FACULTAD DE CIENCIAS NATURALES Y OCEANOGRAFICAS _

UNIVERSIDAD DE CONCEPCION

CHILE

: DIRECTOR DE LA REVISTA: REPRESENTANTE LEGAL

Andrés O. Angulo Sergio Lavanchy Merino

'REEMPLAZANTE DEL DIRECTOR PROPIETARIO

: Oscar Matthei Te ae Universidad de Concepción

EDITOR GAYANA DOMICILIO LEGAL

Andrés O. Angulo Víctor Lamas 1290, Concepción, Chile

EDITOR EJECUTIVO GAYANA

Ciro Oyarzún G.

La Revista Gayana es una versión moderna de Gayana Oceanología y Gayana Zoología y, por lo tanto, procede a

reemplazarlas.

La Revista Gayana está relacionada con todos los aspectos de la investigación zoológica y oceanológica. Los tópicos

específicos cubiertos en la Revista Gayana se basan en trabajos e investigaciones originales y revisión de artículos en

taxonomía, sistemática, filogenia, biogeografía y oceanología.

Se considerarán los aspectos evolutivos dentro de estos tópicos basados en morfología, fisiología, ecología, etología y

paleontología.

COMITE EDITORIAL

Patrick Arnaud. Station Marine d'Endome, Marsella, Francia. Ariel Camousseight, Museo de Historia Natural, Chile.

Wolf Arntz. Alfred-Wegener-Institut fiir Polar-und Meeresforschung Bremerhaven, Alemania. C. Sergio Avaria. Univer-

sidad de Valparaíso, Chile. Jan Owe Bergstróm. Kristineberg Marine Biologiske Station, Kristineberg, Suecia. Ramón

Formas, Universidad Austral de Chile. Chile. Alberto P. Larrain, Universidad de Concepcion. Chile. Joel Millet. Muséum

National d’ Histoire Naturelle. Francia. Victor Marin. Universidad de Chile, Chile. Roberto Meléndez, Museo de Historia

Natural. Chile. Julian Monge-Najera. Universidad de Costa Rica, Costa Rica. Carlos Moreno. Universidad Austral de

Chile. Chile. Hugo I. Moyano. Universidad de Concepcion, Chile. German Pequeno, Universidad Austral de Chile.

Chile. Linda M. Pitkin, Natural History Museum of London, Inglaterra. Gilbert T. Rowe, Texas A & M University,

College Station, Texas, USA. Nelson Silva, Universidad Católica de Valparaíso, Chile. Raúl Soto, Universidad Arturo Prat,

Chile. Haroldo Toro, Universidad Católica de Valparaíso, Chile.

Subscripción:

Subscripción anual en cada serie: US$ 23.60 (dos volúmenes al año)

Números atrasados US$ 17.70 cada uno, excepto los números de más de 100 pp, para lo cual se deberá consultar a:

gayanaOudec.cl

Información en Internet:

Revista Gayana tiene su página Web en http://www.udec.cl/publicaciones/

Dirección:

Revista Gayana. Facultad de Ciencias Naturales y Oceanográficas, Universidad de Concepción, Casilla 160-C, Concep-

ción. Chile. Teléfono: 56-41-203059, Fax: 56-41-244805, E-mail: gayana@udec.cl

Indexado en Bulletin Signaletique (Abstract, CNRS, Francia); Pascal Folio (Abstract, CNRS, Francia); Periodica (Index Latinoamericano,

México); Marine Sciences Contents Tables (MSCT, Index FAO); Biological Abstract ( BIOSIS); Entomology Abstract (BIOSIS); Zoological

Records (BIOSIS); Ulrich’s International Periodical Directory; Biological Abstract.

Diseño y Diagramación

Maité Núñez R.

ISSN 0016-531X

GAYANA

VOLUMEN 64 NUMERO 2

CONTENTS

Terrestrial environments

ALAMIRI, Z. Oviposition behaviour in four species Of Drosophila ....oooicicinionmro o. 123

Chiapa, E., SH. RODRÍGUEZ & R. BASCUNAN. Floral preference and manipulation of Centris

rodophthaima Perez (Hymenopera: Anthopnoridae) wo... ticcc.sccccrssncccccesvcnoresenssesevne 158

TANNACONE, J., L. ALVARIÑO, C. CABALLERO & J. SÁNCHEZ. Four ecotoxicological assays to

Evaluate lindanesand: ChIOEpyrifOs +. 22iiksciectesceececceseccesdeeseeeesesconeateeretarocteuonasduaaserees® 139

Louis-MALDONADO, M. & R. BapbuLLa. Description of preimaginal stages of Hemieuxoa

CONGHIOLAS BUCEAR E OE IATA 147

RopríGuEz, M.A., T.S. OLIVARES & A.O. ANGULO. A new genus and new species from

hight andean V. tenera Rodríguez & Angulo n.gen. v/s akin genera (Lepidoptera:

NE cr Ola O A a A LS RA E 155

Romero, F., E. ALTIERI, C. QUIÑEHUAL & A. CAYUQUEO. Contraction activity of the papillar

muscle and vas deferent of a rat induced to poison from the Latrodectus mactans spider

Oli © A AL este Lea cls nang etetcontnenenen cube temeetent vans arrears seaennee 161

Sruarpo, J.R. & P. VARGAS-ALMONACID. Land mollusca of Chile. Synonymies and related

problems: 1. Families Veronicellidae, Pupillidae and Achatinellidae (Gastropoda:

A E RS O o in od ió 171

Aquatic environments

JARA-SEGUEL, P., S. PEREDO, C. PALMA-RoOJas, E. PARADA & G. Lara. Quantitative karyotype

of Diplodon chilensis (Gray 1828) (Bivalvia: Hyriidae) ......cooccnonccnocnnonocnconorncanornnononos 189

SALAMANCA, M.A., A. Camaño, B. JARA & T. RoDRÍGUEZ. Cu, Pb and Zn distribution in

nearshore waters in’ san Jorge bay, morthiern” Chile reno... casecasecvecsancvcveaseancoseweeens 195

Review

WIABUENAGA: SB. ElSh 1ftMUDE SYSLEDD «00.5250 0n.ce-s-a5< annus sesnesthoeeecoenececor tase oy aa pon dl DiR 205

RoprícuEz, L. & L. Castro. Studies on the ecology of larval myctophids (Pisces,

Myctophidae): A proposal for new research lines in the Humboldt Current ............. 219

Short communications

CasanuEva, M.E. € H.I. Moyano. Ixodes uriae White 1852 (Acari: Ixodidae) associated

with the papua penguin, Pygoscelis papua (Forster), in the antarctic peninsula ...... 289

OLIVARES, T.S. & A.O. ANGULO. A mistook paratype of Pareuxoa koehleri Olivares

Ii O

OLIVARES, T.S. Crenarytaina eucalypti (Maskell 1890): The blue gum psyllid in Chile

(Hemiptera: Sternorryncha: Psylloidea: Spondyliaspininae) eomccccncinninninncnnnnnnss 23%

UNIVERSIDAD DE CONCEPCION - CHILE

ISSN 0016-531X

GAYANA

VOLUMEN 64 NUMERO 2 2000

CONTENIDO

Ambiente terrestre

ALAMIRI, Z. Conducta de oviposición en cuatro especies de Drosophila .............. 123

Cuppa, E., S. RODRÍGUEZ Y R. BASCUNAN. Preferencia y manipulación floral de Centris

rodophthalma Pérez (Hymenoptera: Anthophoridae) ...oooonncccnocinoccnionoconccoonaconnnnnnos 133

TANNACONE, J., L. ALVARIÑO, C. CABALLERO Y J. SÁNCHEZ. Cuatro ensayos ecotoxicológicos

para evaluar lindano y CloLpiritOS .osacosionnioncioos canti sogas oda 139

Louis-MALDONADO, M. Y R. BabILLa. Descripción de los estados preimaginales de

HermmeuxoaiconciaidiaBUL A A A 147

RopríGUEZ, M.A., T.S. OLIVARES Y A.O. ANGULO. Nuevo género y nuevas especies de

nóctuidos altoandinos V. Tenera Rodríguez & Angulo n. gen. v/s géneros afines

(Lepidoptera: Noctuidae: @uculllamde) 220-2 .2.2..s-0s00-0<ssss00ssccosevnaeserssaansscereuatareee 155

Romero, F., E. ALTIERI, C. QUIÑEHUAL Y A. CAYUQUEO. Actividad contractil de músculo

papilar cardiaco y conducto deferente de rata inducida por veneno de la araña

Eatrodectusimacians ae Oy eeecesscsssecsetesesce rece eect eter eee 161

STUARDO, J.R. Y P. VARGAS-ALMONACID. Moluscos terrestres de Chile. Sinonimia y problemas

relacionados: 1. Familias Veronicellidae, Pupillidae y Achatinellidae (Gastropoda:

Pulmonar ar Ed e e e dl o. ION 171

Ambiente acuático

JARA-SEGUEL, P., S. PEREDO, C. PALMA-ROJAs, E. PARADA Y G. LARa. Cariotipo cuantita-

tivo de Diplodon chilensis (Gray 1828) (Bivalvia: Hyriidae) ....ooononnccinccnnocaconnnono» 189

SALAMANCA, M.A., A. CAMANO, B. JARA Y T. RODRÍGUEZ. Distribución de Cu, Pb y Zn

en aguas costeras de bahía: San Jorge en el norte de Chile ..acoonooriooaoniososnoasosiscaos 195

Revisión

OLABUENAGA,'S-E; Sisfema inmune En PECES o ldoconnriano concede nono tone da cast oasis 205

RopríGuEz, L. y L. Castro. Estudios en ecología de larvas de mictófidos (Pisces,

Myctophidae): Una propuesta para nuevas líneas de investigación en la Corriente de

A O 219

Comunicaciones breves

CASANUEVA, M.E. Y H.I. Moyano. /xodes uriae White 1852 (Acari: Ixodidae) asociado

con el pingiiino papua, Pygoscelis papua (Forster), en la península antártica .... 235

OLIVARES, T.S. Y A.O. ANGULO. Un paratipo errado de Pareuxoa koehleri Olivares

(Lepidoptera: INOCtUuIdaC) es. c.ncc. ccs citan AE 237

OLIVAREs, T.S. Ctenarytaina eucalypti (Maskell 1890): El psilido del eucalipto en

Chile (Hemiptera: Sternorryncha: Psylloidea: Spondyliaspininae) ......ocioncnicccnonernos» 239

UNIVERSIDAD DE CONCEPCION - CHILE

“Los infinitos seres naturales no podrán perfectamente conocerse

sino luego que los sabios del país hagan un especial estudio de

ellos”.

CLAUDIO GAY, Hist. de Chile, 1:14 (1848)

Portada:

Claudio Gay Mouret nació el 18 de marzo de 1800 en Draguignan, de-

partamento de Yar, Francia. Fue director del Museo Nacional de Historia

Natural de Santiago de Chile. Fallece el 29 de noviembre de 1873 en

Deffens, Yar, a la edad de 73 años. La presente revista lleva el nombre de

“GAYANA” en su homenaje.

Dr. Andrés O. Angulo

DIRECTOR REVISTA GAYANA

ESTA REVISTA SE TERMINÓ DE IMPRIMIR

EN LOS TALLERES DE IMPRESOS ANDALIÉN

CONCEPCIÓN, CHILE,

EN EL MES DE DICIEMBRE DE 2000,

QUE SÓLO ACTÚA COMO IMPRESORA

PARA EDICIONES UNIVERSIDAD DE CONCEPCIÓN

Gayana 64(2): 123-131, 2000

AMBIENTE TERRESTRE / TERRESTRIAL ENVIRONMENTS

ISSN 0016-531X

OVIPOSITION BEHAVIOUR IN FOUR SPECIES OF DROSOPHILA'

CONDUCTA DE OVIPOSICION EN CUATRO ESPECIES DE DROSOPHILA

Zaid Alamiri”

ABSTRACT

Oviposition site selection plays a central role in the

evolutionary ecology of Drosophila, due to its high

relation with the pre-adults fitness since the site selection

determines the interactions between the species sharing

common resources. Drosophila subobscura Collin which

was detected in Chile for the first time in 1978, was found

coexisting in the wild, as adults, over apple and raspberry,

with D. hydei, D. immigrans and D. melanogaster. It was

observed that raspberry has been used only by Drosophila

subobscura as a breeding site; meanwhile sharing apple

with the others. Our principal purpose was to shed light

on the ecological significance of the new species

Oviposition behaviour; analysing also some of the

preference-performance relationship. Two experiments of

non-choice and choice, were carried out. The results

showed that all species used both substrates as a breeding

site. However, D. subobscura and D. melanogaster chose

significantly raspberry, whereas D. immigrans and D.

hydei preferred apple. In relation to preference-

performance, only D. melanogaster expressed that

positively in terms of short development time and high

viability. The physical characters of the substrate could

explain the oviposition preference. These results

constitute the first empirical evidence that D. subobscura

is constantly colonising new breeding sites, if it is known

that raspberry has been cultivated for one decade.

Keyworpbs: Oviposition behaviour, D. subobscura,

colonisation, preference - performance relationship, and

substrate physical characters.

'The present paper is part of a MS Thesis at the

Universidad Austral de Chile.

“Department of Entomology, University of California

Riverside, CA 92521, U.S.A

RESUMEN

Debido a su importancia en la eficacia de los estadios

preadultos, la elección del sitio de oviposición ocupa un

lugar esencial en la ecología evolutiva de Drosophila, pues

ella determina las interacciones entre especies que comparten

recursos comunes. Drosophila subobscura Collin, que fue

detectada en Chile por primera vez en 1978, se había

encontrado en la naturaleza, coexistiendo con D. hydei, D.

immigrans y D. melanogaster, sobre frambuesa y manzana.

La frambuesa ha sido usada solamente por D. subobscura

como sitio de crianza; mientras tanto ella compartía la

manzana con las otras especies. El objetivo principal de este

trabajo fue investigar la implicancia ecológica de conducta

de oviposición de la especie nueva; analizando algunos

aspectos de la relación preferencia-eficacia. Se han realizado

dos experimentos con elección y sin elección del sitio de

oviposición. Los resultados han demostrado que todas las

especies usaron ambos sustratos; sin embargo D. subobscura

y D. melanogaster han preferido ovipositar en frambuesa,

mientras D. hydei y D. immigrans lo hicieron en manzana.

En cuanto a la relación preferencia-eficacia, solamente D.

melanogaster mostró dicha relación en términos del tiempo

de desarrollo y viabilidad. Los factores físicos del sustrato

podrían haber sido involucrados en la preferencia. Estos

resultados constituyen la primera prueba empírica de que

D. subobscura está constantemente colonizando nuevos

sitios de crianza.

PALABRAS CLAVES: Conducta de oviposición, colonización

de D. subobscura, relación preferencia-eficacia y factores

físicos del sustrato.

INTRODUCTION

The oviposition site selection in Drosophila,

among many other ecological and behavioural

factors, plays a central role in the community

structure. Being immobile, pre-adults instars are

directly influenced by the decision taken by their

mothers where to lay their eggs because it

125

Gayana 64(2), 2000

determines their fitness especially when sharing

resources with other species. The species of

Drosophila are generally selective in their selection

of breeding site. As a species in process of

colonisation of a new habitat, Drosophila

subobscura Collin (Diptera: Drosophilidae) is using

new breeding sites in Chile to avoid competitive

interactions in nature, a strategy proposed by Budnik

and Brncic (1983) who found in experiments of

competition performed in the laboratory, using

artificial culture medium, that D. subobscura

interferes with D. simulans, D. immigrans, D. pavani

as well as with D. melanogaster. D. subobscura is a

typically Paleartic species distributed all over Europe,

North Africa and Asia Minor, with the exception of

the northern parts of Scandinavia and Finland

(Lakovaara and Saura 1982). The species was

detected in Chile for the first time in Puerto Montt

(419608) in 1978 (Brncic and Budnik 1980). In the

next year the insect expanded its range from Puerto

Montt to La Serena (29°55’S) where its frequency in

relation to the total collected drosophilids was 49.09

and 0.45%, respectively (Budnik and Brncic 1982).

The species was found far southern as Punta Arenas

(54°40°S), with a frequency of 1.4 (Budnik and

Brncic 1982). The insect has also crossed the Andes

mountain range and was detected in the Pacific coast

of North America, where it has now become

established (Prevosti et al. 1982).

Samples of Drosophila collected in southern

Chile (Temuco and Valdivia) by Videla et al. (1994)

showed that adults of D. hydei, D. immigrans, D.

melanogaster and D. subobscura coexist over

decayed fruits of apple, peach, plum, and raspberry;

however, in the laboratory, it was seen that from

the first three fruits, emerged all the four species

while from raspberry only D. subobscura did. So,

considering these findings, the aim of this paper

was to shed light on the ecological significance of

oviposition site selection by D. subobscura as a new

species colonising Chile, as well as D. hydei, D.

immigrans; and D. melanogaster in two natural

substrates of raspberry and apple.

Furthermore, the study aims to evaluate

preference - performance relationship in terms of the

time needed to reach the adult stage and the viability.

This work would try to find answer to the two

specific questions; does raspberry offer a suitable

breeding site for D. subobscura? Should other

females lay their eggs on raspberry, would the egg-

124

to-adult development time and viability be affected

in comparison to other substrate where they breed?

MATERIALS AND METHODS

Two oviposition experiments were conducted

without and with substrate choice. The populations

of the four species used in the study were derived

from flies captured in the university experimental

station located at the north of Valdivia (39%45“S;

73°14°W). The species were reared in 250-cm glass

bottles using 50 cc of Burdik culture medium

(Burdik 1954). The fruits offered were apple (Malus

sylvestris, CV. Granny) and raspberry (Rubus

idaeceus CV. Heritage), which were healthy and

untreated, collected one day before the beginning

of the experiments.

EXPERIMENT I. NON-CHOICE EXPERIMENT

Transparent acrylic population cages of

35x35x1lcm, containing twenty-five 2x2 cm

oviposition glass tubes arranged in five rows and

five columns, were used. Variable quantity of moist

river sand was added to the oviposition tubes in such

a way that the substrates maintain the same height

level, then 4.5 + 0.1 gr. of apple piece or 2.5 + 0.1

gr. of raspberry fruit was placed on the sand. A

sterilised filter paper was added to the sand to avoid

that females lay eggs on the sand. Afterwards, the

fruit surface was sprayed with Nipagin 1% to prevent

the bacterial and fungal contamination.

After leaving 25 females of maximum

fecundity age of each species, introduced without

anaesthesia, for 24 h in the cage, the tubes were

withdrawn and the number of eggs, if any, was

examined. Those containing eggs were incubated

to be checked daily for the insect presence until one

week after the emergence of the last adult. The

experiment starts at 10:00 A.M., and the withdrawal

process is done at 10:00 A.M. the following day.

Five replicates for each species and substrate

were used.

EXPERIMENT II: CHOICE EXPERIMENT

The whole procedure used was similar to that

of the previous experiment, with the exception of

offering simultaneously 12-apple oviposition

areas and 12-raspberry oviposition ones

distributed randomly in the population cage.

Oviposition behaviour in Drosophila: ALAMIRI, Z.

Five replicates for each species were carried

out.

The experiments were done in a controlled

room of 22 + 1°C, 60% R.H and 12L: 12D (08:00-

20:00).

RESULTS

NON CHOICE EXPERIMENT

First of all, the most remarkable fact, as can be

seen from Table 1, was that all species oviposited on

both substrates; however, significant differences were

found between species (ANOVA and a posterior

Tukey’s test) within each substrate. In raspberry, for

example, D. subobscura laid significantly more eggs

than did the other three species (E, 513.3; P<0.001)

and occupied more available oviposition areas (F,

¿=13.5; P<0.001). Meanwhile, in apple, the situation

is completely opposite in the sense that D. subobscura

had the less number of eggs and occupied less tubes

in comparison to D. hydei, D. melanogaster and D.

immigrans. lt seems there is an apparently

proportional relationship, in the case of D. subobscura

between the number of tubes occupied and the number

of eggs laid, on the contrary of the other species. As

for spatial egg distribution, it was clear that all species

are gregarious, since the variance-mean ratio was more

than one, irrespective of the substrate, egg number,

and tubes amount.

TaBLe I. Number of Eggs deposited and tubes occupied and aggregation rate in the non-choice experiment (Means +SE).

Species Substrate Eggs Tubes Aggregation's

number number rate

Raspberry

D. hydei 84.4 + 19.0” 8.4+0.9* TAZA

D. immigrans 1712535 12 241.9" 4.8+0.7 *

D. melanogaster 17S 2277" 14.0+1.6° Bo al (op ee

D. subobscura 342-4: 375% 20.4+0.8 * TABLA?

D. hydei 233.8+43.7 * 17.8t1:6* 9.741.4*

D. immigrans 153:0529:5% IN DESOS 4.6+0.5”

D. melanogaster 191.4+44. 1 eevee [el ES 5,921.82

D. subobscura 81.0+14.9° 11.8+0.9° 2620.1 5

Values in each column with the same letter are not significantly different at the 5% level.

CHOICE EXPERIMENT x7=426.0; 11 di; P<0.0015 tespectively);

D. subobscura as well as D. melanogaster

preferred ovipositing on raspberry (x?=47.0;

meanwhile D. hydei and D. immigrans laid their

eggs on apple (x=31.5; x=118.8; 1 df; P<0001;

respectively). ;

TABLE II. Chi-square test for the oviposition preference behaviour (Means +SE).

Species Raspberry

D. hydei 42.0+ 15.9

D. immigrans 40.0+ 15.6

D. melanogaster 201.0+ 16.9

D. subobscura 130.5+ 24.6

Apple; + x? d.f=1

77.04 22.6 51.5***

177.0+ 9.8 118.8***

53.6+ 8.9 426.0***

85.4+ 27.2 47 Q***

With regards to the two parameters used to

measure, if any, the preference-performance

relationship, i.e., development time of egg-to-adult

and mortality; Table III indicates significant

differences between species in both substrates and

sexes as D. melanogaster being the species that

reached the adult stage in short time (ANOVA and

a posterior Tukey’s test). In raspberry, for example,

125

Gayana 64(2), 2000

D. melanogaster took less development time

expressed in days (F , ,,,=136.3; P<0.0000 and

F ,,,=55.7; P<0.0000, for females and males,

respectively). It is worthy to mention that only

D. melanogaster (F=3.64, with 4 df; P<0.04

and F=3.19, with 4 df; P<0.03, for females &

males, respectively) had the positive

preference-performance relationship when

raspberry was used as a breeding site.(Table

MI, T-test).

TaBLe III. Development time of females and males (in days) showing the relationship of preference - performance

(Means +SE).

Species Females development time T-test Males development time T-test

Raspberry Apple Raspberry Apple

D. hydei INES IOMEDNSE ISOEO00F ~19520:4" n.s

D. immigrans 1566 OH AG: 802° 5307 MAS 20:3:P n.s

D. melanogaster 11950521 14.9+0.9° 3.64* 12:50:88 16:32:25 319%

D. subobscura S60: 28 SES SAS US 1'8:6:50.3 * n.s

Values in each column with the same letter are not significantly different at the 5% level.

It is interesting to observe from graphics | and

2 that D. melanogaster was the only species that had

the high percent of emerging individuals (females and

males) in both substrates, 1.e., the preferred as well as

the non-preferred. On the other hand, D. subobscura

and D. hydei showed their high percentage of

individuals in the preferred substrate only; while D.

immigrans did that in the non-preferred substrate.

—_ N

on o

Accumulative percentage of adult emergence

r=)

OO 129 seg IS 1G Te

Time in days

Graphic 1. Accumulative emergency in raspberry

—o—D. subobscura Female |

—-D. subobscura Male

—4—D. hydei Female

—D. hydei Male

~x—D. immigrans Female

immigrans Male

melanogaster Female

melanogaster Male

OD.

— ek O,

=p]

SAS LO 21" 225 2S ZA E

FIGURE |. Accumulative emergency 1n raspberry.

126

Oviposition behaviour in Drosophila: ALAMiRI, Z.

25 4

Accumulative percentage of adult emergence

—£—D. subobscura Female

—0—D. subobscura Male

—e-D. hydei Female

——D. hydel Male

HD. immigrans Female

—0—D. immigrans Male

—+—D. melanogaster Female

——D. melanogaster Male

Time in days

Graphic 2. Accumulative emergency in apple

FIGURE 2. Accumulative emergency in apple.

With regards to mortality, both D.

melanogaster in raspberry and D. immigrans in

apple, had such relationship (Table IV, T-test), as

the ANOVA and a posterior Tukey’s test indicate

significant differences between species only in

raspberry (F ,,¿=5.1; P<0.01).

TABLE IV. Percentage of total mortality between species expressed by ANOVA and T-test (Means +SE).

Species: = ____ Raspberry

D. hydei 65:5+165:"

D. immigrans DEIS

D. melanogaster 29.8+1.8°

D. subobscura El cP: dls

_ Apple TStespiLA GEES

IDEN n.s

SOMEES Or 2.97*

62.1+10.9* USES

SA n.s

Values in each column with the same letter are not significantly different at the 5% level.

DISCUSSION

The results of choice experiment will be

discussed first because of its relevance to the ecology

of the colonising species, i.e., D. subobscura. This

helps to get some information on some of its

behaviour patterns, ¡.e., oviposition preference, used

by the insect in the new environment which somehow

will provide the necessary steps needed to establish

well. Then I proceed to deal with the first experiment.

The substrate physical conditions such as shape,

texture and colour could explain the results obtained.

It seems that the convex shape of raspberry was used

as a positive visual stimulus in comparison to the

flat. Such finding was assured by Ruiz et al. 1994,

that D. melanogaster, in front of concave and convex

surfaces (culture medium), preferred the later. In

another work about Chaetorellia australis Hering

1207

Gayana 64(2), 2000

(Diptera: Tephritidae), it was observed that the

insect frequently visited spherical and conic

substrates, and also it was mentioned that

Ceratitis capitata (Wied) (Tephritidae), preferred

convex than plane or concave (Pittara «

Katsoyannos 1992). Degen & Stadler (1996)

observed that Delia antigua (Meigen) (Diptera:

Anthomyiidae) did not lay significantly more

eggs around the host leaf which was flat and too

wide at the base rather than cylindrical and

narrow like its main host plant, the onion (Allium

cepa).

Referring to substrate texture, the structural

arrangement of the fruit drupes as well as the spaces

between them, had an attractive effect for D.

subobscura to choose in the sense that the texture

might provided the protection for the eggs; besides,

it might help the females perceive and detect

olfactory stimulus through antenna or rather by

chemical ones located in the tarsus when the insect

is going up and down the fruit. Once the insect

landed on the fruit surface, 1t begins and exhibits

series of preovipositional activities that lead finally

to accept the substrate as a site for the deposition of

eggs (Harris & Miller 1984).

Results found by Prophetou-Athanasiadou

et al. (1993) showed that D. subobscura used

significantly the more rough surface, out of three

offered surfaces with different roughness, laying

there more eggs.

Many researchers (Atkinson & Shorrocks

1981) indicated the tendency of D. melanogaster to

exhibit a significant preference to the rough surface

as a site of oviposition and this observation or fact

was used then by Atkinson 1983 to argue that texture

irregularity is the factor that expresses the gregarious

behaviour in this species.

Chess & Ringo (1985), demonstrated that D.

melanogaster females with amputated tarsus and

antenna, continued laying eggs on the rough

substrate in a proportion reached to 90% than on

smooth surface. In addition, it was observed that D.

simulans, preferred to oviposit in the centre of the

culture medium which has more roughness than the

border (Grossfield 1983).

Roessingh & Stadler (1990), mentioned that

Delia radicum (L.) (Diptera: Anthomyiidae) in the

natural as well as in the artificial substrates, always

used the irregular surface.

It was observed in this study that both D.

subobscura and D. melanogaster, frequently laid

their eggs on the border and inside the fruit cavity

which probably provide a suitable site that support

their pre-adult instars development. Sirvastara &

Singh (1983) also noticed such behaviour in four

Indian species of Drosophila. This observation could

be attributed partially to the humidity content as the

border and the inside are more wet and consequently

more suitable than the outside for the growth. This

observation agrees with the work of Chess & Ringo

(1985) that D. melanogaster lay more eggs on humid

than on dry part of the substrate.

Another factor that might be involved in the

site selection, is the colour, as there are many

evidences in the Diptera, including Drosophila,

indicate the preference for a certain colour. The first

evidence was presented by Carfagna & Lancieri

(1971), who declared that there is a cause-effect

relationship between the extraretinal pigment and

frequent oviposition on determined colour in D.

melanogaster. Del Solar et al. (1974, 1976) found

in a selection experiment that D. melanogaster

females preferred coloured areas than non-coloured.

Anastrepha suspensa Loew (Diptera:

Tephritidae) chose the coloured substrate in the

choice experiment where coloured and non-coloured

substrates were offered (Greany & Szentesi 1979).

It has been seen also, that D. radicum prefers any

coloured substrate (Roessingh & Stadler 1990).

Pittara & Katsoyannos 1992 observed that, in the

laboratory, C. australis, preferred the yellow and

orange coloured substrates.

As for the preference exhibited by D. hydei

and D. immigrans to the flat and smooth substrate

that is similar to the culture medium where they

were cultivated; Del Solar & Ruiz (1979) noted that

D. melanogaster females prefer to lay eggs on the

area similar to that one where they had been reared

in relation to colour and superficies. These species

in the nature emerged frequently from apple (Videla

et al. 1994).

With relation to non-choice experiment where

all species laid eggs on raspberry as well as on apple,

the following explanation could account for the

results obtained. The insect will lay its eggs on a

certain host when the stimulus received from the

potential host plant exceeds some threshold since

this threshold is variable and decreases as the search

time increases and for that reason the insect will

accept the less preferred host, although this will

Oviposition behaviour in Drosophila: ALAMIRI, Z.

affect development of the insect (Jaenike 1990

and references therein).

In this regards, it is necessary to take into

consideration, on analysing such complicated

behaviour, the multiple stimulus and not to

overestimate one factor per se (Deither 1982).

PREFERENCE - PERFORMANCE RELATIONSHIP.

Only D. melanogaster, both females and males,

showed positive relationship in the parameters used,

development time as it took short time to the adult

stage as well as the high viability. This could be

principally explained by the fact that in raspberry, the

feeding rate due to the liquid content of the fruit is so

high and the insect has a fast search capacity (Burnet

et al. 1977) and then getting the food more easily

without spending more effort. Besides, D.

melanogaster as a species, is known by its evolutionary

history to decrease its body size in order to lessen as

possible the mortality even if it encounters

intraspecific conditions (Miller 1964). Many

researchers had indicated that development time in

drosophilids, depends principally on food consumed

as insects need to reach the minimum size required

during the third instar, before completing growth to

become pupa (Robertson 1963; Miller 1964; Budnik

1977; Barker 1992). On the other hand, in the case of

D. immigrans, this relationship is partially expressed

by the relatively low mortality in apple in comparison

to raspberry as might be explained by the insect large

size. The other species, D. hydei and D. subobscura,

failed to display this tendency. It is worthy to mention

that this relation is not a direct consequence of plant-

insect relationship, for example, Kearney (1983),

found that D. subobscura although preferred Rubus

fructicosus L. (blackberry) but relationship was

observed partially in terms of body size which the

present study did not measure.

This relationship range from positive (Singer

1983; Singer et al. 1988; Criage et al. 1989; Dodge

et al. 1990; Ryoo £ Cho 1992; Waddell & Mousseau

1996) to negative (Courtney 1981; Karban &

Courtney 1988; Auerbach & Simberloff 1989; Fox

& Lalonde 1993; Ahman & Lovgren 1995), as for

example Larson and Strong (1992) had revealed

that Dasineura marginemtorquens (Diptera:

Cecidomyiidae) preferred oviposit on Salix

viminalis, in spite of being resistant to the attack to

the extent that at the sixth day of development, the

insect survival was in the terms of just 6%.

Finally, it would be necessary to explain some

of the ecological significance of oviposition

behaviour showed by D. subobscura in the sense of

implications that could be drawn about the insect

process of colonisation which implicitly include the

probable interactions with other species in terms of

utilising food resources (including breeding sites)

and consequences that might result from such

interactions in the long run. The results presented

here agree well with those observed in the nature,

which indicate that as a new species, the insect is

always seeking new sites not used by other, specially

if we know that raspberry has been a recently

introduced and cultivated in southern Chile. As

Budnik & Brncic (1983) postulated that D.

subobscura, being inferior in its competitive ability,

and to avoid or escape the negative effects it should

use new habitats in its new environment.

For example it was found in the wild native

trees like Berberis buxifolia, Maytenus magallanica,

Embothrium coccineum and various species of

Nothofagus. So, the results of this study represent as

far as it is concerned to the ecological implication of

the insect behaviour, the first empirical findings

supporting and confirming the above-mentioned

hypothesis, and also confirm its poor competitive

ability, since the development time, body size and

viability as fitness components, were negatively

affected in competition experiment with the

established species in Chile in the culture medium

experiments (Budnik & Cifuentes 1989,1993) as well

as in natural substrates (Alamiri 2000).

As a successful coloniser, the insect must be less

adapted to the particular local environments of the

territories, 1.e., be able to occupy a contrasting climates

where there may be an association between the level of

chromosome polymorphism and ecological

phenotypes. (Parsons 1982 and references therein). This

is clearly evident as the insect had extended its

distribution on 3000 km north-south gradient ranging

from semi-arid zones to wet and cold zones (Budnik

& Brncic 1982), beside other characters such as the

rapid differentiation of its populations here in Chile as

compared to the European populations which was

proved by analysis of chromosomal and enzymatic

polymorphism (Brncic et al. 1981; Brncic & Budnik

1987; Prevosti et al. 1985, 1987) and quantitative

characters relevant to the microdifferentiation process,

such as sexual isolation ,i.e., interpopulation differences

in mating (Bmcic € Budnik 1984).

129

Gayana 64(2), 2000

ACKNOWLEDGMENTS

I would like to thank Prof. Dolly Lanfranco from

Universidad Austral de Chile, Instituto de Silvicultura

and an anonymous reviewer for their constructive

comments on an earlier draft of this paper.

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Gayana 64(2): 133-138, 2000

ISSN 0016-531X

PREFERENCIA Y MANIPULACION FLORAL DE CENTRIS

RODOPHTHALMA PEREZ (HYMENOPTERA: ANTHOPHORIDAE)*

FLORAL PREFERENCE AND MANIPULATION OF CENTRIS

RODOPHTHALMA PEREZ (HYMENOPTERA: ANTHOPHORIDAE)

Elizabeth Chiappa', Sharon Rodríguez? € Rossana Bascuñán'

RESUMEN

Se estudió la manipulación y preferencia floral de Centris

rodophthalma Pérez en 3 localidades de la IV Región de

Chile, caracterizadas, principalmente, por representantes de

la familia Fabaceae y condiciones ambientales estrictas que

reducen el rango de recursos disponibles para la abeja. Se

estimó la influencia de factores florales de 6 especies de plantas

en la preferencia de C. rodophthalma, con el objeto de

determinar el grado de correspondencia entre la morfología

de la abeja y la elección de la flor, considerando: longitud de

la lengua de la abeja; tamaño, diseño, color y estructura de la

flor; profundidad de la corola; capacidad volumétrica de

nectarios y medida del ángulo formado entre nectario y resto

del estandarte. De estas variables, sólo las diferencias que

muestra el ángulo formado entre nectario y resto del pétalo

permiten discriminar entre las flores, dificultando la llegada

de la lengua de la abeja al nectario, lo que podría determinar

la elección floral de C. rodophthalma. Además se describe la

manipulación de la flor por C. rodophthalma cuando va por

polen o sólo por néctar.

PALABRAS CLAVES: Centris, Fabaceae, interacción insecto-

planta, Chile.

INTRODUCCION

Abundante literatura y ejemplos bien

documentados proponen que factores fisiológicos

"Financiado por Proyecto FONDECYT 1971141

'Facultad de Ciencias, U. de Playa Ancha, Casilla 34-V.

Valparaíso, Chile. E-mail: echiappa@upa.cl

* Instituto de Biología, U. Católica de Valparaíso, Casilla

4059, Valparaíso, Chile. E-mail: srodrigu@ucv.cl

ABSTRACT

In three localities of the IV Region of Chile a study on

floral preference of C. rodophthalma was carried out. At

each area, a striking feature was the stricts weather

conditions and the dominance of few species of Fabaceae,

that reduce the resources available to the bee.

To know the influence on the bee of floral morphological

characters of 6 species of plants, the tongue’s lenght and

depht of flowers were correlated. Also, the size and

structure of the flowers, nectar volume and the angle

shaped between the nectaries and the rest of the petal,

were measured. The results indicated that the angle is

the only one that permit to explain the floral preference

of C. rodophthalma, because of the difficulty to reach

the nectar and, in spite that C. rodophthalma is a longue-

tongued bee.

In addition, the flower manipulation for nectar or polen

by the bee and pollen in brood cells are described.

Keyworpbs: Centris, Fabaceae, insect-plant interaction,

Chile.

juegan un importante papel en la determinación de

respuestas de insectos a señales asociadas con tipos

particulares de recursos (Bell 1991; Barton 1993).

En forma diferente, el papel de la morfología ha

sido cuestionado como causa de mecanismos

funcionales o reflejo de patrones ecológicos, más

aún, se ha dudado de la utilidad de la morfología

como indicador ecológico (Wiens & Rotenberry

1980). Sin embargo, se ha presentado evidencias

de partición de recursos como producto de

diferencias estructurales, las que determinarían

eficiencias en el forrajeo (Schoener 1974, 1979).

188

Gayana 64(2), 2000

Debido al papel fundamental en la alimen-

tación de las abejas, la probóscide aparece como la

estructura más obvia que podría afectar la elección

de flor, en particular, la longitud de la glosa

determina la profundidad desde la cual una abeja

puede obtener néctar. El tiempo de manipulación

por flor y la eficiencia en la extracción de néctar

son función de la longitud de la probóscide en

relación a la longitud de la corola (Harder 1983),

por lo que correlaciones entre tales rasgos morfoló-

gicos han sido frecuentemente registradas

(Heinrich 1976; Inouye 1980; Johnson 1986). Por

lo demás, el análisis de un carácter en forma aislada

no permitiría discriminar entre abejas ni explicaría

el uso de diferentes especies de plantas, por lo que

debiera estudiarse la interacción entre varios

caracteres morfológicos que estarían afectando el

uso de un recurso particular (Harder 1985).

El presente trabajo se realizó en la IV

Región de Chile, en el marco del estudio de la

conducta de forrajeo de Centris rodophthalma

Pérez, planteando la importancia de ciertos rasgos

morfológicos de las flores como determinantes de

la elección floral de la abeja. Debido a que C.

rodophthalma restringe sus visitas a un pequeño

número de plantas, (principalmente especies del

género Adesmia en la zona de estudio), se presenta

como una especie útil para examinar la relación

entre características morfológicas de esta abeja y

las plantas que visita.

Con el objetivo de determinar el grado de

correspondencia entre la morfología de la abeja y

la elección de flor, se consideraron las siguientes

variables: longitud de la lengua de la abeja,

tamaño, color, diseño y estructura de la flor,

profundidad de la corola, capacidad volumétrica

de nectarios y medida del ángulo formado entre

el nectario y el resto del estandarte.

METODOLOGIA

El estudio se llevó a cabo en 3 localidades

de la IV Región del país, Varillar (29%55*31”S;

703200” W), Andacollito (3001*'06”S; 70°36’28” W)

y Hurtado (30°09°07’’S; 70%40'06”W), durante los —

meses de septiembre y octubre de 1999.

Cada uno de estos sitios se caracterizó por

la presencia de diferentes representantes de la

familia Fabaceae visitadas por C. rodophthalma:

Adesmia glutinosa Hook & Arn. y Geoffroea

decorticans (Gill. ex Hook. et Arn.) Burk. en

Varillar; A. pedicellata Hook & Arn. en

Andacollito; A. monosperma Clos., A. pedicellata

Hook & Arn., más una Lamiaceae, Stachys

albicaulis Lindl., en Hurtado. Además en Varillar

y Hurtado se encontró A. argentea Meyen, que

no era visitada por la abeja y se usó como control.

En 20 hembras y 20 machos dese:

rodophthalma, recién muertos, fue medido el

largo total desde la base del mentón al extremo

de la glosa, ancho máximo del mentón, el largo

de la glosa y su ancho máximo en la base, con

pie de metro digital (precisión 0.3 mm).

Se analizó la estructura floral, el color y

diseño de las flores de las especies visitadas y la no

visitada y se midió el largo (1) y ancho máximo (a)

de la flor para obtener una proporción del tamaño

entre el largo y el ancho máximos (l/a).

Se midió la longitud de estandarte y nectario

de 20 flores de 2 especies visitadas frecuentemente

por la abeja: A. glutinosa y A. pedicellata; 3 especies

menos visitadas por C. rodophthalma en las áreas

de estudio: A. monosperma, Geoffroea decorticans

y Stachys albicaulis y 1 especie no visitada por la

abeja, A. argentea. De estas mismas flores se midió

el ángulo formado entre nectario y resto del

estandarte.

Se hizo un análisis de correlación entre la

longitud de las lenguas de C. rodophthalma y la

profundidad de las corolas de las plantas visitadas y

la no visitada por la abeja.

En terreno, se midió la capacidad volumétrica

de los nectarios de 20 ejemplares de las distintas

especies analizadas, con micropipeta Chempette

(Digital Micropipettor 1-5 1) durante 3 días, entre

10 y 18 horas, cada 2 horas, mientras los insectos

fueron excluidos de las flores.

Para corroborar la preferencia floral, el

polen de flores de A. glutinosa (Johnson 1984;

da Silveira 1991) fue fotografiado desde un

microscopio Leitz utilizando un aumento de 160x

y aceite de inmersión, para comparar con polen

obtenido desde celdillas de C. rodophthalma

(nido de la localidad de Varillar) y, de ese modo,

estimar el porcentaje de polen de Adesmia

presente en la celdilla, en relación a otros tipos

de polen. A través del área del campo visual del

microscopio, se contabilizó el número de granos

de polen de A. glutinosa y el número total de

Preferencia y manipulación de C. rodophthalma: Cutappa, E. ET AL.

granos de polen de otras especies de plantas (que

no fueron determinados específicamente).

En terreno se realizaron observaciones

sobre la manipulación de la abeja sobre la flor:

a) cuando iba sólo por polen y b) cuando iba sólo

por néctar.

RESULTADOS Y DISCUSION

En las zonas de estudio C. rodophthalma

se manifestó con tendencia oligoléctica y clara

preferencia en las visitas a un pequeño número de

especies vegetales de la familia Fabaceae, y

aunque había una abundante flora acompañante

en cada uno de los sitios, visitó particularmente

A. glutinosa en la localidad de Varillar y A.

pedicellata en Andacollito y Hurtado (Tabla I).

La flora de cada uno de los sitios se detalla en un

trabajo sobre nidificación de la especie.

Al examinar el polen que las hembras trasladan

a las celdillas para alimentar las larvas (nido de la

localidad de Varillar), se obtuvo como resultado la

presencia de un 50% de polen de A. eglutinosa versus

un 50% con la suma del resto de tipos de polen,

corroborando la preferencia por esa planta en Varillar.

Muy poco frecuentes fueron las visitas a

Geoffroea decorticans en Varillar y A. monosperma

y Stachys albicaulis en Hurtado. Estas observaciones

concuerdan con Toro et al. (1993) y Arroyo et al.

(1983), quienes describen estrechas relaciones

insecto-planta en zonas de alta selectividad por

condiciones ambientales estrictas, un evidente ajuste

entre períodos de floración y actividad de los

insectos asociados y restricciones en el rango de los

recursos, tanto para abejas como para plantas.

Las Fabaceae se caracterizan por una flor

papilionada en la que órganos sexuales y néctar se

encuentran notoriamente protegidos por pétalos

modificados, con un alto grado de ajuste en su

asociación con insectos que la visitan por néctar y

polen, los que deben enfrentarse a más de una barrera

para obtener recompensas. En relación a este

ajuste, fueron observadas conductas diferentes en

C. rodophthalma de acuerdo al tipo de recurso

explotado en Adesmia: en la colecta de polen (Fig.

la), las hembras se posan en la quilla y manipulan

activamente las estructuras florales, colocando las

patas dentro de la flor; en cambio, al ir por néctar

tanto machos como hembras asumen una posición

menos estrecha con la flor, abriendo la quilla con

el propio peso y dejando las patas posteriores fuera

de la flor mientras se alimentan (Fig. 1b). Estas

observaciones concuerdan con lo afirmado por

Westerkamp (1998), al otorgar un carácter pasivo

a la relación abeja-flor papilionada cuando forrajea

por néctar, y asumir una conducta más activa al

visitar las flores por polen. Estas diferentes

conductas, probablemente, tienen importancia en

la polinización de la planta, puesto que representan

vínculos más o menos estrechos con la flor, los que

determinan mayor o menor contacto con los

estambres, con el consecuente transporte de polen

de una planta a otra.

La longitud de la lengua fue correlacionada

positivamente con la profundidad de corola de todas

las especies de plantas (Tabla II), por lo que no

indica niveles de importancia en cuanto a

selección del recurso. Tampoco el tamaño de las

flores con rangos semejantes (Tabla III), ni la

capacidad volumétrica de los nectarios permitió

discriminar entre especies, puesto que las flores

visitadas y la no visitada registraron volúmenes

semejantes (0.2 - 0.4 mu). El color y el diseño de

las flores no son variables discriminatorias,

puesto que la flor no visitada es muy semejante

respecto a esos caracteres con las especies más

frecuentadas.

En la figura 2 se muestran las diferencias

importantes que fueron registradas en relación al

ángulo en que se dispone el nectario respecto del

resto del estandarte en las especies estudiadas. Para

las flores visitadas se registró un ángulo promedio

de 160° entre nectario y extremo superior del

estandarte (Fig. 2 a, b, c, e, f), en cambio para A.

argentea (Fig. 2d), especie no visitada, se obtuvo

un ángulo de 120° que, prácticamente, oculta el

nectario bajo el resto del pétalo, dificultando el

acceso de la probóscide de C. rodophthalma, a pesar

de su gran longitud.

CONCLUSIONES

Estas observaciones señalan que la

disposición y acceso al nectario son altamente

relevantes en la preferencia floral de la abeja,

determinando la elección de forrajeo de C.

rodophthalma en nuestra zona de estudio, sobre

A. glutinosa, A pedicellata, A. monosperma, G.

Gayana 64(2), 2000

decorticans y S. albicaulis, que comparten

características morfológicas similares.

Las barreras morfológicas de este tipo

presentan gran importancia en la medida que

deben ser superadas por los insectos para poder

obtener recompensas de las plantas y demuestran

que la información de la preferencia floral no

puede ser obtenida, simplemente, a través de una

lista de flores visitadas por una especie de insecto

en particular.

AGRADECIMIENTOS

Las autoras agradecen enormemente al Dr.

Emilio A. Ulibarri del Instituto de Botánica

Darwinion de Buenos Aires, Argentina, quien estuvo

siempre dispuesto a determinar las especies de

Adesmia. Agradecemos, además, a dos correctores

anónimos que mejoraron el manuscrito con valiosas

sugerencias.

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shrubsteppe bird populations. Ecological

Monographs 50:287-308.

TABLA I. Número de visitas diarias de C. rodophthalma a especies de plantas de tres localidades estudiadas.

TABLE I. Number of visits per day by C. rodophthalma to plant species at study sites.

Especies de plantas N° de flores visitadas por Centris en un día N° de arbustos

Andacollito Hurtado Varillar Observados

Adesmia argentea 0 0 0 2

Adesmia glutinosa 0 0 1051 al

Adesmia monosperma 0 100 0 6

Adesmia pedicellata 320 978 0 6

Geoffroea decorticans 0 0 2 1

Stachys albicaulis 0 3 0 ze

136

Preferencia y manipulación de C. rodophthalma: Cutappa, E. ET AL.

TABLA II. Análisis de correlación entre longitud de probóscide de C. rodophthalma y profundidad de corolas de

plantas presentes en área de forrajeo.

Table II. Correlations between length of proboscis in C. rodophthalma and corolla depth of plants present at study

sites.

Aes +8 Longitud de probóscide versus a y b

Especie de planta | a) estandarte + nectario | ve, b) sólo nectario __

A. argentea 0.935 0.983

A. glutinosa | 0.985 0.963

A. monosperma 0.971 | 0.968

A. pedicellata | 0.978 | 0.952

G. decorticans 0.898 | 0.974

S. albicaulis 0.988 | 0.983

TABLA IM. Rango y largo/ancho promedio, en mm, representando el tamaño de las flores estudiadas.

TABLE III. Length/width for flowers of study species (mean and range).

Especie de planta | Rango l/a X l/a

— A E

A. argentea 1.2 — 2.0 1.47

A. glutinosa 1.7 -. 2.4 2.02

A. monosperma 2.5 — 3.2 3.02

A. pedicellata 1.3 -1.9 62

G. decorticans 1.2 —- 2.2 1.50

S. albicaulis 2 3.35 2.78

FIGURA 1. Se puede observar a C. rodophthalma en la flor de Adesmia con posiciones características cuando:

a) con los 3 pares de patas dentro de la flor cuando va por polen; b) con el tercer par de patas colgando fuera de la

flor cuando va por néctar.

FIGURE 1. C. rodophthalma visiting Adesmia flower, showing characteristic positions when (a) extracting pollen,

with all three pairs of legs inside flower, and (b) extracting nectar, with the third pair hanging out of the flower.

137

Gayana 64(2), 2000

FIGURA 2. Vista lateral del estandarte y los nectarios de las flores estudiadas, donde se puede observar el ángulo que se

forma, especialmente agudo en A. argentea (d). a) Stachys albicaulis; b) Adesmia monosperma; c) Geoffroea

decorticans; d) A. argentea; e) A. pedicellata; f) A. glutinosa.

FIGURE 2. Lateral view of the nectares and banner of the studied flowers, where it can be appreciated the acute angle

formed in A. argentea (d). a) Stachys albicaulis; b) Adesmia monosperma; c) Geoffroea decorticans; d) A. argentea;

e) A. pedicellata; f) A. glutinosa.

Fecha de recepción: 06.03.2000

Fecha de aceptación: 07.08.2000

138

Gayana 64(2): 139-146, 2000

ISSN 0016-531X

CUATRO ENSAYOS ECOTOXICOLOGICOS PARA EVALUAR LINDANO

Y CLORPIRIFOS

FOUR ECOTOXICOLOGICAL ASSAYS TO EVALUATE LINDANE

AND CHLORPYRIFOS

José lannacone”, Lorena Alvariño”, Cecilia Caballero’ y Javier Sánchez'

RESUMEN

La evaluación de riesgos ambientales por productos

fitosanitarios es un componente de importancia en los

estudios de impacto ambiental en el sector agrícola. Se

evaluó la ecotoxicidad de los plaguicidas de suelo, lindano

y clorpirifos, sobre la mortalidad del oligoqueto Limnodrilus

hoffmeisteri (CL, 24h) y tres plantas, en las cuales se

observaron los siguientes efectos subletales: germinación

en Lactuca sativa (Cl, 96h), crecimiento de raíz en

Lycopersicon esculentum (CL, 96h) y clorosis, necrosis,

ruptura y formación de hojas nuevas en la lenteja de agua,

Lemna minor (CE,, 48h). En ambos agroquímicos se

observó en general el siguiente orden de ecotoxicidad

decreciente: Lycopersicon> Lemna> Lactuca > Limnodrilus.

En los tres ensayos con plantas se observó una mayor

toxicidad del organofosforado clorpirifos. Se analizan las

perspectivas de empleo, en el Perú, de estas herramientas

ecotoxicológicas para la evaluación de riesgos ambientales

por productos fitosanitarios.

PALABRAS CLAVES: Ensayo ecotoxicológico, evaluación

de riesgos ambientales, agroquímico, lindano,

clorpirifos, Limnodrilus, Lemna, Lycopersicon, Lactuca.

INTRODUCCION

Cada ano se aplican globalmente aproximada-

mente tres millones de toneladas de plaguicidas para

el control de plagas (Pimentel 1998). Algunos

quimicos agricolas persistentes, con un elevado

‘Laboratorio de Ecofisiologia, Facultad de Ciencias Na-

turales y Matemáticas, Universidad Nacional

FedericoVillarreal. Lima- Perú. Calle San Marcos 383,

Pueblo Libre, Lima 21- Perú. Telefax: 0514600930. E-

mail: joselorena Oterra.com.pe

ABSTRACT

The environmental risk assessments of phytosanitary prod-

ucts is a main subject in the studies of the impact assess-

ment in the agriculture areas. The ecotoxicity of the soil

pesticides lindane and chlorpyrifos was performed with:

the mortality in tubifids worm Limnodrilus hoffmeisteri

(LC,, 24h) and in three plants: seed germination assay in

Lactuca sativa (1C,, 96h), root elongation assay in

Lycopersicon esculentum (IC, 96h) and the duckweed test

in Lemna minor (EC,, 48h) (chlorosis, necrosis, colony

breakup and new fronds increased) sublethal effects were

analized. Both agrochemistries in general showed a de-

crease order of ecotoxicity: Lycopersicon> Lemna>

Lactuca > Limnodrilus. In the three plant bioassays were

seen a high toxicity to the organophosphate chlorpyrifos.

The perspectives of use of these phytosanitary products in

Peru, was analized for environmental risk assessment.

Keyworbs: Ecotoxicological assay, environmental risk

assessment, agrochemistry, lindane, chlorpyrifos,

Limnodrilus, Lemna, Lycopersicon, Lactuca.

coeficiente de partición octanol-agua (K, ), alcanzan

los cuerpos de agua y son transportados a todos los

niveles tróficos (Heckman 1982).

Una gran cantidad de literatura concerniente

a contaminación accidental de cursos de agua con

plaguicidas muestra la predominancia de reportes

relacionados con vertebrados, sin embargo, es

escasa la información disponible relacionada con

los efectos sobre los organismos no destinatarios,

es decir, que no son objetivos del control químico,

como la fauna de invertebrados, las macrófitas

acuáticas y las plantas terrestres (Kime 1996).

139

Gayana 64(2), 2000

El plaguicida organoclorado lindano y el

organofosforado clorpirifos afectan a las comunidades

biológicas planctónicas, como los copépodos y

cladóceros, y a las comunidades bentónicas acuáticas

y del suelo que no son destinatarios del control

químico (Racke 1992; Van Wyk & Hutchinson 1995;

Barron & Woodburn 1995; Fliedner & Klein 1996;

lannacone & Gutiérrez 1999).

En Perú, la Resolución Ministerial N* 15-95-

AG para el registro, comercialización y control de

plaguicidas y sustancias afines indica en su artículo

21 inciso f, que para el registro de un plaguicida se

requieren ensayos de toxicidad biológica en orga-

nismos acuáticos y terrestres (SENASA 1995).

En Perú, el lindano presenta registro para ocho

productos comerciales y el clorpirifos igualmente para

27 (SENASA 1995). Ambos agroquímicos son usados

principalmente en el control de plagas del suelo y se

encuentran entre los cinco plaguicidas de mayor uso

en Perú durante 1996 a 1998 (De la Rosa, Alicia,

comunicación personal). En los últimos diez años, el

clorpirifos cada vez se está empleando más en sanidad

vegetal y está reemplazando en su uso al lindano.

Por estas razones, es importante determinar el

nivel de riesgo ambiental de los plaguicidas lindano y

clorpirifos sobre diversos representantes del ecosistema

epicontinental acuático y del ambiente terrestre

utilizando bioensayos ecotoxicológicos (Calleja et al.

1994; Fliedner & Klein 1996; lannacone & Gutiérrez

1999). Entre ellos el oligoqueto dulce-acuícola

bentónico Limnodrilus hoffmeisteri, conocido por ser

muy resistente a la contaminación por metales pesados

(Brkovic-Popovic & Popovic 1977; Lucan-Bouché et

al. 1999), las semillas de las plantas terrestres Lactuca

sativa (lechuga) y Lycopersicon esculentum (tomate),

especies representativas de los agroecosistemas

hortícolas y con la macrófita acuática Lemna minor

(lenteja de agua), especie usada frecuentemente para

remover sólidos suspendidos, nutrientes y metales

pesados de cuerpos de agua contaminados (Wang 1990,

1991; Lewis 1995; Arambasic et al. 1995). Sin embargo,

el efecto de los plaguicidas lindano y clorpirifos sobre

estas cuatro especies no es bien conocido (WHO 1991;

Racke 1992).

La determinación de algunos aspectos de la

ecotoxicidad del lindano y clorpirifos empleando

bioensayos sencillos y prácticos para catalogar

toxicológicamente muestras ambientales contami-

nadas por plaguicidas contribuirá, en Perú, a tomar

medidas para disminuir la problemática del uso de

agroquímicos (Bodestein 1972; Kendall 1992).

140

Los objetivos específicos planteados en la

presente investigación fueron determinar la toxicidad

del lindano y clorpirifos sobre la mortalidad del

invertebrado Limnodrilus hoffmeisteri (CL,, 24h) y tres

plantas, en las cuales se observaron los siguientes

efectos subletales: ensayo de germinación en Lactuca

sativa (Cl, 96h), crecimiento de raíz en Lycopersicon

esculentum (CL, 96h) y el ensayo con lenteja de agua,

Lemna minor (CE,, 48h) (clorosis, necrosis, ruptura y

formación de hojas nuevas).

MATERIALES Y METODOS

Limnodrilus hoffmeisteri

Las formas juveniles del oligoqueto tubificido,

Limnodrilus hoffmeisten, se obtuvieron de cultivos masivos

de los acuarios “Cleo” — Lima-Perú. La especie fue

identificada a nivel del estadio adulto usando las

ilustraciones de Streble & Krauter (1987). L. hoffmeisteri

se crió masivamente en el laboratorio en placas petri

grandes de 20 cm x 20 mm en un medio a base de hojas de

cereal® (Cereal Leaves), siguiendo la metodología descrita

por APHA (1995), con el fin de obtener juveniles con tallas

menores de 20 mm, por su mayor sensibilidad, siguiendo

las recomendaciones de Fargasova (1994) para otro

oligoqueto Tubifex tubifex. El agua usada para el ensayo

biológico consistió en un medio con agua desionizada y

una solución amortiguadora fosfato a pH 7. Las pruebas

ecotoxicológicas con los oligoquetos se realizaron con

cohortes de 240 especímenes de L. hoffmeisteri de 20 + 2

mm de longitud que se obtuvieron del envase de cultivo

masivo y se realizaron bajo condiciones de oscuridad para

evitar el efecto de fotólisis (Calow 1993). Las lecturas se

realizaron en placas de petri de 100 x 15 mm en ensayos

estáticos a 24 h de exposición. El indicador de la prueba

de mortalidad fue la inmovilización de los especímenes al

ser pinchados con un alfiler entomológico, durante 10

segundos de observación bajo la accion del microscopio

estereoscopico, según el criterio estándar propuesto por

Fargasova (1994).

Lactuca sativa y Lycopersicon esculentum

Las semillas de Lactuca sativa y Lycopersicon

esculentum fueron obtenidas en sobres de 500

semillas de la Feria Agropecuaria de la Universidad

Nacional Agraria La Molina (UNALM), Lima-Perú.

Las semillas de L. sativa variedad Capitata y L.

esculentum variedad Rio Grande, antes de su empleo

Cuatro ensayos ecotoxicológicos: IANNACONE, J. ET AL.

en ensayos ecotoxicológicos fueron mantenidas en

condiciones de oscuridad y a temperaturas de 6°C

para inhibir su germinación y mantener su fertilidad,

según el criterio propuesto por Wang (1991). Se

descartaron las semillas dañadas y se utilizaron las

de un mismo lote y tamaño. Para la desinfección de

las semillas, se realizó un pretratamiento con una

solución de lejía Clorox® diluida al 3,33 g OCI/L,

20 min (APHA 1995). L. sativa y L. esculentum se

evaluaron en bioensayos estáticos utilizando un total

de 5 semillas/envase, con cuatro repeticiones. El agua

utilizada para los ensayos biológicos consistió en

una solución hidropónica con las características

descritas en la Tabla I. La prueba fue realizada bajo

condiciones de oscuridad. Los envases de

experimentación utilizados fueron placas de petri de

100 x 15 mm con papel filtro Whatman #1. Se

agregaron 5 ml del plaguicida/envase. La duración

de la prueba fue de 96 h. Los indicadores para el

control fueron la germinación de semilla con

crecimiento de radícula de 5 mm o más.

Lemna minor

La lenteja de agua Lemna minor se colectó de

la laguna terciaria de 1 ha de la Planta de Aguas

Residuales domésticas de San Juan de Miraflores,

ubicado a 14 km al sur del departamento de Lima-

Perú. En esta agua se determinaron los niveles de

metales pesados, encontrándose en todos los casos

valores muy por debajo de los límites máximos

permisibles de la legislación peruana vigente (Ley

17752). La lenteja de agua L. minor se crió

masivamente durante dos semanas antes del inicio de

la prueba (Wang & Williams 1990), en un acuario de

60 cm largo x 30 cm de ancho x 30 cm de alto con

sales nutritivas, según recomendaciones de APHA

(1995). Para 10 L de la solución de cultivo de “lentejas

de agua” en agua destilada se prepararon las soluciones

nutritivas A, B y C (Tabla I). Se agregó 1 ml de cada

solución madre a 100 ml de agua desionizada.

Posteriormente se ajustó el pH entre 7,7 a 8,0. En el

acuario se usó una profundidad del agua mayor de 60

mm y se proveyó de un fluorescente de luz blanca de

4300 lux. La temperatura para las crianzas se mantuvo

a 28 + 1°C (Taraldsen & Norberg-King 1990).

La lenteja de agua L. minor se evaluó en

bioensayos semiestáticos utilizando un total de 12

especímenes/envase, con cuatro repeticiones. Los

especímenes utilizados contenían dos hojitas de

aproximadamente el mismo tamaño. Las pruebas se

realizaron bajo condiciones de luz continua de 4300

lux. Los envases de experimentación utilizados

fueron vasos de vidrio de 80 x 50 mm. Se agregaron

25 ml del plaguicida/envase disuelto en solución

nutritiva. La duración de la prueba fue de 48 h. Las

lecturas finales de los cuatro efectos subletales, que

incluían formación de hojitas nuevas, clorosis (50%

de pérdida de pigmento), necrosis (50% de tejido

muerto) y ruptura de colonias, fueron realizadas bajo

el microscopio estereoscopico a 4x de aumento para

la evalua ción de síntomas.

Taba I. Componentes de la solución nutritiva para el cultivo de Lemna minor y los bioensayos de las semillas

terrestres con las plantas estudiadas.

TabLe I. Compounts of nutritive solution for culture Lemna minor and terrestrial seeds bioassays with the plants studied.

Solución Concentración de la

sl ib Solución Stock

NaNO, SNS g/L

NaHCO, 15,0 g/L

K,HPO, 1,04 g/L

CaCl -ZH-O 4,41 g/L

MgCl, — 57 e/L

FeCl, 0,096 g/L

Na,EDTA:2H,O 0,3 g/L

MnCl, . 0,264 = g/L

MgSO,'7H,O 14,7 g/L

HBO, 0,186 = g/L

Na,M0O '2H,0 7,26 mg/L

ZnCl, 3,27 mg/L

CoCl, 0,78 mg/L

CuCl, 0,009 = mg/L

Elemento Concentración

Final als

N 42,0 mg/L

Na 110,0 mg/L

K 4,69 mg/L

P 1,86 mg/L

Ca 12,0 mg/L

Mg 29,0 mg/L

Fe 0,33 mg/L

Mn 1,15 mg/L

Sl AU mg/L

B 325 ug/L

Mo 088 1 "|

Zn 577 ug/L |

Co 3,54 pg/L

Cu 0,04 ug/L

141

Gayana 64(2), 2000

FisICO-QUIMICA DEL AGUA

El oxígeno disuelto se determinó usando el

método Winkler al inicio del ensayo (APHA 1989)

y los valores pH se midieron en dos réplicas al

inicio del ensayo, estandarizándose a 7 + 0,5. Los

bioensayos se realizaron a una temperatura de 25

1106

SUSTANCIAS QUÍMICAS

Los plaguicidas empleados fueron lindano

1,5% P (Kuro wanuchiq®) y clorpirifos 2,5 PS

(Lorsban®). El lindano presentó las siguientes

propiedades fisicoquímicas (solubilidad en agua=

7300 ug/L a 25°C; presión de vapor= 5,6 mPa a

20°C; tiempo de vida media en el suelo= 15 meses;

logK, =4,82; logK =2,96) y lo mismo para el caso

del clorpirifos (solubilidad en agua= 2000 ug/L a

25°C; presión de vapor= 2,5 mPa a 20°C; tiempo

de vida media en el suelo= 12 meses; logK = 4,99;

logK_=4,13). Las dos sustancias químicas se

disolvieron al 1% en agua desionizada (pH= 7,12;

conductividad especifica= 70 úmhos/cm), usando

como solvente acetona al 99%, grado analítico

(0,5% v/v) (Calleja & Persoone 1993). Para todos

los bioensayos se incluyó una concentración

con la máxima cantidad de acetona empleada.

En el caso de L. hoffmeisteri para el ensayo

definitivo con lindano se emplearon las siguientes

concentraciones 150 ug/L, 300 ug/L, 600 ug/L,

1200 ug/L y 2500 ug/L y para el clorpirifos 50

ug/L, 100 ug/L, 500 ug/L y 1250 ug/L y 2500 ug/

L. Para el ensayo definitivo con lindano con

ambas semillas terrestres, se emplearon las

siguientes concentraciones 25 ug/L, 250 ug/L y

2500 ug/L y para el clorpirifos 15 ug/L, 150 ug/L

y 1500 ug/L. Finalmente, en el bioensayo con

L.minor para el lindano, se emplearon las

siguientes concentraciones definitivas 9,375 ug/L,

37,5 ug/L, 150 ug/L, 600 ug/L y 2400 ug/L y para

el clorpirifos 3,9 ug/L, 15,62 ug/L, 62,5 ug/L, 250

ug/L y 1000 ug/L.

DISENO EXPERIMENTAL Y TRATAMIENTO ESTADISTICO

Las pruebas de toxicidad aguda para L.

hoffmeisteri y las respuestas subletales para L. minor

se evaluaron en cinco concentraciones nominales

con cuatro réplicas, mas el control, en un Disefio en

142

Bloque Completamente Randomizado (DBCR): 6

x 4. La eficacia de los tratamientos se evaluó a

través de un Análisis de Varianza (ANDEVA) de

una vía, previa transformación de los datos a

raíz cuadrada del arcoseno. En el caso de existir

diferencias significativas entre las réplicas se

realizó una prueba de Tukey (Norman &

Streiner 1996). Para el caso de L. minor se

calculó la respuesta subletal promedio de los

cuatro parámetros evaluados. Las CL(E),,s se

calcularon usando un programa computarizado

de la EPA Probit (EPA, Environmental Protection

Agency de los EE.UU. version 1.5). El modelo

de regresión fue verificado usando el estadís-

tico Chi-cuadrado (Martin € Holdich 1986).

Para el caso de las semillas de “tomate” y

“lechuga” se usó un DBCR: 4x4. Para los ensayos

fitotóxicos con semillas se empleó el método de

interpolación lineal para toxicidad subletal,

calculando la concentración de inhibición (CI, y

CI,,) con el paquete estadístico de la EPA

(versión 2.0, 1993).

RESULTADOS

La Tabla II muestra los valores comparativos

para los puntos finales en los cuatro ensayos

ecotoxicológicos, observándose en los tres

ensayos con plantas: L.sativa, L. esculentum y L.

minor (respuesta promedio), que el clorpirifos es

más tóxico que el lindano, a excepción del ensayo

con L. hoffmeisteri. Para ambos plaguicidas, en

general, se observó el siguiente orden de

ecotoxicidad decreciente: Lycopersicon > Lemna

(respuesta subletal promedio) > Lactuca >

Limnodrilus. Si sólo se toma el parámetro en L.

minor, de formación hojas nuevas en una secuencia

de ecotoxicidad decreciente, entonces esta última

pasa a ser el bioensayo más sensible. La respuesta

subletal de ruptura de colonia en L.minor es muy

diferente entre lindano y clorpirifos, siendo este

último agroquímico 1496 veces mas tóxico que el

lindano. Estas mismas diferencias se observan en

la inhibición del crecimiento de raíz de L.

esculentum, siendo el clorpirifos 36 veces más

tóxico que el lindano (Tabla ID.

Cuatro ensayos ecotoxicológicos: IANNACONE, J. ET AL.

TABLA II. Valores comparativos de CL(E)(I) para cuatro ensayos ecotoxicológicos para la evaluación del lindano y

clorpirifos.

TabLE II. Comparative values of L(E)(I)C for four ecotoxicological assays to evaluate lindane and chlorpyrifos.

Ensayo ecotoxicológico: |

L. esculentum (96h) (crecimiento de raíz)

Lemna minor (48h) (formación de hojas nuevas)

Lemna minor (48h) (clorosis)

Lemna minor (48h) (necrosis)

Lemna minor (48h) (ruptura)

Lemna minor (48h) (respuesta promedio)

EL,

(96h)

| Limnodrilus hoffmeisteri (mortalidad)

Lactuca sativa (germinación) 1750

Lindano Clorpirifos

(ug/L) ll Ticas a AE 1

CL, CL,, CE, CL, CL, CL,, CE,,

(24h) (48h) (96h) (24h) (48h)

1501 ey LIOS= 2 TRS

1050

960 26,78

14,64 10,41

150 pile)

437 662

4907 3,28

7 229

DISCUSION

Los oligoquetos se encuentran entre los

invertebrados bentónicos más comunes en los

ecosistemas dulceacuícolas. Muchas de estas

especies son reconocidas como indicadores de

calidad ambiental. En ambientes acuáticos altamente

contaminados, los oligoquetos dominan la fauna

bentónica, alimentándose principalmente de

bacterias (APHA 1995). Entre los oligoquetos

dulceacuicolas los tubificidos como L. hoffmeisteri,

T. tubifex y Branchiura sowerbyi han sido utilizados

en pruebas de ecotoxicidad (Khangarot 1991;

Fargasova 1994). En nuestro caso, de los cuatro

ensayos comparados, L. hoffmeisteri fue en general

menos sensible para ambos plaguicidas (Tabla II).

Meller et al. (1998), empleando L. hoffmeisteri y T.

tubifex en ensayos agudos de 72 h con lindano,

encontró poca sensibilidad de esta especie al ser

comparado con otros organismos componentes del

bentos dulceacuícola y por lo tanto altamente

tolerable a los efectos letales del lindano. L.

hoffmeisteri, en ensayos de toxicidad aguda de 96 h

de exposición con lindano, ocupó el último lugar

entre 13 ensayos con invertebrados (CL, =430 ug/

L) (WHO 1991). En nuestro caso, la respuesta fue

aguda a 24 h de exposición y por lo tanto, una menor

sensibilidad a ambos plaguicidas (CL, = 1501 ug/L,)

(Tabla II). Sin embargo, Keddy et al. (1995) y Sibley

et al. (1997) recomiendan los tubificidos para la

evaluación de sedimentos dulceacuícolas en ensayos

reproductivos crónicos de 28 días de duración a bajas

concentraciones de los contaminantes. Barron y

Woodburn (1995), al evaluar la ecotoxicología del

clorpirifos, señalan que los organismos acuáticos,

como los tubificidos, son tolerantes a este agroquí-

mico. Un parámetro detectado durante las lecturas

de mortalidad en L. hoffmeisteri es que en las más

altas concentraciones se presentó una gradual

estrangulación de los últimos segmentos corporales,

lo cual ha sido observado en T. tubifex, como un

mecanismo de adaptación a medios altamente

contaminados (Lucan-Bouche et al. 1999).

Las pruebas de fitotoxicidad empleando

plantas terrestres no son frecuentemente usadas en

ecotoxicología (Wang 1991). Las tres características

más importantes de los ensayos con plantas terrestres

son: que se les puede usar con muestras coloreadas

o turbias, en ensayos estático, semiestático y de flujo

continuo y con un mínimo costo de mantenimiento

en el laboratorio (Wang 1991). El empleo del tomate

Lycopersicon esculentum y de la lechuga Lactuca

sativa como herramientas ecotoxicológicas es

ventajoso, por requerirse poco volumen de muestra

(5-7 mL/envase), comparado con otros organismos

acuáticos que requieren de 50 a 200 mL/envase

(Arambasic et al. 1995). Los ensayos de fitotoxicidad

con semillas son simples, versátiles y útiles para

evaluar la toxicidad de aguas y sedimentos (Walsh

et al. 1991). Ambas especies han sido recomendadas

por la USEPA y por la FDA (Administración de

Drogas y Alimentos), encontrándose entre las más

sensibles, en comparación con otras seis especies

de semillas de plantas terrestres (Wang 1991).

143

Gayana 64(2), 2000

El ensayo ecotoxicológico con semillas de tomate

presenta algunas ventajas sobre el de lechuga,

debido a que el tomate germina más rápido y

presenta un mayor crecimiento de raíz, lo que

permite usar cuantitativamente este parámetro.

Wang (1991) indica que el crecimiento de raíz como

punto final de lectura es más sensible a la toxicidad

que la germinación de semillas. Además, el tomate

es más sensible a los tóxicos que las semillas de

lechuga. Calow (1993) presenta un resumen de los

protocolos de bioensayos de germinación de

semilla y de elongación de raíz con diferentes

especies de plantas, siendo comparables a nuestro

protocolo, con una variante en la duración de las

pruebas que son de 120 h y en nuestro caso, de 96

h, lo que podría acortar en un día el bioensayo

ecotoxicológico. Además, las evaluaciones de

compuestos orgánicos como los plaguicidas

empleados en el presente estudio es preferible

realizarlos en condiciones de oscuridad para evitar

su rapida fotodegradabilidad (Calow 1993). La

sensibilidad de las especies al clorpirifos varía

considerablemente a través de reinos y filas, siendo

las plantas ligeramente más tolerantes (Barron &

Woodburn 1995).

L. minor es una pequeña macrófita ampliamente

distribuida en ambientes dulceacuícolas en zonas

tropicales y temperadas (APHA 1995). Debido a que

presenta un crecimiento más rápido en comparación

con otras plantas fanerógamas y presenta un rol

fundamental en los ecosistemas acuáticos como

productora de oxígeno, en los ciclos biogeoquímicos,

en el control de la calidad del agua, en la estabilización

de nutrientes, en ser un soporte físico para una

variedad de invertebrados y en proveer habitats para

la vida acuática, principalmente peces (Lewis 1995).

Esta especie ha sido empleada por su sensibilidad y

simplicidad en bioensayos en el laboratorio, así como

por emplear un método simple y no destructivo

(Taraldsen & Norberg-King 1990; Wang & Williams

1990; Bengtsson & Triet 1994). Calow (1993) presenta

un resumen de las características experimentales en

varias pruebas de toxicidad con lenteja de agua, cuyas

condiciones son muy semejantes a las nuestras, pero

con tiempos de exposición entre 96 h a 168 h, sin

embargo, en nuestro caso, la duración del bioensayo

fue de 48 h, ya que experimentalmente se observaron

en ese tiempo los efectos subletales esperados. Wang

(1991) indica que el tiempo de duplicación del

número de hojas de L.minor es aproximadamente de

144

1,4 días, por lo que el tiempo de 48 h es suficiente

para este parámetro de lectura final. El punto final

subletal es de cuatro parámetros, cuya sensibilidad

en orden decreciente sigue la siguiente secuencia para

el lindano: formación de hojas nuevas > clorosis >

necrosis > ruptura de colonia. En contraste, este último

parámetro de evaluación en el caso del clorpirifos pasa

a ser el más sensible con la siguiente secuencia en

orden de ecotoxicidad decreciente: ruptura de colonias

> formación de hojas nuevas > clorosis > necrosis.

Calow (1993) señala como parámetro de efecto más

sensible en Lemna spp., el número de nuevas hojas

formadas, el cual en nuestro caso mostró una alta

sensibilidad (Tabla II). De los cuatro parámetros

evaluados para el ensayo con L. minor, el lindano

mostró un mayor efecto tóxico en la clorosis y la

necrosis; en cambio, el clorpirifos en la formación de

hojas nuevas y la ruptura de colonias (Tabla II). Esto

indica efectos y mecanismos de acción diferentes en

las respuestas subletales en L. minor por ambos

agroquímicos empleados. lannacone y Gutiérrez

(1999) muestran para el bioensayo con las raíces de

Allium cepa, características morfológicas diferentes

bajo la acción de estos dos agroquímicos. Bajo la

acción del lindano se observa un ápice notoriamente

grueso, raíces encorvadas y con nódulos; en cambio

con el clorpirifos, las raíces son largas y delgadas y

algunas encorvadas.

Los resultados obtenidos de las semillas de

tomate y lechuga, y del ensayo con la lenteja de

agua concuerdan con el bioensayo del nematodo

Panagrellus redivivus y de la microalga Chlorella

vulgaris, pero no con el ensayo de A. cepa, debido

a que se observa una mayor toxicidad en los dos

primeros al clorpirifos y en el último al lindano

(lannacone & Gutiérrez 1999).

En Perú, el reglamento sobre el registro,

comercialización y control de productos fitosani-

tarios nos muestra que para el registro de un

agroquímico se requieren datos de ensayos

toxicológicos y ambientales con información

científica reciente, que demuestren que estos

compuestos no son peligrosos para el ambiente

(SENASA 1995). La Ley de Promoción del Manejo

Integrado para el Control de Plagas (Ley 26744-

1997) indica, en su artículo cinco, la prohibición

en uso, fabricación e importación del lindano, si es

que para el año 2000 no cuenta con un Estudio de

Impacto Ambiental (EIA) aprobado por la autoridad

competente.

Cuatro ensayos ecotoxicológicos: IANNACONE, J. ET AL.

De esta forma el empleo de procedimientos

estandarizados aprobados por la EPA (Agencia de

Protección Ambiental de los EE.UU.), adaptados a

las especies locales, pueden emplearse como

equivalentes ecológicos de cada latitud, es decir

especies que cumplan el mismo rol trófico en

ecosistemas diferentes, lo cual es muy necesario para

la protección de los recursos biológicos y evitar el

deterioro ambiental (lannacone & Alvariño 1998).

CONCLUSIONES

Para el lindano se observó el siguiente orden

de ecotoxicidad decreciente: Lycopersicon

esculentum (Cl, 96 h= 961 ug/L) > Lemna minor

(respuesta subletal promedio) (CE,, 48 h= 1377

ug/L) > Limnodrilus hoffmeisteri (CL, 24 h=

1501 ug/L) Lactuca sativa (CL, 96 h=1750 ug/L).

Para el clorpirifos se observó el siguiente orden

de ecotoxicidad decreciente: L. esculentum (CI,,

96 h= 26,78 ug/L) > L. minor (respuesta subletal

promedio) (CE,, 48 h= 222 ug/L) > L. sativa (CL,

96 h= 1050 ug/L) > L. hoffmeisteri (CL, 24 h=

1703 ug/L). Si es que se toma sólo la respuesta

de formación de hojitas nuevas en el ensayo con

L. minor, ésta es más sensible al lindano (Cl, 48

h= 14,64 ug/L) y al clorpirifos (CL, 48 h= 10,41

ug/L) que los otros tres PlosAsayos: En los tres

ensayos con plantas: L. esculentum (Cl, 96 h),

L. minor (respuesta subletal promedio) (CE, 48

h) y L. sativa (Cl,, 96 h) se observó una mayor

toxicidad por el clorpirifos. En cambio para el

oligoqueto L. hoffmeisteri (CL,, 24 h) presentó

una mayor toxicidad al lindano. En el ensayo con

L. minor, el lindano, para la clorosis (CE,, 48 h=

150 ug/L) y necrosis (CE,, 48 h= 437 ug/L)

resulto ser más tóxico y para la formación de

hojas nuevas (CI,, 48 h= 10,41 ug/L) y ruptura

de colonias (CE,, 48 h= 3,28 ug/L), el clorpirifos.

AGRADECIMIENTOS

Agradecemos al Ing. Benjamín Rey

(Agrícola SAUME) por su cooperación en la

obtención de los plaguicidas. A la Dra. Jeannette

Silva (Universidad de Concepción, Chile) por sus

valiosas críticas al manuscrito. A la botánica

M.Sc. María Isabel La Torre Acuy del Laboratorio

de Ecofisiología de la Universidad Nacional

Federico Villarreal (UNFV) por la identificación

de la macrófita aquática como Lemna minor.

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ISSN 0016-531X

DESCRIPCION DE LOS ESTADOS PREIMAGINALES DE HEMIEUXOA

CONCHIDIA (BUTLER)

DESCRIPTION OF PREIMAGINAL STAGES OF HEMIEUXOA CONCHIDIA

(BUTLER)

Miguel Louis-Maldonado! y Rubén Badilla?

RESUMEN

Se describen los estados preimaginales (huevo, larva y

pupa) de Hemieuxoa conchidia (Butler). Se ubican en

las claves de Angulo y Weigert 1975 para larva y pupa y

en Angulo y Weigert 1977 para huevo. Se incluyen

figuras.

"PALABRAS CLAVES: Chile, clave, Hemieuxoa conchidia,

inmaduros, huevo, larva, pupa, Lepidoptera.

INTRODUCCION

El imago de Hemieuxoa conchidia fue

descrito por primera vez por Butler 1882 (Bartlett

1894) como Hadena conchidia Butler, incluida

en la familia Hadenidae (sensu stricto Butler

1882). Posteriormente, Hampson en 1903 ubica

en el género Lycophotia Hiibner y la cambia a la

subfamilia Agrotinae (actualmente Noctuinae),

de la familia Noctuidae. Forbes 1933 hace la

descripción de la genitalia del macho y la incluye

en el subgénero Hemieuxoa, dentro del género

Peridroma Hiibner. Actualmente en el catálogo

de Poole 1989 aparece en el género Hemieuxoa

Mc. Dunnough, quedando hasta la fecha la nueva

combinación como Hemieuxoa conchidia

(Butler).

¡Universidad de Alicante. Alicante. España. E-mail:

mlm10@alu.ua.es

“Servicio Agricola y Ganadero. Isla de Pascua. Chile.

ABSTRACT

Preimaginal stages (egg, larvae and pupae) of Hemieuxoa

conchidia (Butler) are described. Larvae and pupae are

added to the key of Angulo and Weigert 1975, and eggs

are added to the key of Angulo and Weigert 1977. Figures

are illustrated.

Keyworbs: Chile, key, Hemieuxoa conchidia, immatures,

eggs, larvae, pupae, Lepidoptera.

En Angulo y Weigert 1975 esta especie

aparece dentro de los lepidópteros nóctuidos de

importancia económica en Chile. Sin embargo,

la especie descrita ahí como Pseudoleucania

conchidia (Butler) corresponde en realidad a P.

ferruginescens (Butler) (Andrés O. Angulo com.

pers. 1999). De ahí la importancia de la

descripción de sus estados preimaginales debido

a los hábitos fitófagos de su estado larval.

MATERIAL Y METODOS

El material utilizado para realizar las

descripciones se obtuvo de oviposturas en

laboratorio a partir de ejemplares provenientes del

sector La Mina, Talca (900 ms.n.m.). El análisis de

las microestructuras del huevo, larva y pupa fue

realizado mediante fotografías obtenidas en el

Microscopio Electrónico de Barrido Autoscanning

ETEC, de la Universidad de Concepción. La

nomenclatura utilizada para la quetotaxia larval

fue la propuesta por Stehr 1987, excepto para el

147

Gayana 64(2), 2000

labro en que se siguió a Peterson 1959.

ABREVIATURAS USADAS

148

- Segmentos abdominales 1-10

: Seta anterior 1, 2, 3

: Abertura anal

: Abertura genital

: Setas adfrontales 1-2

: Poro adfrontal

: Abertura del ovipositor

: Setas del clípeo 1-2

: Ceratoteca

: Cremáster

: Seta dorsal 1-2

: Espiráculo

: Espiritrompa

: Seta frontal 1

: Poro frontal

: Frente

: Seta lateral 1-3

: Setas laterales del labro 1-3

: Setas mediales del labro 1-3

: Poro mediodorsal

: Setas mediodorsales 1-3

: Poro genal

: Seta genal 1

: Seta táctil ventral 3

: Notum 1-3

: Ojo

: Poro

: Seta posterodorsal 1-2

: Poro posterodorsal a

: Poro posterodorsal b

: Palpo labial

: Podoteca

: Seta primaria posterior 1

: Pteroteca

: Sete estematal 1-2

: Poro estematal a

: Poro estematal b

: Sensilas

: Seta subdorsal 1-2

: Setas subestematales 1-3

: Poro subestematal

: Seta subventral 1-4

: Segmento torácico 1-3

: Seta ventral 1

: Setas táctiles dorsales 1-2

RESULTADOS

Hemieuxoa conchidia (Butler)

(Figs. 1-2)

Huevo (Figs. 3-5)

Forma subpiramidal desde una vista lateral, de

color rosa tenue recién ovipuesto. Mide 0.47 mm de

altura y 0.60 mm de diámetro aproximadamente (n=6).

Costas longitudinales o radiales en número de 29 (Fig.

3), muy notorias, dispuestas regularmente, comenzando

a la mitad del segmento inferior del huevo y

disminuyendo en número (a menos de la mitad de las

costas) al llegar a la mitad del segmento superior. Las

costas longitudinales que quedan convergen hacia

el polo apical del huevo. Costas transversales

cortando perpendicularmente a las longitudinales,

poco notorias en la mitad inferior, más marcadas

las que se aproximan al polo apical. La separación

entre costas transversales es más o menos constante.

Aeropilas (Fig. 5) dispuestas sobre las costas

longitudinales, en los nodos con las costas transver-

sales, y limitadas a la zona apical, comenzando

después de la roseta secundaria y termina en el

segundo ciclo de sectores interradiales. Area micro-

pilar (Fig. 4) dispuesta en el ápice, presenta una

roseta primaria bien definida, formada por 14 celdas

libres e iguales, y rodeada por un reborde muy

marcado que la eleva de la superficie del huevo y

una roseta secundaria poco definida, formada por

18 celdas desiguales. El ancho de las rosetas

secundarias es cuatro veces mayor que el de las

primarias. Fórmula micropilar: 14:18.

MATERIAL EXAMINADO: 6 huevos ovipuestos en

laboratorio.

Larva (Figs. 6-10, 17-21)

PATRÓN DE COLORACIÓN: Tegumento rojizo apagado

(terracota), con ornamentaciones pequeñas y tenues

castaño claras. Escudo cervical con manchas castaño

oscuro y dividido en la zona medio dorsal por una

línea sin diseño. Escudo anal con ornamentaciones

castaño oscuro. Espiráculos castaño claros rodeados

de marrón muy oscuro. Cabeza castaño clara con una

franja de bordes irregulares y poco definidos de color

castaño oscura que se extiende, desde la parte

Preimaginales de Hemieuxoa conchidia (Butler): Louis-MALDONADO, M. y R. BADILLA

posterior de L1 hasta el ocelo 3; otra franja más oscura

que la anterior, en el área adyacente a la sutura frontal

que termina tras la seta P2. Puntos de inserción de las

setas color marrón oscuro. Crochets castaño oscuros.

Mandíbulas castaño muy oscuro.

MORFOLOGÍA: Longitud del cuerpo 30 mm + 3 mm:

ancho máximo 5,4 mm (n=2). Larva con trece

segmentos, los torácicos con un par de patas cada uno,

y los abdominales con cuatro pares de espuripedios

entre el tercer y sexto segmento y un par de espuripe-

dios anales en el décimo segmento. Tegumento liso,

sin ornamentaciones epidérmicas, no corrugado. Setas

corporales y cefálicas simples. Pináculas inconspicuas

O ausentes.

Cabeza hipognata (Figs. 6 y 18), con todas

las setas y puncturas presentes; área ocular (Figs. 7

y 21) con los ocelos dispuestos en forma de 2

invertido. Al, A2 y A3 forman un ángulo recto y Sl,

S2 y S3 un triángulo equilátero. Seta ocular Sl

adyacente y en posición posterior a la recta que une

los ocelos 4 y 6. Ocelos 4, 5 y 6 formando un ángulo

recto; el ocelo 6 junto con Sa, S3 y MGa forman una

línea recta. La línea que une los ocelos 3 y 6 pasa

por la base de Sl. Sutura adfrontal no alcanza el

seno epicraneal y es, aproximadamente, la mitad de

larga que la sutura epicraneal.

Labro con todas las setas y puncturas presentes.

Mandíbula (Figs. 19-20) con 5 dientes bien

diferenciados (vista externa). En la cara interna, en el

borde posterior, se aprecia un sexto diente de menor

tamaño. Hay dos setas en la cara dorsal y tres

prominencias subglobosas, muy poco elevadas, en

la cara ventral.

Primer segmento (Fig. 17) torácico, con las

setas D1, D2, XD1 y XD2 en el escudo cervical, SD]

y SD2 inmediatamente bajo el escudo cervical. L1 y

L2 por delante del espiráculo (Fig. 8) y en el mismo

tubérculo setígero. SV2 y SV 1 ubicadas en línea recta

horizontal sobre la coxa y en el mismo tubérculo

setigero. MV3 junto a la coxa en la región anterior y

V1 en la posterior. Los dos poros entre XD2 y XDI,

y entre XD1 y D1 presentes. Ausencia de L3.

Segundo y tercer segmentos torácicos con D1,

D2 y SD2 en línea recta vertical. SD1, L3 y L1 forman

un ángulo recto, y L2 debajo de L1. SV1 sobre la

coxa, MV3 y V1 junto a ésta, en posición anterior y

posterior respectivamente. Ausencia de MV1 y MV2.

En el primer y segundo segmentos abdomi-

nales D1, D2 y SD1 forman un ángulo recto. Ll

en posición inmediatamente posterior al espirácu-

lo y L2 bajo el espiráculo, de forma que una línea

entre SD1 y L2 proyectada pasa por el espiráculo.

SV1, SV2 y V1 forman un triángulo isósceles con

el ángulo agudo en la parte superior con SV1 como

vértice. Ausencia de L3.

En los segmentos abdominales tercero al

sexto D1, D2 y SD1 forman un ángulo recto. Ll

tras el espiráculo y L2 bajo el espiráculo. L3 en

la zona posterior superior del espuripedio. SV1,

SV2 y SV3 forman un triángulo con SV2 en el

ángulo superior. V1 ubicada en la cara interior

del espuripedio. Ausencia de MV3, SD2 y MDI.

En el séptimo segmento abdominal, D1, D2

y SD1 forman un ángulo recto. L2 bajo el espiráculo,

forman con Ll una recta ligeramente oblicua,

ascendente hacia atrás, que no llega a la altura del

espiráculo. L3, SV1 y V1 en línea recta vertical. La

recta que une L2 y SDI pasa por el espiráculo.

Ausencia de SV2 y MV3.

Octavo segmento abdominal con igual

quetotaxia que el séptimo, pero con la diferencia que

L1 se encuentra a la misma altura que el espiráculo.

Noveno segmento abdominal con D2, Dl y

SD1 forman un ángulo recto y Ll está presente en la

mitad del segmento. Las demás setas están ausentes.

En el décimo segmento abdominal, D1, D2,

SD1 y SD2 forman una figura romboidal sobre el

escudo anal. SV4 y V1 forman una recta vertical

anterior al espuripedio anal. L3, L1 y L2 forman un

ángulo recto. SV2 y SV3 se ubican en el borde

anterior del espuripedio anal, y PP1 y SV1 en el

borde posterior. Poro sobre L1 presente.

Espuripedios abdominales con 14 a 24

crochets (Figs. 9-10), los anales con 23 a 26 (n=3).

Crochets con forma de gancho semicurvado, unise-

riales, uniordinales y de disposición homoidea.

Tubérculos setígeros no siempre presentes

y cuando existen varían en tamaño.

MATERIAL EXAMINADO: 3 larvas criadas en laboratorio.

Pura (Figs. 11-16)

De tipo obteca y desnuda. Longitud 15.5

mm, ancho máximo 4.6 mm (n=3). Tegumento

liso, de color amarillo pálido en el abdomen y

castaño oscuro en el tórax y la cabeza.

Las pterotecas (Figs. 12-13) llegan hasta el

149

Gayana 64(2), 2000

tercio posterior del cuarto segmento abdominal. El ápice

de las ceratotecas termina antes del fin de la espiritrompa

y ésta antes de las podotecas metatorácicas, las cuales

asoman bajo el resto de los apéndices, llegando a

sobrepasar el borde inferior del cuarto segmento

abdominal. Ceratotecas y podotecas mesotorácicas

terminan a la misma altura aproximadamente.

Sensilas (Fig. 14) circulares, de color

castaño claro, presentes en los tercios superiores

de los segmentos abdominales cinco, seis y siete,

formando múltiples filas sin orden.

Espiráculos, en los segmentos abdominales

segundo al octavo, de color castaño oscuro a

marrón casi negro.

Apertura anal y gonoporo separados a una

distancia igual a una vez y media la longitud del

gonoporo en los machos (Figs. 11 y 16) y a dos veces la

longitud de la apertura anal en las hembras (Fig. 15). En

la hembra el borde posterior del octavo segmento

abdominal se proyecta formando un ángulo agudo que

llega a tocar el borde anterior del mismo segmento.

Cremáster formado por 6 espinas; dos de gran

tamaño en el centro, saliendo de unas prominencias

del tegumento y rodeadas por 4 espinas, dos

anteriores y dos posteriores, tres veces más pequeñas

y sin emerger de una prominencia.

MATERIAL EXAMINADO: 4 pupas criadas en laboratorio.

UBICACION EN LAS CLAVES TAXONOMICAS

Huevo: En la clave de Weigert y Angulo 1977 la especie estudiada se separa en el 16'(7). Aquí se

propone una modificación para incluir a Hemieuxoa conchidia:

16(7). El ancho de la mayoría de las celdas secundarias son el doble del ancho de las primarias; con 21

a 27 costas radiales; la zona aeropilar es indistincta; la relación de proporción entre la roseta primaria

y laisecundania'es de 1:2: formula micropilar: (11-5) 207-2) reco cctannncnne cocoa cocos Helicoverpa zea (Boddie)

16'. El ancho de la mayoría de las celdas secundarias son el triple o más del ancho de las primarias;

COMA O A 18

18(16'). La zona aeropilar comienza después de las celdas secundarias hasta el cuarto ciclo de sectores

interradiales; la relación de proporción entre la roseta primaria y secundaria es de 1:3; fórmula micropilar:

MASIA crea i BIE, E A O APs 8 Ra Pseudoleucania diana (Butler)

18'.- La zona aeropilar comienza después de las celdas secundarias hasta el segundo ciclo de sectores

interradiales; la relación de proporción entre la roseta primaria y secundaria es de 1:4; fórmula micropilar:

SA O A A E A ro Hemieuxoa conchidia (Butler)

Pura: En la clave de Angulo y Weigert 1975, Hemieuxoa conchidia (Butler) llega al punto 5 junto con

Copitarsia consueta (Walker) y Melipotis walkeri (Dognin). Se propone una modificación a esta clave para

separar ambas especies e incluir a Hemieuxoa conchidia (Butler).

(4). Hembra: 8° y CIO) estermites En contacto A 19

5'. Hembra: 8° y (10°-11°) esternites no están en contacto; cremáster formado por un par de espinas centrales

y dos pares de menor tamaño, un par ventral y otro dorsal rodeando a las espinas centrales

LOS e A RO A RN RS. oh ese Hemieuxoa conchidia (Butler)

19(5). Cremáster formado por un par de espinas ventrales y uno posterior .... Copitarsia consueta (Walker)

19'. Cremáster formado por un par de espinas centrales y una espina a cada lado ... Melipotis walkeri (Dognin)

Larva: Según la clave de Angulo y Weigert 1975, Hemieuxoa conchidia (Butler) se separa en el punto

16 de Copitarsia consueta (Walker) de la siguiente manera:

16(9'). Línea medio-dorsal del metatórax y dos primeros segmentos abdominales con simples ensanchamientos;

pináculas rodeadas por áreas claras que contrastan con el resto del área ............. Copitarsia consueta (Walker)

16'. Línea medio-dorsal del metatórax y dos primeros segmentos abdominales sin ensanchamientos;

pinñaculas IAcONSPICUAS DUES iS ee Hemieuxoa conchidia (Butler)

150

Preimaginales de Hemieuxoa conchidia (Butler): Louis-MALDONADO, M. Y R. BADILLA

AGRADECIMIENTOS

Por la ayuda prestada en la realización

de este trabajo, se agradece muy

especialmente al Dr. Andrés O. Angulo por la

acogida y útiles sugerencias, así como por la

buena orientación. y acertada revisión del

manuscrito; a la Dra. Tania Olivares por sus

frecuentes comentarios constructivos y

apoyo; a la Lic. Marcela Rodríguez por los

consejos, ideas y motivación aportados; al

Lic. Mauricio Alarcón por sus frecuentes y

útiles sugerencias; al Laboratorio de

Microscopía Electrónica de la Universidad de

Concepción (Chile) por las fotografías SEM.

A todo el Departamento de Zoología de la

Universidad de Concepción por el agradable

ambiente de trabajo y su cálida acogida. Se

agradece además al Proyecto N° PB 96/01413

del Ministerio Español de Educación y

Ciencia.

BIBLIOGRAFIA

ANGULO, A.O. Y G.TH. WelGERT. 1975. Estados inmaduros

de lepidópteros nóctuidos de importancia

económica en Chile y claves para su determinación

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Publ. Especial N° 2. 153p.

BartLErr, G. 1894. Nuevos lepidópteros de Chile. Anales

de la Universidad de Chile. Memorias científicas y

literarias. 87: 133-182. Traducido de Butler 1882.

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genera. Entomologica Americana, 14(1).

Hampson, G.F. 1903. Catalogue of the Lepidoptera

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PETERSON, A. 1959. Larvae of insects. Part I. Lepidoptera

and plant infesting Hymenoptera. Edwards Bros.,

Ann Arbor, Michigan. 315p.

Poo.e, R.W. 1989. Lepidopterorum catalogus. 118.

Noctuidae. E.J. Brill/ Flora & Fauna Publications.

Part 1 (1-500), Part 2 (501-1013).

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Hunt Publishing Company. 754p.

Weicert, G.TH. Y A.O. ANGULO. 1977. Nuevos huevos en

nóctuidos chilenos (Lepidoptera: Noctuidae). Bol.

Soc. Biol. de Concepción, 51(1): 289-298.

Ficura. 1. Adulto macho de H. conchidia (Butler). FIGURA. 2. Adulto hembra de H. conchidia (Butler).

Ficure 1. Adult male of H. conchidia (Butler). FIGURE 2. Adult female of A. conchidia (Butler).

1571

Gayana 64(2), 2000

FIGURAS. 3-11. A. conchidia (Butler): Fic. 3. Huevo en vista polar (120x); Fic. 4. Area micropilar: roseta primaria y

secundaria (400x); Fic. 5. Aeropilas (400x); Fic. 6. Larva, cabeza (18x); Fic. 7. Area ocular (60x); Fic. 8. Espiráculo

abdominal (340x); Fics. 9-10. Espuripedios, crochets (160x). Fic. 11. Pupa, terminalia macho (30x).

Ficures. 3-11. H. conchidia (Butler): Fic. 3. Polar view of egg (120x); Fic. 4. Micropylar area: primary & secondary

cells (400x); Fic. 5. Aeropylas (400x); Fic. 6. Larvae, head (18x); Fic. 7. Ocular area (60x); Fic. 8. Abdominal

spiracle (340x); Fics. 9-10. Prolegs, crochets (160x). Fic. 11. Pupae, male terminalia (30x).

Preimaginales de Hemieuxoa conchidia (Butler): Louts-MALponapo, M. y R. BADILLA

Ficuras. 12-21. H. conchidia (Butler): Fic. 12. Pupa, vista lateral; Fic. 13. Vista ventral; Fic. 14. Vista dorsal; Fic. 15.

Terminalia pupa hembra; Fic. 16. Terminalia pupa macho; Fic. 17. Larva, quetotaxia corporal; Fic. 18. Quetotaxia de la

cabeza; Fic. 19. Mandíbula, vista externa; Fic. 20. Mandíbula, vista interna; Fic. 21. Quetotaxia ocular.

Ficures. 12-21. H. conchidia (Butler): Fic. 12. Pupae, lateral view; Fic. 13. Ventral view; Fic. 14. Dorsal view; Fic. 15.

Female pupae terminalia; Fic. 16. Male pupae terminalia; Fic. 17. Larvae, body chaetotaxy; Fic. 18. Head chaetotaxy;

Fic. 19. Mandible, external view; Fic. 20. Mandible, internal view; Fic. 21. Ocular area, chaetotaxy.

Fecha de recepción: 02.11.1999

Fecha de aceptacion: 13.10.2000

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Gayana 64(2): 155-160, 2000

ISSN 0016-531X

NUEVO GENERO Y NUEVAS ESPECIES DE NOCTUIDOS ALTOANDINOS

V. TENERA RODRIGUEZ & ANGULO N. GEN. V/S GENEROS AFINES

(LEPIDOPTERA: NOCTUIDAE: CUCULLINAE)

A NEW GENUS AND NEW SPECIES FROM HIGHT ANDEAN

V. TENERA RODRIGUEZ 4 ANGULO N. GEN. V/S AKIN GENERA

(LEPIDOPTERA: NOCTUIDAE: CUCULLINAE)

Marcela A. Rodríguez”, Tania S. Olivares” & Andrés O. Angulo’

RESUMEN

Se realiza una revisión taxonómica del género Albirenia

Angulo & Olivares, desprendiéndose de ésta la creación

de un nuevo género, Tenera Rodríguez & Angulo n. gen.,

con dos especies. Se reubican algunas especies de los

géneros Valeria Stephens (Cucullinae) y Eucoptocnemis

Grote (Noctuinae), en Albirenia Angulo & Olivares

(1999). Se redefinen algunos caracteres para Albirenia.

Se confecciona una clave para los géneros Albirenia

Angulo & Olivares, Tenera Rodriguez & Angulo n. gen.

y Curvalia Olivares & Angulo in litteris.

PALABRAS CLAVES: Albirenia Angulo & Olivares, clave

genérica, Curvalia Olivares & Angulo in litteris, Tenera

Rodriguez & Angulo n. gen, nuevas combinaciones,

nuevas especies.

INTRODUCCION

El estudio de lepidopterofauna altoandina que

ha dado como resultado una serie de publicaciones

(Angulo & Olivares 1999; Angulo et. al. 1999), nos

ha llevado a la creación de nuevos taxa para

especies que no tienen una ubicación dentro de los

géneros neotropicales existentes. Uno de estos casos

se ha dado con la subfamilia Cucullinae. Los trabajos

de Koehler (1951, 1973 y 1979) presentan las

descripciones de numerosas nuevas especies, sin

"Departamento de Zoología, Facultad de Ciencias

Naturales y Oceanográficas, Universidad de Concepción,

Casilla 160-C, Concepción, Chile.

“Casilla 4040, Correo 3, Concepción, Chile.

ABSTRACT

A taxonomic revision of the genus Albirenia Angulo &

Olivares was done, which resulted in the creation of a

new genus, 7enera Rodríguez & Angulo n. gen, with two

species. Some species of the genera Valeria Stephens

(Cucullinae) and Eucoptocnemis Grote ( Noctuinae) are

placed in Albirenia Angulo & Olivares (1999).

Characters for Albirenia are redefined. A key for the

genera Albirenia Angulo & Olivares, Tenera Rodriguez

& Angulo n. gen. and Curvalia Olivares & Angulo in

litteris is done.

Keyworps: Albirenia Angulo & Olivares, Curvalia

Olivares & Angulo in litteris, generic key, Tenera

Rodriguez & Angulo n. gen., new species, new

combinations.

embargo, éstas fueron puestas por el autor en

géneros previamente existentes pero originarios de

la región Neártica, con tipos de Europa o Asia, que

evolutivamente no deben tener un origen común con

los géneros de la región Neotropical (Poole 1989).

Tenera n. gen., Curvalia Olivares £ Angulo in litteris

y Albirenia Angulo & Olivares (1999), son ejemplos

de lo anterior. La ubicación y formación de nuevas

combinaciones estarán dadas en observaciones

pertinentes después de cada caso.

MATERIALES Y METODOS

El material utilizado en esta investigación

proviene de la Colección Badilla y las Colecciones

Científicas de la Universidad de Concepción (UCCC).

155

Gayana 64(2), 2000

Para el estudio de las estructuras genitales

se utilizó el método de extracción de Angulo &

Weigert 1977.

El material tipo será depositado en los

siguientes museos: Colecciones Científicas de la

Universidad de Concepción, Concepción-Chile

(UCCC); Fundación e Instituto Miguel Lillo,

Tucumán-Argentina (FML) y Museo Nacional de

Historia Natural, Santiago-Chile (MNHN).

RESULTADOS

Tenera Rodríguez & Angulo n. gen.

ESPECIE TIPO: Tenera andina (Koehler)

DiaGnosis: genitalia del macho con valva de

terminación subcuadrangular con una proyección

puntiaguda en la parte dorsal, con corona débil o sin

ella, provista sólo de ampulla y ésta con ubicación

variable sobre la valva; vesica con cornuti representado

por fuertes y numerosas espinas rectas. Genitalia de la

hembra, bisacular y con signa en forma de placa lineal.

ETIMOLOGÍA: (L.) tenera: suave, tierna.

Tenera andina (Koehler) n. comb.

(Figs. 1, 4, 7 y 10)

Bryotype andina Koehler

Xilinissa andina (Koehler)

Albirenia andina (Koehler)

ADULTO Y GENITALIA DEL MACHO: según Angulo y

Olivares (1999).

HEMBRA: de acuerdo con la descripción de Koehler

1979:24.

GENITALIA HEMBRA: apófisis anteriores subiguales en

tamaño que las posteriores; ductus bursae

esclerosado, bursa copulatrix bisacular; corpus

bursae subgloboso con signa en forma de una pla-

ca lineal notoria; lóbulos del ovipositor provistos

de espinas largas y débiles.

DISTRIBUCIÓN GEOGRÁFICA: CHILE: VII Región: Talca,

Sector La Mina; R.M.: Santiago: El Manzano.

156

MATERIAL EXAMINADO: 8 ejemplares: 4 ejemplares

Sector La Mina; Laguna del Maule, segunda

quincena: enero, 01981: (353, 354, 3959 505)

Badilla Coll. (UCCC). 1 ejemplar Sector La Mina;

Laguna del Maule, primera quincena, enero,

1981 (374), Badilla Coll. (UCCC); 2 ejemplares,

Sector La Mina; Laguna del Maule, segunda

quincena, diciembre, 1995 (299, 301), Badilla

Coll. (UCCC); 1 ejemplar, El Manzano, Santiago,

12=x121 9591 (UEECE):

OBSERVACIONES: si bien esta especie cumple con

algunas características del género Albirenia, no

corresponde a esta asignación debido a que la

genitalia de su hembra es bisacular con el corpus y

cervix bursae subglobosos, en el trabajo de Angulo

& Olivares (1999), se describe para la hembra de

Albirenia, bursa copulatrix bisacular pero el cervix

bursae es alargado y en algunas especies helicoidal.

Otro carácter para ser incluida en el nuevo género

es la forma y disposición de las espinas de la vésica

en el macho.

Tenera purpuracea (Angulo & Olivares) n. comb.

(Figs: 2:57 '8S8y 141)

Albirenia purpuracea Angulo & Olivares (Olivares

et al. en prensa)

Macho: Olivares et al. (en prensa)

HEMBRA: Olivares et al. (en prensa)

OBSERVACIONES: A. purpuracea Angulo & Olivares in

litteris es cambiada a este género debido a que su

hembra presenta la bursa copulatrix bisacular, corpus

bursae y el cervix bursae son subglobosos, corpus

bursae con presencia de signum; la vésica de la

genitalia del macho está cubierta por fuertes espinas

rectas, lo que reafirma esta nueva designación.

Albirenia Angulo & Olivares

REDEFINICION: genitalia del macho con valvas redon-

deadas en su apice, corona poco desarrollada a au-

sente, saccus terminado en punta, presencia de

ampulla unica; aedeagus con numerosas espinas

simples y pequefias dispuestas a lo largo de la

Nuevo género y nuevas especies de nóctuidos altoandinos V: RODRÍGUEZ, M.A. ET AL.

vésica; genitalia de la hembra con bursa copulatrix

bisacular, corpus bursae globoso, cervix bursae

alargado y más o menos enrollado sobre sí, au-

sencia de signum; ductus seminalis se origina del

ápice del cervix bursae.

Albirenia transversalis Rodríguez & Olivares n.

sp.

(Figs. 6 y 9)

Macho: cabeza con escamas blancas y negruzcas

entremezcladas; palpos con escamas negruzcas

externamente y en el borde interno con escamas

blanquecinas mezcladas con piliformes negras;

antenas plumosas (aserradas) provistas de cilios

delgados y uniformemente distribuidos; vertex con

escamas blanquecinas y negruzcas, las que se

mezclan formando una línea negra que cruza al

vertex y que destaca entre las escamas blancas

restantes; tegulas cubiertas por escamas blanque-

cinas, negruzcas y castaño oscuro entremezcla-

das; patagias, de igual composición que las

tégulas, pero en ésta las escamas negras forman

dos líneas sobre el color de fondo, y presenta es-

camas piliformes negras en el borde alar; patas

cubiertas por escamas blancas mezcladas por unas

pocas escamas castaño claras, los segmentos

tarsales con escamas castaño claras más abundan-

tes y anillados por escamas blancas terminalmente.

Alas anteriores, de color general agrisado, presenta

una línea de escamas castaño oscuras a negruzcas

por sobre la vena Cu2 desde el borde anal hasta la

banda subterminal donde es interrumpida; sobre

la banda el color general es más claro y bajo ésta

de una tonalidad notoriamente más oscura; el área

basal alar está cubierta superiormente por esca-

mas blancas, e inferiormente gris oscuro; las ban-

das alares sólo se manifiestan en la porción supe-

rior del ala con escamas castaño oscuro; la

claviforme no se evidencia, lo mismo que la orbi-

cular; la reniforme, subcuadrangular cubierta de

escamas blanquecinas a gris claras, con su anuli

de color gris oscuro; la banda subterminales do-

ble, dentada y transversal, internamente con es-

camas castaño oscuro y blancas externamente; faz

inferior, cubierta de escamas blancas y en el ex-

tremo costal matizado con escamas castaño cla-

ras, algunas escamas blanquecinas con escamas

piliformes; presenta la reniforme claramente iden-

tificada por escamas castaño oscuras. Alas poste-

riores blancas con escamas piliformes blancas

iridiscentes, costalmente con algunas escamas

castaño oscuro; el borde del ala con algunas man-

chas pequeñas externamente; la discal cubierta

por escamas castaño oscuras por ambas faces del

ala. Abdomen, cubierto por escamas castaño cla-

ras y oscuras entremezcladas con piliformes.

EXPANSIÓN ALAR: X machos: 26.7 mm (n=4)

GENITALIA: uncus corto y de cuello grueso con espi-

na apical; valvas anchas y cortas, de ápice redon-

deado y con corona muy débil; provisto solamente

por ampulla curva de bordes aserrados y ápice re-

dondeado, larga y curbada hacia el extremo dorsal

de la valva pero sin sobresalir de ésta; saccus

subcuadrangular y de extremo agudo; yuxta sub-

triangular. Aedeago provisto por una espina simple

en la apófisis dorsal de la vésica y con numerosas

espinas distribuidas a lo largo de ésta, al final de la

vésica, las espinas son más gruesas, algunas orde-

nadas en hileras.

HEMBRA: desconocida.

DISTRIBUCIÓN GEOGRÁFICA: CHILE: IV Región: Los

Morongos, Los Niches, Curicó; VII Región: Sector

La Mina; IX Región: Termas de Río Blanco,

Cautín, Malleco.

MATERIAL EXAMINADO: 4 ejemplares machos. 1 ma-

cho, Holotipo, Chile, VII Reg. Sector La Mina, 930

ms.n.m, 24-10-1998, Badilla:coll. (UCCC). 1 macho,

Termas de Río Blanco, Cautín, II. 51. (UCCC). 1

macho, Termas de Río Blanco, Malleco, 3/51, col.

(UCCC). L.E. Peña; 1 macho, Chile, Los Morongos

600 m. Los Niches-Curicó, 17/19-xi-1994. (UCCC).

ETIMOLOGÍA: el nombre de esta especie transversalis,

alude a la notoria banda subterminal dispuesta

transversalmente sobre el ala anterior.

OBSERVACIONES: esta especie es muy cercana tan-

to en su morfología externa como en las estruc-

turas genitales del macho a lunatica Koehler, el

carácter tentativo de esta ubicación se debe al

desconocimiento de la hembra de esta especie,

sin embargo, el cornuti de su vésica sustenta esta

combinación.

157

Gayana 64(2), 2000

Albirenia murina (Koehler) n. comb.

Valeria murina Koehler 1979

Macho: Koehler 1979.

OBSERVACIONES: el cambio de ubicación de esta es-

pecie responde a que el género Valeria Stephens

es de la Región Paleártica, con especies de Asia

y Europa, que no se relacionaría con las Neotro-

picales de la subregión altoandina. Los caracte-

res morfológicos de la estructura genital del ma-

cho sustentan su ubicación en el género Albirenia

Angulo & Olivares.

Albirenia bicolor (Koehler) n. comb.

Valeria bicolor Koehler 1979

Macho: Koehler 1979.

HEMBRA: Koehler 1979

OBSERVACIONES: la nueva ubicación de esta especie en

el género Albirenia Angulo y Olivares está basada en

la concordancia de caracteres presentada en la diag-

nosis de Koehler (1979), para la genitalia del macho.

Valeria Stephens es desestimado como asignación

genérica debido a que corresponde a un género

Paleártico, y esta especie es de distribución altoandina.

CLAVE PARA SEPARAR LOS GÉNEROS CONSIDERADOS (BASADA EN CARACTERES GENITALES DE MACHO Y HEMBRA)

PiMachos aia oi MI e IA A SA A

MN IHembras dos

21 Walva icon proyección apicallen el Extremo dorsal cole TOA

2 Valva Sim proyección apical ici.

3. Vésica con cornuti provisto de espinas pequeñas ................... Albirenia Angulo & Olivares

3”, Vésica con cornuti provisto por grandes: y fuertes espimas cone. can +

4. Cornuti con espinas curvas en número variable ... Curvalia Olivares & Angulo in litteris

4’. Cornuti con espinas rectas en número variable

5. Bursa copularix unisacular, signa ausente .......

5) /Bursa'copulatnxebisacullars!. A ss

6. Corpus bursae globoso y cervix bursae enrollado sobre si, signa ... Albirenia Angulo & Olivares

6”. Corpus y cervix bursae subgloboso, signa presente .............. Tenera Rodriguez & Angulo

AGRADECIMIENTOS

Agradecemos al proyecto N° 200.113.057-1.0

de la Dirección de Investigación de la Universidad

de Concepción, por el apoyo económico a la pre-

sente publicación.

BIBLIOGRAFIA

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1013; Part.3. 1015-1314. E.J. Brill/Flora & Fauna

Publications. N.Y

Fecha de recepción: 30.08.2000

Fecha de aceptación: 30.08.2000

158

Nuevo género y nuevas especies de nóctuidos altoandinos V: RODRÍGUEZ, M.A. ET AL.

Ficguras 1-3. 1. Macho de Tenera andina (Koehler). 2. Macho de Tenera purpuracea (Angulo & Olivares). 3. Macho

de Albirenia transversalis Rodríguez & Olivares

Ficures 1-3. 1. Male of Tenera andina (Koehler). 2. Male of Tenera purpuracea (Angulo & Olivares). 3. Male of

Albirenia transversalis Rodríguez & Olivares.

lab

Gayana 64(2), 2000

Ficuras 4-11. Valvas de: 4. T. andina (Koehler). 5. T. purpuracea (Angulo & Olivares). 6. A. transversalis (Rodríguez

& Olivares). Aedeagus de: 7. T. andina (Koehler). 8. T. purpuracea (Angulo & Olivares). 9. A. transversalis (Rodríguez

& Olivares). Genitalia hembra de: 10. 7. andina (Koehler). 11. 7. purpuracea (Angulo & Olivares).

Ficures 4-11. Valves of: 4. T. andina (Koehler). 5. T. purpuracea (Angulo & Olivares). 6. A. transversalis (Rodríguez

& Olivares). Aedeagus of: 7. T. andina (Koehler). 8. T. purpuracea (Angulo & Olivares). 9. A. transversalis (Rodriguez

& Olivares). Female genitalia of: 10. T. andina (Koehler). 11. 7. purpuracea (Angulo & Olivares).

160

Gayana 64(2): 161-170, 2000

ISSN 0016-531X

ACTIVIDAD CONTRACTIL DE MUSCULO PAPILAR CARDIACO Y

CONDUCTO DEFERENTE DE RATA INDUCIDA POR VENENO DE LA

ARANA LATRODECTUS MACTANS DE CHILE

CONTRACTION ACTIVITY OF THE PAPILLAR MUSCLE AND VAS

DEFERENT OF A RAT INDUCED TO POISON FROM THE LATRODECTUS

MACTANS SPIDER OF CHILE

Fernando Romero’, Elena Altieri', Carlos Quiñehual? y Alejandra Cayuqueo*

RESUMEN

La araña Latrodectus mactans al morder inocula su

veneno, el cual induce un cuadro clínico denominado

latrodectismo sistémico, del que se desconocen sus efectos

en tejidos aislados. Nuestro laboratorio ha obtenido veneno

de esta especie de arácnido mediante la técnica de

extracción de glándula, lo que permitió iniciar estudios de

la reactividad muscular inducida por extracto de glándula

y una fracción purificada bioactiva sobre músculo liso,

utilizando como modelo preparaciones de músculo aislado

papilar cardiaco y conducto deferente de rata. Los

resultados muestran que estas toxinas generan un efecto

miotónico en el tejido muscular liso del conducto deferente

y en el tejido cardiaco inducen inotropismo positivo y

aumento de la frecuencia de contracción. Nuestros

resultados permiten demostrar que el veneno de esta araña

estimula la reactividad contráctil en tejido muscular

cardiaco y liso, y sugieren que el efecto principal se debe

a la acción de una fracción proteica estructuralmente similar

a la alfa-latrotoxina de arañas europeas y asiáticas.

PALABRAS CLAVES: Araña viuda negra, Latrodectus mactans

de Chile, músculo cardiaco, conducto deferente, contracción.

INTRODUCCION

La araña Latrodectus mactans de Chile perte-

neciente al orden Araneae, sub-orden Labidognatha,

¡Departamento de Ciencia Preclínicas - CEBIOR,

Facultad de Medicina, Universidad de la Frontera, Casilla

54-D, Temucho, Chile. E-mail: fromero Oufro.cl

Tesista de carreta Tecnología Médica.

“Tesista de carreta Tecnología Médica y ayudante de

investigación Proyecto DIUFRO N° 9731.

ABSTRACT

The spider Latrodectus mactans inoculates its poison

when biting, this induces a clinical chart named systemic

latrodectism, its effects are ignored in isolated tissues.

Our laboratory has obtained poison of this arachnid

species by means of the gland extraction technique. This

allowed us to begin studies of the muscular reactivity

induced by gland extract and a purified bioactive fraction

on smooth muscle, using as a pattern isolated cardiac

papillar muscle and rat vas deferent. The results show

that these toxins generate a miotonic effect in the smooth

muscle of vas deferent, and positive inotropism and an

increase in the frequency of contraction in the heart tissue.

Our results demonstrate that the poison of this spider

stimulates the contractile reactivity on cardiac and smooth

muscular tissue, and also suggest that the main effect is

due to the action of a proteinous fraction, structuraly

similar to the alfa-latrotoxin from european and asian

spiders.

Keyworpbs: Black widow spider, Latrodectus mactans of

Chile, heart muscle, vas deferent, contraction.

familia Theridiidae, género Latrodectus, especie

mactans, de Chile (Zapfe 1959), conocida como

“araña del trigo” o “viuda negra”, correspondiente a

la fauna ponzoñosa biocenótica de especies de

fanerotóxicas. Su mordedura a humanos genera un

efecto sistémico conocido como “latrodectismo” o

“aracnoidismo sistémico”. Se sabe que el veneno está

constituido por varias neurotoxinas que inducen una

sintomatología clínica que se caracteriza por dolor

generalizado, dolor abdominal agudo, calofríos y/o

temblor, fiebre, vómitos, taquicardia, hipertensión

161

Gayana 64(2), 2000

arterial, secreción sudoral, lacrimal, nasal y priapismo,

causando en algunos casos la muerte en adultos o

niños (Scherone et al. 1957; Scherone 1966).

En la actualidad, el avance en los estudios de los

componentes del veneno de la araña Latrodectus

mactans se ha realizado en la subespecie euroasiática

tredecimguttatus, existiendo ausencia de estudios sobre

la composición de las toxinas presentes en el veneno de

la araña Latrodectus mactans de Chile o de sus efectos

fármaco-citofisiológicos. No obstante, estudios del

efecto del extracto de glándula sobre la contractilidad

del músculo papilar en corazón de rata demostraron un

efecto inótropo positivo (Romero et al. 1996).

Las toxinas excitadoras de origen animal que

inducen neuroexocitosis se conocen como neuro-

toxinas. Del veneno de la subespecie euroasiatica se han

identificado al menos tres de estas neurotoxinas de alto

peso molecular: (1) la alfa-latrotoxina (0-LTX) de 130

KDa, proteína ácida no glicosilada, que actúa

selectivamente sobre terminales nerviosos presinápticos

de vertebrados, provocando una liberación masiva de

neurotrans- misores por estimulación de la fusión de

vesículas sinápticas con la membrana presináptica

(Frontali et al. 1972; Grasso 1976; Kiyatkin et al. 1990,

1992); (11) la alfa-latroinsectotoxina (o&-LIT) de 120 KDa,

con actividad equivalente sobre insectos (Magazanik

et al. 1992); y (111) la alfa-(125)-latrocrustotoxina (Q-

LCTX) de 150 KDa, específica para crustáceos

(Krasnoperov et al. 1991).

La o-LTX actúa en dosis nanomolares y sus efec-

tos son causados desde el exterior celular. Aunque tam-

bién es activa en ausencia de calcio, sus acciones son

más rápidas en medios que contengan este catión

(Hlubek ef al. 2000). En modelos aislados de contrac-

tilidad de músculo liso de uretra de cerdo, la o-LTX

produce relajación estimulada por secreción de me-

diadores no-adrenérgicos y no-colinérgicos en los ter-

minales nerviosos. Efecto similar se observa en esófa-

go de gato, pero asociado a la liberación de óxido ní-

trico (NO), péptido intestinal vasoactivo (VIP) y

neurotransmisores de las vesículas sinápticas. En este

modelo se reporta también un efecto de contracción,

atribuido a intermediarios colinérgicos (Werkstrom ef

al. 1997; Ny et al. 1997). En músculo liso de conducto

deferente de rata, la o-LTX produce exocitosis de ve-

sículas con cuerpos densos grandes, que contienen

noradrenalina y neuropéptido Y (De Potter et al. 1997).

El presente trabajo tiene por objetivo estudiar

el efecto del veneno de Latrodectus mactans de Chile,

obtenido de extracto de glándula y de una fracción

162

bioactiva, sobre respuestas de contractilidad en músculo

liso y cardiaco, utilizando dos modelos de tejidos aislados:

conducto deferente y músculo papilar cardiaco de rata.

MATERIALES Y METODOS

CAPTURA DE ARAÑAS

La captura de los especímenes de Latrodectus

mactans se realizó en los meses de diciembre 1998 y

enero 1999 en los sectores de La Peña y Quino, de la

VIII y IX Región, de Chile (Figura 1). Los ejemplares

son delicadamente inmovilizados con pinzas anató-

micas de 30 cm y aislados en cápsulas plásticas (capa-

cidad 150 ml) con su tapa oradada para permitir airear

la “jaula”. Es importante mencionar que nuestro equi-

po ha recolectado arañas en la zona mencionada los

dos últimos años, realizando siempre un repoblamiento

posterior con arañas jóvenes, de modo de no alterar

sustancialmente el equilibrio poblacional en el área.

Los especímenes son dejados en ayunas por 30 días,

mantenidos con agua, para estimular la producción y

concentración del veneno en las glándulas.

FIGURA 1. Sitios de muestreo de la VIII y IX regiones,

sector de Quino y La Peña (Santa Bárbara).

Ficure 1. Sample sites of the 8" and 9" regions Quino

and La Peña sectors (Santa Barbara).

Actividad contráctil y veneno de la araña L. mactans de Chile: ROMERO, F. ET AL.

OBTENCIÓN DE VENENO

El extracto de glándula venenosa se obtuvo re-

tirando los quelíceros de un total de 65 arañas, previa

muerte por inmersión de 1 min. en nitrógeno líquido.

Luego se sumergieron unos segundos en buffer fosfato

salino (PBS) 0,1 M, pH 7.4, a 4°C y se seccionó la mem-

brana que adhiere a los quelíceros en su base, proce-

diendo a retirarlos. Cada quelícero con su glándula de

veneno se depositó en un tubo con el buffer mencio-

nado (25 pares de glándulas por 100 ul de PBS), sien-

do homogeneizados e inmediatamente centrifugados

a 1060 g por 15 min. El sobrenadante alicuotado, que

es denominado extracto de glándula (EG), se congeló

de inmediato a -20°C, hasta su utilización.

REGISTRO DE CONTRACCIÓN ISOMÉTRICA DE MÚSCULO

LISO Y CARDIACO

Se utilizaron 22 ratas Sprague-Dawley machos,

de un peso aprox. de 250 g. sacrificadas por

decapitación. Se removió rápidamente el corazón y

conductos deferentes, para obtener los segmentos de

tejidos que se utilizaron en los ensayos experimentales,

los que colocados en solución Tyrode (baño de 6 ml) se

mantuvieron a 30°C, conteniendo (concentración en

mM): NaCl 137, KC] 5.4, CaCl, 2.7, MgCl, 0.5 NaHCO,

11.9, NaH,PO, 0.45 y glucosa 5.55, a pH 74, oxigenando

con una mezcla de 95% O, y 5% CO, La adición de

veneno total o de la fracción purificada en el baño es en

volúmenes de 40 ul con micropipeta en concentración

proteica final de 20 ng/ul y de 0.5 ng/ul respectivamente.

Los registros de contracción isométrica se

realizaron a través de un transductor de fuerza Gilson T

1030 de alta sensibilidad (el extremo inferior se conecta

a un portaelectrodo y el superior al transductor), acoplado

a un micromanipulador. La preparación de tejido aislado

recibe una tensión de reposo basal de 1 g. El transductor

de fuerza se conectó a un polígrafo Gilson modelo 5/

6H. Luego de un período de estabilización de 60 min, se

registró la actividad basal o de control.

La preparación de segmento (3 cm) de conducto

deferente se estimuló con una intensidad de 3 a 12 mV, a

frecuencia de 5 Hz y 5 ms duración. Se realizaron 6 series

experimentales en curvas intensidad-respuesta, en

ausencia (control) y 6 series experimentales en presencia

de extracto de glándula, más 6 series experimentales en

presencia de fracción proteica purificada bioactiva.

El estudio de la respuesta contráctil de músculo

papilar de ventrículo izquierdo de rata se realiza en seis

series experimentales de segmentos de tejido muscular

(aprox. 1 cm) que se conecta al fisiopoligrafo a través

de un amplificador IC-MP, para registrar la tensión

desarrollada y per interconexión a un amplificador 1C-

DIFF se obtiene la primera derivada de la función

contráctil (dP/dt), como también el valor del tiempo en

que se alcanza la máxima tensión desarrollada (t). La

preparación se estimuló, con una intensidad del doble

de su umbral, a una frecuencia de 5 Hz y 5 ms de duración,

en ausencia (control) y en presencia de extracto de

glándula de veneno de la Latrodectus mactans de Chile.

Los resultados fueron analizados estadística-

mente por el método de ANOVA en el software

PRIMER y se graficaron en INPLOT versión 4.0.

SEPARACIÓN DE FRACCIÓN POR CROMATOGRAFÍA DE

INMUNOAFINIDAD

Para obtener una fracción proteica del veneno de

L. mactans chilena, se utilizó un método de separación

por inmunoafinidad (Schneider ef al. 1982; Scheer &

Meldolesi 1985) (ver Anexo I para el procedimiento de-

tallado): proteína A-Sefarosa CL4B (Pharmacia Biotech),

hidratada con buffer borato, fue incubada con 12.5 ug del

anticuerpo anti o-LTX, con agitación suave durante | hora

en cámara fría a 4°C. Luego de centrifugada, se lavó con

dietanolamina 0.1 M, pH 8 (DEA) y se resuspendió en 7.5

ml de dimetilsuberi-midato (DMSD, Pierce) preparado

en DEA, mezcla que se agitó suavemente durante 45 min

a 4°C. A esta matriz sefarosa-proteína A-anticuerpo anti

o-LTX, se agregaron 7.5 ml de buffer borato conteniendo

40 ul de EG (de esta dilución se reservaron 500 ul para

determinar la concentración de proteínas) con agitación

suave. La elución de la fracción ligada al anticuerpo se

realizó con 2 ml de glicina 0.2 M, pH 2.7, neutralizando

de inmediato con 100 ul de Tris-HCI | M, pH 8.0. La frac-

ción se almacenó en alícuotas a -20°C.

DETERMINACIÓN DE CONTENIDO DE PROTEÍNAS

Se utilizó la técnica de Lowry (1951) con leves

modificaciones. Las lecturas se obtuvieron en un

espectrofotómetro Shimadzu. mod. EBA 3S, a 660 nm. y se

compararon con una curva de referencia (solución de albú-

mina sérica bovina) realizada previamente por triplicado.

ANÁLISIS ELECTROFORÉTICO

Se analizó el EG mediante electroforesis en gel de

poliacrilamida en condiciones denaturantes (SDS-

163

Gayana 64(2), 2000

PAGE)(Laemli 1970), junto con un patrón de pesos

moleculares. La técnica se aplicó fundamentalmente de

acuerdo al protocolo modificado por Sambrook et al.

(1989). Se utilizó un aparato de electroforesis BioRad

mod. Mini-Protean II Cell y una fuente de poder BIO-

RAD mod. Power-Pac 300. Se usó una solución de

acrilamida/bis-acrilamida (BioRad) al 10% . Se

depositaron 10 ul de cada muestra en buffer de depósito

(ver Anexo I para detalle de todos los buffers utilizados)

después de llevarla a ebullición por 5 min. La corrida se

realizó a voltaje constante (50 V) por 15 min y 60 V el

resto de la corrida. El gel se fijó durante 2 h o toda la

noche. La tinción de los geles se realizó con nitrato de

plata (Sambrook et al. 1989; Sammons et al. 1981). Se

lavaron los geles con etanol 30% tres veces durante 20

min cada vez. A continuación fueron pretratados con 0.2

er/l de NaS,O, x 5 H,O (Sigma) durante 1 min lavados y

teñidos con AgNO, 2 er/l (Merk) más 0.75 ml/l de

formaldehído 37%, durante 30 min. Se reveló con Na,CO,

(60 gr/1), HCHO 37% (0.5 ml), y Na,S,O, X 5 H20 (4

mg/l) durante 10 min o hasta aparición de las bandas. Los

geles se sumergieron inmediatamente en EDTA 0.05 M

(Sigma) para su almacenamiento y posterior

digitalización mediante scanner UMAX ASTRA 610 P.

ANÁLISIS MEDIANTE Dot IMMUNOBINDING Assay (DIA)

Para determinar la existencia de epitopes comu-

nes entre la molécula de o-LTX de L. mactans

tredecimguttatus (mt) y algún componente del EG de L.

mactans chilena (Lim), se utilizó la técnica de DIA, funda-

mentalmente de acuerdo a Hawkes ef al. (1982). Mem-

branas de nitrocelulosa fueron sembradas con distintas

diluciones de o&-LTX de la subespecie euroasiática (Figu-

ra 2, segundo, tercer y cuarto recuadro de izquierda a de-

recha); extracto de glándula de la subespecie Ln (quinto

recuadro); y PBS como control negativo (primer recua-

dro). Brevemente, se usaron tiras de membrana de nitro-

celulosa (Inmobilon NC Pure, Sigma) y las muestras (1.5

ul) fueron: (1) o-LTX (Calbiochem) en concentraciones

de 0.75, 1.5, 3 (x107M). (ii) EG, obtenido como se indicó

arriba; y (111) PBS como control. Luego de bloquear y la-

var, se incubó cada NC en concentraciones (ug/ml) de

0.5, 1, 2, 3 del anticuerpo primario (anti o-LTX desarro-

llado en conejo, Calbiochem). El anticuerpo secundario

fue un anti inmunoglobulina de conejo desarrollado en

cabra, conjugado a peroxidasa, 1:15.000 (Sigma). Se re-

veló con tetrahidrocloruro de 3,3" diaminobencidina

(DAB) a 0.5 mg/ml en TPBS, más 0.01% de peróxido de

hidrógeno y 0.4 mg/ml de cloruro de níquel.

RESULTADOS

RESPUESTA CONTRÁCTIL ISOMÉTRICA DE CONDUCTO

DEFERENTE DE RATA

Las respuestas de registros típicos de contracción

de músculo liso, al aplicar intensidades de estímulos eléc-

tricos crecientes, fueron observadas en las preparacio-

nes aisladas de conducto deferente de rata, como se pre-

sentan en la Figura 2. En (a) corresponde a respuesta

tónica control, en (b) la contractilidad aumenta en pre-

sencia de fracción purificada del veneno de xn, y en (c)

el efecto fásico-tónico basal es incrementado cuando

se adiciona al baño extracto de glándula.

2 b

eee

FiGURA 2. Registro típico de contracciones tónicas de conducto deferente de rata inducida por estimulo máximo eléctrico

(T=12mV) 5 Hz y 5 ms de duración: (a) respuestas basal control y en presencia de extracto de glándula 20 ng/ul; (b) y por

adición de fracción proteica 0.5 ng/ul; (c). calibración 1 g de tensión y velocidad de registro 1 min.

FiGURE 2. Typical registration of tonic contractions of the rat’s vas deferent induced by maximum electric stimulus of (T=12mV)

5Hz and 5 ms duration: (a) control responses and in the presence of glandular extract of 20 ng/ul; (b) and for the addition of

protein fractions 0.5 ng/ul; (c) the tension basal of 1 g and registered velocity of Imin.

164

Actividad contráctil y veneno de la araña L. mactans de Chile: ROMERO, F. ET AL.

La reactividad muscular del conducto defe-

rente, en la Figura 3, se muestra en las curvas de

porcentaje de respuestas máximas a estímulos eléc-

tricos de intensidad creciente de 3-12 mV, 5 Hz. El

valor de E, . obtenido para el control fue de

100+1.3, el que aumenta en presencia de EG (20

ng/ul) a 107.6+0.5, y al adicionar al baño la frac-

ción proteica (0.5 ng/ul) de veneno el valor alcan-

za a 122.7+2.5. Todas las series experimentales son

RESPUESTA MAXIMA (%)

oz 4

6 8

INTENSIDAD (mV)

significativamente diferentes al control (p<0.05).

También se determina que el extracto de glándula

y la fracción proteica inducen un aumento de la

sensibilidad de la curva de intensidad-respuesta de-

terminada por el valor de ED,, del control (mV)

que es 7.76+0,11, en tanto la respuesta de sensibi-

lidad en (mV) presencia del EG es 7.331075 y de la

fracción púrificada (mV) es 7.07+0.57. Ambas cur-

vas son significativamente diferentes al control.

= FRACCION

4 EXT. GLAND.

o CONTROL

10 12

FIGURA 3. Dependencia intensidad-respuesta contráctil del conducto deferente de rata, inducida por estímulos eléctricos

variables de 3 a 12 (mV), frecuencia 5 Hz y 5 ms de duración. La respuesta máxima está expresada en porcentaje del

efecto fásico-tónico del registro isométrico, control, puntos llenos (MW); extracto de glándula, puntos (A); fracción, puntos (7).

Cada punto representa la media, y su ES en trazos verticales, de 3 series experimentales con 5 puntos normalizados por ajuste

de la función de Hill.

FiGurE 3. Dependent intensity-contraction response of the rat’s vas deferent, induced by variables of electric stimulus of 3 to

12 (mV), duration of 5 Hz and 5 ms frecuency. The maximum response is expressed in a percentage of stage-tonic registered

isometric effect. Control, full points (MW); glandular extract, points (A) fraction, points (J). Each point represents the medium and

the ES in vertical lines of 3 experimental series with 5 normalized points adjusted according to the Hill function.

RESPUESTA CONTRACTIL ISOMETRICA DE MUSCULO

PAPILAR DE CORAZON DE RATA

En el estudio de los efectos inotropicos y

frecuencia contractil del músculo papilar de rata,

como se muestra en la Tabla I, al adicionar EG

(20 ng/ul en concentración final en el baño, 6

ml), aumentaron significativamente los efectos

máximos obtenidos para parámetros estudiados

(máxima tensión desarrollada, la primera deri-

vada de la función contráctil y tiempo) del mús-

culo papilar aislado de rata y son concordantes

con los registros de contractilidad de la máxima

tensión y efecto sobre la frecuencia contráctil de

este tejido .

Los cambios de las respuestas isométricas ob-

tenidas en la presencia de neurotoxinas fueron

reversibles, ya que en ausencia de ellas se observó

que la recuperación de los diferentes parámetros no

se modificó en relación con los controles.

165

Gayana 64(2), 2000

TABLA I. Efectos inducidos por la adición de extracto de glándula sobre músculo papilar cardiaco de rata.

TABLE I. Effects induced by the addition of the glandular extract concerning the papillar muscle of the rat.

Parámetro Control Efecto max Recuperación (n) p<

MTD (mg/mg) 73.0+0.9 91.0+2.9 ISO] 6 0.05

dP/dt (g/cmxs) 37.0+4.1 49.3+5.2 37.8+5.4 6 0.05

t (ms) 113.0+6.0 105.0+3.8 11202522 6 0.05

se observó una reacción positiva con ambas

fracciones (Figura 4). Esto demuestra la existencia

de epitopes comunes entre las proteínas, por lo cual

fue factible utilizar el anticuerpo anti-a-LTX

euroasiática en la matriz de inmunoafinidad que

separó una fracción del extracto de glándula de Lm

con posible actividad o-LTX.

EPITOPES COMUNES ENTRE EG DE L. MACTANS

CHILENA Y &-LTX DE L. MACTANS TREDECIMGUTTATUS

Al utilizar la técnica del DIA para determinar

la existencia de epitopes comunes entre algún

componente del EG de la subespecie chilena de L.

mactans y la 0-LTX de la subespecie euroasiática,

abcd e f

. de 1 e

el —i a

7 :

FIGURA 4. Membranas de nitrocelulosa incubadas con distintas concentraciones de anticuerpo primario (0.5, 1, 2, 3;

mg/ul, marcadas de A, B, C, y D). En el recuadro a se observa el control negativo (PBS). En los recuadros b y c se

observa el extracto de glándula, diluido 1:2 y 1:4, respectivamente. La o-LTX euroasiática se observa en los recuadros

d, e y f, en concentraciones de 0.75; 1.5 y 3 (x10” M) respectivamente.

FIGURE 4. Nitrocelulose membranes incubated with different concentrations of primary antibodies (0.5,1, 2, 3; mg/

ul, marked to A, B, C and D). In the chart a negative control can be observed. In the b and c charts the extracted

glandula can be observed, diluted 1:2 and 1:4, respectively. The euroasian &-LTX can be observed in charts d, e

and f in concentrations of 0,75; 1.5 and 3 (x107 M) respectively.

166

Actividad contráctil y veneno de la araña L. mactans de Chile: ROMERO, F. ET AL.

CONTENIDO PROTEICO Y BANDAS ELECTROFORÉTICAS

Las alícuotas congeladas, EC y el producto de

la separación por inmunoafinidad, fueron estudiadas

por el método de Lowry (1951) para determinar su con-

centración proteica. Los resultados, que se aprecian

en la Tabla II, indican la presencia de una alta concen-

tración proteica en el EG (4.99 mg/ml), la mayoría de

la cual no se unió a la matriz de inmunoafinidad (3,4

mg/ml), es decir, no presentó epitopes comunes con la

o-LTX de Lint. Sólo 2.95x10* mg/ml de proteína se

eluyeron de la fracción unida al anticuerpo anti-o-LTX

de Lmt. Esta fracción proteica presentó alta actividad

tipo &-LTX en los modelos fisiológicos estudiados. En

el análisis electroforético (figura 5), se observa para

EG un patrón de bandas similar al reportado por Grasso

(1976) para el extracto de glándula de la subespecie

euroasiática.

TabLa II. Resultados de la determinación de proteínas. Se muestran los valores de concentración de proteínas

obtenidas (muestra total de 65 arañas).

TaBLE II. Results of determined proteins. The following demonstrates the values of obtained protein concentrations

(total sample of 65 spiders).

Muestra

Extracto de glándula (EG)

EG no unido a matriz

Fracción proteica

Blanco de reactivo _

| Concentración proteica (ug/ml) _

4993.9

3144.4

2.93

94 Kda

67 Kda

43 Kda

30 Kda

20,1 Kda

FIGURA 5. Gel de poliacrilamida al 10%, sometido a electroforesis en condiciones denaturantes. Se indica la ubicación de las

bandas del marcador de pesos moleculares (94, 67, 43, 30 y 20.1 KDa.). Se observan las bandas correspondientes al extracto de

glándula (EG) de la araña Lm, que presentan un patrón similar al obtenido por Grasso (1976) al analizar el EG de la araña Lint.

FIGURE 5. Poliacrilamide gel of 10% submitted to electroforesis in denaturing conditions. The location of the zones of the signal

lines of the molecular weight is indicated (94, 67, 43, 30 y 20.1 KDa.). The zones corresponding to the glandular extract (EG) of

the Lm spider are observed, which present a similar pattern obtained by Grasso (1976) when analysing the EG of the Ent spider.

167

Gayana 64(2), 2000

DISCUSION

En preparaciones de tejido muscular con

inervación intacta, las respuestas a extractos de glán-

dulas y fracciones purificadas de o-LTX del veneno

Lmt pueden atribuirse a estímulo de secreción de

neurotransmisores en las terminales nerviosas

(Grasso 1976; Magazanik et al. 1992; Ny et al. 1997).

En nuestros resultados, la respuesta contráctil

del conducto deferente de rata aumentó la actividad

de tensión desarrollada en presencia de la fracción pu-

rificada, como también su afinidad, lo que nos indica

que estamos en presencia de un incremento de la acti-

vidad específica en la fracción en comparación con el

extracto de glándula. De esto se desprende la necesi-

dad de dilucidar los mecanismos fármaco-receptor uti-

lizando un agonista molecular conocido. Igualmente,

nuestro equipo continúa en el trabajo de purificación

y caracterización de las fracciones del veneno.

Por otra parte, en músculo papilar cardiaco, en

presencia de extracto de glándula, se observó un aumento

de respuesta máxima contráctil y de su frecuencia,

equivalentes a las respuestas reportadas en la literatura,

obtenidas en preparaciones de tejidos aislados en

presencia de sustancias simpaticomiméticas con efecto

inótropo, los que pueden estar relacionados a un evidente

tono simpático dependiente de la presencia de las

neurotoxinas en el extracto de glándula y en la fracción

purificada (Olson et al. 1995; Frontali 1972; Ny et al. 1997;

Werkstrom et al. 1997). Los efectos observados por

nuestro equipo podrían deberse a mecanismos similares

inducidos por la o-LTX, que generaría posiblemente una

exocitosis de terminaciones nerviosas simpáticas que son

abundantes en ambos tejidos en estudio.

En modelos aislados de contractilidad de mús-

culo liso de uretra de cerdo, que estudian la fracción

a-LTX obtenida de la subespecie euroasiática

Latrodectus mactans tredecimguttatus, se reporta un

efecto de relajación, el cual se atribuye a una posible

secreción de mediadores no-adrenérgicos y no-

colinérgicos en los terminales nerviosos (Werkstrom

et al. 1997). En músculo liso de esófago de gato, Ny

et al. (1997) igualmente observan efecto de relaja-

ción inducida por ot-LTX, el cual asociaron a la libe-

ración de óxido nítrico (NO), péptido intestinal

vasoactivo (VIP) y neurotransmisores de las vesícu-

las sinápticas. Sin embargo, también reportan un efec-

to de contracción, atribuido a intermediarios

colinérgicos. Esto nos permite indicar que el aumen-

to de la sensibilidad de la respuesta contráctil de los

168

diferentes tejidos en nuestros modelos está asociado a

mecanismos de membrana y/o intracelulares, directos

o mediados por exocitosis de algún neurotransmisor

que se active por las neurotoxinas del veneno de la

especie Latrodectus mactans de Chile.

El estudio de los venenos animales ponzoño-

sos demuestra que presentan estructuras moleculares

proteicas muy similares en animales que son de los

mismos géneros o familias (Scheer et al. 1985;

Kiyatkin et al. 1990). Debido a lo anterior, resultó

interesante establecer en el presente trabajo la pre-

sencia de epitopes comunes entre la o-LTX de la es-

pecie euroasiática (preparado comercial) y un com-

ponente del veneno de Latrodectus mactans de Chi-

le. Los epitopes comunes encontrados sugieren que

la estructura molecular de alguno de los componen-

tes del veneno es similar a la toxina de la araña

euroasiática, y por lo tanto su mecanismo de acción

puede ser similar. Además, el análisis electroforético

del EG de Latrodectus mactans de Chile muestra un

patrón similar al del extracto de glándula de

Latrodectus mactans euroasiática (Grasso 1976). Sin

embargo, una comparación más exhaustiva requeri-

rá la utilización del extracto de glándula de ambas

especies en un mismo gel de electroforesis.

Es interesante notar que la actividad especifi-

ca de la fracción purificada, que modifica el “efecto

máximo” en conducto deferente y músculo papilar

es mayor que la presentada por el extracto de glán-

dula. En conclusión, nuestros resultados sugieren que

la molécula responsable de parte importante del efec-

to observado sería precisamente aquella que presen-

ta epitopes comunes con la o&-LTX europea.

AGRADECIMIENTOS

Agradecemos los financiamientos recibidos de

la Dirección de Investigación de la Universidad de la

Frontera (DIUFRO), Proyecto 9731 y del Centro de

Biotecnología de la Reproducción (CEBOIR) perte-

neciente al proyecto de Mejoramiento de la Calidad

de la Educación Superior MECE-SUP98 UFRO “Pro-

grama fortalecimiento de la capacidad científica tec-

nológica y productiva regional”.

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Fecha de recepción: 03.01.2000

Fecha de aceptación: 11.10.2000

169

Gayana 64(2), 2000

ANEXO I

PREPARACIÓN DE LA MATRIZ DE INMUNOAFINIDAD

50 mg de proteína A-sefarosa CL-4B

(Pharmacia Biotech) liofilizada fueron hidratados

con 7.5 ml de buffer borato pH 8.0 (0.1 M NaCl,

20 mM borato), que llamaremos buffer A, durante

30 min. Posteriormente se lavó dos veces en bu-

ffer A, centrifugando a 400 g por 5 min. Después

del segundo lavado se resuspendió en 7.5 ml de

buffer A, con 12.5 ug del anticuerpo anti o-LTX.

Se mezcló en rotador con agitación suave durante

| hora en cámara fría a 4°C. Luego fue centrifugada

a 400 g por 5 min. Se lavó la sefarosa con

dietanolamina 0.1 M, pH 8 (DEA) centrifugando

a 400 g por 5 min a 4°C y luego se resuspendió en

7.5 ml de dimetilsuberimidato (DMSD, Pierce) 20

mM preparado en DEA 0.1 M con pH reajustado a

8.0. La mezcla se agitó suavemente durante 45 min

a 4°C. La reacción se detuvo centrifugando a 400

g por 5 min y resuspendiendo en 7.5 ml de

etanolamina 20 mM pH 8.0 durante 10 min a 4°C,

agitando constantemente. Se lavó dos veces con

buffer A centrifugando a 400 g, 5 min cada vez. A

esta matriz sefarosa-proteína A-anticuerpo anti O-

170

LTX se agregaron 7.5 ml de buffer borato conte-

niendo 40 ul de EG (de esta dilución se reserva-

ron 500 ul para determinar concentración

proteica) con agitación suave, durante 1 h en cá-

mara fría a 7°C. Luego de completada la

incubación, se centrifugó a 400 g por 5 min (el

sobrenadante fue recuperado para posteriormen-

te determinar la cantidad de proteína no ligada al

anticuerpo). Se lavó la matriz 2 veces en buffer A.

La elución de la fracción ligada al anticuerpo se

realizó con 2 ml de glicina 0.2M, pH 2.7, neutrali-

zando de inmediato con 100 uL de Tris-HCl 1M,

pH 8.0. La fracción aislada se almacenó en

alícuotas a -20°C.

BUFFERS DE ELECTROFORESIS

Buffer de depósito: TRIS HCI 50 mM, pH 6.8,

Dithiotreitol 100 mM, SDS 2%, Azul de

bromofenol 0.1%, y Glicerol 10%, con DTT

(dihitrioteitol)1M.

Buffer de corrida: TRIS-Glicina 0.5 M, pH 8.8 con

10% SDS.

Fijador de gel: etanol 30%, acido acético 12% y 0.5

ml/l de formaldehído al 37%.

Gayana 64(2): 171-188, 2000

ISSN 0016-531X

MOLUSCOS TERRESTRES DE CHILE. SINONIMIA Y PROBLEMAS

RELACIONADOS: 1. FAMILIAS VERONICELLIDAE, PUPILLIDAE Y

ACHATINELLIDAE (GASTROPODA: PULMONATA)

LAND MOLLUSCA OF CHILE. SYNONYMIES AND RELATED PROBLEMS:

1. FAMILIES VERONICELLIDAE, PUPILLIDAE AND ACHATINELLIDAE

(GASTROPODA: PULMONATA)

José R. Stuardo’ y Patricio Vargas-Almonacid

RESUMEN

Se examina el status taxonómico de las especies chilenas

de las familias Veronicellidae, Pupillidae y Achatinellidae,

como parte de una serie de análisis taxonómicos sobre los

moluscos terrestres de Chile que se elabora como segui-

miento a la sinopsis del grupo publicada con anterioridad

(Stuardo & Vega 1985). Son pocos los trabajos trascen-

dentes publicados después de la sinopsis. En la actualidad

hay descritas dos especies de Veronicellidae, dos de

Pupillidae y 21 especies de Achatinellidae. De éstas, el

único registro de Chile para Heterovaginina limayana

Lesson es cuestionable y la subespecie Pupoides

(Ischnopupoides) minimus costatus Biese, es considerada

inválida. Se presenta una exhaustiva compilación de la

sinonimia, junto a una discusión morfológica de los

caracteres de la concha y de la distribución topotípica de

cada una de las especies conocidas. Sin embargo, es ya

necesario realizar estudios genéticos de especiación en los

morfos del único veronicélido ampliamente distribuido

en Chile central y sur, y en las especies de Orthurethra

encontrados en Chile continental y sus islas oceánicas.

PALABRAS CLAVES: Mollusca, sinonimias, Veronicellidae,

Pupillidae, Achatinellidae, Neotropical, Oceanía, Chile.

INTRODUCCION

Este artículo es parte de una revisión taxo-

Omica, principalmente sinonímica, que se elabora

"Departamento de Oceanografía y “Departamento de

Zoología, Facultad de Ciencias Naturales y Oceanográ-

ficas. Universidad de Concepción, Casilla 160-C,

Concepción, Chile.

ABSTRACT

The content of this paper, part of a series of taxonomic

analysis of the land mollusca of Chile being written as a

follow up to a synopsis published earlier (Stuardo € Vega

1985), examines the status of the Veronicellidae, Pupillidae

and Achatinellidae. Only a few meaningful contributions

have been published after the synopsis. So far, two species

of Veronicellidae, two species of Pupillidae and 21 species

of Achatinellidae have been recorded. Of these,

Heterovaginina limayana Lesson with only one record from

Chile continues being questioned and the subspecies

Pupoides (Ischnopupoides) minimus costatus Biese, is here

considered invalid. A full synonymic compilation, with a

discussion of morphological distinctive shell traits and

topotypic geographical distributions is given for each of

these species. However, much needed taxonomic work on

the genetic of speciation becomes necessary for the

understanding of the morphs of the only widely distributed

veronicellid species in central and south Chile and the species

of Orthurethra found in continental Chile and the Oceanic

Islands.

KeYworbs: Mollusca, Synonymies, Veronicellidae,

Pupillidae, Achatinellidae, Neotropical, Oceania, Chile.

sobre las familiás de moluscos terrestres recientes

presentes en el territorio nacional.

Ampliando el plan tradicional de un catálogo,

se han incluido observaciones y comentarios generales

sobre los diversos grupos cuando esto ha sido posible

O necesario. Sin embargo, se hace especial énfasis en

que la información aquí analizada sobre distintas

especies no es definitiva, y deberá continuarse por los

distintos especialistas ya que en algunos casos sólo

171

Gayana 64(2), 2000

representa las fases iniciales de una taxonomía alfa.

En esta misma perspectiva deberían considerarse las

listas o compilaciones de moluscos chilenos publicadas

que, no conteniendo ningún comentario taxonómico

útil, se suponen exhaustivas, intentando evaluar la

diversidad natural del grupo para ambientes tan

variados como los que encierra, a su vez, la diversidad

geográfica y am- biental de nuestro territorio

geopolítico. De hecho, aparte de la sinopsis evaluadora

del estado taxonómico de las especies descritas para

Chile, y de su distribución y posible origen (Stuardo &

Vega 1985), los aportes trascendentes publicados sobre

el grupo son escasos, limitándose a una lista sinonímica

de los Bulimúlidos chilenos (Stuardo & Valdovinos

1985), a una monografía con la revisión de la

morfología, sistemática y distribución del género

Plectostylus Beck 1837 (Valdovinos & Stuardo 1988),

la descripción de nuevas especies de Austrodiscus

Parodiz 1957 y Biomphalaria Preston 1910

(Valdovinos & Stuardo 1989, 1991) y, recientemente,

la descripción de una nueva especie del género

Radiodiscus Pilsbry 4 Ferriss 1906 perteneciente a

la familia Charopidae (Vargas-Almonacid 2000). Una

lista general de los moluscos chilenos recientes,

valiosa desde el punto de vista de las especies

descritas hasta ahora, incluye a las especies terrestres

descritas (Valdovinos 1999), pero desgraciadamente

no expone, a pesar de la experiencia del autor, la

condición taxonómica, ni las dudas existentes sobre

la validez relativa de tantas especies y grupos mal

conocidos en las distintas faunas continentales e

insulares oceánicas, o en las marinas.

MATERIALES Y METODOS

Para facilitar estudios futuros, la presentación

de categorías superiores, familias y especies

consideradas incluye observaciones sobre la

clasificación de taxones supraespecíficos, listas

completas de la sinonimia y de la literatura ligada a

cada especie, y observaciones taxonómicas y

morfológicas sobre muestras examinadas de las

especies, cuando ellas han estado disponibles. Parte

de este material fue estudiado por uno de nosotros

(J.R.S.) en las colecciones del Museo de Zoología

Comparada de la Universidad de Harvard, Cambridge,

USA (MCZ); el resto se encuentra depositado en las

Colecciones Científicas de la Universidad de

Concepción, Chile (UCCC). Gracias a la gentileza

172

del Dr. Sergio Letelier, curador del Museo Nacional

de Historia Natural, Santiago de Chile, recibimos una

lista de las muestras de Pupoides (Ischnopupoides)

minimus (Philippi) existentes en esas colecciones.

En general, la sinonimia y distribución de

las especies presta atención especial sólo a los

artículos u obras que hacen referencia a Chile. En

el caso de las especies introducidas, las referencias

se limitan a la descripción original y las citas más

relevantes sobre el grupo. Para facilitar la consulta

rápida de la literatura, la sinonimia incluye el

nombre de la especie citada y la referencia

completa abreviada del artículo (excluido el título)

u obra, siguiendo la nomenclatura utilizada en el

Zoological Record (ISSN: 0144-3607) o en el

World List of Scientific Periodicals. Después de

cada referencia bibliográfica se indica como regla,

entre paréntesis, si el nombre de la especie es sólo

citado, si se incluye en un catálogo o lista de especies,

o si considera información importante sobre su

distribución, anatomía y sinonimia. Así, cuando las

referencias no son seguidas por cualquiera de estas

indicaciones, pero incluyen láminas y figuras acom-

pañantes, se debe entender que ellas normalmente

contienen descripciones o datos de valor general para

el reconocimiento de las especies.

Cuando las referencias a publicaciones

incluyen a dos o más autores, el último se separa por

el signo &.

RESULTADOS

PLAN GENERAL DE CLASIFICACION

CLASE GASTROPODA Cuvier 1797

SUBCLASE PULMONATA Cuvier 1817

ORDEN Systellommatophora Pilsbry 1948

(= Gymnophila Baker 1955)

SUBORDEN Soleolifera Simroth 1890

Superfamilia Veronicelloidea Gray 1840

Familia Veronicellidae Gray 1840

ORDEN Stylommatophora Schmidt 1856

(= Geophila Férussac 1812)

SUBORDEN Orthurethra Pilsbry 1900

Superfamilia Pupilloidea Turton 1831

Familia Pupillidae Turton 1831

Superfamilia Achatinellacea Gulick 1873

Familia Achatinellidae Gulick 1873

Moluscos terrestres de Chile: SruARDO, J.R. Y P. VARGAS-ALMONACID

ANALISIS TAXONOMICO

ORDEN Systellommatophora Pilsbry 1948

Los Veronicélidos han sido incluidos en el

Orden Soleolifera junto a Onchidiidae y

Rathouisiidae por Boettger (1955) y Zilch (1959),

y en la superfamilia Veronicellacea por Taylor &

Sohl (1962). Con anterioridad, Thiele (1931) había

considerado a los órdenes Soleolifera y Oncidiacea

como estirpes del Orden Stylommatophora.

Concluyendo que esta familia estaría más

alejada de los Stylommatophora que de los

Basommatophora, Pilsbry (1948), incluyó a

Veronicellidae dentro del nuevo Orden

Systellommatophora y consideró a Soleolifera y

Onchidiacea como sinónimos de su nuevo orden,

invalidando las interpretaciones posteriores de Zilch,

y Taylor & Sohl (op. cit.) Este nuevo taxon continuó

siendo aparentemente ignorado, por lo menos,

durante un par de décadas después de su proposición.

FAMILIA Veronicellidae Gray 1840

Género Phyllocaulis Colosi 1922

1. Phyllocaulis gayi (Fischer 1871)

Género Heterovaginina Kraus 1953

2. Heterovaginina limayana (Lesson 1829)

Por mucho tiempo el género Phyllocaulis fue

incorporado dentro de la familia Vaginulidae. Sin

embargo, no parece haber ya ninguna duda acerca

de la prioridad del nombre Veronicella Blainville

1817 sobre Vaginula Férussac 1821, como lo

demostraran Cockerell & Collinge (1893), Baker

(1925a) y como fuera enfatizado por Connolly

(1939). Posteriormente, la especie tipo (Veronicella

laevis Blainville 1817) conservada en el Museo

Británico de Historia Natural (Heynemann 1885;

Cockerell £ Collinge 1893) fue redescrita por

Thomé (1975). En consecuencia, seguimos a estos

autores usando el nombre Veronicellidae en lugar

de Vaginulidae (Gill 1871).

Un estudio bastante completo de esta familia

con una descripción más o menos detallada de la

biología, anatomía, distribución y filogenia fue

hecho por Hoffman en 1925. Sin embargo, su

taxonomía descuidó las Reglas de Nomenclatura

Zoológica, por lo que fue criticado y modificado

por Baker (1925a y b, 1928, 1931; Hoffmann

1927a y b). Las modificaciones propuestas por

Baker han constituido, esencialmente, la base del

tratamiento sistemático seguido hasta hoy en día,

aunque los estudios parciales de la familia

publicados después por Kraus (1953a y b, 1954),

por Forcart (1953) con su importante estudio de

los Veronicélidos africanos y más recientemente por

Thomé (1975, 1976) quien examinó y redescribió

gran parte de las especies Neotropicales, han

permitido un mejor entendimiento del grupo.

Esta familia de distribución principalmente

mundial parece estar representada en Chile a través

de sólo una especie: Phyllocaulis gayi (Fischer

1871); otra, Heterovaginina limayana (Lesson 1829)

ha sido registrada también para Chile, por lo que

siguiendo a Thomé (1976) recomendamos un

examen cuidadoso del material de América del Sur,

lo que podría permitir determinar incluso la

presencia del género Veronicella en nuestro país.

Género Phyllocaulis Colosi 1922

Phyllocaulis gayi (Fischer 1871)

Vaginula gayi Fischer 1871, Nouv. Arch. Mus. Hist.

nat. Paris, Méms., 7: 172; 1872, J. Conchyliol.,

20: 145; Heynemann 1885a, Jber. dt. Malak. Ges.,

12: 7 (lista de especies); 1885b, /bid., 12: 281

(lista de especies); Semper 1885, Reisen Arch.

Philippinen, Pt. 2, 3 (N° 7): 294-295, pl. 26, fig. 4;

Plate 1897, Verh. dt. Zool. Ges., 7: 187; Keller

1902, Zool. Jahrb., Abt. Syst., Suppl., 5 (Fauna

Chilensis, 2): 607, lam. 18 (anatomia); Simroth

1914, Mem. Soc. neuchat. Sci. Nat., 5: 289.

Vaginula maillardi Fischer 1871, Nouv. Arch. Mus.

Hist. nat. Paris, Méms., 7: 154; 1872, J. Conchyliol.,

20: 144.

Vaginula decipiens Semper 1885, Reisen. Arch.

Philippinen, Pt. 2, 3 (N° 7): 295, lam. 25, fig. 3;

Simroth 1913, Mem. Soc. neuchat. Sci. Nat., 5: 290.

Vaginula nigra Heynemann 1885a, Jber. dt. Malak.

Ges., 12: 7, lam. 1, figs. 4, 5; 1885b, Ibid., 12:

281 (lista de especies); Simroth 1899, SitzBer.

naturf. Ges. Leipzig, 24-25: 2; Heynemann

1906, Abh. Senckenb. Naturforsch. Ges., 30: 71.

Vaginula limayana Semper 1885, Reisen Arch.

Philippinen, Pt. 2, 3 (N° 7): 294 (non Lesson 1829).

Vaginula chilensis Simroth 1892, SitzBer. Naturf.

Ges. Leipzig, 17-18(1891-92): 71, 86; 1913, Mem.

173

Gayana 64(2), 2000

Soc. neuchát. Sci. Nat., 5: 289, lám. 11, fig. 16.

Vaginula stroebeli (sic) Colosi 1922a, An. Mus.

nac. Hist. nat. B. Aires, 31: 490.

Vaginula strebeli (corr.) Heynemann 1906, Abh.

senckenb. naturforsch. Ges., 30: 70; Simroth

1914, Mém. Soc. neuchat. Sci. Nat., 5: 292.

Vaginula adspersa Hoffmann, 1925, Jena. Z.

Naturw., 61 (N. FE. 54): 171.

Veronicella sp. Strebel & Pfeffer 1882, Beitr.

Fauna mexikan. Conch., 5: 128-129, lam. 19,

figs. 20, 22, 24, 25 (fide Hoffmann 1925).

Veronicella gayi Cockerell & Collinge 1893,

Conchologist, 2(8): 195 (lista de especies), 221.

Veronicella chilensis Cockerell & Collinge 1893,

Ibid.: 195 (lista de especies).

Veronicella maillardi Cockerell & Collinge 1893,

Conchologist, 2(8): 194, 216.

Veronicella strebelii (sic) Cockerell & Collinge

1893, Conchologist, 2(8): 194; Cockerell 1895

Nautilus, 8(12): 142.

Veronicella adspersa Cockerell & Collinge 1893

Conchologist, 2(8): 195; Cockerell 1895, Nautilus,

8(12): 142.

Veronicella decipiens Cockerell & Collinge 1893,

Conchologist, 2(8): 195; Cockerell 1895, Nautilus,

8(12): 142.

Veronicella nigra Collinge 1897, J. Malac. London,

6: 43; Cockerell & Collinge 1893, Conchologist,

2(8): 195-221; Cockerell & Larkin 1894a: 24;

1894b: 60; Collinge 1897: 43

Veronicella fusca Collinge 1897, J. Malac. London,

6: 43 (non V. Fusca Heynemann 1885).

Phyllocaulus sp. Hoffmann 1925, Jena. Z. Naturw.,

GIN E/X94)3 171:

Phyllocaulus adspersus Hoffmann 1925, Ibid., 171.

Phyllocaulus niger Hoffmann 1925, Jena. Z.

Naturw., 61 (N. E. 54): 170, 244, 365.

Phyllocaulus chilensis Hoffmann 1925, Jena. Z.

Naturw., 61 (N. F. 54): 169.

Phyllocaulus strebeli Hoffmann 1925, Jena. Z.

Naturw., 61 (N. F. 54): 170, 244, 364; 1927a,

Proc. Acad. Nat. Sci. Philad. (79): 221.

Phyllocaulus decipiens Hoffmann 1925, Jena. Z.

Naturw., 61 (N. F. 54): 170, 244, 364; 1927a, Proc.

Acad. Nat. Sci. Philad. (79): 209-221.

Phyllocaulus gayi Hoffmann 1925, Jena. Z.

Naturw., 61 (N. F. 54): 169, 244, fig. 8 (radula),

fig. 30 (distribución); lam. 6. Fig. g3 (penis);

1927, Proc. Acad. Nat. Sci. Philad., (79): 221;

1935, Zool. Jahrb., Abt. Syst., 67: 213.

174

Vaginulus strebelii Semper 1885, Reisen Arch.

Philippinen, Pt. 2, 3 (N° 7): 293, lam. 26, fig. 7.

Vaginulus (Phyllocaulis) gayi Baker 1925b, Proc.

Acad. Nat. Sci. Philad., 77: 182; Forcart 1952, J.

de Conchyliol., 92(4): 176-179 (medidas de

lectotipos y paratipos); Thomé 1971, Iheringia,

Zool., 40: 30-33.

Vaginulus (Phyllocaulis) decipiens Baker 1925b,

Proc. Acad. Nat. Sci. Philad., 77: 160, 182.

Vaginulus (Phyllocaulis) strebeli Baker 1925b,

Proc. Acad. Nat. Sci. Philad., 77: 160, 182-183.

Meisenheimeria alte Hoffmann 1925, Jena. Z.

Naturw., 61(N. F. 54): 120, lam. 5, fig. 45b.

Phyllocaulis gayi Hoffmann 1928, Arch.

Molluskenk., 60: 244, 248, 250; 1935, Zool. J., Abt.

Syst., 67: 213-215; Thomé 1975, Iheringia, Zool.,

48: 21-24; 1976, Ibid., 49: 71-75 (redescripción y

sinonimia); Stuardo & Vega 1985, Stud. Neotrop.

Fauna & Envir. 20(3); 126 (distribución).

DISTRIBUCIÓN GEOGRÁFICA: Localidad Tipo: Valdivia,

Chile (Fischer 1871).

Phyllocaulis gayi ha sido encontrada princi-

palmente en Chile aunque algunos registros adicio-

nales extienden su distribución presente a Lima

(Perú) y Mazatlán (México) (Hoffmann 1925) don-

de probablemente haya sido introducida (Hoffmann

1927; Baker 1925b; Thomé 1975).

En nuestro territorio se ha encontrado desde

la Isla de Chiloé (Simroth 1899) hasta al norte de

Viña del Mar (Hoffmann 1935; Stuardo & Vega

1985) incluyendo las siguientes localidades: Ancud,

Calbuco, Puerto Montt, Puerto Varas, Llanquihue,

Corral, Valdivia (Fischer 1871; Semper 1885;

Heynemann 1885a; Simroth 1892, 1893, 1913; Plate

1897; Keller 1902; Hoffmann 1925; Thomé 1975,

1976), Isla Teja (Valdivia), Coronel y Termas de

Chillán (Hoffmann 1925, 1935). Hay otros registros

que indican “Chile”, sin localidad precisa.

Nosotros hemos podido examinar algunas

muestras no catalogadas de la Isla de Chiloé (Parque

Nacional Chiloé), Puerto Varas (Parque Nacional

Vicente Pérez Rosales), Osorno (Parque Nacional

Puyehue, Termas de Puyehue y Cascadas), Valdivia

(arboleda cercana a Mehuín), Temuco (Cerro

Ñielol), y Concepción (Barrio Universitario,

Puchacay y Parque Nacional Nahuelbuta).

La mayoría de los ejemplares se distribuyen a

lo largo de las partes central y preferentemente sur del

país en la denominada selva valdiviana. Se han

Moluscos terrestres de Chile: Sruarpo, J.R. y P. VARGAS-ALMONACID

encontrado generalmente en bosques húmedos, bajo

la hojarazca en descomposición, árboles caídos y

troncos de árboles podridos, o bajo las piedras y en

áreas de bosques abiertos, situación que la hace

particularmente vulnerable a la destrucción del bosque

nativo y la fragmentación de habitats que la caracteriza.

OBSERVACIONES: Phillocaulis gayi parece ser una es-

pecie muy poco constante en relación a tamaño y

colorido (con morfos oscuros y amarillos), por lo que

podría corresponder a una especie politípica o a un

grupo de especies estrechamente relacionadas, lo que

ha determinado que las especies descritas para Chile

se consideren sinónimos. Este problema deberá ser

resuelto con estudios sobre su variabilidad genética.

Forcart (1952) revisando los tipos de Vaginula

gayi y Vaginula maillardi descritos simultáneamente

por Fischer (1872) y depositados en el Museo de

Historia Natural de París, encontró que V. maillardi

(probablemente descrita erróneamente de la isla La

Réunion o Isla Bourbon) es idéntica a Y. gayi. Da las

medidas de los 6 sintipos (lectotipos y paralectotipos)

de ambas especies y su conclusión fue confirmada

por Thomé (1971).

Aunque la anatomía de esta especie fue tra-

tada en detalle por Keller (1902), lo que permitió

hacer buenas comparaciones (pero confundió la

uretra con el pulmón), se hace necesario en nuestra

opinión el estudio en serie de ejemplares de dife-

rentes áreas geográficas y principalmente obser-

vaciones entre el colorido y su ecología general.

Basándonos en la revisión y redescripción de

los tipos y en las consideraciones anatómicas de las

genitalias llevadas a cabo por Thomé (1971, 1975,

1976), se pueden determinar diferencias entre los

géneros Vaginulus y Veronicella, que en primera

instancia fueron considerados sinónimos de

Phyllocaulis. Al presentar espermatecas y penes con

diferente morfología, parece justificado aceptar la

separación de los dos géneros. Lo anterior confirmaría

como combinación válida a Phyllocaulis gayi como

lo ha propuesto Hoffmann (1928, 1935) y confirmado

Thomé (1975, 1976).

Género Heterovaginina Kraus 1953

Heterovaginina limayana (Lesson 1829)

Vaginulus limayanus Lesson 1829, Moll. Voy.

“Coquille”, Zoologie: 302, Atlas, lám. 14, figs. 1, la:

d'Orbigny 1837, Voy. Amer. Mérid., 5 (3): 219; Hupé

1854, in Gay, Hist. Fis. Polit. Chile, Zool., 8: 88.

Vaginulus Limaianus Férussac 1832, Hist. nat.

Moll., Atlas, pl. SE, fig., 11.

Vaginulus Limayanus d'“Orbigny 1835, Mag.

Zool., 5: 1-2.

Vaginula Limaiana Deshayes 1851, in Férussac,

Hist. Nat. Moll., 2: 966-967.

Vaginula limayana Fischer 1872, Nouv. Arch. Mus.

Hist. nat. Paris, Méms., 7: 171; Heynemann 1885,

Jber. dt. Malak. Ges., 12: 281 (lista de especies);

Hoffmann 1925, Jena. Z. Naturw., 61 (N. E 54):

240 (descripción), 174, fig. 30, lám. 5, fig. 2 (error,

fide Kraus 1953).

Veronicella limayana Miller 1879, Malak. BL, N. E 1:

129, 130, 188 (lista de especies); Cockerell & Collinge

1893, Conchologist, 2(8): 195 (lista de especies).

Vaginina (Heterovaginina) peruviana Kraus 1953a,

Arch. Mollusk., 82:(1/3): 63-65, figs. la-d.

Heterovaginina limayana Kraus 1954, Ibid., 83 (1/

3): 82; Thomé 1969b, Arch. Mollusk., 99 (5/6):

357 (redescripción); Stuardo & Vega 1985, Stud.

Neotr. Fauna & Envir., 20(3): 126 (distribución).

DISTRIBUCIÓN GEOGRÁFICA: Localidad Tipo: Colina de

San Cristóbal, cerca de Lima, Perú (Lesson 1829).

Heterovaginina limayana ha sido descrita

para Guayaquil (Ecuador), Lima y Cuzco (Perú).

Sólo Hupé (1854) menciona su presencia en Chile;

sin embargo, éste registro es de dudosa confirmación

y altamente cuestionable (Stuardo & Vega 1985).

Miller (1879) citando a Fischer (1872: 171)

confirma el registro, pero al parecer Fischer sólo compiló

antecedentes de la distribución atribuidos a H. limayana

y no da ninguna confirmación de si ha revisado él o

los ejemplares pertenecientes a la colección de Gay,

determinados por Hupé (1854). Creemos que el

registro realizado por Hupé corresponde a V. gayi

debido a que en sus comentarios de distribución dice:

“esta especie esta bastante esparcida ya en el Perú,

ya en Chile; la hemos hallado más particularmente

en Valdivia” (fide Hupé in Gay, p. 88).

OBSERVACIONES: Kraus (1953a) describió una nueva

especie de Vaginina Simroth 1897 para Perú y creó el

nuevo subgénero Heterovaginina para incluirla. La

especie tipo denominada Vaginina (Heterovaginina)

peruviana fue recolectada en Lomas de Atocongo,

Lima (Perú).

175

Gayana 64(2), 2000

Con respecto al estado genérico de Vaginina,

Forcart (1953: 55) en su monografía de los

Veronicélidos de Africa ha mantenido que la au-

sencia de glándula penial (carácter considerado

por Simroth (1903) de bastante valor para separar

a los Veronicélidos en 2 subfamilias) no tiene im-

portancia taxonómica. Por lo tanto, debido a que,

“Vaginina difiere de otros subgéneros de

Pseuveronicella sólo en los órganos copuladores

masculinos”, considera a Vaginina como un

subgénero de Pseudoveronicella Germain, 1908,

género aparentemente restringido a la selva tro-

pical africana (Forcart 1953: 92).

Kraus (1954) después de examinar

especímenes de Vaginulus limayanus Lesson 1829,

colectados en la misma localidad tipo de Lesson

(op.cit.), ubicó a su nueva especie como sinónimo

de la de Lesson, citándola como Heterovaginina

limayana, habiendo previamente reafirmado el

estado genérico de su nuevo grupo (Kraus 1953b).

Basado principalmente en las afinidades del

pene, Kraus (1954) también incluye dentro de su nuevo

género a Vaginula odhneri Hoffmann 1927,

considerada sin localidad definida, aunque Hoffmann

sugirió que probablemente era de origen africano

(Forcart 1953: 60). Kraus (1953a), evaluando las

similitudes con A. limayana, sugiere que odhneri podría

ser de origen neotropical, lo cual fue aceptado por

Forcart (1957), quien no sólo enfatizó la línea genérica

de Heterovaginina sino que también estableció la

distribución de H. odhneri para el sur de Perú.

No hemos tenido acceso al material tipo de

Heterovaginina limayana, H. odhneri y H. conradti, ni

a la especie tipo de Vaginina, sin embargo,

considerando que las relaciones de H. conradti con el

grupo Pseudoveronicella estarían bien establecidas

(ver Forcart 1953a) y basándonos en las diferencias

entre los penes de H.conradti, H. limayana y H. odhneri,

parece justificado aceptar que se agrupe a Vaginina s.

s. como un subgénero de Pseudoveronicella, dando

claramente status genérico a Heterovaginina, hasta no

llevar a cabo un estudio comparativo completo de

las relaciones de estas especies sudamericanas.

ORDEN Stylommatophora Schmidt 1856

(= Geophila Férussac 1812)

SUBORDEN Orthurethra Pilsbry 1900

Superfamilia Pupilloidea Turton 1831

Familia Pupillidae Turton 1831

176

Género Pupoides Pfeiffer 1854

Subgénero Ischnopupoides Pilsbry 1926

1. Pupoides (Ischnopupoides) minimus (Philippi

1860)

2. Pupoides (Ischnopupoides) minimus costatus

Biese 1960

3. Pupoides (Ischnopupoides) paredesi (d’Orbigny

1835)

INCERTAE SEDIS

Pupa curta Anton 1839

Pilsbry (1926, 1935) realiz6 un tratamiento

detallado de la taxonomía y distribución de esta

familia y Baker (1935) ha discutido las relacio-

nes anatómicas entre los diversos grupos de la

superfamilia Pupillacea.

Aunque es esencialmente un grupo del

hemisferio norte, con Eurasia como centro principal

de radiación y evolución (Pilsbry 1934: 136-160),

los géneros pueden distribuirse ampliamente como

ocurre en el caso de Pupoides. Sin embargo, el

endemismo de géneros y subgéneros en las Américas

es pobre comparado con otras partes del mundo.

Ischnopupoides es el único subgénero de

Pupoides endémico en Norte y Sudamérica, mos-

trando, sin embargo, una distribución discontinua y

un número reducido de especies. Se caracteriza por

presentar una concha cilíndrica o subcilíndrica con

el diámetro máximo decididamente menor que la

mitad de su longitud (Pilsbry 1921, 1948).

Al crear su nuevo subgénero (de hecho,

originalmente una Sección) Pilsbry incluyó dentro

de él las especies siguientes: Pupoides paredesii

(d“Orbigny), P. chordatus (Pfeiffer), P. hordaceus

(Gabb) y P. inornatus Vanatta.

Pupa limensis Philippi 1867, fue considerada

una “forma” de P. paredesii y Bulimus minimus

Philippi 1860, permaneció desconocida para la

mayoría de los autores hasta que Haas (1956),

basándose en el material de Chile coleccionado por

el Dr. W. Biese, lo ubicó propiamente en el subgénero

Ischnopupoides.

En Chile esta familia esta representada por

sólo 2 especies: P. (I.) minimus y P. (I.) paredesii

y una subespecie P. (1.) minimus costatus Biese,

que no aceptamos.

Según Zilch (1959: 167), en Ischnopupoides

sólo se incluirían conchas que miden entre 3.3 y

Moluscos terrestres de Chile: SruARDO, J.R. y P. VARGAS-ALMONACID

4.7 mm en altura; sin embargo, Biese (1969) colectó

en Chile especímenes de P. (Ischnopupoides)

minimus con una altura de 5.2 mm.

Género Pupoides Pfeifer 1854

Pupoides (Ischnopupoides) minimus (Philippi

1860)

Bulimus minimus Philippi 1860, Viaje al desierto

de Atacama: 166, lam. 7, fig. 12 (pro parte) a, b;

1860, Reise W. Atacama: .184, lám.7, fig. 12.

Pupoides (Ischnopupoides) minimus Haas 1956,

Arch. Molluskenk., 85: 84; Biese 1960, Ibid., 89

(4-6): 133, lam. 13, figs. 1-4; Stuardo & Vega

1985, Stud. Neotr. Fauna & Envir., 20(3): 127

(distribución).

DISTRIBUCIÓN GEOGRÁFICA: Localidad Tipo: Paposo

(Biese 1960).

Descrita originalmente para Paposo y Cachinal

(Philippi 1860), se ha encontrado posteriormente en

las siguientes localidades: Provincia de Antofagasta:

Mina Cóndor en Guanillos Sur, 135 km al norte de

Antofagasta, 800 msnm; Cobija, 200 m; Hornitos, 80

km al norte de Antofagasta, 800 msnm; Cerro

Moreno, 30 km al norte de Antofagasta, 800 msnm;

Quebrada La Chimba, 10 km al norte de Antofagasta,

200 msnm; Salar del Carmen, 12 km al norte de

Antofagasta, 700 msnm; Quebrada de Paposo, 200

msnm; 33 km al sur de Paposo, 40 msnm, bajo piedras;

Quebrada de Paposo, 200 msnm (para minimus

costatus). Provincia de Atacama: Copiapó, Canal

Ojancos, hacia el mineral de Ojancos, 700 msnm; 10

km al este de Carrizal Bajo, 200 msnm; 2 km al sur de

Carrizal Bajo, 200 msnm; Mina Coquimbana, Sierra

de Manganeso, 30 km al noroeste de Vallenar, 600

msnm (Biese 1960).

Existen cinco muestras colectadas por el Dr.

W. Biese en las colecciones del Museo de Zoología

Comparada de Harvard (MCZ): N* 203535, de Cerro

Moreno; N° 203533, de Quebrada La Chimba; N°

203531, del Salar del Carmen; N° 203532, a 33 km

sur de Paposo; N° 203534, de Quebrada Guanillos, 3

km el norte de Quebrada Cachina, 60 km al sur de

Taltal. Todos en la provincia de Antofagasta. Tres

muestras depositadas en las colecciones del Museo

de Zoología de la Universidad de Concepción

(UCCC), N°1112, 1339 y 2454 provenientes de

Antofagasta, Chañaral y Vallenar, respectivamente,

también fueron examinadas. En el Museo Nacional

de Historia Natural, Santiago de Chile, existen

ejemplares colectados por W. Biese en las mismas

localidades.

El rango de distribución de esta especie ha

sido discutido por Biese (1960), señalando que

puede ser paralelo al presentado por Peronaeus

Albers 1850 entre los Bulimulidae, no alcanzando

más allá del sur de La Serena, límite sur de la

“Fauna-Peruana” de Biese y de las divisiones

biogeográficas denominadas Atacameña o Arido-

Desértica por otros autores (Stuardo & Vega 1985).

OBSERVACIONES: Debido a su tamaño diminuto, esta

especie es uno de los moluscos más característicos

de la fauna chilena. Buenas figuras acompañan a

las primeras descripciones dadas por Philippi

(1860) y Biese (1960) para este caracol. Biese (op.

cit.) menciona que pueden distinguirse dos grupos

dentro de las especies del sur, diferenciándose por

la presencia o falta de una lamela tuberculiforme

(tubérculo o callo angular) cerca de la inserción

del labio exterior. Este rasgo encontrado en la

mayoría de los pupiliformes está presente en P. (1.)

minimus, pero falta en P. (1.) paredesi (d“Orbigny

1835) encontrada cerca de La Paz, Bolivia,

estrechamente relacionada, sino idéntica con P (1.)

limensis (Philippi 1867) de Lima, Perú. Las dos

especies norteamericanas, P. (1.) hordaceus (Gabb

1866) y P. (1.) inornatus Vanatta 1915, tampoco

presentan este tubérculo angular, diferenciándose

por la presencia O ausencia de costillas delgadas o,

por estrías irregularmente desarrolladas.

Si se aceptan las descripciones de las

especies de América del Sur, estas características

también parecerían útiles para separar a P. (1.)

minimus de P.(1.) paredesi y P.(1.) limensis, ya que

la primera ha sido descrita como lisa (Biese

1960) además de presentar una lamela

tuberculiforme, mientras que las dos últimas

presentan costillas distribuidas regularmente sin

la presencia de callo. Además, Biese (1960) hizo

notar que P (1.) minimus costatus difiere de la

forma típica por la presencia de costillas axiales

finas, indicando que la “subespecie” tiene

además la primera una y media vuelta lisa, sin

costillas, carácter también observado en otras

especies que presentan costillas. A juzgar por su

tabla de medidas (op. cit.: 134-135), el número de

anfractos para P (/.) minimus costatus sería de 6

Gayana 64(2), 2000

1/4 (aparentemente constantes) mientras que los de P.

([.) minimus minimus mostrarían una variación de 5

1/2 a 6 1/2 anfractos. Sin embargo, ninguna de estas

diferencias parecen ser significativas.

Philippi (1860) no declaró que su nueva especie

fuera lisa, y la escultura de la concha que él describe como

“striis capillaribus distantibus sculpta...’’ no puede ser equi-

valente a “Anwachsstreifen sehr fein” como las menciona

Biese. En el hecho, Philippi, en su figura 12 (op. cit. pl. 7)

muestra, al parecer, dos especies muy diferentes: una que

probablemente representa un Bulimulido (?) con 8 a 9

anfractos, y que si se considera una figura de tamaño natu-

ral tendría aproximadamente 15 mm de altura; la otra es-

pecie sería su Bulimus minimus, con el tamaño máximo

ya indicado.

Creemos que la figura de este último de-

bió haber tenido el número 13 que falta en la lá-

mina, usando la letra (a) para indicar el tamaño

natural de la concha y la (b) para la vista amplia-

da. La otra figura (la número 12 propiamente tal)

asignada por Philippi aparentemente por equi-

vocación a Bulimus minimus, no es ciertamente

un pupiliforme. El menciona haber encontrado

las dos conchas en localidades diferentes, pero

dudamos que la figura cuestionada, siendo ab-

solutamente diferente, pudiera representar a B.

minimus. Probablemente, Philippi intentó repre-

sentar a su Bulimulus leucostictus [ahora Bostryx

(Peronaeus)| descrito en 1856.

Lo anterior, indica que obviamente Biese no

vio los dibujos de B. minimus realizados por Philippi

donde las figuras a y b muestran las costillas que él

describió tan claramente en su “subespecie” minimus

costatus. Las presuntas diferencias dadas por Biese

fueron probablemente debidas a un análisis incom-

pleto de la descripción original condicionado por el

análisis de las muestras que él estudió.

En las muestras de P. (1.) minimus examina-

das por uno de nosotros (J.R.S.) en el Museo de

Zoología Comparada de Harvard (MCZ), gran par-

te de los ejemplares presentaban conchas bastan-

te deterioradas y corroídas, no pudiendo determi-

narse diferencias en forma muy precisa. Sin em-

bargo, hay dos muestras identificadas por Biese

como P. (I.) minimus minimus (N° 203531 y

203534) donde se pueden observar con relativa

claridad conchas con costillas o una indicación

débil de ellas, distribuidas regularmente. El pre-

dominio de especies con costillas se demostró

más claramente en muestras mejor conservadas

178

depositadas en las Colecciones Científicas del Depar-

tamento de Zoología, Universidad de Concepción

(UCCC), provenientes de Antofagasta, Vallenar y

Chañaral, norte de Chile (N* 1112, 1339 y 2454). En

estas muestras, prácticamente todos los ejemplares exa-

minados (más de 80), salvo algunas conchas corroi-

das, poseen costillas tan claramente marcadas como

en el pupilido norteamericano P. (1.) ordaceus (de he-

cho pueden incluso notarse las costillas de P. (1.)

minimus minimus en las figuras 2, 3 y 4 de Biese). El

numero de anfractos varia entre 5 y 6 ”, e igualmente

varió la presencia del tubérculo que, en algunos ejem-

plares, puede unirse a los labios o desaparecer en su

totalidad.

De acuerdo con esto, nos parece que no hay

ninguna justificación para separar a la especie en

dos subespecies, ni aun si se considera que podría

haber variación geográfica clinal, ya que los

especímenes que presentan costillas se encuen-

tran tanto en las localidades del norte (e. g. Salar

de Atacama) como en las localidades ubicadas

más al sur. Por otra parte, la variación también

incluye diferencias mostradas por ejemplares ju-

veniles con sólo 3 6 4 anfractos, en los que no se

observa un tubérculo ni labios reflejados.

Pupoides (Ischnopupoides) minimus costatus

Biese 1960

Pupoides (Ischnopupoides) minimus costatus Biese

1969, Arch. Moll., 89 (4-6): 135, lam. 13, fig.

5; Stuardo & Vega 1985, Stud. Neotr. Fauna &

Envir., 20(3): 127 (distribución).

DISTRIBUCIÓN GEOGRÁFICA: Localidad Tipo: en la cos-

ta, 30 km al norte de Paposo (Prov. de Antofagasta,

Chile), a 40 msnm (Biese 1960; en la explicación

de la fig. 5, pl. 13, aclara que esta localidad se da

erróneamente como 20 km al norte de Antofagasta).

También se registra en Quebrada Paposo,

a 200 msnm.

OBSERVACIONES: Como se ha concluido bajo P. (1.)

minimus, esta subespecie no se considera válida.

Pupoides (Ischnopupoides) paredesi (d'

Orbigny 1835)

Helix (Cochlodon) paredesii d'Orbigny 1835,

Mag “Zool *2 1 Ne 1153

Moluscos terrestres de Chile: Sruarpo, J.R. y P. VARGAS-ALMONACID

Pupa paredesi d“Orbigny 1837, Voy. Amer.

Merid., 5, Moll.: 322, lám. 41, figs. 3-6;

Pfeiffer 1848, Monogr. Helic. Vivent., 2: 309;

Kiister 1852, Conchyl. Cab., Pupa 1 (15): 133,

lám. 17, figs. 11, 12; Pfeiffer 1853, Monogr.

Helic. Vivent., 3: 531; 1855, Malak. Bl. 2: 176

(Isthmia; sólo lista); 1859, Monogr. Helic.

Vivent., 4: 662 (sólo lista); 1868, Ibid., 299

(sólo lista); Hidalgo 1870, J. Conchyliol., 18:

65; Pfeiffer 1876, Monogr. Helic. Vivent., 8;

359; Clessing & Pfeiffer 1881, Nomenclator:

356 (Sección Itshmia).

Pupa (Alaea) paredesii Beck 1837, Index: 85,

N° 8.

Vertigo (Isthmia) paredesii H. & A. Adams 1853,

Gen. Rec. Moll., 2: 143 (sólo lista).

Pupoides paredesii Kobetl, 1902 Conchyl. Cab.,

Buliminidae: 921, lám. 130, figs. 7, 8; Pilsbry

1521 7"Man. Conch.,:(2) 26 (102): 120, pl. 11,

figs. 10-12.

Pupoides (Ischnopupoides) paredesii Pilsbry

1926, Man. Conch. 27: 250; Ibid. 28: 169 (sólo

lista); Parodiz 1957, Nautilus, 70(4); 128; Biese

1960, Arch. Moll., 89 (4-6): 136, lám. 13, fig.

6; Stuardo & Vega 1985, Stud. Neotr. Fauna &

Envir., 20(3): 127 (distribución).

DISTRIBUCIÓN GEOGRÁFICA: Localidad Tipo: Los

Obrajes, cerca de La Paz, Bolivia (Pilsbry 1926).

Citada también originalmente de Lima,

Perú (d“Orbigny 1835, 1837; Beck 1837; Pfeiffer

1848; Kiister 1852; Kobelt 1902), se ha descrito

después para Guayaquil, Ecuador y Cobija

(Chile) (Hidalgo, 1870), y aparentemente por

equivocación de Coquimbo, Chile e isla Opara

(Cuming’s Coll.); Pfeiffer 1853, 1868, 1876).

En Chile es conocido con certeza en el Cerro

Orcume, 18°15°S; 9°40°W (Prov. de Tarapacá), en

3000 msnm (Biese 1960).

OBSERVACIONES: El registro de esta especie para

Cobija, Chile (Hidalgo 1870) podría correspon-

der a P. (1.) minimus ya que esta última especie

parece haber sido desconocida para Hidalgo. Los

registros de Coquimbo y Opara Id. serían equi-

vocados, probablemente debido a un error de H.

Cumming.

P. (I.) paredesi, puede caracterizarse por su

falta de lamela angular y la apariencia más

voluminosa. Los especímenes determinados por

Biese como paradesi del Cerro Oruñe, Tarapacá,

tienen entre 5 y 5 anfractos y * contra los 6

mencionados en la descripción original. Las

observaciones y figuras de paredesi de Biese (1960)

concuerdan con muestras de P. (1.) limensis (Philippi

1867) en las colecciones del MCZ, determinado por

W. K. Weyrauch (N* 211026, 211027 y 211028).

En consecuencia, sí P. (1.) limensis es sólo una

forma de paredesi como argumenta d“Orbigny; una

subespecie de la misma como lo sugiere Pilsbry

(1926:120), o una especie totalmente diferente, puede

ser determinado solamente por una comparación

detallada de material topotípico, de poblaciones

intermedias y por un elaborado análisis de su

variación.

INCERTAE SEDIS

Pupa curta Anton 1839

Pupa curta Anton 1839, Verz. Conch., 47, N°.

1731 (non Pupa curta Potiez & Michaud 1838);

Pfeiffer 1842, Symbolae Hist. Helic., 2: 126

(sólo cita); 1848, Monogr. Helic. Vivent. 2: 355;

1853, Ibid., 3: 554 (sólo lista); 4, Ibid., 679

(sólo lista); Ibid., 6: 325; Ibid., 7: 395; Stuardo

& Vega 1985, Stud. Neotr. Fauna & Envir.,

20(3): 127 (dudosa).

Pupa (Alaea) annaaensis Beck 1837, Index Moll.:

(nomen nudum); Pfeiffer 1842, Symbolae, 2:

125 (sólo cita).

Vertigo curta H. & A. Adams 1853, Gen. Rec.

Moll., 2: 172 (sólo lista).

Gastrocopta curta Pilsbry 1916, Man. Conch.,

(2)24: 103.

DISTRIBUCIÓN GEOGRÁFICA: Localidad Tipo: Chile ?

OBSERVACIONES: Según Pilsbry, esta especie sería

muy probablemente un ejemplar juvenil imposible

de reconocer. La única descripción conocida

menciona la presencia de 4 anfractos y medio, tres

dentículos lameliformes, una altura de la concha

de 2 mm y un diámetro de 1 1/5 mm.

Superfamilia Achatinellacea Gulick 1873

Familia Achatinellidae Gulick 1873

Subfamilia Tornatellidinae Cooke & Kondo 1960

Tribu Tornatellidini Cooke & Kondo 1960

179

Gayana 64(2), 2000

Género Tornatellina Pfeiffer 1842

. Tornatellina aperta Odhner 1922

. Tornatellina bilamellata (Anton 1839)

. Tornatellina callosa (Anton 1839)

. Tornatellina conica (Anton 1839)

. Tornatellina minuta (Anton 1839)

. Tornatellina plicosa Odhner 1922

. Tornatellina reclusiana (Petit 1843)

(Tornatellina trochiformis Pfeiffer 1842 = conica)

(Tornatellina trochlearis Pfeiffer 1842; es

Antonella Cooke & Kondo 1960)

ZO Uu Kun =

Género Fernandezia Pilsbry 1911

. Fernandezia bulimoides (Pfeiffer 1846)

. Fernandezia conifera (Reeve, 1849)

. Fernandezia consimilis (Reeve 1849)

. Fernandezia cylindrella Odhner 1922

. Fernandezia diaphana (King 1832)

. Fernandezia expansa Hyatt & Pilsbry 1911

. Fernandezia inornata Hyatt & Pilsbry 1911

. Fernandezia longa Hyatt & Pilsbry 1911

9. Fernandezia philippiana Hyatt & Pilsbry 1911

10. Fernandezia splendida (Anton 1839)

11. Fernandezia tryoni Hyatt & Pilsbry 1911

12. Fernandezia wilsoni Hyatt & Pilsbry 1911

ONAN FWY

Género Ambrosiella Odhner 1963

1. Ambrosiella kuscheli Odhner 1963

Género Tornatellinops Pilsbry & Cooke 1915

1. Tornatellinops variabilis (Odhner 1922)

Para el análisis de esta familia, seguimos a Cooke

& Kondo (1960) quienes rebajan a Tornatellinidae a

nivel de subfamilia (Tornatellidinae), aunque Odhner

(1963), basándose en sus propios estudios

anatómicos considera que debe restaurarse el rango

de familia de Tornatellinidae, para contener los

géneros Tornatellina, Fernandezia, Elasmias Pilsbry

1910 y Ambrosiella.

La familia Achatinellidae está limitada en su

distribución a las islas del Océano Pacífico Central.

Existen dos géneros endémicos conocidos para las

Islas Juan Fernández (Tornatellina y Fernandezia)

y uno (Ambrosiella) para la Isla San Ambrosio del

grupo de las Desventuradas. No se encuentran

representantes de la familia o de estos géneros en

las costas de Chile continental, sin embargo, una

especie de Tornatellinops, género que presenta una

gran distribución en el Pacífico Central y que

180

incluye Nueva Zelandia, es conocida en Isla de

Pascua. Esta especie junto a otras dos del género

Melampus Montfort, 1810 son hasta ahora los

únicos Pulmonados descritos para esta isla.

Los géneros Tornatellina y Fernandezia están

representados por 7 y 12 especies respectivamente;

Ambrosiella es monotípica, aunque muestra

afinidad con algunas especies encontradas en Juan

Fernández (Odhner 1963). Sería muy interesante

estudiar los mecanismos que han impedido la

especiación de Ambrosiella, particularmente si,

como sugiere Odhner (op. cit.), los caracoles de

estas dos islas provienen de un stock común.

Un estudio detallado de la anatomía y distri-

bución de las especies de esta familia y particular-

mente de las especies chilenas, se encuentra en las

excelentes revisiones de Cooke & Kondo (1960) y

Odhner (1922).

El material disponible para el estudio de esta

familia se limitó a algunos ejemplares existentes en

el MCZ de Harvard (3 ejemplares de Fernandezia y

2 de Tornatellina), junto con material depositado

en las UCCC, Universidad de Concepción [16 ejem-

plares de Fernandezia bulimoides (N° 2105, 2106),

45 de EF. cylindrella (N° 2107), 4 de FE. splendida (N°

2108), 13 de Tornatellina bilamellata (N* 2101,

2102) y 7 de T. conica (N° 2103)], determinados por

Dr. Y. Kondo, y a un examen breve de los tipos de

Pilsbry realizado por el autor principal durante una

visita a la Academia de Ciencias Naturales de

Filadelfia.

Género Tornatellina Pfeiffer 1842

Se han descrito nueve especies del genero

Tornatellina para Juan Fernández: T. aperta

Odhner, 7. bilamellata (Anton), T. callosa

(Odhner), T. conica (Anton), T. minuta (Anton), T.

plicosa Odhner, T. reclusiana (Petit), T. trochiformis

Pfeiffer y T. trochlearis Pfeiffer. Sin embargo,

Cooke & Kondo (1960) incluyen a 7. trochiformis

Pfeiffer 1842, como sinónimo de T. conica (Anton

1839), y reubicaron a 7. trochlearis bajo su nuevo

género Antonella, no aceptando el registro de Beck

(1837) para esta especie en Juan Fernández. En el

hecho, Pilsbry & Cooke (1911) han sugerido, que

es improbable que la especie conocida de la Isla

Rapa (Opara) pueda encontrarse en ambos lugares.

Las siete especies restantes constituyen for-

mas bastante distintas; sin embargo, 7. aperta se

Moluscos terrestres de Chile: Sruarpo, J.R. y P. VARGAS-ALMONACID

parece a algunas especies del género Fernandezia,

principalmente en la fase adulta, aunque la arma-

dura de la abertura la distingue inmediatamente.

Por otro lado, 7. bilamellata y T. conica pueden

separarse fácilmente de las otras especies a causa

de una costilla vertical ancha (o callo) presente

en la pared paleal, y las especies T. minuta, T.

plicosa y T. reclusiana se diferencian por presen-

tar un alto número de anfractos lisos.

Otras dos especies descritas para Juan Fernández

por Beck (1837: 79) denominadas Leptinaria

succinealis y L. lacryma son nomina nuda.

Tornatellina aperta Odhner 1922

Tornatellina aperta Odhner 1922, in Skottsberg,

Nat. Hist. Juan Fernández, 3: 238, lám. 9, figs.

45, 46 (localidad tipo: Masatierra, Islas Juan

Fernandez); Cooke & Kondo 1960. Bernice P.

Bishop Mus., Bull., 221: 235 (lista de especies);

Stuardo & Vega 1985, Stud. Neotr. Fauna &

Envir., 220(3): 127 (distribución).

DISTRIBUCIÓN GEOGRÁFICA: Localidad Tipo: Masatierra,

Islas Juan Fernández (Odhner 1922).

Encontrada en Rabanal (300 msnm) y Puerto

Inglés (400 msnm), principalmente en bosques

tupidos.

OBSERVACIONES: TJ: aperta se caracteriza por presentar

5 anfractos y una altura máxima de sólo 3 mm.

Presenta gran parecido con 7. callosa pero difiere

de ésta por una abertura más ancha y forma más

robusta, ausencia de callo columelar y pliegue

columelar delgado, y por presentar en estado

juvenil (neánico) una débil lamela parietal

(Odhner 1922).

Tornatellina bilamellata (Anton 1839)

Clausilia (Strobilus) bilamellatus Anton 1839,

Verz. Conchyl.: 46, N°. 1694 (localidad tipo:

Opara) (non Tornatellina (Strobilus) bilamellata

Schmeltz 1874, Cat Mus. Godef., 5: 90.

Tornatellina clausa Beck 1837, Index Moll.: 80

(nomen nudum), Pfeiffer 1842, Symbolae Hist.

Helic., 2: 55 (Localidad tipo: Opara).

Tornatellina bilamellata Pfeiffer 1848, Monogr.

Helic. Vivent., 2: 393 (Strobilus); Kiister 1852,

Conchyl. Cab., (2)15(1): 147, lam. 18, figs. 3-

5; H. & A. Adams 1853, Gen. Rec. Moll., 2:

140, pl. 74, fig. 4; Pfeiffer 1853, Mon. Helic.

Vivent., 3: 527 (lista de especies); 1856, Malak.

Blatt., 2: 170 (lista de especies); 1859, Monogr.

Helic. Vivent., 4: 652 (lista de especies); Albers

1860, Die Heliceen: 259 (lista de especies);

Pfeiffer 1868, Monogr. Helic. Vivent., 6: 265;

1877, Ibid., 8: 319 (lista de especies); E. A.

Smith 1884, Proc. Zool. Soc. London: 280 (sólo

registro); Pilsbry & Cooke 1915, Man. Conch.,

(2), 23: 139, pl. 34, figsy 9;-107 (Seecion:

Tornatellina; Traducción de descripción de

formas); Odhner 1922, in Skottsberg, Nat. Hist.

Juan Fernández, 3(2): 235, lám. 9, fig. 36 (una

variedad); Cooke & Kondo 1960, Bernice P.

Bishop Mus., Bull., 221: 235 (lista de especies);

Stuardo & Vega 1985, Stud. Neotr. Fauna &

Envir., 20(3): 127 (distribución).

DISTRIBUCION GEOGRAFICA: Localidad Tipo: Juan

Fernandez ? (Pfeiffer 1868).

Esta especie se describió originalmente para

Opara (Opana en Anton, 1839, error) pero Pfeiffer

(1868, 1877) cambió la localidad tipo a Islas

Juan Fernández, situación confirmada después

por E. A. Smith (1884). Según Pilsbry (1915) es

improbable que el mismo registro de la especie se

presente en ambas islas, y para Odhner (1922: 235),

la localidad de Anton es ciertamente un error.

Ha sido encontrada en Masatierra (Juan

Fernández) en las siguientes localidades: Pangal;

Cerro Centinela (300 y 350 msnm); Quebrada

Yunque; Puerto Inglés (400 msnm); Rabanal (400

y 300 msnm); bajo Damajuana (300 msnm);

Quebrada Portezuelo (200 msnm). Normalmente

encontrada en bosques espesos bajo las hojas y

helechos.

Una variedad con tres dientes se describió

para: Cerro Centinela (aproximadamente 650 y 500

msnm); Cerro Salsipuedes (350 msnm); Puerto Inglés

(400 msnm); Puerto Francés (400 msnm); Valle de

Piedra Agujereada y Damajuana (300 msnm).

OBSERVACIONES: T. bilamellata se describió con 6

a 8 anfractos y una altura máxima de 8 mm. La

forma varía considerablemente (Odhner op cit.)

pero se caracteriza principalmente por la presen-

cia de 2 láminas palatales paralelas delicadas y

una costilla palatal vertical. Estas características

se confirman en el material examinado.

181

Gayana 64(2), 2000

Tornatellina callosa Odhner 1922

Tornatellina callosa Odhner 1922, in Skottsberg, Nat.

Hist. Juan Fernández, 3(2): 238, lám. 9, figs. 13,

14; (localidad tipo: Masatierra, Islas Juan

Fernández); Cooke & Kondo 1960, Bernice P.

Bishop Mus., 221: 236; Stuardo & Vega 1985, Stud.

Neotr. Fauna & Envir., 20(3): 127 (distribución).

DISTRIBUCIÓN GEOGRÁFICA: Localidad Tipo: Masatierra,

Islas Juan Fernández (Odhner 1922).

Se conoce en Cerro Centinela (ca. 500 y 350

msnm) y Rabanal (300 msnm). Bajo helechos y hojas

(Odhner 1922).

OBSERVACIONES: La descripción menciona 6 ”

anfractos y una altura máxima de 3,6 a 3,8 mm. Es

característica la coloración rojo-castaño del margen

de la sutura (Odhner 1922).

Tornatellina conica (Anton 1839)

Clausilia (Strobilus) conicus Anton 1839, Verz,

Conchyl. 46, N° 1696 (Localidad tipo: Islas

Juan Fernandez).

Achatina (Tornatellina) trochiformis Beck 1837, Index

Moll. 80 N° 2, nomen nudum (Juan Fernandez).

Tornatellina trochiformis Pfeiffer 1842, Symbolae,

2: 55 (localidad tipo: Opara, error); 1848, Monogr.

Helic. Vivent., 2: 392 (localidad tipo: Isla Juan

Fernandez); Kiister 1852, Conchyl. Cab., Pupa,

1(15): 154, lam. 18, figs. 28, 29: H. & A. Adams

1853, Gen. Rec. Moll., 2: 140 (lista de especies);

Pfeiffer 1853, Monogr. Helic. Vivent., 3: 525 (lista

de especies); 1859, Ibid., 4: 651 (lista de especies);

von Martens 1860, in Albers, Die Heliceen: 259;

Pfeiffer 1868, Monogr. Helic. Vivent., 6: 263 (lista

de especies); 1877, Ibid., 8; 315 (lista de especies);

E. A. Smith 1884, Proc. Zool. Soc. London: 280

(sólo registro); Pilsbry & Cooke 1915, Man. Conch.,

(2)23: 190, lám. 53, fig. 14.

Achatina trochiformis Pfeiffer 1855, Malak. Bl.,

2: 170 (Leptinaria: lista de especies).

Tornatellina conica Pilsbry & Cooke 1915, Man.

Conch?) @)237.189 "Seccion + Elasmatina;

Odhner 1922, in Skottsberg, Nat. Hist. Juan

Fernandez, 3: 236, lam. 9, fig. 37; Cooke &

Kondo 1960, Bernice P. Bishop Mus., 221: 236;

Stuardo & Vega 1985, Stud. Neotr. Fauna &

Envir., 20(3): 127 (distribución).

DISTRIBUCIÓN GEOGRÁFICA: Localidad Tipo:

Masatierra, Islas Juan Fernández (Odhner 1922).

Encontrada en las siguientes localidades:

Cerro Centinela (500 msnm); Puerto Inglés (400

msnm); Valle de Piedra Agujereada; Rabanal (300

msnm); Damajuana (300 msnm); Quebrada

Portezuelo (200 msnm); Cerro Salsipuedes (300

msnm); Pangal y Puerto Francés (400 msnm)

(Odhner 1922).

OBSERVACIONES: T. trochiformis se ha considerado

como un sinónimo de 7. conica por Cooke & Kondo

(1960) probablemente debido al comentario de

Pilsbry, de que para Pfeiffer (1848) T. conica “era

un ejemplar juvenil de trochiformis”, sin duda, por

el examen del tipo de Anton. T. trochiformis se

describió originalmente para Opara por Beck (1837)

y Pfeiffer (1842); sin embargo, el último cambió el

registro original en 1848 (y trabajos siguientes) a

Juan Fernández. Aceptamos tanto el tipo como la |

localidad registrada por Odhner (1922).

Elasmatina cumingia Petit 1843 fue intro-

ducida en la sinonimia de 7. trochiformis y T. conica

por Pfeiffer.

T. conica presenta de 10 a 11 anfractos y una

altura máxima de 5,6 a 6 mm. Puede ser caracterizada

por presentar una base ancha, los anfractos bastante

aplastados lisos y una costilla parietal (vertical)

bastante delgada.

Tornatellina minuta (Anton 1839)

Bulimus (Achatina) minuta Anton 1839, Verz.

Conchyl.: 44, N° 1592 (localidad tipo: Juan

Fernández).

Achatina minuta Pfeiffer 1855, Malak Blátt. 2: 170

(Leptinaria).

Tornatellina minuta Pfeiffer 1842, Simbolae, 2:

130 (sólo nombre); 1848, Monogr. Helic. Vivent.,

2: 392 (Achatina); Kiister 1852, Conch. Cab.,

Pupa, \(15): 150, lam. 18, figs. 14, 15; Pfeiffer

1853, Monogr. Helic. Vivent., 3: 524 (lista de

especies); 1859, Ibid., 4: 651 (lista de especies);

1868, Ibid., 6: 263 (lista de especies); 1876,

Ibid., 8: (lista de especies); Clessin & Pfeiffer

1881, Nomenclator: 342 (lista de especies);

Pilsbry & Cooke 1915, Man. Conchol., (2)23:

187, lam. 40, fig. 7 (Sección: Tornatellinops):

Cooke & Kondo 1960, Bernice P. Bishop Mus.,

Bull., 221: 236; Stuardo & Vega 1985, Stud.

Moluscos terrestres de Chile: SruARDO, J.R. Y P. VARGAS-ALMONACID

Neotr. Fauna & Envir., 20(3): 127 (distribución).

Tornatellina (Leptinaria) minuta H. &. A. Adams

1853, Gen. Rec. Moll., 2: 141 (lista de especies).

DISTRIBUCIÓN GEOGRÁFICA: Localidad Tipo: Islas Juan

Fernández (Anton 1839).

Esta localidad ha sido citada y aceptada por

todos los autores.

OBSERVACIONES: Esta especie sólo se conoce a través

de las descripciones originales (Anton 1839; Pfeiffer

1848; Kiister 1852). Según ellas T. minuta tiene 5°

anfractos y una altura de 3 mm. Se parece a las

especies del género Lamellidea.

Tornatellina plicosa Odhner 1922

Tornatellina plicosa Odhner 1922, in Skottsberg,

Nat. Hist. Juan Fernández, 3: 237, lám. 9, figs.

38-42; Cook £ Kondo 1960, Bernice P. Bishop

Mus., Bull. 221: 237; Stuardo & Vega 1985, Stud.

Neotr. Fauna & Envir., 20(3): 27 (distribución).

DISTRIBUCIÓN GEOGRÁFICA: Localidad Tipo: Masatierra,

Islas Juan Fernández (Odhner 1922).

Encontrada en las siguientes localidades:

alrededor de Portezuelo (570 msnm); Quebrada

Portezuelo (300 msnm); Cerro Centinela (800

msnm); Rabanal (300 msnm); Puerto Inglés (400

msnm); Damajuana; Valle Piedra Agujereada.

Encontrada sobre helechos y bajo hojas.

OBSERVACIONES: T. plicosa tiene una altura de 2,8 a 4

mm y 7 a 8 anfractos en la etapa juvenil (neánica). En

el estado geróntico (adulto) tienen una altura máxima

de 5,1 mm y 9 anfractos aplastados, ligeramente

convexos, salvo las 2 6 3 vueltas apicales. Difiere de

T. conica (al parecer su pariente más cercano) por la

ausencia de una costilla palatal (Odhner 1922).

Tornatellina reclusiana (Petit 1843)

Elasmatina reclusiana Petit 1843, Proc. Soc.

London: 2 (localidad tipo: Masafuera).

Tornatellina reclusiana Pfeiffer 1848, Monogr.

Helic. Vivent., 2: 393 (Elasmatina: lista de es-

pecies); 1853, Ibid., 3: 525 (lista de especies);

1859, Ibid., 4: 651; 1868, Ibid., 6: 263 (lista de

especies); 1876, Ibid., 8: 317 (lista de espe-

cies); Clessin & Pfeiffer 1881, Nomenclator:

242 (lista de especies); Pilsbry & Cooke 1915,

Man. Conch., (2) 23: 189 (Sección Elasmatina);

Cooke & Kondo 1960, Bernice P. Bishop Mus.,

Bull., 221: 237; Stuardo & Vega 1985, Stud.

Neotr. Fauna & Envir., 20 (3): 127 (distribu-

ción).

Tornatellina recluziana Pfeiffer 1846, Symbolae,

3: 60 (lista de especies); H. & A. Adams 1853,

Gen. Rec. Moll., 2: 140 (lista de especies).

DISTRIBUCIÓN GEOGRÁFICA: Localidad Tipo: Masafuera,

Islas Juan Fernández (Petit 1843). Encontrada bajo

musgos.

OBSERVACIONES: Esta especie no ha sido nunca dibu-

jada y se conoce sólo a través de la descripción

original. Se caracteriza por tener 9 a 10 anfractos

y una longitud de 5 mm. Al parecer es muy cer-

cana, si no idéntica, a T. conica y T. plicosa.

Género Fernandezia Pilsbry 1911

Según Pilsbry (1911: 93) las 12 especies de

este género pueden diferenciarse según la longitud

de la columela, la presencia de una lamela fuerte o

débil, por su tamaño, y el número de anfractos. De

acuerdo a estas características, Pilsbry reconoce dos

grupos: uno representado por una columela corta

y una lamela fuerte, donde se incluye a Fl expansa,

E philippiana y E. wilsoni; el otro, caracterizado

por especies con una columela más larga y el

pliegue columelar más débil cerca de la base, se

puede subdividir a su vez según la longitud de la

abertura. Así, E limoides y F. consimilis tienen una

longitud de la abertura de más de la mitad de la

concha; mientras que en F. conifera, E. longa, E

splendida, E. tryoni y F. inornata la abertura tendría

menos de la mitad de la concha.

E. cylindrella Odhner, el representante más

pequeño del subgénero, difiere de las demás especies

por presentar una concha muy espiralada (turrito-

cónica, casi como Tornatellina) con 11° anfractos,

que es un número elevado dentro del género. La

descripción breve de E diaphana no permite su

inclusión en los grupos mencionados.

Detalles de la anatomía de estos taxa, se

encuentran en el excelente trabajo de Odhner (1922)

y en Cooke & Kondo (1960); descripciones de las

conchas aparecen en las monografías de Pilsbry

(1911) y Pilsbry & Cooke (1915-1916).

183

Gayana 64(2), 2000

Fernandezia bulimoides (Pfeiffer 1846)

Achatina bulimoides Pfeiffer 1846, Proc. Zool. Soc.

London: 116 (localidad tipo: Juan Fernández):

1848, Monogr. Helic. Vivent., 2: 271; Reeve 1849,

Conch. Icon., 5, lám. 19, fig. 103.

Spiraxis bulimoides Pfeiffer 1853, Monogr.

Helic. Vivent., 3: 472 (lista de especies); 1856,

Malak. Bl., 2: 167 (Nothus: lista de especies):

1859, Monogr. Helic. Vivent., 4: 575 (lista de

especies); 1868, Ibid., 6: 193 (lista de espe-

cies); 1876, Ibid., 8: 258 (lista de especies).

Oleacina (Nothus) bulimoides H. & A. Adams

1853, Gen. Rec. Moll., 2: 105 (lista de especies).

Cionella bulimoides von Martens 1860, in Albers.

Die Heliceen: 255 (Leptinaria; lista de especies).

Stenogyra bulimoides Clessin & Pfeiffer 1881.

Nomenclator: 324 (Sección: Spiraxis; Subsección

Nothus: lista de especies).

Stenogyra (Nothus) bulimoides E. A. Smith 1884.

Proc. Zool. Soc. London: 280 (sólo registro).

Fernandezia bulimoides Hyatt & Pilsbry 1911.

Man. Conch., (2)21: 94, lam. 14, fig. 4: Odhner

1922, in Skottsberg, Nat. Hist. J. Fernandez, 3:

241, pl. 9, fig. 47; Cooke & Kondo 1960, Bernice

P. Bishop Mus., Bull., 221: 238, fig. 102 a-g,

103 a-i; Stuardo & Vega 1985, Stud. Neotr. Fau-

na & Envir., 20(3): 127 (distribución).

DISTRIBUCIÓN GEOGRÁFICA: Localidad Tipo: Masatierra,

Islas Juan Fernandez (Odhner 1922).

Encontrada en las siguientes localidades y

altitudes: Rabanal (hasta 300 msnm); Puerto Inglés

(200 msnm); alrededor de Portezuelo (570 msnm):

Quebrada Portezuelo (hasta 200 msnm); Cerro Cen-

tinela (500 - 600 msnm); bajo Damajuana (300

msnm). Habita preferentemente en bosques espesos,

bajo y sobre hojas y en helechos.

OBSERVACIONES: Especie con concha oval-cónica,

columela larga, 5 a 6 anfractos y una altura máxima

de 11 mm. El último anfracto es más bien ventricoso.

Fernandezia conifera (Reeve 1849)

Achatina conifera Reeve 1849, Conch. Icon., lam.

18, fig. 98 (localidad tipo: Islas Juan Fernandez);

Pfeiffer 1853, Monogr. Helic. Vivent., 3: 455;

1856, Malak. Bl., 2: 168 (Electra: lista de espe-

cies); 1859, Monogr. Helic. Vivent., 4: 608 (lis-

184

ta de especies); Ibid., 6: 225: 1876, Ibid., 8: 281

(lista de especies).

Fernandezia conifera Hyatt & Pilsbry 1911, Man.

Conch. (2) 21: 98, lam. 14, fig. 5; Cooke & Kondo

1960; Bernice P. Bishop Mus., Bull. 221: 240.

Oleacina (Electra) conifera H. & A. Adams 1853,

Gen. Rec. Moll., 2: 105 (lista de especies).

Cionella conifera von Martens 1860, in, Albers, Die

Heliceen: 255 (Leptionaria: lista de especies).

Glessula conifera “Pease” Clessin & Pfeiffer

1881. Nomenclator: 330 (lista de especies).

DISTRIBUCIÓN GEOGRÁFICA: Localidad Tipo: Islas Juan

Fernández (Reeve 1849).

OBSERVACIONES: Hasta el momento es conocida sólo

a través de las descripciones originales de Reeve

(1849) y Pfeiffer (1853). La concha presenta una

altura máxima de 12 mm y 8 anfractos. Se caracteri-

za por una larga espira y la columela profundamen-

te torcida (Hyatt & Pilsbry 1911).

Fernandezia cylindrella Odhner 1922

Fernandezia cylindrella Odhner 1922, Moll., in

Skottsberg, Nat. Hist. Juan Fernández, 3: 242, lám.

9. fig. 49 (localidad tipo: Masatierra, Isla Juan

Fernández); Cooke & Kondo 1960, Bernice P.

Bishop Mus., Bull., 221: 241 (lista de especies):

Stuardo & Vega 1985, Stud. Neotr. Fauna & Envir.,

20(3): 127-128 (distribución).

DISTRIBUCIÓN GEOGRÁFICA: Localidad Tipo: Masatierra,

Islas Juan Fernández (Odhner 1922).

Encontrada en las siguientes localidades:

Rabanal (300 y 400 msnm); bajo Damajuana (300

msnm) y Cerro Centinela (350 y 500 msnm). En

bosques espesos, bajo hojas y helechos.

OBSERVACIONES: F. cylindrella tiene una espira

como en Tornatellina, y 11” anfractos. Es la es-

pecie más pequeña del género con una altura máxi-

ma de 5,3 mm, características confirmadas en las

muestras examinadas.

Fernandezia diaphana (King 1831)

Achatina diaphana King 1831, Zool. Journ. 5:

342: Pfeiffer 1848, Monogr. Helic. Vivent., 2:

295; 1853, Ibid., 3: 520 (lista de especies);

Moluscos terrestres de Chile: SruarDo, J.R. Y P. VARGAS-ALMONACID

1859, Ibid., 4: 627 (lista de especies); 1868,

Ibid., 6: 243 (lista de especies); 1876, Ibid., 8:

297 (lista de especies).

Fernandezia diaphana Pilsbry & Cooke 1915. Man.

Conch. (2)23: 272; Cooke & Kondo 1960, Bernice

P. Bishop Mus., Bull, 221: 241 (lista de especies);

Stuardo & Vega 1985, Stud. Neotr. Fauna &

Envir., 20(3): 128 (distribución).

DISTRIBUCIÓN GEOGRÁFICA: Localidad Tipo: Islas

Juan Fernández (King 1831).

OBSERVACIONES: No existen figuras de esta especie.

Sólo es conocida a través de su corta descripción

original.

Fernandezia expansa Hyatt & Pilsbry 1911

Fernandezia expansa Hyatt & Pilsbry 1911, Man.

Conch., 21: 95, lam. 14, fig. 1 (localidad tipo:

Juan Fernández); Cooke € Kondo 1960,

Bernice P. Bishop Mus., Bull., 221: 241 (lista

de especies); Stuardo & Vega 1985, Stud. Neotr.

Fauna & Envir., 20(3): 128 (distribución).

DISTRIBUCIÓN GOEGRÁFICA: Localidad Tipo: Islas Juan

Fernandez (Hyatt & Pislbry 1911). No se conocen

otros registros.

OBSERVACIONES: F. expansa se caracteriza por

presentar una lamela columelar muy fuerte y una

periferia subangular. Su altura máxima conocida

es de 10,5 mm, aunque, según la descripción

original, las conchas no serían totalmente adultas.

Fernandezia inornata Hyatt & Pilsbry 1911

Fernandezia inornata Hyatt & Pilsbry 1911, Man.

Conch. (2)21: 97, lam. 14, figs. 14, 15 (locali-

dad tipo: Juan Fernandez); Cooke & Kondo

1960, Bernice P. Bishop Mus., Bull., 221: 241

(lista de especies); Stuardo & Vega 1985, Stud.

Neotr. Fauna & Envir., 20(3): 128 (distribución).

DISTRIBUCIÓN GEOGRÁFICA: Localidad Tipo: Islas

Juan Fernández (Hyatt y Pilsbry 1911). No exis-

ten Otros registros.

OBSERVACIONES: Descrita como una especie estre-

chamente relacionada con F. philippiana, con una

altura máxima de 9 mm y 6 J anfractos.

Fernandezia longa Hyatt & Pilsbry 1911

Fernandezia longa Hyatt & Pilsbry 1911, Man.

Conch., (2)21: 99, lam. 14, fig. 6 (localidad

tipo: Juan Fernandez); Cooke & Kondo 1960,

Bernice P. Bishop Mus., Bull., 221: 241 (lista

de especies); Stuardo & Vega 1985, Stud. Neotr.

Fauna & Envir., 20(3): 128 (distribución).

DISTRIBUCIÓN GEOGRÁFICA: Localidad Tipo: Islas Juan

Fernández (Hyatt & Pilsbry 1911). No hay otros

registros conocidos.

OBSERVACIONES: F: longa se caracteriza por presentar

7 anfractos y © con una altura máxima de 9,9

mm. La columela ha sido descrita como recta

arriba y ligeramente plegada hacia abajo. Debido

a su parecido con FE splendida Anton podria ser

un sinónimo de ella (Hyatt & Pilsbry 1911).

Fernandezia philippiana Hyatt & Pilsbry 1911

Fernandezia philippiana Hyatt & Pilsbry 1911,

Man. Conch., (2)21: 96, lám. 14, figs. 2, 3 (loca-

lidad original: Juan Fernández); Cooke & Kondo

1960, Bernice P. Bishop Mus., Bull., 221: 241

(lista de especies); Stuardo & Vega 1985, Stud.

Neotr. Fauna & Envir., 20(3): 128 (distribución).

DISTRIBUCIÓN GEOGRÁFICA: Localidad Tipo: Islas

Juan Fernández (Hyatt & Pilsbry 1911).

OBSERVACIONES: E. philippiana tiene una longitud

de 9 mm y 6 J anfractos, el último de los cuales

es redondeado. Presenta gran parecido con F.

inornata pero se distingue por una columela corta

y una fuerte lamela columelar.

Fernandezia splendida (Anton 1839)

Bulimus (Achatina) splendida Anton 1839, Verz.

Conchyl.: 44, N° 1590 (localidad original: Opana;

error por Opara).

Achatina splendida Pfeiffer 1847, in Philippi,

Abbild. Beschr. Conch., 2: 214, lam. 1, fig. 11

(localidad original corregida: Islas Juan

Fernandez (Cumming)); 1848, Monogr. Helic.

Vivent., 2: 271; Reeve 1849, Conch. Icon., 5:

185

Gayana 64(2), 2000

lam. 19, sp. 100; Pfeiffer 1863, Conchyl. Cab.,

Bulimus, etc. 1 (13): 339, pl. 37, figs. 10-12.

Spiraxis splendida Pfeiffer 1853, Monogr. Helic.

Vivent., 3: 472; 1856, Malak. Bl., 2: 167

(Nothus; lista de especies); 1868, Ibid.. 6: 193

(lista de especies); 1876, Ibid., 8: 258 (lista de

especies).

Fernandezia splendida Hyatt « Pilsbry 1911,

Man. Conch., (2)21: 98, pl. 14, figs. 9, 10;

Odhner 1922, in Skottsberg, Nat. Hist. Juan

Fernández, 3: 241, lám. 9, fig. 48: Cooke «

Kondo 1960, Bernice P. Bishop Mus., Bull..

221: 242; Stuardo & Vega 1985, Stud. Neotr.

Fauna & Envir., 20(3): 128 (distribución).

Oleacina (Nothus) splendida H. & A. Adams 1853,

Gen. Rec. Moll., 2: 105 (lista de especies).

Stenogyra splendida Clessin « Pfeiffer 1881,

Nomenclator: 324 (Sección Spiraxis; Subsección

Nothus; lista de especies).

Stenogyra (Nothus) splendida E.A. Smith 1884,

proc. Zool. Soc. London: 280 (sólo registro).

DISTRIBUCIÓN GEOGRÁFICA: Localidad Tipo: Masatierra,

Islas Juan Fernández (Odhner 1922).

Conocida en las siguientes localidades: Cerro

Salsipuedes (350 msnm): Valle Piedra agujereada:

Quebrada Portezuelo (200 msnm): alrededor de

Portezuelo (520 msnm): Pangal: bajo Damajuana

(300 msnm).

Se ha encontrado en bosques espesos, bajo

hojas y sobre helechos; también al remecer arbustos.

OBSERVACIONES: Según Hyatt & Pilsbry (1911: 98-

99) E splendida es una especie incierta debido a

que no está claro si la concha descrita y dibujada

por Pfeiffer es idéntica o no con la de Anton. Sin

embargo, Odhner (1922) encontró a esta especie

en varios lugares de Masatierra y su descripción

y figuras concuerdan bien con la de Pfeiffer.

La concha de esta especie tiene una altura

máxima de 7 mm, 5 a 6 anfractos y es característica

por la presencia de un fuerte pliegue columelar.

Fernandezia tryoni Hyatt « Pilsbry 1911

Fernandezia tryoni Hyatt & Pilsbry 1911, Man.

Conch., (2)21: 97, lam. 14, figs. 12, 13 (locali-

dad original: Juan Fernández); Odhner 1922,

in Skottsberg, Nat. Hist. Juan Fernández, 3:

242: Cooke & Kondo 1960, Bernice P. Bishop

Museum, Bull., 221: 242 (lista de especies);

Stuardo & Vega 1985, Stud. Neotr. Fauna «€

Envir.. 20(3): 128 (distribución).

DISTRIBUCIÓN GEOGRÁFICA: Localidad Tipo: Masatierra,

Isla de Juan Fernández (Odhner 1922).

Conocida en dos localidades: El Puente y

Cerro Centinela (500 msnm). Encontrada en hele-

chos y bajo hojas.

OBSERVACIONES: F: tryoni es una de las especies más

pequeñas del género, caracterizada por tener 5 6

6 anfractos, una altura máxima de 6,6 mm y un

pliegue columelar pequeño. Tiene un tamaño si-

milar a E cylindrella de Odhner, la otra especie

pequeña del género, pero ésta es más espiralada.

Fernandezia willsoni Hyatt « Pilsbry 1911

Fernandezia willsoni Hyatt & Pilsbry 1911, Man.

Conch., (2)21: 96, lam. 14, figs. 7, 8 (localidad

original: Juan Fernandez); Cooke & Kondo

1960, Bernice P. Bishop Mus., Bull., 221: 242

(lista de especies); Stuardo & Vega 1985, Stud.

Neotr. Fauna & Envir., 20(3): 128 (distribución).

DISTRIBUCIÓN GEOGRÁFICA: Localidad Tipo: Islas Juan

Fernandez (Hyatt & Pilsbry 1911).

OBSERVACIONES: Esta especie es representante del

grupo expansa. Presenta una lamela columelar

fuerte y estriaciones finas, 7 © anfractos, y una

altura máxima de 10,5 mm.

Género Tornatellinops Pilsbry & Cooke 1915

Tornatellinops variabilis (Odhner 1922)

Pacificella variabilis Odhner 1922, in Skottsberg,

Nat. Hist. Juan Fernandez, 3(2): 249, lam. 8, figs.

15-17 (localidad original: Isla de Pascua).

Tornatellina impresa normalis Pilsbry & Cooke

1915, Man. Conch., 23: 175 (pars; Sección:

Tornatellinops).

Lamellidea variabilis Pilsbry & Cooke 1933, Nautilus

47(2): 60, note 3 (Sección: Tornatellinops). Cooke

1934, Bernice P. Bishop Mus., Occ. Papers,

101149

Tornatellinops variabilis Cooke & Kondo 1960,

Bernice P. Bishop Mus., Bull., 221: 172, fig. 76

Moluscos terrestres de Chile: SruARDO, J.R. y P. VARGAS-ALMONACID

a-h.; Stuardo & Vega 1985, Stud. Neotr. Fauna

& Envir., 20(3): 128 (distribución).

DISTRIBUCIÓN GEOGRÁFICA: Localidad Tipo: Isla de

Pascua (Odhner 1922).

También ha sido encontrada en Isla Rapa e

Isla de Palmira (Cooke & Kondo 1960).

OBSERVACIONES: 7. variabilis fue descrita original-

mente por Odhner (1922) como el único represen-

tante del nuevo género Pacificella. Sin embargo,

Cooke & Kondo (1960) han reconocido una amplia

distribución de 7. variabilis en más de 67 islas del

Pacífico, desde Isla de Pascua en el este a las Carolinas

por el oeste. Estos autores mencionan una gran

variedad de formas distintas o subespecies de T.

variabilis (pág. 173), pero no entregan ninguna

explicación acerca de su grado de diferenciación.

Género Ambrosiella Odhner 1963

Ambrosiella kuscheli Odhner 1963

Ambrosiella kuscheli Odhner 1963, Proc. Malac.

Soc. London, 35: 207 (localidad tipo: Isla San

Ambrosio, Archipiélago de las Desventuradas);

Stuardo & Vega 1985, Stud. Neotr. Fauna &

Envir., 20(3): 127 (distribución).

DISTRIBUCIÓN GEOGRÁFICA: Localidad Tipo: Isla

San Ambrosio, Archipiélago de las Desventuradas

(Odhner 1963). Encontrada sobre 400 msnm

(punto más alto de la isla).

Se ha recolectado en agujeros y grietas en la

tierra, bajo troncos caídos, alrededor de las raíces

y entre las hojas y ramas del arbusto Thamnoseris,

y también en Ctenopodium.

OBSERVACIONES: A. kuscheli posee una concha

pequeña turrito-cónica, con rayas transversales

de color café oscuro; presenta 6 a 7 anfractos

convexos y una altura máxima de 6 mm.

AGRADECIMIENTOS

Los autores agradecen a las instituciones

que permitieron la revisión de algunas muestras

estudiadas y las observaciones de los revisores

anónimos. En particular, se agradece el apoyo de

la Dirección de Investigación de la Universidad

de Concepción para financiar esta publicación.

BIBLIOGRAFIA

(Se consideran, salvo excepciones importantes, sólo

referencias que no están incluidas en las sinonimias.)

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188

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AMBIENTE ACUÁTICO / AQUATIC ENVIRONMENTS

ISSN 0016-531X

QUANTITATIVE KARYOTYPE OF DIPLODON CHILENSIS (GRAY 1828)

(BIVALVIA:HYRIIDAE)

CARIOTIPO CUANTITATIVO DE DIPLODON CHILENSIS (GRAY 1828)

(BIVALVIA:HYRIIDAE)

Pedro Jara-Seguel?, Santiago Peredo', Claudio Palma-Rojas?, Esperanza Parada! y

Gladys Lara'

ABSTRACT

The karyotype of a freshwater population of Diplodon

chilensis located in La Poza area of the Villarrica Lake

(39°18°S; 72%05"W), Southern Chile, was studied. The

chromosomes were obtained by squash of cleaving

embryos, previously treated with colchicine and fixed in

ethanol-acetic acid 3:1 at 4°C and stained using the

Feulgen reaction. Diplodon chilensis showed a diploid

karyotype of 2n = 34, with metacentric and

submetacentric chromosomes. This work is the first

approach to cytogenetic characterization of Chilean

populations of this species.

Keyworps: Hyriidae, Diplodon chilensis, karyotype,

freshwater bivalves, Southern Chile.

INTRODUCTION

Diplodon chilensis (Gray 1828) is a

freshwater bivalve, widely distributed in lakes and

rivers from central and southern Chile.

However, information of this species are

restricted to ecological studies reported by Peredo &

Parada (1986), Parada et al. (1987, 1989 a, b, 1990),

and Parada & Peredo (1994). Therefore, it is funda-

mental to understand processes such as evolution,

'Departamento de Ciencias Biológicas y Físicas, Facul-

tad de Ciencias, Universidad Católica de Temuco, Casi-

lla 15-D, Chile. E-mail: speredo Ouctem.cl

“Laboratorio de Citogenética, Departamento de Biología,

Universidad de La Serena, Casilla 599, La Serena, Chile.

RESUMEN

Se estudió el cariotipo de una población dulceacuícola

de Diplodon chilensis ubicada en el sector La Poza del

Lago Villarrica (39°18’S; 72°05’O), sur de Chile. Los

cromosomas fueron obtenidos por aplastado de

embriones en segmentación, pretratados con colchicina,

fijados en etanol-ácido acético 3:1 a 4°C y teñidos

mediante la reacción de Feulgen. Diplodon chilensis

presenta un cariotipo diploide 2n = 34, constituido por

cromosomas metacéntricos y submetacéntricos. Este

trabajo es el primer aporte a la caracterización

citogenética de poblaciones chilenas de esta especie.

PALABRAS CLAVES: Hyriidae, Diplodon chilensis, cariotipo,

bivalvos dulceacuícolas, sur de Chile.

phylogenetic relationships and the current taxonomic

classification, which are still under discussion in D.

chilensis.

In Chile and the Argentinean Patagonia have

been described 25 species of Diplodon Spix 1827,

named as D. chilensis by Haas (1930-31). This author

(1969) used shell features to recognise two

subspecies: D. chilensis chilensis distributed from

Valparaiso to Chiloé and D. chilensis patagonicus

inhabiting in Austral Region (Chile) and the

Argentinean Patagonia with Futalauquén Lake as

meridional argentinean border. Moreover, evolutive

relationships of the Chilean hyriids was proposed

by Parodiz (1977) based on morphology, shell

features of fossils and biogeographical data. At

present, no accurate and reliable genetic information

has been published.

189

Gayana 64(2), 2000

Karyotypes are known for most marine

bivalve mollusks (Palma-Rojas et al. 1997).

However, in freshwater bivalves, only have been

reported the karyotipes of the unionids Unio

pictorum and U. tumidus and Dreissena polymorpha

(Dreissenidae)(Barsiene 1994).

This paper was carried out to investigate

karyotypical characteristics of a freshwater population

of D. chilensis from Villarrica Lake, Southern Chile.

The aim is to improve our knowledge on genetic data

of Chilean and South American hyriids.

MATERIALS AND METHODS

During January 1998, adult specimens of D.

chilensis were collected in La Poza area, Villarrica

Lake (3918”S; 72°05’ W), Southern Chile.

Cleaving embryos were removed from the

inner demibranchs of gravid females and used to

study the karyotype. Chromosomes were obtained

from embryos using the squash method, previously

treated with colchicine at 0.05% for 3 hours. The

samples were fixed in ethanol-acetic acid 3:1 at 4°C,

and stained using the Feulgen reaction (Navarrete

et al. 1984) and acetocarmine.

Sixty metaphase plates were counted, and the

best 10 plates were photographed. Chromosome

morphology was established according to the centro-

meric index (CI) Levan et al. (1964). Total chromo-

some relative length, as a percentage, and the relative

lengths of short arm (SA) and long arm (LA) over

total length of the haploid complement, were also

obtained. SA and LA lengths were used to elaborate a

karyo-ideogram to analise chromosome differences

within as well as between karyotypes (Spotorno 1985).

RESULTS

Cleaving embryos of Diplodon chilensis showed

a diploid karyotype 2n = 34, with 9 pairs of metacentric

chromosomes (m) and 8 pairs of submetacentric

chromosomes (sm). Two chromoso- mes (pairs 1 and

2) are twice more longer as pairs 16 and 17 (Figures 1-

3). Chromosomes lengths range between 2.5 and 6.5

um (Table I).

The mean relative arm length of the short arm (SA)

and long arm (LA) for each chromosomic pair together

with its confidence intervals are summarized in Table I.

190

DISCUSSION

Diplodon chilensis presents symmetrical

karyotype according to Stebbins (1971). Likewise,

morphometric characteristics agrees with previous

reports for other species such as Unio pictorum and

U. tumidus (Barsiene 1994). However, the diploid

chromosome number of D. chilensis (2n = 34) is lower

than Unio species (2n = 38).

Due to the staining method used in this study

it was not possible to show any secondary

constrictions within the chromosomes that could

indicate the amount and location of nucleolar

organizer regions (NOR) within the karyotype.

Nevertheless, in interphasic embryonic cells it was

observed a number of nucleolei that ranged between

l and 2 per nucleus, which, probably, indicate two

active NOR in the karyotype of this species.

Karyotype characteristics of D. chilensis, such

as the number and size of chromosomes, and

symmetry, emphasise the relevance to increase

cytogenetic studies in the genus. Parada et al. (1990)

and Parada & Peredo (1994) proposed that variability

on morphological and life strategies in D. chilensis

should be caused by environmental factors. Future

studies on chromosome banding such as C- banding,

silver staining of NORs and G banding procedures

in lentic and lotic populations will provide

cytological information to dilucidate whether the

variability on morphological and life strategies in D.

chilensis are related to differences of genetic type

and also to understand chromosomal divergence and

evolutionary significance in the genus Diplodon.

ACKNOWLEDGMENTS

This work was supported by Dirección de

Investigación, Catholic University of Temuco-Chile

(Proyect: 99-4-03). The authors wish to thank Dr.

Elisabeth von Brand for the critical review of the

manuscript.

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TABLE I. Relative mean length in um (+ confidence interval (CI) at 95%) of the short arm (SA) and long arm (LA)

of each chromosome pair, chromosome size (CS), and chromosome shape (SH)

La Poza area Villarrica Lake, Southern Chile (n = 10).

Chromosome SA (El

pair

l 5.37 0.60

2 3.20 0.28

3 3.23 0.35

4 AS 0.52

3 2.40 0.58

6 2.47 0.26

7 1.85 0.31

8 1.90 0.45

9 2.00 0.46

10 2.05 0.20

11 1.85 0.48

12 1.72 0.32

13 1.65 0.36

14 1.35 0.20

15 1.70 0.32

16 1.34 0.29

17 [oR 0.25

of Diplodon chilensis, located in

LA Gi CS SH

5.90 0.19 6.5 m

5.10 0.63 4.8 m

3.92 0.37 4.1 m

3.80 0.25 37 m

3.70 0.51 55) m

2 0.54 53 m

3.62 0.32 382, sm

3.45 0.51 Sal sm

1162 0.51 520 m

3.10 0.16 3.0 m

3.15 0.47 2.9 m

EPIA 0.14 2.9 sm

3.10 0.31 2.8 sm

3.40 0.16 2.8 sm

2.92 0.44 2.6 sm

3.20 0.29 2.6 sm

3.07 0.17 25 sm

191

Gayana 64(2), 2000

104m

FIGURE 1. Metaphase plate from embryos of Diplodon chilensis (Feulgen reaction stain).

eh eae

ÉS ¡6 38 58 23 858

7 8 9 10 1 12

10 um

FiGURE 2. Karyotype of Diplodon chilensis, from La Poza area, Villarrica Lake, Southern Chile.

Quantitative karyotype of Diplodon chilensis: JARA-SEGUEL, P. ET AL.

% Long Arm (LA)

0 1 2 3 “ 5 6

% Short Arm (SA)

Ficure 3. Karyo-ideogram of Diplodon chilensis. (t = telocentric; st = subtelocentric; sm = submetacentric; m =

metacentric; LA = long arm; SA = short arm; CS = chromosome size.

Fecha de recepción: 03.01.2000

Fecha de aceptación: 20.04.2000

193

Gayana 64(2): 195-204, 2000

ISSN 0016-531X

Cu, Pb AND Zn DISTRIBUTION IN NEARSHORE WATERS IN SAN JORGE

BAY, NORTHERN CHILE

DISTRIBUCION DE Cu, Pb Y Zn EN AGUAS COSTERAS DE BAHIA SAN

JORGE EN EL NORTE DE CHILE

Marco A. Salamanca’, Andrés Camaño”, Bibiana Jara' & Tatiana Rodriguez*

ABSTRACT

An extensive spatial survey metal content to study the spatial

distribution of Cu, Pb and Zn concentration in nearshore waters

of San Jorge Bay, along the coast of Antofagasta City, Chile

was carried out located near the Atacama desert, which

represent the largest populated urban settlement in northern

Chile (- 260,000 inhabitants). The coastal zone of this area is

under an intensive use as discharge location of pollutants of

different sources. Dissolved Cu varies between 0.97 to 1.65 Ug

1”, in the southern part of the study area and in front of an

industrial discharge, respectively. The dissolved Pb shows a

narrow concentration range (0.019 to 0.029 ug 1*) and Zn

content varies between 1.7 ug 1* in the northern part of the

study area to 2.0 ug I', in front of the industrial discharge zone.

The particulate Cu fraction pattern is similar to that of dissolved

Cu, with concentrations varying between 126.8 tig g' and 467.2

ug g'. Particulate Pb ranges between 9.8 to 33.8 ug g', and Zn

149.7 to 403.5 u g g'. The spatial distribution of both, dissolved

and particulate Cu, Pb and Zn results from local industrial

sources located within Antofagasta City and San Jorge Bay

current system that dilutes them as the water moves to the north.

The particulate fraction is the dominant form of the metals,

probably due to the dust coming from the Atacama desert,

representing an important natural source of these metals to the

water of the bay, particularly in those locations far from local

inputs.

Keyworbs: Trace metal distribution, coastal waters, desert

areas.

‘Departamento de Oceanografía, Facultad de Ciencias

Naturales y Oceanográficas, Universidad de Concepción,

Casilla 160-C, Concepción, Chile.

“Gerencia de Medio Ambiente, Minera Escondida Ltda.,

Casilla 690, Antofagasta, Chile.

‘Instituto de Investigaciones Oceanológicas, Facultad de

Recursos del Mar, Universidad de Antofagasta, Casilla

170, Antofagasta, Chile.

RESUMEN

En este estudio se realizó una investigación espacialmente

extensiva para conocer la distribución de Cu, Pb, y Zn en

el agua de la zona intermareal del sector costero de Bahía

San Jorge, cerca de la ciudad de Antofagasta, que repre-

senta la mayor densidad poblacional (~ 260.000 habitan-

tes), en el norte de Chile. La zona costera de esta bahía es

intensameñte utilizada como área de descarga de diferen-

tes fuentes de contaminación. Los resultados indican que

el Cu disuelto varía entre 0.97 y 1.65 mg I", al sur del área

de estudio y frente a la zona industrial de la ciudad, res-

pectivamente. El Pb disuelto varía entre 0.019 y 0.029 mg

1? y el contenido de Zn entre 1.7 mg I' en la parte norte

del área de estudio y 2.0 mg I', frente a la descarga de la

zona industrial. La distribución de la fracción particulada

de Cu es similar a la disuelta, con concentraciones que

varían entre 126.8 mg g* y 467.2 mg g”. El Pb particulado

presenta un rango entre 9.8 y 33.8 mg g', y el Zn entre

149.7 y 403.5 mg g'. La distribución espacial encontrada

es el resultado de los diferentes aportes locales y del siste-

ma de corrientes litorales que diluyen los aportes así como

el agua se mueve hacia el norte. La fracción particulada

es la forma más abundante de los metales, probablemente

debido al aporte del polvo atmosférico proveniente del

desierto de Atacama, representando una fuente natural de

metales a las aguas de la bahía.

PALABRAS CLAVES: Distribución de metales traza, aguas

costeras, areas desérticas.

INTRODUCTION

Coastal areas near urban and industrial

areas are affected by the waste products of both

activities which, in many cases, change the na-

tural trends of substances that have natural and

195

Gayana 64(2), 2000

anthropogenic sources. Usually, these sources are

multiple and variable in nature, supplying different

kinds of wastes, and thus changing the composition,

distribution and abundance of pollutants in these areas

(Luoma 1990; Giordano et al. 1992; French 1993).

In this context, trace metals have been one of

the main group of elements whose abundance in the

environment has been extensively studied, because

of their toxicity and because trace metals are also

produced in significant amounts, both in urban and

industrial processes. These metals have natural

source that reaches the coastal zone by the same

biogeochemical pathways used by anthropogenic

sources, mixing both signals, which complicates the

understanding of their spatial distribution patterns

(Chester & Murphy 1990). On the other hand, many

trace elements are considered as essential for

organisms and thus their relative abundance is

influenced significantly by biological processes. In

fact, it is well known that several trace metals such as

Cd, Ni, Cu and Zn have a similar distribution pattern

as algae micronutrients (Bruland 1980; Danielsson

1980; Boyle et al. 1981; Jickells £ Burton 1988;

Hunter & Ho 1991). This is to be interpreted as these

trace elements are involved in biological cycling, and

thus its distribution and abundance can reflect

biological activity (Kudo et al. 1996).

In Chile the studies of trace metals in the marine

system are scarce and basically shows the existence

of areas of high metal concentration such as Chañaral

Bay in northern Chile (Castilla 1983; Olivares & Ruiz

1991) and San Vicente Bay in central south Chile

(Salamanca et al. 1986). On the other hand, the history

of heavy metals in Caleta Coloso (northern Chile),

Concepción Bay (central south Chile) and in

Chacabuco Bay (fjords area) has been established

(Salamanca & Camaño 1994; Salamanca 1996). In

all these locations, anthropogenic trace metals signals

has been clearly detected, indicating an alteration of

metal natural supply processes. Finally, sediments

cores from the fjord and Strait of Magellan area has

been analyzed for heavy metals, showing natural Cd,

Cu, Pb and Zn vertical distributions in sediment

column (Ahumada 1996).

The present study was carried out in San

Jorge Bay, along the coast of Antofagasta City,

located in the Atacama desert, which represents the

largest populated area in northern Chile (~ 260,000

inhabitants). The coastal ocean waters receive

several discharges from municipal and industrial

196

activities, including eight domestic effluents, three oil

loading terminals, two non treated industrial

discharges (one of them is the Fiscal Port where

mineral concentrate is loaded) and one treated (Minera

Escondida effluent). These discharges are mainly

concentrated in the northern side of the city, being the

Minera Escondida port facilities the only industrial

activities to the south of Antofagasta City (Fig. 1).

The oceanographic conditions of San Jorge Bay

are not well characterized, but the bay is dominated

mostly by cold waters of the Humboldt current and by

an intermittent upwelling process (Marin et al. 1993;

Escribano et al. 1997; Rodriguez et al. 1996). The

temperature range vary between 13.13 and 21.07°C.

The coastal zone of the study area is under

intensive and extensive use as discharge location

of different sources of pollutants, so in this research

an extensive spatial survey of metal content was

carried out to verify the current status of Cu, Pb

and Zn content in the nearshore waters of this area,

both in the particulate and dissolved fractions.

METHODOLOGY

SAMPLING

One liter seawater samples from seven

locations behind the surf zone, along the coastal

area of San Jorge Bay in Antofagasta, northern

Chile (Fig. 1), were collected manually in narrow

mouth low density polyethylene bottles (Nalgene)

in June, October and December of 1996. The bottles

were exhaustively cleaned involving soaking in

detergent solution (2% v/v) Extran 300 for 24 h,

rinsing with abundant deionized water and then a

acid treatment with 3 M Merck Suprapur HCl for

another 24 h, rinsing with deionized water and

soaked with HNO, for another 24 h followed by

rinsing with copious quantities of Milli-Q water.

Each bottle was stored separately in re-sealable

polyethylene bags. The samples were collected in

triplicate and are reported as average values.

ANALYSIS

The dissolved metals fraction was obtained

by pressure filtration using 0.45 um acetate

cellulose membranes pretreated with deionized

water and a 3M HCI solution and rinsed with

Heavy metals in northern Chile: SALAMANCA, M.A. ET AL.

abundant Milli-Q water. A total of 1.5 1 of sample

were filtered, discarding the first 500 ml. A separate

subsample (250 ml) was taken for Zn analysis and

another subsample (500 ml) was considered for Cu

and Pb determination. These samples were acidified

with 0.03 M HCl and concentrated HNO,,

respectively using Merck Suprapur acids. |

The solid material retained by the membrane

was analyzed for particulate metals, rinsing the

filters with Milli-Q water and stored frozen until

analysis. These samples were digested in

concentrated HNO, using clean teflon bombs

heated for 1 h at 160°C. After cooling the residue

was made up to 25 ml with Milli-Q water to be

analyzed for Cu, Pb and Zn.

Trace metals were analyzed by Anodic

Stripping Voltametry (ASV) using a ISS-820

Radiometer Polarograph in the Chemistry Depart-

ment of the Antofagasta University, Chile. The

accuracy and precision of the analytical method were

assessed using CASS-3 (National Research Council

of Canada) certified standard coastal seawater.

Quality appraisal data are given in Table I.

RESULTS

The accuracy analytical results obtained for

the reference material CASS-3 vary between less

than 1% (Zn) to 6.3% (Pb), with a precision about

5% (Table I), indicating an acceptable accuracy and

precision of the analytical techniques.

The average trace metals and total suspended

solids (TSS) data obtained in the study area are

presented in Table II. The average TSS does not shows

large variability between sampled locations. On the

contrary, trace metal present a clear spatial distribution

showing higher concentrations within Antofagasta City

limits, being Station 5, near by the industrial sector, the

zone that present the highest metal concentrations.

Figure 2 presented the annual average

concentration of the dissolved (upper) and

particulate (lower) fractions of Cu, Pb and Zn for

each sampled location. These results shows a clear

spatial trend in the particulate fraction where Sta.

5 (Antofagasta Industrial Park) present the highest

metal content. The dissolved fraction this location

also slowed the highest content of Cu and Zn, but

in the case of Pb the highest concentration was

presented in Sta. 3 to the south of Antofagasta city.

Particulate copper distribution is characte-

rized by uniform concentration along the coast with

values between 100 ~ 150 ug g' except in Sta. 5

where there is a clear increase up to 450 ug g*. The

dissolved Cu, on the other hand, shows a pattern

characterized by lower concentration in the

southern side of the study area, increasing towards

the north, reaching a maximum in Sta. 5, to decrease

again in Sta. 6 and 7. However this decrease does

not reach the level of southern locations.

Lead present a different spatial distribution

pattern when compared with that of Cu. Particulate

lead showed two locations with high concentrations,

both located between Antofagasta City limits. Further

south or north, the concentration decrease by about

50% (Fig 2). However, the dissolve fraction spatial

distribution pattern exhibits a uniform concentrátion

along the coast, except in Sta. 3 where there is a clear

increase of this metal in sea water.

Finally, particulate Zinc showed a spatial

distribution pattern comparable to that of lead, ¡.e.,

high concentration within city limits (Sta. 3, 4 and 5)

and lower values to southern and northern limits of

the study area. The highest concentrations

corresponded to Sta. 5. On the other hand, the

dissolved fraction of Zn showed large variability in

its spatial distribution with increasing concentration

station in Sta. 3 relative to southern stations, to

decrease again in Sta. 4 again, to reach a maximum

in Sta. 5, decrease again in Sta. 6, to finally reach the

lowest level in Sta. 7, far to the north of study area.

DISCUSSION

SPATIAL DISTRIBUTION

The spatial distribution of Cu, Pb and Zn along

the waters the coastal zone of San Jorge Bay is clearly

affected by the inputs from local sources and the

hydrodynamic of area. In fact, a predominant current

moving towards the North running along the San

Jorge Bay, in response to wind pattern, has been

described (SHOA 1988). This can explain the metal

distribution pattern, characterized by lower

concentration in the southern part of the studied area,

where there are no important trace metals sources,

except Minera Escondida facilities. As the water

moves toward north, receive the discharge of in-

dustrial and municipal effluents, reaching a

197

Gayana 64(2), 2000

maximum just in front to a industrial Port area, to

decrease again further north.

To verify this pattern, the data on metal

concentration were analyzed using exploratory

analysis based on multivariate statistical techniques.

Fig 3 presented the results of Principal Components

Analysis (a) and Correspondence Analysis (b). Both

tests shows comparable results, separating the

locations in three groups. Group I includes Univer-

sidad de Antofagasta, Puerto Antofagasta and Las

Rocas, which correspond to sampling location within

Antofagasta City limits (Fig. 1), Group II includes El

Lenguado, Murallones and Los Metales sites, located

far from city limits, in fact, these points are close to

external limits of the studied area. Finally, Group III

considers the sampling site located in front of the

discharge of the industrial Port, well separated of the

other two groups. This distribution supports the

reasoning that the local sources determine the

abundance of the three studied metals in coastal

waters of San Jorge Bay.

The spatial relation for each metal was

evaluated using Cluster Analysis. In Fig. 4 it 1s

presented the resulting clusters, which are not

equivalents but shows some similarities,

particularly in separating the site in front of in-

dustrial Port discharge, and the relation between

El Lenguado and Murallones stations, which

represent the southern limit of the study area. It is

interesting to note that in the case of Cu and Zn,

sites located at the extremes of the bay are grouped

together. On the contrary, the largest mixing of

locations is shown in the Pb distribution, reflecting

more scatter in the sources, which might be due to

the atmospheric mobilization of this metal from a

local source such as Antofagasta City.

METAL PARTITIONING

The partition of metal between dissolved and

particulate fractions may be defined by a distribution

coefficient K,, (McManus & Prandle 1996):

K,= €, FC, x 0.000001

with C, = C,/SS, where C, is the concentration in

the particulate fraction (ug I') and SS the suspen-

ded sediment concentration (mg 1*), which

represent the metal concentration in the particulate

198

fraction (ug mg! of suspended particulate material)

and C,, being the dissolved concentration fraction

(ug 1”). Thus the resulting units of K, are in ml g”,

and the 0.000001 factor represent the conversion

factor for SS in mg I' to SS in g ml". The resulting

K,, computed as described above, are presented in

Table III. The lower K,, values are shown by Cu (~

10°) and the largest by Pb and Zn (~ 10%). In gene-

ral, the distribution of trace metals in surface waters

is controlled by the input function, the circulation

effects and internal processes, such as output,

trapping or recycling (Chester 1996). In a coastal

zone, such as the present study, the metals are

supply mainly via atmospheric, through terrestrial

dust in suspension from the desert nearby (river run

off is considered negligible, since no water

discharge at all exists in the area) and local

anthropogenic sources. A third sources that can

supply metals to the particulate fraction is the

biogenic particles produced in situ, but this source

can be important only during the high production

season, which occurs in spring and summer time

with Chlorophyll a values between 8.1 to 155.4 mg

m” (Rodriguez et al. 1996). The first two source

are probably the most important in supplying

metals, mainly in the particulate form, which is

indicated by high K,, values (~ 10°- 10%) calculated

for Cu, Pb and Zn. Considering that the TSS values

vary between 15.7 and 17.2 mg I' the mass of

metals in the particulate fraction in fraction is an

important source. In fact, McManus & Prandle

(1996) indicate for the North sea K,, values less than

10° show dominance of the dissolved fraction. On

the other hand, the three order of magnitude

difference between K,, values for the studied metals

can also be a reflect of the different biogeochemical

behavior of the metals (Kremling et al. 1997),

particularly in the case of Pb, where the atmospheric

supply can enhanced by Pb from the combustion

of cars circulating in Antofagasta City. This burden

of trace elements reaching the nearshore waters

then is redistributed by the current system described

above, which tend to transport the water towards

north. This motion can also explain the decrease of

Cu, Pb and Zn further north the Puerto Industrial

discharge, diluting the trace metal content as the

waters moves to the northern part of San Jorge Bay,

producing a diminish of the concentrations to levels

that are comparable to the southern situation, where

the lower metal concentrations are found.

Heavy metals in northern Chile: SALAMANCA, M.A. ET AL.

CONCLUSIONS

The main conclusion that can be drawn from

this study is that the Cu, Pb and Zn in the coastal

waters of San Jorge Bay, is in response to a local

input from a industrial discharge coming from an

industrial park located within Antofagasta City limits,

and the current system that run from south to the

north, carrying away the metal and diluting them as

the water moves to the north. This explains the sharp

decrease of Cu, Pb and Zn in the waters of the

northern part of the bay.

The particulate fraction is the dominant form

of the metals in the study area. This is expected,

since the main atmospheric source of metals is dust

coming from the Atacama desert, representing a

natural input to the water of the bay. The other source

is a local discharge from an industrial park, which

also have the largest TSS content, representing an

anthropogenic supply.

The distribution coefficient K,, vary between

10°- 10°, indicating the dominance of the particulate

fraction if this metal in the coastal waters of San

Jorge Bay.

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199

Gayana 64(2), 2000

TABLE I. Summary of quality control data.

TABLA I. Resumen del control de calidad de los datos.

Element “Found Certified CASS-3 "Accuracy ‘Precision

(ug 17) (ug 17) (%) (%)

Cu 0.530 0:17 4) 3.9

Pb 0.013 0.012 6.3 ell

Zn 1.247 1.240 0.5 6.7

“Mean value of 12 measurements

"Percentage deviation away from certified value of CASS-3

“Relative standard deviation of CASS-3 analysis (n=12)

TABLE II. Total suspended solids and average* seawater trace metal concentrations along the coastal zone of San

Jorge Bay, Antofagasta area.

TABLA II. Concentración de sólidos totales suspendidos y contenido promedio* de metales en traza en agua de mar,

a lo largo de la zona costera

TSS (mg 1) Dissolved (ug I!) Particulate (ug g*)

Location cv |Cu cv Pb cv Zn cv | Cu cv Pb cv Zn cv

El Lenguado (1) V5.7 +25.7 10:97. 12.7 0:019 29.5. 1.78 22:01) 126.8 41.0 1421023529 NM51828

Murallones (2) 15.9) 20.3) 1.12... 6:8 0.020 57.7 1:74 31:03/173.0.42:0. 98-111 S5HMSS2

Universidad de Antofagasta (3) 16.3 30.2 |1.16 19.8 0.029 73.0 1.92 35.17] 153.3 53.0 31.2 94.0 346.2 95.18

Puerto Antofagasta (4) 15:8) 27.0,11:21 15.1 01017 21.1 1.88 19.87) 152.8 60:0 16:0 36.0" 343185858

Descarga Industrial (5) 17.2 18.1 |1.65 42.4 0.020 29.0 2.00 10.49| 467.2 40.3 33.8 48.8 403.5 50.88

Las Rocas (6) 16.8 20:6 |1.12 16.7 0.019 21.1 1.96 14.73) 161.4 46.3 18:6 320" 20837459

Los Metales (7) [16.4 31.7 [1.14 29.0 0.018 22.2 1.70 46.49| 152.5 31.7 7.0 86.6 179.4 53.70

*Calculated as the average value of june, october and december 1996 sampling.

Numbers in parenthesis indicate the location of sampling stations, shown in reference map.

TABLE III. Partition coefficients of samples in the study area.

TABLA III. Coeficientes de partición en las muestras del área de estudio.

Location K,Cu (x10°) K Pb (x10*) K ,Zn (x10*)

El Lenguado (1) esi 7.62 0.84

Murallones (2) 22 4.89 1.02

Universidad de Antofagasta (3) 132 10.76 1.80

Puerto Antofagasta (4) 1.26 9.62 1.83

Descarga Industrial (5) 2.83 17.16 2.02

Las Rocas (6) 1.44 9.80 1.06

Los Metales (7) 1.34 3.89 105

200

Heavy metals in northern Chile: SALAMANCA, M.A. ET AL.

E | $ 2

“> E | Cerro Moreno ‘ 2 g

ick: Vaan Drank ee ea a AEROPUERTO CERRO MORENO occ cc ceceeeeceaeeseeseeeeeees

Caleta Vieja

Punta Colorada Punta La Chimba : | ano

Caleta Abtao

Caleta Colo Colo |

| : a

Punta Jorge ña ; ;

_LaGhiinba ie

O | os.

= |Z

STACION 6 Wh Ore

O | | +’ WN -7.390.000

A —_ A > -A——+—»1w1 — - I,” t I

» STACIÓN 5 ay

=< 8 | ae

Ry 7 | i,

El Caleta del Cobre Norte | Quebrada Caracoles. e

a E Caleta Poza del Salitre | Mx ~;

SALAR DEL CARMEN

Puerto Antofagasta ANTOFAGASTA : q

— NA A

PEA N -7.380.000

SIMBOLOGIA

D O Descarga doméstica

%e :

Ae, C @ Terminal de carga

rm |

A Descarga industrial

\ sin tratamiento

ze | Descarga industrial

ze | AT + tratada

Caleta Coloso" ‘ FR Estaciones muestras

AT-14 2 Colas, a agua de mar

Punta Coloso

Est. La Negra +. N -7.370.000

FIGURE 1. Map of the study area, showing the sampling stations and main pollutant discharges to San Jorge Bay

coastal waters.

FIGURA 1. Mapa del área de estudio, mostrando las estaciones de muestreo y las principales descargas de contami-

nantes a las aguas costeras de Bahía San Jorge.

201

Gayana 64(2), 2000

"SAJBIIJA SOT (1) A SedOyY se] (9) ‘feLasnpuy e3e9sag (¢) “esse3ejojuy ong (p) “e]Se3RJOJUY OP PepIsIOAIUA] (€) “SIUO[IeINIA (7) topen3ua7 14

(1) :sapepreoo] sajuarpuodsaxio9 sns Á oansenul DP SIUOLDRISH *33IO[ UPS PIYRG ap sense se] ua opepnonied A oyansip uz A qd NI ap [eroedsa uOranqiasIiG 7 vanol

“SAJBIIA SOT (1) pue sedoy se] (9) ‘[eLsnpuy esiedsaq (s) “ese3ejojuy OVeng (fp) “e1se3ejojuy op PepIssaatuy (¢) ‘souoTfemnyy (7) *open3ua7]

14 (1) :suonesoy Surpuodsax1o9 sy pue Jaquinu uone]s Surdures “siem Avg 93101 UBS UL UZ pue qd ‘ND JO UONNQINSIP jeneds! ayeynonsed pue paajossiq “7 INDIA

"SABIA SO] (L) ¿sedoy se] (9) Iv 'd ap e3ue9sa( (Ss) “e]seBejojuy op 03.194 (p) tejseBejozuy ap pepisssamuy (€) “souo ena (7) ‘opensusy 14 (1) :suoyes0]

suoye307 suoye3o]

suoyeo7

(3/a11)

uoyHIBAA 2J8MIYAB Y

UOBI8 1] 2) NIYAE

suone3oT suonye30T

00'0

070

0b'0

090

080

001

ob"1

091

081

(yan)

UOHIA] peajossig

UO0BIB IA PIALOSSK] UOYIB 1H PIAJOSSK(J

202

Heavy metals in northern Chile: SALAMANCA, M.A. ET AL.

Principal Components Analysis a

% Descarga de

RAE

Universidad de Puerto de

% Antofagasta Antofagasta

Las Rocas

Murallones

Eigenvalue

@Los Metales

@ El Lenguado

0,86 0,88 0,9 0,92 0,94 0,96 0,98 1

Eigenvalue

Correspondence Analysis Locations b

200

150 Universidad de

Puerto de Antofagasta

Antofagasta

100

3 50

á Las Rocas

in 0

50 Murallones

j e

ES Los Metales e

El Lenguado Descarga de P.A.I.

-150

-200 -150 -100 -50 0 50 100 150 200

Eigenvalue

Ficure 3. Locations groups resulting from multivariate analyses. a) Principal Component Analysis and b)

Correspondence Analysis.

FIGURA 3. Grupos de localidades resultantes del análisis multivariado. a) Componentes Principales y b) Análisis de

Correspondencia.

203

Gayana 64(2), 2000

Cu Locations Cluster

(4) Pto. Antofagasta

(5) Desc. Industrial

0 100 200 300 400 500 600

(1) El Lenguado

(2) Murallones

(4) Pto. Antofagasta

(6) Las Rocas

(7) Los Metales

(3) U. Antofagasta

(5) Desc. Industrial

(1) El Lenguado

(2) Murallones

(6) Las Rocas

(7) LosMetales

(3) U. Antofagasta

(4) Pto. Antofagasta

(5) Desc. Industrial

Euclidean Distance

FIGURE 4. Cluster diagram for Cu, Pb and Zn distribution in the coastal waters of San Jorge Bay. Sampling station

number and its corresponding locations: (1) El Lenguado; (2) Murallones; (3) Universidad de Antofagasta; (4)

Puerto Antofagasta; (5) Descarga Industrial; (6) Las Rocas and (7) Los Metales.

FIGURA 4. Dendrograma de la distribución de Cu, Pb y Zn en las aguas costeras de Bahía San Jorge. estaciones de

muestreo y sus correspondientes localidades: (1) El Lenguado; (2) Murallones; (3) Universidad de Antofagasta; (4)

Puerto Antofagasta; (5) Descarga Industrial; (6) Las Rocas y (7) Los Metales.

Fecha de recepción: 23.03.2000

Fecha de aceptación: 30.08.2000

204

Gayana 64(2): 205-218, 2000

REVISION / REVIEW

ISSN 0016-531X

SISTEMA INMUNE EN PECES

FISH IMMUNE SYSTEM

Susana E. Olabuenaga*

RESUMEN

La función esencial del sistema inmune en todos los

vertebrados es la defensa contra las infecciones. Los peces

presentan una respuesta inmunológica bien desarrollada e

integrada, y en el caso de los Teleósteos, con algunas simili-

tudes respecto a los vertebrados superiores. Puede ser

dividido en dos tipos: innato o inespecífico y adquirido o

específico, ambos compuestos por una parte humoral y celular.

Su importancia puede variar con la edad del pez y está

influenciada por distintos factores. Se mencionan aquí sus

componentes más relevantes. En los peces existen dos factores

que influencian notoriamente la respuesta inmune y la

producción de anticuerpos, que son los cambios estacionales

y la temperatura. Se describen los principales Órganos

linfoides, el timo, el riñón y el bazo, así como el proceso

ontogénico linfocitario. Si bien se ha avanzado mucho en los

últimos años, todavía se necesitan estudios de inmunología

básica en las distintas especies que ayuden a caracterizar las

poblaciones efectoras y sus mecanismos de acción.

PALABRAS CLAVES: Antígeno, anticuerpo, leucocitos,

fagocitosis, linfoquinas, inflamación, inmunoestimulantes.

INTRODUCCION

La función esencial del sistema inmune en todos

los vertebrados es la defensa contra las infecciones,

este sistema permite la sobrevida del individuo y

mantener sus funciones corporales en un medio que

por naturaleza le es hostil. Los peces son un grupo

ampliamente divergente representado aproximada-

"Miembro de la carrera de investigador del CONICET.

Cátedra de Ictiopatología, Centro Regional Universitario

Bariloche, Universidad Nacional del Comahue, Quintral

1250, Unidad Postal Univiversidad Nacional del Comahue,

8400 Bariloche, Rio Negro. E-mail: oserra@cab.cnea.gov.ar

ABSTRACT

The defence against infections is the essential function of

the immune system of all Vertebrates. Fish present an efficient

and developed immunologic response and in the case of

Teleosts, with some similarities to the higher vertebrates. It

can be divided into two types: innate or non specific and

adquired or specific, both with a humoral and cellular

compartments. Their relative importance can change

according to the age of fish and is always under the influence

of different factors. The most relevant components are

mentioned here. There are two factors in fishes which

strongly influence the immune response and antibody

production, seasonal changes and temperature. The main

lymphoid organs are described here: the thymus, the kidney

and the spleen, as well as the lymphocyte ontogenic process.

Some advances in knowledge were published during the

last years, however it is still necessary to develop new studies

in basic immunology in different species to caracterize

effector cell populations and their functions.

Keyworps: Antigen, Antibody, Leukocytes, Phagocyto-

sis, Lymphokines, Inflammation, Immunostimulants.

mente por 20.000 especies que ocupan distintos

habitats. Estudios filogenéticos indicaron una

divergencia entre protostomos (anélidos, moluscos,

artropodos) y deuterostomos (equinodermos,

tunicados, cordados) que ha tenido lugar alrededor de

500 a 600 millones de años atrás y es a partir de este

último grupo que se han desarrollado los peces en

distintas direcciones (Jarvik 1980).

Dentro de la línea de los vertebrados se en-

cuentran, en primer lugar, los Elasmobranquios (ra-

yas, tiburones) que presentan inmunoglobulinas y

moléculas del complejo mayor de histocompa-

tibilidad y luego son seguidos por los Teleósteos

que además presentan el sistema complemento y la

proteína C reactiva (Marchalonis & Schluter 1994).

205

Gayana 64(2), 2000

La respuesta inmune de los peces en general está

bien desarrollada e integrada, y en los Teleósteos es

donde se encuentran muchas similitudes funciona-

les con la respuesta observada en los vertebrados

superiores; normalmente funciona con eficiencia,

aunque como cualquier otro sistema fisiológico, el

sistema inmune de un individuo se ve afectado cuan-

do el estado de salud es deficiente. En términos de

una población, cuando las condiciones del medio

son adversas, aumentan los riesgos de una infec-

ción y se pone en peligro la salud de todo el conjun-

to de ejemplares. Existen una serie de factores que

influyen el desarrollo de una buena respuesta, y en

algunas ocasiones la deprimen significativamente.

Estos se clasifican en: factores intrínsecos 0 aque-

llos inherentes al pez como la edad y el estado sani-

tario, y los factores extrínsecos, como la temperatu-

ra, los cambios de estación y los parámetros abióticos

del agua. Dentro de los factores extrínsecos existen

una serie de estímulos que actúan sobre un sistema

biológico en forma negativa, y que originan luego

una reacción subsecuente del mismo y que se cono-

ce con el nombre de stress, el pez posee la capaci-

dad de responder al mismo, e involucra reacciones

fisiológicas y de comportamiento, que lo ayudan a

adaptarse a una nueva situación. En algunos casos,

cuando el stress se prolonga o se hace más severo,

puede exceder su capacidad de ajuste, y se produce

un colapso del sistema inmune y también de otros

sistemas (Ellis 1981a). El efecto supresivo del stress

está mediado por hormonas, principalmente

corticosteroides (Jeney et al. 1992). El cortisol es el

principal glucocorticoide que es producido (en la

corteza adrenal) en las células interrenales del

Pronefros en los peces. Su secreción es aumentada

por la hormona adrenocorticotrófica (ACTH) que

es secretada a su vez por la glándula pituitaria y está

bajo un control positivo del factor de liberación de

corticotrofina (CRF) del hipotálamo. La inhibición

del sistema clásico de retroalimentación sobre la

secreción de la CRF ocurre cuando aumenta la con-

centración de cortisol en la sangre. El cortisol es el

más común y biológicamente activo de los

corticosteroides en peces.

Básicamente, la respuesta inmune es un

mecanismo de defensa celular y humoral inducido

por un agente extraño, que es el antígeno (Ag), y las

células responsables del reconocimiento inicial de

un Ag específico en vertebrados superiores

pertenecen a las líneas celulares T y B. También son

206

necesarias células accesorias para el procesamiento

y presentación antigénica y mediadores fisiológicos

llamados citoquinas para la proliferación, interacción

y regulación.

El sistema de defensa de los peces, al igual que

en los vertebrados superiores, puede ser dividido en

dos tipos de mecanismos: Sistema de Defensa innato,

natural o inespecífico y Sistema Inmune adquirido o

específico. El primero es el que poseen todos los seres

vivos desde el nacimiento, formado por componentes

celulares y humorales, y el segundo involucra la

producción de anticuerpos a través de un

reconocimiento específico del antígeno, y también

participan elementos celulares. La importancia

relativa de ambos puede variar con la edad del pez y

están influenciados por distintos factores. En el caso

de los Teleósteos, el sistema defensivo está

compuesto de subpoblaciones de leucocitos que

incluyen los linfocitos B y T, los granulocitos, los

trombocitos, los macrófagos y las células citotóxicas

inespecíficas. Para comprender las reacciones

inmunes de defensa desarrolladas por los peces contra

los diferentes patógenos, se requiere un amplio

conocimiento de la biología de los linfocitos.

1. SISTEMA DE DEFENSA INESPECIFICO

la. FACTORES HUMORALES SOLUBLES

El epitelio intacto y su secreción, el mucus,

forman la barrera de defensa primaria entre el pez

y su ambiente. El mucus contiene proteínas y

carbohidratos y tiene una función protectiva

previniendo la colonización en su superficie, de

parásitos, bacterias y hongos, a través de una

continua pérdida y reemplazo (Ourth, 1980). El

mucus, además de la mucina, contiene otros

componentes secretorios, está compuesto por

precipitinas inespecíficas, aglutininas, proteína C-

reactiva (CRP) y lisozima, las cuales constituyen

una barrera de defensa química primaria (Fletcher

1981). También, internamente, el mucus tapiza las

paredes del tracto alimentario, que junto con pH

extremos y enzimas proteolíticas, sirven de defensa

contra potenciales patógenos (Stoskopf 1993).

Muchas de estas funciones de reconocimiento y

de regulación son parte de la respuesta en la fase

aguda de una infección y es quizás la forma más

antigua de reconocimiento de lo no propio y que

Sistema inmune en peces: OLABUENAGA, S.E.

se ha conservado en la línea evolutiva. En los peces

pueden representar un sistema de reconocimiento

primitivo, más que una acción efectora en la

destrucción del patógeno.

Luego se encuentran los componentes del

suero. Las proteínas de fase aguda son moléculas

que aparecen por un período breve durante picos

febriles o simplemente aumentan su concentración

durante este período en mamíferos. Dentro de las

más importantes se incluyen la proteína C reactiva

(CRP) y la transferrina.

La CRP, representa un grupo muy primitivo de

moléculas de reconocimiento y están involucradas

en los mecanismos de defensa. En peces, su

concentración tiende a ser uniforme y constante a lo

lareo de toda la vida. Se ha demostrado que aglutina

ciertas bacterias y también presenta especificidad por

pequeñas moléculas orgánicas como la fosforilcolina

(Volanakis et al. 1990). Se ha demostrado su

interacción con un número de moléculas del sistema

inmune, como el complemento y los receptores Fc

de los linfocitos. Tiene un peso molecular de 118.000

y una movilidad electroforética beta. Fue detectada

en peces por citometría de flujo en la superficie del

25% de los linfocitos de sangre periférica y en el 4%

de los linfocitos del Pronefro (Edagawa et al. 1993).

Distintos estudios sugieren que aquí, en contraste a

lo que ocurre en los mamíferos, estas proteínas son

constituyentes normales del suero y su concentración

puede estar aumentada después de una infección

bacteriana. Se producen en respuesta al stress,

manipulación, exposición antigénica, etc. Algunos

han concluído que podría servir como indicador de

un stress no determinado o de enfermedades que

tienen lugar durante estadios tempranos del ciclo de

vida del pez (Fletcher ef al. 1977 ).

La transferrina es una glicoproteína

globular, tipo B1 que carece del grupo hemo, pero

que puede unirse al hierro, se ha encontrado en el

suero de la mayoría de los vertebrados. Cuando

no está totalmente saturada presenta propiedades

antimicrobianas y por lo tanto juega un rol

importante en la patología de muchas infecciones

bacterianas, limitando la cantidad de hierro

endógeno disponible para los patógenos invasores

y por ende, su capacidad de reproducción (Buller

et al. 1978). En los peces y también en otras

especies se ha encontrado que presenta un alto

grado de polimorfismo genético. Al igual que en

los homeotermos existen distintos genotipos, se han

encontrado 5 en el salmón coho (Oncorhynchus

kisutch) y 3 en la trucha (O. mykiss) (Suzumoto et al.

1977; Winter et al. 1980). Van Muiswinkel et al. 1985

demostraron que el tipo de transferrina es heredable.

Los distintos fenotipos parecen tener un rol importante

en el desarrollo de la resistencia a ciertas

enfermedades y se ha demostrado que determinados

grupos muestran mayor predisposición a una

enfermedad determinada. La explicación sería de que

algunos genotipos tienen mayor afinidad por el hierro

que otros.

También se encuentra como proteína de

fase aguda la 0-antiproteasa que es un análogo

de la @2-macroglobulina de los mamíferos, la

cual neutraliza la actividad proteolítica de una

exotoxina de Aeromonas salmonicida en el suero

normal de la trucha arco iris y puede estabilizar

los lisosomas de macrófagos (Ellis 1981b).

La lisozima es una enzima mucolítica con

propiedades antimicrobianas y ha sido detectada en

el suero, el mucus y en otros tejidos ricos en

leucocitos, como el riñón, el bazo y el intestino, tanto

en peces de agua de mar como de agua dulce (Grinde

et al. 1988; Lie et al. 1989). Tiene la capacidad de

degradar mucopolisacáridos de la pared celular de

bacterias, particularmente las Gram positivas,

causando la lisis (Ellis 1990). Se encuentra también

en neutrófilos, monocitos y en menor cantidad en

macrófagos. El pH óptimo puede variar entre las

distintas especies en respuesta a condiciones

ambientales (Ellis 1990; Murray & Fletcher 1976).

En algunas especies se han informado variaciones

del nivel de lisozima según los cambios estacionales

o sexuales en las diferentes especies.

Se mencionan a continuación otras sustancias

que pueden participar en este sistema inespecífico

de defensa según Ingram (1980).

La quitinasa, es una enzima que desdobla la

N-acetil-D-glucosamina o quitina por hidrólisis de

los enlaces 1,4 glucosamina y que tiene un peso

molecular de aproximadamente 30000. Su

actividad ha sido detectada en el bazo, el plasma,

la linfa y los tejidos linfomieloides, es posible que

tenga una función protectiva actuando contra la

quitina presente en hongos y parásitos de

invertebrados.

Las citoquinas son polipéptidos o glicopro-

teínas que actúan como moduladores del sistema

inmune y en muchas especies de peces al igual que

en los vertebrados superiores ha sido informada la

207

Gayana 64(2), 2000

existencia de muchas de ellas como las

interleuquinas 1 y 2 ( IL-1, IL-2 ), el interferon (IFN),

el factor de activación de los macrófagos (MAF)

(Verlurg-van-Kemenade et al. 1985; Secombes et

al. 1996), la IL-3, la IL-6, el factor de necrosis

tumoral alfa (TNF «) y el receptor soluble para IL-2

en el suero de animales infectados con virus O

parásitos (Ahne 1994).

Los IFNs constituyen una serie de moléculas

importantes como agentes antivirales (Dorson et al.

1975; Graham € Secombes 1990a), son glicopro-

teínas producidas por macrófagos, linfocitos,

fibroblastos y células natural killer (NK) en respues-

ta a una infección viral, una estimulación inmune o

una variedad de estimuladores químicos. Han sido

identificados en muchas especies de peces. Su pro-

ducción, al igual que en mamíferos, ha sido demos-

trada por estimulación tanto in vivo como in vitro

con virus (De Serra et al. 1975; Dorson et al. 1992;

Rogel-Gaillard et al. 1993) o con activadores sinté-

ticos (Eaton et al. 1990; Tangelsen et al. 1991) o

con mitógenos (Graham et al. 1990b). La mayoría

de los estudios sugieren que el IFN es especie espe-

cífico pero no virus específico (Gordon et al. 1981;

Johnson et al. 1994). Se ha encontrado IFN que se

asemeja al tipo I de los vertebrados superiores 0 sea

al alfa y al beta y también al tipo Il o gamma

(Secombes 1991); en los últimos años se han

secuenciado genes de otras citoquinas en peces, que

incluyen el factor de transformación del crecimien-

to beta (TGF $), la IL-1 $, el factor de crecimento

de fibroblastos (FGF) y algunas quimoquinas y por

estudios de hibridización se han encontrado los

genes de citoquinas como el IFN y la eritropoyetina

(Secombes et al. 1999).

Estos estudios representan un avance impor-

tante, confirman los datos biológicos encontrados

inicialmente y permitirán ampliar las investigacio-

nes realizadas hasta el momento, la existencia de

estas citoquinas indicaría un origen muy temprano

en la evolución y que además este sistema de co-

municación intercelular se ha conservado a lo largo

de millones de años.

Las aglutininas están presentes en el suero y

actúan contra una variedad de microorganismos y

glóbulos rojos heterólogos. Como muchos tipos de

microorganismos comparten especificidades

serológicas con glóbulos rojos de vertebrados, pueden

ser “protectoras”, aglutinando bacterias o virus y

promoviendo su fagocitosis (Roberson 1990).

El sistema del complemento (C) juega un rol

importante en la inmunidad humoral y también en la

celular contra diferentes patógenos y en el proceso

inflamatorio (Ingram 1990; Yano 1992). Está

constituido por al menos unas veinte proteínas

plasmáticas sintetizadas principalmente como

precursores inactivos (pro-enzimas) que funcionan

como enzimas o como proteínas que se van uniendo

cuando son activadas por la introducción y/o

presencia de ciertas sustancias en el plasma de sangre

normal. Muchas de estas proteínas son sintetizadas

en el hígado y en el epitelio intestinal, mientras que

otras se originan en los macrófagos (Tyzard 1992).

La estimulación del sistema complemento

desencadena reacciones bioquímicas, que son

acompañadas por la generación de numerosos

mediadores biológicamente activos en la inflamación.

Actúan secuencialmente en la lisis de una célula

blanco, participando en la muerte y eliminación de

antígenos celulares, usualmente bacterias y también

en la activación de muchas respuestas inespecíficas

de defensa asociadas con la inflamación. Puede ser

activado a través de dos vías, la clásica o dependiente

de anticuerpo y la alternativa o de la Properdina ó

independiente de anticuerpo. Se ha descripto la

presencia del sistema complemento en el mucus de

la piel, actuando así como primera barrera de defensa,

mediante la activación de alguna de las dos vías

(Lambris 1993; Sakai 1992a). El sistema del C en

mamíferos consiste en aproximadamente 12

componentes, denominados a partir del C1 al C9 y

los factores B, D y la Properdina y otros factores que

regulan su actividad. La activación de la vía clásica

se inicia por la interacción entre el componente Cl y

el complejo antígeno-anticuerpo y la de la vía alterna

a través del componente C3 activado por diferentes

sustancias como lipopolisácaridos, zymosan y otros.

Este sistema existe en peces teleósteos, en forma

comparable al que existe en mamíferos. A la fecha se

ha demostrado la presencia de ambas vías en distintas

especies, como la trucha arco iris (O. mykiss), la carpa

(Cyprinus carpio), la tilapia (Tilapia nilotica) y el

bagre (Ictalurus punctatus) (Nonaka et al. 1981;

Matsuyama ef al. 1988a, b; Lobb & Hayman 1989).

lB. MEDIADO POR CÉLULAS

En cuanto a la parte celular inespecifica, se

encuentran las células NK o células citotóxicas

inespecíficas y las células fagocíticas.

Sistema inmune en peces: OLABUENAGA, S.E.

Las células NK juegan un rol similar al de los

vertebrados superiores, o sea ejercen una

citotoxicidad inespecífica de diferentes células

blanco sin un previo reconocimiento. Se ha

postulado que estas células pueden ser las

progenitoras en la línea evolutiva de las NK de los

mamíferos (Evans et al. 1984). En los peces

teleósteos se han encontrado células NK en el riñón

cefálico o pronefros, el bazo, la sangre periférica y

el timo, y efectúan la lisis de células blanco

humanas, de ratón y de estos mismos peces; se ha

descrito su presencia en distintas especies (Greenlee

et al. 1991; Graves et al. 1985), la citólisis requiere

el contacto célula a célula, son células no adherentes

y resistentes a la irradiación. Representan menos

del 1% de los leucocitos de sangre periférica. En

elasmobranquios la célula efectora sería un

monocito/macrófago y en los peces óseos, células

linfoides agranulares (Moody et al. 1985).

En cuanto a las células fagocíticas, primero

se puede decir que la fagocitosis es un mecanismo

celular de ingestión y digestión de material extraño

particulado, y es probablemente la reacción de

defensa más ampliamente distribuida tanto en

vertebrados como en invertebrados, y segundo que

en teleósteos han sido descritas diferentes células

con capacidad fagocítica (Mac Arthur & Fletcher

1985; Finn 1970). Las más comunes en los peces

al igual que en los mamíferos son los granulocitos

y los fagocitos mononucleares o agranulocitos, de

los cuales estos últimos son los más importantes.

Dentro de estos dos grupos se encuentran a su vez

distintas categorías: a) los granulocitos, incluyen

los neutrófilos, los eosinófilos y los basófilos y b)

los monocitos-macrógagos (Ellis 1977; Rowley ef

al. 1988). a) granulocitos: la mayoría de éstos son

móviles y fagocíticamente activos, su citoplasma

contiene gránulos lisosomales, vacuolas, mitocon-

drias y otras organelas. Se encuentran en distintas

proporciones en la sangre, dependiendo de las

especies, pero las más comunes son los neutrófilos

y los eosinófilos, mientras que los basófilos no

están presentes en la mayoría de las especies. Los

neutrófilos, constituyen 4.5 a 18% de los leucocitos

de la sangre, con un rango amplio entre las distintas

especies. Se los llama también polimorfonucleares

o leucocitos específicos. El citoplasma contiene

numerosos gránulos, son pobremente fagocíticos,

en el sentido que ingieren poco material extraño,

pero poseen la mayoría de las enzimas presentes

en los mamíferos y por lo tanto su rol primario sería

la lisis extracelular por secreción de estas enzimas

y otras sustancias antimicrobianas. Pueden

producir severos daños tisulares por liberación de

los radicales libres del oxígeno (Tyzard 1992). Los

eosinófilos contienen gránulos citoplásmicos que

se tiñen con los colorantes ácidos. En la mayoría

de los peces teleósteos son escasos o ausentes en

la circulación. Algunos están presentes en el

peritoneo y tejidos. En los elasmobranquios se

encuentran distintos grados de eosinofilia con

diferencias de tamaño y estructura. En algunas

especies son abundantes en el intestino, lo cual

indicaría alguna función en la inmunidad contra

bacterias. Los basófilos contienen gránulos en el

citoplasma que se tiñen con los colorantes básicos

y su presencia es escasa y rara en la sangre

periférica de la mayoría de las especies estudiadas.

b) Monocitos-macrófagos: Los monocitos son

móviles, fagocíticos y normalmente de mayor

tamaño que otros leucocitos. Tienen un citoplasma

vacuolado y basofílico. Se han encontrado en

sangre y riñón y su presencia ha sido demostrada

sólo en algunas especies. Los macrófagos son

células fagocíticamente activas derivadas de los

monocitos que se encuentran en tejidos y en las

cavidades peritoneal y pericárdica, de mayor

tamaño que los anteriores, y por esta razón pueden

fagocitar partículas más grandes. En teleósteos

los macrófagos son especialmente abundantes en

el bazo y en el tejido linfomieloideo renal y puede

haber en otros tejidos, por ejemplo la mucosa

olfatoria.

En este proceso de ingestión el antígeno es

capturado inicialmente por los macrófagos

presentes en las branquias y los tejidos conectivos

de la piel e intestino, en el individuo adulto los

principales sitios fagocíticos son los órganos

linfoideos, el riñón, el bazo y el epicardio; en el riñón

el material es inicialmente fagocitado por la trama

celular reticuloendotelial dentro del parénquima

hemopoyético, mientras que en el bazo, el antígeno

es atrapado extracelularmente en las fibras reticu-

lares en la pared elipsoide (Fergusson 1989). Los

macrófagos conteniendo material fagocitado se

agregan en áreas linfoideas muchas veces en

presencia de melanomacrófagos, que son células

fagocíticas que han transformado en melanina el

material fagocitado.

Los fagocitos son afectados por transmisores

209

Gayana 64(2), 2000

nerviosos adrenérgicos y colinérgicos, que

aumentan su habilidad para producir las especies

reactivas del oxígeno, que participan en el proceso

fagocítico (Lambris 1993), produciéndose un

aumento de anión superóxido, peróxido de

hidrógeno y radicales hidroxilo (Graves ef al. 1985).

2. SISTEMA INMUNE ESPECIFICO

2A. INMUNIDAD HUMORAL

Está representada por los anticuerpos (Ac) o

inmunoglobulinas (Igs) que son glicoproteínas, en

el suero 40-50% de la proteína total corresponde a

las Igs. En los ciclóstomos, los anticuerpos que se

encuentran son macroglobulinas de 23.88 y en

lampreas, encontramos 3 tipos de anticuerpos, de

14S, 9S y 7S (Tizard 1992), esta última molécula

con cadenas livianas y pesadas, pero sin puentes

disulfuro intercatenarios.

La unica Ig presente en los peces 6seos y

cartilaginosos es de la clase “IgM like”, en

teleósteos se presenta en forma de tetrámero con

dos cadenas livianas y dos pesadas con un peso

molecular aproximado de 700 y un coeficiente de

sedimentación de 17 S, también hay formas

monoméricas en el suero (Castillo ef al. 1993; Killie

et al. 1991; Koumans-van Diepen et al. 1994;

Miller et al. 1985). Han sido descritos péptidos

homólogos a la cadena J en peces (Tyzard 1992),

en los elasmobranquios se presenta en forma

pentamérica (19S) y de aproximadamente 900 kDa

y también monómerica (7S) y de aproximadamente

160 kDa (Fange 1992).

Los genes de las Igs están organizados

esencialmente de la misma forma que en los

vertebrados (Marchalonis 1989). Las paredes de

los vasos sanguíneos son permeables a las Igs

del suero y por ello se las encuentra en la mayoría

de los fluidos tisulares, en el plasma, la linfa y el

mucus epitelial (Stoskopf 1993). En los peces

Oseos se encuentra la IgM dimérica en el mucus

y se supone que es sinterizada localmente.

Las células productoras de anticuerpo derivan

de linfocitos B, los cuales por interacción con el

antígeno se transforman en células plasmáticas. En

el proceso de presentación antigénica colaboran los

macrófagos. Las células plasmáticas han sido

detectadas en distintos grupos de peces, incluyendo

los ciclóstomos, aunque en éstos se considera que

tienen propiedades intermedias entre las Igs de los

vertebrados y las lectinas de los invertebrados

(Fange 1992). Tienen un citoplasma basófilo, por

lo común no granular y se las encuentra en el tejido

conectivo, bazo, riñón y raramente en la sangre. Se

originan de células B activadas por el Ag y son

consideradas como las principales productoras de

Igs (Fange 1992).

La naturaleza del Ag ha tenido influencia en

la respuesta de los Acs y es de fundamental

importancia en la investigación inmunológica y

también en la producción de vacunas. Es esencial

que la molécula sea reconocida como extraña para

estimular el sistema inmune, y además para ser

procesado existen restricciones físicas y químicas.

Los antígenos más efectivos son aquéllos de alto

peso molecular, con una estabilidad estructural y

que sean moléculas químicamente complejas y no

inertes. En general, los complejos virales y

bacterianos y los antígenos tipo eritrocito parecen

ser inmunógenos efectivos en la mayoría de las

especies de teleósteos, mientras que las proteínas

solubles son poco inmunogénicas (Tizard 1992).

En las distintas especies de poiquilotermos

existen dos factores que influencian notoriamente

la producción de anticuerpos y la respuesta inmune,

ellos son los cambios estacionales y la temperatura.

En los peces tanto la respuesta humoral como la

celular dependen de estos factores.

En cuanto a la temperatura, Ellis (1988a) de-

fine que el rango óptimo para su desarrollo está re-

lacionado con las condiciones del medio ambiente

natural para las distintas especies. En general, cuanto

más alta es la temperatura dentro del rango fisioló-

gico normal, más corta es la fase de inducción y más

alta es la magnitud de la respuesta inmune; a bajas

temperaturas la fase de inducción se prolonga con

una reducción en el título de anticuerpos o en su

defecto hay una ausencia completa de la respuesta.

Avtalion (1981) indicó que siempre que la

temperatura de inmunización y el período posterior

se mantenga por sobre el nivel crítico, la producción

de anticuerpos durante la respuesta primaria y

secundaria será absolutamente normal, constante e

independiente de la temperatura del medio ambiente.

Por otro lado, la temperatura afecta el crecimiento

de la cría y las bajas temperaturas prolongarán el

período requerido por el pez para alcanzar el estado

de desarrollo crítico en el cual se hace inmuno-

Sistema inmune en peces: OLABUENAGA, S.E.

lógicamente competente. Con respecto a los cambios

estacionales, se ha demostrado en la trucha arco iris

(O. mykiss), que la producción de anticuerpos, así

como su estabilidad frente a los cambios de

temperatura, la movilidad electroforética y los

coeficientes de sedimentación dependían de las

estaciones, algunos autores han informado que en

los poiquilotermos existe una respuesta pobre

durante el período invernal en comparación con el

verano, aun cuando la temperatura permanezca

constante (Ellis 1981a).

La edad a la cual tiene lugar un montaje ade-

cuado y maduro de la respuesta humoral varía se-

gún las distintas especies y depende también de las

condiciones ambientales. En general una respues-

ta completa ocurre entre los 2 a 10 meses, después

de la incubación. Se han encontrado anticuerpos

circulantes en peces de 15-21 días y 0.15-0.3 g de

peso, pero esto no es lo más general, en la práctica

ocurre recién en ejemplares de mayor peso y tama-

ño (Ellis 1988b).

Se ha demostrado, al igual que lo descrito

para mamíferos, la respuesta clásica primaria y se-

cundaria de producción de anticuerpos. La fase de

inducción es habitualmente más larga y con títu-

los que aumentan en forma más lenta (Ellis 1989).

Los neurotransmisores pueden influenciar

significativamente la inducción in vitro de células

secretoras de anticuerpos en cultivos de leucocitos

en el bazo de trucha. Los agonistas fB adrenérgicos

suprimen la respuesta de anticuerpos contra antígenos

T independientes mientras que los (-2 adrenérgicos

y colinérgicos la aumentan (Flory 1990).

Como en los mamíferos, ocurre tolerancia

en los peces y esto puede tener lugar antes de que

se hagan inmunológicamente competentes.

Estudios en O. mykiss y C. carpio realizados por

Ellis (1988b) han demostrado que las células

citotóxicas y la producción de anticuerpos contra

antígenos T independientes, se desarrollan 4

semanas post-eclosión. La habilidad para establecer

una memoria inmunológica y producir anticuerpos

contra antígenos T dependientes, se desarrolla 8

semanas post-eclosión (Tatner 1986). Si se inyectan

con un Ag T dependiente antes de este tiempo se

produce la tolerancia inmunológica.

Los Acs monoclonales han permitido definir

la heterogeneidad molecular de las cadenas pesadas

y livianas de las Igs en muchas especies como carpa,

bagre, trucha arco iris (Rombout ef al. 1993;

Ainsworth et al. 1990; Sánchez & Domínguez 1991)

y muchas otras, y han ayudado a entender la cinética

de la respuesta humoral primaria y secundaria

después del desafío antigénico.

2B. INMUNIDAD MEDIADA POR CÉLULAS

En los peces cartilaginosos y Oseos encon-

tramos dentro del grupo de los glóbulos blancos, las

células no granulocíticas que participan en los

mecanismos de inmunidad celular. En este grupo se

incluyen los linfocitos, células inmunocompetentes

que constituyen la base de las reacciones inmunes.

Los linfocitos en el sentido morfológico son células

relativamente pequeñas con un núcleo redondo a

oval, su tamaño oscila entre 4.5 a 8 um, son células

no fagocíticas y constituyen el 50-80% del total de

los leucocitos. La mayoría de los linfocitos son

producidos en el pronefros y en el timo. Como fue

mencionado más arriba existen dos tipos, los

linfocitos B y T. La población de linfocitos T y sus

diferentes clones son los responsables de la

inmunidad mediada por células. Este aspecto de la

respuesta inmune tiene un amplio rango y a su vez

recluta otros tipos celulares como son los macrófagos,

permitiendo un eficiente montaje de la respuesta. En

una estimulación antigénica primaria estos clones se

diferencian en distintos tipos celulares con funciones

específicas. Estos incluyen, las células citotóxicas O

“killer”, capaces de lisar células extrañas por contacto

físico directo entre la célula T y la célula blanco; las

células supresoras que regulan la producción de

anticuerpos y de linfoquinas proporcionando un cierre

al proceso y las células colaboradoras o “helper”, que

ayudan a las células productoras de anticuerpos y

también liberan ante la estimulación antigénica

factores solubles o linfoquinas que aumentan la capa-

cidad de defensa.

En la actualidad, se dispone de una batería

de anticuerpos monoclonales que ha permitido

demostrar que existen estos dos tipos de células

linfocitarias (las células B y las células T) en varias

especies de peces (De Luca et al. 1983). Sin

embargo, la mayoría de estos anticuerpos están

dirigidos contra inmunoglobulinas y células B

(portadoras de Igs en su superficie) y sólo unos

pocos reconocen las células T periféricas

(Scapigliati et al. 1999). El desarrollo de éstos y

de nuevos Acs permitirá una mejor caracterización

fenotípica de los linfocitos y sus diferentes

211

Gayana 64(2), 2000

subpoblaciones celulares, sin embargo hay pocos

datos sobre el origen ontogénico y la diferenciación

de células linfoides (Castillo et al. 1993). Debido a la

falta de anticuerpos monoclonales anti T específicos,

las respuestas han sido controladas indirectamente y

solamente se presume su participación, por ejemplo,

en la proliferación inducida por mitógenos como la

fitohemaglutinina A (PHA), la concanavalina A

(ConA) y el lipopolisacárido (LPS) (Sizemore et al.

1984), la respuesta en reacciones de cultivo mixto

(Miller et al. 1985), la función como células cola-

boradoras en la producción de Acs contra Ags

dependientes de células T (Miller et al. 1987; Clem

et al. 1985), el rechazo a tumores y aloinjertos

(Manning 1994) y la secreción de linfoquinas

(Secombes ef al. 1996). La preparación de estos Acs

ha definido la distribución en el cuerpo de estas

células y su heterogeneidad y ha aumentado la

investigación en el área de inmunología y de inmuno-

patología.

En los ciclóstomos tienen sólo dos pobla-

ciones de leucocitos en su sangre, una tipo monocito

y otra tipo linfocito, el 70% de éstos poseen Igs en

su superficie, se originan en el riñón anterior y no

poseen células plasmáticas.

3. ORGANOS LINFOIDES

Los principales órganos linfoides en peces

teleósteos son el timo, el riñón y el bazo (Ellis

1988a; Fergusson 1989).

El timo es un órgano par, bilateral, situado

debajo del epitelio faríngeo, dorso lateral y aloja-

do en la parte superior interna de las cámaras

branquiales. El principal componente celular es

el timocito, o sea linfocitos en maduración. Como

en otros vertebrados, se lo considera como un ór-

gano linfoide primario donde se produce el pool

de linfocitos vírgenes que luego migran para jun-

tarse con los linfocitos periféricos en la circula-

ción y otros órganos linfoides. No participa en la

producción de anticuerpos o en la captura de

antígeno.También pueden estar presentes células

epitelioides o células tipo macrófago o macrófago

propiamente tal y células granulares eosinofilicas

(Fergusson 1989). Como en los mamíferos, la in-

volución de este Órgano se observa en ejemplares

de mayor edad. En salmónidos jóvenes, el timo

está totalmente diferenciado y separado del me-

212

dio externo por una capa de células epiteliales sim-

ples, y que por ejemplo en la trucha arco iris (O.

mykiss) poseen poros de 20 um de diámetro, en

los ejemplares más viejos estos poros se cierran y

se engrosa el epitelio. Su localización superficial

sugiere una cierta vulnerabilidad a severas infec-

ciones micóticas y bacterianas.

El riñón cefálico o pronefros es el principal

órgano hematopoyético de los peces y el principal

sitio de diferenciación de eritrocitos, granulocitos,

linfocitos B y monocitos. Es el principal órgano

productor de anticuerpos (Ellis 1989). Es un órgano

de filtración conteniendo macrófagos que

fagocitan los diferentes antígenos, contiene

componentes linfomieloides, renales y endocrinos

suplementados por la sangre de las arterias y de la

vena porta caudal. Sirve como un análogo de la

médula ósea, de los ganglios y en parte de la

glándula adrenal de los vertebrados superiores

(Fange 1992). El mesonefros o riñón propiamente

tal cumple con funciones de equilibrio hidrosalino.

El bazo contiene menor número de células

hemopoyéticas y linfoides en comparación con el

riñón y está compuesto principalmente por sangre

alojada en cavidades. Está formado por elipsoides,

paredes capilares compuestas por una trama de

fibras reticulares y macrófagos. Las fibras se

especializan en atrapar complejos inmunes y

antígenos particulados (Vallejo ef al. 1992),

mientras que los macrófagos son altamente

fagocíticos (Ellis 1980). Un rasgo particular del bazo

de los teleósteos es la presencia de macrófagos

conteniendo pigmentos de color oscuro, princi-

palmente melanina y que se denominan melanoma-

crófagos. Estos se agrupan y forman agregados

llamados centros melanomacrofágicos (CMM). Su

número y tamaño aumenta en peces crónicamente

enfermos, cuando el catabolismo ha sido excesivo

(Fergusson 1989). Sirven como depósito de los

productos finales del metabolismo (ej. los fosfo-

lípidos) y también de antígenos y material

particulado (Herraez et al. 1986), su función exacta

no se conoce, pero además de lo mencionado, se

sabe que la melanina tiene la habilidad de atrapar

los radicales libres de oxidación y eso protegería a

los tejidos contra estos productos liberados por las

células fagocíticas como son los neutrófilos. Se los

encuentra también en el riñón e hígado y

ocasionalmente en las gónadas y la tiroides

(Fergusson 1989).

Sistema inmune en peces: OLABUENAGA, S.E.

En cuanto a la ontogenia del sistema inmune

se han realizado numerosos estudios para definirla y

en base a esto se pueden deducir las siguientes

consideraciones. Una descripción histológica

completa del desarrollo ontogénico de los órganos

linfoides en peces informó que en varias especies la

primera aparición de linfocitos ocurriría en el timo

(Grace & Manning 1980; Botham & Manning 1981;

Doggett & Harris 1987), aunque sin embargo, otros

autores encontraron una detección más temprana en

el riñón (Grace et al. 1981; Ellis 1977; O'Neill 1989).

De todos modos, aunque aparecieran células

precursoras en el riñón antes de la diferenciación

linfocitaria en el timo, los linfocitos maduros están

presentes primero en el timo y luego secuencialmente

aparecen en el riñón y en el bazo (Zapata et al. 1990),

por lo cual se considera que el timo es el primer órgano

linfoide donde se desarrollan los linfocitos.

Se comparó el tiempo de aparición de los

linfocitos en la circulación sanguínea y los Órganos

linfoídeos en distintas especies (Ellis 1988a). Des-

pués de la diferenciación de un gran número de cé-

lulas en el timo, aparecen linfocitos en la sangre y

riñón al mismo tiempo, el riñón se hace luego rico

en células linfoides. El tiempo de diferenciación de

linfocitos varía con las especies y está probablemente

relacionado con la tasa de crecimiento y desarrollo

general (Ellis 1988a). Es claro que los linfocitos pe-

queños maduros aparecen justo antes o después de

la eclosión. Durante las primeras semanas después

de producida la eclosión, la velocidad de crecimien-

to de los Órganos linfoídeos es mayor que la del res-

to del cuerpo, pero posteriormente comienza a dis-

minuir con la edad. Muchos timocitos migran a los

Órganos periféricos durante los primeros 2-3 meses

de este período y se observan signos de involución

alrededor de los 9 meses (Ellis 1988a). El desarrollo

de los órganos linfoides se correlaciona mejor con

el peso del pez que con la edad y por lo tanto, parece

ser una función de la velocidad de crecimiento.

Como se mencionó anteriormente, en los

ejemplares adultos, los linfocitos periféricos llevan

en su superficie ciertos Ags relacionados con la fun-

ción celular y su presencia se puede usar como mar-

cador para diferenciar células inmaduras de madu-

ras. Con el uso de anticuerpos monoclonales se pudo

estudiar la aparición de estos marcadores en las cé-

lulas linfoides (Secombes 1983), se determinó así

que, aunque los linfocitos aparecen temprano en el

desarrollo, su maduración funcional toma un perio-

do de tiempo más largo antes de que sean capaces

de montar una respuesta inmune (Ellis 1988a).

4. RESPUESTA INFLAMATORIA

La respuesta inflamatoria es la característica

protectiva del tejido en respuesta a un determinado

daño y es común a todos los vertebrados, incluyendo

los peces (Finn & Nielsen 1971). La inflamación es

inespecífica y puede ser iniciada por distintos

factores incluyendo parásitos, bacterias 0 virus y

otros agentes como la radiación y toxinas químicas.

Los eventos que caracterizan la respuesta

inflamatoria son: 1) vasodilatación con un aumento

en el flujo sanguíneo y la permeabilidad vascular,

2) exudación del plasma, y 3) migración de

leucocitos a los tejidos (Ellis 1989).

Los neutrófilos son las primeras células que

migran a los tejidos y se los puede observar con

frecuencia en las lesiones inflamatorias (Wolke

1975; Tyzard 1992). Su rol en estas lesiones no

es muy relevante, pero ejercen_una actividad

extracelular liberando enzimas y radicales libres

que causan severos daños tisulares.

Los macrófagos mononucleares tienen un

importante rol fagocítico, ingiriendo tanto material

inerte como antigénico. Los linfocitos están menos

asociados con lesiones inflamatorias excepto que

esté involucrada una respuesta inmune mediada

por células. Si el proceso inflamatorio no es

efectivo para neutralizar la causa del daño o si el

daño tisular continúa, puede ocurrir un encapsu-

lamiento o enquistamiento en el área, que se

acompaña por depósitos de fibras de colágeno,

calcio y pigmentación (Fergusson 1989).

5. INMUNOESTIMULANTES

Los inmunoestimulantes son una serie de

agentes, naturales y artificiales, que son utiliza-

dos para controlar las enfermedades de los pe-

ces y son mencionados aquí ya que actúan di-

rectamente sobre las células del sistema inmune

estimulando su acción efectora. Incluyen agen-

tes químicos sintéticos como el levamisol (Kajita

et al. 1990; Siwiki et al. 1990); sustancias bioló-

gicas como derivados bacterianos, como el LPS

(Mac Arthur et al. 1985; Neumann et al. 1995),

213

Gayana 64(2), 2000

el beta glucano (Jorgessen et al. 1993; Thompson

et al. 1995) etc., o polisacáridos, como la quitina

(Sakai et al. 1992) y oligosacáridos (Yoshida et al.

1993); extractos provenientes de animales o plan-

tas (Davis & Hayasaka 1984; Jang et al. 1995) ; fac-

tores nutricionales, como las vitaminas C y E

(Thompson et al. 1993; Wise et al. 1993); hormo-

nas, como la prolactina y la hormona de crecimien-

to (Sakai et al. 1996; Kajita et al. 1992) y citoquinas

como el IFN y la IL-2 (Tamai et al. 1993; Tamai et

al. 1992). Estos son sólo algunos ejemplos repre-

sentativos de la lista actualmente disponible. Fun-

damentalmente actúan facilitando la función de las

células fagocíticas, aumentando su actividad

bactericida, estimulando la actividad de las células

natural killer, del sistema complemento, de la

lisozima y de la respuesta de anticuerpos. La acti-

vación de estas funciones inmunológicas está aso-

ciada con un aumento de la protección contra en-

fermedades infecciosas. Estos agentes son sólo efec-

tivos en algunas enfermedades y además su acción

varía con los períodos de tiempo, la dosis, los méto-

dos de administración y la condición fisiológica del

pez (Sakai 1999).

CONCLUSIONES

En términos generales se ha descrito que los

peces desarrollan una buena respuesta inmunológica,

aunque como ya hemos mencionado, la misma está

bajo la influencia de distintos factores en especial

los del medio ambiente, que modifican fuertemente

su desarrollo. El sistema responde y controla los agen-

tes infecciosos que toman contacto con el huésped y

es por ello que el conocimiento del mismo es básico

para el desarrollo de programas de control de las

enfermedades. Se ha avanzado mucho en los últimos

años, aunque todavía se necesita realizar estudios de

inmunología básica en las distintas especies. Por ello

es importante ser muy cauto cuando se comparan las

observaciones realizadas en algunas especies de pe-

ces con las efectuadas en mamíferos, y de igual mane-

ra dentro de una especie a otra de pez. A excepción de

los peces teleósteos, la información encontrada en los

distintos grupos es todavía escasa, y por lo tanto resul-

ta insuficiente al momento de emitir conclusiones.

El estudio de las enfermedades de los peces

se ha incrementado notablemente en los últimos 40

años, recibiendo cada vez más atención, y esto ha

214

sido principalmente por el gran desarrollo de la

acuicultura. El cultivo de peces es una gran industria,

siendo muy variadas las especies que se cultivan y

la producción en el mundo entero aumenta cada año.

Este aumento afecta en forma adversa la salud de

los peces, incrementando la susceptibilidad a

distintas infecciones. Se requiere una información

actualizada y métodos rápidos y sensibles de

diagnóstico para detectar en forma eficaz las

distintas afecciones. En este sentido, los diagnós-

ticos basados en reacciones inmunológicas tienen

la particularidad de detectar casos subclínicos en

poblaciones de peces aparentemente sanos, permi-

tiendo así la prevención de la transmisión y difusión

de las enfermedades. También la obtención de vacunas

durante la última década se basó principalmente en el

avance del área de la inmunología, y las mismas han

sido eficaces en el control de algunas enfermedades.

Por último, los inmunoestimulantes aumentan la

resistencia a las enfermedades infecciosas, activando

los mecanismos de defensa.

Por todo lo expuesto, resulta evidente que a

pesar de los grandes avances realizados en los últimos

años, se necesita continuar con estudios morfológicos

y fisiológicos combinados de las poblaciones

efectoras, que permitan resolver algunos interro-

gantes sobre los mecanismos funcionales básicos y

que ayudarán a comprender por qué se establecen

los diferentes agentes infecciosos y cómo éstos

inducen la patogenia.

AGRADECIMIENTOS

Este trabajo de revisión fue realizado con fon-

dos del subsidio B037 otorgado por la Universidad

Nacional del Comahue. Agradezco a mis colegas del

laboratorio de Ictiopatología del Centro Regional

Universitario Bariloche por su apoyo y por haber-

me brindado con generosidad parte del material bi-

bliográfico aquí utilizado. Agradezco muy especial-

mente al Lic. Oscar Serra por su ayuda en la prepa-

ración de este trabajo y su apoyo permanente y a la

Dra. María Marta de E. de Bracco por haberme alen-

tado para que escribiera esta revisión.

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Fecha de recepción: 23.02.2000

Fecha de aceptación: 30.04.2000

218

Gayana 64(2): 219-233, 2000

ISSN 0016-531X

ESTUDIOS EN ECOLOGIA DE LARVAS DE MICTOFIDOS (PISCES,

MYCTOPHIDAE): UNA PROPUESTA PARA NUEVAS LINEAS DE

INVESTIGACION EN LA CORRIENTE DE HUMBOLDT

STUDIES ON THE ECOLOGY OF LARVAL MYCTOPHIDS (RISCES,

MYCTOPHIDAE): A PROPOSAL FOR NEW RESEARCH LINES IN THE

HUMBOLDT CURRENT

Laura Rodríguez'” & Leonardo Castro”

RESUMEN

En el presente trabajo se realiza una revisión de algunas

características de la biología y ecología de los estadios de

desarrollo temprano de la familia Myctophidae que

ejemplifican el grado de adaptabilidad de este grupo de

peces a ambientes costeros de surgencia y zonas oceánicas

adyacentes. El objetivo, sin embargo, no fue el realizar un

listado exhaustivo de todos los temas posibles de

investigación, sino profundizar en, a) la identificación de

aspectos relevantes que puedan ser abordados con

metodologías ya existentes en la región y b) mediante la

ejemplificación de algunos estudios ya publicados a nivel

nacional y regional, estimular investigaciones futuras en

el área de la ecología larval en la Corriente de Humboldt.

Se abordan principalmente tres áreas: aspectos

taxonómicos y sistemáticos, aspectos de ecología

poblacional y estrategias reproductivas, y aspectos de

ecofisiología de estadios tempranos. Se determinó falta de

información y descripción de los estadios tempranos en

mictófidos, particularmente de los estadios huevo. Se

propone además que podrían existir diferencias genéticas,

a nivel interpoblacional en algunas especies de mictófidos

con distribución más amplia (e. g. Triphoturus mexicanus).

Al respecto, el desarrollo de técnicas genético-moleculares

se espera conlleven a un aumento en el grado de

conocimiento inter e intraespecífico a nivel regional.

Respecto a estudios poblacionales, la información existente,

aunque escasa en zonas de surgencias, sugiere que algunas

'Programa Doctorado en Oceanografía, Departamento

de Oceanografía, Facultad de Ciencias Naturales y

Oceanográficas, Universidad de Concepción, Casilla 160-

C, Concepción, Chile.

"Departamento de Oceanografía, Facultad de Ciencias

Naturales y Oceanográficas, Universidad de Concepción,

Casilla 160-C, Concepción, Chile.

especies de este grupo tendrían la capacidad de variar sus

estrategias reproductivas de acuerdo a las condiciones

oceanográficas. Se detecta una deficiencia en la

información referente a cambios ontogénicos en la

distribución espacial, principalmente vertical. Con la

incorporación de nuevo equipamiento en muchos centros

de investigación en Chile, se espera que estas limitaciones

se superen y aumente el interés en esta área de

investigación. Finalmente, en relación a aspectos de

ecofisiología, se advierte también falta de información

incluso en estudios tradicionales (alimentación, migraciones

verticales), aunque se observa que algunas áreas temáticas

actualmente muy difundidas a nivel internacional (edad y

crecimiento mediante lectura de otolitos) y otras más

recientes (metabolismo en condiciones de hipoxia) están

comenzando a desarrollarse también en larvas de peces

de la Corriente de Humboldt.

PALABRAS CLAVES: Ictioplancton, mictófidos, Corriente de

Humboldt, áreas de surgencia.

ABSTRACT

This is a review on some biological and ecological charac-

teristics Of the early life stages of myctophids that exem-

plify their adaptations to coastal upwelling zones and

oceanic nearby areas. The approach has been, however,

not to make an exhaustive list of all possible research

subjects but, in a more pragmatic way, a) to identify

relevant aspects that can be approached with currently

available methods in the region and, b) through examples

of studies published nationally and regionally, to stimu-

late future research in larval ecology in the Humboldt

Current. Three major themes were assessed: taxonomy

and systematics, population ecology and reproductive

strategies and, ecophysiology of the early life stages.

Among the former, we detected a lack of information

and descriptions, especially on the egg stage. We also

219

Gayana 64(2), 2000

document how differences occur in widely distributed

species at the inter-population level. The development

of new molecular techniques are expected to produce an

increase in studies about inter- and intraspecific relation-

ships at a regional level. On population biology studies,

the relatively scarce information available from upwelling

areas suggests that some species have the capacity to

modify their reproductive strategies according to the

oceanographic conditions, as it has also being docu-

mented for invertebrates. However, there is a shortage of

information as a result of the lack of adequate sampling tech-

niques to determine efficiently the changes in distribution,

in particular in the vertical domain. The purchasing of equip-

ment in several research centers of the region is expected

to solve these limitations and to incentive the studies in

this research line. Finally, in relation with studies on eco-

physiology, we also detected a shortage of information

even in very traditional topics such as on feeding and

vertical migrations. Interestingly, however, we noticed

that some research lines and methods currently very popu-

lar in the international literature (age and growth of lar-

val fish utilizing otoliths), are also being utilized for lar-

val fish studies of the Humboldt Current. Even more in-

teresting, some research lines such as metabolisms un-

der hypoxic conditions are being developed primarily in

this zone.

Keyworps: Ichthyoplankton, myctophids, Humboldt

Current, upwelling areas.

INTRODUCCION

Los peces mictófidos forman densas

agregaciones en diversas áreas oceánicas y son

considerados uno de los grupos más abundantes

dentro de los peces mesopelágicos, estimándose

biomasas superiores a las 600 mton (Gjósaeter 1984;

Hulley 1994; Pakhomov et al. 1996; Moser 1996;

FAO 1997). A partir de la década de los 60 se han

realizado diversos estudios para explorar la

posibilidad que los mictófidos pudieran sustentar una

pesquería, principalmente en la región del Mar de

Arabia (Gjósaeter & Kawaguchi 1980; Gjdsaeter

1981). Esos estudios señalan que la pesquería de

Benthosema pterotum (Alcock 1890) es comercial-

mente posible en la región del Golfo de Omán y en

1996 se dio inicio a la explotación de esa especie en

dicha área (FAO 1997). A pesar del interés que este

grupo motivó en esas regiones como un potencial

recurso, no son muchos los estudios que abarquen

aspectos de su ecología y biología en general y menos

aún en sus estadios tempranos de desarrollo.

En aguas chilenas no se han realizado

prospecciones enfocadas directamente a la cuanti-

220

ficación de la abundancia o biomasa de este grupo.

Algunos cruceros realizados por el Instituto de

Fomento Pesquero de Chile (IFOP) durante los años

1981-1982 en el norte y centro-sur de Chile (18°28’S

y 30°30’S respectivamente) (Acuña 1987), así como

investigaciones realizadas por Sielfeld et al. (1995)

también para la zona norte de Chile (18°25’S y

21°47°S) y Lechenbauer (1993), señalan que los

mictófidos constituyen un alto porcentaje de las

capturas de peces mesopelágicos. Las especies más

abundantes en estas regiones están representadas por

Triphoturus mexicanus (Gilbert 1890), Hygophum

bruuni Wisner 1971, Diogenichthys atlanticus

(Táning 1928), D. laternatus (Garman 1899),

Lampanyctus parvicauda Parr 1931 y Diaphus

hudsoni Zurbrigg & Scott 1976 (Acuña 1987).

La importancia de los mictófidos en el sistema

pelágico marino no sólo está dada por su gran

abundancia, sino también por su rol en flujos

biogeoquímicos. Ellos presentan una alimentación

principalmente zooplanctófaga (Gorelova 1983;

Kinzer & Schulz 1985; Pakhomov et al. 1996),

predando selectivamente sobre algunas especies de

copépodos y eufáusidos (Hopkins & Gartner 1992),

y una gran capacidad migratoria vertical (Gjdsaeter

1981; Willis & Pearcy 1982; Roe & Badcock 1984),

por lo que actúan como una via de exportación de

carbono desde la zona fótica hacia aguas más

profundas (Pakhomov et al. 1996). También, los

mictófidos son presa de una gran diversidad de

especies, muchas de las cuales tienen importancia

comercial (Acuña 1986; Greer-Walker & Nichols

1993), lo que los convierte en un nexo entre el meso-

macroplancton y los predadores tope (Pakhomov et

al. 1996).

Desde el punto de vista de la ontogenia, el orden

Myctophiformes es el más variado entre los teleósteos,

dado que las larvas de ningún otro grupo de peces han

explorado tan diversas vías evolutivas como éste. Las

larvas de mictófidos exhiben diversas formas

corporales, tamaños de boca, tractos intestinales que

varían en longitud, gran diversidad y patrones en los

melanóforos, así como variaciones en largo y forma

de las aletas dorsal y pectoral (Moser 1984).

Las investigaciones en ictioplancton que tienen

como objetivo principal a los mictófidos son escasas.

Las más frecuentes abordan aspectos taxonómicos

(e.g. Balbontín & Orellana 1983; Olivar & Palomera

1994; Olivar & Beckley 1995; Moser 1996; Olivar ef

al. 1999; Herrera et al. 2000) de distribución (e.g.

Larvas de mictófidos: nuevas líneas de investigación: RODRÍGUEZ, L. y L. Castro

Loeb 1979, 1980; Loeb & Rojas 1988; Rópke 1993;

Olivar & Palomera 1994; Olivar et al. 1999) y

crecimiento (e.g. Methot & Kramer 1981; Linkowski

1991; Linkowski et al. 1993).

En Chile, los estudios realizados en larvas de

peces están enfocados principalmente hacia aquellas

especies de importancia comercial (e.g. jurel, anchoveta

y sardina). En su mayoría, las larvas de mictófidos son

tratadas como fauna asociada, entregándose poca

información sobre su recurrencia, relación con

variables ambientales u otras características biológicas

pese a su gran abundancia y presencia.

En el presente trabajo se presentan algunas

características de la biología y ecología de los estadios

de desarrollo temprano de la familia Myctophidae,

poniendo de manifiesto la importancia de este grupo

en el ecosistema pelágico, especialmente en zonas de

surgencia costera del Pacífico Suroriental. Tradi-

cionalmente la mayoría de las investigaciones se

centran en peces adultos, ignorando las características

y patrones ontogenéticos que podrían ser indicadores

del grado de adaptabilidad de las especies al medio,

debido a que estos estadios son los más sensibles a

variaciones ambientales. Consecuentemente, en esta

revisión se otorga un mayor énfasis a las características

biológicas de los primeros estadios de vida. Del análisis

de la información publicada sobre mictófidos en aguas

chilenas, queda en evidencia la falta de información

básica que de estar disponible, permitiría avanzar

rápidamente en las áreas de ecofisiología y dinámica

poblacional de este y otros grupos de especies. El

enfoque de este trabajo es 1) identificar aspectos

relevantes en la ecología de las primeras fases de

desarrollo que puedan ser abordadas con metodologías

ya existentes en la región en estudio y 11) mediante la

ejemplificación de algunos procesos y temas ya

publicados a nivel nacional e internacional, estimular

investigaciones futuras en el área de la ecología larval

de organismos marinos.

PRINCIPALES CARACTERISTICAS

BIOLOGICAS Y ECOLOGICAS DE LOS

MICTOFIDOS

TAXONOMÍA

La familia Myctophidae incluye aproxima-

damente 230 a 250 especies (Paxton 1972; 1979),

agrupadas en 30-32 géneros. Los géneros más

numerosos son Diaphus y Lampanyctus, los que

incluyen un total de 105 especies (Nelson 1994). La

familia se divide en dos subfamilias, Myctophinae

(14 géneros) y Lampanyctinae (18 géneros), sobre

la base de caracteres osteológicos y patrones de

distribución de fotóforos.

En aguas chilenas se han citado unas 80

especies de mictófidos (Pequeño 1989, 1997), lo que

representa una fracción significativa de las especies

existentes. Sin embargo, la información sobre los

estadios larvales en esta familia es escasa si se

compara esa cifra con el numero de especies de

mictófidos citadas a lo largo de Chile (Tabla I). Hasta

la fecha existe un solo trabajo en el que se describen

las primeras etapas de desarrollo de Hygophum

bruuni, una especie abundante en la zona centro-sur

de Chile (Balbontín y Orellana 1983), quedando

muchas otras especies por citar y describir, princi-

palmente su ontogenia. Es probable además que

algunas especies presenten un rango de distribución

geográfica mayor a los descritos hasta ahora.

TRIPHOTURUS MEXICANUS (GILBERT 1890): NUEVOS

ANTECEDENTES PARA LA “POBLACIÓN SUR”

El genero Triphoturus (Paxton 1972) está

representado por dos especies: Triphoturus

nigrescens (Brauer 1904) y Triphoturus mexicanus

(Gilbert 1890). Se ha postulado que 7. mexicanus

presenta dos poblaciones en el Pacífico oriental, una

en el hemisferio norte y la otra en el hemisferio sur

(Hulley 1986); esta última se extiende hasta aguas

del norte de Chile. Inicialmente se consideró la

población del hemisferio sur como una especie

separada, Triphoturus oculeus (Garman 1899), de

su congenérica T. mexicanus. Las principales

diferencias entre ambos grupos se relacionan con

el número de vértebras y branquiespinas (Brewer

1973; Wisner 1976), y en los patrones de

pigmentación larval (Moser & Alhstrom 1970;

Alhstrom 1971). Sin embargo, Hulley (1986)

concluye que 7. oculeus y T. mexicanus no son

especies distintas debido a que las diferencias en el

número de vértebras pueden ser inducidas por

variaciones en el ambiente y el número de espinas

branquiales no se correlaciona con alguna

diferencia en los fotóforos o estructura del órgano

caudal. Las larvas de T. mexicanus recolectadas en

aguas chilenas no son exactamente iguales a las de

la región de California (Moser 1996). Las larvas del

Gayana 64(2), 2000

hemisferio sur presentan entre uno a dos

melanóforos elongados en la línea lateral del cuerpo

a nivel de la aleta anal, similar en forma y posición

al melanóforo meso-lateral posterior de T.

nigrescens. Utilizando la técnica de electroforesis

de proteínas Afanas’yev y colaboradores (1990)

detectan un significativo nivel de divergencia

genética y sugieren que las poblaciones sur y norte

difieren subespecíficamente pero no son especies

diferentes. Recientemente, sin embargo, la

secuenciación del gen de citocromo b en larvas de

T. mexicanus recolectadas frente a Chile y su

posterior comparación con secuencias de ejemplares

del hemisferio norte, señalan que las diferencias

encontradas son consistentes y permitiría validar la

hipótesis que el género Triphoturus está formado

por una tercera especie, y que sería ésta y no T.

mexicanus la que estaría presente en la Corriente de

Humboldt (Herrera et al. 2000). Estos resultados son

además interesantes porque permiten ejemplificar

cómo mediante el estudio de estadios tempranos de

desarrollo se pueden dilucidar aspectos de tipo

taxonómico no resueltos en adultos.

ABUNDANCIA: AUSENCIA DE HUEVOS DE MICTÓFIDOS,

(¿ARTEFACTO DE MUESTREO?

Aunque las larvas de mictófidos constituyen

un alto porcentaje de las capturas en muestreos de

plancton oceánico y nerítico, no ocurre lo mismo

con la fracción huevos en este grupo. En muestreos

oceánicos realizados en el Pacífico e Indico, las

larvas de mictófidos correspondieron a un 47% del

total de larvas de peces recolectadas (Moser &

Ahlstrom 1974), y han llegado a porcentajes muy

elevados en algunas áreas, hasta un 90%, como

ocurre por ejemplo en el sur de Argentina

(Ciechomski et al. 1981). En Chile, las larvas de

mictófidos corresponden entre un 8 y 49% de las

capturas. Esto no ocurre con la fracción huevos y

en general es escasa la información sobre la

presencia, morfología y desarrollo de huevos en las

especies de la familia Myctophidae. Lampanyctodes

hectoris (Ginter 1876) es una de las pocas especies

cuyos huevos han sido descritos (Robertson 1977).

La falta de descripciones de huevos de mictófidos

se debe a que éstos son escasamente representados

en los muestreos. Los mictófidos son ovíparos y

presumiblemente tienen huevos planctónicos. La

gran disparidad entre la aparente ausencia de huevos

222

y una alta abundancia larval puede ser explicada

por la desintegración de los huevos durante la

captura (Moser 1996). Los huevos identificados

como de mictófidos tienen un rango de diámetro

entre 0.70 y 0.90 mm, poseen vitelo segmentado,

espacio perivitelínico moderadamente grande, una

sola gota de aceite (0.1-0.3 mm de diámetro) y un

corion rugoso y frágil. Al ser la membrana coriónica

frágil, es probable que se rompa durante los

arrastres, causando que el embrión se desintegre y

pase a través de la red. La desintegración y extrusión

de larvas vitelogénicas podría explicar su ausencia

en las muestras (Moser 1996). Una hipótesis

alternativa sugiere que la ausencia de huevos se

debería a que éstos se encontrarían por debajo de

los 200 m de profundidad (Yefremenko 1977), nivel

alcanzado pocas veces en los muestreos de

ictioplancton realizados en Chile (Tabla ID.

Estrategias de muestreo diferentes a las utilizadas

son necesarias para dilucidar esta interrogante.

DISTRIBUCIÓN Y EVIDENCIA DE ESTRATEGIAS

REPRODUCTIVAS ALTERNATIVAS

Las mayores abundancias de mictófidos

ocurren lejos de la costa (Gruber et al. 1982; Acuña

1986), principalmente a lo largo del quiebre de la

plataforma (Gjósaeter 1984; Hulley 1992). En su

distribución influyen las características hidrográficas

(Badcock 1981), patrones de circulación (Acuña

1987; Sabatés & Masó 1990; Olivar & Palomera 1994)

y estacionalidad de la temperatura, nutrientes y

producción primaria (May & Blaber 1989). Hulley

(1992) propone que la profundidad de la plataforma

determinaría la distribución espacial y vertical. Según

este autor existiría cierta zonación “plataforma abajo”

entre los mictófidos, debido a los efectos combinados

de la profundidad y las características oceanográficas

de la columna de agua, además de los requerimientos

propios de profundidad de cada especie. En otros

estudios (e.g. plataforma del NW de Africa) se plantea

que las características hidrográficas y los patrones

de circulación influirían más que la profundidad

(Badcock 1981). May & Blaber (1989) sugieren que

el aumento de la biomasa de peces mesopelágicos en

la plataforma de Tasmania se debe a ciclos

estacionales en temperatura, nutrientes y producción

primaria producidos por la interacción de la

convergencia subtropical y la Corriente Australiana

del Este. En sistemas de surgencia los mictófidos

Larvas de mictófidos: nuevas líneas de investigación: RODRÍGUEZ, L. y L. Castro

muestran un patrón de distribución y un patrón

reproductivo que varía entre especies y entre

poblaciones de la misma especie. En el caso de

Lampanyctodes hectoris, la más abundante en el

sistema de surgencia de Benguela, presenta dos

estrategias reproductivas: a) durante las surgencias

activas sus huevos y larvas se distribuyen de forma

más amplia en la columna de agua que en períodos

de relajación (Olivar 1990). Además se ha sugerido

que durante las surgencias activas, huevos y larvas

se distribuyen a profundidades donde el efecto del

transporte de Ekman fuera de la zona de plataforma

es menor (Hulley € Prosch 1987; Olivar & Shelton

1993). Alternativamente, b) durante surgencias

débiles L. hectoris presenta abundancias más bajas y

sus huevos y larvas se confinan más superficialmente

y próximo a la costa, generalmente en el borde del

talud continental (Olivar ef al. 1992). Otras especies

de la región de Benguela, como Protomyctophum

chilensis (Wisner 1971) y Symbolophorus boops

(Richardson 1844), no disminuyen sus abundancias

durante períodos de surgencia activa o débil,

permaneciendo en zonas más alejadas de la costa

(Olivar et al. 1992; Olivar & Shelton 1993). En Chile,

algunos estudios señalan que las larvas de mictófidos

son más abundantes en zonas alejadas al quiebre de

plataforma (Acuña 1986; Rodríguez & Castro no

publ.), mientras que en otros se ha descrito una gran

abundancia en zonas costeras (Landaeta et al. 2000).

En una escala temporal mayor, Loeb y Rojas (1988)

determinaron que las larvas de mictófidos en la zona

norte de Chile son un grupo dominante, y a través de

una serie temporal de 10 años evidenciaron que este

grupo presenta menos fluctuaciones en sus

abundancias en relación a otros órdenes. En ese estudio

la correlación entre las abundancias y variables

oceanográficas (temperatura y salinidad) evidenció

cierta tendencia positiva (aunque no significativa) para

algunas especies (e. g. D. laternatus) y negativas para

otras (e. g. L. parvicauda y T. mexicanus). Claramente

son necesarios nuevos trabajos que incluyan muestreos

a distancias variables de la costa y a distintas

profundidades para comprender la dinámica pobla-

cional de las especies de mictófidos presentes a lo largo

de la costa, así como para determinar sus estrategias

reproductivas en zonas de surgencias.

DISTRIBUCIÓN VERTICAL Y MIGRACIONES

Las variables físicas (e. g. termoclina, oxiclina,

luz y ritmos de marea) condicionan los patrones de

distribución vertical y migración en larvas. Sin

embargo, el grado en que estos factores afectan la

distribución vertical o si es la distribución de sus

presas o sus predadores la responsable de esta

conducta, no esta dilucidado (Fortier & Leggett 1983,

1984; De Lafontaine & Gascon 1989; Neilson & Perry

1990; Fortier & Harris 1989; Rópke 1993). Las larvas

de mictófidos se encuentran generalmente en los

primeros 200 m de la columna de agua (Ahlstrom

1959; Loeb 1979), aunque su distribución vertical y

conducta migratoria pueden variar según el estadio

de desarrollo (Nafpaktitis et al. 1977; Hulley 1994),

estación del año (Clarke 1973), conducta alimentaria

(Gorelova 1977) y características específicas; las

larvas de la subfamilia Myctophinae tienen una

distribución más profunda (entre los 50-75 m) que

las de la subfamilia Lampanyctinae (25-50 m) (Loeb

1979; Loeb & Nichols 1984; Moser & Smith 1993).

Además, la distribución vertical de las larvas es

diferente a la que presentan los juveniles y estadios

más avanzados; los adultos de la subfamilia

Myctophinae realizan migraciones verticales diarias,

mientras que aquéllos de la subfamilia

Lampanyctidae habitan a mayores profundidades,

pudiendo o no realizar migraciones verticales (Pearcy

et al. 1979; Moser & Smith 1993). Si bien se conocen

las diferencias en la distribución de los adultos, existen

muy pocas evidencias que señalen si las larvas de

mictófidos realizan algún tipo de migración diaria

en zonas de surgencia. Sameoto (1982) determinó

un ritmo diario de migración en larvas de

Diogenichthys laternatus. Esta especie presentó sus

máximas abundancias durante la noche a los 30 m y

a los 60 m durante el día frente a las costas de

Chimbote, Perú. Tampoco se ha estudiado si

distribuciones verticales diferentes tienen alguna

consecuencia sobre el crecimiento temprano (e. g.

relacionado con la oferta alimentaria y condiciones

oceanográficas). Los estudios realizados en Chile

no han contemplado hasta el momento un diseño

de muestreo en el que se incluyan arrastres

estratificados que permitan responder estas

interrogantes (Tabla II), las cuales son importantes

ya que la distribución vertical de las especies se

relaciona con sus características morfológicas y

ecológicas, afectando los patrones de crecimiento

(Linkowski 1991), nutrición (Gorelova 1977) y

otras funciones fisiológicas (Neighbors &

Nafpaktitis 1982).

223

Gayana 64(2), 2000

ALIMENTACIÓN: CICLOS DIARIO DE ALIMENTACIÓN

De los diversos estudios realizados sobre la

composición específica de la dieta de mictófidos se

desprende que este grupo ocupa el nivel trófico

terciario dentro del sistema pelágico y son

consumidores de segundo orden (Pakhomov et al.

1996). Por otro lado, Robison (1984) encontró que

Ceratoscopelus warmingii (Litken 1892) puede

alimentarse también de fitoplancton. Los mictófidos

son zooplanctófagos en su mayoría, siendo los

crustáceos el grupo más importante en su dieta. Esta

incluye principalmente copépodos calanoídeos,

eufáusidos, anfípodos, misidáceos y decápodos

(Gorelova 1975, 1977; Kinzer & Schulz 1985;

Pakhomov et al. 1996). En larvas de algunas especies

de mictófidos se han encontrado nauplii de

copépodos y copepoditos como principales presas

(Sabatés & Saiz 2000). En adultos el espectro de

presas puede variar con la hora del dia y la

profundidad. Se ha descrito que las especies de

mictófidos que realizan migraciones verticales se

alimentan en superficie durante la noche (Gorelova

1977; Hopkins & Baird 1985; Clarke 1973; Kinzer

& Schulz 1985). Sin embargo esta conducta estaria

relacionada con especies que ocurren en el océano

abierto. En regiones costeras con una alta

productividad (e. g. regiones con surgencias) se ha

registrado un ciclo diario de alimentación menos

marcado, donde las especies se alimentarían de

noche y también durante las horas del día (Tyler 4

Pearcy 1975; Kinzer 1982; Young & Blaber 1986).

Se ha afirmado que un gran número de larvas de

peces son predadores visuales (Hunter 1984) y por

tanto que sus ritmos de alimentación se concentran

durante las horas de luz. Sin embargo en larvas de

Hygophum bruuni capturadas frente a la región

central de Chile (32°S-33°S), sólo se encontraron

restos de alimento ya digeridos (Balbontín et al.

1997) y dado que las muestras fueron recolectadas

durante el día, esto podría indicar que las larvas de

esta especie preden durante la noche o bien

presenten una digestión más rápida. Estudios sobre

alimentación en larvas de mictófidos que incluyan

muestreos nocturnos determinarían más claramente

si existen o no ritmos de alimentación diarios en

estas especies en zonas de surgencia costera.

Respecto a la selección de su alimento, algunos

autores han propuesto que muestran un comporta-

miento trófico generalista (e. g. D. atlanticus),

224

presentando una alta diversidad y abundancia de presas

(Balbontin et al. 1997). Otros estudios han determinado

que existe una amplia variabilidad interespecífica en

la dieta y en las estrategias de alimentación en larvas

de este grupo que estarían relacionadas con una alta

diversidad en su morfología que les permitiría

optimizar el uso de los recursos y aumentar su probabi-

lidad de sobrevivencia en ambientes oceánicos

oligotróficos (Sabatés & Saiz 2000).

CRECIMIENTO LARVAL Y SU RELACIÓN CON LAS

MIGRACIONES VERTICALES

Los mictófidos se caracterizan por presentar un

crecimiento rápido, madurez sexual temprana, período

de desove corto y tasas de mortalidad elevadas

(Childress et al. 1980; Gjdsaeter & Kawaguchi 1980).

El crecimiento ocurre principalmente durante los

primeros seis meses de vida, y la curva de crecimiento

se aproxima rápidamente a una asíntota característica

de muchos peces mesopelágicos (Childress et al.

1980).

Debido a que los adultos de mictófidos habitan

en aguas más profundas y que la mayoría de las

especies que conforman este grupo realizan amplias

migraciones, su captura y mantenimiento en

laboratorio presentan serias dificultades (Linkowski

et al. 1993). Gjbsaeter (1981) y Methot & Kramer

(1981) fueron los primeros en contabilizar incrementos

en los otolitos de mictófidos. Ellos asumieron una

periodicidad diaria de formación, hecho que ha sido

corroborado en trabajos posteriores (Young et al.

1988). En general los incrementos se forman en

respuesta a una periodicidad diaria en la tasa

metabólica, afectada por factores externos, e.g.

fotoperíodo. Panella (1980) indicó que los peces que

realizan migraciones verticales diarias bien definidas

presentan incrementos diarios bien marcados en sus

otolitos. Esto fue efectivamente demostrado por

Linkowski et al. (1993) para dos especies del género

Ceratoscopelus que realizan extensas migraciones, C.

maderensis (Lowe 1839) y C. warmingii. Basado en

estos antecedentes, es razonable asumir que la

periodicidad de formación de incrementos también

ocurriría sobre una base diaria en los mictófidos (Young

et al. 1988), especialmente en aquellas formas que

experimentan amplias migraciones verticales a partir

del período temprano de desarrollo.

Los estudios sobre crecimiento en larvas de

mictófidos son escasos. Los modelos de crecimiento

Larvas de mictófidos: nuevas líneas de investigación: Ropricurz, L. y L. Castro

varían según la especie considerada, siendo las

variables ambientales uno de los factores más

importantes en la determinación de las diferencias en

crecimiento (Linkowski 1991). De acuerdo con

Campana (1984), el proceso de metamorfosis es en sí

mismo insuficiente para causar un cambio radical en

la estructura del otolito, pero un cambio en la conducta

y hábitat, conjuntamente con la metamorfosis, puede

producir tal efecto. En mictófidos tal cambio ocurre

cuando la larva desciende o cambia a una profundidad

donde ocurre la metamorfosis (Badcock & Merrett

1976). Las larvas de mictófidos exhiben diferentes

niveles de desarrollo antes de descender a esas

profundidades (Loeb 1979). Algunas especies

completan su transformación antes de su descenso O

incluso pueden realizar largas migraciones antes que

ello ocurra. Consecuentemente, podría esperarse

cambios en las tasas de depositación en los otolitos

asociadas a cambios ontogenéticos en la distribución

vertical. Esta primera hipótesis, sin embargo, y al igual

que la hipótesis de ritmos de alimentación larval, espera

ser puesta a prueba en ambientes de surgencia costera.

AMBIENTES DE SURGENCIA: EFECTO DE LA CAPA MÍNIMA

DE OXÍGENO SOBRE LA DISTRIBUCIÓN Y FISIOLOGÍA

LARVAL

El oxígeno es considerado como uno de los

factores que afecta la distribución de los mictófidos.

Algunas especies de mictófidos habitan en regiones

con bajas concentraciones de oxígeno (Kinzer et al.

1993), otras como en el caso de D. atlanticus las evaden

(Wisner 1976). Gjósaeter (1984) señala el papel

importante que podría tener la zona mínima de oxígeno

en la distribución de peces mesopelágicos en el Mar

de Arabia. El área de minima de oxígeno (<1 ml I*) del

Pacífico este y/o la penetración de aguas cálidas a lo

largo de Chile podrían explicar la distribución de

algunas especies de mictófidos frente a la costa chilena

(Wisner 1976). El Sistema de Corrientes Chile-Perú se

caracteriza por una extensa capa de mínimo oxígeno

(CMO; 1 ml O, I') muy próxima a la superficie

(Antezana 1978; Silva 1983; Morales 1996). Esta

característica implica otra fuente de variación en la

distribución de los organismos, incluidos los

mictófidos (Judkins 1979; Kinzer et al. 1993). Según

un estudio realizado por Lechenbauer (1993) los

juveniles y adultos de Diogenichthys laternatus pasan

más de un 60% del ciclo diario dentro de la CMO,

mientras que los juveniles y adultos de 7) mexicanus

pasan sólo un 38% del tiempo dentro de ella. Esto

indicaría que existen diferencias interespecíficas dentro

de este grupo con respecto al grado de adaptación a

condiciones de niveles bajos de oxígeno.

La hipoxia puede alterar la conducta de los

peces (Breitburg 1992; Hales & Able 1995),

incrementar la vulnerabilidad de las larvas a la

predación (Poulin et al. 1987; Breitburg et al. 1994,

1999) y reducir las tasas de crecimiento (Bejda et al.

1992). Además la concentración del oxígeno afecta

significativamente el crecimiento somático y acreción

de los otolitos (Mugiya & Uchimura 1989; Wright

1991; Hales & Able 1995). Existen algunos estudios

acerca del grado de tolerancia que los organismos

planctónicos (principalmente zooplancton) podrían

presentar frente a condiciones de hipoxia (Childress

1977; Antezana 1978). Recientemente se ha sugerido

que los organismos planctónicos en zonas de

surgencia presentan ciertas adaptaciones bioquími-

cas que influyen en el grado de tolerancia a las

condiciones de hipoxia ambiental (González 4

Quiñones 1999). En larvas de peces sin embargo

existen pocos antecedentes al respecto (Vía et al.

1997; Overnell & Batty 2000) y sólo recientemente

se están realizando este tipo de estudios para la región

(Rodríguez, González & Quiñones, no publ. ).

CONCLUSIONES

En el presente trabajo se resaltan algunas

características de la biología y ecología de los estadios

de desarrollo temprano de la familia Myctophidae,

que ejemplifican el grado de adaptabilidad de este

grupo de peces a ambientes costeros de surgencia O

a las zonas oceánicas adyacentes. El énfasis ha sido

puesto sobre los estadios más tempranos debido a

que son más sensibles a los cambios ambientales.

La revisión entregada deja de manifiesto que

existe poca información para cada uno de los temas

tratados (Tabla MI) y que generalizaciones a partir de

resultados encontrados en otras latitudes pueden no

resultar adecuadas para el área del Pacífico Sur

Oriental. Por ejemplo, existen deficiencias en el

conocimiento taxonómico y sistemático básico de

algunas especies así como de sus primeros estadios

de desarrollo (e.g. estadio de huevo). Existen en la

actualidad métodos genéticos que pueden ayudar a

clarificar la identificación y separación de especies.

De este modo, considerando que las larvas de

229

Gayana 64(2), 2000

mictófidos ocurren con frecuencia y en abundancia

en muestreos de zooplancton, que para estudios

genéticos las muestras tienen como requisito mínimo

ser preservadas en alcohol (preservante de bajo

costo), y que además existe un amplio número de

colecciones disponibles a nivel mundial, es factible

lograr grandes avances en estas nuevas líneas de

investigación y a corto plazo para esta región del

Pacífico.

En relación a posibles estrategias reproductivas

y distribución espacial a nivel poblacional, la

información existente en zonas de surgencia sugiere

que algunas especies de este grupo tendrían la

capacidad de variar sus estrategias reproductivas de

acuerdo a las condiciones oceanográficas y, mediante

estos cambios, aprovechar áreas y períodos favorables

para su reproducción o mantenimiento en zonas más

apropiadas. Lo anterior ha sido documentado previa-

mente para otros grupos de organismos planctónicos

en zonas de surgencia (e. g. eufáusidos, copépodos,

etc.) (Peterson et al. 1979, Pillar et al. 1989, Castro et

al. 1993). La falta de mayor información disponible

para mictófidos en las costas de la Corriente de

Humboldt se debe inicialmente a la falta de equipa-

miento básico para efectuar muestreos estratificados

que permitan determinar la existencia de zonas

verticales de agregación, cambios ontogenéticos en

distribución, etc. (situación que está mejorando

actualmente), y a que la mayor cantidad de recursos

disponibles para la investigación se destina al estudio

de especies de importancia comercial más que a

ecología poblacional de otras especies. Debido a su

distribución pelágica oceánica, la obtención de

muestras involucra costos muy altos, siendo probable

que estudios poblacionales para este grupo de peces

tomen mayor tiempo en desarrollarse.

El tercer conjunto de estudios señalados en este

trabajo está relacionado con aspectos ecológicos en

cuanto incluye los de tipo conductual (migraciones

verticales, alimentación) y fisiológicos (crecimiento,

adaptaciones a ambientes hipóxicos). Estudios sobre

alimentación y migraciones verticales en larvas son

abundantes en la literatura, sin embargo aspectos

básicos como la periodicidad diaria de alimentación

y la estratificación vertical de las larvas y sus presas

no han podido ser abordados exhaustivamente. Esto

se debería principalmente a la falta de equipamiento

que permita determinar la distribución vertical de los

organismos, asociados a los períodos de alimentación

diurno-nocturna. Estudios en crecimiento y determi-

nación de edad larval a través de la lectura de anillos

diarios en otolitos están ampliamente desarrollados

a nivel mundial y actualmente se están implemen-

tando en algunas especies presentes en la Corriente

de Humboldt (Peñailillo & Araya 1996; Hernández

& Castro 2000). Las adaptaciones de los organismos

a ambientes hipóxicos, tales como zonas de

surgencias costeras, es una temática con gran

potencial, la cual se está desarrollando recientemente

a nivel local y mundial (Rodríguez, González &

Quiñones, no public.). Considerando que en Chile

existe el equipamiento y personal calificado para

estos y otros estudios previamente mencionados, es

de esperar en los próximos años un incremento en el

número de estudios relacionados con ecología del

ictioplancton. Del mismo modo se espera que los

mictófidos sean más favorecidos como objeto de

estudio debido a su abundancia, por su función en el

traspaso de energía entre estratos del océano, así como

por sus particularidades eco-fisiológicas que le

permiten ser extremadamente exitosos en áreas de

surgencia costera y zonas adyacentes.

AGRADECIMIENTOS

Los autores quieren hacer llegar sus

agradecimientos al Dr. G. Herrera y Lic. M. Landaeta

por los comentarios y aportes para el mejoramiento

de las primeras versiones de este manuscrito. Durante

el desarrollo de este estudio, el primer autor fue

financiado por las instituciones Deutscher

Akademischer Austauschdients (DAAD) y la

Universidad de Concepción y el segundo autor por

el Programa FONDAP-Humboldt y Proyecto

FONDECYT 1990470.

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370:

TABLA I. Listado de especies de mictófidos cuyos estadios larvales han sido documentados en estudios realizados en

Chile.

TabLE I. Myctophid fish larvae documented in studies carried out off Chile.

ESPECIE REFERENCIAS

Ceratoscopelus towsendi (Eigenmann & Eigenmann 1889) 20

Ceratoscopelus sp. 20

Diaphus theta (Eigenmann & Eigenmann 1890) 9,10,20

Diaphus sp.

Diogenichthys atlanticus (Tánning 1928)

Diogenichthys laternatus (Garman 1899)

Diogenichthys spp.

Gonichthys sp.

Gymnoscopelus sp.

Hygophum atratum (Garman, 1899)

Hygophum bruuni Wisner 1971

Hygophum proximum Becker 1965

Hygophum reinhardtii (Liitken 1892)

Hygophum sp.

Lampadena luminosa Garman 1899

Lampadena sp.

Lampanyctodes hectoris (Giinter 1876)

Lampanyctus achurus Andriashev 1962

Lampanyctus parvicauda Parr 1931

Nannobrachium ritteri Zahuranec 1980

Lampanyctus sp.

Metelectrona ventralis Becker 1963

Myctophum nitidulum Garman 1899

Myctophum sp.

Notoscopelus resplendens (Richardson, 1844)

Protomyctophum (Hierops) chilensis Wisner 1971

Protomyctophum (Hierops) crockeri (Bolin 1939)

Protomyctophum (Hierops) subparallellum Tanning 1932

Protomyctophum sp.

Symbolophorus boops (Richardson 1844)

Symbolophorus sp.

Triphoturus mexicanus (Gilbert 1890)

4,7, 8, 16, 20

9,7, 10, 11, 12, 14, 16, 20

7,9, 10, 12, 18, 20, 21

4, 8, 15, 22

9,11

Moras 6 90 12, 18114,45, 16

19, 20

12, 13, 20

4,7, 9, 12, 20

9,10, 11

4,7, 8, 15, 20

719,20

11520

9710; 11 1215.16

OZ 20

951011

16, 20

8, 15, 20

3,4, 759.10; 16,17,18,20, 21, 22,23

Re OFF

1) Aron 1980 9) Serra et al. 1994 17) Bustos & Flores 1999

2) Balbontin & Orellana 1983 10) Quiñones et al. 1995 18) Rodríguez & Castro 1999

3) Muñoz 1983 11) Serra et al. 1995 19) Castro et al. 2000

4) Loeb & Rojas 1988 12) Landaeta 1996 20) Rodriguez & Castro (no public.)

5) Sepúlveda 1990 13) Balbontin & Bernal 1997 21) Rodriguez et al. (no public.)

6) Castillo et al. 1991 14) Balbontin et al. 1997 22) Landaeta et al. 2000

7) Palma et al: 1992 15) Castro et al. 1997 23) Herrera et al. 2000

8) Mujica 1993 16) Llanos 1998

231

Gayana 64(2), 2000

TABLA II. Tipo de muestreos realizados en ictioplancton en Chile, donde se han colectado larvas de mictófidos. Se

incluyen las artes de pesca empleada, área de estudio, tipo de arrastres, distancia de la costa y hora de muestreo.

TABLE II. Sampling design in ichthyoplankton studies in which larval myctophids have been collected off Chile. Table

includes: sampling gear, area of study, type of towing (oblique, vertical), distance from shore and time of day.

RED AREA ARRASTRES DISTANCIA HORADE REFERENCIA

A LA COSTA MUESTREO

Nansen Bahía Concepción oblicuos interior bahia noindica Aron 1980

(365u) (36°40’S-63°02’ W)

Nansen Bahia Coliumo oblicuos interior bahia _ no indica Munoz 1983

(350 4) (36°32’S-72°-73°1 1’ W)

Bongo (3331) Bahía Valparaíso oblicuos interior bahia noindica Balbontin & Orellana

CalCOFI (5001) (32°55’S) 1983

Hansen (300) Norte Chile oblicuos no indica diurno-nocturno Loeb & Rojas 1988

WP2 (300) (18%00*S-24%00'S; 0-50 m y

70°-72°W) 0-100 m

Clarke-Bumpus Bahia Coliumo

Estratos oblicuos 2.2 mn

diurno

Sepulveda 1990

(365 y) (36°31’S-72°56’ W) (0-14m y 15-23m)

Bongo Golfo Arauco oblicuo boca del golfo diurno-nocturno Castillo et al. 1991

(335 4) (37°05’S) 0-45 m

WP-2 Norte de Chile vertical 5-200 mn diurno-nocturno Palma et al. 1992

(210) (18°20’S-23°31’S) 0-100 m

Bongo Isla de Pascua oblicuo no menciona noindica Mujica 1993

(330 4) (27*10”S-109%20”W) 0-5 m

Bongo Chile centro-sur oblicuos costa-85 mn diurno-nocturno Serra et al. 1994

(300 u) (33°40’S-39°S) 0-200-350m 100-400 mn

Bongo Chile centro-sur oblicuos 100-400 mn diurno-nocturno Quiñones et al. 1994

(3001) (33°40’S-39°S) 0-200-400m

WP2 estratos oblicuos:

0-50, 50-150,

150-250, 250-400

Bongo Chile centro-sur oblicuos 5-100 mn diurno-nocturno Serra et al. 1995

(300 u) (33°40’S-39°S) 0-200-400m

Bongo Chile centro-sur oblicuos 2-90 mn diurno-nocturno Landaeta 1996

(250 1) _(33°40’S-39°S) 0-50 m

Bongo Chile Central oblicuos 4mn no indica Balbontin et al. 1997

(350 u) (32°00’S-33°00’S) 0-200 m

Tucker trawl Centro-Sur Chile estratos oblicuos: 2-60 mn diurno-nocturno Castro et al. 1997

(250 u) (32°20’S-39°40’S) 0-40 m y

40-100 m

Bongo Canales australes oblicuo no indica no indica Balbontin & Bernal

(350 u) (41°-46°S-72°-75°W) (0-200 m) 1997

Bongo Bahia Valparaiso oblicuos 4mn diurno Llanos 1998

(350 u) (32°55’S) 0-50 m

Bongo Chile Central oblicuo 2-12 mn diurno Castro et al. 2000

(500 4) (35°00’S-38°00’S) 0-40 m

CalVET Norte Chile vertical no indica no indica Bustos & Flores 1999

(250 p) (21°40’S-22°20’S- (0-70 m)

70°12’ W-70°42’ W)

Tucker trawl Antofagasta estratos oblicuos: 5-90 mn diurno-nocturno Rodriguez & Castro

(250 u) (23°00’S) 0-50 m 1999

50-150 m

Bongo con Antofagasta horizontal en 5-90 mn diurno-nocturno Rodriguez et al.

cierre (350 4) (23°00’S) estratos: (no public.)

25 m, 50 m,

75 m, 100 m

232

Larvas de mictófidos: nuevas líneas de investigación: RODRÍGUEZ, L. Y L. Castro

TABLA III. Estudios realizados en Chile en que se entrega información de larvas de mictófidos.

TABLE III. Research lines carried out in Chile giving information on larval myctophids.

TIPO DE ESTUDIO REFERENCIA

Taxonomía, descripción larval 10528

Distribución y abundancia 4 07,8, 19; 1516, 17, 1819

Relación con variables ambientales DM 12 E 181920222

Alimentación 14, 16

Fisiología ai

1) Aron 1980 9) Serra et al. 1994 17) Bustos & Flores 1999

2) Balbontin & Orellana 1983

3) Munoz 1983

4) Loeb & Rojas 1988

5) Sepúlveda 1990

6) Castillo et al. 1991

7) Palma et al. 1992

8) Mujica 1993

10) Quiñones et al. 1995

11) Serra et al. 1995

12) Landaeta 1996

13) Balbontin & Bernal 1997

14) Balbontin et al. 1997

15) Castro et al. 1997

16) Llanos 1998

Fecha de recepción:10.04.2000

Fecha de aceptación: 13.09.2000

18) Rodríguez & Castro 1999

19) Castro et al. 2000

20) Rodríguez & Castro (no public.)

21) Rodríguez et al. (no public.)

22) Landaeta et al. 2000

23) Herrera et al. 2000

233

Gayana 64(2): 235-236, 2000

COMUNICACIONES BREVES / SHORT COMMUNICATIONS

ISSN 0016-531X

IXODES URIAE WHITE 1852 (ACARI: IXODIDAE) ASSOCIATED WITH

THE PAPUA PENGUIN, PYGOSCELIS PAPUA (FORSTER), IN THE

ANTARCTIC PENINSULA

IXODES URIAE WHITE 1852 (ACARI: IXODIDAE) ASOCIADO CON EL

PINGUINO PAPUA, PYGOSCELIS PAPUA (FORSTER), EN LA PENINSULA

ANTARTICA

María E. Casanueva’ & Hugo I. Moyano’

‘Departamento de Zoología, Facultad de Ciencias Naturales y Oceanográficas, Universidad de Concepción, Casilla

160-C, Concepción, Chile. E-mail: mcasanue @udec.cl

Among the members of the family Ixodidae

the genus /xodes is the largest taxon and is repre-

sented by about 250 species (Keirans & Clifford

1978). Some of the /xodes species are associated

with different types of birds. The ticks of sea birds

represent a very interesting ecological group since

some are widely distributed and occur in both the

northern and southern hemispheres.

Species of the genus /xodes, like I. kohlsi and

I. percavatus, have been mentioned as ectoparasites

of the Little penguin Eudyptula minor in Australia

(Reilly & Balmford 1975). According to Zumpt

(1952) Ixodes (Ceratixodes) uriae (White 1852)

presents an interesting distribution since is bipolar.

In the North Hemisphere this species has been

collected in Alaska, Canada, Iceland, Greenland,

England, Scotland, Norway, Finland, Kola

Peninsula, Hebrides, and Russia. On the other hand

in the South Hemisphere it presents a circumpolar

distribution, collected in Patagonia, Kergueleng, St.

Paul and King Islands, Campbell and Nightingale,

South Africa and Australia. Roberts (1964) reported

this species associated with the “Tasmania

penguin” in the King Island; however he mentioned

that the most commnon hosts are sea birds like

albatross, seagulls and petrels.

In Chile the tick species Ixodes auritulus

and /xodes uria [sic] have been recorded in birds

and sea birds by Tagle (1971) but he does not

give information about the distribution and

specific hosts for both species. In the Antarctic

these species have been found associated with

penguins and other birds in the Graham Land. They

are well distributed in the subantarctic islands, but

there are not records of their presence in more

meridional areas as other mites species (Gressitt

1972). However few other studies have been done

in Chile regarding the ticks species. Among these

are Donoso (1953) and Tagle (1971).

The objective of this short note is to present

the record of Ixodes uriae associated with nests

of the “papua penguin”, Pygoscelis papua, in the

Antarctic Peninsula.

One female was collected in the Doumer

Island (64%52*24”S; 63°36'00’’W), Antarctic

Peninsula in january 1999 by Hugo I. Moyano, as

part as the grant INACH 005-97 of the Instituto

Antártico Chileno. The specimen was found

walking in the snow close to the nests of Pygoscelis

papua.

Females of /. uriae can be distinguished from

I. auritulus because they have a 2/2 hypostomal

dentition and no spurs on any coxae and females

of 1. auritulus have instead a 4/4 to 5/5 hypostomal

dentition and two spurs on coxa I and one spur each

on coxae II-IV. Scannning electron microscope

photos and keys for males and females can be found

in Keirans and Clifford 1978.

ZO)

Gayana 64(2), 2000

ACKNOWLEDGMENTS

Thanks are due to Instituto Antártico Chileno,

Grant INACH 005-97 and to Universidad de Con-

cepción, Chile through Grant DIUC 97-113.041-1.0

for the fundings. Special thanks to Dr. Jim Keirans

(USA) for helping with the identification of the

species.

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Series, 17: 1-8 pp.

TAGLE, I. 1971. Ixodoidea en Chile. Temas parasitológicos

de actualidad. 46-49. Universidad de Chile, San-

tiago.

Zumpt, F. 1952. The Ticks of sea birds. A.N.A.R.E.

Report, Series B, Vol. 1: 12-20.

Fecha de recepción: 12.10.2000

Fecha de aceptación: 13.10.2000

236

Gayana 64(2): 237-238, 2000

ISSN 0016-531X

UN PARATIPO ERRADO DE PAREUXOA KOEHLERI OLIVARES

(LEPIDOPTERA: NOCTUIDAE)

A MISTOOK PARATYPE OF PAREUXOA KOEHLERI OLIVARES

(LEPIDOPTERA: NOCTUIDAE)

Tania S. Olivares! y Andrés O. Angulo?

‘Casilla 4040, Correo 3, Concepción. Chile. E-mail: tolivare Oudec.cl

‘Departamento de Zoología, Facultad de Ciencias Naturales y Oceanográficas, Universidad de Concepción, Casilla 160-

C, Concepción, Chile. E-mail: aangulo@udec.cl

La homogeneidad en la coloración de las alas

anteriores de los nóctuidos y su capacidad de

camuflaje es alta, los casos de especies que se

asemejan exteriormente, sean del mismo género o

de distinto género de diferentes subfamilias son una

buena expresión de diversos fenómenos biológicos

evolutivos (Angulo & Olivares 1998). Esto ha

llevado a la confusión de dos especies, por lo que

se realiza la presente nota.

Tras la revisión del material típico de la

especie Pareuxoa koehleri Olivares depositado en

el Museo de Zoología de la Universidad de

Concepción y la publicación de esta especie

(Olivares 1992) se procedió a la preparación de

la genitalia de uno de los ejemplares que difería

del resto por una coloración más rojiza, según la

técnica de Angulo & Weigert 1977.

RESULTADOS

Tras la preparación de genitalia, se obtuvo

que el ejemplar correspondiente a la etiqueta Termas

de Rio Blanco, Cautin-II-51, corresponde a la

especie Scania anelluspinata Olivares (Olivares

1994). por lo que es retirada de la serie típica de la

especie koehleri.

AGRADECIMIENTOS

Deseamos agradecer al proyecto de la

Dirección de Investigación N* 200.113.057-1.0,

de la Universidad de Concepción.

BIBLIOGRAFIA

ANGULO, A.O. & T.S. OLIVARES. 1998. Especies gemelas

y crípticas de mariposas nóctuidas andino-

patagónicas (Lepidoptera: Noctuidae) Gayana

Zool. 62(1): 65-67.

ANGULO, A.O. & G.TH. WEIGERT. 1977. Pseudaletia

punctulata (Blanchard) y Pseudaletia impuncta

(Guenée): nóctuidos hadeninos similares en

Chile (Lepidoptera: Noctuidae) Agro Sur 5(1):

12-17.

OLIVARES, T.S. 1992. Dos nuevas especies de Paraeuxoa

Forbes, 1933, próximas a P. janae Angulo 1990

(Lepidoptera, Noctuidae, Noctuinae, Austrandesiini)

Bol. Soc. Biol. de Concepción. 63: 147-150.

OLIVARES, T.S. 1994. Sistemática y filogenia de las especies

del género Scania n. gen. (Pseudoleucania in part)

(Lepidoptera: Noctuidae) de la subregión andino-

patagónica. Gayana Zool. 58(1): 27-60.

237

Gayana 64(2), 2000

Ficuras 1-3. 1. Adulto macho (del ejemplar erróneamente tratado). Scania anelluspinata Olivares. Genitalia macho:

2. valvas, 3. aedeagus.

Ficures 1-3. 1. Male adult (the mistook specimen). Scania anelluspinata Olivares. Male genitalia: 2. valves, 3.

aedeagus.

Fecha de recepción: 30.08.2000

Fecha de aceptación: 30.08.2000

Gayana 64(2): 239-241, 2000

ISSN 0016-531X

CTENARYTAINA EUCALYPTI (MASKELL 1890): EL PSILIDO DEL

EUCALIPTO EN CHILE (HEMIPTERA: STERNORRYNCHA:

PSYLLOIDEA: SPONDYLIASPININAE)

CTENARYTAINA EUCALYPTI (MASKELL 1890): THE BLUE GUM

PSYLLID IN CHILE (HEMIPTERA: STERNORRYNCHA: PSYLLOIDEA:

SPONDYLIASPININAE)

Tania S. Olivares”

“Casilla 4040, Correo 3, Concepción. Chile. E-mail: tolivare@udec.cl

Chile tiene 308. 762 há. de Eucalyptus spp.

(Odepa 1997 fide Burckhardt 1999). Conjunta-

mente con introducir Eucalyptus llegan también los

insectos asociados a éstos, cabe mencionar

Gonipterus scutellatus Gyll. o Phoracantha

semipunctata (Fabricius). Una nueva plaga asociada

al eucalipto corresponde al conocido “blue gum

-psyllid” o psílido del eucalipto (Figs. 1 y 2) que ataca

tanto Eucalyptus globulus o gomero azul y

Eucalyptus nitens. Este psílido proviene del sureste

de Australia y Tasmania. En América latina se le ha

detectado en Uruguay y Brasil. Burckhardt 1994,

predice la aparición de esta especie en hospederos

de la familia Myrtaceae.

En la actualidad, en Chile, se le ha detectado

en Iquique (I región), en las Provincias San Felipe

y los Andes en Chile Central (Anónimo 2000;

Burckhardt & Elgueta 2000).

Ctenarytaina Ferris & Klyver es un género

ampliamente distribuido desde el Sudeste asiático

hasta Europa pasando por Sudáfrica. Este se

caracteriza taxonómicamente por la presencia de

una hilera de espinas en la cara apical externa de

la mesotibia.

Si bien existen datos que permiten conocer la

especie, ésta puede ser confundida con otras especies

simpátricas, v. gr. Blastopsylla occidentalis Taylor.

El presenta trabajo tiene por objetivos reunir

información dispersa de esta especie y entregar

nuevos datos de distribución geográfica y datos

biológicos para Chile.

El material utilizado para el presente estudio

proviene de Arica (I región), San Felipe (V región)

y Concepción (VIII región) y fueron analizadas a

través de preparaciones microscópicas según las

técnicas corrientes y la clave de Burckhardt 1994b,

a través de los caracteres taxonómicos de la cabeza,

metatibia y genitalias de machos y hembras. Las

descripciones originales fueron revisadas, además,

los trabajos de Zondag 1992; Burckhardt 1994a y

b; Burckhardt et al. 1999.

La clasificación actual de la especie es:

Orden: Hemiptera

Suborden: Sternorryncha

Familia: Psyllidae

Subfamilia: Spondyliaspininae

Género: Ctenarytaina Ferris & Klyver

Especie: Ctenarytaina eucalypti (Maskell

1890)

Recientemente se ha detectado la especie

en la Provincia de Concepción, en las localidades

de Coronel, Playa Blanca, Cerro Alto, Altos de

Villuco, en la Provincia de Nuble (Chillán) y en

la provincia del Bío Bío (Mulchén).

Por lo tanto la distribución de la especie se

ha ampliado desde la I región (Iquique) detectada

2399

Gayana 64(2), 2000

en agosto de 1999, Los Andes, San Felipe (V región)

y Región Metropolitana (RM) a la VIII región

(Playa Blanca, Cerro Alto, Cañete, Chillán).

En muestras obtenidas de la Provincia de

Ñuble (Chillán), se han encontrado larvas de Diptera

de la familia Syrphidae, la que es depredadora, su

identificación ha llegado a nivel de género, la que

corresponde a Pipiza sp. (Fig. 3), la que podría ser

un eventual controlador biológico en Chile.

Las muestras obtenidas de la VIII región

corresponden a los meses de mayo a diciembre

del 2000, en las cuales se han encontrado todos

los estados de desarrollo, los cuales han sido

descritos ampliamente en Maskell 1890; Zondag

1992 y Burckhardt 1994a y b.

DISCUSION

La especie Ctenarytaina eucalypti (Maskell)

posee un alto grado de dispersión ya que prácticamente

ha recorrido todo el territorio nacional en un año.

Es necesario evaluar la conducta de la

especie en Chile, ya que no se tienen parámetros

en nuestro país, con respecto al tipo de clima o

humedad, sólo se han extrapolado datos de

conducta en Nueva Zelanda, Australia y Tasmania.

Se ha mencionado como posible controlador

biológico a la especie Psyllaephagus pilosus

(Hymenoptera) la cual eventualmente podría traer

beneficios para su control (Sandoval 2000), pero es

necesario evaluar su conducta, otro controlador

mencionado para Nueva Zelanda es Cleobora mellyi

Mulsant (Coccinellidae) (Zondag 1982), tanto la

larva como el adulto se alimentan del psílido.

Otros enemigos parásitos y predatores

mencionados por Burckhardt 1993 son Pteroptrix

maskelli (Eulophidae), Syrphoctonus cf. abdominalis

(Ichneumonidae), Eumerus sp, Melliscaeva cictellus,

Pipizella sp, Sphaephoria scripta (Syrphidae),

Bardysia sp. (Sciaridae) y Haematopota ocelligerg

(Tabanidae)

En Uruguay las poblaciones declinan con

grandes lluvias (Burckhardt et al. 1999)

Si bien el ataque del psílido ocurre cuando las

plantas son jóvenes (1-2 años) y preferentemente en

viveros, es necesario seguir la evolución de las plantas

atacadas a través del resto del desarrollo de la planta.

BIBLIOGRAFIA

ANÓNIMO. 2000. El psílido de los eucaliptos. Ctenarytaina

eucalypti Maskell (Hemiptera: Psyllidae).

Ministerio de Agricultura. Servicio Agrícola y

Ganadero. Departamento de Protección Agrícola.

Subdepartamento de Vigilancia Fitosanitaria. 4 pp.

BuRCKHARDT, D. 1993. Psílidos (Homoptera: Psylloidea) en

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Servicio Agrícola y Ganadero. Departamento de

Protección Agrícola. 67 pp. Mimeografiado.

BurckHARDT, D. 1994a. Psylloid pests of temperate and

subtropical crop and ornamental plants

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BuRCKHARDT, D. 1994b. Generic key to chilean jumping

plant-lice (Homoptera: Psylloidea) with inclusion

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BuRCKHARDT, D., D.L.Q. SANTANA, A.L. TERRA, F.M. DE

ANDRADE, S.R.C. PENTEADO, E.T. IEDE & C.S. Morey.

1999. Psyllid pests (Hemiptera: Psylloidea) in south

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schweizerischen entomologischen Gesellschaft.

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BuRCKHARDT, D. & M. Excueta. 2000. Blastopsylla

occidentalis Taylor (Hemiptera: Psyllidae), a new

introduced Eucalypt pest in Chile. Rev. Chilena

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SANDOVAL, A. 2000. Nueva plaga de los Eucalyptos.

Mercurio. Revista del Campo. Septiembre. 3 pp.

ZONDAG, R. 1982. Ctenarytaina eucalypti (Maskell)

(Hemiptera: Psyllidae). Forest and Timber insects

in New Zealand. Forest Reseach Institute New

Zealand Forest Service. 53:3 pp.

Fecha de recepción: 29.12.2000

Fecha de aceptación: 29.12.2000

240

El psilido del eucalipto en Chile: OLIVARES, T.S.

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FIGURA |. Adulto recién emergido de Ctenarytaina eucalypti (Maskell).

FIGURE |. Adult just merged of Ctenarytaina eucalypti (Maskell).

FIGURA 2. Ninfa de Ctenarytaina eucalypti (Maskell). FIGURA 3. Larva de Diptera (Syrphidae) del género Pipiza

Fallén.

FIGURE 2. Nymphal stage of Ctenarytaina eucalypti :

(Maskell). FIGURE 3. Larvae of Diptera (Syrphidae) from Pipiza

Fallén genus.

24]

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REGLAMENTO DE PUBLICACIONES DE LA REVISTA GAYANA

La revista Gayana, dedicada al distinguido naturalista francés radicado en Chile don Claudio Gay, es el órgano

oficial de Ediciones de la Universidad de Concepción, Chile, para la publicación de resultados de investigaciones

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un volumen anual compuesto por dos números. Recibe trabajos realizados por investigadores nacionales y extran-

jeros, elaborados según las normas del presente reglamento. La recepción es permanente. Acepta trabajos escritos

en idioma español o inglés. La publicación en otros idiomas deberá ser consultada previamente al Director. Revista

Gayana recibe además libros para ser comentados y comentarios de libros, comunicaciones de eventos científicos,

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El titulo principal debe ir todo escrito en letra mayúscula y expresar el contenido real del trabajo. Si incluye un

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ción de los autores, Resumen, Abstract, Palabras claves y Keywords (máximo 12 palabras o nombres compuestos

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y Bibliografía. Estos títulos deberán ir en mayúsculas sin negrita. Los nombres de los autores, dirección de los

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ción será realizada por un Comité de Publicación ad hoc, dicha comisión no se hará responsable de lo mencionado

en el texto, por lo cual se solicita que los manuscritos vengan en su forma definitiva para ser publicados (jerarquizar

títulos, subtítulos, ortografía, redacción, láminas, etc.). Los nombres científicos y las locuciones latinas serán las

únicas que irán en cursiva en el texto. La primera vez que se cite una unidad taxonómica deberá hacerse con su

nombre científico completo (género, especie y autor). Las medidas deberán ser expresadas en unidades del sistema

métrico separando los decimales con punto (0.5). Si fuera necesario agregar medidas en otros sistemas, las abrevia-

turas correspondientes deben ser definidas en el texto. Las citas en el texto deben incluir nombre del autor y año, sin

coma entre autor y año (ejemplo: Smith 1952); si hay más de una fecha se separarán con comas (ejemplo: Smith

1952, 1956, 1960). Si hay dos autores se citarán separados por & (ejemplo: Gómez & Sandoval 1945). Si hay más

de dos autores, sólo se citará el primero seguido de la expresión ef al. (ejemplo: Seguel et al. 1991). Si hay varios

trabajos de un autor(es) en un mismo año, se citará con una letra en secuencia adosada al año (ejemplo: 1952a,

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Journals para citar correctamente fechas, publicaciones, abreviaturas, etc. La nomenclatura se regirá por el Código

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numeración; serán en blanco y negro o en color, brillantes, de grano fino y buen contraste y deben ser acompañadas

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tada previamente al Director de la Revista. No se aceptarán fotografías y dibujos agrupados en la misma lámina. Las

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y manuscrita la ubicación relativa de las tablas y figuras, si procede. Las ilustraciones deberán tener un tamaño

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cho y hembra, éstos deben escribirse (macho, hembra), en la impresión definitiva aparecerá el símbolo correspon-

diente. Bibliografía. Los nombres de los autores deben ir en altas y bajas. Coloque un punto antes y después del

año de publicación (ejemplo: Smith, J.G. £ A.K. Collins. 1983.). No use sangrías. Para las referencias que son

volúmenes no use espacio después de dos puntos (ejemplo: Rev. Biol. Mar. 4(1):284-295). Tablas. Reducir al

máximo el uso de tablas o cuadros complicados o difíciles de componer. No usar espaciador para separar una

columna de otra en las tablas, para ello usar exclusivamente tabuladores. No se aceptarán trabajos que contengan

tablas confeccionadas con espaciador. Los manuscritos que no cumplan con esta reglamentación serán devueltos a

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dos en proyectos de investigación.

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Cont...CONTENIDO / CONTENTS

Revisión / Review

DASS e A A 205

Fish immune system

Ropricuez, L. € L. Castro. Estudios en ecología de larvas de mictófidos (Pisces, Myctophidae): Una

propuesta para nuevas líneas de investigación en la Corriente de Humboldt ..onconnncnnnccnnicinocincccinnccnos 219

Studies on the ecology of larval myctophids (Pisces, Myctophidae): A proposal for new research lines in

the Humboldt Current

Comunicaciones breves / Short communications

CasANuEVA, M.E. y H.I. Moyano. /xodes uriae White 1852 (Acari: Ixodidae) asociado con el pingúino

Papa veoscels papua (Forster), en la peninsula antartica .. <2. 1o:c.ccaccssecs<cesavusteccessasceoceessenendOzateraen 235

Ixodes uriae White 1852 (Acari: Ixodidae) associated with the papua penguin, Pygoscelis papua (Forster),

in the antarctic peninsula

OLIVARES, T.S. y A.O. ANGULO. Un paratipo errado de Pareuxoa koehleri Olivares (Lepidoptera: Noctuidae)

A mistook paratype of Pareuxoa koehleri Olivares (Lepidoptera: Noctuidae)

OLIVARES, T.S. Ctenarytaina eucalypti (Maskell 1890): El psilido del eucalipto en Chile (Hemiptera:

Siemasaochs: Psylloidea: Spondylaspininac) ...::c5:.cveacoss<avecevenneeessiWeceuvess cea Side naci RAR RR 239

Ctenarytaina eucalypti (Maskell 1890): The blue gum psyllid in Chile (Hemiptera: Sternorryncha:

Psylloidea: Spondyliaspininae)

CONTENIDO / CON

Ambiente terrestre / Terrestria} environments

ALAMIRI, Z. Conducta de oviposición en cuatro especies de Drosophila .........uoocoocnconccnooennnonncnnanecananos 123

Oviposition behaviour in four species of Drosophila

Chiapra, E., SH. RODRÍGUEZ Y R. BASCUNAN. Preferencia y manipulación floral de Centris rodophthalma

Pérez (Hymenoptera: Anthophorida6) l.aviocicnntacaso someras rt ames aa Sn aedes Se eae 133

Floral preference and manipulation of Centris rodophthalma Perez (Hymenopera: Anthophoridae)

IANNACONE, J., L. ALVARIÑO, C. CABALLERO Y J. SANCHEZ. Cuatro ensayos ecotoxicológicos para evaluar

lindano: y Clorplrilos ..cc...eomoioiónonenconnranonenro canina renato o ÓN 139

Four ecotoxicological assays to evaluate lindane and chlorpyrifos

Louis-MALDONADO, M. Y R. BapiLLa. Descripción de los estados preimaginales de Hemieuxoa conchidia

Br a gr RCO oe ee nee ee 147

Description of preimaginal stages of Hemieuxoa conchidia (Butler)

RopríGuEz, M.A., T.S. OLIVARES Y A.O. ANGULO. Nuevo género y nuevas especies de nóctuidos altoandinos

V. Tenera Rodríguez & Angulo n. gen. v/s géneros afines (Lepidoptera: Noctuidae: Cucullinae) ....... 155

A new genus and new species from hight andean V. tenera Rodríguez & Angulo n.gen. v/s akin genera

(Lepidoptera: Noctuidae: Cucullinae)

Romero, F., E. ALTIERI, C. QUIÑEHUAL Y A. CAYUQUEO. Actividad contráctil de músculo papilar cardiaco y

conducto deferente de rata inducida por veneno de la araña Latrodectus mactans de Chile ................+++ 161

Contraction activity of the papillar muscle and vas deferent of a rat induced to poison from the Latrodectus

mactans spider of Chile

STUARDO, J.R. Y P. VARGAS-ALMONACID. Moluscos terrestres de Chile. Sinonimia y problemas relacionados:

|. Familias Veronicellidae, Pupillidae y Achatinellidae (Gastropoda: Pulmonata) .............::::csseseeeeees 171

Land mollusca of Chile. Synonymies and related problems: 1. Families Veronicellidae, Pupillidae and

Achatinellidae (Gastropoda: Pulmonata)

Ambiente acuático / Aquatic environments

JARA-SEGUEL, P., S. PEREDO, C. PALMA-Rojas, E. PARADA Y G. LARA. Cariotipo cuantitativo de Diplodon

chilensis (Gray 1828) (Bivalvia: Hyriidae) ............... O O ng 189

Quantitative karyotype of Diplodon chilensis (Gray 1828) (Bivalvia: Hyriidae)

SALAMANCA, M.A., A. Camaño, B. Jara & T. RoDrÍGUEZ. Distribución de Cu, Pb y Zn en aguas costeras de

bahía San Jorge en el norte de Chile eonionnocnnnnnnio eaenee se] eoeeee ae a 195

Cu, Pb and Zn distribution in nearshore waters in San Jorge bay, northern Chile

Dirigir correspondencia a:

ComITÉ DE PUBLICACIÓN

REVISTA GAYANA

CasILLA 160-C

CONCEPCION, CHILE

E-mail: gayana@udec.cl

EDICIONES UNIVERSIDAD DE CONCEPCION