Mem. Inst. Butantan

U/45, 1980/81

INSTRUÇÕES AOS AUTORES

1. FINALIDADE

As MEMÓRIAS DO INSTITUTO BUTANTAN são publicadas sob a

orientação da Comissão Editorial, sendo que os conceitos emitidos são de

inteira responsabilidade dos autores. Têm por finalidade a apresentação

de trabalhos originais que contribuam para o progresso nos campos da

Biologia e da Medicina, elaborados por especialistas nacionais e estran¬

geiros que se enquadrem no Regulamento dos Trabalhos.

2. REGULAMENTO DOS TRABALHOS

2.1 Normas gerais

2.1.1 Os trabalhos devem ser inéditos e destinar-se exclusivamente

à revista “MEMÓRIAS DO INSTITUTO BUTANTAN”.

Os artigos de revisão serão publicados a convite da Comissão Editorial.

2.1.2 Estrutura do trabalho

2.1.2.1 Elementos 'preliminares

a) cabeçalho — titulo do trabalho e nome do autor(es);

b) filiação científica e endereço para correspondência.

2.1.2.2 Texto

Sempre que possível deve obedecer à forma convencional do artigo

científico:

a) Introdução — Estabelecer com clareza o objetivo do trabalho

relacionando-o com outros do mesmo campo e apresentando de forma

sucinta a situação que se encontra o problema investigado. Extensas

revisões de literatura devem ser substituídas por referências aos traba¬

lhos mais recentes, onde tais revisões tenham sido apresentadas.

b) Material e métodos — A descrição dos métodos usados deve limi¬

tar-se ao suficiente para possibilitar ao leitor a perfeita compreensão e

repetição dos métodos; as técnicas já descritas em outros trabalhos devem

ser referidas somente por citação, a menos que tenham sido consideravel¬

mente modificadas.

SciELO

0 11 12 13 14 15 16

c) Resultados — Devem ser apresentados com clareza e, sempre que

necessário, acompanhados de tabelas e material ilustrativo adequado.

d) Discussão — Deve restringir-se à apresentação dos dados obti¬

dos e dos resultados alcançados, relacionando-se novas contribuições aos

conhecimentos anteriores. Evitar hipóteses ou generalizações não baseadas

nos resultados do trabalho.

e) Conclusões — Devem ser fundamentadas no texto.

Dependendo do assunto do artigo, as divisões acima poderão ser modi¬

ficadas de acordo com o esquema do trabalho, porém, o artigo deve conter

obrigatoriamente:

— Introdução;

— Desenvolvimento do tema (com as divisões a critério do autor);

— Conclusão.

2.1.2.3 Agradecimentos

Devem ser mencionados antes das referências bibliográficas.

2.1.2.4 Material de Referência

Todo trabalho deve vir obrigatoriamente acompanhado de:

a) Resumos — Um no mesmo idioma do texto, outro em inglês,

redigidos pelo(s) próprio (s) autor (es), devendo expressar o conteúdo

do artigo, salientando os elementos novos e indicando sua importância.

O resumo na língua em que está redigido o trabalho deve ser colocado

antes do texto e o em inglês, no final. Só excepcionalmente excederá a

200 palavras. Os títulos dos trabalhos devem ser traduzidos para o inglês

e vice-versa.

b) Palavras-chave — Correspondendo a palavras ou expressões que

identifiquem o conteúdo, devem ser em número necessário para a completa

descrição do assunto e assinaladas com asteriscos (*) as 3 palavras-chave

principais. Para escolha das palavras-chave usar o vocabulário protótipo

do campo especializado.

c) Referências bibliográficas — Devem ser incluídas no texto e

arranjadas em ordem alfabética do sobrenome do autor, numeradas conse¬

cutivamente.

Periódico:

MACHADO, J. C. & SILVEIRA F.°, J. F. Obtenção experimental

da pancreatite hemorrágica aguda no cão por veneno escorpiônico. Mem.

Inst. Butantan, JfO/Jtl :l-9, 1976/77.

Livro:

BIER, O. Bacteriologia e imunologia. 18 ed. São Paulo, Melho¬

ramentos, 1977.

As citações no texto devem ser em números-índice correspondendo às

respectivas referências bibliográficas.

Exemplos:

As investigações sobre a fauna flebotomínica no Estado de São Paulo,

foram feitas em várias ocasiões 1, 3, 4,. método

derivado de simplificação de armadilha de Disney ^ (1968)...

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Referências hibliográficas (correspondentes aos números-índice).

1. BARRETO, M. P. Observações sobre a biologia em condições na¬

turais dos flebótomos do Estado de São Paulo (Diptera, Psycho-

didae). São Paulo, 1943 (Tese — Doutoramento — Faculdade

de Medicina da Universidade de São Paulo).

2. DISNEY, R. H. L. Observations on a zoonosis: leishmaniosis in

British Honduras. J. app. Ecol., 5:1-19, 1968.

3. FORATTINI, O. P. Algumas observações sobre a biologia dos

Flebótomos (Diptera, Psychodidae) em região da bacia do Rio

Paraná (Brasil). Arq. Fac. Hig. S. Paulo, 5:15-136, 1954.

3. NORMAS PARA APRESENTAÇÃO DOS ORIGINAIS

3.1 Datilografia

Os originais devem ser datilografados em 3 (três) vias, com espaço

duplo, em uma só face, mantendo as margens laterais com aproximada¬

mente 3 cm. Todas as páginas devem ser numeradas consecutivamente,

com algarismos arábicos, no canto superior direito.

3.2 Tabelas

Devem ser numeradas consecutivamente com algarismos arábicos e

encabeçadas pelo seu título. Os dados apresentados em tabelas não devem

ser, em geral, repetidos em gráficos. As notas de rodapé das tabelas

devem ser restritas ao máximo possível e referidas por asteriscos.

3.3 Ilustrações

3.3.1 Desenhos e gráficos

3.3.1.1 Devem ser feitos com tinta nanquim preta, em papel

Schoeller Hammer 3G e 4G. Não usar papel vegetal porque este retrai

com 0 calor e abranda com o frio, e o nanquim tende a ficar mais falhado,

devido à porosidade do papel vegetal. Na impressão as ilustrações tendem

a ter ligeira deformidade e traços levemente acinzentados, sobretudo os

gráficos saem totalmente fora de esquadro.

3.3.1.2 O tamanho, quando ocupar página inteira, deve seguir rigo¬

rosamente estas medidas 12,6 x 19,8 cm ou 16,8 x 26,3 cm ou 21 x 33 cm

ou 25,2 X 39,6 cm, pois em geral as gráficas com as quais nós trabalhamos,

têm um determinado tamanho de letra e as ilustrações precisam ser pro¬

porcionais a estes tamanhos existentes. Para uma boa reprodução, não

precisa ser maior, pois sendo maior perde muitos detalhes na redução.

3.3.1.3 Aplicar cola no verso do desenho ou do gráfico só na mar¬

gem superior, numa faixa de aproximadamente 1 cm e colar sobre um

cartão um pouco maior.

3.3.1.4 Para melhor proteção, cobrir com papel vegetal de compri¬

mento um pouco maior, de maneira a poder ser dobrado para trás na

parte superior e colado.

3.3.2 Fotografias

3.3.2.1 Devem ser bem nítidas e contrastadas, pois fotos muito

acinzentadas dão péssima impressão.

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3.3.2.2 Devem vir soltas dentro de um envelope.

3.3.2.3 Devem ser entregues inteiras e não recortadas, em papel

fotográfico liso. 0 papel fotográfico crespo (martelado) dá péssima

reprodução.

3.3.2.4 0 tamanho é muito importante. Uma foto para ganhar

mais qualidade na impressão necessita sempre sofrer redução. Portanto,

mandem fotos sempre de tamanho maior do que o que vai ser impresso.

Ex.: para página inteira fotos 18 x 24 cm, para meia página fotos 18 x

12 cm.

3.3.2.5 Colocar um papel vegetal em cima da foto que tiver qual¬

quer anotação a ser feita, ou simplesmente para limitar a parte importante

a ser usada. Tomar muito cuidado para não pressionar o lápis ou caneta,

a fim de não marcar a foto. Não colocar letras ou números sobre as fotos.

3.3.3 Os textos e números que completam os desenhos, gráficos e

fotos devem ser feitos em manuscrito legível ou datilografado (os alga¬

rismos sempre em arábicos) direto sobre o papel vegetal que foi colocado

para proteção (não pressionar a fim de não marcar as ilustrações) ou

em papel branco e colocado no papel vegetal, pois os textos e números

serão feitos em tipos gráficos.

3.3.4 A numeração dos desenhos, gráficos e fotos será feita com

algarismos arábicos na parte inferior do papel vegetal, não importando

se é foto, desenho ou gráfico. Seguir sempre com uma numeração só.

Ex.: Um trabalho que tenha 2 fotos, 1 gráfico e 1 desenho seguem com

a numeração (fig. 1), (fig. 2), (fig. 3), e (fig. 4), se as 2 fotos vão

numa página só, colocar na parte inferior (figs. 1 e 2) e determinar em

cima da foto (no papel vegetal) qual é (fig. 1) e qual é (fig. 2). Quanto

aos demais elementos necessários à identiúcação das ilustrações (nome

do autor e título do trabalho) devem ser escritos atrás do cartão em que

as mesmas estiverem colocadas.

3.3.5 As legendas devem ser apresentadas à parte em folhas datilo¬

grafadas, constando a numeração correspondente à ilustração. Ex.: Fig. 1

— Legenda,

A Revista admite até 6 clichês (branco e preto) no texto, para cada

trabalho, devendo os demais serem pagos pelo autor. Para clichês colori¬

dos deverá haver prévia combinação entre a Comissão Editorial e o autor.

De cada trabalho serão impressas 100 (cem) separatas, devendo o

autor pagar as separatas que excedam a esse número, quando solicitar

uma quantidade maior. As separatas em excesso devem ser solicitadas

quando o manuscrito for encaminhado à Comissão Editorial.

Os trabalhos poderão ser redigidos, além da língua portuguesa, em

inglês, francês e espanhol. Outras línguas ficarão a critério da Comissão

Editorial.

A reprodução total ou parcial dos trabalhos em outros periódicos —

com menção obrigatória da fonte — dependerá de autorização prévia da

Comissão Editorial.

Para fins comerciais serão proibidas a tradução e reprodução dos

trabalhos publicados pela revista.

SciELO

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Mem. Inat. Butanian

1980/81

SUMÁRIO/SUMMARY

HOMENAGEM/HOMAGE

Linda Nahas . 1-2

EDITORIAL

1981. Ano do 80.° aniversário do Instituto Butantan.

1981. Year of the eightieth anniversary of the Instituto Butantan.

Jesus Carlos MACHADO . 3-10

CRONOLOGIA DO INSTITUTO BUTANTAN (1888-1981) — 1.^ Parte.

CRONOLOGY OF THE INSTITUTO BUTANTAN (1888-1981) — 1“ Part.

Jandira Lopes de OLIVEIRA . 11-79

ARTIGOS ORIGINAIS/ORIGINAL ARTICLES

1 Notes on micro and ultrastructure of “Oberháutschen” in Viperoidea.

Notas sobre micro e ultra-estrutura de “Oberháutschen” em Viperoidea.

A.R. HOGE & S. Alma ROMANO HOGE . 81-118

2 Absence of E-Rosette-Positive cases in a series of 17 children with acute

lymphoid leukemia from São Paulo, Brazil.

Ausência de E-Rosette-Positivo em casos de 17 crianças com leucemia

linfóide aguda, de São Paulo, Brasil.

L. DENARO-MACHADO; J. C. MACHADO; A. G. AMARAL; M. I.

ESTE VES; A. BIANCHI & M. L. D’ANDREA . 119-126

3 Neoformação de linfonodos e aspectos morfológicos confundíveis com a

assim chamada degeneração gordurosa ou lipomatose dessas estruturas.

Neoformation of lymphonodes and morphological aspects, confusable with

the so called adipous degeneration or lipomatous of these struetures.

Jesus Carlos MACHADO; André L. Carmo GASPARINI & Tereza

Cristina MACHADO . 127-131

4 Findings of pathological anatomy in mammals from the “Fundação Parque

Zoológico de São Paulo” in 1971.

Resultados do estudo anátomo-patológico em mamíferos da “Fundação

Parque Zoológico de São Paulo” em 1971.

Hélio Emerson BELLUOMINI; Lilian de Stefani Munaó DINIZ &

Adayr Mafuz SALIBA . 133-152

5 Sobre a posição sistemática de Trasyphoberus parvüarsis Simon, 1903

(Araneae, Theraphosidae).

On the systematic position of Trasyphoberus parvitarsis Simon, 1903

(Araneae, Theraphosidae).

Sylvia LUCAS . 153-156

6 Descrição de gênero e espécie novos da subfamília Theraphosinae (Ara¬

neae, Orthognatha, Theraphosidae).

SciELO

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Description of a new genus and species of the Theraphosinae subfamily

(Araneae, Orthognatha, Theraphosidae).

Sylvia LUCAS .

7 Aranhas do gênero Ctenus coletadas na foz do rio Culuene, Xingu: des¬

crição de uma espécie nova e redescrição de Ctenus villasboasi Mello-

-Leitão (Araneae; Ctenidae).

Spiders of the genus Ctenus collected at the confluence of the Culuene

and Xingu rivers: description of a new species and redescription of

Ctenus villasboasi Mello-Leitão (Araneae; Ctenidae).

Vera Regina D. von EICKSTEDT .

8 Redescrição de Ctenus similis, Ctenus albofasciatus e Ctenus minor

(Araneae; Ctenidae).

Redescription of Ctenus similis, Ctenus albofasciatus and Ctenus minor

(Araneae; Ctenidae).

Vera Regina D. von EICKSTEDT .

9 A propósito da indicação de um neótipo para Tityus serrulatus Lutz e

Mello, 1922 (Scorpiones; Buthidae).

About the indication of a neotype for Tityus serrulatus Lutz e Mello,

1922 (Scorpiones; Buthidae).

Wilson R. LOURENÇO & Vera Regina D. von EICKSTEDT .

10 Produtos naturais biologicamente ativos de animais marinhos.

Comunicação química e aspectos farmacológicos.

Natural products biologically actives from marine animais.

Chemical communication and pharmacological aspects.

José Carlos de FREITAS .

11 Acute necrotic myelopatia after spider bite.

Mielopatia necrótica aguda após picada de aranha.

Paulo E. MARCHIORI; Milberto SCAFF; José Paulo S. NÓBREGA;

Sérgio ROSENBERG & José Lamartine de ASSIS.

12 Sobre a identificação das espécies de Porocephalus (Pentastomida) que

ocorrem em ofídios da América Tropical.

About the Identification of the species of Porocephalus (Pentastomida)

collected from ophidians of the Tropical America.

A. Arandas REGO .

13 Notas sobre alguns pentastomídeos de répteis.

Notes about some pentastomides from reptilia.

A. Arandas REGO .

14 Encontro de plerocercos de Trypanorhyncha (Cestoda) em ofidio de rio

da América do Sul.

Finding of plerocercus of Trypanorhyncha (Cestoda) in ophidian from

river of South America.

A. Arandas REGO .

15 Efeitos sobre a toxicidade da mistura de venenos e a sobrevida de

exemplares de Crotalus durissus terrificus e Crotalus durissus colU-

lineatus, submetidas às extrações manual e elétrica.

Effects on the toxicity of the venoms mixture and the survival rate of

specimens of Crotalus durissus terrificus and Crotalus durissus

collilineatus submitted to manual and electric extractions.

Raymundo ROLIM ROSA; Hélio Emerson BELLUOMINI; Medardo

SILES VILLARROEL & Hideyo IIZUKA .

16 Produção de soro antiaracnídico polivalente mediante inoculações simul¬

tâneas de venenos em um mesmo animal.

Production of polyvalent antiarachnid serum by simultaneous inocula-

tion of venoms in one and the same animal.

Raymundo ROLIM ROSA; Medardo SILES VILLARROEL; Eliza¬

bete Gomes Jardim VIEIRA; Hideyo IIZUKA & José NAVAS .

1 SciELO

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191-211

213-218

219-231

233-238

239-243

245-251

253-258

14 15

17 Análise comparativa entre os diferentes esquemas de hiperimunização

empregados na produção de soros antiofídicos pelo Instituto Butantan

(1967-1979).

Comparative analysis between the different methods of hyperimmuni-

zation employed for the production of antiophidic serum by the

Instituto Butantan (1957-1979).

Raymundo ROLIM ROSA; Elizabete Gomes Jardim VIEIRA; Medardo

SILES VILLARROEL; Yara Queiroga SIRACUSA & Hideyo IIZUKA 259-270

18 Verificação da atividade tóxica de venenos crotálicos e da capacidade

neutralizante dos antivenenos específicos, em camundongos.

Verification of the toxic activity of crotalic venoms and of the neutra-

lizing capacity of specific antivenins, in mice.

Medardo SILES VILLARROEL; Raymundo ROLIM ROSA; Flávio

ZELANTE; Walter BANCHER & Helena Maria PIOTO . 271-279

19 Possibilidade da determinação da toxicidade do veneno de Lachesis

muta muta e da titulação do antiveneno específico, em camundongos.

Possibility of the determination of the toxicity of Lachesis muta muta

venom as well as for the titration of specific antivenins, in mice.

Medardo SILES VILLARROEL; Flávio ZELANTE; Raymundo

ROLIM ROSA & José Luiz DE LORENZO . 281-288

20 Perspectivas de padronização das titulações de venenos e antivenenos

elapídicos, em camundongos.

Perspectives of standardization of titrations of elapidic venoms and

antivenins, in mice.

Medardo SILLES VILLARROEL; Raymundo ROLIM ROSA; Flávio

ZELANTE & Elizabete Gomes Jardim VIEIRA . 289-297

21 Emprego de camundongos na titulação de venenos e antivenenos escor-

piônicos.

Use of mice for titration of scorpion venoms and antivenins.

Elizabete Gomes Jardim VIEIRA; Medardo SILES VILLARROEL;

Flávio ZELANTE; Sheila da Costa ÁVILA & Raymundo ROLIM

ROSA . 299-306

22 Emprego simultâneo de antígenos botulínicos tipos A e B, em um mesmo

animal, para obtenção de antitoxina bivalente.

Simultaneous use of A and B botulinic antigens, in the same animal, to

obtain bivalent antitoxin.

Edison Paulo Tavares de OLIVEIRA; Hideyo IIZUKA; Hisako Gondo

HIGASHI; Maria Antonieta da SILVA & Raymundo ROLIM ROSA 307-316

23 As Bases de Mannich de hidantoinas terpênicas. II.

The Mannich Bases of terpenic hydantoins. II.

Ema RABENHORST & Raymond ZELNIK . 317-323

24 Aperfeiçoamento do processo de hiperimunização antitetânica visando a

obtenção de antitoxina de alta dosagem (Anotações de Relatórios de

Serviço).

Perfection of the antitetanic hyperimmunization process to obtain

antitoxin with high dosage (Notations of Service Report).

Sebastião de Camargo CALAZANS & Reynaldo S. FURLANETTO 326-334

25 Relações entre o emprego de anatoxina diftérica bruta e o teste de

Schick em cavalos hiperimunizados.

Relations between the use of crude diphteria anatoxin and Schick test

in hyperimmunization horses.

Joana Akiko FURUTA; Célia LIBERMAN; Edison Paulo Tavares

de OLIVEIRA; Frederico Fontoura LEINZ; Hideyo IIZUKA &

Raymundo ROLIM ROSA .

26 Bionomia dos triatomíneos — O surgimento de adultos nas colônias de

Panstrongylus megistus (Burm, 1835) (Hemiptera, Reduviidae).

Bionomy of triatomine bugs — The appearance of adults in the

Panstrongylus megistus colonies (Burm, 1836) (Hemiptera; Redu¬

viidae).

Therezinha J. HEITZMANN-FONTENELLE .

335-341

343-353

SciELO

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27 Contribuição para o conhecimento dos Triatominae — Hemiptera, Redu-

viidae. I — Triatoma melanocephala Neiva & Pinto, 1923.

Contribution to knowledge of the Triatominae — Hemiptera, Reduviidae.

I — Triatoma melanocephala Neiva & Pinto, 1923.

Rosa Maria de Oliveira VEIGA; Hypolito Lima BORBA; Lauro

Pereira TRAVASSOS FILHO; James E. DOBBIN JR. 355-365

28 Contribuição para o conhecimento das lagartas urticantes. I — Cero-

dirphia avenata araguensis Lemaire, 1971. (Lep. Attacidae).

Contribution to knowledge of the urticating Caterpillar. I — Cerodirphia

avenata araguensis Lemaire, 1971. (Lep. Attacidae).

Roberto Henrique Pinto MORAES & Lauro Pereira TRAVASSOS

FILHO . 367-376

29 Ácaros ectoparasitas de serpentes Descrição de Ophioptes longipilis sp.n.

e Ophioptes brevilis sp.n. (Trombidiformes, Ophioptidae).

Ectoparasites mites from snakes. Description of Ophioptes longipilis sp.n.

and Ophioptes brevilis sp.n. (Trombidiformes, Ophioptidae).

Nélida M. LIZASO . 377-381

30 Gyrinicola chabandi nsp. (Nematoda, Pharyngodonidae), oxiurideo encon¬

trado em girinos.

Gyrinicola chabavdi n.sp. (Nematoda, Pharyngodonidae) pinworm speci-

mens collected from tadpoles.

Paulo ARAÜJO & Paulo de Toledo ARTIGAS . 383-390

31 Observações do comportamento e da cópula heteróloga de sucuris em

cativeiro — Eunectes murinus murinus (Linnaeus) e Eunectes

Notaeiis Cope, 1862.

Observations on the behaviour, and heterologous mating of anacondas —

Eunectes murinus murinus (Linnaeus), and Eunectes Notaeus Cope,

1862.

Tatiana VEINERT & Hélio Emerson BELLUOMINI . 391-402

32 Accidentes humanos por las serpientes de los generos Bothrops y Lachesis.

Human accidents by snakes of Bothrops and Lachesis genus.

Juan Silva HAAD . 403-423

33 Compléments à la description du Scorpion brésilien Opisthacanthus

cayaporum Vellard, 1932 (Scorpiones; Scorpionidae).

Complementação à descrição do escorpião brasileiro Opisthacanthus

cayaporum Vellard, 1932 (Scorpiones; Scorpionidae).

Wilson R. LOURENÇO . 425-438

34 The withanolides as a model in plant geneties: chemistry, biosynthesis and

biological activity.

Os withanolídeos como modelo na fitogenética: química, biossíntese e

atividade biológica.

David LAVIE . 439-450

35 Studies of Brazilian marine invertebrates. IX. Comparative study of

Zoanthid sterols. I. The genus Zoanthus.

Estudos de invertebrados marinhos brasileiros. IX. Estudo comparativo de

esteróis de zoantídeos. I. O gênero Zoanthus.

A. KELECOM & A.M. SOLÉ CAVA . 451-462

ÍNDICE DE AUTOR/AUTHOR INDEX . 463-464

ÍNDICE DE ASSUNTO . 465-470

SUBJECT INDEX . 471-476

SciELO

10 11 12 13 14 15 16

Mem. Inst. Butantan

-íV-45. 1980/81

LINDA NAHAS

1921-1982

HOMENAGEM

Linda Nahas, médica, formada em 1946 pela Escola Paulista de Me¬

dicina e Pesquisadora-Científica Nível VI, do Instituto Butantan. Nasceu

em São Paulo, aos 10 de fevereiro de 1921 e faleceu em l.° de março de

1982 em São Paulo.

De 1946 a 1948 estagiou no laboratório de Hematologia do Instituto

Butantan, sob orientação do Dr. Gastão Rosenfeld.

Em 1947 e 48 foi Assistente da Clínica Médica (EPM), Serviço do

Prof. Octávio de Carvalho. Em 1948 iniciou suas atividades oficiais no

Laboratório de Hematologia do Instituto Butantan, no qual era estagiária.

De 1948 a 1953 foi titular do Serviço de Hematologia do Hospital A. C.

Camargo da atual Fundação Antonio Prudente. De 1954 a 1960 chefiou

0 Laboratório de Citopatologia e Hematologia do Departamento de Pato¬

logia, do mesmo Hospital.

Foi bolsista em 1962 e 1963 na Blood Coagulation research Unit,

Serviço do Prof. Mac Farlane (Oxford, Inglaterra) e Departamento de

Fisiologia e Farmacologia da Wayne State University (Detroit EUA)

Serviço do Prof. W. H. Seegers.

De 1962 a 1966 foi encarregada do Setor de Hematologia da Seção

de Fisiopatologia do Instituto Butantan.

Em 1966 assumiu a chefia da Seção de Fisiopatologia. Colaborou

intensamente com as atividades do Hospital Vital Brazil desde 1954. Em

1969, assumiu a Diretoria do Serviço de Fisiopatologia função que ocupou

até a sua morte.

Em 1977, integrou a Carreira de Pesquisador Científico Nível VI.

Em 1970, no mês de outubro estagiou no Oxford Haemophilia Centre

(Inglaterra), a convite da Dra. R. Biggs.

Participou intensamente nas atividades científicas e de organização

de numerosos Congressos e Sociedades científicas. Escreveu ou colaborou

em 22 trabalhos científicos originais publicados em revistas especializadas

2 3

MACHADO, J.C. Homenagem. Linda Nahas. Aícm. Insi. Dutantan, í4/^5:l-2, 1980/81.

do Brasil e do exterior sobre envenenamento de serpentes, aranhas, escor¬

piões e coagulopatias e foi co-autora de capítulo especializado no livro sobre

Atualização Terapêutica.

No Instituto Butantan pertenceu aos Conselhos de Pesquisa, de Pro¬

dução e bem como de várias Bancas examinadoras de ingresso de técnicos

superiores e grupos de trabalhos para estudos de natureza técnica.

Participou ainda na formação de numerosos especialistas em Hema¬

tologia principalmente no setor da Coagulação sangüínea onde se destacou

invulgarmente.

Sua valiosa coleção de livros especializados, foi doada ao Centro de

Investigação em Hematologia, sito à Av. Brasil, 633, São Paulo.

A Dra. Linda Nahas foi exemplo de dedicação à carreira médica e

de pesquisadora que muito enobreceu o Instituto Butantan.

SciELO

10 11 12 13 14 15 16

Mem. Inst. Butantan

U/45:2-10, 1980/81

EDITORIAL

1981. Ano do 80.° aniversário do Instituto Butantan

Jesus Carlos MACHADO

Decidiu a Comissão Editorial das “Memórias do Instituto Butantan”,

ressaltar neste número, as Comemorações de um evento marcante para a

história do Instituto Butantan, qual seja o seu 80.° aniversário, ocorrido

aos 23 de fevereiro de 1981.

O Diretor Substituto do Instituto Butantan, Dr. Bruno Soerensen

Cardozo — Presidente do Conselho Superior por designação deste, consti¬

tuiu uma Comissão organizadora, sob a sua presidência e composta por:

Dr. Jesus Carlos Machado, Dr. Alphonse Richard Hoge, Dr. Raymond

Zelnik, Dr. Henrique Moisés Canter e Dr. Murillo Adelino Soares.

A Comissão organizadora, aprovou o Calendário dos eventos que

foram desenvolvidos durante todo ano de 1981 e que foram os seguintes:

— 16 a 20 de fevereiro

IV Curso sobre Linfomas Malignos

Coordenador: Dr. Jesus Carlos Machado.

— 2S de fevereiro

Sessão Solene Comemorativa do 80.° aniversário da Fundação do

Instituto Butantan. Carimbo Postal comemorativo do dia da Fundação

do Instituto Butantan.

—■ 23 a 27 de fevereiro

I.° Encontro Brasileiro de Linfomas Malignos.

I.° Curso de Reciclagem de Linfomas Malignos.

IV “Tutorial” sobre Linfomas Malignos.

Coordenador: Dr. Jesus Carlos Machado.

— 20 a 21 de maio

Seminário sobre produtos naturais bioativos.

Coordenador: Dr. Raymond Zelnik.

SciELO

0 11 12 13 14

MACHADO, J. C. Editorial. 1981. Ano do 80.® aniversário do Instituto Butantan. Mem. Inst. Dutanian,

1980/81.

— 11 de junho

Entrega da restauração do l.° Laboratório do Instituto Butantan, nele

instalando-se o Museu Histórico.

Entrega da recém-instituída “Medalha Instituto Butantan”.

— 20 a 2Jf de julho

Retrospectiva de filmes de caráter histórico sobre o Instituto Butantan.

Coordenador: Dr. Henrique Moisés Canter.

— li de setembro

Cerimônia do Tombamento do Instituto Butantan.

— li a 16 de setembro

III Congresso Brasileiro de Bioteristas e Entidades Afins.

Presidente: Dr. Bruno Soerensen Cardozo.

— 12 a 23 de outubro

Curso sobre “Vacinas e Vacinações”

Coordenador: Dr. Bruno Soerensen Cardozo.

— 26 a 28 de outubro

I Congresso Brasileiro de Vacinas e Soros.

Presidente: Dr. Bruno Soerensen Cardozo.

— 27 de outubro

Inauguração do Centro de Convivência Infantil.

— 16 a 18 de novembro

I Simpósio sobre Serpentes e Artrópodes peçonhentos.

Coordenador: Dr. Alphonse Richard Hoge.

Os Congressos, Reuniões Científicas e Cursos contaram para o seu

grande êxito, com os auxílios inestimáveis do Conselho Nacional de Pes¬

quisas, do Ministério da Saúde (Divisão Nacional de Doenças Crônicas

e Degenerativas, através da Comissão Nacional de Linfomas Malignos e

CAIS), da OPAS e das diversas Secretarias de Estado do Governo do

Estado de São Paulo.

Cumpre destacar, dentre os eventos a entrega do Museu Histórico.

O Diretor do Instituto Butantan, constituiu uma Comissão especial para

estudo da localização e efetuar sua implantação. Vamos reproduzir o

assinalado no livreto entregue no dia da inauguração e que retrata melhor

o que foi idealizado e realizado:

APRESENTAÇÃO

Ao completar o Instituto Butantan, em 1981, 80 anos de existência,

dentro dos eventos programados para comemorar esta data, a inauguração

do MUSEU HISTÓRICO é um dos pontos altos.

A Diretoria do Instituto Butantan e a Comissão do Museu Histórico

decidiram instalar o Museu no primeiro laboratório onde Vital Brazil

iniciou rotineiramente seus trabalhos no Instituto Butantan, em 1901.

Inicialmente localizou-se o prédio, descobrindo-se seu piso original, alicerce

e uma das paredes e, por análise de fotografias e entrevistas com servi¬

dores da época, obteve-se a correta disposição do prédio e aspectos de seu

interior. Com a colaboração de arquiteto, foi dimensionado corretamente.

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MACHADO, J. C. Editorial. 1981. Ano do 80.® aniversário do Instituto Butantan. Mem. Itist. Butantan,

4-4/45:3-10, 1980/81.

Contratou-se especialistas em história e museologia para assessorar a

Comissão na instalação e planificação atual e futura do Museu.

A Comissão contou, na estruturação do Museu, com a colaboração

inestimável de servidores do Instituto Butantan, que nela se motivaram

até emocionalmente.

Ao entregar o Museu Histórico do Instituto Butantan ao público, a

Diretoria e a Comissão do Museu desejam mostrar, sobretudo aos jovens,

que neste prédio simples, adaptado de um telheiro e de uma cocheira.

Vital Brazil produziu o soro e a vacina antipestosa, pesquisou e produziu

soros antipeçonhentos, com isso salvando vidas e elevando o nome da

ciência brasileira.

Neste local iniciou o Instituto Butantan o seu caminho de aplicação

da ciência em prol da saúde pública, há 80 anos.

Em 1888, a criação do Instituto Pasteur, no Rio de Janeiro, repre¬

sentava o início, no Brasil, das pesquisas sistemáticas e aplicações práti¬

cas na área da medicina experimental voltada para a saúde pública.

A partir de 1892 eram criados, em São Paulo, o Instituto Bacterio¬

lógico, 0 Laboratório de Análises Químicas, o Instituto Vacinogênico, um

Laboratório Farmacêutico e o Desinfetório.

HISTÓRICO

Em 1899, surto de peste bubônica atingia a cidade de Santos; o

alastramento da doença, as dificuldades para importação de soros e vacinas

para seu tratamento e prevenção, bem como a falta de condições do

instituto Bacteriológico para produzi-los em suas dependências, traria à

tona a necessidade de criar-se instituição para combate de doenças epidê¬

micas na região de São Paulo.

Em decorrência desses fatores, por proposição de Emílio Ribas, dire¬

tor do Serviço Sanitário do Estado, foram tomadas as primeiras provi¬

dências para a criação do “Instituto Serumtherapico”, sendo indicado para

sua direção Vital Brazil Mineiro da Campanha, médico a serviço do

Instituto Bacteriológico.

O então Presidente do Governo do Estado, Cel. Fernando Prestes,

designou o Secretário do Interior, Pereira de Queiroz, para que, com

Oswaldo Cruz, Adolpho Lutz e Vital Brazil, escolhessem o local para a

instalação do novo instituto, mais tarde Instituto Butantan.

O local escolhido foi a Fazenda Butantan, na periferia da cidade,

cujas instalações foram adaptadas e aproveitadas. As atividades tiveram

início antes da organização oficial do Instituto, que se concretizaria pelo

Decreto 878/A, 23-2-1901.

Neste ambiente simples, que exigia grandes sacrifícios dos cientistas.

Vital Brazil e seus colegas de trabalho, entre os quais Abdon Petit Carneiro,

Dorival de Camargo Penteado, Bruno Rangel Pestana, Carlindo Valeriani,

Sérgio Meira F.®, Theodureto de Camargo, Francisco Iglesias e muitos

outros marcaram com seus esforços e trabalho cientifico a primeira fase

da história do Instituto Butantan.

SciELO

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MACHADO, J. C. Editorial. 1981. Ano do 80.® aniversário do Instituto Butantan. Mcm. Inst. Butantan,

44A5:3-10, 1980/81.

Dedicando-se sobretudo à produção de soro antipestoso, Vital Brazil

daria também prosseguimento às suas pesquisas sobre ofidismo.

Em 11 de junho de 1901, o Instituto Butantan entregava ao público

as primeiras partidas de soro antipestoso e a 14 de agosto do mesmo ano

os primeiros soros antipeçonhentos.

O MUSEU

O Museu, tal como chegou até nós, é instituição estruturada na

Europa renascentista, a partir das coleções dos grandes príncipes. Durante

o período expansionista europeu, o Museu foi usado sobretudo para mostrar

à sociedade européia “o novo”, ‘‘o exótico”, “o conquistado” além dos seus

limites territoriais.

É só nos fins do século XIX que estudiosos e especialistas em educação

passaram a ver o Museu não mais como um gabinete de relíquias mas sim

como importante instrumento do processo educacional e da pesquisa

científica.

O MUSEU HISTÓRICO do Instituto Butantan propõe-se a ser, através

de exposições sempre renovadas a partir de pesquisa sobre seu acervo

material e documental, o espelho da trajetória da instituição, desde a sua

criação até nossos dias. Não uma sala estanque de um passado recapturado

mas sim importante auxiliar para a compreensão dos caminhos da própria

atividade científica.

O Instituto Butantan expressa vivos agradecimentos aos servidores

que contribuíram no restauro do primeiro laboratório, na recuperação de

peças e documentos históricos e outras atividades para a abertura do

Museu:

Francisco Capuano, Joaquim Bento da Silva, Francisco Corrêa, Sal¬

vador M. Simões, Luiz de Souza, Rodrigo Gil Garcia F.®, Oswaldo Cândido,

Milton L. Gonçalves, Francisco P. Belém, Ernesto Gimenez, Ernani da

Silva, Milton A. Chagas, Alcides B. dos Santos, Nelson A. de Souza,

Waldemar A. de Almeida, Lúcio A. Catani, Joel Braga, Juvenal E. da

Silva, José F. Martins, José Felix Irmão, J. Vicente Fernandes, J. Esteves

dos Santos, Antonio Fraia, Milton P. da Silva, Antonio Cortez, Oscar S.

do Nascimento, Paulo Villela, Antonio B. de Novais, João M. de Godói,

Carlos A. Tobias, César F. Figueira, Antonio Ferreira, Benedito A. de

Oliveira, José Viter Ribeiro, J. Augusto da Silva, João Lacerda dos Santos,

Arlindo A. de Matos, Manoel Rocha, João C. de Morais, Benedito A. da

Silva, Luiz C. Prudente, Antonio Jesuino, Arcênio B. de Araújo, Antonio

R. Barbosa, Domingos B. de Araújo, Nicolau G. de Lima, Daniel A. Maciel,

Januário F. de Andrade, J. Eugênio Máximo, Júlio A. de Azevedo, José

da Conceição, Mauro L. de Jesus, Benedito J. dos Santos, Domingos

A. Ferreira, Eduardo Conceição, Idalício N. de Melo, João I. Gonzalez,

Santo Coelho, Osvaldo Pinto, Israel S. Garcia, Francisco Braga, Juracy

A. Chagas, Antonio C. Ribeiro, José F. de Souza, Joel B. de Novais,

Irineu Batista, Antonio F. Souza, Orlando Vaine, Lázaro A. de Moraes,

Benedito A. de Oliveira, Benedito T. da Silva, Gabriel A. Pinto, Silvio D.

de Oliveira, Miguel A. M. Alba, Romeu Simões, Odavilson de Oliveira,

Valdelino N. de Souza, Antoninho de Souza, Eliseu Tobias, Floriano da

SciELO

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machado, J. C. Editorial. 1981.

U/iS-.i-\ü, 1980/81.

Ano do 80.° aniversário do Instituto líutantan. Mcm. hist. Butantan,

Rosa, Reinaldo Ramos, J. Carlos Barlleta, Wagner da Rocha, J. Cassiano

Borba, Hei’val J. Ribeiro, Taufic A. Aued.

Na inauguração foi descerrada a placa comemorativa onde está ins¬

crita: Museu Histórico do Instituto Butantan — 1901-1981 (Octogésimo

aniversário). Instalado no Laboratório que deu origem aos trabalhos técni¬

cos do Instituto. Eng.° Paulo Salim Maluf (Governador do Estado de São

Paulo) ; Dr. Adib Domingos Jatene (Secretário da Saúde) ; Dr. Bruno

Soerensen Cardozo (Diretor Substituto do Instituto Butantan) ; Comissão

do Museu Histórico: Presidente — Dr. Jesus Carlos Machado; Membros —

Dr. Alphonse Richard Hoge, Dr. Newton Pereira Santos, Dr. Henrique

Moisés Canter, Iara d’01iveira Lemenhe, Carmem Aleixo Nascimento.

Restaurado pela equipe de funcionários e servidores do Instituto Butantan

orientado pelo arquiteto Osmar Antonio Mamini e chefiado por Francisco

Capuano, chefe da Seção de Zeladoria. Inaugurado aos 11 de junho de

1981.

Aos 11 de junho de 1981 foi também entregue a Medalha Instituto

Butantan, de caráter permanente, pelo Governo do Estado de São Paulo

a personalidades e entidades que cooperam com o Instituto Butantan, bem

como a Servidores do Instituto que se destacaram nas suas atividades.

Foram os seguintes aqueles que meritoriamente a receberam por aprova¬

ção unânime do Conselho Superior do Instituto Butantan:

— Dr. Fauze Carlos

Diretor Efetivo do Instituto Butantan

Deputado Estadual — Líder do PDS

— Dr. Antonio Henrique Bittencourt da Cunha Bueno

Secretário da Cultura

— Dr. Leonildo A. Winter

Presidente da Central de Medicamentos

— Alm. Gerson de Sá Pinto Coutinho

Ex-Presidente da Central de Medicamentos

— Dra. Jandyra Planet do Amaral

Ex-Diretora do Instituto Butantan

— Dr. Giuseppe Mauro

Diretor Presidente do Instituto Vital Brazil

— Dr. Roched Abib Seba

Diretor Científico do Instituto Vital Brazil

— Dl'. René Corrêa

Ex-Diretor do Serviço de Virologia do Instituto Butantan

— Dr. Oswaldo Vital Brazil

Professor da Universidade de Campinas

■— Dr. Alphonse Richard Hoge

Diretor da Divisão de Biologia do Instituto Butantan

— UNIVERSIDADE DE SÃO PAULO

representada pelo Sr. Reitor Dr. Waldyr Muniz Oliva

—- CENTRAL DE MEDICAMENTOS

representada pelo Dr. Alex Castaldi Romera

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MACHADO, J. C. Editorial. 1981. Ano do 80.® aniversário do Instituto Dutantan. Aícm. Inst. Butantan,

44/45:3-10, 1980/81.

Museu Histórico: Vista interna da parte anterior correspondente ao laboratório.

Museu Histórico: Vista interna da parte posterior correspondente às cocheiras.

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MACHADO, J. C. Editorial. 1981. Ano do 80.° aniversário do Instituto Butantan. Mem. Inst. Butantan,

U/^5:Z-10, 1980/81.

Museu Histórico: Vista lateral do museu

Butantan.

restaurado e instalado no primeiro laboratório do Instituto

— FINANCIADORA DE ESTUDOS E PROJETOS

representada pelo Sr. Maurício Walter Susterás

— FUNDO DE AMPARO À PESQUISA DO ESTADO DE SÃO PAULO

representado pelo Sr. Diretor Científico Dr. Ruy Carlos de Camargo

Vieira

— CONSELHO NACIONAL DE DESENVOLVIMENTO CIENTÍFICO

E TECNOLÓGICO

repi-esentado pelo Sr. Presidente Dr. Lynaldo Cavalcanti de

Albuquerque

— MINISTÉRIO DO EXÉRCITO — COMANDO DO II EXÉRCITO

representado pelo Sr. Chefe do Estado-Maior, General-de-Brigada Léo

Guedes Etchegoyen

— MINISTÉRIO DA AERONÁUTICA — IV COMANDO AÉREO

REGIONAL

representado pelo Sr. Comandante Brigadeiro-do-ar João Alberto

Correia Neves

— MINISTÉRIO DA MARINHA — COMISSÃO NAVAL EM SÃO

PAULO

representado pelo Sr. Presidente Contra-Almirante Milton Ribeiro de

Carvalho

SciELO

MACHADO, J. C. Editorial. 1981. Ano do 80.° aniversário do Instituto Butantan. Mem. Inst. Dutantan,

U/i5:ZA0, 1980/81.

— POLÍCIA MILITAR DO ESTADO DE SÃO PAULO

representado pelo Tenente-Coronel Antonio Augusto Neves —

Comandante do 16.° Batalhão Policial Militar

Funcionários do Instituto Butantan

— Sr. Antonio Moreno

— Sr. Jurandyr Soares de Oliveira

— Sr. José Caly

— Sr. Juvenal Bueno Filho

— Sr. Samuel Helfstein Fischer

— Sr. João Domingos Cavalheiro

— Sr. Pedro Vilela

— Sr. Joaquim Cavalheiro

— Sr. Benedito Moreira da Silva

— Sr. Jairo Mendes de Souza

Como se pode observar o 80.° aniversário da Fundação do Instituto

Butantan foi condignamente comemorado através de eventos científicos,

culturais e principalmente com a recuperação da sua memória histórica

representada pela restauração do Museu Histórico, do encontro de cerca

de 400 metros lineares de documentação e contratação de dois historiadores

para aproveitamento desse material. Com isso a história do Instituto

Butantan, instituto pioneiro na implantação da medicina experimental no

Brasil, junto a outros que infelizmente foram pouco a pouco desapare¬

cendo ou sendo desfigurados, poderá ser escrita com fidelidade.

SciELO

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Mem. Inat. Butantan

U/45:1U79, 1980/81

CRONOLOGIA DO INSTITUTO BUTANTAN (1888-1981)

l.a PARTE: 1888-1945

Jandira Lopes de OLIVEIRA *

Da relevância do pioneirismo do Instituto Butantan na implantação

das ciências experimentais em São Paulo e a existência de importante

acervo: manuscritos de Vital Brazil, relatórios de atividades do Instituto,

instrumentos de laboratório, fotografias etc. foram iniciados os trabalhos

para a implantação do Museu Histórico, instalado no primitivo laboratório

de Vital Brazil, reconstruído a partir das paredes originais.

O Museu Histórico, inaugurado em 11-6-1981, pretende em suas ativi¬

dades refletir a trajetória do Instituto, desde sua fundação no final do

século passado, e para tanto se faz necessário o trabalho sistemático de

pesquisas do material documental existente.

Apresentamos agora nosso trabalho inicial, com a realização da cro¬

nologia, feita a partir de pesquisas nos relatórios anuais do Instituto.

O presente trabalho consiste no primeiro passo para a elaboração da

história do Instituto Butantan, seu papel no desenvolvimento das ciências

no Brasil e sua inserção na história de São Paulo.

SÉCULO XIX

1888

— Criação do Instituto Pasteur no Rio de Janeiro, marco inicial da

Medicina Experimental no Brasil.

1890

— Criação da Farmácia do Estado.

1891

— Organização do Serviço Sanitário do Estado.

1892

— Lei Estadual n.° 43, de 18-7-1892, criava o Laboratório Bacterio¬

lógico de São Paulo, o Laboratório de Análises Químicas.

* Museu Histórico do Instituto Butantan.

SciELO

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OLIVEIRA, J. L. Cronologia do Instituto Butantan (1888-1981) 1.* Parte. A/cm. Inst. Butantan, 44/45:

11-79, 1980-81.

1893

— Decreto n.° 94, de 28-2-1893 regulamentava o início das atividades

do Bacteriológico, sob a orientação do Biólogo francês Felix Le Dantec.

— Adolfo Lutz assumiu a direção do Instituto Bacteriológico.

— Surto epidêmico de cólera na Hospedaria dos Imigrantes foi iden¬

tificado por Adolfo Lutz.

1894

— Criação do Instituto Vacinogênico para preparar vacina jenne-

riana; diretor Arnaldo Vieira de Carvalho.

1895

— Epidemia de cólera no Vale do Paraíba.

1897

— Vital Brazil Mineiro da Campanha ingressava como ajudante no

Instituto Bacteriológico.

1898

— Adolfo Lutz identificava o “anopheles” (Kertzia cruzi) agente

transmissor da malária na Serra de Cubatão.

1899

— Vital Brazil foi enviado a Santos para identificar e pesquisar

surto de peste bubônica.

— Adolfo Lutz requisitava material para instalação, nas dependên¬

cias da Chácara Butantan, deste novo laboratório do Instituto Bacterio¬

lógico e Vital Brazil Mineiro da Campanha foi indicado para dirigí-lo;

os trabalhos de laboratório foram iniciados a 16 de novembro.

1900

— A Chácara em Butantan possuía “200 e tantos alqueires de terras”,

2 casas de moradia, cocheiras, água canalizada e outras pequenas cons¬

truções, além de boas pastagens e canavial.

— Entre as obras necessárias para o pleno funcionamento do labo¬

ratório, foi solicitado o reaproveitamento de um telheiro para instalação

do l.° laboratório provisório; coelheiras, aproveitando as já existentes;

construção de gaiolas para cobras; adaptação de um antigo estábulo de

vacas para cocheiras de animais imunizados; construção de cocheira-en-

fermaria; construção de um telheiro para balança e para aparelho de

contensão; construção de pequeno pavilhão para sangria de animais;

construção de catacumbas impermeáveis para os animais infeccionados

mortos; aumento da rede de águas e esgotos; instalação de gás acetileno.

SÉCULO XX

1901

— O decreto 878/A de 23-2-1901 transformava o “laboratório em

Butantan” em instituição autônoma com o nome de “Instituto Serumthe-

rapico do Estado de São Paulo”. Além de Vital Brazil, o Instituto contava

com 0 seguinte pessoal;

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OLIVEIRA, J. L. Cronologia do Instituto Butantan (1888-1981) l.“ Parte. Mtm. Inat. Butantan,

11-79, 1980/81.

Dr. Abdon Petit Carneiro, ajudante; Horácio Damásio dos Santos,

administrador; João Gomide de Castro, escriturário; Tarcísio Magalhães,

auxiliar; Vitor Salcedo, João Salcedo, Victor dei Franco, André Bumos,

José Holi, Francisco Leone como serventes e mais 5 “camaradas” para

plantação de forragens e outros serviços.

— Em início de março foi entregue a cocheira-enfermaria construída

pelo engenheiro Augusto Fomm.

— O Instituto Serumtherapico entregava as primeiras partidas de

soro antipestoso em 11-6 e a 14-8 as primeiras de soro antipeçonhento.

— Vital Brazil solicitava a construção de uma casa para residência

do diretor em Butantan e também casas para os serventes. Gastava diaria¬

mente uma hora e meia de viagem de “troly” para vir ao trabalho.

— A vacina antipestosa de Maff Kines foi produzida tanto pelo pro¬

cesso primitivo como pelo do Professor Terni, sendo enviados para a

Diretoria do Serviço Sanitário 140 tubos de serum. Existiam 6 cavalos

para imunização. Em março começou à título de experiência, a imuni¬

zação em muar.

— Em Sorocaba, Santos e na Capital os resultados da aplicação do

serum fabricado em Butantan foram satisfatórios, sendo empregado

também em Campos (RJ).

— Foram preparados neste ano 1.636 tubos de serum antiofídico.

Por ocasião do início dos trabalhos em Butantan, Vital Brazil já havia

desenvolvido estudos sobre envenenamento ofídico e preparado pequenas

quantidades de serum para 2 espécies mais abundantes no nosso meio

(cascavéis e jararacas). Prosseguiu portanto seu trabalho, já em Butantan,

com a imunização de animais para o preparo do serum antibothropico

(jararaca) e anticrotálico (cascavel) e urutu; da mistura dos 2 seruns

obteve um terceiro, bastante ativo, a que denominou antiofídico.

— Demonstração de provas da ação específica deste serum contra o

veneno ofídico foi realizada em 5-11, com a presença do Presidente do

Estado, Prefeito Municipal, Secretário do Interior e da Agricultura e

outras autoridades. Em 1-12 foi realizada outra demonstração na Escola

de Farmácia.

— Além dos seruns citados, eram objetos de estudos os da febre

tifóide, 0 leucotoréico de Metohnikoff e o anti-rábico.

1902

— Dorival de Camargo Penteado substituiu Abdon Petit Guimarães

Carneiro, então comissionado em Campos.

— O Instituto contava com 17 animais imunizados contra a peste e

sua produção pode atender 3.400 doentes por mês.

— Os soros antibothropico (cascavel), anticrotálico (jararaca) e

antiofídico (misto) começaram ter boa procura e foi iniciada campanha

de vulgarização destes seruns, sendo realizadas conferências nas escolas

Politécnica de São Paulo e de Farmácia.

SciELO

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OLIVEIRA, J. L. Cronologia do Instituto Butantan (1888-1981) L* Parte. Mem. Jnat. liutantan, JfJí/iS;

11-79, 1980/81.

— As vacinas contra a peste e os seruns fabricados em Butantan

eram destinados: ao Hospital de Isolamento de São Paulo, Instituto Bacte¬

riológico do Estado de São Paulo, Diretoria do Serviço Sanitário, Rio de

Janeiro, Paraná, Ceará, sendo enviados inclusive para Londres.

— Saíram do Instituto neste ano: serum antipestoso — 1.130 ampo¬

las, serum anticrotálico — 75 ampolas, serum antibothropico — 67 am¬

polas, serum antiofídico — 475 ampolas, vacina antipestosa — 150

ampolas.

— Vital Brazil recebeu intensa correspondência do interior do Estado

descrevendo a eficácia do soro aplicado em pessoas acidentadas com ser¬

pentes. Entre outros, cartas do: Conselheiro Antonio Prado, Engenheiro

Augusto Fomm, Dr. Olímpio Portugal (Araras), Dr. Marcondes Machado

(Tatuí).

1903

— O Butantan prosseguiu na produção de serum e vacina antipestosa e

os seruns aplicáveis nos casos de mordedura de cobra. Por não terem sido

executadas as obras solicitadas pelo Diretor e indispensáveis para o desen¬

volvimento técnico do Instituto, não foi possível iniciar o preparo de outros

seruns aplicáveis em terapêutica.

— Vital Brazil participou do 5.° Congresso de Medicina e Cirurgia

no Rio de Janeiro, apresentando o trabalho “Da serumtherapia no enve¬

nenamento ofídico”, com demonstração experimental da eficácia do serum

anticrotálico.

— Foi dada maior divulgação do soro contra envenenamento ofídico

em São Paulo por intermédio de fazendeiros contatados por Vital Brazil.

— O Instituto recebeu 159 cobras entre as espécies: cascavel, jara¬

raca, urutu e jararacuçu.

— Preparou neste ano 2.461 doses do serum antipestoso; 220 serum

anticrotálico; 282 serum antibothropico e 1.459 serum antiofídico; 496 das

vacinas antipestosas.

— Remeteu seruns e vacinas antipestosas para o Hospital Isolamento

de São Paulo, Diretoria do Serviço Sanitário, Comissão Sanitária de

Santos, Bahia, tendo enviado também para a índia e para a Exposição

Internacional de São Luiz nos Estados Unidos da América.

— Os seriins contra mordedura de cobra, além da capital paulista e

interior do Estado, foram enviados para o Rio de Janeiro, Minas Gerais,

Maranhão, Bahia, Ceará, Rio Grande do Sul e USA.

1904

— Em maio. Vital Brazil viajava em visita a Institutos congêneres

da Eui'opa, assumindo interinamente a direção do Instituto Serumthera-

pico, 0 assistente Dorival de Camargo.

— Foi nomeado também como assistente o Inspetor Sanitário Carlindo

Valeriani.

— Não foram efetuadas as obras e reformas solicitadas por Vital

Brazil, não se ampliando portanto a produção além daqueles soros e

vacinas já referidos nos anos anteriores.

1 SciELO

OLIVEIRA, J. L. Cronologia do Instituto Butantan (1888-1981) 1.® Parte. Mem. Inst. Butantan, 44/45-

11-79, 1980/81.

— Foi solicitado ao governo a concessão de transporte gratuito por

via férrea das cobras enviadas por fazendeiros do interior, ressaltando-se

a importância do recebimento do maior número de cobras para obtenção

de veneno para a feitura de soros.

— O Instituto continuava recebendo correspondência com relatos da

eficácia do soro contra mordedura de cobras.

— Foram reiteradas as solicitações ao governo quanto às necessida¬

des de melhorias das instalações e pedidos do material para laboratórios,

bem como da insuficiência de número do pessoal técnico.

— Foi registrada a entrada de 146 cobras.

— O Butantan cultivava em suas dependências: alfafa, capim fino,

couve, cana, milho, uva, trigo e aveia.

— Foram plantados neste ano 230 pinheiros. 370 eucaliptos, 626

mudas de acácias.

1905

— Vital Brazil retornava da viagem à Europa, reassumindo a direção

do Instituto.

— Carlindo Valeriani era dispensado e João Gomide de Castro (admi¬

nistrador) pedia exoneração, sendo substituído por Theodureto Leite de

Almeida Camargo (engenheiro agrônomo).

— O Instituto continuava a preparar o serum e vacina antipestosa

e os seruns antipeçonhentos.

— O serum antidiftérico estava em vias de ser preparado pois já

estavam sendo imunizados os animais para tanto.

1906

— Além dos produtos já entregues nos anos anteriores, foi acrescen¬

tado 0 soro antidiftérico. O soro antipestoso tem pouca saída, pela dimi¬

nuição das manifestações epidêmicas.

— A produção de seruns contra moi’dedura de cobras foi aumentada:

1905-1.920 tubos de seruns, 1906-3.518 tubos de seruns.

— Vital Brazil incrementava a propaganda junto aos fazendeiros de

São Paulo para obtenção de cobras vivas e obtém bons resultados.

— Solicitava ao governo o aumento de funcionários do Instituto, o

que tornaria possível o preparo de tuberculina, de serum antitetânico e

talvez de serum anticarbunculoso.

— Até então, o Instituto contava além do diretor, um ajudante:

Dorival de Camargo Penteado, um administrador: Theodureto Camargo,

um escriturário: Henrique da Silva Pinto, dois auxiliares de laboratório:

Victor Salcedo e Maurício R. da Silva, um cocheiro, nove serventes e cinco

camaradas.

— Os seruns fabricados eram vendidos, trocados ou mesmo distri¬

buídos gratuítamente, além do fornecimento a Diretoria do Serviço Sani¬

tário e outras instituições públicas.

SciELO

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OLIVEIRA, J. L. Cronologia do Instituto Butantan (1888-1981) 1.* Parte. Mcm. Inat. Butantan, 44/45:

11-79, 1980/81.

1907

— Epidemia de varíola no Estado de S. Paulo. A vacina é fabricada

desde 1894 pelo Instituto Vacinogênico.

—■ Início do preparo da tuberculina no Instituto.

— Dorival de Camargo era encarregado do preparo dos seruns anti-

pestoso, antidiftérico e da vacina antipestosa.

— Foi nomeado ajudante em 11-4-1907 o Farmacêutico Bruno Rangel

Pestana, trabalhando junto com o Diretor, no preparo dos seruns antipe-

çonhentos e das tuberculinas.

— Theodureto de Camargo foi nomeado para trabalhar na Escola

Politécnica, sendo substituído no cai’go de administrador por Jonas M. de

Mello.

— Era necessário intensificar e sistematizar a propaganda para

remessa de cobras pois era insuficiente o número de cobras para a produ¬

ção de soros.

1909

— Além do fornecimento em São Paulo, Vital Brazil enviava seruns

antipeçonhentos e antidiftéricos para o Uruguai e Argentina, além dos

Estados de Minas Gerais, Paraná, Santa Catarina, Rio Grande do Sul e

Mato Grosso.

— Distribuição dos serviços:

Dorival de Camargo Penteado: serum e vacina antipestosa, serum

diftérico, serum antitetânico (estudos).

Bruno Rangel Pestana: estudos sobre as peçonhas (em colaboração

com o diretor) ; preparo dos seruns antiofídico, anticrotálico e antibothró-

pico; preparo da tuberculina; estudos sobre tuberculose (em colaboração

com o diretor) ; estudos sobre hemogregarineas e outros parasitas do

sangue.

— Os trabalhos de pesquisa eram publicados na “Revista Médica de

São Paulo”.

— Foi conferido ao Instituto Serumtherapico em Butantan a medalha

de ouro na Exposição Internacional de Higiene, anexa ao IV Congresso

Médico Latino Americano, no Rio de Janeiro.

1910

— O Instituto dava prosseguimento ao fornecimento de seruns e

vacinas produzidas nos anos anteriores, aumentando o volume de sua

produção. Na área de pesquisas, a continuidade aos estudos sobre tuber¬

culose, não só sobre a biologia do bacilo, mas também do ponto de vista

da imunização.

— Em novembro foram iniciadas as obras de construção do novo

edifício do Instituto (atualmente o prédio que abriga a Biblioteca e outros

setores) sob a direção técnica de Mauro Álvaro, no Governo de Manoel

Joaquim de Albuquerque Lins, sendo secretário do Interior, Carlos Gui¬

marães.

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OLIVEIRA, J. L. Cronologia do Instituto Butantan (1888-1981) l.“ Parte. Mem. Inst. Butantan, 44/^5:

11-79, 1980/81.

1911

— O soro mais procurado era o antiofídico sendo que de 1902 a 1906

foram entregues ao consumo 900 tubos de seruns e de 1907 a 1911,

12.600 tubos.

— Sistematização oficial da permuta de cobras por soros.

— Foi feito 0 soro antielapíneo (serpentes elaps).

— Início do preparo experimental do serum antitetânico, porém não

entregue ao consumo.

— Participação do Instituto Serumtherapico na Exposição Interna¬

cional de Higiene em Dresden (Alemanha) sendo representado por Bruno

Rangel Pestana, que foi recebido por Dr. Ataliba Florence, que lá se

encontrava em estudo. Bruno Rangel Pestana permaneceu na Alemanha

se especializando em química biológica.

— João Florêncio Gomes substituiu Rangel Pestana em sua ausência.

— Vital Brazil publicou “Defesa contra o Ofidismo”, súmula de todo

trabalho realizado até então no Instituto.

1912

— O Instituto prosseguiu na produção dos seruns: antiofídico, anti-

crotálico, antipestoso, antitetânico (ainda não entregue ao público), da

vacina antipestosa, da tuberculina e do soro antidiftérico.

— Os soros mais procurados eram aqueles contra o acidente ofídico,

seguido do antidiftérico. A tuberculina era fornecida quase que exclusiva¬

mente ao Dispensário Clemente Ferreira.

— Na área de pesquisa os temas principais foram: o estudo dos

venenos, toxinas e antitoxinas; biologia das cobras e sua classificação.

— Bruno Rangel Pestana regressava de sua viagem de estudos na

Alemanha.

— João Florêncio Gomes era efetivado como ajudante.

— Dorival de Camargo Penteado seguiu para Paris onde trabalhou

em histologia patológica no Instituto Pasteur.

— Distribuição dos serviços técnicos:

— Vital Brazil, além do trabalho de direção do Instituto, se ocupou

da extração e estudo sobre venenos, estudos sobre a biologia das serpentes

e preparo dos seruns antipeçonhentos.

— Dorival de Camargo Penteado: preparo dos seruns antidiftérico,

antipestoso, antitetânico e vacina antipestosa.

— Bruno Rangel Pestana: química dos venenos e toxinas, tuberculose

e tuberculina.

— João Florêncio Gomes: sistemática das cobras, dosagem dos seruns

antipeçonhentos. O Museu ficou sob sua responsabilidade: constava de

seu acervo peças anatômicas, cobras nacionais e estrangeiras com 119

espécies, sendo 66 do Brasil. Foram identificadas neste ano 26 espécies

de cobras brasileiras.

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OLIVEIRA, J. L. Cronologia do Instituto Butantan (1888-1981) 1-* Parte. Mem. Inut. Butantan,

11-79, 1980/81.

— O Instituto estabeleceu permutas de serpentes com os Museus de

Stutgart, Berlim e Paris.

— As obras do l.° edifício do Instituto estavam quase concluídas.

Em frente ao prédio foi construído o serpentário. Entre outras constru¬

ções já concluídas se destacavam: 3 casas para empregados, parque em

frente do novo edifício, caixas d’água, captação de uma fonte de água,

instalação de uma bomba centrífuga, adaptação de um pequeno pavilhão

para serviços de observação de pequenos animais inoculados, portão da

entrada.

— Em projeto: casas para residência do diretor, para 2 ajudantes e

para um auxiliar; cocheira modelo para 50 animais imunizados; e uma

caixa para distribuição d’água às máquinas.

— Foi explicitado objetivamente o programa do Instituto Serum-

therapico:

a) preparar ser uns e vacinas de aplicação prática no nosso meio;

b) estudar todas as questões que se relacionem com a serumtherapia

e as demais relacionadas com a saúde pública;

c) divulgação (escrita ou através de conferências) dos resultados

das pesquisas originais do Instituto e de noções de higiene.

— Foram projetadas pesquisas para:

a) produção dos ser uns anticolérico, antimeningocócico, anti-stafilo-

cócico, antiestreptocócico, antiescorpiõnico, seruns aglutinantes diversos,

vacina anticarbunculosa etc.;

b) estudos dos assuntos: sistemática e biologia das serpentes do

Brasil, estudos sobre as diferentes peçonhas tanto do ponto de vista quí¬

mico como do toxológico. Serumterapia antipeçonhenta.

— Aracnídios venenosos do Brasil, sua sistemática e biologia. Estudo

dos venenos mais importantes desta ordem: serumterapia escorpiônica,

histologia patológica destes envenenamentos, insetos sugadores que inte¬

ressem à higiene.

1913

— Início do funcionamento das novas instalações do prédio do Insti¬

tuto.

— Os produtos fornecidos pelo Instituto eram: serum antipestoso,

vacina antipestosa, serum antidiftérico, serum antiofídico, serum anticro-

tálico, serum antibotrópico, tuberculina diluída (T.O.A.).

— Dorival de Camargo Penteado retornava de viagem, tendo reali¬

zado cursos no Instituto Pasteur de Paris e no Instituto de Moléstias

Tropicais de Hamburgo.

— Vital Brazil iniciava imunização de animais para o preparo dos

seruns anti-streptocócico e anti-stafilocócico.

— João Florêncio Gomes prosseguiu com o estudo da sistemática

das serpentes, descrevendo uma espécie nova venenosa, a qual denominou

Lachesis Cotiara. Dedicou-se também ao estudo dos triatomas (barbeiro),

da sua distribuição geográfica no Estado e da moléstia que eles podem

transmitir.

SciELO

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OLIVEIRA, J. L. Cronologia do Instituto Butantan (1888-1981) 1.® Parte. Mem. Jnst. Butantan, 4^/í5;

11-79, 1980/81.

— O Instituto continuava a ampliar sua coleção de ofídios através

de trocas com outras instituições.

— Bruno Rangel Pestana, além de se ocupar com o preparo do serum

antidiftérico, da tuberculina e estudos de química de veneno e quimiote¬

rapia, realizou estudos sobre protozoologia relativa a moléstia do cão

(Nambyuvu).

— Início do programa de conferências com fins de educação sanitária

para o povo, tendo sido a 1.^ conferência realizada a 7 de agosto, proferida

por João Florêncio Gomes versando sobre a história natural das serpentes.

— Necessidade de ampliar o quadro de funcionários, criando cargos

como de mecânico, eletricista, desenhista-fotógrafo, bibliotecário-arqui¬

vista e ajudante de 2.^ classe, ou seja, estudantes de Medicina.

— Do preparo técnico do pessoal duas opções eram possíveis: ou

contratar especialistas estrangeiros ou enviar brasileiros para estudar nos

grandes centros científicos, opção esta escolhida tanto aqui como em

Manguinhos no Rio de Janeiro.

— Com aumento da produção houve aumento das despesas, portanto,

foi solicitada a verba de 30 rOOOSOOO e que a renda dos produtos do Insti¬

tuto seja aplicada como verba suplementar nas despesas gerais. A renda

líquida da verba dos produtos foi de 9:548$450 no ano de 1912.

1914

— Inauguração do prédio do Instituto no dia 4-4-1914.

— Com as novas instalações, início do preparo dos seruns: antidisen-

térico, antiestreptocócico, antiescorpiônico.

— Dos soros até então fabricados os mais procurados foram: o anti-

ofídico e 0 antidiftérico.

— Era necessário aumentar o número de animais para imunização

para atender à demanda de seruns.

— Vital Brazil partia em viagem de estudos na Europa. Foi substi¬

tuído por Dorival de Camargo Penteado em sua permanência no exterior

no período de abiúl a outubro; a viagem de Vital Brazil foi prejudicada

pela eclosão da 1.^ Guerra Mundial.

— Dl.stribuição dos serviços técnicos:

Dorival de Camargo Penteado: serum antidiftérico, antipestoso e

vacina antipestosa, pesquisas anátomo-histopatológica;

Bruno Rangel Pestana: tuberculina, serum antitetânico, estudos de

quimioterapia e de parasitologia;

João Florêncio Gomes: estudo das sistemáticas dos ofídios, biologia

das serpentes, dosagem e preparo dos seruns antipeçonhentos, preparo do

serum antidisentérico, estudos de parasitologia.

— Na ausência do diretor, o Instituto contou com o auxílio técnico

do Dr. Lemos Torres.

— A cargo do Diretor ficou o preparo dos seruns antipeçonhentos,

estudo da biologia das serpentes, preparo dos seruns antiestreptocócico e

antiestafilocócico.

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OLIVEIRA, J. L. Cronologia do Instituto Butantan <1888-1981) 1.* Parte. Mem. Inst. Butantan,

11-79, 1980/81.

— A vacina e o serum antipestoso teve sua produção diminuída

devido à ausência da moléstia em nosso meio.

1915

— 28-2-1915 — Bruno Rangel Pestana oBteve por permuta a trans¬

ferência para o Instituto Bacteriológico, tendo ocupado seu posto Otávio

Veiga.

— Distribuição dos serviços técnicos;

Octávio Veiga — preparo e dosagem do soro antitetânico, da tuber-

culina e maleína e conservação da coleção de culturas do Instituto, estudo

de moléstias parasitárias do cavalo; estudos sobre a lepra e estudos sobre

ofidismo;

João Florêncio Gomes — preparo e dosagem dos soros antipeçonhen-

tos, sistemática dos ofídios, tendo descrito 4 novas espécies; o trabalho

sobre este tema foi publicado nos Anais Paulista de Medicina e Cirurgia

de junho de 1915 sob o título “Contribuição para o conhecimento dos

ofídios do Brasil”. Ocupou-se também dos estudos de parasitologia. Em

colaboração com o Prof. Brumpt estuda nova espécie de Trictoma, o

Trictoma Chagasi;

Dorival de Camargo, além de substituir o diretor durante sua ausên¬

cia, ocupou-se dos serviços de produção de serum antidiftérico, dos estudos

de anatomia e histologia patológica e dos ensaios de animais bons produ¬

tores de antitoxina.

— Das necessidades do Instituto:

Contratação de mais pessoal técnico; contratação de um técnico para

seção de química e outro para organização da seção de parasitologia.

Aumento de verbas do Estado para atingir equilíbrio econômico. Vital

Brazil propõe que seja votada uma lei que regularize a venda da produção

do Instituto de forma que a renda seja revertida no próprio Instituto.

A falta de maiores recursos punha a risco de paralisação das atividades

de produção de vacinas e seruns.

Salientava a necessidade de preparar técnicos e cientistas brasileiros

no exterior, principalmente nos grandes centros da França e Alemanha,

para prover as instituições de pesquisas nacionais, inclusive o Serum-

terápico.

Tornar o Instituto um centro de difusão da educação sanitária para

o povo.

Promover campanha a favor da higiene pública e para tanto orientar

os estudos para o combate ao paludismo na luta contra o ankylostomíase,

tracoma, moléstia de Chagas, úlcera de Bauru, lepra, difteria, tuberculose,

febre tifóide, combater às más condições de higiene, alimentação e habi¬

tação do povo.

— Em novembro. Vital Brazil viajava pai’a os Estados Unidos da

América, a convite da “Carnegie Endo^vment for Peace” para assistir o

Congresso Científico Pan-Americano, realizado no mês de dezembro em

Washington. Vital Brazil apresentou os seguintes trabalhos:

SciELO

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OLIVEIRA, J. L. Cronologia do Instituto Butantan (1888-1981) 1.* Parte. Mcm. Inst. Butantan,

11-79, 1980/81.

Profilaxia do Ofidismo na Améiúca, de Vital Brazil; comunicação

sobre o emprego da adrenalina na disenteria amébica, de Theodoro Bayma;

nota sobre a profilaxia da febre amarela, de Emílio Ribas; Vital Brazil

levou também filmes sobre os trabalhos desenvolvidos no Instituto e uma

coleção de ofídios vivos para permuta. Realizou várias visitas a institutos

congêneres norte-americanos.

— Da produção do Instituto:

Neste ano apresentou diminuição de 1.000 ampolas de soro antiofídico

por perda de animais para imunização.

O soro antiescorpiônico não é entregue ao consumo por falta de veneno

em quantidades suficientes para fabricação de antígeno.

Houve muita procura do soro antidiftérico sendo entregue ao consumo

3.200 ampolas.

São entregues ao consumo 1.000 ampolas de soro antitetânico.

Tiveram pouca procura o serum e vacina antipestosa, a maleína e a

tuberculina.

Estavam em vias de preparação para consumo os soros antiescorpiô¬

nico, antidisentérico e antitífico.

1916

— Distribuição dos serviços técnicos:

Dorival de Camargo Penteado — serviço de peste e difteria; estudos

de anatomia e histologia patológica.

João Florêncio Gomes — preparo dos soros antipeçonhentos e anti¬

disentérico, estudo da sistemática e distribuição geográfica dos ofídios;

distribuição geográfica dos triatomas em São Paulo e estudos sobre a

transmissão do germen do Nambyuvu; prosseguiu nas experiências para

determinar as condições em que se deve ser instituído o tratamento espe¬

cífico do ofidismo.

Octávio Veiga preparo dos soros: antitetânico, tubei’culina e maleína;

estudos sobx-e a strongylose (verminose) dos eqüídeos e sobre diversas

epizootias. Representou o Instituto na Conferência Sanitária realizada em

Buenos Aires, apresentando dois trabalhos: sobre a Strongylose dos eqüí¬

deos e outro sobre a mosca doméstica.

Vital Brazil, além da direção do Instituto, se incumbiu do preparo

do soro antistreptocócico, a concentração dos soros antitóxicos e estudos

de sorologia.

Houve substancial aumento da produção de soro antidiftérico, dada

a grande procura, devido a escassez do produto estrangeiro no mercado

(período da guerra). O Butantan conseguiu produzir 6.947 ampolas do

produto, tendo no ano anterior produzido 3.200; conseguiu também resul¬

tados melhores com soro mais ativo.

Com vistas a difundir os produtos do Instituto e aumentar suas vendas

0 diretor sugere que seja entregue à uma casa comercial, a representação

comercial do estabelecimento.

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OLIVEIRA, J. L. Cronologia do Instituto Butantan (1888-1981) 1.® Parte. Mcm, Inst. Butantan, Uk/kS:

11-79, 1980/81.

— Produção do Instituto Serumterápico:

Soros antitetânicos 1.867 ampolas.

Soros antipeçonhentos 9.500 ampolas.

Soro e vacina antipestosa: manutenção do estoque.

Soro antidisentérico já entregue ao consumo.

Soro antiestreptocócico em vias de preparo.

Soro antiescorpiônico ; apesar de em 1907 ter sido iniciada a imuniza¬

ção de animais não foi possível sua fabricação para atender o consumo,

devido a não-obtenção de venenos suficientes. Este ano foi reiniciada

sua produção.

Soro hormônico: ação do soro normal de cavalos no tratamento da

epilepsia (resultados não conclusivos) através de pesquisas realizadas por

Vital Brazil e Pelippe Aché. Da decomposição do soro normal se chegou

ao soro hormônico ou soro tônico-estimulante usado a título de ensaio no

Hospício de Juqueri.

Tuberculina.

Maleína: fornecida à Força Pública e à Câmara Municipal.

Parte dos produtos foi comercializada, sendo seu rendimento bruto

da ordem de 91:222$400.

1917

— Foram criados os serviços de Botânica e Química, a instalação do

Horto Oswaldo Cruz de cultura de plantas tóxicas e medicinais, o labora¬

tório de Opoterapia e o de Soluções Medicamentosas.

— Foram feitas algumas melhorias nas instalações como a construção

de 2 pavilhões, aquisição de maquinários, câmaras frigoríficas para apoio

dos serviços de laboratório. Foram instaladas uma oficina mecânica, uma

carpintaria e marcenaria.

— Concorrência para a comercialização dos produtos do Instituto

tendo concorrido duas firmas: Casa Fretin e Armbrust e Cia. Ganha a

Armbrust, que firma contrato com o Governo do Estado em 21-5. Ficava

estabelecido por 5 anos que a Armbrust seria a única depositária dos

produtos do Instituto com desconto mínimo de 40% e máximo de 50%,

conforme o volume de compras realizadas. Ficou ainda estabelecido o

mínimo de compras de 10 contos de réis mensais e a quantia de 60 contos,

como adiantamento da firma ao Instituto, quantia essa a ser amortizada

no prazo de 5 anos.

— À casa Armbrust cabia a propaganda dos produtos do Instituto

e auxílio pecuniário para as publicações de trabalhos científicos.

—■ Aumento do pessoal técnico:

Dr. F. Hochne, Joaquim Crissiuma e Toledo, Francisco de Camargo

Mesquita, Juvenal de Lima, Artur Pedroso, Benedito Laurindo de Morais;

Afrânio do Amaral e Paulo de Araújo (17-8).

— Comissões: João Florêncio Gomes realizou três excursões cientí¬

ficas pelo interior do estado junto com Diretor Geral do Serviço Sanitário;

SciELO

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OLIVEIRA, J. L. Cronologia do Instituto Biitantan (1888-1981) 1-“ Parte. Mem. Jnst. Butantan Ái/i5:

11-79, 1980/81.

Octávio da Veiga viajou para Pelotas a fim de verificar as condições para

instalação de uma filial do Instituto; viagem para Argentina para efetuar

compra de cavalos.

— Distribuição dos serviços técnicos:

Dorival de Camargo Penteado — serviço de difteria e peste, exames

anatomopatológicos; estudos histológicos sobre as glândulas da cabeça

dos ofídios.

João Florêncio Gomes — preparo dos soros antipeçonhentos, preparo

do soro antidisentérico, estudo da sistemática e biologia das serpentes.

Estudos sobre o tratamento dos acidentes ofídicos pelos soros específicos

e em colaboração com o Diretor Geral do Serviço Sanitário.

Artur Neiva — estudo sobre a evolução do berne e os mecanismos

de sua propagação.

Octávio Veiga — preparo do soro anti tetânico, da tuberculina,

maleína e piocianase; trabalhos de veterinária, com a inspeção geral dos

animais do Instituto; início da imunização de animais para produção do

serum antitifóidico.

Vital Brazil — preparo do soro antiestreptocócico, soro antiescor-

piônico e a concentração de diferentes soros.

— Aumento dos produtos do Instituto:

Soros: antiofídico, anticrotálico, antibotrópico — (João Florêncio

Gomes).

Soros antidiftérico e vacina e soro antipestoso — (Dorival de Ca¬

margo Penteado).

Soro antitetânico — (Octávio Veiga e Joaquim Crissiuma).

Soro antidisentérico — (João Florêncio Gomes e Octávio Veiga).

Soro renal caprino — (João Florêncio Gomes e Afrânio do Amaral).

Soro antitóxico gravídico (Afrânio do Amaral).

Soro antiestreptocócico, antiescorpiônico, soro hemostático (coagu-

lante), normal de cavalos (Vital Brazil).

Soluções medicamentosas (Paulo de Araújo) : soro fisiológico, solu¬

ção de tártaro emético, solução de lodureto de sódio, by-cloridrato de

quinina, chlorhydro sulfato de quinina, chlorhydrato de morfina e de enti-

ua; sulfato de sparteina, de cafeína, de cânfora. Suspensão oleosa: calome-

lanos, solução de cacodilato de sódio, solução gaúche, solução do sonligoux,

solução neuro-Tônica, vacina antipestosa, piocianase, tuberculina in natura,

tuberculina (T.O.A.), tuberculina de Koch.

— Necessidade do Instituto:

Aumento de n.° de animais p/ imunização.

Aumento da pastagem e adubação do solo.

Construção de casas p/ residência do funcionário, desdobramento da

escola mista, que funcionou no antigo laboratório provisório para duas

escolas c/ separação de sexo.

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OLIVEIRA, J. L. Cronologia do Instituto Butantan (1888-1981) l.“ Parte. Mem. Inst. Butantan, 44/45:

11-79. 1980/81.

Criação de biblioteca especializada e publicação de revista especia¬

lizada.

Solicitação de leitos na Santa Casa de Misericórdia de São Paulo,

para que se faça o acompanhamento de verificação de terapêutica dos

produtos fabricados no Instituto.

— Houve aumento das despesas devido às ampliações efetuadas no

Instituto, apresentando neste ano, déficit em seu orçamento.

— A municipalidade concedeu medalha e diploma comemorativo ao

Instituto Serumtherapico na 1.® Exposição Industrial da Cidade de São

Paulo.

— Reforma do Serviço Sanitário.

1918

— A estrutura funcional do Instituto se ampliava pela reforma que

sofreu (Decreto 1596 de 29-12-1917) criando 18 cargos novos:

Um assistente, quatro subassistentes, um botânico, um químico, um

desenhista ceroplasta, um chefe de cultura, um mecânico eletricista, um

chefe cocheira, um bibliotecário, um fotógrafo micrografista, um enca¬

dernador, dois escriturários, um motorista, um porteiro telefonista, um

guarda noturno.

— Distribuição dos serviços técnicos:

Dorival de Camargo Penteado — serviço de difteria, peste, exames

histopatológicos.

João Florêncio Gomes — sistemática de ofidios, soros antipeçonhen-

tos, soro antidisentérico, trabalhando em conjunto com Arlindo de Assis,

preparou a 1.^ partida de vacina gonocócica e realizou estudos sobre a

gripe.

Joaquim Toledo Crissiuma — estudos sobre o tétano, soro antitetâ-

nico, estudos sobre a tuberculose, preparo da tuberculina, maleína.

Octávio Veiga — trabalhos de veterinário, estudo do grupo colli tífico.

Afrânio do Amaral — opoterapia, sangrias, trabalhos hospitalares e

fiscalização de produtos, assistência médica aos funcionários.

Paulo de Araújo — soro e vacina antiestreptocócica, soluções medi¬

camentosas.

Arlindo de Assis — vacina antiestafilocócica, vacina antigonocócica,

exames de produtos.

F.C. Hoehne — estudos de botânica, tendo a seu cargo o Horto

Oswaldo Cruz (1700 espécies classificadas) e a estação biológica do alto

da Serra (reserva florestal).

— Pesquisas Científicas:

Dorival de Camargo Penteado — além do prosseguimento de estudos

iniciados anteriormente, ocupou-se da pesquisa sobre a difteria.

João Florêncio Gomes — sistemática de ofídios, tendo examinado as

coleções do Museu Paulista, Museu do Pará e do Ceará; escreveu dois

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OLIVEIRA, J. L. Cronologia do Instituto Butantan (18S8-1981) l.“ Parte. Mem. Inst. Butantan

11-79, 1980/81.

artigos, publicados na revista do Museu Paulista e nas Memórias do

Instituto Butantan: Estudos de sorologia e microbiologia; Estudos sobre

disenteria bacilar; sobre as condições culturais do gonococo e sobre dife¬

rentes germes isolados em casos de gripe, tendo trabalhado em colabo¬

ração com Arlindo de Assis e obtido uma vacina combinada com bons

resultados.

Paulo Araújo — experiências para determinar a atividade relativa

dos soros normais de diferentes espécies como preventivo na infecção

carbunculosa a título experimental.

Florêncio Gomes — estudos sobre soros precipitantes; modificações

na ação ativante hemolítica durante o período de imunização.

Afrânio do Amaral — observações clínicas e terapêuticas colhidas

na enfermaria do Butantan na Santa Casa. Demonstrou o poder cicatri-

zante do soro seco e ensaio de outros produtos (soro normal, soro antipneu-

niocócico).

F. C. Hoehne, os estudos de botânica.

— Produção Industrial do Instituto:

Soro antipeçonhento, soro antidiftérico, soro antitetânico, soro anti-

estreptocócico, soro antidisentérico, soro antipestoso, soro antitóxico gra-

vídico, soro antipneumocócico, soro normal de cavalo, soro normal de boi,

hemostático, vacinas bacterianas diversas, tuberculina, maleína, óleo can¬

forado, soluções medicamentosas, extratos orgânicos injetáveis, extratos

orgânicos por via gástrica, comprimidos de órgãos.

O Dr. Octávio Veiga esteve em comissão na cidade de Pelotas,

dirigindo a instalação da filial do Instituto Butantan. A nova instituição

tem produzido a vacina jenneriana, feito o tratamento anti-rábico, reco¬

lhido peçonhas de serpentes para permuta com soro do Butantan e reali¬

zado todos os exames bacteriológicos e bacterioscópicos da região; Dr.

Costa Pereira seria confirmado como diretor desta repartição.

— Octávio Veiga também representou o Instituto Butantan na Confe¬

rência de Higiene realizada no Rio de Janeiro.

— Foi criado o Instituto de Veterinária com pessoal subordinado

administrativamente à seção da Indústria Pastoril da Secretaria da Agri¬

cultura, mas com a orientação científica do Instituto Serumterápico.

— Vital Brazil foi contrário ao estabelecimento do Instituto de Vete¬

rinária com essa organização.

— Por incumbência do Inspetor Geral da Instrução Pública do Esta¬

do, o Instituto Serumtherapico organizava curso elementar de higiene para

inspetores escolares.

— João Florêncio Gomes morreu em 13-6-1918, interrompendo car¬

reira científica brilhante.

— Foi publicado o l.° volume das “Memórias do Instituto Butantan”

e “Coletânea de trabalhos científicos” de 1901 a 1917.

— Economia — Apesar da grande produção, a despesa ultrapassou

a receita, o que para tanto contribuiu a elevação do preço dos materiais

empregados na indústria, as despesas com a criação de novos serviços e

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OLIVEIRA, J. L. Cronologia do Instituto Butantan (1888-1981) 1.* Parte. Mcm. Inat. Butantan,

11-79, 1980/81.

as condições onerosas do contrato com a Casa Armbrust e o mal cumpri¬

mento do referido contrato. A firma, sem assumir os riscos da produção,

ficava com a maior parte dos rendimentos.

1919

— Devido a desentendimentos relacionados com a orientação do Ser¬

viço Sanitário do Estado de São Paulo, Vital Brazil retirou-se do Instituto

e foi para Niterói (Rio de Janeiro) onde fundou o Instituto Vital Brazil.

Foi acompanhado pelos assistentes: Dorival de Camargo Penteado, Octávio

Veiga, Arlindo de Assis e ainda Crissiuma de Toledo.

— Em 11-7 Antonio Joaquim Ulhôa Cintra assumiu a direção inte¬

rina do Butantan, depois respondendo pela direção, Artur Neiva, diretor

para produção de soros.

— O Instituto apresentou um déficit de 88:476$270.

— O contrato com a Casa Armbrust e Comp. prejudicou a expansão

comercial do Instituto e conseqüentemente o desenvolvimento científico.

Porcentagem de lucro da firma muito grande (40% da renda bruta) e

10% de bonificação, quando da venda anual mínima de 150.000$000.

— Saída de Vital Brazil e parte do pessoal técnico, desorganizando

os serviços e atrasando a produção.

— Falta de cobras e conseqüentemente de venenos, matéria-prima

para produção de soros.

— Necessidade de inutilizar produtos por falta de condições de con¬

sumo e dificuldade em repor tais produtos.

— Falta de milho e capim o que levou o Instituto despender grande

verba para compra de ração para os animais.

— Lemos Monteiro que trabalhava no Instituto Bacteriológico desde

5 de julho foi removido para o Butantan em 18-7-1919.

— O desenhista ceroplasta Augusto Esteves pediu exoneração.

— Todo assunto referente a ofidismo ficaria a cargo de Afrânio do

Amaral que parte para o interior a fim de contatar os melhores forne¬

cedores de serpentes. Acumulou diversos serviços: opoterapia; ofidismo,

concentração e dosagem dos diferentes soros, sangrias de animais esta-

bulados.

— Aumento do pessoal técnico: José Lemos Monteiro da Silva, Joa¬

quim Pires Fleury e José Bernadino Arantes.

— Distribuição dos Serviços Técnicos:

J. B. Arantes — soro antidiftérico, antipestoso e estudos de anatomia

patológica.

Afrânio do Amaral — ofidismo, opoterapia, soro antidisentérico, e

concentração de soros.

José Lemos Monteiro da Silva — soro antitetânico, tuberculinas,

maleína, soluções medicamentosas e verificação da esterialidade de diver¬

sos produtos.

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OLIVEIRA, J. L. Cronologia do Instituto Butantan (1888-1981) 1.* Parte. Mem. Inat. Butantan,

11-79, 1980/81.

J. Pires Fleury — soro antieslreptocócico e antipneumocócico.

Artur Neiva (diretor) — vacinas, orientação e fiscalização de todos

os serviços.

— Devido à conjuntura de crise interna, o serviço hospitalar reali¬

zado pelo Butantan na Santa Casa de Misericórdia foi suspenso.

— Acusações de Afrânio do Amaral à administração de Vital Brazil

(desaparecimento de venenos secos, não cumprimento da permuta de

cobras por soros).

— Pelo decreto n.° 1.700 de 26-12 foi criado o Instituto de Medica¬

mentos Oficiais em Butantan, que ficaria a cargo do químico Alfredo de

Araújo Lima.

1920

— Crise do Instituto: dívida de 106:586$800 da administração ante¬

rior, falta de verbas, baixos vencimentos do pessoal técnico.

— Afrânio do Amaral foi encarregado de responder pela Direção do

Instituto Serumtherapico.

— O subassistente Lucas de Assumpção foi nomeado em 17-3 e a

partir de outubro, ficou encarregado da seção de opoterapia.

— Afrânio do Amaral realizou trabalhos de terapêutica: preparo de

soro eumênico, usados pelos clínicos Celestino Bourroul e Vieira Mar¬

condes e de um preparado de extrato pluriglandular para tratamento de

asma essencial.

— Distribuição dos serviços técnicos:

J. B. Arantes continuou a preparar o soro antidiftérico, soro e vacina

antipestosa e piocianase, estudos de anatomia e histologia patológica.

J. P. Fleury — preparo dos soros e vacinas estreptocócicas e penu-

mocócicas; preparo de soro antimeningocócico polivalente.

J. Lemos Monteiro realizou várias experiências para obter um método

prático de imunização antitetânica e outros trabalhos referentes ao pre¬

paro da tuberculina e maleína, serviços de soluções medicamentosas e

verificação de produtos injetáveis.

F. C. Hoehne, serviços de Botânica.

Afrânio do Amaral, além da direção do Instituto, se ocupou de todos

os demais serviços médicos, seção de opoterapia, seção de ofidiologia,

preparo dos soros antipeçonhentos, antiescorpiônico, serviços de disenteria

bacilar e da superintendência geral dos trabalhos de sangria e concen¬

tração de soros.

— Intensificação de intercâmbio científico com outros institutos con¬

gêneres no país e no exterior.

— Realização do 3.° curso de higiene para professores da rede esta¬

dual de ensino.

— Aumento do cultivo de pastagem.

— Obras de reparo e início da construção da Escola Rural.

— Pedido de envio de cascavéis da Bahia para o Butantan.

SciELO

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OLIVEIRA, J. L. Cronologia do Instituto Butantan (1888-1981) 1.* Parte. Mem. Inat. Butantan,

11-79, 1980/81.

— Superou o Instituto seu déficit, terminando o ano com 82:528?900

em caixa.

— O Instituto foi premiado com medalha de ouro na Segunda Expo¬

sição Industrial da Cidade de São Paulo.

— Foi quebrada a praxe de troca de soro por cobras que até então

existia, passando a serem pagas, em dinheiro, aos fornecedores.

— Até esse ano o Instituto Serumtherapico funcionava sem uma

organização definitiva.

1921

— Até 6 de setembro o cargo de diretor foi ocupado por Afrânio do

Amaral.

— Animais para imunização foram fornecidos pelo Regimento da

Cavalaria de São Paulo mediante acordo entre as Secretarias da Justiça

e do Interior, representando economia para Butantan na compra de

animais.

— Redução das despesas, aumento da produção estabilizando gradual¬

mente as finanças do Instituto.

— Incremento da seção agrícola com a instalação de oficina mecâ¬

nica, de ferreiro, seleiro, máquinas agrícolas.

— Implantado sistema de semi-entabulação de animais com economia

de gastos com rações.

— Inaugurado prédio da Escola Rural.

— Reforma de 8 casas de funcionários.

— Instalação da rede de esgoto.

— Necessidade de reformulação do sistema elétrico.

— O químico Alfredo de Araújo Lima, designado para Instituto de

Medicamentos Oficiais, se transferiu para o Laboratório de Análises.

— Distribuição dos Serviços Técnicos:

Lucas de Assumpção — seção de opoterapia e serviços anexos de

sangria de cabras e ovelhas.

José Maria Gomes — preparo das soluções medicamentosas, estudos

de cogumelos patogênicos e disenteria bacilar.

J. P. Fleury investigações sobre coccos e preparo de vacinas e soros

meningococos, estreptococos e gonococos.

Quando em comissão na Bahia, Afrânio do Amaral instalou o posto

antiofídico anexo à Faculdade de Medicina.

O assistente J. B. Arantes — pesquisas sobre hemogregarinas de

cobras e estudos sobre métodos de imunização para antitoxinas diftéricas;

preparo dos soros antipestoso e antidiftérico.

Lemos Monteiro — fiscalização dos produtos a serem entregues ao

consumo, imunização para antitoxina tetânica e a preparação de maleína

e tuberculina.

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OLIVEIRA, J, L. Cronologia do Instituto Butantan (1888-1981) !•* Parte. Mcm. Inst. Butantan, ^^/45:

11-79, 1980/81.

Fernando Paes de Barros — encarregado do Instituto de Medica¬

mentos Oficiais; apesar da pouca disponibilidade de verbas, prosseguiu

na pesquisa de vegetais e na produção de água destilada.

O botânico F. C. Hoehne — excursões de colheita de material, catalo¬

gação de material e publicação de dois trabalhos científicos.

Afrânio do Amaral — serviços de ofiologia, de concentração de soros;

publicou sete trabalhos. Os assistentes do Instituto pesquisaram e aten¬

deram a epizootia de peste bovina irrompida nas imediações de São Paulo.

— A transferência do cargo do Diretor para Rudolph Kraus em

6-9. Este novo diretor explicitou a necessidade de reorganização do

Instituto;

Péssima situação financeira, falta de uma contadoria organizada.

O contrato com a Casa Armbrust e Comp. terminou no mês de maio

de 1922, não devendo ser renovado.

A necessidade de organização de forma que a renda da venda dos

produtos seja revertida no próprio Instituto de forma a equilibrar as

despesas, sem que seja mantido o rígido esquema de poupança, que pre¬

judicou o desenvolvimento do Instituto.

Necessidade de aumentar o número dos cavalos para imunização,

aumentando conseqüentemente a produção de soros.

— Rudolph Kraus iniciou a produção de vacina antitífica, antes pre¬

parada no Instituto Bacteriológico. Esta vacina sendo gratuita, portanto,

onei’ava o Instituto.

— Foi iniciado o preparo do soro antigangrenoso.

— Teófilo Martins e Augusto Hencke (veterinários) foram encarre¬

gados do serviço de imunização de cavalos.

— A seção de concentração de soros se transferiria para junto da

seção de envasamento e acondicionamento dos produtos, reunindo, por¬

tanto, todas as seções de preparo de soros.

— Necessidade de reaparelhamento do Instituto e reparos nos prédios.

— Solicitação de reconhecimento, pelo Governo, da Caixa Beneficente

dos Empregados do Instituto e aumento de salários dos funcionários.

— Da necessidade de fabricar somente “produtos já conhecidos pela

ciência” e na programação de novos produtos estão: vacina anticarbun-

culosa para uso veterinário, tuberculina Denys, leite para proteinothera-

pia, vacina para lepra, soro antitetânico e antidiftérico de bovinos, AT.

de Behring. Para o diagnóstico biológico, soros precipitantes, hemolisinas,

autovacinas etc.

— Seção de opoterapia: necessita ser reorganizada e ser contratado

um técnico químico-biológico experimental. O diretor Kraus não queria

preparar produtos que não tivessem base científica.

— Rudolph Kraus dividiu o Instituto em seções de forma a promover

os assistentes a chefe de serviço e titulares, os atuais subassistentes,

aumentando os vencimentos de todos.

SciELO

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OLIVEIRA, J. L. Cronologia do Instituto Butantan (1888-1981) 1.® Parte. Mcm. Inst. Butantan,

11-79, 1980/81.

— Distribuição dos Serviços Técnicos;

Seção de ofiologia — Afrânio do Amaral; seção de toxinas e dosagem

de soros — J. B. Arantes; seção de vacinas — J. P. Fleury; seção de peste,

preparo de tuberculina, maleína e vacina anticarbunculosa — Lemos Mon¬

teiro; seção de microbiologia — José Maria Gomes; seção de diagnóstico

biológico — Lucas de Assumpção; seção de opoterapia-farmacêutico —

F. Paes de Barros.

— O Instituto de Medicamentos Oficiais estava fechado.

— O pessoal técnico foi aumentado com a contratação de dois sub-

assistentes: Paulo Marrey trabalhando com J. B. Arantes e Rocha Bote¬

lho junto de Afrânio do Amaral.

— A necessidade de os assistentes disporem de tempo maior para

pesquisa, daí a necessidade de o Instituto dispor de número maior de

técnicos para fabricação de soros e vacinas.

— Solicitou mais verbas para Biblioteca.

— Rudolph Kraus organizou conferências semanais entre os técnicos

para divulgação de artigos científicos; curso de Microbiologia para os

novos assistentes e para aperfeiçoamento dos médicos, confei-ências sobre

enfermidades infecciosas, sua profilaxia, vacinação e tratamento. Esses

cursos seriam programados análogos àqueles do Instituto Pasteur e Insti¬

tuto Koch.

— Rudolph Kraus propôs a fundação de uma Sociedade de Biologia,

que depois de implantada foi presidida por Adolpho Lindenberg.

— Organizou também conferências populares para divulgação cientí¬

fica sobre as enfermidades infecciosas para o público em geral.

— Kraus tencionava modificar o Museu do Instituto, até então sobre

cobras, ampliando-o para Museu de Higiene.

— Pesquisas em andamento:

Afrânio do Amaral — sistemática das serpentes.

J. B. Arantes — estudos sobre estado filtrável dos protozoários, sobre

os métodos de imunização em cavalos depois do descanso.

J. P. Fleury — estudo dos tipos de meningococos e pneumococos.

José Maria Gomes — estudos dos fungos e das blastomicis e da cultu¬

ra de “Peptospira icteróides”.

Lucas de Assumpção — preparo de antígenos e soros hemolíticos

para reações biológicas da sífilis, estudo sobre tuberculose e lepra.

Paulo Marrey — bacteriologia d’Herelli.

G. Hohne — sistemática de plantas.

— Projeto de ampliação das seções criando as de; protozoologia,

entomologia, parasitologia e química biológica experimental e para tanto

se deveria contratar especialistas europeus, com contratos de dois anos.

1922

— Foram reiteradas as solicitações do ano anterior ao Governo do

Estado para plena execução do plano administrativo de Rudolph Kraus:

1 SciELO

OLIVEIRA, J. L. Cronologria do Instituto Butantan (1888-1981) 1.* Parte. Ment. Inat. Butantan,

11-79, 1980/81.

ênfase à necessidade da venda dos produtos ser organizada de forma

comercial para que possa fornecer verbas necessárias e equilibrar as

despesas — o Instituto estava em déficit desde 1918.

— Afrânio do Amaral estava de licença, tendo viajado para os

Estados Unidos.

— J. P. Fleury se transferiu para o Instituto Bacteriológico.

— A redução do pessoal técnico prejudicando o desenvolvimento dos

trabalhos, agravado também pelos baixos salários pagos aos funcionários,

más condições das moradias dos funcionários.

— Necessidade de novas construções e reparo nos serpentários e

jardins; medidas para resolver o problema de transporte até o Instituto.

— Solicita apoio moral e material do Governo e justificou sua linha

de ação baseada na experiência em Institutos do exterior, ressaltando, no

programa, os objetivos do Instituto; fabricante de produtos para defesa

da Saúde Pública e de ser um centro de ciência, atualizado com o desen¬

volvimento das ciências e produzindo também trabalhos teóricos originais,

voltados à ciência aplicada.

— A necessidade de formar técnicos sorólogos com conhecimentos de

microbiologia.

— As conferências semanais no Instituto foram suspensas por ordem

superior.

— Os trabalhos científicos publicados no Instituto neste ano eram

relacionados com a sorologia.

— O Instituto de Medicamentos Oficiais foi anexado a nova seção de

Organoterapia.

— A seção de Botânica (horto Oswaldo Cruz) foi incorporada ao

Museu Paulista, sem ter sido consultado o diretor R. Kraus.

— Distribuição dos serviços técnicos:

Seção de ofiologia: Rocha Botelho substituindo Afrânio do Amaral;

pouca produção de soros por falta de cavalos para imunização.

Seção de peste: Lemos Monteiro.

Seção de toxinas e dosagem de soros (difteria, tétano, disenteria)

Paulo Marrey.

Seção de vacinas: Lucas de Assumpção, substituído depois por José

Maria Gomes.

Seção de soros antiinfecciosos: com a transferência de Fleury para

o Bacteriológico, a seção ficou a cargo de Lucas de Assumpção.

Seção de microbiologia; José Maria Gomes.

Seção de concentração de soros: Victor Salcedo.

Seção de imunização: Artur Teófilo Martins; Augusto Hencke, vete¬

rinário contratado, foi despedido por ordens superiores, sendo substituído

por veterinário da Força Pública.

Seção de sangria — José Salcedo.

SciELO

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OLIVEIRA, J. L. Cronologia do Instituto Butantan (1888-1981) !.• Parte. Mem. Inat. Butantan,

11-79, 1980/81.

Administração — Julião Joaquim de Freitas.

— Biblioteca;

Seção de desenho — Carlos Rodolph Fisher e auxiliar H. Chiarelli.

Seção de fotografia — Euclides Soares.

Seção de meios de cultura subdividida em:

a) esterilização de material infectado dos laboratórios;

b) feitura dos meios de cultura.

Encarregado: Antonio Alvarenga — coelheira.

Agrícola; Serafim Fontes.

Mecânica: João Nicacio Godói.

Seção de permuta de serpentes.

1923

— Rudolph Kraus em 9-7 solicitou ao Governo a rescisão do seu con¬

trato. Assumiu a direção do Instituto Serumterápico J. Bernardino Arantes

(Lemos Monteiro assinou relatório).

— O relatório anual se resumiu no fornecimento de dados referentes

à produção de soros e vacinas.

— Morreram 59 cavalos.

— Críticas ao trabalho de Kraus: número de cavalos excessivo e

fracos para imunização.

— Rudolph Kraus publicou “Noções Gerais sobre Cobras”.

1924

— Em setembro de 1924, Vital Brazil voltou à direção do Instituto

Serumtherápico convidado pelo Governo do Estado (Carlos de Campos)

com contrato de quatro anos.

— Vital Brazil relatou, nesse relatório, os motivos de sua demissão

em 1919: sua oposição à política do Governo em transformar o Instituto

em “fábrica de soros, vacinas, outros produtos biológicos e solutos medi¬

camentosos com preocupação industrial da concorrência a outras fábricas”

0 que, para tanto, foi realizado pelo Governo contrato comercial com a

Casa Armbrust, muito oneroso para o Instituto. “Além desse erro, de

gravíssimas consequências para o futuro do estabelecimento, outro, de não

menos alcance, era cometido à revelia da vontade e do parecer de quem até

aquela data havia guiado com certa liberdade os destinos da instituição.

Refiro-me à criação do Instituto de Veterinária, subordinado à direção

da Indústria Pastoril da Secretaria da Agricultura, instalado nos terrenos

de Butantan e com orientação científica do diretor deste estabelecimento.”

Da dissociação da direção do Instituto e da inconveniência de se instalar

uma clínica de animais doentes junto a cocheiras e pastagens de animais

destinados à produção de soros terapêuticos residiu a oposição de Vital

Brazil.

SciELO

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OLIVEIRA, J. L. Cronologia do Instituto Butantan (1888-1981) 1.* Parte. Mem. Inat. Butantan, ^4/^5:

11-79, 1980/81.

— 0 Instituto de Quinina Oficial instalado com grande dispêndios,

com máquinas, aparelhos e pessoal técnico depois não podendo funcionar

por falta de matéria-prima, sendo então transformado em Instituto de

Medicamentos Oficiais, também inoperante.

— O contrato com a Casa Armbrust terminou, não concretizando a

transformação de Butantan em indústria, o Instituto de Veterinária foi

transferido e do Instituto de Medicamentos Oficiais só restou o edifício.

— As direções interinas não seguiram a linha administrativa ante¬

rior, a atuação do Prof. Kraus foi conflituosa com os assistentes e a crise

se estabeleceu no Instituto, levando mesmo o governo quase a fechar o

estabelecimento.

— Foi necessário dispensar “elementos perturbadores irredutíveis da

boa ordem” e admissão de novos elementos.

— A distribuição dos serviços técnicos ficou assim:

José Bernardino Arantes: organização dos serviços de protozoologia.

Lemos Monteiro: serviços de tétano e difteria.

Paulo Marrey: serviços de peste, disenteria, vacina tífica.

Lucas de Assumpção: preparo dos soros e vacinas antimeningocócica,

antiestreptocócica, antigonocócica e vacina estafilocócica.

Rocha Botelho: vacina jenneriana, tuberculina, maleína.

J. Vellard: organização de Museu e da sistemática de aracnídeos.

Vital Brazil: direção, preparo de soros antipeçonhentos e estudos

sobre venenos.

— O prédio antes ocupado pelo Instituto de Veterinária está sendo

adaptado para o Instituto Vacinogênico, que lá já estava funcionando,

quando Vital Brazil assumiu a direção em Butantan.

— O prédio do Instituto de Medicamentos Oficiais foi adaptado para

abrigar o Museu de ofídios e animais peçonhentos, peças anatômicas e

quadros sinóticos para educação sanitária do povo e a seção de História

Natural.

— Programa de trabalhos e estudos:

Preparo de todos os soros e vacinas para defesa sanitária do Estado

e estudo de todas as questões que possam interessar a saúde pública.

Retomada dos estudos sobre ofidismo e outros animais peçonhentos;

estudos de imunidade local com suas aplicações das enterovacinas de

interesse imediato para a defesa sanitária.

— No período de afastamento de Vital Brazil aumentou o número

de fornecedores de cobras por ter sido abolida a prática de troca de

serpentes por soros e passando a ser pago em dinheiro. Quebra portanto

do objetivo principal “a obtenção do material indispensável ao preparo do

soro e 0 de colocar estes produtos nas mãos dos agricultores”. A propa¬

ganda visando a remessa de serpentes deve ser paralela à do emprego dos

soros, pois é preciso não esquecer que em curar as desgraçadas vítimas

do ofidismo está a finalidade de todo nosso esforço humanitário. Este

fato também contribuiu para o desequilíbrio financeiro do Instituto.

SciELO

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OLIVEIRA, J. L. Cronologia do Instituto Butantan (1888-1981) l."* Parte. Mcm. Inat. Butantan, Í4/45:

11-79, 1980/81.

— De 5 a 28 de julho, período de Revolução foi suspensa a imuniza¬

ção de animais em serviço de soros antipeçonhentos, pela possibilidade

de falta de recursos e pela anormalidade dos serviços de transporte.

— Em decorrência da Revolução de 24, houve aumento de produção

do soro antitetânico, então muito solicitado.

1925

— Pelo decreto 3.876 de 11-7-1925 art. 58 os Institutos Bacteriológico,

Soroterápico e Vacinogênico do Serviço Sanitário se localizarão em Butan¬

tan e constituirão todos sob o nome de Instituto Butantan.

— O Butantan continuou com seu programa de auxílio técnico ao

Serviço Sanitário preparando soros e vacinas para defesa sanitária e,

com a fusão dos três institutos, teve ampliadas suas atribuições, cabendo-

-Ihes também os exames bacterioscópicos e bacteriológicos e preparo da

vacina jenneriana.

— O primeiro posto de exames ficou instalado na antiga sede do

Instituto Bacteriológico, sob a direção do assistente Lucas de Assumpção,

lá trabalhando também Sebastião Calazans, Bruno Rangel Pestana e

Eduardo Vaz.

— Distribuição dos Serviços Técnicos:

Lucas de Assumpção além da direção do posto de exames bacterioló¬

gicos e bacterioscópicos ficou encarregado do preparo dos soros antiestrep-

tocócico, antipneumocócico, antigonocócico e antimeningocócico e das res¬

pectivas vacinas.

Rocha Botelho (sai do Instituto em agosto) e passa para Bulcão

Ribas o preparo da vacina jenneriana, inspeção sanitária dos animais do

estabelecimento e necrópsias dos animais que morreram durante o período

de imunização.

Paulo Marrey e Eduardo Vaz: preparo dos soros e vacinas (soro e

vacina antipestosa, soro antidisentérico e vacina tífica).

Lemos Monteiro: preparo dos soros antidiftérico e antitetânico.

Sebastião Calazans: exames bacteriológicos dos produtos.

Bruno Rangel Pestana: preparo e dosagem da tuberculina e maleína.

Afrânio do Amaral: sistemática de ofídios até sua transferência para

o Museu Paulista, passando este serviço para J. Vellard, que também se

incumbiu da direção do Museu e da sistemática dos aracnídeos, batráquios

e outros animais peçonhentos.

José Bernardino Arantes: seção de protozoologia, até sua saída em

primeiro de agosto.

Vital Brazil: além da direção do Butantan, se encarregou do preparo

dos soros antipeçonhentos. Em colaboração com J. Vellard, o estudo dos

venenos de aracnídios, batráquios e outros animais peçonhentos.

— Aumento do pessoal: foram contratados Eduardo Vaz, J. Vellard,

Jaime Pereira, José Bulcão Ribas; J. Pires Fleury foi removido para o

Instituto Butantan a pedido. Com a fusão dos institutos passaram a fazer

parte do quadro técnico os assistentes do Bacteriológico: Sebastião Cala-

SciELO

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OLIVEIRA, J. L. Cronoloffia do Instituto Butantan (1888-1981) 1.* Parte. Mem. Inst. Butantan, hit/itS:

11-79, 1980/81.

zans e Bruno Rangel Pestana. Continuaram em exercício dos cargos:

Paulo Marrey, Lucas de Assumpção e Lemos Monteiro. Foram nomeados

funcionários para administração: escriturários, guarda-livros, bibliotecá¬

rios, zeladores de laboratórios, motoristas e vários auxiliares técnicos e

serventes.

— Em 24-12 foi inaugurado o Pavilhão João Florêncio Gomes onde

se instalou o Museu de Animais Peçonhentos e Saúde Pública e gabinetes

de História Natural (antigo prédio do Instituto de Medicamentos Oficiais).

— Museu (pequeno histórico).

— O material do Museu começou a ser colecionado desde 1896 no

Instituto Bacteriológico por Vitar Brazil. Esse material era constituído

exclusivamente por serpentes conservadas em álcool. Com o preparo de

soros antipeçonhentos em 1901, já em Butantan, e com a propaganda

entre os agricultores foi possível aumentar a coleção consideravelmente.

Em 1910, já dispunha de uma regular coleção de ofídios nacionais e outros

obtidos através de permuta com os principais Museus dos Estados Unidos

e Europa.

Por essa época entra João Florêncio Gomes (morreu em junho de

1918) que logo se dedica a estudos da sistemática dos ofídios e identifi¬

cação de novas espécies. A ele sucedeu Afrânio do Amaral, que prosse¬

guiu no estudo da biologia e sistemática das serpentes; transferido em

1925, para o Museu Paulista (Ipii-anga) foi substituído por J. Vellard,

a quem coube a incumbência de reorganizar o material do Museu, dis-

pondo-o convenientemente para exposição ao público. Dado o espaço insu¬

ficiente de que dispunha o Museu, em uma das salas do Edifício Central,

foi adaptado o prédio antes destinado ao Instituto dos Medicamentos

Oficiais, para a instalação do pavilhão de História Natural, composto

do laboratório, gabinete de estudo, depósito das coleções, sala de desenho

e um grande salão para exposição do material ao público.

— Publicação de seis trabalhos de Vital Brazil e J. Vellard sobre

estudos dos venenos.

— Normalizada a produção de soros antipeçonhentos, prejudicada

no ano anterior, pelo movimento revolucionário, que afetou o transporte

ferroviário, reduzindo assim o número de serpentes que chegavam ao

Instituto.

— Foi publicado o segundo volume das “Memórias do Instituto

Butantan”.

1926

— Distribuição dos trabalhos técnicos:

Lucas de Assumpção: encarregado do Posto Bacteriológico, incum¬

bido de preparo dos soros antimeningocócico, antiestreptocócico, antigo-

nocócico e das respectivas vacinas. Estudos sobre reação de Wasserman

e sobre tipos de meningocócica.

Joaquim Pires Fleury, ajudante do Posto Bacteriológico, encarre¬

gado do soro e da vacina antipestosa.

SciELO

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OLIVEIRA, J. L. CronoloGfia do Instituto Butantan (1888-1981) 1.‘ Parte. Mem. Inst. Butania-n,

11-79, 1980/81.

Eduardo Vaz, encarregado do soro antidisentérico, da vacina tífica

T.A.B., por via oral e hipodérmica e da vacina BCG, estudos sobre imuni¬

dade local.

Lemos Monteiro, encarregado do preparo do soro antidiftérico e da

anatoxina diftérica para uso profilático. Estudos dos vírus filtráveis.

Jaime Pereira, fisiologista, incumbido do curso de aperfeiçoamento

e da pesquisa sobre venenos.

Bruno Rangel Pestana, encarregado do preparo da tuberculina e

maleína.

Sebastião Calazans, encarregado do preparo do soro antitetânico

e do soro antiescarlatinoso e do exame bacteriológico dos produtos do

Instituto.

José Bulcão Ribas (veterinário) incumbido da fiscalização dos ani¬

mais produtores e do preparo da vacina jenneriana.

J.A. Vellard, (naturalista), encarregado do Museu, estudo e classi¬

ficação de ofídios e aracnídios. Em colaboração com o diretor preparou

soros contra o veneno das aranhas e estudos sobre animais peçonhentos.

Paulo Marrey esteve em comissão de estudos na Europa, especiali-

zando-se no grupo dos germes anaeróbios, no Instituto Pasteur.

Vital Brazil, (Diretor), preparo dos soros antipeçonhentos estudos

sobre venenos.

— Trabalhos de pesquisa: foram publicados no III volume das

Memórias do Instituto Butantan e em outras publicações especializadas

um total de 17 trabalhos científicos versando sobre estudos dos venenos,

sobre imunização, estudos da sífilis, vacinas etc.

— Produtos do Instituto; vacina BCG; vacina tífica por via oral e

hipodérmica; soro antidisentérico (usado largamente no combate aos

surtos epidêmicos na Capital e interior) ; soro antipestoso (casos ocorri¬

dos na Capital e outros pontos do país) ; soro antidiftérico e anatoxina

diftérica para uso profilático; grande procura vacina jenneriana com

produção de cinco milhões de doses dada a epidemia ocorrida na Capital

da República (R. de Janeiro) e em estados vizinhos. Em São Paulo,

graças a intensa vacinação, houve pequeno número de vítimas.

— “Ofidismo é um dos objetivos do Instituto desde sua fundação e

tem contribuído para o renome do estabelecimento.”

Período

N.° de serpentes

recebidas

N.° de ampolas

de soro distribuídas

1901-1905

958

12.566

1906-1910

8.342

21.325

1911-1915

23.193

33.960

1916-1920

37.231

39.072

1921-1925

48.542

29.332

1926

12.052

10.000

(maior n.°

anual) (maior n.° anual)

OLIVEIRA, J. L. Cronologia do Instituto Butantan (1888-1981) 1.*^ Parte. Mem. Inst. Butantan, 44/45:

11-79, 1980/81.

— Para avaliação dos efeitos do tratamento soroterápico foram utili¬

zados três meios: boletins distribuídos com as ampolas de soro; informa¬

ções pedidas diretamente às prefeituras e a comparação dos coeficientes

de mortalidade por ofidismo, do período anterior à vulgarização do trata¬

mento e do período em que se vulgarizou esse tratamento. A partir de

1902, a pedido de Vital Brazil, foi iniciada a Estatística Demógrafo-Sani-

tária para registrar os óbitos por ofidismo.

— Verificou-se que a partir de 1907, houve queda anual progressiva

da mortalidade por acidente ofídico coincidindo com maior divulgação e

distribuição dos soros.

— Necessidade do Instituto:

Solicitação do Diretor para que seja enviado anualmente um dos

assistentes para viagem de estudos nos grandes centros do exterior para

aperfeiçoamento técnico do Instituto.

Com a reforma do Serviço Sanitário em 1918, da formalização legal

da exigência do tempo integral dos pesquisadores, Vital Brazil apontou a

necessidade desses pesquisadores residirem em terras do Butantan, facili¬

tando a plena utilização da mão de obra e de forma a resolver o problema

de locomoção do centro da cidade para o Instituto.

Necessidade de aumento de pessoal especializado: um assistente de

histologia patológica e outro de protozoologia.

Necessidade de construção de casa para o diretor e para funcioná¬

rios e outras reformas nos edifícios.

— Paulo Marrey que esteve em Paris freqüentando curso de micro-

biologia no Instituto Pasteur critica o baixo nível de ensino e a decadên¬

cia daquela instituição, alertando quanto aos perigos de supervalorizar

os elementos estrangeiros em nossa terra.

— Foi publicado III Volume das “Memórias do Instituto Butantan”.

— Em início de maio, Vital Brazil adoeceu, ficando um mês inter¬

nado no Instituto Paulista.

— Quando reassumiu seu posto partiu em comissão para o Rio de

Janeiro, de onde regressou a 14 de agosto.

— Impossibilitado de permanecer em São Paulo por não estar plena¬

mente restabelecido. Vital Brazil solicitou sua demissão do cargo de

Diretor do Instituto Butantan.

— Durante sua ausência e depois, com seu afastamento difinitivo,

respondeu interinamente pela direção do Instituto, Lucas de Assumpção.

— Em três de outubro a direção do Posto Bacteriológico do Instituto,

antigo Instituto Bacteriológico, passou para Carvalho Lima; havia sido

dirigido por Lucas de Assumpção desde 1925.

— Distribuição dos Serviços Técnicos:

José Bernardino Arantes: preparo dos soros antidiftérico, antipes-

toso, vacina antipestosa, tuberculina e maleína.

Paulo Marrey: preparo dos soros antitetânico e antigangrenoso

(seção micróbios anaeróbios).

1 SciELO

OLIVEIRA, J. L. Cronologia do Instituto Butantan (1888-1981) 1.® Parte. Mcm. Inst. Butantan, Uh/JtS:

11-79, 1980/81.

Eduardo Vaz: preparo do soro antidisentérico.

Lucas de Assumpção, além da direção do posto bacteriológico e depois

da direção do TB, se encarregou do preparo dos soros: antiofídico, anti-

crotálico, antibotrópico, soros e vacinas antimeningocócica, antiestrepto-

cócica, antipneumocócica, antigonocócica, seleção de animais para pro¬

dução de soros.

Lemos Monteiro: preparo da vacina jenneriana.

Eduardo Vaz: preparo da vacina contra tuberculose (BCG), anti-

tífica e antidisentérica, coleção de cultura.

Antonio Moui'ão da Serpa Pinto: (farmacêutico do almoxarifado e

Farmácia do Serviço Sanitário) respondeu pela seção de hipodermia

e soluções medicamentosas.

José C. Ribas: serviços de veterinária.

Alcides Prado: malariologista do Serviço Sanitário adido a éste

Instituto.

— Desde o ano anterior Vital Brazil orientava o assistente Lucas

de Assumpção no preparo dos soros antiofídico e em 26 de abril de 1927

passava esse serviço a seu assistente.

— A produção de soros antipeçonhentos foi de 11.000 ampolas nes¬

te ano.

— Necessitava-se aumentar a propaganda para o envio de serpentes.

O sistema de troca era quatro serpentes por um tubo de soro; por seis

cobras, o Instituto fornecia também uma seringa com duas agulhas.

— No início a permuta era de uma cobra por tudo de soro; de 1920

a 24 (período de afastamento de Vital Brazil) o instituto deveria pagar

quatro mil réis por cada cobra.

— Nestes últimos dois anos, teve aumentado o n.° de jararacas

enviadas ao instituto devido à propaganda nos estados do Paraná e Sta.

Catarina, onde a quantidade de jararacas era grande. E o aumento de

cascavéis foi devido à colônia japonesa de São Paulo, que contribuía

para envio dessas cobras, muito abundantes em nosso Estado.

— A taxa de mortalidade por acidente ofídico caiu muito, sendo

nos últimos anos de 0,9 a 0,8 por mil. No ano de 1927 a mortalidade

total foi de 92.207 sendo, por ofidismo, apenas 84.

— Bruno Rangel Pestana e Joaquim Pires Fleury passaram a ser

assistentes no Posto Bacteriológico; Seba.stião Calazans foi comissionado

para Pelotas e J. Vellard retirou-se do instituto.

— Solicitação ao governo da concessão de vencimentos de tempo

integral aos assistentes e do envio de cientistas para aperfeiçoamento

no exterior.

1928

— Afrânio do Amaral foi nomeado diretor do Instituto Butantan,

assumindo em 12-03.

— Distribuição dos Serviços Técnicos (Reorganização dos serviços) :

SciELO

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OLIVEIRA, J. L. Cronologia do Instituto Butantan (1888-1981) 1.* Parte. A/cm. hist. Butantan,

11-79, 1980/81.

J.B. Arantes: soi’os antipeçonhentos (antivenenos crotálico, botró-

pico monovalente e polivalente, ofídico, escorpiônico, licósico ectenolicó-

sico) ; soro antidisentérico, antipestoso e diagnóstico anátomo-patológico.

Sempre que o diretor se ausentou, respondeu pelo expediente da diretoria.

Lemos Monteiro: vacina jenneriana e investigações gerais sobre

vírus (foi criada seção de vírus).

Paulo M. de B. Marrey: serviço de toxina tetânica e diftérica; anti-

toxinas tetânica e diftérica: Prosseguiu seus estudos sobre anaeróbios,

visando produzir soros antigangrenosos.

Fernando Paes de Barros, que veio transferido do Laboratório da

Inspetoria de Alimentação Pública, ocupou-se da morfologia e classifica¬

ção de bactérias; museu de culturas; orientação científica do serviço de

meios de cultura; vacinas bacterianas injetáveis (tífica, paratífica, disen-

térica) vacina per-os; filtrados bacterianos (antivírus de Besi-edka).

Luiz Viana: serviço de coccos em geral (identificação e conservação

e preparo de vacinas correspondentes e os devidos soros). Preparação

para iniciar a pi'odução de soro antiescarlatinoso.

Sebastião Calazans continuou em comissão em Pelotas.

Eduardo Vaz pediu demissão em 8 de maio.

Lucas de Assumpção pediu transferência para o Instituto de Higiene.

Afrânio do Amaral: direção, seção de ofiologia, museu e registro

de serpentes.

— Reorganização das seções, reforma e modernização das instalações.

— Necessidade de contratar maior número de técnicos superiores e

reaparelhamento do Instituto.

— A diretoria do Instituto foi autorizada pelo governo a aplicar a

verba oriunda da venda de seus produtos no próprio Instituto.

— Instalação de sala de refeições para funcionários; compra de

aparelhos: raspadeira elétrica, pipetas padrão, gasómetro tipo Tangye

Suction; aquisição de cavalos (131 cavalos).

— Foi derrubado grupo de casas de empregados o chamado “cortiço”

em péssimas condições, bem como a “cocheira velha” (atual Museu His¬

tórico) .

— Início da construção de casas para empregados.

— Reforma da antiga casa da fazenda para residência temporária

do diretor (atual seção de herpetologia) para ulterior aproveitamento

como sede das escolas reunidas de Butantan.

— Instalação do Posto de Higiene do Butantan destinado ao atendi¬

mento de funcionários e crianças residentes no Instituto e redondezas.

— Instalação de bomba para captação de água do Ribeirão Pira-

jussara.

— Revestimento

Instituto.

e impermeabilização das estradas internas do

— Seção agrícola reformulada, com seção de obras; início constru¬

ção de biotério geral para criação de coelhos, cobaias, pombos e outros

SciELO

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OLIVEIRA, J. L. Cronologia do Instituto Butantan (1888-1931) 1.® Parte. Mcin. Inst. Butantan,

11-79, 1980/81.

pequenos animais; criação de animais e mesmo de hortas para alimen¬

tação de funcionários residentes; reaproveitamento de lixo para adubação.

— Horários fixos para saída dos automóveis de condução de funcio¬

nários e inauguração de um ônibus, montado nas oficinas do Instituto.

Foi aberta estrada de rodagem de Pinheiros a Butantan pelo governo.

— Comissões:

José Lemos Monteiro esteve no Rio de Janeiro para acompanhar

trabalhos sobre transmissão experimental da febre amarela e preparo

de vacina e soro antiamarílico.

Afrânio do Amaral esteve nos USA de novembro de 1925 a 11 de

março de 1927 montando o Antivenin Inst. of America.

— Solicitação ao Governo do Estado:

Aumento do salário dos funcionários equiparando-os aos do Instituto

Biológico (Secr. da Agricult.) com salários quatro vezes maiores.

Reforma do Instituto de forma a ampliar suas finalidades e esfera

de ação, transformando-o em um laboratório de Medicina Experimental,

dedicado especialmente a investigações de Patologia humana.

Aumento do número de assistentes, devendo o Instituto dispor de:

um diretor encarregado de seção; dez assistentes encarregados de seção;

cinco assistentes de pesquisa; um adjunto, encarregado do Horto Osvaldo

Cruz; três preparadores; um conservador do Museu e das coleções; seis

técnicos de laboratórios; dezesseis auxiliares de laboratórios; um secre¬

tário-tradutor, além dos atuais servidores administrativos.

Construção de serpentário, de forma científica, para diminuir a

mortalidade de ofídios.

— Neste ano a produção de vacina jenneriana possibilitaria a vaci¬

nação de 1.982.600 pessoas, sendo fornecida para vários Estados.

— Foram produzidos ainda experimentalmente soros para trata¬

mento de coqueluche.

O governo ainda não atendeu solicitação do ano anterior de aumento

de verbas e pessoal, impossibilitando as melhorias programadas.

— Distribuição dos Serviços Técnicos:

J.B. Arantes: antivenenos (soros antipeçonhentos) serviço de peste

e pesquisas histopatológicas.

P.M. Barros Marre.v: serviço de tétano e culturas de anaeróbios;

preparo de antitoxinas e anatoxina diftérica e soro antidisentérico.

J. Travassos da Rosa, assistente interino, na vaga de Camargo

Calazans, em comissão no Instituto de Higiene de Pelotas. Ocupou-se

da seção de soros antibacterianos, tendo reiniciado o serviço de preparo

de bacterinas contra os diversos coccos patogênicos.

Luiz Viana voltou para Maranhão, sua terra natal, ficando lá como

assistente da filial do Instituto Oswaldo Cruz.

F. Paes de Barros seção de bacterioterapia. Museu de Culturas e

preparo de meios de cultura.

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OLIVEIRA, J. L. Cronologia do Instituto Butantan (1888-1981) 1.» Parte. Mem. Inst. Butanian, U/i5:

11-79, 1980/81.

Cícero Neiva substituiu Bulcão Ribas. Incumbiu-se da revisão do

grupo de germes disentéricos e paradisentéricos.

Afrânio do Amaral ofiologia e zoologia médica.

J. Lemos Monteiro seção de vírus e laboratório vacínico, auxiliado

por R. Braga Godinho, nomeado assistente.

— Aumento sistemático do recebimento de serpentes.

— Publicação de vários trabalhos científicos de Lemos Monteiro (7)

Afrânio do Amaral (18).

_ A redução de verbas e de pessoal técnico do Instituto, prejudi¬

cando seu desenvolvimento.

— Redução de cavalos imunizados.

— Perda da produção de forragem, devido a enchentes do Rio

Pinheiros.

— Terminadas as reformas iniciadas no ano anterior.

_ Era projeto do Diretor, iniciar reformas das salas de sangria,

meios de cultura, concentração de plasma, filtração, distribuição e acon¬

dicionamento de produtos. Reformas do biotério anexo ao Laboratório

Central e do cobril das espécies venenosas.

_ Não foi destacado um inspetor sanitário ou médico para tomar

conta do Posto de Higiene, que só funcionou alguns meses.

— Reorganização dos serviços de contabilidade.

— Foi autorizada a contratação de um bioquímico estrangeiro D.

von Klobusitzky.

— Foram instalados dois laboratórios para estudos sobre vírus fil¬

tráveis, sendo estudados a febre amarela e o vírus tuberculoso.

— Foram encomendados pelo Instituto 100 macacos rhesus e feitas as

instalações para os trabalhos experimentais de febre amarela.

— Foi iniciado o fornecimento de vacina BCG para uso subcutâneo

para imunização de adolescentes e adultos. Foi publicado o IV volume das

“Memórias do Instituto Butantan”.

— Surgiu nos arredores de São Paulo infecção desconhecida que

matava 80% dos doentes, (tifo exantemático).

— O Posto Bacteriológico estava ligado ao Butantan apenas for-

malmente.

Apesar de contar com apenas sete assistentes e da redução orça¬

mentária, o Instituto Butantan apresentou situação administrativa e

econômica favorável, precisando, no entanto, da efetivação da reorga¬

nização geral do Instituto.

— Distribuição dos Trabalhos Técnicos:

Lemos Monteiro; laboratório Central: seções correspondentes à

imunidade ativa e passiva; restabelecimento da produção de antitoxina

tetânica.

SciELO

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OLIVEIRA, J. L. Cronologia do Instituto Butantan (1888-1981) 1.® Parte. Mem. Inst. Butantan, i4/45:

11-79, 1980/81.

J.B. Arantes antivenenos, serviço de peste, pesquisas histopatoló-

gicas e serviço de difteria.

J. Travassos da Kosa produção de bacterinas e de soros antibacte-

rianos; início do preparo do soro antiestreptoescarlatinoso e estudos sobre

sorologia.

C. Neiva produção soro antidisentérico e reorganização geral do

Museu.

S. C. Calazans reassumiu seu cargo, trabalhando no Butantan e no

Posto Bacteriológico. Estava encarregado do serviço de preparo do soro

antigangrenoso, produção de bacterinas tífico-paratíficas e disentéricas.

— Laboratório Experimental (Lemos Monteiro) superintendência

da seção de vírus e virusterapia, estudos sobre febre amarela experimental

e tuberculose.

— Laboratório Vacínico da Seção de Vírus (R. B. Godinho) aper¬

feiçoamento dos processos técnicos da vacina variólica.

— Seção de Ofiologia e Zoologia Médica: Afrânio do Amaral.

— Contratação:

Alcides Prado (malariologista) estudos sobre questões concernentes

à entomologia e parasitologia, iniciando a organização das coleções da

seção.

Dionysio von Klobusitzky especialista em físico-química em institutos

austro-húngaros e alemães, que aqui montaria o primeiro laboratório de

físico-química para pesquisas sobre os fenômenos de imunidade e aperfei¬

çoamento dos métodos sorológicos.

— Foi destacado o inspetor C.A. do Espírito Santo como encarre¬

gado do Posto de Higiene, que atendeu em dez meses de funcionamento

a 2.796 pessoas. Foi destacada para serviço no Posto de Higiene a educa¬

dora sanitária Nadia Campeio de Souza.

— Trabalhos agrícolas e de construção:

Construção de duas casas e reformas de outras quatro do tipo rural.

Reforma e instalação definitiva da seção de meios de cultura e de

esterilização de material.

Canalização de águas pluviais.

Início da construção da residência para diretor.

— O serviço de transporte passava a ser feito por uma empresa

particular.

— Diminuição do recebimento de cobras devido:

a) à crise econômica, que resultou no fechamento de muitas fazen¬

das e redução de colonos e b) ao movimento revolucionário de outubro

com a interrupção do tráfego ferroviário.

— Foi sugerida a reorganização geral do Instituto e sua separação

do Serviço Sanitário, de forma a lhe dar maior autonomia financeira e

de desenvolvimento.

SciELO

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OLIVEIRA, J. L. Cronologia do Instituto Butantan (1888-1981) Parte. Mem. Inat. Butantan,

11-79, 1980/81.

— Foram publicados vinte e cinco trabalhos científicos originais,

sendo sete deles sobre ofiologia e de autoria de Afrânio do Amaral, publi¬

cados no IV volume das Memórias do Instituto. O V volume, já no

prelo, correspondia ao ano de 1930, com trabalhos de Lemos Monteiro,

J. Travassos, A. do Amaral, C. Neiva e D. Klobusitzky.

Os dados referentes a 1931 e 1932 foram obtidos através de con¬

sulta ao Decreto 4.941 de 21-03-1931 que reorganizou o Instituto Butantan

e da publicação de Afrânio do Amaral “Cinco Anos de Reorganização do

Instituto Butantan” à luz do seu 32.° relatório anual, janeiro 1933.

— O decreto n.° 4.891 de 13-02-1931 desanexava da Diretoria

Geral do Serviço Sanitário do Estado o Instituto Butantan que passava

a ser subordinado à Secretaria da Educação e da Saúde Pública.

— O artigo 40 do mesmo decreto desanexava o Instituto Bacterio¬

lógico do Instituto Butantan.

— O Instituto Butantan foi reorganizado como um centro de medi¬

cina experimental tendo por fim:

a) realizar toda sorte de trabalhos científicos sobre animais

venenosos;

b) estudar questões referentes à patologia humana ou a ela apli¬

cáveis, investigando especialmente os fenômenos de imunidade e outros

que surgirem no decurso dos trabalhos, de acordo com a tradição do

estabelecimento;

c) preparar produtos biológicos necessários à defesa sanitária e

substâncias empregadas em terapêutica humana;

d) realizar investigações sobre plantas medicinais brasileiras, tra¬

tando de isolar seus princípios ativos aplicáveis em medicina humana,

aproveitando as instalações do antigo Horto Osvi^aldo Cruz;

e) fiscalizar o comércio de produtos biológicos, aferindo aqueles

que tiverem aplicação na terapêutica ou na profilaxia de enfermidades

humanas;

f) realizar excursões científicas ao interior para o estudo de molés¬

tias, dentro das finalidades do Instituto;

g) instalar e manter postos antiofídicos ou filiais onde for jul¬

gado conveniente, a fim de estender às zonas rurais o benefício de

sua influência;

h) organizar e manter cursos práticos de especialização e de divul¬

gação científica, dentro de suas finalidades;

i) divulgar amplamente, por meio de publicações, os resultados de

seus estudos;

j) estabelecer contato e permuta com outros centros científicos,

para manter-se em dia com os progressos de Medicina Experimental;

k) cobrar as taxas fixadas pelo regulamento de fiscalização de

produtos biológicos;

l) aceitar doações, mediante prévia autorização do Governo;

Art. 2.° — Para a boa marcha dos trabalhos, os serviços do Insti¬

tuto Butantan ficariam divididos em dois grupos:

SciELO

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OLIVEIRA, J. L. Cronologia do Instituto Butantan (1888-1981) Parte. Mem. Inat. Butantan,

11-79, 1980/81.

a) serviços administrativos, compreendendo a Diretoria com as

Seções de Administração, Animais Imunizados e Culturas e obras;

b) serviços técnicos, sob a superintendência do Diretor, que os

distribuirá em Seções, de acordo com o regulamento interno do Instituto.

— Foi instituido o regime de tempo integral para os assistentes-

-chefes.

— Foram instituídas as escolas rurais no Butantan.

— O Instituto fornecerá gratuitamente ao Serviço Sanitário os

produtos solicitados e o excesso da produção seria vendida e a renda

revertida no próprio Instituto.

— O Instituto deveria incrementar sua produção industrial e orga¬

nizaria uma “Seção comercial, pondo a sua testa um profissional de

reconhecida competência e idoneidade”.

— A seção de Protozoologia e Parasitologia ficava provisoriamente

anexa à de Ofiologia e Zoologia Médica, a cargo do diretor.

— O quadro funcional do Instituto ficava assim:

a) serviços administrativos, na diretoria: um diretor-superinten¬

dente, um bibliotecário, um ajudante de bibliotecário, um desenhista-cero-

plasta, um fotomicrografista-adjunto, um preparador, dois serventes; na

administração: um administrador-almoxarife, um guarda-livros, um aju¬

dante de guarda-livros, um protocolista, três auxiliares de escrita, um

porteiro-telefonista, quatro motoristas, quatro serventes. Na seção de

animais imunizados: um chefe de cocheira, oito serventes. Na seção de

culturas e obras: um chefe, um jardineiro, dez serventes;

b) serviços técnicos nas diversas seções: quatro assistentes-chefes,

cinco assistentes, dois preparadores, doze auxiliares técnicos e doze ser¬

ventes técnicos.

— O decreto 4.998 de 27-04 dava regulamento ao decreto 4.941 de

21-03 que reorganizou o Instituto.

— Ao diretor-superintendente competia entre outras funções:

a) orientar e dirigir os trabalhos técnicos e administrativos;

b) superintender, como assistente-chefe, os serviços da seção de

Ofiologia e Zoologia Médica e bem assim os de Protozoologia e Parasito¬

logia, enquanto esta estiver anexa àquela;

c) designar funcionários para execução dos serviços técnicos admi¬

nistrativos;

d) propor ao governo nomes para o preenchimento dos cargos de

nomeação ou de contrato criados, ou que se vagarem;

e) contratar, dispensar, licenciar e punir os motoristas, serventes-

-técnicos, serventes e jardineiro constantes do quadro e admitir artífices e

operários, dentro dos limites das verbas do estabelecimento;

f) organizar o programa de concursos para o preenchimento de

vagas do quadro, dirigindo-os pessoalmente e designando entre os funcio¬

nários superiores do Instituto os necessários examinadores, a juízo do

governo;

SciELO

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OLIVEIRA, J. L. Cronologia do Instituto Butantan (1888-1981) 1.* Parte. Mcm. In$t. Butantan, 44/45:

11-79, 1980/81.

g) propor ao governo nomes de funcionários para fazerem excur¬

sões científicas ou viagens de estudo, arbitrando-lhes diárias, de acordo

com 0 governo;

h) apresentar relatórios anuais sobre os trabalhos da repartição,

com sugestões sobre os meios de aumentar a eficiência dos serviços;

i) fiscalizar a confecção das “Memórias” e outras publicações cien¬

tíficas do Instituto;

j) informar, sempre que lhe for ordenado pelo governo, sobre a

marcha dos serviços do Instituto;

k) apresentar em tempo, ao governo, dados para a confecção do

orçamento no qual deverá ser incluída a verba para pagamento de tempo

integral ao pessoal técnico superior.

— Ao administrador-almoxarife competia entre outras funções:

a) manter em dia e em ordem os serviços de administração, expe¬

diente, registro, escrituração e movimento dos funcionários;

b) adquirir e distribuir pelas seções o material necessário, fiscali¬

zando 0 seu emprego e conservação;

c) organizar e manter em dia os serviços do almoxarifado apresen¬

tando um balancete mensal e inventário anual sobre seu movimento;

d) preparar editais e providenciar sobre a impressão de folhetos,

circulares e outros papéis de uso da repartição;

e) fiscalizar o ponto dos funcionários;

f) organizar a folha de pagamento do pessoal do Instituto;

g) fiscalizar o serviço do guarda-livros ;

h) fiscalizar a conservação dos edifícios e casas de residência.

— Ao guarda-livros competia entre outras funções:

a) trazer em dia o serviço de contabilidade, escrituração de todo o

movimento de produção e despesas das seções;

b) examinar e conferir todas as contas e faturas de fornecimentos,

antes do respectivo processo de pagamento ficando responsável pelos erros

ou omissões cometidas;

c) trazer em dia e em ordem a escrituração sobre movimento de

produtos e de permutas com os fornecedores do interior.

— O ajudante de guarda-livros, protocolista e auxiliares de escrita

sobre o auxílio aos trabalhos referentes à seção, catalogação da biblioteca,

serviços de compra e permuta de livros e outras publicações, escrituração

sobre o movimento geral da biblioteca, colaborar com o correspondente

na organização de resumos e fichamentos de trabalhos.

— Ao desenhista-ceroplasta compete entre outras funções: os dese¬

nhos de caráter científico, preparar as peças de cera e outro material

necessário ao Museu Médico, serviço fotomicrográfico, fotográfico do

Instituto, auxiliar os serviços técnicos da seção de Protozoologia e Para-

sitologia.

— Ao chefe de cocheira competia entre outras funções: tratar conve¬

nientemente de todos os animais usados no serviço de soroterapia e outros;

SciELO

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OLIVEIRA, J. L. Cronologia do Instituto Butantan (1888-1981) 1.* Parte. Mcm. Inst. Butantan,

11-79, 1980/81.

dirigir o serviço de injeções e sangrias; o registro do movimento da seção

e as folhas de observações clinicas; realizar as necroscopias.

— Ao chefe de Cultura e Obras competia entre outras funções: diri¬

gir os trabalhos agricolas; fiscalizar o movimento dos empregados diaris¬

tas, operários e artífices; fiscalizar a construção; fiscalizar o serviço de

automóveis; fiscalizar a manutenção do parque etc., e dos preparadores,

porteiro-telefonista, motorista, jardineiro, serventes, auxílio e execução

de manutenção do Instituto.

— A divisão dos serviços técnicos ficou assim dividida:

1. Seção de Ofiologia e Zoologia Médica: diretor;

2. Seção de Protozoologia e Parasitologia: a cargo do diretor-assis¬

tente Alcides Pi’ado;

3. Seção de Imunologia Experimental e Soroterapia: J. Bernardino

Arantes, Flávio de Fonseca e Joaquim Travasso;

4. Seção de Bacteriologia Experimental e Bacterioterapia: S. de

Camargo Calazans, assistente Cícero Neiva;

5. Seção de Vírus e Virusterapia: Lemos Monteiro e R. Godinho;

6. Seção de Físico-química Experimental: Klobusitzky;

7. Seção de Botânica Médica;

8. Seção de Química e Farmacologia Experimental;

9. Seção de Fisiopatologia Experimental;

10. Seção de Citologia, Embriologia e Genética Experimental.

— A seção de Ofiologia e Zoologia Médica competia entre outras

funções:

a) estudar ofídios e outros animais de interesse médico ou

higiênico ;

b) organizar o Museu Médico para divulgação dos trabalhos do

Instituto;

c) dirigir a campanha dos ofídios e outros animais venenosos;

d) organizar conferências e palestras com intuito de divulgar

conhecimentos referentes ao assunto;

e) manter permuta de material com outros laboratórios;

f) informar as consultas relativas à seção.

— A seção de Imunologia Experimental e Soroterapia competia

entre outras funções:

a) estudar todas as questões referentes aos fenômenos de imuni¬

dade;

b) entregar ao serviço o produto de suas experiências, para a

devida aplicação;

c) preparar, dosar e aferir todos os soros, antivenenos e anti-

toxinas usados no tratamento e profilaxia de enfermidades humanas;

d) analisar e aferir soros, anti venenos e anti toxinas preparados

por laboratórios particulares, para consumo público, tudo de acordo

com instruções que constituirão objeto de decreto especial.

— À seção de Bacteriologia Experimental e Bacterioterapia com¬

petia entre suas funções:

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OLIVEIRA, J. L. Cronologia do Instituto Butantan (1888-1981) 1.® Parte. Mem. Inst. Butantan, 4^/45:

11-79, 1980/81.

a) investigar questões relativas a bactérias patogênicas;

b) conservar o Museu de Culturas;

c) entregar ao serviço, o produto de suas experiências, para a

devida aplicação;

d) preparar bacterinas, filtrados bacterianos e outras substâncias

de emprego corrente no tratamento e profilaxia de moléstias infectuosas

humanas;

e) analisar produtos de origem bacteriana empregados no trata¬

mento e profilaxia de enfermidade humanas e preparados por labora¬

tórios particulares.

— A seção de Vírus e Virusterapia competia entre outras funções:

a) investigar questões referentes a moléstias humanas produzi¬

das por vírus, tais como varíola, varicela, sarampo, tracioma, polio¬

mielite, influenza (gripe), febre amarela, tifo exantemático e outras.

b) estudar experimentalmente a ação de bacteriófagos e tratar de

seu preparo;

c) preparar vacina animal contra a varíola.

— À seção de Físico-química Experimental compete entre outras

funções:

a) estudar experimentalmente questões referentes aos fenômenos

vitais e especialmente os de imunidade;

b) investigar a composição dos lipóides e colóides;

c) concentrar e refinar plasmas fornecidos pelo serviço de soro-

terapia ;

d) dirigir cientificamente o preparo dos meios de cultura;

— À seção de Protozoologia e Parasitologia compete entre outras

funções:

a) estudar os principais artrópodes e protozoários parasitas,

veiculadores ou causadores de enfermidades humanas;

b) pesquisar meios de tratamento e profilaxia contra os mesmos;

c) investigar fenômenos de imunidade no decurso de doenças

produzidas por protozoários e parasitas.

— À seção de Botânica Médica competia entre outras funções:

a) estudar plantas indígenas de interesse médico ou higiênico;

b) cultivar e realizar observações biológicas sobre espécies em¬

pregadas na terapêutica popular, afim de contribuir para a nossa

matéria médica;

c) organizar herbários e coleções para a divulgação dos trabalhos

da seção;

d) organizar exposições e conferências para interessar o público

no aproveitamento das espécies medicinais;

e) manter permutas de material com outros laboratórios;

f) informar as consultas relativas à seção.

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OLIVEIRA, J. L. Cronologia do Instituto Butantan (1888-1981) l.“ Parte. Mem. Inst. Butantan,

11-79, 1980/81.

— À seção de Química e Farmacologia Experimental competia

entre outras funções:

a) investigar todas as questões de química que surgissem no

decurso dos trabalhos do Instituto;

b) isolar princípios ativos de venenos animais e de plantas

reputadas medicinais;

c) estudar a ação farmacodinâmica de princípos ativos, de venenos

e plantas;

d) colaborar com outras seções no esclarecimento de problemas

em investigação;

e) realizar todas as pesquisas químicas sugeridas pelo diretor;

f) investigar a ação de princípios endócrinicos e outros que cons¬

tituam objeto de trabalho no Instituto.

— À seção de Fisiopatologia Experimental competia entre outras

funções:

a) colaborar no esclarecimento da ação exercida sobre o organismo

pelos venenos e toxinas animais e princípios ativos vegetais;

b) pesquisar lesões produzidas por micróbios e parasitas do domínio

da patologia humana;

c) tratar de desenvolver experimentalmente métodos aplicáveis à

cirurgia humana;

d) investigar em sua subseção de Endocrinologia, a ação das secre¬

ções internas, preparando produtos endocrínicos (opoterápicos) devida¬

mente dosados e aferidos;

e) investigar em colaboração com as seções de Química e Físico-

-química, o mecanismo da ação das vitaminas;

f) analisar produtos opoterápicos do comércio.

— À seção de Citologia, Embriologia e Genética Experimental com¬

petia entre outras funções:

a) estudar experimentalmente os fenômenos da atividade celular,

reprodução, hereditariedade, variação e seleção;

b) fazer conferências e divulgar, por meio de publicações os resul¬

tados de seus estudos.

— Somente as seis primeiras seções funcionariam este ano posto que

já existentes. A medida das necessidades do serviço e disponibilidade de

recursos financeiros as demais seriam instaladas.

— Benfeitorias das instalações do Instituto:

Remodelação dos serviços de concentração e refinação de plasmas,

filtração e distribuição de produtos e de acondicionamento.

Instalação de sistema de vácuo e pressão para uso dos laboratórios

com controle central.

Quatro casas tipo rural para residência de funcionários.

Construção de casa para residência do diretor (atual Diretoria

Técnica).

SciELO

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OLIVEIRA, J. L. Cronologia do Instituto Butantan (1888-1981) 1.® Parte. Mem. Inst. Butantan, 44/45:

11-79, 1980/81.

Reforma da antiga sede da chácara, onde se instalara o diretor, para

sede do Grupo Escolar Rural e apartamentos dos técnicos.

— Neste ano foram publicados 43 trabalhos científicos.

1932

— O relatório de 1932 está sob forma de publicação “Cinco anos de

Reorganização”.

— A dotação de verbas para o Instituto veio declinando desde 1927:

1927 — 1.395:107$760; 1931 — 1.054:925$000.

— Apesar da produção vir aumentando progressivamente: 1927 —

668:405$000; 1931 — 908:142$803, apresentando aumento nos períodos

revolucionários de 30 e 32: 1930 — 1.310 .•748Ç400; 1932 — 1.505:104$050

(em julho de 32 o Instituto recebeu crédito especial pelo Comando

Geral da Força Pública de 127:003$660) a verba global de 1932 foi

1.175:403$660.

— Sugestões:

Aumento da verba de 200:000$000 para instalar novos serviços como

de Botânica Médica (para cultivo e estudo de plantas medicinais) e de

Fisiopatologia Expeiúmental (com as sub-seções de Fisiologia, Endocrino-

logia e Histopatologia) que criariam renda através da venda de seus

produtos: venda de plantas medicinais e de preparados opoterápicos,

representando fonte de recurso para o estabelecimento.

— Orientação e intensificação dos serviços de produção de soros,

antitoxinas, antivenenos, bacterinas, vacinas e outras substâncias bioló¬

gicas.

— O número de obras decresceu pela crise financeira do ano ante¬

rior, daí orientação mais voltada ao aspecto social dos funcionários:

Incremento da Caixa Beneficente mantida pelos funcionários e a

criação de Cooperativa com fundos da Caixa Beneficente para forneci¬

mento de gêneros de primeira necessidade. Construção de campo de

esportes.

— No período revolucionário, o Butantan atingiu recorde de produ¬

ção de soro antitetânico fornecido principalmente às ü'opas. Em função

desse aumento para atender demanda o Instituto solicitou empréstimos a

Associação Comercial e a MMDC e mesmo de criadores de animais para

aumentar números de cavalos para serviço de imunização e requisição de

outros materiais necessários à construção de novos alojamentos e manu¬

tenção dos animais recebidos.

— Daí a construção de galpões para semientabulação de cavalos

imunizados, um abrigo para eqüinos do serviço de criação e seleção racial.

— Foi construído também báias para alojar vitelos do serviço de

vacina variólica.

— Início da criação de suínos de raça, como subproduto da Seção

Agrícola, para nova fonte de renda e aumento de Biotério Geral.

— Foi constituído alambique para destilação de água requisitada

pelo Serviço Sanitário.

— Neste ano foram publicados 41 trabalhos científicos.

SciELO

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OLIVEIRA, J. L. Cronologia do Instituto Butantan (1888-1981) 1.® Parte. Mera. Jnst. Butantan,

11-79, 1980/81.

— Foram realizados os serviços de análise dos produtos biológicos,

que desde 1925 haviam sido interrompidos.

— Novos produtos: vacina variólica pura, soro vacínico (coquelu¬

che) ; anatoxina tetânica; antitoxina super concentrada; soro antitoxina

escarlatínica, soros antigangrenosos, soro antitoxina anaeróbica, bacte.

rina tífico-disentérica injetável, lipo-soros (normais para tratamento de

perturbações nervosas e antitoxigrávídicos para tratamento das pertur¬

bações toxêmicas da gravidez).

1933

— “Devido ao desfecho da Revolução Constitucionalista no segundo

semestre de 1932 é alarmante a instabilidade política no semestre seguinte:

todos os estabelecimentos técnicos dotados de produção industrial sofre¬

ram crise mais ou menos intensa nos oito primeiros meses de 1933”, pg. 1,

Rei. Annual, 1933.

1. Seção de Ofiologia e Zoologia Médica: assistente-chefe Afrânio

do Amaral.

— Houve decréscimo na produção de venenos em conseqüência das

perturbações na vida agrícola pela revolução. A produção científica teve

dez trabalhos publicados de Afrânio do Amaral, em colaboração com Lemos

Monteiro e Vieira Marcondes.

— Foram remetidos 354 folhetos descritivos dos produtos do Insti¬

tuto para os fornecedores de serpentes, 402 seringas e 197 caixas; o

Instituto recebeu 23.066 serpentes.

2. Seção de protozoologia e parasitologia (assistente Alcides Prado)

realizou 683 exames de material e aumentou a coleção de artrópodes e

de helmintos a 1.401 exemplares. Publicou três trabalhos científicos.

3. Seção de Imunologia e Soroterapia (assistente-chefe J.B. Arantes

e assistentes J. H. Travassos e Flávio da Fonseca).

— Produção de soros antipeçonhentos, antidiftérico e antitoxina dif-

térica; verificação da esterilidade dos produtos; serviço de antitoxina

tetânica.

— Produção científica: quinze trabalhos publicados nas Memórias,

em revistas nacionais e estrangeiras, destacando-se trabalhos de Flávio

da Fonseca sobre ácaros.

4. Seção de Bacteriologia e Bacterioterapia (assistente-chefe S. C.

Calazans e assistente C. Neiva), encarregado do preparo de todas as

bacterianas, injetáveis e ingeríveis, além dos soros antidisentérico e anti-

gangrenoso, das tuberculinas e do Museu Bacteriológico. Subseção de soro¬

terapia antibacteriana (assistente Joaquim Travassos) realizou estudos

experimentais principalmente da toxina e antitoxina estafilocócica que

permitiu lançar dois novos produtos: a anatoxina e a antitoxina estafilo¬

cócica. Oito trabalhos publicados.

5. Seção de Vírus e Virusterapia (assistente-chefe Lemos Monteiro,

assistente Raul Godinho) vacina variólica, bacterina tuberculosa e bacte-

rina pestosa e o soro correspondente; estudos sobre o cultivo de vírus

variólico no embrião da galinha e novas pesquisas sobre “tifo exantemá-

OLIVEIRA, J. L. Cronologia do Instituto Butantan (1888-1981) !.• Parte. Mem. Inat. Butantan,

11-79, 1980/81.

tico de São Paulo”. A produção de vacina variólica tem sido maior que a

do Instituto Vacínico Federal. Produção Científica: seis trabalhos publi¬

cados.

6. Seção de Físico-química (assistente-chefe: D. von Klobusitzky)

cinco trabalhos publicados: realizou 637 trabalhos de físico-química (PH)

e 117 de química. Foi publicado o VII Volume das Memórias.

1934

— Desenvolvimento gradual dos trabalhos realizados no Butantan.

Aumento da verba do Estado da ordem de 210:500$000 sendo portanto

sua despesa líquida por conta do Tesouro de 1.247:325$300 e a produção

global de 1.619:405$050 tendo saldo positivo de 372:079$750. O Instituto

recebeu crédito especial de 62:000$000 para construção do pavilhão espe¬

cial, com 20 laboratórios para estudos experimentais e preparo de vacina

contra febre maculosa de São Paulo (tifo exantemático).

— Dada à exigüidade de verbas destinadas ao setor agrícola, foram

feitas apenas reformas dos prédios, destacando-se a do Laboratório Vací¬

nico de forma a unificar todo o serviço de produção da vacina variólica.

— Serviços Técnicos:

1. Seção de Ofiologia e Zoologia Médica: (A. Amaral) prossegui¬

mento dos serviços de propaganda científica e permutas, recebimento de

animais peçonhentos e extração de venenos. Foram publicados doze traba¬

lhos científicos.

2. Seção de Protozoologia e Parasitologia (A. Prado) realizou 771

exames diversos; elevou para 1.572 o número de exemplares de suas

coleções e o prosseguimento dos estudos referentes a protozoários e para¬

sitas, relacionados com enfermidades humanas. Publicou seis trabalhos

científicos.

3. Seção de Imunologia e Soroterapia (J. B. Arantes com os assis¬

tentes J. H. Travassos e F. da Fonseca) produção de soros antipeçonhentos,

antitoxina diftérica, soros anticocos, antitoxina e anatoxina estafilocócica,

bacterinas cocos. Publicou oito trabalhos científicos.

4. Seção de Bacteriologia e Bacterapia (S. Calazans com o assis¬

tente C. Neiva). A fabricação das bacterinas antitífico-paratíficas, anti-

disentérica, antidisentérica mista; a antitífico-disentérica passou para

responsabilidade do Dr. Calazans, e para o Dr. Neiva o preparo das tuber-

culinas. Esta seção também fabricava o soro antigangrenoso e era respon¬

sável pelo Museu de Culturas e serviço de meios de cultura. Várias pes¬

quisas estavam sendo realizadas sobre o soro anticoli e antitífico. Foram

publicados três trabalhos científicos.

5. Seção de Vírus e Virusterapia (Lemos Monteiro, assistente Raul

Godinho, auxiliar-técnico Edison Dias) a cargo do preparo da vacina

variólica, da bacterina tuberculosa BCG, da bacterina pestosa e do soro

correspondente. Neste ano foram produzidas 2.632.800 doses de vacina

variólica. Foram publicados dezesseis trabalhos científicos, principalmente

sobre o “tifo exantemático de São Paulo” estudado por Lemos Monteiro.

6. Seção de Físico-química: Klobusitzky. A finalidade principal des¬

ta seção era a orientação dos trabalhos sobre imunologia e soroterapia.

SciELO

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OLIVEIRA, J. L. Cronologia do Instituto Butantan (1888-1981) 1.® Parte. Mcm. Inst. Butantan, 44/45:

11-79, 1980/81.

Neste ano foi terminada a instalação desta seção que ocupava quatro

laboratórios com aparelhos de alta precisão. Foram publicados três traba¬

lhos científicos.

— Seções novas;

Foi instalada a seção de Fisiopatologia Experimental que iniciava

pesquisas sobre glândulas endócrinas e realizou trabalhos para a produção

de hormônios de aplicação terapêutica como fonte de renda para o

Instituto. Foi encarregado da seção como assistente-chefe Thales Martins.

A produção industrial estava dependente da instalação das seções de Quí¬

mica e Farmacobiologia, o que para tanto deveriam ser contratados os

necessários técnicoS no estrangeiro (Alemanha e Áustria). Foram publi¬

cados cinco trabalhos científicos.

Seção de Botânica Médica (farmacognosia). Foi instalada esta nova

seção cujo encarregado era o assistente-chefe Waldemar Peckolt que apro¬

veitou as antigas instalações do horto “Oswaldo Cruz” e a área nele culti-

vável principalmente para estudar e produzir substâncias terapêuticas de

origem vegetal, mais uma fonte de renda para o Instituto. Além de atender

47 consultas foram publicados treze trabalhos científicos.

— Foi publicado o vol. VII das “Memórias do Instituto Butantan”

com trinta e um trabalhos. O Instituto recebeu em permuta por esta publi¬

cação 160 revistas científicas diversas.

— Participação do Instituto Butantan, através da escola rural por

ele mantida no Congresso de Ensino Rural na Bahia.

— Com 0 desenvolvimento da assistência médica fornecida pelo Insti¬

tuto através da Policlínica, preparação de terreno pai’a futura instalação

do primeiro hospital regional.

1935

— Aumento da dotação orçamentária permitiu implantar novas

seções previstas no regulamento de 1931, sedimentar e complementar

aquelas já exi.stentes e ampliar o quadro de técnicos superiores.

— A produção científica decresceu, sendo produzidos 45 trabalhos,

27 dos quais publicados no vol. IX das “Memórias”.

— Participação do Instituto Butantan no VI Congresso da Médica

Panamericana tendo sido por essa ocasião inaugurado o novo pavilhão

destinado a “estudos sobre tifo exantemático, febre amarela e outras

enfermidades perigosas”.

— Surto de febre amarela na fronteira do Estado e de febre petequial

paulista na Capital e arredores.

— Reformas nos serpentários, na cocheira, construção de grupo novo

de gaiolas no Biotério Geral.

— Comissões científicas: Afrânio do Amaral esteve na Europa, de

agosto a novembro, comissionado pelos governos de São Paulo e do Brasil;

representando-os no XII Congresso Internacional de Zoologia (Portugal)

e no X Congresso de História de Medicina (Espanha). O assistente-chefe

Tales Martins, da seção de Fisiopatologia Experimental, participou do

SciELO

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OLIVEIRA, J. L. Cronologia do Instituto Butantan (1888-1981) 1.» Parte. Mem. Inat. Butantan, H/i5:

11-79, 1980/81.

Congresso Internacional de Fisiologia (Moscou) e visitou laboratórios

existentes na Alemanha, França e Inglaterra.

— Durante ausência de Afrânio do Amaral esteve encarregado da

diretoria o assistente-chefe J. B, Arantes. Houve desavenças internas entre

os assistentes; o encarregado da Seção de Bacteriologia determinou refor¬

mas dos laboratórios daquela seção acima do previsto pelo orçamento,

— Lemos Monteiro e seu axiliar Edson Dias contraíram tifo exante¬

mático durante os trabalhos de preparação da vacina falecendo, ambos,

em conseqüência do acidente (6-11).

— Crise política-administrativa do Instituto o que para tanto contri¬

buiu as críticas a contratação de especialistas estrangeiros para novas

seções criadas: a professora G. von Ubish para seção de Genética e à

Química e Farmacobiologia com o contrato do prof. K. H. Slotta e drs.

P. Koenig e G. Szyszka; e principalmente “J. B. Arantes, que não soube,

infelizmente, continuar o regime de disciplina instituído no estabeleci¬

mento o que concorreu, não só para a intromissão de atividades parti¬

dárias em Butantan como para a eliminação do princípio fundamental do

comando único na administração...” pg. 5 Relat. Anual 1935 Instituto

Butantan.

— Distribuição dos Serviços Técnicos:

Seção de Protozoologia e Parasitologia — Flávio da Fonseca prosse¬

guiu suas pesquisas sobre acarianos (carrapatos) tendo descrito trinta e

seis formas novas. Foram publicados quatorze trabalhos científicos

(além de um de divulgação) sendo onze sobre acarianos de Flávio da

Fonseca e um sobre carobinha, de Alcides Prado e W. Peckolt.

Seção de Imunologia e Soroterapia (J. B. Arantes) com as subseções

soroterapia antivenenosa, antitóxica e antibacteriana. Produção cientí¬

fica de quatro trabalhos originais.

Seção de Bacteriologia e Bacterioterapia (S. de C. Calazans) pro¬

dução científica quatro trabalhos.

Seção de Vírus e Virusterapia (Lemos Monteiro) com o anexo

lab. Vacínico e o serviço de bacterina tuberculosa BCG. Aumento de

produção de vacina antivariólica dado o recrudescimento da varíola em

nosso meio. Produção científica quatro trabalhos.

Seção de Físico-química: quatro trabalhos científicos sobre a com¬

posição química de venenos ofídicos; análises diversas e pesquisas em

especialidades.

Seção de Fisiopatologia Experimental (Tales Martins) : quatro tra¬

balhos científicos. As instalações desta seção ainda não foram com¬

pletadas.

Seção de Botânica Médica (W. Peckolt). Como produção científica,

além de artigos de divulgação na revista “Chácaras e Quintais”, publicou

dois trabalhos nas “Memórias”.

— Seções novas:

Seção de Citoembriologia e Genética Experimental (Gestrudes von

Ubisch, contratada na Alemanha) realizou trabalhos de seleção de aveia

OLIVEIRA, J. L. Cronologia do Instituto Butantan (1888-1981) 1.® Parte. Mem. Inat. Dutantan, khíKSi

11-79, 1980/81.

e milho com fins de aumentar a produção de forragens para os animais

do Instituto e realizou estudos sobre a hibridação de preás e cobaias,

visando o problema futuro de fixação de uma raça de eqüinos boa

produtora de antitoxina. No entanto, esses trabalhos estiveram preju¬

dicados pela insuficiência de verbas.

— Foram contratados para a Seção de Química e Farmacobiologia,

K. H. Slotta e G. Szyzka que trabalharam na instalação dos respectivos

laboratórios, sendo aguardado material importado retido na Alfândega

de Santos para o início das pesquisas. Entre estas se destacavam:

estudo da composição e ação fisiológica do café sobre o organismo

humanos, em colaboração com a seção de Fisiopatologia Experimental de

acordo com entendimentos havidos com a presidência do Instituto do

Café de São Paulo.

— Distribuição dos Serviços Técnicos:

Seção de Ofiologia e Zoologia Médica: Afrânio do Amaral.

Seção de Parasitologia e Protozoologia: Flávio da Fonseca e Alcides

Prado — subseção de Parasitologia: Alcides Prado.

Seção de Imunologia Sorotepia: J. B. Arantes (não apresenta o

relatório anual) subseção de soroterapia antitóxica: assistente esta^ária

Jandira Planet do Amaral, subseção de soroterapia antibacteriana:

Joaquim Travassos.

Foram subdivididos os trabalhos desta seção: Paulo Artigas (con¬

tratado neste ano) serviço de preparo e estudo do soro e bacterina

pneumocócica, soro e bacterina antipestosa e tuberculina: Jandira

Planet do Amaral, preparo de anatoxinâs e antitoxinas diftéricas e

estafilocócicas: Joaquim Travassos soros e bacterinas antimeningocó-

cica, gonocócica e estreptocócica e antitoxina e anatoxina escarlatínica.

Seção de Bacteriologia e Bacterioterapia: Sebastião Camargo Cala-

zans. Subseção de anaeróbios (soros antitetânico e antigangrenoso)

subseção de Bacterioterapia e serviços veterinários — Cícero Neiva, ser¬

viço de meios de cultura (anexo a seção de bacteriologia) o encarregado

Pedro Ruiz Pacheco.

Seção de Vírus e Virusterapia (Lemos Monteiro que morreu em 6-11)

foi substituído pelo assistente interino Raul Godinho e os auxiliares

José Navas e Victor Salcedo J.° — subseção vacínico.

Seção de Físico-química Experimental: D. Klobusitzky

Seção de Fisiopatologia: Tales Martins.

Seção de Botânica Médica: W. Peckolt.

Seção de Genética Experimental: G. Ubisch.

— Apesar do aumento de verbas do Estado, houve decréscimo tanto

na produção industrial, quanto da científica devido à crise interna do

Instituto.

1936

— Em 23 de janeiro foi iniciada a sindicância para apurar as

irregularidades acontecidas no ano anterior.

SciELO

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OLIVEIRA, J. L. Cronologia do Instituto Butantan (1888-1981) 1.^ Parte. Mem. Inat. Butantan, kk/USi

11-79, 1980/81.

— Afrânio do Amaral solicitava o afastamento do cargo de diretor

durante a duração da sindicância, que se estendeu até sete de novembro;

foi substituído na superintendência interina, pelo Dr. J. Carvalho Lima

e depois por Flávio da Fonseca. Com o resultado do inquérito, foram

afastados do Instituto e adidos ao Serviço Sanitário três assistentes-

-chefes (J. B. Arantes, S. de Camargo Calazans e Waldemar Peckolt).

Três assistentes (Raul Godinho, Alcides Prado e Cícero Neiva), o chefe

de cocheira (Teófilo Martins), dois auxiliares técnicos (Tertuliano Beu

e Domingos Yered) um servente (F. Corrêa). Foram designados para

ocupar as seções, respectivamente, Flávio da Fonseca, Paulo Artigas,

Gertrudes von Ubisch. Para serviços da cocheira, Pedro Ruiz e para

0 lugar de assistente-chefe, criado no orçamento de 1936 e ainda não

preenchida a vaga a assistente Jandira Planet do Amaral (estagiária

desde 1931). Foram abertos concursos para preenchimento dos cargos

de auxiliares de escrita e serventes.

— A produção industrial do Instituto apresentava um déficit de

739:285|500.

— A produção de pesquisa científica sofre também decréscimo,

trinta e seis trabalhos científicos constariam do X vol. das “Memórias”.

— Poucas construções neste ano, restringindo-se à adaptação de

algumas seções, à compra de dois tratores e implantando a instalação

da Seção de Química Experimental com aparelhamento importado da

Alemanha; ultimada a instalação de físico-química, com aquisição de

aparelho para cataforese e eletrocondutividade e, na Fisiopatologia

Experimental, a instalação de um grande oscilógrafo importado da

Inglaterra.

— Foi realizado curso de extensão universitária de endocrinologia

6 outro sobre hormônios sexuais femininos e mecanismos do parto.

— Distribuição dos Serviços Técnicos (científicos) :

Seção de Ofiologia e Zoologia Médica — decréscimo do recebimento

de animais peçonhentos e a produção científica consistiu no Catálogo

dos Ofídios do Brasil (segunda edição) impresso nas “Memórias”.

Seção de Parasitologia e Protozoologia — Flávio da Fonseca — desta¬

cou-se em estudos sobre acarologia, entomologia, malariologia e protozoo¬

logia. Substituiu J. B. Arantes, vice-diretor, na seção de Imunologia

Experimental e Soroterapia e ficou também à frente das Seções de

Ofiologia e Zoologia Médica, Vírus e Virusterapia e do laboratório de

Entomologia, quando do afastamento do diretor-supeiúntendente e de

algum assistente, chegando mesmo a se encarregar, durante este período

de crise, do trabalho de seis diferentes serviços do Instituto.

— Seção de Imunologia e Soroterapia — (F. Fonseca) subseção de

soroterapia antitóxica Jandira Planet.

— Seção de Bacteriologia e Bacterioterapia — Paulo Artigas — em

caráter provisório até serem admitidos novos assistentes. Foi auxiliado

por Benedictus Mourão e Ariosto Soreto, que se achavam em condições

de serem admitidos como assistentes.

— Pequeno surto de peste.

OLIVEIRA, J. L. Cronologia do Instituto Butantan (1888-1981) 1.® Parte. Mem. Inst. Butantan, kk/US:

11-79, 1980/81.

— Seção de Vírus e Virusterapia sob direção de Joaquim Travassos,

aprovado em concurso. Devido ao inquérito esteve afastado por três

meses. Os trabalhos iniciados por Lemos Monteiro sobre tifo exante¬

mático e febre maculosa foram interrompidos e perdido o material de

pesquisa. O departamento de vacina jenneriana necessitava reformas.

Pequeno surto de varíola em São Paulo. O Instituto forneceu 3.321.360

doses de vacinas.

Seção de Físico-química — Dr. D. Von Klobusitzky com o assistente

P. Koloning — pesquisas sobre princípios ativos do veneno de jararaca

e que resultou no preparo de um novo produto, “hemocoagulase”, com

indicação específica contra certas hemorragias.

Seção de Fisiopatologia Experimental — Tales Martins — foram am¬

pliadas suas instalações.

Seção de Botânica Médica e Seção de Genética — G. von Ubisch —

estudos sobre seleção de aveia e milho. Realizou também estudos sobre

hibridização da cobaia com o preá, visando a verificação da capacidade

de imunização desses dois animais contra anatoxina diftérica.

Seção de Química — K. H. Slotta — auxiliado pelo assistente G.

Szyszka e K. Neisser realizaram trabalhos científicos e industriais sobre

hormônios, sobre princípios ativos de venenos e sobre componentes do

café. A seção foi favorecida por ter contado com apoio financeiro do

Instituto do Café, constituindo suas instalações nas mais modernas da

América Latina.

— Depois que reassumiu a Direção do Instituto, Afrânio do Amaral

reintegrou a necessidade da criação de um hospital regional, a contratação

de mais seis assistentes e ampliação das instalações do Instituto.

1937

— Reorganização do Instituto desde a parte administrativa e

económico-financeira até a industrial e técnico-científica.

— Trabalhos de reparação e conservação dos cinqüenta e quatro

prédios existentes no Butantan e adaptações em laboratórios e seções

técnicas.

— Devido aos serviços de drenagem e fertilização do solo, houve

aumento da produção agrícola, principalmente de forragens verdes para

0 sustento dos animais.

— O Instituto possuia uma das maiores criações de animais para

experimentação, infra-estrutura básica para pleno desenvolvimento da

Medicina Experimental.

O Instituto superava o déficit do ano anterior, chegando mesmo a

ter um saldo positivo de 1.585:674$700.

— Foi sugerido pelo diretor superintendente, Afrânio do Amaral,

que fosse concedido ao Instituto maior autonomia administrativa

tornando-se uma autarquia, o que possibilitaria superar as dificuldades

de ordem burocrática, resultando em maior saldo da produção industrial.

“O simples fato de haver em 1931 o Instituto sido desanexado do

SciELO

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OLIVEIRA, J. L. Cronologia do Instituto Butantan (1888-1981) 1.® Parte. Mem. Inst. Butayitan, ii/45:

11-79, 1980/81.

Serviço Sanitário e de ter então adquirido finalidades mais amplas,

passando a dedicar-se de perto a trabalhos sobre medicina experimental

no terreno da patologia humana, já foi o bastante para lhe desburocra¬

tizar em parte as normas administrativas”. Amaral, Afrânio, Relatório

1937, pg. 3.

— Distribuição dos Serviços Técnicos (científicos) :

Seção de Ofiologia e Zoologia Médica (Afrânio do Amaral) recebi¬

mento de 20.962 serpentes vivas; 3.528 batráquios; aranhas, escor¬

piões e centopéias 8.854, além de outros animais; carrapatos, barbeiros

e outros insetos.

Produção de onze trabalhos científicos.

Seção de Parasitologia e Protozoologia — (Flávio da Fonseca) além

dos trabalhos normalmente desenvolvidos na seção, colaborou com o

Serviço Especial da Defesa contra a Febre Amarela, em pesquisas visando

0 problema dos reservatórios naturais de virus na selva. Foram elabo¬

rados seis trabalhos científicos.

Seção de Botânica Médica (M. Pirajá da Silva) além dos trabalhos

normais de produção, estudos sobre a ecologia e a sistemática de diversas

espécies de plantas Medicinais do gênero Jacaranda (carobinha) Paul-

linia (guaraná), Cephaelis (Ipecacuanha) e Theobroma (cacau). A

seção recebeu por permuta semente e mudas de diversas plantas (101

remessas) e feita classificação de sessenta e um exemplares de plantas

medicinais cultivadas no Horto Oswaldo Cruz.

Seção Citoembriologia e Genética (G. von Ubisch. A chefe da seção

esteve por seis meses na Europa tendo sido substituída por Raul F. de

Mello. Prosseguimento dos estudos sobre o cruzamento de cobaias e

preás e trabalhos de seleção de plantas de interesse econômico (aveia e

tremoço) e medicinal (mamão).

Seção de Vírus e Virusterapia (Joaquim Travassos) trabalhos

experimentais sobre a etiopatogenia do “Tifo exantemático de São

Paulo”. Foram apresentados treze trabalhos à Sociedade de Biologia de

São Paulo. No laboratório Vacínico anexo à Seção, foram preparadas

3.067.280 doses de vacinas jenneriana, sendo a metade desta produção

enviada ao Serviço Sanitário para profilaxia da varíola em São Paulo.

Seção de Bacteriologia e Bacterioterapia (Paulo Artigas auxiliado

por B. Mourão) trabalhos de preparo de substâncias biológicas; cinco

trabalhos científicos.

Seção de Imunologia e Soroterapia (subseção de anaeróbios) Ariosto

Buller Souto; encarregado dos serviços de soro antiperfringens, soro

antisepticum, soro antioedematiens, soro antihistolyticum, soro anticoli-

bacilar, soro e anatoxina antitetânica.

— Ariosto B. Souto trabalhava em bacteriologia e imunologia com

Genésio Pacheco, no Rio de Janeiro, fez estágio no Instituto Bacteriológico

de Buenos Aires e assumiu a direção da Seção de Anaeróbios em fevereiro

de 1937. Trabalhos científicos: estudos sobre anatoxinas tetânicas, estudos

hematológicos e experiências sobre vitaminas e toxinas gangrenosas,

organização do novo museu de Culturas Anaeróbias.

1 SciELO

OLIVEIRA, J. L. Cronologia do Instituto Butantan (1888-1981) 1.” Parte. Mem. Inat. Butantan. 44/4.5-

11-79, 1980/81.

Subseção aeróbios (Jandira Planet do Amaral) preparo das toxinas

e anatoxinas diftérica, estafilocócica, e escarlatínica e das antitoxinas

correspondentes; soro antiestreptocócico e as bacterinas estreptocócica,

estafilocócica e piogênica.

Seção de Vírus e Virusterapia (J. Travassos) pesquisas sobre tifo

exantemático de São Paulo tanto do problema do reservatório e deposi¬

tários do tifo de São Paulo, como do transmissor ou transmissores. Foram

apresentados na Sociedade de Biologia de São Paulo e em publicação no

Comptes Rendus de la Societè de Biologie de Paris doze trabalhos cientí¬

ficos e outros três que seriam apresentados no ano seguinte. O departa¬

mento de vacina jenneriana necessitava de reformas para melhor anda¬

mento de seus trabalhos; foram rebatidas as acusações do Serviço Sani¬

tário sobre a qualidade dos produtos. Coube ainda a esta seção a prepa¬

ração da vacina antiamarílica, cujo início dos trabalhos se daria em 1938

quando a seção estivesse devidamente aparelhada. Foram preparadas

na seção 2.794 doses de vacina BCG.

Seção de Fisiopatologia experimental subseção de histologia patoló¬

gica — (Moacyr Amorim). Esta seção foi criacla neste ano em 06-02 e

iniciados os serviços de organização e implantação de infra-estrutura para

seu pleno funcionamento. Já recebeu material de pesquisas de outras

seções e/ou de controle diagnóstico.

Seção de Genética Experimental (Gertrud von Ubisch) com a cola¬

boração de Jandira Planet do Amaral estudos sobre imunização de cobaias

e preás com anatoxina diftérica e pesquisas sobre cultura de aveia e sobre

sexo de mamões, e tremoço. A chefe da seção esteve afastada até mês

de dezembro por motivo de saúde, sendo substituída por Raul Franco de

Mello.

Seção de Botânica Médica (Manoel A. Pirajá da Silva) realizou

excursão científica à Bahia e trabalho de classificação das plantas no

Horto O. Cruz.

Seção de Fisiopatologia (Thales Martins) com o assistente J. Ribeiro

do Valle, estudos sobre hormônios sexuais. Foram publicados seis traba¬

lhos científicos.

Seção de Físico-Química (Dionísio von Klobusitzky), assistente

Paulo Konig; serviços de dosagens eletrométricas e colorimétricas de pH,

exames químicos e bioquímicos de produtos; experiências sobre a concen¬

tração de soros curativos por meio de corrente contínua. Foram realizados

nesta seção, pioneiramente, trabalhos sobre eletroforese em papel. Partici¬

pação de D. Klobusitzky no Congresso Sul-Americano de Química, realizado

no Rio de Janeiro, onde foram apresentados seis trabalhos. Em anda¬

mento pe.squisas sobre o veneno do gênero Bothrops sobre as propriedades

das proteínas em presença do álcool.

Seção de Química (Carlos Slotta), assistente João Szyszka e Cláudio

Neisser. Foram aumentadas as instalações da seção, seu aparelhamento e

pessoal. O Estado cobre metade das despesas, cabendo o restante ao

Instituto do Café.

— Realizaram pesquisas sobre venenos de sapos, hormônios sexuais

e pesquisas sobre a química do café, seu aproveitamento e propaganda

científica.

SciELO

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OLIVEIRA, J. L. Cronologia do Instituto Butantan (1888-1981) 1.® Parte. Mem. Inst. Butantan, 44/45.*

11-79, 1980/81.

1938

Afrânio do Amaral foi substituído na direção do Instituto Butantan

por José Bernardino Arantes. Pelo decreto 9.437 de 22-8-38 foi criado o

Serviço do Laboratório da Saúde Pública compreendido pelos Institutos

Butantan, Pasteur e Bacteriológico, de forma a possibilitar vantagens de

ordem científica e econômica, além de um intercâmbio entre eles e a

possibilidade de melhor distribuição de atribuições de cada um.

— Jayme Cavalcanti acumulou os cargos de diretor do Serviço de

Laboratórios de Saúde Pública e da direção do Instituto Butantan, auxilia¬

do pelos assistentes-médicos da Diretoria: José Dutra de Oliveira e Renato

Fonseca Rodrigues.

— Crise administrativa fruto da gestão anterior: “Caso Simaco” e o

da Light.

— “Caso Simaco”, firma que explorava ilegalmente em terrenos do

Instituto a indústria de olaria e extração de areia com prejuízos para o

Estado.

— Acordo desvantajoso para o Estado pela Light para cessão dos

terrenos marginais ao rio Pinheiros para serviços de canalização.

— Modificações introduzidas:

a) criação da Seção de Exames Sanitários e Químicos. Dentre suas

finalidades o combate à falsificação de produtos medicamentosos.

b) criação da Seção de Peste, fazendo a parte do laboratório em

cooperação com o Serviço de Epidemiologia e Profilaxia Gerais;

c) instalação da Seção de Medicina Experimental, transferida da Fa¬

culdade de Medicina para o pavilhão do Instituto especialmente adaptado;

d) melhorias nos vários laboratórios, remodelação da rede telefônica

interna; e estudos para plano geral de remodelação do Instituto, incluindo

a parte técnica e turística.

— Os relatórios de atividades do Instituto Bacteriológico e Pasteur

estão incluídos neste Relatório Anual dos Laboratórios da Saúde Pública.

A direção do Bacteriológico ficou a cargo do J. P. Carvalho Lima e do

Instituto Pasteur, Eduardo Rodrigues Alves. O Bacteriológico também em

crise: precariedade do prédio e instalações. Problemas referentes à car¬

reira dos assistentes e remuneração. Instituto Pasteur continuava normal¬

mente nos serviços de debelação e profilaxia do vírus da raiva.

— Distribuição dos trabalhos técnicos I.B.:

Seção de Parasitologia e Protozoologia: (Flávio da Fonseca) foi

incumbida do preparo da vacina BCG; atendimento de consultas técnicas

e pedidos de material (permuta). Até meados do ano foram realizadas

pesquisas sobre a febre amarela silvestre, que depois passaram a ser de

responsabilidade da Comissão Rockefeller (R.J.). As pesquisas sobre

acareologia prosseguiam: descrição de uma espécie hematófaga, capaz de

parasitar o homem, descrição de um gênero e onze novas espécies. Foram

entregues dezesseis trabalhos científicos para publicação.

Seção de Ofiologia e Zoologia Médica: (Alcides Prado) acréscimo

na coleção de ofídios, trabalhos de conservação da coleção. Devolveu-se ao

OLIVEIRA, J. L. Cronologia do Instituto Dutantan (1888-1981) !•* Parte.

11-79, 1980/81.

Mem. Inat. Buiantan, 4 í/45

Museu Paulista, a coleção de ofídios e sáurios que desde 12-12-31 estava

no Butantan por empréstimo. Foi contratado novo assistente auxiliar, o

biologista Otto Wolfgang Burcherl, que estudaria principalmente os gru¬

pos dos sáurios e chilópodos.

Seção de Soros Antitóxicos (Jandira Planet do Amaral) encarregada

da seção do mês de janeiro a abril. Preparo das toxinas e anatoxinas

diftéricas, estafilocócica e escarlatínica e das antitoxinas correspondentes;

soro antiestreptocócico e bacterinas estreptocócica, estafilocócica e piogê-

nica. Depois, a seção passou a ser designada como imunologia.

Seção Soroterapia antidisentérica (Paulo Monteiro de Barros Marrey)

nomeado em 2-9-38 para o cai’go de assistente-chefe. Havia trabalhado

anteriormente no Instituto tendo se retirado espontaneamente em 3-9-1930.

Foi encarregado do preparo de soro antidisentérico até então a cargo de

Cicero Neiva. Dificuldade técnica: falta material de laboratório, falta de

estirpes dos diversos tipos de bacilo disentérico para preparo dos antíge-

nos. A imunização dos animais só se iniciou em dezembro.

Seção de Anaeróbios Ariosto Büller Souto (1-1-38 a 15-5-38) encar¬

regado dos serviços de; soros antiperfringens, antioedematiem, antivi-

brião-séptico, anti-histolítico, antitetânico, anticolibacilar e anatoxina

tetânica; oito trabalhos científicos; recebimento de amostras de anaeróbios

de laboratório estrangeiro.

Seção de Preparo dos Soros Antipeçonhentos (J. B. Arantes).

Seção de Fisiopatologia (Thales Martins) vinte e três trabalhos cientí¬

ficos com o assistente J. R. Valle e estagiário Ananias Porto. Participação

no Primeiro Congresso Pan-Americano de Endocrinologia (RJ). Convites

para visitas ao estrangeiro: Montevidéu, Buenos Aires e Londres. Com

a supressão da subvenção do Instituto do Café e da desarticulação da

Seção de Química Orgânica foram interrompidos os trabalhos.

Seção de Vírus e Virusterapia (J. Travassos) trabalhos de pesquisa

sobre tifo de São Paulo. Desde 1936 desavença entre Raul Braga Godinho,

que perdeu o cargo em concurso para Joaquim Travassos, e depois exer¬

cendo alto cargo no Departamento de Saúde difamou a seção. No período

de 37-38 foram publicados vinte e seis trabalhos. Esta seção ficou encar¬

regada do fabrico dos soros e bacterianas antimeningocócica e gonocóci-

ca, cultura de tecidos e estudos de vírus. O serviço de BCG foi transfe¬

rido para outra seção e o Serviço de Febre Amarela, que não chegou a

utilizar as novas instalações especialmente feitas, sendo transferido o

Serviço para a Rockefeller Foundation (RJ). 10-5 reassumiu Cícero

Neiva a Seção de Vírus Vacínico (soro antidisentérico e antitífico; bacte¬

rinas “per os”; típico-paratífica, disentérica, disentérica mista e tífico-

-paratifico — disentérica e bacterinas injetáveis, anatoxina, diftérica;

filtrados estafilocócico, estreptocócico e antipiogênico. O serviço de vacina

BCG passou para o assistente A. B. Souto. Em trinta de setembro assumiu

a seção de Vírus Vacínico que estava sob a responsabilidade do técnico

José Navas.

Seção de Química (Armando Taborda) prosseguimento das pesquisas

iniciadas: veneno de sapos, hormônios sexuais, análises das propriedades

químicas e fisiológicas do café e estudos dos venenos ofídicos relativos ao

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OLIVEIRA, J. L. Cronologia do Instituto Butantan (1888-1981) 1.® Parte. Men%. Inst. Butantan,

11-79, 1980/81.

conhecimento da constituição das pi'oteínas tóxicas. Era intenção de Ta-

borda formar especialista em química orgânica e bioquímica moderna,

Serviço de Controle PH e outros exames químicos.

— As seções de Físico-química e Química e Farmacologia experi¬

mentais, com os respectivos assistentes-chefes Klobusitzky e Slota — for¬

mavam corpo técnico de vinte e três pessoas, que após as mudanças do

Governo e Diretoria (6-5-38) foram sendo reduzidos até ficarem apenas

oito (saída dos assistentes estrangeiros em julho). Foi subordinada à

seção 0 Serviço de Concentração de Soros (técnico José Salcedo Navarro)

em novas e higiênicas instalações.

— Apesar da sugestão de Taborda para criação da Seção de Química

Imunológica, esta orientação não foi seguida pela reforma de 23-8 tendo

sido incrustada na Seção de Química, uma outra: exames Sanitários e

Químicos e exame Sistemático de Aguas Minerais e Medicinais do Estado.

— Em 1937 foi feito contrato com a firma Delpech e Cia. Ltda. para

venda exclusiva dos produtos do Instituto Butantan no Brasil e no estran¬

geiro. Em 7-3-1938 foi renovado o contrato onde em uma das cláusulas

concedia ao agente depositário, o desconto imediato de 40% sobre o valor

de fatura, o que deixava em de.svantagem o Instituto.

— Quadro geral dos assistentes do Instituto: nove assistente-chefes;

Dr. Alcides Prado, Dr. Cícero de Moura Neiva, Dr. Flávio O. R. da Fon¬

seca, Dr. Mòacyr de Freitas Amorim, Dr. Paulo Monteiro de Barros

Marrey, Dr. Joaquim Travassos da Rosa, Dr. José Bernardino Arantes,

Dr. Thales Martins, Dr. Sebastião de Camargo Calazans.

— Oito assistentes: Di'. Armando Taborda, Dr. Fernando Paes de

Barros, Dr. Ariosto Büller Souto, Dra. Jandira Planet do Amaral, Dr.

Paulo Rath de Souza, Dr. José Ribeiro do Valle, Dr. Aristides Vallejo

Freire, Dr. Leônidas de Toledo Piza.

— Seis assistentes-auxiliares; Dr. Domingos Yered, Dr. Favorino

Prado Júnior, Dr. Wolfgang Bucherll, Dr. Ananias Porto, Dr. Goswin

Karmann.

— Um assistente-químico: Dr. Antonio de Salles Teixeira.

— Assistentes novos indicados em 1938: Dr. Aristides Vallejo Freire,

Dr. Ariosto Büller Souto, Dr. José Ribeiro do Valle, Dra. Jandira Planet

do Amaral, Dr. Paulo Rath de Souza, Dr. Leônidas de Toledo Piza.

— Assistentes-auxiliares: Dr. Ananias Porto, Dr. Favorino Prado

Júnior, Dr. Wolfgang Bucherll, Dr. Domingos Yered.

1939

— Diretor do Instituto Butantan: Jaime Cavalcanti; Diretor-Geral

do Departamento de Saúde: Humberto Pasquale.

— Superação da crise administrativa:

Reaparelhamento dos laboratórios e remodelação das instalações de

diversas seções, dentre elas as de Concentração de Soros, Distribuição de

Produtos e Controle de Esterilidade. Para tanto foi formada uma comissão

composta por Flávio da Fonseca (IB), José Dutra de Oliveira (Diretoria

do Serviço de Laboratório) e José de Toledo Mello (Faculdade de Medi-

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OLIVEIRA, J. L. Cronologia do Instituto Butantan (1888-1981) 1.® Parte. Mem. Inat. Butantan,

11-79, 1980/81.

cina) ; foi construído um grande tanque de diálise e uma nova câmara

frigorífica para estoque de produtos.

Foram também reformadas as seções de Vírus Vacínico, seção de

Vírus e Virusterapia, dotando-a de aparelhamento para estudo e preparo

da vacina de febre maculosa, de forma a assegurar-se contra riscos de

contaminação daqueles que lá trabalhavam.

Foi estimada uma verba necessária de 2.600:00$000 para atender

as reformas: Seções de difteria, tipo exantemático e peste; serviço de

gás e construção da cocheira geral e por último, melhorar instalação da

diretoria, administração, museu, biblioteca etc.

Foi concedida verba de 700:000$000 e graças a esse crédito foi inicia¬

da a construção do novo pavilhão de laboratórios, cujas obras foram

confiadas à firma construtora Francisco Azevedo e Palma Travassos.

Foi retomado o programa do Instituto, isto é, produção de substân¬

cias biológicas para combate de doenças infecto-contagiosas e acidentes

por envenenamento de origem animal, distribuídas pelo Departamento de

Saúde do Estado, permuta com os lavradores e o restante vendido através

dos representantes comerciais.

Aumento da produção industrial com relação ao ano anterior na

ordem de 361:183?600.

Apesar do cultivo de grandes áreas foi sugestão do Estado a aqui¬

sição de mais terras, no interior, para criação de um tipo-padrão de

cavalo doador de sangue.

Intensificação da campanha para envio de animais peçonhentos do

Instituto, tendo concorrido para tanto a propaganda pelo rádio.

— Distribuição dos trabalhos técnicos — Divisão I — Produção:

a) Seção de Ofiologia (J.B. Arantes) soro antipeçonhentos, ana-

venenos.

b) Seção de Imunologia Experimental e Soroterapia (Jandira Planet

do Amaral) : toxinas (diftérica, estafilocócica, escarlatínica, estreptocó-

cica) anatoxinas e soros (diftérica, estafilocócico, escarlatínico, estrepto-

cócico e pneumocócico tipos I e II) e vacinas (estafilocócica, estreptocó-

cica, piogênica e pneumocócica).

c) Seção de Anaeróbios (Ariosto Buller Souto). Até junho de

1939 abi’angia os seguintes serviços: Soro antipestoso; controle, Museu

de Cultura; Soro antitífico; Soro anticolibacilar; Soro antitetânico; Tuber-

culina; Soro antiperfringens; Soro antioedematiens ; Soro anti-histolítico;

Vacinas antitíficas, antidisentéricas e antitífica.s-disentéricas orais e inje¬

táveis, serviço de antivírus tífico-paratífico, serviço de vacinas antipes-

tosa e antitetânica, instalação e funcionamento de S. Controle peste murina

(profilaxia da peste).

Com o aumento do pessoal técnico foram divididos os serviços desta

seção da seguinte forma:

José C.B. Ribas: produção de vacinas e soros antipestosos e controle

da peste murina.

J.S. Leme: produção de soros e vacinas coli-tífico-disentéricos, pro¬

dução de tuberculina e de Museu de Culturas.

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OLIVEIRA, J. L. Cronologia do Instituto Butantan (1888-1981) 1.® Parte. Mem. Inst. Butantan,

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Graças ao serviço de controle de peste murina foi detectado e debelado

0 foco de peste bubônica na Av. Água Branca, onde foram mortos mais

de 3.000 ratos e evitando surto epidêmico de graves conseqüências, dada

a forte concentração de operários na região. Vários fatores pertubaram

as seqüências dos trabalhos desta seção: a brusca transferência do pre¬

paro do BCG e 0 inquérito administrativo contra quase a totalidade dos

assistentes do Instituto; em decorrência da guerra na Europa, dificul¬

dades para o recebimento dos soros-padrões antitetânico e antigangre-

noso que passaram a ser enviados pelo “National Institute of Health” de

Washington.

d) Seção Vírus Vacínico (Cícero Neiva).

e) Seção de Vírus (febre maculosa) (Joaquim Travassos da Rosa

e 0 assistente A. Vallejo Freire) estudo experimental da febre maculosa

e preparo da vacina preventiva tipo Spencer-Parker; preparo do soro

antimeningocócico e das vacinas antimeningocócica e antigonocócica; con¬

trole da seção de distribuição, filtração e esterilização; controle da esteri¬

lidade dos produtos do Instituto.

Os serviços da seção estiveram prejudicados no ano anterior e pri¬

meiro semestre deste ano por causa do inquérito administrativo; com o

afastamento do assistente-chefe, foram interrompidas as pesquisas sobre

a febre maculosa de São Paulo.

O resultado do inquérito levou a seu arquivamento e autorizou os

implicados a reassumirem os seus cargos e a conseqüente retomada das

pesquisas iniciadas. Foram realizadas reuniões semanais inicialmente

com pesquisadores e técnicos da seção e depois ampliadas, com fins de

divulgação de conhecimento científico.

f) Seção de Bacteriologia (José C. Bulcão Ribas) soros antimicro-

bianos; antimeningocócico, antipestoso e vacinas antimeningocócica, pes-

tosa e gonocócica.

g) Seção de Colitifo-disentérico. (2.® semestre) José Sizenando de

Macedo Leme, segundo assistente da cadeira de Microbiologia e Imuno-

logia da Faculdade de Medicina da USP, em comissão no Instituto Butan¬

tan. Se encarregou dos preparos dos produtos: tuberculina, soro antífico,

soro anticolibacilar e Museu de Cultura.

h) Seção de Físico-química — concentração (Armando Taborda).

Esta seção contou com o auxílio da assistente, auxiliar, química Laura

Taborda. Foram realizados os controles de proteínas nos soros, dosagem

microquímicas de nitrogênio e análises microquímicas em geral, trabalhos

em colaboração sobre os venenos de cobras, além dos trabalhos de concen¬

tração e acondicionamento. Apesar da saída dos técnicos estrangeiros,

da supressão da subvenção do Instituto do Café, da insuficiente insta¬

lação da seção e diminuição do pessoal técnico foi possível prosseguir

os trabalhos atribuídos à seção.

i) Seção de Controle (Plínio Martins Rodrigues) iniciada em

novembro, para fins de estabelecer uma técnica para controle de esteri¬

lidade dos produtos.

j) Seção de Botânica Médica (Fernando Paes de Barros) falta de

laboratórios para pesquisas e falta de pessoal. O Horto Oswaldo Cruz

OLIVEIRA, J. L. Cronologia do Instituto Butantan (1888-1981) 1." Parte. Mem. Inst. Dutantan,

11-79, 1980/81.

tem sofíido depredações. A tintura de carobinha, único produto da seção,

logo teria que ser adquirido fora, devido à devastação das carobinhas

existentes.

— Divisão II — Pesquisa:

a) Seção de Ofiologia (II) Zoologia Médica (Alcides Prado) rece¬

beu ofídios por intercâmbio científico do Prof. Samuel Pessoal (Amazo¬

nas), Venezuela, produziu sete trabalhos científicos.

b) Seção de Ofiologia III (Wolfgang Bucher) estudos sobre os quiló-

podos da América do Sul, além de três trabalhos científicos publicados em

revistas especializadas, estava no prelo um trabalho completo (300 pág.)

sobre “Os Quilópodos do Brasil”.

c) Seção de Fisiologia (Thales Martins assistente J. R. Valle) onze

trabalhos publicados.

d) Seção de Parasitologia e Protozoologia (Flávio da Fonseca)

além dos trabalhos próprios da seção, acumulou trabalhos relativos à

produção do Instituto e aqueles realizados no Serviço de Profilaxia da

Malária do Departamento de Saúde do Estado. Trabalhos relativos à

coleção parasitológica e pesquisas de acareologia, protozoologia e helmin-

tologia. Foram publicados dezoito trabalhos científicos. Encarregou-se

da produção BCG.

e) Seção de Química e Farmacologia Experimentais (Laura Tabor-

da) faltava aparelhagem adequada à seção; realizava dosagem de Nitro¬

gênio e pesquisas sobre venenos em colaboração com a seção de físico-

química.

f) Seção de Química Analítica (Leônidas de Toledo Piza) seção

nova — necessidade de aparelhamento da seção. Já se encontrando amos¬

tras de trinta e oito produtos farmacêuticos para análise de fiscalização.

O prof. Toledo Piza foi comissionado para assumir a cadeira de Química

Analítica da Escola Politécnica, assumindo Gowin Karmann. Foram

atendidas solicitações de outras seções: aferição material, preparo de

soluções tituladas etc. Em outubro, reassumindo Toledo Piza, foram reini¬

ciados os trabalhos de fiscalização de produtos e trabalhos da Seção de

Meios de Cultura.

g) Seção de Medicina Experimental (Anatomia patológica) Barata

Ribeiro. Dqntre os vinte e um trabalhos experimentais da seção desta¬

cavam-se: “Contribuição ao Estudo da Semiologia e Patologia do Pân¬

creas Exócrimo”, pesquisas sobre tumores em ratos, pesquisas de Eurí-

clides de Jesus Zerbini e Moacyr Hoclz “Influência da Hipoavitaminose

nos processos de cicatrização”, trabalhos de biópsias em animais.

— A seção ainda estava incompleta em suas instalações.

1940

4-1 Ademar de Barros, interventor do Estado, presidiu ao lançamento

da pedra fundamental do novo prédio destinado aos laboratórios de bacte¬

riologia.

— Reformas e ampliações das instalações já existentes, dentre elas,

as seções de Vacina Jenneriana, seção de Vírus e Virusterapia (princi-

OLIVEIRA, J. L. Cronologia do Instituto Butantan (1888-1981) l." Parte. Mem. Inst. Butantan, i4/45.-

11-79. 1980/81.

palmente visando o aumento de produção da vacina preventiva contra a

febre maculosa), Seção de Anaeróbios, Parasitologia e de Controle de

Esterilidade, a Seção de Difteria e Soros Antitóxicos em geral (profilaxia

e terapêutica de moléstias infecciosas como a pneumonia, difteria, escar¬

latina, tifo e outras) habilitando-as a grandes campanhas sanitárias.

A seção Industrial, as seções de concentração, distribuição e Meios de

Culturas tiveram remodelação geral em suas instalações, objetivando o

aumento da produção e a qualidade dos produtos.

— Foi criada a Seção de Endocrinologia pelo decreto 11.032 de 16-4

e inaugurada em 30-7 por Ademar de Barros. Ela constituiu-se na amplia¬

ção da extinta Seção de Fisiopatologia (criada em 1934) e manteve em

funcionamento duas subseções: a parte experimental no Butantan e parte

clínica, instalada no Centro de Saúde de Santa Cecília.

— Melhoramentos nos parques, pintura dos prédios tornando o

Instituto um local agradável, também no aspecto turístico. Obtenção de

um guarda civil poliglota para atender turistas estrangeiros. E estava

em plano a construção de bar-restaurante para atender funcionários e

visitantes.

— Pelo decreto 11.032 de 16-04-40 foi extinta a Seção de Medicina

Experimental, que por transferência da Faculdade de Medicina, vinha

funcionando no Instituto Butantan desde 13-12-38.

— Pelo decreto 11.522 de 26-10-40 foi extinta a Diretoria do Serviço

de Laboratório de Saúde Pública e desta forma o Butantan torna-se depen¬

dente direto do Departamento de Saúde.

— Jayme Cavalcanti continuou como Diretor comissionado do

Butantan.

— O valor da produção industrial aumentou atingindo a cifra de

1.923:143$100 referentes a nove meses, posto que a produção esteve por

três meses paralisada em função das reformas acima referidas.

— Seções técnicas em funcionamento em 1940;

Ofiologia e Zoologia Médica (Alcides Prado e Wolfgang Bucherl).

Imunologia e Soroterapia Antivenenosas (José Bernardino Arantes).

Vacina Jenneriana (Cícero Neiva, Domingos Yered).

Imunologia e Soroterapia Antitoxinas e Antibacterianas os assis¬

tentes-chefes Sebastião Calazans em comissão no Instituto Adolfo Lutz

e Paulo Marrey comissionado junto ao Serviço de Policiamento da Ali¬

mentação Pública, respondendo pela Seção, a assistente Jandira Planet

do Amaral, auxiliada por mais três assistentes: Bulcão Ribas, Macedo

Leme e Celso Brandão. Nova redistribuição dos encargos técnicos, a

saber: preparo das toxinas e anatoxinas diftérica, estafilocócica, estrepto-

cócica e escarlatínica; soros diftérico, estafilocócico, estreptocócico, escar-

latínico e pneumocócico tipos I e II; vacinas estafilocócica, estreptocócica,

piogênica e pneumocócica e serviços anexos: seção de meios de cultura,

esterilização e sangria.

Seção de Anaeróbios que funcionou até o final do ano sob a respon¬

sabilidade do assistente-chefe Ariosto Buller Souto, que então solicitou

transferência para o Instituto Adolfo Lutz.

OLIVEIRA, J. L. Cronologia do Instituto Butantan (1888-1981 ) 1.* Parte. Mem. Inat. Butantan Aá/aS'

11-79, 1980/81.

Seção de Vírus e Virusterapia (J. Travassos da Rosa e assistente

A. Vallejo Freire) grande incremento da fabricação de vacina contra

febre maculosa, muito solicitada pelo Serviço de Saúde, além de palestras

científicas, trabalhos publicados (3) sobre febre maculosa, ampliação

de gama de pesquisas, como por exemplo, o tracoma e outras moléstias

de vírus, que podem atingir o homem. Foram realizadas viagens pelo inte-

rio do Estado com o fim de vacinação e instrução aos Médicos da região,

apenso a esta seção ficava também o serviço de Diagnóstico de Pes¬

te Murina, responsável J. C. Ribas; em colaboração com a Seção de

Epidemiologia e Profilaxia Gerais do Departamento de Saúde. O preparo

dos produtos: vacinas e soros antimeningocócico, antigonocócico, anti-

pestoso e Museu de Culturas; subseção "coli-tifo-disentérica"; subordi¬

nada à Seção de Imunologia e Soroterapia, a cargo de José Sizenando

de Macedo Leme, o preparo dos produtos: tuberculina, bucovacinas

(tífico-paratífico-disentérica) e vacinas injetáveis e soros antidisenté-

ricos. Foram suspensas a fabricação dos soros antitífico e soro anticoli-

bacilar, por falta de infra-estrutura técnica e pessoal insuficiente.

Seção de Química: o assistente responsável pela seção Leônidas de

Toledo Piza foi comissionado junto à Escola Politécnica, substituído por

Armando Taborda. Além das melhoras na assepsia e aumento do pro¬

duto, a seção prosseguiu estudos sobre venenos de cobra, especialmente

na parte enzimática, responsável pela ação proteolítica e outros estudos.

Seção de Controle de Esterilidade; (Favorino Prado Jr. assistente-

-auxiliar) os produtos foram submetidos a exames: culturas de meios, exa¬

me bacterioscópico e inoculação subcutânea em cobaias. Quanto a pesquisas,

estudos sobre tuberculose e participação no Segundo Congresso Nacional

de Hidroclimatismo (RJ) onde foram apresentados dez estudos rela¬

tivos a águas minerais do Brasil.

Seção de Botânica Médica (Fernando Paes de Barros) falta de con¬

dições materiais para pesquisa e o Horto estava em estado precário.

Seção de Endocrinologia: O responsável pela seção Tales Martins

voltou para Manguinhos, respondendo pela seção José Ribeiro do Valle.

Tiveram mais sessenta trabalhos cientificos publicados, dois trabalhos

apresentados na sociedade de Biologia de São Paulo e prosseguimento

dos estudos hormonais, além de manter intenso intercâmbio científico,

com entidades congêneres estrangeiras e inicio da organização de um

museu de peças anatômicas de interesse endocrinológico, além dos atendi¬

mentos na parte clínica no ambulatório especialmente criado.

Seção de Parasitologia (Flávio O. Ribeiro da Fonseca) colaboração

com o serviço de Profilaxia da Malária em Guarujá, organização da

coleção parasitológica e organização de um Museu Parasitológico, estudos

sobre protozoários parasitas, estudos sobre Depteros parasitas, descrição

de novos acarianos e produção da vacina BCG. A seção entregou dez

trabalhos científicos para publicação.

1941

— Em 26 de junho, Flávio da Fonseca assumiu a direção do Instituto

Butantan.

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OLIVEIRA, J. L. Cronologia do Instituto Butantan (1888-1981) 1.® Parte. Alem. Inst. Butantan, 44/45:

11-79, 1980/81.

— O Instituto readquiriu sua autonomia administrativa, estando

subordinada então, à Diretoria Geral do Departamento de Saúde.

— Medidas disciplinares visando regulamentação dos serviços; sus¬

pensão de vendas de leite e legumes a funcionários externos do Instituto,

suspensão da indústria de venda de peles de ofídios e de fotografias etc.

— A seção de Ofiologia que cuidava da cori’espondência com os

fornecedores foi transformada em Seção de Expediente.

— O contrato comercial para a representação dos produtos do

Instituto Butantan com a firma Carlos Amaral foi prorrogado por mais

cinco anos.

— Contrato com a Cia. Antárctica para exploração do serviço de

restaurante, que foi inaugurado a 15 de fevereiro.

— Em face da situação internacional, foi aumentado o estoque de

matéria-prima para atender a possíveis necessidades extraordinárias

do País. Aumento da produção de antitoxinas tetânicas e gangrenosas

e de vacinas tifico-paratífico-disentéricas.

— A convite do Reitor da Universidade do Brasil, Raul Leitão da

Cunha, o Instituto representado por J. H. Travassos e Armando Taborda,

na visita a Buenos Aires, dos Universitários do Brasil.

— Proposta de reforma Técnica e Administrativa do Instituto por

Flávio da Fonseca: criação de curso de especialização como atividade

cultural anexa à Universidade; criação de pequeno Hospital; desenvolvi¬

mento da seção do Museu; aumento de verbas para Biblioteca. Na parte

técnica: redivisão das atuais seções, criação dos laboratórios de Imuno-

logia Experimental, Micologia, de Biologia de Ofídios e de Quimioterapia

(Química Orgânica) dando autonomia à seção de Anatomia Patológica

e ao Laboratório de Tifo Exantemático e transformação da seção de

Botânica Médica, em Farmacologia, ampliando-lhe o campo de ação.

— Separação das seções técnicas da função industrial e de produção

científica, visando maior produção nas áreas.

— Previsão de criação do serviço de Veterinária, maiores facili¬

dades de viagens para os assistentes, aumento do número de técnicos,

aumento de verbas para aquisição de material de laboratórios, aumento

permuta de ofídios.

— “Por determinação governamental acha-se em estudo o plano da

instalação da cidade Universitária em terras do Instituto Butantan, apro¬

veitada para esse fim a área hoje utilizada para culturas, piquetes, indo

desde o Ribeirão Jaguaré até próximo do aqueduto de Cotia, para o

que foi promulgado o decreto n.® 12.401 de 16 de dezembro de 1941”,

página 10 do Relatório Anual.

— Foi autorizada, verbalmente pelo Governo do Estado a escolha

de uma fazenda, a uma distância não maior de 4 horas de viagem, à

margem da Estrada de Ferro da Sorocabana, para ressarcimento das

terras doadas e para o desenvolvimento da criação de eqüinos, bovinos

e agricultura.

— Denúncia falsa sobre nocividade da tuberculina fabricada no

Butantan.

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OLIVEIRA, J. L. Cronologia do Instituto Butantan (1888-1981) 1.* Parte. Mem. Inat. Butantan, 44/^5:

11-79, 1980/81.

— Desequilíbrio financeiro do Butantan apesar do aumento da

produção industrial.

— Grande atenção à seção de concentração de soros, pois depende

do bom funcionamento desta seção, o rendimento final de produção, daí

melhorias introduzidas tanto no aspecto técnico, como na aquisição de

aparelhagem.

— Ampliação dos biotérios de cobaias e coelhos e organização do

biotério de macacos reshus para pesquisas sobre vírus de febre amarela,

poliomielite e outros.

— Flávio da Fonseca organizou cursos de aperfeiçoamento em Bacte¬

riologia, Imunologia, Parasitologia e Animais Venenosos.

— Dada à situação internacional, foi iniciado estudo para possível

preparo de plasmas secos, para transfusão de sangue.

— Funcionamento de um laboratório provisório para estudo sobre

febre maculosa em Loreto (surto na região).

— Publicação de quarenta e nove trabalhos científicos, destacando-se

a seção de Endocrinologia, com dezoito trabalhos.

— Distribuição Técnica dos Serviços:

Laboratório de Soros Antivenenosos, Seção de Imunologia e Sorote-

rapia — J. B. Arantes.

Seção de Imunologia Experimental e Soroterapia: preparação das

toxinas, anatoxinas, soros, vacinas e serviços anexos (seção de meios de

culturas, sangria e esterilização e de 20-1 a 20-9 os serviços da seção de

anaeróbios — Jandyra Planet do Amaral).

Seção de Anaeróbios — Sebastião de C. Calazans esteve de licença

de janeiro a setembro e novamente em dezembro; foi substituído na chefia

de seção por Jandyra Planet do Amaral que teve como assistente Reynaldo

Furlanetto.

Seção de Vírus Vacínico — Cícero Neiva.

Seção de Vírus — J. Travassos (preparo da vacina contra a febre

maculosa e pesquisas para produção de soros anti-Rickettsia.

Seção de Bacteriologia e Serviço de Diagnóstico de Peste Murina —

J. C. Ribas.

Seção “Coli-Tifo-Disentérica” — J. S. Macedo Leme.

Seção de Física-Química (Armando Taborda) — pesquisas sobre

veneno bothrops e pesquisas referente a Concentração de Soros. Visita

ao Instituto Bacteriológico de Buenos Aires e outros congêneres. Fusão

das seções de Química, antes divididas em Química e Farmacologia, à de

Físico-Química.

Seção de Controle (Plínio Martins Rodrigues).

Seção de Botânica Médica (Feimando Paes de Barros). Não foi pro¬

vido de laboratório auxiliar para manutenção do Horto; daí seu quase

completo abandono.

Seção de Ofiologia e Zoologia Médica (Alcides Prado) e Wolfgang

Bucherl. O estudante de Medicina Paulo Emílio Vanzolini foi estagiário

da seção.

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OLIVEIRA, J. L. Cronologria do Instituto Butantan (1888-1981) 1.^ Parte. Mem. Inat. Butantan, j^i/45:

11-79, 1980/81.

Seção de Parasitologia (Flúvio da Fonseca) além de trabalhos de

produção e pesquisa em conjunto com outras seções do Instituto, colaborou

com o Serviço de Profilaxia da Malária e Seção de Tuberculose, ambos

do Departamento dependência direta da Saúde.

Seção de Águas Minerais — devolução do aparelhamento para Insti¬

tuto Adolfo Lutz (Antonio de Salles Teixeira).

Seção de Endocrinologia (J. Ribeiro do Valle e Paulo Rath de Souza)

participação no Segundo Congresso Panamericano de Endocrinologia em

Montevidéu e visita a Buenos Aires; realização de cursos e intercâmbio

científico.

1942

— O Instituto Butantan recuperou sua autonomia administrativa,

passando a ser dependente direto da Secretaria de Estado dos Negócios

da Educação e Saúde Pública pelo decreto 12.787, de 30 de junho de 1942,

deixando a tutela do Departamento de Saúde, a que estava subordinado

desde a criação da Diretoria de Laboratório de Saúde Pública.

— O Instituto Butantan sofreu reflexos da guerra, pois foram cor¬

tadas as importações de material de laboratório e o existente no mercado,

sofreu conseqüente encarecimento. Mas, apesar das dificuldades, conse¬

guiu bater recordes de produção visando atender às Forças Armadas e/ou

populações civis dos produtos biológicos necessários. Na área de pesquisas

no campo da patologia humana, foram produzidos vinte e quatro trabalhos

originais a serem publicados no tomo XVI das Memórias, além de vinte

e um trabalhos publicados em outras revistas especializadas.

— Dentre as pesquisas em curso, destacou-se aquelas desenvolvidas

nas Seções de Química e Físico-Química, com a colaboração da Bacterio¬

logia, sobre a “Penicilina”. Estão sendo ultimados os preparativos para

produção de plasma seco em escala industrial, estimando-se a produção

em 1.200 unidades mensais, isto é, podendo manipular 250 litros de plasma

humano, possibilitando assim o transporte de plasma seco para transfu¬

sões a longas distâncias. Outra pesquisa em curso, de destaque, foi para

obtenção de um soro ativo contra o tifo Exantemático e as de uma nova

técnica de obtenção da vacina contra a mesma infecção por Joaquim

Travassos da Rosa, utilizando vírus cultivado em embriões de galinha.

Também estavam sendo desenvolvidos trabalhos de isolamento e cristali¬

zação de flávina de venenos ofídicos, nas seções de Química e Físico-

-química.

— Foram realizadas dezesseis conferências, aulas e comunicações

em sociedades científicas e cinqüenta reuniões internas, para comunicação

e discussão de bibliografia.

— Medidas para incremento de produção de medicamentos: nova

aparelhagem para maior rendimento de produção de soros, suspensão de

férias dos funcionários, racionalização do estoque de matérias-primas,

que resultaram na produção de 2.199.389 unidades de medicamentos

diversos no valor de Cr$ 3.010.479,00 (cruzeiros antigos).

— Foi entregue um anteprojeto de Decreto-lei para reformas do

Instituto, sugeridas no ano anterior, destacando-se : dissociação das ativi¬

dades industriais das pesquisas; autonomia financeira em relação às

SciELO

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OLIVEIRA, J. L. CronolofiTÍa do Instituto Dutantan (1888-1981) 1*‘ Parte. Mem, Inat. Butantan,

11-79, 1980/81.

rendas próprias; organização de um Curso de Aperfeiçoamento, para

candidatos a assistentes; estabelecimento de um Serviço Hospitalar, para

uso das seções.

— Apesar da paralização de muitas obras dentro do Butantan em

função da guerra, foram ampliadas as instalações do biotério para criação

de cobaias, que teve sua produção quintuplicada; foi iniciada a construção

do biotério de camondongos.

— O Serviço Federal de Febre Amarela, que vinha funcionando

desde 1939 no prédio destinado à residência do Diretor do Instituto, foi

transferido por se tratar de trabalho administrativo, tornando o prédio

à sua função original.

— Racionamento de gasolina, álcool e óleo combustível e reativação

para produção do gasogênio (mais barato) para transportes e funcio¬

namento de caldeiras e outras máquinas.

— Apesar do racionamento que afetou os transportes, continuou

grande o afluxo de turistas ao Butantan, tendo sido registrado o afluxo

de 46.114 visitantes.

— De 12.600 fornecedores de cobras, 8.845 estiveram inativos no

triénio passado, daí a reativação e a sistematização dos serviços de propa¬

ganda. O instituto vinha sofrendo concorrência de instituições particulares

com finalidades comerciais.

— A produção de vacina BCG, feita até então no Butantan, passava

a ser feita no Instituto Dispensário Clemente Ferreira, praticamente o

único consumidor deste produto.

— Em decorrência da Guerra e a participação do Brasil, agravam-

se as dificuldades de trabalho do Butantan para solucionar seus problemas

técnicos (nas áreas de pesquisa e produção) mas, ainda assim, houve

intensificação das atividades industriais para fornecimento de produtos

indispensáveis à Saúde Pública e às Forças Armadas, batendo recorde

de produção.

— Apesar das atividades de pesquisas estarem prejudicadas, foi

publicado 0 volume XVII das Memórias, com dezoito trabalhos nas se¬

guintes especialidades: Ofiologia, Parasitologia, Escolopendromorfos,

Endocrinologia e Bacteriologia.

— Várias pesquisas estiveram em andamento; dentre os assuntos:

estudos sobre imunologia, biologia de animais peçonhentos etc. desta¬

cando-se especialmente as relativas à produção de soro curativo contra

Febre Maculosa e aqueles sobre o preparo da Penicilina; solicitou-se

para tanto a ampliação dos respectivos laboratórios.

— Continuou em atividades o Ambulatório Clínico de Endocrinologia

no Posto de Saúde Santa Cecília, para estudo de distúrbios hormonais e

no projeto de reforma proposto pela diretoria, solicitou-se a criação, neste

serviço, de alguns leitos para internamento.

— Várias conferências realizadas por técnicos do Instituto para

outras instituições: Ministério da Agricultura, Sociedade Química do

Brasil, Sociedade Brasileira de Biologia, Faculdade de Medicina de Recife,

Escola de Saúde do Exército, além de reuniões internas.

SciELO

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OLIVEIRA, J. L. Cronologia do Instituto Butantan (1888-1981) 1.“ Parte. Merti. Inst, Butantan,

11-79, 1980/81.

— Colaboração com outras instituições: Serviço Nacional de Peste,

Diretoria do Interior e Cia. Paulista de Estradas de Ferro, quanto a

problemas de febre amarela, realizando pesquisas e instalando laborató¬

rios de campo nos locais de foco da doença, além de fornecimento de

forragens para várias instituições estaduais, durante a grande estiagem.

— O Butantan participou da colaboração interamericana, colaborando

com Costa Rica, Chile e Guatemala no fornecimento de soros antiofídicos

e antitetânicos.

— No esforço de guerra, o Butantan colaborou com a intensificação

da fabricação de produtos biológicos, dispondo para as Forças Armadas

soros, vacinas e especialidades biológicas no valor de um milhão de cru¬

zeiros (antigos) sendo distribuídas em cotas, de 70% para o Exército,

20% para a Marinha e 10% para a Aeronáutica militar.

— Foi concedido crédito especial de um milhão de cruzeiros para

aquisição nos Estados Unidos da aparelhagem necessária ao preparo do

plasma seco para transfusões.

— Além do que, esta aparelhagem atenderá outras atividades, como

secagem da vacina variólica, para sua maior conservação; a manutenção

de amostras de vírus e de bactérias; a secagem de venenos, com a con¬

servação quase integral do poder tóxico; o preparo de produtos opoterá-

picos; a secagem de anticorpos dos soros curativos e da penicilina em

via ser produzida no Instituto.

Foi adquirido também, um grande forno elétrico, para esterilização

a seco da vidraria dos laboratórios, além de outros aparelhos e produtos.

— As obras do prédio iniciado em 1938 e que estavam paralisadas

por falta de verba, foram reiniciadas, prevendo-se sua inauguração para o

ano seguinte.

— Remodelação completa da rede elétrica.

— Construção de gasómetro para armazenagem.

— Reforma da rede telefônica para instalação de PBX.

— Projetos para construção de novos laboratórios para a seção de

vírus, principalmente para atender necessidade das pesquisas e produção

de vacinas e soros contra Febre Maculosa e outras rickettsioses.

— Pelo Decreto 12.401 de 16-12-41 foi desmembrada a área para a

Universidade de São Paulo, limitada pelos encanamentos adutores de

água que, do reservatório de Cotia se dirigiam para a cidade, cortando

as terras do Instituto no sentido horizontal. A Reitoria da Universidade

foi autorizada a tomar posse das terras pelo ato de 07-07-1943.

— Foi autorizado pelo Interventor Federal a aquisição de uma

fazenda com área suficiente para expansão das atividades do Instituto,

com terra adequada para o desenvolvimento da pecuária e exploração

agrícola e próximo a linha da Estrada de Ferro Sorocabana. A escolha

recaiu sobre a fazenda Riachuelo, no município de Conchas, com 1300

alqueires de terras, sendo analisadas as vantagens para sua aquisição.

— Estiveram em comissionamento o assistente-chefe Plínio Martins

Rodrigues no Rio de Janeiro, para freqüentar os serviços de vírus filtrá-

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OLIVEIRA, J. L. Cronologia do Instituto Butantan (1888-1981) 1.* Parte. Afem. Inst. Buiantan,

11-79, 1980/81.

veis da Fundação Rockefeller e do Instituto Oswaldo Cruz; Paulo Marrey,

junto à Diretoria de Fiscalização de Alimentação Pública; Antonio de

Salles Teixeira, junto à Diretoria de Produção Mineral do Governo Fe¬

deral ; e reassumiu o cargo na seção de Físico-química Gosurin Rarmann,

após viagem de estudo nos Estados Unidos.

— Foram intensificadas as criações de animais de laboratórios nos

biotérios, aumento de criação de eqüinos, e aprimoramento das raças

eqüinas e bovinas. Foram aplainadas e aterradas toda bacia correspon¬

dente ao açude existente no Instituto.

— O novo secretário da Educação e Saúde confirmou Flávio da Fon¬

seca no cargo de Diretor.

— Foi concedido ao Butantan pelo Interventor Federal um crédito

especial de sete milhões de cruzeiros (antigos) ; dos quais 5 1/2 milhões

para ampliação dos serviços de pesquisas e combate a Febre Maculosa.

— Em 1943, existiam cerca de 280 funcionários trabalhando no

Instituto.

— O fluxo de visitantes tinha se mantido alto, apesar das restrições

de combustível com a guerra.

— Em estudos, a proposta de reforma do Instituto: necessidade

entre outras, de separar as funções de produção industrial e pesquisa nos

laboratórios. A produção atingiu a cifra de 3 milhões de cruzeiros.

“Trabalhos de investigação científica”:

1. Pesquisa sobre febre maculosa (Drs. J. Travassos e A. Vallejo

Freire) distribuição geográfica dos focos da doença, além da pesquisa

e do preparo da vacina preventiva e curativa.

2. Pesquisa sobre a produção dos soros antitetânico e gangrenoso.

(Drs. S. C. Calazans e Furlaneto)

3. Pesquisa sobre soros antipeçonhentos e anavenenos (J. B. Aran-

tes) pesquisas sobre o paralelismo que se verifica entre a dosagem do

soro anticrotálico por meio do seu poder protetor in vivo (pombo) e pela

precipitação in vitro.

4. Pesquisas sobre difteria (Jandiyra Planet do Amaral) pesquisas

sobre imunologia aplicada a difteria.

5. Pesquisa sobre a incidência da peste murina em São Paulo

(José Bulcão Ribas).

6 Pesquisas sobre a vacina antitífica (Plínio Rodrigues, Lindorf

Carrijo e Celso Brandão).

7. Pesquisas sobre Penicilina (A. R. Taborda, Laura Taborda e

Favorino Prado) ensaio de produção semi-industrial de penicilina.

8. Pesquisas parasitológicas (Flávio da Fonseca), pesquisas sobre

ácaros e o trabalho de divulgação sobre “Animais Peçonhentos”.

9. Pesquisas sobre Zoologia Médica e Ofiologia (Alcides Prado)

livro sobre Serpentes do Brasil.

10. Pesquisas sobre animais venenosos (Wolfgang Bücherl) des¬

tacando-se 0 estudo sobre o valor terapêutico do veneno de abelhas nas

1 SciELO

OLIVEIRA, J. L. Cronologia do Instituto Butantan (1888-1981) 1.* Parte. Mem. Inat. Butantan,

11-79, 1980/81.

algias reumatismais, precisando melhor as indicações do “Reumapiol”

fabricado no Instituto Butantan.

11. Pesquisas sobre as quinas brasileiras (F. R. Paes de Barros).

12. Pesquisas endocrinológicas (J. R. do Vale, Ananias Porto, J. I.

Lobo, L. Decorert e A. Marcondes da Silva) prosseguimento de pesquisas

experimentais e atendimento clínico, onde eram tratados os casos de

moléstias endócrinas, muitas vezes com preparado obtido na própria

seção: hormônios femininos, tiróidiano e do lobo posterior da hipófise.

Estudo sobre a morfologia e Fisiologia do Sistema endócrino dos ofídios

e na parte experimental, a verificação da ineficácia das preparações de

hormônio de crescimento.

— De junho de 1943 a abril de 1944, assumiu a direção do Butantan

0 Dr. Otto Bier.

1. Medidas de mudanças para 2.° semestre de 1944; após reunião

dos bacteriologistas e imunologistas do Instituto (Calazans, Arantes, Car-

rijo, Jandyra Planet do Amaral) foi resolvido centralizar o serviço de

produção do Instituto, sob a responsabilidade de um assistente-chefe bacte¬

riologista ou imunologista; no caso foi escolhido S. C. Calazans; desta

forma procurava-se maior rendimento da pesquisa.

2. Mudanças dos laboratórios de Bacteriologia do Instituto para

prédio novo, que abrigaria também a seção de Anatomia Patológica.

3. Reforma e ampliação da Seção de Vírus, riquétsias, e viagem do

Dr. J. Travassos da Rosa aos USA.

4. Reformas da biblioteca, do parque do museu.

5. Necessidade de aumento do quadro de cientistas do instituto,

principalmente para a Seção de Química e Ofiologia.

— Início de estudos visando o preparo de vacina contra Coqueluche.

— O soro antitetânico fabricado no Butantan possuía titulagem supe¬

rior aos internacionais.

— Pesquisas sobre a quinina no tratamento do paludismo.

— Falta de pessoal e recursos materiais dificultando a eficiência de

inúmeras pesquisas, dentre elas sobre a Penicilina, ainda assim foram

realizados estudos experimentais e ensaios de produção industrial.

1944

— Neste ano foram reorganizados os trabalhos do Instituto e remo¬

deladas as instalações, com importação de vários instrumentos.

— Dr. Otto Bier permaneceu como diretor do Instituto.

— Foram reafirmadas as funções do Instituto, a saber:

a) pesquisa científica;

b) produção de soros, vacinas e outras especialidades biológicas,

destinadas ao tratamento das doenças humanas;

c) ensino: cursos de extensão universitária, conferências de divul¬

gação, formação de técnicos especializados etc.

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OLIVEIRA, J. L. Cronologia do Instituto Butantan (1888-1981) 1.* Parte. Mem. Inat. Butantan, Jtk/kS:

11-79, 1980/81.

— Foi porém ressaltado “que a pesquisa científica é a atribuição

precípua de Butantan, que deve ser considerado essencialmente como um

centro de estudos de medicina experimental, em suas particulares aplica¬

ções a higiene e a fisiopatologia humana”: Ótto Bier. Relatório Anual da

Diretoria do Instituto Butantan, 1944.

— Principais trabalhos e pesquisas realizados no Instituto: preparo

de soros purificados de alto valor terapêutico pesquisados por bacterio¬

logistas e imunologistas na seção de Imunoterapia; processos de dosagem

dos soros antiofídicos; inoculação do veneno da cascavel pelo respectivo

antiveneno; estudos de imunologia quantitativa com os venenos e seus

respectivos antivenenos; diagnóstico bacteriológico da peste, tendo sido

identificada a ocorrência da leptospirose em ratos; na seção de Química,

a produção de penicilina purificada, sob a forma de sal de bário, obten¬

do-se resultados iguais à penicilina produzida no estrangeiro. Entretanto

optou-se por interromper a produção pois implicaria na criação de infra-

estrutura industrial, com administração própria, que fugiria às atribui¬

ções do Instituto. Prosseguiria apenas estudos relativos a penicilinoterapia

e ao controle da penicilina introduzida no país pela indústria farmacêutica

norte-americana. Também estavam sendo realizadas pesquisas para se

estabelecer as condições de preparo em larga escala da ovo-vacina contra

a febre maculosa na seção de Vírus, tendo o assistente-chefe Dr. Travassos

da Rosa viajado para USA a fim de adquirir domínios sobre pormenores

da técnica com o descobridor daquela vacina Dr. H. R. Cox e comprar as

aparelhagens necessárias para produção; pesquisas farmacológicas: ação

farmacodinâmica dos venenos crotálicos e botrópicos.

— Ampliação e remodelação das instalações do Instituto:

1.0) reforma do edifício principal, onde funcionava os laboratórios

e que passariam a abrigar os serviços de administração, a biblioteca e a

sala de reuniões científicas;

2. °) adaptação do embasamento da nova construção destinada aos

laboratórios de Bacteriologia e Imunologia e onde se instalaria também o

“Serviço de Produção de Plasma Seco”;

3. °) reforma geral do Biotério e construção de um biotério para

animais inoculados;

4. °) construção de um aviário para o fornecimento de cerca de 2.000

ovos embrionados por semana para seção de Vírus;

5. ®) remodelação geral do Parque do Instituto e dos serpentários;

6. °) construção de uma nova cocheira para 200 cavalos;

7. °) adaptação da atual cocheira para funcionamento de museu

educativo sobre questões de ofidismo, de biologia em geral de profilaxia

e epidemiologia das moléstias infecciosas;

8. ®) instalação de um hospital e ambulatório com os serviços anexos

de raios X e laboratórios clínicos para internamento dos indivíduos picados

por serpentes venenosas e de casos clínicos a serem estudados pela Seção

de Endocrinologia, com 10 leitos;

9. °) reforma das instalações da Seção de Vírus;

10.°) construção de um novo pavilhão para os laboratórios de Quí¬

mica, Endocrinologia e Farmacologia com os respectivos biotérios.

OLIVEIRA, J. L. Cronologia do Instituto Butantan (1888-1981) 1.* Parte.

11-79, 1980/81.

Mem. Inat. Butantan, 44/45:

— 0 Estado tem cogitado adquirir uma fazenda para o Instituto com

a finalidade de abrigar os cavalos fornecedores de soro em fase de des¬

canso, criação de vitelos para produção de vacina antivariólica e criação

de macacos “rhesus”.

— O Instituto vinha incrementando e aperfeiçoando a produção da

anatoxina tetânica associadamente à vacina tífica, além dos soros antite-

tânico, antigangrenoso e antianaeróbico.

— No laboratório de difteria, além das pesquisas já iniciadas e da

produção de rotina, vinham sendo feitas investigações extensas sobre a

freqüência dos portadores de difteria nos grupos escolares da capital e

pesquisa sobre a terapêutica combinada soro-penicilina da infecção me-

ningocócica

— Aperfeiçoamento da técnica e obtenção de vacina mais eficiente

contra o tifo.

— A endocrinologia prosseguiu em suas pesquisas experimentais e

clinicas e na preparação dos hormônios feminino, tiroidiano e do lov

posterior da hipófise e pesquisas relativas a veneno de cobras.

— A coleção de ofídios tem aumentado, contando nesta época com

10.501 exemplares.

— Instalação dos laboratórios de pesquisa (Bacteriologia, Imunolo-

gia. Controle e Anatomia Patológica) no novo edifício bem como do

gabinete do Diretor.

— Com a reforma e ampliação da Seção de Vírus (Pavilhão Lemos

Monteiro) visava-se não só o incremento da produção da vacina preven¬

tiva contra febre maculosa como estudo de outras moléstias provocadas

por vírus (gripe, poliomielite, encefalomielite etc.).

— A estrutura determinada pela reforma de 1931 não correspon¬

dendo às atuais necessidades do serviço e no funcionamento prático de

vários laboratórios que recebem denominações diversas e desvincularam-

-se das seções antes estabelecidas foi necessário reorganizar o Instituto

de forma a se adequar às atuais exigências.

— A seção de Fisiopatologia foi desdobrada em duas seções autôno¬

mas: Endocrinologia e Histopatologia.

— A seção de Citologia e Genética Experimental estava extinta na

prática desde 1937, com a saída da Dra. G. von Ubish.

— Foi reiterada a necessidade de maior autonomia do Instituto e

não anexação ao Departamento de Saúde, pois ainda que fornecendo pro¬

dutos a esse departamento, seria necessário maior autonomia à direção

do I.B. para aplicação livre na pesquisa do Instituto das rendas prove¬

nientes das vendas efetuadas.

— Em 4 de janeiro de 1945 foi aprovado pelo Departamento de

Serviço Público a nova estrutura do Instituto Butantan que então passou

a ser:

I — Seções Técnicas — Laboratórios de produção e laboratórios de

pesquisas:

a) Anatomia Patológica

b) Bacteriologia

SciELO

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OLIVEIRA, J. L. Cronologia do Instituto Butantan (1888-1981) !•* Parte. Mem. Inst. Butantan,

11-79, 1980/81.

c) Endocrinologia

d) Farmacologia

e) Imunologia

f) Imunoterapia

g) Ofiologia e Zoologia Médica

h) Parasitologia

i) Química

j) Riquétsias

1) Vacina Jenneriana

m) Vírus

II — Serviços Técnicos Auxiliares:

a) Biblioteca

b) Desenho e Fotografia

c) Hospital Vital Brazil

d) Horto Oswaldo Cruz

e) Museu e Serpentário

f) Meios de Cultura e Esterilização

g) Criação de Animais e Culturas

h) Cocheiras de Imunização

III — Serviço de Administração:

a) Seção de Comunicação

b) Seção de Expediente

c) Seção de Contabilidade

d) Seção de Material e Transporte

e) Oficinas e Obras.

As duas antigas seções de Físico-Química Experimental e de Botânica

Médica foram extintas e criadas então as seções de Controle, Farmaco¬

logia, Imunoterapia, Riquétsias e Vacina Jenneriana.

Os serviços de produção se centralizaram numa seção única, a Imuno¬

terapia, sob a chefia de S. C. Calazans de forma de melhorar tanto a

produção como aumentá-la, estimular a pesquisa científica, antes sobre¬

carregada com encargos de produção.

— A seção de Imunoterapia distribuiu os seus serviços por 3 labo¬

ratórios :

1. Produção de bacterinas e soros antibacterianos.

2. Produção de toxinas, anatoxinas e soros antitóxicos.

3. Serviço de sangrias, concentração de soros e distribuição de

produtos.

— A produção de anavenenos e de antivenenos ainda não foi anexada

ao centro de produção, estando sob a responsabilidade do Dr. J. B.

Arantes. E a produção de vacina jenneriana se manteve na seção respec¬

tiva, sob a chefia de Cícero Neíva, sendo neste ano aumentada a produção,

devido ao surto de varíola na Capital.

1 SciELO

OLIVEIRA, J. L. Cronologia do Instituto Butantan (1888-1981) 1.“ Parte. Mcm. Inst. Butantan,

11-79, 1980/81.

— Além das reformas dos prédios, foi instalada a rede PBX e adqui¬

ridas várias aparelhagens de laboratórios, de escritório e maquinário

agrícola.

— Foi necessário aumentar o volume de vendas dos produtos feitos

através do representante comercial, quer no Brasil como no estrangeiro.

Daí a necessidade de dispor a Diretoria de maiores verbas para aquisição

de material destinado à produção. Uma vez que a legislação federal

proibia a aplicação direta de renda que deveria obrigatoriamente ser

recolhida ao Tesouro, pleitearia esta Diretoria, por eqüidade, em relação

ao que acabava de ser concedido ao Instituto Biológico de São Paulo e a

outras repartições do Estado, que se consignasse no orçamento uma verba

mínima de Cr$ 200.000,00 para ser empregada no desenvolvimento do

serviço de produção de soros e vacinas no Instituto Butantan (a tal verba

seria compensada por anulação da receita com parte da renda, recolhida

ao Tesouro no mesmo exercício).

— Estavam sendo examinadas as condições para aquisição da Fazenda

São Joaquim, de propriedade de Emílio Guerra, no município de São

Roque, situada próxima à estação de São João, da Estrada de Ferro

Sorocabana. A Fazenda possuía 470 alqueires de terras, com excelentes

instalações e infra-estrutura básica, tendo já bem desenvolvida a criação

de animais.

— Necessidade de melhorar o nível do pessoal técnico do Butantan

e da instituição de melhores salários de acordo com o regime de tempo

integral. Necessidade de contratação de mais pessoal técnico especializado

de nível superior.

— O Decreto-lei número 15.094 de 11-10-45 reorganizou o Instituto

Butantan.

— A nova reorganização dos serviços técnicos do Instituto permitiria

maior autonomia da direção para articular e agrupar os laboratórios, de

acordo com a estrutura interna de funcionamento prático do mesmo, con¬

veniência e necessidade do serviço.

— Assim ficariam distribuídos os serviços técnicos:

A) Laboratórios de Produção:

1. Serviço de Imunoterapia:

a) Laboratório de Bacterinas e Soros antibacterianos: Drs. S. C.

Calazans e Favorino Prado Jr.

b) Laboratório de Antígenos tóxicos e soi’os antitóxicos: Dr. R. S.

Furlanetto.

c) Laboratório de Concentração e Purificação de Soros: Dr. Celso

Brandão.

2. Serviço de controle (incluindo a produção de anavenenos e

antivenenos) Dr. J. B. Arantes.

3. Serviço de Vacina Jenneriana: Dr. Cicero Neiva.

4. Dependências anexas: Meios de Cultura, Esterilização e Lava¬

gem; Sangrias e Distribuição asséptica de produtos.

1 SciELO

OLIVEIRA, J. L. Cronologia do Instituto Butantan (1888-1981) 1.* Parte. Mem. Inat. Butantan, U/i5:

11-79, 1980/81.

B) Laboratórios <ie Pesquisas:

1. Laboratório de Anatomia Patológica:

a) Histopatologia: Professor Dr. Moacir Amorim; Dr. C. A, Sal-

vatore (estagiário) ;

b) Hematologia: Dr. Gastão Rosenfeld;

c) Citogenética: Professor G. Schreiber (estagiário).

2. Laboratório de Bacteriologia: Dra. Jandiyra Planet do Amaral,

Dr. E. Biocca (estagiário).

3. Laboratório de Botânica Médica: Dr. Fernando Paes de Barros.

4. Laboratório de Endocrinologia: Drs. J. R. do Valle, J. Leal

Prado, S. B. Henriques e O. B. Henriques (estagiário).

5. Laboratório de Farmacologia: Dr. Ananias Pereira Porto.

6. Laboratório de Imunologia: Dr. A. Vallejo Freire, Dr. F. Eich-

baum (estagiário).

7. Laboratório de Ofiologia e Zoologia Médica:

a) Ofiologia: Dr. Alcides Prado;

b) Zoologia Médica: Dr. W. Bücherl.

8. Laboratório de Parasitologia: Drs. Flávio da Fonseca e A. T.

Leão.

9. Laboratório de Química: Dr. F. Berti, Dr. H. W. Rzeppa

(estagiário).

10. Laboratório de Vírus: Drs. J. Travassos, Plínio M. Rodrigues,

L. M. Carrijo e Luiz A. R. do Valle (estagiário).

— Aumento de 3,5 vezes a produção de toxina diftérica com relação

ao ano anterior (1.838.900 cm’).

— Viagem do Dr. R. S. Furlanetto ao Chile para aperfeiçoamento

técnico do preparo do soro antigangrenoso e outros estudos referentes a

anaeróbios no Instituto Bacteriológico do Chile.

— 26 Pesquisas científicas realizadas: nas áreas de Imunologia,

Bacteriologia, Parasitologia, Soroterapia, Patologia, Ofiologia, Endocri¬

nologia, etc.

— Dos serviços novos, apenas o Serviço de Plasma foi iniciado,

pela impossibilidade material de sua instalação no prédio, que ainda se

acha em construção.

— Foi inaugurado o Hospital Vital Brasil em 12-11-1945 com a pre¬

sença do Secretário da Educação Jorge Americano e de Vital Brasil,

então homenageado. O hospital funcionou na antiga residência do Diretor

(atual diretoria).

— O Decreto n.o 14.678 de 24-4-45 autorizou o governo do Estado

a adquirir a Fazenda São Joaquim, e o Estado já entrou na posse^ da

mesma, dando início aos trabalhos, inclusive o plantio de 50 alqueires

de milho.

1 SciELO

OLIVEIRA, J. L. Cronologia do Instituto Butantan (1888-1981) 1.® Parte. Mem. Inst. Butantan, kk/U5:

11-79, 1980/81.

— Dentre as construções novas já concluídas estavam: pavilhão

para 1.000 coelhos, biotério de animais inoculados, instalação do Labora¬

tório de Endocrinologia, Laboratório de Vírus, Laboratório de Parasito-

logia e instalação definitiva dos Serviços de Esterilização e Lavagem, e

da Câmara de Distribuição Asséptica.

— Foi sugerido pelo diretor ao Governo do Estado autorização para

que através da firma Produtos Butantan Ltda., o Diretor do Instituto

pudesse contratar pessoal para serviço da produção, correndo tais des¬

pesas por um encontro de contas com o produto das vendas feitas ao

representante comercial. Desta forma se estabeleceria um regime de

semi-autarquia a ser adotado apenas no setor de Produção.

— Dentre os objetivos propostos para o ano seguinte estavam;

aumento do quadro de pessoal técnico especializado, contratação de biolo¬

gistas e químicos, viagens de técnicos do Butantan a centros de pesquisas

estrangeiras.

— Desenvolver Serviço de Pesquisas sobre Malária, conforme plano

apresentado por Flávio da Fonseca.

E também deveriam ser desenvolvidos os trabalhos para preparo

da vacina contra gripe, um serviço de pesquisa sobre vírus neurotrópicos

(encefalites, poliomielite) incluindo o diagnóstico, a epidemiologia e a

profilaxia (eventualmente o preparo de vacina preventiva). Anexo ao

serviço de plasma, a instalação de um laboratório para determinação

de eletroforese, seguindo o método de Fiselius.

— Necessidade de reorganizar os serviços de contabilidade e aumen¬

tar pessoal administrativo.

— Necessidade de contabilizar o fornecimento de produtos a Depar¬

tamento de Saúde como Receita da repartição.

— Foi extinto o armazém para fornecimento de gêneros de primeira

necessidade anexo à Caixa Beneficente.

Mem. Inst. Butantan

4^/45:Sl~nS, 1980/81

NOTES ON MICRO AND ULTRASTRUCTURE OF

“OBERHÃUTSCHEN” IN VIPEROIDEA *

A. R. HOGE**

S. Alma ROMANO HOGE***

ABSTRACT: Description of a new technique for microscopical study

of “Oberhâutschen; description of a new genus; Protobothrops- the

genera, Portliidium, Dothriechis and Bothriopsis are considered as

distinct from Bothrops-, with a short diagnose of the Agkistrodon-

tini, and redescription of Calloselaftma rhodostoma and C. annamensis.

KEYWORDS: “Oberhàutschen; Viperoidea; Protobothrops; Porthi-

dmm-, Bothriechis; Bothriopsis-, Agkistrodontini-, Calloselasma rho¬

dostoma; Calloselasma annamensis.

INTRODUCTION

This preliminary account on Crotalid snakes is based on the study

of a large number of specimens. Besides the classical methods in sistematic

zoology, special attention is given to the superficial structure of the skin.

In 1953 the Sênior author and Souza Santos published a paper on sub-

microscopic structure of “Stratum corneum” (oberhàutschen) showing

the value of the method in taxonomy. Besides the electron microscopic

method a new method for use in optic microscopy is described. The

conclusion is that the method is extremely useful. For the moment about

90% of the species from the Bothrops Trímeresiirus complex were exa-

mined. Definitions of the genera will be modified but to avoid useless

changes in nomenclature the authors will wait to complete their studies

before introducing the changes maintaining for the moment a more con-

servative nomenclature. The solenoglyphous snakes are included in a super-

family, Viperoidea subdivided into two families: Atractaspiidae for the

primitive colubrid-like Mole false vipers; Viperidae for the vipers, with

four subfamilies; Viperinae (true vipers); Azemiopsinae (Mole Vipers);

Causinae (Night adders) and Crotalinae (Pit Vipers). The Crotalinae are

• This Work was supportcd in part by grant LM 00418 — LM 00698 from the National Library of

Medicine, National Institutes of Health, US Department of Health Education and WelWelfare; by

the CNPq and FINEP, BRAZIL.

♦* Director of the Division of Biology, Institute Butantan — 05504 — Cx. postal, 65 — São Paulo —

BRAZIL.

Scientif Researcher from the CNPq, Institute Butantan — BRAZIL.

1 SciELO

HOGE, A. R. & ROMANO HOGE, S. A. Notes on micro and ultrastructure of “Oberhâutschen” in

Viperoidea. Mem, Inat. Butantan, 4^/45tSl-llS, 1980/1981.

Figs.: 1, 2, 3, 4 — CaXlosclasma annamensia holotypo Ç

Mus. Nat. Hist. Nat. n.° 3.323

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HOGE, A. R. & ROMANO HOGE, S. A. Notes on micro and ultrastructure of “Oberhâutschen” in

Viperoidea. Mem. Irist. Butantan, ^^/^5;81-118, 1980/1981.

Fig. 5 — Calloeelasma annameiisia holotypo $

Mus. Nat. Hist. Nat. n.® 3.323

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HOGE, A. R. & ROMANO HOGE, S. A. Notes on micro and ultrastructure of “Oberháutschen” in

Viperoidea. Mem, Inat. Buiantan, t81-118, 1980/1981.

divided in two tribes; Agkistrodontini for the genera Agkistrodon, Callo-

selasma, Deinagkistrodon, Gloydius and Hypnale (Hoge and Romano Hoge,

1981), and Crotalini for the genera; Crotalus and Sistrurus (Rattlesna-

kes) ; Bothrops, Porthidium, Bothriechis and Bothriopsis (American scale

snouts); Trimeresurus, and Protobothrops (Asiatic Pit Vipers); Tropido-

laemus (Chin-keeled Pit Viper) and Ovophis (The mountain and Okina-

wan pit viper). The genus Agkistrodon “sensu auctores” is considered as

formed by five genera: Agkistrodon for the American species; Calloselas-

ma for C. rhodostoma and C. annamensis; Deinagkistrodon for D. acutus;

Gloydius for the asiatic forms except Deinagkistrodon, Callosélasma and

Hypnale for H. hypnale, H. nepa and H. walli.

METHODS

Resides the classical methods in systematic zoology, special attention

is paid to microscopic and ultramicroscopic structurs of “Oberháutschen”

Pockrand 1937. (Epitrialschicht of Leydig 1873, “stratum corneum” of

Hoge et Souza Santos, 1953). Direct optical examination of “oberhâuts-

chen” is very difficult due to the thickness of the preparation. A new

technique of replica is used for examination with optical microscope.

Instead of making replicas by the “stripiny method (Schaffer 1943) the

replica was done directely on the slide. The slides are from Plexiglas, a

drop of chloroformium is placed on the plexiglas and the snake scales

are pressed against leaving a perfect replica of the scale. This prepa-

rations can be stored indefinitely unlike the ones by the dry-striping

method. The examination of the replicas was made with the help of a

Siemens electron microscope type UM 100 b at original magnifications

of 1300 and 6300.

STRUCTURE OF “OBERHÁUTSCHEN”

Comparing the microscopic, and or, the submicroscopic structures of

Bothrops and Trimeresurus (fig. 27, 28, 51 and 52) it is easy to distin-

guish them on the base of their pattern.

The very large number of species already examined permit us to

conclude that very distinct patterns permit the use of this structure for

the distinction of genera for ex.: Boa; Xenoboa; Eunectes; Corallus;

Lystrophis; Conophis; Ditaxodon; Python etc. (figs. 31 to 39 and 44, 45).

Between Viperidae the distinction of: Atheris, Echis, Vipera, Both¬

rops, Trimeresurus, Tropidolaemus etc. is possible on the base of the

ultrastructure.

A very large number of genera and species are already examined

and the results will be published in a fortcoming paper.

Here we will limit us to a few genera and species of Crotalinae.

Using the replicas prepared for optical microscopic examinations

the shape of cells and microornamentation is easely observed (fig. 46

and 62).

1 SciELO

HOGE, A. R. & ROMANO HOGE, S. A. Notes on micro and ultrastructure of “Oberhâutschen” in

Viperoidea. Mcm. Inst. Butantan, 44/45t81A18, 1980/1981.

Figs. 6 and 8 — Calloeelasma annamcnsia

Mus. Nat. Hist. Nat. n.® 1920 — A 216

Figs. 7 and 9 — Callosclaema rhodostoma

Mus. Nat. Hist. Nat. n.® 1970-583

HOGE, A. R. & ROMANO HOGE, S. A. Notes on micro and ultrastructure o£ “Oberhâutschen” in

Viperoidea. Mem. Inat. Butantan, 81-118, 1980/1981.

Fis:s. 10 and 11

Calloaelasma rhodoatoma

Mua. Number: MNHN n.® 1970 — 683

Locality: Plantation Krek, Cambodge

Collector: Saint Giron

HOGE, A. R. & ROMANO HOGE, S. A. Notes on micro and ultrastructure of

Viperoidea. Mem. Inat. Butantan, 4-4/45*81-118, 1980/1981.

“Oberháutschen” in

Before discussing the results it seem interesting to observe that,

sometimes different patterns appears in the sarae genus (sensu auctores)

but till now the different patterns are always associated with other

characters.

Although the use of the scanning microscopic give the best results,

the optic technique here described, is very usefull, simple and permit a

quick observation.

Bothrops: a pattern of allongated and generally keeled cells (fig. 51

and 27 and 29).

Trimeresunts: a pattern of large, not or nearly not allongated cells

(fig. 28 and 52).

Tropidolaemus: a pattern of rounded cells, strongly covered with

complicated keells and stripes (fig. 53 and 58).

In Ovophis the pattern observed (only O. okinavensis and O. chaseni

studied) is quite similar to Trimeresurus (fig. 62).

A distinct pattern was observed in flavoviridis, mucrosquamatus and

jerdoni. This pattern together with other characters permit to put them

in a distinct genus.

Protobothrops Gen. Nov.

DIAGNOSIS

A pit viper with allongated, not forked, and generally edentulous

palatine (fig. 80). The maxillary without the projection on border of

cavity, similar to Bothrops; the anterior border of ectopterigoid not

enlarged as in Trimeresurus and Ovophis. Splenial and angular distinct;

structure of paraventral with fingerlike projections; structure of dorsais

showing a striated pattern (fig. 41). The median wing of the prefrontal,

unlike in Trimeresurus and Tropidolaemus, present, but small in size.

RELATIONSHIP

Related to Bothrops by the pattern of paraventral structure (fig. 42).

Easely distinguished from Trimeresurus by the structure of dorsais,

paraventrals (fig. 40 and 41) ; the different shape of palatine, maxillary,

ectopterygoid, and prefrontal (figs. 80, 81).

Type species: Protobothrops flavoviridis.

Species here considered as belonging to the genus Protobothrops:

P. flavoviridis (Hallowell 1860) ; P. jerdoni (Günther 1875) and P. mu¬

crosquamatus (Cantor, 1839).

Bothrops

The genus Bothrops as here defined can be characterized by:

Palatine deeply forked (fig. 68), internai border of maxillary not

provided with projection; ectopterygoid with anterior part not large and

square; splenial and angular present; structure of dorsais showing allon¬

gated and keelled cells (figs.: 75, 27, 29 and 55).

SciELO

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IIOGE, A. R. & ROMANO HOGE, S. A. Notes on micro and ultrastructure of “Oberhâutschen” in

Viperoidea. Mem. Inet. Butantan, 4-4/45:81-118, 1980/1981.

Figs. 12 and 13

CaÜoselaama annamensis Angel

Locality: Cap. Saint Jacques, Sud Vietnam

Mus. Number: MNHN — 1920 A 216

Col.: Mignon.

HOGE, A. R. & ROMANO HOGE, S. A. Notes on micro and ultrastructure of

Viperoidea. Mem. Inat. Butantan, ^^/i5:81-118, 1980/1981,

Oberhâutschen

Fig. 14

Callosclaama annamcnaia

Locality: Plantation Krek, Cambodge

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HOGE, A. R. & ROMANO HOGE, S. A. Notes on micro and ultrastructure o£ "Oberhâutschen” in

Viperoidea. Mem. Inst. Butantan, 4-^/^5:81-118, 1980/1981:

A few species of Bothrops “sensu auctores” do not share all those

characters: undulatm, bicolor, schlegeli, lateralis, nigroviridis, nummifer

and lanshergii.

Although more data has to been computed before further subdividing

the Bothrops group a few genera can already be revalidated.

Porthidium Cope

This genus related to both Bothrops and Trimeresurus differs from

Bothrops by the structure and ultraestructure of dorsais wich are closely

related to the ones observed in Trimeresurus (fig. 46).

From Trimeresurus by shape of maxillary and ectopterygoid wich

are similar to the ones observed in Bothrops (fígs. 66, 72).

The shape of palatine is somewhat intermediate between Bothrops

and Trimeresurus. Differs from Bothrops and Trimeresurus by having

splenial and opercular fused (figs. 70 and 76).

The genus Porthidium as here defined is diferent from Burger’s

conception of the genus Burger states that all but nasutus have splenial

and angular separated. The specimens of lanshergii examined all have

splenial and angular fused.

Type species: Porthidium lanshergii (Schlegel), 1841.

The following species are included in this genus: P. brachstoma,

P. dunni, P. nasutus, P. ophryomegas, and yucatanicus (not seen).

Bothriechis Peters

This genus already recognized by Savage is really different from

the genus Bothrops by the structure of “oberhautschen” (fig. 57).

Type specimes: Bothriechis nigroviridis species here included in the genus

B. nigroviridis subsp. (including rowleyil).

Bothriopsis Peters

This genus already recognized by Burger is here restricted to B.

castelnaudi and B. lichenosus.

Diagnosis will be given in a forthcoming paper.

Type species: B. castelnaudi.

Species here included B. castelnaudi with B. lichenosus either as a

species or subspecies.

Genera inquerendae

undulatus, bicolor, schlegeli, lateralis, pictus, nummifer, supraciliaris,

till now in the genus Bothrops “sensu auctores”. Some species, specially

bicolor, are closely related to Trimeresurus. (Fig. 43).

The species T. kaulhacM and T. kanburiensis still need to be studied.

T. capitetriangidatus although having the maxillary and palatine

of the Trimeresurus shape, a distinct striped pattern of dorsal scales the

shape of ectopterygoid also is quite unusual. More specimens are needed

before conclusion.

1 SciELO

HOGE, A. R. & ROMANO HOGE, S. A. Notes on micro and ultrastructure of “Oberhãutschen” in

Viperoidea. Mem. Inat. Butantan, 4-4/-45:81-118, 1980/1981.

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HOGE, A. R. & ROMANO HOGE, S. A. Notes on micro and ultrastructure of “Oberhâutschen” in

Viperoidea. Mem. Inat. Butantan, 1980/1981.

Agkistrodontini (Historical)

In 1896 Boullenger included in the same genus Agkistrodon the genera

Hypnale Fitzinger, 1843, Halys Cray, 1849 (non Fabricius, 1803) and

Calloselasma Cope (nom. nov. pro Leiolepis Duméril, 1853) (non Cuvier,

1829), nearly no attempt was made for the revival of those genera,

except by:

1957 Chernov who removed Calloselasma from the synonymy and

gave additional reasons for the revival of the genus.

Unfortunatelly he was not followed by the authors.

1971 Burger in his doctor thesis (l.c.) revived Calloselasma and

Hypnale. Burger used Agkistrodon for the American species,

Calloselasma for the species rhodostoma and acutus and

Hypnale for the other Asiatic species.

1977 Gloyd revived Hypnale (without mention to Burger’s thesis

or to Dis-sertation Abstract International 32 (10)1972 but

restricted to Hypnale only the species H. hypnale; H. nepa

and a new species H. walli, giving a good diagnosis.

1978 Gloyd describes a new genus Deinagkistrodon for the single

species acutus.

1981 Hoge and Romano Hoge conclude that Agkistrodon “sensu

auctores” is a complex of five genera: Agkistrodon Beauvois,

Calloselasma Cope, Deinagkstrodon Gloyd, Hypnale Fitzinger

and a new genus Gloydins. They subdivide the subfamily

Crotalinae in two tribe: Crotalini and Agkistrodontini.

TRIBE Agkistrodontini

Rattleless pit vipers with large symmetrical shields on top of the

head; sometimes the internasals and prefrontals broken up into scales

of scalelike shields. When broken up in scales dorsais in 17 row at midbody.

Contains five genera: Agkistrodon Beauvois, 1799; Calloselasma

Cope 1859; Deinagkistrodon Gloyd 1978; Gloydius Hoge and Romano

Hoge 1981 and Hypnale Fitzinger, 1843.

Range: Asia from the borders of Caspian Sea Eastwards to Japan and

southwards to Sri-Lanka and Indonésia; North and Central America.

DIAGNOSIS OF THE GENERA

Agkistrodon Beauvois, 1799

A rattleless Pit Viper; nine large symmetrical shields on the upper

surface of the head; internasals and praefrontals well developed; dorsais

keeled; anterior subcaudals single; upper labiais usually forming the

anterior border of the loreal pit; snout not produced in a dermal appen-

dage; skull short and broad; supratemporal (tabular) extending beyond

the braincase. Skull very broad, as broad or nearly as broad as the

distance of praefrontals from posterior and of braincase; palatine not

deeply forked; ectopterygoid not hooked; broad and strongly curved.

SciELO

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HOGE, A. R, & ROMANO HOGE, S. A. Notes on micro and ultrastructure of “Oberhâutschen” in

Viperoidea. Mem. Inat. Butantan, 1980/1981.

Fifir. 20 — Calloaelaêina rkodoatoma

Fiar. 21 —• CaUoaelasma annamenaiê

Fig, 22 — CaUoèçlaama rhodoatoma

Fig. 23 Deinagkiatrodon acutua

Fig. 24 — Agkiatrodon contortrix

Fig. 26 — Gloydiua blomhoffii blomhoffi

SciELO

HOGE, A. R. & ROMANO HOGE, S. A. Notes on micro and ultrastructure of "Oberhâutschen” in

Viperoidea. Mem. Inst. Butantan, 1980/1981.

articulated with pterygoid on both internai and externai side angular

and splenial separated (fig. 77) (except for A. hilineatus fide Marx,

1972).

The structure of “Oberhâutschen” shows allongated cell contours,

(fig. 59).

Not related to any asiatic or european genera of Agkistrodontini,

charing only a single character with the monotypic genus Deinagkis-

trodon, in not having angular and splenial fused.

Contains: Three species, all viviparous.

Range: From North to Central America.

Calloselasma Cope 1860

A rattleless Pit Viper with; dorsal scales smooth loreal pit separated

from the labiais; subcaudals paired, palatine very peculiar with a long

anterior process toothles or provided with a single teeth, ectopterygoid

slender, hooked and not strongly curved; braincase broad, supratem-

poral not or nearly not extending beyond braincase; angular and

splenial fused (fig. 82). Structure of oberhaütschen nearly structurless

not related with any of the other genera of Agkistrodontini.

Contains: Two species: C. rhodostoma and C. annamensis, oviparous.

Range: From Laos to Djawa.

Deinagkistrodon Gloyd, 1978

A rattleless Pit Viper related to both Agkistrodon and Calloselasma.

Dorsal scales keeled; snout with a distinct dermal appendage; scales of

the lowermost row near the tip of the tail distingtly higher than wide,

(upper head shields finely granulated; loreal pit bordered by the second

upper labial; palatine with a dorsal process, deeply forked in front and

provided by ±5 teeth ectopterygoid slender not hooked, even more

strongly articulated with pterygoid than in Agkistrodon. Oberhâutschen

with rounded cells (fig. 61).

Angular and splenial not fused; (fig. 78)

Contains: a single species. Viviparous.

Range: South China, Tong-King, Taiwan.

Gloydius Hoge and Romano Hoge 1981

A rattleless pit viper different from, Agkistrodon, Calloselasma

and Deinagkistrodon by cranium wich is long and narrow scales of the

lowermost row near the tip of the tail not distingtly higher than wide,

from Calloselasma by the keeled dorsais and not hooked ectopterygoid;

from Deinagkistrodon by the absence of produced dermal appendage

on snouth; from both Agkistrodon and Deinagkistrodon by very short

supratemporals not extending posteriorly beyond the braincase. Angular

and splenial fused or not (Fig. 83). The M. O. different from all other

Agkistrodontini but remembering both Protobothrops (Crotalini) and

Agkistrodon {Agkistrodontini).

Contains: Seven species. Viviparous.

1 SciELO

HOGE, A. R. & ROMANO HOGE, S. A. Notes on micro and ultrastructure of “Oberhâutschen** in

Viperoidea. Mem. Inat. Butantan, 81-118, 1980/1981.

Fig. 27 — Bothrope pradot (Scan. Micr. x 530)

Fig. 28 — Trimeresurus gramineua (Scan. Micr. x 630)

Fig. 29 — Bothropa pradoi (Scan. Micr. x 4,500)

Fig. 30 — Trimereaurua gramincMa (Scan. Micr. x 4,600)

SciELO

HOGE, A. R. & ROMANO HOGE, S. A. Notes on micro and ultrastructure of “Oberhâutschen” in

Viperoidea. Mem. Inst. Butantan, 4^/^5:81-118, 1980/1981.

Boa conatrictor conatrictor amarali (Dorsal Electron Micr. x 6,200)

Xenoboa cropanii (Dorsal Electron Micr. x 6,200)

Euncctes murinus (Dorsal Electron Micr. x 6,200)

Tropidophia paucidens (Dorsal Electron Micr. x 6,200)

CorallvÃ caninua (Dorsal Electron Micr. x 6,200)

Lyatrophia nattereri (Dorsal Electron Micr. x 6,200)

Conophia vittatua — Type specimen — (Dorsal Electron Micr. x 7,200)

Python reticxdatxLa (Dorsal Electron Micr. x 6,200)

Crotalua duriaaua terrificua (Dorsal Electron Micr. x 6,200)

Fig, 31

Figr. 32

Fig. 33

Fig, 34

Fig. 36

Fig. 37

Fig. 38

Fig. 39

SciELO

HOGE, A. R. & ROMANO HOGE, S. A. Notes on micro and ultrastructure of “Oberhâutschen’*

Viperoidea. Mem. Inst. Butantan, 4^/^5:81-118, 1980/1981.

Range: Eastern Europe; Continental Asia southwards to Indonésia and

westwards to Japan.

Hypnale Fitzinger 1843

Distinct from, Agkistrodon, Calloselasma, Deinagkistrodon and

Gloyctius by the praefrontals and internasals which are broken up in

scales by the dorsais which are in 17 rows; by the presence of a very

short and strongly hooked ectoperygoid (only slightly hooked in rhodos-

toma) ; from Agkistrodon and Gloydius by the pattern of M.O., angular

and splenial fused, (Fig. 84).

ContaÂns: Three species. Viviparous.

Range: Sri-Lanka and índia, Western Ghats as far north as 16.° L.N.

ANNAMENIAN AND MAL AY AN PIT VIPERS

During a stay at the “Laboratoire of Reptiles et Amphibiens” of the

“Museum National d’Histoire Naturelle” in Paris, a very distinct pattern

in some specimens of Calloselasma called our attention.

The fine collection of Reptiles and superior library of the Paris

Museum; the large series of specimens in the British Museum and

Rijksmus. Nat. Hist. at Leiden besides the previous notes on specimens

in several other institutions, enabled us to conclud that two taxons are

included under the name of Agkistrodon rhodostoma.

In march 1981 a visit to the Knoll-Twyford laboratories at Ludwigs-

hafen allowed us, not only to observe the largest known series of live

Malayan pit vipers, but also complete the data on geographical distribu-

tion. The Twyford laboratories maintain several hundreds of Calloselas¬

ma rhodostoma to produce the venom necessary for the elaboration of a

commercial anticoagulant.

A drawing in Seba (1736) seems to be the first reference to a speci-

men of the actual genus Calloselasma but the poor quality of the fig.

turns identification doubtfull, almost impossible.

The first good description of a specimen of C. rhodostoma belongs to

Patrick Russel 1801-1809, pl. XXI :24-25. This description and drawing

was based on a specimen from Java. No scientifical or vernacular name

was given.

Reinwardt in Boie (1827) was the first to name the species as

Trigonocephalus rhodostoma.

For about twenty years this species was consecutively included in

the genera: Vipera; Trigonocephalus and Tisiphone.

Duméril (1853) created a separate genus for rhodostoma, Leiolepis,

unfortunately preocupied by Leiolepis Cuvier (Lizard).

Cope (1860) gives a subst. name, Calloselasma for Leiolepis Duméril

1853.

Boulenger (1896) puts Calloselasma in the synonymy of Ancistrodon

in his Catalogue.

SciELO

10 11 12 13 14 15

HOGE, A. R. & ROMANO HOGE, S. A. Notes on micro and ultrastructure of “Oberhâutschen” in

Viperoidea. Mem. Inst. Butantan, 81-118, 1980/1981.

Fig. 40 — TrivicresuTUS albolabria (Dorsal Electron Micr. x 8000)

Fig. 41 — Trimercsurus jcrdoni (Dorsal Electron Micr. x 8000)

Fig. 42 — Bothrops jararacuasu (Paraventral Electron Micr. x 8000)

Fig. 43 — Bothropa bicolor (Paraventral Electron Micr. x 8000)

100

HOGE, A. R. & ROMANO HOGE, S. A. Notes on micro and ultrastructure of “Oberhâutschen” in

Viperoidea. Mem. Inet. Butantan, 1980/1981.

Fig

Fie

— Ditaxodon taeniatua — Type spccimen (Dorsal Electron Micr. x 1,200)

— Conophia vittatua — Type specimen (Dorsal Electron Micr. x 1,200)

— Porthidium lanabergii rozei (Opt. Micr. ± x 200)

2 3 4

SciELO

10 11 12 13 14 15

HOGE, A. R. & ROMANO HOGE, S. A. Notes on micro and ultrastructure of

Viperoidea. Mem. Inst. Butantan. 4-4/-45:81-118, 1980/1981.

'‘Oberhâutschen” in

Angel (1933) describes a new species of Agkistrodon from Annam,

Agkistrodon annamensis.

Smith (1943) puts A. annamensis in the synonymy of A. rhodostoma.

Klemmer (1963) mentions A. annamensis and A. rhodostoma without

any coment.

Campden-Main (1970) uses Calloselasma rhodostoma for specimens

from Vietnam.

Since Boulenger’s Catalogue no attempt was made to revive Callose¬

lasma except by Chernov (1957) ■who removed Calloselasma from the

synonymy of Agkistrodon but -was not followed by the autors, except

Campden Main l.c.

Burger 1971 in his dissertation for PhD thesis used Calloselasma for

rhodostoma and acutus.- In 1978 Gloyd formed a new genus for acutus

(Deinagkistrodon acutus). In 1981 Hoge and Romano Hoge subdivided

Agkistrodon “sensu auctores” in several genera: and includes them in a

new tribe the Agkistrodontini:

Agkistrodon Beauvois 1799 for the American species (3 species)

Calloselasma Cope, 1860 (two species)

Deinagkistrodon Gloyd 1978 (one species)

Gloydius Hoge and Romano-Hoge 1981 nom subst. pro Halys Gray

1849 preocupied by Halys Fabricius 1803 (seven species).

Hypnale Fitzinger 1843 (three species)

Calloselasma annamensis (Angel)

Annamenian Pit Viper (Fig. 6, 8, 12, 13 and 14)

1875 CalloselcLsma rhodostoma; Morice, Coup d’oeil sur la faune Coch.

Franç. Rept., :67.

1885 Calloselasma rhodostoma; Tirant {partim ?), Excurs. et Recon-

naissance ^0:399 (not seen) fide Saint Girons.

1885 Calloselasma rhodostoma; Tirant {partim ?), Notes sur les

Reptiles et Batraciens de la Conchinchine et du Cambodge,

Saigon :37

1933 Ancistrodon annamensis Angel, Buli. Mus. Nat. Hist. Nat.,

Paris, Serie 2 (2), 5:277, fig. 1.

1936 Agkistrodon annamensis; Bourret, Serp. Indo-Chine, :454.

1943 Ancistrodon rhodostoma; Smith (partim) The Fauna of British

índia, Ceylon and Burma including the whole of the Indo-

-Chinese Sub-Region vol. III — Serpentes :497 text fig. 158

A, B and C.

1963 Agkistrodon annamensis; Klemmer, Behringwerk-Mitteil. Die

Giftschlangen der Erde. (Sonderband) :397.

1968 Agkistrodon rhodostoma; Leviton (partim), Venomous Verte-

brates. Acad. Press., 1, p. 560.

1970 Calloselasma rhodostoma; Campden-Main (partim), A Field

guide to the Snakes of South Vietnam, USNM :96 + text, fig.

-H maps.

102

SciELO

10 11 12 13 14 15 16

überháutschen

HOGE, A. K. & ROMANO HÜGE, S. A. Notes on micro and ultrastructure of

Viperoidea. Mem. Inat. Butantan, 1980/1981.

Figr. 47 — Atheris nitschei nitschci

Fig. 48 — Echis carinatus pyramidum

Fig. 49 —. Vtpero Icbctina turanica

Fig. 50 — Vipcra russeüi rusaclli

103

2 3 4

SciELO

10 11 12 13 14 15

HOGE, A. R. & ROMANO HOGE, S. A. Notes on micro and ultrastructure of “Oberháutschen” in

Viperoidea. Afem. /twí. Butantan, 4^/45:81-118, 1980/1981.

Fig. BI — Bothropa moojeni

Fi?. 52 — Trimercsurus gramineus

Fig. 63 — Tropidolaemus wagleri

FifiT. 64 — Atractaspia irrcgularis conradsi

All fig. Opt. Micr

X 100

104

SciELO

HOGE, A. R. & ROMANO HOGE, S. A. Notes on micro and ultrastmcture of “Oberhautschen*' in

Viperoidea. Mem. Inst. Butantan, 4^/^5:81-118, 1980/1981.

1972 Agkistrodon rhodostoma; Saint Girons (partim), Mem. Mus.

Nat. Hist. Nat. Série A Zoologie, 74:153.

1981 Calloselasma annamensis; Hoge and Romano-Hoge, Mem. Inst.

Butantan, 4:2/4^:193, 1978/79 (1981).

Type locality: Vinh-Hoa, Southern Annam Vietnam.

Range; Eastern Cambodge, Southern Annam, Vietnam (map. fig.)

MATERIAL

M.N.H.N.P.N^ 1933-23, 9 (Type specimen) from “Sud de TAnnam”,

Vietnam, col. by the “Mission Citroen”; M.N.H.N.P.N^ 1887-173, from

Tonkin, don. by Heckel; M.N.H.N.P.N--. 1920-215, 9 and 1920 A-215 juv.

from Cap Saint Jacques, Sud Vietnam, col. by Mignon; M.N.H.N.P.N^

1911-67, 3 and 1911-67, 9 from Cap Saint Jacques, Sud Vietnam, col.

by Chatel; M.N.H.N.P.N^ 1912-76, á and 1912-79, 9, from Cambodge

col. by Charpentier, M.N.H.N.P.N^ 1937-30, 9. Environ de Bien-Hoa Sud

Vietnam, col. by Toilane ; M.N.H.N.P.N'’. 1970-582 Plantation Krek, Cam¬

bodge, col. by Saint Giron; B.M.N^ 1937-2-1-17, 9 (bad state of preser-

vation) Nakham between (Uteradit and Paklay N.E. Siam press. by

M. A. Smith; B.M.N^ 1937-2-1-13, O, from N.W. of Raheng Northern

Siam; B.M.N"". 1921-4-1-49, O and 1921-4-1-50, O from Cap Saint Jacques

South Vietnam pres. by M. A. Smith; B.M.N^ (7505), 1968-837, O Cham-

-Am P. Siam foot of Hill, M. A. Smith pres. B.M.N^ (8268) 1968-839

O N.W. of Raheng (Rak ng?) (Now Tsheng (=Tak) Thailand, col by

Nai Put; B.M.N'’. (2610) 1968-841, O, from Cap Saint Jacques. For the

elaboration of the maps following localities where quoted (They where

tentatively atributed to annamensis on base of geografical localisation) :

Sakhon Nakon, Prov. Sakon Nakhon, Thailand; Lop Buri, Prov. Lop.

Buri, Thailand; Korat (=Nakon Ratchasima) prov. of Nakhon Racha-

sima Thailand.

Kumpawapi 250 km North of Korat = Nakon Ratschásima) Thailand

Lat. 17° 10’N long. 102° 50’E.

Nong Kai; Chiang Mai; Thailand. Laos and the following localities

in Vietnam; Phu Rieng, Pham Rang, Loe Ninh, Ben Cat. Xaun Loc,

Long Binh, Phu Vinh and Kompong Speu.

DESCRIPTION

Closely related to Calloselasma rhodostoma but postocular band indis-

tinct and never festooned (fig. 3, 4, 8 and 21).

Calloselasma rhodostoma Reinwardt in Boie

Malayan Pit Viper

1736 in Seba, Thes. 2, pl. 68, fig. 6 (?). Very bad drawing and

identification doubtfull.

1801-1809 in Russel, Cont. acc. Indian Serpents., 2, pl. 21:24.

*1827 Trigonocephalus rhodostoma Reinwardt in Boie, Isis 1827,

.2^:561.

105

1 SciELO

HOGE, A. R. & ROMANO HOOE, S. A. Notes on micro and ultrastructure of überhautschen in

Viperoidea. Mcm. Inst. Butantan, 1980/1981.

Fiíf. 65 — Bothropa moojenx

Fiff. 66 — 2'rimere8uru8 albolabria

Fig. 67 — Bothrxechiê nigroviridia marchi

Fig. 68 — Tropidolaemua wagleri

AU fig. Opt

Micr.

X 200

106

SciELO

HOGE, A. R. & ROMANO HOGE, S. A. Notes on micro and ultrastructure of “Oberhãutschen” in

Viperoidea. Mem. Inst. Butantan, 1980/1981.

Fif?. 69 — Agkiatrodon bilineaitie

Fig'. 60 — Hypnalc hypnale

Fig. 61 — Deinagkistrodnn acutus

Fig. 62 — Ovophis okinavensis

All iig. Opt. Micr.

X 200

107

SciELO

HOGE, A. R.

Viperoidea.

& ROMANO HOGE, S. A. Notes on micro and ultrastructure of “Oberhâutschen” in

Mem. Inat. Butantan, -^4/45:81-118, 1980/1981.

1830

Trigonocephalus rhodostoma; Wagler. Syst. Amph. :174.

1832

Vipera praetexta Gravenhorst. Deliciae Mus. Vrátisv. Trigo¬

nocephalus praetexta Hemprich.

1837

Trigonocephalus rhodostoma; Schlegel, Essai Phys. Serp.

1:190, 240 and 2:541, pl. 20, fig. 1-3.

1843

Tisiphone rhodostoma; Fitzinger. Syst. Rep.: 28.

1844

Trigonocephalus rhodostoma; Schlegel. Abb. n. Amph. 59-63,

140, pl. 19, fig. 1-10 and pl. 49.

1849

Trigonocephalus rhodostoma; Gray, Cat.: 19.

1853

L\_eiolepis~\ rhodostoma; Duméril, Mém. Acad. Sc., 23:5^4.

1854

Leiolepis rhodostoma; Duméril, Bibron et Duméril, Erp Gén.

7(2) :1500.

1859

(1858-1859) Tlrigonoceplialus] (Tisiphone, Fitz.), rhodos¬

toma; Jan, Prodome d’une Iconographie descriptive des ophi-

diens... :29.

1860

Calloselasma [rhodostoma']; Cope, Proc. Acad. Sei. Phila-

delphia (1859) ;336.

(1861 fide Troschel).

1861

(1860) Trigonocephalus rhodostoma; Reinhardt, Herpeto-

logiske Meddelelser.

1863

(Tisiphone) T[rigonocephalus] rhodostoma; Jan Elenco

sist. :125.

1863

Tisiphone rhodostoma; Peters. Mb. Berl. Akad., 1862:673.

1864

Calloselasma rhodostoma; Günther, Rept. Brit. índia :391.

1870

(1869) L[eiolepis] rhodostoma; Westphal-Castelnau, Cat.

col. Rept. :| 49 .

1872

Trigonocephalus rhodostoma, Schlegel, De dierenterin :43

+ fig.

1874

Trigonocephalus rhodostoma; Jan, Icon. Gén. Ophid livr.

46, pl. 6, fig. 2.

1892

Ancistrodon rhodostoma; Boettger, Ber. Off. Verh. Nat.,

29/32:1S5. (non vidi)

1896

Ancistrodon rhodostoma; Boulenger, Cat. Snake Brit. Mus.,

3 :527.

1902

Ancistrodon rhodostoma; Lampe et Lindholm. Jahrb. d. Nass.

Ver. f. Nat. 55 :43.

1912

Agkistrodon rhodostoma; Barbour, Mém. Mus. Comp. Zool.

Harward Coll., 44:139.

1912

Ancistrodon rhodostoma; Boulenger. Vert. Fauna Malay Pe¬

nínsula, Rept. and Batrachia, :213, fig. 64.

1904

Ancistrodon rhodostoma; Annandale, J. Asiat. Soc. Bengal.,

73 :207-212.

1914

Ancistrodon rhodostoma; Smith, J. Nat. Hist. Soc. Siam.,

1 :57-58.

108

HOGE, A. R. & ROMANO HOGE, S. A. Notes on micro and ultrastructure of

Viperoidea. Aícm. Inat. Butantan, 1980/1981.

“Oberháutschen” in

6 6

Pig. 63 — Maxillary of Bothrops lanceolatus

Fig. 64 — Maxillary of Trimeresurus gramineua

Fig. 66 — Maxillary of Ovophia chaaeni

Fig. 66 — Maxillary of Porthidium lansbergi

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SciELO

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HOGE, A. R. & ROMANO HOGE, S. A. Notes on micro and ultrastructure of “Oberhâutschen” in

Viperoidea. Mem. Inst. Butantan, 1980/1981.

7 2

7 3

7 4

Fií?. 67 •

Fig. 68

Fig. 69

Fig. 70

Fig. 71

Fig. 72

Fig. 73

Fig. 74

• Palatine of TrimcremruB gramincua

■ Palatine of Bothropa lanccolatua

• Palatine of Ovophia chaacni

■ Palatine of Porthidiurn lanabcrgi

• Ectopterygoid of Ovophia chaaeni

• Ectopterygoid of Porthidiurn lanabcrgi

- Ectopterygoid of Trimercaurita gramincua

■ Ectopterygoid of Bothropa lanccolatua

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SciELO

10 11 12 13 14 15 16

HOGE, A. R.

Viperoidea.

& ROMANO HOGE, S. A. Notes on micro and ultrastrueture of “Oberhâutschen” in

Mem. Inat. Dutantan, 4-4/-45:81-118, 1980/1981.

1915

Ancistrodon rhodostoma; Smith, J. Bombay Nat. Hist. Soc.,

23 :787-788+Photo.

1916

Ancistrodon rhodostoma; Smith, J. Nat. Hist. Soc. Siam.,

^:164.

1916

Ancistrodon rhodostoma; Ouwens. De Voorn. Giftsl. Nederl.

Cost Indie, 19, pl. 13.

1916

Ancistrodon rhodostoma; Gyldenstolpe, Handl. Sven. Akad.

Stockolm, 4(3) :27, Mus. Singapure.

1917

Ancistrodon rhodostoma-, de Rooij Rept. Ind. Austr. Archip.,

2, Ophidia 279, figs. 114-115.

1930

Agkistrodon rhodostoma; Smith, Buli. Raffles, 5:[89].

1930

Agkistrodon rhodostoma; Cochran, Proc. U.S.N. Mus., 77:37.

1934

Agkistrodon rhodostoma; Brongersma, Zool. Med. Rijksmu-

seum Nat. Hist. Leiden, 17:161-251.

1934

Agkistrodon rhodostoyna; Mertens, Arch. f. Hydrobiologie

(Supl.) l^:Trop. Binnengew., 4:677-701.

1936

Agkistrodon rhodostoma; Bourret, Serp. de L’Indo-Chine:45.

1953

Algkistrodon] rhodostoma; Cochran, Smiths. Inst. war back.

stud. n.° (10) :21.

1943

Ancistrodon rhodostoma Smith (partim), Fauna índia, Rept.

and Amph., 3:497.

1944

Agkistrodon rhodostoma; Cochran. From the Smithsonian

report for 1943 (public. 3753) :275-324 + 23 pl. Washington

D.C. Un. Stat. Gov. printing offices.

1945

A [gkistrodon^ rhodostoma; Loveridge. Rept. o.t. pacif ic

world: 178-180.

1950

Agkistrodon rhodostoma; Haas, Treubia, 20:608.

1954

Ancistrodon rhodostoma; Tweedie. The Snakes of Malaya,

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1957

Calloselasma rhodostoma; Chernov. Zool. J., 36(5) :792.

1958-1958 Agkistrodon rhodostoma-, Taylor et Ebbel, Univ. Kansas,

Sei. Buli., 38,{2) n° 13:1168.

1959

Agkistrodon rhodostoma; Hoesel, Ophidia Javanica, 1:1-88,

figs. 122-123.

1959

Agkistrodon rhodostoma; Mertens, Treubia., 25,(1).

1961

Agkistrodon rhodostoma; Deuve Buli. Soc. Sei. Nat. Laos

n.° 1:30.

1962

Agkistrodon rhodostoma; Deuve, Buli. Soc. Sei. Nat. Laos

(2) :81.

1962

Agkistrodon rhodostoma; Deuve, Buli. Soc. Sei. Nat. Laos

(2) :88.

111

HOGE, A. R. & ROMANO HOGE, S. A. Notes on micro and ultrastructure of

Viperoidea. Mem. Inat. Butantan, ^4/^5:81-118, 1980/1981.

‘Oberháutschen" in

7 5

7 6

8 0

7 9

Fig. 75 — Bothropa atrox

Fig. 76 — Porthidium lanabergi

Fig. 77 — Agkiatrodon piacivortia

Fig. 78 — Deinagkiatrodon acutua

Fig. 79 — Gloydiua blomhoffii

Fig. 80 — Protobothropa flavoviridis

Fig. 81 — Protobothropa jerdoni

112

SciELO

10 11 12 13 14 15 16

HOGE, A. R. & ROMANO HOGE, S. A. Notes on micro and ultrastructure of “Oberhâutschen” in

Viperoidea. Mem. Inat. Butantan, 44/^5:81«118, 1980/1981.

Fig. 82 — Calloaelaama rhodoBtoma

Fig. 83 — Gloydiua blomhoffii

Fig. 84 — Hypnale hypnale

113

HOGE, A. R. & ROMANO HOGE, S. A. Notes on micro and ultrastructure of “Oberhâutschen” in

Viperoidea. Mem. Inet. Butantan, ^4/^5:81-118, 1980/1981.

1962 Agkistrodon rhodostoma; Deuve, Buli. Soc. Sei. Nat. Laos

(2) ;77, 78, 79, 81.

1962 Agkistrodon rhodostoma; Deuve, Buli. Soc. Sei. Nat. Laos

(3) :20.

1962 Agkistrodon rhodostoma; (partim), Depart. Navy ONI Study

3-62:126.

1963 Agkistrodon rhodostoma; Klemmer, Behrin^erke Mitt. Son-

derb. :401.

1965 Agkistrodon rhodostoma; Taylor, {partim), Univ. Kansas

Sei. Buli., 45, (9) ;1058, fig. 120.

1968 Agkistrodon rhodostoma; Levitou, {partim), Ven. Vertebrates.

Acad. Press., 1 :560.

1971 Calloselasma rhodostoma; Burger {partim), Genera of Pit

Vipers. PhD. diss. Publ. microf. Anu. Arbor:100, fig. 4b.

1972 Agkistrodon rhodostoma; Saint Girons {partim), Mem. Mus.

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1978 Calloselasma rhodostoma; Gloyd {partim), Proc. Biol. Soc.

Washington, 963.

1981 Calloselasma rhodostoma; Hoge and Romano-Hoge, Mem. Inst.

Butantan, 42/43:193, 1978/79 (1981).

TYPE LOCALITY: Djawa.

RANGE: Malaysia south of Isthmus of Kra and Djaw^a: a few

specimens known from Thailand and Cambodge, Saint Girons collected

both C. rhodostoma and C. annamensis at Kreck, Cambodge.

The species seems to be abscent in Sumatra (a specimen in the

collection of the RMNHL Nr.ll454 leg. Dubois is labelled Sumatra

without any other data; two more specimens, leg. P.GNiel.Nr.20392 and

20393 al.so are labelled Sumatra). In 1896 Boulenger in his Catalogue

noticed only specimens from Java and a single one as being from Siam

with? (actually BMNr.62.11.1.243). The first specimens without doubt

from Siam are those collected by Annandale and Robinson in Perak and

the Siamese Malay States and identified by Boulenger who prepared list

of Malayan rep tiles. He confirms the occurance of A. rhodostoma in

Siam whence a specimen has been received by the Christiana Museum

and also records the species for Biserat. A parallel case of discontinuous

distribution is afforded by Geoclemys subtrijuga and several other species,

as already stated by Boulenger and Barbour l.c.

All the specimens seen by Boulenger are still in the herpetological

collection of the British Museum belong to the species C. rhodostoma and

not a single one to the species C. annamensis.

MATERIAL:

M.N.H.N.P.Nr.411 a 2 and 411A, a á, from Batavia, col. DTstria;

M.N.H.N.P.Nr.576 (2 spec.) from Java, col. Quoy and Gaimard; M.N.H.

114

SciELO

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HOGE, A. R. & ROMANO HOGE, S. A. Notes on micro and ultrastructure of

Viperoidea. Mem. /nst. Butanian, 1^/45:81*118, 1980/1981.

^Oberhãutschen" in

N.P.Nr.7761 from Java, col. Leschenault; M.N.H.N.P.Nr.4045 and 4046,

from Java, col. Bleeker; M.N.H.N.P.Nr.1893-124, $, from “Prov. de

Bangtaban” Malayan península, col. Bei; B.M.Nr.(1834-MAS) 1968-838,

head only; B.M.Nr. (6322) 1968-840 from KHAORAM (food of Hill) ;

B.M.Nr. (1835-MAS) ; 1968-843 Hupbon B.M.Nr. (7165) 1968-842 from

Nong SE Siam; B.M.Nr. (1833) 1939 a á from Bangnara; B.M.Nr.l885,

12.31.31 a á from Wellus Mountains Kediri, Java 5000 ft.; by Baron

v.Hnegal; B.M.Nr.62.11.1. 243 a 5 from Siam; B.M.Nr.1879.16.2 a 13

and 1879.16.20.14 from Java pres. A. Scott; B.M.Nr.66.8.14.316 a $ from

Java; B.M.Nr.1903.4.13.98, 9, and 1903.4.13.100 from Jahor Malayan

península; B.M.Nr.l891.5.Í.16 a, 9, and 1891.5.1.17 3, from Batavia;

B.M.Nr.44.2.22.47, 9 pres. Leyden Mus.; B.M.Nr.1915.5.13.13, 3, from

Bantaphan Siam col. Malcon Smith; B.M.Nr.l969 from Sve Úmbel col.

Malcom Smith 1918 R.M.N.H.L.Nr.318 (3 spec.) from Java? leg. Boie

and Macklat; R.M.N.H.L.Nr.l509 from Java, leg. S. Muller; R.M.N.H.L.

Nr.l510 from Java leg. C.G.C. Reinwardt R.M.N.H. from Buitemorg

leg van Slooten; R.M.N.H.Nr.5808 from Babakan Djatti, Res. Krawang

Java leg. W.V. van Heurn; R.M.N.H.L.Nr.7433 (2 spec.) from Botanical

Garden, leg Kannegieter; R.M.N.H.L.Nr.7474 (4 spec.) from Radjamala,

W. Java, leg J. Semmelink. R.M.N.H.L.Nr.7490 (2 spec.) from Buiten-

zorg Java leg. Buitendijk R.M.N.H.L.Nr.8013 (1 spec.) from Buitenzorg,

Java. R.M.N.H.L.Nr.8969 (2 spec.) from Indramajoe, W. Java, leg. F.

Kopstein (not seen!) ; R.M.N.H.L.Nr.9736 (2 spec) from Depak near

Batavia Nature Reserve (now Depok near Djakarta Djawa) ; R.M.N.

H. L.Nr.l0134 (2 spec.) from Java leg. Tegelaar; R.M.N.H.L.Nr.l0319

(2 spec.) ; from Malong Java; R.M.N.H.L.Nr.ll454, from Sumatra, (now

Sumatera), leg. Dubois; R.M.N.H.L.Nr.20381 from Surroundings of

Buitenzorg, leg P. Buitendijk; R.M.N.H.L.Nr.20382 from Buitenzorg leg

P. Buitendijk; R.M.N.H.L.Nr.20383 and 20384 from Buitenzorg leg F.

Verbeek; R.M.N.H.L.Nr.20385 from Dessa Sambengwangon, Rembang

Java leg Fr. Verbeek; R.M.N.H.L.Nr.20386 (6 spec.) from Radjaman-

dala, Bandoeng, W. Java leg F. Kapstein; R.M.N.H.L.Nr.20391 (no data) ;

R.M.N.H.L.Nr.20392 and 20393 from Sumatra leg P.G. Neeb; R.M.N.H.L.

Nr.20394 from Java; R.M.N.H.L.Nr. 20395 from Buitenzorg; R.M.N.H.L.

Nr.20396 from Bandoeng, W. Java leg E. Jacobson; 20397 and 20398 from

Tandji near Semarong Java leg P. Buitendijk. LB.H.Nr.31 Java (gift

from Konigl. Natur. Sammlung in Stuttgart, (1912) ; I.B.H.Nr.l9216 Ja¬

va, gift from I.R.S.N. Belgique; I.B.H.Nr.l9227; Java I.R.S.N. Belgique;

I. B.H.Nr. 4234 from Buitenzorg, Java leg T. Barbour. In lit. Barbour

(1912) Buitenzorg. Gunung Bundes on Mt. Salak 2200 ft am Daru in

Bantam.

DESCRIPTION

Snout pointed, somewhat turned up; rostral as high as broad or

slightly higher, internasals a little longer than broad, shorter than the

prefrontals; frontal as long, or longer than its distance to the tip of

the snout, longer than broad, as long or a little longer than the parietais ;

parietais slightly longer than broad; 3 preoculars; a loreal between the

upper preocular and posterior nasal; a large subocular separating the

eye from the upper labiais; loreal pit not in contact with upper labiais;

116

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HOGE, A. R. & ROMANO HOGE, S. A. Notes on micro and ultrastructure of “Oberhâutschen” in

Viperoidea. Mem. Inst. Butantan, ^í/^5:81-118, 1980/1981.

1 or 2 postoculars; 7 to 9 upper labiais; all cephalic shields and scales

smooth; dorsais in (23-25) — (21-17) longitudinal rows all smooth 138-

157 ventrals in males, 157-166 in females; 34-46 pairs of subcaudals in

females and 45-55 in males.

Reddish brown with a series of dark brown, black edged spots oppo-

site to one another or alternating; generally a black vertebral line, inter-

rupted or not; the spaces between the dorsolateral spots are distinctly

lighter in color, sometimes ill defined darker marking in the light inter-

paces. Belly white to yellowish, powdered or not with dark brown on

the borders of ventrals and two outer dorsais series of dark, sometimes

indistinct roundish dots. A broad dark brown band from the eye to

the angle of mouth. Black edged, always festooned below (fig. 20).

Sometimes upper and lower black edges rimmed with light yellow.

The juveniles have brighter colors than the adults (fig. 26) ; viva-

rious yellow tails. When aging, small dark spots appear on the dorsal

surface; the spots spread gradually sidewards leaving the yellow color

indefined in the adult.

Total length 1030 mm.

This species is mainly found in heavily forested areas.

ARTIFICIAL KEY TO THE Agkistrodontini *

I. Dorsal scales smooth (fig. 22) . Calloselasma

II. Dorsal scales keeled.

A — Praefrontals and internasals broken up in scales (fig. 18) ;

dorsal scales in 17 rows; snout turned up (fig. IÇ)... Bypinale.

B — Praefrontals and internasals not broken up in scales; dorsais

not in 17 rows.

1. Snout with a distinct dermal appendage (fig. 17) ; scales

of the lowermost row near the tip of tail much higher

than long (fig. 23) . Deinagkistrodon

2. Snout and scales near the tip of tail not as above; (fig.

24 and 25).

a) All subcaudals paired; loreal pit always separated

from labiais . Gloydius

b) Anterior subcaudals single; loreal pit generally bor-

dered by a labial . Agkistrodon

KEY TO THE SPECIES OF Calloselasma

1. The postocular dark band very distinct, black edged and always

festooned (fig. 9 and 20) . rhodostoma

2. The postocular dark band indistinct not festooned below (fig.

8 and 21) . annamensis

* In case of doubt on any characters check skull, if:

1. Short and broad; supratemporal extending beyond the brain case = Agkistrodon.

2. Long and narrow; supratemporal not extending beyond the brain case = Gloydius.

117

SciELO

HOGE, A. R. & ROMANO HÜGE, S. A. Notes on micro and ultrasiructure of “überhíiutschen” in

Viperoidea. Aíewi. Inst. Butantan, 1980/1981.

ACKNOWLEDGMENTS

Our thanks go to several institutions and persons for loans or

permission to study the specimens namely: (C. Myers; R. G. Zweifel)

American Museum of Natural History; (G.R. Zug) Smithsonian Insti-

tution; (Alice Grandisson) British Museum Natural History; To Knoll-

Twyford Laboratories at Ludwigshafen, Germany for the permission to

examine the alive specimens. To Miss Alma Yasodhara Alexandra Hoje

for technical aid helping the examination of the Knoll-Twyford and

M.N.H.N. Paris specimens and redaction of manuscript. To João Domin-

gues Cavalheiro for redrawing the figs. 20-25. Our special thanks to Dr.

E.R. Brygoo for his invitation and Mrs. Brygoo for the photographs

of specimens (Museum National d’Histoire Naturelle, Paris) and to Dr.

M.S. Hoogmoed Rijksmuseum van Natuurlijke Historie, Leiden, who

kindly checked the shape and form of postocular band in all available

specimens in the Rijksmuseum van Natuurlijke Historie, Leyden. We

are also indebted to the: Application laboratory, Naka works of the

Hitachi, Ltd of Tokyo, Japan for photographs with scanning microscope.

RESUMO: Descrição de uma técnica nova para o estudo micros¬

cópico da “oberhãutschen”; descrição de um gênero novo: Proto-

bothrops; os gêneros, Porthidium, Bothriechis e Bothriopsis são

considerados distintos de Bothrops; uma diagnose sumário dos

Agkistrodontini e redescrição de Calloselasma rhodostoma e Callo-

selasma annamensis.

PALAVRAS-CHAVE: “Oberhãutschen”; Viperoidea; Protobothrops;

Porthidium', Bothriechis; Bothriopsis; Agkistrodontini; Calloselas¬

ma rhodostoma; Calloselasma annamensis.

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Mem. Intt. Butantan

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ABSENCE OF E-ROSETTE-POSITIVE CASES IN A SERIES

OF 17 CHILDREN WITH ACUTE LYMPHOID LEUKEMIA

FROM SÃO PAULO, BRAZIL‘ ^

L. DENARO-MACHADO 3

J. C. MACHADO*

A. G. AMARAL*

M. I. ESTEVES*

A. BIANCHI*

M. L. D’ANDREA*

ABSTRACT: A study on 17 chlldren from the São Paulo State

(Brazil) with Acute Lymphoid Leukemia (ALL) was perfomed in

ordèr to correlate the socioeconoraic condition of the patients with

the immunological typing, besides data on the clinicai evolution of

the disease. The most significant finding was the absence of T-cell

proliferation in all cases. These findings can be compared with those

of other countries.

KEYWORDS: Brazilian children, Acute Lymphoid

Immunological markers, Leukemic epidemiology.

Leukemia,

ABBREVIATIONS

Acute Lymphoid Leukemia (ALL) ; High Risk (HR) ; Standard

Risk (SR) ; "^^ite Blood Cell (WBC) ; Central Nervous System (CNS);

E — Rosette — Positive (E) ; Surface Immunoglobulin (sig) ; Sheep

Red Blood Cells (SRBC).

INTRODUCTION:

In order to supply support for the comparison of the relative fre-

quency of different morphological types of leukemia in children of several

countries plus aspects related to the membrane markers associated to

Research Support: CNPq, FEDIB and DINECKODE.

This Work was presented on the International Workshop on the influence of the environmental on

leukemia and lymphoma, May 1982, NIH, Bethesda-Maryland. USA.

Instituto Butantan. — Laboratório de Citopatologia — Divisão de Patologria.

Instituto Central — Hospital A. C. Camargo (Fundação Antonio Prudente).

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DENARO-MACHADO, L.; MACHADO, J. C.; AMARAL, A. G.: ESTEVES, M. I.; BIANCHI, A. &

D*ANDREA, M. L. Absence of E>Ro8ette-Positive caces in a series of 17 childrcn with acute lymphoid

leukemia from São Paulo, Brazil. Itmí. Mem. Inst. Butantan, ^^/^5:n9*126, 1980/81.

other clinicai data, and socioeconomic conditions of the patients, the AA

completed studies on 17 children from the “Serviço de Pediatria” of the

Hospital A.C. Camargo from São Paulo City, Brazil.

The São Paulo State is localized in the Southern region of Brazil,

of a temperate climate. It is proven to be the State of highest economical

development of the Country, to v^^hich a high number of immigrants

arrive from several adjacent States as "well as from the Brazilian Nor¬

theast. This condition determines relevant local socioeconomic disleveling.

MATERIAL AND METHODS

The present study was restricted to 17 children, carriers of ALL,

the ages varying from 8 months to 13 years, selected after admission in

the Hospital, betAveen October 1979 and June 1981.

Identification data of the patients are summarized in Table 1. Most

of the patients originate from peripheric areas of the City of São Paulo,

and therefore from populational socioeconomical less privileged classes.

The Assistant Service of the Hospital A.C. Camargo informed that 16

of them carne from social classes provided with social security, and one

(case 9) was considered indigent.

Table 2 summarizes the clinicai and laboratorial data of the patients

as well as diagnosis, classification in HR-ALL, and SR-ALL, and survival.

The data relative to WBC/mm® represent those obtained at the moment

of admission of the patients. The percentage of blasts in the peripheral

blood varied between 1% (case 4) to 83% (case 16), and in bone marrow

from 6% (case 4) to 94,4% (case 2). These blasts were counted on the

same day (in the case of peripheral blood) or on one of the proximate

days (in the case of bone marrow) of the blood sampling collected for

immunological tests.

The clinical-laboratorial data concerning the presence of one or more

of the following characteristics: WBC/mm^ > 100.000; presence of

mediastinal mass; CNS infiltration ; proliferation of type E-rosette-posi-

tive, and induction failure to remission on the 30th day, were the para-

meters demonstrative for the diagnosis of an HR-ALL. Obviously, the

absence of these characteristics implies a SR-ALL.

The immunological tests performed refer to the typing of peripheral

blood lymphocytes after the treatment by the Ficoll-Hypaque gradient

method. Such tests were restricted to the determination of the T-lympho-

cyte population by the spontaneous rosette formation with SRBC, and

by the identification of surface immunoglobulins for the enumeration of

B-lymphocytic population by using of polyvalent fluorescent antiserum,

as well as fluorescent antiserum for the heavy chains of immunoglobulin

(IgG and IgM). The results were compared with the values obtained

from 9 volunteer healthy donnors, as shown in Table 3.

By the current knowledge, it is known that such tests do not suffice

for a more exact typing of leukemias, we believe however, that they

are adequate for a comparison with other equivalent works.

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DENARO-MACHADO, L.; MACHADO, J. C.: AMARAL, A. G.: ESTEVES, M. I.; BIANCHI, A. &

D'ANDREA, M. L. Absence of E-Uosette-Positive cases in a series of 17 children with acute lymphDid

leukemia from São Paulo, Brazíl. /tist. Mem, Inst, Butantün, 119-126, 1980/81.

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121

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DENARO-MACHADO, L.; MACHADO, J. C.j AMARAL, A. G.; ESTEVES, M. I.; BIANCHI, A. &

D'ANDREA, M. L. Absence of E-Rosette-Positive cases in a series of 17 children with acute lymphoid

leukemia from São Paulo, Brazil. /nsí. M.em. Jnat. Butantan, 119-126, 1980/81.

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Of The CNS

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Presence Of

Mediastinal Mass

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DENARO-MACHADO, L.; MACHADO, J. C.; AMARAL, A. G.; ESTEVES, M. L; BIANCHI, A. &

D’ANDREA, M. L. Absence of E-Rosette-Poaitive cases in a series of 17 children with acute lymphoid

leukemia from São Paulo, Brazil. IiMt, Mem. Inst, Butantan, ■(^/45:119>126, 1980/81.

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DENARO-MACHADO, L.; MACHADO, J. C.; AMARAL. A. G.; ESTEVES, M. I.; BIANCHI, A. &

D’ANDREA, M. L. Absence of E-Rosette-Positive cases in a series of 17 children with acute lymphoid

leukcmia from São Paulo, Brazil. Inst. Mem. l-nst. Butantan, 119-126, 1980/81.

RESULTS AND DISCUSSION

Table 4 shows the results of the lymphocyte typing tests, as well

as the immunological interpretation of these data, correlating them with

the HR-ALL and SR-ALL diagnosis.

Of the 17 cases presented in Table 4, we verified that the majority

(15/17) presented low values for both T-cell and B-cell populations, and

consequently a high percentage of “Non-T, Non-B” cells, at least with

respect to the employed tests. By the joint analysis of Table 2 and 4,

we may conclude that these cases constitute a heterogeneous group as

to the evolution of the disease.

Three of these non-T, non-B cases (cases 14, 15, 16) were carriers

of tumoral mediastinal mass, a factor considered by Chessells et al.

(1977) (2) as associated to a poor prognosis, and suggestive of a T-ALL

type of immature cells, even when during the typing they were classified

as a Null-cell type proliferation. Actually, two of these 3 cases had a

failure in the induction to remission (cases 15 and 16), one of which

(case 15) with a survival on only 4 months, a fact that can reiterate the

affirmation of those authors, as to a poor prognosis of these cases when

associated to the presence of mediastinal tumoral mass.

Monoclonal B-cell type proliferation in ALL are referred to in the

literature as a group poorly represented (about 5% of the cases) and

characterized by a poor prognosis. One of the 17 cases studied (case 13),

classified as HR-ALL by the CNS infiltration and induction failure to

remission, presented itself immunologically as a B-cell type proliferation,

monoclonal IgG.

Unexpectedly, one of the cases of our series (case 1) presented

E-rosette and sig values within the patterns considered by us as normal

(Tbl.3). For this case, denominated by us as “Undeterminable” (U),

one of the plausible interpretations would be perhaps the low percentage

of blasts within the peripheral blood (7%), although in other cases with

such a percentage, or less, the definition of the type of proliferation

implicated in the process had been possible.

On the other hand, the literature related about 25% of ALL cases

as being of type T-cell proliferation, by the expression of receptor for

SRBC, or expression of T-cell antigens (1, 3, 5) being these cases of a

poorer prognosis than the “Null” type proliferation. There are authors

who relate (4) that T-cell proliferations seem to constitute the largest

contingency of ALL in populations of less privileged socioeconomic classes.

In our limited sample of 17 ALL cases of children coming from

different areas of the São Paulo State, no type T-cell proliferation could

be detected, at least with respect to the ability to form spontaneous

rosettes with SRBC, a fact called to attention by the authors as a

possible implication with an environmental sociogeographical distribution

as well as with etiological factors peculiar to this area.

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DENARO-MACHADO, L.: MACHADO, J. C.; AMARAL. A. G.; ESTEVES, M. I.; BIANCHI. A. &

D’ANDREA, M. L. Absence of E-Rosette-Positive cases in a series of 17 children with acute lymphoid

leukemia from São Paulo, Brazil. Inat. Mem. Inst. Butantan, ^^/^5:119-126, 1980/81.

Immunological

Interpretation

% of non-T

non-B Cells

COOSO^^OSOOÜSt-OOt-lÕCOÇOíOOíOSt^»

% of IgM

Positive

Cells

OiOrHCSWOOTfC^THOiOOOiTjfCOOJtO

rH T-l ^

% of IgG

Positive

Cells

OJW^^WONOOiCOOxiOCOOOWCO^D

tH (N çO

% of sig

Positive

Cells

tONCOTPrJiioçDÇOl/ÍCOCOT^OOkCiftM

rH tH

% of E

Rosette

Positive Cells

W^(N05C^Wlf5(MlAlf5eOií50CO(NÇOM

CO iHrHWC^rHcO CO

Diagnosis

and Risk

KKtíP3WpjpíWKÊtó«ÊÊÊÊ«

woíwwWwwwwWwwWWWWot

1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1

Case N.°

^OJcO^uoçOt^OOOiOíHNCO^lOÇDf

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DENAUO-MACHADO. L.; MACHADO. J. C.; AMARAL, A. G.; ESTEVES, M. I.; RIANCHI, A. &

D'ANDREA, M. L. Abscnce of E-Rosette-Positive caees in a series of 17 children with acute lymphoid

leukemia from São Paulo. Brazil. Inst. Mem. Inat. Butantan, ^^/^5:119-126, 1980/81.

ACKNOWLEDGEMENTS

This work was undertaken with the aid of CNPq, FEDIB, and

DINECRODE — MS.

The authors wish to thank Dr. I.F. Souza (Chefe do Serviço Social)

of the Hospital A.C. Camargo.

RESUMO: Um estudo em 17 crianças do Estado de São Paulo

(Brasil) com Leucemia Linfóide Aguda (LLA) foi realizado, de

forma a correlacionar a condição sócio-econômica dos pacientes com

a tipagem imunológica, ao lado de dados de evolução clínica da

doença. O achado mais significante foi a ausência de proliferação

celular T em todos os casos. Esses achados podem ser comparados

com aqueles de outros países.

PALAVRAS-CHAVE: Crianças brasileiras; Leucemia linfóide

aguda; Marcadores imunológicos; Epidemiologia leucêmica.

BIBLIOGRAPHIC REFERENCES

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untreated acute lymphocytic leukemia. J. Immunol., 111:1257, 1973.

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Mem. Inst. Butantan

^íA5:127-131. 1980/81

NEOFORMAÇÃO DE LINFONODOS E ASPECTOS

MORFOLÓGICOS CONFUNDÍVEIS COM A ASSIM

CHAMADA DEGENERAÇÃO GORDUROSA OU

LIPOMATOSE DESSAS ESTRUTURAS

Jesus Carlos MACHADO

André L. Carmo GASPARINI

Thereza Cristina MACHADO

RESUMO: Os autores apresentam a interpretação que julgam mais

adequada para os aspectos histológicos da assim chamada “degenera¬

ção adiposa” dos linfonodos. Concluem que a seu ver trata-se na

realidade de aspectos sugestivos de neoformação de linfonodos erro¬

neamente interpretados como aspectos “degenerativos” lipomatosos.

PALAVRAS-CHAVE: Degenerações. Linfonodos. Linfoadenopatias.

I. INTRODUÇÃO

A nossa experiência no exame de milhares de linfonodos retirados

em esvaziamentos cirúrgicos como recurso terapêutico para exerese ou

prevenção de metástases tumorais, leva-nos questionar sobre a real

natureza da maioria dos aspectos histológicos diagnosticados como sen¬

do degeneração gordurosa dos linfonodos. Aquele mais característico e

curioso que permite ao anatomopatologista, durante um exame de con¬

gelação intracirúrgico ou na rotina de peças cirúrgicas, realizar ma¬

croscopicamente o citado diagnóstico de atrofia gordurosa é o do tecido

linfóide de dispor em forma de meia-lua envolvendo área nodular de

tecido adiposo. Outro aspecto, neste caso microscópico, que leva o ana¬

tomopatologista a fazer esse diagnóstico é o de por vezes o tecido adi¬

poso encontrar-se junto com o linfático, envolvido por cápsula fibrosa

formando verdadeiro linfonodo.

A interpretação cuidadosa de tais achados histológicos comparados

com aspectos histogenéticos e embrionários, relacionando-os com a neo¬

formação no adulto de tecido linfóide, permite-nos a nosso ver afirmar

* Trabalho realizado, em colaboração, pelos Departamentos de Anatomia Patológica do Hospital A. C.

Camargo (Fundação Antonio Prudente) e Divisão de Patologia do Instituto Butantan. Auxilio do

FEDIB, FUNDAP e Comissão Nacional de Linfomas Malignos e Ministério da Saúde.

127

MACHADO, J. C.; GASPARINI, A. L. C. & MACHADO, T. C. Neoformação de linfonodos e aspectos

morfolósricos confundíveis com a assim chamada deg:eneração srordurosa ou lipomatose dessas estru¬

turas. Mem. Inst. Butantant 1980/81.

que a maioria das assim chamadas “degenerações gordurosas” dos lin¬

fonodos nada mais são do que aspectos morfológicos de neoformações

de linfonodos ativados, no nosso caso, pela presença de neoplasia re¬

gional.

Assim pretendemos nesse trabalho apresentar a nossa interpreta¬

ção de que alguns aspectos de neoformação de tecido linfático tão pouco

lembrados, são erroneamente interpretados como processo degenerativo

“adiposo” do parênquima do linfonodo.

II. MATERIAL, MÉTODOS E RESULTADOS

O nosso material de estudo constituiu-se no exame de milhares de

linfonodos extirpados cirurgicamente das axilas, da região cervical, do

mesentério e de outras localizações de pacientes portadores de carci¬

nomas das mamas, da rinofaringe, boca, estômago e intestino.

Os gânglios linfáticos sempre foram incluídos rotineiramente em

parafina e corados pela Hematoxina e Eosina.

Nos linfonodos axilares e intra-abdominais dos dois aspectos citados

foi mais freqüente o achado da “atrofia adiposa” onde o parênquima

do linfonodo apresenta-se com a forma de uma meia-lua envolvendo

nódulo de tecido adiposo e assim é incluído para exame. Na região

cervical foi mais freqüente o encontro de linfonodos menores com tecido

adiposo presente misturado ao parênquima por vezes envolto por cápsula

fibrosa.

Um terceiro aspecto encontrado, mas que geralmente não é citado

como atrofia adiposa, por ser muito fácil de verificar-se, constituir ver¬

dadeira neoformação de linfonodos, são as pequenas coleções de tecido

linfóide, por vezes contendo centros germinativos, sem cápsula ou somente

com esboços dela.

Os tratados usuais de Patologia, desde os mais tradicionais como o

de L. Aschoff (1), até os mais recentes como o de Robbins (5) no capí¬

tulo dos linfonodos ao tratarem dos seus aspectos degenerativos incluem

a atrofia adiposa como o mais freqüente e com aspectos anatomopato¬

lógicos que descrevemos em primeiro lugar.

Assim, H. Schridde (in Aschoff) (1) relata: “o mesmo que sucede

a outros órgãos, nos gânglios linfáticos se observa na velhice o desapa¬

recimento do parênquima. O tecido linfóide é substituído por tecido con¬

juntivo ou por tecido adiposo, sobretudo nos linfonodos mesentérios ou

região inguinal. O tecido adiposo penetra pouco a pouco a partir do hilo.

Se o tecido adiposo aparece de modo patológico, cabe admitir a lipoma¬

tose dos gânglios linfáticos. Às vezes se encontram restos escassos de

tecido linfático do córtex, que quase sempre está esclerosado em maior

ou menor grau” C. Sternberg (6) também participa da mesma opinião

e sua descrição, do aspecto morfológico feita mesmo antes de H. Schridde,

com ela coincide. Herman e Morei (3), Ribbert e Hamperl (4), Bogliolo

(2), interpretam da mesma forma esse aspecto dos linfonodos. De modo

geral os demais autores repetem essas afirmações.

128

SciELO

10 11 12 13 14 15 16

MACHADO, J. C.; GASPARINI, A. L. C. & MACHADO, T. C. Neoformação ds linfonodos e aspectos

morfológicos confundiveis com a assim chamada degeneração gordurosa ou lipomatose dessas estru»

turas. Afcm. Inst. Butantan, ^4/^5:127-131, 1980/81.

Como vimos, interpretam os diversos autores, esses aspectos macros¬

cópicos e histopatológicos como sendo decorrentes da atrofia do parên-

quima linfático que ocorreria com a idade e sua conseqüente substituição

pelo tecido adiposo a partir do hilo. O aspecto mais característico descrito

é 0 do tecido linfóide constituir-se em faixa em forma de crescente ou

aspecto de meia-lua, e envolvendo tecido adiposo correspondente. Por vezes

até, formam esse conjunto aspecto pseudotumoral, ensejando sua exerese

cirúrgica, com diagnóstico clínico de lipoma como já observamos (micro-

foto 2).

Outro aspecto microscópico não analisado convenientemente, é o encon¬

tro de linfonodo ovalar com o parênquima envolto por cápsula fibrosa bem

constituída. Ao lado do parênquima linfóide envolvido pela cápsula é obser¬

vado áreas com presença de tecido adiposo (microfoto 3).

III — CONCLUSÕES

Analisemos os vários aspectos. No primeiro caso, o termo degenera¬

ção a nosso ver não é bem aplicado. Tratar-se-ia, se fosse o caso, de simples

atrofia senil com substituição do parênquima linfóide pelo tecido adiposo,

como ocorre no miocardio na chamada “adipositas cordis” ou ainda na

hiperplasia ex-vácuo do tecido adiposo da pélvis renal por hipotrofia do

parênquima do rim. Não seria verdadeiramente processo degenerativo,

mas simplesmente processo substitutivo. A degeneração adiposa seria

verdadeira no caso do linfonodo se a assim chamada “degeneração gor¬

durosa” ocorresse no parênquima linfóide. Se existisse, verdadeira cápsula

em derredor, envolvendo tanto o parênquima linfóide como o tecido adiposo

seria, talvez, um testemunho da atrofia e sua substituição. Mas, neste

caso 0 que se observa é uma coleção de tecido linfóide com a forma

assinalada, na maior parte das vezes sem cápsula do lado adiposo estando

0 tecido linfóide simplesmente imerso na massa adiposa (microfoto 1 e 2).

Este aspecto, a nosso ver, é mais característico da neoformação de

linfonodos, a partir do subendotêlio dos linfáticos como é descrito na

literatura (6). O tecido linfóide assim neoformado iria desenvolvendo-se

até atingir sua forma ideal sendo posteriormente envolvido pela cápsula

fibrosa, completando a sua neoformação.

Portanto o aspecto característico no qual o linfonodo fica constituído

por uma fina camada de parênquima em forma de meia-lua, envolvendo

tecido adiposo, na nossa opinião, nada mais é do que um aspecto da neo¬

formação de linfonodos pela ação antigênica, e não constitui assim verda¬

deiramente uma “atrofia adiposa”.

Já no segundo aspecto descrito com a cápsula formada e o encontro

conjunto de tecido linfóide e adiposo por ela contidos (microfoto 3) pode

comportar a nosso ver duas explicações: a primeira seria a de realmente

se tratar de uma atrofia com lipomatose substitutiva. A outra seria a

de uma neoformação linfonodal ainda incompleta, no sentido parenqui-

matoso, mas com a cápsula já totalmente desenvolvida. Acreditamos, tam¬

bém nesse caso, na segunda hipótese, desde que a excitação antigênica

nos fala mais no sentido de uma neoformação do que no de uma dege¬

neração.

129

SciELO

10 11 12 13 14 15

MACHADO, J. C.: GASPARINI, A. L. C. & MACHADO, T. C. Neoformação de linfonodos e aspectos

morfológicos confundíveis com a assim chamada de^neração gordurosa ou lipomatose dessas estru¬

turas. Mem. Inat. Butantan, ^4/^5:127-131, 1980/81.

Microfoto 1: Linfonodo, HE. Aspectos da assim chamada “degeneração gordurosa". Linfonodo axilar,

onde o parênquima é constituído em uma simples meia-lua envolvendo tecido adiposo.

■4 X

■"W. .

Microfoto 2: Linfonodo HE. Aspecto de linfonodo inguinal onde se nota, a nosso ver, neoformação de

tecido linfóide. Há esboços de cápsula e vaso maior sugerindo aspecto hilar.

130

2 3 4

6 SCÍELO;l0 11 12 13 14 15 16

MACHADO, J. C.; GASPARINI, A. L. C. & MACHADO, T. C. Neoformação de linfonodos e aspectos

morfológicos confundíveis com a assim chamada degeneração gordurosa ou lipomatose dessas estru¬

turas. Mem. Inst. Butantan, 127-131, 1980/81.

Microfoto S: Linfonodo HE. Aspecto de linfonodo notando-se na medular presença maior de tecido

adiposo. Algumas células adiposas ainda são vistas inclusas, no parênquima.

Finalizando, reafirmamos que a nosso ver, o aspecto tradicional¬

mente, descrito como sendo o de uma degeneração adiposa dos linfonodos

trata-se na realidade de aspectos sugestivos da neoformação linfonodal

em decorrência de estímulos antigênicos.

ABSTRACT : The authors presents interpretation for the histologi-

cal aspects of the so called “adipous degeneration” of the lymphnode.

They conclued that this aspect almost realy means a neoformation of

lymphnode and not a degenerative process.

KEYWORDS: Degenerations. Lymphonodes. Lymphoadenopathies.

REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

1. ASCHOFF, L. Tratado de Anatomia Patológica. Barcelona, Editorial Labor

S.A., 1934. Tomo I.

2. BOGLIOLO, L. Patologia. 2.^ ed. Rio de Janeiro, Guanabara Koogan, 1976.

3. HERRMANN, G. & MOREL, CH. Précis d’Anatomie Pathologique. Paris,

Octave Doris Ed., 1914.

4. RIBBERT, H. & HAMPERL, H. Tratado de Patologia Geral e Anatomia

Patológica. Editorial Labor S.A., 1959.

6. ROBBINS, S.L. Patologia. 2.^ ed. bras. Rio de Janeiro, Guanabara Koogan,

1969.

6. STERNBERG, C. Hqndbuch der Spezziellen Pathologischen anatomie und

histologie. Berlin, Springer-Verlag, 1926. vol. I, 1.

131

SciELO

Aíem. Inst. Butantan

4^/45:133-162, 1980/81

FINDINGS OF PATHOLOGICAL ANATOMY IN MAMMALS

FROM THE “FUNDAÇÃO PARQUE ZOOLÓGICO DE SÃO

PAULO” 1971

Helio Emerson BELLUOMINI *

Lilian de Stefani Munaó DINIZ*’*'

Adayr Mafuz SALIBA ***

ABSTRACT: In 1971, from a total of 2066 animais of the ZOO,

674 of which Mammals, 101 were received for post mortem exami-

nation. Forty seven cases were selected from the total of animais

that were examined, comprising 27 acclimatized animais and 20

under quarentine. Tissue fragments were collected and fixed in a

neutral 15% formaldehyde solution, or in Bouin’s fluid. Paraffin

tissue sections, 5 n in size, were submitted to staining methods for

histological examination. Material collected concerned the following

orders: Primates, Carnivora, Artiodactyla, Perissodactyla, Marsu-

pialia, Rodentla and Edentata. Among the examined animais, the

nighest incidence of alterations was seen at the levei of the circula-

tory tract. Following, were disturbances of the digestive tract,

respiratory and urinary tract. At times, alterations of the genital

tract and some cases of traumatism, were observed. A fact to be

noted is the finding of neoplasia represented by one case of renal

adenocarcinoma.

KEYWORDS: Capitivity animais, Pathology.

INTRODUCTION

Practical experience concerning animais maintained in captivity at

are assembled in the papers pf T-W-Fiennes (1966, 1966 and 1968), who

studied main diseases that took place in Regenfs Park, London; Hime

(1976), and Keymer (1976) with similar studies at the same Zoo.

Practical experience concerning animais maintained in captivity at

the “Fundação Parque Zoológico de São Paulo” (ZOO) is reported in the

publications of Matera et al. (1968), who described five cases of infection

caused by Dioctophyma rencàe in Chrysocyon hrachyurus, Saliba et al.

Technical Director of the "Serviço de Animais Peçonhentos", Instituto Butantan, São Paulo.

In Charge of the Veterinary Division of the Fundação Parque Zoológico de São Paulo.

Professor in charge of the Pathology and Clinic Department of the Veterinary and Zootechnical

School of the University of São Paulo.

Address: INSTITUTO BUTANTAN Caixa Postal 65 — São Paulo — Brasil

133

SciELO

10 11 12 13 14 15

1 BELLUOMINI, H. E.; DINIZ, L. S. M. & SALIBA,

1 mammals from the “Fundação Parque Zoológico

1 133-162, 1980/81.

A. M. — Finding^s of pathological anatomy in

de Sáo Paulo” in 1971. Mem. Inat. Butantan'.

1 (1968), who described a case of sporotrichosis in a chimpanzee, Matera

1 et al. (1967) with the description of three cases of rabies in Pteronura

1 brasiliensis, Simon et al. (1975), who reported a case of infection by

1 Yersinia spp. in Callicebiis moloch hoffmansi, and Costallat, L.F. et al.

1 (1978) with two cases of mycobacteriosis in monkeys.

1 In 1971 from a total of 2066 animais of the Zoo, 674 of which

1 Mammals, 101 were received for post mortem examination. The following

is an account of the more interesting cases, comprising 27 acclimatized

animais, and 20 under quarantine.

MATERIAL AND METHODS

Material of the following animal orders, families, genera and species

was collected.

1. Marsupialia, Phalangeridae

Didelphidae

Macropodidae

Tricosurus vulpecula

Marmosa murina

Thylogale stigmatica

2. Endentata, Myrmecophagidae

Tamandua tetradaetyla

Myrmecophaga tridactyla

3. Rodentia, Chinchillidae

Capromidae

Chinchilla laniger

Myocastor coypus

4. Perissodactyla, Tapiridae

Rhinocerontidae

Tapifus terrestris

Diceros bicomis

5. Artiodactyla, Cervidae

Mazama simplicicornis

Ozotocerus bezoarticus

Blastocerm dichotomus

Tayassuidae

Bovidae

Tayassu ta jacu

Bubalus bubalis 1

Ovis aries 1

Ovis musimom 1

Antílope cervicapra 1

6. Carnívora, Felidae

Procyonidae

Canidae

Mustelidae

Otariidae

Felis yaguaroundi 1

Procyon lotor 1

Chrysocyon brachyurus 1

Pteronura brasiliensis 1

Zolophus califomianus 1

7. Primata, Callithricidae

Callithrix penicillata 1

Callithrix spp. 1

Saguinus niger 1

Saguinus bicolor 1

Cebidae

Cacajao melanocephalus 1

Alouatta guariba 1

Saimiri sciureus 1

134

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10 11 12 13 14 15 16

BELLUOMINI, H. E.; DINIZ, L. S. M. & SALIBA, A. M. — Findings of pathological anatomy in

mammals from the “Fundação Parque Zoológico de São Paulo” in 1971. Mem. Inet. Butantan:

44/45:m-152, 1980/81.

Tissue fragments were collected and fixed in a neutral 15% formtal

dehyde solution, or in Bouin’s fluid.

Paraffin tissue sections, Spi in size, were submitted to the following

staining methods for histological examination: Regaud’s Ferric Hema-

toxilin, Congo Red, Perlz’s Blue, Wilder Foot, and MalIory’s trichromic

method.

The ZOO’s record number for each specimen, appears in brackets.

RESULTS

1. Trichosurm vulpecula (3572)

Female, unknown age, received from Frankfurt in December, 1971;

died one day after arrival at the ZOO.

Main disease: Cachexia

Morbid anatomic findings: cachexia

Histopathological findings: hyaline degeneration of the myocardial

fibers; hemosiderosis, and toxic dystrophia of the liver; necrosis

and calcification of the renal tubuli.

2. Marmosa murina (1931)

Male, unknown age, captured in the forest of the ZOO, where it

remained for two years, never presenting any organic alteration.

Main disease: endocarditis, and myocarditis.

Morbid anatomic findings: endocarditis, and myocarditis.

Histopathological findings: chronic interstitial myocarditis, he-

morrhage; pulmonary edema and congestion; hepatic hemoside

rosis; chronic interstitial nephritis.

3. Chironectes minimus (3698)

Male, unknown age, proceeding from the vicinity of the “Guarapi-

ranga Dam” — São Paulo. After 21 days in captivity a lesion on

the tail was observed, treatment had no satisfactory results, deve-

loping posterior necrosis. The animal died a month and a half later.

Main disease: purulent necrotic dermatitis on the tail.

Histological findings: necrotic purulent dermatitis, hyaline degene¬

ration and calcification of the myocardial fibers; passive congestion,

hemorrhage, necrosis and calcification of the smooth muscle fibers

of the bladder’s wall; necrosis and calcification of the renal tubuli;

cardiac liver.

4. Thylogcde stigmatica (3578)

Female, unknown age (adult)

turition.

from Frankfurt. Died after par-

Main disease: ulcerous thrombo-endocarditis of the mitral valve.

Morbid anatomic findings: ulcerative-thrombo endocarditis of the

mitral valve; passive hepatic congestion; passive congestion of the

spleen, passive renal congestion.

135

SciELO

10 11 12 13 14 15

BELLUOMINI, H. E.; DINIZ, L. S. M. & SALIBA, A. M. — Findingrs of pathological anatomy in

mammals from the “Fundação Parque Zoológico de São Paulo” in 1971. Mem. Inat. Butantan:

U/i5:lZZ-152, 1980/81.

Histological findings: chronic interstitial myocarditis, ulcerative

thrombo-endocarditis; focal necrosis and chronic hepatic congestion.

5. Thylogale stigmatica (3579)

Female, unknown age (adult), proceeding from Frankfurt, stayed

at the ZOO for two years without any apparent signs or symptons.

Death took place during Winter.

Main disease: purulent pneumonia.

Morbid anatomic findings: purulent pneumonia; cystitis hepatitis

and vicarious hypertrophy of the left kidney.

Histopathological findings: purulent pneumonia; chronic interstitial

hepatitis; chronic cystitis, necrosis of central follicle of spleen.

6. Thylogale stigmatica (3576)

Female (adult) from Frankfurt. Death after parturition.

Main disease: chronic myocarditis, bronchopneumonia.

Morbid anatomic findings: chronic myocarditis, bronchopneumonia.

7. Thylogale stigmatica (3577)

Male, unknown age, proceeding from Frankfurt. After 16 days of

quarantine, it was found dead.

Main disease: intestinal intussusception.

Morbid anatomic findings: intestinal intussusception.

8. Tamandua tetradactyla (3680)

Female, unknown age, proceeding from “Serra do Mar” — São

Paulo. It died after 12 days of captivity, showing apathy, slow

movements, nasal discharge, T-36°C.

Main disease: hypoproteinemia.

Morbid anatomic findings: pulmonary edema; anasarca; ascitis;

hydropericardium.

9. Myrmecophaga tridactyla (3742)

Male, unknown age, from Itai-São Paulo.

Parasitological examination: large amount of Ancylostoma sp ova.

Main disease: verrucous thrombo-endocarditis of the bicuspidal and

mitral valves.

Morbid anatomic findings: thrombo-endocarditis of the bicuspidal

and mitral valves; peptic ulcer of the stomach and duodenum; pas-

sive renal congestion.

Histopathological findings: splenic and adrenal amyloidosis — fig.

1, 2; peptic ulcer of the stomach and duodenum.

10. Chinchilla laniger (390)

Male, from the North of Chile, staying for five years at the ZOO.

Main disease: purulent pneumonia.

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BELLUOMINI, H. E.; DINIZ, L. S. M. & SALIBA, A. M. — Findiníra of pathological anatomy in

mammals from the “Fundação Parque Zoológico de São Paulo” in 1971. Mew. /rtsí. Butantan'.

U/JtS-.nZAbT., 1980/81.

Fig. X — Thin 9«ction of the splecn of Myrmecophaga tridactyla demonstrating amyloid infiltration in

the follicles. HE staining: magnification about 160 x.

Fig. 2 — Details of fig. 1. HE staining; magnification about 400 x.

137

SciELO

BELLUOMINI, H. E.; DINIZ, L. S. M. & SALIBA, A. M. — Findíngs of pathological anatomy in

mammala from the “Fundação Parque Zoológico de São Paulo” in 1971. Mem. Inat. Butantan:

UU5:1ZZ-152, 1980/81.

Morbid anatomic findings: purulent pneumonia.

Histopathological findings: purulent pneumonia — fig. 3.

11. Chinchüla laniger (3671)

Female, lived for several years with its previous owner, before being

donated to the ZOO, where it remained for two months.

Main disease: myocarditis and verrucous thrombo-endocarditis of

the mitral valve.

Morbid anatomic findings: chronic interstitial myocarditis; chronic

pericarditis; verrucous thrombo-endocarditis of the mitral valve.

Histopathological findings: chronic interstitial myocarditis; chronic

pericarditis; verrucous thrombo-endocarditis; pulmonary edema and

emphysema; serous glomerulitis.

12. Chinchüla laniger (3674)

Female, lived for many years with its owner, and was then donated

to the ZOO, where it stayed for two months.

Main disease: toxic dystrophia of the liver.

Morbid anatomic findings: toxic dystrophia of the liver; gastroen-

teritis.

Histopathological findings: necrosis and steatosis of the liver; pas-

sive congestion and pulmonary hemorrhage; hyaline degeneration

of the myocardic fibers; hemorrhagic enteritis.

13. Chinchüla laniger (3672)

Male, lived for many years with its previous owner, and was then

donated to the ZOO, where it stayed for two months.

Main disease: verrucous thrombo-endocarditis of the mitral valve,

and focal myocarditis.

Morbid anatomic findings: chronic myocarditis, and chronic ver¬

rucous thrombo-endocarditis.

14. Myocastor coypus (2150)

Male, born at the ZOO, two years old. It was found dead in its

cage after presenting inappetency and apathy.

Main disease: acute glomerulonephritis; serosas with ecchymosis

and suffusions.

Histopathological findings: acute glomerulonephritis — fig. 4.

15. Myocastor coypus (3167)

Male, captured in Santo Amaro — São Paulo, estimated age one

year. Stayed at the ZOO for one year. It was found dead without

prior signs or symptons.

Main disease: pericarditis and chronic f ibrinous peritonitis.

Morbid anatomic findings: pericarditis and chronic fibrinous peri¬

tonitis.

138

1 SciELO

Fií?. 4 Thin kidncy section of Myocastor coypus, indicating Malpigi’s vesicles with glomerulonephritis.

HE staining; magnification about 400 x.

139

BELLUOMINI, H. E.; DINIZ, L. S. M. & SALIBA, A. M. — Findings of pathological anatomy in

mammals from the “inundação Parque Zoológico de São Paulo” in 1971. Mcm. Ivst. Biitantan:

44A5:133-162, 1980/81.

Fig. 3 — Thin lung section of Chinchilla laninger. presenting bronchioles and alveoli filled with pus.

HE staining; magnification about ICO x.

BELLUOMINI, H. E.: DINIZ, L. S. M. & SALIBA, A. M. — Findings of pathological anatomy in

mammals from the “Fundação Parque Zoológico de São Paulo” in 1971. Mem. Inst. Butantan:

44/-45:133-162, 1980/81.

16. Tapirus terrestris (332)

Female, approximately five years old, received at the ZOO on May

9, 1971 from Goiania, Brazil. On May 15, 1971, parasitologic exa-

mination showed ova and larvae of Strongyliis sp. and the animal

was submitted to antihelminthic treatment. On June 16, 1971 it

gave birth to a young female. On July 21, 1971 it presented dysen-

tery and was medicated, with no satisfactory results and death took

place on August 24, 1971.

Main disease: catarrhal gastroenteritis.

Morbid anatomic findings: catarrhal gastroenteritis.

Note: Within the intestines, a great amount of sand was found.

This incidence caused the removal of this animal species from sandy

enclosures.

Histopathological findings: toxic dystrophia of the liver; hyaline

and vacuolar degeneration of the myocardic fibers; catarrhal gas¬

troenteritis, glomerular and interstitial renal hemorrhage.

17. Tapirus terrestris (3745)

Female, born at the ZOO on June 16, 1971. Presented dysentery

on August 2, 1971; intense treatment did not show any improvement.

The animal was sacrified on the 28th of September of the same year,

presenting dehydration and cachexia.

Main disease: catarrhal hemorrhagic gastroenteritis.

Morbid anatomic findings: catarrhal hemorrhagic gastroenteritis;

toxic dystrophia of the liver.

Histopathological findings: toxic dystrophia of the liver; catarrhal

hemorrhagic gastroenteritis.

18. Diceros bicornis (642)

Male, received at the ZOO on the 3rd of September, 1971, born

in Angola, proceeding from Portugal. Early in the morning of

October 20, 1971, the animal presented symptoms of severe colics

which probable started early in the morning. The animal was

immediately medicated with no satisfactory results, dying soon

after.

Main disease: intestinal volvulus (jejunum and ileus).

Morbid anatomic findings: fibrino hemmorhagic peritonitis; intes¬

tinal volvulus.

19. Mazama simplicirconis (3867)

Female, received on August 29, 1971, presenting diffuse skin inju¬

ries, some of them with fistulous foccus. It died on September 3,

1971.

Main disease: chronic interstitial myocarditis, and thrombo-endo-

carditis of the valves.

140

SciELO

10 11 12 13 14 15 16

BELLUOMINI. H. E.; DINTZ, L. S. M. & SALIBA, A. M. — FindinBS of pathological anatomy in

mammals from the “Fundação Parque Zoológico de São Paulo” in 1971. Mem. Inst. Butaniani

4.4/^5:133-162, 1980/81.

Morbid anatomic findings: chronic interstitial myocarditis; cardiac

liver; passive congestion, and pulmonary edema; purulent der-

matitis.

Histopathological findings: cardiac liver; chronic myocarditis, and

chronic endocarditis.

20. Mazama simplicicornis (3749)

Female, estimated age several months. Arrived on 19“’ June 1971,

extremely emaciated, inappetent during a couple of days. After

medication, and special food, however, died on June 26, 1971, still

rejecting food.

Main disease: verminosis.

Morbid anatomic findings: cachexia; secondary anemia; anasarca.

Note: numerous exemplaries of trichostrongylidae were found in

the intestines.

21. Mazama simplicicornis (3044)

Female, adult, arrived on July 18, 1970. It gave birth to one young

on April 8, 1971 and died on April 23 of the same year.

Main disease: ulceropolypous endocarditis.

Morbid anatomic findings: ulceropolypous endocarditis, pulmonary

hemorrhage and hepatic cirrhosis.

Histopathological findings: pigmentary hepatic cirrhosis — fig. 5 ;

chronic perisplenitis; ulceropolypous thrombo-endocarditis.

22. Ozotocerus bezoarticus (3889)

Female, unknown age, proceeding from Minas Gerais. Arrived on

September 15, 1971, under the effect of a tranquilizer, extremely

weak. Died on September 28, 1971.

Main disease: hepatic cirrhosis, ascitis; hydrothorax; hydroperito-

neum.

Histopathological findings: biliary cirrhosis.

23. Ozotocerus bezoarticus (3879)

Female, estimated age two months, proceeding from Mato Grosso.

Arrived on September 10, 1971, presenting intense dysenteria, still

in lactation stage. Medicated, however, died on September 16, 1971.

Main disease: verminosis.

Morbid anatomic findings: secondary anemia; ascitis; anasarca.

Note: Numerous exemplaries of trichostrongylidae were observed

in the intestines.

24. Ozotocerus bezoarticus (588)

Female, adult, arrived on 28th of September 1968. On May 30,

1971, it presented respiratory problems, treatment was initiated,

however, it died on July 2, 1971.

141

SciELO

BELLUOMINI, H. E.; DINIZ. L. S. M. & SALIBA, A. M. — Findinjfs of patholoKical anatomy in

mammals from the “Fundação Parque Zoológico de São Paulo” in 1971. Mem. Inat. Butantan:

1980/81.

Fig. 5 — Thin liver section of Mazama aimplieieornis, indicating intense connective proliferation in the

portal space, and macrophages congested with hemosiderin. HE staining; magnification about

400 X.

Fig. 6 — Thin kidney section of Mazama aimplicicornia presenting hemosiderin infiltration in the proximal

distorted tubuli. HE staining; magnification about 400 x.

142

SciELO

BELLUOMINI, H. E,; DINIZ, L. S. M. & SALIBA, A. M. — Findinge of pathological anatomy in

mammals from the “Fundação Parque Zoológico de São Paulo” in 1971. Mem. Inat, Butantani

133-162, 1980/81.

Main disease: purulent bronchopneumonia.

Morbid anatomic findings: purulent fibrinous pleurisy.

Histopathological findings: fibrinous pneumonia. — figs. 7, 8.

25. Blastocerus dichotomus (2997)

Female, estimated age two years, arrived on July 8, 1970, from

Presidente Epitácio — São Paulo. On October 6, 1971, presented

cachexia, dry and bristly fur, anemic mucosa, body temperature

36°C. It died on October 21, 1971.

Main disease: inanition.

Morbid anatomic findings: hydrothorax; ascitis; hydroperitoneum.

26. Tayassu tajacu (297)

Male, adult, proceeding from Brasilia on June 21, 1958; it died on

October 18, 1971.

Main disease: serofibrinous pericarditis; serous hepatitis; pulmo-

nary edema.

27. Buhalus bubalis (190)

Male, six years and eight months old, born at the ZOO on September

9, 1965. Up to May 21, 1971, it showed only small injuries, and

endoparasites, when on this date, the animal presented intense apa-

thy, and a brownish urine. Examination of the urine revealed an

increased levei of glucose and a sediment without erythrocites. On

May 26, 1971, in spite of the intense treatment, it died.

Main disease: traumatic pericarditis; hypertrophy of the left and

right heart.

Morbid anatomic findings: traumatic pericarditis.

Histopathological findings: fibrinous pericarditis; renal hemoside-

rosis; hepatic hemosiderosis.

28. Ovis aries (2074)

Female, born at the ZOO, five years and six months old. It brought

On May 20, 1971, it suffered traumatism while pregnant.

Main disease: endometritis, and purulent placentitis.

Morbid anatomic findings: endometritis and purulent placentitis.

29. Ovis aries (308)

Female, born at the ZOO, five years and six months old. It brought

forth one young on June 14, 1969, and on the 24th of February 1971,

it presented myasis of the basis of horns, and was medicated. It

died on March 14, 1971, without disclosing symptoms.

Main disease: ulceropolypous thrombo-endocarditis.

Morbid anatomic findings: chronic myocarditis and chronic endo-

carditis; ascitis.

Histopathological findings: chronic myocarditis and endocarditis.

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SciELO

BELLUOMINI, H. E.: DINIZ, L. S. M, & SALIBA, A. M. — FincUnps of pathological anatomy in

mammals from the “Fundação Parque Zoológico de São Paulo" in 1971. Mem. Inst. Butantan:

H/^5’.lZZ-lh2, 1980/81.

7 — Thin lung section of Ozoíocerus bczoarticus with fibrinous pneumonia, presenting exudative

alvcüli with carnification. HE staining» magnification about 160 x.

Fig. 8 — Thin lung section with fibrinous pneumonia, showing cxtense necrotic area, and dystrophie

calcification. HE staining: magnification about 400 x.

144

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BELLUOMINI, H. E.; DINIZ, L. S. M. & SALIBA, A. M. — Findings oí pathological anatomy in

mammals from the “Fundação Parque Zoológico de São Paulo” in 1971. Mem. Inat. Butantan:

.♦Í/ÍS: 133-162, 1980/81.

30. Ovis musimom (1444)

Female, born at the ZOO on August 19, 1971, two years and six

months old.

Main disease: chronic myocarditis and chronic endocarditis.

Morbid anatomic findings: chronic myocarditis, chronic endocar¬

ditis.

Histopathological findings: chronic myocarditis and chronic endo¬

carditis.

31. Ovis musimom (3845)

Female, two months and a half old. Born at the ZOO on August 19,

1971. Since it lost its mother, it was bottlefed, and on October 15,

1971, it presented dysenteria.

Parasitological examination: Strongylidae.

Main disease: Helminthic pneumonia.

Morbid anatomic findings: helminthic pneumonia; ascitis; hy-

drothorax; hydropericardium; secondary anemia; catarrhal he-

morrhagic enteritis. Within the intestines, numerous exemplaries

of Strongylidae were observed.

32. Ovis musimom (411)

Female, four years and three months old. Born at the ZOO on

August 12, 1967. On October 15, 1971, it presented dysenteria.

Examination of the faeces revealed numerous ova of Strongylidae.

After medication, however, it died on November 13, 1971.

Main disease: purulent necrotic pneumonia.

Morbid anatomic findings: purulent necrotic pneumonia; ascitis;

hydrothorax; hydropericardium; hepatic toxic dystrophia.

33. Antilope cervicapra (548)

Male, arrived at the ZOO on January 17, 1963, over 8 years of age.

On August 6, 1971, it suddenly fell down trembling with groaning

respiratory sounds, and died 10 minutes after.

Main disease: myocardial infarction.

Morbid anatomic findings: myocardial infarction; mesenteric he-

morrhage.

Histopathological findings: myocardial infarction; chronic inters-

titial nephritis; hepatic toxic dystrophia.

34. Felis yaguaroundi (3734)

Male, arrived at the ZOO on June 10, 1971. On the 20th of Septem-

ber, 1971, it died after presenting apathy and inappetence.

Main disease: purulent pneumonia.

Morbid anatomic findings: purulent pneumonia.

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BELLUOMINI, H. E.; DINIZ, L. S. M. & SALIBA, A. M. — Findings of pathological anatomy in

mammals from the “Fundação Parque Zoológico de São Paulo” in 1971. Mem. Inat. Butantan:

U/^5:m-l52, 1980/81.

35. Procyon lotor (750)

Male, arrived at the ZOO on the 28th of August, 1964. It became

apathic, inappetent on April 25, 1971, and died on the same day.

Main disease: renal neoplasia; gastroenteritis; toxic hepatic dys-

trophia.

Morbid anatomic findings: renal neoplasia; gastroenteritis; toxic

hepatic dystrophia.

Histopathological findings: renal adenocarcinoma — fig. 9, 10, ,11;

Hemorrhagic catarrhal gastroenteritis; toxic hepatic dystrophia.

Renal metaplastic ossification — fig. 12, 13.

36. Chrysocyon brachiurus (3820)

Male, five months old, arrived at the ZOO on August 9, 1971, in

an advanced state of cachexia. On August 9, of the same year, it

presented bloody faeces, and died on August 11, 1971.

Main disease: cachexia.

Morbid anatomic findings: ascitis; hemopericardium; rachitism.

Histopathological findings: necrosis of the central lobe of the liver;

necrotic nephrosis; pulmonary edema and hemorrhage.

37. Pteronura brasiliensis (196)

Female, 10 years old, arrived at the ZOO on October 28, 1964, from

Aquidauana — Mato Grosso. During its stay in the ZOO, presented

only injuries by fighting. On May 22, 1971, it rejected food, did

not swim, and on May 23, of the same year, it died.

Main disease: calculous pyelonephritis; fibrinous pericarditis; ulce-

rous thrombo-endocarditis of the tricuspid and mitral valves; puru-

lent cystitis; hemorrhagic catarrhal gastroenteritis.

Histopathological findings: pyelonephritis; fibrinous pericarditis;

ulcerous thrombo-endocarditis; purulent cystitis; catarrhal gas¬

troenteritis.

38. Zalophus califomianus (2202)

Male, unknown age, arrived at the ZOO on September 10, 1969.

On September, 1969, it presented skin injuries caused by fungi.

On March 17, 1970, it presented bilateral keratitis of the eyes, and

on April 4, 1970, a cutaneous abcess was observed. It received

constant treatment for keratitis and skin lesions up to February

25, 1971. On March 23, 1971, it became inappetent and died on

June 21, 1971.

Main disease: internai hemorrhage by rupture of a vessel of the

heart basis.

Morbid anatomic findings: internai hemorrhage.

Histopathological findings: chronic myocarditis; interstitial ne-

phritis.

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BELLUOMINI, H. E.; DINIZ, L. S. M. & SALIBA, A. M. — Findings of pathological anatomy in

mammals from the “Fundação Parque Zoológico de São Paulo” in 1971. Mcm. Inst. Dutantan:

4-4/^5; 133-152, 1980/81.

Fig-. 10 — Details of fig. 9 showing papilar structures of the neoplasm. HE staining; magnification

about 250 x.

147

Fig. 9 — Thin kidney section of Procyon lotor presenting renal adenocarcinoma. HE staining; magnifi¬

cation about 160 X.

BELLUOMINI, H. E.; DINIZ, L. S. M. & SALIBA, A. M. — Findings of pathological anatomy in

mammals frora the “Fundação Parque Zoológico de São Paulo” in 1971. Mem. Inat. Butantan:

UM5:nZ-152, 1980/81.

Fig. 11 — Thin kidney sections of Procyon lotor showing renal adenocarcinoma with an extense necrotic

area were numerous cholesterol crystals are seen. HE staining; magnification about 400 x.

Fig. 12

Thin kidney section of Procyon lotor, Bhowing areas of calcifications and metaplastic ossifica

tion. HE staining; magnification about 160 x.

148

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BELLUOMINI, H. E.: DINIZ, L. S. M. & SALIBA, A. M. — Findings of pathological anatomy in

mammals from the “Fundação Parque Zoológico de São Paulo” in 1971. Mem. Inat. Butantan:

.(í/íí: 133-162. 1980/81.

39. Callithrix penicillata (3926)

Female, unknown age, donated on October 2, 1971; it died on October

5, 1971.

Main disease: verminosis.

Morbid anatomic findings: secondary anemia; hemorrhagic ca-

tarrhal gastroenteritis; cachexia.

Note: within the intestines numerous exemplaries of strongylidae

were found.

40. Callithrix penicillata (2878)

Male, unknown age, donated on March 22, 1970. On November 1,

1970, presented small injuries.

Main disease: traumatism.

Morbid anatomic findings: anemia, hemothorax; hemoperitonium;

traumatic rupture of the lung and of liver.

41. Callithrix spp. (2265)

Female, unknown age, proceeding from Bahia, on October 8, 1969,

and released after quarantine on November 18, 1969. On June 19,

1971, it was found dead without presenting any prior signs or

symptoms.

Main disease: purulent pneumonia.

Morbid anatomic findings: purulent pneumonia.

42. Saguinus niger (3516)

Male, unknown age, arrived at the ZOO on March 19, 1971, from

Goiania. On March 23, 1971, it was found dead.

Main disease: fibrinous peritonitis.

Note: in the abdominal cavity, numerous exemplaries of filaria

were found.

43. Saguinus bicolor (665)

Female, over four years of age. Arrived from Manaus on September

27, 1967. On March 3, 1971, it'presented prolapse of the rectum

due to dysenteria. Although rich and varied food was supplied, it

gradually became emaciated. It died on September 17, 1971.

Main disease: pyelonephritis.

Morbid anatomic finding: pyelonephritis.

Histopathological findings: pyelonephritis; toxic hepatic dystrophia

— fig. 14.

44. Cacajao melanocephalus (557)

Female, approximately eight years of age.

Main disease: hepatitis.

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BELLUOMINI, H. E.; DINIZ, L. S. M. & SALIBA, A. M. — Findinj?s of pathological anatomy in

mammals from the "Fundação Parque Zoológico de São Paulo" in 1971. Mem. Inst. Butantan:

4-4/45:133-162, 1980/81.

Fig. 13 — Detail of fig. 12 showing hyaline cylinders too. HE staining; magnification about 400 x.

Fig. 14 — Thin kidney sectíon of Saguinus bicolor with pyelonephritis. HE staining; magnification about

260 X.

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BELLUOMINI, H. E.; DINIZ, L. S. M. & SALIBA, A. M. — Findings of pathological anatomy in

mammala from the "Fundação Parque Zoológico de São Paulo" in 1971. Mem. Inst. Butantani

^-4/45:133-162. 1980/81.

Morbid anatomic findings: hepatitis; pulmonary edema; hydro-

torax; interstitial nephritis.

Histopathological findings: edema and passive pulmonary conges-

tion; hepatitis; chronic interstitial nephritis; cardiac hemorrhage.

45. AloiMtta guariba (3405)

Male, estimated age three years. It was captured when young,

arrived on January 28, 1971, from Pariquera-Açu, two years old.

On March 4,1971, it presented ascariasis. On July 15,1971, it became

apathic, inappetent, presented pneumonia and was still infested by

ascarides.

Main disease: purulent necrotic pneumonia.

Morbid anatomic findings: purulent necrotic pneumonia; purulent

necrotic enteritis; hemorrhagic enteritis.

Histopathological findings: purulent pneumonia; purulent necrotic

glossitis; purulent nephritis; splenic lymphoreticular hyperplasia.

46. Alouatta sp (3565)

Male, aproximate age 11 months. Arrived on March 28, 1971, from

Itapecerica da Serra — São Paulo. On November 15, 1971, it became

apathic, inappetent, and showed fetid faeces.

Main disease: hemorrhagic catarrhal gastroenteritis.

Morbid anatomic findings: hemorrhagic catarrhal gastroenteritis;

generalized ganglionic hypertrophy; toxic dystrophia of the liver.

Histopathological findings: toxic dystrophia of the liver; gan¬

glionic lymphoreticular hyperplasia.

47. Saimiri sciureus (2556)

Male, unknown age. Arrived on June 2, 1970, and on May 13, 1971,

presented deep injuries by fighting. It died on May 14, 1971.

Main disease: traumatism.

Morbid anatomic findings: hemothorax; hemoperitonium; hemope-

ricardium; pulmonary traumatism; anemia.

FINAL CONSIDERATIONS

Among the examined animais, the highest incidence of alterations

was seen at the levei of the circulatory tract, and the most common

conditions affecting the animais were thrombo-endocarditis, and myocar-

aitis with their manifestations. Following, were disturbancies of the

tiigestive tract, most part represented by severe patho-anatomical aspects

01 gatroenteritis, several cases caused by helminths, inducing invariably

ojarrhea, dehydration, and cachexia in the infested animais. At times,

alterations of the urinary tract were observed represented by pyelo-

nephritis, mostly of ascendent origin. A fact to be noted is the finding

ot neoplasia represented by one case of renal adenocarcinoma.

161

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BELLUOMINI, H. E.; DINIZ, L. S. M. & SALIBA, A. M. — Findings of patholosical anatomy in

mammals from the “Fundação Parque Zoológico de São Paulo” in 1971. Mem. Jnat. Butantan:

íiAS: 133-162. 1980/81.

ACKNOWLEDGEMENT

The authors wish to thank Mrs. Sibylle Heller for her editorial aid

and translation.

RESUMO: Durante o ano de 1971, o Zoológico de São Paulo man¬

teve em cativeiro 2066 animais dos quais 674 mamíferos. Foram

recebidos 101 mamíferos para exame necroscópico e 47 casos foram

selecionados, compreendendo 27 animais aclimatados e 20 em qua¬

rentena. Fragmentos de tecidos foram coletados e fixados em solu¬

ção de formol a 15% ou em líquido de Bouin. Cortes de tecidos de

6 n foram submetidos a diversos métodos de coloração para exame

histológico. O material coletado compreende às seguintes ordens

zoológicas: Primates, Carnívora, Artiodactyla, Perissodactyla, Mar-

supialía, Rodentia e Edentata. Dentre os mamíferos examinados,

foi visto maior incidência ao nível do aparelho circulatório.

Seguindo, distúrbios do aparelho digestivo, respiratório e urinário.

Foram observados também alterações do aparelho genital e alguns

casos de traumatismos. Fato a ser notado é o encontro de neoplasia,

representada por um caso de adenocarcinoma renal.

PALAVRAS-CHAVE: Animais em cativeiro, Patologia.

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Mem. Inat. Butantan

-*■4/45:163-166, 1980/81

SOBRE A POSIÇÃO SISTEMÁTICA DE TRASYPHOBERUS

PARVITARSIS SIMON, 1903 (ARANEAE,

THERAPHOSIDAE) *

Sylvia LUCAS *♦

RESUMO: O estudo comparativo dos tipos de Acanthoacurria

ferina Simon, 1892 e de Trasyphoherus parvitarsis Simon, 1903

e o exame de material pertencente à Coleção ORTHOGNATHA

(ARANEAE) do Instituto Butantan, permitiu estabelecer a sino-

nímia de parvitarsis com ferina, devendo prevalecer o nome atual:

TrasyphohervLS ferina (Simon), 1892.

PALAVRAS-CHAVE: Acanthoscurria ferina Simon, 1892; Tra-

syphoherus parvitarsis Simon, 1903; Sinonímia.

INTRODUÇÃO

Em 1892 Simon (5, ) descreveu a espécie Acanthoscurria ferina,

baseado num exemplar, macho, procedente de Tefé, Amazonas, Brasil.

O mesmo autor, em 1903 (6, ) descreveu o gênero monotípico, Trasy-

phoberus, baseado num exemplar, fêmea, também coletado em Tefé, deno¬

minando a espécie parvitarsis. A descrição do gênero e da espécie é

sumária e o autor comparou o gênero com Phormictopus Pocock, 1901 e

Theraphosa Thorell, 1870.

Mello Leitão, em 1923 (1, ) elaborou uma chave para distinção

dos gêneros do grupo das THERAPHOSEAS e colocou Trasyphoherus

muito próximo à Acanthoscurria Ausserer, 1871. Transcreveu a descrição

original de Simon, tanto do gênero como da espécie, citando que “não

lhe são conhecidos na natureza”.

Em 1945, Schiapelli e Gerschman (2, ) descreveram uma fêmea,

procedente do Rio Pimenta Bueno, Acre, Brasil, como pertencente à

T. parvitarsis e Vellard (7, ), no mesmo ano fez alguns comentários

sobre a biologia desta espécie e aproximou o gênero à Acanthoscurria.

Em 1964, Schiapelli e Gerschman (3, ) redescreveram o tipo de

Acanthoscurria ferina, um macho e descreveram o alótipo, fêmea, dese-

Trabalho realizado com o auxilio da FINEP.

Seção de Artrópodes Peçonhentos, Instituto Butantan.

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LUCAS, S. Sobre a posição sistemática de Traayphoberus parvitarsis Simon, 1903 (Araneae, Therapho-

sidae). Mem. Inat. Butantan, ^^/^5:158>156, 1980/81.

nhado os receptáculos seminais, caracter considerado de grande impor¬

tância para a correta identificação da espécie.

Em 1979 (4, ), as mesmas autoras, revendo as espécies tipo dos

gêneros da subfamília THERAPHOSINAE, elaboraram uma chave para

machos e fêmeas, para a distinção dos gêneros, afirmando não terem

visto 0 tipo nem o material pertencente ao gênero Trasyphoberus.

MATERIAL E MÉTODO

Os exemplares examinados foram os seguintes:

Acanthoscurria ferina Simon, 1892, holótipo, macho e alótipo

fêmea, n.° 1056 da coleção do Museu Nacional de História Natural

de Paris, procedente de Tefé, Amazonas, Brasil, fêmea n.° 3109 da

coleção ORTHOGNATHA do Instituto Butantan (Col. I.B. — O) proce¬

dente de Bôca do Tefé, Amazonas, Brasil, Hoge e Cavalheiro col., 1952.

Fêmea n.° 4524 (Col. I.B. — O), procedente do Peru, Menezes col..

Fêmea n.° 1857 (Col. I.B. — O), procedente de Manicoré, Amazonas,

Brasil, Armirante col., 1972. Três fêmeas n.° 1884 (Col. I.B. — O) pro¬

cedente de Humaitá, Amazonas, Brasil, Hoge Col., 1972. Fêmea n.°

2275 (Col. I.B. — O), procedente de Jatobal, Pará, Brasil, Gorgonio

col., 1975. Fêmea n.° 2659 (col. I.B. — O), procedente de Belém, Pará,

Brasil, Fonrobert col., 1979. Trasyphoberus parvitarsis Simon, 1903,

holótipo fêmea da Coleção do Museu Nacional de História Natural de

Paris.

Os exemplares foram estudados comparativamente, dando-se ênfase

ao aspecto das espermatecas, consideradas um bom caracter para a

identificação da espécie.

RESULTADOS

O exame do tipo de Trasyphoberus parvitarsis, uma fêmea em mau

estado de conservação, permitiu apenas verificar a existência do apa¬

relho estridulante localizado na face externa do trocanter do palpo e o

estudo das espermatecas.

O estudo comparativo dos tipos de Trasyphoberus parvitarsis e de

Acanthoscurria ferina, além dos demais exemplares pertencentes à Co¬

leção de ORTHOGNATHA do Instituto Butantan, permitiu estabelecer

a sinonímia de parvitarsis com ferina, uma vez que apresentaram

receptáculos seminais do mesmo tipo e os demais caracteres também

concordarem.

CONCLUSÃO

Não discutimos no presente trabalho a validade do gênero Trasy¬

phoberus Simon, 1903, pois, eventualmente, o exame de maior quanti¬

dade de material permitirá estabelecer caracteres novos para diferen¬

ciá-lo de Acanthoscurria Ausserer, 1871.

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LUCAS, S. Sobre a posição sistemática de Traayphoberus parvííarsis Simon, 1903 (Araneae, Thcrapho-

sidae). Mcm. Inst. Butantan, 4-Í/-45:153-156, 1980/81.

Estabelecemos que a espécie parvitarsis é sinônima de ferina e que

deve prevalecer o nome TrasypJioberus ferina (Simon), 1892.

AGRADECIMENTO

Agradecemos ao Dr. M. Hubert o empréstimo dos tipos da coleção

do Museu Nacional de História Natural de Paris e ao Dr. A. R. Hoge a

ajuda prestada na revisão do texto.

DISCUSSÃO

Além da descrição sumária de TroLsyphoherus parvitarsis Simon,

1903, 0 autor não comparou o gênero com Acanthoscurria, do qual difi¬

cilmente se distingue.

Mello Leitão citou como caracter de distinção entre os dois gêneros,

além da forma da fóvea torácica, as sigilas, que seriam quase marginais

em Acanthoscurria e afastadas da margem em Trasyphoberus, este

último caracter não mencionado na descrição original de Simon.

Schiapelli e Gerschman afirmaram, em 1979, não conhecer exempla¬

res pertencentes ao gênero Trasyphoberus, quando, em 1945, as autoras

descreveram um “genótipo”, fêmea, pertencente à coleção de aracnídeos

do Museu Argentino, sob n.° 839.

Vellard afirmou ser T. parvitarsis espécie comum na região média

do Gy-Paraná, principalmente perto do Posto Pimenta Bueno e colocou

em dúvida a procedência fornecida por Simon, sugerindo que Tefe

poderia ser apenas o porto de expedição do material. Aproximou o

gênero à Acanthoscurria e citou que Trasyphoberus distingue-se facil¬

mente pela presença das cerdas estridulantes, quando, na realidade,

a localização das cerdas é a mesma nos dois gêneros.

Em 1979, quando Schiapelli e Gerschman elaboraram uma chave

para a distinção dos gêneros da subfamília THERAPHOSINAE, as

autoras mencionaram os caracteres já empregados por Mello Leitão

para a diferenciação dos dois gêneros, citando na chave macho e fêmea,

quando é apenas conhecida a fêmea da espécie tipo do gênero Trasy¬

phoberus.

ABSTRACT: The comparative study of the type specimens

Acanthosmrria ferina Simon, 1892, and Trasyphoberus parvitarsis

Simon, 1903 as well as the examination of the material pertaining

to the ORTHOGNATHA (ARANEAE) collection of the Instituto

Butantan, permitted the conclusion of a synonymy between parvi¬

tarsis and ferina, where the actual name Trasyphoberus ferina

(Simon, 1892) must predominate.

KEYWORDS: Acanthoscurria ferina Simon, 1902; Trasyphoberus

parvitarsis Simon, 1903; Synonymy. Synonymy.

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10 11 12 13 14 15

LUCAS, S. Sobre a posição sistemática de Trasyphoherua parvitaraia Simon, 1903 (Araneae, Therapho-

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RAPHOSIDAE nuevas o poco conecidas. Observaciones biológicas. Acta zool.

Lilloana., 5:195-213, 1945.

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1 SciELO

Mem. Inat. Butantan

-í4A5:167-160, 1980/81

descrição de Gênero e espécie novos da sub-

FAMÍLIA THERAPHOSINAE (ARANEAE,

ORTOGHATHA, THERAPHOSIDAE ) *

Sylvia LUCAS **

RESUMO: São descritos gênero e espécie novos da subfamília

THERAPHOSINAE Thorell, 1870: Nhandu corapoensis, procedentes

de Carapó, Mato Grosso do Sul, Brasil.

PALAVRAS-CHAVE: Nhandu n. gen.; Nhandu carapoensis n.

sp.; ARANEAE; ORTHOGNATHA; THERAPHOSIDAE; THE-

RAPHOSINAE.

INTRODUÇÃO

A subfamília Theraphosinae Thorell, 1870, caracterizada pela pre¬

sença de uma escópula na face interna do fêmur IV, compreende, atual¬

mente, dez gêneros, que se distinguem entre si pela presença ou ausência

de um aparelho estridulante, pela localização do mesmo, pela extensão

das escópulaiS metatarsais e pelos caracteres sexuais: presença ou

ausência de esporões tibiais, aspecto do bulbo copulador e dos recep¬

táculos seminais.

Baseado nos caracteres citados acima, descrevemos um gênero e

espécie novos.

MATERIAL

Holótipo, macho Nro. 4611 da coleção de Orthognatha do Instituto

Butantan (Col. I.B. — O), procedente de Carapó, Mato Grosso do Sul,

Brasil, março 81, Souza Dias col.; paratipo, macho Nro. 4661 Col, I.B.

— O, da mesma procedência e col. do holótipo; paratipo, fêmea Nro.

4553 Col. I.B. — O, também procedente de Carapó, set. 79, Pellici col.;

macho Nro. 4647 Col. I.B. — O, procedente de Campo Grande, Mato

Grosso do Sul, Brasil, abr. 81, W. W. Koller col.; macho Nro. 4246 Col.

I.B. — o, procedente de Nioaque, Mato Grosso do Sul, Brasil, mar. 75,

Trabalho realizado com o auxílio da FINEP.

Seção de Artrópodes Peçonhentos, Instituto Butantan. Endereço para correspondência: CEP 05504 —

Caixa Postal 66 — São Paulo — Brasil.

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SciELO

LUCAS, S. Descrição de e^ênero e espécies novos da subfamflia Theraphosinae (Araneae, Orthognatha,

Theraphosidae). Mem, Inat. Butantan, ^í/^5:157-160, 1980/81.

C.B.O. Santos col.; macho Nro. 4707 Col. I.B. — O, procedente de Pedro

Gomes, Mato Grosso do Sul, Brasil, mar. 82, A. Francisconi col.

DIAGNOSE DO GÊNERO

Sem aparelho estridulante; escópulas dos metatarsos I e II com¬

pletas, no III ocupando os 4/5 apicais e no IV apenas o terço apical.

Sem apófises tibiais, apenas com espinhos apicais, ventrais. Bulbo copu-

lador de êmbolo curto (Figs. 1, 2, 3 e 4) e receptáculos seminais como

na Fig. 5.

DESCRIÇÃO DO HOLÓTIPO

Medidas: comprimento total do corpo, com quelíceras: 58 mm,

cefalotórax 21 x 20 mm, pernas I 63 mm, II 59 mm, III 58 mm, IV

73 mm. Patela e tíbia I e IV 23 mm, tíbia e metatarso I 26 mm, IV 35 mm.

Cefalotórax, abdômen e fêmures de colorido castanho escuro, quase

negro, dorsalmente, apresentando no abdômen e nas pernas a partir das

patelas, longos pêlos avermelhados. O colorido ventral é mais claro,

sendo o externo mais escuro. Anéis de cor creme nos ápices dos fêmures,

patelas, tíbias, metatarsos e tarsos dos palpos e pernas, mais largos nas

pernas posteriores.

A fóvea torácica é curta, reta e profunda. Os olhos medianos ante¬

riores são redondos e distam entre si pouco mais de um diâmetro, os

olhos laterais anteriores são ovais e distam dos anteriores medianos um

diâmetro dos últimos. A primeira fila ocular é fortemente procurva, uma

tangente à borda anterior dos olhos medianos toca o bordo posterior dos

laterais.

Lábio mais longo do que largo, com duas sigilas logo abaixo da

sutura e apresentando numerosas cúspides apicais. Ancas dos palpos

também com numerosas cúspides na área basal. Sigilas posteriores ovais,

distando da margem pouco menos do que um diâmetro maior. Sem apa¬

relho estridulante. Metatarsos I e II com escópulas completas, III com

escópulas ocupando os 4/5 apicais e IV com escópulas no terço apical.

Perna I sem esporões tibiais, porém com vários espinhos apicais, ven¬

trais. Fêmures das pernas, principalmente da perna III espessados.

Metatarsos I e II com três espinhos ventrais, dois basais e um apical,

III e IV com numerosos. Patelas múticas. Tíbias dos palpos com quatro

espinhos na face interna. O bulbo apresenta o êmbolo curto e está repre¬

sentado nas Figs. 1, 2, 3 e 4.

DESCRIÇÃO DOS PARATIPOS

Macho: comprimento total do corpo, com quelíceras: 56 mm, cefalo¬

tórax 21 X 20 mm, pernas I 64 mm, II 59 mm, III 57 mm e IV 71 mm.

Patela e tíbia I e IV 23 mm, tíbias e metatarsos I 26 mm e IV 35 mm.

O exemplar apresenta o mesmo colorido do holótipo e também o

mesmo aspecto, havendo apenas uma pequena diferença na espinulação

do palpo, com apenas um espinho basal.

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LUUAS, S. Descrição de gênero e espécies novos da subfamília Theraphosinae (Araneae, Orthognatha,

Theraphosidae). Mem. Inst. Butantan, 4-4/-45:167-160, 1980/81.

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^ 1 — Nhandu carapoenais. palpo direito, face externa.

^ig. 2 — Nhandu carapocnaia, palpo direito, face interna.

Fig, 3 — Nhandu carapocnais, bulbo direito, face externa.

Fig, 4 — . i-Jhanãu carapoensia, bulbo direito, face interna.

Fig. 5 — Aspecto dorsal de Nhandu carapoenaia (exemplar Nro. 4 707 Col. I.B. —

O).

LUCAS, S. Descrição de gênero e espécies novos da subfamilia Theraphosinae (Araneae, Orthognatha,

Theraphosidae). Mem. Inat. Butantan, ^4/-45*167-160, 1980/81.

Fêmea: comprimento total, com quelíceras: 53 mm, cefalotórax 22,5

X 21 mm, pernas I 55 mm, II 51 mm, III 48 mm e IV 58 mm. Patela e

tíbia I 21 mm e IV 22 mm, tíbia e metatarso I 21,5 mm e IV 27 mm.

O colorido é o mesmo do holótipo, ligeiramente mais claro, talvez

pela conservação no álcool. Na face dorsal dos fêmures, patelas e tíbias

há duas faixas longitudinais glabras, que também aparecem nos machos,

porém bem menos nítidas.

DIAGNOSE DIFERENCIAL

Como ocorre nos gêneros Sericopelma Ausserer, 1875 (1) e Thera-

phosa Walckenaer, 1805 (4), os machos do novo gênero também não

apresentam esporões tibiais. Distingue-se porém de Sericopelma pelo

aspecto do bulbo e das espermatecas e de Theraphosa, além do aspecto

do bulbo e espermatecas, também pela ausência de um aparelho estri-

dulante. Aproxima-se de Pamphobeteus Pocock, 1901 (2) pelo aspecto

do bulbo e espermatecas, porém distingue-se pela ausência de esporões

tibiais.

ABSTRACT: a new genus and a new species of the subfamily

THERAPHOSINAE are described: Nhandu carapoensis, from

Carapó, State of Mato Grosso do Sul, Brasil.

KEYWORDS; Nhandu n. gen.; Nhandu carapoensis n. sp.;

ARANEAE; ORTHOGNATHA; THERAPHOSIDAE; THERA-

PHOSINAE.

AGRADECIMENTOS

Agradecemos aos Srs. Mauro Cândido de Souza Dias, J. Pellici,

Wilson Werner Koller e A. Francisconi o envio dos exemplares que servi¬

ram para a realização deste trabalho.

À Sra. Delminda Travassos agradecemos a confecção dos desenhos e

ao Dr. A. R. Hoge as fotografias.

REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

1. AUSSERER, A. Zweiter Beitrag zur Kenntniss der Arachniden Familie der

TERRITELARIEAE (MYGALIDAE — autor). Verh. zool. bot. Ges. Wien

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2. POCOCK, R.I. Some new and old Genera of S. — American Aviculariidae.

Ann. Mag. Nat. Hist. (7) S:540-555, 1901.

3. THORELL, T. On European Spider. N. Aet. reg. Soc. sei. Upsal. (3) 7 -

109-142, 1870.

4. WALCKENAER, C.A. Tableau des Aranéides ou Caractères essentiels des

tribus, genres, familles et races que renferme le genre ARANEAE de

Linné, avec la désignation des espèces comprises dans chacune de ces

divisions. Paris: I — XII, 1 — 88, 1 tab., 9 pl., 1806.

160

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Afetn. In$t. Butantan

U/ÂS:16U169, 1980/81

aranhas do gênero ctenus coletadas na foz

DO RIO CULUENE, XINGU, BRASIL: DESCRIÇÃO DE

UMA ESPÉCIE NOVA E REDESCRIÇÃO DE CTENUS

VILLASBOASI MELLO-LEITÃO (ARANEAE; CTENIDAE)

Vera Regina D. von EICKSTEDT *

RESUMO: É descrita uma espécie nova de Ctenus (ARANEAE;

CTENIDAE) baseada numa fêmea coletada na confluência dos rios

Culuene e Xingu (Mato Grosso, Brasil) e redescrita dessa mesma

localidade-tipo a espécie Ctenus viUasboasi Mello-Leitão, 1949. A

disponibilidade de novos exemplares desta última espécie, conhecida

até agora apenas pelo holótipo, permitiu um melhor conhecimento

sobre sua distribuição geográfica e variação intra-específica.

PALAVRAS-CHAVE; Sistemática de aranha; Ctenus carvalhoi

sp. n.; Ctenus viUasboasi Mello-Leitão: redescrição.

INTRODUÇÃO

Em 1949 Mello-Leitão publicou uma relação de sessenta e duas espé¬

cies de aranhas coletadas pelo Dr. José Cândido de Mello Carvalho na

confluência dos rios Culuene e Xingu (Mato Grosso) das quais dezesseis

foram descritas como espécies novas. Quanto à família Ctenidae, que

tem sido objeto de meus estudos, Mello-Leitão mencionou Ctenus similis

Pickard-Cambridge, 1897 e descreveu uma espécie nova do mesmo gênero,

Ctenus viUasboasi. O estudo do material examinado por Mello-Leitão e de

novos espécimes, agora disponíveis, permitiu avaliar a correta posição

específica dos exemplares determinados por Mello-Leitão como Ctenus

similis e um melhor conhecimento sobre a distribuição geográfica e varia¬

ção intra-específica de C. viUasboasi, que era conhecida até agora apenas

pelo holótipo.

MATERIAL E MÉTODOS

Foram examinados os ctenídeos coletados por Mello Carvalho, perten¬

centes ao Museu Nacional (Rio de Janeiro), um exemplar de viUasboasi

Seção de Artrópodes Peçonhentos, Instituto Butantan. Endereço para correspondência: CEP 05604 —

Caixa Postal 66 — São Paulo — Brasil.

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EICKSTEDT, V. R. D. von. Aranhas do gênero Ctenua coletadas na foz do rio Culuene, Xingu, Brasil:

descrição de uma espécie nova e redescrição de Ctcnua vülasboasi Mello-Leitão (Araneae; Ctenidae).

Mem. Inat. Butantan, -4^/^5:161-169, 1980/81.

do Museu de Zoologia (USP) e cinco da coleção particular de P. Ashmole

(Departamento de Zoologia, Universidade de Edinburgh, Inglaterra), que

me enviou (abril 1980), para identificação, parte do material por ele

capturado durante uma expedição espeleológica nas grutas de Los Tayos,

Equador. De Ctenus carvalhoi sp. n., além do material-tipo foi examinado

um exemplar contido em um lote de Ctenus indeterminadas pertencentes

ao Muséum d’Histoire Naturelle (Paris). Tive também disponíveis os

holótipos de Ctenus similis Pickard-Cambridge (British Museum Natural

History, Londres) e de Ctenus villasboasi (Museu Nacional, Rio de

Janeiro).

A descrição das espécies foi baseada no estudo comparativo do colo¬

rido, dimensões corporais e caracteres morfológicos externos do material

disponível. Na bibliografia precedente a cada uma foram relacionadas

as referências à sistemática da espécie constantes na literatura; quando

necessário, foram feitas observações a respeito na discussão que acom¬

panha cada espécie. Representou-se graficamente a quetotaxia através

de um mapeamento da inserção dos espinhos em cada artículo das pernas

e do palpo. A extensão das escópulas ventrais das pernas foi assinalada

junto com a espinulação. Para o desenho da genitália feminina utilizou-se

uma câmara clara acoplada ao estereomicroscópio. As ilustrações foram

feitas pelo autor e passadas a nanquim pela Sra. Delminda Travassos,

desenhista do Instituto Butantan.

Abreviaturas usadas: OMA — olhos medianos anteriores; OMP —

olhos medianos posteriores; OLA — olhos laterais anteriores; OLP —

olhos lateriais posteriores; MNRJ — Museu Nacional (Rio de Janeiro) ;

MZSP — Museu de Zoologia (São Paulo) ; PAG — coleção P. Ashmole.

Ctenus carvalhoi sp. n.

Material-tipo : Ctenus carvalhoi é fundamentada nos exemplares de¬

terminados por Mello-Leitão (1949) como Ctenus similis Pickard-Cam¬

bridge, 1897. Holótipo fêmea, J. C. Mello Carvalho col. 1947, confluência

dos rios Culuene e Xingu, Mato Grosso, Brasil, n.° 48450MNRJ. Parátipo

fêmea jovem, mesmos dados do holótipo.

Etimologia: o nome específico é uma homenagem ao coletor do mate¬

rial-tipo.

Diagnose: Ctenus carvalhoi pode ser facilmente distinta das demais

espécies conhecidas do gênero pela morfologia do sistema copulador femi¬

nino (forma do epígino e escleritos laterais).

Fêmea — Colorido geral castanho escuro. Dorso do abdômen com uma

faixa clara longitudinal mediana, de margens serrilhadas (Fig. 1). Ventre

marron mais escuro, cortado por linhas longitudinais de pontos brancos,

presentes também, esparsamente, na face lateral do abdômen.

Olhos 2-4-2. Quadrângulo ocular mediano tão longo quanto largo,

ligeiramente mais estreito na frente. OMA um pouco menores que OMP.

OLP e OMP iguais em tamanho. OLA os menores, elípticos. OLA e OLP

em um cômoro comum. Segunda fila ocular reta pelas margens anteriores.

Distâncias interoculares: OMA distantes entre si e dos OMP cerca de

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EICKSTEDT, V. R. D. von. Aranhas do gênero Ctenus coletadas na foz do rio Culuene. Xingu, Brasil:

descrição de uma espécie nova e redescriçáo de Ctenus vülasboasi Mello-Leitão (Araneae; Ctenidae).

Mcm. Inst. Butantan, íí/45:161-169, 1980/81.

1 e 2 — Ctenus carvalhoi sp. n. Fig. 1 — padrão do colorido dorsal; Fig. 2 — sistema copulador

do holótipo, vista ventral.

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EICKSTEDT, V. R. D. von. Aranhas do gênero Ctenua coletadas na foz do rio Culuene. Xingu, Brasil:

descrição de uma espécie nova e redescrição de Ctenua vülasboaai Mello-Leitão (Araneae; Ctenidae).

Mem. Inat. Jiutantan, ^4/^5:161-169, 1980/81.

um diâmetro; OLA afastados dos OMP e dos OLP pelo seu diâmetro

maior. Clípeo igual a um diâmetro dos OMA. Sulco ungueal das quelíceras

com três dentes na promargem (o médio, maior) e quatro na retromar-

gem, seguidos de mais um, punctiforme, proximal. Lábio escavado na base,

mais longo que largo, atingindo a metade da altura das lâminas maxilares.

Escópula rala em toda a extensão da face ventral dos tarsos I a IV e

meta tarsos I e II e na metade apical do metatarso III (Fig. 7). Artículos

dos palpos sem escópula lateral anterior. Quetotaxia das pernas e dos

palpos: (Fig. 7). Duas garras tarsais, com dois a três dentes; tufos subun-

gueais densos, verticais. Epígino retangular, com margens laterais abaula¬

das formando um cordão sinuoso (que corresponde à “guide” de Cham-

berlin (1904) cuja função é orientar o êmbolo em direção aos orifícios

de abertura do epígino) ; escleritos laterais ao epígino (Comstock, 1965:

132) muito desenvolvidos e. esclerotizados, entrelaçados com as guias da

placa epigineal e terminando em ponta romba na altura do terço basal

do epígino (Fig. 2). Pernas IV-I-II-III. Pat. + tib. I > Pat. + tib. IV.

Comprimento do corpo;

Macho-, desconhecido.

19 mm (com quelíceras).

Distribuição geográfica : BRASIL; Amazonas : São Paulo de Olivença.

Mato Grosso: confluência dos rios Culuene e Xingu (localidade-tipo).

Material estudado : o material-tipo e uma fêmea, sem dados sobre

coletor e data de coleta, São Paulo de Olivença, AM, Brasil, n.° 1877

(tubo 8613) MNHN (Paris).

Discussão: o confronto dos exemplares determinados por Mello-Leitão

como Ctenus similis Pickard-Cambridge com o holótipo desta espécie

demonstrou que eles não são co-específicos (a redescrição de similis encon¬

tra-se no prelo). Eles também não correspondem a nenhuma das espécies

conhecidas do gênero cujos tipos tive oportunidade de estudar.

Ctenus villasboasi Mello-Leitão

Ctenus villasboasi Mello-Leitão, 1949:11 (sp. n.), fig. 12. Roewer,

1954:656 (Cat).

Material-tipo: Holótipo fêmea, 48452 MNRJ, J. C. Mello Carvalho

col. abr. 47, confluência dos rios Culuene e Xingu, MT, Brasil.

Diagnose : o padrão de colorido das pernas (mancha retangular clara

na face ventral das tíbias I a IV e faixa clara oblíqua ventral nas coxas I)

e a morfologia do sistema copulador feminino (epígino e escleritos laterais)

caracterizam Ctenus villasboasi.

Fêmea — Colorido geral castanho a cinza escuro. Cefalotórax, em dois

exemplares, com uma estreita linha clara mediana partindo do intervalo

entre os OMP e indo até a margem posterior do cefalotórax, nos outros

exemplares sem essa linha; borda lateral do cefalotórax sem ou com pelos

acinzentados formando uma faixa marginal contrastante. Esterno, coxas,

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EICKSTEDT, V. R. D. von. Aranhas do grênero Ctenus coletadas na foz do rio Culuene, Xingu, Brasil:

descrição de uma espécie nova e redescrição de Ctenua villasboasi Mello-Leitão (Araneae; Ctenidae).

Mem. Inet. BiUantan, íí/í5:161-169, 1980/81.

3 ® 6 — Ctenua villaahoasi Mello-Leitão. Fig. 3 — padrão de colorido do ventre. Fig. 4 — padrão

de colorido do externo e coxas I; Fig. 6 — sistema copulador do holótipo, vista ventral;

Fig. 6 — sistema copulador do exemplar 1720 PAC, vista ventral. Abreviaturas: el =

esclerito lateral; ep = epígino.

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EICKSTEDT, V. R. D. von. Aranhas do gênero Ctenua coletadas na foz do rio Culuene. Xingu, Brasil:

descrição de uma espécie nova e redescriçáo de Ctenua vülasboaai Mello-Leitão (Araneae; Ctenidae).

Aíem. Inst. Butantan, ^4/45:161-169, 1980/81.

lábio, lâminas maxilares e artículo basal das quelíceras de colorido mais

escuro. Dorso do abdômen marrom amarelado ocre, com fólio claro dorsal

mediano ladeado de dois a três pares de manchas circulares escuras; às

vezes, só as manchas escuras são perceptíveis. Lados do abdômen de

colorido pardacento, manchado de escuro. Ventre com um triângulo me¬

diano bem escuro, delimitado por duas filas paramedianas de sigilos

claros; dentro desse triângulo, dois sigilos claros abaixo do epígino e,

próximo a ele, lateralmente, algumas manchas claras, esparsas; epigastro

com uma faixa clara transversal um pouco acima do epígino (Fig. 3).

Tíbia das pernas I a IV com mancha retangular clara, formada por pelos

cinza, na altura do terceiro par de espinhos ventrais nas pernas I e II e

do segundo par nas pernas líl e IV. Coxa do primeiro par de pernas com

uma faixa clara oblíqua atravessando toda a face ventral do artículo,

presente também na margem anterior do esterno (Fig. 4). Face dorsal

dos artículos das pernas, principalmente dos fêmures, com anéis escuros,

nem sempre muito conspícuos. Face ventral do fêmur e da tíbia do palpo

com ou sem mancha clara, como nas pernas.

Olhos 2-4-2. Quadrângulo ocular mediano ligeiramente mais longo

que largo, um pouco mais estreito na frente. OMA pouco menores que

OMP e estes do mesmo tamanho dos OLP. OLA muito pequenos, elípticos.

Segunda fila ocular reta ou ligeiramente recurva pelas margens ante¬

riores. Distâncias interoculares: OMA afastados entre si por pouco menos

que um diâmetro e dos OMP por um diâmetro. OMP distantes um do

outro por um diâmetro. OLA afastados dos OMP e dos OLP cerca de um

diâmetro e meio. Clípeo igual a um diâmetro e meio dos OMA. Sulco

ungueal das quelíceras com três dentes na promargem (o médio, maior),

quatro na retromargem (seguidos de mais um, punctiforme, proximal) e

muitas cúspides entre as duas margens. Lábio escavado na base, mais

longo que largo, atingindo a metade das lâminas maxilares. Escópula rala

em toda a face ventral dos tarsos I a IV e metatarsos I e II, na metade

apical do metatarso III e no quarto apical de metatarso IV; tíbias sem

escópula ventral (Fig. 8). Artículos do palpo sem escópula lateral anterior.

Quetotaxia das pernas e dos palpos: (Fig. 8). Duas garras tarsais nas per¬

nas, com dois a três dentes; tufos subungueais densos, verticais. Palpo com

garra ímpar pectinada em fila simples. Epígino alongado, com dois lobos

ovais salientes na metade anterior; escleritos laterais ao epígino digiti-

formes, curvos para dentro, situados na metade da altura do epígino

(Figs. 5, 6). Pernas IV-I-II-III. Pat. + tib. I > pat. + tib. IV. Variação

do tamanho do corpo (fêmeas adultas) : 18 mm-32 mm

Macho: desconhecido.

Distribuição geográfica: BRASIL: Mato Grosso: confluência dos rios

Culuene e Xingu (localidade-tipo). Pará: Belém. EQUADOR: Los Tayos.

Material estudado: além do holótipo, uma fêmea, P. Vanzolini col.

ago. 1966, Belém (5658 MZSP) ; uma fêmea, P. Ashmole col. jul. 76, Los

Tayos (78°12’W, 3°10’S), no campo (7 PAC) ; uma fêmea com ooteca,

P. Ashmole col. jul. 76, Los Tayos (78°12’W, 3"10’S), sob casca de árvore

(150 PAC) ; uma fêmea, P. Ashmole col. ago. 76, Los Tayos (78°12’W,

3°?6’S), dentro de gruta (1186 PAC) ; uma fêmea, P. Ashmole col. ago.

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1 SciELO

EICKSTEDT, V. R. D. von. Aranhas do gênero Ctenua coletadas na foz do rio Culuene, Xingu, Brasil:

descrição de uma espécie nova e redescrição de Ctenua vülaaboaai Mello-Leitão (Araneae; Ctenidae).

Mem. Inat. Butantan, -4^/45:161-169, 1980/81.

7 — Ctenua carvalhoi ap. n. — Quctotaxia do palpo e das pernas I-IV e extensão das escópulas

ventrais das pernas I-IV. Abreviaturas: d := face dorsal; v = face ventral; fe =: fêmur;

pa =: patela; ti == tíbia; met = metatarso; ta = tarso.

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EICKSTEDT, V. R. D. von. Aranhas do gênero Ctenus coletadas na foz do rio Culuene. Xingu, Brasil:

descrição de uma espécie nova e redescrição de Cíenws villasboasi Mello-Leitão (Araneae; Ctenidae).

Mem. Inst. liutantan, 4^/^^5:161-169, 1980/81.

8 — Ctenus vülashoasi Mello-Leitão — Quetotaxia do palpo e das pernas I-IV e extensão das escó-

pulas ventrais das pernas I-IV. Abreviaturas: d = face dorsal- v = face ventral; fe = fêmur;

pa = patela; ti = tíbia; met = metatarso; ta =; tarso.

1 SciELO

168

EICKSTEDT, V, R. D. von. Aranhas do tçênero Ctenus coletadas na foz do rio Culuene. Xingu, Brasil:

descrição de uma espécie nova e redescrição de Ctenus villasboasi Mello-Leitão (Araneae; Ctenidae).

Mcm. Inst. liiitantan, 44/45^161-169, 1980/81.

76, Los Tayos, campo Santiago (78°02’W, 3”04’S), perambulando à noite

(1720 PAG).

Discussão : na descrição original Mello-Leitão cita um macho como

holótipo de villasboasi, entretanto a Fig. 12 representa o epígino dessa

espécie. No catálogo de Roewer consta que apenas o macho de villasboasi

é conhecido. O exame do holótipo demonstrou que a espécie está baseada

em uma fêmea adulta.

O padrão de colorido das pernas (mancha retangular clara nas tíbias

e faixa clara transversal nas coxas I) é um caráter diagnóstico da espécie,

entretanto, não foi mencionado na descrição original, apesar de muito

conspícuo no holótipo.

AGRADECIMENTOS

Aos responsáveis pelas coleções, A. Timótheo da Costa (Museu Na¬

cional, Rio de Janeiro), Lícia M. Neme (Museu de Zoologia, São Paulo),

F. R. Wanless (British Museum, Londres), M. Hubert (Muséum National

d’Histoire Naturelle, Paris) e P. Ashmole (University of Edinburgh)

agradeço o empréstimo do material que possibilitou a execução deste

trabalho.

ABSTRACT: A new species of the genus Ctenus (Araneae;

Ctenidae) is described based on a feniale collected at the con-

fluence of the Culuene and Xingu rivers (Mato Grosso, Brazil).

The study of five now avaiable specimens of Ctenus villasboasi

Mello-Leitão, 1949 allowed its redescription and a better know-

ledge on the geographic distribution and intraspecific variation

of this species that was known up to present only by the type-spe-

cimen.

KEYWORDS: Spider systematics; Ctenus carvalhoi sp.n.; Ctenus

villasboasi Mello-Leitão : redescription.

1 .

6 .

REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

CIIAMBERLIN, R.V. Notes on generic characters in the Lycosidae. Canad.

Entom., 36:145-148, 173-178, 1904.

COMSTOCK, J.H. The spider book. New York, Comstock Pub. Associates,

1965. 729 p., 770 figs.

MELLO-LEITÃO, C.F. Aranhas da foz do Koluene. Boi. Mus. Nac. Rio de

Janeiro (Zool.), n.° 92:1-19, figs. 1-21 1949.

PICKARD-CAMBRIDGE, F.O. On cteniform spiders from the lower Ama-

zons and other regions of North and South America. Ann. Mag. Nat.

Hist., fP(6) :62-106, pis. III, IV, 1897.

ROEWER, C. Katalog der Araneae. Bruxelles, Cari S. Bremen, 1954. vol.

2a, 923 p.

169

SciELO

10 11 12 13 14 15

Mem. Inat, Butantan

W-*í:171-179, 1980/81

REDESCRIÇÃO DOS TIPOS DE CTENUS SIMILIS, CTENUS

ALBOFASCIATUS E CTENUS MINOR (ARANEAE;

CTENIDAE)

Vera Regina D. von EICKSTEDT ♦

RESUMO; São redescritos os tipos de três espécies amazônicas

de aranha do gênero Ctenus: C. similis, C. albofasciatus e C. minor.

Para cada uma constam a bibliografia correspondente à sistemática

da espécie e a redescriçâo, acompanhada de comentários e ilustrações.

As espécies em estudo são representadas até o momento apenas

pelos exemplares-tipo. Verificou-se que o espécime relacionado por

Mello-Leitão (1949) sob C. similis não é co-especifico com o holótipo

dessa espécie; ele pertence a uma espécie nova do gênero, descrita

sepaardamente. (Eickstedt, V. R. D. 1980/81)

PALAVRAS-CHAVE: Sistemática de aranha; Ctenus similis; Cte¬

nus albofasciatus; Ctenus minor; redescriçâo de tipos.

INTRODUÇÃO

A família Ctenidae (Araneae, Labidognatha) é representada

por 65 gêneros; mais da metade das 400 espécies de ctenídeos

mencionadas na literatura estão incluídas no gênero nominativo da

família, Ctenus. Esse “status” taxonômico decorre do fato de que tanto

os gêneros quanto as espécies estão, em geral, mal caracterizados, indu¬

zindo os autores à criação contínua de novas entidades. Por outro lado,

a definição precária do próprio gênero-tipo permite incluir sob ele a

maioria das espécies descritas.

O exame dos espécimes-tipo das espécies mais antigas e a redes-

crição delas baseadas nos caracteres morfológicos atualmente considera¬

dos de valor para o reconhecimento específico, notadamente as genitálias

masculina e feminina, constituem o primeiro passo para uma posterior

revisão da sistemática dessa família. Com este objetivo são redescritas as

espécies amazônicas Ctenus similis, Ctenus albofasciatus e Ctenus minor.

Seção de Artrópodes Peçonhentos, Instituto Butantan.

Caixa Postal 65 — São Paulo — Brasil.

Endereço para correspondência: CEP 06504

171

SciELO

EICKSTEDT, V. R. D. von. Redescrição de Ctenua aimilia, Ctenus albofaaciatus e Ctenus minor

(Araneae; Ctenidae). Mem. Inat. Butantan, íí/^5:171-179, 1980/81.

MATERIAL E MÉTODOS

Foram estudados os exemplares-tipo das três espécies em questão,

pertencentes ao British Museum of Natural History (Londres) e um

espécime do Museu Nacional (Rio de Janeiro) determinado por Mello-

-Leitão (1949) como Ctenus similis Pickard-Cambridge.

De cada aranha foram examinados os caracteres morfológicos exter¬

nos e 0 colorido e tomadas as dimensões corporais costumeiramente

usadas em araneologia. A quetotaxia de cada espécie foi representada

graficamente através de um mapeamento da inserção dos espinhos em

cada articulo dos quatro pares de pernas e do palpo. A extensão das

escópulas ventrais das pernas foi assinalada juntamente com a espinu-

lação. A fim de não prejudicar o material-tipo apenas a face ventral da

genitália externa foi desenhada, com auxílio de câmara clara acoplada

ao estereomicroscópio. As ilustrações foram feitas pelo autor e passadas

a nanquim pela Sra. Delminda Travassos, desenhista do Instituto

Butantan.

Abreviaturas usadas: C = citação; Cat = catálogo; Ch = chave;

L = lista (na bibliografia precedente a cada espécie). OMA = olhos

médios anteriores; OMP = olhos médios posteriores; OLA = olhos

laterais anteriores; OLP = olhos laterais posteriores; pat. -f- tib. =

patela + tíbia (na redescrição das espécies).

Ctenus similis Pickard-Cambridge

Ctenus similis Pickard-Cambridge, 1897: 55 (L), 77 (Ch), 83

(sp.n.), pl. 3; figs. Ic, 4a Pickard-Cambridge, 1902: 411 (Ch), 413 (L).

Petrunkevitch, 1911 : 477 (Cat.) Mello-Leitão, 1936: 4 (Ch), 13 (C).

Mello-Leitão, 1949 : 11 (C). Roewer, 1954: 655 (Cat.). Bonnet, 1956 :

1289 (Cat.).

Material-tipo: Holótipo fêmea, 1896.12.13.102 BMNH (Londres),

F. O. Pickard-(^ambridge e E. E. Austen col. 1896, floresta de Santarém,

Pará, Brasil.

Fêmea: Colorido geral castanho claro. Cefalotórax com vestígio de

uma faixa longitudinal de pelos amarelados na região mediana, mais

nítida no terço posterior. Esterno, lábio, lâminas maxilares e coxas das

pernas cor de palha. Abdômen cinza escuro com uma faixa longitudinal

serrilhada, mediana dorsal, formada por pelos claros, chegando até

quase às fiandeiras; ventre cinza amarelado uniforme.

Olhos 2-4-2. Quadrângulo ocular mediano tão largo quanto longo,

ligeiramente mais estreito na frente. Clípeo do tamanho do diâmetro

dos OMA. Segunda fila ocular procurva, uma tangente à margem ante¬

rior dos OMP cortando os OLA pela metade. OMA pouco menores que

OMP, de tamanho igual ao dos OLP. OLA elípticos, menores que os

outros. OLA e OLP em um cômoro comum. Distâncias interoculares:

OMA distanciados entre si e dos OMP por um seu raio. OLA distantes

dos OMP pelo seu menor diâmetro e dos OLP pelo seu maior diâmetro.

Sulco ungueal das quelíceras com 3 dentes na promargem (o médio,

maior) e 4 na retromargem, seguidos de dois dentículos, proximais,

punctiformes. Lábio mais longo que largo, escavado na base, atingindo

a metade da altura das lâminas maxilares. Pernas IV-I-II-III. Pat. -h

172

1 SciELO

EICKSTEDT, V. R. D. von. Redescrição de Ctenus similis Pickard-Cambridge, Ctenua albofaseiatua

Pickard-Cambridge e Ctenua minor Pickard-Cambridge (Araneae* Ctenidae). Mem. Inat. Butantan,

U/i5:ni-n9, 1980/81.

tib. I = pat. + tib. IV. Escópula rala em toda extensão da face ventral

dos tarsos I a IV e metatarsos I e II e na metade apical do metatarso III

(Fig. 1), Artículos do palpo sem escópula lateral anterior. Quetotaxia

dos palpos e das pernas; (Fig. 1). Duas garras tarsais com três a quatro

dentes; tufos subungueais densos, verticais. Epígino mais largo que

longo, ocupando quase todo o epigastro; escleritos laterais próximos ao

epígino, em forma de gancho, situados na metade da altura do epígino

(Fig. 4). Comprimento do corpo: 12 mm.

Macho: desconhecido.

Distribuição geográfica: espécie conhecida apenas da localidade-tipo.

Material examinado: somente o holótipo.

Discussão: Mello-Leitão (1936:13), ao relacionar similis entre as

espécies brasileiras de Ctenus, forneceu referências bibliográficas rela¬

tivas a sinuatipes Pickard-Cambridge, 1897, e não a similis. No catálogo de

Roew^er (1954:655) ocorre o mesmo fato. O engano feito por estes dois

autores refere-se apenas às citações bibliográficas correspondentes às

duas espécies: sinuatipes é espécie válida, da América Central (Costa

Rica), facilmente distinta de similis pela forma da genitália feminina.

Somente dois exemplares de similis são mencionados na literatura:

0 tipo, capturado pelo autor da espécie na floresta de Santarém e um

espécime coletado por Mello Carvalho na confluência dos rios Culuene e

Xingu, Mato Grosso (Mello-Leitão, 1949). Tive oportunidade de exami¬

nar este último exemplar, depositado no Museu Nacional do Rio de

Janeiro (n.° 48450) ; ele não pertence à espécie similis e sim a uma

espécie nova do gênero descrita separadamente (Eickstedt, V.R.D., 1980/

81). Portanto, similis é representada até agora unicamente pelo exem¬

plar-tipo.

Ctenus albofasciatus Pickard-Cambridge

Ctenus albofasciatus Pickard-Cambridge, 1897:55 (L), 77 (Ch),

82 (sp.n.), pl. 3: figs. Id, 4b. Pickard-Cambridge, 1902:411 (Ch), 412

(L). Petrunkevitch, 1911:470 (Cat.) Roewer, 1954:647 (Cat.). Bonnet,

1956:1274 (Cat.).

Material-tipo: Holótipo fêmea, 1896, 12.13.99 BMNH (Londres),

F. O. Pickard-Cambridge col. fev. 1896, floresta de Santarém, Pará,

Brasil.

Fêmea: Colorido geral castanho escuro. Cefalotórax com um losan¬

go claro formado por pubescência cinza dourada que se inicia entre os

olhos laterais posteriores e termina na altura do sulco torácico; em

continuação, uma estreita linha mediana longitudinal de pelos claros indo

^té a base do cefalotórax. Partindo do espaço entre os OMP e os OLP,

uma faixa clara que percorre o clípeo até a borda anterior do cefalotórax.

Dorso do abdômen escuro, com uma faixa de lados sinuosos pardo-

amarelada, longitudinal mediana, que esmaece em direção às fiandeiras;

^■egião basal bem escura dos dois lados (Fig. 5). Ventre denegrido, com

quatro filas de sigilos circundados por pelos claros.

Olhos 2-4-2. Quadrângulo ocular mediano tão largo quanto longo, ligei¬

ramente mais estreito na frente. Clípeo do tamanho do diâmetro dos OMA.

Segunda fila ocular ligeiramente recurva pelas margens anteriores. OMA

pouco menores que os OMP e estes um pouco maiores que os OLP. OLA

173

EICKSTEDT, V. R. D. von. Redescrição de Ctcnua similia, Ctenua albofasciatua e Ctenus minor

(Araneae; Ctenidae). Mem. Inat. Butantan, :171-179, 1980/81.

Fíg. 1 — Ctenua eimilia Pickard-Cambridge — Quetotaxia do palpo e das pernas I-IV e extensão das

escópulas ventraiíj das pernas I-IV. Abreviaturas: d = face dorsal; v = face ventral; fe =

fêmur; pa = patela; ti = tíbia; met = metatarso; ta = tarso.

174

1 SciELO

EICKSTEDT, V. R. D. von. Redescrição de Ctemis aimilis, Ctenua albofasciatus e Ctcnua minor

(Araneae; Ctenidae). Mem. Inat. Butantan, 4-4/-45:171-179, 1980/81.

muito pequenos, elípticos, seu diâmetro maior não atingindo a metade do

diâmetro dos OLP. Distâncias interoculares: OMA afastados entre si e dos

OMP por um seu raio. OMP afastados entre si por um i’aio. OLA distantes

dos OMP pelo seu maior diâmetro e dos OLP por duas vezos seu maior diâ¬

metro. OLA e OLP em cômoro comum. Sulco ungueal das quelíceras com

três dentes na promargem e quatro na retromargem, seguidos de mais um,

punctiforme, proximal. Lábio mais longo que largo, escavado na base,

atingindo a metade da altura das lâminas maxilares. Pernas IV-I-II-III.

Pat. + tib. I = pat. + tib. IV. Escópula rala em toda a extensão da face

ventral dos tarsos I a IV e metatarsos I e II e na metade apical do

metatarso III (Fig. 2). Artículos do palpo sem escópula no lado interno.

Quetotaxia dos palpos e das pernas : (Fig. 2). Duas garras tarsais; um

par de tufos subungueais densos, verticais. Epígino de base ovalada

e com duas projeções anteriores, dirigidas para os lados, afiladas no

ápice; escleritos laterais em forma de gancho, sobrepostos à parte

basal do epígino (Fig. 6).

Comprimento do corpo : 14 mm.

Macho: desconhecido.

Distribuição geográfica: espécie conhecida apenas da localidade-tipo.

Material examinado: o holótipo e um parátipo (fêmea adulta) com

0 mesmo n.° e procedência do holótipo.

Ctenus minor Pickard-Cambridge.

Ctenus minor Pickard-Cambridge, 1897: 55 (L), 77 (Ch), 83 (sp.n.),

pl. 3: fig. 4c. Pickard-Cambridge, 1902: 411 (Ch), 412 (LD Petrunke-

vitch, 1911: 475 (Cat.). Mello-Leitão, 1936: 4 (Ch), 11 (C). Roewer,

1954: 652 (Cat.). Bonnet, 1956: 1285 (Cat).

Material-tipo: Holótipo fêmea, 1896.12.13.100 BMNH (Londres),

F. O. Pickard-Cambridge col. 1896, floresta de Santarém, Pará, Brasil.

Fêmea: Colorido geral marrom amarelado. Cefalotórax com uma

faixa longitudinal mediana de pelos amarelados pouco nítida. Abdômen

pardo, com faixa clara denteada longitudinal mediana e manchas de

pelos amarelados, irregularmente dispostas, nas regiões dorsolateral e

látero-ventral (Fig. 7). Ventre amarelado. Pernas com manchas de pelos

louros.

Olhos 2-4-2. Quadrângulo ocular mediano ligeiramente mais largo

que longo, pouco mais estreito na frente. Clípeo cerca de um diâmetro

do OMA. Segunda fila reta ou ligeiramente recurva pelas margens

anteriores, conforme se olha o exemplar. OMA pouco menores que os

dos OMA. Segunda fila reta ou ligeiramente recurva pelas margens

elípticos. Distâncias interoculares: OMA distantes entre si por um

pouco menos que um seu diâmetro e dos OMP por um seu raio. OLA

distantes dos OMP pelo seu maior diâmetro e dos OLP por um diâmetro

e meio. OMP afastados entre si por quase um diâmetro. Sulco ungueal

das quelíceras com três dentes na promargem (o médio, maior) e quatro

na retromargem. Lábio mais longo que largo, escavado na base, atin¬

gindo a metade da altura das lâminas maxilares. Pernas IV-I-II-III.

Pat. + tib. I = pat. + tib. IV. Escópula rala em toda extensão da face

ventral dos tarsos e metatarsos I e II e na metade distai do metatarso

III (Fig. 3). Artículos do palpo sem escópula lateral anterior. Queto-

176

SciELO

10 11 12 13 14 15 16

EICKSTEDT, V. R. D. von. Redescrição de Ctenua aimilis, Ctenua albofasciatua e Ctenua minor

(Araneae; Ctenidae). Mem. Inat. Butantan, 44/^5:171-179, 1980/81.

1'íff. 3 — Ctenua minor Pickard-Cambridpe — Quetotaxia do palpo e das pernas I-IV e extensão das

escópulas ventrais das pernas I-IV. Abreviaturas: d = face dorsal; v = face ventral; fe =

fêmur; pa =: patcla; ti = tíbia; met metatarso* ta = tarso.

177

2 3 4

5 SciELO ;lo 11 12 13 14 15

EICKSTEDT, V. R. D, von. Redescrição de Ctenua similia, Ctenua albofaaciatua e Ctenua minor

(Araneae; Ctenidae). Mem. Inat. Butantan, ^4/^5:171-179, 1980/81.

1 mm

ep-

I mm

Fig. 4 — Ctenua aimüia Pickard-Cambridge — Sistema copulador do holótipo, vista ventral.

Fige. 5 e 6

Ctenua albofaaciatua Pickard-Cambridge — Fig. 6 — padrão do colorido dorsal; Fig. 6 —

sistema copulador do holótipo, vista ventral.

Figs. 7 e 8 — Ctenua minor Pickard-Cambridge — Fig. 7 — padrão do colorido dorsal; Fig. 8 — sistema

copulador do holótipo, vista ventral.

Abreviaturas: el = esclerito lateral; ep = epígino; rs = receptáculo seminal (por trans¬

parência).

178

SciELO

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EICKSTEDT, V. R. D. von. Redescrição de Ctenus aimilis, Ctenus 'albofaaciatus e Ctenus minor

(Araneae; Ctenidae). Mem. Inat. Butantan, 171-179, 1980/81.

taxia dos palpos e pernas: (Fig. 3). Duas garras tarsais; um par de

tufos subungueais densos, verticais. Epígino pentagonal, com lobos

laterais ovalados na parte anterior; escleritos laterais semelhantes a

gancho, sobrepostos à borda anterior do epígino (Fig. 8).

Comprimento do corpo : 11 mm.

Macho: desconhecido.

DisMbuição geográfica: espécie conhecida apenas da localidade-tipo.

Material examinado: o holótipo.

AGRADECIMENTOS

Ao Dr. F. R. Wanless (British Museum Natural History) e à Dra.

Anna Timotheo da Costa (Museu Nacional) agradeço o empréstimo do

material que possibilitou a execução deste trabalho.

ABSTRACT; The type-specimens of the amazonean spider

species Ctenus similis Pickard-Cambridge, Ctenus albofasciatus

Pickard-Cambridge, and Ctenus minor Pickard-Cambridge (La-

BIDOGNATHA,- Ctenidae) are redescribed. For each species

the pertinent systematic bibliography and the redescription with

comments and illustrations are given. Up to now the three species

are represented only by the type-specimnes. The spider from the

Culuene River (Xingu) listed by Mello-Leitão (1949) as

Ctenus similis is not co-specific with the holotype; it was separately

dsecribed as a new species (Eickstedt, V.R.D., 1980/81).

KEYWORDS: Spider systematics; Ctenus similis, Ctenus albofas¬

ciatus, Ctenus minor : redescription.

REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

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vol. 2 (2.^ parte), p. 919-1926.

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villasboasi. Mcllo-Leitão (Araneae, Ctenidae). Mem. Inst. Butantan, ü/iS:

161-170, 1980/81.

3. MELLO-LEITÃO, C.F. Contribution à 1’étude des Ctenides du Brésil. Fetschr.

Strand, 1 :1-31, 1936.

4. MELLO-LEITÃO, C.F. Aranhas da foz do Koluene. Boi. Mus. nae. Rio de

Janeiro (Zool.), (92) :1-19, 1949.

5. PETRUNKEVITCH, A. A synonimic index-catalogue of spiders of North,

Central and South America with all adjacent islands, Greenland, Bermudas,

West Indies, Terra dei Fuego, Galapagos, etc. Buli. Amer. Mus. Nat. Hist.,

29:1-791, 1911.

6. PICKARD-CAMBRIDGE, F.O. On cteniform spiders from the lower Amazons

and other regions of North and South America. Ann. Mag. Nat. Hist.,

19(6) :52-106, 1897.

7. PICKARD-CAMBRIDGE, F.O. New species of spiders belonging to the genus

Ctenus, with supplementary notes. Ann. Mag. Nat. Hist., 9(7) :401-415,

1902.

8. ROEWER, C. Katalog der Araneae. Bruxelles, Cari S. Bremen, 1954. vol. 2a,

923 p.

179

SciELO

Mcm. Inat. Butantan

U/45:18l‘n0, 1980/81

A PROPÓSITO DA INDICAÇÃO DE UM NEÓTIPO PARA

TITYUS SERRULATUS LUTZ E MELLO, 1922

(SCORPIONES; BUTHIDAE)

Wilson R. LOURENÇO *

Vera Regina D. von EICKSTEDT **

RESUMO: É proposto um neótipo para Tityus serrulatus Lutz e

Mello, 1922, espécie de escorpião descrita de Belo Horizonte, Minas

Gerais. As tentativas feitas para localização do tipo, originalmente

depositado no Instituto Ezequiel Dias (Belo Horizonte), mostraram-se

infrutíferas, levando-nos a crer que o mesmo se encontre definitiva¬

mente perdido. O neótipo proposto neste artigo, depositado na coleção

aracnoíógica do Instituto Butantan, obedece a todos os critérios exi¬

gidos pelo Artigo 75 do Código Internacional de Nomenclatura

Zoológica.

PALAVRAS-CHAVE: Tityus serrulatus Lutz e Mello, 1922;

Buthidae; neótipo.

INTRODUÇÃO

Lutz e Mello (1922) publicaram a descrição de cinco espécies novas

de escorpião pertencentes à família Buthidae, entre as quais Tityus serru¬

latus, indicando Belo Horizonte como localidade típica dessa espécie.

Após a descrição original, sucederam-se algumas redescrições: Mello-

-Campos (1924), Vellard (1932), Pessoa (1935) e Mello-Leitão (1945).

Com exceção de Pessoa (1935), que analisou a variabilidade de alguns

caracteres, nenhum dos outros autores apresentou qualquer acréscimo

substancial ao conhecimento de Tityus serriãatus; além disso, em nenhum

dos casos é citado o estudo do tipo.

No trabalho original, Lutz e Mello (1922) indicaram “Loc: Bello

Horizonte. Collecção da filial naquella capital.”, ou seja, o tipo teria sido

depositado no Instituto Ezequiel Dias, filial do Instituto Oswaldo Cruz,

“Attaché" do Laboratoire de Zoolos:ie (Arthropodes), Muséum National d'Histoire Naturelle, Paris.

Endereço para correspondência: 61, Rua de Buffon, 75231, Paris, França.

Pesquisador científico da Seção de Artrópodes Peçonhentos do Instituto Butantan. Endereço para

correspondência: CEP 05504, C. Postal 65, São Paulo, Brasil.

181

SciELO

10 11 12 13 14 15

LOURENÇO, W. R. & EICKSTEDT, V. R. D. von. A propósito na indicação de um neótipo para Tityns

aerrulatus Lutz e Mello, 1922 (Scorpiones; Buthidae). Mem. Inat. Btitantan í^/^5:181-190, 1980/81.

do Rio de Janeiro. Todas as tentativas feitas por um de nós (WRL)

desde 1975 para localizar o referido tipo não tiveram sucesso, levando-nos

a concluir que ele deva se encontrar definitivamente perdido. Visto ser

Tityus serrulatus a espécie de maior importância médica no Brasil e possi¬

velmente em toda a América do Sul, pareceu-nos oportuna a criação de

um neótipo, a ser depositado na coleção aracnológica do Instituto Butantan

(São Paulo), onde é fabricado o soro antiveneno correspondente a esta

espécie.

MATERIAL E MÉTODOS

São estudados comparativamente cinqüenta e um exemplares topóti-

pos de Tityus serrulatus e um deles é selecionado como neótipo fêmea, de

acordo com todos os critérios exigidos pelo Artigo 75 do Código Interna¬

cional de Nomenclatura Zoológica. A escolha de um macho como exem¬

plar-tipo é sempre preferível, entretanto, Tityus serrulatus é espécie

partenogenética, apresentando unicamente fêmeas em suas populações

(Matthiesen, 1962; San Martin e Gambardella, 1966).

A análise estatística de alguns dos caracteres morfológicos estudados

é feita segundo Lamotte (1971).

Material estudado: BRASIL; Minas Gerais, Belo Horizonte, H. C.

Cunha col. jul. 1980, 45 fêmeas (IB-SC 1158 a 1202) ; C. Diniz col.

maio 1980, 6 fêmeas (IB-SC 1203 a 1208).

Tityus serrulatus Lutz e Mello, 1922.

Tityus serrulatus Lutz e Mello, 1922, Folha médica, 5(4) :25.

Tityus serrulatus: Mello-Campos, 1924, ilfem. Inst. Osw. Cruz, 17

(2) :267.

Tityus stigmurus: Vellard, 1932, Mém. Soc. zool. France, 29(6) :553.

Tityus serrulatus: Pessoa, 1935, An. paul. Med. Cir., ^5 (5):430.

Tityus serrulatus vellardi Mello-Leitão, 1939, Physis, 17:69.

Tityus sem-ulatus: Mello-Leitão, 1945, Arq. Mus. nac.,

Tityus serrulatus vellardi: Mello-Leitão, 1945, Arq. Mus. nac., UO :396.

Neótipo fêmea, H. C. Cunha col. jul. 1980, Belo Horizonte, Minas

Gerais, Brasil, IB-SC 1165 (Figs. 1 e 2).

Colorido: colorido geral amarelado. Placa prossomial amarela com

manchas castanho escuras formando desenhos regulares; na região ante¬

rior elas se unem delimitando um triângulo com a base dirigida anterior¬

mente. Cômoro ocular quase negro. Tergitos I a VI com manchas con¬

fluentes de colorido castanho escuro, mais acentuadas na borda posterior

dos tergitos; tergito VII com uma mancha central em forma de triângulo

estreito de base voltada para a região anterior. Todos os segmentos do

metassoma amarelos, os dois últimos ligeiramente mais escuros. Face

dorsal de todos os segmentos sem manchas. Face ventral do quinto seg-

182

SciELO

10 11 12 13 14 15 16

LOURENÇO, W. R. & EICKSTEDT, V. R. D. von. A propósito na indicação de um neótipo para Tityus

serrulatua Lutz e Mello, 1922 (Scorpiones; Buthidae). Mem. Inst. Butantan 44/-45:181-190, 1980/81.

1 e 2 — Tityus serrulatus, neótipo. Fig. 1 — vista dorsal; Fig. 2 — vista ventral.

183

LOURENÇO, W. R. & EICKSTEDT, V. R. D. von. A propósito na indicação de um neótipo para Tityus

serrulatus Lutz e Mello, 1922 (Scorpiones; Buthidae). Mem. Inat. Butantan 4^/^5:181-190, 1980/81.

Hí'

--d.

L-!-,

4 -"

-d,

-em

-esb

-eb

Figs. S

8 — Tricobotriotaxía do neótipo de Tityus scrrulatua. Fík- 3 — pinça, vista externa. Fík. 4

—• pinça, vista ventrai; Fík. 5 — tíbia, vista donsal; Fík. 3 — tíbia, vista externa:

Fík. 7 — fêmur, vista dorsal; Fík. 8 — detaiho do fêmur, vista interna.

Fík. 9 — SeKmentos caudais III a V e vesícuia do neótipo de Tityus scrrulatua mostrando os Krânulos

espiniformes dos seKmentos III e IV.

AKuilhãü em detalhe.

SciELO

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LOURENÇO, W, R. & EICKSTEDT, V. R. D. von. A propósito na indicação de um neótipo para Tityus

serrulatus Lutz e Mello, 1922 (Scorpiones; Buthidae). Mcm. Inttt. liutantan 4^/^5:181-190, 1980/81.

mento caudal com uma mancha de colorido castanho denegrido na metade

posterior, estendendo-se sobre a crista axial na metade anterior; segmen¬

tos II a IV com mancha semelhante que se prolonga sobre as cristas

ventrais, sendo bem mais acentuada nos segmentos III e IV; região

posterior do segmento IV com algumas manchas também sobre as cristas

látero-ventrais. Vesícula da mesma cor que o quinto segmento caudal.

Aguilhão com base amarelada e extremidade avermelhada, ligeiramente

denegrida. Esternitos amarelo-ocre; cristas do esternito VII com dois

esboços de manchas castanhas. Pentes, opérculo genital, esterno, ancas e

lobos maxilares de colorido amarelo-ocre. Pernas amarelo-palha uniforme

com nuances avermelhadas sobre as cristas. Palpos de colorido amarelo

mais escuro que o das pernas, com alguns esboços de manchas pardacentas

sobre as cristas, principalmente da tíbia e da pinça; dedos bem mais

escuros, castanho denegridos. Quelíceras amarelo-ocre; dedos castanho-

-pardamentos com dentes denegridos.

Morfologia : Prossoma — borda frontal da placa prossomial com enta¬

lhe pouco profundo. Cômoro ocular anterior em relação ao centro da placa

prossomial. Olhos medianos separados por pouco mais que um diâmetro

ocular; três olhos lateriais. Cristas do prossoma (Vachon, 1952:50):

cristas oculares medianas, que formam o sulco interocular, bem acentua¬

das; cristas oculares laterais partindo da borda dorsal dos olhos laterais

e continuando em direção aos olhos medianos por uma distância menor

que a metade do intervalo entre os olhos laterais e olhos medianos; cristas

medianas posteriores delimitando aproximadamente um quadrado na

região póstero-mediana da placa prossomial. Graduação geral da placa

prossomial entre média a grosseira. Mesossoma: tergitos com granulação

semelhante à da placa prossomial, porém mais intensa na região posterior

de cada tergito. Crista axial presente e bem acentuada em todos os

tergitos. Tergito VII com granulação um pouco mais fina que a dos

demais e apresentando cinco cristas: uma axial, reduzida à metade, duas

medianas praticamente completas e pouco sinuosas e duas laterais, incom¬

pletas e ligeiramente curvas (as medianas e as laterais quase se encon¬

tram na região látero-anterior do tergito). Metassoma: segmentos I e II

com dez cristas, III e IV com oito cristas e segmento V com cinco cristas.

Cristas intermediárias do segmento II incompletas na região anterior;

cristas dorsais dos segmentos III e IV com grânulos mais desenvolvidos,

espiniformes, na região posterior, sendo dois grânulos de tamanho médio

nas cristas dorsais do segmento III e três grandes nas cristas dorsais do

quarto segmento. Tegumento entre as cristas com granulação média, a do

quinto segmento caudal menos acentuada. Télson: vesícula desprovida de

cristas laterais e com crista mediana ventral pouco acentuada; espinho

ventral do aguilhão bem desenvolvido, com dois grânulos dorsais. Pentes

com 22-23 dentes; lâmina intermediária basilar não dilatada. Pedipalpos :

fêmur com cinco cristas completas; tíbia com sete cristas completas, a

dorsal interna apresentando grânulos espiniformes dos quais o proximal

é 0 mais desenvolvido; pinça com nove cristas, quatro estendendo-se ao

longo do dedo fixo; gume do dedo móvel com 16-16 séries de grânulos;

ausência de lobo basilar. Quelíceras: dedos fixo e móvel com a dentição

normal dos Buthidae (Vachon, 1963). Tricobotriotaxia: as figuras 3 a 8

representam o número e a disposição das tricobótrias dos pedipalpos.

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eerrulatua Lutz e Mello, 1922 (Scorpiones; Buthidae). Mem. Inst, Butantan /^í/45:181-190, 1980/81.

Devem ser assinalados os seguintes aspectos; a) presença de cinco trico-

bótrias na base do fêmur, face interna, devido à migração para esta face da

tricobótria dorsal d 2 (Fig. 8) ; b) tricobótrias dt e dh distais em relação

a et (Fig. 3) ; c) tricobótrias et e em da face externa da tibia situadas do

mesmo lado em relação à crista externa (Fig. 6) ; d) tricobótrias dj, da e

d 4 da tíbia, face dorsal, situadas do mesmo lado em relação à crista

mediana dorsal (Fig. 5) ; e) as duas tricobótrias externas do fêmur, ei e

Oi são distais em relação a ds (Fig. 7) ; f) tricobótrias esh (dedo fixo),

Esh e Ehs (mão) e d-, (fêmur) pequenas, com cerda curta.

TABELA 1

Dimensões corporais do neótipo de Tityus serrulatus (em mm)

Comprimento total

67,0

Prcssoma — comprimento

6,9

Prossoma — largura anterior

4,7

Prossoma — largura posterior

7,6

Mesossoma — comprimento total

22,0

Metassoma — comprimento total

38,1

Segmento caudal I — comprimento

4,9

Segmento caudal I — largura

4,1

Segmento caudal II — comprimento

5,7

Segmento caudal II — largura

4,1

Segmento caudal III — comprimento

6,1

Segmento caudal III — largura

4,1

Segmento caudal IV — comprimento

6,6

Segmento caudal IV — largura

4,2

Segmento caudal V — comprimento

7,7

Segmento caudal V — largura

3,9

Segmento caudal V — altura

3,2

Télson — comprimento

7,1

Vesícula — comprimento

4,2

Vesícula — largura

2,6

Vesícula — altura

2,4

Aguilhão — comprimento

2,9

Pedipalpo — comprimento total

27,0

Fêmur — comprimento

6,9

Fêmur — largura

2,0

Tíbia — comprimento

7,4

Tíbia — largura

2,6

Pinça — comprimento

12,7

Pinça — largura

2,7

Pinça — altura

2,4

Dedo móvel — comprimento

8,4

186

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LOURENÇO, W. R. & EICKSTEDT. V. R. D. von. A propósito na indicação de um neotipo para Tityus

serrulatus Lutz e Mello, 1922 (Scorpiones; liuthidae). Mem. Inat. Butanían 44/45:181-190, 1980/81.

ANÁLISE DA VARIABILIDADE DE ALGUNS CARACTERES

MORFOLÓGICOS DE TITYUS SERRULATUS

A análise dos 51 exemplares topótipos estudados mostrou os seguintes

resultados:

1 . Número de dentes dos pentes (Tabelas 2 e 3).

TABELA 2

Variação do número de dentes dos pentes

n.° dentes

19 dp

20 dp

21 dp

22 dp

23 dp

24 dp

1,0

2,0

19,0

53,0

24,0

1,0

0,03

5,40

0,20

7,00

11,80

28,10

42,80

63,10

16,00

33,60

0,03

5,40

Os dados das Tabelas 2 e 3 mostram sobreposição entre os intervalos

de confiança obtidos para as diferentes porcentagens de freqüência, impe¬

dindo a determinação de um número-tipo e de uma fórmula global típica

para os dentes pectíneos. Embora esses valores típicos existam, sua

caracterização só será possível através da análise de uma amostra bem

superior à disponível.

2. Número de sénes de grânulos do gume do dedo móvel dos palpos:

n.° de séries n.“ de exemplares

13- 16 1

14- 16 1

15- 16 3

16- 15 3

16-16 41

16- 17 1

17- 16 1

3. Número de grânulos espiniformes sobre as cristas dorsais dos seg¬

mentos caudais III e IV:

segmento III

segmento IV

grânulos

exemplares

grânulos

exemplares

1-1

1-2

2-2

2-3

2-4

3-3

3-4

3-5

4-4

4-5

187

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TABELA 3 — Variação da fórmula global do número de dentes dos pentes

LOURENÇO, W. R. & EICKSTEDT, V. R, D. von. A propósito na indicação de um neótipo para Tityus

aerrulatua Lutz e Mello, 1922 (Scorpiones; Buthidae). Mem. Inst. Butantan ^4/^5:181-190, 1980/81.

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1—1

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1 SciELO

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serrulatua Lutz e Mello, 1922 (Scorpionea; Buthidae). Mem. Inst. Butantan :181-190, 1980/81.

4. Número de cristas do segmento caudal III:

cristas exemplares

8 48

10 3

5. Número de olhos laterais:

olhos exemplares

0-3 1

2- 3 1

3- 3 49

DISCUSSÃO

Para o caráter número de dentes dos pentes foi encontrada uma

variabilidade de 19 a 24 dentes, sendo que o valor mais constante foi

22 para o número de dentes e 22-22 para a fórmula global. Isto coincide

com o que foi citado por Lutz e Mello (1922) na descrição original e por

Pessoa (1935), que encontrou 22 dentes pectíneos em 7 dos 23 exemplares

por ele estudados.

Quanto ao número de séries de grânulos do gume do dedo móvel dos

palpos o valor mais encontrado foi 16-16, obtido em 41 dos 51 exemplares

analisados. Lutz e Mello (1922) citam 14 séries e Pessoa (1935), 15 séries

como número mais constante para esse caráter. A divergência dos resul¬

tados deve ser decorrente da diferença das amostragens.

Com referência ao número de grânulos espiniformes dos segmentos

caudais III e IV os valores mais constantes obtidos foram 2-2 para o

segmento III e 3-3 para o segmento IV. Esses resultados são concordantes

com os de Pessoa (1935), que em seu estudo estatístico encontrou os

valores 2-2 e 3-3 para os segmentos III e IV em 21 dos 40 exemplares por

ele analisados.

Em populações de Tityus freqüentemente ocorre variação do número

de cristas do segmento caudal III. A variação do número de olhos laterais

é mais rara e decorrente de fenômenos teratológicos. Esses dois fatos já

haviam sido anteriormente constatados por um de nós (WRL) para

Tityus trivittatus fasciolatus (Lourenço, 1978) e são agora ratificados.

AGRADECIMENTOS

Agradecemos a M. Gaillard e J. Rebière pela realização dos desenhos

e das fotos.

RESUMÉ: Un néotype est proposé pour Tityus serrulatiis Lutz

et Mello, 1922, scorpion décrit de Belo Horizonte dans TEtat de

Minas Gerais. Nos tentatives pour retrouver le type, à Torigine

déposc à rinstitut Ezcquiel Dias à Belo Horizonte, se sont averées

inutiles, ce qui nous amène à croire qu’il est définitivement perdu.

Le néotype proposé dans la presente note sera déposé dans la

collection de Tlnstitut Butantan à São Paulo; il présent tous les

critères requis par 1’article 75 du Code International de Nomen-

clature Zoologique.

UNITERMS: Tityus serrulatus Lutz et Mello, 1922; Buthidae; néotype.

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serrulatua Lutz e Mello, 1922 (Scorpiones; Butbidae). Mem. Inat. Butantan ^4/45:181-190, 1980/81.

REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

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Masson et Cie. Edit., 1971. 2è edit., 144 p.

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Tityus trivittatus Kraepelin, 1898 et, en particulier, de la sous-espèce

Tityns trivittatus fasciolatus Pessoa, 1935. (Buthidae). Tese de douto¬

ramento, Universidade de Paris VI, 1978. 128 p., 55 pl.

3. LUTZ, A. & MELLO, O. Cinco novos escorpiões dos gêneros Tityus e Rhopa-

lurus. Folha méd., 5(4):25-26, 1922.

4. MATTHIESEN, F.A. Parthenogenesis in Scorpions. Evolution, 16(2) :

255-256, 1962.

5. MELLO-CAMPOS, O. Os escorpiões brasileiros. Mem. Inst. Osw. Cruz,

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7. MELLO-JLEITÃO,' C. Escorpiões sul-americanos. Arq. Mus. nac. (Rio de

Janeiro), 40:1-468, 1945.

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9. SAN MARTIN, P.R. & GAMBARDELLA, L.A. Nueva comprobación de Ia

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10. VACHON, M. Etudes sur les Scorpions. Inst. Pasteur Algérie : 1-482, 1952.

11. VACHON, M. De 1’utilité, en systématique, d’une nomenclature des dents des

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12. VELLARD, J. Scorpions. In: Mission scientifique au Goyaz et au Rio Ara-

guaya. Mém. Soc. zool. France, ;2.9 (6) :539-556, 1932.

190

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Mem. Inat. Butantan

4^A5:191-211, 1980/81

PRODUTOS NATURAIS BIOLOGICAMENTE ATIVOS DE

ANIMAIS MARINHOS. COMUNICAÇÃO QUÍMICA E

ASPECTOS FARMACOLÓGICOS

José Carlos de FREITAS *

RESUMO: O autor faz uma revisão sobre biotoxinas de moluscos

gastrópodes e equinodermos, enfatizando novas estruturas de com¬

postos orgânicos isolados destes animais e ações farmacológicas.

A importância das biotoxinas nas comunidades foi ressaltada, bem

como as espécids investigadas que também ocorrem no litoral

brasileiro.

PALAVRAS-CHAVE: Biotoxinas marinhas (*), Moluscos gastró¬

podes (*), Equinodermos (*). Aspectos farmacológicos, Ecologia

química, Defesa química.

INTRODUÇÃO

Geralmente os invertebrados pequenos e de corpo mole, como espon¬

jas e tunicados de regiões coralígenas, apresentam hábitos crípticos e,

quando eventualmente expostos, servem de alimento para peixes preda¬

dores. Certas espécies, entretanto, de esponjas, holotúrias e moluscos

possuem biotoxinas que propiciam defesa química, retardando ou impe¬

dindo a predação, podendo, assim, tais espécies viver expostas a esses

peixes. A competição entre predadores, bem como a presença de bioto¬

xinas nas presas operando como mecanismos de defesa, criam pressões

seletivas que conduzem as espécies predadoras, em muitos casos, a

explorar novas fontes de energia e a adquirir hábitos alimentares mais

especializados (BAKUS, 1969, 1971; GREEN, 1977). De acordo

com BAKUS (1981), 73% de todos os invertebrados (4 filos

e 42 espécies examinadas), que vivem expostos na área de estudo no

Great Barrier Reef, na Austrália, foram tóxicos para peixes. Dentre

os invertebrados da criptofauna, apenas 25% revelaram-se tóxicos para

os peixes.

Os produtos bioativos de um organismo podem provir de fontes

exógenas, ou se originar endogenamente à custa de suas próprias vias

• Instituto de Biociências da USP & Centro de Biologia Marinha da USP.

191

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FKEITAS. J. C. Produtos naturais biologicamente ativos de animais marinhos. Comunicação química e

aspectos farmacológicos. Mem. Inst. Butantan, 1980/81.

metabólicas. Na defesa química, estes produtos podem agir de várias

maneiras: provocar irritação das membranas quimiorreceptoras de

órgãos sensoriais dos predadores (odores crípticos) ; conferir à presa

um sabor desagradável; afastar predadores, quando liberados na água

ou, ainda, podem ser injetados através de estruturas inoculadoras. Assim,

sob o aspecto ecológico, as biotoxinas são agentes que diminuem o

fluxo energético nas redes tróficas dos ecossistemas.

Os animais que serão abordados no presente artigo, pertencem aos

seguintes grupos: moluscos gastrópodes e equinodermes.

MOLUSCOS GASTRÓPODES

WHITTAKER (1960) relacionou as seguintes famílias de moluscos

gastrópodes que estavam sendo pesquisadas com referência à presença

de compostos bioativos: Muricidae, Thaididae, Buccinidae, Turbinelidae,

Littorinidae, Cerithiidae e Turritellidae. Nas quatro últimas famílias,

não se demonstrou a ocorrência de colinésteres, entretanto, a urocanil-

colina (I) (WHITTAKER, 1960) foi encontrada nas glândulas hipo-

branquiais dos seguintes muricídeos e taídideos: Murex trunculus; M.

brandaris; M. fulvescens, Urosalpinx cinereus e Thais lapülus; a sene-

cioilcolina (II) (ERSPAMER e BENNATI, 1953) foi registrada em

Thais floridana e a acrililcolina (III) (WHITTAKER, 1960) no buc-

cinídeo, Buccinum undatum.

Os gastrópodes das famílias Muricidae e Thaididae perfuram estru¬

turas calcárias, carapaça de bivalves e cracas, para atingirem as partes

moles do corpo de suas presas. A secreção de Murex é inicialmente

incolor ou amarelo-pálido, contendo, além disso, um cromogênio fotolábil,

que se torna violeta brilhante quando exposto à luz solar. Esse cromo¬

gênio é produzido por células da região mediana da glâdula hipobran-

quial, a qual também secreta muco e colinésteres. A secreção tem um

odor desagi'adável devido ao seu conteúdo em mercaptanas, provavel¬

mente liberadas no decurso da produção do cromogênio (GARDINER,

1972). Segundo este autor, as substâncias complexas secretadas pela

glândula hipobranquial possuem ação relaxante, quando atingem o inte¬

rior da carapaça de suas presas. Este fato concorda com as observações

de que a murexina (= urocanilcolina) é capaz de paralisar a musculatura

esquelética, tanto de vertebrados como de invertebrados e que o bloqueio

neuromuscular é devido à ação despolarizante na região da placa motora

terminal -(ERSPAMER & GLASSER, 1967; QUILLIAM, 1957, KEYL &

WHITTAKER, 1958).

Entre os Taidídeos, na espécie Thais haemastoma, foi encontrado

um novo colinéster, a dihidromurexina (Imidazole-propionilcolina) (IV)

(ROSEGHINI, 1971). Mais tarde, ROSEGHINI & FICHMANN (1973)

trabalhando com Thais haemastoma, da costa brasileira, e Thais haemas¬

toma floridana, das costa do Lacio, Itália, encontraram, predominante¬

mente, di-hidromurexina e senecioilcolina, além de pequena quantidade

de urocanilcolina, que, ocasionalmente, pode estar ausente.

192

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FREITAS, J. C. Produtos naturais biologicamente ativos de animais marinhos. Comunicação quimica e

aspectos farmacológicos. Mem. Inst. Butantan, 4^/^5:191-211, 1980/81.

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FREITAS, J. C. Produtos naturais biologicamente ativos de animais marinhos. Comunicação química e

aspectos farmacológicos. Mcm. Inst. Butantan, 4^/45:191-211, 1980/81.

As reações de fuga do molusco Melagraphia aethiops na presença

do taidídeo Haustrum haustorum são devidos à urocanilcolina, que se

origina na glândula hipobranquial do predador (LAURENSON, 1970).

Neste caso, a substância comporta-se como um cairomônio, conferindo

vantagem para a presa.

A glândula hipobranquial não possui órgão inoculador e seus pro¬

dutos são lançados na água circundante. Como os animais portadores

desta glândula são carnívoros predadores, capazes de perfurar e abrir

carapaças de bivalves e cracas, GUNTER (1968) suspeita que as presas

sejam envenenadas pela injeção de um fluido proveniente da glândula

salivar. ENDEAN (1972) encontrou tetramina (V) nas glândulas sali¬

vares de algumas espécies de Buccinidae e Cymatiidae. HUANG e MIR

(1972), trabalhando com glândulas salivares de Thais haemastoma, regis¬

traram uma substância tóxica para camundongos (LD 50 = 43 mg/Kg),

a qual tinha uma ação depressora no sistema nervoso central destes

animais, uma forte ação hipotensora em gatos e era capaz de induzir

intensa contração do íleo de cobaia e duodeno de coelho, não sendo

antagonizada pela atropina ou hexametônio. Entretanto, desconhecem-se

ainda as ações dessa substância sobre as presas destes moluscos car¬

nívoros.

Dentre as presas dos moluscos gastrópodes destacam-se os equi-

noides, sendo que alguns grandes predadores pertencem ao gênero

Cassis (SCHROEDES, 1962). CORNMAN (1963) demonstrou que

materiais tóxicos da saliva de Cassis tuherosa são capazes de imobilizar

os órgãos superficiais do ouriço Diadema antillarum, diminuindo, por

exemplo, a mobilidade e a eficiência de seus espinhos; o princípio ativo

é produzido em pares de grandes glândulas salivares, mas a natureza

química do princípio ativo é ainda desconhecida. A espécie Plialium

granulatum, da mesma família (Cassidae), do litoral de São Paulo, é

capaz de predar ouriços Lytechinus variegatus, Echinometra lucunter e

Arbacia Uxula, segundo observações em aquários. O predador, ao per¬

ceber a presença do ouriço, desloca-se em sua direção, libera um fluido

leitoso que induz resposta de fuga, que todavia, não impede que ele

alcance a presa e a devore. P. granulatum é capaz de atingir os órgãos

internos do ouriço utilizando sua probóscide, que perfura 0 perístoma ou

a carapaça (Fig. 1). As possíveis biotoxinas presentes em P. granulatum

serão objeto de pesquisas futuras.

A família Conidae também possui representantes na costa brasi¬

leira; entretanto, as nossas espécies habitam o sublitoral, distribuindo-se

entre os 25 m e 165 m e têm sido coletadas somente por di’agagens (RIOS,

1975). Quase tudo que se conhece sobre o comportamento predatório

desta família de gastrópodes peçonhentos provém de estudo de espécies

dos recifes de corais da região Indo-Pacífica, onde são abundantes.

(KÕHN et al, 1960). KõHN (1959) assinalou que os conídeos são pre¬

dadores de poliquetos, moluscos ou peixes e que a peçonha de algumas

espécies piscívoras ocasionalmente pode atingir o homem. O aparelho

glandular consiste de um bulbo muscular, 0 qual armazena a peçonha

secretada pelo longo duto peçonhento; a estrutura inoculadora consiste

de um saco radular, contendo dentes em arpão, sendo que chegam atingir

um comprimento de até 10,8mm, podendo variar na forma e no tamanho.

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FREITAS. J. C. Produtos naturais biologicamente ativos de animais marinhos. Comunicação química e

aspectos farmacológicos. Mem. Inst. Dutantan, 4^/45:191-211, 1980/81.

Fig. 1 — Carapaça de Lytechimia variegatus perfurada por Phalium granulatum. Escala = 1 cm.

dependendo da espécie. A contração da espessa musculatura do bulbo

muscular resulta na expulsão da peçonha através do lúmen do duto

peçonhento em direção à faringe. Daí passa para uma abertura na

base de um dente radular oco, enchendo-o. Esse dente é deslocado para

a pré-faringe no momento do ataque à presa. Uma abertura próxima

à extremidade ponteaguda do dente permite a injeção da peçonha no

corpo da presa, à maneira de uma agulha hipodérmica. Dentes radu-

lares adicionais são produzidos e armazenados no saco radular. A

principal ação da peçonha dá-se no sistema neuromuscular, embora os

autores não excluam a possibilidade de que exista uma ação no sistema

nervoso central; ela contém compostos de amónio quaternário (N-metil-

peridina, gama-butirobetaína, homarina) e derivados indóies (KÕHN

et al., 1960).

Um outro gastrópode, Babylonia japonica, é portador da suruga-

toxina (VI). A biotoxina recebeu este nome por ter ocorrido o primeiro

registro de intoxicação humana na baía de Suruga (Japão). O isola¬

mento e a determinação estrutural da substância devem-se a Kosuge

et al (1972) ; trata-se de uma molécula singular por reunir as estruturas

de um indol, uma pteridina e um mioinositol (HABERMEHL, 1976).

Farmacologicamente, é dotada de uma potente ação bloqueadora gan¬

glionar, cerca de 12 vezes maior que a do cloreto de tetraetilamonio

(FUHRMAN, 1980).

Um interessante aspecto da comunicação química entre algas ver¬

melhas incrustantes e larvas do molusco “abalone” (Haliotis nifescens)

foi estudado por MORSE et al. (1979). As larvas livre-natantes exibem

um comportamento de ocupação do substrato em resposta à presença

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FREITAS, J. C. Produtos naturais biologicamente ativos de animais marinhos. Comunicação química e

aspectos farmacológicos. Mem. Inat. Butantan, ííA5:191-211, 1980/81.

de algas rodofíceas incrustantes. Os autores concluíram que o ácido

aminobutírico (GABA) (VII), um neurotransmissor encontrado em

muitos animais, é um potente indutor de recrutamento e metamorfose

das larvas do molusco. GABA é encontrado em altas concentrações nos

extratos das algas vermelhas de recifes de corais juntamente com o

pigmento ficoeritrobilina (composto tetrapirrólico linear) (VIII) e seu

derivado protéico ficoeritrina. Estes pigmentos contêm nos anéis,

imino-cíclicos análogos do GABA, e são também potentes indutores de

recrutamento. L-glutamato (IX), mesmo em altas concentrações foi

fracamente ativo no que se refere a esse recrutamento das larvas do

H. 1'ufescens.

CHr

NH,

3zn:

CH,

CH—COOH

NHo

3ZDI

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FREITAS, J. C. Produtos naturais biologicamente ativos de animais marinhos. Comunicação química e

aspectos farmacológicos. Mem. Inst. Butantan, :191-211, 1980/81.

No grupo dos gustrópodes opistobrânquios encontram-se glândulas

epidérmicas ou subepidérmicas, unicelulares ou pluricelulares, que secre-

tam muco abundante ou fluidos ácidos, sendo rejeitados pela maioria

dos peixes (THOMPSON, 1960). Nos opistobrânquios nudibrânquios

sacoglossos (doridáceos e eolidáceos), as glândulas defensivas estão

situadas nas papilas dorsais que podem sofrer autotomia. Em espécies,

como por exemplo, Discodoris sp., muitas glândulas defensivas estão

situadas na borda do manto e podem liberar fragmentos por autotomia.

Estes animais são em geral aposemáticos, sendo as cores crípticas para

alguns substratos (ROS, 1976).

Eolidáceos e alguns dendronotáceos nutrem-se de cnidários, acumu¬

lando os nematocistos de suas presas, em cnido-sacos das papilas dorsais

(= ceratas), os quais recebem o nome de cleptocnidas. Parece que o

muco, produzido naquelas glândulas do manto impede o disparo dos

nematocistos, como no caso do peixe-palhaço, Amphipríon sp, e de outros

comensais de anémonas que passam incólumes tocando os tentáculos de

seu hospedeiro (ROS, 1976). Os cnido-sacos libertam os nematocistos

através dos poros das referidas papilas dorsais por pressões mecânicas

das musculatura circular ou por lesão provocada por predadores. No

caso do gastrópode planctônico Janthina sp, que preda o hidrozoário

Velella sp, a secreção púrpura da glândula hipobranquial parece impedir

a descarga dos nematocistos (GARDINER, 1972). Nesse molusco, bem

como no opistobrânquio planctônico Glaucus atlanticus, que foi observado

predando Physalia sp (“caravela”) (Fig. 2), no litoral de São Paulo,

os nematocistos também são transportados para os cnido-sacos e passam

a ser utilizados para defesa, existindo registros de que podem afetar o

homem (THOMPSON & BENNETT, 1969, 1970).

O nudibrânquio doridáceo Phyllidia varicosa secreta um muco odo¬

rífero, tóxico para outros animais marinhos, cuja substância ativa é um

sesquiterpenóide isocianeto (9-isocianopupuqueanano), (X) que também

foi isolado da esponja Hymeniacidon sp, da qual este molusco se alimenta

(BURRESON et al. 1975).

Extratos aquosos totais de nudibrânquios doridáceos {Anisodores

nobilis e Doriopsilla alhopunctata ou das suas glândulas digestivas exci-

sadas, foram letais quando injetados em caranguejos ou em camundongos

(intraperitonialmente) e induziram bradicardia e hipotensão em camun¬

dongos e ratos. Em corações isolados de cobaias mostraram ações ino-

trópicas e cronotrópicas negativas (FUHRMANN et al. 1979).

Ainda, de acordo com FUHRMANN (1980), a substância responsá¬

vel por estas ações farmacológicas, a doridosina (XI), foi isolada tam¬

bém da esponja Tedania sp pelo grupo de Pesquisas Roche, que lhe atri¬

buíram, ainda, propriedades mio-relaxantes, antiinflamatórias e anti-

alérgicas.

Investigações com o opistobrânquio Peltodoris atrorrmculata e sua

presa, a esponja Petrosia ficiformis, resultaram no isolamento de vários

compostos acetilênicos de alto peso molecular (R — C = H) e estes

metabólitos secundários constituem uma boa ferramenta para análise

das interações presa-predador (CIMINO et al. 1980).

197

FKEITAS, J. C. Produtos naturais biologicamente ativos Je animais marinhos. Comunicação Química e

aspectos farmacológicos. Mcm. Inst. Butantan, ^4/^5:191-211, 1980/81.

, -

" -A.

F'ig. 2 — Piiyaalia sp e seu predador, o molusco planctônico CdaucuH atlanticun. ílscala =r 2 cm.

O isoguanosídeo (XII), conhecido na natureza somente de uma

espécie vegetal (“croton bean”), foi recentemente isolado de um animal

marinho, o nudibrânquio do Oceano Pacífico, Diaidiila sandieguensis

(FUHRMANN et al. 1981). Nos mamíferos, esta substância provoca

bradicardia, hipotensão e relaxamento da musculatura lisa. Os autores

não detectaram o isoguanosídeo na esponja, Haliclona perviollis, que é

predada pelo nodibrânquio.

198

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FREITAS, J. C. Produtos naturais bioloificamente ativos de animais marinhos. Comunicação química e

aspectos farmacológicos. Mem. Inst. Butantan, ^4/-45:191-211, 1980/81.

R =

Stylocheilus longicauda, um opistobrânquio que também é encontrado

na costa brasileira, adquire a debromoaplisiatoxina (XIII) das algas

azuis de que se alimenta. A substância possui atividade antileucêmica

em camundongos e dermonecrótica (MYNDERSE et al. 1977).

Um outro opistobrânquio, Bulia striata, dotado de concha relativa¬

mente bem desenvolvida e que pode ser encontrado em praias lodosas no

litoral de São Paulo, libera uma secreção que escurece a água em sua

proximidade (TCHANG-SI, 1931). Não se sabe se esta secreção provoca

mascaramento visual ou funciona como desorientador olfativo (“odor

criptico”).

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FREITAS, J. C. Produtos naturais biolojcicamente ativos de animais marinhos. Comunicação química e

aspectos farmacológicos. Mem. Inst. Dutantan, .44/-í5í191-211, 1980/81.

Fig. 3 — Exemplar jovem de Aplyaia brasiliana — a) tentáculos orais; b) rinóforos: c) parapódios:

d) manto envolvendo a concha; e) glândula digestiva da massa visceral, vista por transpa¬

rência; f) pé.

Em relação aos opistobrânquios da família Aplysiidae, o autor fez

uma revisão da literatura sobre defesa química e realizou estudos a

respeito das glândulas defensivas de Aplysia brasiliana (FREITAS, 1977,

1980), espécie freqüente no litoral brasileiro (Fig. 3). SCHMITZ

(1980) apresentou uma comunicação no III Simpósio Internacional sobre

Produtos Naturais Marinhos, realizado em Bruxelas (Bélgica), enfati¬

zando que Aplysia dactylomela acumula um terpeno bromado originário

das algas de que se alimenta, o dactiline (XIV), que é capaz de poten¬

cializar os efeitos do pentobarbital nos camundongos, por inibição do

metabolismo da droga. Dentre os membros desta família, Aplysia cali-

fornica tem sido a espécie mais estudada do ponto de vista da ecologia

química e do comportamento defensivo (FLURY, 1915; WINKLER, 1961;

WINKLER et al. 1962; WINKLER e TILTON, 1962; WINKLER, 1969;

STALLARD & FAULKNER, 1974), seu sistema nervoso possui neurô¬

nios gigantes que constituem excelentes ferramentas para o estudo analí¬

tico da neurofisiologia a nível celular, pois tais cédulas são identificáveis

nos mapeamentos ganglionares publicados por KANDEL (1976). Assim, ■

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FREITAS, J. C. Produtos naturais biolopricamente ativos de animais marinhos. Comunicação química e

aspectos farmacológicos. Mem. Inst. Butantan, íí/í5:191-211, 1980/81.

0 gânglio abdominal de Aplysia vem sendo considerado como um sistema

experimental para a investigação do papel de peptideos como mensageiros

quimicos no sistema nervoso (BROWNELL & MAYERI, 1979).

Da glândula digestiva e intestino de Notarchus leachi (= Bursatella

leachi), ELSWORTH (1980), isolou a notartoxina, que possui um LD 50

de ordem de 4 ng por camundongo.

EQUINODERMES

Dentre os invertebrados deuterostômios, os equinodermes consti¬

tuem o maior grupo, com aproximadamente 6.000 espécies englobando

cinco classes com vários representantes registrados na literatura como

venenosos ou peçonhentos (RUSSELL, 1965).

A espécie Ophiocomina nigra, representante da classe Ophiuroidea,

possui grande quantidade de glândulas pluricelulares na superfície aboral e

lateral do corpo, que secretam mucopolissacarídeos ácidos, cujo pH se

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FREITAS, J. C. Produtos naturais biologicamente ativos de animais marinhos. Comunicação química o

aspectos farmacológicos. Mem. Inat. Butantan, 4^/.45:191“211, 1980/81.

aproxima de 1,0, servindo como defensivo para peixes e outros animais

marinhos predadores (FONTAINE, 1964).

Na classe Asteroidea, os estudos de HASHIMOTO & YASUMOTO

(1960) com a espécie Asterína pectinifera levaram à descoberta de uma

substância solúvel em água e em álcool diluído e insolúvel em benzeno,

clorofórmio e éter, que apresentou reações positivas para esteróis e

açúcares. Através de análises cromatográficas os autores concluíram

que a substância é uma saponina. Segundo MACKIE et al. (1977), os

equinodermes são os únicos dentre os animais marinhos que apresentam

saponinas esteroídicas tóxicas, conhecidas como asterosaponinas e holo-

turinas, assim denominadas, porque estão presentes em grandes quanti¬

dades em asteróides e holoturóides, respectivamente. As asterosapo¬

ninas são triterpenos característicamente derivados da ciclização de

múltiplas subunidades de isopreno. Incluídos neste grupo de substân¬

cias estão o colesterol e seus derivados, além dos glicosídeos cardio-

tônicos de origem vegetal. As atividades biológicas destes compostos

são as mais diversas e eles são freqüentemente ativos em concentrações

muito baixas. As saponinas representam um derivado terpênico que é

caracterizado pela posse de uma cadeia linear de monossacarídeos na

posição C-3 do esqueleto esteroídico típico (XV). Este pormenor pro¬

picia um alto grau de solubilidade na água, servindo para o bom desem¬

penho de seu papel biológico no ambiente aquático marinho. O estágio

inicial para a identificação de uma saponina se resume na quebra da

ligação glicosídica e análises por métodos convencionais de cromato-

grafia (PATTERSON et al. 1978).

O conteúdo em asterosaponinas dos pés ambulacrários de certas

estrelas do mar (Asterias ritbens e Marthasterias alacialis) induz res¬

postas de fuga em suas presas (MACKIE et al. 1968) e este mesmo

comportamento foi observado no molusco Malagraphia aetiops, na pre¬

sença da estrela do mar predadora Coscinastei^ias calamarís (LAUREN-

SON, 1970). Agentes tensioativos sintéticos são capazes de induzir

respostas de escape em animais que naturalmente respondem às sapo¬

ninas de Marthasterias glacialis, indicando que a atividade surfactante

das saponinas constitui o fator importante na estimulação (MACKIE

et al. 1968; MACKIE, 1970; 1975).

O quimiotactismo responsável pela associação do poliqueto Arctonoé

fragilis com a estrela do mar hospedeira, Evasterias troschelU depende

do conteúdo em asterosaponinas, as quais impedem que a outra espécie

aparentada, Arctonoé pulchra se associe àquela estrela. Este último

poliqueto mori-e quando permanece por mais de 150 minutos exposto às

saponinas (PATTERSON et al, op. cit).

Quanto às atividades farmacológicas, as asterosaponinas causam

bloqueio irreversível da junção neuromuscular em preparações freno-

-diagragmáticas (FRIESS, 1972). As saponinas de Marthasterias gla¬

cialis são ictiotóxicas, além de hemolíticas para mamíferos e peixes

(MACKIE et al. 1975). Extratos crus de Asterias forbesi, Acanthaster

planei e Asterina pectinifera são antivirais no caso de influenza das

aves (vírus B) (RÚGGIERI, 1976) e a atividade citotóxica foi recente¬

mente estudada sobre zigotos do ouriço do mar (ANISIMOV et al. 1980).

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FREITAS, J. C. Produtos naturais biologicamente ativos de animais marinhos. Comunicação química e

aspectos farmacológicos. Mem. Inst. Butanian, 191-211, 1980/81.

Novas asterosaponinas foram isoladas de Astropecten aurantiacus e

M. glacialis por SIMONE et al. (1979) ; Lynckia guildingi, KAPUSTINA

et al. (1978), e de Echinaster sepositus, por SIMONE et al. (1980). De

acordo com RICCIO et al. 1980, esta última espécie possui um arranjo

cem ser característicos do gênero Echinaster, tendo sido também isolado

molecular único, ou seja, glicosídeos cíclicos esteroídicos, os quais pare-

da espécie Echinaster lozonicus.

O sulfato de colesterol está presente a uma concentração de 1,3 mg/g

de tecido seco de Asterias rubens (BJORKMAN et al. 1972). Mais tarde

verificou-se que este composto também estava presente em todas as outras

classes dos equinodermes (GOAD, 1976).

Vários fosfágenos já foram isolados de asteróides (THOAI & RO-

CHE, 1960) e a homarina (ácido N-metil-picolínico), foi detectada em

asteróides, holoturóides e em certos equinóides por HOPPE-SEYLER

(1933).

Focalizando os equinodermes da classe Holothuróidea, FREY (1951)

registrou que os habitantes da costa Pacífica empregavam sucos de pepi-

nos-do-mar para envenenar peixes nas poças de marés dos recifes de corais.

CHANLEY et al. (1959), investigando a espécie Actinopyga agassizi, iso¬

laram a saponina esteroídica, holoturina, que por hidrólise forneceu os

seguintes açúcares: D-glicose, D-xilose, quinovose e 3-0-metil-glicose.

Posteriormente, a holoturina B foi isolada de Holothuria vagabunda e

H. lúbrica por YASUMOTO et al. (1967), que obtiveram por hidrólise

apenas D-quinovose e D-xilose. Os aglicones esteróidicos (XVI) foram

designados holoturinogeninas por CHANLEY et al. (1966). As holoturi-

nas são tóxicas para peixes e alguns invertebrados em doses inferiores a

2ppm, provocam hemólise e têm ação antitumoral (NIGRELLI & JA-

KOWSKA, 1960) ; induzem anormalidades no desenvolvimento de zigotos

do ouriço do mar (NIGRELLI & JAKOWSKA, 1961; RUGGIERI, 1965;

ANISIMOV et al. 1972, 1973, 1974 e 1980). Estes glicosídeos possuem

uma ação citotóxica 2-3 vezes superior à da teasaponina (XVII), extraída

da planta Thea sinensis L., 10 vezes superior à da asterosaponina-L, isolada

da estrela do mar Lynckia guildingi e 20-30 vezes superior à do caulosídeo

extraído da planta Caulophyllum robustum. A atividade citotóxica destas

substâncias está na dependência do número de unidades monossacarídicas

ligadas ao grupo hidroxila do Cs; holoturina A possui quatro unidades

monossacarídicas, enquanto que a holoturina B, somente duas, decrescendo

assim a atividade citotóxica desta última substância (ANISIMOV et al.

1980). Isostichopus badionotus, que ocorre também no litoral de São

Paulo, é portador de outro glicosídeo esteroídico (XVIII) (ELYAKOV

et al. 1980).

Quanto mais tropical for a localidade estudada, maior a probabilidade

dos holoturóides serem tóxicos para peixes; como os pepinos-do-mar se

deslocam vagarosamente, o desenvolvimento de mecanismos de defesa quí¬

mica nos trópicos, é vantajoso, uma vez que seus predadores potenciais

são animais relativamente rápidos (BAKUS, 1974). Dependendo da espé¬

cie, a biotoxina pode estar presente na parede do corpo, parede do corpo

e vísceras, ou na parede do corpo, vísceras e tubos de Cuvier. BAKUS

{op. cit.) atribuiu a Tursch (dados não-publicados) a informação de que

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FREITAS, J. C. Produtos naturais biologicamente ativos de animais marinhos. Comunicação química e

aspectos farmacológicos. Mem. Inst. Butantan, 1980/81.

em alguns casos dois tipos de holoturinas podem ocorrer num mesmo

holoturóide. Os túbulos de Cuvier estão presentes somente em algumas

espécies e se originam de um ramo comum da árvore respiratória. Quando

atacados os holoturóides lançam os túbulos através do ânus, por pressão

hidrostática da cavidade perivisceral, os quais se espalham sobre o

predador.

Recentemente novas holoturinas vêm sendo isoladas e sua atividade

citotóxica está sendo testada em zigotos do ouriço do mar (GARNEAU

et al. 1980). São conhecidos métodos de síntese destas substâncias, a partir

do lanosterol (HABERMEHL et al. 1980).

Os ouriços-do-mar, pertencentes ao grupo dos equinóides regulares,

apresentam uma carapaça globosa de calcita, na qual se articulam espinhos

e pequenas estruturas em forma de pinça denominadas pedicelárias. Os

espinhos das espécies da família Diadematidae podem exceder 30 cm de

comprimento e são dotados de um canal contendo uma biotoxina que pode

ser liberada por ruptura durante a penetração no tegumento de outro

animais, descarregando assim, seu conteúdo na lesão (RUSSEL, 1971).

As espécies, Echinotrix calamaris e E. diadema, possuem substâncias que

aumentam a pressão arterial em gatos e o fracionamento por cromato-

grafia evidenciou a noradrenalina e um fator não dialisável que excita a

musculatura lisa e produz dor intensa (ALENDER, 1967). Em Astheno-

soma variíim, os espinhos menores portam terminalmente glândulas de

veneno, que descarregam seu conteúdo nas lesões por eles provocadas

(RUSSEL, ov. cit.).

As pedicelárias estão distribuídas na superfície corpórea, por entre

os espinhos em equinóides e também nos asteróides. De acordo com von

Uexkull (1899), as pedicelárias globíferas isoladas de Sphaerechinus

gramdaris, quando intactas, ao picarem reflexamente uma preparação de

nervo ciático de rã, impedem a condução de impulsos. O autor demonstrou,

também que o extrato de uma única pedicelária é capaz de provocar a

parada do coração da rã. O simples manuseio de espécies do Indo-Pacífico

(Toxopnetiste.'? sp e Asthenosoma sp) provocam tonturas e paralisias

musculares (SOUTHCOTT, 1970).

LÉVY (1925) investigou os efeitos hemolíticos dos homogeneizados

de pedicelárias de Echinus esctãentus e Paracentrotus lividus, concluindo

que a ação hemolítica é análoga àquela exercida pelas peçonhas de abelhas,

serpentes, lacraias ou escorpiões. Extratos de pedicelárias globíferas de

Toxopneustes püeolus, injetados em camundongos, induzem dificuldades

respiratórias e mudanças na temperatura corpórea (FUJIWARA, 1935).

Entre nós, MENDES et al. (1963) trabalharam com homogeneizados de

pedicelárias globíferas de Lytechinus variegatus e detectaram uma intensa

atividade colinérgica, sendo que o material ativo foi dialisável, parcial¬

mente inativado pelo calor e totalmente por hidrólise alcalina (NaOH

0,25N). Posteriormente ALTIMARI (1969) investigou os extratos de

glândulas situadas no pedúnculo e nas valvas das pedicelárias de L. varie¬

gatus, obtendo uma ação colinérgica mais intensa para as glândulas

valvares, concordando assim com os i-esultados de PÉRÊS (1950) que

trabalhou com extratos aquosos de pedicelárias da espécie Sphaerechinus

granularis.

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FREITAS, J. C. Produtos naturais biologicamente ativos de animais marinhos. Comunicação química e

aspectos farmacológicos. Mem. Inst. Butantan, .4^/^5:191-211, 1980/81.

OKADA et al. (1950) verificou que corações de ostras submetidos à

picadas de pedicelárias globíferas de Toxopneustes pileolus, apresenta¬

ram um aumento inicial do tônus seguido de bloqueio dos batimentos

cardíacos. Trata-se de um interessante registro no campo da farmacologia

comparativa.

CONCLUSÕES

As investigações sobre biotoxinas de organismos marinhos, levam à

elucidação de novas estruturas químicas de metabólitos, tem o interesse

prático na indústria farmacêutica e medicina e vem trazendo grandes

contribuições para o melhor entendimento da estrutura e função dos

organismos nas comunidades. Neste contexto, BAKUS (1981) indicou

novas questões a serem solucionadas em pesquisas futuras, a saber: como

certos invertebrados predadores (gastrópodes, p. ex.) podem consumir

animais altamente tóxicos (esponjas, gorgõnias, holotúrias etc.), sem

sofrerem perturbações aparentes? Qual o possível papel das biotoxinas

no impedimento da fixação de larvas sobre invertebrados sésseis? Qual

o papel destes produtos no controle da estrutura da comunidade? Acredito

que as pistas para a solução destas questões poderão ser encontradas com

0 trabalho conjunto de biólogos e químicos, como publicou BARBIER

(1981)... “direct field interaction between marine chemists and natu-

ralists or biologists who study marine phenomena is an absolute neces-

sity”.

Neste trabalho, tratou-se apenas de equinodermes e moluscos gastró¬

podes e, como visto, dentre as espécies pesquisadas com sucesso, algumas

também ocorrem no litoral brasileiro. Entretanto, naquelas espécias cujas

biotoxinas são obtidas através da dieta, os produtos detectados em outras

populações podem diferir segundo a região geográfica ou até estar ausen¬

tes. A observação dos organismos na natureza, ou mesmo, em condições

de aquário podem levar a novos e interessantes problemas para serem

investigados no campo da ecologia química.

ABSTRACT: The author reviews the pharmacological and ecolo-

gical aspects of organic compounds obtained from marine mollusc

gastropods and echinoderms. A number of new structures of organic

compounds are described with emphasis on those from species

occurring in the Brazilian coast. Their importance are discussed

in terms of community.

KEYWORDS: Marine biotoxins *, Gastropd molluscs *, Echino¬

derms * Farmacological aspects, Chemical ecology, Chemical defense.

AGRADECIMENTOS

Ao Dr. Raymond Zelnik pelo convite para participação no Seminário

de Produtos Naturais em comemoração ao 80.° Aniversário do Instituto

Butantan e pela tarefa de revisão, ao Dr. E.G. Mendes, igualmente pela

revisão crítica.

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FREITAS, J. C. Produtos naturais biolopricamente ativos de animais marinhos. Comunicação química e

aspectos farmacológicos. Mem. Inst. Butantan, 1980/81.

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Mcm. Inst. Butantan

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ACUTE NECROTIC MYELOPATIA AFTER SPIDER RITE

Paulo E. MARCHIORI *

Milberto SCAFF *

José Paulo S. NÓBREGA *

Sérgio ROSENBERG*

José Lamartine de ASSIS *

ABSTRACT: A case of a 56 year-old patient bited by a spider,

species Loxosceles, who developed a local bubbly lesion and after

six days an ascendent necrotizing myelitis which progressed towards

a rapid lethal exit. The authors emphasize the difficulties in esta-

blishing the aetiological diagnosis in the myelitis group of unde-

termined causes and report this present paper trying to relate the

venomous accident and the spinal lesion. The mechanisms that

could be responsible in the genesis of the spinal lesion and the

behaviour of the antigenic complex of the toxine are discussed.

KEYWORDS; Acute myelitis — Spider bite.

INTRODUCTION

Necrotizing myelopathies are characterized by an acute

aggression to the spinal cord with extensive necrosis and minimum

signs of inflammation (Kissel, P., Schmitt, J. 1972). They are the

expression of the action of many aetiopathogenic agents as well as

different physiopathological mechanisms. There is a group of unknown

causes and some are related to previous venomous accidents.

In Arachnidae accidents a neurological onset is rare but, depending

on the species, an immediate onset, a temporary one, or a severe onset

may occur, due to the toxine itself or to secondary systemic aggressions.

(Chok et al., 1979, Dillaha et al, 1964, Gajardo-Tobar, 1966, Jacobs,

1969, Matthews et al, 1973, Pitts, 1962).

The scarcity of necrotizing myelopathy cases associated with

venomous accidents, the difficulties in establishing an clinicopathologic

correlation and the possible aetiopathogenic mechanisms justify this

communication.

Division of Neurology Department of Neuropsychiatry University of São Paulo, School of Medicine,

Brazil — P.O. Box 3461 — São Paulo, S.P. — Brazil.

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MARCmORI. P. E.; SCAFF, M.; NÓBREGA, J. P. S.; ROSENP.ERG, S. & ASSIS, J. L. Acute necrotic

myciopatia after spider bite. Aícm. Inst. JJutanian, ^/í/^5:213“218, 1080/81.

CASE REPORT

A 56 year-old negro man, Brazilian, married, farmer, coming from

a region in the hinterland of the São Paulo State, was examined on the

24th of December, 1979, reporting that three days ago, he had been

bited by a spider on the left buttock. Soon after, he started to feel a

general physical indisposition, shivering fits and local pain from the

bite. Two days before being hospitalized he felt strong headache, nausea

and vomiting. One day before, he felt feeble an his left lower limb ached,

and in the same day the right leg was also involved. The patient was

examined at the Butantan Institute (São Paulo), where by the

characteristics of the lesion, the bite was diagnosed as due to Loxosceles

spider.

Patient in a regular general state, with a mild dyspnea, not icteric

or cyanotic. Blood pressure 90 x 50 mm hg., pulse of 72 beats/min.;

axillar temperature 37.2°C. There was a circular lesion of the skin and

the subcutaneous sue of the left buttock with a diameter of appro-

ximately 2.0cm., with phlogistic signs and a meliceride crust. The

pulmonary examination showed a slight inferior drawing with médium

subcrepitant stertorous breathing in the lower left lung. The cardio¬

vascular apparatus had rythmical noises and normophonetic heart

sounds. The abdômen was normal. The patient lead a delay bladder

catheter. The patient was anxious with contact difficulties due to the

dyspnea. Applying the extension of superior members procedure these

upper limbs fell globally and rapidly reflexes absent in the lower limbs,

present and symetrical in the upper limbs. Hypotonia in the lower

limbs. The superficial abdominal reflexes, the cremasteric and the

plantar reflexes were absent. Superficial anesthesia of the great toes.

Rigidity of the neck. Urinary retention. The cranial nerves were normal.

The hematological examination disclosed a normochromic anemia and

leukocytosis of 15,000/mm®. The other routine laboratory investigations

were normal. The results of the cerebrospinal fluid examination are

shown in table I. Normal descendent iodized oil perimyelographya.

Evolution: The neurological form, first represented by a crural

paraparesis with a sensory syndrome, which pointed to damage at the

lombosacral segment, developed rapidly with a severe flaccid paralysis

of the lower limbs. The motor manifestations assumed an ascending

character, which attained moderately the upper limbs, but the sensory

disorders reached the fourth thoracic levei, and consisted of thermical,

tactile and painful anesthesia and loss of position sense in the great toes.

Death occurred on the third day after the onset of the spinal involvement.

The general pathological aspect showed a bilateral pneumonia and

an acute splenitis. The brain weighed l,400g. The externai examination

of the brain and the verticofrontal cuts showed no abnormality. The

spinal cord was completely softened from the third cervical to the first

sacral segment. The meninges and the blood vessels showed no

modifications.

The only microscopic modifications were in the spinal cord, both in

the white and in the gray matter, being more marked in the thoracic

and high lumbar leveis. At these points, the spinal cord was entirely

necrotized, formed by tissue debris. In these, the only type of cells

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MARCHIORI, P. E.; SCAFF, M.; NÓBREGA, J. P, S.; ROSENBERG, S. & ASSIS. J. L. Acute necrotic

myelopatia aftor spider bite. Aíem. Inst. Butantan, 4-4/^5:213-218, 1980/81.

recognizable were polymorphonuclear leukocytes. Inwardly or amidst

the tissue debris most of the blood vessels showed fibrinoid necrosis.

In the seginents where the necrosis was milder, the spinal parenchyma

was feeble, spongelike, areolated, being impossible to differenciate

between the gray and the white matter. Focal collections of polymor¬

phonuclear leukocytes were scattered randomly on the tissue, mostly on

the perivascular areas. The little nuclei still visible did not allow any

cell Identification. Exceptionally neuronals ghosts were present (figure 1).

A ring like nervous tissue, better structured, was visible in the spinal

periphery, near to the piameter.

Fig. 1 — Microscopic aspect in the spinal cord: necrotized areas and polymorphonuclear leukocytes are

seen: the cells are mostly on the perivascular region. Hematoxylin and eosin stain. A=X

78 B=X 200.

In the upper cervical and the low sacral segments, the appearance

was practically normal, with the presence of some rare euff of limpho-

cyte cells surrounding the intraparenchymatous vessels.

The whole of the spinal cord, the meninges and the nervous roots

had no histological alterations, with the exception of some rare and

discrete lymphatic perivascular sheaths in the meninges.

DISCUSSION

In this case, the concomitance of the venomous accident (loxoscelism)

with the persistance of the bubbly lesion on the left glutes region, which

maintains the toxine in side it, and the development of the, necrotizing

myelitis deserve considerations on a possible correlation between the

1 SciELO

216

MAUCHIORI. P. E.: SCAFF. M.; NóBREGA, J. P. S.; ROSENBERG. S. & ASSIS, J. L. Acute necrotic

myelopatia after spider bite. Mcm. Inst. Buiantan, í4/í5:213-218, 1980/81.

events (Limber et al, 1962). Considering the antigenic aspect, it is

known that the venom of certain spiders can lead to immediate and late

immune reactions, consuming the complement Cs (Futrell et al, 1978,

Majesk et al, 1976, Smith et al, 1970). The severeness of the systemic

lesions depends on the period of inoculation and on the resistance of

the host (Gajardo-Tobar, 1966). The pathological aspect of this case

does not allow us to assert the relation between the venomous lesion in

the gluteal region and the myelitis, but this possibility cannot be rejected

because the toxine diffusion of the inoculate in the spinal cord can be

biphasic and can occur through the lymphatic vessels, foreign arterial

adventitia and veins, and may ascend by the Batten plexus, and spinal.

RESUMO: Os autores apresentam caso de paciente de 5G anos

de idade picado por aranha, Loxosceles, desenvolveu lesão bolhosa no

local. Após seis dias houve aparecimento de mielite nocrosante ascen¬

dente que evoluiu rapidamente para êxito letal. São enfatizadas as

dificuldades para se estabelecer o diagnóstico etiológico nas mielites

de causa indeterminada e são feitas tentativas de correlação entre

o acidente peçonhento e a lesão espinal.

Os mecanismos responsáveis pela gênese da lesão espinal e o com¬

portamento antigênico complexo de toxina são discutidos.

PALAVRAS-CHAVE: Mielite aguda. Picada de aranha.

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218

1 SciELO

Mem. Inat. Butantan

^4/45:219-231, 1980/81

SOBRE A IDENTIFICAÇÃO DAS ESPÉCIES DE

POROCEPHALUS (PENTASTOMIDA) QUE OCORREM EM

OFÍDIOS DA AMÉRICA TROPICAL

A. Arandas REGO *

Como homenagem ao Instituto Butantan que completa 80 anos de

atividades de pesquisas, imortalizando o nome de seu fundador Vital

Brazil, iniciamos nossos estudos de Pentastomida da Coleção Parasito-

lógica desse Instituto.

RESUMO: Foram estudados espécimes de Porocephalus (Pentas¬

tomida) obtidas de espécies de ofídios do Brasil e que ocorrem em

toda a América Tropical. São cinco as espécies de Porocephalus :

P. crotali (Humboldt, 1808) de crotalídeos; P. stilesi (Sambon,

1910) de Lachesis muta, P. clavatus (Wilman, 1847) de boideos e

sucuri, P. tortugensis Riley & Self, 1979 de Crotalus tortugensis e

P. basiliscus Riley & Self, 1979 de Crotalus basiliacus. O autor é

de opinião que apenas P. stilesi e P. basiliscus são bem carac¬

terizadas tendo em vista a simples utilização de caracteres morfo¬

lógicos; que consistem no número de annulus, na forma do corpo

e o poro genital saliente (apenas em P. basiliscus). A espécie

P. tortugensis não possui caracteres diferenciais suficientes para

distingui-la de P. crotali devendo cair na sinonímia deste último

nome. Sugere, também, que sejam mantidos provisoriamente os

nomes das espécies associados ao do hospedeiro e que nesta ordem

de idéias provavelmente os Porocephalus de Bothrops constituiriam

uma nova espécie.

PALAVRAS-CHAVE: Pentastomida * — Porocephalus * — Ofí¬

dios * — América Tropical

INTRODUÇÃO

Recentemente estudamos larvas de Porocephalus coletados de mamí¬

feros (REGO, 1980). Essas larvas carecem de suficientes caracteres

morfológicos diferenciais; na ocasião preferimos identificá-las à espécie

Pesquisador do Departamento de Helmintologia. Instituto Oswaldo Cruz, RJ Bolsista (Pesquisador

II-A) do C. N. Pq.

219

SciELO

REGO, A. A. Sobre a identi<‘icação das espécies de Porocephalus (Pentastomida) que ocorrem em ofídios

da América Tropical. Mem. Inat. Butantan, H/^5:21Ò-2Z1, 1980/81.

Porocephalus crotali (Humboldt, 1808), aliás como vinha sendo feito pela

maioria dos estudiosos do grupo.

O gênero Porocephalus Humboldt, 1811 é constituído por parasitas

cujos adultos habitam o pulmão de ofídios na América e na África. Estas

espécies possuem o corpo arredondado e por vezes dilatado nas extre¬

midades, principalmente na região do cefalotórax. Os annuli nem sempre

são evidentes, principalmente nas fêmeas ovígeras, o que dificulta a sua

contagem. As garras têm ganchos desiguais, os externos possuem uma

espécie de apêndice digitiforme pouco esclerotizado e portanto frágil

(figs. 1 e 8) ; os ganchos internos não possuem esse apêndice, salvo nas

primeiras mudas larvares (figs. 2-3), quando é presente nos quatro

ganchos. Ê sabido que as larvas de pentastomídeos são ubíquas, elas

podem ser encontradas em diversas espécies de mamíferos selvagens e

experímentalmente em diversas espécies de roedores de laboratório

(FONSECA, 1939). As larvas podem ser encontradas enquistadas no

fígado, pulmão, perítôneo e outros locais. Larvas podem ser também

encontradas em serpentes, além de adultos no pulmão, mas este meca¬

nismo de desenvolvimento não é ainda bem compreendido.

SAMBON (1922), HEYMONS & VITZTHUM (19.35), SELE &

McMURRAY (1948), entre outros, referiram três espécies de Poro¬

cephalus para a America Tropical : P. crotali (Humboldt, 1808), em

crotalídeos; P. clavatus (Wiman, 1847) em boídeos e sucuri e P. stilesi

(Sambon, 1910) em Lachesis, Bothrops e Helicops (cobra d’água).

Todos referem a dificuldade de diferenciar essas espécies se apoiados

apenas em caracteres morfológicos, abstraindo do hospedeiro.

Sendo nossa intenção pesquisar caracteres morfológicos, que a

semelhança dos helmintos pudessem ser utilizados como caracteres dife¬

renciais, estudamos estruturas endurecidas, como as garras (ganchos),

a armadura bucal quitinosa e as peças copuladoras do macho, além de

outros caracteres, como as dimensões totais, a forma das extremidades

e 0 número de annulus do corpo.

MATERIAL E MÉTODOS

Foram examinados espécimes coletados de Constrictor constrictor

(jibóias), Eunectes murinus (sucuri), Lachesis muta (surucucu), Both¬

rops jararaca e Crotalus terrificus (cascavel). Material este proveniente

da Coleção Helmintológica do lOC e da Coleção de Parasitologia do

Instituto Butantan, que o cedeu por empréstimo.

Os espécimes já se encontravam fixados pelo formol-acético (líquido

de Railliet & Henry). Os machos foram montados “in totum”, mas as

fêmeas tiveram de ser seccionadas para montagem em mais de uma lâmi¬

na. Os ganchos e o anel bucal foram dissecados e montados separadamente

do corpo. A diafanizaçâo foi feita pelo ácido fênico, após prévia desi¬

dratação. Montagem em creosoto de faia e bálsamo do Canadá. Micro-

fotografias feitas em equipamento Olympus e os desenhos em câmara

clara universal.

220

REGO, A. A. Sobre a identificação das espécies de Porocephahia (Pentastomida) que ocorrem em ofídios

da América Tropical. Mem. Inst. Butantan, /í4/45:219-231, 1980/81.

Fig. 1 — Poroccphalus sp. adulto: gancho externo: indicado o apêndice digitiforme. Microfotografia.

Fig. 2 — Larva de Porocephalua coletado de Eunectca murinus: nota*se o quisto. Microfotografia.

Oc 6 X obj. 2,6.

221

REGO, A. A. Sobre a identificação das espécies de Poroccphalus (Pentastomida) que ocorrem em ofídios

da América Tropical. Mem. Inst. Butanian, 4í/.45:219-231, 1980/81.

Fig. 3 — Larva de Porocephalus coletado de murimis

externo e interno. Microfotografia.

indicado o apendice digitiforme nos ganchos

Fig. 4 — P. crotali, macho: extremidade anterior. Microfotografia. Oc. 6 x obj. 4

222

SciELO

KEGO, a. a. Sobre a identificação das espécies de Poroccphalua (Pentastomida) que ocorrem em ofidios

da América Tropical. Mem. Inst. Dutantan, Jí/i5;219-231, 1980/81.

RESULTADOS

O exame das peças endurecidas não forneceu elementos que servis¬

sem para a separação morfológica daquelas espécies. As garras, a

armadura bucal e o aparelho copulador do macho tem grande unifor¬

midade neste grupo de pentastomídeos (figs. 4-7). Parece-nos que as

dimensões dos espécimes, o número de annuliís e a forma das extremi¬

dades ainda constituem os melhores caracteres diferenciais, sendo que

o número de anéis talvez seja o melhor desses caracteres, uma vez que

0 seu número é constante no adulto e provavelmente também nas últimas

mudas larvares.

Estamos convencidos no entanto de tratar com espécies diferentes,

mesmo porque os pentastomídeos são bastante específicos quanto ao

hospedeiro final. Somos também de opinião que a espécie mais fácil de

identificar é PorocepJialios stilesi de Lachesis muta; ela se distingue bem

das demais espécies pelos machos; eles têm o cef alotórax bem mais dila¬

tado que a extremidade posterior e o corpo se atenua grandemente da

parte anterior para a posterior. Este foi um caráter constante em todos

os machos examinados (fig. 9). As fêmeas embora não sejam assim

afiladas, são no entanto mais alongadas que as fêmeas das outras

espécies. No entanto o número de annuhis é sem dúvida o melhor caráter,

seu número em P. stilesi foi de 46-54 (vide quadros), podendo mesmo

ultrapassar esse número. Nos espécimes de outros ofídios, o número de

annulus não ultrapassa em geral os 40. Essas características já foram

anteriormente mencionadas.

HEYMONS (1935) e SELE & McMURRAY (1948) mencionaram

a dificuldade de identificar as espécies de Porocephalus da América,

utilizando caracteres morfológicos. Acharam ser o hospedeiro um dos

melhores critérios para identificação das espécies. RILEY & SELF

(1979) tentaram esclarecer o problema de determinação dessas espécies;

dos espécimes por eles obtidos. Para o material recente estabeleceram

eles puderam reestudar material depositado no Museu Britânico, além

duas novas espécies: P. tortuqensis Riley & Self, 1979 e P. basüiscus

Riley & Self, 1979. Eles informaram que somente foram capazes de

diferenciar essas duas espécies e as outras reestudadas, graças à utili¬

zação de método estatístico (análise de variância).

Pensamos que, embora a estatística tenha suas aplicações dentro de

determinados parâmetros, não possui valor para a diferenciação prática

dos Porocephalus; continuam as mesmas dificuldades que referimos. As

tabelas de medidas por eles apresentadas (Quadro I) não parecem

diferenciar as espécies, isto se excluirmos a análise estatística e nos

atermos apenas ao quadro. É sabido que estas espécies inclusive apre¬

sentam ampla variação nas dimensões dos ganchos, o que também pude¬

mos constatar (Quadro II) ; note-.se que as medições de nossos espécimes

coletados de Crotahis terrificus são bastante diferentes das que RILEY

& SELF apresentaram. Isto poderia invalidar a análise estatística dessas

espécies.

Das duas espécies que descreveram, parece-me que P. basiliscus

possui um excelente caráter morfológico, que é o poro genital saliente

(fig. 10), caráter esse que não é evidente nas demais espécies de

Porocephalus.

223

SciELO

10 11 12 13 14 15

REGO, A. A. Sobre a identificação das espécies de Porocephalus (Pentastomida) que ocorrem em ofídios

da América Tropical. Mem. Inat. Dutantan, 44/-45:219-231, 1980/81.

Fig. 5 — />. clavatua, de Conatrictor conatrictor: gancho interno. Microfotografia. Oc. 6 x obj. 10

Fig. 6 — P. clavatua, de C. conatrictor: anel bucal. Microfotografia. Oc. 6 x obj. 10.

224

SciELO

REGO,

A. A. Sí^re a identificação das espécies de Porocephalus

America Tropical. Mem. Inst. Butantan, 44/^5:219-231,

(Pentastomida)

1980/81.

que ocorrem em ofídios

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226

D. geográfica

USA

América Tropical

até México

América Tropical

América do Sul

México

I. Tortuga

Califórnia (USA)

México

Hospedeiros

Crotalus spp.

Agkistrodon

piscivorua

Boa spp,

Epicrates

cenchria

Lackesis

muta

Bothrops spp.

Crotalus

basilisctís

Crotalus

tortugensis

- 0,352

- 0,336

■ 0,573

■ 0,476

0,413

0.775

0,389

0,640

0,432

0.417

0,704

0,378

0,348

0,635

1 1

1 1 1

0,292

0,281

0.524

0,417

0.363

0,672 ■

0.324 -

0,332 -

0,596 -

o o

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0.405 -

0,385 -

0,626 -

0,335 -

0,316 -

0,581 -

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1 1 1

1 1

0,197

0,188

0,368

0.259

0,235

0.437

0,211 -

0,219 -

0,382 ■

® o

00 IO

o o

0,251 -

0,238 -

0,441 -

0,221 -

0,209 -

0,372 -

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REGO, A. A. Sobre a identificação das espécies de Porocephalua (Pentastomida) que ocorrem em ofídios

da América Tropical. Mem. Inat. Butantan, í^/^5:219-231, 1980/81.

QUADRO II

Porocephalus spp. de Ofídios

Observação pessoal

(medidas em mm)

Ofídio

Comprimento

Annulus

Garras (ganchos)

Bothropa

jararaca

(Wied.)

38 — 40

± 40

AC = 0.210

CB = 0,210 — 0,225

AD = 0,375

0,226 — 0,330

0,240 — 0,330

0,466 — 0,610

Crotalua

terrificiía

(Laur.)

48 — 60

± 36

± 40

AC = 0.316 — 0.360

CB = 0,300 — 0,360

CB = 0,670 — 0,600

0,360

0,300 — 0,330

0.640 — 0,686

Constrictor

conatrictor

(L.)

36 — 40

AC = 0,225 — 0,256

CB = 0,202 — 0,240

AD = 0,330 —0,390

—

Lacheaia muta

(L.)

46 — 54

50 — 52

AC = 0,195 — 0,286

CB = 0,195 — 0,225

AD = 0,316 — 0,376

0,360 — 0,405

0,300 — 0,375

0,630 — 0,676

* fêmeas em mau estado

Quanto à F. tortugensis as suas próprias medidas mostram sua

semelhança com P. crotali (Quadro I), os próprios autores reconhecem

que elas não podem ser diferenciadas baseando-se em caracteres morfo¬

lógicos. Sugerimos pois que P. tortugensis seja considerado como sinô¬

nimo de P. crotali, tendo em vista a ausência de suficientes caracteres

diferenciais.

CONCLUSÕES

Apenas P. stilesi e P. basiliscus são bem caracterizadas, tendo em

vista a utilização dos caracteres da forma do corpo, o poro genital saliente

e número de annulus. As demais espécies são praticamente impossíveis

de diferenciar; talvez técnicas bioquímicas pudessem elucidar esse proble¬

ma, pois se trata de espécies muito uniformes. Como um esquema provi¬

sório poderiam ser mantidos os antigos nomes, isto é, P. crotali (Humboldt,

1808) para os parasitos de Crotalus terrificus, P. stilesi (Sambon, 1910)

para os de Lachesis muta, P. clavatus (Wiman, 1847) para os encontrados

em boídeos e sucuri; além evidentemente de P. basiliscus de Crotalus basi¬

liscus, pelas razões já expostas. Nesta ordem de idéias os espécimes prove¬

nientes de Bothrops deveriam constituir uma nova espécie; a propósito,

227

SciELO

10 11 12 13 14 15

REGO, A. A. Sobre a identificação das espécies de Poroccphalus (Pentastomida) que ocorrem em ofídios

da América Tropical. Mem. hist. Butantan, 4-4/.45:219-231, 1980/81.

Figr. 8 — P. clvatua, de C. cnatrictor'. gancho externo, indicado o apêndice digitiforme (ad.) Modelo de

medição dos ganchos (AC, AD, BC).

228

SciELO

10 11 12 13 14 15 16

REGO, A. A. Sobre a identificação das espécies de Porocrphahis (Pentastomida) que ocorrem em ofídios

da América Tropical. Mcm. Inat. Butantan, :219-231, 1980/81.

Pig, 9 — p. atileai, de L. muta: note o afilamento do corpo do macho, da extremidade anterior para a

posterior.

229

SciELO

10 11 12 13 14 15

REGO. A. A. Sobre a identificação das espécies de Porocephalus (Pentastomida) que ocorrem em ofídios

da América Tropical. Mcm. Inet. [iutantan, 4í/45:219*231. 1980/81.

Fig. 10 — P. basüiscus (adaptado de Riley & Self, 1979): note o saliente poro genital.

230

2 3 4

5 6 SCÍELO;l0 11 12 13 14 15 16

REGO, A. A. Sobre a identificação das espécies de Porocrphalus (Pentastomida) que ocorrem em ofídios

da América Tropical. Mem. Inat. Butantan, ^í/.45;219-231, 1980/81.

RILEY & SELF (1979) chamaram a atenção para o fato dos espécimes

que estudaram de Bothrops talvez constituíssem uma diferente espécie,

mas em virtude da ausência de caracteres morfológicos que as caracte¬

rizem preferimos abstermo-nos de criá-la.

AGRADECIMENTOS

Expressamos nossos agradecimentos ao Dr. Lauro Travassos Filho,

chefe da Seção de Parasitologia do Instituto Butantan de S. Paulo, que

gentilmente cedeu parte do material que utilizamos neste trabalho.

ABSTRACT: The author studied specimens of Porocephalus (Pen-

tastomida) collected from species of Ophidia; these species occur

in Tropical America. He searched for characters that could be

useful to distinguish the species referred to these hosts. Five

species were referred to Tropical America: P. crotali (Hum-

boldt, 1808) from Crotalus terrificiis, P. stilesi (Sambon, 1910) from

Lachesis muta, P. clavatus (Wiman, 1847) from Boa and anaconda,

P. tortugensis (Riley & Self, 1979) from Crotalus tortugensis, P.

basüiseus Riley & Self, 1979 from Crotalus basiliscus. In the

author’s opinion only P. stilesi and P. basiliscus are easily identified

to the others species described, in using only morphological cha¬

racters, mainly concerning to the annulus number, the body form

and the genital pore. P. tortugensis seems to be a synonim of P.

crotalus, because they can not be differentiated. He suggests also

that the criterion of hosts is yet useful to separate these species

of Porocephalus. By this reason the specimens from Bothrops must

be considered a new species.

KEYWORDS: Pentastomida * — Porocephalus * — Ophidians * —

Tropical America.

REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

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231

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Mem. Inst. Butantan

Wí5:233-238, 1980/81

NOTAS SOBRE ALGUNS PENTASTOMÍDEOS DE RÉPTEIS

A. Arandas REGO *

RESUMO: São feitas considerações sobre a morfologia e a taxo-

nomia de três espécies de pentastomideos de répteis, Porocephaliis

crotali, Kiricephalus coarctatiis e Diesingia megastoma. De P. croiali

é comentado o poro genital conspícuo nos dois espécimes estudados.

Ihjdrodgnastes bicinctus, um colubrídeo, é um novo hospedeiro de

Kiricephaliis coarctatiis; na sinonímia desta espécie é colocado K.

constrictor Riley & Self, 1979. Quanto a D. megastoma, é estabele¬

cida a sua posição taxonômica em família independente; o nome

Didantanella é posto na sinonímia do Diesingia.

PALAVRAS-CHAVE: Pentastomideos. Porocephalus crotali, Kiri-

eephalus eoarctatus e Diesingia megastoma. Répteis.

INTRODUÇÃO

Prosseguindo com o estudo de espécimes de pentastomideos, da

Coleção de Parasitologia do Instituto Butantan, tratamos agora de

três espécies de Porocephalidea, respectivamente, Porocephalus crotali

(Humboldt, 1809), Kiricephalus eoarctatus (Diesing, 1850) e Diesingia

megastoma (Diesing, 1836). Da primeira espécie, P. crotali, discutimos

um caráter (poro genital conspicuo) que não tínhamos observado em

trabalho anterior (REGO, 1981). Citamos um novo hospedeiro para a

espécie K. eoarctatus e quanto a D. megastoma, confirmamos a sua

posição taxonômica.

Como observamos em trabalhos anteriores, os pentastomideos consti¬

tuem um grupo que tem sido descurado pelos parasitologistas nacionais;

u maior parte das espécies é conhecida de descrições antigas, ainda do

uiaterial de Natterer; há portanto lacunas na taxonomia das espécies

da região neotropical ; pouco existe além dos trabalhos de SAMBON

(1922) 7 e de HEYMONS & VITZTHUM (1935)

Depto. (íe Helmintolopía, Fundação Oswaldo Cruz — Bolsista (Pesquisador) do Conselho Nacional de

Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq). Endereço para correspondência: Caixa Postal 926,

CEp 20.000, Rio de Janeiro.

233

SciELO

10 11 12 13 14 15

REGO, A. A. Notas sobre alsruns pentastomídeoa de répteis. Mem. Inst. BtUantan, *233-238, 1980/81.

MATERIAL E MÉTODOS

Os espécimes já se encontravam fixados pelo formol. Para estudos

de morfologia introduzimos uma técnica capaz de proporcionar bons

resultados no esclarecimento (diafanização) da cuticula quitinosa. Usa¬

mos 0 hipoclorito de sódio diluído em álcool. Para diluição ele é prefe¬

rível à água; usamos uma parte de hipoclorito de sódio para três partes

de álcool. Podem ficar cerca de 24 horas nesta solução. Lavar depois

em álcool a 70° e corar pelo carmin aluné de Granacher; obtém-se uma

leve coloração rósea, suficiente para as observações necessárias. Desi¬

dratação na série de álcoois e passagem pelo fenol líquido para esclareci¬

mento final. Montagem em creosoto de faia.

RESULTADOS

FAMÍLIA POROCEPHALIDAE

Parocephalus crotali (Humboldt, 1809)

Fig. 1 — Poroccphalus crotali (Humboldt, 1809): macho, genital saliente.

234

2 3 4

6 SCÍELO;l0 11 12 13 14 15 16

REGO, A. A. Notas sobre alguns pentastomídeos de répteis. Mem. Inst. Butantan, ^4/^5:233-238, 1980/81.

Hospedeiro — pulmão de Crotalus terrificus Laurenti

Proveniência — Instituto Butantan, São Paulo

Material da coleção de parasitologia, n.° 6.516.

Amostra constituída por apenas dois machos e uma fêmea; consta¬

tamos que ambos os machos exibiam poro genital conspícuo. Por este

caráter diferiram dos espécimes anteriormente estudados (REGO,

1981).“

A fêmea mediu 75 mm de comprimento. O cefalotórax é mais dila¬

tado que 0 anel caudal. Possui 34 annulus, sem contar os anéis caudal

e do cefalotórax. Anéis visíveis mesmo sendo uma fêmea ovígera. Anel

bucal pequeno e oval.

Os machos mediram o máximo de 38 mm de comprimento e têm o

mesmo número de anéis que a fêmea. Poro genital saliente e conspícuo;

abre no primeiro anel abdominal; é flanqueado por três dobras de cutícula.

Os ganchos mediram em média: AC = 0,216 mm; CB = 0,192 mm e

AD = 0,372 mm (medições conforme o esquema de RILEY & SELE,

1979).®

Considerações — SAMBON (1922)^ ao reestudar as espécies de

Porocephaliis da região neotropical comentou que apenas na espécie P. cla-

vatus de boídeos, os machos têm abertura genital proeminente, cercada

por três papilas, sendo duas anteriores e uma posterior. Em trabalho

recente (REGO, 1980),“ examinamos grande número de espécimes ma¬

chos do P. crotali, de cascavéis; nesses espécimes não observamos poro

genital visível. Fizemos novo exame de machos coletados de Boa cons-

trictor, de Bothrops e de Lachesis, a fim de avaliar esse caráter em

outras espécies. Nos machos coletados de Boa comtrictor o poro genital

saliente é uma constante, o que está de acordo com a observação de SAM¬

BON ; nas outras espécies esse caráter é raramente observado, embora

possa estar presente em alguns espécimes.

As dimensões dos ganchos nesses dois espécimes de Crotalus con¬

cordam com as do estudo anterior (REGO, 1980) “. O poro genital não

deve, portanto, ser levado em conta isoladamente. Excetuamos apenas a

espécie P. hasilisci(,s, de Crotalus basiliscus do México, descrita por

RILEY & SELF (1979)® como possuindo enorme e saliente poro genital.

Kiricephalus coarctatus (Diesing, 1850)

Hospedeiros — pulmão e cavidade geral de Hydrodynastes bicinctus

(Hermann, 1804) e pulmão de Di-yadophis bifossatus Raddi i—Drymo-

bius bifossatus).

Proveniências — Rio Approyage, Guiana francesa {Hydrodynastes)

e Inst. Butantan {Dryadophis).

Material da coleção de parasitologia do I. Butantan, números, 5.473

e 5.919.

Trata-se de seis exemplares ninfas; mediram o máximo de 20 mm

de comprimento e têm cerca de 50 anmilus. Os ganchos são simples, rela¬

tivamente grandes e de lâmina alongada, com cerca de 0,240 mm de com¬

primento. O anel bucal quitinoso mediu 0,250 mm x 0,120 mm, tem

forma oval.

235

SciELO

10 11 12 13 14 15

REGO, A. A. Notas sobre alguns pentastomítleos de répteis. Mcm. /n-st. Butanian, ^/#/45:233-238, 1980/81.

0.4

Fig. 2 — Kiricephalus coarctatus (Diesing, 1850): ninfa, cefalotórax.

Apenas um espécime macho, coletado de Dryadophis; mediu 32 mm

de comprimento. A cabeça é dilatada, mediu 1,6 mm x 2 mm. Ganchos

iguais, a lâmina do par externo mediu 0,228 mm de comprimento. O

anel bucal mediu 0,312 mm x 0,180 mm.

Considerações — O gênero Kiricephalus se caracteriza pelo cefa¬

lotórax alargado em relação ao início do abdome, em ambos os sexos, mas

no macho isto não é tão nítido. K. coarctatus parasita várias espécies de

colubrídeos das América do Norte e Sul, mas não tinha sido ainda refe¬

rida em Hydrodynastes bicinctus; este é pois um novo hospedeiro

pai-a ela.

RILEY & SELF (1979)® revisaram o gênero Kiricephalus e propu¬

seram uma nova espécie, K. constrictor, para os parasitos que encontra¬

ram em Boa constnctor. Em nossa opinião essa espécie não pode ser di¬

ferenciada de K. coarctatus; como eles mesmos referem, ambas espécies

têm praticamente o mesmo número de annulus (52 em K. coarctatus e

54 em K. constrictor-), além de se superporem geograficamente. Sugeri¬

mos que K. constrictor seja considerado sinônimo de K. coarctatus até

que seja demonstrada a existência de suficientes caracteres diferenciais.

236

SciELO

10 11 12 13 14 15 16

REGO, A. A. Nütas sobre alguns pentastomídeos de répteis. Mcm. Inat. Dutantan, ^í/i5:233-238, 1980/81.

FAMÍLIA DIESINGIIDAE Nomen novum

Diesingia megastoma (Diesing, 1836) Fonseca & Ruiz, 1956 sin.:

Butantanella megastoma (Diesing, 1836) Fonseca & Ruiz, 1956

Hospedeiros — Hífdraspis geoffroyana (Wagler) e Hydromedusa

tectifera Cope

Proveniência — Instituto Butantan, S. Paulo

Material depositado na coleção de parasitologia do Inst. Butantan,

números 5.906/8.

A principal característica desta espécie é sem dúvida o enorme anel

bucal quitinoso, muito maior que os próprios ganchos. Não redescreve-

mos a espécie pois FONSECA & RUIZ (1956)“ deram uma boa descri¬

ção da mesma. No entanto, o gênero Butantanella proposto não é neces¬

sário. Diesingia Sambon, 1922, estabelecido para estes parasitos de tar¬

tarugas aquáticas é sem dúvida um bom gênero.

Há apenas duas espécies de Diesingia além de D. megastoma., D. ka-

chugensis (Shipley, 1910), restrita à Ásia.

Colocamos Butantanella na sinonímia de Diesingia, aliás os autores

já tratavam corretamente essa espécie como D. megastoma. Curioso que

o trabalho de Fonseca & Ruiz tenha permanecido ignorado.

Persistem no entanto dúvidas sobre a posição taxonômica de Diesingia;

FAIN (1961) 1 o tratou como Sebekidae e o mesmo fizeram outros autores.

HEYMONS & VITZTHUM (1935) » trataram como subfamília indepen¬

dente. Concordamos com este último autor que não se trata de Sebekidae;

provisoriamente sugerimos uma família nova, Diesingiidae, na ordem

Porocephalidea.

AGRADECIMENTO

Expressamos os nossos agradecimentos ao Dr. Lauro Travassos F.,

da seção de Parasitologia do Instituto Butantan, pela cessão do material

de estudo.

ABSTRACT: The author makes considerations on the morphology

and taxonomy of three species of Pentastomid from reptiles, Poroce-

phalus crotali, Kiricephalus coarctatm and Diesingia megastoma.

About P. crotali he comments the conspicuos. genital opening in two

inales he cxamined froni Crotalus terrificiis. The colubrid Hydrody-

nastes bicinctus is a ncw host for K. coarctatus; in the sinoniiny of

this species is placed K. constrictor Riley & Self, 1979. Finally, about

D. megastoma, he places it in a independent family, Diesingiidae;

Butantanella Fonseca & Ruiz, 1956 is placed in the sinoniiny of

Diesingia Sambon, 1922.

KEYWORDS: Pentastomids; Porocephalus crotali, Kiricephalus

coarctatus, Diesingia megastoma. Reptilia.

REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

1. FAIN, A. Les pentastomides de 1’Afrique Centrale. Musèe Royal de VAfrique

Centrale. Annales, série in 8ème, Sciences Zoologiques, ,92:1-115, 1961.

237

SciELO

10 11 12 13 14 15

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2. FONSECA, F. & RUIZ, J.M. Was ist eigentliche Pentastoma megastomum

Diesing, 1836? (Porocephalida, Porocephalidae). Senck. BioL, 57(5/6);

469-485, 1956.

3. HEYMONS, R. & VITZTHUM, H.G. Beitrage zur systematik der Pentasto-

niiden. Z. Parasitenk., 5(1) :1-102, 1935.

4. REGO, A.A. Sobre a identificação das espécies de Porocephalus (Pentasto-

mida) que ocorrem em ofídios da América Tropical. Mem. Inst. Butantan,

44/45, 1980/81 (no prelo).

5. RILEY, J. & SELF, J.T. On the systematies of the Pentastomid genus

Porocephalus (Humboldt, 1811) with descriptions of two new species.

System. Parasit., /(l);25-42, 1979.

6. RILEY, J. & SELF, J.T. On the systematies and lifecycle of the Pentas¬

tomid genus Kiricephalus Sambon, 1922 with descriptions of three new

species. System. Parasit., 1 (2), 1979 (no prelo).

7. SAMBON, L.W. A synopsis of the family Linguatulidae. J. Trop. Med. Hyg.,

25:188-206, 391-428, 1922.

238

1 SciELO

Mem, Inat. Butantan

4-4A5:239-243, 1980/81

ENCONTRO DE PLEROCERCOS DE TRYPANORHYNCHA

(CESTODA) EM OFÍDIO DE RIO DA AMÉRICA DO SUL

A. Arandas REGO *

RESUMO: São descritos os plerocercos de Pterobothrium (Trypa-

norhyncha), encontrados em cobra de água-doce, Hydrodynastes

bicinctus da Guiana francesa. São feitas considerações sobre a rari¬

dade desse encontro, pois os répteis não são hospedeiros normais para

essas larvas. São também citadas as referências de Pterobothrium

spp. na América do Sul.

PALAVRAS-CHAVE: Plerocercos de Pterobothrium. Cestoda, Try-

panorhyncha. Serpente, Hydrodynastes bicinctus.

INTRODUÇÃO

Examinando material coletado de cobras, pudemos separar alguns

cistos que, dissecados, revelaram a presença de plerocercos de Trypa-

norhyncha. Essas larvas provêm de uma cobra de rio da Guiana francesa,

cujo material foi depositado na Coleção de Parasitologia do Instituto

Butantan.

Procedemos a uma revisão da literatura, tendo encontrado apenas as

seguintes referências de plerocercos em ofídios, conforme DOLLFUS, 1942

(1) e YAMAGUTI, 1959 (3) : Shipley, 1903, que referiu cistos de Trypa-

norhyncha em cobras do Sião (atual Tailândia) ; acrescentou tratar-se de

colubrídeo proteróglifo, que se alimenta de peixes marinhos. Meggitt,

1931, que descreveu blastocisto encontrado em colubrídeo opistóglifo, que

segundo aquele autor freqüenta o litoral marinho da Birmânia.

São pois muito raras as referências de plerocercos em ofídios e mesmo

assim limitadas ao continente asiático. Não há referências de Trypa-

norhyncha larvares em cobras fluviais e na América, daí a oportunidade

desta nota.

Depto. de Helmintologia, Fundação Oswaldo Cruz — liolsista Pesquisador) do Conselho Nacional de

Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq). Endereça para correspondência: Caixa Postal 920,

CEP 20.000, Rio de Janeiro.

239

SciELO

10 11 12 13 14 15

REGO, A. A. Encontro de plerocercos de Trypanorhyncha (Cestoda) em ofídio dc rio da América do Sul.

Afc-m. Inat. Butantan, 44/^5:239-243, 1980/81.

Fizemos a tentativa de identificação dos espécimes, o que só é possí¬

vel até 0 gênero, Pterohothrium Diesing, 1850. A identificação específica

foi impossível em virtude das probóscides estarem invaginadas, o que

impossibilitou o estudo da armadura espinhosa.

MATERIAL E MÉTODOS

Os cistos estavam fixados, de mistura com nematódeos fragmentados

e espécimes de pentastomídeos (Kiricephalus coarctatus) , As larvas foram

dissecadas com agulhas e coradas pelo carmin de Granacher; clarificação

em fenol líquido e montagem em bálsamo do Canadá e creosoto de faia.

As microfotografias foram feitas em equipamento Olympus.

RESULTADOS

No fixador os cistos apresentavam-se envolvidos por material gela¬

tinoso. São cistos alongados, providos de dois fortes envoltórios. Mediram

0 máximo de 14,40 mm de comprimento x 2 mm de largura. A larva

localizava-se em uma das extremidades do cisto, ocupando cerca de 1/8

da dimensão do mesmo. O plerocerco isolado mediu 3,2 mm de compri¬

mento. Ele tem escólex com 4 botridias, que mediram 0,300 — 0,336 mm

de diâmetro. Probóscides retraídas dentro das bainhas. Os bulbos medi¬

ram 1,08 mm X 0,216 mm; são 4 ou 5 vezes mais longos que largos.

A armadura das probóscides é do tipo poeciloacantha, com 3 tipos

diferentes de ganchos ou espinhos, o que é compatível com o gênero

Pterobothrium.

Localização — cavidade geral.

Proveniência — Rio Approyage, Guiana francesa.

Hospedeiro — Hydrodynastes hicinctus hicinctus

Espécimes depositados na Coleção Helmintológica do Instituto

Os-waldo Cruz sob o número 31.905 a-b e na coleção do Instituto Butantan

sob o n.° 5.919.

CONSIDERAÇÕES

Os Pterobothriidae parasitam principalmente peixes de mares tropi¬

cais e subtropicais. As espécies de Pterohothrium (o gênero mais impor¬

tante) são insuficientemente conhecidas pois não há boas descrições das

armaduras das trombas, além disto algumas espécies foram descritas

apenas de larvas, desconhecendo-se o adulto.

Na América do Sul foram referidas as seguintes espécies de Ptero¬

hothrium, segundo REGO, 1973 (2):

240

SciELO

10 11 12 13 14 15 16

REGO, A. A. Encontro de plerocercos de Trypanorhyncha (Cestoda) em ofídio de rio da América do Sul.

Mem. hiBt. Butantan, 239-243, 1980/81.

Espécies

Hospedeiros e proveniências

P. macrouncm (Rud., 1819)

P. heteracanthum Diesing, 1850

P. crassicolis (Diesing, 1850)

P. interriiptus (Rud., 1819)

P. fragile (Diesing, 1850)

Cherubincho lusitanorum — Brasil

Micropogon undulatus — Uruguai

Micropogon opercularis (= Micropo¬

gon lineatus — Brasil)

Oligoplites saliens, Hoplenjthrinus

unitaenitatus Erythrinus unitae-

niatus), Sciaena sp.,

Dorus sp. — Brasil

Trichiurus lepturiis — Brasil

Pristis perrottetii — Brasil

Várias espécies de teleósteos de rios foram citados como apresen¬

tando larvas de espécies de Pterohotlirium, mas apenas o “peixe-serra”,

Prístis perrottetii, possui as formas adultas desses Trypanorhyncha. Esse

elasmobrânquio é capaz de subir os rios por longas distâncias, o que

explicaria a existência de teleósteos amazônicos parasitados por larvas

de Pterobothrium. No entanto não foram ainda correlacionados os para¬

sitas adultos com as formas lai’vares nesses teleósteos.

Os ofídios não constituem hospedeiros normais pai’a Trypanorhyncha,

mas poderiam se infectar pela ingestão de crustáceos parasitados, ou

ainda, pela ingestão de peixes que tenham os plerocercos. Esta última

hipótese é mais remota, pois não parece provável que os plerocercos

possam se reencistar em novo hospedeiro e produzir outros envoltórios

císticos.

O ofídio colubrídeo, Hydroãynastes hicinctus também ocorre na região

amazônica brasileira, onde é conhecido como “cobra d’água”; é uma cobra

grande que sempre que pode se alimenta de crustáceos e também de

peixes.

CONCLUSÕES

O ofídio de hábitos aquáticos (de água-doce), Hydrodynastes hi¬

cinctus, proveniente do Rio Approyage, Guiana francesa, é considerado

como sendo um hospedeiro anormal, talvez acidental, para os plerocercos

de Pterobothrium (Cestoda, Trypanorhyncha).

Trata-se da primeira referência na América de plerocercos de Trypa¬

norhyncha em réptil.

AGRADECIMENTO

Agradecemos ao Dr. Lauro Travassos Filho, da seção de Parasitologia

do Instituto Butantan, pela cessão do material e pelo apoio que vem

prestando a estes estudos.

241

SciELO

10 11 12 13 14 15

REGO, A. A. Encontro de plerocercos de Trypanorhyncha (Cestoda) em ofídio de rio da América do Sul.

Mem. Inet. Butantan, ^^/45:239-243, 1980/81.

Fig. 1 — Ptcrobothrium sp., isolado do cisto. Oc. 6 x obj. 4.

Fík. 2 — Cisto com plerocerco de Ptcrobothrium sp. Oc. x obj. 2,5.

242

2 3 4 5 6 SCÍELO;LO 11 12 13 14 15 16

REGO, A. A. Encontro de plerocercos de Trypanorhyncha (Cestoda) em ofídio de rio da América do Sul.

Mem. Inat. Butantan, íí/^5:239-243, 1980/81.

ABSTRACT: This paper deals with plerocercus of Pterobothrium

(Cestoda, Trypanorhyncha) found enclsted in Hydrodynastes bicinc-

tus, colubrid ophidian from French Guyana. The author makes

considerations on the rarity of this fact considering that reptilia

are not usual hosts for these larvae. He relates also the refercnces

of Pterobothrium species in South America.

KEYWORDS: Plerocercus of Pterobothrium. Cestoda, Trypanor¬

hyncha. Ophidian, Hydrodynastes bicinctus.

REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

1. DOLLFUS, R.P. Étude critique sur les tétrarhynques du Muséum de Paris.

Arch. Mus. Hist. Nat., 6ème ser., tome ISème. 466 pp., 1942.

2. REGO, A.A. Contribuição ao conhecimento dos cestóides do Brasil. I —

Cestóides de peixes, anfibios e répteis. Atas Soe. Biol. Rio de Janeiro,

16(2/3) :97-129, 1973.

3. YAMAGUTI, S. Systema Helminthum, 2. The Cestodes of Vertebrates. New

York, Intersc. Publ. Inc., ed., 1959. p. 1-626, 769-860.

243

SciELO

10 11 12 13 14 15

Mcm. Inst. fíutantan

4-4/^5:245-251, 1980/81

EFEITOS SOBRE A TOXICIDADE DA MISTURA DE

VENENOS E A SOBREVIDA DE EXEMPLARES DE

CROTALUS DURISSUS TERRIFICUS E CROTALUS

DURISSUS COLLILINEATUS, SUBMETIDOS ÀS

EXTRAÇÕES MANUAL E ELÉTRICA

Raymundo ROLIM-ROSA *

Hélio Emerson BELLUOMINI **

Medardo SILES-VILLARROEL ***

Hideyo IIZUKA ****

RESUMO: Os autores demonstram que o processo de extração de

peçonha de serpentes das subespécies Crotalus durissns terrificus

(Laurenti, 1768) e Crotalus durissus collilineatus Amaral, 1926, influi

tanto na toxicidade do produto, quanto na sobrevivência dos exem¬

plares. Embora a peçonha surdida na primeira oportunidade por

estímulo elétrico fosse a mais tóxica, em termos de DL50 para

camundongos inoculados pela via intravenosa, os produtos resultan¬

tes das operações seguintes apresentaram valores em escala decres¬

cente; fenômeno inverso foi registrado com as peçonhas obtidas pelo

processo de extração manual. No que diz respeito ao índice de sobre-

vida das serpentes submetidas ao processo de extração manual, foi

verificado que houve uma diferença de 10% favorável ao mesmo, em

relação ao processo de estímulo elétrico aplicado sobre as glândulas

veneníferas.

PALAVRAS-CHAVE: Veneno crotálico; processos de extração;

extração e toxicidade; extração e sobrevida de serpentes.

INTRODUÇÃO

O veneno de serpentes é, de um modo geral, um produto de natureza

química complexa, dotado de diversas propriedades farmacológi¬

cas 2 .19. 20 , 22 ,24,25, 26 _ g siutetízado pclas glândulas veneníferas as quais se

* Diretor Técnico do Serviço de Imunolojria do Instituto líutantan. Professor Aswistente Doutor do

Departamento de MicrobioloRÍa e Imunolo^ia do Instituto de Ciências líiomédicas da USP.

•• Pesquisador Científico Ref. PqC-G, Diretor Técnico do Serviço de Animais Peçonhentos do Instituto

Butantan.

••• Professor Livre Docente do Departamento de Microbiolojjia c Imunologia do Instituto de Ciências

Biomédicas da USP.

• ••• Pesquisador Científico Ref. PqC-1, Encarregado do Setor de Anaeróbios do Instituto Butantan.

Endereço para correspondência: C.P. 65, São Paulo.

245

SciELO

10 11 12 13 14 15

ROLIM-ROSA. R.; RELLUOMINI, II. E.; SILES VILLARROEL, M.; & IIZUKA. H. Efeitos sobre a

toxicidade da mistura de venenos e a sobrevida de exemplares de Crotalus durissus terrificus e

Crotalus duriaHu» collUincatus, submetidos às extrações manual e elétrica. Mcm. Inst. Dutantan,

.ííA5:245-251, 1980/81.

comunicam com os dentes inoculadores, sendo utilizado como arma de

caça ou defesa e, em algumas espécies, desempenham funções de suco

digestivo, de acordo com Fonseca(1949). Além de conter enzimas e

substâncias biologicamente ativas, a maioria dos componentes apresenta

propriedades imunogênicas. A atividade letal resulta da interação dos

componentes presentes nas peçonhas, sendo que alguns dos mesmos podem

representar papel mais importante que os outros, para provocar a morte,

conforme assinala Rosenfeld (1969-71).

Dentre os acidentes ofídicos registrados em nosso meio, o crotálico,

de acordo com as observações de Fonseca e Rosenfeld assume maior

importância, em virtude de representar aquele que causa maior número

de óbitos. Os freqüentes casos de envenenamento causados por Crotalus,

são explicados pela grande distribuição geográfica de seus represen¬

tantes em nosso território *•

Embora tratando-se de um veneno preponderantemente hemolítico e

neurotóxico sua composição pode variar de acordo com a

procedência das serpentes

Rosenfeld & Belluomini (1960), e Belluomini ° (1968), estudando

a extração e a quantidade de peçonha de serpentes brasileiras, verifica¬

ram que alguns exemplares de Crotalus eram capazes dc fornecer até

220 mg, numa única extração; todavia, mais de 60% dos espécimes tinham

a capacidade de inocular acima de 40 mg de veneno, aproximadamente o

dobro daquela que seria a dose mínima mortal, presuntiva, para um ho¬

mem de 60 kg. '*

Apesar dos progressos verificados pelos numerosos estudos sobre as

peçonhas ofídicas, desde os primeiros trabalhos encetados por Vital Bra-

zil® (1901-17), constatamos, pela literatura consultada, não ter havido

preocupação, por parte dos pesquisadores que se dedicam ao assunto,

relativa à possível variação da toxicidade da peçonha, tampouco ao índice

de sobrevida proporcionado pelas técnicas empregadas para a obtenção

da mesma.

Propusemo-nos, face às considerações apresentadas, estudar, inicial¬

mente, a influência dos processos de extração de veneno sobre sua toxi¬

cidade e a sobrevida de serpentes das subespécies Crotalus durissus terri¬

ficus e Crotalus durissus collilineatus.

MATERIAL E MÉTODOS

Veneno: Trabalhamos, de acordo com Hoge & Romano*® (1972),

com a mistura de venenos provenientes de dezenas de exemplares de Cro¬

talus durissus terrificus (Laurenti, 1768) e Crotalus durissus collilineatus

(Amaral, 1926), adultos, sem distinção de sexo, procedentes do Estado de

São Paulo e de Estados circunvizinhos, extraídos mediante dois processos:

compressão manual das glândulas veneníferas e aplicação de uma corren¬

te elétrica de quatro volts sobre o pálato, de acordo com Belluomini ■*

(1965).

Todas as amostras foram colhidas na Secção de Venenos do Insti¬

tuto Butantan, no serviço de rotina, onde as serpentes são mantidas em

compartimentos sob temperatura regulada entre 21 a 26°C e grau de

246

SciELO

10 11 12 13 14 15 16

ROLIM-ROSA. R.: BELLUOMINI, H. E.; SILES VILLARROEL, M.; & IIZUKA. H. Efeitos sobre a

toxicidade da mistura de venenos e a sobrevida de exemplares de Crotalua durissus terrificus e

Crotalus durissus collüineatus, submetidos às extrações manual e elétrica. Mcm. Inst. Butantan,

.4^/^5:245-251, 1980/81.

umidade entre 40 e 60%, conforme Belluomini ^ (1964). Os venenos

eram extraídos quinzenalmente de cada lote — manual e elétrico —

colhidos em um cálice e, a seguir, centrifugados. Imediatamente após, o

“pool” era submetido à dessecação a vácuo e conservado a 4°C

Soluções de Veneno: O veneno seco era dissolvido em solução de

NaCl a 1,5%, conforme Vital Brazil®, (1911), contendo 200 microgramas

por mililitro. Estas soluções eram distribuídas em flaconetes os quais,

uma vez hermeticamente fechados, eram conservados em congelador re¬

gulado a —25°C, de acordo com técnica adotada por Furlanetto “ (1965).

No momento da manipulação, cada frasco era descongelado e feitas

as diluições seriadas, observando a mesma técnica utilizada por Rolim-

-Rosa et al (1973) e Bancher et al ^ (1973).

A determinação da atividade tóxica das amostras de peçonha era,

inicialmente, norteada por um ensaio preliminar efetuado mediante a

inoculação de quantidades variáveis da mesma, segundo uma razão cons¬

tante igual a 2, ensaio esse que nos colocava a par do grau de toxicidade

do veneno

Animais utilizados: Todos os ensaios foram realizados em camun¬

dongos — Mus muscidus Linnaeus 1758 — de 18 a 22 gramas de peso,

sem distinção de sexo, provenientes do Biotério Geral do Instituto; as

inoculações eram feitas pela via venosa.

Cálcido da DL50 — A DL50 de cada experimento foi sempre cal¬

culada com os resultados verificados após 48 horas das inoculações, pelo

método de Reed & Müench(1938) e ratificada pelo método prático

preconizado por Miller & Tainter “ (1944), em papel milimetrado em

escala “log-probit”.

RESULTADOS E DISCUSSÃO

Os resultados da variação da atividade tóxica dos venenos crotá-

licos extraídos mediante a aplicação das duas técnicas, manual e elétrica,

expressos em termos de DL50, referentes às sucessivas operações, estão

consubstanciados nas Tabelas 1 e 2, e o confronto entre ambas, na Ta¬

bela 3.

. TABELA 1

Variação da atividade tóxica da mistura de venenos de C. d. terrificus e C. d.

coUilineatus, obtidos pelo processo manual, em função da ordem das extrações e do

número de serpentes de um mesmo grupo, expressa em valores de DL50 para

camundongos de 18 a 22 g, inoculados pela via venosa.

Extrações

Número de

Serpentes

DL50

Atividade relativa

(1.®' extração

= 100)

l.a

181

3,518

100,00

2.a

144

3,456

101,79

3.»

3,159

112,07

4.a

3,095

113,67

247

SciELO

10 11 12 13 14 15

UOLIM-ROSA, R.: BELLUOMINI, H. E.; SILES VILLARROEL, M.: & IIZUKA, H. Efeitos sobre a

toxicidade da mistura de venenos e a sobrevida de exemplares de Crotalua durisaus tcrrificua e

Crotalua duriaaua collüincatua, submetidos às extrações manual e elétrica. Mem. Inat. Dutantan,

.447.45:246-261, 1980/81.

Os resultados expressos pela Tabela 1 revelam que houve oscilação

entre os valores da DL50 da 1.** à 4.®^ extrações e que, tomando-se a 1.^

com valor igual a 100%, verifica-se que houve, nas extrações seguintes,

aumento gradual e constante da potência relativa da peçonha. Foi tomada

a DL50 da primeira extração como referência porquanto as serpentes

não haviam recebido alimento, ainda, e o veneno resultante era

representativo da quantidade secretada e acumulada pelo ofídio na

natureza, procedimento, aliás, já adotado por Biasi et al® (1976-77)

por ocasião do estudo sobre a produção de veneno de Bothrops pradoi.

Ainda na Tabela 1 pode-se notar que a quantidade de serpentes,

inicialmente em número de 181, reduziu-se a 65 por ocasião da 4A

extração. Ocorrência análoga já havia sido observada e discutida em

trabalhos anteriores “■

TABELA 2

Variação da atividade tóxica da mistura de venenos de C. d. terrificus e C. d.

collüineatvs, obtidos pelo processo elétrico, em função da ordem de extrações e do

número de serpentes de um mesmo grupo, expressa em valores de DL50 para

camundongos de 18 a 22 g, inoculados pela via venosa.

Extrações

Número de

Serpentes

DL50

Atividade relativa

(1.8 extração

= 100)

l.a

138

3,163

100,00

2.8'

118

3,507

90,19

3.8

4,136

76,47

4.8

5,143

61,50

Nota-se, pela Tabela 2, que a toxicidade da peçonha crotálica sofreu

decréscimo gradual em sua potência relativa, fenômeno inverso daquele

observado na Tabela 1, a qual apresenta resultados conseqüentes ao

processo de extração manual.

Paralelamente à diminuição da atividade tóxica da peçonha obtida

mediante estímulo elétrico, nota-se uma progressiva redução da quantidade

de exemplares a qual, por ocasião da 4.^ extração, estava representada

em apenas 26% do número inicial, enquanto que, pelo processo de

extração manual, esse índice foi da ordem de 36%.

TABELA 3

Confronto entre as quantidades de DL50/mg da mistura de venenos de C. d.

terrificus e C. d. collilineatus obtidos pelos processos manual e elétrico, de dois grupos

de serpentes, extraidas quinzenalmente, em quatro oportunidades.

Extrações

Quantidade de DL50/mg da mistura

de venenos

Pela extração

manual

Pela extração

elétrica

1.8

284

316

2.8

289

285

3.8

318

242

4.8

323

194

Médias

303

259

248

SciELO

10 11 12 13 14 15 16

ROLIM-ROSA, R.; BELLUOMINI. H. E.; SILES VILLARROEL. M.; & IIZUKA. H. Efeitos sobre a

toxicidade da mistura de venenos e a sobrevida de exemplares de Crotalus durissu8 tcrrificíts c

Crotalus durisaus collüineatus, submetidos às extrações manual e elétrica. Mem. Inst. Butantan,

■44/45:246-251, 1980/81.

Comparando-se o número de DL50 contido em um miligrama da

mistura de venenos de C. d. terrificiis e C. d. collilineahis, obtido mediante

extração manual com o número de DL50 do mesmo produto obtido por

extração elétrica, verifica-se que, na primeira extração, a peçonha

resultante da obtenção através de descarga elétrica apresenta 32 DL50

a mais que aquela obtida pelo processo de extração manual. Todavia, as

extrações subseqüentes demonstram uma inversão nos valores da DL50,

isto é, os venenos obtidos por extração manual, a partir da 2.^ extração

até a 4.^, aumentaram gradativamente de toxicidade, enquanto os

venenos obtidos por estímulo elétrico diminuíram durante as mesmas

operações.

Possivelmente, além do processo empregado para as extrações das

peçonhas ofídicas, vários outros fatores poderiam causar alterações, tanto

na quantidade quanto na qualidade das mesmas, dentre os quais podería¬

mos destacar os seguinte: — mudança abrupta das condições de vida

livre para a vida em cativeiro das serpentes; a alimentação; a idade; as

excitações e os traumatismos resultantes das freqüentes e sucessivas

extrações, etc. ..

Pelos resultados apresentados, podemos inferir que o processo de

extração de peçonha de serpentes das subespécies Crotalus durissus

terrificus e Crotabis durissus collilineatus, através de indução elétrica,

não seria recomendável para o serviço de rotina de aferição de antissoros,

em virtude de se constituir em um recurso que apresenta, como conse-

qüência, diminuição progressiva na atividade tóxica da referida peçonha

e de causar a morte de maior número de exemplares mantidos em

cativeiro.

Quer nos parecer que o efeito de sucessivas contrações das glândulas

veneníferas, induzidas por descarga elétrica, repercute negativamente

sobre a fisiologia das mesmas.

Paradoxalmente, o processo de extração elétrica seria o mais reco¬

mendável a ser empregado em serpentes submetidas à primeira extração,

por fornecer, não só o produto secretado pela serpente em seu habitat

natural, como corresponder ao mais tóxico e, por isso mesmo, poderia

ser 0 mais indicado para aferir a capacidade neutralizante de antissoros

correspondentes, em termos de DL5Õ.

CONCLUSÕES

1. A mistura de venenos de Crotalus durissus ternficus e Crotalus

durissus collilineatus obtidos de exemplares em cativeiro e

extraídos quinzenalmente, apresenta alterações em sua ativi¬

dade tóxica, na dependência do processo, elétrico ou manual,

de obtenção.

2 . O processo elétrico, embora apresentasse a peçonha mais ativa,

em termos de DL50 para camundongos, na primeira extração,

revelou um declínio progressivo nas extrações subseqüentes.

3. O processo manual, não obstante apresentasse a peçonha menos

ativa do que aquela obtida na primeira operação elétrica, reve-

249

SciELO

10 11 12 13 14 15

ROLIM-ROSA. R.: BELLUOMINI, 11. E.; SILES VILLARROEL. M.; & IIZUKA, H. Efeitos sobre a

toxicidade da mistura de venenos e a sobrevida de exemplares de Crotalua duriaaus terrificua e

Crotalua duriaaua coüüineatua, submetidos às extrações manual e elétrica. Mcm. Inst. Butantan,

^4/^5:245-251. 1980/81.

lou, pelo mesmo método de aferição, aumento crescente nas

extrações subseqüentes.

4. A sobrevida dos espécimes de C. d. terrificiLS e C. d. collili-

neatus foi, cerca de 10%, maior nos submetidos às extrações

manuais.

ABSTRACT: The authors demonstrate that the venom extraction

process in snakes of the subespecies Crotalua durissus terrifieus

(Laurenti, 1768), and Crotalua durissus collilineatus Amaral 1926,

exerts an influonce on the toxicity of the final product as well as on

the survival of the specimens. The venom firstly obtained by elec-

trical stimulation of glands is more toxic in terms of LD50 for

mice intravenously inoculated, while the resulting products of the

next extractions showed values in a decreasing scale; an inverse

phenomenon was registered with the venoms obtained through

manual extraction. As to the survival rate of the snakes submitted

to the manual process of venom extraction, it could be verified that

there was a 10% difference in its favor in comparison with the

process of electric stimulation applied upon the venom glands.

KEYWORDS: Crotalic venom; effects by the extraction process

upon the toxicity, and survival rate of the snakes.

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250

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toxicidade da mistura de venenos e a sobrevida dc exemplares de Croialus durisaua terrificua e

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SciELO

10 11 12 13 14 15

A/em. Inst. Buianian

■4-4/45:253-268, 1980/81

PRODUÇÃO DE SORO ANTIARACNÍDICO POLIVALENTE

MEDIANTE INOCULAÇÕES SIMULTÂNEAS DE

VENENOS EM UM MESMO ANIMAL

Raymundo ROLIM ROSA ^

Medardo SILES VILLARROEL2

Elizabete Gomes Jardim VIEIRA ^

Hideyo IIZUKA «

José NAVAS 5

RESUMO; É descrito um método para a produção, em escala

industrial, de soro antiaracnídico polivalente, mediante a inoculação

de mistura de venenos de Tityus serrulatus, Phoneutria spp, Loxos-

celes spp e Lycosa eryihrognatha. São enfatizadas as suas vantagens

técnicas e econômicas, destacando-se, entre outras, o emprego de

menor número de animais soro-produtores, os menores dispêndios de

imunógenos, de tempo e de trabalho, em relação aos possíveis processos

de produção dos respectivos antivenenos específicos.

PALAVRAS-CHAVE: Soro antiaracnídico polivalente; produção

em escala industrial do soro antiaracnídico polivalente.

INTRODUÇÃO

Nos casos de acidentes aracnídicos, nem sempre é possível ser

reconhecido o animal responsável, nem mesmo, de acordo com Rosenfeld

e cols. ” (1957), pelos sinais ou sintomas registrados logo após as picadas.

A produção de um imunessoro polivalente capaz de neutralizar seus

venenos seria, sob vários aspectos, recomendável.

Diversos autores *• *• obtiveram, em relação a de¬

terminadas espécies de peçonhas ofídicas, aranêicas e escorpiônicas,

pertencentes ao mesmo ou a gêneros diferentes, antivenenos polivalentes

mediante inoculações de seus respectivos venenos de forma alternada

ou de misturas, em um mesmo animal.

Diretor do Serviço de Imunologia do Instituto Butantan e Professor Assistente Doutor do Departa¬

mento de Microbioloífia e Imunologia do Instituto de Ciências Biomédicas da USP.

2* Professor Livre-Docente do Departamento de Microbiologia e Imunolcgia do Instituto de Ciências

Biomédicas da USP.

3. Assistente do Serviço de Imunologia do Instituto Butantan.

Pesquisador Científico Ref. PqC-1 e Encarregado do Setor de Anaeróbios do Instituto Butantan.

5. Ex-Encarregado do Setor de Imunização do Serviço de Imunologia, do Instituto Butantan.

Endereço para correspondência: Caixa Postal 66 — São Paulo — Brasil.

253

SciELO

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ROLIM-ROSA, R.; SILES VILLARROEL. M.; VIEIRA, E. G. J.; IIZUKA, H. & NAVAS. J. Produ¬

ção de soro antiaracnídico polivalente mediante inoculações simultâneas de venenos em um mesmo

animal. A/em. /naí. Butantan, 253-268, 1980/81.

Os bons resultados e as reais conveniências demonstrados pelos

citados pesquisadores, permitiram-nos propor a obtenção de um produto

capaz de neutralizar venenos de artrópodes pertencentes a ordens

diferentes — Scorpiones e Araneae — empregando um esquema de

hiperimunização em um mesmo cavalo, utilizando uma mistura dos

referidos venenos.

MATERIAL E MÉTODOS

1. Venenos utilizados

Foram utilizados venenos de Tityus serrulatus Lutz & Mello, 1922,

de Phoneutria nigriventer (Keyserling, 1891) e de Phoneutria keyserling

(Pickard-Cambridge, 1897) extraídos por descarga elétrica e dessecados

a vácuo, segundo técnica de Bücherl ® (1971), misturados a triturados

de glândulas de Lycosa erythrognatha Lucas, 1836 e de cefalotórax de

Loxosceles spp Heinecken & Lowe, 1833.

Os venenos, as glândulas e os cefalotóraxes (cada cefalotórax contém

duas glândulas), foram fornecidos pela Seção de Artrópodes Peçonhentos

do Instituto Butantan.

2. Determinação da atividade tóxica dos venenos

2.1 Tityus serrulatus — Determinada pelo método descrito por

BraziP (1918).

2.2 Lycosa erythrognatha — Observando o método proposto por

Brazil & Vellard'' (1950).

2.3 Loxosceles %pp — Conforme método preconizado por Furla-

netto>= (1961).

2.4 Phoneutria spp — Embora não conste da literatura, o Instituto

Butantan determina a atividade tóxica destes venenos, em cobaias de

375 g ± 25 g, sem distinção de sexo, inoculadas pela via subcutânea e

observadas por 48 horas.

3. Produção de soros antiaracnídicos monovalentes

Para as necessárias comparações com os resultados obtidos, estão

apresentadas no Quadro 1, as quantidades de imunógenos e o número de

dias necessários para a produção de soros antiaracnídicos monovalentes,

segundo método anteriormente utilizado pelo Instituto Butantan,

empregando um adjuvante oleoso acrescentado às últimas doses do

esquema de hiperimunização.

QUADRO I

Imunessoros Específicos

Venenos

Hiperimunização de Base

Reimunizacão

mg ou gls

nP de dias

mg ou gls

n.° de dias

Phoneutria spp

63,0 mg

57,0 mg

T. serrulatus

135,0 mg

75,0 mg

L. erythrognatha

720,0 gls

600,0 gls

Loxosceles spp

546,0 gls

350,0 gls

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SciELO

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ROLIM-ROSA, R.; SILES VILLARROEL, M.; VIEIRA, E. G. J.; IIZUKA, H. & NAVAS, J. Produ¬

ção de soro antiaracnídico polivalente mediante inoculações simultâneas de venenos em um mesmo

animal. Mem. Inst. Butantan, ^4/45:253-258, 1980/31.

4. Mistura imunogênica e adjuvante utilizados para a produção de soro

antiaracnídico polivalente

4.1 Mistura imunogênica — Para um volume de 300,0 ml, os

componentes entraram nas seguintes proporções:

Componentes

glândulas

Phoneutria spp

300,0

T. serrulatus

300,0

—

L. erythrognatha

—

300,0

—

Loxosceles spp

—

900,0

—

Glicerina

—

120,0

Thimerosal 1/1000

—

60,0

Sol. Fisiológica

a 0,85% q.s.p.

—

300,0

4.2 Adjuvante utilizado — Foi utilizado o adjuvante de Freund:

completo com a primeira dose de imunógenos e incompleto com a segunda.

5. Animais soro-produtores utilizados e esquemas de hiperimunização

e de reimunização

5.1 Foram hiperimunizados 10 cavalos machos, castrados, de

idade entre 4 e 10 anos, pesando de 380 a 430 kg, jamais utilizados para

a produção de soros hiperimunes.

5.1.1 Hiperimunização de Base — Todas as doses foram inoculadas

pela via subcutânea, na região dorsal.

1 . ^ dose — 6,0 ml da mistura de venenos adicionados a 10 ml de

adjuvante de Freund completo e inoculados em 8 pontos diferentes;

2. ^ dose — 6,0 ml da mistura de venenos adicionados a 10 ml de

adjuvante de Freund incompleto e inoculados em 8 outros diferentes

pontos;

3. ^ dose — 3,0 ml da mistura de venenos adicionados a 15 ml de

solução fisiológica a 0,85% e inoculados, em três etapas espaçadas de

duas horas, em torno dos granulomas formados pelas doses anteriores.

As demais doses, 4.^ e 5.^, foram iguais à terceira.

Foram observados intervalos de 7 dias entre as três primeiras doses

e de dois dias entre as restantes.

5.1.2 Reimunização — Após 30 dias, a contar do último dia de

sangria (item 6.2), os animais foram submetidos à reimunização,

recebendo doses imunogênicas correspondentes às três últimas da

hiperimunização de base, pela mesma via e na mesma região.

6 . Sangrias

6.1 Sangria de prova — Consistia na retirada, por punção da

jugular, de cerca de 20 ml de sangue, de cada animal separadamente,

recolhidos em tubos de ensaio sem anticoagulante. Esta operação era

realizada 7 dias após a inoculação da última dose de antígeno.

255

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ROLIM-ROSA, R.; SILES VILLARROEL, M.; VIEIRA, E. G. J.: IIZUKA, 11. & NAVAS. J. Produ¬

ção de soro antiaracnidico polivalente mediante inoculações simultâneas de venenoâ em um mesmo

animal. Mcm. /nst. Butantan, :253“268, 1980/81.

6.2 Sangria final — Equivalente a 3%, em volume de sangue, do

peso de cada cavalo, efetuada em duas etapas com intervalo de 48 horas

entre as mesmas. O sangue era recebido em tubos contendo solução de

citrato de sódio a 11%, na proporção de 10% em relação ao volume de

sangue a ser obtido.

A separação do plasma era realizada logo após a sangria, em

desnatadeira tipo Alfa Lavai, adaptada para essa finalidade.

7. Determinação da capacidade neutralizante dos antivenenos

A capacidade neutralizante de cada fração de antiveneno correspon¬

dente a cada imunógeno contido na mistura, foi determinada segundo

os métodos descritos no item 2.

RESULTADOS E DISCUSSÃO

Os soros antiaracnídicos produzidos pelo Instituto Butantan, durante

muitos anos, foram obtidos através de hiperimunizações específicas, com

exceção do soro antictênico-licósico, então produzido mediante hiperi¬

munizações de cavalos com uma mistura de venenos de Phoneutria spp

e Lycosa erythognatha.

A aplicação do método ora proposto possibilitou a produção de um

imunessoro polivalente, capaz de neutralizar os venenos aranêicos e

escorpiônico estudados. Para a sua produção, foram consumidas quanti¬

dades relativamente pequenas de venenos, conforme demonstra a Tabela 1.

TABELA 1

Quantidades de venenos secos ou de número de glândulas utilizadas para a

hiperimunização de base e para a reimunizaçâo de cada cavalo, para a produção

de soro antiaracnidico polivalente, com respectivos títulos mínimos detectados.

Venenos

Hiperimunização

de base

(18 dias)

Reimunizaçâo

(4 dias)

Título mínimo

detectado do

antiveneno

Phoneutria spp

21,0 mg

9,0 mg

300 /ig/ml *

T. serrulatus

21,0 mg

9,0 mg

400 fig/ral *

L. erythrognatha

21,0 gls

9,0 gls

2.000 p.g/ml **

Loxosceles spp

63,0 gls

27,0 gls

15 /ig/ml **

* Atividade antitóxica

** Atividade antinecrosante

Se confrontarmos quantidades de antígenos e tempo dispendidos entre

a produção de soros antiaracnídicos específicos (Quadro 1, Material e

Métodos) com o antiveneno polivalente ora produzido, podemos constatar

considerável diminuição das necessidades de animais soro-produtores,

de venenos e de tempo destinados à hiperimunização.

256

SciELO

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UOLIM-ROSA. R.: SILES VILLARROEL, M.; VIEIRA, E. G. J.: IIZUKA, H. & NAVAS. J. Produ¬

ção de soro antiaracnídico polivalente mediante inoculações simultâneas de venenoe em um mesmo

animal. Mcm. Inst. Butantan, ^4/^5:253-268, 1980/81.

Considerando que um exemplar de Phoneutria spp produz em média,

numa extração, 1,25 mg'“ de veneno, conclui-se que foram poupadas,

aproximadamente, 34 aranhas; 699 glândulas de L. erythrognatha

correspondem, praticamente, a 350 exemplares que foram dispensados

pelo método de produção de soro antiaracnídico polivalente; da mesma

forma, 483 glândulas de Loxosceles spp correspondem a 241, 5 indivíduos

poupados e, finalmente, 114 mg de veneno de T. serndatus que seriam

produzidos por cerca de 184 escorpiões, sabendo-se que cada exemplar

desta espécie produz, em média, por extração, 0,62 mg de veneno seco

De forma semelhante, efetuando-se a mesma análise comparativa

entre as hiperimunizações de base, constata-se que as reimunizações

exigiram menores quantidades de venenos e de tempo, ou seja, 38

exemplares de Phoneutria spp; 296 de L. erythrognatha; 162 de Loxosceles

spp e de 106 escorpiões da espécie T. serrulatus.

CONCLUSÕES

1 . É viável a produção, num mesmo animal e em escala industrial,

de um imunessoro capaz de neutralizar, simultaneamente, os venenos de

Tityus serrulatus, Phoneutria spp, Lycosa ei-ythrognatha e Loxosceles

spp.

2 . O método utilizado permitiu sensível economia de animais

soro-produtores, de imunógenos e de tempo, para a obtenção de títulos

neutralizantes satisfatórios, tanto nas hiperimunizações de base quanto

nas reimunizações.

ABSTRACT: A method is described for the industrial scale

production of a polyvalent antiarachnid serum, by the inoculation

of a venom mixture of Tityus serrulatus, Phoneutria spp., Loxos¬

celes spp. and Lycosa erythrognatha. The technical and economieal

superiority is emphasized, with special attention to the utilization

of less a number of serum producing animais, minor immunogen

expenses, time and effort when compared with the possible pro¬

duction processes of the respective specific antivenins.

KEYWORDS; Polyvalent antiarachnid serum; large scale pro¬

duction of polyvalent antiarachnid serum.

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10 11 12 13 14 15 16

Mem. Inst. Butantan

UA5:259-270, 1980/81

ANÁLISE COMPARATIVA ENTRE OS DIFERENTES

ESQUEMAS DE HIPERIMUNIZAÇÃO EMPREGADOS NA

PRODUÇÃO DE SOROS ANTIOFÍDICOS PELO INSTITUTO

BUTANTAN (1957-1979)

Raymundo ROLIM ROSA '

Elizabete Gomes Jardim VIEIRA ^

Medardo SILES VIELARROEL^

Yara Queiroga SIRACUSA *

Hideyo IIZUKA »

RESUMO: No transcurso de 22 anos (1957-1979), o Instituto

Butantan adotou quatro esquemas de hiperimunização de eqüideos,

diferentes entre si quanto às doses de veneno, dos quais três quanto

às doses e o adjuvante: óleo vegetal, alginato de sódio e adjuvante

de Freund, respectivamente. No último periodo de observação, 1975-

-1979, a introdução do adjuvante de Freund, completo e incompleto,

nas misturas imunogênicas reduziu, em cerca de 99%, a quantidade

de veneno aplicada e, em apro.ximadamente 80%, o tempo necessário

para a produção de imunessoros com títulos mais altos que os conse¬

guidos durante os primeiros períodos.

PALAVRAS-CHAVE: Soros antiofídicos. Esquemas de hiperimuni-

zaçâo de eqüideos. Adjuvante de Freund na hiperimunização de

eqüideos.

INTRODUÇÃO

Uma das preocupações dos institutos produtores de soroterapêuticos

é, sem dúvida, a pesquisa de métodos visando obter imunessoros dotados

de títulos satisfatórios ’ com menor dispêndio de antígenos e em menor

prazo.

O Instituto Butantan, um dos pioneiros no mundo na produção de

soros antiofídicos, tem procurado, desde os trabalhos iniciais de Brazil ^

1. Diretor do Serviço de Imunologia do Instituto Butantan e Professor Assistente Doutor do Departtf-

mentü do Microbiologia e Imunolotfia do Instituto de Ciências Bíomédicas da USP.

2. Assistente do Serviço de Imunologia do Instituto Butantan.

3. Profe.ssor Livre Docente do Departamento de Microbiologia e Imunologia do Instituto de Ciências

Biomêdicas da USP.

4. Diretora do Serviço de Controle e Técnicas Auxiliares e ex-Chefe da Seção de Soros do Instituto

Butantan.

5. Pesquisador Científico Ref. PqC-l e Encarregado do Setor de Anaeróbios do Instituto Butantan.

Endereço para correspondência: Caixa Postal G5 — São Paulo — Brasil.

259

SciELO

10 11 12 13 14 15

ROLIM-ROSA. R.; VIEIRA, E. G. J.; SILES VILLARROEL. M.; SIRACUSA, Y. Q. & IIZUKA. H.

Análise comparativa sobre os diferentes esquemas de hipcrimunização empregados na produção de

soros antíofidicos pelo Instituto Butantan (1967-1979). Mcm. Inst. Butantan, -4^/45:269-270, 1980/81.

(1901), satisfazer àqueles aspectos ensaiando diferentes esquemas de

hiperimunização e novos adjuvantes.

Vital Brazil iniciou suas experiências sobre hiperimunização de

animais contra venenos ofídicos, em 1897, conseguindo imunizar cães

e cabritos contra “doses formidáveis” de veneno de jararaca e de

cascavel. Aplicava “veneno puro em estado fresco, diluído em água

esterilizada ou água physiológica, ou secco pela evaporação na estufa a

38." e dissolvido na occasião de ser empregado”

O método de Vital Brazil demorava, inicialmente, cerca de um

ano para imunizar eqüinos, porém, mais tarde, o referido prazo foi,

pelo mesmo autor, reduzido pela metade, protegendo-se o animal,

preliminarmente, com doses decrescentes de soro antipeçonhento espe¬

cífico, administrado pela via venosa '.

Amaral ‘ (1918/24), utilizava mais de 8,0 gramas de veneno para

obter 0 soro anticrotálico, num prazo superior a quatro meses; o soro

antibotrópico monovalente, contra o veneno de B. jararaca, ou o polivalente

contra os venenos de B. jararaca, B. jararacussu, B. alternatus, B.

neuioiedi e B. atrox, era produzido após três meses, dispendendo um total

de 5 a 6 gramas de veneno; o antiofídico era preparado mediante

inoculações alternadas de venenos crotálico e botrópico polivalente,

recebendo o animal, ao cabo de dois e meio a três meses, 2 a 3 gramas

de cada tipo de veneno.

Anos mais tarde, com a introdução de um adjuvante oleoso adicionado

às últimas doses, as quantidades de veneno necessárias para a produção

de antivenenos dotados de títulos satisfatórios sofreram sensíveis

reduções, tanto para a primeira hiperimunização quanto para a

reimunização.

Em 1972, introduzimos novo esquema de doses e o alginato de sódio

como adjuvante, conseguindo reduzir pela metade o consumo de veneno.

A partir de 1975, baseados em trabalhos realizados por Oropeza e

cols. “ (1972), passamos a adotar o adjuvante de Freund e novo esquema

de hiperimunização, tendo sido realizados ensaios preliminares necessários

para a adequada adaptação aos venenos de serpentes brasileiras e aos

métodos de doseamentos observados pelo Instituto Butantan.

A presente comunicação, estabelecendo uma análise comparativa

entre os diversos esquemas de hiperimunização ofídica adotados pelo

Instituto Butantan, durante o período de 1957 a 1979, propõe-se a revelar

os resultados obtidos com o emprego do alginato de sódio e do adjuvante

de Freund, nas misturas imunogênicas de venenos ofídicos do Brasil.

MATERIAL E MÉTODOS

1. Esquemas de Hiperimunizações:

Foram estudadas hiperimunizações anticrotálica, antibotrópica,

antiofídica® (anticrotálica e antibotrópica), antielapídica e, a partir de

1963, o antilaquético.

260

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I I I

ROLIM-ROSA, R.: VIEIRA. E. G. J.; SILES VILLARROEL. M.; SIRACUSA, Y. Q. & IIZUKA. H.

Análise comparativa sobre os diferentes esquemas de hiperimunização empregados na produção de

soros antiofidicos pelo Instituto Butantan (1967-1979). Mem. Inst. Butanian, ^í/45:259-270, 1980/81.

1.1 Esquema empregado durante o período compreendido entre 1957

e 1962;

1.1.1 Hiperimunização de base

Eram inoculadas de 17 a 19 doses de veneno, em escala crescente,

a partir de 0,1 mg até 250,0 mg em cavalos pesando até 300 kg, em um

período de 86 dias; em cavalos pesando acima de 300 kg e até 450 kg,

inoculavam-se doses até 350,0 mg, em 93 dias e, finalmente, em cavalos

pesando acima de 450 kg, inoculavam-se doses até 450,0 mg de veneno,

em 100 dias, num total, respectivamente, de 815,8 mg, 1.165,8 mg e

1.615,8 mg. Os intervalos, entre uma dose e a seguinte, variavam de

4 a 7 dias.

Um adjuvante oleoso era adicionado, a partir da 12.^ dose, de forma

alternada.

1.1.2 Reimunização

Trinta dias após o último dia de sangria referente à hiperimunização

de base, os cavalos eram retomados, de acordo com o seguinte esquema

de doses: iniciava-se a reimunização com uma dose de 30,0 mg de veneno,

progredindo até a dose de 250,0 mg em cavalos pesando até 300 kg, em

um período de 31 dias, num total de 790,0 mg; até a dose de 300,0 mg

nos cavalos pesando acima de 300 kg a 450 kg, durante 38 dias, num

total de 1.090,0 mg e, finalmente, até a dose de 450,0 mg nos cavalos

pesando acima de 450 kg durante 45 dias, num total de 1.540,0 mg de

veneno.

Os intervalos observados entre as doses variavam de 5 a 7 dias.

O adjuvante era o mesmo da hiperimunização de base, adicionado

a doses alternadas a partir da segunda.

Via de inoculação: Foi sempre utilizada a via subcutânea, em um

só ponto para cada dose, na região dorsal dos animais.

Sangria de prova: Tanto na hiperimunização de base quanto na

reimunização, as sangrias de prova eram realizadas sete dias após a

penúltima inoculação de veneno, momentos antes da aplicação da última

dose.

Sangrias finais: Efetuadas sete dias após a última dose de antígeno

e representava, tanto após a hiperimunização de base quanto na

reimunização, na coleta de um volume de sangue correspondente a 5%

do peso do animal, dividida em três parcelas com intervalo de 48 horas

entre uma e outra.

1.2 Esquema empregado durante o período compreendido entre os anos

de 1963 e 1971:

1.2.1 Hiperimunização de base

Eram inoculadas de 14 a 15 doses de veneno, em escala crescente,

a partir de 1,0 mg até 350,0 mg, ou até a dose de 450,0 mg em cavalos

que não respondiam com títulos neutralizantes satisfatórios, durante um

período de 91 a 98 dias, num total de 1.190,0 mg ou.de até 1.614,0 mg

de veneno.

261

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ROLIM-ROSA, R.; VIEIRA, E. G. J.; SILES VILLARROEL, M.; SIRACUSA, Y. Q. & IIZUKA. II.

Análise comparativa sobre os diferentes esquemas de hiperimunização empregados na produção de

soros antiofídicos pelo Instituto Butantan (1957>1979). Mem. Inat. Butantan, 4^/i5:259-210, 1980/81.

Os intervalos observados entre as doses variavam de 4 a 7 dias.

O mesmo adjuvante oleoso, utilizado no primeiro esquema, era adicio¬

nado, em doses alternadas, a partir da 6.^.

1 .1.2 Reimunização

Trinta dias após o último dia da sangria final referente à hiperimuni¬

zação de base, os animais eram reimunizados de acordo com a seguinte

escala de doses: 100,0 mg, 200,0 mg e 300,0 mg, juntando-se o adjuvante

oleoso apenas à segunda dose.

Os intervalos entre as inoculações eram de sete dias.

Via de inoculação do veneno, sangrias de prova e finais eram as

mesmas descritas no esquema referente ao período anterior.

1.3 Esquema empregado durante o período compreendido entre os anos

de 1972 e 1974:

1.3.1 Hiperimunização de base

Eram inoculadas 12 doses de veneno, a partir de 1,0 mg até

180,0 mg, em um período de 77 dias, empregando um total de antígeno

de 564,0 mg, com exceção dos venenos crotálico e elapídico, os quais

eram inoculados em 16 doses, a partir de 0,1 mg até 170,0 mg, durante

um período de 105 dias e consumindo um total de 508,3 mg de veneno.

Os intervalos mantidos entre as doses eram, regularmente, de 7 dias.

Como adjuvante introduzimos o alginato de sódio, em solução a

2 %, adicionado a todas as doses de veneno.

1.3.2 Reimunização

Os cavalos eram reimunizados 30 dias após o último dia da sangria

final, de acordo com o seguinte esquema de doses: 20,0, 40,0, 80,0 e

160,0 mg, com intervalos de 7 dias entre as mesmas.

A todas as doses, era adicionado alginato de sódio, como na hiperi¬

munização de base.

Via de inoculação dos venenos, sangrias de prova e sangrias finais,

como nos períodos anteriores.

1.4 Esquema empregado durante o período compreendido entre os anos

de 1975 e 1979:

1.4.1 Hiperimunização de base

Eram inoculadas 5 doses de veneno, num total de 16,0 mg, sendo a

primeira dose constituída de 5,0 mg de veneno mais adjuvante de Freund

completo; a segunda dose constituída de 5,0 mg de veneno mais adjuvante

de Freund incompleto e as três últimas doses eram preparadas apenas

com a solução de veneno, sendo 2,0 mg cada, num período de 18 dias,

sendo os intervalos de 7 dias entre as três primeiras doses e de dois

dias entre as demais.

1.4.2 Reimunização

Após um período de descanso de 30 dias, a contar do último dia

da sangria final, os animais eram retomados recebendo, nesta fase.

262

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ROLIM-ROSA, R.; VIEIRA, E. G. J.; SILES VILLARROEL, M.: SIRACUSA, Y. Q. & IIZUKA. H.

Análise comparativa sobre os diferentes esquemas de hiperimunização empregados na produção de

soros antiofídicos pelo Instituto Buthntan (1957-1979). Mem. Inat, Butantan, ^4/^5:259-270, 1980/81.

apenas 3 doses de imunógeno sem adjuvante, correspondendo a alíquotas

de 2,0 mg de veneno.

Os intervalos entre as inoculações eram de 48 horas.

Via de inoculação : A via de inoculação, a exemplo dos esquemas

anteriores, era a subcutânea, sendo que na hiperimunização de base cada

uma das duas primeiras doses era injetada em oito pontos diferentes

do dorso do animal, enquanto as três últimas eram aplicadas em

torno dos granulomas formados pelas duas primeiras. Estas inoculações

eram efetuadas em três etapas com duas horas de intervalo.

Sangria de prova; Era realizada sete dias após a injeção da última

dose de antígeno.

Sangria final: Era processada dez dias após a última inoculação

de veneno e consistia na coleta de um volume de sangue correspondente

a 3% do peso do cavalo, realizada em duas etapas com intervalo de

48 horas.

2. Métodos de doseamentos:

As titulações dos soros anticrotálico e antielapídico, nas sangrias

de prova, eram feitas pelo método de Dean & Webb variando-se a

quantidade de veneno e mantendo-se constante o volume de soro. Os

imunessoros antibotrópicos e antilaquético o foram pelo método de Vital

Brazil *.

Após a concentração e purificação dos antivenenos pelo método de

Pope®'"’, modificado por Furlanetto® (1961), a titulação dos mesmos

era realizada pelo método de Vital Brazil.

Títulos mínimos requeridos nas sangrias de prova, para a sangria final;

Soros

1957/1974

1975/1979

Anticrotálico

0,2 mg/ml

0,5 mg/ml

Antibotrópico

0,6 mg/ml

1,0 mg/ml

Antiofídico

0,2 mg/ml ♦

0,6 mg/ml **

0,3 mg/ml *

1,0 mg/ml **

Antielapídico

0,2 mg/ml

0,3 mg/ml

Antilaquético

0,6 mg/ml

1,0 mg/ml

* Fração anticrotálica

** Fração antibotrópica

O soro antilaquético passou a ser produzido regularmente, a partir

da década de 60.

RESULTADOS

As tabelas 1 e 2 consubstanciam os resultados referentes ao consumo

de venenos para a produção de cinco imunessoros, nos quatro diferentes

períodos analisados, traduzindo em percentuais os miligramas empregados

na hiperimunização de base e na reimunização.

263

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ROLIM-ROSA, R.; VIEIRA, E. G. J.; SILES VILLARROEL, M.; SIRACUSA. Y. Q. & IIZUKA. H.

Análise comparativa sobre os diferentes esquemas de hiperímunização empregados na produção de

soros antiofídicos pelo Instituto Butantan (1957-1979). Mem. Inst. Butantan, ^í/45:259-270, 1980/81.

TABELA 1

Quantidades de venenos, em miligramas, e respectivos percentuais correspondentes

aos quatro esquemas de hiperimunização utilizados durante os períodos de 1957-1962,

1963-1971, 1972-1974 e 1975-1979.

Hiperimunização de base

Serviço

1957-1962

1963-1971

1972-1974

1975-1979

Venenos

em mg

Venenos

em mg

% *

Venenos

em mg

% *

Venenos

em mg

% *

Botrópico

1615,8

100

1614

99,89

564

34,91

0,99

Crotálico

1615,8

100

1614

99,89

508

31,46

0,99

Ofídico

1614,0

100

1614

100,00

564

34,94

0,99

Elapídico

1615,8

100

1614

99,89

508

31,46

0,99

Laquético

—

1614

100,00

564

34,94 *♦

0,99 **

* Percentagens em relação ao primeiro período (1957-1962)

** Percentagens em relação ao segundo período (1963-1971)

TABELA 2

Quantidades de venenos, em miligramas, e respectivos percentuais correspondentes

aos quatro esquemas de reimunização utilizados durante os períodos de 1957-1962,

1963-1971, 1972-1974 e 1975-1979.

Reimunização

Serviço

1957-1962

1963-1971

1972-1974

1975-1979

Venenos

em mg

Venenos

em mg

% *

Venenos

em mg

% *

Venenos

em mg

% *

Botrópico

1540

100

600

38,96

300

19,48

0,39

Crotálico

1540

100

600

38,96

300

19,48

0,39

Ofídico

1640

100

600

38,96

300

19,48

0,39

Elapídico

1640

100

600

38,96

300

19,48

0,39

Laquético

—

600

100,00

300

50,00 *♦

1,00 **

* Percentagens em relação ao primeiro período (1957-1962)

Percentagens em relação ao segundo período (1963-1971)

As Tabelas 3 e 4 apresentam resultados referentes ao número de

dias requeridos para as hiperimunizações de base e para as reimunizações,

com respectivos percentuais, nos quatro diferentes períodos estudados.

264

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10 11 12 13 14 15 16

ROLIM-ROSA. R.; VIEIRA, E. G. J.; SILES VILLARROEL. M.; SIRACUSA, Y. Q. & IIZUKA. 11.

Análise comparativa sobre os diferentes esquemas de hiperimunização empregados na produção de

soros antiofídicos pelo Instituto Butantan (1967-1979). Mem. Inst. Butantan, 44/^5:259-270, 1980/81.

TABELA 3

Número de dias e respectivos percentuais, necessários para a hiperimunização de

base, correspondentes aos quatro períodos de 1957-1962, 1963-1971, 1972-1974 e

1975-1979.

Hiperimunização de base

Serviço

1957-1962

1963-1971

1972-1974

1975-1979

n.° de

dias

n.° de

dias

% *

n.° de

dias

% *

n.° de

dias

% *

Botrópico

100

77,0

18,0

Crotálico

100

77,0

18,0

Ofídico

100

77,0

18,0

Elapídico

100

77,0

18,0

Laquético

—

100

78,6 **

18,4 **

* Percentagens em relação ao primeiro período (1957-1962)

** Percentagens em relação ao segundo período (1963-1971)

TABELA 4

Número de dias e respectivos percentuais, necessários para a reimunização,

correspondentes aos quatro períodos de 1957-1962, 1963-1971, 1972-1974 e 1975-1979.

Reimunização

Serviço

1957-1962

1963-1971

1972-1974

1975-1979

n.° de

dias

n.° de

dias

% *

n.° de

dias

% *

n.° de

dias

% *

Botrópico

100

31,10

46,70

8,9

Crotálico

100

31,10

46,70

8,9

Ofídico

100

31,10

46,70

8,9

Elapídico

100

31,10

46,70

8,9

Laquético

—

100,00

150,00 **

28,6 **

* Percentagens em relação ao primeiro período (1957-1962)

** Percentagens em relação ao segundo período (1963-1971)

As figuras 1 e 2 sintetizam as quantidades de venenos utilizadas

quatro esquemas de hiperimunização e de reimunização, respectiva-

mente, referentes aos períodos: 1957-1962, 1963-1971, 1972-1974 e

1975-1979.

265

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KOLIM-ROSA, n.; VIEIRA, E. G. J.; SILES VILLARROEL, M.; SIRACUSA, Y. Q. & IIZUKA. H.

Análise comparativa sobre os diferentes esquemas de hiperimunizaçáo empregados na produção de

soros antiofídicos pelo Instituto Butantan (1967-1979). Mem. Inst. Butantan, íí/45:259-270, 1980/81.

Fisf. 1 — Quantidades de venenos, em miligramas, utilizadas na hiperimunizaçáo de um eqüídeo, em quatro

diferentes períodos.

266

2 3

SciELO

10 11 12 13 14 15 16

KOLIM-ROSA, R.: VIEIRA, E. G. J.; SILES VILLARROEL, M.; SIRACUSA, Y. Q. & IIZUKA. H.

Análise comparativa sobre os diferentes esquemas de hiperimunização empregados na produção de

soros antiofídicos pelo Instituto Butantan (1957-1979). Mem. Inst. Butantan, 4^/45:259-270, 1980/81.

diferentes períodos.

267

2 3

SciELO

10 11 12 13 14 15

ROLIM-ROSA. R.; VIEIRA, E. G. J.; SILES VILLARROEL, M.; SIRACUSA, Y. Q. & IIZUKA. II.

Análise comparativa sobre os diferentes esquemas de hiperimunizaçáo empregados na produção de

soros antiofídicos pelo Instituto Butantan (1957-1979). Mem. Inst. Butanian, ^///45:259-270, 1980/81.

DISCUSSÃO

Os resultados demonstram, claramente, as diminuições progressivas

das necessidades de venenos ofídicos e dos prazos requeridos para a

produção dos soros antiofídicos, no Instituto Butantan.

Durante o período de 1957 a 1962, as quantidades de venenos neces¬

sárias para hiperimunizar eqüídeos variavam em função do peso do

animal. Iniciavam-se com a dose de 0,1 mg e terminavam, nos cavalos

pesando acima de 450 kg, com a dose de 450,0 mg de veneno, num prazo

de 100 dias. A reimunização era efetuada com quantidade de veneno

muito próxima da primeira hiperimunização, num prazo equivalente à

metade daquele observado anteriormente.

De 1963 a 1971, embora o dispêndio de venenos e tempo para a hipe¬

rimunização de base fossem praticamente iguais ao do primeiro período

referido acima, a reimunização passou a ser realizada com menos da

metade de antígeno e o tempo, de 45 dias, foi reduzido para 14.

O adjuvante utilizado nesses dois citados períodos, isto é, 1957-62

e 1963-71, era constituído de uma mistura oleosa, à base de óleo vegetal,

misturado às últimas doses de venenos, alternadamente. Também os

títulos considerados mínimos satisfatórios eram os mesmos, isto é; 0,2

mg/ml nas sangrias de prova dos serviços anticrotálico e antielapídico,

dosados por floculação, e 0,6 mg/ml para os serviços antibotrópico, anti-

laquético e para a fração antibotrópica do soro antiofídico.

Um novo adjuvante, solução de alginato de sódio a 2%, utilizado

a partir de 1972 até 1974, permitiu que o gasto de veneno, por animal,

representasse menos da metade daquele referente aos períodos anteriores

quando da primeira hiperimunização e, justamente a metade quando da

reimunização; todavia, nesta, o prazo aumentou de 14 para 21 dias. Os

títulos considerados satisfatórios eram os mesmos exigidos nos períodos

anteriores.

A partir de 1975, passamos a empregar o adjuvante de Freund

completo misturado à primeira dose, incompleto à segunda e às três

últimas doses, apenas a solução de veneno. A reimunização era realizada

apenas com três doses idênticas às últimas da primeira hiperimunização.

Este processo propiciou marcante economia de venenos ofídicos e de

tempo para a produção dos antivenenos. Em relação aos primeiros dois

métodos, a quantidade de veneno passou a ser, aproximadamente, cem

vezes menor e o tempo, cerca de cinco vezes menos. Este fato assumiu

características mais flagrantes quando da reimunização dos animais.

As quantidades de veneno utilizadas foram cerca de 250 vezes menores

(1.540,0 mg e 6,0 mg, respectivamente). Em conseqüência, foram obtidas

consideráveis economias de venenos, de tempo e maior rendimento dos

animais soro-produtores. Paralelamente, foi observada acentuada dimi¬

nuição das reações locais, nos pontos de inoculação dos antigenos: não

mais ocorreram grandes abscessos e necroses de pele e tecidos subja¬

centes, como eram relativamente comuns nos períodos anteriores, fatores

responsáveis pelos frcqüentes atrasos nas hiperimunizações.

Os títulos mínimos considerados satisfatórios, após a introdução do

adjuvante de Freund, passaram a ser 0,5 mg/ml nas sangrias de prova

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nOLIM-ROSA. R.: VIEIRA, E. G. J.; SILES VILLARROEL, M.; SIRACUSA, Y. Q. & IIZUKA. H.

Análise comparativa sobre os diferentes esquemas de hiperimunização empresados na produção de

soros antiofídicos pelo Instituto Butantan (1957-1979). Mcm. Inat. Butantan, 4</í5:259-270, 1980/81.

do serviço anticrotálico, 0,3 mg/inl no serviço antielapídico, 0,3 mg/ml

na fração anticrotálica do soro antiofídico e 1,0 mg/ml para os serviços

antibotrópico, antilaquético e na fração antibotrópica do soro antiofidico.

Por outro lado, quando comparativamente utilizamos o esquema de

hiperimunização adotado pelo Departamento de Sueros Hiperiramunes,

dei Instituto Nacional de México ®, não obtivemos, com os venenos por

nós utilizados, imunessoros com títulos satisfatórios, aferidos pelas téc¬

nicas observadas pelo Instituto Butantan.

CONCLUSÕES

1. Dentre os três adjuvantes utilizados pelo Instituto Butantan,

ou sejam mistura oleosa, alginato de sódio e adjuvante de

Freund, este último ofereceu melhores e mais significativas

conveniências na produção de soros antiofídicos;

2. o adjuvante de Freund propiciou uma economia de venenos da

ordem de cem vezes, em relação ao processo de hiperimunização

de eqüídeos anticrotálica, antibotrópica, antilaquética e antiela-

pídica, empregado de 1957 a 1971;

3. 0 tempo necessário para a hiperimunização de base com o adju¬

vante de Freund, foi cerca (ie seis vezes menor em relação ao

tempo requerido nos períodos de 1957-62 e 1963-71 e de cerca

de (lez vezes na reimunização;

4. as quantidades de venenos utilizadas para as reimunizações,

com 0 adjuvante de Freund, foram cerca de 250 vezes menores

em relação ao emprego de venenos do período 1957-62;

5. os títulos mínimos satisfatórios foram ampliados, após o uso

do adjuvante de Freund.

ABSTRACT: In the course of 22 years (1957-1979), the Instituto

Butantan adopted 4 mcthods for the hyperimmunization of equines,

differing among thcmselves as to doses, and three methods as to

doses and adjuvant: vegetal oil, natrium alginate and Freund’s

adjuvant respectively. During the last observation period, i.e.,

1975-1979, the introduction of Preund’s adjuvant, complete and

incomplete, into the immunogenic mixturo, reduced about 99% the

venom quantity to be applied, and about 80% of the time necessary

for the production of immune sera with titers higher than those

obtained before.

KEYWORDS: Antiophidic sera. Methods for equine hiperimmu-

nization. Freund’s adjuvant in the equine hiperimmunization.

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soros antioffdicos pelo Instituto Butantan (1967-1979). Mem. Inst. Butantan, .4.1/^5:269-270, 1980/81.

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270

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Mem. ÍTist. Butantan

4í/íJ:271-279, 1980/81

VERIFICAÇÃO DA ATIVIDADE TÓXICA DE VENENOS

CROTÁLICOS E DA CAPACIDADE NEUTRALIZANTE

DOS ANTIVENENOS ESPECÍFICOS, EM CAMUNDONGOS

Medardo SILES VILLARROEL >

Raymundo ROLIM ROSA ^

Flávio ZELANTE3

Walter BANCHER «

Helena Maria PIOTO ^

RESUMO: Os autores compararam, em camundongos, a eficiência

das vias intraperitoneal e intravenosa na determinação da atividade

tóxica de venenos crotálicos crotamino-positivos e crotamino-negati-

vos. Verificaram a validade do uso de ambas as vias, tendo a intra¬

peritoneal se revelado mais sensível. O mesmo modelo experimental

demonstrou ser eficiente para o doseamento dos antivenenos específi¬

cos, não sendo observadas diferenças relativas às vias de inoculação.

Todavia, nas reações cruzadas, o antiveneno crotálico crotamino-posi-

tivo demonstrou maior capacidade neutralizante do que o crotamino-

-negativo. Este fato sugero o emprego do veneno crotamino-positivo

para o preparo e doseamento dos antivenenos de Crotalus durisstes

terri/icus do Brasil.

PALAVRAS-CHAVE: Venenos e antivenenos crotálicos

ção de venenos e antivenenos, em camundongos.

Titula-

INTRODUÇÃO

A atividade do veneno crotálico, predominantemente neurotóxica e

nefrotóxica ainda é determinada, segundo preconiza a Farmacopéia

Brasileira^ (1977), pelo método de Vital Brazil “ (1907). Conseqüente-

!• Professor Livre Docente do Departamento de Microbiologia e Imunoloiíia do Instituto de Ciências

Biomédícas da Universidade de São Paulo.

2. Diretor do Serviço de ImunoloKÍa do Instituto Butantan, Professor Assistente Doutor do Departamento

do Microbiolopia e Imunolopria do Instituto de Ciências Biomédicas da Universidade de São Paulo.

3. Professor Titular do Departamento de Microbiologia e Imunologia do Instituto de Ciências Biomédicas

da Universidade de São Paulo.

4. Profes.sor Assistente Doutor do Departamento de Microbiologia e Imunologia do Instituto de Ciências

Bioméilicas da Universidade de São Paulo.

6. Técnica de Laboratório do Departamento de Microbiologia e Imunologia do Instituto de Ciências

Biomédicas da Universidade de São Paulo.

Endereço para correspondência: Cai.xa Postal 65 — São Paulo — Brasil.

271

SciELO

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SILES VILLARROEL. M.; ROLIM-ROSA. R.; ZELANTE, F.; BANCHER, W. & PIOTO, H. M.

Verificação da atividade tóxica de venenos crotálicos e da capacidade neutralizante doa antivenenos

específicos, em camundongos. Mem. Inst. Butantan, í^/^5:271-279, 1980/81.

mente, o mesmo critério é aplicado para a titulação do antiveneno

respectivo.

Siles Villarroel “ (1977), Siles Villarroel e cols. trabalhando

com venenos botrópicos e elapídicos, propuseram a substituição daquele

método, demonstrando as vantagens do emprego do camundongo e das

vias intraperitoneal e intravenosa, conforme o caso, para as inoculações.

Em relação ao veneno crotálico, algumas observações já foram

realizadas por Kocholaty e cols.® (1968) e Kocholaty e cols.’ (1971),

que utilizaram camundongos e as vias intraperitoneal e intravenosa, para

a inoculação de venenos de C. durissiis durissus e C. dicríssus terrificus.

Concluíram que a via intraveno.sa revela melhor ação do veneno do que

a intraperitoneal. Por outro lado, Bolanos ‘ (1972), verificando a

toxicidade do veneno de Crotalus durissus durissus da América Central,

também utilizou camundongos e aquelas duas vias de inoculação.

Observou, ao contrário, que a via intraperitoneal evidencia maior

suscetibilidade do animal ao veneno inoculado.

Aparentemente, existe uma discrepância entre os dois resultados;

todavia, em seus trabalhos, esses autores não forneceram maiores

informações sobre a composição do veneno empregado.

Rohm Rosa e cols.® (1973), entre nós, empregaram camundongos

que receberam veneno de Crotalus durissus terrificus, crotamino-positivo,

pela via intravenosa. A crotamina confere ao veneno crotálico crotamino-

-positivo, propriedades bioquímicas e farmacológicas diferentes daquele

negativo, estando esta diferença de composição diretamente relacionada

com a distribuição geográfica das serpentes.

Na ausência de informações a respeito, procuramos verificar se

ocorrem vaiuações na toxicidade dos dois tipos de venenos de Crotalus

durissus terrificus — crotamino-positivo e crotamino-negativo — segundo

as vias de inoculação. Como observações complementares, aplicamos,

também, o mesmo modelo experimental para o doseamento dos antivenenos

específicos e nas reações de neutralização cruzada.

MATERIAL E MÉTODOS

Veneno crotálico

Foram utilizados venenos de serpentes Crotalus durissus terrificus

(Laurenti 1768), crotamino-positivos e crotamino-negativos, obtidos por

extração manual de diversos animais adultos, dessecados à vácuo e

mantidos em geladeira a ± 4”C. Quando de seu emprego, foram feitas

soluções concentradas a 1% em solução de NaCl a 0,85% das duas espécies

de venenos. A partir destas, foram preparadas todas as demais diluições

utilizadas nos ensaios.

Prova para a detecção de crotamina

A crotamina foi verificada conforme Schenberg(1959), através

de prova “in vivo”.

272

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SILES VILLARROEL, M.; ROLIM-ROSA, R.; ZELANTE, F.; BANCHER, W. & PIOTO, H. M.

Verificação da atividade tóxica de venenos crotálicos e da capacidade neutralizante dos antivenenos

específicos, em camundongos. Mem. Jnst. Dutantarit 4^/^5:271-279, 1980/81.

Antiveneno crotâlico

Os antivenenos específicos, obtidos em cavalos hiperimunizados pela

primeira vez, foram purificados e concentrados segundo o método de

Pope modificado * e utilizados obedecendo aos critérios adotados em

trabalhos anteriores

Animais utilizados

Foram utilizados camundongos brancos (Miis musculus Linnaeus,

1758), pesando 20,0 g ± 2,0 g, procedentes do Biotério do Instituto de

Ciências Biomédicas da USP, que receberam inoculações pelas vias

intravenosa e intraperitoneal, num volume de 0,5 e 1,0 ml, respectivamente.

Em todos os ensaios, foram utilizados lotes de seis animais por dose,

sem distinção de sexo. Após as inoculações, esses animais foram

observados aos 10, 30 e 60 minutos, às 24 e 48 horas. A toxicidade dos

venenos foi determinada em termos de DL.-,o, segundo o método de Reed

& Müench» (1938).

RESULTADOS

Para facilitar a realização dos ensaios, previamente foram deter¬

minadas as zonas de toxicidade dos venenos crotamino-positivos e

crotamino-negativos, inoculados pelas vias intravenosa e intraperitoneal.

De posse desses informes, foram, então, determinadas as respectivas

DLr.o. As tabelas 1 e 2 apresentam os resultados observados com o veneno

crotamino-positivo, quando inoculado pelas vias intravenosa e intrape¬

ritoneal, respectivamente.

TABELA 1

Determinação da DL» do veneno de Crotalus dnrissus terrificus (crotamino-positivo)

inoculado, pela via intravenosa (0,5 ml), em camundongos.

Tempos de

observação

Doses

em microgramas

2,40

2,88

3,46

4,15

5,00

6,00

DLr,„

30 minutos

0/6

60 minutos

0/6

24 horas

0/6

3/6

4/6

6/6

3,67 US

48 horas

0/6

3/6

4/6

—

3,67 (JLg

TABELA 2

Determinação da DL™ do veneno de Crotalus durissus terrificus (crotamino-positivo)

inoculado, por via intraperitoneal (0,5 ml), em camundongos.

Doses em microgramas

observação

2,00

2,60

3,38

4,39

5,71

DL.0

30 minutos

0/6

60 minutos

0/6

24 horas

1/6

4/6

6/6

3,01 fíg

48 horas

1/6

4/6

—

3,01 /xg

273

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SILKS yrU.ARROEL, M.: ROLIM-ROSA. R.: ZELANTE. F.; BANCIIER, W. & PIOTO, H. M.

Verificação da atividade tóxica de venenos crotálicos e da capacidade neutralizante dos antivenenos

específicos, em camundongos. Mem. Inst. Uutantan, í4/í5:271-279, 1980/81.

As tabelas 3 e 4 apresentam os resultados observados para o veneno

de Crotalus durissus terrificus, crotamino-negativo, também inoculado

pelas duas vias.

TABELA 3

Determinação da DLr,,i do veneno de Crotalus durissus terrificus (crotamino-negativo)

inoculado, pela via intravenosa (0,5 ml), em camundongos.

Tempos de

observação

Doses

em microgramas

2,40

2,88

3,46

4,15

5,00

6,00

DL.-,„

30 minutos

0/6

60 minutos

0/6

24 horas

0/6

1/6

2/6

5/6

6/6

3,63 /xg

48 horas

0/6

1/6

2/6

5/6

—

3,63 /xg

TABELA 4

Determinação da DL™ do veneno de Crotalus durissus terrificus (crotamino-negativo)

inoculado, pela via intraperitoneal (0,5 ml), em camundongos.

Tempos de

observação

Doses

em microgramas

1,56

2,00

2,60

3,38

4,39

5,71

DD,„

30 minutos

0/6

60 minutos

0/6

24 horas

0/6

3/6

4/6

5/6

6/6

2,60 /xg

48 horas

0/6

3/6

4/6

5/6

—

2,60 /xg

As tabelas 5 e 6 referem-se aos doseamentos dos antivenenos

crotamino-positivos e, as tabelas 7 e 8, aos antivenenos crotamino-nega-

tivos, inoculados pelas vias intravenosa e intraperitoneal, respectiva¬

mente.

TABELA 5

Doseamento do antiveneno crotamino-positivo de Crotalus durissus terrificus (0,25 ml),

aferido frente ao veneno específico (DD,o = 3,67 /xg); mistura inoculada, pela via

intravenosa (0,5 ml), em camundongos.

Veneno de C.

d. terrificus

Sol. salina

Incubação

Tempos de observação

24 h

48 h

0,1

0,01

0,24

Q70P

0/6

0,2

0,02

0,23

0/6

0/6 *

0,3

0,03

0,22

2/6

0,4

0,04

0,21

3/6

0,5

0,05

0,20

30 mm.

4/6

5/6

Título: 1 ml de antiveneno crotamino-positivo de C. d. terrificus neutraliza

completamente 1,6 mg ou 436,0 DLs» do veneno específico.

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SILES VILLARROEL. M.; ROLIM-ROSA. R.; ZELANTE, F.; BANCHER, W. & PIOTO, H. M.

Verificação da atividade tóxica de venenos crotálicos e da capacidade neutralizante dos antivenenos

específicos, em camundongos. Mcm. Inst. Butantan, ^.4/^5:271-279, 1980/81.

TABELA 6

Doseamento do antiveneno crotamino-positivo de Crotalus durissus terrificus (0,5 ml),

aferido frente ao veneno específico (DL5o= 3,01 p.g); mistura inoculada pela via

intraperitoneal (1,0 ml), em camundongos.

Veneno de C.

d. terrificus

Sol. salina

Incubação

Tempos de observação

24 h

48 h

0,3

0,03

0,47

0/6

0,4

0,04

0,46

0/6

0/6 *

0,5

0,05

0,45

2/6

0,6

0,06

0,44

3/6

0,7

0,07

0,43

30 min.

4/6

* Título: 1 ml de antiveneno crotamino-positivo de C. d. terrificus neutraliza

completamente 1,6 mg ou 631,5 DL-,o do veneno específico

TABELA 7

Doseamento do antiveneno crotamino-negativo de Crotalus durissus terrificus (0,25 ml),

aferido frente ao veneno específico (DLr,o= 3,63 fxg) ; mistura inoculada, pela via

intravenosa (0,6 ml), em camundongos.

Veneno de C.

d. terrificus

Sol. salina

Incubação

Tempos de observação

24 h

48 h

0,2

0,02

0,23

37°C

0/6

0,3

0,03

0,22

0/6

0/6 *

0,4

0,04

0,21

5/6

6/6

0,5

0,05

0,20

30 min.

6/6

0,6

0,06

0,19

6/6

—

* Título: 1 ml de antiveneno crotamino negativo de C. d. terrificus neutraliza

completamente 2,4 mg ou 661,2 DL™ do veneno específico.

TABELA 8

Doseamento do antiveneno crotamino-positivo de Crotalus durissus terrificus (0,5 ml),

aferido frente ao veneno específico (DL7,o= 2,60 p.g); mistura inoculada, pela via

intraperitoneal (1,0 ml), em camundongos.

Veneno de C.

d. terrificus

Sol. salina

Incubação

Tempos de observação

24 h

48 h

0,5

0,05

0,45

3VOC

0/6

0,6

0,06

0,44

0/6

0/6 *

0,7

0,07

0,43

1/6

2/6

0,8

0,08

0,42

30 min.

5/6

0,9

0,09

0,41

5/6

6/6

Título: 1 ml de antiveneno crotamino-negativo de C. d. terrificus neutraliza

completamente 2,4 mg ou 923,0 DLr.» do veneno específico.

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SILES VILLARROEL, M.: ROLIM-ROSA. R.; ZELANTE, F.; BANCHER. W. & PIOTO. H. M.

Verificação da atividade tóxica de venenos crotálicos e da capacidade neutralizante dos antivenenos

específicos, em camundongos. Mem. Inat. Butantan, ^4/^5:271-279, 1980/81.

Com 0 objetivo de estabelecer análises comparativas entre as

capacidades neutralizantes dos dois antivenenos, foram conduzidos os

ensaios de neutralização cruzada constantes das tabelas 9 e 10.

TABELA 9

Doseamento do antiveneno crotamino-positivo de Crotalus durissus terrificus (0,25 ml),

aferido frente ao veneno crotamino-negativo de C. d. terrificus (DLir,i,= 3,63 /^g);

mistura inoculada, pela via intravenosa (0,6 ml), em camundongos.

Veneno de C.

d. terrificus

Sol. salina

Tempos de observação

Incubação

24 h

48 h

0,4

0,04

0,21

370c

0/6

0,5

0,05

0,20

0/6

0,6

0,06

0,19

0/6

0/6 *

0,7

0,8

0,07

0,08

0,18

0,17

30 min.

6/6

* Título: 1 ml de antiveneno crotamino-positivo de C. d. terrificus neutraliza

completamente 4,8 mg ou 1.322,3 DLso do veneno crotamino-negativo

de C. d. terrificus

TABELA 10

Doseamento do antiveneno crotamino-negativo de Crotalus durissus terrificus (0,25 ml)

aferido frente ao veneno crotamino-positivo de C, d. terrificus (DLm^: 3,67 jag);

mistura inoculada pela via intravenosa (0,5 ml), em camundongos.

Veneno de C.

d. terrificus

Sol. salina

Incubação

Tempos de observação

24 h

48 h

0,1

0,2

0,01

0,02

0,24

0,23

37°C

0/6

0/6 *

0,3

0,03

0,22

1/6

0,4

0,04

0,21

30 min.

2/6

0,6

0,05

0,20

6/6

* Título: 1 ml de antiveneno crotamino-negativo de C. d. terrificus neutraliza

completamente 1,6 mg ou 436,0 DL» do veneno crotamino-positivo de

C. d. terrificus

DISCUSSÃO

A exemplo do que demonstráramos anteriormente com relação aos

venenos botrópico e elapídico, neste trabalho constatamos que os

camundongos também se prestam, satisfatoriamente, para a determinação

da toxicidade dos venenos crotálicos.

As DL 50 determinadas através das inoculações intravenosa e intra-

peritoneal, apresentaram valores bastante próximos entre si, embora esta

última via tivesse determinado uma suscetibilidade do animal, ligeiramente

superior. A presença de crotamina, nos pareceu não influir, de forma

marcante, na atividade tóxica do veneno.

276

SILES VILLARROEL, M.; ROLIM-ROSA, R.; ZELANTE, F.; BANCIIER. W. & PIOTO, H. M.

Verificação da atividade tóxica de venenos crotálicos e da capacidade neutralizante dos antivenenus

específicos, em camundongos. Mcm. Inst. Butantan, 4^/45:211-219, 1980/81.

Em todos os ensaios realizados, as mortes ocorreram a partir de

60 minutos, evoluindo com a progressão das doses. Por outro lado, em

nenhuma oportunidade ocorreram mortes após as primeiras 24 horas.

Estas observações nos permitem recomendar o emprego de camun¬

dongos como animal de prova e as vias intravenosa e intraperitoneal,

indistintamente, como vias de inoculação para a determinação da toxici¬

dade dos venenos crotálicos, quer sejam ou não dotados de crotamina.

Para efeito de uniformidade com as observações anteriores ", seria

recomendável a adoção da via intraperitoneal.

As duas vias de inoculação também permitiram o doseamento dos

antivenenos específicos (crotamino-positivo e crotamino-negativo), sem

que fossem observadas variações entre os resultados.

Em todos os ensaios realizados, as mortes ocorreram sempre a partir

de 60 minutos da inoculação, prolongando-se até as 48 horas.

A fim de ser mantida a uniformidade de critérios e tendo em vista

estes resultados, recomendamos, também, que o período de observação

dos animais inoculados somente com o veneno, seja prolongado até as

48 horas.

Devido à equivalência constatada nos resultados das reações de

soroneutralização específica, as provas cruzadas foram realizadas apenas

através da via intravenosa.

Enquanto na reação entre veneno e antiveneno crotamino-positivo o

título neutralizante determinado foi de 1,6 mg/ml (Tabela 5), na reação

cruzada antiveneno crotamino-positivo e veneno crotamino-negativo, o

titulo neutralizante foi três vezes maior ou seja, 4,8 mg/ml (Tabela 9).

Quando comparado o resultado entre a reação do antiveneno crotamino-

-negativo e veneno específico (2,4mg/ml: tabela 7) com o resultado

da reação entre o mesmo antiveneno e o veneno crotamino-positivo,

observa-se um efeito neutralizante menor (1,6 mg/ml: tabela 10).

Estas verificações sugerem que, para efeito de preparo e doseamento

de antivenenos crotálicos, devem ser utilizados os venenos crotamino-

-positivos, visto que os imunessoros correspondentes neutralizaram,

satisfatoriamente, os venenos crotamino-negativos, enquanto que a

recíproca ocorre em sentido contrário.

CONCLUSÕES

1. É possível a determinação da atividade tóxica dos venenos de

Crotalus dunssíis terrificus, crotamino-positivo e crotamino-

-negativo, em termos populacionais, através da inoculação

intraperitoneal ou intravenosa, em camundongos;

2. o mesmo modelo experimental demonstrou ser adequado para o

doseamento dos antivenenos específicos;

3. nas reações cruzadas, o antiveneno crotamino-positivo revelou

maior título neutralizante do que o antiveneno crotamino-

-negativo.

277

SciELO

10 11 12 13 14 15

SILES VILLARROEL, M.; ROLIM-ROSA, R.: ZELANTE, F.: BANCHER, W. & PIOTO. H. M.

Verificação da atividade tóxica de venenos crotálicos e da capacidade neutrali/ante dos antivcnenos

específicos, em camundongos. Mem. Inst. Butantan, H/i5:2Tl-219, 1980/81.

ABSTRACT: The authors compare in mice the efficiency of intra-

peritoneal and intravenous routes for the determination of the

toxic activity of crotamin-positive and crotamin-negative crotalic

venoms. The validity of both routes was verificd, the intra-

peritoneal, however, proving to be more sensitive. The same expe¬

rimental model demonstratcd its efficiency in dosing specific anti-

venins, and no diffcrences were observcd in relation to the

inoculation routes. However, with cross-reaction, the crotamin-

-positive crotalic antivenin showed a higher neutralizing capacity

than the crotamin-negative one. This fact suggests the employmont

of the positive-crotamin venom for the preparation and dosing

of Brasilian Crotalxis durissus terrificus antivenin.

KEY-WORDS: Crotalic venoms and antivenins. Titration of

venoms and antivenins in mice.

REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

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278

SciELO

10 11 12 13 14 15 16

SILES VILLARROEL, M.; ROLIM-ROSA. R.; ZELANTE. F.: BANCHER, W. & PIOTO, H. M.

Verificação da atividade tóxica de venenos crotálicos e da capacidade neutralizante dos antivenenos

específicos, em camundongos. Mem. Inst. Butantan, 4^/^5:271-279, 1980/81.

15. SILES-VILLARROEL. M.; ROLIM-ROSA, R.; ZELANTE, F. & FURLA-

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trópicos, em camundongos. Mem. Inst. Butantan, 42/45:325-36, 1978/79.

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279

SciELO

10 11 12 13 14 15

Mem. Inst. Butantan

•44/-45:281-288. 1980/81

POSSIBILIDADE DA DETERMINAÇÃO DA TOXICIDADE

DO VENENO DE LACHESIS MUTA MUTA E DA

titulação do antiveneno específico, em

CAMUNDONGOS

Medardo SILES VILLARROEL’

Flávio ZELANTE

Raymundo ROLIM ROSA ***

José Luís DE LORENZO

RESUMO: Os autores testaram, em camundongos, a eficiência das

vias intraperitoneal e intravenosa, tanto para a determinação da

atividade tóxica, em termos de DLbo, do veneno de Lachesis muta

muta, como para o doseamento do antiveneno específico.

Lotes de seis animais foram inoculados, pela via intraperitoneal, com

doses crescentes de veneno, e observados apóe 10, 30, 60 minutos, 24 e

48 horas; todas as mortes ocorreram no período compreendido entre

60 minutos e 24 horas, sendo sempre proporcionais à progressão das

doses. A inoculação intravenosa, por outro lado, não proporcionou

os mesmos resultados; os animais, sem exceção, morreram durante

os primeiros 30 minutos após a inoculação.

A via intraperitoneal permitiu, também, o doseamento do antiveneno

específico, possibilitando a sua titulação em termos de mg ou de

número de DLm de veneno neutralizado por ml.

Os resultados demonstram a validade da via intraperitoneal de

camundongos como modelo experimental satisfatório para essas

finalidades.

PALAVRAS-CHAVE; Veneno de Lachesis muta muta, titulações

do veneno e do antiveneno laquético, em camundongos.

INTRODUÇÃO

Devido ao elevado número de acidentes, é grande o interesse desper¬

tado pelo estudo dos venenos e antivenenos ofídicos, sendo bastante

Drofesaor Livre Docente do Departamento de Microbiolos;ia e Imunologia do Instituto de Ciências

Liomédicas da Universidade de São Paulo.

Titular do Departamento de Microbiolo^ia e ImunoloRia do Instituto de Ciências Bio-

médicas da Universidade de São Paulo.

* Serviço de lmunoIo(?ia do Instituto Butantan. Professor Assistente Doutor do

Departamento de Microbiologia e Imunologia do Instituto de Ciências Biomédicas da Universidade

^ de São Paulo.

* Drofessor-Assistente do Departamento de Microbiologia e Imunologia do Instituto de Ciências

BiomédicaB da Universidade de São Paulo.

Endereço para correspondência: Caixa Postal 4365 — São Paulo — Brasil.

281

SciELO

10 11 12 13 14 15

SILES VILLARROEL, M.; ZELANTE, F.- ROLTM-ROSA, R. & DE LORENZO. J. L. Possibilidade da

determinação da toxicidade do veneno de Lacheais muta muta e da titulação do antiveneno específico,

em camundonífos. Mem. Inst. Butantan, ^4/-45:281-288, 1980/81.

extensa a literatura pertinente. Todavia, poucos foram os autores que

se preocuparam com a análise, “in vivo”, da ação dos venenos das espé¬

cies de Lachesis. Este aparente desinteresse possivelmente esteja rela¬

cionado com a limitada distribuição geográfica dessas serpentes encon¬

tradas apenas na América Central e na América do Sul No Brasil,

são encontradas somente na Região Amazônica e nas florestas da Ver¬

tente Atlântica Centro-Leste sendo pequeno o número de acidentes

relatados

Brazil e Rangel Pestana® (1909), testaram vários animais com as

finalidades de determinar a toxicidade dessas peçonhas e de dosar

os respectivos antivenenos; concluíram que as aves são mais sensíveis

à ação dos venenos ofídicos e adotaram, como modelo experimental, o

pombo e a via intravenosa. Foram os primeiros pesquisadores a divul¬

gar informes relativos à atividade tóxica do veneno laquético e da

ação neutralizante do antiveneno. Mais tarde, Rosenfeld (1976) des¬

creveu a sintomatologia e a evolução clínica da intoxicação laquética,

observando indivíduos que sofreram acidentes por serpentes desse gênero.

Bolanos ' (1972), estudando a toxicidade de peçonhas de serpentes

da Costa Rica, comparou a variação da atividade do veneno de Lachesis

muta stenophrys, quando inoculado pelas vias intravenosa e intraperito-

neal de camundongos. Verificou que a primeira via determinava maior

toxicidade.

Apesar da inconveniência do uso de pombos para a determinação

da toxicidade de venenos, até o presente, em nosso país, ainda é adotado

0 método proposto por Vital Brazil® (1907). Sendo a Farmacopéia Bra¬

sileira* (1977) omissa a respeito do laquético, seu doseamento é reali¬

zado a partir de inoculações intravenosas em pombo, que são observados

durante 24-48 horas, embora Siles VillarroeP® (1977) e Siles Villarroel

e cols. ’*■ tenham demonstrado que o camundongo e as vias intra-

peritoneal ou intravenosa, conforme o caso, constituem o modelo mais

adequado para ensaios com venenos e antivenenos botrópicos, elapídicos

e crotálicos.

Devido à inexistência de informações e dando continuidade às obser¬

vações anteriormente realizadas, neste trabalho os autores se propuseram

a analisar, comparativamente ao pombo, o comportamento do camun¬

dongo como animal experimental e as vias intravenosa e intraperitoneal,

como vias de inoculação para a determinação da toxicidade do veneno

da espécie Lachesis muta muta e da atiyidade neutralizante do antiveneno

específico.

MATERIAL E MÉTODOS

Veneno laquético

O veneno utilizado em todos os ensaios, foi obtido por extração

manual de várias serpentes adultas Lachesis muta muta Linnaeus, 1766,

dessecado a vácuo e, após a cristalização, mantido em geladeira, a ±

4°C. Quando do uso, foi preparada uma solução concentrada a 1% em

solução de NACl a 0,85%. A partir desta, foram preparadas todas as

demais diluições utilizadas.

282

SciELO

10 11 12 13 14 15 16

SILES VILLARROEL, M.: ZELANTE, F.- ROLIM-ROSA. R. & DE LORENZO, J. L. Possibilidade da

determinação da toxicidade do veneno de Lachcsia muta muia e da titulação do antiveneno específico,

em camundongos. Mem. Inat. Butantan, 4^/45:281-288, 1980/81.

Para as posteriores comparações, a Dose Mínima Mortal (DMM)

do veneno, determinada em pombos segundo o método de Vital Brazil,

correspondeu a 225,0 [j.g do veneno seco. Em todas as determinações

realizadas, as mortes ocorreram em até 30 minutos.

Antiveneno laquético

O antiveneno específico foi obtido através da hiperimunização de

cavalos e purificado de acordo com o método de Pope modificado ’’ (1961).

Quando da realização dos ensaios, foi diluído a 1:2 em virtude da sensi¬

bilidade apresentada pelos camundongos ao fenol, normalmente adicio¬

nado como preservador dos imunessoros purificados.

A sua atividade neutralizante, determinada em pombos (método de

Vital Brazil), foi equivalente a 1,5 mg/ml.

Animais utilizados

Foram utilizados camundongos brancos {Mus mnscidus, Linnaeus,

1758), sem distinção de sexo, adultos jovens, pesando 20 g ± 2,0 g,

procedentes do biotério do Instituto de Ciências Biomédicas da USP;

estes animais receberam inoculações pelas vias intravenosa ou intrape-

ritoneal, no volume de 0,5 e 1,0 ml, respectivamente. Foram utilizados

lotes de seis animais por dose; após as inoculações, foram observados

por um período máximo de 48 horas, com leituras parciais aos 10, 30

e 60 minutos e 24 horas.

Determinação da DL^o do veneno

Foi realizada de acordo com o método de Reed & Müench (1938).

RESULTADOS

Para possibilitar a determinação da DL^o, foi necessária a avaliação

prévia das zonas de toxicidade do veneno, inoculado tanto pela via intra¬

venosa como pela intraperitoneal. Os resultados constam das tabelas 1

í! 2, respectivamente.

TABELA 1

Peterminaçâo da zona de toxicidade do veneno de Lachesis muta muta inoculado,

pela via intravenosa (0,5 ml), em camundongos.

Tempos de

observação

Doses em microgramas

100

200

10 minutos

0/6

2/6

6/6

30 minutos

0/6

3/6

—

60 minutos

0/6

3/6

—

24 horas

0/6

3/6

—

48 horas

0/6

3/6

—

283

SciELO

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SILES VILLARROEL, M.; ZELANTE, F.. ROLTM-ROSA. R. & DE LORENZO, J. L. Possibilidade da

determinação da toxicidade do veneno de Lachesis muta muta e da titulação do antiveneno específico,

em camundongos. Mem. Iri&t. Butantan, ^4/-45:281“288, 1980/81.

TABELA 2

Determinação da zona de toxicidade do veneno de Lachesis muta muta inoculado,

pela via intraperitoneal (0,5 ml), em camundongos.

Tempos de

observação

Doses em microgramas

100

200

400

10 minutos

0/6

30 minutos

0/6

60 minutos

0/6

24 horas

0/6

6/6

48 horas

0/6

—

A partir dessas informações, foram realizados os ensaios determi¬

nantes da DL 50 , cujos resultados constam das tabelas 3 e 4.

TABELA 3

Tentativa de determinação da DLm do veneno de Lachesis muta muta inoculado,

pela via intravenosa (0,5 ml), em camundongos.

Doses em microgramas

observação

60,00

72,00

86,40

103,68

124,42

10 minutos

1/6

6/6

30 minutos

1/6

—

60 minutos

1/6

1/0

—

24 horas

1/6

—

48 horas

1/6

—

TABELA 4

Determinação da DL™ do veneno de Lachesis muta muta inoculado, pela via

intraperitoneal (0,5 ml), em camundongos.

Tempos de

observação

Doses

em microgramas

250,00

280,00

313,60

351,23

393,38

440,58

r)Lr>o

10 minutos

0/6

30 minutos

0/6

60 minutos

0/6

24 horas

0/6

3/6

4/6

5/6

6/6

295,27 MS

48 horas

0/6

3/6

4/6

5/6

—

295,27 MS

284

SciELO

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SILES VILLARROEL, M.; ZELANTE, R- ROLIM-ROSA, R. & DE LORENZO, J. L. Possibilidade da

determinação da toxicidade do veneno de Lachcsia mvta muta e da titulação do antiveneno específico,

em camundongos. Mcm. Inst. Butantan, :281-288, 1980/81.

A tabela 5 apresenta os resultados dos ensaios para a determinação

do título neutralizante do imunessoro específico, através da via

intraperitoneal.

TABELA 5

Doseamento do antiveneno de Lachesis muta muta (0,5 ml), aferido frente ao veneno

específico (DLm^ 295,27 /xg); mistura inoculada, pela via intraperitoneal (1,0 ml),

em camundongos.

Veneno de L. muta muta

Sol. salina

Incubação

Tempos de observação

24 h

48 h

1,0

0,10

0,40

37°C

0/6

1,1

0,11

0,39

0/6

0/6 ♦

1,2

0,12

0,38

1/6

1,3

0,13

0,37

2/6

3/6

1,4

0,14

0,36

30 min.

3/6

4/6

Título; 1 ml de antiveneno de L. muta muta neutraliza completamente 4,4 mg

ou 14,9 DLm do veneno respectivo.

DISCUSSÃO

Ao contrário do método de Vital Brazil, o emprego de camundongos

Que sofreram inoculações pela via intraperitoneal possibilitou a determi¬

nação da DL,r,o do veneno de Lachesis muta muta, com satisfatória repro-

dutibilidade.

Embora, em todos os ensaios realizados, o período de observação

tenha sido mantido até 48 horas, quando da inoculação intravenosa, as

niortes ocorreram, sistematicamente, dentro dos primeiros 30 minutos,

com as doses próximas ou superiores à zona de toxicidade (Tabela 3),

não permitindo a determinação da DL.-,o- Com isto, ficou evidenciado que

a inoculação intravenosa não é adequada para essa finalidade.

Ao contrário, quando o veneno foi administrado pela via intraperi¬

toneal, as mortes se sucederam somente após 60 minutos (Tabela 4),

obedecendo a uma regularidade e guardando uma relação com a progres¬

são das doses inoculadas. A DL.-,o equivalente a 295,27 pg do veneno,

correspondente à leitura de 24 horas, manteve-se para a de 48 horas,

permanecendo esta característica constante em todos os ensaios realiza¬

dos. Desta forma, torna-se desnecessária a leitura até 48 horas, redu¬

zindo 0 período de observação.

As demais vias usuais de inoculação não foram verificadas no pre¬

sente trabalho, devido às observações de outros autores, que demonstra¬

ram serem elas menos eficientes -■

Embora Bolanos ^ (1972) tenha utilizado a via intravenosa para a

determinação da DL 50 da peçonha de Lachesis muta stenoph'i'ys, os nos-

285

SciELO

10 11 12 13 14 15

STLES VILLARROEL, M.; ZELANTE, F.» ROLIM-ROSA, R. & DE LORKNZO, J. L. Possibilidade da

determinação da toxicidade do veneno de Lachesis muta muta e da titulação do nntiveneno específico,

em camundongos. Mcm. Inst. Butantan, íí/45:281-288, 1980/81.

sos resultados não podem ser cotejados devido à provável constituição

diversa do veneno analisado por aquele autor, apesar de serem produtos

de serpentes do mesmo gênero.

As mortes precoces, observadas quando da inoculação intravenosa,

possivelmente sejam devidas à somatória de diferentes atividades do

veneno, dentre as quais a coagulação intravascular constatada por Rosen-

feld em humanos, embora estes testes “in vitro” tenham demonstrado

que este veneno é dotado de fraca atividade coagulante Todavia,

Deutsch & Diniz (1955), Diniz e cols. ® (1973) e Oliveira’" (1974),

empregando o método de Ware & Seegers (1949), observaram o con¬

trário.

A DLr.o determinada nas presentes observações (295,27 (Ag), supe¬

rior à DMM verificada em pombos (225,0 [xg), demonstra que estes ani¬

mais, embora de maior porte mas morrendo dentro dos primeiros 30

minutos após a inoculação, são dotados de elevada sensibilidade ao veneno

em si ou a algum dos fatores que o constituem. A DMM, nestas condi¬

ções, não determina a real toxicidade do veneno, mas um fenômeno par¬

ticular da via de inoculação, pois o mesmo foi observado nos camundon¬

gos que sofreram inoculação pela mesma via, num determinado limiar

da progressão das doses (Tabela 3).

O mesmo modelo experimental permitiu o doseamento da potência

do antiveneno laquético específico, possibilitando expressá-la em termos

de mg de veneno ou em número de DL,-,o neutralizadas por ml. Esta

conduta, confirmando as recomendações de Bolanos ’■ ”, comportou-se de

forma semelhante à verificada com o antiveneno botrópico

Assim, a atividade tóxica responsável pelas manifestações clínicas

dos venenos de Lachesis muta viuta e das principais espécies botrópicas

do Brasil e, ainda, a capacidade neutralizante dos antivenenos específicos,

somente podem ser determinadas de forma segura, econômica e reprodu¬

tível, empregando-se a via intraperitoneal de camundongos.

CONCLUSÕES

1. A inoculação intraperitoneal em camundongos possibilitou, satis¬

fatoriamente, a determinação da DL.,o do veneno de Lachesis muta muta

e 0 doseamento do antiveneno específico;

2. ao contrário, conforme a dose, a inoculação intravenosa pro¬

moveu a morte rápida dos animais, no máximo em 30 minutos, tornando

inviáveis tais determinações.

ABSTRACT: The authors tested in mice the efficiency of intra¬

peritoneal and intravenous routes for the determination of the

toxic activity, in terms of LD»,, of Lachesis muta muta venom

as well as for the dosage of specific antivenins.

Groups of 6 animais were inoculated via intraperitoneal with

increasing doses of venom, and observed after 10, 30, and 60 min,

24 and 48 h; death ocurred between 60 min and 24 h, always

proportional to the progression of the doses. The intravenous

286

SciELO

10 11 12 13 14 15 16

SILES VILLARROEL, M.; ZELANTE, F.- ROLIM-ROSA, R. & DE LORENZO, J. E. Possibilidade rfa

determinação da toxicidade do veneno de Lachesis muta miita e da titulação do anliveneno específico,

em camundongos. Mcm. Inst. Butantan, j^Jt/i5:2S\-2S8, 1980/81.

inoculation, on the other hand, did not produce the same results;

without exception, the animais died within the first 30 min after

inoculation.

Moreover, the intraperitoneal route allowed the dosage of the

specific antivenin, granting its titration in terms of mg or the

number of LDso of neutralized venom per ml.

The results demonstrated the intraperitoneal route in mice as a

satisfactory experimental model for this purpose.

KEY-WORDS: Lachesis muta muta venom; titrations in mice of

lachesis venom, and its antivenins.

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Mcm. Inat. Butantan

•4-4A5:289-297, 1980/81

PERSPECTIVAS DE PADRONIZAÇÃO DAS TITULAÇÕES

de venenos e antivenenos elapídicos, em

CAMUNDONGOS

Medardo SILES-VILLARROEL *

Raymundo ROLIM-ROSA ♦*

Flávio ZELANTE

Elizabete Gomes JARDIM VIEIRA****

RESUMO: Os autores, utilizando venenos das espécies Micrurus

frontalis e Micrurus corallinus, demonstram que a atividade tóxica

desses venenos pode ser determinada, satisfatoriamente, através de

inoculações intravenosa e intraperitoneal em camundongos. Também

demonstram que a potência de neutralização dos imunessoros

antielapidicos obtidos em cavalos, pode ser determinada, utilizando-se

as mesmas vias de inoculação, em camundongos. Descrevem, também,

a ocorrência de neutralização cruzada entre os venenos e antivenenos

estudados.

PALAVRAS-CHAVE: Titulações de venenos e antivenenos elapí¬

dicos; neutralização cruzada entre venenos e antivenenos do gênero

Micrurus.

INTRODUÇÃO

Em trabalhos anteriores foi demonstrado que a inoculação

intraperitoneal, permite o emprego de camundongos na avaliação da

atividade tóxica de venenos e no doseamento de antivenenos botrópicos.

Quanto à titulação de venenos e antivenenos elapídicos — gênero

Micrurus — a Farmacopéia Brasileira*® (1977) é omissa. Assim, até

0 presente, essas titulações são realizadas segundo o método original de

Brazil ® (1907), à semelhança do recomendado para os venenos e anti-

* Professor Livre Docente do Departamento de Microbiologia e Imunologia do Instituto de Ciências

Biomédicas da Universidade de São Paulo.

** Diretor do Serviço de Imunologia do Instituto Butantan e Professor Assistente Doutor do Departa¬

mento de Microbiologia e Imunologia do Instituto de Ciências Biomédicas da Universidade de São

Paulo.

*** Professor Titular do Departamento de Microbiologia e Imunologia do Instituto de Ciências Biomédicas

da Universidade de Suo Paulo.

***• Assistente do Serviço de Imunologia do Instituto Butantan.

Endereço para correspondência: Caixa Postal 4365 — São Paulo — Brasil.

289

SciELO

10 11 12 13 14 15

SILES VILLARROEL, M.: ROLIM-ROSA, R.; ZELANTE, F. & VIEIRA, E. G. J. Perspectivas de

padronização das titulações de venenos e antivenenos elapidicos, cm camundongos. Mem. Inst,

Ilutantan, íí/45:289-297, 1980/81.

venenos crotálicos devido a ambos os venenos apresentarem atividade

neurotóxica

Todavia, outros pesquisadores como Cohen e cols. *• Bolanos ^

Bolanos e cols. ■*' * e Vital Brazil e cols. (1976-77) já haviam verificado

algumas das atividades biológicas desses venenos e de seus respectivos

antivenenos, inoculados pelas vias intravenosa e intraperitoneal, em

camundongos.

O Manual de Procedimentos OMS/OPS (1977) apresenta, no

capítulo atinente à produção de antivenenos, os métodos utilizados para

avaliação da toxicidade das peçonhas e potência dos antivenenos que,

em suas linhas gerais, são semelhantes aos propostos por Siles Villarroel

e cols. (1976) e Siles Villarroel ” (1977).

Ainda de acordo com recomendações contidas no Boletim da

Organização Mundial da Saúde (1981), verifica-se que as mesmas

vêm de encontro aos nossos propósitos de tentativa de padronização

de antiveneno elapídico, assim como de todos os soros antipeçonhentos

produzidos no Brasil.

No presente trabalho, adotando a mesma metodologia anteriormente

utilizada ”, os autores se propõem a avaliar a toxicidade do veneno e

a potência de antivenenos do gênero Micrurus e, paralelamente, verificar

a possível neutralização cruzada entre os venenos e antivenenos estudados.

MATERIAL E MÉTODOS

Venenos elapidicos

Foram utilizados venenos das espécies Micrurus frontalis (Duméril,

Bibron et Duméril, 1854) Micnmis corallinus (Merrem, 1820)

procedentes de várias regiões do Brasil e obtidos de diversas serpentes

adultas, por extração manual, submetidos a secagem a vácuo e, após a

cristalização, mantidos em geladeira em torno de 4°C.

As soluções de veneno foram preparadas, inicialmente, na concen¬

tração de 1%, em solução de cloreto de sódio a 0,85%. A partir destas

soluções concentradas, foram preparadas as diluições de acordo com as

necessidades dos experimentos.

Antivenenos elapidicos

Os antivenenos específicos monovalentes, obtidos mediante hiperi-

munização de cavalos, foram concentrados e purificados segundo o

método de Pope modificado ” (1961). Em todos os ensaios, os imunessoros

utilizados foram diluídos a 1:2, devido à sensibilidade dos camundongos

ao agente preservativo (fenol), normalmente adicionado aos antivenenos

purificados ”.

Animais utilizados

Foram utilizados camundongos brancos (Mus musculvs Linnaeus,

1758), de ambos os sexos, adultos jovens pesando entre 18 e 22 g,

procedentes do biotério do Instituto de Ciências Biomédicas da Univer-

290

SciELO

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SILES VILLARROEL. M.; ROLIM-ROSA. R.: ZELANTE, F. & VIEIRA, E. G. J. Perspectivas de

padronização das titulações de venenos e antivenenos elapidicos, em camundongos. Mem. Inst.

Ilutantan, ii/i5:ZS9-291, 1980/81.

sidade de São Paulo, inoculados pela via intravenosa ou intraperitoneal,

no volume de 0,5 e 1,0 ml, respectivamente, para cada dose. Em todos

os ensaios, foram sempre utilizados lotes de seis animais por dose. Após

a inoculação, os camundongos foram observados por um período máximo

de 48 horas, com observações parciais de 30 e 60 minutos, 24 e 48 horas.

Cálculo ãa DL50

A atividade tóxica dos venenos foi determinada através do método

de Reed e Müench(1938).

RESULTADOS

A partir das soluções de veneno a 1%, foram avaliadas as zonas

de toxicidade, necessárias para a determinação das respectivas DL50.

As tabelas de 1 a 4, apresentam resultados dos ensaios com os venenos

de M. frontalis e M. corallinus, inoculados pelas vias intravenosa e

intraperitoneal em camundongos; as tabelas de 5 a 8, apresentam os

resultados de avaliação de potência dos antivenenos específicos

monovalentes, inoculados pelas mesmas vias e para a mesma espécie

animal. Finalmente, as tabelas 9 e 10, contêm os resultados das reações

de neutralização cruzada entre os dois venenos e antivenenos estudados.

TABELA 1

Determinação da DL50 do veneno de Micrurus frontalis inoculado, pela via

intravenosa (0,5 ml), em camundongos de 18 a 22 g.

Tempos de

observação

Doses em microgramas

20,00

23,00

26,45

30,42

34,98

40,23

DL50

30 minutos

0/6 *

0/6

60 minutos

0/6

24 horas

1/6

3/6

4/6

5/6

6/6

24,05 fig

48 horas

1/6

3/6

4/6

5/6

—

24,05 iJLg

TABELA 2

Determinação da DL50 do veneno de Micrurus frontalis inoculado, pela via

intraperitoneal (0,5 ml), em camundongos de 18 a 22 g.

Tempos de

observação

Doses em microgramas

25,00

30,00

36,00

43,20

51,84

62,21

DL50

30 minutos

0/6

60 minutos

0/6

24 horas

0/6

2/6

3/6

5/6

6/6

35,06 fig

48 horas

0/6

2/6

3/6

5/6

—

35,06 fjLg

* Em todas as tabelas, o denominador representa o número de animais inoculados

e, o numerador, o número de animais mortos.

291

SciELO

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SILES VILLARROEL, M.; ROLIM-ROSA, R.: ZELANTE. F. & VIEIRA, E. G. J. Perspectivas de

padronização das titulações de venenos e antivenenos elapidicos, em camundongos. Mcm. Inst.

Butantan, /,^/45:289-297, 1980/81.

TABELA 3

Determinação da DL50 do veneno de Micrurus coralUnus inoculado, pela via

intravenosa (0,50 ml), em camundongos de 18 a 22 g.

Tempos de

observação

Doses em microgramas

6,96

8,00

9,20

10,56

12,17

13,99

DL50

30 minutos

0/6

60 minutos

0/6

24 horas

0/6

3/6

4/6

6/6

9,62 /xg

48 horas

0/6

2/6

4/6

6/6

—

8,60 fig

TABELA 4

Determinação da DL50 do veneno de Micrurus corallinus inoculado, pela via

intraperitoneal (0,5 ml), em camundongos de 18 a 22 g.

Doses em microgramas

observação

8,00

9,60

11,52

13,82

16,58

19,90

24,88

29,86

DL50

30 minutos

0/6

60 minutos

0/6

24 horas

0/6

1/6

2/6

3/6

5/6

6/6

16,16 Mg

48 horas

0/6

1/6

2/6

3/6

5/6

—

16,16 fig

TABELA 5

Doseamento do antiveneno de Micrurus frontalis (0,25 ml), colocado frente ao veneno

específico (DL50 = 24,05 ms) ; mistura inoculada, pela via intravenosa (0,5 ml),

em camundongos de 18 a 22 g.

Veneno de M. frontalis

Sol. Salina

Incubação

Tempos de observação

24 h

48 h

0,2

0,02

0,23

370 c

0/6

0,3

0,03

0,22

0/6

0,4

0,04

0,21

0/6

0,5

0,05

0,20

30 min.

0/6

0/6 ♦

0,6

0,06

0,19

6/6

—

Título: 1 ml de antiveneno de M. frontalis neutraliza 4,0 mg ou 166,32 DL50

do veneno específico.

292

SILES VILLARROEL. M.; ROLIM-ROSA, R.; ZELANTE, F. & VIEIRA, E. G. J. Perspectivas de

padronização das titulações de venenos e antivenenos elapidicos, em camundongos. Mem. Inst.

Butantan, íí/45:289-297, 1980/81.

TABELA 6

Doseamento do antiveneno de Micrunis frontalis (0,5 ml), colocado frente ao veneno

específico (DL50 = 35,06 /xg); mistura inoculada, pela via intraperitoneal (1,0 ml),

em camundongos de 18 a 22 g.

Veneno de M. frontalis

Sol. Salina

nil

Incubação

Tempos de observação

24 h

48 h

0,8

0,08

0,42

0/6

0,9

0,09

0,41

37°C

0/6

1,0

0,10

0,40

0/6

0/6 *

1,1

0,11

0,39

30 min.

3/6

4/6

1,2

0,12

0,38

6/6

—

* Título; 1 ml de antiveneno de M. frontalis neutraliza 4,0 mg ou 114,09 DL50

do veneno específico.

TABELA 7

Doseamento do antiveneno de Micrurns corallinus (0,25 ml), colocado frente ao

veneno específico (DL50 = 8,6 /tg); mistura inoculada, pela via intravenosa (0,5 ml),

em camundongos de 18 a 22 g.

Veneno de M. corallinus

Sol. Salina

Incubação

Tempos de observação

24 h

48 h

0,1

0,01

0,24

0/6

0,2

0,02

0,23

370c

0/6

0,3

0,03

0,22

0/6

0/6 *

0,4

0,04

0,21

30 min.

2/6

0,5

0,05

0,20

6/6

—

* Título: 1 ml de antiveneno de M. corallinus neutraliza 2,4 mg ou 279,07 DL50

do veneno específico.

TABELA 8

Doseamento do antiveneno de Micrurus corallinus (0,5 ml), colocado frente ao veneno

específico (DL50 = 16,16 /xg) ; mistura inoculada, pela via intraperitoneal (1,0 ml),

em camundongos de 18 a 22 g.

Veneno de M. corallinus

Sol. Salina

Incubação

Tempos de observação

24 h

48 h

0,5

0,05

0,45

0/6

0,6

0,06

0,44

37°C

0/6

0,7

0,07

0,43

0/6

0/6 *

0,8

0,08

0,42

30 min.

2/6

0,9

0,09

0,41

3/6

* Título: 1 ml de antiveneno de M. corallinus neutraliza 2,8 mg ou 173,27 DL50

do veneno específico.

293

SciELO

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SILES VILLARROEL, M.; ROLIM-ROSA, R.; ZELANTE. F. & VIEIRA, E. G. J. Perspectivas de

padronização das titulações de venenos e antivenenos eiapídicos, em camundongos. Mem. Inst,

Butantan, ii/i5:289-291, 1980/81.

TABELA 9

Doseamento do antiveneno de Micrurus frontalis (0,25 ml), colocado frente ao veneno

de Micrurus corallinus (DL50 = 8,6 BS)’> mistura inoculada, pela via intravenosa

(0,6 ml), em camundongos de 18 a 22 g.

Veneno de M. corallinus

Sol. Salina

Incubação

Tempos de observação

24 h

48 h

37°C

0,05

0,005

0,245

0/6

0,1

0,01

0,24

30 min.

0/6

0/6 *

0,2

0,02

0,23

3/6

0,3

0,03

0,22

6/6

—

* Título: 1 ml de antiveneno de M. frontalis neutraliza 0,8 mg ou 93,02 DL50 do

veneno de M. corallinus.

TABELA 10

Doseamento do antiveneno de Micrurus corallinus (0,26 ml), colocado frente ao veneno

de Micrurus frontalis (DL50 = 24,05 fig); mistura inoculada, pela via intravenosa

(0,5 ml), em camundongos de 18 a 22 g.

Veneno de M. frontalis

Sol. Salina

Incubação

Tempos de observação

24 h

48 h

0,05

0,005

0,245

370 c

0/6

0,1

0,01

0,24

30 min.

0/6

0/6 *

0,2

0,02

0,23

6/6

—

0,3

0,03

0,22

6/6

—

* Título: 1 ml de antiveneno de M. corallinus neutraliza 0,8 mg ou 33,26 DL50

do veneno de M. frontalis.

DISCUSSÃO

A exemplo do demonstrado em observações anteriormente realizadas,

camundongos inoculados quer pela via intravenosa quer pela via

intraperitoneal, prestaram-se também, satisfatoriamente, para a titulação

de venenos e antivenenos eiapídicos. Mais uma vez ficou confirmada a

dispensabilidade do pombo para tais titulações.

Devido à natureza neurotóxicados venenos empregados, que

não induziram a mortes imediatas — durante os primeiros 60 minutos

— tanto a via intravenosa como a intraperitoneal podem ser utilizadas

para as titulações dos venenos e dos antivenenos. Todavia, a primeira

delas revelou maior suscetibilidade do animal, o que, em termos de

quantidade de veneno a ser empregada, torna-a mais adequada.

294

SciELO

10 11 12 13 14 15 16

SILES VILLARROEL, M.: ROLIM-ROSA, R.; ZELANTE. F. & VIEIRA. E. G. J. Perspectivas <le

padronização das titulações de venenos e antivenenos elapídicos, em camundongos. Mcm. Inst.

Butantan, 4^/45:289-297, 1980/81.

Vital Brazil e cols. (1976/77), verificaram a existência de diferentes

graus de atividade tóxica de venenos de M. frontalis, conforme a região

de onde provém a serpente. Assim, as peçonhas de animais procedentes

do Estado de Mato Grosso foram menos ativas do que as correspondentes

do Estado de S. Paulo, quando Inoculadas pela via intravenosa em

camundongos.

Bolanos * (1972) e Bolanos e cols. ^ (1975), estudando diversos

venenos elapídicos, tanto da Costa Rica como da Colômbia e dos Estados

Unidos, inoculados pelas vias intraveno.sa e intraperitoneal em camun¬

dongos, verificaram que eram dotados de graus variados de toxicidade

que variavam, também, conforme a via de inoculação.

Cohen e cols.® (1971), trabalhando com amostras de venenos de

diversas regiões do Continente Americano obtiveram antivenenos em

coelhos. Os autores verificaram, através da soroneutralização cruzada,

que o antiveneno de M. frontalis tinha a capacidade de neutralizar, com

variados graus de eficiência, todos os demais venenos por eles estudados.

Os demais antivenenos, embora dotados de alguma capacidade neutra-

lizante, estão sempre inferiores ao antiveneno de M. frontalis. Nossos

resultados demonstraram que o antiveneno de M. corallinus, é dotado

de maior capacidade de soroneutralização cruzada do que o antiveneno

de M. frontalis.

Este fato deve constituir um alerta, pois destaca a necessidade de

que os imunessoros elapídicos sejam dotados de uma atividade neutrali-

zante a mais ampla possível, tendo-se em vista as naturais dificuldades

do não especialista, em reconhecer a espécie causadora do acidente.

CONCLUSÕES

1. A atividade tóxica dos venenos de Micrurns frontalis e de

Micrurus corallinus, pode ser determinada satisfatoriamente em

camundongos, através de inoculações pelas vias intravenosa e

intraperitoneal;

2. também a capacidade neutralizante dos antivenenos de M.

frontalis e de M. corallinus pode ser determinada em camun¬

dongos empregando-se a mesma metodologia;

3. embora ocorrendo soroneutralização cruzada, o antiveneno de

M. frontalis neutralizou apenas 0,8 mg do veneno de M. corallimis,

enquanto que na reação específica neutralizava 4,0 mg; por

sua vez, o antiveneno de M. corallinus neutralizou 0,8 mg do

veneno de M. frontalis, enquanto que na reação especifica

neutralizou 2,4 mg.

ABSTRACT: The authors, using venoms of the species Micrurus

frontalis and Micrurus corallmus, demonstrated that the toxic acti-

vity of these venoms can satisfactorily be determined by intravenous

and intraperitoneal inoculation in mice. They also ascertained that

the neutralization potency of the elapidic antivenins, made in horses,

can be determined in mice using the same route of inoculation.

295

SciELO

10 11 12 13 14 15

SILES VILLARROEL. M.; ROLIM-ROSA, R.; ZELANTE, F. & VIEIRA, E. G. J. Perspectivas fie

padroniração das titulações de venenos e antivenenos elapídicos, em camundonsos. Mem. Inut.

Butantan, ii/i5:2S3-291, 1980/81.

They also describe the occurrence of cross-neutralization between

the venoms and antivenins under study.

KEYWORDS: Elapid venom and antivenin titration; cross-neutra¬

lization between venoms of the genus Micrurus and their antivenins.

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Mcm. Inst. Btitantan

4-4A5:299-306, 1980/81

EMPREGO DE CAMUNDONGOS NA TITULAÇÃO DE

VENENOS E ANTIVENENO ESCORPIÔNICOS

Elisabete Gomes Jardim VIEIRA *

Medardo SILES VILLARROEL **

Flávio ZELANTE***

Sheila da Costa ÁVILA *

Raymundo ROLIM ROSA****

RESUMO: Foi determinada, em termos de DL50, a toxicidade dos

venenos de Tityus serrulatus e Tityus bahiensis em camundongos,

através das vias intraperitoneal e intravenosa. Com a mesma meto¬

dologia, foi avaliada a capacidade neutralizante do antiveneno de

T. serrulatm em relação ao veneno específico e paraespecífico.

Os resultados sugerem recomendar a metodologia ora proposta,

como método prático, econômico e reprodutível para titulação dos

venenos e antiveneno escorpiônicos estudados.

PALAVRAS-CHAVE: Titulação de venenos do gênero Tityus;

doseamento de antiveneno escorpiônico; soroneutralização cruzada

entre venenos escorpiônicos.

INTRODUÇÃO

O escorpionismo no Brasil está afeto, principalmente, às espécies

Tityus serrulatus e Tityus bahiensis, responsáveis por acidentes que,

mesmo desprovidos da dramaticidade característica devida aos envene¬

namentos ofídicos, podem representar sério risco ao acidentado,

particularmente para crianças

Embora os escorpiões apresentem ampla distribuição mundial, ainda

é pequeno o conhecimento sobre a natureza imunobiológica de seus

venenos, principalmente sobre a sua atividade tóxica. O mesmo ocorre

• Asnistcntes do Serviço de Injunoloíria do Instituto Butantan.

Professor Livre Docente do Departamento de Microbiologia e Imunologia do Instituto de Ciências

Biomódicas da Universidade de Sào Paulo.

• •• Professor Titular do Departamento de Microbiologia e Imunologia do Instituto de Ciências Biomédicas

da Universidade de São Paulo.

•*•• Diretor do Serviço de Imunologia do Instituto Butantan e Professor Assistente Doutor do Departa¬

mento de Microbiologia e Imunologia do Instituto de Ciências Biomédicas da Universidade de São

Paulo.

Endereço para correspondência: Caixa Postal 65 — Sào Paulo — Brasil.

299

SciELO

10 11 12 13 14 15

VIEIRA, E. G. J.: SILES VILLARROEL, M.; ZELANTE, F.; AVILA, S. C. & ROLIM-ROSA, R.

Emprego de camundongos na titulação de venenos e nntivenenos escorpiônicos. Mcm. Inst. Butantan,

4^/4í;299-306, 1980/81.

em relação ao preparo e doseamento dos antivenenos respectivos. As

informações são bastantes desencontradas, devido à ausência de padrões

quanto à técnica de obtenção do veneno, à espécie do animal de prova e

à via de inoculação

Já Maurano ® (1915) e BraziP (1918), estudaram a ação tóxica do

veneno e a atividade neutralizante do antiveneno de T. bahiensis, através

de inoculações subcutâneas em cobaias. Sergent (1938) determinou

a Dose Mínima Mortal (DMM) de triturado de glândulas de Prionurns

australis, em camundongos, pela via subcutânea. Magalhães® (1947)

comparou a atividade antitóxica do antiveneno escorpiônico produzido

pelo Instituto Ezequiel Dias frente a venenos de espécies existentes em

diversos outros países. BücherP (1953) utilizou camundongos e as

vias subcutânea e intravenosa para analisar a atividade tóxica dos

venenos de T. serrulatus e T. bahiensis, obtidos em diferentes fases de

extração, verificando qual delas (“gotículas límpidas, hialinas, opales-

centes e as últimas gotas leitosas espessas”) evidenciava maior

toxicidade.

A exemplo do demonstrado por Siles Villarroel e cols. (1978/79)

e Siles Villarroel e cols. (1980/81) com os venenos ofídicos e,

devido à ausência na Farmacopéia Brasileira ’ de recomendações técnicas

para as titulações dos venenos e antivenenos escorpiônicos, os autores se

propuseram a determinar, através das inoculações intraperitoneal e

intravenosa em camundongos, a toxicidade dos venenos escorpiônicos

obtidos por extração elétrica e avaliar, comparativamente, a capacidade

neutralizante do antiveneno de T. serrulahis em relação ao veneno

específico e paraespecífico.

MATERIAL E MÉTODOS

1. Venenos escorpiônicos — Foram utilizados venenos cristalizados,

fornecidos pela Seção de Artrópodes Peçonhentos do Instituto Butantan,

obtidos por extração elétrica, das espécies Tityus serrulatus Lutz e Mello,

1922 e Tityus bahiensis Perty, 1834.

As soluções dos venenos foram preparadas a 1% em solução salina

(NaCl 0,85%). Para efeito de comparação, foram determinadas as DMM,

segundo Brazil ® (1918), tendo os venenos de T. serrulatus e T. bahiensis

apresentados títulos de 400 pig e 200 ij.g, respectivamente.

2. Antiveneno escorpiônico — Foi utilizado o antiveneno purificado

de T. serrulatus, proveniente da Seção de Soros Antipeçonhentos do

Instituto Butantan, produzido em cavalos e com título neutralizante de 2

DMM por ml, equivalente a 0,8 mg de veneno específico neutralizado por

ml, segundo o método de Brazil ® (1918). Quando do seu emprego, o

antiveneno foi diluído a 1/2, com a finalidade de evitar o possível efeito

do fenol, normalmente adicionado aos imunessoros purificados.

3. Animais utilizados — Foram utilizados camundongos (Mus

musculus, Linnaeus, 1758) adultos jovens, de 20g ± 2g, procedentes

do Biotério do Instituto de Ciências Biomédicas da Universidade de São

300

SciELO

10 11 12 13 14 15 16

VtETnA, E. G. J.: SILES VILLARROEL, M.: ZELANTE. F.; ÁVILA, S. C. & ROLIM-ROSA, R.

Emprepro de camundongos na titulação de venenos e antivenenos escorpiônicos. Mem. Inst. Butantan,

H/i5-.2í^-Z06, 1980/81.

Paulo, sem distinção de sexo, inoculados pelas vias intraperitoneal e

intravenosa. Em todos os ensaios, foram utilizados lotes de seis

camundongos por dose de veneno.

4. Determinação da toxicidade dos venenos escorpiônicos — Em

todos os ensaios, os animais receberam doses escalonadas dos venenos,

num volume de 0,5 ml para cada dose e observados aos 10, 30 e 60 minutos,

24 e 48 horas após as inoculações, sendo a toxicidade determinada, em

termos de DL50, pelo método de Reed & Müench (1938).

5. Doseamento do antiveneno de T. serrulatus — Em todos os

ensaios, foram utilizadas quantidades constantes de antiveneno e doses

variáveis de veneno, obtendo-se um volume final equivalente a 0,5 ml

por camundongo. A mistura, veneno-antiveneno, foi incubada a 37°C

durante 30 minutos. Os animais inoculados foram observados por um

período máximo de 48 horas. Os títulos do antiveneno foram expressos

em miligramas ou em número de DL50 de veneno neutralizado por ml

de antiveneno.

RESULTADOS

As tabelas 1, 2, 3 e 4 apresentam os resultados das atividades tóxicas

dos venenos de T. serrulatus e T. bahiensis.

TABELA 1

Determinação da DL50 do veneno de T. serrulatus inoculado pela via intraperitoneal

(0,5 ml), em camundongos.

Tempos de

observação

Doses em microgramas

DL50

20,00

26,00

33,80

43,94

57,12

74,25

10 minutos

0/6

30 minutos

0/6

60 minutos

0/6

2/6

4/6

24 horas

0/6

2/6

4/6

5/6

6/6

31,85 /xg

48 horas

0/6

2/6

4/6

5/6

6/6

—

30,88 fig

TABELA 2

Determinação da DL50 do veneno de T. serrulatus inoculado pela via intravenosa

(0,5 ml), em camundongos.

Tempos de

observação

Doses em microgramas

DL50

14,20

16,90

20,11

23,93

28,48

33,89

10 minutos

0/6

1/6

2/6

4/6

30 minutos

0/6

2/6

5/6

60 minutos

0/6

3/6

4/6

5/6

24 horas

0/6

1/6

2/6

4/6

5/6

6/6

22,02 /xg

48 horas

0/6

1/6

3/6

5/6

6/6

—

20,11 Mg

301

VIEIRA, E. G. J.; SILES VILLARROEL, M.: ZELANTE, F.; ÁVILA, S. C. & ROLIM-ROSA, R.

Emprego de camundongos na titulação de venenos e antivenenos escorpionicos, Mem. Inst. Butantan,

U/J,S:2i^-Z0&, 1980/81.

TABELA 3

Determinação da DL50 do veneno de T. bahiensis inoculado pela via intraperitoneal

(0,5 ml), em camundongos.

Tempos de

observação

Doses em microgramas

DL50

15,40

20,00

26,00

33,80

43,94

57,12

10 minutos

0/6

30 minutos

0/6

60 minutos

0/6

1/6

2/6

5/6

24 horas

0/6

1/6

3/6

5/6

6/6

26,00 fig

48 horas

0/6

1/6

3/6

5/6

—

25,00 B-S

TABELA 4

Determinação da DL50 do veneno de T. bahiensis inoculado pela via intravenosa

(0,5 ml), em camundongos.

Tempos de

observação

Doses em microgramas

DL50

7,10

9,23

12,00

15,60

20,28

26,36

10 minutos

0/6

2/6

3/6

30 minutos

0/6

3/6

5/6

60 minutos

0/6

1/6

3/6

6/6

24 horas

0/6

1/6

2/6

4/6

—

17,35 Hg

48 horas

0/6

1/6

2/6

4/6

—

17,35 HS

As tabelas 5, 6, 7 e 8 apresentam os resultados das provas de

soroneutralização específica e paraespecífica, realizadas com o antiveneno

de T. sernãatus frente aos venenos de T. serrulatiis e T. bahiensis.

TABELA 5

Doseamento do antiveneno de T. serrulatus (0,25 ml), em relação ao veneno específico

(DL50 = 30,88 fíg); mistura inoculada pela via intraperitoneal (0,5 ml), em

camundongos.

Veneno de T. serrulatus

Sol. salina

Incubação

Tempos de observação

24 h

48 h

0,10

0,010

0,240

37°C

0/6

0,15

0,015

0,235

0/6

0/6 *

0,20

0,020

0,230

2/6

0,25

0,025

0,225

30 min.

3/6

0,30

0,030

0,220

6/6

—

Título; 1 ml do antiveneno de T. serrulatus neutraliza 1,2 mg ou 38,86 DL50

do veneno específico.

802

SciELO

10 11 12 13 14 15 16

VIEIRA, E. G. J.; SILES VILLARROEL, M.; ZELANTE, F.; ÁVILA, S. C. & ROLIM-ROSA, R.

Emprego de camundongos na titulação de venenos e antivenenos escorpiônicos. Mcm. Inst. Butantan,

44/^5:299-306, 1980/81.

TABELA 6

Doseamento do antiveneno de T. serrulatiis (0,25 ml), em relação ao veneno especifico

(DL50 = 20,11 fjLg ); mistura inoculada pela via intravenosa (0,5 ml), em camundongos.

Veneno de T. serrulatus

Sol. salina

Incubação

Tempos

de observação

24 h

48 h

0,10

0,15

0,010

0,015

0,240

0,235

37°C

0/6

0/6 *

0,20

0,020

0,230

4/6

0,25

0,025

0,225

30 min.

6/6

—

0,30

0,030

0,220

6/6

—

* Titulo: 1 ml do antiveneno de T. serrulatus neutraliza 1,2 mg ou 57,91 DL50

do veneno especifico.

TABELA 7

Doseamento do antiveneno de T. serrulatus (0,25 ml), em relação ao veneno de

T. bahiensis (DL50 = 26,00 Mg); mistura inoculada pela via intraperitoneal (0,5 ml)

em camundongos.

Veneno de T. bahiensis

Sol. salina

Incubação

Tempos de observação

24 h

48 h

0,05

0,005

0,245

37°C

0/6

0,10

0,010

0,240

0/6

0/6 *

0,15

0,015

0,235

1/6

0,20

0,020

0,230

30 min.

6/6

—

0,25

0,025

0,225

6/6

—

* Titulo: 1 ml do antiveneno de T. serrulatus neutraliza 0,8 mg ou 30,77 DL50

do veneno de T. bahiensis.

TABELA 8

Doseamento do antiveneno de T. serriãatus (0,25 ml), em relação ao veneno de

T. bahiensis (DL50 = 17,35 /xg); mistura inoculada pela via intravenosa (0,5 ml)

em camundongos.

Veneno de T. bahiensis

Sol. salina

Incubação

Tempos

de observação

24 h

48 h

0,05

0,005

0,245

37°C

■0/6

0/6

0,10

0,010

0,240

0/6

0/6 ♦

0,15

0,015

0,235

2/6

0,20

0,020

0,230

30 min.

6/6

—

0,25

0,025

0,225

—

Titulo: 1 ml do antiveneno de T. serrulatus neutraliza 0,8 mg ou 46,11 DL50

do veneno de T. bahiensis.

303

SciELO

10 11 12 13 14 15

VIEIRA, E. G. J.: SILES VILLARROEL, M.; ZELANTE, F.; ÁVILA, S. C. & ROLIM-ROSA, R.

Emprego de camundongos na titulação de venenos e antivenenos escorpiônicos. Mcm. Inst, Ilutantan,

44/Í5;299-306, 1980/81.

DISCUSSÃO

Siles Villarroel e cols. "• (1978/79) e Siles Villarroel e cols.

(1980/81), trabalhando com venenos e antivenenos ofídico.s, propuseram

a utilização do camundongo como animal de prova e as vias intraperitoneal

ou intravenosa, como vias de inoculação, como substitutos do pombo

(método de Vital Brazil) para os ensaios biológicos daqueles produtos.

De forma semelhante, as observações agora realizadas demonstraram a

possibilidade do emprego do camundongo, para a titulação dos venenos

e doseamento do antiveneno escorpiônico.

Tendo-se em vista que a Farmacopéia Brasileira não estabelece

normas e padrões para os ensaios biológicos destes produtos, os atuais

resultados se constituem numa proposta para a adoção de critérios

padronizados para as titulações dos venenos e antivenenos escorpiônicos.

O emprego do camundongo confere condições mais econômicas e de

melhor reprodutibilidade, o que representa fator importante para a

confiabilidade da eficácia terapêutica do antiveneno em questão.

A análise da atividade dos dois venenos estudados em camundongos,

demonstra que o da espécie T. bahiensis é dotado de maior toxicidade

do que o de T. serrulatus, fato constatado através da sua inoculação

tanto pela via intraperitoneal (DL50 26,00 [xg e 30,88 ixg, respectivamente)

como pela via intravenosa (DL50 17,35 [;.g e 20,11 iJ.g, respectivamente).

Estes resultados não concordam com observações realizadas no homem,

por Rosenfeld (1976).

Por outro lado, a via intravenosa demonstrou maior sensibilidade

dos animais inoculados do que a intraperitoneal, aos dois tipos de

venenos.

As mortes imediatas (durante os primeiros 10 minutos após a

inoculação do veneno) ocorreram quando os animais foram inoculados

pela via intravenosa com doses superiores a uma DL50. Este fenômeno,

comum para os dois tipos de venenos (Tabelas 2 e 4), não foi observado

quando as peçonhas foram inoculadas pela via intraperitoneal (Tabelas

1 e 3).

Os nossos resultados não podem ser cotejados com outros, pois, os

informes apresentados pelos autores que anteriormente trabalharam

com veneno escorpiônico, basearam-se em metodologia diferente da

adotada no presente trabalho.

A soroneutralizaçâo específica, entre veneno e antiveneno de T.

serrulatus, demonstrou que o antiveneno foi capaz de neutralizar 1,2 mg

do veneno específico, fato este demonstrado por ambas as vias de

inoculação (Tabelas 5 e 6). Quanto a soroneutralizaçâo paraespecífica,

o antiveneno de T. serrulatus neutralizou 0,8 mg do veneno de T. bahiensis

constatada também pelas duas vias de inoculação (Tabelas 7 e 8).

Embora a reação específica evidenciasse maior capacidade neutralizante,

foi demonstrada, também, a possibilidade de neutralização paraespecífica,

0 que caracteriza a existência de algumas frações ou determinantes

imunogênicos comuns entre os dois venenos estudados. Todavia, esta

reação não apresenta a mesma eficiência neutralizante, visto que, houve

304

SciELO

10 11 12 13 14 15 16

VIEIRA. E. G. J.,- SILES VILLAREOEL. M.; ZELANTE, F.; AVILA. S. C. & ROLIM-ROSA, R.

Emprego de camundongos na titulação de venenos e antivenenos escorpiônicos. Mem. Inst. Butantan,

.<í/iJ:299-306, 1980/81.

uma redução em torno de 33% de atividade (1,2 mg e 0,8 mg, respecti¬

vamente). Assim, o antiveneno de T. serrulatus poderia ser utilizado

na terapêutica dos dois tipos de envenenamentos, indistintamente, o que

constitui um recurso auxiliar de real importância para a terapêutica dos

acidentes escorpiônicos mais freqüentes no Brasil.

Para efeito de uniformidade de conduta nos estudos e perspectivas

de padronização dos ensaios biológicos com venenos e antivenenos ofidicos,

aranêicos e escorpiônicos, julgamos recomendável a adoção do camun¬

dongo, como animal de prova e a via intraperitoneal como via de eleição.

CONCLUSÕES

1. Camundongos se prestaram adequadamente, quando receberam

inoculações pela via intraperitoneal, para a titulação da atividade

tóxica dos venenos de T. serrulatus e T. bakiensis;

2. o doseamento do antiveneno de T. serrulatus pode ser realizado,

indistintamente, pelas vias intraperitoneal ou intravenosa, em

camundongos ;

3. o veneno de T. bahiensis evidenciou maior toxicidade do que o

de T. serrulatus, quando inoculados pelas duas vias, em

camundongos ;

4. 0 antiveneno de T. serrulatus neutralizou 1,2 mg/ml do veneno

específico e 0,8 mg/ml do veneno de T. bahiensis.

ABSTRACT: The toxicity, in terms of LD50, of the venoms of

Titvus serrulatus and T. bahiensis was determined in mice by intra¬

peritoneal and intravenous route. With the same methodology, the

neutralizing capacity of the antivenin for T. serrulatus was

evaluated with relation to specific and paraspecific venoms.

The results permit the recommendation of the methodology here

proposed, as a practical, inexpensive and reproducible method

for the titration of the studied scorpion venoms and antivenins.

KEYWORDS: Titration of venoms of the genus Tityus; dosage

of scorpionic antivenin; serum cross-neutralization between scorpion

venoms.

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306

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Mcm. Inst. Butantan

•44/45;307-315. 1980/81

EMPREGO SIMULTÂNEO DE ANTÍGENOS BOTULÍNICOS

TIPOS A E B, EM UM MESMO ANIMAL, PARA OBTENÇÃO

DE ANTITOXINA BIVALENTE *

Edison Paulo Tavares de OLIVEIRA **

Hideyo IIZUKA **

Hisako Gondo HIGASHI **

Maria Antonieta da SILVA **

Raymundo ROLIM ROSA **

RESUMO: Descreve-se método para a obtenção da antitoxina

botulínica bivalente tipo AB, através de hiperimunização simultânea

de cavalos com antígenos adsorvidos pelo alúmen de potássio.

Erapregando-se novo esquema de imunização, e utilizando antígeno

botulínico bivalente AB, obtiveram a respectiva antitoxina cujos

títulos específicos médios variavam entre os níveis de 140 a 200

Ul/ml para o tipo A e de 70 a 130 Ul/ml para o tipo B, tendo como

referência o soro padrão internacional. Após a purificação e concen¬

tração pelo método de Pope, os títulos finais atingiram valores da

ordem de 750 a 1000 Ul/ml.

Através deste novo método, foi verificado que é possível obter

soro antíbotulíníco bivalente tipo AB, num mesmo animal, com

resultados superiores aos processos anteriormente utilizados, com

menores dispêndios de antígenos, de animais soroprodutores, de

tempo e de trabalho.

PALAVRAS-CHAVE: Botulismo; hiperimunização simultânea, de

eqüinos, com antígenos tipos A e B; toxina e toxóide botulínicos

tipos A e B.

INTRODUÇÃO

Em 1972, pela primeira vez no Brasil, foi preparado o soro anti-

botulínico tipo A, por um de nós, e, posteriormente, o tipo B, pela hiperi¬

munização de eqüídeos, através do antígeno adsorvido pelo sulfato duplo

de alumínio e potássio (11,18). Utilizando novo esquema de imunização,

foi possivel obter soros antitóxicos que apresentavam teor médio de anti¬

toxina botulínica ao redor de 750 a 1000 Ul/ml, quando purificados e

concentrados, pelo método de Pope (20).

Trabalho apresentado no VIII Congresso Latínoamericano de Microbiologia, Vina dei Mar, Chile.

Serviço de Imunologia — Instituto Butantan.

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OLIVEIRA, E. P. T.; IIZUKA. H.; HIGASHI, H. G.- SILVA, M. A. & ROLIM ROSA. R. Emprego

simultâneo de antígenos botulínicos tipos A e B, em um mesmo animal, para obtenção de antitoxina

bivalente. Mem. Inst. Butantan, 4-4/-45;307“315, 1980/81.

Verificaram, também, que as antitoxinas dos tipos A e B não apre¬

sentam reação cruzada com a toxina heteróloga, comportando-se, por¬

tanto, como soros monoespecificos (11).

Contudo, em virtude da especificidade da antitoxina (13, 14) e da

eficácia de seu emprego depender de um diagnóstico prévio, estabelecido

através de prova de toxinotipia e do resultado do exame bacteriológico,

os quais sempre demandam precioso tempo, o tratamento deve ser ime¬

diatamente iniciado com a soroterapia bivalente AB, tendo em vista que

os casos de botulismo humano ocorreram com maior freqüência com

esses dois tipos (1, 4, 5, 6, 7, 12, 16, 27), com alto indice de mortalidade

(7, 15, 16, 19).

Portanto, propusemo-nos verificar a possibilidade de obtenção da

antitoxina botulinica bivalente tipo AB, num mesmo animal soroprodutor.

MATERIAL E MÉTODOS

O presente trabalho foi conduzido utilizando, em linhas gerais, a

mesma metodologia desenvolvida e descrita pelos autores em trabalhos

anteriores (11, 18). Todavia, julgamos interessante destacar as seguin¬

tes considerações.

1. Cepas utilizadas — as cepas de Clostndium botvlmum tipo A,

n.° 306-IB e tipo B, n.® 204-IB, ambas dotadas de alto poder toxigênico,

foram escolhidas do estoque da germoteca do Instituto Butantan, para a

obtenção das respectivas toxinas.

2. Obtenção de toxinas — as toxinas botulínicas dos tipos A e B,

foram obtidas no meio de cultura proposta por Wadsworth, modificado

(11, 18, 23, 28). A toxicidade das culturas filtradas foram tituladas

segundo Nigg e col. (17), em camundongos de 18 a 22 g de peso, através

da inoculação pela via intraperitoneal de alíquotas de 0,5 ml de séries

de diluições de toxina em solução tampão de gelatina fosfatada (11).

3. Antígenos — para a preparação dos antígenos dos tipos A e B,

foram utilizadas toxinas filtradas que apresentavam cerca de 8 x 10^ a

1 X 10® DMM por mililitro, em camundongos, para cada tipo (Tabela 1).

A anatoxina botulinica, resultante da destoxificação da toxina pelo for-

TABELA 1

Toxicidade da cultura de Clostridimn botulinum tipos A e B e condições de

desenvolvimento da toxina *

Incubação

Tipo

Cepa

Temperatura

(°C)

Tempo

(dias)

DMM

306-IB

1 X 10“

204-IB

8 X 10“

* Inoculação de 0,5 ml por via intraperitoneal, em camundongos de 18 a 22 g.

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OLIVEIRA. E. P. T.: IIZUKA, H.; HIGASHI, H. G.- SILVA. M. A. & ROLIM ROSA. R. Emprego

simultâneo de antígenos botulínicos tipos A e B, em um mesmo animal, para obtenção de antitoxina

bivalente. Mera. /nst. Butantan, í4/^5;307-316, 1980/81.

maldeido, na taxa final de 0,5%, era precipitada pelo alúmen na concen¬

tração final de 1,25% do adsorvente. Após a prova de inocuidade (11,

28), era submetida à prova de imunogenicidade em cobaios de 250 a 300 g

de peso, de acordo com os estudos de Rice e col. (25). Os resultados

desta prova permitiam revelar os toxóides que apresentavam melhor

poder imunogênico, os quais passavam a ser utilizados como antígeno

para hiperimunização de cavalos. O antígeno bivalente era constituído

de mistura homogênea em proporções equivalentes das frações A e B.

4. Animais soroprodutores — para a obtenção do soro antibotu-

línico bivalente, foram selecionados 9 cavalos sadios, jamais empregados

na produção de anti-soros, de cerca de 8 a 10 anos de idade, em condições

físicas consideradas satisfatórias pelo exame prévio, clínico veterinário,

e separados em dois lotes:

Lote 1 — 4 animais, os quais eram inoculados com antígeno mono-

específico. Assim, os cavalos n.° 232 e 233 foram destinados à produção

do soro antibotulínico do tipo A, enquanto que os de n.° 243 e 244 o

foram para o tipo B, observando-se, em ambos os casos, o esquema de

imunização já citado (11, 18).

Lote 2 — 5 cavalos, os quais receberam os n.°s 234, 240, 248, 249 e

250, todos inoculados com o antígeno bivalente AB. Neste lote, também

os soros antitóxicos eram obtidos pela hiperimunização de eqüinos, em

duas fases, segundo o esquema de hiperimunização estabelecido em tra¬

balhos anteriores (11, 18), sendo que a primeira fase correspondia à

imunização de base. Devemos destacar que, em virtude de fórmula anti-

gênica estar encerrada no mesmo volume proposto no esquema citado,

cada animal soroprodutor recebia exatamente 50% de cada fração anti-

gênica, em relação aos animais do lote 1.

Na fase de hiperimunização, ao invés de administrar a quantidade

total de cada dose imunizante num único ponto, o volume de antígeno

misto AB correspondente era subdividido em cinco frações iguais, cada

qual sendo inoculada subcutaneamente em cinco pontos diferentes, na

região do dorso do animal.

Na última semana, cada cavalo pertencente a cada lote, era subme¬

tido à sangria exploradora. As reimunizações eram repetidas após cada

período de repouso de 45 dias (2) que sucedia imediatamente terminada

a sangria final.

O sangue recebido de cada animal era recolhido em solução anticoa-

gulante de citrato de sódio, sendo o plasma separado e a seguir tratado

com preservativo antes de ser levado à câmara fria, a 4‘’C, onde era

mantido até o momento de purificação e concentração. As misturas de

plasmas eram tratadas pelo método preconizado por Pope (20, 21), e

modificado posteriormente (9).

5. Soro e toxina padrões utilizados — os soros antibotulínicos,

padrões internacionais, eram provenientes de Statens Serum Institute de

Copenhagen, Organização Mundial de Saúde, de onde vêm acondicionados

em ampolas sob forma liofilizada e cujas atividades específicas estão con¬

tidas em 0,1360 mg para o tipo A, e 0,1740 mg para o tipo B (4).

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OLIVEIRA, E. P. T.; IIZUKA, H.; HIGASHI, H. G.- SILVA, M. A. & ROLIM ROSA. R. Emprepo

BÍmultânco de antíjçenos botulínícos tipos A c B, em um mesmo animal, para obtenção de antitoxina

bivalente. Mem. Inst. Butantan, ^4/^5:307-315, 1980/81.

As toxinas botulínicas padrões utilizadas no experimento foram pre¬

paradas no laboratório do Setor de Anaeróbios do Instituto Butantan e

padronizadas “in vivo”, ao nível de 0,1 L-|- (Limite morte), para o

tipo A e de 1 L-(-, para o tipo B, respectivamente, pelos soros padrões

antibotulínicos monoespecíficos, e conservadas sob forma de solução

glicerinada (4).

O método de titulação dos soros era realizado pelo teste de neutrali¬

zação “in vivo”, em consonância com o preconizado pela Organization

Mondiale de la Santè.

6. Animais utilizados — camundongos brancos (Mus musculus

Linnaeus, 1758), sem distinção de sexo, de 18 a 22 g, e cobaias de 250

a 300 g de peso, fornecidos pelo Biotério Geral do Instituto Butantan.

RESULTADOS E DISCUSSÃO

Estudando os surtos de botulismo no mundo inteiro, verifica-se que

a grande maioria dos casos humanos é provocada pela ingestão de alimen¬

tos contaminados pelas exotoxinas neuroparalíticas dos tipos A e B, e,

com menor freqüência, pelo tipo E (1, 5, 6, 7, 8, 10, 12, 16, 26, 27).

A análise dos dados publicados na literatura nos permite concluir

que os grandes surtos desta toxiinfecção apresentam características cícli¬

cas e ocorrem, de maneira estreitamente correlacionada com as épocas de

recessão econômica, sendo, portanto, a expansão do botulismo, atribuível

ao aumento de preparações de conservas caseiras (12).

Neste aspecto, entre outros, Legroux e col. (15) constataram na

França, durante a época de ocupação de 1940 a 1944, cerca de 500

focos de botulismo, envolvendo mais de 1000 intoxicados. Mais recente¬

mente, Horwitz e col. (12) em 1974, nos E.U.A., registraram 20 surtos,

num único ano, sendo o maior verificado desde 1935.

No Brasil, felizmente, o botulismo ainda é uma doença rara, uma

vez que se acha registrado apenas um surto ocorrido em 1958 (19).

Entretanto, neste acidente, 9 pessoas se intoxicaram das quais 7 tiveram

êxito letal.

Do que foi exposto, dada a inexistência do soro antibotulínico biva¬

lente tipo AB no país, e considerando que não existe outra terapêutica

comprovadamente melhor para o botulismo, resolvemos estabelecer, pelo

presente trabalho, uma metodologia para a obtenção de antitoxina botu-

línica bivalente, tipo AB.

O primeiro soro antibotulínico foi preparado por Van Ermengen

pela imunização de equinos, utilizando toxina como antígeno. Em vista

deste método apresentar certos inconvenientes (22), optamos pelo em¬

prego de produto atóxico, ou seja, o toxóide botulínico absorvido pelo

alúmen, que apresenta inúmeras vantagens; entre outras a faculdade

que 0 toxóide oferece de poder ser manipulado com absoluta segurança,

conservando todas as propriedades imunogênicas que favorecem a bios-

síntese de imunoglobulinas específicas.

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OLIVEIRA, E. P. T.; IIZUKA, H.; HIGASHI, H. G.- SILVA, M. A. & ROLIM ROSA. R. Emprego

simultâneo de antígenos botuHnicos tipos A e B, em um mesmo animal, para obtenção de antitoxina

bivalente. Mem. /nst. Butantan, ^^/^5;307-315, 1980/81.

Adaptando o esquema de imunização idealizado e posto em prática

pelo laboratório do Setor de Anaeróbios do Instituto Butantan (11,18),

podemos observar o resultado apresentado pelos cavalos pertencentes

ao Lote 1, que serviram como controle, com toxóides botulínicos mono-

valentes dos tipos A e B (Tabela 2). Pela mesma, os resultados revelam

níveis médios de 166 Ul/ml de antitoxina botulínica tipo A, e de 116

a 125 Ul/ml de tipo B.

A Tabela 3 mostra níveis de antitoxina botulínica bivalente tipo

AB, observados em cavalos pertencentes ao Lote 2, que receberam antí-

geno misto tipo AB, onde se nota que os títulos médios da fração A

variam de 140 a 200 Ul/ml, enquanto que na fração B, oscilam de 70 a

130 Ul/ml, no soro circulante. Pela análise destes dados, pode-se notar

que existe tendência marcante da superior resposta imunogênica da

fração A. Parece-nos que este fenômeno é atribuível ao efeito adjuvante

do antígeno tipo B sobre o do tipo A, que se evidenciou na forma com¬

binada, pois foi verificado que durante todo período de imunização, o

tipo A respondeu em níveis entre 100 a 200 Ul/ml, nas sangrias de

prova, ao passo que o tipo B oscilou entre os valores de 50 até o máximo

de 150 Ul/ml (Tabela 3).

Apesar de Rice (24) ter observado que o poder imunogênico da

fração B aumenta consideravelmente, quando se emprega o antígeno

bivalente AB na imunização de camundongos, em nossos experimentos

verificamos que ocorre fenômeno inverso. Esta divergência de resultados

correlaciona-se, possivelmente, com as diferentes espécies animais

utilizadas.

Por outro lado, confrontando os resultados obtidos nas Tabelas

2 e 3, pode-se destacar um fato muito interessante: embora os cavalos

pertencentes ao Lote 2 tivessem recebido apenas 50% da quantidade de

cada fração antigênica em relação aos do Lote 1, a síntese de antitoxina

botulínica alcançou praticamente os mesmos níveis séricos deste. Assim,

na fração A foram encontrados títulos médios oscilando entre os valores

de 140 a 200 Ul/ml, contra a média de 166 Ul/ml da imunização mono-

valente. O tipo B também comportou-se de maneira análoga, alcançando

média de 70 a 130 Ul/ml, contra 116 a 125 Ul/ml, da imunização mono-

específica.

TABELA 2

Níveis de antitoxina botulínica tipos A e B, observados em quatro cavalos do Lote 1,

no decurso de seis hiperimunizações

Cavalos

Tipo

Títulos em Ul/ml

Média

aritmética

Ul/ml

1 .»

Hiperimunização

2.“ 3.“ 4.“ 5.“

6 .“

232

100

200

100

200

166

233

100

200

100

200

166

243

100

150

100

150

116

244

150

100

160

150

125

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OLIVEIRA, E. P. T.; IIZUKA, H.; HIGASHI, H. G.- SILVA, M. A. & ROLIM ROSA, R, Emprego

simultâneo de antígenos botulínicos tipos A e B, em um mesmo animal, para obtenção de antitoxina

bivalente. Mem. Iriat. Butantan, ^4/^5:307-315, 1980/81.

TABELA 3

Níveis de antitoxina botulínica bivalente tipo AB, observados em cinco cavalos do

Lote 2, no decurso de cinco hiperimunizações, através do antígeno misto

Cavalos

n.°

Tipo

Títulos em Ul/ml

Média

aritmética

Ul/ml

l.a

Hiperimunização

2 .® 3.^ 4.^

5.“

234

200

—

150

100

240

200

—

150

100

248

—

200

160

150

130

249

100

200

100

200

140

150

110

250

200

100

200

180

—

150

—

A Tabela 4 mostra o resultado do doseamento do soro antibotulí-

nico bivalente AB purificado, onde os níveis antitóxicos atingiram os

valores de cerca de 1000 Ul/ml para fração A e de 750 Ul/ml, para o

tipo B. Finalmente, este soro purificado e concentrado era diluído con¬

venientemente para apresentar 500 Ul/ml de antitoxina de cada tipo,

para compor o soro antibotulinico bivalente AB, de acordo com as reco¬

mendações estabelecidas na XV Seção de “Expert Committee on, Biolo-

gical Standardization” da OMS.

TABELA 4

Dosagem do soro antibotulinico bivalente tipo AB purificado ♦

Soro antibotulinico

Tempo de observação em horas

Fração

Ul/ml

600

0/4

750

0/4

1000

0/4

1250

0/4

2/4

4/4

600

0/4

750

0/4

1000

0/4

2/4

3/4

1250

4/4

—

Dose individual de 0,5 ml da mistura toxina-antitoxina, pela via intraperitoneal,

em camundongos de 18 a 22 g, sendo a toxina ao nível de 0,1 L -f- para o tipo A,

e L -|- para o tipo B, frente ao respectivo soro padrão internacional.

312

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OLIVEIRA. E. P. T.: IIZUKA, H.; HIGASHI, H. G.» SILVA. M. A. & ROLIM ROSA, R. Emprego

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bívalente. Mem. Inst. Butantan, ■4-^/45;307-315. 1980/81.

Também digno de registro foram as constatações de que o emprego

de antígeno bivalente AB para a hiperimunização de eqüídeos oferece

a conveniência de serem evitadas diluições recíprocas de soros monova-

lentes dos referidos tipos, visando a obtenção de soro anti-AB e, fato

igualmente significativo, do processo não causar nos animais submetidos

à produção da antitoxina bivalente, reações que o contraindiquem para

a sua adoção definitiva (3).

CONCLUSÕES

1. Utilizando-se Clostridium botulinum tipo A, estirpe 306-IB e

tipo B, 204-IB, foram obtidas as respectivas toxinas dosando cerca de

8 X 10® a 1 X 10® DMM para camundongos.

2. O antígeno bivalente AB, empregado na hiperimunização de cava¬

los, era constituído de mistura, em proporções equivalentes, de anatoxinas

dos tipos A e B, precipitadas pelo alúmen.

3. As sangrias de prova apresentaram títulos médios de antitoxina

botulínica bivalente variando entre os valores de 140 a 200 Ul/ml para o

tipo A e de 70 a 130 Ul/ml, para o tipo B.

4. A mistura de plasma resultante de diversas imunizações, permi¬

tiu obter soro purificado e concentrado cujo título atingiu níveis da ordem

de 750 a 1000 Ul/ml de cada fração.

5. A hiperimunização simultânea de eqüinos soroprodutores, com o

emprego de antígeno bivalente, apresenta a vantagem de evitar a diluição

recíproca que resulta da mistura de soros monovalentes, bem como a de

não causar, nos animais, reações indesejáveis em seu estado físico.

The usage of Clostridium botulinum Type AB antigen in the preparation

of bivalente antitoxin.

ABSTRACT: The present paper describes the method employed

in the preparation of bivalent Clostridium botulinum Type AB

antitoxin by simultaneous hyperimmunization of horses with mixed

alum potassium adsorbed antigen. By the use of a new immunization

scheina, and using a bivalent AB botulinic antigen, the AB antitoxin

was obtained, whose mean specific titres varied between the

140-200 lU/ml serum leveis for Type A, and 70-130 lU/ml, for

Type B, respectively, when dosed against the International standard

antitoxin. After purification and concentration by the method of

Pope, their final titres reached values of 750 to 1000 lU/ml.

Through this new method. it was verified that it is possible to

obtain bivalent antibotulinic antitoxin Type AB in the same animal

with results superior to those obtained by the processes formerly

employed.

KEYWORDS: Botulism; bivalent hyperimmunization of horses;

Clostridium botulinum Types A and B; food poisoning;

Clostridium botulinum Types A and B toxin and toxoid.

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Mem. Inat. Butantan

■44/í5;317-323. 1980/81

AS BASES DE MANNICH DE HIDANTOINAS

TERPÊNICAS II/

Ema RABENHORST**

Raymond ZELNIK **

RESUMO: A síntese de Bases de Mannich N-substituidas das

Hidantoinas dos terpenos citral, mentona, a-ionona e a-metil-ionona

foi realizada por condensação com formaldeído e aminas secundárias

em meio etanólico. Os rendimentos variam de 4,6 a 61%, verifi¬

cando-se a substituição pelos radicais dialquilaminometilenos ao

nível dos nitrogénios imídicos.

PALAVRAS-CHAVE: Hindantoinas, Terpenos, Bases de Mannich

N-substituídas.

INTRODUÇÃO

Em pesquisa anterior descrevemos as hidantoinas 1 e 2 dos terpe¬

nos carbonílicos citral, ionona e metil-ionona, a fim de avaliar o potencial

farmacológico destes compostos. No decorrer deste estudo, verificamos a

pouca hidrossolubilidade destas hidantoinas. Para torná-las hidrossolú-

veis, condição propícia para os testes farmacológicos, escolhemos a Rea¬

ção de Mannich- por permitir a substituição do próton imídico pelo

grupamento dialquilaminometileno, através da condensação com o for¬

maldeído e uma amina secundária, formando uma base terciária que

pode ser transformada em sal de amónio quaternário.

Parte I, ref. 19.

Trabalho comunicado na 33.* Reunião Anual da Sociedade Brasileira para o Progresso da Ciência,

Salvador, BA, 15 de julho de 1981.

Serviço de Química Orgânica do Instituto Butantan.

317

SciELO

10 11 12 13 14 15

RABENHORST, E. & ZELNIK, R. As Bases de Mannich de hidantoinas terpênicas. II. Mcm. Jnat.

Butantan, íí/í5;317-323, 1980/81.

etanólico pela reação da hidantoina com 2 equivalentes de amina e formol.

Nos casos da morfolina e da difenilamina, verificamos uma monossubsti-

tuição no N-3 imídico que é tido como o mais reativo devido à influência

das carbonilas adjacentes i'"*, obtendo-se os compostos S e 9.

Com a piperidina e o formaldeído as hidantoinas reagiram, origi¬

nando os derivados bi-substituídos aos quais atribuímos a estrutura 10,

fundamentada nas análises elementares.

No caso da piperazina, a condensação de um equivalente da amina

com dois de hidantoina e de formol resultou na formação dos derivados

N,N’-bis (3-hidantoinil-metileno) 11 semelhantes a outros exemplos cita¬

dos na literatura *■ No infravermelho, a absorção a 3.300-3.200

cm~i caracterizou a vibração de estiramento do N-H inalterado h

A comprovação das estruturas propostas para os produtos obtidos

está sendo efetuada por análises espectroscópicas (IV, RMN de e

EM), e os resultados serão publicados posteriormente.

R|-n!.^n-R2

R| =H

R2= CH2 —N

R| = H

R2= CH2-n(Q),)^

R| =CH2—

^ R2= CH2 —

R| -H

R2= CH2—

N-

R| = H

R2= CH 2 OH

A reação da hidantoina da mentona 3 com formol e difenilamina

forneceu o composto N-hidróxi-metileno 12 sem conseguirmos a Base de

Mannich desejada apesar de várias condições experimentais. Aliás, a

obtenção de derivados N-hidróxi-metilenos no decorrer da Reação de

Mannich foi salientada anteriox-mente®' e num exemplo citado para a

benzimidazolona^o, há formação do composto 13.

319

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RABENHORST, E. & ZELNIK, R. As Bases de Mannich de hidantoinas terpênicas.

Dutantan, ^4A5.’317-323, 1980/81.

II. Mem. ínat.

CH2OH

CH2 N(RR')

Na reação das hidantoinas do citral e da metil-ionona com formol e

morfolina, não foram isolados derivados.

Os resultados deste estudo estão consignados na Tabela I.

PARTE EXPERIMENTAL

Os pontos de fusão foram registrados no aparelho Buchi 510 sem

sofrer correções. Os espectros de massa foram determinados nos espec-

trômetros Hitachi RMU-7M e Hewlett-Packard HP 5980 A, de infra¬

vermelho no da Perkin-Elmer 727 B e os de ultravioleta no da Beckman

DU-2 modelo 1098. Para a cromatografia em coluna empregamos gel

de sílica (Merck 0,05-0,20 mm). Hexano-acetato de etila 1:1 e 1:2 foram

os sistemas de solventes escolhidos para as análises de cromatografia

em camada delgada e iodo 0 reagente para a detecção das manchas. A

morfolina é da Koch-Light, a piperidina da Hopkin e Williams, a difeni-

lamina da Merck, a piperazina da Tanabi: estes reagentes foram secos

e destilados ou recristalizados. O formol é da Cario Erba. Os terpenos

carbonílicos citral, ionona, metil-ionona e mentol, matérias-primas para

a obtenção das hidantoinas, são da Dierberger Óleos Essenciais: foram

bidestilados a pressão reduzida. Através da espectrometria ultravioleta

as iononas foram identificadas como sendo os isômeros oc : «x-ionona

MeOII

230 nm ( 1 12884), lit.

230 nm (£15848); oc-metil-

Mcon

-ionona A 230 nm

max

8 EtOH

(£ 10950), lit. A 237nm (£8100). A

mentona foi preparada por oxidação do mentoP^.

PROCEDIMENTO GERAL

Refluxa-se uma mistura de 0,01 mol da hidantoina terpênica, 0,02

mol da amina secundária e 0,022 mol de formol a 40% em 5 ml de

320

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TABELA I

RABENHORST, E. & ZELNIK, R. As Bases de Mannich de hidantoinas terpênicas.

Butantan, ^íA5;317-323, 1980/81.

II. Mem. Inat.

12:

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321

SciELO

RABENHORST, E. & ZELNIK, R. As Bases de Mannich de hidantoinas terpênicas. II. Mem. Insi.

Butantan, UUU5:Z\1-Z2Z, 1980/81.

etanol durante 3 a 5 horas. No caso da piperazina as proporções foram

respectivamente de 0,02:0,011:0,03 mol. Após concentração o resíduo é

submetido a cromatografia de coluna, exceto no caso do derivado N-

-metil-piperidínico da hidantoina da mentona 3-10 que cristalizou em

hexano. Nos eluatos de hexano-acetato de etila 4:1 e 2:1 isola-se o

produto que é purificado por recristalizações em solventes apropriados

(Tabela I). Nas reações com piperazina ocorre precipitações após

refluxo de 5 a 10 minutos, recolhendo-se o produto por filtração.

N-3-(hidroximetil) -espiro-mentil-hidantoina (3-12)

Uma mistura de 0,01 mol da hidantoina 3, 0,02 mol de difenilamina

e 0,02 mol de formol a 40% em 5 ml de etanol foi refluxada durante 7

horas. Após concentração, o resíduo (313 mg) foi cromatografado. O

produto (48 mg — 19%) foi isolado dos eluatos do hexano-acetato de

etila 3:2, p.f. 168-172° (acetona-hexano), M+254.

Calculado para C 13 H 22 N 2 O 3 : C 61,39, H 8,72, N 11,01%;

obtido: C 61,94, H 8,90, N 11,11%.

AGRADECIMENTOS

Agradecemos a Dra. Riva Moscovici, Instituto de Química da USP

pelas análises elementares, ao Centro de Análises Instrumentais do

Instituto de Pesquisas Tecnológicas de São Paulo pelos espectros de

infravermelho e de massa, ao Dr. A. Haider, Institut de Chimie de

rUniversité de Lausanne pelos espectros de massa (HP 5980 A), a Quí¬

mica Maria Nazareth de C. Ferraz pela colaboração na fase final desta

pesquisa, ao Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecno-

lógico-CNPq pelo auxílio financeiro concedido (N.° 2222-0900/77), aos

Srs. Teodomiro Vieira Santos e Lourenço Blanc pela assistência técnica

e a Dierberger Óleos Essenciais S.A., São Paulo, pelos terpenos carbo-

nílicos oferecidos.

ABSTRACT: The synthesis of N-Mannich Bases of the hydantoins

of the terpenes citral, menthone, a-ionone and a-methyl-ionone was

aceomplished by reaction with formaldehyde and the secundary

amines morpholine, piperidine, diphenylamine and piperazine. The

yields ranged from 4.6 to 61%.

UNITERMS: Hydantoins, Terpenes, N-Mannich Bases.

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Mem. Inét. Butantan

UU5:B25-Z3i, 1980/81

APERFEIÇOAMENTO DO PROCESSO DE HIPERIMUNI-

ZAÇÃO ANTITETÂNICA VISANDO A OBTENÇÃO DE

ANTITOXINA DE ALTA DOSAGEM

(Anotações de Relatórios de Serviço)

Sebastião de Camargo CALAZANS

Reynaldo S. FURLANETTO *

Serviço de Imunoterapia do Instituto Butantan (*)

Foi sempre grande o interesse dos pesquisadores que se dedicam

ao preparo dos soros terapêuticos, a obtenção de produtos cada vez

mais potentes.

Para esse fim, em numerosas publicações recentes, vem sendo feita

a adição, aos antígenos, de substâncias não específicas e que se reve¬

laram estimulantes ao aumento da produção dos anticorpos desejados.

A idéia já é antiga, porém com interpretação diferente, pois em

1889, Roux e Yersin (1), pouco tempo depois de terem descoberto a

toxina diftérica observaram, em suas experiências, que o veneno ela¬

borado pelo bacilo de Klebs-Lõffler, que matava cobaias no perío¬

do de 30 a 60 horas, tinha sua ação retardada quando tratado pelo

cloreto de cálcio, o que levou os referidos autores a dizerem que “se a

substância tóxica aderisse bastante ao corpo insolúvel, ela não se difun¬

diria senão lentamente determinando, talvez a vacinação gradual do

animal”.

(♦) EXPLICAÇÃO NECESSÁRIA

Este trabalho representa a análise das pesquisas realizadas durante

os anos de 1942-1943 e 1944, no Serviço de preparo da antitoxina tetâ¬

nica, e que fazem parte dos relatórios anuais, encaminhados à Diretoria

do Instituto Butantan.

Não estando ainda completas nossas pesquisas, sua publicação

deveria ser feita em 1945.

Acontece que, sendo um de nós, transferido para o Instituto “Adolfo

Lutz”, inesperadamente, e sem ao menos um' simples aviso pessoal, a

“In memorian”.

325

SciELO

10 11 12 13 14 15

CALAZANS, S. C. & FURLANETTO, R. S. Aperfeiçoamento do processo de hiperimunização antítetànica

visando a obtenção de antitoxina de alta dosasrem (Anotações de Relatórios de Serviço). Mcm, Inat.

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organização por nós planejada, de comum acordo com a Diretoria, então

em exercício e as pesquisas em andamento, foram interrompidas.

Comemorando-se porém, no corrente ano, o octogésimo aniversário

da criação do Instituto Butantan, resolvemos publicar estas anotações

para que ficasse documentado nas Memórias do Instituto, o que foi con¬

seguido naqueles três anos a respeito da produção da antitoxina tetânica.

Em 1916, Le Moignic e Pinoy (2) empregaram uma vacina antití-

fica constituída por germes mortos pelo calor, tendo como veículo a

lanolina e o óleo de oliva. Visavam realizar a vacinação antitífica com

uma dose única, reunindo em uma só, a totalidade dos germes empre¬

gados nas quatro injeções em uso.

O emprego, porém, de substâncias não específicas na rotina

do preparo de soros terapêuticos só foi estabelecido depois das pesquisas

memoráveis e fundamentais de G. Ramon e que revolucionaram por

completo os antigos processos de hiperimunização dos equinos e a

profilaxia da difteria e do tétano.

Este grande e persistente pesquisador, a quem tanto devem a

ciência e a humanidade, assinalou, depois de uma série de observações,

“o aumento, por vezes considerável, do teor de antitoxina no soro dos

cavalos que apresentavam, acidentalmente, um abcesso no ponto de inje¬

ção da toxina diftérica, durante o processo de imunização”.

Atribuindo à referida reação inflamatória, a melhora do título dos

soros, que vinha preparando, resolveu adicionar aos antígenos, substân¬

cias não específicas, mas capazes de produzirem, in loco, acentuada

reação semelhante a obtida acidentalmente.

Fixou-se Ramon (3), no início, no emprego da tapioca pulverizada,

cuja aplicação passou a ser adotada largamente, sendo logo seguida pelo

uso de cloreto de cálcio e das vacinas associadas. Por outro lado, Glenny,

Pope, Waddington e Wallace (4), adicionando alúmen de potássio às

toxinas, notaram o aparecimento de um precipitado insolúvel que aumen¬

tava, também, grandemente o poder antigênico das mesmas.

Mais recentemente, Ramon, em estudos realizados com seus colabo¬

radores Lemétayer e Richou (5), mostrou ser a lanolina de grande utili¬

dade na imunização e, em novas pesquisas ainda com Lemétayer (6),

expos os resultados da imunização de carneiros e cavalos com anatoxina

tetânica misturada com a referida substância. Com o emprego da lano¬

lina, os animais não só se imunizaram rapidamente, como forneceram

soro de alta dosagem.

Para Weinberg e Guillaumie (7), que compartilham da opinião de

Ramon, o aumento do poder imunizante dos antígenos é devido “à reabsor¬

ção lenta e contínua do antígeno em conseqüência do seu envolvimento

pela lanolina, e à forte reação local e geral do organismo, fator comum

a todos os processos de imunização, mas que se manifesta, em geral,

de uma maneira mais violenta, quando se emprega o processo da lanolina”.

Thibaut (8), em interessantes pesquisas, estudou as modificações

histológicas determinadas pela inoculação subcutânea, em cobaias, de 4

misturas diferentes, a saber:

326

SciELO

10 11 12 13 14 15 16

CALAZANS, S. C. & FURLANETTO, R. S. Aperfeiçoamento do processo de hiperimunização antitetânica

visando a obtenção de antitoxiha de alta dosagem (Anotações de Relatórios de Serviço). Mem. Inat.

Butantan. ^4/45;325-334, 1980/81.

1. ®) Caldo Simples

Solução Fisiológica

2. °) Anatoxina Tetânica

Solução Fisiológica

3. °) Solução Fisiológica

Lanolina

Óleo de Oliva

4. ®) Anatoxina Tetânica

Lanolina

Óleo de Oliva

Suas conclusões baseadas no estudo histológico de cortes da zona

inoculada foram as seguintes: a anatoxina injetada subcutaneamente em

cobaias não determina reação histológica característica, pois a reação se

assemelha à produzida pelo caldo simples que é banal, leve e efêmera, ao

passo que as modificações produzidas pelas misturas oleosas são pro¬

fundas, com grande proliferação do tecido conjuntivo, criando uma lesãc

durável.

Norman (9), em 1934, empreendeu uma série de experiências nas

quais estudou a influência das emulsões finamente divididas de óleos e

gorduras sobre as toxinas bacterianas. Empregou para isso substâncias

de origem vegetal, animal e mineral, como o óleo de oliva, o creme de

leite e a parafina, emulsionadas com goma acácia, estudando sua influ¬

ência sobre a ação das toxinas produzidas pelos bacilos tetânico, difté-

rico, perfríngico e V. Séptico.

Conclui o autor que as toxinas são adsorvidas pelas partículas oleosas

e depois lentamente cedidas ao organismo e que quanto mais finas as

emulsões, maior a proteção contra as doses letais das toxinas empre¬

gadas. A adição de substâncias que tornem as emulsões estáveis garante

a proteção contra as toxinas, assinalando, por outro lado, que o creme

de leite não tinha nenhuma ação protetora. Referiu-se ainda às expe¬

rimentações que vinha fazendo a respeito da possibilidade de imunização

de animais por esse processo.

Walsh e Frazer (10), independentemente do autor anterior, inves¬

tigaram problemas semelhantes, inoculando em coelhos grandes doses

de toxinas misturadas a emulsão de óleo de fígado de bacalhau e óleo de

oliva, chegando às mesmas conclusões.

De tudo o que acima ficou exposto, devemos concluir com Ramon

que é na intensa reação inflamatória local, na qual se observa o apare¬

cimento de forte leucocitose, que deve residir a exaltação do poder imuni-

zante dos antígenos, pelas substâncias não específicas.

Uma outra aquisição de grande valor, na produção de antitoxina

tetânica, com títulos elevados foi, sem dúvida, a recomendação de Glenny,

Pope, Waddington e Wallace (11) de se deixar um intervalo de 30 dias

entre a primeira injeção do antígeno tetânico e do início da imunização.

327

SciELO

10 11 12 13 14 15

CALAZANS, S. C. & FURLANETTO, R. S. Aperfeiçoamento do processo de hiperimunização antitetânica

visando a obtenção de antitoxina de alta dosagem (Anotações de Relatórios de Serviço). Afcm. Inst.

Butantan, 1980/81.

Algum tempo mais tarde, Ramon e Lemétayer (12) observaram que

os cavalos vacinados com duas doses de vacina antitetânica, dois anos

antes, produziam antitoxina tetânica de titulos muito mais elevados.

No Instituto Butantan, tanto no preparo de soros antipeçonhentos,

como no serviço de preparo do soro antidiftérico, e dos soros antianae-

róbios, todas estas substâncias têm sido empregadas e com grande

sucesso, tendo tais métodos sido iniciados em São Paulo, pelos saudosos

amigos e colegas Lemos Monteiro e Flávio Fonseca (13).

Em 1932, Flávio Fonseca (14), então responsável pelo preparo da

antitoxina tetânica, adotou a vacinação antitetânica, sistematicamente,

nos animais do Instituto.

Esta prática, além de proteger os eqüinos contra o tétano, faz com

que eles reajam, com muito maior intensidade, ao estímulo imunizante

dos antígenos tetânicos ao serem submetidos ao processo de hiperimu-

nização.

PREPARO DA TOXINA E DA ANATOXINA TETÂNICAS

O meio empregado para a obtenção da toxina tetânica é o que já,

há muito tempo, vem sendo empregado neste Serviço, isto é, o meio de

Tarozzi, constituído por caldo de coração de boi, glicosado a 1%.

Após uma série de experiências, resolvemos reduzir o pH inicial

deste meio de 7,8 para 5,5, de conformidade com as pesquisas de A.

Berthelot, G. Ramon e Mlle. Amoureux, julgado melhor para a produção

uniforme, de uma boa toxina tetânica.

As experiências deste Serviço, neste particular, vêm sendo realizadas

desde 1940, sendo tal prática empregada rotineiramente.

Outra modificação, não menos importante, foi a referente ao tempo

de incubação, que era de 15 dias. Esse período hoje está reduzido, pratica¬

mente à metade, pois as filtrações são feitas no fim de 8 a 9 dias de

estufa. Findo o prazo de produção da toxina, é a mesma clarificada, por

meio de filtração, através de polpa de papel de filtro, colocada em funis

de Büchner e em seguida filtrada em placas Zeitz E. K., e, finalmente,

determinada a D.M.M., em cobaias de 350 g. Provas de pureza das cultu¬

ras antes da clarificação, e da esterilidade da toxina filtrada, são feitas

em todas as partidas.

Quebrando-se com certa freqüência os funis de Büchner, feitos de

porcelana, esta Seção tratou de substituí-los por outros semelhantes,

mas de metal, com resultados perfeitamente iguais.

Quanto ao título da toxina utilizada a D.M.M. foi de 0,0002 para

cobaias de 350 g pela via subcutânea.

A anatoxina é preparada de acordo com a técnica já conhecida.

Uma vez terminado o processo de desintoxicação, é feita a prova de

inocuidade e verificado o poder antigênico da mesma.

As provas de inocuidade e do poder antigênico da anatoxina são

feitas em duas cobaias.

328

SciELO

10 11 12 13 14 15 16

CALAZANS, S. C. & FURLANETTO, R. S. Aperfeiçoamento do processo de hiperimunização antitetânica

visando a obtenção de antitoxina de alta dosagem (Anotações de Relatórios de Serviço). Mem. Inst.

Butantan, U/45:Z25-ZZ4, 1980/81.

As cobaias i’ecebem, uma 5 c.c. e outra 10 c.c., pela via subcutânea.

Um mês após a injeção da anatoxina, essas cobaias são inoculadas com

50 e 100 D.M.L. da toxina tetânica, respectivamente, e devem sobreviver,

sem sintomas, em ambas as provas.

O título da antitoxina tetânica é determinado pelo processo de Ro-

senau e Anderson e expresso em unidades americanas — U.A. Uma U.A.

corresponde a duas unidades internacionais — U.I.

O processo de imunização empregado para a obtenção da antitoxina

tetânica consta de 3 fases, a saber:

1. ^ Vacinação — (sensibilização dos animais)

2. ^ Imunização de base

3. ^ Hiperimunização

VACINAÇÃO

Todo animal que entra para o Instituto recebe duas doses de 25 e

50 c.c. da anatoxina tetânica, adicionada de 0,5% de alúmen de potássio,

com 15 dias de intervalo, após o que é distribuído aos vários Serviços de

imunização.

Transcorrido, no mínimo, um mês de intervalo após a vacinação,

os cavalos encaminhados ao Serviço de produção de antitoxina tetânica

serão submetidos a uma das seguintes variantes:

l.a MODALIDADE-IMUNIZAÇÃO DE BASE

Consta de 4 injeções de anatoxina adicionada de alúmen de potás¬

sio, na proporção de 0,5% até o total de 650 cm-'’, de 5 em 5 dias, sendo

a primeira injeção de 50 cm^ e a última de 300 cm®; dosando mais de 5 U.A.

por cm®, 8 dias após a última injeção, descanso de 20 dias, quando, então,

se inicia a fase de hiperimunização.

HIPERIMUNIZAÇÃO

Nesta fase os animais recebem um total de 750 cm® de toxina, com

0,5% de alúmen de potássio (menos na última), em injeções feitas

cada 5 dias; dosando mais de 300 U.A. por cm®, serão submetidos às

sangrias definitivas.

Quantidade de antígenos empregada:

— Anatoxina 650 c.c.

— Toxina 750 c.c.

Total 1.400 c.c.

Dias decorridos até a primeira sangria definitiva: 70

329

SciELO

10 11 12 13 14 15

CALAZANS, S. C. & FURLANETTO, R. S. Aperfeiçoamento do processo de híperimunização antitetânica

visando a obtenção de antitoxina de alta dosagem (Anotações de Relatórios de Serviço). Mem. Inst.

Butantan, 44A5;326-334, 1980/81.

2.^ MODALIDADE

É igual à primeira, com um intervalo de oito dias entre a imuni¬

zação de base e a hiperimunização.

Dias decorridos até a primeira sangria definitiva: 48

Títulos antitóxicos alcançados em alguns cavalos, nos anos de 1942, 1943 e 1944

NÜMERO DOS CAVALOS

ANOS

DOSAGEM

509

1942

2.500

U.A.

523

))

2.500

U.A.

592

2.500

U.A.

694

2.500

U.A.

600

3.000

U.A.

513

3.000

U.A.

521

3.000

U.A.

1943

621

16/4

4.000

U.A.

621

24/4

3.500

U.A.

507

24/4

4.000

U.A.

631

4/6

4.000

U.A.

654

4/6

4.000

U.A.

E-545

19/7

5.000

U.A.

E-546

13/7

6.500

U.A.

E-545

31/7

7.000

U.A.

E-545

10/8

5.250

U.A.

Em 1943, os títulos antitóxicos, obtidos no Serviço de hiperimunização

antitetânica, ultrapassaram nossa expectativa, deixando mesmo em

segundo plano os excelentes resultados obtidos em 1942; supomos haver

conseguido o maior título antitóxico até hoje registrado na imunização

contra o tétano, pois, em toda a literatura consultada não foi encontrado

título de dosagem da antitoxina igual ao produzido pela égua n.° 545,

de procedência nacional, que revelou conter de 3.000 a 7.000 U.A. por

cm’, como se vê abaixo:

E. 545 do Serviço de Soro Antitetânico

(duas imunizações em 1943)

1.® imunização

2.^ imunização

1. “ sangria =:

2. ^ sangria =

3. “ sangria =

4. ®* sangria =

1. ^ sangria =

2. ^ sangria =

3. ®^ sangria =

4. ® sangria =

4.000 U.A.

4.500 U.A.

3.500 U.A.

6.000 U.A.

6.500 U.A.

5.000 U.A.

7.000 U.A.

5.500 U.A.

330

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10 11 12 13 14 15 16

CALAZANS, S. C. & FURLANETTO, R. S. Aperfeiçoamento do processo de hiperimunização antitetânica

visando a obtenção de antitoxina de alta dosagem (Anotações de Relatórios de Serviço). Mem. Inat.

Dutantan, 4iA5;326-334, 1980/81.

A obtenção pela primeira vez de antitoxina com o título de 7.000 U.A.

por C.C., constitui fato marcante na história da produção da antitoxina

tetânica no Instituto Butantan.

Em 1944, foram também alcançados títulos altos como se vê na relação abaixo:

NÜMERO DOS CAVALOS

ANOS

DOSAGEM

1944

500

25/4

7.000 U.A.

544

25/4

7.000 U.A.

541

27/4

4.500 U.A.

510

27/4

4.500 U.A.

530

27/4

5.000 U.A.

563

27/4

5.000 U.A.

594

8/5

4.000 U.A.

563

8/5

4.000 U.A.

500

8/5

5.000 U.A.

Pelo que pudemos apurar, o

maior

título antitóxico referido na lite-

ratura é o citado por G. Ramon e Lemétayer (15)

que relatam ter obtido

em um grupo

de 15 cavalos, previamente vacinados contra o tétano, o

título máximo

de 10.000 U.I. que correspondem

a 5.000 U.A., em dois

animais, conforme se vê a seguir

“N.° des

Titres

N.° des

Titres

Chevaux

des sérums

Chevaux

des sérums

6.000 unités (0)

1.800 unités

1.200

2.800

3.000

6.000

1.500

3.000

10.000

6.000

2.600

10.000

6.000

6.000”

6.500

(0) Unités internationales.

Citando ainda outros pesquisadores, dizem os mesmos autores por

nós referidos:

“La valeur antitoxique moyenna des sérums antitoxiques préparés

par S. Schmidt atteint, em 1927-1928 prés de 1.000 unités (internatio¬

nales) et la valeur la plus élevés que ai été obtenue: 4.400 unités chez

un Cheval. Condréa, en utilisant diverses techniques, préparé des sérums

dont le titre antitoxique moyen est de 600 unités et cela aprés un temps

d’hyperimmunisation beaucoup plus long et des quantités d’antigène

plus considerables. Glenny, dans un article tout récent, dit avoir atteint

331

SciELO

10 11 12 13 14 15

CALAZANS, S. C. & FURLANETTO, R. S. Aperfeiçoamento do processo de hiperimunização antitctânica

vfsando a obtenção de antitoxina de alta dosagem (Anotações de Relatórios de Serviço). Mcm. Inst.

Butantan, 44^5:325-334, 1980/81.

la moyenne de 1.600 unités (800 unités U.S.). La mise em parallèle de

tous ces chiffres et resultais avec ceux fournis plus haut à propos do

rhyperimmunisation de nos quinze Chevaux donne la mesure des progrès

réalises à tous points de vue, grâce aux méthodes que Tun de nous a

établies ou perfectionnées durant ces six dernières années et que nous

avons assotiées dans Tessai rapporté. Aux avantages qui s’attachant à

la mise en ouvre de ces méthodes et aux i-ésultats acquis: économie de

temps et d’antigène, production d’antitoxine considérablement accrue,

s’en ajoutent d’autres, nom moins importants qui ont trait à Tutilisation

des sérums antitètaniques ainsi obtenus en thérapeutique. Par exemple,

ces sérums dont la haute teneur en antitoxine spécifique peut être encore

augmentée par la concentrations et la purification donnent de grandes

facilités pour le traitment du tétanos déclaré, ils permettent, em effect,

de réduire considérablement le volume du liquide spécifique à injectar”.

Do exposto conclui-se que Ramon e Lemétayer obtiveram em 15

cavalos uma média de 2.423 U.A., sendo a dosagem máxima de 5.000 U.A.,

em dois cavalos. S. Schmidt obteve 2.200 U.A., em um único cavalo;

Condréa, depois de um longo período de imunização, consegue uma média

de 300 U.A.; Glenny, por sua vez, obteve uma dosagem média de 800 U.A.

Em nosso Serviço de rotina este ano, computando-se indistintamente

todos os animais, bons e maus produtores submetidos à imunização, tive¬

mos as seguintes dosagens:

1. ^ imunização — 40 cavalos — dosagem máxima

dosagem média

2. ^ imunização — 15 cavalos — dosagem máxima

dosagem média

Quadro demonstrativo das dosagens obtidas pelos autores citados

antitoxina tetânica no Instituto Butantan

— 6.000 U.A.

— 1.544 U.A.

— 7.000 U.A.

— 1.886 U.A.

e no serviço de

ANOS

DOSAGEM MAXIMA DOSAGEM MÉDIA

SCHMIDT

1928

2.200 U.A.

500 U.A.

CONDRÉA

300 U.A.

GLENNY

800 U.A.

RAMON e

LEMÉTAYER

1931

5.000 U.A.

2.423 U.A.

LEMOS MONTEIRO e

FLAVIO FONSECA

1931

1.600 U.A.

FLAVIO FONSECA

1932

1.600 U.A.

CALAZANS e

FURLANETTO

1942

3.000 U.A.

CALAZANS e

FURLANETTO

1943

7.000 U.A.

1.715 U.A.

CALAZANS e

FURLANETTO

1944

7.000 U.A.

1.888 U.A.

332

SciELO

10 11 12 13 14 15 16

CALAZANS, S. C. & FURLANETTO, R. S. Aperfeiçoamento do processo de hiperimunização antitetânica

visando a obtenção de antitoxina de alta dosagem (Anotações de Relatórios de Serviço). Mem. Inst.

Butantan, ^í/^5;325-334, 1980/81.

Vê-se que este serviço não só conseguiu bater o recorde mundial no

que diz respeito à dosagem máxima, mas ainda obteve uma média geral

de dosagem, num serviço de rotina, que se pode classificar de excelente.

Acreditamos que estes títulos excepcionais corram por conta do tipo

de imunização, por nós adotado, além de outros fatores mencionados, como

a seleção de animais bons produtores e ao alto poder imunizante dos antí-

genos empregado.

Do relatório anual de 1943 do Diretor do Instituto Butantan, Flávio

Fonseca (16), destacamos os seguintes tópicos:

“Resultados de grande significação prática no preparo de antitoxina

tetânica foram obtidos pelos Drs. Calazans e Furlanetto, os quais regis¬

traram em diferentes cavalos, títulos antitóxicos excepcionais de 3.500,

4.000, 4.500 e 5.000 unidades americanas por cm^ havendo mesmo um

eqüino (a égua n.° 545, de procedência nacional), no qual se encontrou

um título de 4.000-6.000 U.A., em diferentes sangrias da 1.^ imunização

e de 5.000-7.000 U.A., em várias sangrias de 2.‘^ imunização.

Tais títulos de 6.000-7.000 U.A., como foram obtidos no animal acima

referido, parecem constituir um recorde, pois RAMON e LEMÉTAYR,

de grande experiência no assunto, se referem ao título máximo de

5.000 U.A., obtido em dois, de um lote de quinze eqüinos”.

CONCLUSÕES

1. Foram apresentados títulos de antitoxina tetânica produzida

durante os anos de 1942, 1943 e 1944.

2. Em toda literatura consultada não foi encontrada antitoxina

tetânica com título igual ao obtido nos eqüinos números 545, 500 e 544.

3. Por meio da refinação e concentração, essas antitoxinas pode¬

rão ter seu título ainda mais elevado, o que representará, sem dúvida,

grande vantagem para o tratamento do tétano.

4. Foi ressaltada a importância da seleção de animais bons pro¬

dutores na obtenção de antitoxina tetânica de altos títulos. Esses ani¬

mais devem ser conservados no serviço, enquanto se acharem em boas

condições.

5. Foram introduzidas modificações no processo de produção da

toxina tetânica.

6. Os bons resultados obtidos podem ser atribuídos também ao

alto poder imunizante dos antígenos empregados.

AGRADECIMENTOS

Não podemos terminar este trabalho sem prestar um sentido culto

de saudade ao nosso amigo e companheiro de trabalho REYNALDO FUR¬

LANETTO, inteligência brilhante e dotado de notáveis qualidades de pes¬

quisador, tão prematuramente desaparecido.

333

SciELO

10 11 12 13 14 15

CALAZANS, S. C. & FURLANETTO, R. S. Aperfeiçoamento do processo de hiperimunização antitetânica

visando a obtenção de antitoxina de alta dosagem (Anotações de Relatórios de Serviço). Mcm. /nst.

Dutantan. U/45:325-3Z4, 1980/81.

Aos queridos auxiliares JOÃO FERNANDES e ANTENOR MAR¬

CONDES, nosso preito de grande saudade.

A nossa prezada e inteligente colaboradora EMMA DE LIMA, inex-

cedível no cumprimento do dever, o nosso muito obrigado.

CONCLUSIONS

1. Titles of tetanic antitoxin produced during the years of 1942,

1943 and 1944 have been presented.

2. It has not been found, in all literature consulted, tetanic anti¬

toxin with titles similar to the ones obtained in the horses number 545,

500 and 544.

3. By means of refinement and concentration these antitoxines

may have titles yet higher than the ones here obtained what will be of

great advantage in the treatment of tetanus.

4. The importance of a selection of good animal productors in

the obtainance of tetanic antitoxin of high titles has been emphasized.

Those animais should be left in condition of subsequent immunization

while they are sound.

5. Modifications in the process of tetanic toxin have been intro-

duced.

6. The good results that have been obtained may be due to the

high immunization power of the antigenic employed.

REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

1. ROUX, E. & YERSIN, A I. Pasteur, 1889.

2. Le MOIGNIC & PINOY C.R. Soc. Biol, 29:201 e 352, 1916.

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16. FONSECA, F. Relatório Anual do Diretor do Instituto Butantan, 1943.

334

SciELO

10 11 12 13 14 15 16

Mcm. Inst. Dutantan

4^45:335-341. 1980/81

RELAÇÕES ENTRE O EMPREGO DE ANATOXINA

DIFTÉRICA BRUTA E O TESTE DE SCHICK EM

CAVALOS HIPERIMUNIZADOS

Joana Akiko FURUTA * *

Célia LIBERMAN *

Raymundo ROLIM ROSA ****

Edison Paulo Tavares de OLIVEIRA **

Frederico Fontoura LEINZ ***

Hideyo IIZUKA *

RESUMO: Cavalos submetidos previamente ao teste de Schick

foram estimulados sete vezes com anatoxina dlftérica fluida adsor-

vida pelo alúmen a fim de se estudar os níveis de antitoxina pro¬

duzidos.

Observou-se que a freqüência dos títulos antitóxicos individuais

maiores ou i^ais à 500 Ul/ml, bem como os títulos médios foram

mais elevados no lote de eqüinos Schick negativos.

Desta forma, o aproveitamento para a produção de soros antidifté-

ricos será maior quando da utilização de animais Schick negativos.

PALAVRAS-CHAVE: Anatoxina diftérica; antitoxina diftérica;

produção de soro antidiftérico em cavalos; reimunizações repetitivas.

INTRODUÇÃO

A produção de soro antidiftérico tem sido alvo de inúmeros estudos

desde 1908, quando BELLA SCHICK introduziu uma intradermo rea¬

ção que permitiu detectar a presença de antitoxina diftérica circulante.

Esta reação consistia na inoculação de baixas doses de toxina diftérica

pela via intradérmica.

HITCHENS e TINGLEY em 1917, adaptaram esta reação ao

cavalo a fim de observar a existência de uma provável imunidade natu-

• Seção de Toxinas e Anatoxinas

Chefe da Seção de Toxinas e Anatoxinas

Serviço Agrícola

• ••♦ Diretor do Serviço de Imunologia

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FURUTA, J. A.: LIBERMAN, C.; OLIVEIRA, E. P. T.; LEINZ, F. F.: IIZUKA, H. & ROLIM, R.

Relações entre o emprego de anatoxina diftérica bruta e o teste de Schick em cavalos hiperimunizados,

Mem. Inst. Butantan, ^^/■45;385-341, 1980/81.

ral. SORDELLI em 1921, conseguiu a preparação de um soro com

alto teor de antitoxina diftérica, utilizando cavalos Schick negativos.

Em 1921/6, GLENNY ^ propôs a utilização de cavalos original¬

mente Schick negativos para a rápida obtenção de soros hiperimunes,

fato corroborado depois por RAMON em 1929.

Quanto ao antígeno a ser administrado, GLENNY ® referia que o

precipitado obtido pela adição do alúmen a este, provocava em cobaias

uma exacerbação significativa do poder imunogênico, quando comparado

ao da anatoxina diftérica sem o adjuvante.

Já em 1959, RELYVELD estudou a produção de anticorpos em

cavalos com e sem imunidade natural, utilizando como antígeno a anato¬

xina diftérica purificada e adsorvida por fosfato de cálcio.

Fundamentados nas pesquisas dos autores citados propõe-se um estu¬

do sobre a dinâmica da anticorpogênese, bem como o seu comportamento

em cavalos soroprodutores, previamente selecionados pelo teste de Schick,

no decorrer de uma série de reimunizações com anatoxina diftérica não

purificada adsorvida pelo alúmen.

MATERIAL E MÉTODOS

Antígeno — Foi preparado a partir do cultivo da estirpe de Coryne-

bacteríum diphtheriae, Park Williams 8, variedade Toronto, em meio de

cultura F-20 A toxina produzida, liberada nesse meio, foi separada da

massa bacteriana por meio de filtração esterilizante em placas Seitz, tipo

EKS. A seguir foi destoxificada através da adição de formol na concen¬

tração final de 0,5% e incubada durante um período de 30 dias, à 37°C

em estufa bacteriológica.

A seguir, o antígeno foi diluído de forma a conter 40 Lf/ml. Para

cada cavalo foram utilizadas 750 ml de anatoxina diftérica fluida, seguida

de 2100 ml de anatoxina diftérica adsorvida com alúmen de potássio, na

concentração final de 0,5%.

Animais — Foram selecionados cavalos considerados hígidos pelo

Serviço de Veterinária do Instituto Butantan, pesando aproximadamente

500 kg, separados em dois lotes de cinco animais cada, de acordo com o

resultado do teste de Schick.

Os animais permaneceram durante todo o período do experimento

na Fazenda São Joaquim deste Instituto, localizada no município de São

Roque no Estado de São Paulo.

Teste de Schick — Foi utilizada uma toxina diftérica preparada no

Instituto, conforme técnica recomendada pela Organização Mundial de

Saúde’®. O produto, diluído de tal forma à conter 1 D.M.M./cobaia, foi

inoculado, por via intradérmica, na região correspondente à tábua do

pescoço do cavalo previamente depilada. *•

Após 48 horas, a reação que resultou na formação de um edema, foi

medida através de um paquímetro, comprimindo-se a região testada entre

os dedos polegar e indicador.

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FURUTA. J. A.; LIBERMAN, C.; OLIVEIRA, E. P. T.; LEINZ, F. F.; IIZUKA, H. & ROLIM, R.

Relações entre o emprego de anatoxina diftérica bruta e o teste de Schick em cavalos hiperimunizados.

Mem. Inst. Butantan, ^4/^5:335-341, 1980/81.

O teste foi considerado positivo quando, a diferença entre a espes¬

sura da derme medida antes do teste e, a provocada pela reação foi igual

ou superior a 3 mm. Esta ocorrência indicou que o animal não apresen¬

tou imunidade natural. Na ausência do edema, o teste foi considerado

negativo, revelando, provavelmente, a presença de antitoxina diftérica.

Toxina diftérica padrão — A toxina padrão, utilizada para dosea¬

mento do teor de antitoxina diftérica contida nas amostras de soro hipe-

rimune, procedentes das sangrias exploradoras, foi preparada no Insti¬

tuto Butantan. A padronização foi realizada frente à antitoxina diftérica

padrão internacional.

Antitoxina diftérica padrão — o soro padrão utilizado para a padro¬

nização da toxina diftérica procedeu do “International Laboratories for

Biological Standards” do Statens Seruminstitut, Copenhagen, Denmark.

Esqiiema de hmmização — Os dois grupos de cavalos, tanto Schick

negativo como o Schick positivo, foram imunizados inicialmente por via

intramuscular, na região dorsal mediana, com anatoxina diftérica fluida

e em seguida com anatoxina diftérica adsorvida pelo alúmen. O antí-

geno foi administrado em volumes crescentes. A primeira fase consumiu

28.900 Lf de imunógeno; a segunda, 42.200 Lf, pei-fazendo ao final de

oito semanas de imunização um total global de 71.800 Lf de toxina

diftérica. A freqüência das inoculações e respectivos volumes respeita¬

ram o esquema preconizado por OLIVEIRA

Em seguida, os animais permaneceram em repouso durante um

período mínimo de 30 dias 2 . Iniciou-se portanto a reimunização. Nesta

fase, cada um dos eqüinos receberam um total de 40.000 Lf de anatoxina

adsorvida pelo alúmen, também administrada em doses gradativamente

crescentes

Na última semana de imunização foi executada uma sangria explo¬

radora de cada cavalo a fim de se determinar o título de antitoxina dif¬

térica circulante. De acordo com 0 resultado do doseamento, ou seja,

títulos iguais ou superiores a 500 Ul/ml, os animais foram sangrados na

proporção de 4% do seu peso corporal, fracionados em três vezes, com

intervalos de dois dias entre cada sangria.

Terminada a última operação, os eqüinos permaneceram em repouso

durante um período mínimo de 60 dias. Após cada etapa de sangria e

repouso, repetiu-se 0 processo de reimunização.

RESULTADOS E DISCUSSÃO

Foram avaliadas sete sangrias exploradoras nos dois lotes de cinco

cavalos.

A primeira imunização denominamos imunização de base, por consti¬

tuir-se no primeiro contato dos animais com a anatoxina diftérica, inde¬

pendente do fato de estes possuírem ou não imunidade natural.

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FURUTA. J. A.; LIBERMAN, C.; OLIVEIRA, E. P. T.; LEINZ, F. F.; IIZUKA, H. & ROLIM, R.

Relações entre o emprego de anatoxina diftérica bruta e o teste de Schick em cavalos hiperimunizados.

Mem. Jnst. Butantan, 44/-45';335-341, 1980/81.

O comportamento sorológico do lote Schick positivo está delineado

na Tabela 1, onde observamos que a média dos títulos antitóxicos inicial

foi de 640 Ul/ml. Este valor foi decrescendo até 280 Ul/ml na sétima

imunização.

TABELA 1

Níveis de antitoxina diftérica observados em lote de cavalos Schick positivos, no

decurso

de sete

imunizações

Cavalo

Níveis

de antitoxina diftérica

em Ul/ml

Hiperimunizações

l.a

2.a

3.a

6.a

7.»

980

400

600

400

300

200

322

800

400

500

600

500

433

1000

600

500

400

300

200

998

200

800

400

500

400

446

800

700

500

100

Médias

640

620

500

460

360

320

280

Os cavalos Schick negativos, por sua vez, responderam ao primeiro

estímulo com um título médio de 1.000 Ul/ml. Esta média foi declinando

no decorrer das hiperimunizações até 480 Ul/ml. Na sexta estimulação

houve uma elevação para 680 Ul/ml, conservando-se nesse nível até o

final do experimento, conforme indica a Tabela 2.

TABELA 2

Níveis de antitoxina diftérica observados em lote de cavalos Schick negativos, no

decurso

de sete

imunizações

Cavalo

n.°

Níveis

de antitoxina diftérica

em Ul/ml

Hiperimunizações

l.a

2.a

3.a

5.a

6.a

7.a

413

1000

600

700

400

200

300

200

188

1400

1100

900

1100

900

1100

1000

684

1000

800

700

600

1000

1200

558

400

700

600

500

700

600

1200

600

700

300

400

Médias

1000

740

710

680

480

680

O comportamento diferenciado de cada lote de animais, diante de cada

estímulo antigênico, no transcorrer das sete imunizações, está represen¬

tado na Figura 1.

1 SciELO

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Relações entre o emprego de anatoxina diftérica bruta e o teste de Schick em cavalos hiperimunizados.

Mem. Inst. Butantan, ^■4/-i5:335-341. 1980/81.

A freqüência dos títulos individuais de antitoxina diftérica foi tam¬

bém levantada e analisada na Tabela 3, pois, dentro da rotina do Instituto

Butantan, para produção de soro antidiftérico, selecionam-se, para sangria,

apenas eqüinos que apresentem títulos iguais ou superiores a 500 Ul/ml.

TABELA 3

Freqüência dos níveis individuais de antitoxina diftérica observados em cavalos

Shick positivos e negativos no decurso de sete imunizações.

Título

Schick positivo

Schick negativo

Ul/ml

n.o

n.°

< 500

51,43

22,86

> 500

48,57

77,14

Total

100,00

Os valores individuais no grupo Schick negativo iguais ou acima de

500 Ul/ml ocorreram em 77,14% enquanto que no outro grupo, a fre¬

qüência foi de 48,57%.

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FURUTA, J. A.; LIBERMAN, C.; OLIVEIRA, E. P. T.: LEINZ, F. F.; IIZUKA, H. & ROLIM, R.

Relações entre o emprego de anatoxina diftérica bruta e o teste de Schick cm cavalos hiperimunizados.

Mem. Inst. Butantan, 44/-i5;335-341, 1980/81.

O comportamento dos títulos diante do teste de Schick aqui descritos

corroboram os estudos de GLENNY ® e RAMON onde a presença de

antitoxina diftérica, adquirida previamente de maneira natural, concorre

para a obtenção de níveis elevados de antitoxina após a imunização com

anatoxina diftérica.

CELAREK e POREBSKI ^ referiram, quando da primeira hiperimu-

nização, títulos médios de 1.000 Ul/ml e 250 Ul/ml para o lote de cavalos

Schick negativo e Schick positivo, respectivamente.

Enquanto o primeiro valor revelou-se equivalente ao aqui descrito,

0 segundo nível antitóxico foi inferior à média obtida, não somente na

primeira sangria (640 Ul/ml), como também às subseqüentes (Tabela 1),

onde observamos 280 Ul/ml na última hiperimunização.

Outrossim, considerando como viáveis para processamento em escala

industrial níveis séricos individuais iguais ou superiores à 500 Ul/ml,

verifica-se uma freqüência destes títulos maior até a sétima e última

hiperimunização no grupo Schick negativo, e até a quarta no Schik

positivo, divergindo dos achados de AMARAL ^ que alcançou o valor

médio de 380 Ul/ml na primeira imunização, preconizando nesta a san¬

gria branca, pois os animais não alcançavam os mesmos índices nos estí¬

mulos subsequentes.

CONCLUSÕES

Nas hiperimunizações sucessivas com anatoxina diftérica adsorvida

pelo alúmen, a utilização de animais Schick negativos proporciona títulos

mais elevados, confirmando os resultados verificados pela maioria da

literatura pertinente.

O método de hiperimunização adotado permitiu o estudo da síntese

de anticorpos com o decorrer de seguidas etapas de imunização objeti¬

vando uma contribuição à produção rotineira de soros.

Pretendeu-se delinear um quadro útil, sob o ponto de vista opera¬

cional visando orientar o setor de imunização na seleção de eqüinos pro¬

dutores de antitoxina diftérica.

A rentabilidade dos animais foi maior já que as reimunizações pro¬

porcionaram títulos satisfatórios tanto nos cavalos Schick negativos como

Schick positivos para o processamento industrial.

ABSTRACT: Horses submitted to previous Schick test had

challenged seven times with crude diphteria anatoxin absorbed

by alúmen to study antitoxin leveis produced.

The frequency of individual antitoxin titres equal or higher than

500 Ul/ml and the médium titre was superior in the Schick negative

group.

So, the yield of the animais for the antitoxin diphtheria production

in repetitive imunizations will be higher when Schick negative

horses are used.

KEYWORDS: Diphtheria anatoxin; diphtheria antitoxin; anti¬

toxin production in horses; repetitive reimmunizations.

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FURUTA, J, A.; LIBERMAN, C.; OLIVEIRA, E. P. T.; LEINZ. F. F.; IIZUKA, H. & ROLIM. R.

Relações entre o emprego de anatoxina diftérica bruta e o teste de Schick em cavalos hiperimunizados.

Mem. Inst. Butantan, ^^A5;335*341, 1980/81.

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vet. med. Ass., 61 :286-294, 1922.

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341

SciELO

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Mem. Inat. Butantan

^^45:343-353, 1980/81

BIONOMIA DOS TRIATOMÍNEOS — O SURGIMENTO DE

ADULTOS NAS COLÔNIAS DE PANSTRONGYLUS

MEGISTUS (BURM, 1835). (HEMIPTERA,

REDUVIIDAE) *

Therezinha J. HEITZMANN-FONTENELLE **

Associando-me às comemorações do 80.° aniversário do Instituto Bu¬

tantan, reverencio a memória de Arthur Neiva, grande pesqídsador e dire¬

tor desta instituição, no período de 1919 a 1921.

RESUMO: Durante nove anos de criação contínua de Panstrongylus

megistus, foram observados, além de outros dados bionômicos já

parcialmente publicados (2), dois fatos novos: l.°) o surgimento

de adultos revelou-se sazonal (primavera-verão) ainda que a fase

ninfal fosse aumentada, por vezes, para até mais de quatro anos e

revelou-se independente da época de eclosão das ninfas e 2.°) a

reprodução continuada, por várias gerações, de individuos oriundos

de uma mesma estirpe de insetos, mostrou indícios de esgotamento

genético, traduzido por retardamento no desenvolvimento, com maior

duração dos estádios ninfais, redução na fase adulta da vida das

fêmeas, no número de posturas, no número de ovos por postura e

no percentual de ovos viáveis.

PALAVRAS-CHAVE: Panstrongylus megistus, bionomia.

INTRODUÇÃO

Em 1914, 0 Dr. Arthur Neiva escolheu para sua tese de livre-docên¬

cia da Cadeira de História Natural Médica e Parasitologia o tema “Revisão

do gênero Triatoma Lap.”. Na primeira parte da tese, ele trata generi¬

camente da bionomia dos triatomíneos. Quase 60 anos ápós, iniciei pes¬

quisas bionômicas com triatomíneos no Instituto Butantan. O presente

trabalho é uma coletânea de dados sobre os adultos de Panstrongylus

megistus, feita durante nove anos de criação.

Trabalho efetuado com auxilio do CNPq.

Seção de Parasitolosiia do Instituto Butantan.

343

2 3 4 5 6 SciELO ;lo 11 12 13 14 15

HEITZMANN-FONTENELLE, T. J. Bionomia dos triatomíneos — O sursimento de adUItos nas colônias

de Panstrongylus megistus (Burm» 1835) (Hemiptera, Reduviidae). Mem. Insl. Butantan,

343-353, 1980/81.

MATERIAL E MÉTODO

O material original era oriundo das seguintes regiões: São José do

Rio Pardo, SP; Itapecerica da Serra, SP e de origem desconhecida, rece¬

bido da Escola de Saúde Pública do Rio de Janeiro.

Em 1973, iniciei a criação, em condições laboratoriais, desta espécie

de triatomineo, com um lote de 40 ninfas que completou seu ciclo evolutivo

(ovo-morte) em dois anos (2). A partir de descendentes desse primeiro

lote e de descendentes dos adultos recebidos das localidades acima refe¬

ridas, prossegui na criação desta espécie, coletando, sempre, dados sobre

sua bionomia.

COMENTÁRIOS

Do primeiro lote de 40 ninfas, iniciado em fevereiro de 1973, a

partir de fêmea recebida de São José do Rio Pardo, obtive 21 machos e 16

fêmeas. O primeiro adulto surgiu em agosto do mesmo ano (um macho),

aumentando a ocorrência nos meses seguintes: 2 fêmeas em setembro,

5 machos e 5 fêmeas em outubro, 3 machos e 4 fêmeas em novembro, 3

machos e 4 fêmeas em dezembro e 3 machos e uma fêmea em janeiro.

Nessa época as ninfas remanescentes, em número de seis, já estavam no

Estádio V, pré-adultas, e poderiam ter acompanhado a evolução das de¬

mais ninfas, mas sua evolução foi retardada como que em diapausa, e

atravessara o ano nessa fase, vindo a sofrer a última ecdise um ano

após, na mesma época em que surgiram os primeiros adultos: um macho

em agosto, 3 machos em setembro e 2 machos em outubro (gráfico I e

tabela III).

GRÁFICO I

DURAÇÃO DA FASE NINFAL DE Panstronqylus megistus

344

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HEITZMANN-FONTENELLE, T. J. Bionomia dos triatomíneos — O surgimento de adultos nas colônias

de PanstrongyluB megiatua (Burm, 1836) (Hemiptera, Reduviidae). Mem. Inat. Butantan,

343-353, 1980/81.

Em 1974, selecionei 43 ninfas eclodidas no inverno (junho/julho)

e 70 ninfas eclodidas no verão (novembro/dezembro), todas descendentes

de acasalamentos da criação anterior. Das ninfas eclodidas em junho/

julho, obtive 21 machos e 8 fêmeas, com o surgimento dos primeiros

adultos em setembro do ano seguinte (1975) : 5 machos e 2 fêmeas

em setembro, 2 machos e uma fêmea em outubro, 2 machos e 3

fêmeas em novembro e um macho em dezembro. As ninfas restantes,

das quais seis já no Estádio V, sofreram a última ecdise apenas no ano

seguinte (1976) dando 8 machos em setembro, 2 machos em outubro, 2

fêmeas em novembro e uma fêmea em dezembro (gráfico II).

Do lote eclodido em novembro/dezembro, obtive 25 machos e 24

fêmeas, com o aparecimento dos primeiros adultos em novembro do

ano seguinte (um macho e uma fêmea) ; em janeiro de 1976 obtive

mais um macho. A nova temporada de aparecimento de adultos foi de

setembro de 1976 a janeiro de 1977, assim distribuídos: 9 machos e 1

fêmea em setembro, 3 machos e 9 fêmeas em outubro, 2 machos e 3

fêmeas em novembro, 2 fêmeas em dezembro e um macho e 2 fêmeas em

janeiro. Nova parada no aparecimento de adultos até setembro dando 7

machos e 4 fêmeas em setembro e um macho e 2 fêmeas em outubro. O

último adulto deste lote só surgiu em novembro de 1978 (um macho)

após quatro anos de vida ninfal (gráfico II).

lí.ij

- ZÍ

GRAFICO II-DURAÇAO DA FASE

NINFAL DE Ponstroovlus meoislu;

-5Í.I8

-2<r.32

-I d*, 2 j

VI VIII X XII

1974

IV VI VIII

1975

II IV VI VIII

1976

IV VI VIII

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HEITZMANN-FONTENELLE, T. J. Bionomia dos triatomíneos — O surgimento de adultos nas colônias

de Panstrongylua megiatus (Burm, 1835) (Hemiptera, Reduviidae), Mem. Inat. Butantan, ith/h5:

343-363, 1980/81.

Em 1976, foram observados lotes com início em maio, julho, agosto,

setembro, outubro, novembro e dezembro que deram um total de 53

machos e 33 fêmeas. O primeiro adulto surgiu em outubro do ano se¬

guinte — uma fêmea —, resultante de ninfa desalagada em maio. Em

1978, obtive: um macho e uma fêmea (de desalagamento em agosto) em

janeiro; uma fêmea (do lote desalagado em outubro) em fevereiro e 2

fêmeas (dos lotes de maio e agosto) em março. A partir deste mês,

houve uma parada no aparecimento de adultos que só voltaram a surgir

em setembro (22 machos) e outubro (20 machos e 18 fêmeas). Houve

uma nova parada no aparecimento de adultos até setembro do ano se¬

guinte (1979) : 3 machos e uma fêmea em setembro, 6 machos e 6 fêmeas

em outubro. As ninfas restantes só alcançaram a fase adulta em outubro

do ano seguinte (1980) : um macho e 3 fêmeas de lotes desalagados em

outubro, novembro e dezembro de 1976 (gráfico III).

GRAFICO III - DURAÇAO DA FASE

NINFAL DE PonstroQvIus meaistus

IV VI VIM

IV VI VIII

IV VI Vlll

IV VI VIII X

Durante o ano de 1977, foram observados lotes iniciados de janeiro

a maio, agosto, setembro, novembro e dezembro. Obtive até novembro

de 1981, data em que encerrei as observações para a presente nota, pois

ainda havia ninfas em observação, 35 machos e 46 fêmeas. Os primeiros

adultos de lotes iniciados de janeiro a março, começaram a surgir em

346

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HEITZMANN-FONTENELLE, T. J. Bionomia dos triatomíneos — O surgimento de adultos nas colônias

de Panatrongylua megiatus (Burm, 1836) (Hemiptera, Reduviidae). Mem. Inst. Dutantan, Uit/US:

343-353, 1980/81.

setembro do ano seguinte (1978); 3 machos e uma fêmea em setembro,

5 machos e 10 fêmeas em outubro, um macho e duas fêmeas em no¬

vembro e 2 fêmeas em dezembro. Em 1979, obtive um macho e 4

fêmeas em janeiro (do lote iniciado em janeiro de 1977), uma fêmea

em março (do lote de abril). Depois houve uma parada no aparecimento

de adultos até setembro: 6 machos e uma fêmea em setembro, 3 machos

e 10 fêmeas em outubro, um macho e uma fêmea em novembro e uma

fêmea em dezembro. Em 1980, obtive 24 adultos: uma fêmea em janeiro,

uma fêmea em fevereiro, 3 machos em setembro, 10 machos e 7 fêmeas

em outubro e 3 fêmeas em novembro. O lote iniciado em novembro, teve

os primeiros adultos em setembro de 1980. Em 1981, obtive uma fêmea

em janeiro, 2 machos em setembro e uma fêmea em outubro (gráfico IV).

Em 1978, observei dois lotes: um iniciado nos dois primeiros meses

do ano e outro iniciado nos dois últimos meses. No primeiro lote, o surgi¬

mento de adultos teve início em outubro de 1980 (2 fêmeas) ; em 1981,

obtive 2 machos em setembro e um macho em outubro (gráfico V).

Do lote iniciado no final do ano, os primeiros adultos, também come¬

çaram a surgir em outubro de 1980 (uma fêmea). No ano seguinte, surgi¬

ram 2 fêmeas em fevereiro, uma fêmea em maio, 14 machos e uma fêmea

em setembro, 3 machos e 10 fêmeas em outubro e 3 fêmeas em novembro

(gráfico V). Devo salientar, que grande número das ninfas não atingiu

0 estádio adulto até o final de novembro de 1981, prazo de encerramento

das observações aqui relatadas.

Das criações iniciadas em 1979, apenas uma delas, iniciada em janei¬

ro, já apresentou adultos em 1981; 3 machos em setembro, um macho

e uma fêmea em outubro e 3 fêmeas em novembro (gráfico V).

As criações iniciadas em 1980 e 1981 não foram incluídas neste

trabalho, por não ter surgido adultos até novembro de 1981.

Outro fato que merece ser comentado é que, em 1973, no primeiro

lote criado, a fase ninfal da maioria das observações foi bastante curta,

de seis meses a um ano. Esse fato nunca mais se repetiu e fases nin-

fais de um ou dois anos passaram a ser menos freqüentes, aumentando

0 número de observações com fase ninfal de três a quatro anos (grá¬

ficos I a V).

Quanto à fase adulta, também houve modificações com a criação

continuada: houve um encurtamento na sua duração. Na tabela I estão

anotadas as longevidades dos machos nas criações feitas entre 1973 e

1977. Vê-se que um período adulto de 41 a 50 dias foi raro na primeira

criação e já bem mais freqüente nas criações dos demais anos. Na pri¬

meira criação, a maioria de machos teve uma fase adulta entre 51 e 70

dias. Já nas criações feitas no ano seguinte, embora se tenha conseguido

a maior longevidade para os machos (158 dias), 36% das observações

tiveram uma fase adulta no intervalo de 31 a 60 dias. Essa mesma faixa

de tempo para a vida adulta foi confirmada nos anos seguintes: 54,7%

nas criações iniciadas em 1976 e 64,7% nas criações iniciadas em 1977.

Nas fêmeas, essa redução no tempo de duração da fase adulta foi

mais acentuada. Na primeira criação, 56,2% dos casos teve uma fase

adulta com mais de 141 dias. Essa percentagem baixou para 23,5%,

347

SciELO

10 11 12 13 14 15

GRAFICO V - DURAÇÃO DA FASE NINFAL DE Ponstronovlus megistus

1IEITZMANN>F0NTENELLE, T. J. Bionomia dos triatomíncos — O surgimento de adultos nas colônias

de Panatrongylus megiêtus (Burm, 1835) (Hemiptera. Reduviídae). Mem. Inst. Butantan, khíUS:

343-353. 1980/81.

_ e

> _

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HEITZMANN-FONTENELLE, T. J. Bionomia doa triatomíneos — O suriarimento de adultos nas colônias

de Panstrongylus megiatus (Burm, 1835) (Ilemiptera, Reduviidae). Mcm. Inst. Butantan, j^4/45:

343-353, 1980/81.

18,1% e 2,2% nos anos seguintes. Em 1974, 32,3% das fêmeas tiveram

uma fase adulta na faixa de 71 a 100 dias; no ano seguinte, 33,9% das

fêmeas tiveram uma fase adulta entre 41 e 70 dias e, em 1977, 48,8%

das fêmeas tiveram uma fase adulta entre 31 e 60 dias.

Com essa redução na fase adulta das fêmeas, a sua fecundidade e

fertilidade diminuíram. Além disso, houve uma redução nas oviposições

das fêmeas de maior fase adulta tanto em quantidade como na freqüen-

cia de ovos viáveis e o desalagamento de ninfas resistentes também

baixou bastante.

Das 16 fêmeas do primeiro lote, 8 não foram acasaladas, mas 6

delas produziram óvulos em quantidade razoável. Das 8 fêmeas acasa¬

ladas, 4 também elaboraram óvulos. O início das posturas foi a partir

do 20.° dia de vida adulta.

Das 8 fêmeas acasaladas, sendo que 4 delas tardiamente, obtive

731 ovos sendo que 63 deles foram eliminados logo após a postura e dos

restantes desalagaram 452 ninfas.

Das 34 fêmeas dos lotes iniciados em 1975, o quadro já foi bastante

diferente; as 8 fêmeas obtidas do lote de inverno foram acasaladas, sen¬

do que 3 delas por 2 vezes. Obtive 265 ovos e destes 122 ninfas. Das 26

ninfas do lote de verão, 11 não foram acasaladas e elaboraram apenas

32 óvulos; 15 foram acasaladas sendo que duas com dois acasalamentos

e duas sem nenhuma postura. Na totalidade obtive 450 ovos e destes

228 ninfas.

Por estes dados vê-se que 8 fêmeas acasaladas (do primeiro lote

criado) produziram 731 ovos dando 452 ninfas e 23 fêmeas (do segundo

lote) elaboraram 715 ovos dando 350 ninfas.

RESUMO E CONCLUSÕES

1. Parece existir um período anual bem definido para o surgimento

dos adultos nas colônias de P. megistus. Esse período vai de setembro a

janeiro (primavera/início de verão). Também obtive adultos nos meses

de fevereiro, março, maio e agosto, mas em número bastante reduzido.

O pique de saída dos adultos ocorre nos meses mais quentes. Não creio

que esse fato só ocorra em condições laboratoriais, pois, as informações

colhidas em Dias (1) bem como as datas de material encaminhado a esta

Seção concordam com o que foi visto em laboratório.

2. Embora não seja regra, durante cada período, primeiramente

surgem os machos. Pela tabela III, vemos que os meses de maior inci¬

dência de adultos são setembro e outubro e que em setembro predominam

os machos, enquanto que em outubro, são as fêmeas. As últimas obser¬

vações durante o período, são sempre de fêmeas.

3. A fase adulta dos machos é muito curta: em média duram de

um a dois meses. Caso extremo obtido foi de 158 dias. As fêmeas têm

fase de vida mais longa, entre dois a quatro meses. Caso extremo obtido

foi de 458 dias.

350

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HEITZMANN-FONTENELLE, T. J. BionomU dos triatomíncos — O surgimento de adultos nas colônias

de Panstrongylus megistua (Burm, 1836) (Hemiptera, Reduviidae). Mem. Inst. Butanlan, H/i5:

343-353, 1980/81.

TABELA I

Duração da fase adulta entre os machos de P. megistus

Intervalo de tempo

Lotes de

1973

n.° de obs.

Lotes de

1974

n.° de obs.

Lotes de

1976

n.° de obs.

Lotes de

1977

n.° de obs.

dias

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dias

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dias

111

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dias

121

130

dias

131

140

dias

141

150

dias

151

160

dias

TABELA II

Duração da fase adulta entre as fêmeas de P. megistus

Intervalo de tempo

Lotes de

1973

1974

1976

n.° de obs.

Lotes de

1977

n.° de obs.

dias

100

dias

101

110

dias

111

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dias

121

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141

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dias

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dias

311

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dias

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dias

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350

dias

351

360

dias

361

370

dias

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420

dias

451

460

dias

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HEITZMANN-FONTENELLE, T. J. Bionomia dos triatomíneos — O surgimento de adultos nas colônias

de PanatrongyluB megistua (Burm, 1836) (Hemiptera, Reduviidae). Mem. Inat. Butantan, hk/kS:

343-353, 1980/81.

4. Em condições laboratoriais, a vida total desses barbeiros atin¬

giu frequentemente durações acima de mil dias (aproximadamente três

anos). O máximo obtido foi de 1668 dias (quatro anos e meio) que é a

idade de uma fêmea ao enceiTar estas notas (30-11-1981). Essa mesma

fêmea também foi responsável pela maior fase ninfal registrada no

laboratório: 1638 dias.

5. Com 0 contínuo acasalamento de descendentes comuns, houve

um esgotamento genético com redução na duração da fase adulta das

fêmeas, na sua fecundidade e fertilidade. Embora tenham sido manti¬

das as mesmas condições ambientais como alimentação, umidade, foto-

período, temperaturas com pequenas oscilações e as mesmas técnicas no

manuseio dos insetos, comparando apenas os dados do primeiro lote com

os obtidos no lote iniciado um ano após, já notamos essa redução nitida¬

mente. A vida das fêmeas passou de 71 a 100 dias para 31 a 60 dias.

O número de ovos obtidos passou de 731 (produzido por 8 fêmeas) para

715 (produzido por 23 fêmeas). Para essas quantidades quase iguais

de ovos (731 e 715) obtivemos 452 ninfas no primeiro lote e 350 ninfas

no segundo.

AGRADECIMENTO

Deixo meus agradecimentos, pelas sugestões recebidas, aos Drs. José

Carlos Reis de Magalhães e Lauro Travassos Filho.

ABSTRACT: Continuous breeding, for nine years, of P. mcgistus.

besides other bionomical data already published (2), disclosed two

new facts: 1) Onset of adult stage was clearly seasonal (spring/

summer) independently of time of nimphs eclosion and, in some

cases, after nymphal stages extended for more than four years and

2) Continous inbreeding of insects showed signs of genetical

depletion evidenced by retarded nymphal stages, shorter life span

of adult females, reduced number of ovipositions, less eggs per

oviposition and lower percentage of viable eggs.

KEYWORDS: Panstrongylus megistus, bionomy.

REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

1. DIAS, E. Variações mensais da incidência das formas evolutivas do Triatoma

infestans e do Panstrongylus megistus no Município de Bambui, Estado de

Minas Gerais. Mem. Inst. Osw. Cruz, 53:457-472, 1955.

2. HEITZMANN-FONTENELLE, J.T. Bionomia comparativa de triatomíneos.

I —■ Panstrongylus meg-ystus (Burm., 1835) (Hemiptera, Reduviidae).

Studia ent., 73:201-210, 1976.

3. NEIVA, A. Revisão do gênero Triatoma, Lap. Rio de Janeiro, 1914. 80p.

353

SciELO

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Mem. Inst. Butantan

^^A5;355-365, 1980/81

CONTRIBUIÇÃO PARA O CONHECIMENTO DOS

TRIATOMINAE — HEMIPTERA, REDUVIIDAE

I — Triatoma melanocephala Neiva & Pinto, 1923 *

Rosa Maria de Oliveira VEIGA **

Hypolito Lima BORBA ***

Lauro Pereira TRAVASSOS FILHO **

James E. DOBBIN JR. **♦*

RESUMO: De Triatoma melanocephala Neiva & Pinto, 1923, é

comentada toda a bibliografia, completa distribuição geográfica,

incluindo a nova área, Sete Lagoas, Minas Gerais, e constatação em

Pernambuco, de três exemplares positivos para formas infectantes

de Trypanosoma crtizi, o que o torna vector potencial do agente da

Moléstia de Chagas, como triatomíneo adulto encontrado em domi¬

cílios. São apresentadas fotografias coloridas do desenho original

do holótipo, do exemplar de Minas Gerais e da ninfa no estádio

V. Na Coleção Parasitológica do Instituto Butantan, acham-se dois

exemplares de Pernambuco, n.° 988 e 989, um da Bahia, n.° 1766,

e o de Minas Gerais, n.° 1841.

PALAVRAS-CHAVE: Triatoma melanocephala*-, ninfa; vector de

Trypanosoma cruzi*; presença em Minas Gerais*; distribuição

geográfica.

INTRODUÇÃO

Iniciamos com este trabalho, uma suplementação à excelente “Mono¬

grafia dos Triatomíneos”, de H. Lent & P. Wigodzinsky acrescentando,

ao mencionado por esses autores, informes pertinentes aos exemplares

da Coleção Médico-entomológica da Seção de Parasitologia do Instituto

Butantan.

Versa a primeira nota sobre o Triatoma melanocephala porque,

sendo espécie de Neiva e Pinto destacamos, como homenagem, que Arthur

Neiva foi o terceiro Diretor do Instituto Butantân (7.12.1919 —

20.3.1921), antes de ter, com Cesar Pinto, descrito a espécie em tela

e, à esta, podemos acrescentar outros dados interessantes, a presença do

triatomíneo no Estado de Minas Gerais, o encontro de exemplares por-

• Trabalho apresentado no VIII Cons:. Brasil, de Entomologia — Brasília

•• Parasitologia. Instituto Butantan — C. Postal 66 — São Paulo.

**• Sucam — M.S. — Pernambuco.

• Faculdade de Medicina. Universidade de Pernambuco.

DF.. 1983.

355

SciELO

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VEIGA, R.M.O.; BORBA. H.L.; TRAVASSOS FILHO, L.P. & DOBBIN JR., J.E. — Contribuição

para o conhecimento dos Triatominae-Hemiptera, Reduviidae. I — Triatoma melanoccphala Neiva

& Pinto. 1923. Mem. Inst. Butantan, i2/íí;356-366, 1980/81.

tadores de formas metacíclicas nas fezes, comprovando a sua ação vectora

do agente da Moléstia de Chagas e fotografia da ninfa (fig. 3).

Triatoma melanocephala Neiva & Pinto, 1923

Triatoma melanocephala Neiva & Pinto, 1923, pág. 75-6, $, holó-

tipo, Bahia; Neiva & Pinto, 1923, pág. 103, n.° 17 (cit.) ; Pinto, 1925,

pág. 59, n.° 17, fig. 39, 9 ; Pinto, 1930, pág. 218-9, n.° 80; Del Ponte,

1930, pág. 885-6, n.» 20, fig. 9; Pinto, 1931, pág. 71, n.° 11, 9, fig. 8

(pág. 62) ; Neiva & Lent, 1936, pág. 172, n.® 39, pág. 183, n.° 10 (cit.

geog.) ; Neiva & Lent, 1941, pág. 80, n.° 47 (cit. geog.) ; Wigodzinsky,

1949, pág. 74, n.° 18 (cit.) ; Figueiredo, 1954, pág. 93 (cit. geog.) ; Lucena,

1957, pág. 543, 9 ; Lucena, 1958-A, pág. 301, 313, 314, n.° 7; Lucena,

1958-B, pág. 355, 366-367, n.° 7; Lucena, 1958-C, pág. 371 (com.) ; Luce¬

na, 1958-D, pág. 406, 411; Lucena, 1959, pág. 579; Dobbin Jr. & Cruz,

1966, pág. 262, 264; Corrêa, 1968, pág. 48, 59 (cits.), 63-64 (ch.) ; Lucena,

1970, pág. 37, 41, 69-70; Sherlock & Serafim, 1972, pág. 269, item 13,

273; Pessoa, 1974, pág. 786, item 17; Lent & Wigodzinsky, 1979, pág.

267-270, á e 9 , figs. 110-112.

ANÁLISE BIBLIOGRÁFICA

Neiva & Pinto 1923, descreveram Triatoma melanocephala, basea¬

dos em um exemplar 9, trazido da Bahia pelo Prof. Pirajá da Silva,

o holótipo da espécie, depositado nas Coleções Entomológicas da Funda¬

ção Instituto Oswaldo Cruz, Rio de Janeiro.

Esses informes foram novamente citados por Neiva & Pinto i®, em

1923, pág. 103, n.o 17.

Em 1925, Pinto em sua tese para Faculdade de Medicina da

Universidade do Rio de Janeiro, torna a citar o mesmo exemplar à pág.

59, n.° 17, fig. 39, figura essa, uma fotografia em branco e preto de um

desenho colorido, informando ainda que, segundo Octávio Torres, “fre-

qüenta domicílios”.

Citações de T. melanocephala, referindo-se ao holótipo, são feitas por

Pinto 21, 1930, págs. 218-9, n.° 80 e por Del Ponte 1930, págs. 885-6,

n.° 20, fig. 9, esta, reprodução da fotografia de Pinto, 1925.

Em 1931, na longa introdução do seu trabalho sobre “Valor do ros-

tro e antena...”, C. Pinto à pág. 50, diz que Neiva & Pinto, publi¬

cariam revisão de triatomíneos “ilustrada com grande número de figuras

originais e coloridas, executadas por exímios artistas nacionais”, estam¬

pas certamente guardadas na Fundação do Instituto Oswaldo Cruz.

Aliás, à respeito dessas estampas, a elas se reportou Neiva em

1925, quando no “Prefácio” da tese de C. Pinto 20 “Ensaio Monographi-

co”, refere ter já “grande cópia de material para uma monografia ilus¬

trada” a ser publicada nas Memórias do Instituto Oswaldo Cruz, e que

“boa parte das gravuras em cores se acham prontas” e que não havia

tido ainda oportunidade para terminar seu trabalho.

Obviamente, com o entusiasmo de C. Pinto pelos triatomíneos, pas¬

sou esse a ser o colaborador ao lado de Neiva, na monografia que não

chegaram a publicar.

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Fig. 1 — T. melanocephala — Holótipo. Figura colorida de Neiva & Pinto, 1923.

Fig 2 — T. melanocephala — Exemplar de Sete Lagoas, MG. ^ — IB. n.® 1841.

Fig. 3 — T. melanocephala — Ninfa V, Fj da Q do Mun. de São Joaquim do Monte, PE

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VEIGA. R.M.O.; BORBA, H.L.; TRAVASSOS FILHO, L.P. & DOBBIN JR.. J.E. — Contribuição

para o conhecimento dos Triatominae-Hemiptera, Reduviidae. I — Triatoma melanocephala Neiva

& Pinto, 1923. Aíem. Inst. Butantan, 4.4/.J5;356-365, 1980/81.

VEIGA, R.M.O.; BORBA, H.L.; TRAVASSOS FILHO, L.P. & DOBBIN JR., J.E. — Contribuição

para o conhecimento dos Triatominae-Hemiptera, Reduviidae. I — Triatoma mclanoccphala Neiva

& Pinto, 1923. Mcm. Inat. Butantan, ^.4/45:356-365, 1980/81.

A foto branco/preto (fig. 39) dada por C. Pinto-" em 1925 é justa¬

mente uma fotografia da figura colorida de T. melanocephala de uma

daquelas “estampas coloridas”, executadas realmente por notável dese¬

nhista daquela década, Luiz Kattenbach, e essa estampa, como outras

desenhadas por Manoel de Castro Silva e Raymundo Onório, foram

impressas na Litográfica Ipiranga, São Paulo — Rio de Janeiro.

FisT. 4 — Distribuição geográfica de T. melanocephala no Estado da Bahia, segundo Sherlock & Serafim,

1972. Fig. 11.

358

2 3

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VEIGA, R.M.O.; BORBA, H.L.; TRAVASSOS FILHO, L.P. & DOBBIN JR., J.E. — Contribuição

para o conhecimento dos Triatominae-Hemiptera, Reduviidae. I — Triatoma mclanocephala Neiva

& Pinto, 1923. Mcm. Inst. Butantan, ^4/^5.‘355-366, 1980/81.

Damos agora, a foto colorida desse magnífico desenho, parte da

estampa inédita de Neiva & Pinto, da qual um dos autores (LTF),

possui uma que lhe foi dada em 1938 pelo próprio César Pinto, o qual

na ocasião externou os grandes receios de Neiva e ele de não verem

publicadas as estampas em tela, o que lamentavelmente se confirmou.

Nesse seu trabalho de 1931, Pinto -- apresenta desenho da cabeça de

T. melanocephala em perfil, para demonstrar a situação de inserção das

antenas, fig. 8, pág. 62, desenho baseado no único exemplar conhecido

até então, a $ holótipo.

Neiva & Lent1936, fazem apenas a citação geográfica muito

ampla, “Brasil” e, em 1941, estes mesmos autores mencionam sem maior

detalhe “Bahia e Pernambuco”.

Figueirêdo 1954, pág. 93, refere T. melanocephala em Altinho,

Pernambuco.

Lucena *, 1957, relatando a captura de 15.653 triatomíneos de hábi¬

tos domiciliares, informa ter encontrado apenas uma ç de T. melano¬

cephala, não contaminada, no Município de Bom Jardim, localidade da

região do Agreste de Pernambuco.

Lucena 1958-A, em trabalho que publicou duas vezes — Rev.

Bras. Biol. e Rev. Bras. Malariol. D. Trop. — refere a captura de uma

9, em Sítio Quati, no Mun. de Bom Jardim, PE, também na região do

Agreste, o mesmo exemplar não contaminado, citado no seu trabalho de

1957, pág. 543.

Dessa 9, obteve 46 ovos, cujas ninfas viveram de 1 de junho até

5 de outubro de 1955, as quais não passaram do quarto estádio, concluin¬

do, por essa dificuldade de criação em laboratório, não ser triatomíneo

de hábitos domésticos.

Lucena ”■ 1958-B, em sua II nota sobre Doença de Chagas em

Pernambuco, mencionando o mesmo exemplar 9 de 7’. melanocephala das

notas anteriores, informa ter obtido 36 ninfas dos 46 ovos ovipostos pelo

exemplar em tela.

Lucena 1958-C, na III nota sobre a Doença de Chagas em Pernam¬

buco (pág. 371), afirma que o exemplar citado anteriormente não se

achava contaminado, reafirmando isso no seu trabalho de 1958-D, pág.

406 e 411.

Lucena 1959, descrevendo a ecologia dos triatomíneos brasileiros,

menciona T. melanocephala na zona do Nordeste, que “abrange todo o

Nordeste Oriental, parte do Nordeste Ocidental, quase toda a Bahia e

norte de Minas Gerais”, ou seja, a zona das “caatingas”, onde cita esta

espécie como incidente e endêmica. Afirma, pág. 616, que T. melanoce¬

phala, além de raro, não é domiciliar, pois nas casas só foram encontradas

as formas aladas.

Dobbin Jr. & Cruz 1966, quando comentam os trabalhos em Tria-

tominae de Pernambuco, verificando o controle desses insetos pelo BHC,

citam 0 T. melanocephala nos Municípios de Angelim e Bom Jardim e.

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VEIGA, R.M.O.; BORBA, H.L.; TRAVASSOS FILHO, L.P. & DOBBIN JR., J.E. Contribuição

para o conhecimento dos Triatominae-Hemiptera, Reduviidae. I — Triatoma mclanoccphala Neiva

& Pinto, 1923. Mcm. Inst. Butantan, 44/45;355--365, 1980/81.

assinalam-no pela primeira vez em Passira, essas três, localidades da

região do Agreste, tendo encontrado a espécie também em Tacaratu, na

região do Sertão.

Corrêa1968, pág. 59, afirmando que melanocephala não tem inte¬

resse epidemiológico, refere ser raro entre os triatomíneos assinalados

na Bahia.

Lucena i'‘, 1970, pág. 48, conclui que as “zonas semiáridas do Agreste

e Sertão são as que mais apresentaram triatomíneos”, o que coincide

com a maioria das capturas de T. melanocephala.

Sherlock & Serafim 1972, indicam T. melanocephala como sendo

de achados fortuitos, em limitadas áreas da Bahia, constando a espécie

da chave para identificação de triatomíneos desse Estado (pág. 269,

item 13). Indicam ser espécie de áreas com vegetação tipo Caatinga,

clima dos tipos AW e BSh, em altitudes entre 100/500 m (pág. 273).

Lent & Wigodzinsky 1979, descrevem minuciosamente T. melano¬

cephala, com desenhos e fotografias, permitindo uma precisa caracteriza¬

ção de ambos os sexos da espécie.

Mencionam, sem citar o sexo, o tipo na Coleção do Inst. Oswaldo

Cruz, Rio de Janeiro. Na distribuição geográfica, indicam simplesmente

“Brazil (Bahia, Paraíba, Pernambuco)”, embora a legenda da fig. 110,

seja mais informativa: “male, Pernambuco”.

Essa referência à Paraíba deve ter sido tirada de algum exemplar

de coleção estudada pelos autores, pois na bibliografia sinonímica citada,

não consta esse Estado do Brasil.

SÚMULA DOS CARACTERES: Cabeça completamente preta. Tórax

preto; lobo anterolateral do pronoto com pequena área amarelo-ocre exter¬

na, discreta no exemplar 9 n.° 988-IB, área essa, visível no desenho colo¬

rido do holótipo de Neiva & Pinto, que apresentamos (fig. 1). Lobo

posterior do pronoto com um par de manchas longitudinais amarelo-ocre

ao longo dos lados externos das carenas medianas, manchas essas, que

bem caracterizam a espécie; pernas com um par de espinhos rombos na

porção proximal da face interna dos fêmures anterior e médio e que, no

fêmur posterior é simples protuberância. Abdómen preto, conexivo ama¬

relo-ocre com cinco pares de manchas pretas poligonais sobre as suturas

intersegmentares e em toda a largura.

Como descrição mais minuciosa, ver Lent & Wigodzinsky, 1979, págs.

267-270, figs. 110-112.

Ninfa V Estádio: Colorido geral castanho-escuro, com áreas mais

claras no dorso da cabeça, no pronoto e estojo dos élitros; uma série de

pontos claros na linha dorsal e nos ângulos externos posteriores dos

segmentos abdominais, conforme a fig. 3.

Lucena *'• 1958-A, pág. 314 e, 1970, pág. 69-70, comenta os dados

sobre a 9 de melanocephala que colhera viva em 8-5-55, na região do

Agreste, Sítio Quati, Município de Bom Jardim, informando que as ninfas

obtidas dos 46 ovos, em 1-6-55, apenas 28 chegaram ao último estádio,

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VEIGA, R.M.O.; BORBA, H.L.; TRAVASSOS FILHO. L.P. & DOBBIN JR., J.E. — Contribuição

para o conhecimento dos Triatominae-Hemiptera, Reduviidae. 1 — Triatoma melanoeephala Neiva

& Pinto, 1923. Mem. Inst. Butantan, ^^/45;355-365, 1980/81.

vivendo pouco mais de 4 meses, e não sendo obtidos adultos; essas ninfas

viveram no estádio I, da eclosão à 1.^ ecdise, 13 dias; no estádio II, 20

dias; no estádio III, 53 dias; no IV, 38 dias; morreram no estádio V,

sendo que a última morreu em 6-5-57, vivendo o considerável prazo de

quase 2 anos (1-6-55 - 6-5-57). Disso concluiu Lucena, que esses triato-

míneos “ainda não se encontram adaptados à habitação humana”.

Dobbin Jr. & Borba * (informação epistolar), de uma 5 colhida no

Pov. de Monte Alegre, Mun. de S. Joaquim do Monte, no Agreste, PE,

obtiveram 12 ovos, todos férteis. Das 12 ninfas eclodidas em 6-8-80,

quatro morreram; três se tornaram adultas, 2 $ $ e 1 á , que viveram

apenas 10 dias e tiveram um período evolutivo, de ovo a adulto, de 537

dias; cinco, ainda no estádio V, foram enviadas à Parasitologia do Inst.

Butantan, de uma delas a foto apresentada (fig. 3).

Essas ninfas recebidas por via aérea, já se acham sob os cuidados

da Dra. Therezinha J. Heitzmann-Fontenelle ®, para futuras anotações

bionômicas, nos moldes dos trabalhos que vem publicando, sendo que uma

das ninfas tornou-se adulto s em 30-7-1982.

DISTRIBUIÇÃO GEOGRÁFICA: Bahia, Pernambuco, Paraíba, Minas

Gerais (Sete Lagoas).

BAHIA: O holótipo traz apenas a indicação Bahia.

Sherlock & Serafim 1972, coletaram 68 T. melanoeephala nos

Municípios de: Araci, Brejões, Conceição do Coité, Feira de Santana,

Ipirá, Irará, Itaberaba, Itaquara, Ituaçu, Lamarão, Seabra, Serrinha,

Simões Filho, Teofilândia, Tucano e Valente.

À essa lista, acrescentamos a localidade de Jaguarari, com exemplar

á coletado por “Caraibas Metais” em 26-9-1972.

Sherlock & Serafim informam (pág. 273), ser T. ynelanocephala

espécie de áreas, com vegetação tipo “caatinga”, com clima dos tipos AW

e BSh, em altitudes entre 100/500 m.

Essa distribuição é apresentada no mapa desses autores, no qual são

assinaladas somente as localidades de encontro de T. melanoeephala

(fig. 4).

PERNAMBUCO: Até 1972, T. melanoeephala foi capturado no Agreste,

nos Municípios de: Bom Jardim (Povoado de Tamboatá e Sítio Quati),

Altinho, Passira (Sítio Vertente Seca), Angelim; no Sertão em Tacaratu

(cidade de Tacaratu).

Dobbin Jr. & Borba1972-1982 (comunicação epistolar), em levan¬

tamento triatomínico no Estado de Pernambuco, constataram T. melano-

cephala em 19 municípios; na lista apresentada são separadas as locali¬

dades pelas zonas geográficas e em cada, referidas por ordem alfabética

os municípios e neles as localidades, com número de exemplares colhidos,

examinados e os três exemplares positivos para T. eruzL

É dado 0 mapa de Pernambuco onde são assinaladas as localidades

citadas (fig. 5).

362

SciELO

10 11 12 13 14 15 16

VtIGA. R.M.O.; BOHBA, H.L.; TRAVASSOS FILHO, L.P. &

para o conhecimento dos Triatominae-Hemiptera. Reduviidae.

& Pinto, 1923. Mem. Inat. Butantan, <í/45:366-366, 1980/81.

DOBBIN JR., J.E. — Contribuição

I — Triatoma melanoccpiLala Neiva

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363

SciELO

VEIGA, R.M.O.: BORBA. H.L.; TRAVASSOS FILHO, L.P. & DOBBIN JR., J.E. — Contribuição

para o conhecimento dt>3 Triatominae-Hemiptera, Reduviidae. I — Triatoma melanoccphala Neiva

& Pinto, 1923. Mem. Inat. Dutantan, ^4/i5;356-365, 1980/81.

PARAÍBA: Sem menção de localidade.

MINAS GERAIS: Sete Lagoas (fig. 2).

EXEMPLARES DA COLEÇÃO PARASITOLÓGICA DO INSTITUTO

BUTANTAN:

N.° 988 $ e 989 s, Nazaré da Mata, PE. J. Dobbin Jr. of. Agosto,

1972.

N.° 1766 S , Jaguarari, BA. “Caraíbas Metais” of. 26-9-1972.

N.® 1841 á , Sete Lagoas, MG. L. Travassos Filho of. 18-4-1973.

ABSTRACT: The authors comment the bibliography of Triatoma

melanocephala Neiva & Pinto, 1923 and its geographical distribution,

including the new area of Sete Lagoas, State of Minas Gerais, and

the first record in the State of Pernambuco of specimens positive

for infected forms of Trypanosoma cruzi and therefore potential

vectors of Chagas disease, as an adult triatomine found in houses.

Color prints of the original drawings of the holotype, as well as of

the specimen from Minas Gerais and of the fifth instar nymph

are presented. Two specimens from Pernambuco (nr. 988, nr. 989),

one from Bahia (nr. 1766) and one from Minas Gerais (nr. 1841)

are deposited in the Parasitological Collection of the Institute Bu-

tantan.

KEYWORDS: Triatoma melanocephala *; nymph; vector of Trypa-

nosoma cruzi *; recording in Minas Gerais *; geographical distri¬

bution.

REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

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364

SciELO

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para o conhecimento doa Triatominae-Hemiptera, Reduviidae. I — Triatoma mclanocepbala Neiva

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365

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Mem. Inst. Butantan

U/45:ZG1-Z16, 1980/81

CONTRIBUIÇÃO PARA O CONHECIMENTO DAS

LAGARTAS URTICANTES

I — Cerodirphia avenata araguensis Lemaire, 1971

(Lep. Attacidae) *

Roberto Henrique Pinto MORAES **

Lauro Pereira TRAVASSOS-FILHO **

RESUMO: É estudado o atacídeo Cerodirphia avenata araguensis

Lemaire, 1971, com descrição da lagarta, bastante urticante, pupário

e adultos machos e fêmeas, mencionando os caracteres pertinentes à

subespécie.

São apresentados os hábitos das lagartas, épocas das diversas fases,

plantas alimentícias e material da Coleção Parasitológica do Insti¬

tuto Butantan. Documentação em fotografias coloridas e branco e

preto, e fotos em scanning das cerdas urticantes.

PALAVRAS-CHAVE: Lepidoptera; Attacidae; Cerodirphia ave¬

nata araguensis*; Bionomia*; Urticante*.

INTRODUÇÃO

As larvas pilosas de mariposas (Lepidoptera-Heterocera), são co¬

nhecidas vulgarmente por “tatoranas”.

O revestimento de cerdas urticantes ocorre em larvas de diversas

famílias destes insetos, permitindo uma classificação sistemática relati¬

vamente fácil, quando sabe-se qual mariposa resultará de determinada

lagarta, daí a importância de serem criadas em laboratório e documentados

os diversos estádios de desenvolvimento, pois em muitas espécies, os pri¬

meiros estádios larvais diferem apreciavelmente dos últimos.

Também o tipo de acidente pode variar de acordo com o número e

disposição das cerdas de veneno que são mais fortes e mais eficientes

• Trabalho apresentado no VIII Cong. Bras. de Entomologia — Brasília — DF, 1983.

Seção de Parasitologia — Instituto Butantan. C Postal 65 — S. Paulo — Brasil.

367

SciELO

MORAES, R. H. P. & TRAVASSOS FILHO, L. P. Contribuição para o conhecimento das lagartas

urticantes. I — Cerodirphia avcnata aragueriaia Lemaire, 1971. (Lep. Attacidae). Mem. Inat.

Butantan, 4-Í/-45:367-376, 1980/81.

numas, mais discretas e esparsas noutras. Nem sempre lagartas mais

freqüentes causam acidentes graves, pois a presença é mais facilmente

notada quando muitas, ao passo que as de hábito isolado, surpreendem

os menos cautelosos nas lidas com as plantas em que se alimentam.

Nessa primeira contribuição, estudamos Cerodirphia a.araguensis

porque suas lagartas apareceram em número apreciável no início deste

ano de 1982, superando bastante as dos outros atacídeos freqüentes na

região, e aproveitamos para documentar a espécie que embora em apre¬

ciável número ao nascerem de posturas de muitos ovos agrupados, ao

atingirem o terceiro ou quarto estádio, apresentam uma fase de dis¬

persão por estímulo peculiar e, abandonando a planta em que nasceram,

caminham ativamente em busca de outra na qual, quando de paladar

aceitável, nela permanecem até que a deixam para pupar.

Nesse período andarilho, subindo ao acaso por outras plantas, muros,

portões, etc., é que ao serem tocadas acidentalmente por pessoas, deter¬

minam “queimaduras” características pela inoculação, na pele desabri¬

gada (mãos, braços, pescoço, etc.) do veneno contido nas cerdas pon¬

tiagudas.

De acordo com Valle et ah, 1971, a substância injetada é predomi¬

nantemente a histamina, e por isso, nos acidentes com lagartas, é indi¬

cado 0 tratamento com anti-alérgicos, de preferência de uso oral.

BIONOMIA

Cerodirphia, era já lepidóptero conhecido por um dos autores (T.F.),

que 0 considerava raro pela sua escassa presença nas muitas coletas

noturnas que fez desde 1945.

Um macho, colhido em 18.12.1972 no Horto Osvvaldo Cruz do Ins¬

tituto Butantan, foi enviado ao Dr. Claude Lemaire, do Museu de Paris,

que identificou a espécie aqui estudada, como sendo de sua autoria, Cero¬

dirphia avenata araguensis Lemaire, 1971, exemplar esse ofertado ao

identificador.

Travassos-Filho, também já havia encontrado várias lagartas não

identificadas, no bairro do Ipiranga — SP, e a partir de 1970 pelas

alamedas do Horto Oswaldo Cruz, tendo conseguido no decorrer dos anos,

coletar larvas alimentando-se em folhas de árvores conhecidas como

“canela” e, no laboratório conseguiu também que se alimentassem com

folhas de “goiabeira”, folhas essas em geral bem aceitas por larvas de

Attacidae — Hemileucinae, tendo obtido das poucas lagartas, uma fêmea

em 15.12.1975, que possibilitou a identificação da larva ao adulto já

classificado.

Em 1980, ano em que foi maior o número de lagartas coletadas

(cerca de 20), muitas foram capturadas em pequenos arbustos de “cane¬

la” e poucas ainda em pequenas plantas de goiabeira, confirmando a

aceitação em laboratório, sem contudo obter-se adultos.

1 SciELO

368

MORAES, R. H. P. & TRAVASSOS FILHO, L. P. Contribuição para o conhecimento das lagartas

urticantes. I — Cerodirphia avenata aragucnsia Lomaire, 1971. (Lep. Attacidae). Mem. Inat.

Butantan, 367-376, 1980/81.

Certamente, pelo processo de dispersão é que se encontra em cada

arbusto alimentício uma ou outra lagarta em períodos variados de 3 a 7

dias. Essa dispersão é comprovada retirando-se as poucas larvas de

um pequeno arbusto de canela, por exemplo, e passado o período mínimo

de 3 dias, novas larvas de maior tamanho são encontradas na mesma

planta, certamente dispersas de árvores mais altas.

Em 1981, de abril à julho, ano em que as temperaturas mais elevadas

foram acima da média, conseguimos capturar cerca de 80 larvas, que

alimentaram-se aparentemente bem, atingindo cerca de 8 centímetros,

considerado como o máximo para larvas maduras, isto é, prontas a

puparem.

Procurou-se manter umidade relativa de 80%, pois, mais úmido,

aparecem os fungos rapidamente. Também procurou-se deixar um subs¬

trato de folhas secas com vistas ao meio ambiente em que foram colhidas

as larvas.

Dessas 80 larvas, obtivemos apenas 7 pupas com aspecto normal e,

apenas 4 adultos (3 machos e 1 fêmea) eclodidos de 14.1 a 5.2.1982.

Em fevereiro de 1982, recomeçaram a ser encontradas lagartas dessa

espécie em maior número que nos anos anteriores, não só no Horto

Oswaldo Cruz, como também em sítio de Embú-Guaçu, distante cerca

de 40 km e Parque Primavera em Carapicuíba, 30 km distante em sentido

oposto à Embú-Guaçu. Nessa mesma localidade (Embú-Guaçu) foi encon¬

trado um lote de 214 lagartas pequenas, ainda agrupadas em poucas

folhas de um mesmo arbusto. Mais tarde, naqueles locais citados, come¬

çaram a ser encontradas as lagartas isoladas ou em pequeno número

(até 6 por planta) em diversas espécies vegetais, e entre essas, goiabeira

e cambucí, além de canela e incenso.

Do total de lagartas coletadas em 1982 no Horto Oswaldo Cruz,

Embú-Guaçu e Parque Primavera (aproximadamente 300 larvas), foram

obtidas apenas 56 pupas que estão sendo observadas isoladamente, e

anotadas as variações ponderais de cada uma.

CARACTERÍSTICAS CROMÁTICAS

As lagartas de C. a. araguensis são inconfundíveis com as demais

lagartas de Attacidae devido ao colorido alaranjado forte das manchas

sobre o tegumento preto e nos espinhos dos tufos dorsais, estes em

número de 17, distribuídos por toda a extensão dorsal da larva, caracte¬

rísticas que se apresentam em todos os estádios evolutivos.

As cerdas longas, anteriores, posteriores e laterais, juntamente com

03 respectivos espinhos das porções distais, são pretos. Os espinhos

basais são amarelo-alaranjados, simulando um tufo que na realidade são

espinhos que se agrupam para a base da cerda (Fig. 1).

A cápsula cefálica é amarelo-limão claro, destacando-se bem do resto

do corpo, embora coberta e protegida pelas longas cerdas anteriores

(Fig. 1).

369

SciELO

10 11 12 13 14 15

Fig. 2 — C.a, araguensia — Extremidade cefálica de exúvia (Scannin?).

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MORAES, R. H. P.; & TRAVASSOS FILHO, L. P. Contribuição para o conhecimento das lagartas

urticantes. I — Cerodirphia avenata araguenaia Lemaire, 1971. (Lep. Attacidae). Nem. Insí.

Butantan, 4í/45:367*376, 1980/81.

CONTRIBUIÇÃO PARA O CONHECIMENTO DAS LAGARTAS

URTICANTES I — Cerodirphia avenata araguensis Lemaire, 1971

(Lep. Attacidae)

Fig. 1 — C.a. araguenaia — Lagarta madura.

MORAES, R. H. P. & TRAVASSOS FILHO, L. P. Contribuição para o conhecimento das lagartas

urticantes, I — Cerodirphia avenata araguenaia Lemaire, 1971. (Lep. Attacidae). Mem. Inat.

Dutantan, ^4/^5:367-376, 1980/81.

QUETOTAXIA

Tanto as cerdas longas e curtas com projeções espiniformes, como

também os tufos de espinhos dorsais, são do tipo inoculador de veneno

(figs. 3 e 4).

Os 17 tufos dorsais são distribuídos aos pares no 3.° segmento

torácico e do 1.® ao 7.° segmento abdominal. No 8.° segmento abdominal

apenas um tufo ímpar como mostram as figuras coloridas.

No l.“ e 2.° segmentos torácicos e 9.° segmento abdominal, os pares

de tufos dorsais modificam-se: no l.° apresentam-se como cerdas provi¬

das de espinhos em toda extensão; no 2.° e 9.", as cerdas, apenas nas

suas porções basais, apresentam espinhos pontiagudos agrupados, seme¬

lhantes aos tufos dorsais dos demais segmentos. Ainda no 9." segmento

abdominal, entre o par de cerdas, existe uma ímpar, na mesma direção

do tufo de espinhos também ímpar do 8.° segmento.

Essas cerdas dorsais são as mais longas de toda a lagarta. No l.°

e 2.° segmentos torácicos são voltadas para a frente e no 9.*’ segmento

abdominal, dispostas em sentido oposto, certamente para função tátil e

também defensiva, pois, como as demais, são inoculadoras de veneno.

Ao longo de toda a lagarta, a disposição das cerdas providas de

espinhos, obedece à seguinte organização: l.°, 2.° e 3.° segmentos torá¬

cicos, com 3 cerdas de cada lado; 1.°, 2.^, 7.° e 8.° segmentos abdominais,

com 3 cerdas de cada lado; 3.°, 4.^^, 5.°, 6.° e 9.° segmentos abdominais,

com um par de cerdas de cada lado. (Os segmentos abdominais 3.°, 4.®,

5.° e 6.® correspondem às falsas pernas).

Todas as cerdas citadas, situam-se lateralmente, entre os tufos de

espinhos dorsais e a parte ventral da lagarta.

ECDISES

C. a. araguensis realiza as eedises de crescimento de maneira pe¬

culiar; a exúvia a ser descartada rompe-se antes do estojo cefálico, que

permanece preso e íntegro, sem abrir, saindo a nova cápsula cefálica

como que puxada para trás (fig. 2).

A exúvia fica com aspecto de larva encolhida, mais grossa; os tufos

dorsais bem unidos pelo corrugamento da pele.

Outro detalhe curioso é que essas lagartas não comem as exúvias

descartadas, ficando o local com aparência de maior número de larvas

simulando as exúvias, lagartas imóveis.

PUPÁRIO

As lagartas de C. a. araguensis, para puparem, fazem um tosco

abrigo, prendendo folhas e substratos com fios de seda, fazendo uma

proteção que não chega a ser casulo.

371

SciELO

10 11 12 13 14 15

MORAES, R. H. P.; & TRAVASSOS FILHO, L. P. Contribuição para o conhecimento das lagartas

urticantes. I — Cerodirphia avenata araguen^ia Lemaíre, 1971. (Lep. Attacidae). Nem. Inst.

Butantan, 4i/i5;367-376, 1980/81.

Fig. 3 — C.a. araguaisia — Detalhe de cerda urticante (Scanning)

Fig. 4 — C.a. araguenaié — Detalhe de tufos e cerdas urticantes (Scanning).

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SciELO

MORAES. R. H. P. & TRAVASSOS FILHO, L. P. Contribuição para o conhecimento das lagartas

urticantes. I — Cerodirphia avenata araguenais Lemaire, 1971. (Lep. Attacidae). Mem. Jnst.

Butantan, 367-376, 1980/81.

O pupário é bem esclerosado e preto, e o segmento terminal é carac¬

terístico, com formato semi-esférico, lemlbrando um zimbório e no centro

o cremaster também característico, reto, no eixo longitudinal, apontando

para trás, como mostra a foto n.° 5.

PARASITAS

Foi obtido 1 (um) exemplar de Ichneumonidae (Hymenoptera),

eclodido de pupa. O material foi conservado (icneumonídeo -|- pupa)

sob 0 número 2030-IB; também foi observado um lote de 30 lagartas

parasitadas por Apanteles sp. (Braconidae).

ADULTO

Asa anterior do macho com 34 a 40,5 mm de comprimento e 21 a

26 mm na borda externa; corpo com 22 a 25 mm de comprimento, varian¬

do em função do abdômen estar ou não distendido.

Asa anterior da fêmea com 40 a 45 mm de comprimento e 20 a

25 mm na borda externa; corpo com 25 a 35 mm de comprimento, variando

em função do abdômen.

Asas posteriores arredondadas, acompanhando a dimensão das

anteriores.

Antena do macho com apófises em toda a extensão, as maiores na

porção mediana; a da fêmea filiforme (Fig. 6).

CARACTERÍSTICAS CROMÁTICAS — Fig. 6

O colorido dorsal dos exemplares aqui estudados é predominante¬

mente castanho-avermelhado, lembrando cor de vinho tinto, correspon¬

dendo às cores 691 (sangüíneo), 692 (bruno púrpura, bruno sangüíneo)

e 696 (acaju) do Code Universal des Couleurs de Séguy, 1936 e as cores

32 (chest nut), 221B (Walnut brown) e 132A (brick red), do Naturalist

Color Guide de Smithe, 1975.

A intensidade do colorido avermelhado varia pouco nos exemplares

criados ou capturados quando recém-eclodidos, tendendo à cor pálida

nos exemplares voados ou antigos em coleções.

Na asa anterior, uma mancha dorsal característica, alongada em

alguns milímetros, mais larga sobre a nervura transversal e afinando

em direção à borda da asa, sobre a segunda nervura mediana; essa

mancha tem escamosidade branca e, no centro, também em desenho alon¬

gado, uma escamosidade preta com filete branco mediano, como mostram

as fotos dorsais dos exemplares á e 2.

Asa posterior com colorido quase uniforme, e uma faixa escura no

terço distai, acompanhando o contorno da margem externa e pequena

linha branca sobre a nervura transversal.

Ainda dorsalmente, na asa posterior, a área costal tem escamosidade

branca na borda, em longo e fino triângulo com base na inserção da

asa, faixa limitada por escamosidade escura, separando o branco das

nervuras anteriores da asa.

373

SciELO

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5 6 SCÍELO;l0 11 12 13 14 15 16

MORAES, R. H. P. & TRAVASSOS FILHO, L. P. Contribuição para o conhecimento das lagartas

urticantes. I — Cerodirphia avenata araguensia Leraaire, 1971. (Lep. Attacidae). Mem. Jnet.

Butantan, U/45:367-376, 1980/81.

Ventralmente, na área costal, a escamosidade branca é mais ampla,

até a nervura subcostal e ocupa dois terços basais dessa área, se desta¬

cando bem, conferindo aspecto muito característico à espécie, conforme

a foto ventral colorida. No colorido geral, a tonalidade acompanha o da

asa anterior.

Os adultos voam nos primeiros e últimos meses do ano e, como

vem acontecendo face ao excesso de iluminação pública, raros exemplares

são encontrados em focos luminosos, apesar do grande número de larvas.

PLANTAS ALIMENTÍCIAS

“Abacateiro” — Persea americana Mill. Lauraceae.

“Canela-branca”, Lauraceae, provavelmente do gênero Nectandra,

aguardando-se floração dos arbustos do Horto Oswaldo Cruz, para iden¬

tificação específica.

“Incenso” — Pittosporum undulatum Vent. Pittosporacea.

“Goiabeira” — Psidium guajava; “Cambuci” — Paivaea langsdorffii

Berg, ambas Myrtacea.

MATERIAL EXAMINADO

Da coleção Entomo-Parasitológica do Instituto Butantan: Horto

Oswaldo Cruz, Inst. Butantan, S. Paulo-SP: 9, N.° 2025, 15-12-1975,

pupário conservado; s , N.° 2026, 12-1-1979, A. R. Ali & R. H. P. Moraes

col., foco luminoso; Embu-Guaçu, SP (Sítio) : s, N.° 2028, 27-12-1981,

L. Travassos Neto col.. Foco luminoso; 9, N.° 2029, 28-12-81, larva

col. 18-4-1981, pupa 06.81, pupário cons.; H. O. Cruz, Inst. Butantan,

São Paulo-SP; N.° 2030, nov. 1976, exúvia larval, pupário e ichneu-

monídeo cons.; á, N.° 2031, 14-1-1982, pupário cons.; ê , N.° 2032,

15-1-1982, montagem ventral, pupário cons.; á, N.° 2033, 19-1-1982,

pupário cons.; á , N.° 2034, 5-2-1982, pupário n/ cons.; 9, N.° 2035,

18-1-1982, R. M. O. Veiga col., foco luminoso; 9, N.° 2036, 25-1-1982,

L. P. Travassos-Filho col., foco luminoso; $, N.° 2037, Embu-Guaçu,

SP, 25-1-1982, L. P. Travassos-Filho col., foco luminoso; 9, N.® 2038,

pupa n/ eclodida, foto.

1 (um) á, Horto Oswaldo Cruz, I.B., SP, 18-12-1972, enviado ao

Dr, C. Lemaire.

AGRADECIMENTOS

Agradecemos aos Doutores José Maria Soares Barata e Carlos José

Pereira Baltar, do Depto. de Epidemiologia da Fac. de Saúde Pública da

USP, pelas fotomicrografias em scanning.

Aos Drs. Olaf H. H. Mielke, da Univ. Fed. do Paraná e Gert Hatsch-

bach, do Museu Botânico da Prefeitura de Curitiba, pela colaboração na

identificação das plantas.

375

SciELO

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MORAES, R. H. P. & TRAVASSOS FILHO, L. P. Contribuição para o conhecimento das lagartas

urticantes. I — Cerodirphia avenata araguenaia Lemaire, 1971. (Lep. Attacidae). Mem. Inat.

Butantan, 367-376, 1980/81.

Ao Dr. Claude Lemaire, do Museu de Paris, pela identificação da

espécie.

Ao Dr. José Carlos Reis de Magalhães, pelas sugestões e leitura do

original.

Às biólogas Terezinha de Jesus H. Fontenelle, Rosa Maria de Oli¬

veira Veiga e Ana Maria Marassá, colegas da Seção, pelos incentivos,

colaboração nas anotações e coleta de material.

À Sra. Domingas Moreira de Souza, servente da Seção, pela cola¬

boração na coleta das larvas.

ABSTRACT; The authors describe the larva, 'which has urticating

hairs, the pupa, the male and female adults of Cerodirphia avenata

araguensis Lemaire, 1971 (Lepidoptera, Attacidae), and the

characters of the subspecies. The habits of the larva, the period of

the insect phases, the host plants, and the material from the

Parasitology Collection of the Instituto Butantan are also given.

Color and black and white photos of the insect and scanning photos

of the urticating hairs are presented.

KEY-WORDS; Lepidoptera, Attacidae, Cerodirphia avenata ara^

guensis, Bionomics, Urticating.

BIBLIOGRAFIA

CORRÊA, M.P. Diccionario das Plantas Úteis do Brasil. Min. Agric. Ind. Com.,

1926. Vol. 1/6.

LEMAIRE, C. Description d’Attacidae (Saturn.) nouveaux d’Amerique Centrale

et du Sud (Lepidop.) Tijdschr. Ent., lli(3) ;141-162, 12 pis., fgs., 1971.

SÉGUY, E. Code Universal des Covdeurs. LXVIII pgs., 48 pis. (720 couleurs).

Paris, 1936.

SMITHE, F.B. Naturalist Color Guide. New York, Amer. Mus., 1975. 10 pgs.+

17 pis.

VALLE, J.R. et al. Histamine content and Pharmacological properties of crude

extracts from setae of urticating caterpillars. Arch. Intem. Pharm. &

Therapie, 9S(3) :324-35, 1954.

376

SciELO

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Mem. Inst. Butantan

44/-*J;377-381, 1980/81

ACAROS ECTOPARASITAS DE SERPENTES. DESCRIÇÃO

DE OPHIOPTES LONGIPILIS SP.N. E OPHIOPTES

BREVIPILIS SP.N. (TROMBIDIFORMES, OPHIPTIDAE)

Nélida M. LIZASO *

RESUMO: Apresento o levantamento da fauna acarológica perten¬

cente à Família Ophioptidae, ectoparasitas de serpentes não vene¬

nosas brasileiras.

Foi coletado o gênero Ophioptes Sambom, 1928 em serpentes pro¬

cedentes de 9 Estados do Brasil.

Citam-se dados de distribuição geográfica e hospedeiros de Ophioptes

parkeri Sambom, 1928 e descrevem-se duas espécies novas: Ophioptes

longipilis sp.n. e Ophioptes brevipilis sp.n.

PALAVRAS-CHAVE: Ophioptes Sambom, 1928: Acarina, Ophiop¬

tidae, Ophioptes longipilis sp.n., Ophioptes brevipilis sp.n.

INTRODUÇÃO

O conhecimento da fauna acarológica pertencente à Família Ophiop¬

tidae da Região Neotropical é ainda incipiente. Foram assinalados para

essa região Ophioptes parkeri Sambom, 1928, localidade tipo: Buenavista,

Bolívia, encontrado também no Brasil, Paraguai e Argentina e Ophioptes

dromicus Allred 1958 de Cuba.

São parasitas exclusivos de serpentes em todas as fases de seu desen¬

volvimento.

Fain * em 1964 publicou um levantamento dos Ophioptidae tendo como

base o material herpetológico das coleções do Musée royal de l’Afrique

Centrale de Trevuren, e do Institut Royal des Sciences Naturelles de

Belgique, em Bruxelas.

Decorrente do exame sistemático — duas vezes por semana — das

serpentes que chegam ao Instituto Butantan desde os mais diversos pontos

do Brasil, temos agora novos dados para acrescentar tanto de distribuição

geográfica e hospedeiros como também a descrição de duas novas espécies:

Ophioptes longipilis sp.n. parasitando Oxyrhopns trigeminiis. Duméril,

Divinão de BioloKiar InHtituto Butantan — Bolsista do Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico

e Técnico (CNPq). Endereço para correspondência: CEP 05504 — Caixa Postal 65, São Paulo — Brasil.

377

SciELO

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LIZASO. N. M. Ácaros ectoparasitas de serpentes. Descrição de Ophiopte» longipilia sp.n. e Ophioptea

hrevipilia sp.n (Trombidiformes, Ophioptidae). Mem. Inat. Butantan, .44/^5:377-381, 1980/81.

Bibron and Duméril procedente de Itu, São Paulo e Ophioptes brevipilis

sp.n. parasitando Chironius flavolineatiis (Boettger) procedente de Goiâ¬

nia, Goiás.

MATERIAL E MÉTODO

O material estudado provém em sua maior parte do Estado de São

Paulo, embora tenha sido coletado também nos Estados do Pará, Pernam¬

buco, Goiás, Minas Gerais, Espirito Santo, Mato Grosso, Paraná e Rio

Grande do Sul.

As serpentes chegam vivas ao Instituto Butantan e assim são exami¬

nadas. No periodo compreendido entre março de 1976 e fevereiro de 1982

foi examinado um total de 3.006 serpentes, das quais 511 se apresenta¬

vam com ectoparasitas. Destas, 49 exemplares apresentavam Ophioptes.

As serpentes parasitadas por Ophioptes pertencem a 11 gêneros da

subfamília Colubrinae. Este material herpetológico foi identificado pelo

pessoal da Seção de Herpetologia do Instituto Butantan.

Todas as serpentes foram examinadas vivas, aquelas que se apresen¬

tavam parasitadas foram anestesiadas com éter sulfúrico e em seguida

os parasitas removidos com escarificador, um a um, geralmente a obser¬

vação com estereomicroscópio.

Os parasitas foram coletados todos na fase adulta, alguns dentro das

crateras escavadas nas escamas, mas a maioria deles caminhando lenta¬

mente sobre as escamas.

Ophioptes longipilis sp.n.

(Figs. 1-3)

Fêmea: comprimento do idiossoma 318pi, largura 360iJ..

Face dorsal: pêlos escapulares medindo 31(z., dorsais anteriores, 36(i.

e dorsais posteriores 9 m. Face ventral: placa genitoventral medindo 23 m

de comprimento e 38ii de largura; os quatro pares de pêlos genitoventrais

implantam-se fora da placa (fig. 1 ).

Gnatossoma: com dois pêlos, um laterobasal fino, medindo lôix e outro

ventrobasal com 16ii.. Palpo tarsal com 1 pêlo anterior medindo 24iJ. e

comprimento; espinhos das tíbias medindo: I 22^, II 28m, III 34m, IV 33m.

1 posterior com 11 m (fig. 2).

Pernas: trocanter IV com 1 pêlo fino e farpado, de 56ix de com¬

primento: fêmur I com 1 pêlo liso e 1 rombudo e farpado de 75 ( 1 . de

comprimento; espinhos das tíbias medindo: I 22ix, II 28|ji., III 34 ia, IV

33iJi. Pulvilhos dos tarsos: bárbulas em n.® de 8 apicais e 10 basais.

Macho (fig. 3) : comprimento do idossoma 240ix, largura 234p..

Face dorsal: pêlos escapulares curtos e fortes medindo 13 !a, pêlos

dorsais anteriores de 36/^, dorsais posteriores de 8/1 e genitais de 9/i.

Face ventral: pêlos ventrais posteriores finos de 8 ij. de comprimento.

Gnatossoma: pelo laterobasal medindo 13|x, ventrobasal de 9;x, tarsal

anterior de 19/i, tarsal posterior de 9/i.

Holótipo fêmea, Brasil, São Paulo, Itu, em Oxyrhopus trigeminus

Duméril, Bibon and Duméril, 7-II-77, N. M. Lizaso col., lote n.° 6070.

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LIZASO, N. M. Ácaros ectoparasitas de serpentes. Descrição de Ophioptcs longipüia sp.n. e Ophioptea

brevipilia sp.n (Trombidiformes, Ophioptidae). Mcm. ínst. Butantan, íV-45:377-381, 1980/81.

50 p

Prancha 1 — Ophioptea longipüia sp.n. Figr. 1: fêmea, placa genitoventral; Fig. 2: gnatossoma; Fig. 3:

macho, idíossoma. C

Ophioptea brevipüia sp.n. Fig. 4: fêmea, placa genitoventral; Fig. 5: gnatossoma; Fig. 6:

macho, idiossoma. c

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LIZASO, N. M. Ácaros ectoparasitas de serpentes. Descrição de Ophioptea longipilia sp.n. e Ophioptea

brevipilis sp.n (Trombidiformes, Ophioptidac). Mcm. inst. Butanian, :377-381, 1980/81.

Parátipos: os mesmos dados do holótipo: 3 9 e 1 á ; Pernambuco,

Guararapes, em Oxyrhopiis trigeminus, 14-IV-78, N. M. Lizaso col., 1 9 ;

Goiás, Itumbiara, em Oxyrhopus trigeminus, 23-X-79, N. M. Lizaso col.,

2 $ ; Espírito Santo, Domingos Martins, em Leimadophis poecilogyrus

(Wied), lO-VII-78, N. M. Lizaso col., 5 9 e 2 3 ; São Paulo, Itú, em

Oxyrhopus trigeminus, 25-IX-78, N. M. Lizaso col., 3 9 e 2 á ; Paraná,

Foz do Areia, em Oxyrhopus petola (Linneaus), 25-IV-80, N. M. Lizaso

col., 2 9.

Ophioptes brevipilis sp.n.

(Figs. 4-6)

Fêmea: comprimento do idiossoma 342[j., largura 360 [a.

Comprimento dos pêlos da face dorsal: escapulares: 15|x, dorsais

anteriores: 34 m, dorsais posteriores: 21n.

Face ventral: placa genitoventral de aspecto irregular medindo 49 ia

de comprimento por 50 m de largura onde se implantam 2 pares de pelos

posteriores (fig. 4).

Gnatossoma (fig. 5) : apresenta 1 espinho laterobasal de 8 ijl de com¬

primento e 1 pelo ventrobasal medindo lòu) o palpo tarsal apresenta 1

pêlo anterior medindo ISix e 1 posterior com 10;j..

Pernas: o trocanter III com 1 pêlo dorsal rombudo e farpado de 64|x

e o IV com 1 pêlo rombudo e farpado de 6i[i. de comprimento; fêmur I

com um pêlo dorsal rombudo e farpado de 60ix; espinhos das tíbias

medindo: I 17 m, II 20u, III 24u, IV 24u respectivamente. Pulvilhos dos

tarsos: bárbulas em n.° de 9 apicais e 8 basais.

Macho (fig. 6) : comprimento do idiossoma 222 íji, largura 240;i..

Face dorsal: pêlos escapulares de 13ix, dorsais anteriores de 43 |j.,

dorsais posteriores de 8 [a e genitais de 13ix. Face ventral: pêlos ventrais

posteriores finos de 12u.

Gnatossoma: 1 pêlo laterobasal medindo 13 ij., ventrobasal, 13ix, tarsal

anterior forte de 19 m, tarsal posterior fino de 8u.

Holótipo fêmea. Brasil, Goiás, Goiânia, em Chironius flavolineatus

(Boettger), 30-III-79, N. M. Lizaso col., lote n.° 6327.

Parátipos: os mesmos dados do holótipo: 5 9 ; Itumbiara, em Philo-

dryas olfersii (Lichtenstein), 16-XI-79, N. M. Lizaso col., 5 9 e 3 á ; Mato

Grosso, Três Lagoas, em Mastigodryas bifossatus (Raddi), 29-XII-78,

N. M. Lizaso col., 3 9 e 1 3 ; Espírito Santo, Colatina, em Leimadophis

poecilogyrus (Wied), 17-11-78, N. M. Lizaso col., l9 e 43 ; São Paulo,

Tupã, em Mastigodryas bifossatus, l-XII-78, N. M. Lizaso col., 9 9 e 4 3 ;

Rosana, em Lygophis meridionalis (Schenkel), 12-1-79, N. M. Lizaso col.,

3 9 e 2 3 ; Paraná, Uraí, em Philodi-yas olfersii, ll-IX-79, N. M. Lizaso

col., 1 9 .

DISCUSSÃO TAXONÔMICA

Estas duas espécies apresentam aspecto geral bastante semelhante.

Os exemplares fêmeas se diferenciam: Ophioptes brevipilis sp.n. apre¬

senta gnatossoma com 1 pêlo laterobasal curto e forte, em forma de espi¬

nho; Ophioptes longipilis sp.n. apresenta este pêlo longo e fino. A placa

genitoventral, em brevipilis é de aspecto irregular e nela se implantam

380

SciELO

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LIZASO, N. M. Ácaros cctoparasitas de serpentes. Descrição de Ophioptcs longipüis sp.n. e Ophioptcs

brevipilis sp.n (Trombidiformes, Ophioptidae). Mcm. ínst. Butantan, .4^/45:377-381, 1980/81.

dois pares de pêlos posteriores; em longipüis é pequena de aspecto

regular e sem pêlos.

De modo geral longipüis apresenta pêlos e espinhos de maior tamanho

que brevipilis, detalhe este notório nos espinhos das tíbias.

Ophioptes parkeri Sambom, 1928

É a espécie mais abundante no material coletado e que abrange maior

distribuição geográfica e variedade de hospedeiros.

Damos a seguir esta relação de hospedeiros e localidades: Pará, Belém,

em Spilotes pullatus (Linneaus), 30-III-79, N. M. Lizaso col., 3 9 ; Goiás,

Itumbiara, em Leimadophis poecilogyrus (Wied), 23-X-79, N. M. Lizaso

col., 35 9 e 28 á ; em Waglerophis merremii (Wied), 23-X-79, N. M.

Lizaso col., 1 9 ; em Lygophis mericlionalis (Schenkel), 23-X-79, 18 9 e

3 á ; Minas Gerais, Uberlândia, em Waglerophis merremii, 5-XI-76, 2 9 ;

em Leimadophis poecilogyrus, 18-XI-77, N. M. Lizaso col., 1 9 ; Juiz de

Fora, em Leimadophis poecilogyrus, 4-III-77, N. M. Lizaso col., 10 9 ;

Lambari, em Erythrolamprus aesculapii (Linneaus), 22-IX-78, N. M.

Lizaso col., 12 9 e 27 5 ; Sapucaí, em Spilotes pullatus (Linneaus), 22-XII-

78, N. M. Lizaso col., 35 9 e 19 á ; Três Corações, em Erythrolamprus

aesculapii, 19-V-81, N. M. Lizaso col., 6 9 ; Espírito Santo, Colatina, em

Leptodeira annulata (Linneaus), 17-11-78, N. M. Lizaso col., 2 9 e 2á ;

São Paulo, Presidente Wenceslau, em Leimadophis poecilogyrus, 14-IV-76,

N. M. Lizaso col., 5 9 e2s ; Arujá, em Chironius foveatus Bailey, 22-XI-76,

N. M. Lizaso col., 5 9 e 2 á ; Biritiba Mirim, em Erythrolamprus aescula¬

pii, 20-11-78, N. M. Lizaso col., 18 9 e 9á ; Araçoiaba da Serra, em

Chironius foveatus, 27-11-78, N. M. Lizaso col., 2 9 ; Rancharia, em Eryth¬

rolamprus aesculapii, 22-V-78, N. M. Lizaso col., 7 9 e 2 3 ; Inúbia Paulista,

em Erythrolamprus aesculapii, 22-IX-78, N. M. Lizaso col., 47 9 e 19 3 ;

Jaú, em Waglerophis merremii (Wied), 26-XII-78, N. M. Lizaso col., 1 9 ;

Morro Agudo, em Emjthrolamprus aesculapii, 7-XII-81, N. M. Lizaso

col., 5 9 e 2 3 : São Carlos, em Waglerophis merremii, 7-XII-81, N. M.

Lizaso col., 1 9 ; em Emjthrolamprus aesculapii, 7-XII-81, N. M. Lizaso

col., 19 ; Rio Grande do Sul, Pelotas, em Leimadophis poecilogyrus,

l-XI-76, N. M. Lizaso col., 5 9 e 1 3 .

ABSTRACT: This paper presents a study of the ectoparasite mites

from non poisonous brazilian snakes of the family Ophioptidae.

The genus Ophioptes Sambom, 1928 was collected in snakes from

9 States of Brazil.

The geografical distribution and hosts of Ophioptes parkeri Sam¬

bom are given and two new species are described: Ophioptes

longipüis sp.n. and Ophioptes brevipilis sp.n.

KEY-WORDS: Ophioptes Sambom, 1928; Acarina, Ophioptidae,

Ophioptes longipüis sp.n., Ophioptes brevipilis sp.n.

REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

1. ALLRED, D.M. A new species of pit mite (Acarina, Ophioptidae)

infesting snakes. Herpetológica, 14:107-112, 1958.

2. FAIN, A. Les Ophioptidae acariens parasites des ecailles des serpentes (Trom¬

bidiformes). Buli. Inst. roy. Sei. nat. Delg., 40(15) :l-67, 1964.

381

SciELO

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Mem. Inst. Butantan

U/45:Z8Z-ZQ0. 1980/81

GYRINICOLA CHABAUDI N.SP. (NEMATODA,

PHARYNGODONIDAE), OXIURÍDEO ENCONTRADO EM

GIRINOS *

Paulo ARAÚJO **

Paulo de Toledo ARTIGAS **

RESUMO: O gênero Gyrinicola contém, até o presente, três espé¬

cies encontradas em larvas de anuros: G. batrachienais que ocorre

nas regiões oriental e central da América do Norte; G. tba, na

Checoslováquia, no Cáucaso e no delta do Danúbio europeu; G.

japonica, no Japão. No presente trabalho é descrita uma espécie

nova, a quarta do gênero, Gyrinicola chabaudi, encontrada em girinos

de Leptodactylus ocellatus, no Brasil.

PALAVRAS-CHAVE: Gyrinicola chabaudi n.sp.; Nematoda; Pha-

ryngodonidae; girinos; anuros.

INTRODUÇÃO

Espécimens de oxiurídeos foram colhidos do intestino de girinos de

Leptodactylus ocellatus oriundos do município de Santo Amaro, Estado

de São Paulo. Apesar de não terem sido encontrados exemplares machos,

as características morfológicas das fêmeas permitiram-nos incluí-los no

gênero Gyrinicola Yamaguti, 1938.

Yamaguti (1938), para abrigar o gênero Gyrinicola, criou a famí¬

lia Gyrinicolidae, colocando-a na superfamília Oxyuroidea e, posterior¬

mente ” (1961), na ordem Oxyuridea. Chabaud ® (1978), transformou

Gyrinicolidae em subfamília, situando-a na família Cosmocercidae (Cos-

mocercoidea). Recentemente, Adamson ^ (1981) transferiu o gênero

Gyrinicola para a família Pharyngodonidae (Oxyuroidea) sensu Petter

e Quentin® (1976).

O gênero Gyrinicola, segundo Adamson h possui, atualmente, três

espécies encontradas em girinos: G. batrachiensis (Walton, 1929) Adam¬

son, 1981, G. tba (Dinnik, 1930) Adamson, 1981 e G. japonica Yamaguti,

1938, distintas apenas pela distribuição geográfica.

Trabalho apresentado no VII Congresso da Sociedade Brasileira de Farasitologia. Porto Alegre (RG),

de 31 de janeiro a 4 de fevereiro de 1982.

Departamento de Farasitologia, Instituto de Ciências Biomédicas, Universidade de São Faulo.

383

SciELO

10 11 12 13 14 15

ARAÚJO, P. & ARTIGAS, P. T. Gyrinicola chabauãi n.sp. (Nematoda, Pharyngodonidae), oxiurídco

encontrado em girinos. Mem. Inst. Butantan, 4i/45:ZSZ-Z90, 1980/81.

Como os oxiurídeos por nós encontrados apresentavam caracteres

morfológicos que os distanciavam das demais espécies do gênero Gyrini¬

cola, parece-nos que os mesmos devam constituir uma nova espécie, para

a qual propomos o nome Gyrinicola chabauãi n.sp.

DESCRIÇÃO

Gyrinicola chabauãi n.sp. — Pharyngodonidae.

Fêmeas “gráviãas” — Vermes pequenos, afilados nas extremidades,

desprovidos de asas laterais. Abertura bucal hexagonal limitada por

lábios indistintos, circundada por 4 papilas e 2 ânfides pedunculadas

(fig. 1, 2). Esôfago constituído de corpo ligeiramente dilatado poste¬

riormente, de istmo curto e de bulbo esferóide valvulado. Poro excretor

pós-bulbar. Cauda inicialmente com forma de tronco de cone, continuan¬

do-se por um processo delgado, quatro a cinco vezes mais longo que a

parte inicial; fásmides situadas no limite dessas duas porções da cauda.

Vulva com borda anterior saliente, situada um pouco adiante do meio

do corpo do verme. O ovijetor, dirigindo-se inicialmente para a extre¬

midade anterior, toma, após curvatura, direção oposta. Depois de ultra¬

passar posteriormente o nível da vulva, apresenta uma dilatação, conti¬

nuando-se, a seguir, pelo útero repleto de ovos de casca espessa. Após

curto trajeto em direção da extremidade posterior, dirige-se o útero para

a frente, enovela-se e continua-se pelo ovário que, após curvaturas sinuo¬

sas, torna-se retilíneo, dirigindo-se em direção da cauda do verme e

apresentando sua extremidade livre um pouco adiante do ânus (fig. 3).

Em alguns dos exemplares examinados foi observada a ocorrência

de pequeno “apêndice digitiforme”, de comprimento variável, situado na

face esquerda do ovijetor, próximo do início do útero acima descrito.

Tal apêndice, dirigindo-se anteriormente, não atinge o nível da vulva.

Em seu interior não foi observada a presença de ovos.

Os ovos são alongados (dimensões — em micrômetros — de 20

ovos: 102-118 x 48-56, média 112 x 51), assimétricos, com casca espessa,

operculados e de aspecto triangular quando vistos em secção transversal

(fig. 4). Os opérculos, de situação subpolar, apresentam-se com forma

de elipse (fig. 5). Dois opérculos, vistos perpendicularmente, mediram

(em micrômetros) 28 e 30 de comprimento por 16 e 15 de largura. De

4 ovos examinados, com 102, 103, 105 e 110 micrômetros de comprimento,

foi observado que seus opérculos mediam 29, 29, 28 e 30 micrômetros

de comprimento, representando estas medidas, respectivamente, os per¬

centuais de 28,4, 28,1, 26,6 e 27,2 do comprimento dos ovos.

Na tabela 1, encontram-se as dimensões principais obtidas de 20

fêmeas “grávidas” de G. chabauãi.

Espécimen tipo — O holótipo, desprovido do “apêndice digitiforme

uterino” acima mencionado, apresentou as seguintes dimensões (em

micrômetros) : comprimento 2794; largura ao nível da junção esôfago-

-intestino 178 e ao nível da vulva 170; comprimento total do esôfago

518; comprimento do corpo esofagiano 421; largura do bulbo esofagiano

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SciELO

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ARAÚJO, P. & ARTIGAS, P. T. Gyrinicola chahaudi n.«p. ÍNematoda, Pharyngodonidae), oxiurídeo

encontrado em girinos. Mem. Inat. Butantan, J^/,í5;383-390, 1980/81.

TABELA 1

Principais dimensões (em micrômetros, a menos que haja indicação) de 20 fêmeas

“grávidas” de Gyrinicola chabaudi n.sp. colhidas de girinos de Leptodactylus ocellatus.

Mín. — Máx.

Média

Comprimento (mm)

2,146 — 3,312

2,745

Largura*

145 — 210

168

Largura"

129 — 218

162

Esôfago: comprimento total

421 — 558

494 (17,9)

Esôfago: corpo, comprimento

332 — 445

400 (14,5)

Esôfago: bulho, largura

56 — 113

103

Anel nervoso'

129 — 170

149 (5,4)

Poro excretor'

542 — 868

675 (24,5)

Vulva (mm)'

0,931 — 1,494

1,220 (44,4)

Ovário-anus'

16 — 283

123 (4,4)

Cauda

486 — 648

533 (19,4)

a — Ao nível da junção esôfago-intestino.

b — Ao nível da vulva,

c — Distância da extremidade anterior,

d — Distância da extremidade livre do ovário ao anus.

Os números entre parênteses representam as porcentagens relativas ao comprimento

do corpo do verme.

113; distância da extremidade anterior ao anel nervoso 145 e ao poro

excretor 631; distância da vulva à extremidade anterior 1158; distância

da extremidade livre do ovário ao ânus 194; comprimento da cauda 583.

Fêmeas imaturas — Em fêmeas imaturas, com útero desprovido de

ovos, o aparelho genital era mais facilmente observável que em fêmeas

“grávidas”. Os aparelhos genitais de duas fêmeas, uma com 1,544 mm

e outra com 1,8 mm de comprimento, estão representados nas figuras

6 e 7, respectivamente. No aparelho genital da fêmea com 1,544 mm de

comprimento (fig. 6), observa-se o ovijetor que, após pequeno trajeto

em direção anterior, encurva-se, tomando direção oposta, apresentando

a seguir, grande dilatação, da qual sai o tubo útero-ovariano. Este,

inicialmente dirige-se para a frente e após curvatura segue, com forma

retilínea, em direção da cauda. O aparelho genital da fêmea com 1,8 mm

de comprimento (fig. 7), semelhante ao da fêmea com 1,544 mm de

comprimento, apresenta, na face esquerda da parte dilatada do ovijetor,

pequeno “apêndice digitiforme” dirigido em direção da extremidade

anterior do verme.

Larvas artificialmente eclodidas — Fêmeas recém-colhidas de giri¬

nos e postas em salina, realizaram oviposição. Em ovos assim obtidos

e incubados à temperatura de 25°C observou-se que, aos 4 dias de incuba¬

ção, as larvas desenvolvidas, ocupando todo o espaço interno da casca

do ovo, apresentavam movimentos periódicos de rotação em torno do eixo

longitudinal. Nessas larvas era observável o esôfago com seu aparelho

385

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ARAÚJO, P. & ARTIGAS, P. T. Gyrinicola ckabaudi n.sp. (Nematoda, Pharynsodonidae), oxiurfdeo

encontrado cm girinos. Mem. Inãt. Butantan, .(4A5:383-390, 1980/81.

Gyrinicola ckabaudi n.

Fig. 1

Fig. 2

Fig. 3

Fig. 4

Fig. 5

Fig. 6

Fig. 7

Fig. 8

Extremidade anterior, vista apical.

Extremidade anterior, vista lateral.

Fêmea “grávida'*.

Seção transversal de ovo.

Opêrculo de ovo.

Aparelho genital de fêmea imatura, desprovido de “apêndice digitiforme".

Aparelho genital de fêmea imatura, com “apêndice digitiforme” na face esquerda do ovijetor.

Larva eclodida artificialmentc após 8 dias de incubação à temperatura de 25‘*C.

386

2 3

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ARAÚJO, P. & ARTIGAS, P. T. Gyrirxicola. chabaudi n.sp. (Nematoda, Pharyngrodonidae), oxiurídeo

encontrado em girinos. Mem. Inat. Butantan, ^í/45:383‘390, 1980/81.

valvular. Aos 8 dias de incubação, verificou-se que as larvas permane¬

ciam aparentemente imóveis. A eclosão artificial de larvas foi provocada

por ligeira compressão exercida sobre ovos entre lâmina e lamínula em

meio constituído de salina. De duas larvas artificialmente eclodidas aos

8 dias de incubação foram obtidas as seguintes dimensões (em micrô-

metros) : comprimento do corpo 156 e 173; largura máxima (ao nível

da junção esôfago-intestino) 39 e 38; comprimento total do esôfago 64

e 80 (41,0 e 46,2% do comprimento da larva) ; cauda 33 e 34 (21,1 e

19,6%).

Na larva com 156 micrômetros de comprimento (fig. 8) foram

observados, além do esôfago e do intestino nitidamente delimitados, dois

agrupamentos de grandes células, um ao redor da metade posterior do

corpo esofagiano e outro, na região ventral da larva, ao nível do bulbo

esofagiano; provavelmente esses agrupamentos celulares representam os

primórdios do anel nervoso e do aparelho excretor.

Espécimens tipo: Museu de Zoologia da Universidade de São Paulo,

São Paulo, Brasil. Holótipo MZUSP n.“ 5730. Parátipos MZUSP n.”

5731.

Hospedeiro: Larva (girino) de Leptodactylus ocellatus.

Localização no hospedeiro: Intestino.

Localidade: Jardim Novo Horizonte, município de Santo Amaro, SP.

DISCUSSÃO

Walton em 1929, criou a espécie Pharyngodon batrachiensis, de

girinos de Rana pipiens e, em 1933», P. armatus, de R. pipiens e de

R. clamitans, da América do Norte. Em ambas as espécies o poro excre¬

tor estava situado ao nível do bulbo esofagiano.

Holoman ® (1969), examinando espécimen tipo de P. armatus, cons¬

tatou algumas discrepâncias na descrição original de Walton entre elas,

a situação do poro excretor que era pós-bulbar e não ao nível do bulbo

esofagiano, como descrevera Walton ®. Holoman em material colhido

de girinos de R. clamitans melanota, encontrou, pela primeira vez, machos

de P. armatus. Descreveu-os e redescreveu as fêmeas. Com relação ao

opérculo dos ovos de P. armatus, Holoman ® representa-o em figura, de

forma nitidamente circular.

Adamson h após estudo de espécimens de P. batrachiensis e de P.

armatus depositados em coleções helmintológicas por Walton *•» e por

H 9 loman ®, transferiu P. batrachiensis para o gênero Gyrinicola e colocou

P. armatus na sinonímia de G. batrachiensis. Ainda Adamson *, exami¬

nando exemplares de G. batrachiensis por ele colhidos de girinos de R.

clamitans, R. catesbeiana, R. pipiens, R. sylvatica, Hyla versicolor e Bufo

americanus, constatou a não ocorrência de exemplares machos no mate¬

rial encontrado em girinos de R. sylvatica e de B. americanus. Nas

fêmeas encontradas nos hospedeiros nos quais ocorriam machos, verificou

que as mesmas possuíam dois úteros, um de situação ventral, contendo

ovos de casca delgada em vários estádios de desenvolvimento, e outro,

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ARAÚJO, P. & ARTIGAS, P. T. Gyrinicola chabauãi n.sp. (Nematoda, Pharyngodonidae), oxiurídeo

encontrado em girinos. Mem. Irxêt. Butantan, ^i//#5;383-390, 1980/81.

dorsal, com ovos de casca espessa e operculados, em estádio inicial de

divisão celular. Estes ovos, de casca espessa, apresentavam-se com forma

triangular em secção transversal. Em fêmeas colhidas de hospedeiros

nos quais não foram encontrados espécimens machos (girinos de R. syl-

vatica e de B. amerieanus), constatou que as mesmas possuíam somente

um útero, dorsal, no qual havia apenas ovos de casca espessa e opercula¬

dos. Com relação ao opérculo dos ovos de casca espessa, Adamsonem

sua redescrição de G. batrachiensis, afirmou ser o mesmo de situação

subpolar e de forma circular. Finalmente, conclui Adamson ‘ que exis¬

tem, até 0 presente, três espécies conhecidas do gênero Gyrinicola distin¬

tas apenas pela sua distribuição geográfica: G. batrachiensis que ocorre

nas regiões oriental e central da América do Norte; G. tba, na Checos¬

lováquia, no Cáucaso e no delta do Danúbio europeu; G. japonica, encon¬

trada no Japão.

Considerando-se os dados relativos ao comprimento do corpo, às

dimensões e às posições de vários órgãos obtidos por Adamson ^ de

exemplares de G. batrachiensis colhidos de girinos de R. sylvatica e de

B. amerieanus, verifica-se que, por esses dados, não seria possível dife¬

renciar G. chabauãi de G. batrachiensis. Contudo, a forma do opérculo

dos ovos, circular em G. batrachiensis segundo Holoman ® e Adamson *,

de elipse em G. chabauãi; o comprimento do eixo longitudinal do opérculo

dos ovos, menor nos de G. batrachiensis (15,2 e 15,4% do comprimento

de ovos figurados, respectivamente, por Holoman ® e por Adamson >) que

nos de G. chabauãi (26,6 a 28,4% do comprimento de 4 ovos examinados),

constituem, a nosso ver, caracteres específicos que permitem a diferen¬

ciação dessas duas espécies.

Além disso, em ovos oriundos de exemplares de G. batrachiensis

colhidos de R. clamitans, Adamson ^ (1981) observou desenvolvimento

máximo de larvas aos 6 dias de incubação à temperatura de 20°C. De

três larvas eclodidas artificialmente por meio de compressão de ovos

entre lâmina e lamínula, obteve Adamson ^ as seguintes dimensões prin¬

cipais (em micrômetros) : comprimento do corpo 232 a 238, largura

máxima 34 a 37, comprimento do esôfago 91 a 104 e comprimento da

cauda 62 a 66. Comparados esses dados com os obtidos por nós de duas

larvas de G. chabaudi eclodidas artificialmente após 8 dias de incubação

a 25°C, verificou-se que as larvas de G. chabauãi eram mais curtas e

mais largas que as larvas de G. batrachiensis examinadas por Adamson

Também, relacionados o comprimento do esôfago e o da cauda com o

comprimento da larva, constatou-se que em larvas de G. chabauãi o

esôfago era mais longo e a cauda era mais curta que em larvas de

G. batrachiensis. Tais diferenças constatadas em larvas, contribuem para

distinguir G. chabauãi de G. batrachiensis.

G. chabauãi difere de G. Tba pela ocorrência de um útero (dois

úteros em G. tba, segundo Dinnik ■*, 1930 e Volgar ^ 1959) ; pelo compri¬

mento do eixo longitudinal do opérculo dos ovos, maior em G. chabauãi

(26,6 a 28,4% do comprimento de 4 ovos examinados) que em G. tba

(cerca de 15% do comprimento de ovo figurado por Dinnik^); pela

distribuição geográfica, G. chabauãi encontrada na América do Sul —

Brasil —, G. tba, no Velho Mundo — Checoslováquia, Cáucaso e delta

do Danúbio.

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ARAÚJO, P. & ARTIGAS, P. T. Gyrinicola chabaudi n.sp. (Nematoda, Pharynprodonidae), oxiurídeo

encontrado em girinos. Mem. Inat. Butantan, 4^/^5:383-390, 1980/81.

G. chabaudi distingue-se de G. japonica pelos seguintes caracteres:

ocorrência de apenas um útero (dois úteros em G. japonica) ; cauda mais

longa, representando, em média, 19,4% do comprimento do verme (cerca

de 10% em G. japonica) ; vulva pré-equatorial (pós-equatorial em G.

japonica) ; ovos mais longos que os de G. japonica (ovos de G. chabaudi

102-118 X 48-56 micrômetros, de G. japonica 87-96 x 48-54 micrômetros) ;

pela distribuição geográfica, G. chabaudi assinalada na América do Sul

— Brasil —, G. japonica, no Oriente — Japão. Quanto à forma do

opérculo, não podemos compará-la visto que Yamaguti na descrição

de sua espécie, não mencionou a ocorrência de opérculo nos ovos, prova¬

velmente por não o ter observado.

AGRADECIMENTO

Agradecemos ao Sr. W. C. A. Bokermann, da Fundação Parque

Zoológico de São Paulo, pela identificação dos girinos utilizados no pre¬

sente trabalho.

ABSTRACT: The genus Gyrinicola contains three species described

from tadpoles: G. batrachiensis occurs in eastern and central North

America; G. tba, in Czechoslavakia, the Caucasus and the Danube

delta in Europe; G. japonica, in Japan. In this paper a new species

is described, the forth of the genus, and is named Gyrinicola

chabaudi, after specimens collected from tadpoles of Leptodactylus

ocellatus, in Brazil.

KEYWORDS: Gyrinicola chabaudi n.sp.; Nematoda; Pharyngodo-

nidae; tadpole; anurans.

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390

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Mcm. Inst. Butantan

4V^J:391-402. 1980/81

OBSERVAÇÕES DO COMPORTAMENTO E DA CÓPULA

HETERÓLOGA DE SUCURIS EM CATIVEIRO —

EUNECTES MURINUS MURINUS (LINNAEUS) E

EUNECTES NOTAEUS COPE, 1862

Tatiana VEINERT *

Hélio Emerson BELLUOMINI

RESUMO: Neste trabalho, os autores descrevem observações de

comportamento e de cópula heteróloga entre Eunectes murinus mtv-

rinus (Linnaeus) e Eunectes notaeus Cope, 1862, em cativeiro. A

maturidade sexual de fêmeas de Eunectes murinus murinus ocorre

aproximadamente aos cinco anos de idade quando atingem 320 a

360 cm de comprimento. É registrado o número de cópulas hetoró-

logas e 0 período de duração. Desses acasalamentos não resultaram

filhotes.

PALAVRAS-CHAVE: Cópula heteróloga de Sucuris em cativeiro.

INTRODUÇÃO

As observações referentes a répteis da família Boidae e em particular

do gênero Eunectes, sucuri, conhecidos pelo avantajado porte e que riva¬

lizam em tamanho com algumas espécies do gênero Python, são traba¬

lhosas e de difícil realização, representando anos de paciente dedicação,

nem sempre felizes.

No Brasil, Belluomini e colaboradores, 1976/77 (5) procuraram

apreciar, em relação ao gênero Eunectes, dados relativos a alimentação,

tamanho, nomes vulgares, reprodução, número de filhotes, posição siste¬

mática, acrescentando notas próprias obtidas nos seus trabalhos em 1966

(3) e 1968 (4) na Fundação Parque Zoológico de São Paulo.

Jardins Zoológicos que mantêm sucuris em suas exposições têm

publicado trabalhos referentes ao nascimento de ninhadas em cativeiro,

sendo o último de nosso conhecimento o de Luttenberger em 1973 (7)

e recentemente Deschanel em 1978 (6), do Jardim Zoológico de Lyon,

França, que descreveu cruzamento, reprodução e nascimento em cativeiro.

Fundação Parque Zooló^co do São Paulo — Caixa Postal 12.954

Instituto Butantan — Caixa Postal 66 — São Paulo, Brasil.

São Paulo, Brasil.

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VEINERT, T. & BELLUOMINI, H. E. Observações de comportamento e da cópula heteróloga de sucuris

em cativeiro — Eunectes murinus murinua (Linnaeus) e Eunectea Notaem Cope, 1862. Mem. Inat.

Butantan, ^^45:391-402, 1980/81.

PLANTA DO RECINTO EXPERIMENTAL

CAMARA DE AR

CORTE A-A

8.80

PLANTA

Fig. 1 — Planta do recinto experimental.

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VEINERT, T. & BELLUOMINI, H. E. Observações do comportamento e da cópula heteróloga de sucuris

em cativeiro — Eunectes murinus murinus (Linnaeus) e Eunectes Notaeua Cope, 1862. Mem. Inst.

Butantan, .44/45:391-402, 1980/81.

Em relação ao comportamento de serpentes da família Boidae em

cativeiro, há o trabalho de Barker e col. em 1979 (1), com observações

obtidas com exemplares de Python violunis.

Há muito sabe-se de casos de cópulas heterólogas entre serpentes,

ocasionando geralmente a morte da fêmea. Belluomini e Hoge em 1957/58

(2) estimaram esses acasalamentos na ordem de 1/200.000.

Neste trabalho, realizado no Zoológico de São Paulo, são relatadas

observações no comportamento e na cópula heteróloga de sucuris das

espécies Eunectes murinus murinus e Eunectes notaeus em cativeiro.

MATERIAL E MÉTODO

Quatro exemplares de sucuris foram incluídos neste trabalho:

1. Fêmea de Eunectes mtirinus m%i,rinus, A de 3,25 m e 15,300 kg,

procedente do Rio Feio, Estado de São Paulo em 30-05-76.

2. Macho de Eunectes notaeus, B de 2,00 m e 5,000 kg, procedente

de Sorocaba, Estado de São Paulo, em 17-03-77.

3. Fêmea de Eunectes munnus murinus, C de 2,90 m e 7,300 kg,

procedente do Zoológico de Curitiba, Estado do Paraná, em 11-05-77.

4. Macho de Eunectes munnus murinus, D de 1,40 m e 1,700 kg,

doação de particular em 19-12-78.

I — TERRÁRIO

Ao chegar, as serpentes foram colocadas em terrário com frente de

vidro e paredes de zinco, coberto com tampa de tela. A água era aquecida

por meio de resistência de aquário de 220v/120w.

A temperatura variava entre 20 e 26°C. Nesse terrário, as serpentes

permaneceram da data da chegada até 15-08-79.

ALIMENTAÇÃO

Dado a dimensão do terrário, pequena para o porte dos répteis,

dificultando o fornecimento de alimento de tamanho maior, oferecemos

apenas gambás, ratos de laboratórios, brancos e pretos e cobaias.

RECINTO EXPERIMENTAL

Em 15-08-79, os répteis foram transferidos para o recinto experi¬

mental, medindo 4,00 m de comprimento x 5,80 m de largura x 1,99 m

de altura, tendo na parte frontal um tanque de água de 4,00 m de com¬

primento X 2,00 m de largura e 0,45 m de altura. A área de terra é de

4,00 m de comprimento, 2,50 m de largura e altura de 2,45 m.

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VEINERT, T. & BELLUOMINI, H. E. Observações do comportamento e da cópula heteróloga de sucurii

em cativeiro — Eunectes murinus murinua (Linnaeus) e Eunectes Notaeua Cope, 1862. Mem. Inat

Butantan, ^4/45:3^1-402, 1980/81.

FíéT- 2 — Curvas da temperatura do recinto experimental, que abriga os exemplares A e B {Eunectes

murinua murinua e Eunectes notaeua).

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VEINERT, T. & BELLUOMINI, H. E. Observações do comportamento e da cópula heteróloga de sucuris

em cativeiro — Eunectea murinua murinxLa (Linnaeus) e Eunectea Notaeua Cope, 1862. Mem. Inat.

Butantan, ííA5:391-402. 1980/81.

O recinto foi adaptado às necessidades térmicas das serpentes, sendo

coberto com duas camadas superpostas de lona plástica transparente,

formando um “colchão de ar” com 0,15 m de altura para uniformizar

a temperatura ambiente; três lâmpadas infravermelho de 250w/220v e

cinco aquecedores de convecção estão suspensos a uma altura de 1,30 m.

A água do tanque foi aquecida por 8 resistências de aquário de 120w/220v.

O piso de terra foi coberto com uma camada de feno com espessura de

0,30 m.

A figura 2 mostra a oscilação de temperatura.

Estas instalações permitiram manter a temperatura do meio am¬

biente e da água, com pequenas oscilações ao redor de 30°C máx. e 25'’C

min. (fig. 4).

ALIMENTAÇÃO

A dimensão do recinto experimental permitiu oferecer, como ali¬

mento, animais de porte maior ou seja coelhos e cutias.

COMPORTAMENTO

Observações constantes indicaram que há bastante diferença no

comportamento de cada animal. A fêmea A permanece mais tempo

dentro da água e ao sair desta, prefere enrolar-se debaixo do feno sob

um dos aquecedores de convecção. O macho B prefere a região central

do recinto, também sob o feno e raramente procura a água.

Devido a constante movimentação dos avantajados répteis e as vezes

a dos animais que lhes servem de alimento, o feno tem que ser trocado

a cada 4 meses.

CÓPULAS

No dia 25-06-80, o macho B cruzou com a fêmea A dentro da água

às 13,05 h e até às 18 h ainda encontravam-se em cópula. Em 24-04-81

anotamos outra cópula, agora sob o feno, com duração de 3 h; em

22-05-81 houve outro cruzamento sob o feno, esta vez não se sabendo

a duração.

Apesar da mudança de recinto, houve continuidade nos cruzamentos

do macho B com a fêmea A.

RESULTADOS

I — TERRÁRIO

A) Alimentação

A alimentação no terrário dos exemplares A Eunectes murinus muri-

nus, B Eunectes notaeus, C Eunectes murinus murinus e D Eunectes

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VEINERT, T. & BELLUOMINI, H. E. Observações do comportamento e da cópula heterólojça de sucuris

em cativeiro — Eunectea murinus murinua (Linnaeus) e Eunectes Notaeua Cope, 1862. Mem. Inat.

Butantan, 391-402, 1980/81.

murinus murinus foi, inicialmente, rato de laboratório, branco e preto.

Como A recusava esse tipo de alimento, mudamo-lo para cobaia.

Pelo fato do terrário ser pequeno para alojar esses répteis, freqüen-

temente o exemplar A travava luta com outras serpentes pela posse da

presa (cobaia). Para solucionar esse problema, passamos a fornecer

primeiro os ratos de laboratório para os exemplares B, C e D e depois

cobaia para o exemplar A.

B) Crescimento

Nesse periodo as serpentes cresceram e ganharam peso.

C) Cópulas

Aproximadamente 1 ano depois de estarem juntos no terrário, os

exemplares A, Eunectes murinus murinus e B, Eunectes notaeus cruza¬

ram em 05-09-78.

Observamos que o macho B cruzou com as duas fêmeas, A e C. Nota¬

mos a preferência do macho B pela fêmea A dado o maior número de

coberturas, sendo 24 vezes contra apenas 2 vezes com a fêmea C. A

tabela I mostra os dados referentes aos cruzamentos observados no

terrário.

Observações feitas num período de 24 dias, entre 05-09-78 e 10-10-78,

permitiu-nos constatar que os cruzamentos se davam de uma a duas

vezes por dia, com duração que variava entre o mínimo de 15 min. e o

máximo de 90 min.

No período noturno não se registraram cópulas, pois as serpentes

permaneciam quietas, quase sempre imóveis, apenas reagindo à nossa

presença.

II — RECINTO EXPERIMENTAL

A) Alimentação

Com a mudança dos répteis para o recinto experimental, em 15-08-79,

tivemos condições de alimentar as serpentes com animais de porte maior,

como coelho e cutia. Porco doméstico de 15 kg, oferecido exclusivamente

ao exemplar A não pode ser ingerido devido ao tamanho.

B) Crescimento

As figs. 3 e 4 mostram o crescimento e o peso dos animais.

C) Cruzamentos

O cruzamento da fêmea A com o macho B nesse recinto se deu em

25-06-80.

Em 10-07-80, ao ser feita a inspeção de rotina, notou-se que o exem¬

plar B, Eunectes notaeus, estava com necrose na ponta da cauda, com

exposição de vértebras, impondo-se amputação parcial, ocasionando inter¬

rupção nos cruzamentos, reiniciados aos 24-04-1981.

397

SciELO

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VEINERT, T. & BELLUOMINI, H. E. Observações do comportamento e da cópula heteróloga de sucuris

em cativeiro — Eunectea murinua murinua (Linnaeus) e Eunectea Notaeua Cope, 1862. Mem. Inat.

Butantan, 391-402, 1980/81.

Fig. 4 — Curvas do crescimento de Eunectea notaeua (exemplar B) entre 1977 e 1981.

398

1 SciELO

VEINERT, T. & ÍBELLUOMINI, H. E. Observações do comportamento e da cópula heteróloga de sucuris

em cativeiro — Eunectea murinua rmiriniLa (Linnaeus) e Eunectea Notaeua Cope, 1862. Mem. Inat.

Butantan, .^4/^5:391-402, 1980/81.

Fig. 5 — Hemipênis do exemplar B Eunectea notaeua momento antes da cópula heteróloga. Assinalado

dentro do círculo.

399

SciELO

VEINERT, T. & BELLUOMINI, H. E. Observações de comportamento e da cópula heteróloga de sucuris

em cativeiro — Eunectcs murinua murinua (Linnaeus) e Eunectca Notaeua Cope, 1862. Mcm. Inst.

Butantan, 4-4/-4 5.'391-402, 1980/81.

DISCUSSÃO E CONCLUSÕES

De acordo com os trabalhos de Belluomini e col. (6) as ninhadas

de Eunectes murinus murinus nascem com tamanho que varia de 70 cm

a 80 cm. As curvas de crescimento mostram que aos cinco anos de idade

sucuris podem ter 320 cm de comprimento. Estas observações permitem

supor que a fêmea de Eunectes murinus murinus de 70 cm de compri¬

mento, recebida por Deschanel (6) tinha menos de um ano de idade e

ele observou 5 anos depois, quando a fêmea media 325 cm de compri¬

mento, cruzamento com macho da mesma espécie e nascimento de filhotes

após 7 a 8 meses.

A fêmea A de Eunectes murinus murinus do recinto experimental

do Zoo de São Paulo, cruzou quando tinha 325 cm de comprimento, com

macho de Eunectes notaeus e apesar da repetição dessa cópula heteróloga

(tabela 1) não resultou fecundação, nem morte da fêmea.

TABELA I

Dados referentes aos cruzamentos das serpentes A, B e C no terrário, com anotação

das datas e do tempo da duração em minutos das cópulas.

ANIMAIS

DATA

TEMPO

B e A

de 05/09/78 a

24 cópulas

10/10/78

entre 20’

e 90’

B e C

27/09/78 e

2 cópulas

06/10/78

entre 16,

e 20,

O controle do exemplar de Deschanel (6) e daquele do presente

trabalho, comprova a maturidade sexual aproximadamente aos 5 anos

de idade, quando essas fêmeas alcançaram comprimento entre 320 cm a

350 cm.

Os autores (5) encontraram em neerópsias de fêmeas de Eunectes

murinus murinus dessa idade, ovidutos com ovos corroborando as con¬

clusões acima (fig. 6).

Barker e col. em 1979 (1) observando exemplares de Python molurus

em cativeiro, verificaram que há luta entre os machos pela posse da fêmea

e uma hierarquia social linear dos mesmos. Esse comportamento não foi

constatado por nós com os exemplares de Eunectes estudados neste

trabalho.

Registramos 29 cópulas ao todo com duração mínima de 15 min.

e máxima de 295 min., sendo 26 destas no terrário e 3 no recinto

experimental.

O maior número de cruzamentos no Zoo de São Paulo deu-se nos

meses de setembro e outubro, enquanto Deschanel, 1978 (6), na França,

assinala os meses de maio e julho, estação climática da primavera nos

dois países.

400

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VEINERT, T. & BELLUOMINI, II. E. Observações do comportamento e da cópula heteróloga de sucuris

em cativeiro — Eunectes murinus murimía (Linnaeus) e Eunectes Notaeus Cope, 1862. Mem. Inat.

Butantan, 44/-Í5:391-402, 1980/81.

Fig, g — Necropsia de sucuri de Eunectes murinua murinus com pouco mais de 300 cm mostrando

ovidutos com ovos.

ABSTRACT: In the present paper, the authors describe observa-

tions on the behavior, and heterologous mating of anacondas —

Euneotes murirms murinus (Linnaeus), and Eunectes notaeus

Cope, 1862 in captivity. Sexual maturity occurs in Eunectes

murinus murinus approximately at the age of 6 years, when females

reach body lengths of about 320 to 350 cm. The number as well

as the duration of heterologous matings are recorded. No young

resulted from these copulations.

KEYWORDS: Heterologous mating of Anacondas in captivity.

AGRADECIMENTOS

Agradecemos ao médico veterinário, Dr. FAIÇAL SIMON *, pelas

sugestões na construção do recinto experimental, à bióloga MARIA DE

FÁTIMA DOMINGUES FURTADO **, pelo levantamento bibliográfico,

à Senhora SIBYLLE E. HELLER **, pela redação. Ao Setor de Foto-

cinematografia *, pelas fotografias, GABRIEL ARCANJO DO CARMO *,

da equipe de Desenho, pelos gráficos e desenhos, ao Tratador VALDO-

MIRO FELIZ DA SILVA *, pela dedicação.

Fundação Parque Zoológico de São Paulo.

Instituto Butantan.

401

SciELO

VEINERT, T. & BELLUOMINI, H. E. Observações do comportamento e da cópula heteróloga de sucuris

em cativeiro — Eunectea murinua murinua (Linnaeus) e Eunectea Notaeua Cope, 1862. Mem. Inst.

Buiantan, 4^-^5:391-402, 1980/81.

REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

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group of indian pythons, Python molurus (serpentes, Boidae) with for-

mation of a linear social hierarchy. COPEI A, 3 :466-471, 1979.

2. BELLUOMINI, H.E. & HOGE A.R. Um caso de cópula heteróloga entre

Bothrops e Crotalus (serpentes). Mem. Inst. Butantan, 25:91-94, 1957/58.

3. BELLUOMINI, H.E. & VEINERT, T. Criação de “sucuris”, (Anacondas),

Eunectes murinus (Linnaeus, 1758). Notas preliminares. Parque Zoológico

de São Paulo, Ciênc. Cult., JS(2) ;Í34-135, 1966.

4. BELLUOMINI, H.E.; VEINERT, T. & DISSMANN, F. Dados sobre a biolo¬

gia de serpentes Eunectes murinus — Curva de crescimento e de alimen¬

tação em cativeiro (três anos de observação). Anais do III Congresso

Nacional — Quinta da Boa Vista. Rio de Janeiro, 1968.

5. BELLUOMINI, H.E.; VEINERT, T.; DISSMANN, F.; HOGE, A.R.; & PE¬

NHA, A.M. Notas biológicas a respeito do gênero Eunectes Wagler, 1980

“sucuris” (Serpentes Boidae). Mem. Inst. Butantan, 40/47:79-115, 1976/1977.

6. DESCHANEL, J.P. Reproduction of anacondas. Internat. Zoo Yearbook, 18:

98-99, 1978.

7. LUTTENBERGER, F. Die Geburt von Anakondas (Eunectes murinus (Lin¬

naeus, 1758) Gefangenschaft, Aquaterra, 10(2) :15-21, 1973.

402

1 SciELO

Mem. Inst. Butantan

4í/í5;403-423, 1980/81

ACCIDENTES HUMANOS POR LAS SERPIENTES DE LOS

GÊNEROS BOTHROPS Y LACHESIS

Juan Silva HAAD ♦

RESUMEN: Se presentan 93 casos de accidentes humanos por ser-

pientes dei Género Bothrops y dos casos por el Género Laehesis.

Se hace el estúdio de la semiologia de estos accidentes, y con base

en el análisis estadístico de la casuística presentada, se formulan los

fundamentos para establecer el diagnóstico clínico y diferencial;

además se exponen los métodos terapêuticos empleados.

UNITERMOS: Síndromes: Laehesis; Bothrops. Serpientes; Cro-

talinae.

INTRODUCCIÓN

Desde 1973, hasta el primer semestre de 1978, se han estudiado y

tratado, en el Hospital Regional de la ciudad de Leticia Amazonas, 93

casos de accidentes humanos, determinados por las serpientes dei Género

Bothrops y dos casos por las serpientes dei Género Laehesis.

De los 93 casos de accidentes bothrópico, 79 fueron ocacionadas por

la especie Bothrops atrox y 14 por la subespecie Bothrops bilineatus

smaragdimis.

La gran morbilidad causada por las serpientes dei Género Bothrops

nos permitió realizar un estúdio detallado de la clinica semiológica, como

también, de las alteraciones hematológicas y urinarias que provocan los

venenos de estas serpientes.

Dos casos de accidentes humanos causados por las serpientes dei

Género Laehesis nos ayudarán a establecer tanto las similitudes como las

diferencias clínicas existentes entre estosdos Géneros, cuyo diagnóstico

diferencial clínico, es de gran importância para instaurar una terapêutica

racional.

Los casos de accidentes laquéticos relatados son los únicos, hasta el

momento actual, descritos en la literatura médica colombiana.

Jefe dei Servicio de Salud dei Amazonas — Director Hospital Regional de Leticia — Cirujano General

Calificado.

403

SciELO

10 11 12 13 14 15

IIAAD, J. S. Accidentes humanos por las serpientes de los generos Bothrops y Lacheaia. Mem. Inai.

fíutantan, A5;403-423, 1980/81.

La rareza de los accidentes ocacionados por las serpientes dei Género

Lachesis, nos mantuvo durante 12 anos sin conocerla semiologia producida

por la inyección accidental dei veneno de estas serpientes en el hombre.

El conocimiento de los signos semiológicos de este grave accidente es una

contribución médica importante por lo escasso de la literatura universal

existente.

MATERIAL Y MÉTODOS

Se llevó a cabo un registro detallado de los accidentes ofídicos ocurri-

dos en el Território de la Comisaría dei Amazonas y mediante la investi-

gación realizada se determinarán los siguientes hechos:

1. °) Circunstancia como ocurrió el accidente.

2. °) Hora en la cual ocurrió el accidente, y tiempo transcurrido

entre éste y la consulta médica.

3. °) Lugar dei cuerpo donde fue picado.

4. °) Sintomas y signos presentados.

5. °) Alteraciones hemáticas encontradas.

6. °) Distribución por edad y sexo.

Los pacientes atendidos y tratados en el Hospital Regional de Leticia,

en el cual hay recurso humano médico y de bacteriólogas especializadas,

se les practicarán a todos lo pacientes, además de los exámenes clinicos

nitinarios, exámenes de laboratorio para conocer las alteraciones de la

protrombina y el fibrinógeno; alteraciones de la morfologia globular,

como también exámenes de orina con el fin de determinar la presencia

de elementos anormales en ésta.

Con base en los signos semiológicos, sintomas y hallazgos de labora¬

torio clinico, principalmente las alteraciones de la coagulación, causadas

por la disminución o consumo de la protrombina y dei fibrinógeno, clasi-

Hcamos los pacientes en tres estados clinicos, con el objetivo de sentar las

bases terapêuticas. Los estados clinicos se calificaron en; Estados I, H y

III. Se compila toda la casuistica ocurrida en el Território dei Amazonas

y se hace el análisis estadistico.

SEMIOLOGIA DEL ACCIDENTE BOTHRÓPICO

La función venenosa de los Tanatofidios está dirigida fundamental¬

mente a la conservación de la especie, utilizando el veneno de sus glându¬

las, principalmente, para matar las presas favoritas que constituye su

alimento; en segundo lugar, como medio de defensa contra sus agresores.

De los 93 casos de accidente Bothrópico estudiados y tratados 79 fueron

ocacionados por el Bothrops atrox; el Bothrops bilineatus smaragdinus

produjo 14 accidentes, esto es el 15,053% y el Bothrops atrox es el

84.547%. No hemos comprobado accidentes humanos por las otras repre¬

sentantes dei Género Bothrops.

404

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HAAD, J, S. Accidentes humanos por las serpientes de los generos Bothrops y Lachcsis. Mcm. Inst.

Butantan, 4íÃ5;403-423, 1980/81.

PORCENTAJES 10 20 30 40 50 60

<1 HORA

< 3 HORAS

3-5 HORAS

5y HORAS

Fig. 1 — Numero y porcentaje dei tiempo entre el accidente bothropico y la consulta hospitalaria en

93 casos.

O IO 20 30 40 50 60 70 80 90 100

EDEMA Y DOLOR

HEMORRAGIA

MAREO

NECROSIS

VOMITO

HEMATÚRIA

MACROSCÓPICA

EQUIMOSIS

HEMATEMESIS

Fig. 2 — Porcentaje de distribución de signos y sintomas en los casos de accidente bothropico.

405

2 3 4 5 6 SciELO ;lo 11 12 13 14 15

HAAD. J. S. Accidentes humanos por las serpientes de los generos Bothrops y Lachesis. Mcm. Jnst.

Btitantan, 4^/45:403-423, 1980/81.

El análisis de los casos de estos accidentes nos permitió reconocer

la existência de dos síndromes en los que se basó el diagnóstico dei acci-

dente Bothrópico:

l.°) SINDROME DOLOROSO

2.0) SINDROME HEMATOLOGICO.

Con el hallazgo parcial o toral de estos síndromes se llega a un

diagnóstico correcto.

SINDROME DOLOROSO

El dolor es de aparición inmediata en la zona de la picadura; dolor

agudo, de caracter urente, puede extender-se a todo el miembro herido.

Este se aprecia edematoso y pueden encontrarse flictenas o ampollas de

contenido sero-hemorrágico. Hay calor y rubor. Las lesiones tisulares

pueden progresar bacia la necrosis; ésta puede localizarse únicamente al

sitio de la picadura, en veces, dependiendo de la gravedad dei accidente,

la necrosis afecta todo un segmento o un miembro completo.

La gráfica n.° 1 nos muestra que el 20% de los pacientes llegan a

consulta en un tiempo menor de una hora. El 13% llega en un tiempo

menor a tres horas, el 35% llegan en las primeras cinco horas, después

de ocurrido el accidente. Sin embargo, a pesar de que el mayor volumen

de pacientes está entre las cinco horas y más, hemos observado que la

mortalidad hospitalaria es muy baja en el accidente Bothrópico. La mor-

talidad hospitalaria global en todo el Território dei Amazonas estudiado

durante 15 anos es dei 0.5%.

La gráfica de la fig. n.° 2 nos senala un hecho semiológico importante

y es el de que el edema y el dolor están presentes en el 100% de los pacien¬

tes. El dolor es intenso y de aparición instantânea; el edema se inicia en

los primeros minutos de la picadura.

Apreciamos en esta misma gráfica que el 40% presentaron hemor¬

ragias por diferentes vias, pero principalmente la forma más comün de

aparición es el sangrado por la mucosa gingival, o gingivorragia, presente

en el 70% de los pacientes. Se observa que las equímosis, la hematúria

macroscópica son de aparición más rara, encontrándose este tipo de san¬

grado solo en el 2% de los pacientes. Las hematemesis son las formas de

sangrado de menor frecuencia, y cuando se presenta tiene un gran valor

semiológico, indica que se trata de un Estado III de nuestra clasificación,

en donde el fibrinógeno está notablemente disminuido. Las necrosis se

presentaron en el 17% de los pacientes.

La gráfica n.° 3 senala la relación de aparición entre el edema, dolor

y hemorragia, según los diferentes grupos etareos.

Se observa que el edema, el dolor y la hemorragia están presentes

en el 100%‘en los menores de 15 ano.s, en cambio la hemorragia está

presente en el 27% de 15 a 44 anos, pero en cambio el edema y el dolor

apareció en el 100%. Esto nos indica que la inyección dei veneno Bothró¬

pico en los ninos es mucho más grave que en los adultos; esto se explica

406

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HAAD, J. S. Accidentes humanos por las serpientes de los generos Bothropa y Lachesia. Mem. Inst.

Butantan. iiA5;403-423, 1980/81.

O IO 20 30 40 50 60 70 80 90 100

I I I I I I I I I I

rEDEMA Y DOLOR

•■HEMORRAGIA

^rEDEMA Y DOÜOR

HEMORRAGIA

-EDEMA Y DOLOR

27%

100 %

Fig. 3 — Numero y porcentajes de edema dolor y hemorragia en 93 casos de accidente bothropico segun

grupos etarcos.

10 20 30 4 0 50 6 0 70

SIN COAGULACION

5-10 MINUTOS

MAS DE 10 MINUTOS

Fig. 4 — Numero y porcentajes de las alteraciones dei tiempo de la ccagulación en 93 casos de accidente

bothropico.

407

2 3 4

5 SciELO ;lo 11 12 13 14 15

HAAD, J. S. Accidentes humanos por las serpientes de los generos Bothrops y Lachcsis. Mcm. Inat.

Butantan, U/45:iOZ-423, 1980/81.

por la relación entre peso corporal y dosis de veneno inyectado, que logi¬

camente es siempre mayor en el nino.

La triada de dolor, edema y hemorragia como se aprecia en esta

gráfica, estuvo presente en todos los grupos de edades, por lo tanto esta

tríada semiológica es importante en el diagnóstico dei accidente Both-

rópico.

SINDROME HEMATOLOGICO

Antes de exponer los diferentes elementos que conforman este sín-

drome, es importante ver los resultados dei estúdio de las alteraciones de

la coagulación bien por disminución o consumo de la protrombina y dei

fibrinógeno demonstrados en las figuras n.®s 4 y 5. La gráfica dela fig.

n.° 4 nos indica que el 70% de los pacientes tenía pérdida de la coagula¬

ción sanguínea, determinada esta alteración, por el tiempo de coagulación,

(Método de White) ; el tiempo de coagulación se determinó en el momento

dei ingreso antes de recibir suero antiofídico.

Se comprobó que la incoagulabilidad que presentó el 70% delos casos

atendidos y tratados por nosotros, fue causada, principalmente, por el

consumo de la protrombina, ya que en todos los pacientes de este grupo,

el tiempo de protrombina fue siempre mayor de 26 segundos, lo que

significó un alto consumo de este factor, y en la mayoría, ausência com¬

pleta de protrombina circulante. Hemos observado y comprobado experi¬

mentalmente, que la protrombina es el factor que primero y más rápido

se consume.

Las alteraciones dei Fibrinógeno se analizan en la gráfica de la

Fig. n.° 5, en la cual vemos que el 37.1% de los pacientes, cuya sangre

era incoagulable, presentaban una concentración de este factor de menos

de 100 mgs por ciento. Entre 100 mgs y 249 estuvo el 47,9% y el 15%

de los pacientes tenían un fibrinógeno normal esto es entre 250 y 450 mgs

por ciento.

Las alteraciones de las células sanguíneas y de la fórmula blanca,

expuestas en la Fig. n.” 6 nos indica que el 46.4% de los pacientes presen¬

taban un número de leucócitos normales. El 53.6% tenían más de 10.000

leucócitos de mm

Es interesante anotar, que las plaquetas están normales en el 73%

de los pacientes y que solo en un 27 % de ellos se observa un aumento de

éstos elementos. Nunca hemos observado disminución de las plaquetas en

los pacientes tratados por accidente Bothrópico.

El síndrome hematológico está constituído y se puede resumir en los

siguientes hallazgos:

1. °) Incoagulabilidad sanguínea causada por disminución o consumo

total de la protrombina y/o dei Fibrinógeno y de otros factores más de la

coagulación.

2. °) Poiquilocitosis, anisocitosis y crenación globular. La hemolisis

es rara en el accidente Bothrópico y solo la hemos visto en un caso de

nuestra casuística.

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ERITROSEDIMENTACION PLAQUETAS LEUCOCITOSIS

HAAD, J. S. Accidentes humanos por las serpientes de los generos Bothrops y Lachcsis. Mcm, Inst.

Butantan, 44/45:A0Z-i2Z, 1980/81.

MENOS DE 100 mg

100-249 mg

250- 450

Fig. B — Numero y porcentaje de las alteraciones dei fibrinogeno on 93 casos de accidente bothropico.

0 10 2 0 30 40 50 60 70 80

I I_I_I_I I I I

rDE 5000-10000

^MAS DE 10.000

■DE 250.000-

450.000

l-MAS DE 450.000

rDE 0-4 mm/hora

DE 5-15mm./hora

^ MAS DE 15 mm/hora

46.4 %

53.6 %

73%

27%

53.6 %

17%

29.4 %

Fig. 6 — Numero y porcentajes de las alteraciones de las células sanguíneas y de la formula blanca en

93 casos de accidente bothropico.

409

2 3 4 5 6 SciELO ;lo 11 12 13 14 15

HAAD, J. S. Accidentes humanos por las serpientes de los generos Bothropa y Lachcais. Mem. Inat.

Jiutantan, 4í/í5;403-423. 1980/81.

Las modificaciones de la eritrosedimentación las consideramos como

un signo de valor muy importante en el diagnóstico dei accidente Bothró-

pico, ya que el 53.6% de los pacientes tienen abolida o desminuida esta

prueba. Tal alteración corre pareja con las modificaciones dei Fibrinó-

geno que se aprecían en los pacientes, ya que el 96% de nuestros pacientes

está alterada la concentración dei Fibrinógeno.

Las modificaciones morfológicas de los eritrocitos es otro hallazgo

biológico interesante ya que el 50% presentan uma morfologia eritrocitica

alterada, caracterizada por la presencia de los crenocitos o globulos rojos

en estrellas, lo mismo que la agregación de estas células es un hallazgo

común. El veneno Bothrópico provoca alteraciones de la membrana

globular roja.

3. ®) Leucócitos, más intensa quanto mayor sean las lesiones necró-

ticas dei miembro herido.

4. °) Micro-embolismo pulmonar y a otros órganos; raras veces

embolismo masivo de grandes vasos arteriales y venenosos.

5. ®) El 2% de nuestros pacientes presentan lesiones de los endo-

telios capilares expresadas clínicamente por las equímosis y el aumento

dei tiempo de sangria. El veneno Bothrópico lesiona los endotelios vas¬

culares, determinando aumento de la permeabilidad capilar, y muchas

veces destruyendo al pared vascular.

Las alteraciones urinarias encontradas fueron:

1. °) Albuminúria mayor 200 mgs. el 26%.

2. °) Hematúria microscópica el 8.3% de los pacientes.

3. °) Cilindruria, caracterizada por cilindros hialinos, granulosos (en

un 2%) y hemáticos en un 10%.

4. °) Hemoglobinuria en un 2%.

5. °) Hematúria macroscópica 2%.

Como se puede ver las alteraciones urinarias son menos frecuentes

en los accidentados, y revisten poca gravedad, a excepción de la hematúria

macroscópica, que cuando apareció correspondió siempre a pacientes dei

Estado III de nuestra clasificación.

La figura n.” 7 nos ilustra sobre la frecuencia de los estados clínicos

I- II y III. Se observa que el 66% de pacientes cuando ingresa al Hospital

están dentro dei Estado ,11. Estos pacientes tienen un Fibrinógeno dismi-

nuido con concentraciones de este factor entre 100 y 249 mgs. por ciento.

El 30% de los pacientes ingresan en el Estado III, esto significa que

tienen una concentración de Fibrinógeno menor de 100 mgs. por ciento.

Solo un 4% en esta casuística se clasificaron en el Estado I, es decir

pacientes sin alteración de la clasificación sanguínea.

La distribución porcentual de las picaduras en las diferentes regiones

dei cuerpo se puede apreciar en la figura n.° 8 donde vemos que el 68.6%

de las picaduras están localizadas en el miembro inferior, el 22.6% están

situadas en la mano y solo 1.1% en la cara.

410

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HAAD, J. S. Accidentea humanos por las serpientes de los sreneros Bothropa y Lachesia. Mem. Inat.

Butanian. 4^A5;403-423, 1980/81.

O 10 20 30 40 50 60 70

I I I I I_I_I

NORMAL

DE 250-450 mg.

DE 100-249 mg.

MENOS DE 100 mg

ESTADO I 4 %

ESTADO n

66 %

ESTADO ni 30%

Figr. 7 — Porcentaje de estados clínicos en casos de accidente bothropico.

HOSPITAL REGIONAL LETICIA

AMAZONAS-COLOMBIA

1.973-1.981

LOCALIZACION

1“ PIE

2” PIERNA

3” VHJSLO

4° M ANO

5“ ANTE BRAZO

6° BRAZO

7" ESPALDA

8“CARA

TOTAL

100.0

Fig. 8 — Distribución porcentual de las picaduras por serpientes dei genero bothrop en 93 casos.

411

2 3

SciELO

10 11 12 13 14 15

HAAD, J. S. Accidentes humanos por las serpientes de los generos Bothropa y Lacheais. Mem. Inat.

Butantan. í^/45;403-423, 1980/81.

Todos los accidentes de cara fue determinada por la especie Bothrops

bilineatus smaragdinus.

La Fig. 9 muestra la distribución por sexo y grupos etareos, los

hombres representan el 64% de los accidentados, las mujeres el 27% y

los ninos el 9%. El nino de menor edad picado por un Bothrops atrox es

de tres anos, y la picadura se localizo a nivel de la región escapular

derecha.

Los indígenas dei Território dei Amazonas, a pesar de tener un

excelente conocimiento de la ofidiofauna de la región no ponen en practica

las normas elementales de prevención dei accidente ofídico. Desecham el

calzado, lo que contribuye a incrementar la incidência de los accidentes.

En el Território dei Amazonas hay un alto porcentaje de picaduras

localizadas en la mano; esto es explicable pues dicho território es el

paraiso dei Bothrops bilineatus smaragdinus serpiente que como ya expu-

simos en las páginas anteriores es arborícora; pero a pesar de estar en

el reino de la mencionada serpiente es muy baja la frecuencia de picadu¬

ras en la cara: 1.1%.

CLASIFICACIÓN CLÍNICA DEL ACCIDENTE BOTHRÓPICO

Con fines terapêuticos clasificamos en tres estados clínicos los acci¬

dentes Bothrópicos:

ESTADO I: Paciente que cinco horas después dei accidente pre-

senta: dolor y edema localizado al sitio de la picadura o extendido a todo

el segmento; tiempo de coagulación, normal; tiempo y concentración de

protrombina normales. Fibrinógeno normal.

ESTADO II: Dolor, edema, flictenas o ampollas de contenido seroso

0 serohemático en la zona-herida o cercana a ella. Aumento o desapari-

ción dei tiempo de coagulación. Disminución o consumo total de la pro¬

trombina. Fibrinógeno normal o disminuido hasta 100 mgs. El 47.9%

de los pacientes estudiados correspondían al Estado II.

ESTADO III: Dolor, edema, vesículas o ampollas de contenido

seroso o serohemáticos; necrosis en el área picada. Incoagulabilidad

sanguínea. Consumo total de la protrombina; fibrinógeno menor 100

mgs. Shocke: este síndrome, por si solo, constituye un Estado III.

Guando la inyección dei veneno es intravascular, no hay edema; el dolor

es menos intenso, pero las alteraciones hemáticas son severas. El 37.1%

de nuestros pacientes llegan en Estado III.

SEMIOLOGIA DEL ACCIDENTE LAQU ÉTICO

El conocimiento de la semiologia dei accidente humano determinado

por las serpientes dei Género Laquético, se basa en el estúdio de sólo

dos casos que permiten hacer un análisis de los aspectos más destacados

de este raro accidente, a la vez reconocer por su semiologia y sintoma-

1 SciELO

412

5 6 SciELO ;lo 11 12 13 14 15

HAAD, J. S. Accidentes humanos por las serpientes de los generos Bothropa y Lachesia. Mcm. Inat,

Butantan, 4i/45;403-423, 1980/81.

tología própria, sus diferencias con el accidente Bothrópico. El diagnós¬

tico diferencial clínico es de suma importância para establecer una

terapêutica específica.

En los casos que comentamos se demostro que la serpiente era

Lachesis muta muta, verificados por el autor. Una de estas serpientes

midió 2.65 metros (primer caso) y la segunda 1.85 metros.

CASO NO. 1- H.C. NO. U955. HOSPITAL REGIONAL DE LETICIA-

AMAZONAS

Paciente masculino de 42 anos, residente en Leticia. Ingresa al

servicio de urgências el dia 11 de noviembro de 1975, por que 15 minutos

antes fue picado por una serpiente “VERRUGOSA” en el antebrazo

izquierdo, sobre la cara anterior, a nivel dei tercio inferior (ver figuras

n.«s 10, 10-A y 10-B).

En el momento dei ingreso revela los seguientes dátos:

1. °) Intenso dolor en el sitio de la picadura.

2. °) Sangrado por los orifícios, bien marcados, que dejaron los dien-

tes inyectores dei veneno.

3. °) Cólicos abdominales intensos.

4. °) Deposiciones diarréicas abundantes.

5. °) Tensión arterial de 50 mm la sistólica, diastólica inaudible.

6. °) Bradicardia de 49 por minuto.

Al examen clínico se encontró paciente pálido, com marcado pânico,

pulsos periféricos débiles, pero rítmicos, con visión borrosa y mareos.

A la auscultación cardíaca se encuentran ruídos apagados; se queja en

forma constante de dolores abdominales con características de cólicos;

la auscultación abdominal revela marcado aumento dei peristaltismo intes¬

tinal. El antebrazo izquierdo es muy doloroso tanto a la palpación como

a la movilización; aparecen bien evidentes los dos orifícios que dejaron

la entrada de los dientes inyectores dei veneno; hay sangrado escaso por

los orifícios de la picadura; con edema localizado a este sitio.

Los exámenes complementarios proporcionaron los siguientes datos:

1. °) Tiempo de coagulación de 3)4 minutos.

2. °) Tiempo de sangria 2 minutos.

3. ^) Fibrinógeno: 350 mgs. x 100.

4. °) Eritrosedimentación: 15 mm.

5. “) Tiempo de protrombina: 20 segundos.

6. °)- Morfologia globular hemática: normal.

7. °) Plaquetas : 300.000. Morfologia normal.

8. °) El examen parcial de orina no mostró anormalidades.

414

SciELO

10 11 12 13 14 15 16

HAAD, J. S. Accidentes humanos por las serpientea de los sreneros Bothrops y Lachcsis. Mem. Inat.

Butantan, U/45A0Z-AZZ, 1980/81.

Fie. 10

Fie. 10-A

415

SciELO

HAAD, J, S. Accidentes humanos por las serpientes de los creneros Bothropa y Lacheais. Mcm. Inat.

Butantan, U/iSM3-i23, 1980/81.

• 1

Fík. 10-B

mm de Hg

Fig. 11 — Primeiro caso de accidente laquetico (História clinica n." 14.956)

416

SciELO

10 11 12 13 14 15 16

HAAD, J. S. Accidentes humanos por las serpientes de los generos Bothrops y Lacheaia.

Butantan, 4í/.45;403-423, 1980/81.

Afcm. Inat.

Tres horas después dei accidente el edema se ha extendido a todo el

antebrazo y el dolor persiste. A nivel de la zona picada aparecen peque¬

nas vesículas de contenido seroso que cuatro horas más tarde se agrandan

hasta tener un diâmetro de 6 cms. en su mayor eje.

Tuvo 12 deposiciones diarréicas desde la hora dei ingreso (7,05)

hasta las 12 M. La gráfica de la figura N.° 11 muestra la evolución

de la tensión arterial, 3 y 2 horas después dei accidente se normalizan

las cifras tensionales, desaparecenlos cólicos abdominales y disminuye

notoriamente la diarrea. Los exámenes complementarios en los dias si-

guientes nos mostraron anormalidades. El edema y las ampollas dei

sitio herido desaparecieron en forma total, 7 dias después dei accidente.

Permaneció 14 dias hospitalizado.

CASO N° 2 — H.C. N° 16059

Mujer de 30 anos, originaria y residente en Leticia, ingresa al

Servicio de urgências, el día 11 de julio de 1977, porque 8 horas antes

había sido picada por una serpiente “VERRUGOSA” (Lachesis muta

muta) en la cara externa de la pierna derecha, a nivel de su tercio medio.

El examen de ingreso muestra los siguientes datos clínicos sobresa-

lientes:

1. °) Sangrado permanente por los orifícios de la picadura: a nível

de cada uno de éstos se encuentra una heridade 21/2 cms. que interesan

la piei y el tejido celular subcutâneo. Las heridas fueron practicadas

con machete por su esposo, con sangrado posteriorabundante. Fig. N.°s

12 y 12-A.

2. °) Intensa palidez de la piei y las mucosas.

3. °) Acentuado dolor y edema de toda la pierna herida.

4. ®) Dolores abdominales, tipo cólico, acompanados de diarrea

sanguinolenta.

5. °) Tensión arterial de 60x40 mm Hg.

6. °) Frecuencia cardíaca; 50/minuto.

7. °) Ruidos cardíacos velados.

La anamnesis suministra datos de gran interés clínico: el accidente

ocurrió 5 horas antes y el primer sintoma en aparecer fue el dolor, de

carácter urente, localizado en lugar de la herida. Pocos minutos después

presentó lipotimias acompanadas de vómitos y visión borrosa; intensos

cólicos con deposiciones diarréicas que una hora después se tornan san¬

guinolentas.

El examen dei abdômen demuestra aumento dei peristaltismo intes¬

tinal y dolor difuso a la palpación. El miembro herido está dematoso

y acusa dolor intenso a la palpación y movilización.

Hay sangrado permanente a través de los orifícios dejados por la

picadura y por los bordes de las heridas ya senaladas.

417

SciELO

10 11 12 13 14 15

HAAD, J. S. Accidentes humanos por las serpientes de los generos Bothropa y Lacíieaia. Mem. Inst.

Butantan. U/i5:403~i23, 1980/81.

Los exámenes complementarios arrojaron los siguientes resultados:

CU ADRO HEM AT ICO:

Hematíes: 2.500.000

Leucócitos : 12.600

Neutrófilos: 70%

Linfocitos: 27 %

Eosinófilos: 3%

Hematocrito: 25 %

Hb: 8.3%

Recuento de plaquetas : 200.000. Morfologia globular normal. Tiempo

de coagulación indefinido: Tiempo de sangria indefinido.

Tiempo de protrombina: 9.

Fibrinógeno: 80mg.x%.

Examen parcial de orina: normal.

La gráfica de la figura N.° 13 muestra la evolución de la presión

arterial.

mm. de Hg

419

SciELO

10 11 12 13 14 15

HAAD, J. S. Accidentes humanos por las serpientes de los generos Bothrops y Lacheaia. Mem. Inat.

Dutantan, ^-4^5:403-423, 1980/81.

El análisis dei cuadro clínico dei accidente Laquético y los elementos

semiológicos encontrados en los casos estudiados, permiten estructurar

los siguientes síndromes:

1. °) Doloroso

2. °) Cardiocirculatorio

3. °) Abdominal

4. ®) Hematológico.

El dolor se localiza en el miembro herido; aparece inmediatamente

con la picadura y se extiende a todo el segmento con el correr dei tiempo.

El edema acompana al dolor. Pueden aparecer, alrededor de la zona

picada, vesículas y ampollas de contenido seroso e serohemático en las

primeras cinco horas dei accidente.

El síndrome cardiocirculatorio se caracteriza por la rápida aparición

de una hipotensión arterial severa (en los primeros 15 minutos), con

lipotimias y perturbación de la agudeza visual. Bradicardia acentuada

con velamientos de los ruídos cardíacos.

El síndrome abdominal identificado por la aparición de una diarrea

súbita, acompanada de intensos cólicos. La diarrea se puede tornar

sanguinolenta en la medida en que aparecen los fenómenos de incoagu-

labilidad sanguínea.

El síndrome hematológico caracterizado por la disminución o consumo

de la protrombina y el fibrinógeno con la resultante incoagulabilidad y

sus manifestaciones hemorrágicas.

La semiologia dei accidente laquético queda resumida en las figuras

N.^s 14 y 14-A.

DIAGNOSTICO DIFERENCIAL

Los principales rasgos semiológicos nos permiten precisar el diagnos¬

tico diferenciai, son los siguientes;

1. °) En el accidente Laquético se presenta un síndrome cardio¬

circulatorio de aparición rápida, en los primeros 15 minutos dei accidente,

caracterizado por hipotensión arterial severa, bradicardia con velamiento

de los ruídos cardíacos y lipotimias acompanadas de visión borrosa, todo

explicable por la brusca hipotensión que desencadena la inyección dei

veneno de este serpiente.

2. °) Un cuadro abdominal, acompanado de intensos cólicos y diar¬

rea, explicables por el marcado aumento dei peristaltismo que produce el

veneno de la Lachesis.

En los accidentes Bothrópicos estudiados por nosotros nunca hemos

encontrado ni la bricardia, ni el cuadro diarréico doloroso de instauración

rápida. Los casos de hipotensión arterial que tuvimos ocasión de tratar

fueron siempre de aparición tardia, 10 horas o más después dei accidente

y consecuencia de la hipovolemia resultante, debido a las hemorragias en

sus diferentes formas, por disminución o consumo de los diferentes facto-

res de la coagulación.

420

SciELO

10 11 12 13 14 15 16

SEMIOLOGIA

DIAGNOSTICO CLINICO

HIPOTENSION

ARTERIAL

EDEMA, ERITEMA

Y AMPOLLAS BRAOlCARDIA

HAAD, J. S. Accidentes humanos por las serpientes de los generos Bothrops y Lacheais. Metn. Inat,

Butantan, 4^/^5:403-423, 1980/81.

Fig. 14-A

421

SciELO

MAREO

DIARREA

DOLORES ABDOMINALES

(COLICOS INTESTINALES)

Figr. 14

HAAD, J. S. Accidsntes humanos por Ias scrpicntes de los generos Bothrops y Lachcsis. Mem. Inat.

Butantan, 4-4/-45.-403-423, 1980/81.

La bradykinina, histamina y calicreina, producidas en forma rápida,

por acción dei veneno laquético, explicaria el síndrome cardiocirculatorio

y el cuadro de diarrea súbita y dolorosa ya senalados. Al igual que el

veneno bothrópico, el de la Lachesis muta mtita es coagulante e histolítico.

En síntesis, existen suficientes critérios clinicos para hacer el diag¬

nóstico diferencial entre el accidente laquético y el Bothrópico y poder

asi instaurar una terapêutica racional de estos accidentes.

TERAPÊUTICA DEL ACCIDENTE LAQUÉTICO

Los dos casos de accidentes Laquético que acabamos de analizar, en

sus aspectos semiológicos y clinicos, fueron tratados obteniéndose resul¬

tados satisfactorios con las siguientes medidas terapêuticas:

1. °) Ambos pacientes recibieron SUERO ANTIOFÍDICO PURI¬

FICADO, elaborado por el Instituto Butantan; este suero por cada centi-

metro cúbico neutraliza 1.0 mg de veneno Bothrópico (Bothrops jara¬

raca). El primer caso tratado, H.C. N.° 14955, picado por una Lachesis

de 2.05 m recibió 30 ampolas aplicadas por la via venosa disueltas

en 500 cc. de una solución de Dextrosa al 5% en goteo rápido. Esta

cantidad de suero Antiofidico neutraliza 300 mg de veneno Crotalico y

450 mg de veneno Bothrópico.

El segundo paciente, H.C. N.® 16059 picado por una Lachesis de

1,50 m recibió 20 ampollas dei mismo suero y por la misma via.

2. °) Ambos pacientes recibieron como terpéutica complementaria

para corregir el sindrome Diarréico doloroso y la bradicardia. Sulfato

de Atropina por la via venosa, iniciando con dos ampollas de 0.5 mg

y continuamos con una cada 4 horas, hasta obtener la normalización de

la frecuencia cardiaca y dei pulso.

3. °) Se usó el Effortil (Clorhidratoetil-norfenil en ampollas) sus¬

tância de acción simpaticomimética. Iniciamos con dos ampollas aplica¬

das por la via venosa y continuamos con una cada 4 horas, hasta obtener

la normalización de la presión arterial.

4. °) Hidratación con solución de Ringer y Dextrosa al 5% de

acuerdo con las pérdidas y requerimientos básicos calculados para cada

paciente.

El primer paciente no recibió transfusión sanguinea. El segundo

recibió 2000 cc de sangre fresca: 1500 cc el primer dia dei ingreso, y

500 cc el segundo dia.

De las medidas terapêuticas instauradas, para tratar los únicos dos

casos de accidente Laquético, existentes y relatados hasta el momento en

la literatura médica colombiana, concluímos que el suero Antiofidico

(I.B.) es efectivo contra la picadura de la Lachesis muta muta.

CONCLUSIÓN

La inyección dei veneno Laquético en el hombre, estudiado en dos

pacientes atendidos y tratados en el Hospital Regional de Leticia, Ama-

422

1 SciELO

HAAD, J. S. Accidentes humanos por las serpientes de los generos Bothrops y Lachcsia. Mem. Inst.

Butantan, ^í/^5:403-423. 1980/81.

zonas, Colômbia, permitió conocer un cuadro multisindrómico, que por

sus características clínicas y semiológicas nos ayuda a diferenciarlo dei

accidente Bothrópico.

El tratamiento hecho con suero Antiofídico dei Instituto Butantan

neutralizó satisfactoriamente el veneno Laquético. Son necesarias la

atropinización y el empleo de sustancias simpaticomiméticas, lo mismo

que la aplicación de líquidos por la vía venosa para corregir la hipo-

tensión severa que se apresenta en estos casos.

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423

SciELO

10 11 12 13 14 15

Mcm. Inêt. Butantan

U/-i5:425-iZS, 1980/81

COMPLÉMENTS À LA DESCRIPTION DU SCORPION

BRÉSILIEN OPISTHACANTHUS CAYAPORUM

VELLARD, 1932 (SCORPIONES; SCORPIONIDAE)

Wilson R. LOURENÇO *

RÊSUMÉ: Cet article est une contribution à la connaissance systé-

matique d’ OpisthacanthiLs cayaporum Vellard, 1932. L’espèce est

redécrite à partir de deux exemplaires types et de 81 exemplaires

récoltés dans les États du Pará et Goiás au Brésil.

La variabilité de certains caractères comme par exemple le nombre

de dents des peignes, est analysée et présentée en tableaux. Les

résultats démontrent que la distinction des sexes est parfaitement

possible pour O. cayaporum à partir du nombre de dents des peignes

et celà à tous les stades du développement.

UNITERMES: Opisthacanthus cayaporum Vellard, 1932; Scor-

pionidae.

INTRODUCTION

Au cours de sa mission dans les régions de Goiás et de TAraguaia,

Vellard (1932) a découvert une nouvelle espèce á’Opisthacanthus qu’ii

appelle Opisthacanthus cayaporum en hommage aux indiens Cayapos,

parmi lesquels il a séjourné.

Malgré la très bonne description présentée par Vellard en 1932,

cette espèce demeure incomplètement connue, la description de Vellard

négligeant certains caractères considérés à Tépoque de moindre impor-

tance mais qui aujourd’hui sont devenus fondamentaux pour la systé-

matique; s’est le cas de la trichobothriotaxie et de la morphologie de

rhémispermatophore.

Après le travail de Vellard (1932), cette espèce a été redécrite par

Mello-Leitão (1945), qui s’est borné à traduire la description de Vellard.

Attaché au Laboratoire de Zoologie (Arthropodes) du Muséum National d'Histoire Naturelle, Paris.

Adresse: 61, Rue de Buffon, 76005, Paris, França,

425

SciELO

10 11 12 13 14 15

LOURENÇO, W. R. Compléments à Ia description du Scorpion brésilien Opisthacanthus cayaporum

Vellard, 1932 (Scorpiones- Scorpionidae). Mem. Inst. Butantan, 4-4/-45.'425-438, 1980/81.

MATÉRIEL ET MÉTHODES

Pour notre étude il nous a été possible d’exaniiner un important

échantillonage de O .cayaporum: 66 exemplaires appartenant à la collec-

tion de ITnstitut Butantan, 15 exemplaires de notre collection personelle

et les deux exemplaires types, déposés aux collections du Muséum Na¬

tional d’Histoire naturelle, Paris.

Notre redescription est basée sur les deux exemplaires types,

néanmoins, vu le mauvais état de préservation de ces deux exemplaires,

Tanalyse de la coloration se base sur des exemplaires plus récemment

récoltés.

Les calculs statistiques sont faits selon Lamotte (1971).

Matériel étudié:

IB = Institut Butantan.

MNHNP = Muséum National d’Histoire naturelle. Paris.

WL-OC = Collection Wilson Lourenço.

Brésil: Goiás: Araguacema, M. Montefelli col. III/1956, 1 femelle

(IB-686), M. Montefelli col. III/1956, 1 mâle, 3 femelles (IB-687), M.

Montefelli col. III/1956, 2 mâles, 2 femelles (IB-688) ; Colinas, W.R.

Soares col. IV/1968, 1 mâle (IB-822), W.R. Soares col. IV/1968, 1 mâle

(IB-971), W.R. Soares col. IV/1968, 1 mâle (IB-975). Pará: Baixo

Araguaia (fl. amaz.), M. Lima col. X/1973, 1 mâle (IB-1012) ; Campos

à Touest de la serra dos Cayapos, J. Vellard col. X/1929, 1 mâle, 1 femel-

le-types (MNHNP-RS-0264), W.R. Lourenço col. VI/Í979, 7 mâles, 8

femelles (WL-OC-1 à 15) ; Conceição do Araguaia, Colég. Santa Rosa

leg. X/1958, 2 mâles, 1 femelle (IB-685), ? col. XI/1959, 1 femelle

(IB-764), Colég. Santa Rosa leg. X/1958, 1 mâle (IB-817), A.R. Hoge

col. 11/1964, 1 mâle, 9 femelles (IB-861), A.R. Hoge col. 11/1964, 13

mâles, 9 femelles (IB-862), A.R. Hoge col. 11/1964, 4 femelles (IB-875),

A.R. Hoge col 11/64, 5 mâles (IB-887), A.R. Hoge col. VIII/1965, 3 mâ¬

les, 3 femelles (IB-899), M.L. Borges col. VI/1967, 1 mâle (IB-963).

COMPLÉMENTS À LA DESCRIPTION ^^'OPISTHACANTHUS

CAYAPORUM VELLARD, 1932

Opisthacanthus cayaporum Vellard, 1932, Mém. Soc. zool. France,

29 {Ç,) :540.

Opisthacanthus cayaporum :

JfO :27.

Mello-Leitão, 1945, Arq. Mus. nac.,

Holotype mâle (figs. 1 et 2).

RS-0264. Campos à Touest de la serra dos Cayapos, Pará, Brésil.

Coloration: La couleur de base est châtain-rougeâtre. Prosoma.

plaque prosomienne de couleur châtain-foncé avec des zones plus claires

le long du sillon interoculaire, derrière les yeux médians et sur les

426

SciELO

10 11 12 13 14 15 16

LOURENÇO, W. R. Compléments à la description du Scorpion brésilien Opisthacanthua cayaporum

Vellard, 1932 (Scorpiones* Scorpionidae). Mem. liist. Dutantan, ^4/45.'425-438, 1980/81.

427

SciELO

10 11 12 13 14 15

Figs. 1 et 2 — Holotype mâle; vues dorsale et ventrale.

LOURENÇO, W. R. Compléments à la description du Scorpion brésilien Opisthacanthus cayaporum

Vellard, 1932 (Scorpiones- Scorpionidae), Mem. Inat. Dutantan, 4í/45.‘425-438, 1980/81.

428

LOURENÇO, W. R. Compléments à Ia description du Scorpion brésilien Opiathacanthus cayaporum

Vellard, 1932 (Scorpiones* Scorpionidae). Mem. Inst. Butantan, í4/45;425-438, 1980/81.

bords latéro-postérieurs. Tubercule oculaire plus foncé, noirâtre. Me-

sosoma; tergites de même couleur que la plaque prosomienne, avec

des zones plus claii'es, surtout sur la partie antérieure de chaque

tergite à coté de la carène axiale. Metasoma avec les cinq anneaux de

couleur châtain-rougeâtre-foncé; les zones plus claires forment des

esquisses de taches un peu estompées. Vésicule jaunâtre avec des taches

longitudinales de couleur rougeâtre-foncé. Aiguillon à base jaunâtre et à

extremité rougeâtre-foncé. Sternites jaune-rougeâtre; le Vllème plus

foncé, rouge-noirâtre. Peignes et opei*cule-génital ocre-jaune-foncé, avec

des tons grisâtres. Sternum, hanches et processus maxillaires, châtain-

rougeâtre-foncé. Pattes châtain avec des zones plus claires jaune-rou¬

geâtre qui forment des tâches en forme de trame. Pédipalpes châtain-

rougeâtre-foncé avec des tons noirâtres; doigts presque noirs. Chéli-

cères jaunâtres avec une trame noirâtre; les doigts sont rouge-noirâtre.

Morphologie: Front de la plaque prosomienne très profondément

échancré. Tubercule oculaire plus ou moins au centre de la plaque pro¬

somienne ; yeux médians séparés par un peu plus qu’un diamètre oculaire.

Trois yeux latéraux. Sillon interoculaire profond, s’allongeant ju.squ’à

Tarrière des yeux médians oü il se divise en deux et entoure le début

de la fossette triangulaire. Toute la plaque prosomienne est converte

d’une granulation plus ou moins grossière. Les sillons et la fossette

triangulaire sont dépourvus de granules. Mesosoma: tergites finement

granulés avec une granulation plus marquée dans la région postérieure.

Carène axiale présente mais très peu marquée. Metasoma à anneaux ar-

rondis; toutes les carènes sont peu marquées et formées de quelques

granules grossiers et épars. Vème anneau à face ventrale pourvue de

plusieurs granules en forme d’épines. Telson allongé; aiguillon propor-

tionnellement très court; face dorsale pourvue d’une légère dépression

dans la partie antérieure. Vésicule dépourvue de carènes. Peignes

(fig. 5) avec 9-9 dents (voir tableaux II à V). Sternites lisses, à stigma-

tes linéaires. Opercule génital fait de deux plaques à peu près trian-

gulaires. Pédipalpes: fémur à 5 carènes, pourvues de granules très

gros; tégument intercarénal des faces dorsale et ventrale très peu

granulé, presque lisse; les autres faces un peu granulées. Tibia et pince

avec une très forte granulation; ces grosses granulations forment quel¬

ques carènes très souvent incomplètes. Présence sur la face interne

du tibia d’un grand éperon dans la région basale, avec 4 ou 5 granules

à Textremité. Pince grande et aplatie; face dorsale pourvue de quelques

très fines granulations, chagrinée; faces latérales avec de grosses gra¬

nulations; face ventrale brillante et réticulée. Doigts lisses à tricho-

bothries fixées sur des plaques très brillantes et lisses, bien marquées;

granulations digitales se disposant en deux lignes longitudinales (fig. 6) ;

granules acessoires absents. Pattes: dernièr article avec deux rangées

d’épines (figs. 7 et 8) ; les deux premières paires de pattes en général

avec 4 internes et 2 externes; les deux dernières paires de pattes en gé¬

néral avec 4 internes et 2 externes; les deux dernières paires de pattes

en général avec 5 internes et 3 externes. Le corps, les pattes, les pédi¬

palpes et, plus spécialement la vésicule sont couverts de longues soies

de couleur jaunâtre. Trichobothriotaxie: les figures 9 à 16 précisent le

nombre et la disposition des trcihobothries des pédipaldes. II est à re-

marquer la présence d’une troisième trichobothrie dans le territoire esb

429

SciELO

10 11 12 13 14 15

LOURENÇO, W. R. Compléments à Ia description du Scorpion brésilien Opisthacanthiis cayaporum

Vellard, 1932 (Scorpiones* Scorpionidae). Mem. Inst. Butantan, 44/45:425-438, 1980/81.

sur la face externe du tibia (fig. 15). Hémispermatophore: les figures

17 et 18 montrent Théniispermatophore gaúche, vues externe et interne

d’ensemble, oú les différentes parties sont illustrées.

Allotype femelle (figs. 3 et 4).

RS-0264. Campos à Tonest de la serra dos Cayapos, Pará, Brésil.

Seules les différences avec Tholotype mâle sont indiquées.

Coloration: semblable à celle du holotype mâle.

Morphologie: Plaque prosomienne avec les sillons plus marquês.

Face dorsale de la vésicule avec dépression un peu moins marquée.

Peignes avec 6-6 dents. Opercule-génital constitué d’une seule plaque

non divisée, de forme plus ou moins pentagonal.

TABLEAU 1

Mensurations (en mm) des exemplaires décrits.

Holotype-mâle

Allotype-femelle

Longueur totale

57,6

63,7

Prosoma-longueur

9,9

11,0

Prosoma-largeur antérieure

7,4

8,2

Prosoma-largeur postérieure

11,7

12,4

Mesosoma-longueur totale

18,1

20,9

Metasoma-longueur totale

29,6

31,8

Anneau caudal I-longueur

3,7

Anneau caudal I-largeur

3,4

Anneau caudal Il-longueur

3,7

4,2

Anneau caudal Il-largeur

2,9

3,1

Anneau caudal IlI-longueur

4,0

4,5

Anneau caudal IlI-largeur

2,6

2,9

Anneau caudal IV-longueur

4,5

5,0

Anneau caudal IV-largeur

2,2

2,5

Anneau caudal V-longueur

6,5

6,7

Anneau caudal V-largeur

2,2

2,4

Anneau caudal V-hauteur

2,5

2,7

Telson-longueur

7,2

7,7

Vésicule-longueur

5,9

6.2

Vésicule-largeur

2,4

2,6

Vésicule-hauteur

2,9

3,0

Aiguillon-longueur

1,3

1,5

Pédipalpe-longueur totale

38,1

42.0

Fêmur-longueur

9,4

10,0

Fémur-largeur

3,6

4,2

Tibia-longueur

9,2

10,0

Tibia-largeur

5,1

5,9

Pince-longueur

19,5

22,0

Pince-largeur

7,4

8,2

Pincc-hauteur

4,2

4,9

Doigt mobile-longueur

11,1

11,9

Remarque: bien que les exemplaires types soient vraisemblablement des adultes,

il est possible de trouver dans la population étudiée des exemplaires bien plus grands.

430

SciELO

10 11 12 13 14 15 16

LOURENÇO, W. R. Compléments à la description du Scorpion brésilien Opiathacanthus cayaporum

Vellard, 1932 (Scorpiones- Scorpionidae). Mem. Inat. Butantan, 4í/45;425-438, 1980/81.

Figs. 6 à 8 — Holotype mâle. 5 — Peigne gaúche. 6 — Doigt mobile droit. 7 et 8 — Telotarse, 3è patte

droite.

431

2 3 4

5 SciELO ;lo 11 12 13 14 15

LOURENÇO, W. R. Compléments à la description du Scorpion brésilien Opiatkacanthus cayapoTum

Vellard, 1932 (Scorpiones* Scorpionidae). Mem. Inat. Butantan, ^4/-45;425-438, 1980/81.

Fififs. 9 à 16 — Tríchobothriotaxie (Holotype mâle), 9 — Pince gaúche, vue ventrale. 10 — Pince gaúche,

vue externe. 11 — Pince gaúche, vue dorsale. 12 — Pince gaúche, vue interne. 13 — Fémur

droit, vue dorsale. 14 — Tibia droit, vue dorsale. 15 — Tibia droit, vue externe. 16 — Tibia

droit, vue ventrale.

1 SciELO

432

LOURENÇO, W. R. Compléments à la description du Scorpion brcsilien Opinthacanthua cayaponim

Vellard, 1932 (Scorpiones* Scorpionidae). Mcm. Inst. Butantan, 4^/45:425-438. 1980/81.

VARIABILITÉ DU NOMBRE DE DENTS DES PEIGNES CHEZ

OPISTHA CANTH US CA YAPOR UM

Sigles utilisés: (Tableaux II-V).

nb = abréviation de nombre.

n = nombre de cas oú le caractère étudié existe.

% = pourcentage déterminé par le rapport n/N.

Ic = intervalle de confiance correspondant à un pourcentage de

fréquence à 95% de sécurité.

Fg = formule globale.

Remarques sur les caracteres portés dans les tableaux II à V:

Pour les tableaux II et IV bien qu’on puisse remarquer Texistence

d’un ou même deux cas de chevauchements des intervalles de confiance

obtenus avec les pourcentages des fréquences des différents nombres de

dénts, et cela entre les pourcentages les plus faibles, on peut admettre

Texistence d’un nombre-type, 6 pour les femelles et 9 pour les mâles

caractérisant les dents des peignes à’Opisthacanthus cayaporum. Cela

doit confirmer, bien que les pourcentages soient inférieurs à 90%, l’im-

possibilité d’une prédominance d’autres nombres que 6 pour les femelles

et 9 pour les mâles, dans tout échantillon pris au hasard dans cette même

population.

Pour les tableaux III et V, compte tenu des chevauchements existant

entre les intervalles de confiance obtenus avec les différents pourcentages

de fréquences, on ne peut pas pi’éciser une formule globale typique, soit

pour les femelles, soit pour les mâles. Bien que ces valeurs typiques

existent leur caractérisation sera possible uniquement après Tétude

d’un échantillon beaucoup plus grand que celui actuellement étudié.

Les deux sexes ont un nombre de dents différent; on remarque

rinexistence totale des cas de chevauchement. Les différentes valeurs

sont indiquées dans les tableaux II et IV et dans le graphique (fig. 19).

Le calcul des moyennes donne: 5,7 pour les femelles et 9,3 pour les mâ¬

les; le calcul des variances donne respectivement 0,32 et (—0,115). Le

test de comparaison des moyennes donne un coefficient t de Student de

73,47 assez significatif; les moyennes sont donc différentes sur le plan

statistique. Le graphique exprime cette différence. Un tel résultat nous

démontre donc que la distinction des sexes est parfaitement possible pour

O. cayaporum à partir du nombre de dents des peignes et cela à tous

les stades du développement.

TABLEAU 2

Variations du nombre de dents des peiprnes (femelles)

nb dents

Idp

3dp

4dp

5dp

6dp

7dp

1,2

2,4

25,0

64,3

5,9

0,03-

0,30-

16,18-

58,02-

1,97-

6,45

8,31

35,62

78,71

13,35

433

SciELO

10 11 12 13 14 15

TABLEAU 3

LOURENÇO, W. R. Compléments à la description du Scorpion brésilien Opisthacanfhua cayaporum

Vellard, 1932 (Scorpiones* Scorpionidae). Mem, Inst. Butantan, í/#A5;425-438, 1980/81.

434

Çk

íO

oí

ço

r-1

í>

oí

•M

tò

T—(

to*

T—1

líi

T*H

t-H

Tí<

rH M

Oí

1—1

lÓ

c<r

-ÍJ

pL,

v55

)—(

1 SciELO

LOURENÇO, W. R. Compléments à la description du Scorpion brésilien Opisthaeanthus cayaporum

Vellard, 1932 (Scorpiones* Scorpionidae). Mem. Inst. Butantan, ^^/45.’425-438, 1980/81.

1 m m

17 et 18 — Hémispermatophore gaúche (IB-971). 17 — Vue externe. 18 — Vue interne. PD = partie

distale. PC = partie centrale. PB = partie basale. P = pied.

435

SciELO

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LOURENÇO, W. R. Compléments à la description du Scorpion brésilien OpiHthacanthus cayaporuin

Vellard, 1932 (Scorpiones* Scorpionidae). Mcm. Inst. Butantan, 44/45:425-438, 1980/81.

Fig. 19

Distribution comparée des valeurs du nombre des dents des peignes, chez les mules et les

femelles d^Opisthacanthiia cayaporum. N."P = nonibre de peignes; N.^DP = nombre de dents

des peignes.

436

SciELO

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LOURENÇO, W. R. Compléments à la description du Scorpion brésilien Opisthacanthuft cayaporum

Vellard, 1932 (Scorpiones* Scorpionidae). Mcm. Inst. Dutantan, -J4/í5.'425-438, 1980/81.

TABLEAU 4

Variation du nombre de dents des peignes (mâles)

nb dents

8dp

9dp

lOdp

lldp

6,2

61,3

31,3

1,2

2,10-

49,70-

21,30-

0,03-

14,00

71,90

42,60

6,80

TABLEAU 6

Formules globales du nombre de dents des peignes (mâles)

Fg.

9-8

8-10 9-9

9-10 10-9

10-10

11-10

nb total

17dp

18dp

19dp

20dp

21dp

1 17

7 4

10,0

45,0

27,5

15,0

2,5

2,80-

29,30-

14,60-

5,70-

0,06-

23,70

61,40

43,90

29,80

13,10

REMERCIEMENTS

Nous remercions ici bien vivement Sylvia Lucas et Vera R.D. von

Eickstedt de Tlnstitut Butantan pour le prêt du matériel à’Opisthacanthus

cayaporum. M.Gaillard et J.Rebière pour la réalisation des dessins et

des photos. Annie Prieur pour la mise en forme du texte et M. le Pr.

M. Vachon pour la lecture critique de ce travail.

ABSTRACT: This paper is a contribution to the taxonomical

knowledge of Opisthacanthus cayaporum Vellard, 1932. This species

is redescribed based on the two type-specimens and also on 81 spe-

cimens collected in the states of Pará and Goiás in Brazil. The

variability of some characters as the number of teeth of the pectines

is analysed and disposed in tables. O. cayoporum shows a very

important sexual difference for this character, therefore, males

and females, even immature forms, can be distinguish through

this criterion.

KEY-WORDS: Opisthacanthus cayaporum Vellard, 1932; Scorpio¬

nidae.

437

SciELO

10 11 12 13 14 1

LOURENÇO, W. R. Compléments à la description du Scorpion brésilien Opisthacanthus cayaporum

Vellard, 1932 (Scorpiones- Scorpionidae). Mem. Inst. Butantan, ^4/45;425-438, 1980/81.

BIBLIOGRAPHIE CITÉE

1. LAMOTTE, M. Initiation aux méthodes statistiques en biologie. Paris, Masson

et Cie. Edit., 1971. 2 ème edit., 144 p.

2. MELLO-LEITÃO, C. Escorpiões sul-americanos. Arq. Mus. nac., .40:1-468, 1945.

3. VELLARD, J. Scorpions. In: Mission scientific au Goiaz et au Rio Araguaya,

Mém. zool. France, 29 (6) :539-556, 1932.

438

SciELO

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Mcm. Inst. Butantan

439-449, 1980/81

THE WITHANOLIDES AS A MODEL IN PLANT

GENETICS; CHEMISTRY, BIOSYNTHESIS AND

BIOLOGICAL ACTIVITY *

David LAVIE **

ABSTRACT: The withanolides are oxygenated steroidal lactones

occurring in a number of species of the Solanaceae plant family.

In Withania somnifera (L.) Dun., which has a fairly wide geo-

graphical distribution, several chemotypes have been identified. They

differ primarily in their respective composition in withanolides

displaying a variety of substitution patterns.

Through hybridization performed between different types originating

from various parts of the world, followed by Chemical analysis of

the constituents prescnt in the offsprings, genetic characters were

identified at the Chemical levei. Several hybrids were chemically

analysed and thereby a study of the inheritance characteristics of a

number of Chemical groups was made possible. Biosynthetic pathway

are suggested based on the occurrence of appropriate intermediates.

A summary of the biological activity is provided.

KEY-WORDS:

activity.

Withanolides: chemistry, biosynthesis, biological

INTRODUCTION

Withania somnifera (L.) Dun. is a shrub of the Solanaceae plant

family, with a fairly wide geographical distribution. In Israel it grows

at least as three distinct chemotypes differing in their leaf content of

the various withanolides, C-28 oxygenated steroidal lactones with various

substitution patterns. * Chemotypes are considered as groups of plants

which morphologically are similar in all respects, however, differ by their

Chemical constituents; in the present case through the composition of the

withanolides in the leaves, and the respective quantities.

In this paper we will discus the constituents of a number of che¬

motypes, describe some highlights of their structures, analyse and discuss

Presented at the Seminar on Bioactive Natural Products, Sáo Paulo, 20-22 May, 1981, in commemo-

ration of the 80th, Anniversary of the foundation of the InUtitute Butantan.

Department of Organic Chemistry — The Weizmann Institute of Science, Rehovot, Israel.

439

SciELO

10 11 12 13 14 15

LAVIE, D. The withanolides as a model in plant genetics: chemistry, biosynthesis and biological

activity. Mcm. Inst. Butantayi, 44/-Í5:439-449, 1980/81.

the composition and substitution pattern of the compounds formed in the

hybrids obtained by the cross pollination between different chemotypes.

This approach enabled an understanding of the inheritance at the

Chemical levei, and led to the disclosure of biosynthetic pathways. It

could provide a certain control of the formation of specific compounds in

the plant.

It is interesting to note that other genera of this family (Solanaceae)

as Physalis, Acnistus, Jaborosa, and Nicandra, also produced withano¬

lides and related structures which showed certain skeletal alterations. ^

A number of withanolides were found to have antineoplastic activity

and immunosuppressive properties. ®

RESULTS AND DISCUSSION

The compounds found in chemotype I have been described in an

earlier publication. ^ Withaferin A (1) is always the major product

which is formed, whereas the others, 2-5, are obtained in small quanti-

ties. Chart 1 shows some of the compounds present in this type. It could

be seen that OH groups are present in various positions of the carbon

skeleton, however, no such group could be found at position C-20 of the

side Chain. In rings A/B the 4^-OH, 5y8, 6j8-epoxy system is observed

in most compounds and is present in the product formed in the largest

quantity, withaferin A (1). This system is a predominant feature of

the compounds of this type. ®

The compounds identified in chemotype II (Chart 2) have all an

OH group at position C-20, a feature inherent to the compounds of this

group. ® Here again the 4/3-OH,5y8,6/3-epoxy system is present in most

cases. The compound which accumulates and is present in the largest

quantity is withanolide D (6). It forms 88% of the total withanolide

content of the leaves, whereas the others are formed by far in smaller

quantities.

In chemotype III several compounds have been isolated, some of

which are presented in Chart 3. *• ^ Two groups of compounds have been

identified, those having an isolated double bond in ring B, in addition

to the usual 2-en-l-one system of all the whithanolides; these compounds

in most cases have a 14a-OH group, recently identified in all of them"

together with the usual /3-oriented lactone side chain. The second group

is represented by withanolide E (13) in which the side chain is a-orien-

ted. *■ ® This inverted stereochemistry is a unique feature in a naturally

occurring steroid, and was found so far only in this group of compounds.

In all the products existing in chemotype Hl, no 4j8-OH has been detected.

Only in withanolide E (13) is an epoxide pi’esent at position 5,6 of ring B.

The above observations led to the idea that the formation of the

different compounds, with their inherent characteristics concerning the

substitution patterns, is pi'oduced by specific enzymatic reactions gene-

tically controlled. Therefore, it was interesting to see how genetic mani-

440

SciELO

10 11 12 13 14 15 16

LAVIE, D. The withanolides aa a model in plant prenetics: chemistry, biosynthesis and biological

activity. Mem. Inst. Butantan, 4-4/45:439-449, 1980/81.

Chart 1 Chennotype I

Chort 2 Chemotype n

441

2 3 4 5 6 SciELO ;lo 11 12 13 14 15

LAVIE, D. The withanolides as a model in plant penetics: chemistry, biosynthesis and biological

activity. Mem. Inst. Butantan, 4-4/45:439-449, 1980/81.

pulation by cross pollinations between the types, would act on the forma-

tion of the compounds in the offsprings. Analysis of the constituents of

the first generations (Fi) was carried out. ®

Chort 3 Chemotype m

The reciprocai crosses for example of chemotypes IxIII gave hybrids

which showed in the leaves a large accumulation of withanolide D {6).

The compound, however, was never detected in both parents, chemotypes

I or III, but it was the major constituent of chemotype II. The hybrid

which was formed was not identical with type II as it could be seen in

the finger-print of the chromatoplates for both plants; the set of spots

seen in each of the respective extracts not being identical throughout the

path of the plates. For example, a spot assigned to withanolide E {13)

was present in the hybrid and obviously inherited from chemotype III,

but was missing among the spots of chemotype II. Furthermore, witha-

ferin A (í), the major constituent of chemotype I could not be detected

in these offsprings, whereas the compound E {13) was present in much

smaller quantities than in the parent type III. Clearly, through the pool

of genes following the cross, different characters were combined, pro-

ducing new combinations of substituents in the products.

The cross of IxII produced again primarily withanolide D {6),

whereas IIxIII produced a mixture having the same compound D {6)

as predominant, together with compound E {13) (a side chain) being

present in this hybrid. The results clearly indicated that the enzymatic

Systems producing compound D {6) and involving the reactions intro-

ducing the 20-OH and the 4/3-OH,5/3,6;8-epoxy system were present, and

have to be dominant factors in the genetic pool.

442

SciELO

10 11 12 13 14 15 16

LAVIE, D. The withanolides as a model in plant jçenetics: chemistry, biosynthesis and biological

activity. Mem. Inst. Butantan, ^4/45:439-449, 1980/81.

In order to analyse in a better way and clarify these factors, the

second generation F 2 of the cross IxIII was studied. Some 45 seedlings of

this Fo generation were raised from seeds obtained from self pollinated

flowers, and were analysed separately for their constituents using rapid

methods of identification : chromatoplates for finger printing or small

chromatographic columns for purification of the components, applying

NMR and mass spectrometry for identification.

Substituents at various locations of the carbon skeleton were then

selected for detailed analysis and their presence in the molecules counted,

i.e. the count was done on the presence of a given substituent in the

major compounds found in each plant. The results are shown in Table 1

and are as follows: the presence of a 4jS-OH gi-oup is recorded in 30+6

cases against 5+4 times when an unsubstituted H atom will be present.

A 5/3, 6/3-epoxide will be present the same number of times against an

unreacted double bond (A'”’) again in 5+4 times. Each number referring

to a different compound present in the individual plants.

In position C-14 in 30+6 cases, an H will be present whereas in

5+4 cases an a-OH will be observed. For the 20-OH group the numbers

are 30+5 present against 6+4 absent, and at C-27 a hydroxy-group will

be present only in 6+4 cases against 30+5 times when the -CH;. group

will not be oxidized.

The relation between occurrence and absence of groupings in the

selected positions is 1:3.5 to 1:4, a relation fitting very well into the

genetic inheritance rules, and since we observe the products of enzymatic

reactions taking place in the cells which are controlled by genetic cha-

racters, one can refer to these characters as dominant or recessive while

being observed this time at the molecular levei. Therefore the introduction

of the 4/3-OH with a 5/3, 6^-epoxy system is a dominant character as is

the introduction of the 20-OH, whereas the 27-OH as well as the 14a;-OH

are due to recessive characters as indicated in Table 1.

TABLE 1

Occurrence of different groups in the F. generation of the cross of chemotypes

IxIII in 45 single plants

Number of cases

Characters

Position

Dominant

Recessive

4/3

6-6

epoxide

14cí

CH.

CH.OH

CH.

CH.OH

CH.

CH.OH

In our collection of W. somnifera plants grown in our experimental

plots, we had samples originating from índia, they were named Indian

I (Delhi) on the basis of the location from where the seeds were collected.

When analysed carefully, a large number of withanolides of the most va-

443

SciELO

10 11 12 13 14 15

LAVIE, D, The wíthanolides as a model in plant prenetics: chemistry, biosynthesis and biological

activity. Mcm. Inat. Butantav, ^4/45:439-449, 1980/81.

ried nature were isolated and identified Chart 4 shows some representa-

tive structures indicating that the outstanding feature in this chemotype is

the appearance of a different and characteristic substitution pattern in

rings A and B, namely the 5a-OH, 6», Ya-epoxy system as observed in

withanone * (14). This compound has also a Í7a-OH. Withaferin (1) was

also found to be present in this type in sizable quantities so that the plant

has the outstanding ability of producing concurrently the two systems in

rings A/B, the 5«-OH, 6«, 7a-epoxy, and the 4/3-OH, 5/3, 6^-epoxide.

Advantage was taken of this characteristic in our subsequent genetic

studies and cross-breedings. The most interesting feature inherent to this

plant was, however, the fact that at position C-20 in all compounds no OH

group was ever found to be present

Chart 4 Chemotype Indian I

Following the hybridization of Indian I by chemotype Hl offsprings

were obtained in which withanolide D (6) was formed replacing withafe¬

rin A (1) which disappeared from the mixture, i.e., a compound with a

20-OH, dominant character, instead of the recessive 27-OH. Furthermore,

a new “non natural” withanolide was produced, withanolide T (17), which

is a 20-OH withanone, a compound that the plant Indian I was unable

to prepare. Such a compound was the product of the new enzymatic

changes originating from the genetic pool of the hybrid

Recently the analysis of the cross of chemotypes Hl by Indian I was

repeated Also a study of the hybrid of chemotypes H by Indian I

was carried out Table 2 provides the compounds isolated from these

two Fi hybrids given in percent of the respective total withanolide con-

* Withanone is the name given to a compound isolated from plants collected in índia, and first identified

as compound IV in Ref. 10. This name is now adopted.

444

SciELO

10 11 12 13 14 15 16

LAVIE, D. The withanolides as a model in plant penetics: chemistry, biosynthesis and biological

activity. Mem. Inst. Butantan, 44/45:439-449, 1980/81.

TABLE 2

Withanolides given as percent relative

to their

total occurrence

Compound

Chemotypes

Hyb

r i d s

Ind.I * 10 II * <

III *6

II X Ind. I

III X Ind. I

Withanolide G (10)

3.9

1.0

8.0

Withanolide I

0.4

2.4

Withanolide J (12)

2.6

0.4

Withanolide U

Withanolide E (13)

Withaferin A (1)

33.4

91.9

2.4

Withanolide D (6)

88.0

62.0

49.4

14-Hydroxy-20-

desoxywithanolide D

0.9

27-Hydroxy-

withanolide D (9)

10.7

2.6

Withanone (14)

68.0

18.6

16.7

20-Hydroxy-17-

desoxywithanone (18)

3.6

6.3

Withanolide T (17)

8.3

9.6

14a-Hydroxy

withanone

0.3

14j3-Hydroxy

withanone

4.1

2.1

6,7-Desoxy

withanone (15)

0.9

* The values are computed on the basis of the reported data.

tent. The data of the relevant parents are also incorporated. Table 3

provides the combined quantitative occurrence of each substituent in

relation as percent of the total withanolide content, each being treated

as a separate item.

TABLE 3

Calculated occurrence in percent of each substitution in relation to the

total withanolide content

Substituents

III (Isr.) X Ind. I

III (Isr.)

Indian I

II (Isr.)

II (Isr.) X Ind.I

4/3-OH

—

6/3,6;8-Epoxide

20-OH

100

—

14a-OH

17a-OH

0.6

From the cross breedings described above, we know that three

substituents are introduced due to dominant factors, those are the

20o:p-OH, the 4/3-OH and the 5^, 6/3-epoxide. One can see that if theore-

tically each of these substituents should occur as 75% of the mixture,

due to the dominant character, for the first (in II by Indian I), we have

445

SciELO

10 11 12 13 14 15

LAVIE, D. The withanolides as a model in plant genctics: chemistry, biosynthesis and biological

activity. Mem. Inst. Butantan, í4/'í5:439-449, 1980/81.

recorded 78%, for the second 51%' and for the third 49%. The lower

values for the last two positions are due to the fact that there is in this

case a competition with other enzymes, those producing the 5a-OH and

6a, 7a-epoxide, characteristic of the withanone system (14) present in the

Indian I chemotype. The 14a-OH and 17a-OH are both due to recessive

characters and instead of the expected 25% the observed quantities are

13% for the former and 27% for the latter. The lower value of 13%

may be attributed to some interference by the 17a-OH. Also some 14a-OH

may have been converted to 14/3-OH derivatives through formation of a

A*'* followed by reoxidation as described earlier.

Concerning the hybrid II by Indian I, similar conclusions can be

drawn. The 20-OH appeared in 77%, the 4/3-OH and 5/8, 6/3-epoxide in

64% each, again in lower values due to competition with the withano-

me (14) rings A/B system. The 14a-OH is missing, or occurring in trace

quantities in the two parents and so in their hybrid (1%), whereas the

17a-OH is present in a normal levei 31%.

Analysis of a hybrid derived from the cross of chemotype II (Chart 2)

with a type originating from South África, Chart 6, grown in our plots,

indicated that the dominant characters present in both parent, namely

4/3-OH and 5/3, 6/3-epoxide prevailed (100%). Concerning the 20-OH

group present only to the extent of 10% in the African parent, it must

be due to a different enzyme than the one encountered in all other cases,

and known to bè connected with a dominant character. Indeed, following

the cross with chemotype II, 95% of this group was produced in the

compounds.

The double bond reducing capacity (specific to this type) which was

present in the South African parent'® to a small extent, 5.8% for the

24,25-dihydro compounds (20, 21) should be considered as a recessive

character. Following cross with chemotype II it reached the expected

levei of 27.5%. Interestingly, this character expressed itself also by

reducing the 2,3-double bond only in the hybrids and to the extent of

22.4% (Table4).

Table 4 provides the occurrence in percent of various substitutions in

chemotypes II (Israel) and the South African, and in the product of

their cross; it sums up some of the remarks provided above.

TABLE 4

Calculated occurrence in percent of substituents in W. somnifera chemotypes South

African, II (Isr.) and their cross

Substituents

South African (%)

II (Israel) (%)

Cross (%)

4/3-OH

100

99.6

100

A®

—

0.3

—

6/3, 6/3-Epoxide

100

99.6

100

20ar-OH

10.5

99.0

96.0

24,25-Dihydro

6.8

—

27.6

2,3-Dihydro

—

22.4

2-Ene-l,4-dione

—

2.8

446

SciELO

10 11 12 13 14 15 16

LAVIE, D. The withanolides as a model in plant íjenetics: chemistry, biosynthesis and biological

activity. Mem. Inat. Butantan, ^í/^5:439-449, 1980/81.

Chart 5 Hybnd of Indion I Dy ChemoType II

Chart 6 South Afncan Chemotype

447

2 3 4 5 6 SciELO ;lo 11 12 13 14 15

LAVIE, D. The withanolides as a model in plant penetics: chemistry, biosynthcsis and bioloe:ical

activity. Mcm. Inst. Butantan, 4'4/45:439-449, 1980/81.

BIOLOGICAL ACTIVITY

Withaferin A (1) was found to be active on a number of tumor

Systems in mice It will also produce mitotic arrest in the metaphase of

the tumor system In experiments wilh Ehrlich ascites in which the

tumor growth had disappeared, the mice were resistant to rechallenge

with the ascitic tumor cells. Such a behaviour was explained as a com-

bined effect of the compound (1) and an immune response

Withanolide E (13) has been tested on several tumor systems used

in câncer chemotherapy screening, and a number have responded with

this compound. P388 leukemia bearing mice survived by 48% to the

Controls, but it was most active on B-16 mouse melanoma (70%) and

Lewis lung carcinoma (unpublished results).

The immunosuppressive effects of the two compounds (1) and (13)

were tested on a number of systems Four tests were perforrhed with

human T and B lymphocytes since the main interest was the mode of

action of these compounds on the human immune system. Both compounds

showed an effect on E and Ca human lymphocytes receptors, withanolide

E (13) affecting more the human lymphocyte E receptor (T cells), while

withaferin A (1) had a stronger action on Cs receptors (B cells).

The inhibitory effects of both compounds on the local graft versus

host reaction demonstrate that they had also an effect on the functional

activity of T cells, again withanolide E showing a stronger action than

withaferin AI Further studies are under course.

ACKNOWLEDCEMENT

We thank Mr. Albert Bildner, São Paulo and New York, whose

financial assistance enabled the presentation of this research work in

São Paulo, and the “Serviço de Química Orgânica” of the Instituto Butan¬

tan, which sponsored this lecture.

RESUMO: Os withanolídeos são lactonas esteroídicas que ocorrem

em espécime da família das Solanaceas. Diversos quimiotipos foram

identificados em Withania somnifera (L.) Dun., espécie de ampla

distribuição geográfica e apresentam diferenças principalmente nas

suas respectivas composições em withanolídeos que possuem uma

variedade de substituintes. Através' de hibridização efetuada entre

tipos diferentes oriundos de várias áreas do globo, seguida por

análises químicas dos componentes presentes nas mudas, conseguiu-

-se evidenciar as características genéticas ao nível químico. Assim

sendo, diversos híbridos foram quimicamente analisados, tornando

possível um estudo dos caracteres de transmissão genética dos grupos

químicos. Vias biossintéticas são sugeridas com base na presença

dos intermediários apropriados. Um resumo das atividades bioló¬

gicas é apresentado.

UNITERMOS: Withanolides, Withania somnifera, Solanaceae,

lactonas esteroídicas, fitogenética.

UNITERMS: Withanolides, Withania somnifera, Solanaceae, ste-

roidal lactones, plant genetics.

448

SciELO

10 11 12 13 14 15 16

LAVIE, D. The withanolides as a model in plant prenetics: chemistry, biosynthesis and biological

activity. Mem. Inst. Butantan, 4-í/-45:439-449, 1980/81.

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occurring steroidal lactone with a 17 a-oriented sido chain. Structure of

withanolide E and related compounds. J. Chem. Soe. Perkin Trans. I, 341,

1977.

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Witha7iia somnifera Dun. — Part XII The withanolides of an Indian

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group on a withanolide skeleton; X-Ray crystal and molecular structure

of 14 /l-hydroxywithanone. Chem. Commun., 178, 1981.

14. EASTWOOD, F.W.; KIRSON, I.; LAVIE, D. & ABRAHAM, A. New witha¬

nolides from a cross of a South African chemotype by chemotype II (Israel)

in Withania somnifera L. (Dun.), Phytochemistry, 19:1603, 1980.

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Withania somnifera Dun. — XI. The structure of three new withanolides,

Tetrahedron, 26:2209, 1970.

16. SHOHAT, B.; GITTER, S. & LAVIE, D. Effect of withaferin A on Ehrlich

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17. SHOHAT, B., Effect of Withaferin A on cells in tissue culture. Z. Krehsforsch.,

80:97, 1973.

18. SHOHAT, B.; BEN-BASSAT, M.; SHALTIEL, A. & JOSHUA, H. The

effect of Withaferin A on human peripheral blood lymphocytes: an electron-

-microscope study. Câncer letters, 2:63, 1976.

449

SciELO

10 11 12 13 14 15

Mcm. Inst. Butantan

^^/45;461-462, 1980/81

STUDIES OF BRAZILIAN MARINE INVERTEBRATES.

IX COMPARATIVE STUDY OF ZOANTHID STEROLS 1.

THE GENUS ZOANTHUS

A. KELECOM **

A.M. SOLÉ CAVA

ABSTRACT: The sterol composition of two Zoanthus species

has been analysed and compared with literature data. The new

marine sterol zoanthosterol (4a-methyl-5a-ergosta-24(28)-en-3/3-

ol) has been obtained from Z. sociatus. Biological implications

are discussed.

KEYWORDS: Zoanthids *, Zoanthus species, Zoanthus socia¬

tus, sterol composition *, cholesterol, chalinasterol, brassicasterol,

zoanthosterol *, zooxanthella.

INTRODUCTION

The increased interest in marine sterols has led to the identification,

during the last 15 years, of a number of new structures obtained prin-

cipally from Molluscs, Echinoderms, Poriferas and Coelenterates mostly

of the class Anthozoa, i.e. Octocorallia and Hexacorallia (15). Whilst

Octocorals (soft corais and sea fans) have been intensively investigated

yielding more than 40 new sterols (15), little attention has been payed,

in comparison, to sterols from Hexacorals (hermatypic corais, sea ane-

mones and zoanthids) (8). This is not surprising for corais and sea

anemones for which a generous part of the wet weight is inorganic

matter (corais) or water (some sea anemones). In contrast, zoanthids

yield large proportions of extractable organic material. Even so, zoanthid

sterols have been much less studied than the coral or sea anemone

ones (8). The rather confused biological systematics of Zoanthids, at

species levei, is probably responsible, in part, for this situation (10, 19).

Indeed, after CARLGREN (7), “everyone examining the Zoantharia

has learnt how difficult it is to determine the members of this group

of Anthozoans”.

Presented at the Seminar on Bioactive Natural Products, São Paulo, 20-22 May, 1981. Previous paper

in this series, see reference 12.

Laboratórios Silva Araújo Roussel S.A. — Unidade de Pesquisas — Rua do Rocha, 165 —

CEP 20960 — Rio de Janeiro-RJ — BRASIL.

451

SciELO

10 11 12 13 14 15

KELECOM, A. & SOLÉ CAVA, A. M. Studies of brazilian marine invertebrates. IX*. Comparativa

study of Zoanthid sterols 1. The gcnus Zoanthus. Mem. Inst. Butantan, ^^/45:451-462, 1980/81.

The order Zoanthidea is composed of three families and eleven

genera for a total of about 260-270 different species (see Table 1).

The family Zoanthidae is the mai i one and is restricted to tropical seas

(10). From the 39 species recorded for the West Indies and for the

Atlantic coast of South America, 29 belong to the family Zoanthidae;

among them, 10 are of the genus ZoantJvus and 13 (or 18*) of the genus

Palythoa. This comparative study will be restricted to species of the

family Zoanthidae.

The present work deals with the sterol composition of two Brazilian

zoanthids of the genus Zoanthus. In the second paper of this series we

will consider the genus Palythoa. Comparison with literature data and

biological implications are discussed.

TABLE 1

The order ZOANTHIDEA after HERBERTS and WALSH (10, 19)

FAMILY

Genus

known

species

West Indies

South America

Isaurus Gray

Zoanthidae

Spenopus Steenstrup

Zoanthus Lamarck

^ 64%

Palythoa Lamouroux

Gemmaria Duch. & Mich.l

10_^

Protopalythoa Verrill J

Epizoanthidae

Epizoanthus Gray

53 '

. 21%

Thoracaetis Gravier

Gerardia Bertholani

Parazoanthidae

Isozoanthus Carlgren

L 15%

Parazoanthus Haddon &

Shackleton

25_,

MATERIAL AND METHODS

Equipment: melting points were determined on a BUCHI SMP-20

apparatus and are uncorrected. Optical rotations were measured on a

PERKIN-ELMER 241 polarimeter at 25.° in CHCl.i. Low resolution

mass spectra were determined on a MICROMASS MM12F instrument.

IR spectra were recorded in CHCI 3 Solutions with a PERKIN-ELMER

735B spectrophotometer. GC analysis were performed on a VARIAN

2440 apparatus equipped with a FID- system and on a 3% OV-17 on

VARAPORT 30 column (7’xl/8”) operating in isotherm mode at 285.°.

Retention times are expressed relatively to cholesterol. Column chroma-

tographies were carried out on E. MERCK Kieselgel 60 (70-230 mesh).

Analy tical and preparative thin layer chromatographies (tlc) were car¬

ried out on E. MERCK Kieselgel 60 F254 ready-to-use plates, the

• It is uncertain whether the genera Gemmaria and Protopalythoa are different from one another and

whether they should be included into the genus Palythoa (19).

452

1 SciELO

KELECOM, 4. & SOLÉ CAVA, A. M. Studies of brazilian marine invertebrates. IX*. Comparativo

study of Zoanthid sterols 1. The genus Zoanthus. Mem. Inst. Butantan, 44/-45:451-462, 1980/81.

chromatograms being revealed by spraying a 3% ethanolic solution of

phosphomolybdic acid followed by heating at 150°.

Animais: fresh polyps of Zoanthus sociatus (Ellis, 1767) (Hexa-

corallia, Zoanthidea) and of an unidentified Zoanthus species were

collected, on rocky bottom, along the coast of the state of Rio de Janeiro.

They were preserved in 70% EtOH until work up. Data about the

collection appear in Table 2.

TABLE 2

The ZoanthiLs collection

Animal

Local

Date

Depth

Yield %

extract

Zoanthus sp

Ilha Grande

15-03-80

1 — 2 m

18.3

Z. sociatus

Cabo Frio

29-05-80

0 — 1 m

10.5

Zoanthus sp:

as sterile colonies

Z. sociatus: as sterile or hermaphrodite colonies

Extraction: the aqueous ethanol in which the animais were pre¬

served was filtered off, and the animais extracted several times with

ethanol until a colorless extract was obtained. The polyps were then

extracted with methylene chloride. The organic extracts were combined

and evaporated under reduced pressure. Water was eliminated by azeo-

tropic distillation with benzene. The extract was then triturated in

methylene chloride to eliminate inorganic matter. Evaporation of the

solvent afforded a methylene chloride residue from which the sterol

fraction was isolated.

Obtention of the sterol mixtures — Isolation of the sterols:

a) The obtention, from Zoanthus sociatus, of the free monohydroxy

sterol mixture and the separation of the sterols as their acetyl derivativos

have been described earlier (12). The physico-chemical data of compounds

Z-1 Z-2 and Z-3 (see figure 1.=^) have been reported for the acetyl

derivatives in cited reference.

b) Identical techniques have been used in the case of the uniden¬

tified Zoanthus species.

M'? of the sterol mixture from Zoatithus sp: molecular ion at m/e

= 414 (2 C..«HooO) - 400 (7, C 2 sH 4 bO) - 398 (42, C.sH^cO) - 386

( 99 , r H .Oi and 384 ( 8 , C-. 7 H 440 ) ; characteristic fragment ions at m/e

= 399 (13 414 - CH.), 396 (1, 414 - H.Q), 385 (4, 400 - CH 3 ),

383 (6 398 CH-i), 382 (2.5, 400 — H 2 O), 381 (2, 414 — CH.-s, HoO),

So Í 4 398 - H.Ò , 371 ( 8 , 386 — CH 3 ), 369 (4, 383 - CH 3 ), 368

(11 Se - H 30),'367 (2, 400 - CH 3 , H 3 O), 365 (4, 398 - CH 3 , H^O),

355 (3 5) 353 (8, 386 - CH 3 , H 3 O), 351 (1, 384 - CH 3 , H.O), 336

i 7 i ÍIS 398 — C 6 H 12 , i.e. Mac Lafferty rearrangement from a

doublebond), 300 (28), 299 (7, 314 - CH 3 ), 296 (2, 314 - H^O),

275 (13), 273 (17), 271 (30), 255 (42), 213 (22), ...

453

SciELO

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KELECOM, a. & SOLÉ CAVA, A. M. Studies of brazilian marine invertebrátes. IX*. Comparativo

study of Zoanthid sterols 1. The grenus Zoanthua. Mem. Inst. Butantan, ^4Ãj5:451-462, 1980/81.

The GC trace is described in the text (Figure l.b. and Table 3).

From 41 mg of the steryl acetate mixture of Zoantlnis sp (obtained

in the usual condi ti ons), we isolated as described earlier ( 12 ), five

fractions: S-1 (2 mg), a mixture of S-l/S-2 and S-3 (10 mg), S-4

(15 mg), S-5 (4 mg) and S -6 (5 mg).

S -1 (as the acetate) : BET = 1.00, 83% pure by GC, co-chroma-

tographs with an authentic sample of acetyl-cholesterol; MS : M +—

60 = 368, 353 (368 - CH.,),...

S-1 / S-£ / S-3 (as the acetates) : RRT = 1.00 / 1.25 and 1.46

respectively, relative proportions of 73 / 17 and 10% ; S-1 co-chroma-

tographs with acetyl-cholesterol and S-2 with an authentic sample of

(24S)-24-methylcholesterol (IV with the methyl /3 oriented). MS of

the mixture : M,+- 60 = 368 (S-1), M 2 +- 60 382 (S-2) and

M 3 +- 60 = 396 (S-3).

S-4 (as the acetate) : RRT = 1.12, over 94% pure, co-chromato-

graphs with an authentic sample of brassicasteryl acetate ; m.p. :

150.5-152.0° (lit. 152°, ref 9) ; Md = -55.9° (c = 1.12 in CHCl,)

(lit. -62.2°, ref. 9) ; MS : M +- 60 = 380 (32, CsoH.sO-. - AcOH),

365 ( 6 , 380 - CU,), 337 ( 6 , 380 - C-tH,), 296 (2), 282 (5), 267 (3),

255 (37, 380 — side chain), 253 ( 8 , 380 — side chain + 2H), 239 (3),

228 ( 6 ), 213 (10, 380 - side chain and 42) ; IR : 1720, 1255. 1035

and 980 cm~b

S-5 (as the acetate) : RRT = 0.96, over 96% pure, co-chromato-

graphs with and authentic sample of 22(E)-22-dehydrocholesteryl ace¬

tate; MS : M +— 60 = 366 (17, C 29 H 4 fl 02 — AcOH), 351 (2.5, 366 —

CH 3 ), 323 (1, 366 — C 3 H 7 ), (295 (IK 255 (15, 366 — side chain),

253 (2.5, 366 - side chain 2H), 228 (2), 213 (4, 366 — side chain

and 42).

TABLE 3

GC analysis of free sterol mixtures from some Zoanthus spp

RRT

SAMPLE 0.66

0.96 1.00

1.12

1.25

1.27

1.39

1.46

1.64

C (28)

Z. soc. t

— 3

—

— 87

—

Z. sp —

—

Z. pag. * —

— 19

—

Z. prot. ** —

— —

—

— 100

—

100

Z. soc. (Al)§ —

t 35

—

— —

—

Z. soc. = Z. sociatiis; Z. pac. = Z. pacificus; Z. prot. = Z. proteus; (Al) = alga

* after GUPTA & SCHEUER Steroids 75:343 (1969)

** after BERGMANN et al. J. Org. Chem, 76:1337 (1951)

§ after KOKKE et al. Tet. Letters 3601 (1979)

454

SciELO

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KELECOM, A. & SOLÉ CAVA, A. M. Studies of brazilian marine invertebrates. IX*. Comparativo

study of Zoanthid sterols 1. The genus Zoanthus. Mem. Inst. Butantan, 4-4/-í5:451-462, 1980/81.

S-6 (as the acetate) : RRT = 1.27, over 99% pure, co-chromato-

graphs with an authentic sample of chalinasteryl acetate ; MS : M +—

60 = 380 (27, C30H48O2 - AcOH), 365 ( 8 , 380 - CH 3 ), 296 (15, 380

— CoHio, i.e. Mac Lafferty rearrangement of a double bond),

281 (296 - CH-i), 272 (2), 259 (5), 255 ( 6 , 380 - side chain), 253

(9, 380 - side chain + 2H), 228 (5), 213 (10) ; IR : 1720, 1640, 1260

and 895 cm-^.

RESULTS

The GC traces of the sterol mixtures from the two Zoanthus species

are compared in Figure 1 with the one reported for Zoanthus confertus

(now named Z. pacificus Walsh & Bowers 1971 (20) ). Calculated data

appear in Table 3, where retention times are relative to cholesterol and

where compositions (%) are deduced from the area of the GC peaks.

The three major sterols produced by Z. sociatus were isolated and

identified as cholesterol (Z-1, I), chalinasterol (or 24-methylenecholeste-

rol, Z-2, V) and zoanthosterol (4a-methyl-5a-ergosta-24(28)-en-3y8-ol,

Z- 3 , XI) by gas chromatographic, physico-chemical and spectroscopic

data ( 12 ).

GC analysis of the sterol mixture obtained from the unidentified

Zoanthus species (Fig. l.b.) showed it to be more complex than that

of Z. sociatus. The MS of the sterol fraction displayed at least five

molecular ions at m/e = 414, 400, 398, 386 and 384. The characteristic

fragment ion at m/e = 314 was indicative of the presence of a sterol

with an exomethylene group at C-24 (Mac Lafferty rearrangement of

a ^ 24 ( 28 ) double bond) (9). Separation of the sterols, as their acetates,

by argentic silica gel column chromatography, afforded four steryí

acetates over 92% pure (by GC) and a mixture of three steryl acetates.

The retention times relative to cholesteryl acetate were : 1.00 (S-1,

2 mg), 1.00-1.25-1.46 (S-1, S-2 and S-3, 10 mg), 1.12 (S-4, 15 mg),

0.96 (S-5, 4 mg) and 1.27 (S- 6 , 5 mg).

S-1 was identified as cholesteryl acetate with which it co-chromato-

graphs in GC, on the basis of its retention time (GC) and of its MS

identical with that of an authentic sample.

S-2 and S-3 were tentatively identified as 24|-methyl and 24|-ethyl-

cholesteryl acetates by their RRT identical with published data obtained

in similar operating conditions (14). The MS of the mixture S-1/S-2/S-3

showed fragmentations (M + - 60) at m/e = 368 {i.e. parent sterol

C 27 H 4 ÜO), 382 (i.e. parent sterol C 2 SH 4 RO) and 396 (i.e. parent sterol

Co 9 Hr,oO)’ which were in perfect agreement with our assumption. The

abLnce of molecular ions strongly suggested a S/B-OAc-A^ moiety (17).

That the extra-carbon(s) of S-2 and S-3 were located in the side chain

carne from their MS showing fragment ions corresponding to the tetra-

cyclic nucleus at the same m/e ratios as in cholesteryl acetate. In addition,

S-2 co-chromatographed with an authentic sample of 22,23-dihydrobrassi-

casteryl acetate (IV with the methyl /3 oriented), suggesting the extra-

-carbon of S-2 to be located at C-24, the biogenetic favoured position.

455

SciELO

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KELECOM, A. & SOLÉ CAVA, A. M. Studies of brazilian marine invertebrates. IX*. Comparative

study of Zoanthid sterola 1. The grenus Zoanthus. Mcm. Inat. líutantan, 44/^5:451-462, 1980/81.

I. a. Z. sociatus I. b. Zoanthus sp I. c. Z. pacificus^

Fig. 1 — GC traces of sterol mixtures from Zoanihua spp *.

• after GUPTA e SCHEUER (9): reconstructed; in the original paper the zoanthid Is named Z. con^

fertua

456

2 3

SciELO

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KELECOM, A. & SOLÉ CAVA, A. M. Studies of brazilian marine invertebrates. IX*. Comparativa

study of Zoanthid sterols 1. The genus Zoanthua. Mcm. Inst. Butantan, 4i/-J5:451-462, 1980/81.

c\j

ifi

p. 2 Sterol structures; Distribution of sterols in Zoanthus spp. 1 = Z. aociatus; 2 — Zoanthua sp:

*■ . _ 2'. pacijicua; 4 = Z. proteua; 6 = symbiotic alga of Z. aociatua.

457

5 6 SciELO ;lo 11 12 13 14 15

KELECOM, A. & SOLÉ CAVA, A. M. Studiea of brazilian marine invertebrates. IX*. Comparativo

study of Zoanthid sterois 1.^ The genus Zoanthus. Mem. Inst. BtUantan, 44/-45:451-462, 1980/81.

S-4 was identical with brassicasteryl acetate (9) by m.p., [a] d, IR,

MS and GC (RRT and co-injection with an authentic sample).

S-5 was found identical with 22(E)-22-dehydrocholesteryl acetate

by MS and GC (RRT and co-injection with an authentic sample).

S-6 was identified with chalinasteiyl acetate (24-methylenecholes-

teryl acetate) by MS, IR and GC (RRT and co-injection with an authentic

sample).

DISCUSSION

Although our knowledge on zoanthid sterois of the genus Zoanthus

is restricted to only two published papers (5, 9) dealing with two species,

some general conclusions appear.

1. Cas-sterols are the major sterois of Zoanthus species as they are

of the class Anthozoa in general (11).

2. All the Zoanthus species studied up to now contain chalinasterol

(V). It is the sole sterol of Z. proteus, the major one of Z. sociatus and

a minor component of. Z. pacificus and of the unidentified Zoanthus

species.

3 . Cholesterol (I), a typical animal sterol, and brassicasterol (III),

widely distributed in marine invertebrates (8), seem to be common sterois

in Zoanthus species.

4 . As Z. proteus is now considered synonimous with Z. sociatus

(19), it is possible that the presence of small amounts of cholesterol (I)

and zoanthosterol (XI) in the sterol fraction isolated by BERGMANN

et al. (5) could not be detected by these authors due to the low perfor¬

mance analytical techniques existing prior to 1960.

5 . The sterol composition of the unidentified Zoanthus species was

found quite similar to that reported by GUPTA & SCHEUER (9) for

Z. pacihcus with, in addition to the reported cholesterol (I), brassicas¬

terol (III), chalinasterol (V) and 24|-methylcholesterol (IVL the common

(8) marine sterol 22(E)-22-dehydrocholesterol (II) and probably 24|

-ethylcholesterol (VI). Considering the biosynthetic pathway shown in Fig.

3, the presence of brassicasterol (III) together with S-2 and S-3 allows

us to suggest for the two latter sterois absolute configuration “24S”, i.e.

the alkyl at C-24 is probably /3.

6 . Z. sociatus was found to contain the rare zoanthosterol (XI),

a new 4a-methyl-5a-stanol (12). Sterois containing a 4a-methyl-5a-stanol

moiety have been obtained from various marine organisms including a

red alga (4), a sea star (18) and an alcyonarian (6) but are most

frequently encountered in free living dinoflagellates (1, 2, 3, 21 and 22).

As zoanthids contain large amounts of symbiotic dinoflagellate algae

known as zooxanthellae, it is tempting to speculate about the algal origin

of zoanthosterol (XI). Indeed, the cultured alga isolated from the Jamai-

can Z. sociatus furnished, together with the A’’’ sterois I and II, a series

of 4c(-methyl-5a-stanols (VII, VIII, IX, X, and XII) (13). But when

about 96% of the sterol mixture of the Brazilian Z. sociatus is composed

of sterois with a A"^'***' double bond, such compounds are completely

459

SciELO

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KELECOM, A. & SOLÉ CAVA, A. M. Studiea of brazilian marine invertebrates. IX*. Comparativo

study of Zoanthid sterols 1. The genus Zoanthus. Mem. Inat. Butantan, 44/'*5:A5l~AB2, 1980/81.

absent from the sterol fraction produced by the cultured alga of the Ja-

maican zoanthid (13). As we already pointed out (12), this may indicate

biotransformations by the zoanthid of an algal precursor, a modification

of the algal metabolism when separated from the zoanthid host or differ-

ent geographic strains of symbiotic algae. Such local variations have been

reported (16) for the symbiotic algae isolated from the zoanthids

Palythoa mammilosa and Protopalythoa grandis, both collected in the

Bermudas and in Jamaica.

7. The fact that only Z. sociatus contains 4a-methyl stanols, pro-

bably of algal origin, raises intriguing biological questions concerning the

associated zooxanthella. From the four Zoanthus species investigated by

SCHOENBERG & TRENCH (16), i.e. Z. dubius, Z. pulchellus, Z. sociatus

and Z. sp, only Z. sociatus yielded a viable culture of the zooxanthella

Symbiodinntm microadriaticum, which furnished sterols VII, VIII,

IX, X and XII (13). Biological and/or Chemical comparison of this

associated alga with the cultured zooxanthella from another Zoanthus

species is thus presently impossible. But it was observed that the strain

of zooxanthella isolated from Z. sociatus showed very low affinity with

the associated algae of any other marine invertebrate, even with symbio¬

tic algae strains obtained from zoanthids of the genera Palythoa and

Protopalythoa (16). Whether this observation might explain the occur-

rence of 4a-methyl-5a-stanols only in Z. sociatus and in its associated sym¬

biotic alga is still questionable.

ACKNOWLEDGEMENTS

We are gratefull to Prof. P.M. BAKER (Núcleo de Pesquisas de Pro¬

dutos Naturais, Universidade Federal do Rio de Janeiro, BRAZIL) for

recording the mass spectra, to Prof. B. TURSCH (Collectif de Bio-écolo-

gie, Université Libre de Bruxelles, BELGIUM) and Prof. R.K. TRENCH

(Marine Science Institute, University of Califórnia, Santa Barbara, CA,

USA) for helpfull discussions about some aspects of the symbiosis between

zoanthids and algae, and to the Conselho Nacional de Desenvolvimento

Cientifico e Tecnológico (CNPq).

RESUMO: Estudos de Invertebrados Brasileiros do Mar. IX.

Estudo Comparativo de Esteróis de Zoantídeos 1. O gênero

Zoanthus. A composição em esteróis de duas espécies de Zoanthus

foi analisada e comparada com resultados da literatura Zoanthos-

terol (4a-metila-5Q;-ergosta-24(28)-eno-3)3-ol), um novo esterol do

mar, foi obtido a partir de Z. sociatus. Implicações biológicas são

discutidas.

PALAVRAS-CHAVE: zoantídeos *, Zoanthus sp, Zoanthus sociatus,

composição em esteróis *, colesterol, chalinasterol, brassicasterol,

zoanthosterol *, zooxantela.

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462

SciELO

10 11 12 13 14 15 16

Mem. Inst. Butantan

H/iSMi-i&i, 1980/81

ÍNDICE DE AUTOR/AUTHOR INDEX

AMARAL, A.G.

119

ARAÚJO, P.

383

ARTIGAS, P.T.

383

ASSIS, J.L.

213

AVILA, S.C.

299

BANCHER, W.

271

BELLUOMINI, H.E.

133, 245, 391

BIANCHI, A.

119

BORBA, H.L.

355

CALAZANS, S.C.

325

D’ANDREA, M.L.

119

DE LORENZO, J.L.

281

DENARO-MACHADO, L.

119

DOBBIN JR., J.E.

355

DINIZ, L.S.M.

133

EICKSTEDT, V.R.D. von

161, 171, 181

ESTEVES, M.L

119

FREITAS, J.C.

191

FURLANETTO, R.S.

325

FURUTA, J.A.

335

GASPARINI, A.L.C.

127

HAAD, J.S.

403

HEITZMANN-FONTENELLE, T.J.

343

HIGASHI, H.G.

307

HOGE, A.R.

IIZUKA, H.

245, 253, 259, 307, 335

KELECOM, A.

451

463

INDICK DE AUTOR/AUTHOR INDEX

LAVIE, D.

439

LEINZ, F.F.

335

LIBERMAN, C.

335

LIZASO, N.M.

377

LOURENÇO, W.R.

181, 425

LUCAS, S.

153, 157

MACHADO, J.C.

3, 119, 127

MACHADO, T.C.

127

MARCHIORI, P.E.

213

MORAES, R.H.P.

367

NAVAS, J.

253

NÓBREGA, J.P.S.

213

OLIVEIRA, E.P.T.

307, 335

OLIVEIRA, J.L.

PIOTO, H.M.

271

RABENHORST, E.

317

REGO, A.A.

219, 233, 239

ROLIM ROSA, R.

245, 253, 259, 271, 281, 289, 299, 307, 335

ROMANO HOGE, S.A.

ROSENBERG, S.

213

SALIBA, A.M.

133

SCAFF, M.

213

SILES VILLARROEL, M.

245, 253, 259, 271, 281, 289, 299

SILVA, M.A.

307

SIRACUSA, Y.Q.

259

SOLÉ CAVA, A.M.

451

TRAVASSOS F.°, L.P.

355, 367

VEIGA, R.M.O.

355

VEINERT, T.

391

VIEIRA, E.G.J.

253, 259, 289, 299

ZELANTE, F.

271, 281, 289, 299

ZELNIK, R.

317

464

Mem. Inst. Butantan

5:465-470, 1980/81

ÍNDICE DE ASSUNTOS

Acanthoscurria ferina Simon, 1892

sinonímia : 153

Acarina: Ophioptidae : 377

Ácaros, sistemática : 377

Acidentes ofídicos, síndromes ; 403

Adjuvante de Freund

na hiperimunização de eqüídeos : 259

Agkistrodontini : 81

Animais em cativeiro, patologia : 133

Anatoxina diftérica : 335

Anfíbios, parasitas : 383

Antitoxina

diftérica : 335

tetânica, produção : 325

Antivenenos

aracnídico polivalente ; 253

crotálico : 245

titulação, em camundongos : 271

elapídico

neutralização cruzada : 289

titulação, em camundongos : 289

escorpiônico, doseamento : 299

laquético

titulação, em camundongos : 281

Aranhas

acidente loxoscélico : 213

sistemática : 153, 157, 161, 171

venenos e antivenenos : 253

SciELO

: 317

Bases de Mannich N-substituídas

Biotoxinas marinhas

aspectos farmacológicos : 191

Bothriechis Peters : 81

Bothriopsis Peters : 81

Botlirops, acidentes : 403

Botulismo

hipermunização simultânea de eqüídeos

Calloselasma

annamensis, redescrição : 81

rhodostoma, redescrição : 81

Cerodirphia avenata aragiiensis : 367

Cestoda, Trypanorhyncha : 239

Clostridium botidinum, tipos A e B ; 307

Cópula heteróloga

sucuris em cativeiro ; 391

Ctenus, redescrição : 161, 171

Degeneração gordurosa : 127

Diesingia megastoma : 233

Ectoparasitas, em serpentes : 377

Epidemiologia leucêmica : 119

Equinodermos

defesa química : 191

ecologia química : 191

Escorpiões

sistemática : 181, 425

venenos e antivenenos : 299

Esteróis, composição

em Zoanthus sp. : 451

Eunectes

Murinus Murinus (Linnaeus) ; 391

Notaeus Cope, 1862 : 391

Fitogenética : 439

Gyrinicola chabaudi n.sp. ; 383

Hidantoinas : 317

Hydrodynastes bicinctus : 239

466

SciELO

ÍNDICE DE ASSUNTOS

Instituto Butantan, cronologia : 11

Intoxicação alimentar : 307

Kiricephalus coarctatus : 233

Lachesis, acidentes : 403

Lachesis muta muta : 281

Lactonas esteroídicas : 439

Lagartas urticantes : 367

Leucemia linfóide aguda : 119

Linfoadenopatias ; 127

Linfonodos : 127

Loxosceles, acidente : 213

Marcadores imunológicos

em crianças brasileiras : 119

Mielite aguda ; 213

Moluscos gastrópodes

defesa química : 191

ecologia química : 191

Nematoda, Pharyngonidae : 383

Nhandu, n. gen. : 157

Nhandu carapoensis n.sp. : 157

“Oberhãutschen”, técnica microscópica

em Viperoidea : 81

Ofídios, parasitas : 219, 233, 239

Ophioptes Sambom, 1928

brevipilis sp.n. : 377

longipilis sp.n. : 377

Opisthacantus cayaporum Vellard, 1932

Oxiurídeos, em girinos : 383

Panstrongylus megistus, bionomia ; 343

Parasitas

em anfíbios : 383

em ofídios : 239, 377

da América Tropical : 219

em répteis : 233

sistemática : 377, 383

Patologia

de animais em cativeiro : 133

425

467

SciELO

10 11 12 13 14 15

tNDICE DE ASSUNTOS

Pentastomídeos : 219, 233

Porocephalíis : 219, 233

crotali : 233

Porthiãium Cope : 81

Protobothrops n.gen. : 81

Pterobothrium, plerocercos

Répteis, parasitas : 233

Scorpiones, Buthidae : 181

Scorpionidae ; 425

Serpentes

acidentes : 403

Hydrodynastes bicintus

Lachesis muta muta :

parasitas ; 377

239

281

245, 271

289

281

sistemática

venenos

crotálico

elapídico

laquético

Sistemática

ácaros

Ophioptes

brevilis sp.n. : 377

longipilis sp.n. : 377

Sambom, 1928 : 377

aranhas

Acanthoscurria feriyia Simon, 1892

Ctenus

albofasciatiís, redescrição

carvalhoi sp.n. : 161

minor, redescrição ; 171

similis, redescrição : 171

villasboasi Mello Leitão

Nhandu n.gen. : 157

Nhandu carapoensis n.sp. : 157

Theraphosinae ; 157

Trasyphoberus parvitarsis Simon, 903

153

171

161

153

468

SciELO

10 11 12 13 14 15 16

ÍNDICE DE ASSUNTOS

escorpiões

Opisthacantus cayaporum Vellard, 1932 : 425

Tityus serriãatus Lutz «fe Mello, 1922, neótipo : 181

parasitas

Gyrinicola chabaudi n.sp. ; 383

serpentes

Agkistrodontini : 81

Bothriechis Peters : 81

Bothriopsis Peters : 81

Calloselasma

annamensis : 81

rhodostoma : 81

Porthidium Cope : 81

Protobothrops n.gen. : 81

Solanaceae : 439

Soros

antiaracnídico polivalente, produção ; 253

antidiftérico, produção

reimunizações repetitivas, em cavalos : 335

antiofídicos, hipermunização em eqüídeos : 259

Sucuris, em cativeiro : 391

cópula heteróloga : 391

Terpenos : 317

Tétano, hiperimunização : 325

Tityus semdatus Lutz & Mello, 1922, neótipo : 181

Toxina botulínica, tipos A e B : 307

Toxóide botulínico, tipos A e B : 307

Trasyphoberus parvitarsis Simon, 1903

sinonímia ; 153

Triatorm melanocephala, ninfa : 355

Triatomíneos : 343, 355

Tnjpanosoma cruzi, vetor

em Minas Gerais, Brasil : 355

Venenos

crotálico

extração, efeitos do processo

na toxicidade e sobrevida dos ofídios : 245

469

SciELO

10 11 12 13 14 15

tNDICE DE ASSUNTOS

titulação, em camundongos : 271

elapídico

titulação, em camundongos ; 289

neutralização cruzada : 289

escorpiônico (Tityus)

soroneutralização cruzada : 299

titulação, em camundongos : 299

laquético

titulação, em camundongos : 281

toxicidade : 281

Viperoidea

técnica microscópica “Oberhãutschen”

Withanolides, Withania somnifera : 439

Zoanthus sociatus : 451

Zoantideos

composição em esteróis : 451

Zooxantela : 451

470

SciELO

10 11 12 13 14 15 16

Mem, Inat. Butantan

44/-Í5.-471-476, 1980/81

SUBJECT INDEX

119

127

Acanthoscurria ferina Simon, 1892

synonimy : 153

Acarid, systematic : 377

Acarina: Ophioptidae : 377

Acute lymphoid leukemia

Acute myelitis : 213

Adipous degeneration

Agkistroãontini : 81

Anacondas, in capitivity

heterologous mating

Antivenins

arachnid, polyvalente :

crotalic

titration, in mice :

elapid

cross neutralization

titration, in mice :

lachesic

titration, in mice :

scorpionic, dosage : 299

391

253

: 271

: 289

281

Bothriechis Peters

: 81

Bothriopsis Peters

: 81

Bothrops, accident

: 403

Botulinus

toxin, types A and B : 307

toxoid, types A and B : 307

Botulism

bivalente hyperimmunization of horses

: 307

471

SciELO

10 11 12 13 14 15

Calloselasma

annamensis, redescription : 81

rhodostoma, redescription : 81

Capitivity animais, pathology : 133

Cerodii-phia avenata araguensis : 367

Cestoda, Trypanorhyncha : 239

Clostridium botidinum, types A and B

Ctenus, redescription : 161, 171

Diesingia megastoma : 233

Diphteria anatoxin and antitoxin : 335

Echinoderms

Chemical defense : 191

Chemical ecology : 191

Ectoparasites, in snakes : 377

Eunectes

Murinus Murinus (LinnaeusJ : 391

Notaeus Cope, 1862 : 391

Food poisoning : 307

Freund’s adjuvant

hyperimmunization in eqüine : 259

Gyrinicola chabaudi n.sp. : 383

Heterologous mating

in capitivity anacondas : 391

Hydantoins ; 317

Hydrodynastes bicintus : 239

Immunological markes

in Brazilian children : 119

Instituto Butantan, cronology : 11

Kiricephalus coarctatus : 233

Lachesis, accident : 403

Leuchemic epidemiology : 119

Loxosceles, accident : 213

Lymphoadenopathies : 127

Lymphonodes : 127

Marine biotoxins

pharmacological aspects : 191

Mollusc gastropods : 191

472

2 3 4

5 6

SciELO

SUBJECT INDEX

Chemical defense : 191

Chemical ecology : 191

M-Mannich Bases : 317

Nematoda, Pharyngodonidae ; 383

Nhandu n.gen. : 157

Nhandu carapoensis n.sp. : 157

“Oberhâutschen” microspical technic

in Viperoidea : 81

Ophidians, parasites : 219, 233, 239

Ophidic accidents, syndrome : 403

Ophioptes Sambom, 1928

brevipilis sp.n. ; 377

longipilis sp.n. : 377

Opisthacanhis cayapomm Vellard, 1932 : 425

Panstrongylus megistus, bionomy : 343

Parasites

in amphibians ; 383

in ophidians : 239, 377

of Tropical America : 219

in reptilia : 233

systematic : 377, 383

Pathology

in capitivity animais : 133

Pentastomids : 219, 233

Pinworm, in tadpoles : 383

Plant genetic : 439

Porocephalus : 219, 233

crotali : 233

Pterobothrium, plerocercus : 239

Reptilia, parasites : 233

Scorpiones, Buthidae : 181

Scorpionidae : 425

Scorpions

systematic : 181, 425

venoms and antivenins : 299

Serum

antiarachnid polyvalent, production : 253

473

SciELO

10 11 12 13 14 15

SUBJECT INDEX

antidip?iteric, production

repetitive immunizations, in horses : 335

antiophidic, hyperimmunizations in eqüine : 259

Snakes

accidents : 403

Hydrodynastes bicinctus : 239

Lachesis muta muta : 281

parasites : 377

systeniatic ; 81

venoms

crotalic : 245, 271

elapidic : 289

lachetic : 281

Solanaceae : 439

Spiders

loxoscelic accident : 213

systematic : 153, 157, 161, 171

venoms and antivenins : 253

Steroidal lactones : 439

Sterol composition

in Zoanthus sp. : 451

Systematic

acarid

Ophioptes

hrevilis sp.n. ; 377

longipilis sp.n. : 377

Sambom, 1928 : 377

parasites

Gyrinicola chahaudi n.sp. : 383

scorpions

Opysthacantus cayaporum Vellard, 1932 : 425

Tityus serriãatus Lutz & Mello, 1922, neotype : 181

snakes

Agkistrodontini : 81

Bothriechis Peters : 81

Bothriopsis Peters : 81

Calloselasma : 81

474

SciELO

10 11 12 13 14 15 16

SUBJECT INDEX

annamensis : 81

rhoãostoma : 81

Porthidiiim Cope : 81

Protobothrops n.gen. : 81

Spiders

Acanthoscurria ferina Simon, 1892 : 153

Cteniis

Alhofasciahis, redescription : 171

carvalhoi sp.n. : 161

minor, redescription : 171

similis, redescription : 171

villasboasi Mello Leitão : 161

Nhandu n.gen. : 157

NItandu carapoensis n.sp. : 157

Theraphosinae : 157

Trasyphoberns parvitarsis Simon, 1903 : 153

Terpenes : 317

Tetanus, hyperimmunization : 325

Tetanus antioxin, production : 325

Tityns seirulatus Lutz & Mello, 1922, neotype : 181

Trasyphoberns parvitarsis Simon, 1903

synonimy : 153

Triatoma melanocephala, nimph : 355

Triatomines : 343, 355

Trypanosoma cruzi, vector

recording in Minas Gerais, Brazil : 355

Urticating Caterpillar : 367

Venoms

crotalic

extraction process, effects

in the toxicity and snakes survival rate : 245

titration, in mice

elapidic

cross-neu trai ization

titration, in mice

lachesic

titration, in mice

: 271

: 289

281

475

SciELO

10 11 12 13 14 15