aphyllophorales, Steccherinum, systématique, cultures, intercompatibilité.

Le genre Steccherinum fut créé en 1821 par S.F. GRAY pour une espèce

hydnoïde, Hydnum ochraceum Pers. Il renferme aujourd'hui de nombreuses

espèces présentant toutes en commun les caractères suivants : hyménium odon-

tioide, blanc-cröme, rosätre ou ocrace & brun roux, systeme dimitique, hyphes

génératrices avec ou sans boucles, présence de pseudocystides ou de métuloides

bien différenciés, spores ellipsoïdes à subglobuleuses aux parois minces, lisses,

ne réagissant ni avec IKI ni avec le bleu coton.

facile à préciser, les es-

Si l'appartenance au genre est dans l'ensemble as

ir et le nombre reconnu

pèces sont par contre beaucoup plus délicates à dél

varie selon les auteurs. L'étude des types, les comparaisons morphologiques

ont déjà fait l'objet de travaux importants qui nous ont servi de base (BANKER,

* Laboratoire de mycologie, Université Lyon 1, 43, Bd du 11 Novembre 1918, F-69622

Villeurbanne, France.

Source : MNHN, Paris

94 J. SALIBA et A. DAVID

1912; NIKOLAJEVA, 1961; et surtout MAAS GEESTERANUS, 1974). Devant

les conclusions souvent imprécises en ce qui concerne la distinction des espéces,

nous avons pensé apporter des éclaircissements en étudiant non seulement la

morphologie des carpophores mais aussi l'aspect des mycéliums en culture et

surtout en faisant appel aux tests d'intercompatibilité. Nous avons plus parti-

culiérement travaillé sur les Steccherinum ochraceum, St. dichroum sensu Bour-

dot et Galzin et St. rhois, espèces pour lesquelles les opinions des mycologues

varient considérablement. MAAS GEESTERANUS (1974) les synonymise,

ERIKSSON & al. (1984) ne mentionnent ni St. dichroum, ni St. rhois. D'autres

enfin considèrent deux ou trois espèces distinctes : BOURDOT & GALZIN

(1928) reconnaissent St. ochraceum et St. dichroum alors que PARMASTO

(1968), dans une liste de Steccherinum trouvés en U.R.S.S., énumére comme

espèces indépendantes St. dichroum, St. ochraceum et St. rhois. Dans l'ouvrage

récent d'ERIKSSON & al. (1984) la clé établie pour le genre Steccherinum

renferme six espèces : St. cremeoalbum Hjortst., St. fimbriatum (Pers. Fr.) J.

Erikss., St. litschaueri (Bourd. et Galz.) J. Erikss., St. ochraceum (Pers.: Fr.)

S.F. Gray, St. robustius (J. Erikss, et Lund.) J. Erikss., St. subcrinale (Peck.)

Ryv. auxquels s'ajoute St. oreophilum Linds. et Gilb. non inclus dans cette

clé mais cependant mentionné dans le texte. Pour réaliser notre projet, nous

devions disposer de récoltes fraîches, permettant l'obtention de sporées ou de

boutures. Toutes les espèces énumérées ci-après ont été récoltées par nous, où

nous ont été envoyées fraîches, à l'exception de St. cremeoalbum et St. litschau-

eri qui ne seront donc pas traitées ici, faute de matériel, de même que St. oreo-

philum qui a déjà fait l'objet d'un article récent (DAVID & BOIDIN, 1984).

MATÉRIEL ET MÉTHODES

Les cultures mycéliennes et leur description ont été réalisées selon NOBLES

(1948) et BOIDIN (1958). Le code utilisé est celui établi par NOBLES (1965)

et complété par BOIDIN (1966), BOIDIN & LANQUETIN (1984),

Toutes les confrontations ont été faites avec au moins 2 monospermes de

chaque récolte, indiqués par des chiffres arabes, 1, 2, 3... et toutes les fois que

cela a été possible avec un représentant de chaque pôle, indiqué par un chiffre

romain I, Il, III ou IV. Nous possédons les mycéliums monospermes et (ou)

polyspermes de toutes les récoltes citées; dans le cas contraire les références des

exsiccata seront suivies d'un astérisque.

Les abréviations figurant aprés les numéros des récoltes correspondent aux

références des herbiers.

AD : Alix David (France), DAOM : Ginns (Canada), GB. : Nills Hallenberg

(Suéde), HGB : Holga Grosse-Brauckmann (BDR), PL : Paule Lanquetin (France),

R Ritter (DDR), MT : Milica Tortic (Yougoslavie).

Les cartes de France (Fig. 1-2) permettent de voir la répartition géographique

des différentes espéces de Steccherinum dans ce pays. Enfin pour permettre

l'identification des différentes espèces européennes, leurs principaux caractères

sont rassemblés dans une clé.

Source : MNHN, Paris

LE GENRE STECCHERINUM 95

STECCHERINUM OCHRACEUM (PERS.: FR.) S.F. GRAY

Nat. Arr. Brit. Pl., 1: 651 (1821)

Basionyme : Hydnum ochraceum Pers.: Fr., Syst. Mycol. 1 : 414 (1821).

Steccherinum ochraceum est une espéce trés commune en Europe, croissant

p ;

généralement. sur feuillus, beaucoup plus rarement sur coniféres. Elle est trés

bien décrite dans la plupart des ouvrages de mycologie.

P E y gl

Les nombreuses confrontations effectuées entre monospermes de récoltes

différentes ont conduit à distinguer trois ensembles absolument interstériles, ne

se distinguant ni par leur morphologie, ni par leur structure microscopique, ni

par leur support et correspondant donc à trois espèces jumelles a, b, c.

L'espèce «a» de répartition européenne, fréquente dans la moitié nord de

la France, notamment dans la région parisienne, beaucoup plus rare dans la moi-

tié sud, correspond sans doute à Steccherinum ochraceum dont le lectotype

choisi est de la région parisienne.

Récoltes de Steccherinum ochraceum.

— 207-PL : La Tour de Salvigny, Rhône, 11.1 2.48 (Boidin).

— 4578-PL : Rhône, sur feuillu, 23.11.63 (Société Linnéenne de Lyon).

_ 5819-PL : Poleymieux, Rhône, sur Alnus glutinosa, 09.04.67 (Besson).

— 3660-AD : St. Bernard, Ain, 01.04.79 (Boidin).

— 3716-AD : Forét de la Ferté, Saóne-et-Loire, 20.08.79 (David).

— 3734-AD : Verdun-sur-le-Doubs, Saône-et-Loire, sur Carpinus, 25.08.79 (David).

— 4274-AD : Bois de Lesches prés d'Esbly, Seine-et-Marne, sur Betula, 10.11.81

(Duverger).

- 4379-AD : Savigneux, Ain, sur Carpinus, 20.08.82 (Boidin).

— 4380-AD : Savigneux, Ain, sur Carpinus, 20.08.82 (Boidin).

4391-AD : Forêt de Zollishlag, Lucerne, Suisse, sur Quercus, 16.11.82 (Brei-

tenbach).

— 4393-AD : Forét de Chateau Renault, Indre-et-Loire, sur Carpinus, 20.11.82

(Lafont).

— 4402-AD : Forét de Mixte, Pyrénées-Atlantiques, sur Fagus, 09.01.83 (Gilles).

— 4407-AD : Forêt de St. Germain, Yvelines, Fagus, 29.01.83 (Duverger).

_ 4409-AD : Forét de Coye, Oise, Carpinus, 05.02.82 (Duverger).

4411-AD : Parc National de St.-Amand, Raismes, Nord, sur feuillu, 17.10.82

(Courtecuisse).

— 4412-AD : La Mare aux cannes, Forêt de St-Germain, Yvelines, sur Quercus,

19.02.83 (Duverger).

—4413-AD : Castetpugon, Pyrénées-Atlantiques, sur Carpinus betula, 20.02.83

(Vivant).

— 4417-AD : Région de Montagny, Rhóne, sur tronc mort au sol dans forét mé-

lée de Quercus, Carpinus, Fraxinus, 23.03.83 (David).

— 4420-AD : Forét de Fontainebleau, Seine, sur Quercus, 20.03.83 (Duverger).

— 4421-AD : Belley, Ain, sur Castanea vulgaris, 10.04.83 (Dequatre).

— 4457-AD : Le Lion d'Angers, Maine-et-Loire, sur Acer, 10.06.84 (David).

Source : MNHN, Paris

96 J. SALIBA et A. DAVID

Figure 1 : Répartition de Steccherinum ultraspecies ochraceum.

©: St. ochraceum, © : St. meridiochraceum, v : St. pseudochraceum.

— 4459-AD : Le Lion d'Angers, Maine-et-Loire, sur Acer, 10.06.84 (David).

4476-AD : Maine-et-Loire, sur Corylus, 01.10.83 (Normand).

— 4477-AD : Le Lion d'Angers, Maine-et-Loire, sur Quercus, 08.10.83 (Normand).

~ 4479-AD :Maine-et Loire, sur Laurus, 08.10.83 (Normand).

— 4480-AD : Maine-et-Loire, Aesculus hippocastanum, 08.10.83 (Normand).

— 4495-AD : Forét de la Valbonne, Gard, sur Quercus, 22.08.83 (Cannac).

—4525-AD : Argelés sur-mer, Pyrénées-orientales, sur Quercus pubescens, 21.

01.84 (Lafuente).

4581-AD : environs de Bagnières de Bigorre, Pyrénées-atlantiques, sur Fagus,

17.10.84 (Baute).

—19-83-MT : District d'Opatija, prés de Rijeka, Yougoslavie, sur Quercus,

19.02.83 (Tortic).

Source : MNHN, Paris

LE GENRE STECCHERINUM 97

_ 2100-HGB : Pfungstadter, BDR, sur Alnus glutinosa, 11.02.84 (Grosse Brauck-

mann).

L'espèce «b» serait plus thermophile que la précédente et semble la remplacer

dans le Midi de la France, plus particulièrement dans le Sud-Est, à partir de Va-

lence ainsi qu'en Bretagne. Son aire de répartition se superpose très bien aux

zones climatiques dans lesquelles le nombre moyen annuel de jours de gelée est

inférieur à cinquante. Elle se retrouve en Yougoslavie, en Sardaigne et ce qui

peut paraître plus surprenant, nous avons reçu une récolte du Danemark. Elle

sera nommée Sreccherinum meridiochraceum nov. sp.

Species eadem est ac Steccherinum ochraceum sed thermophila et hac inter-

sterilis.

Holotypus : sur Quercus ilex (branche au sol), Amourdedieu, St Peray,

Ardéche, leg. J. Boidin, 25-09-83, no LY-AD 4463.

Récoltes de Steccherinum meridiochraceum.

— 4670-PL : Grignan, Dróme, sur Quercus ilex, 19.03.64 (Boidin).

— 4686-PL : Six-Fours, Var, sur Quercus ilex, 01.04.64 (Boidin).

— 7137-PL : Fréjus, Var, sur branchette au sol, 19.04.73 (Boidin).

— 3677-AD : Prés d’Uzés, Gard, sur Quercus, 26.05.79 (David),

— 3875-AD : Petit Lubéron, Vaucluse, sur Pinus, 18.12.79 (David).

— 3877-AD : Massif des Cèdres, Ventoux, Drôme, sur Cedrus, 19.12.79 (David).

— 4382-AD : Grasse, Alpes-Maritimes, sur feuillu, 05.12.82 (David).

4463-AD : Amourdedieu, vers St. Peray, Ardèche, sur Quercus ilex, 25.09.83

(Boidin).

_ 4475-AD : La Richardais, Ille-et-Vilaine, sur Sarothamnus, 07.01.83 (Cannac).

— 4487-AD: Mont Ventoux, Dréme, sur Cedrus, 14.10.83 (David).

— 4493-AD : La Richardais, Ille-et-Vilaine, 27.07.83 (Cannac).

4576-AD : Tourtousse, Ardéche, sur Quercus ilex, 14.10.84 (Boidin).

— 4583-AD : Lieu-dit Le Boin, commune de St Eloy-les-Tuileries, Corrèze,

sur Sambucus nigra, 08.08.84 (Bordes).

— 4644-AD : Forét de Burgos, Sardaigne, sur Quercus, 11.85 (David).

79-82-MT : Plitvice, Yougoslavie, sur Fagus, 22.07.82 (Tortic).

— 95.82.MT : Plitvice, Youglosavie, sur Fagus, 24.10.82 (Tortic).

— 14882-MT : Forét vierge de Krokar, Yougoslavie, sur Fagus, 26.08.82 (Tortic).

— 897-GB : Jylland, Djursland, Danemark, sur Fagus, 12.09.83 (Hallenberg).

L'espèce «e» est beaucoup plus rare que les deux précédentes et est répartie

de ci de là, un peu partout en Europe. Elle sera nommée Steccherinum pseudo-

chraceum nov. sp.

Species eadem est ac Steccherinum ochraceum sed hac intersterilis.

Holotypus : sur Eleagnus pungens, Sauveterre de Béarn, Pyrénées-Atlan-

tiques, leg. G. Gilles, 23-01-1983, n° LY-AD 4405.

Source : MNHN, Paris

98 J. SALIBA et A. DAVID

Récoltes de Steccherinum pseudochraceum.

~ 4398-AD : Lucerne, Suisse, sur Fagus, 22.11.82 (Kranzlin).

~ 4405-AD : Sauveterre de Béarn, Pyrénées-Atlantiques, sur Eleagnus, 23.01.83

(Gilles).

— 4408-AD : Tartas, Landes, sur Acer platanoides, 01.02.83 (Gilles).

—4442-AD : Grand Grammont, Haute-Vienne, sur Sarothamnus scoparius,

23.09.83 (David).

~ 4523-AD : Goldach, Suisse, sur Fagus, 26.11.83 (Jaquenoud).

— 4571-AD : Près de Trieste, Italie, sur feuillu, 02.10.84 (Govi).

— 1047-GB : Iasi, Roumanie, 14.10.83 (Hallenberg et Toma).

— 2099-HGB : Pfungstadter, BDR, sur Alnus, 11.02.84 (Grosse Brauckmann).

Étant donné l'impossibilité de distinguer morphologiquement ces trois espè-

ces, nous donnerons à l'ensemble le statut d’ultraspecies, en accord avec les

Propositions de J. BOIDIN (1986) et l'appellerons donc Steccherimum ultraspe-

cies ochraceum. Les confrontations ont été faites a partir de 2 monospermes

de chaque récolte : un — ou un + correspond donc à l'observation de 4 confron-

tations; seule exception, les confrontations entre les Steccherinum n° 4420

(St. ochraceum) et 4463 (St. meridiochraceum) ont été faites à partir de dix

monospermes de chaque récolte, Nous avons effectué 632 confrontations

(158 x 4) et n'en présentons ici qu'une partie. Nous pouvon cependant affirmer

que nous n'avons jamais observé la moindre intercompatibilité, même partielle

entre ces trois espèces jumelles sympatriques.

St. ochraceum 3660 AD (I et III) St. ochraceum 3660 AD (1 et III)

St. ochraceum St. meridiochraceum

3716 AD $ 3677 AD -

3734 AD + 3875 AD

4274 AD + 4382 AD -

4379 AD. t 4463 AD -

4380 AD. EG 4475 AD -

4391 AD "m 4487 AD -

4393 AD + 4493 AD -

4402 AD de 4686 AD -

4407 AD re 79-82 T -

4409 AD + F 95.82T -

4411 AD TE 148.82 T =

4412 AD TUE ——— -—————.

4413 AD Fa St. pseudochraceum

4417 AD $ 4405 AD -

4420 AD fi 4408 AD -

4421 AD + 4442 AD =

4476 AD HAE

4479 AD check;

4480 AD + EF

4495 AD a WE

5819 PL FOR

19-83 T +

Résultats des confrontations entre Steccherinum ochraceum, Steccherinum meridiochra-

ceum et Steccherinum pseudochraceum. (F ; fructifications).

Source : MNHN, Paris

LE GENRE STECCHERINUM 99

St. meridiochraceum 3677 AD (Let Ill) St. pseudochraceum 4405 AD (l et I1)

3875 AD i 4398 AD F

4686 PL + 4408 AD +

4382 AD da 4442 AD jj

4463 AD as 4523 AD +

79-82 T SE 4571 AD na

95-82 T as is. 1047 GB +

148-82 T a ke 2099 GB +

4475 AD +

4487 AD ETF

Résultats de confrontations entre différentes récoltes de Steccherinum meridiochraceum

(tableau de gauche) et Steccherinum pseudochraceum (tableau de droite). (F : fructifi-

cations).

L'étude du mycélium en culture de St. ochraceum a déjà été entreprise par

BOIDIN (1958). Elle reste valable pour les deux autres espèces jumelles dont le

mycélium présente les mêmes caractéristiques. Cependant St. meridiochraceum

se reconnaîtrait à la présence d’hyphes irrégulières, ramifićes, souvent monili-

formes, de nombreuses vésicules sphériques terminales, de 6 à 10 um de dia-

mètre, à parois minces ou irrégulièrement épaissies et dans ce cas congophiles,

de nombreuses hyphes gaînées de cristaux (observations sur les cultures mycé-

liennes des St. meridiochraceum n° 3677 AD et 95-82 PL) et d'hyphes généra-

trices pouvant avoir des parois trés épaissies.

La polarité et le comportement nucléaire ont été recherchés. Steccherinum

ochraceum, St. meridiochraceum et St. pseudochraceum sont tétrapolaires et

ont un comportement nucléaire normal.

STECCHERINUM BOURDOTII NOV. SP.

Synonyme : Mycoleptodon dichroum (Pers.) sensu Bourdot et Galzin, Hymé-

nomyc. France : 440 (1928); illustration récente in GROSSE-BRAUCKMANN

(1986, p. 368).

Hydnum dichroum fut décrit par PERSOON en 1825 à partir de matériel

français envoyé par DELASTRE sous le nom d'Hydnum rubiginosum. Trois ans

plus tard FRIES (1828) nomme Hydnum pudorinum une espéce envoyée

également de France par DELASTRE. Pour MAAS GEESTERANUS(1974),

il ne fait aucun doute que ces espéces sont identiques et qu'elles correspondent

à Steccherinum ochraceum dont elles possédent le méme type de spores ellip-

soïdes. Par contre en 1928, BOURDOT & GALZIN décrivent sous le nom de

Mycoleptodon dichroum Pers. une espèce à «spores obovales élargies 4-6,5 x

3,5-4 um», forme et taille contestées par MAAS GEESTERANUS (1974) qui

pense que ces spores pourraient bien être des levures ou appartenir à des champi-

gnons parasites. Malheureusement, il n'existe plus à Paris, dans l'herbier de

BOURDOT, d'exsiccata de Mycoleptodon dichroum. Par contre nous avons fait

de nombreuses récoltes de Steccherinum à spores nettement subglobuleuses, trés

Source : MNHN, Paris

100 J. SALIBA et A. DAVID

différentes de celles de Steccherinum ochraceum. Malgré les excellentes observa-

tions de MAAS GEESTERANUS (1974) et de BANKER (1912), nous avons

voulu observer à nouveau les exsiccata de PERSOON (L.) et de FRIES (UPS).

— Hydnum dichroum Pers. (Herbier L.) :cet exsiccata est accompagné d'une

étiquette portant les annotations suivantes écrites à la plume, de la main de

Delastre «Hydnum rubiginosum Dre/ Herbier de Vienne/ sur tronc carié de

chêne, dans les fûtaies». Trois spécimens sont collés sur une feuille de papier;

deux sont résupinés, le troisième formé de petis basidiomes flabelliformes, rétré-

cis en arrière, au point d'attache. MAAS GEESTERANUS en a donné une des-

cription précise (1974, p. 531) mentionnant notamment des spores largement

ellipsoïdes de 3,6-3,8 x 2-2,4 um, spores que nous avons observées.

— Hydnum pudorinum Fr. (Herbier UPS.) : trois basidiomes collés sur une

feuille de papier, tous résupinés, Une étiquette porte les annotations suivantes :

«Hydnum rubiginosum Dre. 1823 - dichroum Pers. Mycol. Eur. sect. 2a add

Page 213». Au dessus de cette étiquette sont écrits au crayon et d'une autre

écriture, les mots suivants «Hydnum pudorinum».

Nous avons observé ces basidiomes et y avons trouvé des spores ellipsoïdes,

identiques à celles de Steccherinum ochraceum. Notre conclusion est identique

à celle des auteurs précédemment cités. St. dichroum Pers. et St. pudorinum

Fries correspondent bien à Sf. ochraceum. L'espéce à spores subglobuleuses

devait donc être dénommée. En fait les confrontations réalisées entre mycéliums

monospermes de toutes nos récoltes (24) permettent de distinguer deux groupes

totalement interstériles correspondant donc à deux espèces biologiques dis-

tinctes; les différences morphologiques entre ces espèces sont minimes.

Premier groupe (21 récoltes) : spécimens souvent étalés-réfléchis, dimidiés,

conchoïdes, contexte duplex, spores subglobuleuses. Cette espèce correspond

parfaitement au Steccherinum dichroum sensu Bourdot et Galzin. Nous la nom-

merons Steccherinum bourdotii nov. sp.

Description des carpophores de Steccherinum bourdotii.

Fructificatio annua, effuso-reflexa vel sessilis. Pilei saepe conchoidei. Super-

ficies superia alba ad cremeam vel griseam, hirsuta vel strigosa, zonata; superfi-

cies inferia hydnacea aculei salmoneo-cremea ad incarnato-cremeam.

Species Steccherinum ochraceo affinis, sed differt sporis subglobosis.

Holotypus : sur base d'Ulmus mort debout, aérodrome, Anse, Villefranche,

Rhone, leg. A. David et J. Boidin, 29-08-1979, no LY-AD 3747.

Carpophores facilement détachables, résupinés, étalé-réfléchis ou souvent à

petits chapeaux conchoïdes de 1-1,5 cm de largeur, largement attachés au sup-

port ou au contraire rétrécis en un pseudostipe, séparés ou concrescents. Face

stérile des chapeaux blanchatre, tomenteuse, hirsute, à stries concentriques et à

marge régulière ou festonnée. Aiguillons nombreux, grêles, assez longs (2 à

2,5 mm), plus petits vers la marge, subulés, parfois bifides, hirsutes sur toute

leur longueur, crème aurore à crème incarnat, contexte de 3 à 5 mm d'épais-

Source : MNHN. Paris

LE GENRE STECCHERINUM 101

seur souvent bicolore avec une zone inférieure concolore aux aiguillons et une

face supérieure légèrement plus claire ou plus foncée mais de texture souvent

plus lâche, pseudocystides nombreuses à paroi épaissie, jusqu'à 3 um, entourées

à leur extrémité d'un manchon de cristaux de 45-100 jim de longueur, réparties

sur toute la longueur des aiguillons ainsi qu'entre eux, plus ou moins émer-

geantes et visibles à la loupe.

Système hyphal dimitique : hyphes génératrices peu nombreuses, 2-3 um de

diamètre, régulièrement bouclées, hyphes squelettiques très nombreuses, x 4-

5 um de diamètre, peu ramifiées, Ces hyphes entremélées et sans orientation

précise dans le contexte sont parallèles entre elles dans la trame des aiguillons.

Basides subclaviformes, 12-15 x 4-5 um, ä quatre stérigmates; spores subglo-

buleuses, (3)3,5-4,5(5) x 4,5-5,5 (6) um.

Habitat : sur feuillus, Robinia pseudacacia, Alnus, Carpinus, Quercus, Ulmus,

une récolte seulement sur conifére, Pinus.

Récoltes de Steccherinum bourdotii.

— 4954-PL : Croix de Signy, Rhône, sur Pinus, 12.10.64 (David).

- 6562-PL : Bourg Argental, Loire, sur Alnus, 11.70 (Delaigue).

— 10257-PL : Belley, Ain, 01.11.83 (Abbé Bozonnet).

- 3747-AD : Anse, Rhône, sur Ulmus mort, 29.08.79 (Boidin et David).

— 4156-AD : Forêt de Krakovo, près de Kostanjevica à 60 km de Zagreb, Yougo-

slavie, sur Carpinus, 04.10.81 (David et Tortic).

— 4267-AD : Belley, Ain, sur feuillu, 10.81 (Abbé Bozonnet).

—4268-AD : Belley, Ain, sur feuillu, 10.81 (Abbé Bozonnet).

— 4269-AD : Belley, Ain, sur feuillu, 10.81 (Abbé Bozonnet).

— 4272-AD : Francheville le Bas, Rhône, sur piquet de Robinia pseudacacia, 10.

01. 82 (Dequatre).

— 4400-AD : St Bernard, Ain, sur Robinia pseudacacia, 12.12.82 (Boidin).

— 4401-AD : Mions, Rhône, sur Carpinus, 12.12.82 (Moiroud).

— 4404-AD : Sauveterre de Béarn, Pyrénées-Atlantiques, sur Acer campestris,

23.01.83 (Gilles).

— 4432-AD : San Miguel de Tucuman, Argentine, 09.06.83 (Rajchenberg).

— 4494-AD : Forét de Valbonne, Gard, sur Quercus, 23.08.83 (Cannac).

4572-AD : près de Brisighella, Appennine Tosco Romagnolo, Italie, sur feuillu

(Noyer ?), 02.10.84 (Govi).

4579-AD : Benfeld, Bas-Rhin, sur Carpinus, 15.10.84 (Marti).

— 531-R : Dessau, DDR, sur Quercus, 30.01.82 (Miller et Ritter).

— 1029-GB : Bristrita, Nasaud, Roumanie, 10.12.83 (Hallenberg).

—2096-HGB : Hessen, Oberrheinebene Pfunstadter Moor, BDR, sur Alnus

glutinosa, 11.02.84 (Grosse Braukmann).

-2097-HGB : Hessen, Oberrheinebene Pfunstadter Moor, BDR, sur Alnus

glutinosa, 11.02.84 (Grosse Braukmann).

—2098-HGB : Hessen, Oberrheinebene Pfunstadter Moor, BDR, sur Alnus

glutinosa, 11.02.84 (Grosse Braukmann).

Source : MNHN, Paris

102 J. SALIBA et A. DAVID

Etuce du mycélium en culture.

Les observations ci-dessous sont résumées dans le travail de BOIDIN &

LANQUETIN (1984, p. 203) sous le nom de Steccherinum dichroum, observa-

tions faites sur les récoltes 4954-PL, 6562-PL, 10257-PL et 4156-AD (Steccheri-

num bourdotii).

— Spores et germinations : les spores uninucléées germent en 4-7 jours et

donnent naissance à des articles uninucléés.

— Sexualité : recherchée sur la récolte 4156-AD, l'espèce est tétrapolaire :

Ai A 16 AyBa 8-9

Ai Bo 257 AB, 3440

— Polysperme :

- croissance moyenne à lente (boite de 9 cm de diamétre remplie en un laps

de temps variant de 4 à 6 semaines).

-aspect : marge submergée arborescente. Croissance du mycélium en profon-

deur selon trois ou quatre faisceaux principaux byssoïdes, rayonnant à partir de

l'implant. Culture d’aspect glabre, cireux avec des reliefs irréguliers correspon-

dants aux faisceaux de mycélium profond parfois soulignés en surface par un

léger feutrage de mycélium aérien. Dans les cultures âgées de plus de 6 semaines

et exposées à la lumière, apparition de petites plages circulaires cotonneuses

blanches puis brique clair qui donnent naissance à des aiguillons à hyménium

fertile. Milieu de culture et mycélium légèrement teintés de rose; présence de

petites taches rouges orangées correspondant à des amas de cristaux. Odeur

nulle, dessous inchangé avant 6 semaines, devenant entièrement rose brunätre

avec l’âge.

- microscopie (marge) : hyphes génératrices régulières, 1,5-3 um, à paroi

mince et à boucles constantes contenant de nombreux corpuscules lipidiques;

très rares fibres : ces dernières, par contre, sont très nombreuses dans les plages

cotonneuses. Les pigments observés dans les cultures de Steccherinum bourdotii

ont été étudiés par N. ARPIN & J. FAVRE-BONVIN; les résultats doivent être

publiés prochainement. Nous en résumerons ici l'essentiel.

Deux types de pigments ont été isolés :

-un pigment orange, la phlébiarubrone connue jusqu'à présent dans les cul-

tures mycéliennes de Phlebia strigosozonata = Punctularia strigosozonata,

Basidiomycètes-Corticiaceae (Mc MORRIS & ANCHEL, 1963).

-un pigment rouge pourpre, l'hydroxy-4”-phlébiarubrone découvert récem-

ment dans les cultures mycéliennes de Punctularia atropurpurascens, Basidiomy-

cétes-Corticiaceae (ANKE & al., 1984).

Toutes les observations faites ci-dessus sont valables pour l'espéce récoltée

sur Sarothamnus et à spores plus petites. La seule différence réside dans la vi-

tesse de croissance qui est de 30-35 mm en 6 semaines pour cette espéce au lieu

de 90 mm pour Steccherinum bourdotii.

Source : MNHN. Paris

LE GENRE STECCHERINUM 103

Deuxième groupe : trois récoltes sur Sarothamnus et Ulex. Les différences

avec l'espèce précédente sont minimes et d’autres récoltes permettraient de

préciser nos observations : spécimens petits, toujours résupinés, subiculum plus

mince, jamais duplex, spores légèrement plus petites. Elle paraît correspondre

à une espèce récemment décrite du Brésil sous le nom de Steccherinum sub-

ochraceum Bononi et Hjorst. Des tests d’intercompatibilité entre mycéliums

haploides de récoltes des deux continents seraient souhaitables.

Récolte de cette espéce.

4472-AD : La Richardais, Ille-et-Vilaine, sur Ulex, 03.10.83 (Cannac).

~ 4473-AD : La Richardais, Ille-et-Vilaine, sur Ulex, 03.10.83 (Cannac).

— 4474-AD : La Richardais, Ille-et-Vilaine, sur Sarothamnus, 03.10.83 (Cannac).

STECCHERINUM RHOIS (SCHW.) BANKER.

Mem. Torrey Bot. Club 12 :12 (1906)

Basionyme : Hydnum rhois in Schw., Schriften Naturf. Ges. Leipzig 1 :1

(1822); Fries, Elench. Fung. 1 :134 (1828).

Steccherinum rhois est une espéce dont l'identité est contestée : elle est

soit ignorée de la plupart des mycologues, soit mise en synonymie avec St.

ochraceum. Elle s'en distingue cependant par un certain nombre de caractéres

et les tests négatifs d'intercomptabilité avec les trois espéces regroupées sous le

nom d'ultra-species Steccherinum ochraceum confirment qu'elle correspond bien

à un taxon autonome.

Description des carpophores.

Carpophores de petite taille, dimidiés, flabelliformes, fixés au support par une

région rétrécie formant parfois un pseudostipe. Surface supérieure tomenteuse à

hirsute, blanchátre à grisátre, parcourue par trois à quatre sillons concentriques

dans lesquels le tomentum est plus abaissé et feutré. Marge relativement aiguë et

enroulée sur les spécimens secs. Face fertile à aiguillons cylindriques, de 1-2 mm

de longueur, pulvérulents. Contexte duplex blanchâtre avec une zone supérieure

cotonneuse lâche, séparée de la zone contiguë aux aiguillons par une fine ligne

plus foncée, souvent brune et cornée.

Système hyphal dimitique; le tomentum est formé en majorité d’hyphes

squelettiques très peu ramifiées, aux parois de 1 mm d'épaisseur, disposées

obliquement et même perpendiculairement à la surface du chapeau; très rares

hyphes génératrices, bouclées et à parois fines. Ces hyphes deviennent beaucoup

plus nombreuses dans le contexte ainsi que dans la trame où elles sont disposées

avec les hyphes squelettiques parallèlement à l'axe des aiguillons.

Basides claviformes à quatre stérigmates, pseudocystides à partie apicale

incrustée sur une longueur variant de 7 à 65 lim, assez rares et peu émergentes.

Spores ellipsoides, à paroi lisse, hyaline, 3-4 x 1,8-2,5 um.

Source : MNHN, Paris

104 J. SALIBA et A. DAVID

Figure 2 : Répartition de w St.bourdotii, O St. rhois, W St. robustius.

Habitat : sur feuillus, Fagus, Quercus, Fraxinus.

Recoltes de Steccherinum rhois.

— 3467-PL : Jouéou, Haute-Garonne, sur tronc écorcé, 21.09.59 (Boidin).

— 6708-PL : Louisiane, U.S.A., 08.71 (David).

— 10245-PL : Loubieng, Pyrénées-Atlantiques, sur Fagus, 20.10.83 (Vivant).

— 4620-AD : Primorsk, U.R.S.S. Extr. Orient, sur Quercus mongolica, 18.07.85

(Parmasto n°106808).

— 4621-AD : Primorsk, U.R.S.S. Extr. Orient, sur Fraxinus mandschuria, 23.07.

85 (Parmasto n9 106847).

L'étude morphologique du type de St. rhois confirme nos observations et

notre décision de considérer en tant qu'espéce ce groupe de champignons.

Source : MNHN, Paris

LE GENRE STECCHERINUM 105

Remarques : cette espèce présente les caractéristiques microscopiques de St.

ochraceum mais elle s'en distingue notamment par la morphologie externe : port

flabelliforme, surface supérieure trés hispide, contexte nettement duplex en

coupe avec la présence presque constante d'une ligne brune séparant le contexte

du tomentum. Cette espéce n'a été récoltée, en France, que dans les Pyrénées

mais semble par ailleurs avoir une très large répartition dans l'hémisphére nord.

Étude du mycélium en culture.

— Spores et germinations : les spores uninucléées germent en 4-5 jours et

donnent naissance à des hyphes dont les articles sont uninucléés.

— Sexualité : faite sur la récolte 3467-PL.

AiBi 1 A2B2 24.78

A1Bz 3-10 A2By 5.6.9

— Polysperme :

- croissance rapide (boîte de 90 mm de diamètre couverte en 3 semaines).

-aspect marge : mycélium entièrement submergé, à vagues stries radiales vues

par transparence; surface céracée, brillante. Très fin bourrelet blanc cotonneux

autour de la culture, sur le pourtour de la boîte correspondant à la formation

de fructifications dès la quatrième semaine.

- microscopie : mycélium appliqué et submergé constitué d’hyphes généra-

trices peu ramifiées, 2-3 um et beaucoup plus rarement jusqu'à 5-7 um, conte-

nant des corpuscules lipidiques réfringents, à parois fines ou exceptionnellement

trés épaissies. Ces hyphes se retrouvent dans le mycélium périphérique coton-

neux, certaines d'entre elles possédent des extrémités légérement élargies et en-

tourées de cristaux; fibres trés rares devenant beaucoup plus nombreuses dans les

zones cotonneuses correspondant aux ébauches de fructifications.

- oxydases :

gaiacol 0,2 %0 +++++, cr.: 16à 20mm tyrosine —, 0

2%0 +++

acide gallique ++++ (+), cr. :0 paracrésol —, 0

- Comportement nucléaire : normal.

— Code : 2-3-8-32-36-43-54-60-61.

Les résultats des confrontations faites entre les mycéliums monospermes sont

résumés ci-dessous (F : fructification) : il est intéressant de remarquer qu'il y

a interfertilité entre représentants américain (Louisiane), francais et russes.

6708 PL 10245 PL 4620AD 4621 AD

Louisiane France URSS. URSS:

12 12 12 12

3467 PL + ae + e

France F F F F

LILILIV.

Source : MNHN, Paris

106 J. SALIBA et A. DAVID

STECCHERINUM ROBUSTIUS (J. ERIKSS. & LUND.) J. ERIKSS.

Symb. Bot. Upsal. 16 : 134 (1958)

Basionyme : Mycoleptodon robustior Erikss. & Lund., in Lundell S. & Nann-

feldt J.A.F., Fung. Exs. Suec. n0 2147, p. 26 (1953).

Cette espèce, sans doute confondue avec Steccherinum ochraceum, n'a,

jusqu’à ce jour, jamais été signalée en France. C'est pour cette raison que nous

en donnons une description.

Description des carpophores.

Carpophores résupinés, couvrant de grandes surfaces, jusqu'à plusieurs dm

de longueur.

Hyménium hydnoïde à aiguillons coniques ou subulés, rarement bi ou tri-

fides, parfois aplatis, de 1,9-2,5 (3) um de longueur, de couleur souvent vive,

brun orangé (5YR 6/8-7/8). Subiculum cotonneux, blanchâtre en section, de

0,1-3 mm d'épaisseur. Marge étroite, irrégulière, subfimbriée, signalée par ERIK-

SSON & al. (1984) comme jaunâtre sur matériel frais, se détachant du support

en séchant.

Système d'hyphes dimitiques; hyphes génératrices à paroi mince ou épaissie,

2,54 um, régulièrement bouclées et hyphes squelettiques très nombreuses.

Basides claviformes à quatre stérigmates; pseudocystides à apex fortement

incrusté sur une longueur de 20 à 80 um et jusqu'à 20 um de largeur. Spores

ellipsoïdes à paroi mince, non amyloïde, acyanophile, (4.2)4,6-4,8(5) x (2,1)

2,5-3 um.

Récoltes de Steccberinum robustius.

— 3484-PL : Luchon, Haute-Garonne, sur tronc de Fagus, 21.09.59 (Boidin).

—5784-PL : Massif de la Ste Baume, Var, sur Fagus, 11.02.67 (Boidin).

4225-AD : Belley, Ain, 18.10.81 (Abbé Bozonnet).

4507-AD : Massif de la Ste Baume, Var, sur Fagus, 01.11.83 (David).

— 4575-AD : Avignon, Vaucluse, 14.10.84 (Riousset).

— 4619-AD : Primorsk, U.R.S.S. Extr. Orient, sur Quercus mongolica, 24.07.85

(Parmasto n° 106862).

— 821-H : Uppsala , Suéde, sur Ulmus, 14.11.82 (Hallenberg).

Habitat : sur feuillus, principalement sur Fagus et Ulmus. ERIKSSON & al. le

signalent également sur Fraxinus et précisent «on humid and calcareous soil»,

particularité qui semble être confirmée pour nos récoltes.

Remarques : St. robustius se reconnait facilement sur le terrain à sa couleur

vive roux orangé, à ses aiguillons subulés, relativement longs. Microscopiquement

il se distingue de St. ochraceum par ses grosses cystides incrustées et ses spores

légérement plus grandes.

Étude du mycélium en culture.

Les résultats ci-dessous ont été résumés dans le travail de BOIDIN & LAN-

Source : MNHN, Paris

LE GENRE STECCHERINUM 107

QUETIN (1984). Nos observations ont été faites sur les récoltes LY-AD 4225

et LY-PL 5784.

— Spores et germinations : les spores uninucléées germent en 4-5 jours et

donnent naissance à des germinations dont les articles sont uninucléés.

— Sexualité : l'espèce s’est révélée tétrapolaire,

ALB, 13 A2 B2 2-6-7

A, B; 4-5-8-10 A3Bi 9

— Polysperme :

- croissance rapide à moyenne (boîte de 90 mm de diamètre couverte en 3

ou 4 semaines).

-aspect : mycélium aérien cotonneux laineux, blanchâtre puis très légèrement

beige rosé par endroits, recouvrant presque complètement le milieu de culture,

plus dense et élevé à la périphérie de la boîte; il subsiste cependant des plages

plus où moins étendues et irrégulières à mycélium appliqué, laissant voir le mi-

lieu par transparence. Dessous inchangé, légère odeur.

- microscopie : mycéliums aérien et appliqué sont formés d'hyphes généra-

trices régulières peu ramifiées contenant des corpuscules lipidiques réfringents;

dans le mycélium cotonneux présence possible de très rares fibres.

- oxydases :

gaiacol 0,2 Yoo ++++ tyrosine —, tr.

200 FFF

acide gallique +++ paracrésol —, 0

— Comportement nucléaire normal.

— Code : 2-3-8-32-36-43-44-54-60-61.

Steccherinum robustius est une espéce facile à reconnaitre sur le terrain à

ses fructifications brun rougeátre à brun orangé et à ses aiguillons relativement

longs (jusqu'à 3 mm). Microscopiquement elle se distingue de St. ochraceum

par ses cystides et ses spores légérement plus grandes. MAAS GEESTERANUS

(1974) avait synonymisé cette espèce avec St. laeticolor (Berk. et Curt. apud

Berk.) Bank. décrit d'Amérique. ERIKSSON & al. (1984), aprés une étude

comparative de St. robustius et St. laeticolor arrivent à la conclusion que ce sont

deux espéces différentes. Nous avons également étudié les types de ces deux

espéces et concluons comme les auteurs précédemment cités. Nous avons requ

de J. GINNS des cultures de St. laeticolor : l'aspect du mycélium polysperme est

trés différent de celui de St. robustius. Il n'est pas cotonneux élevé mais appli-

qué, aranéeux et surtout dégage une odeur plus forte et différente. Les confron-

tations effectuées entre monospermes de ces deux espèces sont entièrement

négatives et confirment ainsi les observations d'ERIKSSON & al. Par contre les

confrontations faites entre haplontes de St. robustius sont toutes positives.

Source : MNHN, Paris

108 J. SALIBA et A. DAVID

CLE DES STECCHERINUM EUROPEENS

1- hyphes génératrices sans boucles ............:........ eee ae

1- hyphes génératrices bouclées

Dn esrpaohbtes Wfacilemencedstachab lew duvsuppetiesigullonsscplidieidues

chamois, ocracés, spores 3-3,5 x 2-2,5 4m ....,...,.......,..,.,.

EAE LUN on d penes Asterkhärinumsübernale (Beck) Ryv. (1978)

2. carpophores non facilement détachables, aiguillons plus ou moins coniques,

crème, spores 3,5-4 x 2 um .. *Steccherinum cremeoalbum Hiortst. (1984)

3- carpophores petits, tendres, blanchâtres; hyménium à palettes; ressemble

à Irpex lacteus avec lequel il a été longtemps confondu ..............

.. Steccherinum oreophilum Linds. & Gilbn. (1977)

OE: plus gros, plus coriaces et à aiguillons le plus souvent subulés 4

4- carpophores résupinés, blanchátres, créme ou violacés, à rhizomorphes plus

ou moins développés .................. ’ MR PAT

4- carpophores résupinés, étalé-réfléchis à dimidiés, pas de thizomorphes .. 6

5- hyménium odontoide, violacé pale ou gris rougeátre, présence de rhizo-

morphes de même couleur; espèce commune .............4,..,.

- Steccherinum fimbriatum (Pers.:Fr.) J. Erikss. (1958)

5- Pre à aiguillons blancs ou créme puis jonquille-ocracé, bordure avec

rayons rhizoïdes courts; espèce rare ........,.,:.. SERRE ns

EBEN *Steccherinum litschaueri (Bourd. & Galz.) J. Erikss. (1958)

6- carpophores toujours résupinés, assez étendus: surface hyméniale souvent de

couleur foncée, rouge orangé, brun orangé, aiguillons subulés jusqu'à 3 mm

de longueur, spores 4,2-4,8 (5) x (2,2)2,5-3 um ...

Mee Steccherinum tae U. Erikss. & Lande ee (1958)

6- carpophores résupinés, étalé-réfléchis à subdimidiés, plus clairs, blanchâtre

üptenie d crémesocrace saumon kee e EN:

7- spores ovales élargies à subglobuleuses, espèce souvent dimidiée conchoïde .

- Steccherinum bourdotii nov. sp.

7= spores plus étroites, ellipsoïdes ....,:,...:.,,.,1,4,..,. 1, 8

8- carpophores le plus souvent dimidiós, petits, sessiles ou avec un pseudo-

stipe; présence constante entre la chair du chapeau et le tomentum supérieur

d'une fine ligne brune ........ Steccherinum rhois (Schw.) Bank (1906)

8- carpophores résupinés, étalé-réfléchis, sans ligne brune. ..............

ae Steccherinum ochraceum (Pers.:Fr.) S.F. Gray (1821)

REMERCIEMENTS

Nous remercions vivement les très nombreux mycologues français et étrangers pour l'en-

voi de matériel frais ou de mycéliums en culture. Sans eux, ce travail n'aurait pu étre

mené à bien. Monsieur I, Mouravieff a eu la gentillesse de nous traduire plusieurs pages de

l'ouvrage de Nikolajeva; qu'il trouve ici le témoignage de notre trés vive reconnaissance.

* non encore récolté en France.

Source : MNHN, Paris

LE GENRE STECCHERINUM 109

Monsieur le Professeur J. Boidin a bien voulu porter un jugement critique sur le contenu de

cet article; nous lui en sommes trés reconnaissant. Notre gratitude s'adresse en outre à Mes-

sieurs les Directeurs des mycothèques suivantes : The National Fungus collections (B.P.L.).

Crops research division, U.S. department of Agriculture, West Beltsville, Maryland (U.S.A.),

pour le prét de carpophores d’Hydnum rhois (Schw. Banker de l'herbier de Schweinitz,

Michener XI, sheet 14. The Farlow Herbarium (FH) and reference library of Harvard Univer.

sity, Cambridge, Massachussetts (U.S.A.), pour le prét de carpophores de Hydnum rhois

(Schw.) Banker n9 92 de l'herbier de Curtis. The Royal Botanic Garden (K), Kew (Angle-

terre), pour le prêt de matériel. The Herbarium of Uppsala University (UPS), Uppsala (Sué-

de), pour le pret de Mycoleptodon robustior, Herbier de Lundell, Fung. exs. suec. n9 2147.

(type matériel) et Hydnum pudorinum Fries (Hydnum rubiginosum Dre, 1823, Dichroum

Pers.).

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Source : MNHN, Paris

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SOME NUTRITIONAL REQUIREMENTS

OF SPOILAGE MOLDS OF PINEAPPLE FRUIT

by V.A. ADISA*

ABSTRACT — The utilization of 6 carbon and 7 nitrogen sources by 6 pineapple fruit

pathogens : Ceratocystis paradoxa, Rhizopus stolonifer, R. oryzae (soft rot spoilage molds),

Curvularia verruculosa, Penicillium claviforme and Aspergillus flavus (dry rot spoilage

molds) for their growth was determined. The dry rot molds only grew well on glucose and

sucrose while the soft rot molds substantially utilized all the carbon sources. All the molds

grew well on casein hydrolysate. The 2 inorganic nitrogen sources did not support the

growth of the molds except P. claviforme. All the organic nitrogen sources supported good

growth of C. paradoxa and C, verruculosa.

RÉSUMÉ — L'utilisation de 6 sources de carbone et de 7 sources d'azote a été déterminée

pour la croissance de 6 agents d'altération des fruits d'ananas : Ceratocystis paradoxa, Rhi-

zopus stolonifer, R. oryzae (responsables de la pourriture molle), Curvularia verruculosa,

Penicillium claviforme et Aspergillus flavus (responsables de la pourriture sèche). Seuls les

champignons de la pourriture sèche présentent une bonne croissance sur le glucose et le

saccharose, tandis que les champignons de la pourriture molle ont utilisé substantiellement

toutes les sources de carbone, Tous les champignons présentent une bonne croissance sur

Vhydrolysat de caséine. Les 2 sources d'azote inorganique n'ont aucune influence sur la

croissance des champignons, exception faite du P. claviforme. Toutes les sources d'azote

organique donnent une bonne croissance du C. paradoxa et du C. verruculosa.

KEY WORDS : fruit spoilage molds, nutritional requirements, pineapple.

INTRODUCTION

The pineapple fruit is used as a supplement in the Nigerian diet. The edible

portion, constituting approximately 60 % of the fruit (PURSEGLOVE, 1972)

is basically of carbohydrate (glucose 9700-12000 mg per 100 mg fruit) and

protein (3600-5000 mg per 100 g fruit) nature (DUCKWORTH, 1966). BHAR-

GAVA (1974) reported the utilization of sucrose after hydrolysis, maltose and

cellobiose through transglycosidation by 3 storage rot fungi : Fusarium solani

(Mattius) Saccardo, Botryodiplodia ananassae and Macrophomina phaseoli

(Maublanc) Ashby. The work of PATHAK (1971) showed that the mango fruit

* Department of Botany and Microbiology, University of Ibadan, Ibadan, Nigeria.

Source : MNHN, Paris

112 V.A. ADISA

stem-end rot mold, Diplodia natalensis Pole Evans, did not grow well in nitrogen

sources though the mold preferentially utilized cellulose and pectin for growth.

Four isolates of Botryodiplodia theobromae Pat. utilized polysaccharides inclu-

ding starch and dextrin (SRIVASTAVA & TANDON, 1969). TERUI & HA-

RADA (1970) reported that glucose, saccharose and pectin were the best sources

of carbon for the brown rot organism, Monilinia fructicola (Winter) Honey.

The preferential utilization of the carbon and nitrogen sources by these va-

rious fruit spoilage molds might have an influence on their ability to produce

the types of deterioration on their respective fruit as substrates. Carbon and

nitrogen compounds have an unparallel role in the nutritional physiology of

these fungi.

In an earlier study, it was shown that C. paradoxa produced spoilage of un-

ripe pineapple fruit when certain concentrations of carbon and nitrogen infu-

sions were applied on mature green fruits (ADISA, 1983). This mold causes

soft spoilage with the production of watery fluid. Therefore the nutritional

requirements of the dry and soft spoilage molds would be different. The 6

molds under investigation are soft and dry rot molds of the pineapple fruit.

The utilization of some carbon and nitrogen sources for growth by these molds

was investigated and the results obtained are presented in this paper.

MATERIAL AND METHODS

The fungi used — Ceratocystis paradoxa (Dade) C. Moreau (IMI 223309),

Rhizopus stolonifer (Ehrenb. ex Fr.) Lind. (IMI 223284), R. oryzae Went &

Prinsen Geerligs (IMI 223286), soft rot molds; Curvularia verruculosa Tandon

& Bilgrami (IMI 223307), Penicillium claviforme Bainer (IMI 223298) and Asper-

gillus flavus Link ex Fr. (IMI 223288), dry rot molds — were reported as spoi-

lage molds of pineapple fruits in Nigeria (ADISA & FAJOLA, 1982).

The effects of carbon and nitrogen sources on the growth of the fungi were

investigated. The carbon sources used include D-glucose, sucrose, dextrin, starch

(soluble potato), carboxymethylcellulose (Na salt; CMC) and pectin (apple

grade 250). The nitrogen sources used were : DL-aspartic acid, L-asparagine, L-

lysine, DL-glutamic acid, casein hydrolysate, ammonium sulphate and sodium

nitrate.

The basal medium for these growth studies contained : D-glucose, 5000 mg;

MgSOq.7H2 0, 750 mg; distilled water, 1000 ml (pH 6.0). All salts were «Ana-

lar» grade (BDH Laboratories). This medium was stabilized with citric-acid-

phosphate buffers before autoclaving at 121°C for 15 min. (for carbon sources)

and 10 min. (for nitrogen sources). 25 ml of each medium was distributed into

250 ml flasks and the pH adjusted to 7.0 before autoclaving. For the effects

of carbon and nitrogen sources requirements on mycelial production by fungi,

D glucose and the nitrogen source in the basal medium were respectively repla-

ced by each of the carbon and nitrogen sources used to give 0.8 g carbon/l (OSO,

1974) and 0.485 g nitrogen/l (HASIJA & AGARWAL, 1978) except for starch,

Source : MNHN, Paris

NUTRITIONAL REQUIREMENTS OF MOLDS 113

dextrin, pectin and CMC which were added to give 20 g/l of basal and casein

hydrolysate to give 5 g/l.

For inoculum, the fungi were cultivated on 2 % malt extract agar for 3 days.

A 5 mm diameter of a fungus was inoculated in each flask and incubation was

done at 25°C for 5 days without agitation. Inoculated basal medium served as

control. The mycelium produced was determined by the dry weight method.

RESULTS

Glucose and sucrose generally supported the growth of all the fungi with C.

verruculosa and P. claviforme producing the highest mycelia on them respecti-

vely (Table 1). Though starch and dextrin substantially gave good growth for

all fungi, carboxymethylcellulose and pectin were not well utilized by A. flavus,

P. claviforme and C. verruculosa. But R. stolonifer, R. oryzae and C. paradoxa

grew well on the two polysaccharides (Table 1).

Quantitative production of mycelium (mg) by rot pathogens within specified pH ranges

Carbon m

source. us

c 3 e 5 x 6

D-glucose | 128.0+1.4" 5.8 | 94,0:0.8 6.0 | 78.441.6 5.8 .5 |130.121.1 5.6 | 68.0¢1.1 5.6

Sucrose 1 6.0 /103.81.3 6.0 | 73.901.0 7.0 8 |138.8:0.6 5.5 | 61.2:0.5 5.8

Dextrin 6 6.0 | 85.120.6 7.3 | 83.312 6.0 .3 | 50.80,7 6.0} 54.091.5 5.3

Starch 3 5.7 | 66.721.0 7.0] 70.041.0 6.5 .6| 41.6306 6.8 | 47.6:1.7 6.8

cnc" B4.61.5 6,0 | 63.7:0.9. 6,1 | 76.1:0.5 6.0 «0 | 19.420.5 6,0 | 29.641.3 5.0

Pectin | 96.7:1.9 5.5 | 67.921.2 7.2] 66.541-4 6.5 .0 | 23.0:1.3 6.0 | 22.120.6 5.7

a-f = dry weight mycelium in mg/25m) of medium of rot pathogens (minus control values);

1-6 = pH of filtrates after experiment; * = standard error; ** = Na salt of carboxymethyl cellulose.

Table 1 — Growth of 6 pineapple fruit rot pathogens in liquid media containing 6 carbon

sources, after 5 days incubation at 25°C (Data are means of 5 replicates).

Tableau 1 — Croissance de 6 agents pathogènes de la pourriture de l'ananas, sur milieux li-

quides contenant 6 sources de carbone, aprés 5 jours d'incubation à 25°C (Moyennes de

5 répétitions).

Inorganic nitrogen sources did not give good growth for all fungi, however,

they all recorded highest growth on casein hydrolysate (Table 2). C. paradoxa

grew well on L-asparagine and L-glutamic acid. The Rhizopus spp. recorded

some appreciable growth on L-lysine. DL-aspartic acid, L-asparagine, L-lysine

and L-glutamic acid supported good growth of C. verruculosa. Except in casein

hydrolysate, P. claviforme produced the highest mycelium in ammonium sul-

phate and sodium nitrate. A. flavus grew well only in DL-glutamic acid. The pH

of the filtrates after the experiments ranged between 5.0 and 7.3 (for carbon

sources) and 5.7 and 8.1 (for nitrogen sources). The production of high quantity

of mycelia occurred both at low and high pH values.

Source : MNHN, Paris

114 V.A. ADISA

pH ranges.

Nitrogen #

source paradise stoto

a 2 b a 4 e 5 t 6

are 49,5:0.9" 6.6 | 22.040.8 67.504 6.9 6.5 6 741

L-asparagine 6.3 | 28.640.4 49.61.59 5.8 7.0 3 6.9

L-lysine 6.5 | 49,351.7 CRAN 5.7 6.4 1 6.7

L-glutamic 2 a T

sut 1.2 42.040,3. 6.8 6.8 2 6.0

casein "

Gem ae LISE 7.5 23 | 2.98.0 T8 | 3.9-1.8. 5,9 | 86.3:1.3. 7.6 Sinn

Amon un

RE ass 81 7.5 | 18.720.6 7.9 | 90,021.17. | 52.311.1 7.6 8.0

Sodium $

ans 2.3 23 ni 7 Gala 74 5 68

a-f = dry weight mycelium in mg/25m1 of medium of rot pathogens (minus contro} values)

6 = pH of filtrates after experinent; * = standard error.

Table 2 — Growth of 6 pineapple fruit rot pathogens in liquid media containing 7 nitrogen

sources, after 5 days incubation at 25°C (Data are means of 5 replicates),

Tableau 2 — Croissance de 6 agents pathogènes de la pourriture de l'ananas, sur milieux

liquides contenant 7 sources d'azote, aprés 5 jours d'incubation à 25°C (Moyennes de

5 répétitions)

DISCUSSION

The present study has indicated which of the carbon and nitrogen sources

used are suitable for growth of the 6 pineapple fruit molds. Protein and glucose

are known to be of high occurrence in the edible portion of the pineapple fruit

(DUCKWORTH, 1966). All the organisms were able to grow and utilize the glu-

cose and sucrose satisfactorily. Glucose was found to support good growth of

Aspergillus niger (HASIJA & WOLF, 1969; SINGH & TANDON, 1971) while

Botryodiplodia theobromae grew well on some monosaccharides and oligo-

saccharides (AHMED & HUQ, 1973). Both fungi are common fruit spoilage

molds.

C. verruculosa, a dry rot mold of the pineapple fruit (ADISA & FAJOLA,

1982), utilized starch and dextrin quite satisfactorily during the present investi-

gation. The other dry rot molds — P. claviforme and A. flavus — did not grow

well on the two polysaccharides. On the other hand, C. paradoxa, R. oryzae and

R. stolonifer grew well on all the carbon sources. They produce fruit spoilage of pi-

neapple fruit with watery consistency (ADISA & FAJOLA, 1982). PATHAK (1971)

reported good growth of a soft rot mold, Diplodia natalensis on starch, pectin

and cellulose. R. stolonifer satisfactorily utilized pectin and cellulose sources

(SPALDING, 1963). This observable difference in the preferential assimilation

of carbon sources by these 2 groups (dry and soft molds) of spoilage organisms

may indicate that those that produce dry deterioration may produce less com-

plex enzymes for the spoilage or degradation of the food substances in pineapple

fruit. The utilization of the more complex polysaccharides and the organic ni-

trogen sources by soft rot organisms certainly indicates the ability of the orga-

Source : MNHN. Paris

NUTRITIONAL REQUIREMENTS OF MOLDS 115

nisms to rely on more complex enzymes to degrade these substrates.

It is perhaps the ability of these fungi to grow on such complex substrates

that makes them fast spoilage organisms, producing highly extensive biodete-

rioration of pineapple fruits. The fruits contain considerable quantity of pectin

and cellulose materials. ADISA & FAJOLA (1982) observed that the effects of

the spoilage on the fruits by the molds produced fermented fruits and the spoi-

lage is accompanied by offensive odour. The production of aroma and flavour

compounds by mould species has been reported by some workers, The forma-

tion of alcohols, esters, benzene derivatives, terpenes and specific metabolites

by certain fungi as well as aroma characteristics of various species of fungi in

culture have been discussed (LATRASSE & al., 1985). This odour might there-

fore be due to the degradative products produced from the breakdown of the

nitrogen and carbon sources present in the pineapple fruits by the metabolites of

the molds.

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comosus) in Nigeria, Fitopatol, Bras. 7 : 97-103.

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DÉGRADATION PAR DES CHAMPIGNONS LIGNIVORES

DE LA PAROI CELLULAIRE DE PIN

TRAITÉ À DES DOSES SUB-LÉTALES

DE PRODUIT DE PRÉSERVATION CHLORÉ

par Danièle DIROL*

RESUME — Des cubes d'aubier de Pin sylvestre traités à des doses sub-létales par un pro-

duit de préservation chloré ont été exposés pendant 8 et 12 semaines à des cultures de Co-

niophora puteana et de Trametes versicolor. La confrontation des champignons avec le bois

traité a été observée en microscopie optique et électronique à balayage. La dose la plus

faible appliquée entraîne rapidement l'inactivation de l'agent de pourriture cubique dont le

développement et l'action destructrice ont été constatés importants sur le bois traité uni-

quement avec le solvant. Bien qu'il s'agisse de bois résineux exposé à Trametes versicolor, il

faut comme sur le hêtre des doses très importantes de produit pour protéger le bois contre

ce champignon. La formation de cristaux dans les éléments du plan ligneux, indépendants

des formations fongiques pour les deux champignons mais plutôt issus du produit lui-même,

pose le probléme de leur influence sur les hyphes du champignon qui dans le cas de Tra-

metes versicolor continuent leur action de destruction.

SUMMARY - Cubic samples of scots pine sapwood treated with sub-lethal concentrations of

a chlorated preservative were exposed during 8 and 12 weeks to culture of Coniophora

puteana and Trametes versicolor. The confrontation of fungi with treated wood was obser-

ved in light and scanning electron microscopy. The smallest amount applied inactivated

cubic rot fungi whose development and decay action were very pronounced in wood only

treated with solvent. Similarly to beech exposed to Trametes versicolor, for soft woods, it

is also necessary to apply large amounts of preservative to obtain an effect. Crystalline

formations observed in two cases are not always due to the fungus but rather to the preser-

vative itself; they stress the problem of their influence in front of the hyphae of fungi. In

the case of Trametes versicolor, it goes on its destructive action.

MOTS CLÉS ; Trametes versicolor, Coniophora puteana, aubier de pin sylvestre, produit de

préservation chloré, doses sub-létales, formations cristallines.

INTRODUCTION

La colonisation et la phase active d'altération du bois par des champignons

lignivores ont été abondamment étudiées (WILCOX, 1970; LIESE, 1970; DI-

ROL, 1976, 1978; RUEL & al., 1981; HIGHLEY & MURMANIS, 1984) simul-

* Centre Technique du Bois et de l'Ameublement, 10, Avenue de St Mandé, F-75012 Paris.

Source : MNHN, Paris

118 D. DIROL

tanément aux progrés de la préservation permettant aux essences sensibles d'ac-

quérir une durabilité conférée vis-à-vis de ces organismes.

La protection apportée aux bois par les produits de préservation est dans

l'ensemble satisfaisante de par l'efficacité des matiéres actives utilisées et les

moyens de traitements mis en œuvre. Toutefois, traiter un bois contre une éven-

tuelle attaque fongique n'est pas une opération simple car le matériau est trés

diversifié tant au point de vue des éléments cellulaires que des constituants de

la paroi elle-même. La matière active fongicide doit pouvoir les pénétrer et le

traitement de certaines essences réfractaires comme l'épicéa soulève des diffi-

cultés.

De plus, un traitement fongicide vise des organismes microscopiques capables

de se répandre dans tout le plan ligneux, pour lesquels, la plupart du temps,

une barrière de cellules traitées ne suffit pas à arrêter la progression à l'intérieur

de la pièce de bois.

Les possibilités qu'offre actuellement la microscopie électronique pour l'é-

tude de la préservation du bois; techniques histo-chimiques de coloration, d'ex-

traction, d'analyses par micro-sonde adaptée à la microscopie ont permis ces

vingt dernières années d'étudier les voies de pénétration et de fixation des ma-

tiéres actives des produits commercialisés (WILCOX & al., 1974; ZICHERMAN,

1975; PARAMESWARAN & LIESE, 1982).

Il est indispensable de connaître comment diffusent les produits dans le bois

afin d'améliorer leur répartition. Si les moyens de fixation ont permis une bonne

observation de l'ultrastructure, si l'analyse des produits par rayons X est tout à

fait possible, les résultats obtenus sont souvent trés difficiles à interpréter et la

relation produit-attaque reste encore très incertaine. C'est pourquoi, l'idéal

serait, par des observations qualitatives, de pouvoir constater une corrélation

entre le produit appliqué à des doses inférieures au seuil d'efficacité connu et

l'attaque de la paroi ligneuse par le champignon. L'efficacité du produit pourrait

alors être appréciée ainsi que sa répartition au sein du plan ligneux et même de la

cellule. C'est ce que nous nous proposons d'observer avec un produit de préser-

vation chloré commercialisé appliqué à différentes concentrations dont certaines

sont reconnues insuffisantes à la suite des essais effectués selon la Norme Euro-

péenne EN-113 (NF X 41-552).

Il faut remarquer que la majeure partie des travaux réalisés dans ce domaine a

porté tout particulièrement sur les sels (cuivre-chrome-arsenic ou étain). Leur

étude est beaucoup plus aisée que celle du pentachlorophénol pour lequel le

chlore pose des problèmes nombreux tels que la sublimation.

MATÉRIEL ET MÉTHODE

Des cubes d’aubier de pin sylvestre de 1,5 cm de côté, orientés de manière

identique, provenant d’une méme latte (les valeurs de textures sont sensiblement

les mémes, entre 25 et 30 %) ont été traités sous vide selon les directives de la

Norme Européenne EN-113 avec le produit de préservation dilué dans le ben-

Source : MNHN. Paris

DÉGRADATION DE L'AUBIER DE PIN SYLVESTRE 119

zéne aux concentrations de 0 - 20 - 30 et 50 litres par métre cube de bois. Ce

produit de préservation est une formulation commerciale à base de pentachloro-

phénol (PCP) qui comporte, outre cette matiére active, des adjuvants de fixa-

tion : polymères synthétiques (résines). La quantité de PCP appliquée est en réa-

lité de 1-1,5 et 2,5 kg par métre cube de bois. Une série de témoins sans aucun

traitement a été également prévue. Deux types de pourriture sont étudiés avec

Coniophora puteana (Schum. : Fr.) Karst. provoquant une pourriture cubique

et Trametes versicolor (L. : Fr.) Pilat agent de pourriture fibreuse blanche plus

connu pour attaquer les bois feuillus comme le hétre (DIROL, 1976). Ces deux

champignons sont utilisés dans les essais normalisés et leur seuil d'efficacité se

situe aux environs de 401/m° pour C. puteana sur le pin et est supérieur à

200 I/m? pour T. versicolor sur le hêtre.

Deux périodes d'exposition sur le milieu classique malt agar ont été choisies :

8 et 12 semaines avec 10 échantillons pour chaque champignon et chaque con-

centration : 2 sont destinés aux observations en microscopie optique, 2 aux

observations en microscopie électronique à balayage et 6 pour le calcul de la

perte de masse donnant quantitativement le taux de disparition des constituants

de la paroi cellulaire.

RÉSULTATS DE L'ALTÉRATION DU BOIS DANS SA MASSE

Les valeurs moyennes des pertes de masse obtenues avec les cubes servant de

contrôle d'attaque sont données dans le tableau 1 :

r 1 El

Concentrations | CONIOPHORA PUTEANA TRAMETES VERSICOLOR

ER 8 semaines |12 semaines|8 semaines |12 semaines

Ø = témoins 51 45 9,5 | 15,6

| Benzène pur 48 59 8,4 17,5

s 1/m3 de bois 1,9 3,2 6,2 11,9

30 1/m3 de bois 0,6 1,0 6,0 10,3

50 1/m3 de bois 0,0 11 3,9 7,4

Tableau 1 — Résultats des pertes de masse obtenues sur les échantillons exposés aux cul-

tures (% de la masse séche initiale).

Table 1 — Results of weight losses obtained on samples exposed to cultures (% of the initial

dry weight)

Les résultats obtenus amènent les remarques suivantes :

Source : MNHN, Paris

120 D. DIROL

Source : MNHN. Paris

DÉGRADATION DE L'AUBIER DE PIN SYLVESTRE 121

— Les pertes de masse obtenues avec Coniophora puteana sont très impor-

tantes pour les témoins et le benzène : ce champignon est en général très viru-

lent et dans le cas présent d'autant plus que les éprouvettes sont de très petite

taille. Elles sont moins fortes avec Trametes versicolor réputé plus actif sur les

feuillus; il faut cependant constater qu'après 12 semaines elles ne sont pas né-

gligeables.

— Le rôle du benzène n'est pas le même après 8 ou 12 semaines dans les deux

cas, une stimulation du champignon (très nette pour C. puteana) aurait plutôt

lieu après la seconde période; ce phénomène a lieu d’ailleurs avec certains sol-

vants; c'est parfois le cas également avec le xylène, alors que le white spirit

aurait à lui seul un effet nocif sur le champignon (DIROL, 1986).

— Dès l'application de la première concentration du produit chloré les pertes

de masse sont trés faibles pour C. puteana. Par contre, pour T. versicolor, bien

que les pertes de masses des témoins soient moins importantes, les différentes

concentrations ne parviennent pas à protéger complètement le bois.

Les observations microscopiques des plans ligneux provenant des échantillons

vont permettre d'apprécier qualitativement le développement fongique dans

chacun des cas.

DEGRADATION DE L’AUBIER DE PIN SYLVESTRE

PAR CONIOPHORA PUTEANA

1 - Observation des éprouvettes témoins (aucun traitement)

Comme on peut s'y attendre avec les valeurs obtenues sur les pertes de masse,

les éléments du bois aprés 8 ou 12 semaines d'exposition sont considérablement

dégradés et l'observation à faible grossissement du plan ligneux montre les

fractures typiques de la pourriture cubique avec les fissures et craquelures selon

les trois plans du bois (Fig, A). Il va de soi que le bois est extrémement fragilisé.

Comme cela avait été observé lors de I’étude d’un autre champignon de pour-

riture cubique, Serpula lacrymans (DIROL, 1978), les fissures visibles à l'œil nu

ou à la loupe se retrouvent sur le plan microscopique; le départ irrégulier des

constituants de la paroi entraîne des tensions provoquant les fentes (Fig. B,

flèches), La microscopie électronique à balayage permet également d'observer

Fig. A - Fractures typiques de la pourriture cubique sur les témoins exposés 8 semaines à

Coniophora puteana (MEB). Fig. B — Formation de fentes transversales et de cavités

issues des hyphes dans le bois final attaqué par Coniophora puteana après 8 semaines

(MEB). Fig. C— Hyphe de Coniophora puteana présentant un cristal octaédrique (MEB).

Fig. A — Typical breaks of cubic rot on control samples exposed during 8 weeks to Conio-

phora puteana (SEM). Fig. B — Formation of transverse splits and cavities from hyphae

in late wood decayed by Coniophora puteana after 8 weeks (SEM). Fig. C — Coniophora

puteana hyphae showing an octahedral crystal (SEM).

Source : MNHN. Paris

D. DIROL

Source : MNHN, Paris

DÉGRADATION DE L'AUBIER DE PIN SYLVESTRE 123

la formation de cavités allongées (en «boutonnière») à partir de la couche S3,

vraisemblablement en profondeur dans la couche S; oà elles suivent l'orientation

des microfibrilles de cellulose. Elles n’apparaissent que dans le bois final dont la

couche Sa est riche en cellulose (les agents de pourriture cubique mettant à

profit ce constituant de la paroi cellulaire).

Les filaments mycéliens observés dans les fibres présentent sur leur trajet des

cristaux (Fig. C). Ceux-ci ont été observés par KAARIK (1978) et déjà NO-

BLES (1948) les décrivait comme étant octaédriques.

2 - Observations des éprouvettes uniquement traitées par le solvant (benzène)

Après 8 semaines d'exposition l'allure de la dégradation est sensiblement la

même que dans le bois non traité, les filaments sont nombreux, les ponctuations

déformées, les cavités déjà bien visibles. Après 12 semaines, celles-ci sont extré-

mement profondes (Fig. D).

3 - Observations de l'efficacité absolue du produit de préservation

— Traitement du bois à 20 l/m? : aprés 8 semaines d'exposition, le plan

ligneux est peu dégradé et les hyphes ne sont plus reconnaissables. Par contre,

on observe des cristaux nombreux rassemblés, en général, sur les ponctuations

aréolées. Le fond des parois du bois initial est encore attaqué puisque la S3,

sans doute fragilisée, a disparu avec la coupe laissant apparaitre trés souvent

l'orientation typique de la S5. Dans le bois final aucune dégradation n'est visible

avec un temps d'exposition plus long, l'attaque paraît plus profonde mais elle

est localisée sur le bord des échantillons facilement accessible en culture par le

mycelium; les couches profondes ne sont pas atteintes. Sur la Fig. E, on peut

observer cet arrêt de l'attaque aprés les 4 ou 5 premières cellules. Les cavités

«en boutonniére» se retrouvent dans le bois final.

— Traitement du bois à 30 I/m? : aprés 8 semaines d'exposition, de rares

filaments accompagnés de cavités très peu nombreuses sont encore visibles au

bord des coupes. A 12 semaines, l'attaque n'a pas eu lieu pour autant et l'on

constate encore dans les cellules du parenchyme des rayons des cristaux, plus

Fig. D — Formation de cavités allongées et profondes dans le bois final après 12 semaines

d'exposition à Coniophora puteana des échantillons traités au benzène (MEB). Fig. E —

Arrêt de V'altération par Coniophora puteana aprés les 4 premières rangées de cellules des

échantillons traités à 20 l/m° (MO). Fig. F — A la concentration de 30 I/m?, mélange

dans un rayon des cristaux issus de Coniophora puteana et d’autres formations cristal-

lines de nature inconnue (MEB).

Fig. D — Formation of elongated and deep cavities in late wood after 12 weeks of exposure

to Coniophora puteana of samples treated with benzene (SEM). Fig. E — Stop of decay

by Coniophora puteana after the 4 first cells of samples treated to 20 1/m° (LM). Fig. F

With the 30 l/m? concentration, mixing in a ray of fungic crystals and other crystal-

line unknown formations (SEM).

Source : MNHN, Paris

124 D. DIROL

Source : MNHN. Paris

DÉGRADATION DE L'AUBIER DE PIN SYLVESTRE 125

particulièrement dans les ponctuations simples très larges chez le pin sylvestre

(Fig. F).

Ces cristaux octaédriques, typiques de Coniophora puteana sont intimement

liés à d'autres formations d'aspect cristallin, elles n'ont jamais été observées

normalement dans les rayons du pin sylvestre et l'on peut supposer qu'elles

proviennent du produit de traitement qui, appliqué à une certaine dose, se

déposerait. En ce qui concerne le comportement du champignon, la présence

de ces formations cristallines ne semble pas l'empêcher de produire ses propres

cristaux (Fig. F).

À ce stade la protection apportée au bois semble effective, en relation avec

les taux de pertes de masse obtenus. Cette concentration de produit appliquée

peut étre considérée, pour la taille des échantillons utilisés et la durée de l'expo-

sition, comme correspondant au seuil d'efficacité reconnu (40 l/m?) selon la

norme EN-113 sur des éprouvettes de taille plus importante aprés 16 semaines

d'exposition avec ce type de produit sur C. puteana. Il faut donc s'attendre

dans les conditions de cet essai a une protection compléte avec une concentra-

tion de 50 I/m?.

— Traitement du bois à 50 l/m? : avec les deux périodes d'exposition, on ne

constate aucune manifestation fongique. Comme à la concentration précédente,

des formations cristallines probablement issues du produit chloré apparaissent

en particulier dans les cellules des rayons. Elles n'ont pas du tout le méme aspect

que précédemment (Fig. G).

DÉGRADATION DE L'AUBIER DE PIN SYLVESTRE

PAR TRAMETES VERSICOLOR

1 - Observation des éprouvettes témoin (aucun traitement)

Les hyphes de Trametes versicolor ont envahi uniformément après 8 semaines

d'exposition les éléments du plan ligneux du pin sylvestre. Les rayons sont très

colonisés et les trachéides transversales qui les bordent sont moins dentées et

montrent des perforations anormales. Dans les fibres de bois initial et de bois

Fig

G — Formations cristallines provenant de Coniophora puteana dans les ponctuations

simples d'un rayon aprés traitement de 50 l/m? (MEB). Fig. H — Portion de fibre de bois

initial très perforée sur un fond de paroi délaminée. Traitement au benzéne et exposition

8 semaines à Trametes versicolor (MEB). Fig. I — Abondance des perforations dûes À

Trametes versicolor dans les fibres de bois initial des échantillons traités à 20 l/m? ex-

posés 8 semaines (MEB).

Fig. G — Crystalline formations which are not issued from Coniophora puteana in the ray

pits after treatment with 50 l/m° (SEM). Fig. H — Part of early wood with a lot of per-

forations : the cell-wall is laminated. Treatment only with benzene and exposure 8 weeks

to Trametes versicolor (SEM). Fig. 1 — Numerous bore-holes due to Trametes versicolor

in early wood fibers of samples treated with 20 l/m? , exposed during 8 weeks (SEM).

Source : MNHN. Paris

D. DIROL

126

Source : MNHN, Paris

DÉGRADATION DE L'AUBIER DE PIN SYLVESTRE 127

final, deux types de mycélium cohabitent : l'un est três touffu et présente des

filaments extrêmement fins, l'autre a des hyphes plus larges. Les filaments larges

sont à l'origine des trous observés dans la paroi, mais il semblerait que les fila-

ments fins soient capables de perforer également la paroi cellulaire par émission

d'ectoenzymes à l'apex. En effet, nous verrons par la suite que différents dia-

métres de trous sont fréquemment observés. Certaines préparations montrent

également un fond de paroi «imprimé» par le filament mycélien, qui semble

ainsi avoir émis ses enzymes par toute sa surface créant «des rigoles» dans la $3;

ceci a lieu à la fois dans le bois initial et le bois final. Les formes d'altération

déjà observées sur le hétre se retrouvent dans la paroi du pin sous forme de

trous (subdivisés» c'est-à-dire dans lesquels il ne reste que des «morceaux» de

parois (DIROL, 1976). Les «trous» (bore-holes) sont observés en abondance à

tous les niveaux dans la cellule, en microscopie optique, les ponctuations aréo-

lées semblent «évidées»; l'emplacement du torus paraît très flou.

À ce stade, on peut remarquer par endroits une attaque moins importante

du bois final, sa plus grande richesse en cellulose (82) en serait la cause. Cepen-

dant, après 12 semaines, les deux types de bois sont également atteint ce qui

semble logique car Trametes versicolor, bien qu'étant un agent de pourriture

fibreuse capable de dégrader la lignine, peut dégrader simultanément la cellulose

(DIROL, 1976).

Après cette période la paroi est très fragilisée du fait du départ des consti-

tuants depuis le lumen (DIROL, 1976), les ponctuations trés dégradées devien-

nent jointives et forment des lignes de rupture dans la fibre; au niveau des

rayons, les trachéides transversales et le parenchyme sont trés désorganisés et

certains éléments sont à l'état d'ébauche ou de «moignons» dans les champs

de croisement.

2 - Observation des éprouvettes uniquement traitées par le solvant (benzéne)

L'action du solvant seul n’entraîne pas de modifications profondes si ce n'est

une uniformisation de l'altération : trous de différents diamétres mieux répartis

sur un fond de paroi délaminée (Fig. H). Aprés 12 semaines, le bois est fragilisé

et des fissures apparaissent.

Fig. J — Délamination irrégulière des parois aprés 12 semaines d'attaque par Trametes versi-

color malgré un traitement à 20 l/m? (MEB). ( MP. brane primaire; S et S2 :

couches de la membrane secondaire). Fig. K — Bois traité à 50 l/m?; les hyphes et les

perforations de Trametes versicolor sont encore nombreuses à cóté de formations cris-

tallines (MEB). Fig. L — Formation cristallines sur le fond des parois dans le bois traité

à 50 l/m° et exposé 8 semaines à Trametes versicolor (MEB).

Fig. J — Irregular delamination of cell-walls after 12 weeks exposure to Trametes versicolor

in spite of a 20 I/m? treatment (SEM). (MP : primary wall; S; and So : layers of the se-

condary wall). Fig. K — Treated wood with 50 I/m3; hyphae and bore-holes due to Tra-

metes versicolor are yet numerous inside crystalline formations (SEM). Fig. L — Crystal-

line formations on cell walls of 50 l/m? treated wood exposed during 8 weeks to Trame-

tes versicolor (SEM).

Source : MNHN, Paris

128 D. DIROL

3 - Observation de la régression d'attaque aprés traitement par le produit

de préservation chloré

— Traitement du bois à 20 l/m? : les échantillons observés aprés 8 semaines

d'exposition montrent par endroits d'importantes plages altérées, les hyphes sont

encore présentes et perforent la paroi sous-jacente, avec parfois une intensité

plus grande que chez les témoins, donnant à penser à un effet stimulateur

(Fig. 1).

Pourtant, des plages entières de bois envahi et dégradé voisinent avec des

plages exemptes de toute attaque et où aucune hyphe n'est présente. De même,

une importante différence d’attaque est observable entre le bois initial et le bois

final oà peu d'hyphes sont visibles. Toutefois, malgré la présence de plages

intactes dans le plan ligneux, les fibres ou amas de fibres attaquées le sont de

manière conséquente.

Après une exposition de 12 semaines, le phénomène constaté précédemment

est accentué, les filaments mycéliens sont toujours concentrés dans certaines

fibres.

La microscopie électronique à balayage montre que le bois final est également

dégradé puisque différentes couches ont disparu irrégulièrement (Fig. J). Ainsi,

sur le pin, les effets de ce champignon sont les mêmes que ceux observés sur

le hêtre (DIROL, 1976), c'est-à-dire un amincissement de la paroi ligneuse de-

puis la lumière de la cellule.

— Traitement du bois à 30 I/m? : l'examen du plan ligneux montre encore

aprés 8 semaines d'exposition, là présence de nombreux filaments mycéliens

groupés dans certaines fibres parfois sous forme de «touffes». Dans l'ensemble

les perforations sont moins nombreuses mais, comme pour la concentration

précédente, se trouvent groupées en amas. Certaines fibres, par contre, paraissent

indemnes. Aprés une exposition de 3 mois, on ne constate pas d'altération plus

importante; des plages de «trous» sont encore vi bles sur un fond de paroi

abimé.

— Traitement du bois à 50 l/m? : cette dose plus importante de produit

entraîne, après 8 semaines, une légère diminution du nombre de perforations.

Cependant, on les trouve encore associées aux hyphes (Fig. K). A cette concen-

tration apparaissent des formations cristallines sous forme d’amas et de baton-

nets rappelant celles observées précédemment avec Coniophora puteana (Fig. L

et M). Ce champignon ne formant pas de cristaux habituellement, ces formations

ne seraient pas d'origine fongique mais seraient plutót issues du produit de pré-

servation appliqué. Cependant, comme on peut le voir sur la Fig. M, elles ne

semblent pas entraver l'action de destruction du champignon puisqu'elles joux-

tent une hyphe et deux perforations de nature fongique.

Le fait d'observer, dans le bois traité aux doses précédentes, des plages d'at-

taques et des zones intactes laisse supposer une diffusion trés irrégulière du

fongicide. Par contre, l'observation simultanée de l'hyphe du champignon, des

trous créós par son action enzymatique à proximité des cristaux d'origine

Source : MNHN, Paris

Fig. M

Hyphes créatrices de perforations et formations cristallines non fongiques dans le

bois traité à 501/m? exposé 8 semaines à Trametes versicolor (MEB). Fig. N — Hyphes

de Trametes versicolor dégénérescentes dans le bois traité à 501/m^ et exposé pendant.

12 semaines (MEB).

Fig. M — Hyphae making bore-holes and non fongic crystalline formations in 50 l/m? trea-

ted wood exposed to Trametes versicolor during 8 weeks (SEM). Fig. N — Degenerating

hyphae of Trametes versicolor in 501/m> treated wood exposed during 12 weeks (SEM).

Source : MNHN. Paris

130 D. DIROL

«chimique» donne à penser que T. versicolor offre une résistance à l'action du

produit. Celle-ci est peut-étre limitée car, aprés 12 semaines d'exposition, bien

qu'il y ait des plages trés attaquées et des fibres avec des hyphes en grande quan-

tité, certaines ont des filaments présentant des interruptions qu'une préparation

particuliére par point critique ne pourrait compenser. Il s'agit plutót d'une

dégénérescence, bien visible sur la Fig. N. Ces débris d'hyphes n'avaient pas été

observés aux concentrations précédentes.

DISCUSSION

Le fait important apparu aprés ces observations consiste en la présence à

partir d'une certaine dose de produit (30 l/m? avec Coniophora puteana et

50 l/m° avec Trametes versicolor) de formations cristallines d'aspect varié dans

les rayons et les fibres du bois. Ces formations ne semblent pas, pour T. versi-

color en particulier, géner l'action du champignon et le probléme de leur nature

chimique demande à étre étudié. Il n'est pas évident que les cristaux observés

soient constitués de pentachlorophénol, matiére active fongicide très efficace. A

partir d'une certaine concentration du produit (dont on sait qu'il est constitué

de pesticides et de fixateurs qui sont souvent des polyméres synthétiques ou

naturels à résines) il pourrait y avoir des formations particuliéres — résines par

exemple cristallisées ou bien mélange PCP-résine dans lequel le PCP englobé

dans le polymére n'aurait plus d'efficacité vis-à-vis du champignon. Cette der-

nière hypothèse reste à vérifier dans des bois traités à des doses élevées de pro-

duit pour lesquelles les solutions saturées trop riches déposeraient sans avoir

d'action fongicide. La résistance bien connue de T. versicolor aux doses pour-

tant létales pour les autres champignons de pourriture cubique pourrait donc

s'expliquer. Quoi qu'il en soit, l'observation au microscope électronique à ba-

layage d'une goutte du produit de préservation chloré aprés séchage n'a pas du

tout révélé la formation de cristaux comparables puisqu'il s'agit plutót d'une

formation amorphe; ainsi la cristallisation n’a peut être lieu qu'à l'intérieur du

bois.

CONCLUSION

Le comportement des deux types de champignons étudiés par des observa-

tions microscopiques ne diffère en rien de celui constaté maintes fois avec les 4

champignons de la Norme EN-113 lors d'étude des seuils d'efficacité des pro-

duits de préservation à base de pentachlorophénol. Le champignon de pourriture

cubique constaté trés virulent sur du bois non traité devient rapidement «amoin-

dri» avec une faible concentration de produit; il faudrait des doses minimes pour

étudier une vraie confrontation produit. champignons. Il est certain que tout bois

traité à raison de 40 l/m? sera protégé efficacement contre les champignons

de pourriture cubique; c'est d'ailleurs ce qui est conseillé dans la pratique. En ce

qui concerne Trametes versicolor les concentrations étudiées dans le cas présent

Source : MNHN. Paris

DÉGRADATION DE L'AUBIER DE PIN SYLVESTRE 131

Sont tout à fait inefficace et une réelle confrontation n'a lieu qu'à des doses

supérieures à 50 l/m°. Cette remarque corrobore les résultats toujours sem-

blables, obtenus avec du hêtre, dans l'étude des seuils d'efficacité des produits

chlorés; le seuil est toujours très élevé, pratiquement égal à 250 l/m°.

Le problème de l'association hêtre - Trametes versicolor soulevé de nom-

breuses fois lors des résultats des essais de seuils, en particulier à l'échelle euro.

péenne, s'étend à l'association Pin sylvestre - Trametes versicolor. Dans le cas

présent on ne connaît pas les valeurs du seuil d'efficacité sur le pin mais d'aprés

cette étude, on peut supposer qu'elles sont également élevées. Le probléme ne

serait donc pas comme on le pensait fortement lié à l'essence de bois mais au

champignon lui-méme. Cependant, l'observation dans cette étude de formations

cristallines à partir de 501/m° dans les deux cas donne À penser que le compor-

tement même du produit de préservation au niveau de la paroi cellulaire peut

amener des changements dans la virulence du champignon. Il serait donc inté-

ressant de connaître la nature exacte des formations cristallines et leur fréquence

à partir d’une certaine concentration. Il semble en effet que le rôle du fongicide

ne soit pas négligeable car, en observant les pertes de masse obtenues sur les

échantillons témoins Trametes versicolor ne montre pas une virulence impor-

rante (10 7% à 8 semaines) par rapport à Coniophora puteana (51 %); et pourtant

il provoque toujours des dégradations de la paroi à 50 l/m? alors que C. puteana

a autant dire déjà disparu à 30 l/m°.

REMERCIEMENTS :

L'auteur remercie Françoise THOMASSIN pour sa collaboration technique (Microscopie

électronique à balayage).

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bois. Détermination du seuil de l'efficacité contre les champignons basidiomycètes

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ÉTUDE ONTOGÉNIQUE ET STRUCTURALE

DES PÉRITHÈCES DU DICTYOTRICHIELLA SEMIIMMERSA

CANDOUSSAU ET SULMONT

(PYRENOMYCETES, HERPOTRICHIELLACEAE)

par M.C. JANEX-FAVRE*

RESUME. — Les périthèces du Dictyotrichiella semiimmersa, Pyrénomycéte de position

systématique incertaine, présentent un développement de type ascoloculaire, mais avec des

particularités originales. Leur locule, classiquement entourée d’une garniture composée

d'une cloche sus-hyméniale et d'un ménisque sous-hyménial, est en effet garnie de filaments

rayonnants qui, bien qu'homologues de pseudo-paraphyses et de paraphyses, demeurent

courts au lieu de s'allonger pour former des filaments interascaux. Ces faits rappellent ceux

observés chez les Verrucariales. La notion de périphysoides (BARR, 1979) est discutée.

SUMMARY. — In Dictyotrichiella semiimmersa, whose systematic position is controversial,

perithecia follow the ascolocular pattern of development; they however display original

features. The perilocular layer is complete, both of its constituents parts (suprahymenial

bell and subhymenial disc) produce towards the centre of the locule radiate filaments which

remain short thus forming no true interascal pseudoparaphyses and paraphyses. Such

observations recall the case of Verrucariales. The concept of periphysoid (BARR, 1979)

is discussed.

MOTS CLÉS : périthèce, ascoloculaire, périphysoïde, Dictyotrichiella.

Le Dictyotrichiella semiimmersa Candoussau et Sulmont est un petit Pyréno-

mycéte lignicole, bien caractérisé par ses périthéces brun foncé ne dépassant pas

180 um de diamètre, hérissés de poils peu nombreux, ses asques oblongs bituni-

qués et ses ascospores gris olivacé fusiformes septées (3 à 5 septa transversaux,

1 à 2 septa longitudinaux dans les cellules médianes).

Créé par MUNK (1953) et alors monospécifique, le genre Dictyotrichiella

est inclus dans la famille des Herpotrichiellaceae, définie en même temps, à par-

tir de critères morphologiques (en particulier périthèces portant des poils épars,

ascospores bistre-olivâtre septées) et écologiques (sur bois pourri ou restes

d'autres Champignons). Six espèces ont été reconnues dans le genre Dictyo-

* Laboratoire de Cryptogamie, Université Pierre et Marie Curie - 9, Quai Saint-Bernard -

75252 Paris Cedex 05.

Source : MNHN. Paris

134 M.C. JANEX-FAVRE

trichiella, leur distinction étant également fondée sur des critères morpholo-

giques (dimensions et mode de cloisonnement des ascospores notamment) et

écologiques. Tout récemment, MÜLLER & al. (1987) rejettent le genre Dictyo-

trichiella, l'incluant dans le genre Capronia Sacc. dont l'acception est fortement

élargie.

La position systématique des Herpotrichiellaceae découle du mode d’organi-

sation de leurs périthéces et de leurs asques. En les décrivant, MUNK (1953,

puis 1957) les place parmi les Ascoloculaires du fait de l'absence de tissu inter-

ascalet de l'épaisseur de la paroi ascale. MULLER & von ARX (1962), puis

LUTTRELL (1973) rejettent cette famille des Herpotrichiellaceae et rattachent

aux Pleosporaceae les genres qui la composent. BARR conserve la famille mais

en la révisant, la place d'abord dans les Dothidéales (1972) puis dans les Chaeto-

thyriales (1976a, 1979); cet ordre, joint aux Verrucariales (lichénisées ou para-

sites de Lichens) forme la sous-classe des Loculoanoteromycetidae, Loculo-

ascomycétes caractérisés par la production dans leur ascocarpe périthécioide,

de «pseudoparaphyses latérales (= apicales) courtes», pour lesquelles est intro-

duit le terme de «périphysoïdes» (BARR, 1979). Du fait de l'hétérogénéité

apparente de ces «périphysoïdes» BARR, dans la classification proposée en

1983, supprime la sous-classe réunissant Chaetothyriales et Verrucariales et place

ces deux ordres auprès des Pléosporales dans la sous-classe des Loculoedapho-

mycetidae, Von ARX & MULLER (1975), ERIKSSON (1981 à 1984) puis

ERIKSSON & HAWKSWORTH, 1985, 1986a-b) retiennent également la famille

des Herpotrichiellaceae et l'incluent dans l'ordre, trés vaste, des Dothidéales;

dans la subdivision de cet ordre qu'ils proposent en 1987 (a-b), les Herpotrichiel-

laceae forment avec les Microtheliopsidaceae le sous-ordre provisoire des Herpo-

trichiellineae.

Afin de mieux apprécier la position systématique des Herpotrichiellaceae et

l'intérêt de leur rapprochement avec les Verrucariales, dont nous avons nous-

même étudié plusieurs représentants lichénisés (JANEX-FAVRE, 1970, 1975;

ROUX & al., 1986), il nous a paru intéressant d’en précisér les caractères onto-

géniques et structuraux.

L'étude du Dictyotrichiella semiimmersa, dont nous présentons ici les pre-

miers résultats, a été réalisée sur des échantillons provenant de deux récoltes

successives. La première, effectuée en 1971 par CANDOUSSAU & SULMONT

sur un tronc de peuplier coupé et dénudé, avait permis à ces auteurs la descrip-

tion de l'espèce (CANDOUSSAU & SULMONT, 1971); grace a leur obligeance,

des échantillons ont pu être prélevés, fixés et conservés dans le laboratoire du

Professeur Marius CHADEF AUD où il nous ont été confiés. La deuxième récolte

est due à notre amie Agnès PARGUEY, qui a retrouvé cette petite espèce en

Franche-Comté, en 1986, sur des troncs de chênes coupés et écorcés. Pour

l'étude du développement des périthèces, qui fait l’objet de cet article, ont été

utilisées : 1) des préparations par écrasement, colorées par le bleu Coton ou

l'encre stylographique, qui ont permis d'observer la formation des primordiums,

et 2) des coupes sériées, obtenues et traitées selon les méthodes classiques

(épaisseur : 5 um, coloration : hématoxyline-éosine) après fixation par le liquide

Source : MNHN, Paris

PERITHÈCES DU DICTYOTRICHIELLA 135

de WESTBROOK et inclusion dans la paraffine; ces coupes ont été nécessaires

pour analyser la structure interne du primordium et sa transformation en ébau-

che périthéciale, puis en périthéce.

RESULTATS

Les stades du développement périthécial

Avant toute description, il nous faut indiquer que la localisation des asco-

carpes était différente dans les deux récoltes du Dictyotrichiella semiimmersa :

localisation superficielle, sans pénétration du substrat, pour les échantillons pré-

levés sur troncs de chênes et localisation essentiellement intracellulaire pour ceux

récoltés sur bois de peuplier; dans ce dernier cas, le bois était à nu et donc plus

aisément pénétrable que le précédent, recouvert d'une écorce liégeuse.

1) Le primordium.

Le début de sa formation est indiqué par la présence, sur un filament mycé-

lien, en position intercalaire (Fig. 1, A) ou terminale (Fig. 1, B) de quelques

Fig. 1 — Le primordium, de type stromato-glomérulaire. A à I : stades successifs (voir le

texte). Echelle : 10 lim.

Fig. 1 — Primordium, of stromatic-glomerule structural type. A to I : successive stages (see

in text). Scale : 10 Um.

Source : MNHN. Paris

136 M.C. JANEX-FAVRE

cellules contigués dilatées, à paroi brune et cytoplasme dense. Certaines d'entre

elles se divisent, transversalement ou longitudinalement (Fig. 1, C et D); elles

peuvent également produire par une sorte de bourgeonnement des cellules

nouvelles qui, à leur tour, deviennent arrondies et brunes (Fig. 1, D, E et F).

Progressivement s'édifie ainsi un nodule saillant (Fig. 1, G), qui demeure en rela-

tion avec le mycélium et constitue un primordium de type stromato-gloméru-

laire (cf, PARGUEY-LEDUC, 1966-67). Celui-ci se complique et grossit (Fig. 1,

H), puis il devient globuleux et sa surface se régularise (Fig. 1, 1) : ses cellules

superficielles peuvent demeurer en rapport avec le mycélium originel ou porter

de courts filaments pluricellulaires libres, produits secondairement.

En coupe (Fig. 2), le primordium présente une structure paraplectenchyma-

teuse, les parois des cellules externes étant beaucoup plus épaisses et fortement

pigmentées que celles des cellules internes.

Fig. 2 à 4 — Le primordium et la jeune ébauche périthéciale. 2 : primordium intracellulaire;

3 et 4 : jeunes ébauches périthéciales développées superficiellement; différenciation pro-

gressive du carpocentre c, contenant des cellules ascogoniales ca et de la paroi périthé-

ciale pa. h : hyphe intracellulaire. Échelle : 10 Um.

Fig. 2 to 4 — Primordium and young perithecial bud. 2 : intracellular primordium; 3 and 4 :

superficial young perithecial buds with differentiating carpocenter c (ca : ascogonial

cells) and perithecial wall pa. h : intracellular hypha. Scale : 10 Hm.

2) L’ébauche périthéciale est caractérisée par la formation d’un carpocentre,

d’abord homogène, puis subdivisé en plusieurs parties distinctes.

— différenciation du carpocentre proprement dit :

La jeune ébauche périthéciale (Fig. 3 et 4) comprend tout d'abord une paroi

(pa) issue de la périphérie du primordium et un carpocentre (c) dérivant de ses

cellules internes et dans lequel s'individualisent progressivement des cellules

ascogoniales (ca), relativement grosses et à noyau distinct; autour de celles-ci,

Source : MNHN, Paris

PERITHÈCES DU DICTYOTRICHIELLA 137

les cellules carpocentrales externes tendent à se disposer en couches concen-

triques, notamment dans la moitié supérieure de l'ébauche (Fig. 4).

— différenciation de la garniture périloculaire :

La partie périphérique du carpocentre s'épaissit, surtout au sommet où les

cellules sont particulièrement chromophiles (Fig. 5). Ensuite, tandis qu'une ca-

vité (v) apparait au centre, autour des cellules ascogoniales (ca) (plus nombreuses

que précédemment), elle s'organise en une garniture périloculaire. Ce processus

commence dans la partie supérieure et se poursuit ensuite le long des flancs, en

direction de la base de l'ébauche. Ainsi, au stade représenté par la figure 6,

l'ébauche comporte une volumineuse cloche sus-hyméniale (cl) qui s'amincit

progressivement vers le bas, en s'appliquant sur les bords d’un ménisque sous-

hyménial encore mal individualisé, et porte des pseudo-paraphyses (q) disposées

radialement. Cette disposition n'est pas habituelle : en règle générale, rappelons-

le, la cloche sus-hyméniale ne se prolonge pas aussi loin latéralement et en consé-

quence elle ne produit que des filaments pendants à orientation verticale.

Fig. 5 et 6 — Ebauche périthéciale : formation de la cavité périthéciale v autour des cellules

ascogoniales ca et différenciation de la garniture périloculaire comportant la cloche sus-

hymeniale cl bien individualisée porteuse de pseudo-paraphyses q; h : hyphe intracellu-

laire; pa : paroi périthéciale, garnie de poils. Échelle : 10 Im.

Fig. 5 and 6 — Perithecial bud : formation of a perithecial locule v around ascogonial cells ca

and differentiation of a perilocular layer with suprahymenial bell cl producing pseudo-

paraphyses q;h : intracellular hypha; pa : perithecial hairy wall. Scale : 10 fim.

— différenciation de l'appareil ostiolaire :

L'ébauche périthéciale s'accroit en volume, en toutes directions mais plus

fortement dans le sens de la hauteur (Fig. 7 et 8). Le locule devient ainsi ellip-

Source : MNHN, Paris

138 M.C. JANEX-FAVRE

soïdale. Les cellules fertiles (f), dérivées des cellules ascogoniales, qui en occu-

pent le centre sont uni- ou plurinucléées; leurs interrelations ne sont pas déce-

lables sur les coupes. Les filaments radiaires garnissent le pourtour de la cavité; à

la base, le ménisque sous-hyménial n'est toujours pas nettement individualisé. La

Fig. 7 — Ébauche périthéciale : différenciation de l'appareil ostiolaire oi à partir du sommet

de la cloche sus-hyméniale cl. f: cellule fertile; pa: paroi périthéciale; q: pseudo-para-

physe. Échelle : 10 um.

Fig. 7 — Perithecial bud : the ostiolar apparatus oi differentiates from the top of suprahyme-

nial bell el. f : fertile cells; pa . perithecial hairy wall; q : pseudoparaphysis. Scale: 10 Hm.

Fig. 8 — Ébauche périthéciale : différenciation de l'appareil ostiolaire; stade identique à celui

représenté par la figure 7, mais l'ébauche, développée à l'intérieur du substrat, a une for-

me irrégulière et s'y ancre par un faisceau d’hy ‚Res h formant pivot. cl: cloche sus-hy-

méniale: f: cellules fertiles; oi: appareil ostiolaire; pa: paroi périthéciale; q: pseudo-

paraphyse. Échelle : 10 4m.

Fig. 8 — Perithecial bud with differentiating ostiolar apparatus; same stage as in figure 7, but

‘owing to its intracellular development the bud is irregularly shaped and anchored by an

hyphal strand h. cl : suprahymenial bell; f: fertile cells; oi : ostiolar apparatus; pa: perithe-

cial hairy wall; q : pseudoparaphysis. Scale . 10 Um.

Source : MNHN, Paris

PERITHÈCES DU DICTYOTRICHIELLA 139

Source : MNHN, Paris

140 M.C. JANEX-FAVRE

partie sommitale de la cloche sus-hyméniale (cl) formée d’un empilement de files

cellulaires fortement chromophiles, constitue l'ébauche de l'appareil ostiolaire

(oi) au centre duquel s'ouvrira l'ostiole.

La paroi périthéciale (pa) s'est épaissie; les couches cellulaires internes ont des

parois plus minces que les couches externes; la couche superficielle est en rela-

tion avec les filaments mycéliens et porte des poils, généralement unicellulaires,

à extrémité effilée en pointe et entiérement bruns; ceux-ci sont plus nombreux

et dressés autour de l'appareil ostiolaire.

L'ébauche périthéciale représentée par la figure 8, parvenue au même stade

que celle qui vient d'étre décrite, s'en distingue par son développement intracel-

lulaire et par sa relation bien visible à la base avec un faisceau d'hyphes mycé-

Fig. 9 — Ébauche périthéciale : le stade du dóme sporophytique composé de cellules fertiles

f disposées en files. cl: cloche sus-hyméniale productrice de pseudo-paraphyses q et de

l'appareil ostiolaire oi; me : ménisque sous-hyménial porteur de courts filaments radiaires

P- pa: paroi périthéciale. Échelle : 10 Um.

Fig. 9 — Perithecial bud : locule filled with sporophytic elements. cl: suprahymenial bell

producing pseudoparaphyses q and the ostiolar apparatus oi; me : subhymenial disc,

with short radiate filaments p. pa : perithecial wall. Scale : 10 Jim.

Source : MNHN. Paris

PERITHÈCES DU DICTYOTRICHIELLA 141

liennes qui, développé dans un rayon ligneux, constitue une sorte de pivot d’an-

crage dans le substrat. De plus, sa paroi est demeurée mince et peu différenciée à

l'intérieur du substrat, qui semble ainsi se substituer partiellement à la paroi dans

sa fonction de protection; seule la partie superficielle, comprenant les poils

péri-ostiolaires, est bien formée.

— le stade du dôme sporophytique :

Dans l'ébauche un peu plus avancée (Fig. 9), le changement essentiel concerne

les éléments fertiles (f) qui apparaissent alors disposés en un dóme régulier com-

posé de files de cellules uni- ou binucléées (et dans ce cas vraisemblablement di-

caryotiques) relativement distinctes, divergeant en éventail à partir de la base.

La garniture périloculaire est complètement différenciée : cloche sus-hymé-

niale (cl) formant l'esquisse de l'appareil ostiolaire (oi) et portant des pseudo-

Fig. 10 — Jeune périthéce : formation des premiers asques as et individualisation du canal

ostiolaire co et de ses périphyses pe. cl : cloche sus-hyméniale, avec pseudo-paraphyses q

disposées obliquement; me : ménisque sous-hyménial et ses filaments p; pa: paroi périthé-

ciale. Echelle : 10 Um.

Fig. 10 — Young perithecium : asci as are formed and the ostiolar channel co differentiates.

cl: suprahymenial bell with oblique pseudoparaphyses q; me : subhymenial disc with

filaments p; pa : perithecial wall. Scale : 10 fim.

Source : MNHN. Paris

142 M.C. JANEX-FAVRE

paraphyses (q) implantées sur le plafond et les flancs de la locule et ménisque

sous-hyménial (me); ce dernier, mince, est 4 son tour garni de filaments radiaires

courts (p) qui ne pénétrent pas dans le dôme sporophytique et doivent représen-

ter des paraphyses atypiques.

3) Le passage au stade adulte est indiqué essentiellement par deux faits :

poursuite de la différenciation de l'appareil ostiolaire et formation des premiers

asques (Fig. 10).

Fig. 11 — Jeune périthéce aprés affaissement de l'ensemble des éléments fertiles. as : asque

dl : cloche sus-hyméniale; co : canal ostiolaire; me

ments du ménisque; pa : paroi périthéciale; pe

Échelle : 10 Um.

: menisque sous-hymenial; p : fila-

: périphyse; q : pseudo-paraphyse.

Fig. 11 — Older perithecium, after collapsing of fertile parts. as : ascus; cl : suprahymenial

bell: co : ostiolar channel; me : sub hymenial disc; p : filament of the dise; pa : perithecial

wall; pe : periphysis: q : pseudoparaphysis. Scale : 10 Um.

Source : MNHN, Paris

PERITHÈCES DU DICTYOTRICHIELLA 143

Dans l'appareil ostiolaire, l'individualisation de périphyses (pe) implantées

sur les bords du canal ostiolaire (co) fait apparaître une lumière axiale. Autour,

le sommet de la paroi périthéciale (pa) forme une couronne de poils dressés

dont les extrémités sont bien individualisées.

Dans la cavité du jeune périthéce, le dóme sporophytique s'affaisse progres-

sivement (Fig. 10, puis 11). Des éléments en voie de disparition sont repérables

Fig. 12 — Périthéce adulte : ouverture de l'ostiole au sommet du canal ostiolaire co et matu-

ration des asques as, encore peu nombreux dans la cavité périthéciale v. pa : paroi péri-

théciale; pe : périphyse. Échelle : 10 Um.

Fig. 12 — Mature perithecium : ostiole opening at the end of the ostiolar channel co; matu-

ration ofa few asci as, in the locule v. pa : perithecial wall; pe : periphysis. Scale : 10 im.

Source : MNHN. Paris

144 M.C. JANEX-FAVRE

à la base, au contact des courtes paraphyses (p) portées par le ménisque sous-

hyménial (me). Au sommet sont formés les premiers asques (as).

L'allongement des asques vers le haut et l'élargissement concomitant du canal

ostiolaire (co) à partir de sa base, dans l'axe de la cloche sus-hyméniale (cl),

entraînent un changement d'orientation des pseudo-paraphyses (q) qui sont

entraînées vers le haut, pivotent et acquièrent ainsi une disposition oblique;

à partir de ce stade, il y a continuité entre elles et les périphyses du canal. Dans

le méme temps, les filaments latéraux s'effacent, les restes de la cloche sus-

hyméniale tendent à s'incorporer à la paroi périthéciale en formant sa couche

interne.

4) Le périthéce adulte.

ll est d'abord de forme ovoide (Fig. 12), sa partie supérieure étant plus

étroite que sa partie inférieure (sans former toutefois un col distinct); cette

derniére s'étend ensuite essentiellement en direction radiale (Fig. 13) : le péri-

théce présente alors une forme plus aplatie.

Fig. 13 — Périthéce adulte, à cavité v agrandie et asques as plus nombreux, la plupart ayant

déjà produit des ascospores asp septées. co : canal ostiolaire; pa : paroi périthéciale; pe :

periphyse. Échelle : 20 Um.

Fig. 13 — Mature perithecium with larger locule v and numerous asci as. asp : septate asco-

spores; co : ostiolar channel; pa : perithecial wall; pe : periphy '^. Scale : 20 Um.

Source : MNHN. Paris

PERITHÈCES DU DICTYOTRICHIELLA 145

La cavité (v) contient uniquement des asques (as), implantés à la base dans

une cupule sporophytique relativement mince; ils sont bituniqués et renferment,

à maturité, huit ascospores (asp) septées. Les premiers asques mûrs sont situés au

centre (Fig. 12); par la suite de jeunes asques se forment en tous points entre les

premiers, de sorte que la disposition finale est totalement désordonnée (Fig. 13).

En bordure de la cavité, les périphyses (pe) du canal ostiolaire (co) demeurent

seules distinctes. L'ostiole s'ouvre au sommet, entouré des poils péri-ostiolaires

dépendant de la paroi périthéciale externe; d'autres poils, de même nature, uni-

ou pauci-cellulaires se détachent de place en place des flancs du périthèce.

DISCUSSION

1) Le type ontogénique du Dictyotrichiella semiimmersa.

Le Dictyotrichiella semiimmersa présente un développement de type asco-

loculaire clairement caractérisé. Ses ascocarpes sont des pyrénosphères apostro-

miennes uniloculaires (= périthèces, sensu CHADEFAUD, 1960, 1982); elles

dérivent de primordiums stromato-glomérulaires comparables à ceux de certains

Leptosphaeria (PARGUEY-LEDUC, 1966-67).

L'originalité fondamentale de la structure périthéciale des Herpotrichiella-

ceae, que certaines observations antérieures avaient fait apparaître chez diverses

espéces (comme nous l'avons indiqué plus haut), se trouve confirmée et précisée

chez le Dictyotrichiella. Elle concerne l'évolution de la garniture périloculaire,

analysée ici de manière détaillée en suivant le développement de l'ébauche péri.

théciale; ce point appelle diverses remarques.

Formée, selon la règle, par la périphérie du carpocentre, la garniture périlo-

culaire du Dictyotrichiella semiimmersa se différencie progressivement du haut

vers le bas. Sur toute sa surface, elle produit des filaments radiaires, qui tous

demeurent courts et ne s'entremélent jamais avec les éléments fertiles (appareil

sporophytique, puis asques).

Les premiers filaments formés, sous le plafond de la locule, sont assimilables

à des pseudo-paraphyses (sensu CHADEFAUD, 1960; LUTTRELL, 1965;

PARGUEY-LEDUC, 1966-67); ils présentent en effet deux particularités fonda-

mentales des filaments loculaires de ce type; ils prennent naissance au sommet

de la locule, plus précisément dans la partie supérieure du carpocentre (sensu

CHADEFAUD, 1960, 1982) qui forme la cloche sus-hyméniale et leur croissance

est dirigée vers le bas. Ils ne possèdent toutefois pas tous les caractères des

pseudo-paraphyses typiques puisque : 1) ils demeurent courts, localisés au-

dessus des asques (alors qu'ils forment de longs filaments interascaux dans le

type Pleospora); 2) leur disposition verticale initiale laisse place, au cours de la

croissance du jeune ascocarpe, à une disposition oblique, leurs extrémités s'o-

rientant alors vers le canal ostiolaire comme celles des périphyses situées plus

haut, et 3) ils sont finalement laminés et ne sont plus distincts dans le périthéce

adulte. La ressemblance des pseudo-paraphyses du Dictyotrichiella semiimmersa,

au terme de leur développement, avec les périphyses du canal justifie l'utilisa-

Source : MNHN, Paris

146 M.C. JANEX-FAVRE

tion du terme «périphysoïdes» proposé par BARR (1979), mais il est clair

que, dans le cas étudié ici au moins, ces filaments, qui ont même origine que les

pseudo-paraphyses, n'en sont qu'une variante morphologique.

Après avoir produit ces périphysoïdes dans sa partie supérieure, la périlocule

du Dictyotrichiella semiimmersa continue, sans discontinuité, à se garnir de fila-

ments disposés le long de ses flancs (prolongement de la cloche sus-hyméniale)

puis finalement — mais de façon moins régulière — sur sa base (= ménisque sous-

hyménial portant des paraphyses atypiques).

Le systéme de filaments radiaires de la locule du Dictyotrichiella ainsi consti-

tué évoque le cas de divers Pyrénomycètes périsporiés, à périthèces pourvus

d'une symétrie radiale. Ainsi, chez les Eurotiales, un systéme de filaments cen-

tripétes est présent dans l’ébauche périthéciale, mais il diffère de celui du Dictyo-

trichiella d'une part parce qu'il forme un tissu nourricier et d'autre part parce

qu'il dérive de la paroi ascothéciale (le développement étant, dans ce cas, de type

ascohyménial). Chez d'autres Périsporiés, de type ascoloculaire, les «pseudo-

paraphyses», atypiques, sont disposées radialement comme les filaments du Dic-

tyotrichiella, par exemple chez le Preussia multispora (CHADEFAUD & al.,

1966) et le Lepidosphaeria nicotiae (PARGUEY-LEDUC, 1970), mais avec dans

chaque cas, des particularités propres. Chez le Preussia, les pseudo-paraphyses,

peu nombreuses, sont irrégulièrement dispersées sur tout le pourtour de la locule

et s'anastomosent en formant un plexus intraloculaire dans lequel sont dispersés

l'appareil sporophytique puis les asques. Chez le Lepidosphaeria, elles sont im-

plantées par touffes sous chacune des écailles constituant la paroi, demeurent

courtes et libres, puis dégénérent : la garniture périloculaire est ainsi discontinue,

scindée en multiples unités équivalentes entre elles.

Dans ces divers cas, l'analogie avec le Dictyotrichiella n'est que partielle. Elle

résulte vraisemblablement d'un phénomène de convergence; il ne nous paraît

pas possible de lui donner une application systématique ou une signification

phylogénétique.

2) Données comparatives relatives aux Chaetothyriales.

Pour l’ensemble des Chaetothyriales, les données relatives aux ascocarpes

sont fragmentaires; elles concernent surtout (outre les asques) la structure du

stroma ou de la paroi périthéciale, l'évolution du centre fertile étant générale-

ment négligée. Les documents les plus significatifs, du point de vue qui nous

intéresse ici, montrent que l'organisation des périthéces présente une certaine

homogénéité, marquée par la présence constante de périphysoides (sensu BARR,

1979); ils sont relatifs aux Herpotrichiellaceae et Metacapnodiaceae.

Mentionnons parmi les premières : l'Herpotrichiella setosa (BARR, 1959) et

PH. moravica (von ARX & MÜLLER, 1975), le Berlesiella nigerrima (BARR,

1979; von ARX & MULLER, 1975) et le B. fungicola (SAMUELS & MULLER,

1978), l'Herpotrichia prothelia (BARR, 1976b) et l'Acanthostigmella brevispina;

chez cette derniére, BARR & ROGERSON (1983) observent a la fois des péri-

physoides et des pseudo-paraphyses qui se développent entre les asques, leurs

Source : MNHN, Paris

PERITHÈCES DU DICTYOTRICHIELLA 147

extrémités demeurant libres le plus souvent, et deviennent déliquescentes à

maturité. Ce cas est très intéressant, mais malheureusement l’origine exacte des

deux types de filaments n’est pas précisée.

La famille des Metacapnodiaceae a été créée par HUGHES en 1972 pour

regrouper des genres précédemment inclus dans les Capnodiaceae et qui pos-

sédent en commun, outre certaines particularités morphologiques des hyphes et

des formes conidiennes, un stade parfait qui se rattache au type Pleospora,

avec «pseudo-paraphyses courtes» et asques bituniqués. Ce stade parfait avait été

décrit par CORLETT (1970), qui en avait suivi le développement chez le Meta-

capnodium juniperi, Le primordium est pseudo-parenchymateux, probablement

de type stromatoide. La locule périthéciale (portée par un coussinet stromatique

formé par la base du primordium) est dépourvue de filaments interascaux et

garnie de pseudo- paraphyses courtes qui pendent du plafond puis garnissent les

parois depuis l'ostiole jusqu'à la base (aucun filament n’est visible sous les élé-

ments fertiles). Pour CORLETT (1973) ce type de développement est une va-

riante du type Pleospora, tandis que REYNOLDS (1971, 1975), refusant d'ho-

mologuer les filaments stériles de la locule à des pseudo-paraphyses préfère le

rattacher au type Dothidea. Chez les autres Metacapnodiaceae (CORLETT & al.,

1973) : Metacapnodium sp. (= Limacinia fraserae), Ophiocapnocoma phloio-

philia et O. batistae, dépourvues de stroma, les pseudo-paraphyses, ramifices,

occupent la partie supérieure de la jeune locule avant d'étre lysées. Une autre

Capnodiacée s. L, le Strigopodia resinae présente un ascocarpe du méme type,

sans qu'il soit possible de la rattacher aux Metacapnodiaceae par ses autres

caractères

En dehors des Chaetothyriales, la présence de périphysoïdes (sensu BARR,

1979) a été signalée chez trois Mycosphaerella (Mycosphaerellaceae, Dothi-

deales) : le M. ascophylli (KOHLMEYER, 1968), le M. staticicola (KOHL-

MEYER & KOHLMEYER, 1979) et le M. apophlaeae (KOHLMEYER & DE-

MOULIN, 1981) et chez le Scirrhia acicola (Dothideaceae, Dothideales, LUT-

TRELL, 1973).

3) Le cas des Verrucariaceae.

La présence de périphysoides (sensu BARR, 1979) semble étre une constante

dans cette famille, du moins prise dans son acception stricte (sensu ZAHL-

BRUCKNER , 1907). De tels filaments sont en effet visibles chez les espèces

étudiées du point de vue ontogénique par DOPPELBAUR (1959 : genres Am-

phoridium, Protobagliettoa, Staurothele, Thelidium et Verrucaria) et JANEX-

FAVRE (1970 : genre Verrucaria, 1975 : genre Staurothele). A un stade inter-

médiaire du développement périthécial, il apparaît clairement qu'ils sont pro-

duits, en direction basipéte, par la partie supérieure du carpocentre et qu'ils

sont donc de méme nature que les périphysoides du Dictyotrichiella. La pré-

sence de ce stade transitoire (que nous avons dénommé «stade verrucariacéen»

in ROUX & al., 1986) nous paraît si clairement caractériser les Verrucariaceae

s. s. qu’elle permet de rattacher à cette famille certaines espèces (Catapyrenium

daedaleum, ROUX & al., 1986; Endocarpon pusillum, WAGNER, 1984, 1987)

Source : MNHN, Paris

148 M.C. JANEX-FAVRE

et d'en exclure d’autres (Dermatocarpon miniatum, JANEX-FAVRE, 1970 :

pour des espèces de ce type, la famille des Dermatocarpaceae doit donc être

conservée; voir discussion in ROUX & al., 1986).

4) La notion de périphysoïdes.

En conclusion de cette étude et des comparaisons qu’elle a suscitées, il nous

parait utile de préciser en quoi le terme de périphysoides, utilement introduit

par BARR (1979) peut étre, comme cet auteur l'a indiqué en 1983, appliqué à

des formations qui ne sont pas équivalentes entre elles.

Ainsi, on a vu que chez le Dictyotrichiella semiimmersa, et probablement

les autres Herpotrichiellaceae et les Metacapnodiaceae, ainsi que chez les Verru-

cariaceae s. s., leur mode de formation indique que les périphysoides sont une

variante des pseudo-paraphyses.

D'autres cas pourraient être similaires, en particulier : 1) les filaments du

sommet de la cavité périthéciale du Nectria cinnabarina (Hypocreales Hypo-

creaceae) qui, selon STRIKMANN & CHADEFAUD (1961) et PARGUEY-

LEDUC (1966-67) sont les trongons supérieurs de pseudo-paraphyses bien

caractérisées dont les trongons inférieurs se développent entre les asques, et 2)

les courts filaments descendants garnissant la partie supérieure de la cavité

apothéciale des Ostropales (Discomycétes : BELLEMERE, 1967).

Dans d'autres cas, par contre, des filaments d’allure périphysoide sont de na-

ture différente. Ainsi, les paraphyses secondaires, initialement décrites chez le

Coniochaeta ligniaria (Sordariales Coniochaetaceae) par DOGUET (1959),

qui en observe également chez l'Epichloe typhina (Clavicipitales Clavicipitaceae,

DOGUET, 1960) : en position extra-hyméniale, elles se forment à la marge de

l'ostiole et naissent donc en position de périphyses, disposées obliquement dans

la cavité; elles deviennent des paraphyses à mesure que s'accroit le diamétre

de la cavité périthéciale. Selon l'interprétation donnée par CHADEFAUD

(1965) et PARGUEY-LEDUC (19672) elles seraient issues de l'enveloppe asco-

théciale (sensu CHADEFAUD, 1960) et se rattacheraient à un appareil para-

physoide homologue de celui de divers Discomycétes. Des paraphyses secon-

daires extra-hyméniales dérivées d’une ascothécie ont également été observées

chez le Lasiosphaeria hispida (Sordariales Lasiosphaeriaceae, PARGUEY-LEDUC,

1967b) et l'Hypoxylon rubiginosum (Xylariales Xylariaceae, PARGUEY-LEDUC,

1972). Ainsi on ne peut évaluer la nature des périphysoïdes qu'en déterminant

leur origine et leur évolution; cette notion est donc purement morphologique.

Il s'ensuit que la seule présence de périphysoides dans l'ascocarpe adulte n'est

pas révélatrice du type de développement et ne peut donc étre utilisée comme

critére systématique. Cela est manifeste, par exemple, dans le cas des Verruca-

riales. Ainsi, HENSSEN & JAHNS (1974) incluent les Verrucariaceae (sensu

HALE, 1961, c'est-à-dire Dermatocarpaceae confondues) dans les Ascohymé-

niaux, tandis que, du fait de la présence des périphysoïdes CORLETT (1973)

apparente leur centre fertile au type Pleospora et que BARR (1979) les rattache

aux Ascoloculaires.

Source : MNHN, Paris

PERITHÈCES DU DICTYOTRICHIELLA 149

Pour notre part, nous avons montré, dès 1970, à l’aide d'observations onto-

géniques, que les périthèces des Pyrénolichens, sauf exceptions, ne se rattachent

globalement à aucun des types définis chez les non-lichénisants. Les Verrucaria-

ceae possèdent à la fois des caractéres d'Ascoloculaires (notamment la présence

de filaments descendants comparables à des pseudo-paraphyses) et d'Ascohymé-

niaux (mode de développement de la paroi, présence éventuelle de paraphyses).

Leur rattachement à l'un ou l'autre type ne peut qu'étre discutable. Méme dans

le cas où les périphysoïdes ont valeur de pseudo-paraphyses, leur présence n'est

que l'indication d’une tendance ascoloculaire.

REMERCIEMENTS :

Nous avons plaisir à remercier, pour leur contribution amicale à ce travail, M. AVNAIM,

J. BIDOUX, F. CANDOUSSAU et A. PARGUEY.

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THE HOST SPECIFICITY

OF UROPHLYCTIS LEPROIDES (TRAB.) MAGN.

by Tijani HADAR*

SUMMARY. — Marbled tumor formation is induced on sugar beet (Beta vulgaris L.) by the

fungus Urophlyctis leproides. Using the beet parasite prosporangia as inoculum one trial

involving 70 herbaceous plant species was carried out. Only sugar beet was susceptible to

this disease.

RESUME. — Urophlyctis leproides est le champignon responsable de la formation des tu-

meurs marbrées de la Betterave à sucre (Beta vulgaris L.). Utilisant les prosporanges du

parasite de la Betterave comme inoculum, un essai d'infection sur 70 espèces de plantes

herbacées a été entrepris. Seule la Betterave est sensible à cette maladie.

KEY WORDS : sugar beet, tumors, host range, host specificity.

INTRODUCTION

Urophlyctis leproides (Trab.) Magn., the beet tumors fungus normally at-

tacking the crown and leaves of sugar beet in North Tunisia (Fig. 1) was reclassi-

fied into the Urophly ctaceae (HADAR, 1982) a new family of the Spizellomyce-

tales. Thus far little is known about the host range of U. leproides (HADAR,

1986). The purpose of this investigation was to be determined whether U. le-

proides produces tumors on plants other than Beta vulgaris.

MATERIALS AND METHODS

Inoculation with non-dormant prosporangia of U. leproides from sugar beet

tumors was carried out in a growth chamber under favorable conditions for

pathogenesis (25-30°C, 650 lux from continuous fluorescent light, 1 kg of soil

infested with 18 g of dried tumors, heavy watering). Seventy species (10 indivi-

dual plants) of plant were transplanted into infested soil in two series and incu-

bated for 3 months. These species (Table 1) were chosen because they are com-

mon weeds and economically important plants in Tunisia. Plant names were

taken from «Flore de la Tunisie» (POTTIER - ALAPETITE, 1979).

* Institut National Agronomique de Tunisie, Laboratoire de Botanique, 43, avenue Charles

Nicolle, Tunis, Tunisie.

Source : MNHN, Paris

154

Amaranthaceae

Amaranthus retroflexus L.

Amaranthus gracilis Desf.

Amaranthus blitoides S. Wats.

Amaranthus graecizans L.

Amaranthus cruentus L.

Apiaceae

Ammi majus L.

Coriandrum sativum L.

Daucus carota L.

Kundmania sicula DC.

Petroselinum sativum Hoffm.

Torilis nodosa Gaert.

Asteraceae

Anacyclus clavatus Desf.

Aster squamatus Hiert.

Calendula arvensis L.

Chrysanthemum coronarium L.

Cichorium intybus L.

Erigeron bonariensis L.

Lactuca sativa L.

Picris echioides L.

Sonchus oleraceus L.

Boraginaceae

Borago officinalis L.

Heliotropium europeum L.

Brassiceae

Brassica napus L.

Capsella bursa-pastoris L.

Diplotaxis erucoides (L.) DC.

Raphanus raphanistrum L.

Raphanus sativus L.

Sinapis arvensis L.

Chenopodiaceae

Beta macrocarpa Guss.

Beta vulgaris L.

Chenopodium album L.

Chenopodium murale L.

Chenopodium opulifolium Schrad.

Chenopodium vulvaria L.

Spinacia oleracea L.

Convolvulaceae

Convolvulus arvensis L.

Convolvulus lineatus L.

T. HADAR

TABLE 1

Euphorbiaceae

Chrozophora tinctoria Juss.

Euphorbia helioscopia L.

Euphorbia peplus L.

Mercurialis annua L.

Fabaceae

Coronilla scorpioides (L.) Koch.

Medicago ciliaris Krack.

Medicago hispida Gaertn.

Medicago sativa L.

Melilotus sulcata Desf.

Trifolium jaminianum Boiss.

Vicia faba L.

Vicia sativa L.

Lamiaceae

Lamium amplexicaule L.

Mentha pulgegium L.

Salvia verbenaca L.

Liliaceae

Urginea maritima (L.) Bah.

Papaveraceae

Papaver rhaeas L.

Poaceae

Hordeum murinum L.

Lolium rigidum Gaud.

Phalaris paradoxa L.

Poa annua L.

Zea mays L.

Polygonaceae

Emex spinosus (L.) Campd.

Polygonum aviculare L.

Rumex bucephalophorus L.

Portulacaceae

Portulaca oleracea L.

Ranunculaceae

Ranunculus muricatus L.

Ranunculus sardous Crantz

Solanaceae

Capsicum annuum L.

Solanum lycopersicum L.

Solanum nigrum L.

Solanum tuberosum L.

Urticaceae

Urtica urens L.

Source : MNHN, Paris

HOST SPECIFICITY OF UROPHLYCTIS LEPROIDES 155

OBSERVATIONS AND DISCUSSION

In this experiment U. leproides tumors were often observed on cultivated

sugar beets rarely on wild beets. Tumors were artificially produced on eight

commercially available cultivars of B. vulgaris (HADAR, 1986).

Figures 1-2 : symptoms of Urophlyctis leproides on sugar beet. — 1 : crown tumor of a

plant naturally infected. 2 : various tumors on leaves artificially inoculated.

Figures 1-2 : symptômes d'Urophlyctis leproides sur la Betterave à sucre. — 1 : tumeur

envahissant naturellement le collet. 2 : diverses tumeurs obtenues expérimentalement sur

les feuilles.

As earlier indicated, the life cycle of this fungus consists of an endobiotic

stage in living tissue of B. vulgaris and a saprophyte stage (HADAR, 1985).

Among 70 species of plants belonging to different families, and including some

chenopodiaceous species (Beta vulgaris, Beta macrocarpa, Chenopodium album,

Chenopodium murale, Chenopodium opulifolium, Chenopodium vulvaria and

Source : MNHN, Paris

156 T. HADAR

Spinacia oleracea) only sugar beet (Beta vulgaris L.) shows successful infection

judged leaf tumor formation visible at 5 weeks after incubation (Fig. 2). Since

the work thus far indicates that the host range of this fungus may be narrow,

there is a possibility that U. leproides is endemic to sugar beet crop areas and has

become adapted to this species at its specific chenopodiaceous host. Similar

coevolution between related monophagous species of Urophlyctis and their

specific hosts was mentioned in the literature such U. pulposa (Wall.) Schro.

on Atriplex patula L., U. pottero Bartl. on Lotus corniculatus L., U. alfalfae

(Lagh.) Magn. on Medicago sativa L. and U. hemisphaerica (Speg.) Syd. on

Kundmania sicula DC. The causal fungus of Beta vulgaris tumors was non

pathogenic on M. sativa and K. sicula. The finding that U. leproides affects only

B. vulgaris is further evidence of its narrow host range specificity, and may be

used as a taxonomic criterion in the identification of the pathogen responsible

for this specific beet disease

ACKNOWLEDGEMENTS : We thank Prof. G. Bompeix for critically reading the manu-

script.

REFERENCES

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Source : MNHN, Paris

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CONTROL GROWTH OF WOOD-ROTTING FUNGI

BY NON-VOLATILE METABOLITES

FROM TRICHODERMA SPP. AND GLIOCLADIUM VIRENS

by Lina BETTUCCI, Sandra LUPO and Sylvia SILVA*

SUMMARY — Trichoderma spp. and Gliocladium virens isolated from grassland soil were

tested for growth inhibition of 10 wood-rotting Basidiomycetes. T. hamatum was the most

active inhibitor against the Basidiomycetes and the only one producing growth stimulation

at least for one species. Growth inhibition of many Basidiomycetes decreases with time.

This was clearly correlated with antagonistic metabolites diffusion in agar. There were

few species that failed to show clear inhibition with some of the antagonistic moulds. Fomes

pomaceus, one of the most sensitive species, was completely inhibited by G. virens at a

relative high metabolite concentration : the inoculum transfered to fresh medium culture

failed to develop.

RÉSUMÉ — L'activité inhibitrice des métabolites non-volatiles de Trichoderma spp. et de

Gliocladium virens, isolés à partir d’un sol de prairie, a été testée sur 10 souches de Basidio-

mycétes lignivores. T. hamatum est l'inhibiteur le plus actif vis-a-vis de ces souches et est

le seul à stimuler la croissance d'au moins une des espèces. L'inhibition diminue avec le

temps et est correlde avec la diffusion des métabolites dans le milieu de culture. Peu de

souches sont insensibles à l'effet inhibiteur des moisissures, la plupart montrent une sensi-

bilité trés nette. Fomes pomaceus, une des espèces les plus sensibles, est completement

inhibée par G. virens, à des concentrations de métabolites relativement élevées.

KEY WORDS : wood-rotting fungi, Trichoderma spp., Gliocladium virens, growth control,

non-volatile metabolites.

INTRODUCTION

Trichoderma spp. as effective control agents of several phytopathogens

(CHET, 1987) and of some wood-rotting Basidiomycetes (RICARD, 1977;

BRUCE & KING, 1983; BRUCE & al., 1984) have been confirmed. Less conside-

ration has been given to the activity of Gliocladium virens Miller, Giddens &

Foster perhaps due to the confusion prevalent at regards the identity of this

fungus (WEBSTER & LOMAS, 1964; DENNIS & WEBSTER, 1971a), since we

* Departamento de Botänica, Facultad de Humanidades y Ciencias, Universidad de la

Repüblica, Tristan Navaja 1674, Montevideo, Uruguay.

Source : MNHN, Paris

158 L. BETTUCCI

are dealing with a species less frequent than Trichoderma spp. with respect to

the mode of action against wood-rotting fungi, few studies have been carried

out (BRUCE & al., 1984; SILVA & LUPO, 1987: LUPO & SILVA, 1987).

Apart from production of non-volatile metabolites and production of volatile

metabolites (DICK & HUTCHINSON, 1966; HUTCHINSON & COWAN, 1972;

DENNIS & WEBSTER, 1971b; BRUCE & al., 1984), competition for nutrients

(HULME & SHIELDS, 1972) and mycoparasitism (CHET, 1987) were found

to be forms of control of certain fungus species by Trichoderma spp. The reduc-

tion of nutrients has been discussed on the basis of results obtained by BRUCE

& KING (1983). The existence of these mechanisms, independently or simulta-

neously, constitutes a form of reduction of the niche of the involved species.

The present work studies the antagonistic activity of three species of Tricho-

derma and Gliocladium virens isolated from natural grassland soil (Canelones,

Uruguay). Most of the cultures of wood-rotting fungi were isolated from fruit-

bodies growing on fallen branches and trunks of native and introduced species

(BETTUCCI & GUERRERO, 1971; BETTUCCI, 1987a; PIAGGIO, 1987).

Sistotrema brinkmannii (Bres.) J. Erikss. was isolated from vegetative mycelium

which colonize buried woods of Abies religiosa H.B.K. Schl. et Cham. (Parque

National, Desierto de Los Leones, Mexico) (BETTUCCI, 1983, 1984) and sub-

sequently identified from their cultures. Fomes pomaceus (Pers, ex S.F. Gray)

Lloyd was isolated from carpophores developed on the lesions of a standing

live peach tree.

MATERIALS AND METHODS

In order to bring out the potential antagonistic effect of non-volatile diffu-

sible metabolites produced by strains of Trichoderma hamatum (Bonord.) Bain.

(MVHC 5316), Trichoderma koningii Oudem. (MVHC 5333), Trichoderma

harzianum Rifai (MVHC 5318) and Gliocladium virens Miller, Gidden and Fos-

ter (MVHC 5355), a modified version of the technique proposed by DENNIS

& WEBSTER (1971a) was used. Petri dishes containing 18 ml of 2 % agar-malt

were utilized. An autoclaved cellophane paper membrane was placed upon the

culture medium of fresh antagonistic cultures and 6 mm diameter agar disks

were inoculated on the center. These inoculations were carried out with disks

obtained from growth area of young cultures of the following wood-rotting

Basidiomycetes : Fomitopsis feei (Fr.) Kreisel (MVHC 5), Heteroporus biennis

(Bull. ex Fr.) Sing. (MVHC 106), Fomes pomaceus (Pers. ex S. F. Gray) Lloyd

(MVHC 5004), Coriolus pinsitus (Fr.) Pat. (MVHC 5051), Gloeoporus dichrous

(Fr.) Bres. (MVHC 5042), Sistotrema brinkmannii (Bres.) J. Eriks. (MVHC 96),

Picnoporus sanguineus (L. Meyer ex Fr.) Murr. (MVHC 5050), Coriolus versi-

color (L. ex Fr.) Quél. (MVHC 5031), Laetiporus sulphureus (Bull. ex Fr.)

Murr. (MVHC 5067), Pheocoriolellus trabeus (Pers. ex Fr.) Kotl. & Pouz.

(MVHC 5138). These inoculations were carried on with disks obtained from

the growth area of young cultures.

Source : MNHN. Paris

GROWTH INHIBITION BY NON-VOLATILE METABOLITES 159

Growth was measured daily and compared with the control until the latter

was found to occupy the maximum diameter of the dish.

Four replicates of the controls and of the previously antagonist-treated dishes

were performed. Moreover, in order to assess the effect of the concentration

gradient of diffusible metabolite, four disks were respectively placed at 2 cm and

4 cm from the initial inoculum towards the edge of the dish.

Tests were performed at 23°C and pH 4 at the beginning of the experiment.

The multiple comparisons by T method (SCHEFFEE, 1959) was carried out

to establish the ordination of antibiotic effect on the growth of tested fungi

in relation with the control ones.

The activity of each antagonist with each of the 10 Basidiomycetes species

was analyzed separately. Also determined was the effect of the diffusion of me-

tabolites in the culture medium by comparing the growth rate of the disks

inoculated at a certain distance from the center in relation with the control

and the disk inoculated in the center.

A scale of relative sensitiveness of the Basidiomycetes produced by each

antagonist, was developed. The inocula which were completely inhibited by the

potential antagonist were transferred to a fresh culture medium to detect any

fungicidal activity.

RESULTS

Figure 1a shows that after 48h of development, of the 10 wood-rotting

Basidiomycetes tested, 8 exhibited zero growth with respect to G. virens, 7 with

T. hamatus, 6 with T. koningii and 4 with T. harzianum. The number of species

which failed to develop has decreased to one half or less by the fourth day,

except those tested with G. virens which present almost the same behaviour

(Fig. 1b).

Table 1 shows the percentage of growth inhibition by the diffusible meta-

bolites of G. virens and Trichoderma spp. when the controls are found to cover

the dishes. Evidently the time for covering control Petri dishes is different for

each lignivorous species. The most sensitive species to the antagonistic effect

were F. feei, F. pomaceus, Ph. trabeus and L. sulphureus but they do not exhibit

equivalent sensibility to the same antagonists. L. sulphureus failed to grow (or

showed negligible growth) with the four antagonists, F. pomaceus with G.

virens and T. hamatum, Ph. trabeus with G. virens and T. koningii and F. feei

and G. dichrous with G. virens.

The T method (SCHEFFEE, 1959) was carried out to assess the differences

between the average areas (under the graded curves of growth) of the controls

and those submitted to potential antagonists. Growth data were recorded

until the control colony covered the maximum diameter of the Petri dish (9 cm).

Heteroporus biennis with T. hamatum covered the dish earlier than the

control, its growth is stimulated instead of inhibited.

Source : MNHN, Paris

L. BETTUCCI

160

igos

voos

soL s6 s

4908

igos

voos

N NE

| d

umwe I g

EURO INY

unvezseg 1

suem p

ai 54

Source : MNHN, Paris

GROWTH INHIBITION BY NON-VOLATILE METABOLITES 161

G. virens T. haratanım T. k

61.1 6. 54.4 0

52.2 8. 10 0

90 Mu. n.a 26.7

100 8e, 100 100

Ph. 100 58. 85.5 27.8

Table 1 — Growth inhibition (%) of the Basidiomycetes exposed to metabolites diffusible

in the medium (G. virens and Trichoderma spp.) at the moment when the control attains

9 cm in diameter (it covers the Petri dish). * There is a significant difference in growth

by stimulation instead of inhibition

Tableau 1 — Inhibition de la croissance des Basidiomycetes exposés aux métabolites diffu-

sibles (G. virens et Trichoderma spp.). Diamétre de la culture témoin :9 cm. * Différence

significative par stimulation et non par inhibition de la croissance.

On the other hand, the growth of G. dichrous and S. brinkmannii does not

significantly differ from the controls when tested with T. koningii.

The remaining tested species are significantly inhibited by antagonist with

different effectiveness, according to the Basidiomycete and to the antagonist.

In accorcande with the degree of significance of the differences between the

growth of controls and the treated ones (Table 2), the most sensitive species

were F. pomaceus, L. sulphureus and Ph. trabeus, while the least sensitive were

S. brinkmannii and H. biennis. The remaining species do not differ from one

another in their response to the inhibitory activity of the antagonists, considered

as a whole.

In turn, G. virens was the most efficient inhibitor of growth in most cases

analyzed.

No growth was noted when F. pomaceus was tested with G. virens; when

the same disks were transferred to a fresh culture medium without antagonist,

they likewise failed to show development of the mycelium.

Figure 1 — Means of the growth diameter (cm) of Basidiomycetes species (confidence

interval + 95 %) within 2 days of inoculation (a) and 4 days of inoculation (b). 5 : F.

feei, 96 : S. brinkmannii, 106 : H. biennis, 5004 : F. pomaceus, 5031 : C, versicolor,

5050 : P. sanguineus, 5051 : C. pinsitus, 5042 : G. dichrous, 5067 : L. sulphureus,

5138 : Ph. trabeus.

Figure 1 — Croissance moyenne (diam. en cm) des Basidiomycétes (intervalle de confiance

+95 %) 2 jours (a) et 4 jours (b) aprés l'inoculation.

Source :MNHN. Paris

162 L. BETTUCCI

G. virens T. koningii

5. brinkmann

. biennte

sanguineus

G. dichrous

sulphureus

Table 2 — Growth inhibition ranked in the values of the significant differences. 0 : no effect

of antagonist (no significant difference), 4 : maximum effect of the antagonist (zero or

negligible Basidiomycete growth).

Tableau 2 — Inhibition de la croissance ordonnée selon les valeurs des différences signifi-

catives. 0 : effet nul de l'antagoniste (pas de différence significative), 4 : effet maximal

de l'antagoniste (croissance nulle ou négligeable des Basidiomycètes)

X haraiamum T. k

0 4 | ee sia al a

F. feei too 100 100 fioo 100 o fioo m o [fmo 33 o

8. brinkmannti | 2.86 14.3 14.3] 64.6 25.7 14.3] 25.7 37.1 16 | 13.1 a7 5.7

H. biennis 28.7 0 o | 28.7 5.33 0 | 35.3 22 o 0 o 0

F. ponaceus |100 100 o fio 100 10.3] 100 100 85100 100 0

e; 100 100 0 fio 100 ajio sa o fio m o

P: sanguineus [100 10 41 | 43.4 3.3 — 0,9 100 — 100 — 327|T0 — 202 94

C. pinsitus |100 100 0 | 42.1 7.4 o fas 3x2 1 |446 257 0

G. diehrors |100 100 0 | 22.8 34 0 | n4 105 0 |100 34 -o

L. sulphareus |100 — 100 — 42.6 100 — 100 54.9| 100 — 100 — 42.6|100 — 100 0

Ph erabeus |100 soo 21/10 noo 10 fio aoo sisi 45 311

Table 3 — Growth inhibition of Basidiomycetes (%), when the inoculum disks are placed in

the center (0), 2 and 4 cm from the center. Growth of the control was considered as

100 %.

Tableau 3 — Inhibition de la croissance des Basidiomycêtes (%) lorsque l'inoculum est placé

au centre (0), à 2 et 4 cm du centre. Croissance du témoin : 100 %.

On the other hand, the inoculum disk of P. sanguineus tested with G. virens

became stained more intensely than do the control, during the first 48 hours.

After this delay the mycelium started to grow. Apparently this growth was

allowed by the decrease of metabolites concentration in the central zone around

the disk.

Generally at hour 48, disks inoculated far from the dish center, appeared

less affected by the inhibitory activity than those of the center, the more so with

Source : MNHN, Paris

GROWTH INHIBITION BY NON-VOLATILE METABOLITES 163

greater distance. By contrast, S. brinkmannii tested with G. virens, as well as

with T. hamatus and T. koningii, was inhibited somewhat closer to the edge of

the dish than to its center. The inocula lying in the center were less inhibited

than those placed within 2 cm. This fact remains unexplained. Moreover, P.

sanguineus and L. sulphureus exhibited a marked inhibition at the innermost

half of disk inoculated within 4 cm while the outermost half was less affected

when tested with G. virens and T. koningii. F. pomaceus mycelium placed within

2 cm grew outwardly and upwardly, starting from the fourth day of inoculation

with T. harzianum and the fifth day with T, koningii. The outermost disks of

F. pomaceus, with G. virens, start growth eleven days after inoculation; disks

placed within 2 cm had been totally inhibited in their growth.

Inhibition was calculated by means of 1 = B * 100 _ 100, B being the

mean of the diameters of the Basidiomycete colonies tested with a potential

antagonist and T the mean of the diameters of the control colonies (Table 3).

DISCUSSION

The discussion hinged fundamentally upon the results obtained within the

48 hours following the inoculation of the tested species, as it was deemed that

the antagonistic effect is affected by the diffusion of metabolites and by the

discontinuance of their production following the elimination of the antagonistic

species from the culture medium.

The species of wood-rotting fungi tested exhibit variable sensitivity to the

inhibitory effect of diffusible metabolites of Trichoderma spp. and G. virens. It

should be stressed that, at the same concentration, the same antagonist affects

the different Basidiomycetes in a different manner.

The efffect of concentration may be different, fungistatic or fungicidic. While

at high concentration G. virens was fungicidic for F. pomaceus, with L. sulphu-

reus it behaved as fungistatic. This latter fungus, following decrease of concen-

tration, begins to grow while F. pomaceus does not, even when transferred to

a medium without an antagonist. This is in agreement with other reports (DEN-

NIS & WEBSTER, 1971a; BRUCE & al., 1984) in which it is stated that the

antagonistic effect is species-specific.

Moreover, as pointed out by DENNIS & WEBSTER (1971a) not all the

strains of the same antagonistic species are equally efficient.

The growth rate is not only manner in which the Basidiomycetes are able

to overcome the antagonistic effect but it is a liable mean evaluation of antago-

nistic activity. This effect becomes manifest with similar intensity in F. poma-

ceus and L. sulphureus. Both species present a different growth rate; the former,

slow, the latter, very fast. On the other hand, S. brinkmannii, which exhibits a

comparatively fast growth does not practically present sensitivity to antagonists.

The effect of diffusion of metabolites, as seen in Table 3, is a marked one,

since in 65 % of cases sensitiveness was maximal in the center and within 2 cm,

Source : MNHN, Paris

164 L. BETTUCCI

48 hours after inoculation, and declined or dropped to zero within 4 em.

L. sulphureus is the most sensitive species at the lowest concentration as it

is inhibited by three of the four antagonists (G. virens, T. harzianum, T. konin-

gii) between 42 % and 55 % of its growth 4 cm from the center. On the other

hand G. virens has a fungicidic effect upon F, pomaceus but only at the center

or 2 cm from the inoculum of the antagonist. It was furthermore seen that H.

biennis was stimulated in the presence of T. hamatum.

HULME & SHIELD (1970) postulated that in the case of G. virens the effect

of the diffusible substances does not have an important ecological significance;

what confer a greater competitive ability to this fungus is its high growth rate.

In the condition tested we cannot suggest competition for nutrients because the

antagonist does not coexist with the Basidiomycete; there only remain the diffu-

sible substances and, morevover, this assertion is conforted by the fact that F.

pomaceus and L. sulphureus have the same behaviour independently of their

growth rates.

These results and those obtained by BRUCE & al. (1984) therefore contradict

interpretations by HULME & SHIELD (1972) as the only form of competition.

The decrease of nutrients in the medium, owing to competition between orga-

nisms with different growth rates may be an indirect cause of inhibition, as a

result of involvement of the metabolism of the handicapped species.

Preliminary observations of coexistence of S. brinkmannii with Trichoderma

spp. (BETTUCCI, 1983, 1985, 1987b) are suggestive of the lack of sensitivity

of Basidiomycete with respect to diffusible metabolites in the medium. The high

colonizing ability of buried woods, under laboratory conditions, may have

been favoured by a «cascade» process analogous to that described by SMITH

& al. (1981). Also to be added is the ability of G. virens and of several species

of Trichoderma to produce volatile metabolites with an inhibiting effect upon

the growth of other species (DENNIS & WEBSTER, 1971b).

It has been possible to observe a marked difference between the antagonistic

activity of G. virens with species of Trichoderma, contrarily to remarks of

DENNIS & WEBSTER (1971a).

ACKNOWLEDGEMENT

The authors would like to thank Dr. Gonzalo Pérez for the statistical analysis of data

and his helpful criticism of this paper.

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Les 335 espaces de Basidiomycetes Agaricoïdes représentatives de la myco-

flore de l’île de Ceylan sont ici remarquablement décrites, figurées, nommées, et

délimitées.

Pour qui ouvre le livre dans sa seule partie descriptive sans avoir lu l’introduc-

tion et l'historique des recherches mycologiques dans ce territoire, il est difficile

d'imaginer que, à l'exception de quelques récoltes faites par l'auteur soi-même

lors d'une mission en 1974, toute la très minutieuse étude présentée ici repose

exclusivement sur l'exploitation de matériel d'herbier. Il y a en effet, pas moins

de 104 pages d'illustrations : dessins au trait, non seulement des spores, des

principaux caractéres anatomiques ou structuraux, mais aussi de carpophores

entiers ou en coupe, que l’on croirait croqués sur le vif. En fait, ces dessins de

carpophores ont été tracés à partir d’icônes, aquarelles principalement, qui ac-

compagnent les récoltes faites à Ceylan, et dont certaines ont plus de cent ans

d'âge.

L'activité mycologique dans cette île a connu une première période de 1844

à 1875 avec GARDNER, puis TWAITES en poste à Peradeniya, qui avec l'aide

de récolteurs ont «approvisionné» BERKELEY en exsiccata (1200 récoltes) et

en icônes (œuvre d’un artiste local); celles-ci, recopiées par une des filles de

BERKELEY, accompagnent maintenant les collections déposées à Kew, les

originaux ayant été retournés à Peradeniya. Sans laisser dans l'oubli le rôle

ponctuel d'autres mycologues, CESATI et VON HOENEL entre autres, il faut

accorder une mention spéciale à T. PETCH, en poste à Ceylan de 1905 à 1925 :

non seulement il récolta alors beaucoup, mais encore il fut à méme de réviser

des espèces de BERKELEY et BROOME, et dans 27 publications, il décrivit

79 nouvelles espèces.

Atrivons aux dernières décennies, et voici que D.N. PEGLER nous livre une

impressionnante révision du travail antérieur sur la base de l'abondant matériel

accumulé. Ce travail de dépoussiérage a conduit l'auteur à synonymiser de

nombreuses espéces (et ce n'est pas pour surprendre !).

Les 335 retenues sont présentées dans leur cadre systématique de maniére

particulièrement claire, très pédagogique, puisque sont rappelés à chaque occa-

sion les principaux caractères des grandes unités et sous-unités du système

de classification adopté, et que des clés aiguillent l'utilisateur à tous les niveaux.

En outre, pour chaque espéce, la précision nomenclaturale est impressionnante. .

avec une liste de synonymes dépassant souvent la dizaine de noms (on retrouve

aussi ces noms dans l'index précédés du signe +). Soulignons aussi que dans les

deux «Appendices», le chercheur trouvera : en I, la liste des espèces récoltées

par GARDNER avec leur NO, et désignées sous les noms utilisés dans la publi-

Source : MNHN, Paris

168 ANALYSES BIBLIOGRAPHIQUES

cation de BERKELEY 1847; en Il, la liste des espèces récoltées par TWAITES

avec leur NO, désignées sous les noms utilisés dans la publication de BERKELEY

et BROOME 1870-73, et en regard, dans les deux cas, le résultat de la redéter-

mination, et le NO afférant, de SACCARDO. Bref, un travail d'une tres grande

qualité.

Si l'on osait glisser quelques critiques mineures, on pourrait regretter que,

dans les dessins d'hyphes ou de cystides, l'usage de pointillés en certaines zones

fasse croire que l'on a pu délimiter parfaitement vacuole et cytoplasme, comme

lors d'observations vitales; on aurait aussi aimé voir les boucles figurer plus sou-

vent là ou elles existent (cf. texte).

On ne peut que recommander cet ouvrage comme l'outil indispensable à

tout mycologue intéressé par la mycoflore agaricoide du Sri Lanka et/ou d'au-

tres régions tropicales, pour comparaison.

Les éminentes qualités de l'euvre sont très bien servies par la qualité de

l'édition (c'est une tradition à Kew) : clarté de l'impression, de la mise en page,

de la reproduction des dessins. Jusqu'à ce logo de couverture, ou les silhouettes

du Clarkeinda trachodes tiennent tout juste dans le contour de l'ile : un clin

d’œil aux futurs visiteurs ?

D. Lamoure

LES RÉSISTANCES GÉNÉTIQUES DANS LES SYSTÈMES DE PROTECTION

DES CULTURES CÉRÉALIERES CONTRE LES CHAMPIGNONS, VIRUS

ET NÉMATODES. Versailles (France) 23-24 Janvier 1986. Paris, INRA.

Les colloques de l'INRA n° 35.

Ce symposium, organisé par les diverses instances scientifiques du domaine

Agro-universitaire et présidé par un membre de l'Institut, met en relief le pro-

blème céréalier phytosanitaire en relation avec l'augmentation actuelle de ren-

dements. Les nouveautés scientifiques concernent surtout les méthodologies

adaptées à la sélection, les possibilités d'utilisation de la résistance, la nature de

ces résistances pour les hôtes. Elles concernent aussi la biologie des agents patho-

gènes (la plus avancée) avec les facteurs et les paramètres qui modifient le com-

portement parasitaire nocif. Les exemples abondent : cas des parasites obliga-

toires (rouilles, oïdium, nématodes), cas des parasites nécrotrophes (septoriose,

fusariose, rhynchosporiose, rhizoctone, piérin, helminthosporioses), virus. L’évo-

lution des équilibres entre céréales cultivées et populations des pathogénes

fongiques (ou autres) est due (entre autres) à l'utilisation continue de variétés

résistantes d'hótes et à la variabilité des parasites (surtout obligatoires), à la

mode récente de la culture, à l'adaptabilité continue des agents pathogénes et

à l'application de nouveaux produits pour la lutte chimique. L'amélioration de

la stabilité des résistances génétiques dans la protection sanitaire des céréales

est acquise grâce aux réalisations et orientations de la sélection, à la prise en

compte des variabilités génétiques des populations-hótes et des populations

parasitaires par l'industrie phytosanitaire. Les expérimentations diverses sont

analysées et les résultats sont donnés par groupes des agents pathogénes; don-

Source : MNHN, Paris

ANALYSES BIBLIOGRAPHIQUES 169

nons comme exemple les résultats d’expérimentations systématiques sur les

maladies fongiques d'origine tellurique avec l'Essai «Rotations» d’Aulnay aux

planches (Marne) et, deux cas en Picardie, .… L'avenir de l'agrochimie repose sur

les stratégies de lutte contre la résistance des agents pathogènes, par la synthèse

de nouveaux composés, par l'alternance et le mélange de matières actives, etc.

La bibliographie spécialisée qui suit chaque article aide à élargir et à approfondir

chaque sujet que l'auteur n'a pas pu développer plus, vu le temps strict donné

pour chaque exposé. On peut conclure par une question. Vu les possibilités

offertes par le génie génétique et la biologie moléculaire et cellulaire, sera-t-on

capable d'identifier les composants chimiques qui apparaissent lors de l'infec-

tion, lors de l'extension du parasite, et d'identifier, puis de cloner les génes qui

gouvernent le contrôle de ces composants ? Il suffira alors d'introduire ces

composants à la population que les agriculteurs d'une région «correspondante»

cultiveront sous la pression agro-économique. On trouve enfin la nécessité

absolue d’une collaboration stricte et renforcée entre biologistes, améliorateurs,

physiologistes, chimistes, agronomes, phytopathologistes, et selectionneurs.

Ch. Zambettakis

KENDRICK B., 1985 — The fifth kingdom. Waterloo, Ontario, Canada, Myco-

logue Publications, 364 p.

En introduction, B. KENDRICK nous rappelle que le monde vivant peut être

subdivisé en 5 règnes : les Procaryotes (Monera) et les Eucaryotes unicellulaires

(Protoctista) auxquels sont rattachés les Eucaryotes phototrophes (Plantae), les

Eucaryotes phagotrophes (Animalia) et les Eucaryotes absorbotrophes (Fungi).

L'étude de ce cinquième règne — objet du présent ouvrage — est la version écrite

d'un enseignement par correspondance assuré par l'auteur depuis plusieurs années.

Plus qu'une compilation bibliographique, il s'agit d'un ouvrage personnalisé,

souvent au style direct, attrayant à la lecture. L'expérience et l'étendue des

connaissances que détient B. KENDRICK dans le domaine de la Mycologie est

partout sensible.

L'auteur a cherché à couvrir tous les aspects de la Mycologie : la classification

tient 6 chapitres; la dispersion des spores, la physiologie, la génétique, l'écologie,

la phytopathologie, les fongicides, les biodétériorations, la prédation, les sym-

bioses, les mycorrhizes, l'alimentation, les mycotoxines et la mycologie médicale

sont traités en chapitres successifs d'égale importance. Ceux-ci sont suivis de

quelques références bibliographiques complémentaires à l'intention des lecteurs

désireux d'approfondir leurs connaissances sur tel ou tel sujet. Les chapitres

sont abondamment illustrés et l'auteur propose, en même temps que le texte

écrit de cet enseignement, un support visuel sous forme de 600 transparents

couleur (35 mm).

Ce livre est donc avant tout un ouvrage d'enseignement trés complet dont la

présentation claire et précise, en méme temps qworiginale, ne manquera pas

d'attirer beaucoup de lecteurs.

M.F. Roquebert

Source : MNHN, Paris

170 ANALYSES BIBLIOGRAPHIQUES

KREISEL H., Ed., 1987 — Pilzflora der Deutschen Demokratischen Republik.

Basidiomycetes (Gallert- Hut- und Bauchpilze). Jena, VEB Gustav Fischer

Verlag, 281 p.

C'est à une équipe de mycologues réunis depuis 1977 autour de H. Kreisel

que l'on doit cet inventaire annoté des Basidiomycètes (Hyménomycètes et

Gastéromycètes) de la République Démocratique Allemande. Pour une telle

réalisation qui a pris en compte les récoltes, parfois toutes récentes, de ce XXème

siècle ainsi que d'autres plus anciennes — d'avant 1900 où même 1800 —, de nom-

breuses collections privées et plusieurs herbiers nationaux ont été examinés.

Les résultats de l'enquête, accompagnés de commentaires écologiques et choro-

logiques, sont donnés en une longue énumération alphabétique des genres et

des espèces, constituant l'intérêt primordial de l'ouvrage.

Toutefois les pages introductives ont également leur importance et seront à

lire attentivement: outre des généralités sur la flore fongique concernée, elles

apportent en effet les indications nécessaires à la bonne utilisation du répertoire

taxonomique où tout un système d'abréviations a été largement employé. Ainsi,

sous une forme très concise et à propos de chaque espèce, on trouvera mention

des noms d'auteurs, de l'appellation en allemand, des principaux synonymes,

des références iconographiques les plus notables, de l'habitat et de la répartition

en R.D.A. Afin de préciser cet aspect essentiel du travail, sont signalés les lieux

et dates de cueillette des spécimens, avec les noms des récolteurs. Notes biblio-

graphiques détaillées, liste de synonymies, index et mises à jour complètent par

ailleurs cette étude.

Au point de vue nomenclatural, les Auteurs se sont bien évidemment attachés

à suivre les principes édictés pour les champignons par le Code. Néanmoins,

leur interprétation en ce qui concerne certains aspects de ce problème — citation

des noms d’auteurs des taxons, «sanction» par Fries ou Persoon, notamment —

diffère parfois de celle d'autres mycologues; on peut donc mesurer de nouveau

l'importance des précisions qui restent à obtenir en cette matière. Par contre,

les amateurs pourront se référer avec confiance à l'ouvrage pour connaitre

l'orthographe des mots et les accords en latin qui, tout botanique qu'il soit,

obéit à des règles grammaticales.

Parmi les groupes de Basidiomycétes considérés, plus de 2500 espèces ont été

recensées; elles appartiennent à un peuplement dont les caractéristiques ne

surprennent guère dans la région étudiée. Constitué de plaines, d’un étage

collinéen et d'une zone de moyennes montagnes où l'altitude ne dépasse pas

1250 m, soumis à un climat tempéré froid, ce territoire relève en effet du

domaine floristique médio-européen subatlantique. Les groupements végétaux

qu'on y rencontre, les divers biotopes, tous avec leurs cortèges respectifs de

Macromycètes, sont semblables à ceux d’une grande partie de l'Europe. Le

catalogue minutieux établi en R.D.A. participe ainsi fort utilement à la pro-

gression des recherches sur la distribution géographique des champignons dans

l'hémisphère nord.

J. Perreau

Source : MNHN. Paris

ANALYSES BIBLIOGRAPHIQUES 171

VANKY K., 1987 — Illustrated Genera of Smut Fungi. JUGLICH W., Crypto-

gamic Studies Vol. 1. Stuttgart, New York, Gustav Fischer Verlag, 159 p.

Comme le souligne le Professeur NANNFELDT qui préface l'ouvrage, celui-ci

est consacré essentiellement aux Ustilaginales phytopathogènes. Les champi-

gnons purement saprophytes s’apparentant à ces dernières par leur morphologie

et par leur cycle sont laissés de côté. Seuls sont donc concernés les agents respon-

sables des «charbons».

Dans une brève introduction, l’auteur retrace les caractéristiques des Ustila-

ginales et aborde les problèmes que pose leur taxonomie. La séparation classique

en deux familles, basée sur le mode de formation des sporidies, n'est pas retenue.

La principale raison réside dans l'existence d'espèces possédant un mode de

germination ne permettant de les placer ni dans les Ustilaginacées, ni dans les

Tillétiacées. La difficulté de délimiter objectivement les genres est soulignée.

Parmi les 80 genres qui ont été décrits, 47 seulement sont acceptés par l'auteur.

Il propose pour ces derniers une clé de détermination, dans laquelle entre en

première ligne la disposition des spores (spores isolées ou groupées de différentes

façons).

L'essentiel de l'ouvrage est consacré à la description des genres ainsi déter-

minés, pris dans un ordre alphabétique. Sept autres sont également inclus (An-

giosorus, Crozalsiella, Endothlaspis, Ginanniella, Polysaccopsis, Tranzscheliella

et Yenia) bien que leur érection en tant que taxons distincts soit jugée insuffi-

samment fondée. Le genre Kweilingia, qui ne paraît pas appartenir aux Ustila-

ginales, figure également. Dans chaque cas, l'auteur reprend d'abord les carac-

téristiques du genre; il discute ensuite éventuellement de sa validité, de son affi-

nité avec des genres voisins et de son étendue (nombre d'espèces, plantes hôtes),

puis il décrit en détail l'espèce type. Des dessins originaux et des photographies

personnelles, tout à fait remarquables, accompagnent le texte. Les symptômes

observés au niveau des plantes ou des organes parasités par l'espèce type sont

figurés, ainsi que, lorsque cela est nécessaire pour illustrer la description, une

coupe à travers les sores et le mode de germination des spores. De plus celles-ci

sont à chaque fois représentées en microscopie photonique et en scanning.

Le livre se termine par une abondante bibliographie, comportant plus de 400

références, d'où sont extraites deux listes distinctes récapitulant les publications

d'intérêt général consacrées aus Ustilaginales et celles décrivant la flore de ces

champignons dans différentes régions du globe. En outre, un index alphabétique

signale les noms de genres et d'espéces cités dans le texte.

Ce premier volume de «Cryptogamic studies» représente un ouvrage de base

qui devra figurer dans la bibliothèque de tout laboratoire de Mycologie ou de

Phytopathologie. Aux non spécialistes des «charbons» il offre une vue d'en-

semble facilement accessible des Ustilaginales. Il sera consulté avec profit par

tous ceux qui seront confrontés à un problème concernant leur détermination

ou leur nomenclature. Il constitue surtout un outil de travail de premier ordre

pour les chercheurs désirant se consacrer à l'étude de ces champignons. Sa

lecture stimulera sans doute les travaux destinés à approfondir leur phylogénie et

à préciser leur classification qui paraît encore largement subjective.

A. Schneider

Source : MNHN, Paris

172 ANALYSES BIBLIOGRAPHIQUES

MOORE R.T., 1987 — Deuteromycete Studies. Collected Mycological Papers.

Berlin, Stuttgart, J. Cramer, Gebriider Borntraeger, Bibliotheca Mycologica,

Band 108, 180 p.

Réunion de 18 articles publiés dans différentes revues par l’auteur entre 1953

et 1984, présentés sous trois rubriques :

1) les Helicosporae (5 articles) avec les Helicosporae du Centre-Nord des

U.S.A., les nouvelles espèces d'Helicosporae (Helicomyces colligatus, Helico-

sporium linderi, Helicosporium panacheum), le nouveau genre Hiospira et l'index

des Helicosporae (1 article + 1 addenda).

2) les champignons marins (4 articles) avec les Thalassiomycètes : le nouveau

genre Nia, 3 nouveaux genres Cirrenalia, Cremasteria, Culcitalna et une nouvelle

espèce Humicola alopallonella, l'étude du genre Zalerion et propositions pour

la classification des levures marines et autres champignons levuriformes (y com-

pris les charbons).

3) divers : Sporidesmium, Scheleobrachea, Berkleasmium, Piricauda, Stil-

bum zacalloxanthum, Antromycopsis broussonetiae et autres Antromycopsis,

Vanrija.

Commission paritaire no 58611

Dépôt légal n 13905 - Imprimerie de Montligeon

Sortie des presses le 20 juin 1988

1 Imprimé en France

Éditeur : A.D.A.C. (Association des Amis des Cryptogames)

Président : A. Couté; Secrétaire : D. Lamy

Trésorier : R. Baudouin: Directeur de la publication : H. Causse

Source : MNHN, Paris

CRYPTOGAMIE — MYCOLOGIE

BUREAU DE REDACTION

MM. DURRIEUG., pour les articles traitant d’Ecologie et de Phytopathologie

Laboratoire de Botanique, Faculté des Sciences,

Allées Jules Guesde, 31 000 Toulouse (France).

JOLY P., pour les articles traitant de Systématique

Laboratoire de Cryptogamie, Muséum National d'Histoire Naturelle

12, rue de Buffon, 75005 Paris (France).

MANACHERE G., pour les articles traitant de Physiologie

Laboratoire de Mycologie, Université de Lyon I,

43, Bd du 11 Novembre 1918, 69622 Villeurbanne Cedex (France)

Mmes ZICKLER D., pour les articles traitant de Cytologie

Laboratoire de Génétique, Université de Paris Sud,

Bát. 400, Centre d'Orsay, 91405 Orsay (France).

ROQUEBERT M.F., s'occupera des autres spécialités.

Laboratoire de Cryptogamie, Muséum National d'Histoire Naturelle

12, rue Buffon, 75005 Paris (France).

COMITÉ DE LECTURE

BOIDIN J., Lyon (France) MONTANT Ch., Toulouse (France)

CHEVAUGEON J., Orsay (France) MOREAU Cl., Brest (France)

GAMS W., Baarn (Hollande) PEGLER D.N., Kew (Grande-Bretagne)

HENNEBERT G., Louvain-la-Neuve SUTTON B., Kew (Grande-Bretagne)

(Belgique) TURIAN G., Genève (Suisse)

LACOSTE L., Paris (France)

Les manuscrits doivent être adressés (en 3 exemplaires) directement à un

membre du Bureau de Rédaction, choisi pour sa spécialité. Chaque membre du

Bureau se charge d'envoyer l'article à 2 membres du Comité de Lecture (ou

autres lecteurs compétants).

Bien qu'étant avant tout une revue de langue francaise, les articles rédigés en

Anglais, Allemand et Espagnol sont acceptés.

Les recommandations aux auteurs sont publiées dans le let fascicule de

chaque tome.

Source : MNHN, Paris

19 Juil. 1988

ABONNEMENTS À CRYPTOGAMIE

Tome 9, 1988

CRYPTOGAMIE comprend trois sections : ALGOLOGIE. BRYOLOGIE-

LICHENOLOGIE, MYCOLOGIE. On pent souscrire indépendamment à

chacune des sections.

Abonnement à 1 section :

France

Étranger,

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Prance

Étranger ,

Les anciens tomes et N bre de la REVUE DE MYCOLOGIE et

de CRYPTOGAMIE - MYCOLOGIE sont toujours disponibles.

Ue (HT ER F) 31720 F

TAE ^ 335,00 F

* (HT 870 a 904,80 F

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MÉMOIRES HORS SÉRIF

NO 2 (1942), Les matières colorantes des champignons, par l.

Pastac, 88 pages :15 F.

NO 3 (1943), Les constituants de la membrane champi-

gnons, par R. Ulrich, 44 pages ı 15 F. ILS

N® 6 (1958). Essai biotaxonomique sur les Hydnés impo e les

Corticiés, par J. Boidin. 390 pages, pl. et fig. :

N?9 7 (1959). Les champignons et nous (croque) in par G.

Becker, 94 pages : 25 F. ce

No 8 (1966). AN E Cryptoga-

mie d Muséum National d' E eR (1) Micromy-

cétes, Macromycétes e partie), 68 pages : 25 F.

NO 9.(1967), Table des Matières (1936-1965): 85 pages : 20 F, —

(1966-1975).30 pages : 10 F.

FLORE MYCOLOGIQUE DE MADAGASCAR. ET DÉPENDANCES

publiée sous la direction de M. Roger HEIM

Tome 1, Les Lactario-Russulés, par Roger Heim (1938) (puted.

Tome Il, Les Rh les, pat Henri 1941), 164 |

Fu QUE par Henri Romagnesi (1941). 164 pages.

Tome Ill. Les Mycénes, Georges Métrod (1949). 144 pages,

na 88 fig. 90 F. ete oes Te

Tome IV. Les Discomycétes de Madagascar Marcelle Le Gal

(1953), 465 pages, 172 0g. Y 150 F, i

Tome V. Les Urédinées, par Gilbert Bouriquet et J.P. Bassino

(1965). 180 pages, 97 fig- 4 pl. horstexte : 90 F.-

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