Mem. Inst. Butantan

U7IJtS, 1983/84

INSTRUÇÕES AOS AUTORES

1. FINALIDADE

As MEMÓRIAS DO INSTITUTO BUTANTAN são publicadas sob a

orientação da Comissão Editorial, sendo que os conceitos emitidos são de

inteira responsabilidade dos autores. Têm por finalidade a apresentação de

trabalhos originais que contribuam para o progresso nos campos da Biologia

e da Medicina, elaborados por especialistas nacionais e estrangeiros que se

enquadrem no Regulamento dos Trabalhos.

2. REGULAMENTO DOS TRABALHOS

2 .1 Normas gerais

2.1.1 Os trabalhos devem ser inéditos e destinar-se exclusivamente à

revista “MEMÓRIAS DO INSTITUTO BUTANTAN”.

Os artigos de revisão serão publicados a convite da Comissão Editorial.

2.1.2 Estrutura do trabalho

2.1.2.1 Elementos preliminares

a) cabeçalho — título do trabalho e nome do(s) autor(es);

b) filiação científica e endereço para correspondência.

2.1.2.2 Texto

Sempre que possível deve obedecer à forma convencional do artigo

científico:

a) Introdução — Estabelecer com clareza o objetivo do trabalho rela¬

cionando-o com outros do mesmo campo e apresentando de forma sucinta

a situação em que se encontra o problema investigado. Extensas revisões de

literatura devem ser substituídas por referências aos trabalhos mais recentes,

onde tais revisões tenham sido apresentadas.

b) Material e métodos — A descrição dos métodos usados deve limitar-se

ao suficiente para possibilitar ao leitor a perfeita compreensão e repetição dos

métodos; as técnicas já descritas em outros trabalhos devem ser referidas

somente por citação, a menos que tenham sido consideravelmente modificadas.

c) Resultados — Devem ser apresentados com clareza e, sempre que

necessário, acompanhados de tabelas e material ilustrativo adequado.

d) Discussão — Deve restringir-se à apresentação dos dados obtidos e

dos resultados alcançados, relacionando-se hovas contribuições aos conheci¬

mentos anteriores. Evitar hipóteses ou generalizações não baseadas nos resultados

do trabalho.

e) Conclusões — Devem ser fundamentadas no texto.

Dependendo do assunto do artigo, as divisões acima poderão ser modifi¬

cadas de acordo com o esquema do trabalho, porém o artigo deve conter

obrigatoriamente:

SciELO

0 11 12 13 14 15 16

— Introdução;

— Desenvolvimento do tema (com as divisões a critério do autor);

— Conclusão.

2.1.2.3 Agradecimentos

Devem ser mencionados antes das referências bibliográficas.

2.1.2.4 Material de Referência

Todo trabalho deve vir obrigatoriamente acompanhado de:

a) Resumos — Um no mesmo idioma do texto, outro em inglês, redi¬

gidos pelo(s) próprio(s) autor(es), devendo expressar o conteúdo do artigo,

salientando os elementos novos e indicando sua importância. O resumo na

língua em que está redigido o trabalho deve ser colocado antes do texto e o

em inglês, no final. Só excepcionalmente excederá a 200 palavras. Os títulos

dos trabalhos devem ser traduzidos para o inglês e vice-versa.

b) Palavras-chave — Correspondendo a palavras ou expressões que

identifiquem o conteúdo, devem ser em número necessário para a completa

descrição do assunto e assinaladas com asteriscos (*) as 3 palavras-chave

principais. Para escolha das palavras-chave usar o vocabulário protótipo do

campo especializado.

c) Referências bibliográficas — Devem ser incluídas no texto e arranjadas

em ordem alfabética do sobrenome do autor, numeradas consecutivamente.

Periódico;

MACHADO, J. C. & SILVEIRA F.°, J. F. Obtenção experimental da

pancreatite hemorrágica aguda no cão por veneno eseorpiôhico. Mem. Inst.

Butantan, 40141-.1-9, 1976/77.

Livro:

BIER, O. Bacteriologia e imunologia. 18 ed. São Paulo, Melhoramentos,

1977.

As citações no texto devem ser em números-índice correspondendo às

respectivas referências bibliográficas.

Exemplos:

As investigações sobre a fauna flebotomínica no Estado de São Paulo

foram feitas em várias ocasiões 1, 3, 4,

método

derivado de simplificação de armadilha de Disney^ (1968)...

Referências bibliográficas (correspondentes aos números-índice).

1. BARRETO, M.P. Observações sobre a biologia em condições naturais

dos flebótomos do Estado de São Paulo (Diptera, Psychodidae).

São Paulo, 1943 (Tese — Doutoramento — Faculdade de Medicina

da Universidade de São Paulo).

2. DISNEY, R. H. L. Observations on a zoonosis: leishmaniosis in British

Honduras, /. app. Ecol., 5:1-19, 1968.

2 3

5 6

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3. FORATTINI, O. P. Algumas observações sobre a biologia dos Flebó-

tomos (Diptera, Psychodidae) em região da bacia do Rio Paraná

(Brasil). Arq. Fac. Hig. S. Paulo, 5:15-136, 1954.

3. NORMAS PARA APRESENTAÇÃO DOS ORIGINAIS

3.1 Datilografia

Os originais devem ser datilografados cm 3 (três) vias, com espaço duplo,

em uma só face, mantendo as margens laterais com aproximadamente 3 cm.

Todas as páginas devem ser numeradas consecutivamente, com algarismos

arábicos, nó canto superior direito.

3.2 Tabelas

Devem ser numeradas consecutivamente com algarismos arábicos e enca¬

beçadas pelo seu título. Os dados apresentados em tabelas não devem ser,

em geral, repetidos em gráficos. As notas de rodapé das tabelas devem ser

restritas ao máximo possível e referidas por asteriscos.

3.3 Ilustrações

3.3.1 Desenhos e gráficos

3.3.1.1 Devem ser feitos com tinta nanquim preta, em papel Schoeller

Hammer 3G e 4G. Não usar papel vegetal porque este retrai com o calor

e abranda com o frio, e o nanquim tende a ficar mais falhado, devido à

porosidade do papel vegetal. Na impressão as ilustrações tendem a ter ligeira

deformidade e traços levemente acinzentados, sobretudo os gráficos saem total¬

mente fora de esquadro.

3.3.1.2 O tamanho, quando ocupar página inteira, deve seguir rigoro¬

samente estas medidas 12,6 x 19,8 cm ou 16,8 x 26,3 cm ou 21 x 33 cm ou

25.2 X 39,6 cm, pois em geral as gráficas com as quais nós trabalhamos, têm

um determinado tamanho de letra e as ilustrações precisam ser proporcionais

a estes tamanhos existentes. Para uma boa reprodução, não precisa ser maior,

pois sendo maior perde muitos detalhes na redução.

3.3.1.3 Aplicar cola no verso do desenho ou do gráfico só na margem

superior, numa faixa de aproximadamente 1 cm e colar sobre um cartão um

pouco maior.

3.3.1.4 Para melhor proteção, cobrir com papel vegetal de comprimento

um pouco maior, de maneira a poder ser dobrado para trás na parte superior

e colado.

3.3.2 Fotografias

3.3.2.1 Devem ser bem nítidas e contrastadas, pois fotos muito acin¬

zentadas dão péssima impressão.

3.3.2.2 Devem vir soltas dentro de um envelope.

3.3.2.3 Devem ser entregues inteiras e não recortadas, em papel foto¬

gráfico liso. O papel fotográfico crespo , (martelado) dá péssima reprodução. ,

3.3.2.4 O tamanho é muito importante. Uma foto para ganhar mais

qualidade na impressão necessita sempre sofrer redução. Portanto, mandem

fotos sempre de tamanho maior do que o que vai ser impresso. Ex.: para

página inteira fotos 18 x 24 cm, para meia página fotos 18 x 12 cm.

3.3.2.5 Colocar um papel vegetal em cima da foto que tiver qualquer

anotação a ser feita, ou simplesmente para limitar a parte importante a ser

usada. Tomar muito cuidado para não pressionar o lápis ou caneta, a fim

de não marcar a foto. Não colocar letras ou números sobres as fotos.

SciELO

0 11 12 13 14 15 16

3.3.3 Os textos e números que completam os desenhos, gráficos e fotos

devem ser feitos em manuscrito legível ou datilografado (os algarismos sempre

em arábicos) direto sobre o papel vegetal que foi colocado para proteção

(não pressionar a fim de não marcar as ilustrações) ou em papel branco e

colocado no papel vegetal, pois os textos e números serão feitos em tipos

gráficos.

3.3.4 A numeração dos desenhos, gráficos e fotos será feita com algaris¬

mos arábicos na parte inferior do papel vegetal, não importando se é foto,

desenho ou gráfico. Seguir sempre com uma numeração só. Ex.: Um tra¬

balho que tenha 2 fotos, 1 gráfico e 1 desenho segue com a numeração (fig.),

(fig. 2), (fig. 3), e (fig. 4), se as 2 fotos vão numa página só, colocar na parte

inferior (figs. 1 e 2) e determinar em cima da foto (no papel vegetal) qual é

(fig. 1) e qual é (fig. 2). Quanto aos demais elementos necessários à identifi¬

cação das ilustrações (nome do autor e título do trabalho) devem ser escritos

atrás do cartão em que as mesmas estiverem colocadas.

3.3.5 As legendas devem ser apresentadas à parte em folhas datilogra¬

fadas, constando a numeração correspondente à ilustração. Ex.: Fig. 1 —

Legenda.

A Revista admite até 6 clichês (branco e preto) no texto, para cada

trabalho, devendo os demais serem pagos pelo autor. Para clichês coloridos

deverá haver prévia combinação entre a Comissão Editorial e o autor.

De cada trabalho serão impressas 50 (cinqüenta) separatas, devendo o autor

pagar as separatas que excedam a esse número, quando solicitar uma quanti¬

dade maior. As separatas em excesso devem ser solicitadas quando o manus¬

crito for encaminhado à Comissão Editorial.

Os trabalhos poderão ser redigidos, além da língua portuguesa, em inglês,

francês e espanhol. Outras línguas ficarão a critério da Comissão Editorial.

Á reprodução total ou parcial dos trabalhos em outros periódicos — com

menção obrigatória da fonte — dependerá de autorização prévia da Comissão

Editorial.

Para fins comerciais serão proibidas a tradução e a reprodução dos trabalhos

publicados pela revista.

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5 6

11 12 13 14 15

Mem. Inst. Buiantan

U7/U8, 1983/84

SUMÁRIO/SUMMARY

HOMENAGEM PÓSTUMA/POSTHUMOUS HOMAGE

Rosa Pavone Pimont (1930-1983) . 1-2

Wolfgang Bücherl (1911-1985) . 3-4

ARTIGOS ORIGINAIS/ORIGINAL ARTICLES

1. O gênero Rachias Simon, 1892, Araneae, Ctenizidae, Nemesieae.

The genus Rachias Simon, 1892, Araneae, Ctenizidae, Nemesieae.

Sylvia LUCAS; Irene KNYSAK & Livia ZVEIBIL . 5-11

2. Ações pré-juncionais e pós-juncionais da peçonha da cobra coral'Mi-

crurus corallinus na junção neuromuscular.

Presgnaptic and postsynaptic action of the venom of the coral snake

Micrurus corallinus at the neuromuscular junction.

Oswaldo Vital BRAZIL & Marcos Dias FONTANA . 13-26

3 Avaliação da atividade tóxica do veneno de Phoneutria nigriventer em

termos de DLjq e titulação do antiveneno em camundongos.

Evaluation of the toxic activity of Phoneutria nigriventer’s venom in

terms of DL 59 and titration of the antivenom in mice.

Regina Maria Barretto CICARELLI; Medardo SILES VILLAR-

ROEL & Raymundo ROLIM ROSA . 27-32

4. Estudo imunoquimico dos venenos aranêicos das espécies Loxosceles

gaúcho, Phoneutria nigriventer e Lycosa erythrognatha.

Immunochemistry study of spider venoms of species Loxosceles gaúcho,

Phoneutria nigriventer and Lycosa erythrognatha.

Regina Maria Barretto CICARELLI; Medardo SILES VILLAR-

ROEL; Rosalvo GUIDOLIN & Ornar CRIVELLARO . 33-43

5. Avaliação da atividade tóxica do veneno de Loxosceles gaúcho em ter¬

mos de DLgQ e titulação do antiveneno específico em camundongos.

Evaluation of the toxic activity of Loxosceles gaucho’s venom in terms

of DLjq and titration of the specific antivenom in mice.

Regina Maria Barretto CICARELLI; Medardo SILES VILLAR-

ROEL & Flávio ZELANTE . 45-53

6 . Avaliação da atividade tóxica do veneno de Lycosa erythrognatha em

termos de DL^q e titulação do antiveneno em camundongos.

Evaluation of the toxic activity of Lycosa erythrognatha's venom in

terms of DLgg and titration of the antivenom in mice.

Regina Maria Barretto CICARELLI; Medardo SILES VILLAR-

ROEL & Sylvia LUCAS . 55-60

7. Henneguya pisciforme n. sp., mixosporídeos parasito de brânquias do

lambari Hyphessobrycon anisitsi (Pisces, Characidae).

Henneguya pisciforme n. sp., myxosporidians parasite from the gill of

freshwater fish, Hyphessobrycon anisitsi (Pices, Characidae).

Nelson da Silva CORDEIRO; Paulo de Toledo ARTIGAS; Ismael

GIÓIA & Rosana Souza LIMA . 61-69

8 . Apostolepis dimidiata (Jan, 1862), nova combinação, e a validade de

A. erythronota (Peters, 1880) e A. ventrimaculata Lema, 1978.

(Serpentes: Colubridae: Elapomorphinae).

Apostolepis dimidiata (Jan, 1862) a new combination, and the va-

lidity of A. erythronota (Peters, 1880) and A. ventrimaculata Lema,

SciELO

0 11 12 13 14 15 16

1978. (Serpentes: Colubridae: Elapomorphinae).

Thales de LEMA . 71-80

9. Produção de Vacina Pertussis por diferentes processos. Níveis de pro¬

teção e aspectos econômicos.

Production of Pertussis Vaccine by different processes. Protection

leveis and economical aspects.

Maria Ivette Carboni MALUCELLI & João Pessoa de Paula CAR¬

VALHO . 81-94

10. Ultrastructural changes in neuromuscular junction of mouse diaphragm

caused by the venom of the coral snake Micrurus corallinus.

Alterações ultraestruturais na junção neuromuscular do diafragma de

camundongo provocadas pela peçonha da cobra coral Micrurus co¬

rallinus.

Maria Alice da Cruz HOFLING; Lea RODRIGUES-SIMIONI &

Oswaldo Vital BRAZIL. 95-105

11. Nematóides de Passalidae (Coleoptera). Descrição de Klossnema repen¬

tina n. gên., n. sp. (Nematoda: Hystrignathidae).

Nematode of Passalidae (Coleoptera). Description of Klossnema repen¬

tina n. gên., n. sp. (Nematoda: Hystrignathidae).

Nelson da Silva CORDEIRO & Paulo de Toledo ARTIGAS . 107-111

12. Estomatite ulcerativa infecciosa em Boa constrictor constricior manti¬

das em cativeiro.

Infectious ulcerative stomatitis in Doa constrictor constrictor mainte-

ned in captivity.

Hideyo IIZUKA; Henrique Moisés CANTER; Edison Paulo Tava¬

res de OLIVEIRA; Hisako Gondo HIGASHI & Raymundo ROLIM

ROSA . 113-120

13. Relato clínico de envenenamento humano por Philodryas olfersii.

Clinicai report of human envenomation by Philodryas olfersii.

Marcos Vinícius da SILVA & Marcus Augusto BUONONATO ... 121-126

14. Loxoscelismo: relato de um acidente humano atribuído a Loxosceles

amazônica Gertsch, 1967 (Araneae, Scytodidae, Loxoscelinae).

Loxoscelism: report of a human accident atributed to Loxosceles ama¬

zônica Gertsch, 1967 (Araneae, Scytodidae, Loxoscelinae).

Sylvia LUCAS; João Luiz CARDOSO & Angelina Cirelli MORAES 127-131

15. Escorpionismo por Tityus stigmurus no Nordeste do Brasil (Scorpiones;

Buthidae).

Scorpionism in the northeastem region of Brazil by Tityus stigmurus

(Scorpiones; Buthidae).

Vera Regina D. von EICKSTEDT . 133-137

16. A ocorrência de ácido ursólico em Citharexylum myrianthum (Ver-

benaceae).

The occurrence of ursolic acid in Citharexylum myrianthum (Ver-

benaceae).

Amabile K. MATIDA; Ema RABENHORST & Raymond ZELNIK 139-142

17. Ectoparasitismo em serpentes: observações gerais e algumas considera¬

ções sobre o gênero Ixobioides Fonseca, 1934 (Acarina).

Snakes ectoparasitisms: general observations and considerations about

the genus Ixobioides Fonseca, 1934 (Acarina).

Nélida M. LIZASO .'. 143-156

18. Bionomia comparativa de Triatomíneos. II — Triatoma brasiliensis

Neiva, 1911 (Hemiptera, Reduviidae).

Comparative bionomy of Triatominae. II — Triatoma brasiliensis

Neiva, 1911 (Hemiptera, Reduviidae).

Therezinha J. HEITZMANN-FONTENELLE . 157-164

19. Bionomia comparativa de Triatomíneos. V — Triatoma lenti Scherlock

& Serafim, 1967 (Hemiptera, Reduviidae).

Comparative bionomy of Triatominae. V — Triatoma lenti Scherlock

& Serafim, 1967 (Hemiptera, Reduviidae).

Therezinha J. HEITZMANN-FONTENELLE . 165-174

SciELO

10 11 12 13 14 15

20. Bionomia comparativa de Triatomíneos. VI — Híbridos de Triatoma

brasiliensis Neiva, 1911 X Triatoma lenii, Scherlock & Serafim,

1967 (Hemiptera, Reduviidae).

Comparative bionomy of Triatominae. VI — Triatoma brasiliensis

Neiva, 1911 X Triatoma lenti, Scherlock & Serafim, 1967 hybrids

(Hemiptera, Reduviidae).

Therezinha J. HEITZMANN-FONTENELLE . 175-181

21. Bionomia comparativa de Triatomíneos. VII — Rhodnius neglectus'

Lent, 1954 (Hemiptera, Reduviidae).

Comparative bionomy of Triatominae. VII — Rhodnius neglectus Lent

1954 (Hemiptera, Reduviidae).

Therezinha J. HEITZMANN-FONTENELLE . 183-188

22. Necrose de ponta de cauda em Eunectes notaeus Cope, 1862 (Serpentes,

Boidae, Boinae).

Caudal necrosis in Eunectes notaeus Cope, 1862 (Serpentes, Boidae,

Boinae).

Tatiana VEINERT; Hélio Emerson BELLUOMINI; Hideyo IIZU-

KA & José Daniel Luzes FEDULLO . 189-194

23. Estudo da biologia de Amblyomma rotundatum (Koch, 1844), em infes¬

tações experimentais de Bufo marinus (L., 1758) sob condições

variadas de umidade relativa e de temperatura do ar.

Biological studies of Amblyomma rotundatum (Koch, 1844), in experi¬

mental infestation with Bufo marinus (L., 1758) under differents

conditions of relative humidity and temperature.

Maria Shirley Pizolato OBA & Teresinha T. Sato SCHUMAKER .. 195-204

24. Lista remissiva dos trabalhos publicados nas Memórias do Instituto

Butantan, S9-46, 1975/82.

Remissive list of papers published in Memórias do Instituto Butantan,

S9-Í6, 1975/82 . 205-216

ÍNDICE DE AUTOR/AUTHOR INDEX . 217-218

ÍNDICE DE ASSUNTO . 219-222

SUBJECT INDEX . 223-226

SciELO

0 11 12 13 14 15 16

Mem. Inst. Butantan

1983/84

HOMENAGEM

ROSA PAVONE PIMONT

1930 — 1983

Rosa Pavone Pimont faleceu em 13/07/83, vítima de acidente em Belém

do Pará, para onde fora a fim de participar da reunião anual da Sociedade

Brasileira para o Progresso da Ciência.

Nascida em São Paulo, a 14/05/30, possuía os seguintes títulos univer¬

sitários: Bacharel e Licenciada em Pedagogia (1953), Especialista em Bacte¬

riologia e Imunologia (1959), Especialista em Orientação Educativa (1968),

Educador em Saúde Pública (1971) e Doutor em Educação (1972).

Iniciou sua vida profissional pelos magistérios primário e secundário. A

nível universitário lecionou Saúde Pública, Orientação Vocacional e Orien¬

tação Educacional na Escola de Saúde Pública, Brasília, D.F., na Universidade

de São Paulo e em outras faculdades do Estado de São Paulo.

Ingressou no Instituto Butantan em 1954, como Técnico de Laboratório,

no Laboratório de Anaeróbios da Seção de Imunologia, passando a Chefe

Substituto do mesmo, em 1956. Em 1961, como Assistente Técnico de Cursos

SciELO

0 11 12 13 14 15 16

RIZZO, E. Homenagem. Kosa Pavone Pimont (1930-1983). Mem. Inst. Bulantan, 47/48:

1-2, 1983/84.

e Assessor da Diretoria Técnica, organizou e coordenou inúmeros cursos técni¬

cos, de especialização, atualização e divulgação, a eles imprimindo seu ritmo

dinâmico de trabalho. A partir de 1963 tornou-se, sucessivamente. Chefe

Substituto da Seção de Cursos Técnicos e Especializados do Instituto Butantan,

Chefe da Seção de Cursos (1968) e Diretor da Divisão de Extensão Cultural

do Instituto Butantan (1981), posição que ocupou até a data do falecimento.

Chefiando a Divisão, realizou amplo planejamento para sua reestruturação e

para o estabelecimento de diretrizes de trabalho. Ampliou a área de recursos

humanos, com vários graduados de nível universitário, custeados por bolsas do

CNPq e da Fundap e incentivou-os grandemente a comparecerem e a parti¬

ciparem ativamente de congressos e reuniões. Ultimava um projeto objetivando

divulgar as atividades do Instituto Butantan através de recursos audiovisuais,

para demonstrar a importância da Divisão de Extensão Cultural numa insti¬

tuição de pesquisa como é a nossa, quando sobreveio sua morte.

Em 1976, foi Consultora Individual do Ministério da Educação e Cultura,

na área de Saúde.

Em 1977, transferiu-se para Brasília, D.F., ao ser nomeada Diretora da

Divisão Nacional de Educação Sanitária, no Ministério da Saúde e, até 1980,

foi Representante deste Ministério em Comitês Científicos, Membro de Con¬

selhos Consultivos, Organizadora e Coordenadora de inúmeros projetos sobre

Educação em Saúde a nível nacional, dentre os quais ressalta o Programa

Nacional de Controle da Poliomielite. No período 1977-1980, viajou continua¬

mente por todo o território brasileiro, no desempenho seguro e objetivo de

suas funções, estimulando seus colaboradores com seu exemplo, sua dedicação

e os elevados propósitos de profissional de gabarito.

Realizou vários estágios: em Portugal, Costa Rica, Panamá, Peru e Ingla¬

terra, sob patrocínio da OPS/OMS, por convite expresso das entidades estran¬

geiras, interessadas em usufruir de sua sólida experiência.

No período de 1980-1981, militou no CNPq, tendo sido Técnico em

Desenvolvimento Científico, Coordenadora do Programa Integrado de Ecologia

Humana e sua Representante em programa da Unesco.

Seu desempenho profissional resultou na publicação de mais de 36 artigos

científicos sobre sua especialidade. Participou intensa e ativamente em mais

de 60 congressos, conclaves e simpósios científicos, no Brasil e no Exterior,

comunicando seu trabalho, mediando ou coordenando sessões em sua área

específica.

Avaliar devidamente sua capacidade, dedicação ao trabalho e seu elevado

padrão não é tarefa fácil; avaliar suas qualidades de mulher, amiga e colega,

torna-se ainda mais difícil.

i SciELO

Mem. Inst. Butantan

i7/iS, 1983/84

HOMENAGEM

WOLFGANG BÜCHERL

1911 — 1985

Wolfgang Bücherl, nascido na Alemanha, iniciou a sua vida profissional

como professor da primeira cátedra de Biologia Educacional na Pontifícia

Universidade Católica de São Paulo.

Ingressou no Instituto Butantan em 1939, após terminar o seu doutorado

em Münster, Alemanha, passando a dedicar a sua vida ao estudo dos Animais

Peçonhentos, principalmente das aranhas, escorpiões e quilópodos.

Publicou ao longo dos anos mais de cem trabalhos de pesquisa, livros

didáticos e de divulgação sobre a sua especialidade. Foi editor e escreveu

dois capítulos sobre aranhas e escorpiões no “Animais Venoms and their

Venoms” publicado pela Academic Press nos Estados Unidos.

Recebeu a Medalha de Ouro do Prêmio Mello Leitão como recom¬

pensa ao mérito do trabalho: "A sistemática das aranhas caranguejeiras,

importância dos bulbos copuladores e apófises tibiais, conferido pela Aca¬

demia Brasileira de Ciências. Foi laureado também com a Medalha

SciELO

0 11 12 13 14 15 16

LUCAS, S. Homenagem. Wolfgang Bücherl (1911-1985). Mem. Inst. Butantan, 47/48:3-4,

1983/84.

VITAL BRAZIL por ocasião do centenário do nascimento do ilustre fundador

do Instituto Butantan,- em reconhecimento aos seus trabalhos de pesquisa.

Ocupou o cargo de Chefe da Divisão de Zoologia Médica, a partir de

1949, que compreendia as Seções de Ofiologia, Artrópodos, Parasitologia e

Museu do Instituto Butantan.

Organizou o Museu do Instituto Butantan que é visitado anualmente por

milhares de pessoas do país e do exterior.

Em 1966 organizou o Simpósio Internacional sobre Venenos Animais e

editou os três fascículos comemorativos do citado Simpósio nas MEMÓRIAS

DO INSTITUTO BUTANTAN.

Trabalhou por longos anos como Secretário-Tesoureiro do Fundo de

Pesquisas do Instituto Butantan e também da Sociedade Brasileira para o

Progresso da Ciência.

Foi bolsista do Conselho Nacional de Pesquisas e participou do julgamento

de várias teses de mestrado e doutorado.

Participou do Conselho Preparatório da Fundação Parque Zoológico de

São Paulo e depois membro de seu Conselho Superior.

O seu maior mérito porém foi a idealização dos viveiros para a manu¬

tenção de aranhas e escorpiões em laboratório. Introduziu o método da coleta

dos venenos por choque elétrico obtendo as peçonhas puras, utilizadas tanto

para a elaboração de antivenenos como na pesquisa.

Descobriu nos arredores de São Paulo as aranhas do gênero Loxosceles,

causadoras de acidentes graves, obtendo pela primeira vez no Brasil o veneno

que permitiu a elaboração do soro antiloxoscélico.

Incentivou o ingresso na carreira de pesquisa de numerosos jovens, como

também foi responsável pelo meu ingresso no Instituto Butantan, como a sua

assistente na Seção de Artrópodes Peçonhentos, a partir de 1961 e ocupando

o seu cargo de chefia após a sua aposentadoria em 1967.

Através de cursos especializados, palestras e conferências contribuiu para

a divulgação do Instituto Butantan tanto no país como no exterior.

Após a sua aposentadoria continuou os seus trabalhos de pesquisa e

alcançou o ápice de sua carreira ao ingressar, através de concurso, na carreira

de pesquisador científico no nível mais alto.

Todos nós lhe devemos a nossa gratidão.

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Mem. Inst. Butantan

47/4«:5-ll, 1983/84

0 GÊNERO RACHIAS SIMON, 1892, ARANEAE,

CTENIZIDAE, NEMESIEAE

Sylvia LUCAS *

Irene KNYSAK **

Livia ZVEIBIL**

RESUMO: São acrescentados novos caracteres para a identificação

do gênero Rachias Sinion, 1892, a partir do estudo dos tipos de

Rachias dispar (Simon, 1891), R. piracicabensis Piza, 1938 (= R.

intermedia Soares, 1944) e de material pertencente às coleções do

Instituto Butantan, do M!useu de Zoologia de São Paulo e do Museu

Nacional do Rio de Janeiro. É estabelecida a sinonimia de R. inter¬

media com R. piracicabensis.

PALAVRAS-CHAVE: Sistemática. ARANEAE. CTENIZIDAE.

Gênero Rachias. R. intermedia Soares, 1944 sinônimo de R. piraci¬

cabensis Piza, 1938.

INTRODUÇÃO

O gênero Rachias Simon, 1892, possui grande afinidade com o gênero

Hermacha Simon, 1888, como já havia constatado o próprio autor. Os carac¬

teres até então estabelecidos: olhos anteriores quase iguais e bem separados,

formando uma linha pouco procurva, os médios muito maiores que os laterais,

último artículo das fiandeiras muito menor que o médio e cônico, além dos

caracteres válidos apenas para os machos, ausência de uma apófise tibial e

presença de espinhos nos tarsos posteriores, tornavam difícil a identificação,

principalmente devido à variação que os mesmos apresentam.

O Instituto Butantan recebe, com relativa freqüência, exemplares perten¬

centes a ambos os gêneros. Neste trabalho procuramos estabelecer outros

caracteres para a determinação de Rachias, através do estudo de exemplares

pertencentes às espécies: Rachias dispar (Simon, 1891), espécie tipo do gênero;

Rachias piracicabensis Piza, 1938 (Rachias intermedia Soares, 1944).

Rachias dispar (Simon)

1891 — Hermacha dispar Simon, Annis. Soc. ent. Fr., 60:303.

1892 — Rachias dispar Simon, Hist. Nat. Ar., 1 (1) Paris: 114.

1924 — Rachias dispar Mello Leitão, Rev. Mus. paul., 13:69.

INSTITUTO BUTANTAN — * Divisão de Biologia, Seção de Artrópodes Peçonhentos

Caixa Postal 65 — CEP 05504 — São Paulo — Brasil.

SciELO

LUCAS, S.; KNYSAK, I. & ZVEIBIL, L. 0 gênero Rachias Simon, 1892, Araneae, Ctenizidae,

Nemesieae. Mem. Inst. Butantan, 47/48:5-11, 1983/84.

Material examinado:

Sintipos, macho e fêmea, n.° 10581 do Museu de História Natural de Paris,

loc. Teresópolis, Rio de Janeiro — Brasil.

Macho s/n.” do Museu Nacional do Rio de Janeiro (MNRJ), loc. Represa de

Mendanha, Rio de Janeiro — Brasil. Fêmea s/n.“ do MNRJ, loc. Rio de Janeiro

— Brasil.

Macho n.° 2.280/ref. 20.061 da Coleção Orthognatha do Instituto Butantan

(Col. IB. O), loc. Vassouras, Rio de Janeiro — Brasil. Dois machos, n.°

2.280/ref. 11.201 Col. IB. O, loc. Estação Andrade Costa, Rio de Janeiro

— Brasil.

Acrescentamos à descrição original o seguinte:

macho: a fóvea é reta; os lobos maxilares apresentam junto ao lábio, cúspides

delicadas, lábio sem cúspides; o rasteio é formado por cerdas, mais abundantes

próximo ao bordo, junto aos ferrões; as escópulas tarsais, no tarso I são intei¬

ras, apresentando lateralmente algumas cerdas curtas, no tarso II com escópulas

e alguns espinhos no lugar de cerdas, no tarso III com escópulas e espinhos

curtos, nos lados do tarso IV com escópulas divididas por linha ventral de

cerdas, com muitos espinhos laterais e com terceira garra; sem apófises tibiais,

tíbia do palpo dilatada na base e estreitando-se para o ápice, com 7 a 9

espinhos distribuídos como mostra nas figs. 1 e 2; bulbo com membrana

delicada.

fêmea: fóvea levemente procurva; lobos maxilares com cúspides maiores do

que as do macho; lábio com duas cúspides no exemplar tipo e sem nenhuma

no outro, rasteio de cerdas mais fortes e mais abundantes do que no macho,

escópulas tarsais, nos tarsos I e II inteiras, com apenas algumas cerdas laterais,

curtas, tarso III com espinhos laterais e IV com linha ventral de cerdas divi¬

sórias e espinhos laterais; com terceira garra; receptáculos seminais como na

Fig. 3. O sintipo é uma fêmea subadulta.

Rachias piracicabensis Piza

1938 — Rachias piracicabensis Piza, Foi. Clin. et Biol., São Paulo 10 (1): 21.

1944 — Rachias intermedia Soares, Papéis Dep. Zool. São Paulo 4 (10): 160,

(figs. 4, 5 e 6).

1952 — Rachias plerumque, Zool. Rec., 1952: 61 (error typhograph. pro

Rachias piracicabensis Piza, 1938).

Material examinado:

Sintipos, Rachias piracicabensis, fêmeas n.° A 0033 da Escola Superior de

Agricultura Luiz de Queiroz, col. Piraciba, São Paulo — Brasil; duas fêmeas,

n.° 5575 do Museu de Zoologia de São Paulo (MZSP), col. Barueri, São Paulo,

Brasil; uma fêmea n.° 6630 do MZSP, col. Itapetininga, São Paulo — Brasil;

uma fêmea, n.° 3044 do MZSP, col. Capital, São Paulo — Brasil; uma fêmea,

n.° 3207 do MZSP, col. Cachoeira das Emas, Pirassununga, São Paulo —

Brasil; uma fêmea, n.° 6819 do MZSP, col. Sumaré, São Paulo — Brasil; um

macho, n.“ 5863 do MZSP, col. Barueri, São Paulo ■— Brasil; um macho e uma

fêmea, n.“ 5193 do MZSP, col. Ipiranga, São Paulo — Brasil e da mesma proce-

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LUCAS, S.; KNYSAK, I. & ZVEIBIL, L. 0 género Rackiaa Simon, 1892, Araneae, Ctenizidae,

Nemesieae. Mem. Inst. Butantan, 47/45:5-11, 1983/84.

dência: duas fêmeas, n.° 5789 do MZSP; uma fêmea, n.° 2732 do MZSP; uma

fêmea, n.° 5843 e uma fêmea, s/n.° do MZSP.

Tipo, do sinonimo Rachias intermedia, n.“ E 546 (C629) do MZSP, macho,

Col. Monte Alegre, Município de Amparo, São Paulo — Brasil.

Uma fêmea do MNRJ, col. Lavras, Minas Gerais — Brasil.

Coleção de Orthognatha do Instituto Butantan:

Um macho, n.° 98/ref. 4415, Capital, São Paulo — Brasil; um macho n.“

98/ref. 4225, Capital, São Paulo — Brasil; dois machos, n.“ 1263/A e B,

Capital, São Paulo — Brasil; uma fêmea 1263/ref. 17007, Capital, São Paulo

— Brasil; um macho, n.° 2280/ref. 16969, Capital, São Paulo — Brasil; uma

fêmea, n.“ 3719/ref. 371, Capital, São Paulo — Brasil; uma fêmea, n." 4050/ref.

15421, Capital, São Paulo — Brasil; uma fêmea n.“ 4176/ref. 17681, Capital,

São Paulo — Brasil; um macho, n.° 3722/ref. 381, Casa Branca, São Paulo —

Brasil; um macho, n.° 4214/ref. 16439, Capital, São Paulo — Brasil; uma

fêmea, n.“ 4363/ref. 23091, Capital, São Paulo — Brasil; um macho, n.°

4472/ref. 25669, Capital, São Paulo — Brasil; uma fêmea, n.° 4472/ref.

30999, Capital, São Paulo — Brasil; um macho, n.° 4583/ref. 28955, Capital,

São Paulo — Brasil; um macho, n.“ 4583/ref. 41754, Capital, São Paulo —

Brasil; uma fêmea, n.° 98/ref. 21062, Capital, São Paulo — Brasil; uma fêmea,

n.“ 2254/ref. 17271, Nazaré Paulista, São Paulo — Brasil; um macho, n.°

2280/ref. 23149, Rio Claro, São Paulo — Brasil; uma fêmea, n.° 2280/ref.

16790, Barueri, São Paulo — Brasil; uma fêmea, n.° 3977/ref. 15447, Barueri,

São Paulo — Brasil; um macho, n.“ 3722/ref. 381, Casa Branca, São Paulo —

Brasil; um macho, n.° 4050/ref. 13201, Cotia, São Paulo — Brasil; um macho

n.° 4072/ref. 3306, Campinas, São Paulo — Brasil; um macho, n.° 4214/ref.

1176, Campinas, São Paulo — Brasil; um macho, n." 4214/ref. 21322, São

Roque, São Paulo — Brasil; uma fêmea, n.“ 4530/ref. 26248, São Roque,

São Paulo — Brasil; um macho, n.° 3722-381, Casa Branca, São Paulo —

Brasil; uma fêmea, n.° 4478/ref. 25622, Cabreúva, São Paulo — Brasil; três

machos, n.“ 4517/ref. 26454, Santa Rita do Passa Quatro, São Paulo — Brasil;

uma fêmea, n.° 4593/ref. 27371, Mairiporã, São Paulo — Brasil; um macho,

n.° 4671/ref. 30517, São Luiz do Paraitinga, São Paulo — Brasil; um fêmea,

n.° 4622-A/ref. 29658, São Gonçalo do Sapucaí, Minas Gerais — Brasil; uma

fêmea, n.° 4533/ref. 23888, Guaranésia, Minas Gerais — Brasil.

Acrescentamos à descrição original o seguinte:

macho: fóvea procurva; lobos maxilares com poucas cúspides pequenas; lábio

com nenhuma, uma ou duas cúspides; rasteio formado por cerdas longas, enco¬

brindo os ferrões à semelhança de um pente; escópulas tarsais com linha ventral

de cerdas divisórias, mais nítida nos tarsos posteriores, onde com raras exceções

ocorrem espinhos entre as cerdas, presença de espinhos laterais curtos nos tar¬

sos, que podem ou não ser levemente curvos; terceira garra presente no tarso

IV; sem apófise tibial; forma do palpo como em R. dispar: com 8 a 11 espi¬

nhos; o bulbo com êmbolo apresentando uma membrana delicada (Figs. 4 e 5).

fêmea: fóvea procurva; cúspides nos lobos maxilares mais acentuadas, de zero

a duas cúspides no lábio; escópulas tarsais nas pernas anteriores com poucas

cerdas divisórias, medianas, nos posteriores sempre com cerdas divisórias, entre¬

meadas por espinhos curtos ou não, espinhos laterais presentes apenas nos

tarsos II e III. Receptáculos seminais em forma de duas vesículas duplas,

como na Fig. 6.

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LUCAS, S.; KNYSAK, I. & ZVEIBIL, L. O gênero Rachias Simon, 1892, Araneae, Ctenizidae,

Nemesieae. Mem. Inst. Butantan, i7/48:5-11, 1983/84.

Fig. 4 — Rachias

Fig. 5 —■ Rachias

Fig. 6 — Rachias

piracicabensis

piracicabeyisis

piracicabensis

(macho)

(fêmea)

tíbia do palpo e bulbo esquerdos, face interna,

tibia do palpo e bulbo esquerdos, face externa,

receptáculo seminal.

LUCAS, S.; KNYSAK, I. & ZVEIBIL, L. 0 gênero Rachias Simon, 1892, Araneae, Ctenizidae,

Nemesieae. Mem. Inst. Butantan, 47/48:5-11, 1983/84.

CONCLUSÃO

Após o exame dos exemplares pudemos concluir que o gênero Rachias

apresenta os seguintes caracteres:

macho: tíbia do palpo dilatada na base e estreitando-se para o ápice, com 7

a 11 espinhos, geralmente 4 apicais e 5 basais na face interna e apicais na

face externa; não há apófise tibial; nos lobos maxilares, junto ao bordo

interno, próximo ao lábio, ocorrem pequenas cúspides, nunca dispostas em

forma triangular; presença de espinhos laterais nos tarsos, mais acentuadas

nos tarsos posteriores; o tarso IV com escópula rala, dividida por uma linha

de cerdas, que é ou não entremeada por pequenos espinhos, terceira garra presente

no tarso IV.

fêmea: lobos maxilares com cúspides conspícuas no canto interno, junto ao

lábio; presença de espinhos laterais nos tarsos anteriores ou posteriores.

A fóvea torácica pode ser desde reta até levemente procurva, nos machos,

sendo sempre procurva nas fêmeas; o rasteio é mais nítido nas fêmeas.

A forma do bulbo copulador dos machos e dos receptáculos seminais das

fêmeas são específicos.

Os demais caracteres usados por Simon para a determinação do gênero,

como: tamanho dos olhos anteriores, curvatura da primeira fila ocular, aspecto

e tamanho do último artículo das fiandeiras, são de difícil avaliação e não

possibilitam a distinção entre os gêneros Rachias e Hermacha Simon, 1888.

O material estudado confirma a hipótese de Soares, de que a espécie

R. intermedia Soares, 1944 é o macho de R. piracicabensis Piza, 1938, devendo

prevalecer este último.

AGRADECIMENTOS

Agradecemos o empréstimo dos tipos e demais material à Dra. Ana Timo-

theo da Costa — Museu Nacional do Rio de Janeiro, à Dra. Lícia Neme —

Museu de Zoologia de São Paulo, ao Dr. Hubert do Museu de História Natural

de Paris e à Sra. Delminda Travassos a confecção dos desenhos.

ABSTRACT : Through a comparative study of the typea and other

material pertaining to the Collection of the Museu Nacional do Rio

de Janeiro, Museu de Zoologia de São Paulo, and the Instituto

Butantan, of two species of the genus Rachias Simon, 1892 namely,

R. dispar Simon, 1891, type species of the genus and R. piracica¬

bensis Piza, 1938 (= R. intermedia Soares, 1944) we conclude that

the generic charactcrs are the following:

male:

— form and chaetotaxy of the palpai tibia, i.e. the tibia is enlarged

at the basis narrowing in direction of the apex. with 8 to 11

spines;

— tibial apophysys absent;

— at the maxilla presence of delicate cuspulae, next to the inner

corner close to the labium;

— comb composed by Bristles, consealing partially the fangs;

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LUCAS, S.; KNYSAK, I. & ZVEIBIL, L. 0 gênero Rachias Simon, 1892, Araneae, Ctenizidae,

Nemesieae. Mem. Inst. Butantan, 47/48:5-11, 1983/84.

— presence of lateral spines at the tarsi, more frequent at the

posterior tarsi;

— presence of a sparse scopula and divided by a Bristles covered

band in general interspersed with spines at the tarsus IV;

— presence of a third claw a tarsus IV.

female:

— comb composed of stiffer Bristles and more abundant;

— maxilla with accentuated cuspulae;

— presence of lateral spines at the anterior or posterior tarsi, and

the same scopula at the IV tarsus as in the male.

The features, form of the bulb and aspect of the spermathecae

are specific.

Other characters, considered by Simon as valid for the genus,

such as aspect of the anterior eyes and curvature of the first ocular

row, as well as aspect and size of the last segment of the spinnerets,

are of difficult appreciation, and do not allow a distlnction between

the genera Rachias and Hermacha Simon 1888.

R. intermedia Soares 1944 is a synonym of R. piracicabensis

Piza, 1938, corroborating the hypothesis of the author.

KEYWORDS: Taxonomy. ARANEAE. CTENIZIDAE. Genera

Rachias. R. intermedia Soares, 1944 synonym of R. piracicabensis

Piza, 1938.

Recebido para publicação em 17/08/1983 e aceito em 15/06/1984.

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Mem. ínat. Butantan

^7/45:13-26, 1983/84

AÇÕES PRÉ-JUNCIONAIS E PÓS-JUNCIONAIS DA

PEÇONHA DA COBRA CORAL MICRURUS

CORALLINUS NA JUNÇÃO NEUROMUSCULAR

Oswaldo Vital BRAZIL *

Marcos Dias FONTANA *

RESUMO: A peçonha de M. corallinm produz bloqueio ncuronius-

cular irreversível na preparação isolada nervo frênico-diafragma de

rato, aumenta a liberação espontânea de acetilcolina e inibe a

causada pelos impulsos nervosos. No hemidiafragma cronicamente

desnervado e isolado de rato, inibe reversivelmente as respostas do

músculo à acetilcolina. Não altera o potencial de membrana das

fibras do diafragma de rato, nem a excitabilidade desse músculo.

Aumenta consideravelmente a freqüência dos potenciais de placa

terminal em miniatura do diafragma de rato, reduzindo depois

progressivamente a sua amplitude, efeito que os faz desaparecer.

A despolarização, provocada pelo carbacol na região das placas

terminais das fibras do diafragma é, reversivelmente, inibida pela

peçonha de M. corallinus. Estes resultados mostram que a peçonha

exerce ações pré e pós-sinápticas, sendo a última reversível. A

pré-sináptica é irreversível. Na preparação in situ nervo ciático-

-músculo tibial anterior de cão, a administração de nostigmina na

vigência do bloqueio parcial causado pela peçonha de M. corallinus

provoca apenas ligeiro aumento nas respostas do músculo à excita¬

ção indireta. Este resultado favorece a hipótese de que a ação

pré-sináptica da peçonha prepondera sobre a pós-sináptica na gênese

do bloqueio.

PALAVRAS-CHAVE: Junção neuromuscular; peçonha de cobra

coral; ação pré-sináptica; ação pós-sináptica; acetilcolina: neostig-

INTRODUÇÃO

Em trabalho anterior (Vital Brazil et al, 1976/77), mostramos que o blo¬

queio neuromuscular produzido pela peçonha de Micrurus frontalis é devido

à ocupação dos receptores colinérgicos da placa terminal por sua ou suas neu-

rotoxinas. No presente, relatamos pesquisa sobre as ações da peçonha de

M. corallinus na junção neuromuscular. Verificamos que a peçonha desta espé¬

cie de cobra coral, ao contrário das de M. julvius (Weiss & Mclsaac, 1971),

M. leminiscatus (Vital Brazil, 1963) e M. frontalis (Vital Brazil et al., 1976/77)

exerce ação nas terminações nervosas motoras, além da posjuncional. M. coral-

Departamento de Farmacologia, Faculdade de Ciências Médicas, Unicamp.

SciELO

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BRAZIL, 0. V. & FONTANA, M. D. Ações pré-juncionais e pós-juncionais da peçonha da

cobra coral Micrurus corallinus na junção neuromuscular. Mem. In«t. liutantan, i7/i8:

13-26, 1983/84.

linus é espécie de larga distribuição no Brasil (Hoge e Romano, 1972), ocor¬

rendo também, segundo Roze (1981), no norte da Argentina e provavelmente

no Uruguai.

MATERIAL E MÉTODOS

Atividade bloqueadora neuromuscular — Usou-se a preparação nervo

frênico-diafragma de rato em banho de 40 ml a 37°C. A solução nutritiva

utilizada foi a de Tyrode com a seguinte composição em mM por litro: NaCl

136,8; KCl 2,7; CaCl:- 1,8; NaHCO.i 11,9; MgCU 0,25; NaH:.P04 0,3; glicose

11,0. A oxigenação foi mantida com carbogênio (95% O 2 e 5% C 02 ) e o regis¬

tro das contrações, feito no papel csfumaçado de quimógrafo, através da pena

inscritora de alavanca cardíaca de Starling. Fez-se a estimulação do nervo com

pulsos maximais de 0,1 Hz de freqüência e 0,2 milissegundos de duração

(estimulador Grass S4); na excitação direta do músculo usaram-se estímulos

de igual freqüência mas de maior voltagem (50-100V) e duração (2 milisseg.).

Nestas e em outras experiências em que se usou a preparação nervo frênico-

-diafragma, o hemidiafragma com seu nervo foi retirado de ratos brancos Wis-

tar de 230 a 250 g.

Liberação de acetilcolina (ACh) — O efeito da peçonha sobre a liberação

de ACh foi pesquisado na preparação nervo frênico-diafragma de rato, em banho

de 4 ml a 37°C. Usou-se solução de Tyrode, de composição já indicada com

5p.g/ml de metilsulfato de neostigmina. A oxigenação foi mantida com carbo¬

gênio como no grupo anterior de experiências. Fizeram-se as seguintes operações

após a suspensão 'do diafragma no banho: (1) deixou-se a preparação em repouso

pelo espaço de 40 minutos, findo o qual, a solução foi trocada; (2) o músculo

foi deixado em repouso por período adicional de 20 minutos, findo o qual, a

solução foi coletada para dosagem de ACh liberada (liberação espontânea) e

uma solução nova de Tyrode, colocada na cuba; (3) 0 nervo frênico foi esti¬

mulado por um período de 23 minutos, após o qual, 0 líquido foi coletado

para a dosagem de ACh, a preparação lavada e colocada na cuba solução

Tyrode eom lOng/ml de peçonha; (4) deixou-se a preparação em contato com

a solução até a ocorrência de bloqueio completo (0 nervo frênico era estimu¬

lado de quando em vez para a verificação do grau de bloqueio), após 0 que

substituiu-se a solução por uma nova; (5) deixou-se a preparação em repouso

por um período de 20 minutos, após o qual, coletou-se a solução para a dosa¬

gem de ACh (liberação espontânea após o bloqueio causado pela peçonha)

e colocou-se, na cuba, nova solução de Tyrode; (6) estimulou-se o nervo frênico

por um período de 23 minutos, como em (3), findo o qual, a solução foi cole¬

tada para a dosagem de acetilcolina. O nervo foi sempre estimulado com

pulsos supramaximais de 0,2 milissegundo de duração. Empregou-se a fre¬

qüência de 0,1 Hz nos 3 primeiros minutos e a de 25 Hz nos restantes 20

minutos. As soluções coletadas para a dosagem de ACh foram imediatamente

acidificadas a pH 5-5,5 com solução de HCl após a sua retirada da cuba.

As dosagens de ACh foram realizadas no íleo isolado de cobaia. Usou-se

solução de Krebs com 10 (rg/ml de cloridrato de morfina, 5 ng/ml de

metilsulfato de neostigmina e 5 ng/ml de cloridrato de difenidramina, de

acordo com o procedimento de Paton e Vizi (1969) modificado (inclusão do

anti-histamínico). Oxigenou-se a preparação com carbogênio e registraram-se

as respostas no papel esfumaçado de quimógrafo por meio de alavanca frontal.

i SciELO

BRAZIL, 0. V. & FONTANA, M. D. Ações pré-juncionais e pós-juncionais da peçonha da

cobra coral Micrurus corallinus na junção neuromuscular. Mem. Inst. Butantan, i7/i8'.

13-26, 1983/84.

Fizeram-se ensaios de quatro pontos para avaliar as quantidades de acetilcolina

liberada.

Contratura causada pela acetilcolina no músculo desnervado — As expe¬

riências foram levadas a efeito na preparação hemidiafragma, cronicamente

desnervado isolado de rato. O volume do banho, a temperatura, a solução

nutritiva e o arejamento foram idênticos aos utilizados na preparação nervo

frênico-diafragma de rato. Estimulou-se o músculo com 2,8 (ig/ml de ACh.

Procedeu-se da seguinte forma: (1) após a suspensão do hemidiafragma no

banho, foi ele deixado em repouso durante um período de 40 minutos, findo

0 qual, trocou-se a solução de Tyrode; (2) juntou-se a ACh ao banho e, após

1 minuto, lavou-se a preparação 5 vezes; (3) deixou-se a preparação em repouso

durante 30 minutos, após os quais, adicionou-se a ACh ao banho e, como

em (2), após 1 minuto, lavou-se 5 vezes a preparação; adicionou-se, então, a

peçonha (2 p-g/ml) à solução de Tyrode da cuba, (4) procedeu-se como em

(3); (5) repetiu-se a operação descrita em (3) 3 ou 4 vezes de modo a verificar

a reversibilidade de ação da peçonha.

Os ratos (de 200 a 230 g) foram desnervados pelo procedimento de Vital

Brazil (1963) e os hemidlafragmas, retirados 20 a 30 dias após essa operação.

Excitabilidade muscular — Estudou-se a ação da peçonha sobre a excita¬

bilidade muscular pela determinação de seu efeito sobre a curva de excita¬

bilidade e cronaxia do diafragma isolado de rato. Fragmento triangular do

hemidiafragma foi distendido horizontalmente, com sua face toráxica voltada

para cima, em cuba de perspex de 10 cm de comprimento, 5 cm de largura

e 2 cm de altura, revestida de resina e silicone (“Dow Corning-Sylgard”) e

mantido fixo por meio de alfinetes colocados em sua porção tendinosa e no

tecido conjuntivo da porção costal. A cuba, com a preparação, era colocada

na platina de microscópio estereoscópio de fabricação Zeiss para aumentos de

até 40 vezes. A temperatura, a solução nutritiva e o arejamento eram idênticos

aos já descritos. A temperatura foi mantida a 37° C por meio de lâmpada de

raios infravermelhos a, aproximadamente, 37 cm da cuba. O electródio ativo

era constituído de fio de prata cloretada (Ag. AgCl) revestido, menos em

sua extremidade, com verniz; o electródio indiferente era de fio de prata clo¬

retada. O electródio ativo, sustentado por um dos braços do micromanipulador

(Zeiss, Jena), era colocado na superfície de uma fibra ou entre duas fibras;

o indiferente, no banho. Na estimulação usaram-se pulsos fornecidos por esti¬

mulador Grass S48 através de unidade isoladora de estímulos (Grass S1U5).

As respostas aos estímulos liminares eram observados ao microscópio. Usaram-

-se estímulos de 100, 30, 10, 3, 1, 0,3, 0,1, 0,03 e 0,01 milissegundos de

duração e de intensidades (voltagens) crescentes.

Potencial de membrana, potenciais de placa terminal em miniatura

(pp.p.t.m), despolarização pelo carbacol — Pesquisou-se a ação da peçonha

sobre esses parâmetros no diafragma isolado de rato com o emprego de técnicas

convencionais usadas me pesquisas com microeletródios intracelulares. A cuba

utilizada, o modo de fixação do hemidiafragma, a maneira pela qual mantinha-

-se a temperatura do banho a 37°C, a solução nutritiva, a oxigenação da

preparação assim como o tipo de microscópio e micromanipulador empregados

foram idênticos aos descritos sob o item Excitabilidade muscular. Os microelec-

tródios de vidros preparados com o auxílio de “Microelectrode Puller” CEP,

mod. 8104 eram cheios com solução 3M KCl; a sua resistência achava-se

1 SciELO

BRAZIL, O. V. & FONTANA, M. D. Ações pré-juncionais e pós-juncionais da peçonha da

cobra coral Micrurus corallinus na junção neuromuscular. Mem. Inst. Dutantan, i7/iS:

13-26, 1983/84.

compreendida entre 5 a 25 M. O eleclródio indiferente era constituído de fio

espiralado de prata cloretada incluído em tubo de vidro curvo (para adapta¬

ção à cuba) com agar-salina.

A determinação do potencial de membrana das fibras musculares era

feita da seguinte forma: sob controle microscópico, inseria-se o microelectródio

no interior de uma fibra muscular c media-se o deslocamento vertical sofrido

pela varredura do canal do osciloscópio no momento da penetração. Repetia-se

0 mesmo procedimento em dez fibras distintas em períodos de tempo não

superiores a um minuto e calculava-se a média aritmética das dez leituras. O

potencial de membrana era determinado multiplicando-se o valor da média

obtida por fator de correção. Este era estabelecido introduzindo-se no circuito

sinal de 100 mV e medindo-se a deflexão correspondente no osciloscópio.

Fazia-se a determinação da freqüência e amplitude dos pp.p.t.m. inserindo-

-se o microelectródio em uma fibra na região de sua placa terminal. Após

a determinação de seus valores controles, a peçonha era adicionada ao banho

e as alterações na freqüência e amplitude verificadas em tempos variáveis. Em

3 experiências, adicionou-se tetrodotoxina ao banho em quantidade suficiente

para inibir as respostas à estimulação indireta. Determinou-se depois a influên¬

cia da peçonha sobre a freqüência e amplitude dos pp.p.t.m.

Em 3 experiência pesquisou-se a influência da peçonha sobre a despola¬

rização causada por 12,5 ng/ml de carbacol (Datyner e Gage, 1973). As

determinações da despolarização eram feitas 15 minutos após a adição do

carbacol ao banho; depois se lavava a preparação pelo espaço de 30 minutos

(6 lavagens).

Efeito da neostigmina no bloqueio neuromuscular causado pela peçonha

de Micrurus corallinus — O efeito da neostigmina no bloqueio neuromuscular

causado pela peçonha de M. corallinus foi investigado na preparação in situ

nervo ciático-músculo tibial anterior de cão. Utilizaram-se no estudo sete cães

anestesiados pelo pentobarbital sódico (30 mg/kg, i.v.). Fixação de uma das

patas posteriores do animal, região de exposição do nervo ciático popliteo

externo, registro das contrações do músculo tibial anterior, tipo de eletródios

e canulação da veia femoral de acordo com o exposto em trabalho anterior

(Vital Brazil, 1966). Estimulou-se o nervo com pulsos supramaximais de 0,5

Fiz e 0,2 mseg. (estimulador Grass S 4). Em todas as experiências registrou-se

a pressão arterial carotídea por meio de manómetro de Ludwig. A peçonha

de M. corallinus foi sempre injetada por via intramuscular enquanto a atropina

e a neostigmina o foram por via venosa.

Peçonhas e drogas — Todas as experiências foram levadas a efeito com

um “pool” de peçonha de M. corallinus proveniente da extração de exemplares

capturados na região de Eldorado, São Paulo. A sua DL50 foi determinada em

camundongos brancos de 18 a 22 g. Usaram-se seis animais por dose e quatro

doses em progressão geométrica de razão 1,25. As diluições da peçonha em

salina a 8 por mil foram administradas por via venosa em volume de 0,5 ml.

Calcularam-se as doses medianas letais e seus intervalos e nível fiducial de

95% pelo processo de Weil (1952). Os valores encontrados em duas expe¬

riências foram: 400 (337 a 475) P-g/kg e 414 (377 a 455) !J.g/kg. As drogas

usadas na pesquisa foram as seguintes: iodeto de acetileolina (Sigma), carbacol

(Kock Light), tetrodotoxina (Sigma), metilsulfato de neostigmina (Prostigmine

SciELO

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BRAZIL, 0. V. & FONTANA, M. D. Ações pré-juncionais e pós-juncionais da peçonha da

cobra coral Micrurus corallinus na junção neuromuscular. Mem. Inut. Butantan, Ji7/J,8:

13-2G, 1983/84.

“Roche”), cloridrato de morfina (Enila S/A), cloridrato de difenidramina

(Benadryl “Park Dawes”), sulfato de atropina (C.H. Boehringer Sohn).

RESULTADOS

Atividade bloqiieadora neuromuscular — Realizamos um total de 10 expe¬

riências na preparação nervo frênico-diafragma de rato para avaliar a sua

atividade nessa preparação. Em seis, empregamos a dose de 10 v-g/ml de

peçonha. Bloqueio completo ocorreu após 80 minutos em quatro, após 85

minutos em uma e após 90 minutos em outra. Essa dose de peçonha causou,

portanto, bloqueio completo em 82 ± 2,55 minutos em média. Em uma

experiência, obtivemos bloqueio completo em 100 minutos com o uso de

7,5 {ig/ml de peçonha e, em três outras, em 178 ± 10,4 minutos com o

emprego de 5 [i.g/ml. Observamos aumento inicial bastante acentuado das

respostas (100% e 350%) em duas experiências (com o uso de 10 iig/ml).

Nas restantes o aumento foi discreto ou não ocorreu. Em todas as experiências

o bloqueio foi irreversível. A excitação direta do diafragma após a ocorrência

do bloqueio sempre provocou resposta de amplitude normal.

Liberação de acetilcolina — Os resultados das experiências realizadas com

a finalidade de verificar o efeito da peçonha sobre a liberação de ACh acham-

-se na tabela I. Pelo seu exame constata-se que, após o bloqueio, houve

aumento considerável (64,9%) na liberação espontânea enquanto a liberação

produzida pelos impulsos nervosos foi muito reduzida (53,19%).

TABELA I

Efeito da peçonha de Micrurus corallinus sobre a liberação de acetilcolina, em

nanogramas da base. Preparação nervo frênico-diafragma de rato

EXP.

Liberação antes da adição de

peçonha à cuba

Liberação após o bloqueio pro¬

vocado por 10 Mg/ml de peçonha

Lib.

espontânea

impulsos

Lib. por

nervosos

Lib.

espontânea

Lib. por

impulsos

nervosos

6,4

55,6

9,1

21,1

8,4

64,8

14,0

28,0

8,5

49,0

15,0

30,0

Média ± erro

padrão

7,7 ± 0,9

56,4 ± 0,9

12,7 ± 2,5

26,4 ± 3,8

Contratura causada pela acetilcolina no músculo desnervado — Realiza¬

ram-se 3 experiências. Em todas, a peçonha na dose de 2 p.g/ml inibiu rever-

sivelmente a contratura do hemidiafragma cronicamente desnervado provocada

pela adição de ACh ao banho (fig. 1).

SciELO

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BRAZIL, 0. V. & FONTANA, M. D. Ações pré-juncionais e pós-juncioiiais da peçonha da

cobra coral Micrurus corallinus na junção neuromuscular. Mem. Inst. Butantan, i7/i8:

13-26, 1983/84.

Fig. 1 — Respostas do hemidiafragma cronicamente desnervado e isolado de rato à ACh

(4 fig do iodeto). Em V adicionou-se 2 /ag/ml de peçonha de M. corallinus ao

banho; a solução de Tyrode do banho com a peçonha permaneceu 30 minutos cm

contato com o hemidiafragma antes da adição da ACh. O efeito inibitório da peçonha

sobre a contratura provocada pela ACh desapareceu com as lavagens sucessivas da

preparação.

Excitabilidade muscular — A peçonha na dose de 20 (ig/ml não alterou

as curvas de excitabilidade e a cronaxia do diafragma de rato determinados em

região isenta de terminações nervosas (fig. 2).

Fig. 2 — Curvas de excitabilidad» do diafragma isolado de rato antes e após a adição de

20 /íg/ml da peçonha de M. corallinus. As curvas foram determinadas em região

do músculo isenta de terminação nervosa.

SciELO

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BRAZIL, 0. V. & FONTANA, M. D. Ações pré-juncionais e pós-juncionais da peçonha da

cobra coral Micrunta corallinus na junção neuromuscular. Mem. Inst. Buiantan, JÍ7/i8i

13-26, 1983/84.

Potencial de membrana, potenciais de placa terminal em miniatura

(pp.p.t.m.), despolarização pelo carbacol — O potencial de membrana das

fibras musculares do diafragma não se alterou pela adição da peçonha (10

ixg/ml) ao banho (tabela II), mesmo após a ocorrência do bloqueio neuro¬

muscular. Nas experiências, por exemplo, cujos resultados se encontram na

tab. II, bloqueio completo se deu em 75 minutos na primeira, 80 minutos

na segunda e 90 minutos na terceira.

A frequência dos pp.p.t.m aumentou consideravelmente a partir dos 10 a

15 minutos da adição de 5 pg/ml de peçonha ao banho, atingindo, em geral,

um máximo em torno dos 40 minutos (fig. 3). Esse aumento variou de 406,0%

a 3.176,0% nas quatro experiências realizadas. Apareceram também potenciais

de amplitude consideravelmente maior do que a dos anteriores à adição da

peçonha ao banho (fig. 4). Após 50 a 60 minutos a amplitude do pp.p.t.m.,

começou a diminuir (fig. 3); desapareceram, regra geral, dentro de 70 a 80

minutos. A tetrodotoxina, em doses que inibiram as respostas do diafragma à

estimulação indireta, não alterou os efeitos acima descritos da peçonha sobre

os pp.p.t.m. Na dose de 10 vig/ml a peçonha provocou desaparecimento rápido

dos pp.p.t.m.

Fig. 3 — Potenciais de placa terminal em miniatura antes (I) e após 20 (II), 40 (III) e

60 (IV) minutos da adição de 5 /xg/ml de peçonha de Aí. corallinus ao banho.

SciELO

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BRAZIL, 0. V. & FONTANA, M. D. Ações pré-juncionais e pós-juncoonais da peçonha da

cobra coral Micrurus corallinus na junção neuromuocular. Mem. Irtst, Buiantan, 47/48:

13-26, 1983/84.

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SciELO

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SciELOi'o

BRAZIL, 0. V. & FONTANA, M. D. Ações pré-juncionais e pós-juncoonais da peçonha da

cobra coral Micnirus corallinus na junção neuromuocular. Mem. Inst. Buiantan, J,7/A8\

13-26, 1983/84.

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i SciELO

BRAZIL, O. V. & FONTANA, M. D. Ações pré-juncionais e pós-juncoonais da peçonha da

cobra coral Micrurus corallinus na junção neuromuocular. Mem. Inst, Buiantan, J,7/i8-.

13-26, 1983/84.

Efeito da neostigmina no bloqueio neuromuscular causado pela peçonha

de Micrurus corallinus — Na vigência de bloqueio parcial produzido pela

peçonha de M. corallinus, a administração por via venosa de neostigmina (0,1

mg/kg do metilsulfato após 0,1 a 0,2 mg/kg de sulfato de atropina) causou

apenas pequeno efeito sobre a tensão das respostas do músculo tibial anterior

à excitação indireta (Fig. 5, Tab. IV). O bloqueio que era de 64 ± 7,5%

(média de sete experiências ± erro padrão) no momento da injeção de neos¬

tigmina reduziu-se para 54 ± 6,5% após o pleno efeito da neostigmina.

A+r.

I 1

Fig. 5 — Efeito da neostigmina no bloqueio produzido pela peçonha de Micrurus corallinus

na preparação nervo ciático-músculo tibial anterior in situ de cão; A. antes da

injeção intramuscular de 0,5 mg/kg da peçonha, B. 90 min. após. Atr. 0,2 mg/kg

de sulfato de atropina i.v., Neo 0,1 mg/kg de metilsulfato de neostigmina i.v. Esti¬

mulação do ciático popliteo externo com pulsos supramaximais de 0,5 Hz e 0,2 mseg.

SciELO

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BRAZIL, O. V. & FONTANA, M. D. Ações pré-juncionais e pós-juncoonais da peçonha da

cobra coral Micrurus corallinus na junção neuromuocular. A/em. Inst. Buiantan, Í7li8:

13-26, 1983/84.

TABELA IV

Efeito da neostigmina no bloqueio produzido pela peçonha de Micrurus corallinus

em cães (preparação in situ nervo ciãtico-músculo tibial anterior)

Exp.

Dose de peçonha

(i.m.) mg/kg

% de bloqueio

Imediatamente antes Após a administração

da administração de de neostigmina (metil-

neostigmina sulfato, 0,1 (mg/kg)

0,8

88,4

(90 min.)

71,1

0,5

77,7

(90 min.)

73,3

0,5

75,0

(120 min.)

55,0

0,3

58,8

(240 min.)

47,0

0,3

27,7

(180 min.)

22,2

0,3

54,1

(215 min.)

50,0

0,3

66,6

(223 min.)

58,3

DISCUSSÃO

Verificou-se, na presente pesquisa, que, imediatamente após o bloqueio

produzido pela peçonha de M. corallinus na preparação nervo frênico-diafragma

de rato, a liberação espontânea de ACh achava-se extraordinariamente aumen¬

tada enquanto a causada pela estimulação elétrica do nervo frênico cncontrava-

-se muito diminuída. O resultado destas experiências demonstra, portanto, que

a peçonha exerce ação pré-sináptica e sugere que é ela a principal causa do

bloqueio. Reforça esta última hipótese, o fato de ser irreversível o bloqueio

provocado pela peçonha na preparação nervo frênico-diafragma enquanto são

prontamente reversíveis as suas ações pós-sinápticas: inibição reversível da

contratura causada pela ACh no hemidiafragma cronicamente desnervado e da

despolarização pelo carbacol nas regiões de placas terminais de fibras do

diafragma inervado. Caso a ação pós-sináptica da peçonha participasse de modo

relevante na gênese do bloqueio, deveria ser este, pelo menos, parcialmente

reversível. O estudo do efeito da peçonha sobre os pp.p.t.m. confirma plena¬

mente sua ação pré-sináptica (aumento da freqüência dos pp.p.t.m.) e, também,

a sua ação pós-sináptica (redução da amplitude dos pp.p.t.m.). Por outro lado,

a peçonha de M. corallinus não altera o potencial de membrana das fibras

musculares como o faz, por exemplo, a de M. fulvius (Weiss & Mac-Issaac,

1971). Não altera também a excitabilidade muscular mesmo em doses elevadas

(20 iJ.g/ml). Não deve conter, pois, componentes miotóxicos.

SciELO

10 11 12 13 14 15

BRAZIL, 0. V. & FONTANA, M. D. Ações pré-juncionais e pós-juncoonais da peçonha da

cobra coral Micrurus corallinus na junção neuromuocular. Mem. Inst. Buiantan, 47/4S:

13-26, 1983/84.

Poder-se-ia supor que a mesma ou as mesmas neurotoxinas da peçonha

de M. corallinus exercessem as ações pré e pós-sinápticas acima referidas. Esta

hipótese pode ser, entretanto, facilmente afastada. A ação pré-sináptica é, como

vimos, irreversível enquanto a pós-sináptica mostrou-se reversível. É pouco

provável que uma mesma neurotoxina combine-se reversivelmente com os

receptores para a acetilcolina da placa terminal e, ao mesmo tempo, atue

irreversivelmente nas terminações nervosas. Sabe-se, por outro lado, que algu¬

mas peçonhas elapídicas tais como a da Bungarus multicinctus de Formosa

(Chang & Lee, 1963) e a de Notechis scutatus da Austrália (Karlsson et al,

1972, Datyner e Gage, 1973, Harris et al, 1973) encerram neurotoxinas de

ação pré-sináptica ao lado das de ação pós-sináptica, as quais, segundo parece,

encontram-se em todas ou quase todas as peçonhas de serpentes pertencentes

a essa família. Esses fatos permitem-nos afirmar que a peçonha de M. coral¬

linus contém neurotoxinas de ação farmacológica distinta: uma ou umas atuam

nas terminações nervosas, outra ou outras fixam-se reversivelmente nos recep¬

tores colinérgicos de placa terminal.

A investigação do efeito da neostigmina no bloqueio produzido pela peço¬

nha de M. corallinus, realizada na preparação nervo ciático-músculo tibial

anterior de cão, mostrou que, na vigência do bloqueio parcial causado pela

peçonha, a droga anticolinesterásica provoca apenas ligeiro aumento das res¬

postas do músculo à excitação indireta. Este resultado contrasta com o obtido

na pesquisa do efeito antagônico da neostigmina no bloqueio produzido pela

peçonha de M. frontalis (Vital Brazil et al., 1976/1977). Pode-se inferir, pois,

que a ação pré-sináptica da peçonha de M. corallinus deve preponderar sobre

a pós-sináptica na gênese do bloqueio neuromuscular que induz no cão. A ação

pós-sináptica desta peçonha é, com efeito, prontamente reversível mesmo no

diafragma cronicamente desnervado de rato em que a de M. frontalis é irre¬

versível. Portanto, se o bloqueio decorresse preponderantemente da ação pós-

-sináptica, a neostigmina deveria causar efeito antagônico acentuado. A neos¬

tigmina, em virtude de sua ação no bloqueio da transmissão neuromuscular

produzida pela peçonha de M. frontalis, é eficaz no tratamento do envenena¬

mento experimental, era cães, causado pelo veneno desta espécie de cobra

coral (Vital Brazil et al, 1976/1977). Deve-se, portanto, esperar igual eficácia

no tratamento dos acidentes provocados pela M. frontalis no homem. Os resul¬

tados da presente pesquisa mostram, por outro lado, que pequeno ou nenhum

benefício é de se esperar de administração de neostigmina em casos de aci¬

dentes pela M. corallinus. Deve-se, entretanto, ter presente que, na gênese do

bloqueio, há a possibilidade de a ação preponderante ser a pós-sináptica em

peçonha de serpentes dessa espécie, de certas regiões, dada a extensão de sua

distribuição geográfica na América do Sul.

ABSTRACT: The actions exerted at thc neuromuscular junctioa

and the muscle fibre membrane by the venom of Micrurus corallinus,

a coral snake species of large distribution in Brazil, were studied

in the isolated rat phrenic nerve-diaphra^ preparation and the

isolated and chronically denervated rat hemidiaphragm. It was found

that the venom produces an irreverslble neuromuscular blockade,

reduces the evoked acetylcholine release and increases the sponta-

neous one. The responses of the denervated hemidiaphragm produced

by acetylcholine were reversibly blocked by the venom. It did not

alter either the resting membrane potential or the muscle fibre

membrane excitability of the rat diaphragm. Miniature end-plate

potential frequency was greatly increased by low concentrations of

1 SciELO

BEAZIL, 0. V. & FONTANA, M. D. Ações pré-juncionais e pós-juncoonais da peçonha da

cobra coral Mierurus corallinus na junção ncuromuocular. Mem. Inst. Buiantan, i7/iS:

13-26, 1983/84.

the venom. Their amplitude was at first increased but later on

decreased. The venom at last blocked the ni.e.p.ps. Depolarization

induced bv carbachol at the end-plate region of the diaphragm waa

reversibly blocked by the venom. It is concluded that M. corallinus

venom exerts both presinaptic and postsynaptic actions, being devoid

of myotoxic properties. The irreversible presynaptic action and the

reversible postsynaptic action must be ascribed to two different

venom neurotoxins: presynaptic neurotoxin(s) and postsynaptic

neurotoxin(s). The effect of neostigmine on the neuromuscular

blockade induce by M. corallinus venom was investigated in the dog

sciatic nerve-tibialis anterior muscle preparation, neostigmine being

i.v. injected when there was a partial (64 ± 7.5%, mean of seven

experiments zt S.E.M.) neuromuscular block. The antagonistic effect

was very poor (64 ± 6.6% blockade after neostigmine administr-

ation). This result suggests that the venom presynaptic action is

the main cause of the blockade.

KEYWORDS: Neuromuscular junction; coral snake venom; pre¬

synaptic action; postsynaptic action; acetylcholine; neostigmine.

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Recebido para publicação em 26/07/1983 e aceito era 07/08/1984.

2 3

5 6

11 12 13 14 15

Mem. Inst. Butantan

47/^8:27-32, 1983/84

AVALIAÇÃO DA ATIVIDADE TÓXICA DO VENENO DE

PHONEUTRIA NIGRIVENTER EM TERMOS DE DL^q

E TITULAÇÃO DO ANTIVENENO EM CAMUNDONGOS

Regina Maria Barretto CICARELLI * ** ***

Medardo SILES VILLARROEL ■"*

Raymundo ROLIM ROSA

RESUMO: A toxicidade do veneno de Phoneutria nigriventer é

determinada em camundongos, através de inoculações iijtravenosa e

intraperitoneal. Seguindo a mesma metodologia, avalia-se a capaci¬

dade neutralizante do antiveneno aracnídico polivalente, fração anti-

veneno de Phoneutria, por inoculação intravenosa em camundongo.

Os resultados sugerem que a metodologia proposta, apresenta-se

como técnica prática, econômica e reprodutível para a titulação do

veneno e antiveneno estudados.

PALAVRAS-CHAVE: veneno de Pho7ieutria nigriventer-, antive¬

neno aracnídico.

INTRODUÇÃO

As aranhas do gênero Phoneutria Perty, 1833 pertencem à família Ctenidae,

subfamília Phoneuíriinae Bücherl, 1969. São conhecidas popularmente com o

nome de “aranhas-armadeiras”. Seu veneno é bastante ativo e de propriedades

neurotóxicas semelhantes às do veneno da serpente Crotalus durissus terri-

ficus

Brazil & Vellard^'2 (1925, 1926) fizeram experiências com os venenos de

Phoneutria fera e Phoneutria nigriventer (denominadas por eles de Ctenus fera

e Ctenus nigriventer, respectivamente), concluindo que os mesmos são dotados

de ação neurotóxica, porém destituídos de ação local. Determinaram a Dose

Mínima Mortal (DMM em cobaias, camundongos e coelhos, bem como prepa¬

raram, pela primeira vez, o soro antictênico específico, titulando-o em coelhos

de 1 kg de peso, em termos de neutralização da DMM do veneno).

* Professora Assistente do Departamento de Imunologia do Instituto de Ciências Biomédicas

da USP.

** Professor Livre Docente do Departamento de Imunologia do Instituto de Ciências Bio¬

médicas da USP.

*** Diretor do Serviço de Imunologia do Instituto Butantan e Professor Assistente Doutor

do Departamento de Imunologia do Instituto de Ciências Biomédicas da USP.

Endereço para correspondência: Departamento de Imunologia — Edifício Biomédicas III —

Cidade Universitária — CEP 05508 — São Paulo-SP.

SciELO

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CICARELLI, E. M. B.; SILES VILLARROEL, M.; ROLIM ROSA, R. Avaliação da atividade

tóxica do veneno de Phoneutria nigriventer em termos de DL^q e titulação do antiveneno

em camundongos. Mem. Inst. Butantan, J,7/1,8-.21 1983/84.

Na atualidade, a atividade tóxiea do veneno de Phoneutria e a capacidade

neutralizante da fração de antiveneno de Phoneutria no soro antiaracnídico

polivalente são determinadas não mais em coelhos, mas em cobaias de 350

a 400 g, que recebem inoculações das misturas por via subcutânea e são

observadas durante 48 horas.

No presente trabalho, os autores se propõem a determinar a atividade

tóxica desse veneno, extraído por estímulo elétrico, em termos de DL. 50 , utili¬

zando as vias intravenosa e intraperitoneal em camundongos e, além disso,

verificar a possibilidade de utilização da via intravenosa de camundongos para

doseamento da fração antiveneno de Phoneutria do soro antiaracnídico poli¬

valente.

MATERIAL E MÉTODOS

Veneno utilizado *

Os venenos de Phoneutria nigriventer Perty, 1833 foram extraídos por

estimulação elétrica e dessecados a vácuo, segundo a técnica de Bücherl ^

(1953).

Antiveneno aracnídico polivalente “

No soro antiaracnídico (antiaranêico e antiescorpiônico) a fração antiara-

nêica foi obtida pela hiperimunização de cavalos com mistura imunogênica

constituída por triturado de cefalotórax de Loxosceles e Lycosa e com veneno

obtido por estímulo elétrico de Phoneutria. A fração antiescorpiônica foi obtida

pela hiperimunização de cavalos com venenos obtidos por estímulo elétrico

de espécimes dos gêneros Tityus.

O antiveneno foi purificado e concentrado pelo método de Pope® (1938)

e Pope® (1939), modificado por Eurlanetto ® (1961).

Os títulos do soro apresentados na fração aranêica eram os seguintes:

1 ml de soro neutralizava 10 DMN do veneno loxoscélico, 1,5 DMM do

veneno de Phoneutria e 15 DMN do veneno licósico.

Animais utilizados

Poram utilizados camundongos brancos (Mus musculus Linnaeus, 1758),

de ambos os sexos, pesando 20g ± 2g. Estes animais receberam inoculações

pelas vias intravenosa (IV) ou intraperitoneal (IP), no volume de 0,5 ml.

Foram utilizados lotes de 6 camundongos por dose que, após as inoculações,

foram observados por um período máximo de 48 horas, com leituras parciais

aos 30 e 60 minutos e 24 horas.

Determinação da DL r>n do veneno

Foi realizada de acordo com o método de Kârber ’ (1931).

Doseamento do antiveneno

Na avaliação da potência do antiveneno foi mantido constante o volume

do imunossoro diluído a 1/2, variando as doses do veneno.

* Fornecido pelo Instituto Butantan.

i SciELO

CICARELLI, R. M. B.; SILES VILLARROEL, M.; ROLIM ROSA, R. Avaliação da atividade

tóxica do veneno de Phoneutria nigriventer em termos de I>L 5 q e titulação do antiveneno

em camundongos. Mem. Inst. Butantan, 47/45:27-32, 1983/84.

A mistura veneno-antiveneno, após incubação a 37°C por 30 minutos, foi

inoculada nos camundongos.

Os resultados foram expressos em termos de mg e de DLr,o de veneno

neutralizado por 1 ml de antiveneno, baseando-se na técnica experimental

utilizada por Siles VillarroeP^ (1977), Siles Villarroel e cols. (1978/9 e

Siles Villarroel e cols. (1978/9), no estudo de antivenenos botrópicos.

RESULTADOS

As tabelas 1 e 2 apresentam os resultados da determinação da DL 50 do

veneno de P. nigriventer inoculado pela via IV e pela via IP, respectivamente.

TABELA 1

Determinação da DL.™ do veneno de P. nigriventer, inoculado pela via intravenosa

em camundongos

Tempos de

observação

Doses

em microgramas

5,00

7,50

11,25

16,87

25,31

37,97

DLcü

30 minutos

0/6

1/6

4/6

6/6

GO minutos

0/6

3/6

5/6

—

24 horas

0/6

3/6

5/6

—

11,50 gg

48 horas

0/6

3/6

5/6

—

11,50 Mg

TABELA 2

Determinação da DL-,» do veneno de P. nigriventer, inoculado pela via intraperitoneal

em camundongos

Tempos de

observação

Doses em microgramas

10,0

20,0

40,0

80,0

160,0

DLgo

30 minutos

0/6

60 minutos

0/6

2/6

3/6

6/6

24 horas

0/6

2/6

4/6

6/6

—

28,29 gg

48 horas

0/6

2/6

4/6

—

28,29 gg

SciELO

10 11 12 13 14 15 16

CICARELLI, R. M. B.; SILES VILLARROEL, M.; ROLIM ROSA, R. Avaliação da atividade

tóxica do veneno de Phoneutria nigriventer em termos de e titulação do antiveneno

em camundongos. Mem. Inst. Butantan, í7/4d:27-32, 1983/84.

A tabela 3 apresenta os resultados dos ensaios para a determinação do

título neutralizante do imunossoro específico, através da via IV.

TABELA 3

Doseamento do antiveneno aracnidico, colocado frente ao veneno de P. nigriventer

e inoculado pela via intravenosa em camundongos

Veneno de

P. nigriventer

(DLr,„ = 11,B0 Jiig)

Solução

salina

Antiveneno

aracnidico

Incubação

Tempos de observação

24 h

48 h

0,05

0,20

0,25

37°C

0/6*

0,10

0,15

0,25

6/6

0,15

0,10

0,25

6/6

—

0,20

0,05

0,25

30 min

6/6

—

* Título: 1 ml de antiveneno aracnidico neutraliza 0,40 mg ou 34,78 DLso do veneno

de P. nigriventer

DISCUSSÃO

O uso de camundongos que sofreram inoculações intravenosa e intraperi-

toneal possibilitou a determinação da DLbo do veneno de P. nigriventer que,

em dois experimentos, demonstrou repròdutibilidade satisfatória.

Apesar da ocorrência de mortes após 30 e 60 minutos, as mesmas não

interferiram na regularidade das mortes observadas em função do aumento

das doses. Em ambos os ensaios, foi possível determinar .satisfatoriamente a

DLso, tanto pela via intravenosa (11,50 ng em 48: horas) como pela via intra-

peritoneal (28,29 ng em 48 horas). Observamos, também, que os animais apre¬

sentaram uma sensibilidade maior ao veneno quando este foi inoculado pela

via intravenosa.

Nossos resultados mostraram-se diferentes daqueles obtidos por Bücherl ®

(1953, 1956), que obteve uma DLso de 7 ixg por via intravenosa, enquanto

que, para a via subcutânea, foi de 14 (ig. Essa diferença pode ser compreen¬

dida quando se leva em consideração a metodologia de obtenção dos venenos,

a época de extração do veneno e, também, a idade e o estado nutricional dos

espécimes, fatores esses que podem alterar a atividade do veneno.

Até 0 presente momento, não existem normas ou padrões para a deter¬

minação da atividade tóxica desse veneno. Atualmente, a sua titulação vem

sendo realizada em termos de Dose Mínima Mortal (DMM) por inoculação

subcutânea em cobaias de 350 a 400 g de peso e observadas por 48 horas.

Esse método exige um consumo maior de veneno e utilização de animais de

maior custo, tornando-se antieconômico quando cotejado como a determinação

da DL Bo.

i SciELO

CICARELLI, E. M. B.; SILES VILLARROEL, M.; ROLIM ROSA, R. Avaliação da atividade

tóxica do veneno de Phoneutria nigriventer em termos de e titulação do antiveneno

em camundongos. Mem. Inst. Butantan, 47/48:27-32, 1983/84.

Com relação ao doseamento do soro antiaracnídico (fração antiveneno

de Phoneutria) o mesmo raciocínio anterior é válido.

CONCLUSÕES

1. A atividade tóxica do veneno de Phoneutria nigriventer pode ser

convenientemente padronizada em termos de DL 50 , para as vias intravenosa

e intraperitoneal de camundongos;

2 . o antiveneno aracnídico polivalente pode ser titulado satisfatoriamente

pela inoculação intravenosa da mistura veneno-antiveneno, cujo resultado seria

finalmente expresso em mg ou número de DL 50 de veneno, neutralizado por

ml do antiveneno.

ABSTRACT: Toxicity of Phoneutria nigriventer venom in mice is

determined throug-h intravenous and intraperitoneal inoculations.

According to the same methodology the neutralization capacity of

the fraction of Phoneutria spider polyvalent antivenin is value,

through intravenous inoculation in in mice. The results seem suggest

that for the venom and antivenin titration, the methodology used is

practical, economic and reproducible.

KEYWORDS: Phoneutria nigriventer venom, spider antivenin.

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SILES VILLARROEL, M.; ROLIM ROSA, R.; ZELANTE, F.; GUIDOLIN, R.

Evidenciação em camundongos da soroneutralização paraespecifica entre venenos

e antivenenos botrópicos. Mem. Inst. Butantan, 42/43:337-44, 1978/9.

Recebido para publicação em 14/10/1983 e aceito em 12/06/1984.

2 3

5 SciELO ;lo 11 12 13 14 15

Mem. Inst. Butantan

47/4«:33-43, 1983/84

ESTUDO IMUNOQUÍMICO DOS VENENOS ARANÊICOS

DAS ESPÉCIES LOXOSCELES GAÚCHO, PHONEUTRIA

NIGRIVENTER E LYCOS A ERYTHROGNATHA

Regina Maria Barretto CICARELLI *

Medardo SILES VILLARROEL **

Rosalvo GUIDOLIN ***

Ornar CRIVELLARO *•**

RESUMO: Os autores estudam o comportamento eletroforético e

imunoquímico dos venenos das espécies Loxosceles gaúcho, Phoneu-

tria nigriventer e Lycosa erythrognatha.

Através da técnica de eletroforese em gel de poliacrilamida, demons¬

tram a presença de onze frações no veneno de Loxosceles gaúcho e

8 frações nos venenos de Phoneutria nigriventer e de Lycosa ery-

trognatha, verificando que os três venenos têm comportamento

eletroforético distinto.

Utilizando as reações de imunodifusâo e imunoeletroforese em gel

de ágar, pode-se determinar o número de componentes imunogênicos

específicos e paraespecíficos dos venenos. A imunoeletroforese mos¬

tra-se mais adequada na caracterização desses componentes.

Verificam, ainda, a ocorrência de soroneutralização cruzada “in

vivo” e “in vitro” entre o antiveneno loxoscélico e os venenos de

P. nigriventer e L. erythrognatha.

PALAVRAS CHAVE; eletroforese em gel de poliacrilamida; imu-

nodifusão e imunoeletroforese; venenos aranêicos.

INTRODUÇÃO

Os venenos das espécies Loxosceles gaúcho, Phoneutria nigriventer e

Lycosa erythrognatha * foram pouco estudados quanto a seus aspectos imuno-

* Professora Assistente do Departamento de Iniunologia do Instituto de Ciências Bio-

médicas da USP.

** Professor Livre-Docente do Departamento de Imunologia do Instituto de Ciências Bio-

médicas da USP.'

*** Professor Colaborador do Departamento de Imunologia do Instituto de Ciências Bio-

médicas da USP.

*** Professor Assistente Doutor do Departamento de Bioquímica do Instituto de Química

da USP.

Endereço para correspondência: Departamento de Imunologia Edifício Biomédicas III —

Cidade Universitária — CEP 05508 — São Paulo — SP.

* Essa espécie pode ser também encontrada nos Catálogos com o nome de Scaptocosa raptaria.

SciELO

10 11 12 13 14 15 16

CICARELLI, R. M. B.; SILES VILLARROEL, M.; GUIDOLIN, R. & CRIVELLARO, O.

Estudo imunoquímico dos venenos aranêicos das espécies Loxosceles gaúcho, Phoneutria

nigriventer e Lâcosa erythrognatha. Mem. Inst. Butantan, 47'/4S:33-43, 1983/84.

químicos. Raros são os trabalhos que contêm informes a respeito do número

de frações que os compõem, e pequeno é o número de publicações referentes

aos seus componentes imunogênicos. No que concerne a estudos sobre eletro¬

forese em gel de poliacrilamida, praticamente inexistem informes que se refi¬

ram aos venenos por nós estudados.

Com relação aos componentes imunogênicos do veneno Loxosceles, Smith

& Micks^* (1968) trabalharam com os venenos das espécies L. laeta, L. reclusa

e L. rujescens e com o antiveneno loxoscélico preparado pelo Instituto Butan¬

tan. Encontraram dois componentes imunogênicos com identidade total nas três

espécies e três componentes idênticos entre L. reclusa e L. rujescens. Os mes¬

mos autores verificaram, através de eletroforese, que os três venenos são dis¬

tintos entre si. Furlanetto'' (1961) fez observações sobre a composição imu-

nogênica do veneno loxoscélico em função de seu antiveneno, por imunodifusão

em gel, bem como estudou comparativamente, por esta técnica, os venenos de

Lycosa sp. e Phoneutria sp. Assim, identificou quatro componentes imunogê¬

nicos no veneno de Loxosceles e sugeriu a inexistência de imunidade cruzada,

tanto “in vivo” como “in vitro”, entre o soro antiloxoscélico por ele preparado

e os venenos de Lycosa sp. e Phoneutria sp.

Selecionamos alguns trabalhos sobre eletroforese em gel de poliacrilamida

apenas como fonte de informações a respeito da diversidade de obtenção dos

venenos, e metodologia empregada; esses trabalhos referem-se aos venenos das

espécies L. reclusa, L. laeta e Latrodectus mactans

Quanto ao veneno de Phoneutria, Schenberg & Pereira Lima^^ (1966)

estudaram o efeito de 14 determinantes antigênicos do veneno fracionado de

P. fera, em cães, cobaias, camundongos, ratos e coelhos. Barrio ^ (1955), por

eletroforese em papel, identificou duas frações. Fisher & Bõhn® (1957) e

Diniz ® (1963), por eletroforese e cromatografia em papel, evidenciaram quatro

frações, enquanto Pereira Lima & Schenberg^® (1963), por eletroforese em

acetato de celulose, distinguiram nove frações no veneno.

Em relação ao veneno licósico, encontramos apenas os trabalhos de Fisher

& Bõhn ® (1957) e Diniz ^ (1963), que realizaram eletroforese e cromatografia

em papel, analisando seus componentes ativos e verificando a presença de

quatro frações.

Para elucidar melhor esses aspectos, o nosso trabalho tem por objetivos

estudar, com os três venenos aranêicos obtidos por estímulo elétrico, os

seguintes:

1 — o comportamento eletroforético em gel de poliacrilamida;

2 — as suas frações imunogênicas, através da imunodifusão e imunoeletroforese

em gel de ágar;

3 — a soroneutralização cruzada entre o antiveneno loxoscélico e os venenos

de P. nigriventer e de L. erythrognatha, “in vivo” e “in vitro”.

MATERIAL E MÉTODOS

Venenos utilizados

Os venenos utilizados das três espécies de aranhas foram extraídos por

estímulo elétrico e foram fornecidos * sob a forma dessecada.

As soluções de venenos foram preparadas a 2% em salina.

SciELO

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CICARELLI, R. M. B.; SILES VILLARROEL, M.; GUIDOLIN, R. & CRIVELLARO, O.

Estudo imunoquímico dos venenos aranêicos das espécies Loxosceles gaúcho, Phoneutria

nigriventer e hâcosa erythrognatha, Mem. Inst. Butantan, ^7/^5:33-43, 1983/84.

Antivenenos específicos e paraespecíficos *

Os soros antiloxoscélico monovalente e antiaracnídico polivalente foram

usados não-diluídos nas reações de imunodifusão e imunoeletroforese.

Eletroforese em gel de poliacrilamida

Esta técnica foi conduzida segundo o método de Davis ^ (1964).

Determinação de proteína total dos venenos

Foi realizada segundo o método proposto por Spector^® (1978), utilizando

como reagente o Coomassie Blue G e, como padrão de referência, a soroalbu-

mina bovina (BSA). Para as determinações espectrofotométricas, foi utilizado

o espectrofotômetro Gilford, em 595 nm de absorbância. Optamos por esse

método porque os nossos ensaios preliminares, realizados com os métodos de

Lowry, Biureto, Biureto UV e Büchner, não foram reprodutíveis.

Para todas as corridas eletroforéticas, utilizamos soluções de veneno a

1%, sendo que para o veneno de Loxosceles gaúcho, aplicamos no gel 40 i^l

(456,4 jig de proteína), para o de Phoneutria nigriventer, 50 }^1 (553,5

[Tg de proteína) e, para o de Lycosa erythrognatha, 50 p.1 (286,5 [rg de proteína).

Imunodifusão em gel de âgar

Para a realização desta prova, baseamo-nos na técnica original de Ouch-

terlony” (1948) e Ouchterlony “ (1949), com modificações introduzidas por

Siles Villarroepa (1972), Siles Villarroel e cols.^® (1974) e Siles Villarroel e

cols.2i (1976/7).

Imunoeletroforese em gel de ágar

Seguimos as técnicas de Grabar & Williams® (1953) e Grabar & Wil¬

liams^® (1955), com as modificações propostas por Ferri & Còssermelli^ (1964),

relativas à aparelhagem e técnicas necessárias à adoção do micrométodo por

nós utilizado.

Reações de soroneutralização cruzada "in vivo”

Em tais experimentos, utilizamos lotes de seis camundongos (Mus musculus

Linnaeus, 1738), pesando 20 ± 2 g, que receberam inoculações intravenosas

da mistura veneno-antiveneno, previamente incubada por 30 minutos a 37°C.

O antiveneno utilizado foi o loxoscélico monovalente e os venenos foram o

de P. nigriventer e de L. erythrognatha. Os resultados foram expressos em

tng ou DL so de veneno paraespecífico neutralizado por ml de antiveneno

loxoscélico.

RESULTADOS

A tabela 1 e as figuras de 1 a 3 mostram, respectivamente, o número de

frações eletroforéticas que constituem os venenos e os eletroferogramas dos

venenos estudados.

* Fornecidos pelo Instituto Butantan.

1 SciELO

CICARELLI, R. M. B.; SILES VILLARROEL, M.; GUIDOLIN, R. & CRIVELLARO, O.

Estudo imunoquímico dos venenos aranêicos das espécies Loxoaceles gaúcho, Phoneutria,

nigriventer e Lâcosa erythrognatha. Mem. Inst. Butantan, 1983/84.

TABELA 1

Comportamento eletroforético, em EGP, dos três venenos aranêicos

Venenos

N.° de frações

Loxosceles gaúcho

Phoneutria nigriventer

Lycosa erythrognatha

Fig. 1 — Eletroferograma do veneno de Loxoscelea gaúcho

CICARELLI, R. M. B.; SILES VILLARROEL, M.; GUIDOLIN, R. & CRIVELLARO, O.

Estudo imunoquímico dos venenos aranêicos das espécies Loxosceles gaúcho, Phoneutria

nigriventer e Lãcosa erythrognatha. Mem. Inst. Butantan, 47/^5:33-43, 1983/84.

Fig. 2 — Eletroferograma do veneno de Phoneutria nigriventer

Pig. 3 — Eletroferograma do veneno de Lycosa erythrognatha

CICARELLI, R. M. B.; SILES VILLARROEL, M.; GUIDOLIN, R. & CRIVELLARO, O.

Estudo imunoquímico dos venenos aranêicos das espécies Loxosceles gaúcho, Phoneutria

nigriventer e Lãcosa erythrognatha. Mem. Inst. Butantan, i7/JÍ8:Z3-i3, 1983/84.

Os tabelas 2 e 3 apresentam o número de linhas de precipitação obtidas

pela reação entre o antiveneno loxoscélico e os venenos de L. gaúcho, P.

nigriventer e L. erythrognatha.

TABELA 2

Número de linhas de precipitação obtidas nas reações de dupla difusão em gel de

ágar entre o antiveneno loxoscélico e os venenos de L. gaúcho, P. nigriventer e

L. erythrognatha

Venenos

Número de

linhas

Identidade

Parcial

Ausência de

Identidade

Loxosceles gaúcho

■

. .

Phoneutria nigriventer

Lycosa erythrognatha

—

TABELA 3

Número de linhas de precipitação obtidas nas reações de imunoeletroforese entre o

antiveneno loxoscélico e os venenos de L. gaúcho, P. nigriventer e L. erythrognatha

Venenos

N.° de linhas

Loxosceles gaúcho

Phoneutria nigriventer

Lycosa erythrognatha

A tabela 4 mostra o número de linhas de precipitação obtidas pela reação

entre o antiveneno aracnídico e os três venenos.

TABELA 4

Número de linhas de precipitação obtidas nas reações de dupla difusão em gel de

ágar e na imunoeletroforese, entre o antiveneno aracnídico e os venenos de L. gaúcho,

P. nigriventer e L. erythrognatha

Venenos

N.° de linhas obtidas

na dupla difusão em

gel de ágar

N.° de linhas obtidas

na imunoeletroforese

Loxosceles gaúcho

Phoneutria nigriventer

Lycosa erythrognatha

SciELO

10 11 12 13 14 15

CICARELLI, R. M. B.; SILES VILLARROEL, M.; GUIDOLIN, R. & CRIVELLARO, O.

Estudo imunoquímico dos venenos aranêicos das espécies Loxosceles gaúcho, Phoneutria

nigriventer e Lâcosa erythrognatha. Mem. Inst. Butantan, í7/4S:33-43, 1983/84.

As tabelas 5 e 6 apresentam os resultados dos testes de soroneutralizações

cruzadas “in vivo”.

TABELA 5

Doseamento do antiveneno loxoscélico, colocado frente ao veneno de P. nigriventer

e inoculado pela via intravenosa em camundongos

Veneno de

P. nigriventer

(DLeo = 11,50 Mg)

Solução

salina

Antiveneno

loxoscélico

Incubação

Tempos de observação

24 h

48 h

0,00125

0,0125

0,2375

0,25

37°C

0/6

0,00250

0,0250

0,2250

0,25

0/6

0,00500

0,0500

0,2000

0,25

0/6

0,00750

0,0750

0,1750

0,25

0/6+

0/6*

0,01000

0,1000

0,1500

0,25

30 min

6/6

—

Título: 1 ml de antiveneno de Loxosceles gaúcho neutralizada 0,060 mg ou 5,22

DLm do veneno de P. nigriventer

TABELA 6

Doseamento do antiveneno loxoscélico, colocado frente ao veneno de L. erythrognatha

e inoculado pela via intravenosa em camundongos

Veneno de

L. erythrognatha

(DLw = 294,90 Mg)

Solução

salina

Antiveneno

loxoscélico

Incubação

Tempos de observação

24 h

48 h

0,040

0,0040

0,2460

0,25

37°C

0/6

0,080

0,0080

0,2420

0,25

0/6

0,160

0,0160

0,2340

0,25

0/6+

0,320

0,0320

0,2180

0,25

30 min

3/6

* Título: 1 ml de antiveneno de Loxosceles gaúcho neutraliza 1,28 mg ou 4,34 DLm

do veneno de L. erythrognatha

SciELO

10 11 12 13 14 15 16

CICAEELLI, E. M. B.; SILES VILLAEEOEL, M.; GUIDOLIN, E. & CEIVELLAEO, O.

Estudo imunoquímico dos venenos aranêicos das espécies Loxosceles gaúcho, Phoneutria

nigriventer e Lâcosa erythrognatka. Mem. Inst. Butantan, 47/45:33-43, 1983/84.

Para facilitar a análise dos resultados acima, apresentamos a tabela 7 que

resume os títulos encontrados.

TABELA 7

Resumo dos títulos obtidos com o antiveneno loxoscélico frente aos venenos das três

espécies de aranhas; os títulos neutralizantes estão expressos em mg/ml e apresentam

a correspondência em termos de DLw/ml

Títulos do antiveneno Títulos do antiveneno

loxoscélico (mg/ml) loxoscélico (DLEo/ml)

Venenos

Loxosceles gaúcho

Phoneutria nigriventer

Lycosa erythrognatha

1,60

0,06

1,28

244,27

5,22

4,34

DISCUSSÃO

Conforme os resultados constantes da tabela 1 e ilustrados pelas figuras,

caracterizamos onze frações no veneno loxoscélico, oito frações no veneno de

Phoneutria e oito frações no veneno licósico; os eletroferogramas apresentaram-

-se distintos entre si.

Alguns autores realizaram eletroforese em gel de poliacrilamida dos vene¬

nos de Loxosceles e encontraram um número de frações que

variou de cinco e treze, na dependência do tipo de extração do veneno e da

metodologia utilizada.

A falta de uniformidade na forma de extração do veneno empregado, a

diversidade de metodologia, bem como a utilização de espécies diferentes, não

permitiram uma comparação entre os resultados. O mesmo vale para os nossos

resultados com os venenos de P. nigriventer e L. erythrognatha.

Na reação de imunodifusão (tabela 2), verificamos a formação de duas

linhas de precipitação entre o antiveneno loxoscélico e o veneno de P. nigri¬

venter, sendo uma com identidade parcial e outra com ausência de identidade

em relação ao veneno loxoscélico. Estes resultados são idênticos àqueles obti¬

dos por Furlanetto(1961). Na reação entre o antiveneno e 0 veneno loxos¬

célico, cinco linhas de precipitação foram evidenciadas.

Em relação ao antiveneno loxoscélico e o veneno de L. erythrognatha,

constatamos a presença de apenas u’a linha de precipitação com identidade

parcial ao veneno loxoscélico. A positividade dessa reação cruzada, explica a

neutralização parcial também observada por nós (tabela 6).

Nas reações de imunoeletroforese entre o antiveneno loxoscélico e os três

venenos aranêicos (tabela 3), verificou-se a presença de onze linhas de preci¬

pitação com 0 venono loxoscélico, duas linhas com o veneno de P. nigriventer

e uma com o veneno de L. erythrognatha.

Conforme consta da tabela 4, foram evidenciadas cinco linhas de preci¬

pitação por imunodifusão em gel de ágar entre o antiveneno aracnídico e o

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CICARELLI, R. M. B.; SILES VILLARROEL, M.; GUIDOLIN, R. & CRIVELLARO, O.

Estudo imunoquímico dos venenos aranêicos das espécies Loxosceles gaúcho, Phoneutria

nigriventer e Lâcosa erythrognatha. Mem. Inst. Butantan, U7/U8-.ZZ-ÍZ, 1983/84.

veneno de Loxosceles gaúcho. Por outro lado, por imunoeletroforese, foi-nos

possível demonstrar onze linhas. O mesmo antiveneno, quando colocado frente

aos venenos de Phoneutria nigriventer e Lycosa erythrognatha, permitiu demons¬

trar seis e duas linhas de precipitação por imunodifusão e treze e quatro

linhas por imunoeletroforese, respectivamente.

Schenberg & Pereira Lima^^ (1960), realizando a imunoeletroforese em

gel de ágar do veneno de Phoneutria fera, obtido por estímulo elétrico, demons¬

traram 14 linhas de precipitação, resultado este que se assemelha àquele por

nós encontrado.

Pelos nossos resultados, conclui-se que a imunoeletroforese é mais ade¬

quada do que a imunodifusão em gel de ágar para a caracterização do número

de determinantes antigênicos, fato observado também por Siles VillarroeP^

(1972) e Siles Villarroel e cols.^^'^^ (1974 e 1976/7), com serpentes do gênero

botrópico.

CONCLUSÕES

1. A eletroforese em gel de poliacrilamida não só revela maior número

de frações do que o relatado na literatura, com outras técnicas, como também

permite distinguir claramente os três venenos estudados. Parece-nos, assim, ser

o método mais adequado para a separação dos diversos componentes desses

venenos;

2. através das reações de imunodifusão e, principalmente, de imunoele¬

troforese em gel de ágar, é possível determinar o número de componentes

antigênicos específicos e paraespecíficòs dos venenos estudados;

3. ocorre soroneutralização cruzada entre o antiveneno loxoscélico e os

venenos de Phoneutria nigriventer e de Lycosa erythrognatha "in vivo”, resul¬

tado este confirmado “in vitro” pelas técnicas imunoquímicas utilizadas.

ABSTRACT: The authors study the electrophoretic and immuno-

chemistry behaviour of the Loxosceles gaúcho, Phoneutria nigriventer

and Lycosa erythrognatha venoms. Through polyacrylamide gel

electrophoresis technic as showed, the presence of 11 fractions in

Loxosceles gaúcho venom and of 8 fractions in Phoneutria nigriven¬

ter and Lycosa erythrognatha venoms. By this way, they verify a

distinct electrophoretic behaviour between these venoms. More than

this, immunodiffusion and immunoelectrophoresis in agar gel

technics were utilized to determine, the number of specific and

nonspecific immunogenic components of the venoms. It was also

verifyed crossed “in vivo” and “in vitro” serum neutralization

between loxoscelic antivenin and P. nigriventer and L. erythrognatha

venoms.

KEYWORDS: polyacrylamide gel electrophoresis; immunoelectro¬

phoresis and immunodiffusion; spider venom.

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comparativa dos componentes antigênicos de seis espécies de veneno frente a

seus respectivos antivenenos, através das técnicas de dupla difusão e imunoele-

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Recebido para publicação em 14/10/1983 e aceito em 12/06/1984.

SciELO

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Mem. Inst. Butantan

Í7/Í8-AZ-5Z, 1983/84

AVALIAÇÃO DA ATIVIDADE TÓXICA DO VENENO DE

LOXOSCELES GAÚCHO EM TERMOS DE DL^q E

TITULAÇÃO DO ANTIVENENO ESPECÍFICO EM

CAMUNDONGOS

Regina Maria Barretto CICARELLI *

Medardo SILES VILLARROEL **

Flávio ZELANTE **'

RESUMO: Os autores demonstram que a atividade tóxica do veneno

de Loxosceles gaúcho pode ser determinada satisfatoriamente, em

termos de DLjg, através de inoculações intravenosa e intraperitoneal

em camundongos. A sensibilidade é maior quando o veneno é ino¬

culado intravenosamente. São testados três tipos de veneno: obtido

por estímulo elétrico, por trituração de cefalotórax e por trituração

de glândulas veneníferas. Na tentativa de padronização, seria reco¬

mendada a utilização do veneno extraído por estímulo elétrico.

É demonstrado, também, que a potência de neutralização do anti-

veneno específico pode e deve ser determinada, utilizando-se a via

intravenosa de camundongos, avaliando-se, assim, a atividade tóxica

geral do veneno e não apenas a sua atividade necrosante.

PALAVRAS CHAVE: veneno de Loxosceles gaúcho; antiveneno

aracnídico.

INTRODUÇÃO

O gênero Loxosceles Heinecken e Lowe, 1832 pertence à família Sicariidae,

também conhecida como Scytodidae, com espécies distribuídas nas zonas tro¬

pical, sub-tropical e temperada do mundo inteiro A toxicidade do

veneno de Loxosceles foi estudada por vários autores, principalmente em rela¬

ção à atividade necrosante local 26 . si, 39_

* Professora Assistente do Departamento de Imunologia do Instituto de Ciências Bio-

médicas da USP.

** Professor Livre Docente do Departamento de Imunologia do Instituto de Ciências Bio-

médicas da USP.

*** Professor Titular do Departamento de Microbiologia do Instituto de Ciências Bio-

médicas da USP.

Endereço para correspondência: Departamento de Imunologia — Edifício Biomédicas III —

Cidade Universitária — CEP 05508 — São Paulo — SP.

SciELO

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CICARELLI, R. M. B.; SILES VILLARROEL, M. & ZELANTE, F. Avaliação da atividade

tóxica do veneno de Loxosceles gaúcho em termos de e titulação do antiveneno

específico em camundongos. Mem. Inst. Butantan, 47/45:45-63, 1983/84.

Além de necrosante, o veneno é hemolítico, determinando hemoglobinúria,

hematúria e ictreícia, causando o quadro clínico conhecido como “araneísmo

cutâneo-íctero-hemolítico”, que pode ser agravado por um comprometimento

renal, evoluindo para anúria e, às vezes, morte

Conforme Furlanetto(1961), o acidente loxoscélico era confundido com

o licósico, que apresenta menor gravidade. Assim, muitos pesquisadores estran¬

geiros acreditavam que, no Brasil, o veneno de Lycosa apresentava caracterís¬

ticas diferentes dos encontrados em outros países, com espécies deste gênero.

A partir dessas observações, Furlanetto propôs-se a estudar a atividade do

veneno loxoscélico e preparar o soro específico, até então inexistente.

Alguns autores estudaram o veneno extraído de glândulas de Loxos¬

celes reclusa, a “aranha-marrom” da América do Norte, determinando a DL 6o

por via intraperitoneal em camundongos. Outros pesquisadores, como Schenone

e cols. (1970), usaram outras espécies animais para tal determinação.

Pelo exposto, verifica-se a necessidade de uma padronização para os estu¬

dos dos venenos e antivenenos desses animais peçonhentos. Os próprios infor¬

mes da Farmacopéia Brasileira'^ (1977), da Organização Panamericana da

Saúde (1977) e da Organização Mundial da Saúde (1981) são omissos nestes

particulares.

Até o presente, a atividade do veneno loxoscélico, bem como a titulação

do antiveneno específico são feitas em coelhos, em termos de Dose Mínima

Necrosante (DMN), não se encontrando na Farmacopéia Brasileira nenhuma

instrução normativa quanto à padronização de tais titulações.

Neste trabalho, os autores propõem-se a determinar a atividade tóxica

do veneno de Loxosceles gaúcho, em termos de DL 50, utilizando as vias intra¬

venosa e intraperitoneal, em camundongos, e verificar, também, a possibilidade

da utilização da via intravenosa de camundongos para o doseamento do anti¬

veneno específico.

MATERIAL E MÉTODOS

Venenos *

Os venenos de Loxosceles gaúcho Gertsch, 1967, foram extraídos por esti¬

mulação elétrica e por trituração de cefalotórax e de glândulas

Antiveneno loxoscélico *

Foi obtido através de hiperimunização de cavalos com antígenos do

trhurado de cefalotórax de L. gaúcho. O soro é purificado e concentrado pelo

método de Pope (1938) e Pope (1939), modificado por Furlanetto'® (1961).

O título do soro era de 15 Unidades Antinecrosantes (UAN) por 1 ml

de soro.

* Fornecidos pelo Instituto Butantan.

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CICARELLI, R. M. B.; SILES VILLARROEL, M. & ZELANTE, F. Avaliação da atividade

tóxica do veneno de Loxosceles gaúcho em termos de DLjg e titulação do antiveneno

específico em camundongos. Mem. hist. Butantan, i7/Jf8-.ih-hZ, 1983/84.

Animais

Foram utilizados, por dose, lotes de seis camundongos brancos (Mus

musculus Linnaeus, 1758), de ambos os sexos, pesando 20g ± 2g. Os animais

receberam inoculações pelas vias intravenosa (IV) ou intraperitoneal (IP), sem¬

pre com volume de 0,5 ml. Os animais foram observados por um período

máximo de 72 horas, com leituras parciais aos 30 e 60 minutos, 24 e 48 horas.

Cálculo da DLdo veneno

Realizada de acordo com o método de Kárber (1931).

Doseamento do antiveneno

Na avaliação da potência foi mantido constante o volume do imunessoro,

diluído a 1/2, variando a concentração do veneno. A mistura veneno-antive-

neno, após incubação a 37°C por 30 minutos, foi inoculada nos camundongos.

Os resultados foram expressos em termos de mg e de DL 50 de veneno

neutralizado por 1 ml de antiveneno, baseando-se na técnica utilizada por

Siles Villarroel “ (1977), Siles Villarroel e cols. (1978/9) e Siles Vilarroel

e cols. *(1978/9), no estudo de antivenenos botrópicos.

RESULTADOS

As tabelas 1 e 2 apresentam os resultados da determinação da DL 50 do

veneno obtido por estímulo elétrico, inoculado pela via intravenosa e pela

via intraperitoneal, respectivamente.

TABELA 1

Determinação da DJU» do veneno de L. gaúcho obtido por estímulo elétrico, inoculado

pela via intravenosa em camundongos

Tempos de

observação

Doses em microgramas

5,00

6,00

7,20

8,64

10,37

12,44

DLr,«

30 minutos

0/6

60 minutos

0/6

24 horas

0/6

1/6

2/6

3/6

10,33 Mg-

48 horas

0/6

1/6

2/6

4/6

5/6

8,35 Mg

72 horas

1/6

3/6

4/6

5/6

6/6

6,55 Mg

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CICARELLI, R. M. B.; SILES VILLARROEL, M. & ZELANTE, F. Avaliação da atividade

tóxica do veneno de Loxosceles gaúcho em termos de DLju e titulação do antiveneno

específico em camundongos. Mem. Inst. Butantan, 47/48:45-53, 1983/84.

TABELA 2

Determinação da DLc» do veneno de L. gaúcho obtido por estímulo elétrico, inoculado

pela via intraperitoneal em camundongos

Tempos de

observação

Doses

em microgramas

10,00

12,00

14,40

17,28

20,74

24,88

DLr.„

30 minutos

0/6

60 minutos

0/6

24 horas

0/6

1/6

2/6

4/6

6/6

16,76 gg

48 horas

1/6

4/6

5/6

6/6

13,97 Mg

72 horas

1/6

4/6

5/6

6/6

—

13,55 Mg

A tabela 3 mostra os resultados da determinação da DLso do veneno obtido

por trituração de cefalotórax, inoculado pela via intravenosa.

TABELA 3

Determinação da DLco do veneno obtido por trituração de cefalotórax de L. gaúcho,

inoculado pela via intravenosa em camundongos

Solução inicial de veneno de L. gaúcho diluído a 1:

observação

22,0

30,8

43,1

60,4

84,5

D Lm

30 minutos

0/6

60 minutos

0/6

24 horas

6/6

3/6

1/6

0/6

1/32,60*

48 horas

—

5/6

3/6

1/6

0/6

1/43,11*

72 horas

—

6/6

3/6

2/6

1/6

1/51,00*

* As diluições a 1/32,60, 1/43,11 e 1/51,00 equivalem, aproximadamente, a 7,67 p.g,

5,80 /ug e 4,90 /rg de veneno seco obtido por estímulo elétrico de L. gaúcho

A tabela 4 apresenta os resultados da determinação da DLso do veneno

obtido por trituração de glândulas veneníferas, inoculado pela via intra¬

venosa.

SciELO

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CICARELLI, R. M. B.; SILES VILLARROEL, M. & ZELANTE, F. Avaliação da atividade

tóxica do veneno de Loxosceles gaúcho em termos de e titulação do antiveneno

específico em camundongos. Mem. Inst. Butantan, 47/45:45-53, 1983/84.

TABELA 4

Determinação da DL™ do veneno obtido por trituração de glândulas veneníferas de

L. gaúcho, inoculado pela via intravenosa em camundongos

Tempos de

observação

Solução inicial

de veneno de L. gaúcho diluído

a 1:

22,0

30,8

43,1

60,4

84,6

DLso

30 minutos

0/6

60 minutos

0/6

24 horas

4/6

3/6

1/6

0/6

1/30,80*

48 horas

6/6

4/6

2/6

1/6

1/48,23*

72 horas

—

5/6

4/6

3/6

1/6

1/53,96*

* As diluições a 1/30,80, 1/48,23 e 1/63,96 equivalem, aproximadamente a 8,11 gg,

5,18 fj-g e 4,63 gg de veneno seco obtido por estímulo elétrico de L. gaúcho

Com o objetivo de facilitar uma análise global, incluimos a tabela 5, que

resume os valores das DL.'-,o dos três tipos de venenos presentemente estudados.

TABELA 5

Comparação dos resultados de toxicidade dos três tipos de venenos de L. gaúcho,

inoculados pela via intravenosa em camundongos

Amostra de veneno

D Lm, em gg

24 h

DLso em gg

48 h

D Lm em gg

72 h

Obtidas por estimulo elétrico ....

10,33

8,35

6,65

Obtidas por trituração do cefalo-

tórax.

7,67

5,80

4,90

Obtidas por trituração de glândulas

8,11

5,18

4,63

A tabela 6 apresenta os resultados dos ensaios para a determinação do

título neutralizante do imunessoro específico.

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CICARELLI, E. M. B.; SILES VILLARROEL, M. & ZELANTE, F, Avaliação da atividade

tóxica do veneno de Loxosceles gaúcho em termos de DEj-^ e titulação do antiveneno

específico em camundongos. Mem. Inst. Butantan, 47/48:45-53, 1983/84.

TABELA 6

Doseamento do antiveneno loxoscélico, colocado frente ao veneno específico e inoculado

pela via intravenosa em camundongos

Veneno de L. gauxho

(DLot = 6,65 /ig)

Solução

salina

Antiveneno

loxoscélico

Incubação

Tempos de observação

24 h

48 h

72 h

0,200

0,0400

0,2100

0,25

37°C

0/6

0/6*

0,240

0,0480

0,2020

0,25

0/6

4/6

6/6

0,288

0,0576

0,1924

0,25

6/6

—

0,346

0,0692

0,1808

0,25

6/6

—

0,416

0,0830

0,1670

0,25

30 min

6/6

—

* Titulo: 1 ml de antiveneno de Loxosceles gaúcho neutraliza 1,60 mg ou 244,27

DLr.(p do veneno específico

DISCUSSÃO

A utilização de camundongos que sofreram inoculações IV e IP possibilitou

a determinação da DLno do veneno de Loxosceles gaúcho, que em duas

experiências demonstrou reprodutibilidade satisfatória.

A regularidade de ocorrência de mortes, em função do tempo de

observação e progressão das doses de veneno inoculadas, vias IV e IP, permitiu

a determinação da DLso após 72 horas de observação, 6,55 p.g e 13,55 p.g,

respectivamente. Deve ser ressaltado que a sensibilidade ao veneno é maior,

quando este é inoculado pela via IV do camundongo.

Furlanetto(1961), determinou a DLno do veneno extraído por estímulo

elétrico e inoculado por via IV em camundongos, obtendo 6,82 p.g em 48

horas. Os nossos resultados, 8,35 pg no mesmo período e 6,55 pg após 72

horas são diferentes daquele obtido por Furlanetto e, acreditamos, ser explicável

por tratarem-se de partidas diferentes de veneno, e ainda, por variações a que

estão sujeitos os ensaios biológicos.

Das tabelas 3 e 4, podemos depreeender que as DL^o do veneno de

L. gaúcho, provenientes de trituração de cefalotórax e de glândulas, apresentam-se

muito próximas (4,90 pg e 4,63 pg em 72 horas, respectivamente) c mais tóxicas

se comparadas com a DL,-o do veneno obtido por estímulo elétrico (6,55 pg);

isto se justifica pela utilização da quantidade total do veneno que está contida

nas glândulas da aranha, não possível de ser extraído totalmente por estímulo

elétrico.

Até 0 presente, a toxicidade do veneno de Loxosceles e a atividade

neutralizante do antiveneno específico são determinadas segundo o método

preconizado por Furlanetto (1961). Esta avaliação determina unicamente o

efeito da fração necrosante e não a ação tóxica geral do veneno, levando em

consideração exclusivamente a neutralização do efeito local. Sabe-se, no entanto.

SciELO

10 11 12 13 14 15

CICARELLI, R. M. B.; SILES VILLARROEL, M. & ZELANTE, E. Avaliação da atividade

tóxica do veneno de Loxosceles gaúcho em termos de DLj.g e titulação do antiveneno

específico em camundongos. Mem. Inst. Butantan, 47/45:45-53, 1983/84.

que indivíduos acidentados por esta aranha, apesar de apresentarem lesões

cutâneas extensas, não morrem devido a esse efeito local, mas em decorrência

de manifestações sistêmicas, principalmente caracterizadas pelo comprometimento

renal

Em nossa opinião, o doseamento do antiveneno loxosc^lico seria mais

correto se expresso em termos de ação neutralizante geral do veneno e não apenas

em função do fator necrosante.

CONCLUSÕES

1. A atividade tóxica do veneno de Loxosceles gaúcho, principalmente

quando extraído por estímulo elétrico, pode ser convenientemente padronizada

em termos de DLõo, para as vias intravenosa e intraperitoneal em camundongos;

2. o antiveneno loxoscélico monovalente deveria ser titulado em

camundongos pela inoculação intravenosa da mistura, veneno-antiveneno e os

resultados seriam, finalmente, expressos em mg ou número de DL 50 de veneno

neutralizados por 1 ml de antiveneno.

ABSTRACT: The authors show that through intravenous and in¬

traperitoneal inoculations in mice, the toxic activity of Loxosceles

gaúcho venom can be determined in terms of DLgg. The sensibility

is higher when venom is intravenous injected. Three types of venom

were obtained and tested; through eletric stimulation, cephalothorax

trituration and through venom glands trituration. Tentatives of

standardization should be done with venom obtained from eletric

stimulation. It is shown that the neutralization potency of the

specific antivenin should be determined using the intravenous route

in mice, estimating the toxic and necrotizing activity of the venom.

KEYWORDS: Loxosceles gaúcho venom; spider antivenin.

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1 SciELO

Mem. Inst. Butantan

i7/48:55-60, 1983/84

AVALIAÇÃO DA ATIVIDADE TÓXICA DO VENENO DE

LYCOS A ERYTHROGNATHA EM TERMOS DE DEg^ E

TITULAÇÃO DO ANTIVENENO EM CAMUNDONGOS

Regina Maria Barretto CICARELLI * .

Medardo SILES VILLARROEL »*

Sylvia LUCAS***

RESUMO: Os autores, utilizando veneno da espécie Lycosa eryth-

rognatha, demonstram que a atividade tóxica desse veneno pode ser

determinada, satisfatoriamente, em termos de DL,, 50 , através de

inoculações intravenosa e intraperitoneal em camundongos. A potên¬

cia de neutralização do antiveneno licósico também pode ser deter¬

minada utilizando-se a via intravenosa de camundongos. Dessa

maneira, a atividade tóxica do veneno, bem como a titulação do

antiveneno é fundamentada na atividade geral do veneno e não só

em função do fator necrosante presente neste.

PALAVRAS CHAVE: veneno de Lycosa erythrognatha; antiveneno

aracnídico.

INTRODUÇÃO

O gênero Lycosa Latreille, 1804 pertence à família Lycosidae, com espécies

distribuídas em todos os continentes

Estudos feitos por Brazil e Vellard ^ (1925) mostraram que o veneno

dessas aranhas tem efeito necrosante local e é praticamente desprovido de ação

geral. Os mesmos autores, em 1926^, prepararam o soro antictênico-licósico,

usando o coelho como animal de prova para a determinação da atividade

necrosante do veneno e titulação do antiveneno, metodologia que vem sendo

empregada até a atualidade.

A atividade necrosante do veneno de Lycosa é bem menos intensa do

que a de Loxosceles, sem efeitos sistêmicos proeminentes^''. Kaiser® (1956),

* Professora Assistente do Departamento de Imunologia do Instituto de Ciências Bio-

médicas da USP.

** Professor Livre Docente do Departamento de Imunologia do Instituto de Ciências Bio-

médicas da USP.

*** Diretora da Divisão de Biologia do Instituto Butantan.

Endereço para correspondência: Departamento de Imunologia — Edifício Biomédicas III —

Cidade Universitária — CEP 05508 — São Paulo — SP.

SciELO

10 11 12 13 14 15

CICARELLI, R. M. B.; SILES VILLARROEL, M. & LUCAS, S. Avaliação da atividade

tóxica do veneno de Lycosa erythrognatha em termos de DLj.(j e titulação do antiveneno

em camundongos. Mem. Inst. Butantan, iT/iS:55-G0, 1983/84.

estudando a atividade enzimática desse veneno, verificou ausência de ação

coagulante e hemolítica, porém com atividade semelhante à da hiajuronidase.

Neste trabalho, os autores se propuseram a determinar a atividade tóxica

do veneno de Lycosa erythrognatha *, extraído por estímulo elétrico, em termos

de DL 50 Utilizando as vias intravenosa e intraperitoneal em camundongos, e

verificar a possibilidade de utilização da via intravenosa de camundongos para

o doseamento da fração antiveneno licósico do soro antiaracnídico polivalente.

MATERIAL E MÉTODOS

Veneno utilizado **

Os venenos de Lycosa erythrognatha Lucas, 1 836 foram extraídos por estí¬

mulo elétrico e dessecados a vácuo, conforme a técnica de Bücherl ® (1953),

Antiveneno aracnídico polivalente * *

No soro antiaracnídico (antiaranêico e antiescorpiônico), a fração antiara-

nêica foi obtida pela hiperimunização de cavalos com mistura imunogênica

constituída por triturado de cefalotórax de Loxosceles e Lycosa e veneno obtido

por estímulo elétrico de Phoneutria. A fração antiescorpiônica foi obtida pela

hiperimunização de cavalos com venenos obtidos por estímulo elétrico de

espécimes dos gêneros Tityus.

O antiveneno foi purificado e concentrado pelo método de Pope (1938)

e Pope (1939), modificado por Furlanetto * (1961).

Os títulos do soro apresentados na fração aranêica eram os seguintes:

1 ml de soro neutraliza 10 DMM do veneno loxoscélico, 1,5 DMM do veneno

de Phoneutria e 15 DMN do veneno licósico.

Animais utilizados

Foram utilizados camundongos brancos (Mus musculus Linnaeus, 1758),

de ambos os sexos, pesando 20g ± 2g. Estes animais receberam inoculações

pelas vias intravenosa ou intraperitoneal, no volume de 0,5 ml. Foram utili¬

zados lotes de 6 camundongos por dose que, após as inoculações, foram obser¬

vados por um período máximo de 48 horas, com leituras parciais de 30 e

60 minutos e 24 horas.

Determinação da DL r,o do veneno

Foi realizada de acordo com o método de Kârber (1931).

Doseamento do antiveneno

Na avaliação da potência do antiveneno foi mantido constante o volume

do imunessoro diluído a 1/2, variando as doses do veneno. A mistura veneno-

♦ Essa espécie pode ser também encontrada nos Catálogos com o nome de Scaptocosa raptaria.

** Fornecidos pelo Instituto Butantan.

i SciELO

CICARELLI, R. M. B.; SILES VILLARROEL, M. & LUCAS, S. Avaliação da atividade

tóxica do veneno de Lycosa erythrognatha em termos de DL^g e titulação do antiveneno

em camundongos. Mem. Inst. Butantan, 47/^0:55-60, 1983/84.

-antiveneno, após a incubação a 37°C x 30 minutos, foi inoculada nos camun¬

dongos.

Os resultados foram expressos em termos de mg e de DL 50 de veneno

neutralizado por 1 ml de antiveneno, baseando-se na técnica experimental

utilizada por Siles VillarroeP^ (1977), Siles Villarroel e cols. (1978/9) e

Siles Villarroel e cols. (1978/9), no estudo de antivenenos botrópicos.

RESULTADOS

As tabelas 1 e 2 apresentam os resultados da determinação da DL,-,o do

veneno de Lycosa erythrognatha inoculado pela via IV e pela via IP,

respectivamente.

TABELA 1

Determinação da DLr,o do veneno de L. erythrognatha, inoculado pela via intravenosa

em camundongos

Tempos de

observação

Doses em microgramas

160,00

208,00

270,00

351,52

456,98

594,07

DL50

30 minutos

0/6

1/6

5/6

6/6

60 minutos

0/6

1/6

5/6

—

24 horas

0/6

2/6

5/6

—

294,9 jag

48 horas

0/6

2/6

5/6

—

294,9 /ag

TABELA 2

Determinação da DLr.,. do veneno de L. erythrognatha, inoculado pela via intra-

peritoneal em camundongos

Tempos de

observação

Doses em microgramas

40,0

80,0

160,0

320,0

640,0

1280,0

DL-.,,

30 minutos

0/6

60 minutos

0/6

24 horas

0/6

1/6

4/6

5/6

570,0 g-s

48 horas

0/6

1/6

4/6

6/6

508,0 gg

1 SciELO

CICARELLI, R. M. B.; SILES VILLARROEL, M. & LUCAS, S. Avaliação da atividade

tóxica do veneno de Lycosa erythrognatha em termos de e titulação do antiveneno

em camundongos. Mem. Jnst. Butantan^ .47/45:55-60, 1983/84.

A tabela 3 apresenta os resultados dos ensaios para a determinação do

título neutralizante do imunessoro específico, através da via IV.

TABELA 3

Doseamento do antiveneno aracnídico, colocado frente ao veneno de L. erythrognatha

e inoculado pela via intravenosa em camundongos

L. erythrognatha

(DLeo = 294,9 fig)

Solução

salina

Antiveneno

aracnídico

Incubação

Tempos de

observações

24 h

48 h

0,10

0,01

0,24

0,25

37°C

0/6

0,20

0,02

0,23

0,25

0 /6*

0,30

0,03

0,22

0,25

6/6

—

0,40

0,04

0,21

0,25

6/6

—

0,80

0,08

0,17

0,25

30 min

6/6

—

* Título: 1 ml de antiveneno aracnídico neutraliza 1,60 mg ou 5,42 DLm do veneno

de L. erythrognatha

DISCUSSÃO

A utilização de camundongos que sofreram inoculações IV e IP

possibilitou a determinação da DLr.o do veneno de L. erythrognatha, com

reprodutibilidade satisfatória em dois experimentos realizados.

Constatou-se a ocorrência de mortes após 60 minutos, o que não se

verificou quando da inoculação intraperitoneal. Comparando-se as sensibilidades

apresentadas pelos animais, com relação às vias de inoculação, concluiu-se que

a da intravenosa é consideravelmente maior (DLso iguais a 294,9 p-g — via

IV e 508,0 iig — via IP).

A inexistência de trabalhos semelhantes, impossibilita-nos estabelecer

qualquer análise comparativa, visto que, até hoje, a determinação da atividade

tóxica do veneno licósico tem sido realizada conforme o método proposto por

Brazil & Vellard» (1950).

Atualmente, o doseamento do soro antiaracnídico é realizado através dos

métodos preconizados por Furlanetto ® (1961) para o antiveneno de Loxosceles

(em coelhos) e por Brazil e Vellard ^ (1925, 1926, 1950 e 1950) para

os antivenenos de Phoneutria e Lycosa (em cobaias e coelhos, respectivamente).

Esses métodos apresentam alguns inconvenientes, seja quanto ao consumo de

veneno, à falta de uniformidade em relação aos animais de prova e,

principalmente, porque só avaliam a fração antinecrosante dos venenos loxoscélico

e licósico.

SciELO

10 11 12 13 14 15

CICARELLI, R. M. B,; SILES VILLARROEL, M. & LUCAS, S. Avaliação da atividade

tóxica do veneno de Lycosa erythrognatha em termos de e titulação do antiveneno

em camundongos. Mem. Inst. Butantan, .47/45:55-60, 1983/84.

CONCLUSÕES

1. A atividade tóxica do veneno de Lycosa erythrognatha pode ser

convenientemente padronizada em termos de DL 50 , para as vias IV e IP de

camundongos:

2. o antiveneno aracnídico polivalente pode ser titulado satisfatoriamente

pela inoculação intravenosa da mistura veneno-antiveneno, cujo resultado seria

finalmente expresso em mg ou número de DL 50 de veneno, neutralizado por

ml de antiveneno.

ABSTRACT: The authors show that the toxic activity of Lycosa

erythrognatha species venom inoculated intravenous and intraperi-

toneal in mice, can be satisfatory determined in terms of DLs». The

neutralizing potency of the antivenin can also be determined through

the intravenous route in mice. In this way, the toxic activity of the

venom, as well the antivenin titration are supported by the general

activity of the venom, not only by the necrotizing factor presents

in it.

KEYWORDS: Lycosa erythrognatha venom; spider antivenin.

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HENNEGUYA PISCIFORME N. SP., MIXOSPORÍDEO

PARASITO DE BRANQUÍAS DO LAMBARI

HYPHESSOBRYCON ANISITSI (PISOES, CHARACIDAE)

Nelson da Silva CORDEIRO *

Paulo de Toledo ARTIGAS *

Ismael GIÓIA **

Rosana Souza LIMA **

RESUMO: Uma nova espécie de mixosporídeo é descrita de Hyp-

hessobrycon anisitsi (Characidae), peixe de água doce coletado em

Campinas, Estado de São Paulo. O nome Henneguya pisciforme n.

sp. é dado. A morfologia e estágios do ciclo de vida do parasito são

descritos. É discutida a prevalência da infecção e a ausência de

patogenicidade do organismo.

PALAVRAS CHAVE: Henneguya pisciforme n. sp.; Myxosporea;

Hyphessobrycon anisitsi; Characidae.

INTRODUÇÃO

A presença de mixosporídeos em peixes da região neotrópica foi assina¬

lada por vários pesquisadores. Parece ter sido Müller^^ (1841) quem primeiro

verificou tais protozoários, na América do Sul, encontrados em peixes da

Guiana Holandesa (Suriname). Em 1893, as espécies assinaladas por Müller

foram classificadas por Gurley “ no gênero Myxobolus (M. inaequalis e M.

linearis). Esta última espécie, em 1899, foi transferida por Labbé para o

gênero Henneguya (H. linearis).

Splendore (1910), médico italiano, radicado em São Paulo, constata a

presença de mixosporídeos nas brânquias do bagre Rhamdia quelen, capturado

nos arredores da cidade. Dunkerly'' (1915) relata a existência de Agarella

gracilis parasitando a piramboia Lepidosirem paradoxa, capturada nos rios

Paraguai e Amazonas. Migone“ (1916), outro médico italiano, vivendo no

Paraguai, refere o encontro de mixosporídeos em cinco espécies de peixes da

* Departamento de Parasitologia, Universidade Estadual de Campinas.

** Departamento de Zoologia, Universidade Estadual de Campinas.

Endereço para correspondência: IB — Universidade Estadual de Campinas — Caixa Postal,

6109 — Campinas — SP — Brasil.

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CORDEIRO, N. S.; ARTIGAS, P. T.; GIÓIA, I. & LIMA, R. S. Henneguya pisciforme n. sp.,

mixosporídeo parasito de brânquias do lambari Hyphessobrycon anisitsi (Pisces, Chara-

cidae). Mem. Inst. Butantan, 47/45:61-69, 1983/84.

Bacia do Rio Paraguai; todavia não foi feita a classificação desses protozoários.

Cunha & Fonseca‘ ^ (1917, 1918), em peixes marinhos e fluviais do Rio de

Janeiro, Ilha Grande, Rio Pardo (em Mato Grosso) e Rio Paraná, verificaram

seis novas espécies de diferentes gêneros de mixosporídeos. Aragão ^ (1918),

descreve Myxobolus lutzi, encontrado nos testículos de Poecila vivipara.

Nemeczek (1926) assinala M. chondrophilus nas brânquias de Sardinella

anchovina; assinala ainda, três novos mixosporídeos, M. associatus e Henne¬

guya leporini em Leporinas mormyrops e H. occulta em Loricaia sp.. Fonseca

& Penido, referem mixosporídeos em peixes capturados em Mato Grosso; tais

informações foram publicadas em 1927, por Penido®^. Pinto(1928a), em

Astyanax fasciatus, adquiridos na cidade de São Paulo, encontra H. wenyoni

em peixes colhidos no Rio Turvo, próximo à cidade de Pirangi, SP. Pinto

(1928b), verificou a presença de M. noguchii, M. stokesi e H. iheringi; em

Acestrorhampus sp.. Pinto*’ (1828c), verifica e descreve Myxidium gurgeli.

Guimarães ® (1931), publica sua tese doutoral, versando sobre mixosporídeos

de peixes do Brasil. Em 1933 e 1934, Guimarães & Bergamin registram

o encontro de H. travassosi e H. santae, respectivamente em A. fasciatus e

Lepomis copelandi e em Tetragnopterus santae. Jokowska & Nigrelli (1953),

referem em Electrophorus electricus o encontro de H. visceralis, H. electrica

e Henneguya sp.. Recentemente, Kent & Hoffman(1984) tornam público a

presença de H. theca, parasitando Engemannia •virescens.

Atualmente desenvolvemos um projeto de pesquisa que inclui o levanta¬

mento da fauna parasitária de peixes de lago próximo à cidade de Campinas, SP.

Em Hyphessobrycon anisitsi, peixe characídeo de água doce, conhecido

popularmente por lambari, verificamos, em 20% dos peixes examinados, a

presença, nas brânquias, de grande número de cistos; esses cistos continham

esporos de mixosporídeos do gênero Henneguya Thélohan, 1892.

Neste trabalho apresentamos o resultado de nossas pesquisas, pertinentes

à morfologia do protozoário, aos estágios do ciclo biológico, prevalência da

infecção assinalando inexistência de ação patogênica provocada pelo parasitismo.

MATERIAL E MÉTODOS

Os peixes foram sacrificados no laboratório e a necrópsia, com finalidade

parasitária, efetuada imediatamente. O exame das guelras foi sempre minucioso,

tanto o macro como o microscópico. Positivada a presença de cistos, estes eram

examinados, para um conhecimento morfológico conveniente. Estudou-se mate¬

rial fresco e conservado em formol-Railliet.

Obtiveram-se fotomicrografias de cortes histológicos corados com Hemato-

xilina-Eosina e de esfregaços do material fresco corado pelo Giemsa. A visua¬

lização do vacúolo iodófilo foi conseguida com emprego da solução de Lugol.

A extrusão dos filamentos polares foi provocada em KOH 5% (Hoffman et

al 1965). Os desenhos foram feitos com auxílio de câmara clara.

DESCRIÇÃO

Henneguya pisciforme n. sp.

Estádio vegetativo: Numerosos cistos de coloração brancacento-amarelada,

localizados nos tecidos das brânquias, são visíveis a olho desarmado, em peixes

SciELO

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mixosporídeo parasito de brânquias do lambari Hyphessobrycon anisitsi (Pisces, Chara-

cidae). Mem. Inst, Butantan, ^7/^5:61-69, 1983/84.

vivos e nos conservados em formol. Os cistos, às vezes mais de uma dezena

em cada hospedeiro, eram distribuídos por todas as brânquias e em ambas as

faces, internas e externas. Os cistos simples são esféricos ou ovais, limitados

por uma membrana produzida pelo hospedeiro (Figura 17). Seu desenvolvimento

é assíncrono; cistos contendo muitos esporontes, esporoblastos mono e

multinucleados e esporos maturos são encontrados contemporaneamente. No

pansporoblasto em transformação, encontramos esporos em variados estádios de

desenvolvimento; uns prematuros, arredondados, envoltos por uma membrana

translúcida, com indício de processo caudal e com cápsulas polares de tamanho

igual ou diferente, porém de pequenas dimensões; outros mais avançados,

maduros, o que se evidencia pela extensão do processo caudal e dimensões

das valvas (Figs. 10 a, b, c, d, e e). Os esporos maduros ocupam a área central

dos cistos, enquanto os estádios em desenvolvimento estão localizados ao redor,

na periferia da massa cística.

Esporos: Os esporos têm aspecto biconvexo, comprimidos lateralmente ao

plano da sutura, eom a região posterior estendendo-se e terminando em apêndice

caudal espesso, simples ou bifurcado (Fig. \0 d e e). As valvas são de igual

tamanho e os apêndices caudais são extensões das valvas.

Na região anterior do esporo há uma pequena constrição com aspecto de

mamilo (Fig. 10 d, e e /). Duas cápsulas polares piriformes, desiguais, contêm

os filamentos polares espiralados dispostos no sentido longitudinal. Quando

exteriorizado o filamento polar apresenta espessura uniforme (Fig. 10 /). O

esporoplasma, finalmente granulado, com um ou dois núcleos, contém um

vacúolo iodófilo que se evidencia distintamente, quando tratado pela solução

de Lugol.

Dimensões do material estudado, baseados em 30 exemplares, estão

apresentados na Tabela I.

TABELA I

Medidas em micrômetros de H. pisciforme n. sp.

Especificação

Esporo:

Comprimento

17,32 — 23,20

20,40

1,54

Largura

4,46 — 6,73

6,12

0,46

Distância da extremidade

anterior à cápsula polar

4,62 — 6,73

5,64

0,60

Vacúolo iodófilo

1,78 — 3,04

2,25

0,43

Processo caudal

8,40 — 12,82

10,65

1,27

Cápsula polar:

Comprimento

3,11 — 6,14

4,28

0,57

Largura

1,18 — 2,44

1,70

0,43

Cisto

91,99 — 112,03

100,87

7,49

SciELO

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5 SciELO ;lo 11 12 13 14 15

CORDEIRO, N. S.; ARTIGAS, P. T.; GIÓIA, I. & LIMA, R. S. Henneguya pisciforme n. sp.,

mixosporídeo parasito de branquías do lambari Hyphessobrycon anisitsi (Pisces, Chara-

cidae). Mem. Inst. Butantan, 47/45;61-G9, 1983/84.

EXPLICAÇÃO DA PRANCHA

Figs. la e Ib — Esporos de H. linearis (Gurley, 1893), segundo Müller (1841), in Kudo, 1920.

Figs. 2a e 2b — Esporos de H. lutzi Cunha & Fonseca, 1918.

Figs. 3a-3c — Esporos de H. occulta Nemeczek, 1926, com três, dois e um prolongamentos

caudais.

Figs. 4a e 4b — Esporos de H. leporini Nemeczek, 1926.

Figs. 5a-5d — Esporos de H. wenyoni, Pinto, 1928.

5a •— Esporo com cauda bifurcada.

5b — Esporo, visto de perfil e mostrando o plano de sutura vertical.

5 c — Esporo, mostrando a abertura longitudinal para dar saída ao esporoplasma.

5d — Esporo possuindo cápsulas polares de forma e dimensões diferentes.

Fig. 6 — Esporo de H. iheringi Pinto, 1928.

Fig. 7 — Esporo de H. fonsecai Guimarães, 1931.

Fig. 8 — Esporo de H. cesarpintoi Guimarães, 1931.

Fig. 9 — Esporo de H, bergamini Guimarães, 1931.

Fig. 10 — Esporo de H. travassosi Guimarães & Bergamini, 1933.

Fig. 11 — Esporo de H. santae Guimarães & Bergamini, 1934.

Fig. 12 — Esporo de H. visceralis Jakowska & Nigrelli, 1953.

Fig. 13 — Esporo de H. electríca Jakowska & Nigrelli, 1953.

Figs. 14a e 14b — Esporos de Henneguya sp. Jakowska & Nigrelli, 1953.

Fig. 15 — Esporo de H. theca Kent & Iloffman, 1984. A área pontilhada representa a bainha.

Fig. 16a-16f — Esporos de H. pisciforme n. sp .

16a-16c — Estágios em desenvolvimento; observação a fresco.

16d — Esporos possuindo cápsulas polares de dimensões diferentes; coloração pelo Giemsa.

16e — Esporo com cauda bifurcada e vacúolo iodófilo; observação a fresco.

16f — Esporo tratado com KOH (6%). Notar a extrusão do filamento polar; observação

a fresco.

HOSPEDEIRO: Hyphessborycon anisitsi Eigenmann, 1907 (Pisces, Cha-

racidae).

PREVALÊNCIA: Foi verificada em 20%, num total de 180 peixes

examinados.

LOCALIZAÇÃO PARASITÁRIA: Protozoário histozóico. Estádio vege-

tativo localizado no tecido branquial.

PATOGENICIDADE: Aparentemente nenhuma.

LOCALIDADE TIPO: Campinas, Estado de São Paulo, Brasil.

MATERIAL EXAMINADO: Lâminas permanentes coradas pelo Giemsa

de n.°s 4001 a 4003. Peças histológicas conservadas em formol — Railliet;

cortes histológicos corados pela Hematoxilina-Eosina, seriados, de n.“s 4004 a

4010. Este material está depositado na Coleção de Protozoologia do Departa¬

mento de Parasitologia da UNICAMP.

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mixosporídeo parasito de brânquias do lambari Hyphessobrycon anisitsi (Pisces, Chara-

cidae). Mem. Inst. Butantan, í/'/4S;61-69, 1983/84.

Fig. 17 — Corte de brânquia (microfotografia) de Hyphessobrycon anisitsi, parasitada por

Henneguya pisciforme n. sp.; a. Cavidade cística com formas evolutivas e esporos

maduros; b. Membrana cística.

DISCUSSÃO

Desde a clássica monografia de Kudo(1920) sobre mixosporídeos, com

a descrição do gênero Henneguya, muitas espécies, que diferem fundamental¬

mente na estrutura do esporo, vêm sendo acrescidas ao gênero e encontrados

nas brânquias O encontro de infecção por Henneguya nas brânquias

de Hyphessobrycon anisitsi c de interesse por causa da pouca informação de

mixosporidiose em peixes sul-americanos. No gênero Henneguya, atualmente

são conhecidos dezesseis espécies brasileiras (Prancha 1) e, parasitando brân¬

quias, as seguintes: H. linearis (Gurley, 1895); //. occulta Nemeczek, 1926;

H. wenyoni Pinto, 1928; H. iheringi Pinto, 1928; H. cesarpintoi Guimarães,

1931; H. santae Guimarães & Bergamin, 1934 e H. pisciforme n.sp.

Das espécies brasileiras descritas, a que mais se aproxima da nossa é

H. wenyoni, do lambari de rabo vermelho. Asíyanax fasciatus Cuv. Segundo

as ilustrações apresentadas por Pinto’** (1928a), os esporos exibem cápsulas

polares de dimensões semelhantes ou desiguais. De modo marcante, os esporos

de H. pisciforme diferem dos esporos das demais espécies brasileiras no seguinte

aspecto anatômico: a região anterior se estreita para a formação de um botão

mamilar terminal: a presença de um apêndice caudal espesso é compartilhado

apenas com H. travassosi Guimarães & Bergamin, 1933. Nas demais espécies

brasileiras do gênero Henneguya o apêndice caudal é relativamente mais estreito.

No lago onde foram capturados os exemplares de H. anisitsi, cohabitam

Astyanax bimaculatus (L., 1978); Cheirodon notomelas Eigenmann, 1915;

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SciELO

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CORDEIRO, N. S.; ARTIGAS, P. T.; GIÓIA, I. & LIMA, R. S. Henneguya pisciforme n. sp.,

mixosporídeo parasito de brânquias do lambari Hyphessobrycon anisitsi (Pisces, Chara-

cidae). Mem. Inst. Butaniav, ^7/45:61-69, 1983/84,

Aphyocheirodon hemigrammus Eigenmann, 1915; Phalloceros caudimaculatus

(Hensel, 1968); Odontostilbe microcephala Eigenmann, 1907; Hoplias 'mala-

baricus (Bloch, 1794) e Geophagus brasiliensis (Quoy & Gaimard, 1824).

Apesar da intimidade reinante entre as várias espécies de peixes neste

habitat restrito, somente H. anisitsi apresenta-se parasitando; tal circunstância

demonstra uma intensa especificidade parasitária, talvez suficiente para consi¬

derar o mixosporídeo como sendo uma nova espécie.

Alguns mixosporídeos têm sido assinalados como agentes produtores de

enfermidades; Davis® (1924) e Chakravarty ® (1939) afirmam que tais proto¬

zoários são, realmente, patogênicos. É aceito que Myxobolus pfeifferi Thélohan,

1895, é causador de doença fatal, enquanto M. cyprini Dofflein, 1898, é res¬

ponsável por processo supurativo do rim, fígado e baço de Cyprinus carpio

L. Essas observações são confirmadas por Bauer ^ (1961), em culturas de

carpa, onde M. cyprini e M. dispar Thélohan, 1895, parecem ser as espécies

mais importantes como agentes patogênicos; o mesmo foi verificado em ambien¬

tes naturais (Petruchevskii & Schulman 1961). Ceratomyxa sp., infectando

Gobioides rubicundas mostrou-se fatal, em condições laboratoriais (Ray

1933). Kudo (1934) opina não ser propriamente o protozoário o causador

da doença, eventualmente mortal, mas que o quadro patológico seria conseqüên-

cia de infecção secundária, por bactérias ou fungos. H. anisitsi, infectados por

H. pisciforme e mantidos em aquários, não apresentaram doença parasitária,

mantendo-se, aparentemente, em boa condição hígida.

A espécie em discussão é suficientemente diferente para justificar o seu

reconhecimento como nova.

ABSTRACT: The morphology and some stages of the life-cycle of one

myxosporidian parasite from the gill filaments of Hyphessobrycon anisitsi,

freshwater fish, collected at Campinas, SP, Brazil, are described. The name

Henneguya pisciforme n. sp. is given. Observations have been made about

prevalence of infection and absence of pathogenicity.

KEYWORDS: (*) Henneguya pisciforme n. sp.; (*) Myxosporea; (*) Hyphes¬

sobrycon anisitsi; Characidae.

AGRADECIMENTO

Agradecemos ao Prof. Dr. Ivan Sazima, do Departamento de Zoologia da

Unicamp, a identificação das espécies de peixes referidas da localidade

trabalhada.

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i SciELO

CORDEIRO, N. S.; ARTIGAS, P. T.; GIÓIA, I. & LIMA, R. S. Henneguya pisciforme n. sp.,

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Recebido para publicação em 17/10/1983 e aceito em 19/07/1984.

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Mem. Inst. Butantan

47/4«: 71-80, 1983/84

APOSTOLEPIS DIMIDIATA (JAN, 1862), NOVA

COMBINAÇÃO, E A VALIDADE DE A. ERYTHRONOTA

(PETERS, 1880) E A. VENTRIM ACU LATA LEMA, 1978.

(SERPENTES: COLUBRIDAE: ELAPOMORPHINAE) ^

Thales de LEMA *

RESUMO: O exame comparativo dos dados até agora registrados

sobre as espécies, Elapomojus dimidiatus, Apostolepis erythronota e

A. ventrimaculata, mostrou tratar-se de apenas uma espécie, A.

dimidiata, nova combinação, de morfologia muito variável, princi¬

palmente na região cefálica. Por outro lado, exclui da sinonímia, A.

erythronotus var. lineata Cope, 1887, que, previamente a considera¬

mos como espécie válida. Fica, pois, invalidado o gênero Elapomojus.

PALAVRAS-CHAVE: Elapomojus dimidiatus, Apostolepis erythro¬

nota, Apostolepis ventrimaculata, A. dimidiata n. comb., variação

morfocefálica.

INTRODUÇÃO

Elapomorphus (Elapomojus) dimidiatus Jan, 1862 foi descrita com base em

um exemplar descorado e foi revisto apenas por Amaral^, que elevou o subgênero

à categoria genérica. Até o momento essa pretensa espécie conserva-se válida,

apesar de diversos autores em épocas diferentes terem lançado dúvidas sobre

sua validade. A espécie mais próxima, Apostolepis erythronota (Peters, 1880) é

aceita como boa espécie. Outra, A. ventrimaculata Lema, 1978, também é afim

a ambas. Na ocasião em que descrevemos esta última, notamos que, grande

parte das espécies do gênero Apostolepis Cope, 1862 foi descrita com base em

apenas um espécimen, geralmente já colecionado em um grande museu e total¬

mente sem cor.

Nesta nota taxonômica comunicamos o resultado do exame que procedemos

em todos os registros publicados sobre as três espécies citadas, bem como

supostos sinônimos. Estamos examinando séries de exemplares, cujos resultados

serão objeto de outros artigos, incluindo-se. entre eles, a validade dos gêneros

Apostolepis, Elapomorphus Wiegmann, 1843 e Parapostolepis Amaral, 1929.

1 Bolsa CNPq (Proc. 306090/83).

* Museu de Ciências Naturais, Fundação Zoobotânica do Rio Grande do Sul, Caixa Postal

1188, 90000, Porto Alegre, RS, Brasil.

1 SciELO

LEMA, T. de Apostolepia dimidiata (Jan, 1802), nova combinação, e a validade de A. erylkro-

nota (Peters, 1880) e A. vcntrimaculata Lema, 1978. (Serpentes; Colubridae; Elapo-

morphinae). Mem. Inat. Butantan, 47/48:71-80, 1983/84.

RESULTADOS

Analisamos a bibliografia em ordem cronológica de apresentação das publi¬

cações e apresentamos aqui os resultados dessa análise erítica na mesma

seqüência mas por nomes científicos:

A — Elapomorphus dimidiatus:

Jan^ (1862) descreveu-a com base em um espécimen fixado no Museu de

História Natural de Milão e com a procedência “Brasil”. Determinou-o como

Elapomorphus (sensu lato), mas semi-isolou-a no novo subgênero Elapomojus, que

ora criava, por possuir escudete loreal, três pares de mentais e temperai grande

isolando os parietais das supralabiais. Parece não ter visto o trabalho de Cope“®

(1862), em que este último cria o gênero Apostolepis, ou não concordava com

seu colega norte-americano. Como ambos os artigos surgiram no mesmo ano, é

possível que ambos se desconhecessem pois. Cope-® não citou a espécie de Jan^.

Jan & Sordelli^ (1866) apresentaram desenhos do holótipo e cujo exame permite

ampliar a descrição original. Strauch®'®" (1884, 1885) redescreveu o holótipo e

afirmou que a presença de três pares de mentais pode ser uma anomalia e que

a espécie aproxima-se de A. eryihronotãi Boulenger"* (1896) isolou-a no gênero

“Elapomoius”, correção mal feita de Elapomojus. Berg® (1898) examinou um

espécimen de “Elapomorphus dimidiatus’', assim identificado no “Gabinete de

História Natural” da Universidade Nacional de Buenos Aires, afirmando ser da

espécie A. erythronota. Corrigiu o nome genérico para “Elapomohoeus” e afirmou

que E. dimidiatus devia ser um exemplar anômalo de A. erythronota. Bertoni®

(1913), relacionando fauna do Paraguai, incluiu “Elapomoius dimidiatus”,

dizendo ser esta espécie comum naquele país. AmaraP (1929) afirmou que,

apenas o holótipo era conhecido e que comprovara sua descrição e desenhos

originais. Corrigiu*’® para Elapomojus, mantendo a espécie, apesar de achar que

0 holótipo era um anômalo de A. erythronota, tendo notado que o mesmo estava

mal conservado. Manteve esse nome em suas listas®’’®. Schouten “ (1931) repetiu

Bertoni®. Peters & Orejas-Miranda” (1970), Lema'- (1978) e Savitzky’’’’ (1979)

seguiram Amaral.

A cor loura citada’ deve ser devida ao descoramento’, sendo que o pigmento

vermelho é o primeiro a alterar-se no fixador.

A crer nos registros®’®, essa espécie seria comum no Paraguai. Entretanto,

duas possibilidades se nos antepõem: (a) determinação errada, ou (b) determi¬

nação correta. Não podemos concluir nada porque não há dados nas listas®’®,

nem citação de exemplares para reexame.

O padrão cromático do holótipo é o mesmo de A. erythronota, minimizan¬

do-se pequenas diferenças e as manchas pretas ventrais. A presença de loreal

no holótipo (1/1) vem caracterizando o gênero e a espécie, mas, o exame dos

desenhos de Jan^ mostra que são anômalos, pois, além de serem muito pequenos,

os escudos contíguos, nasal e ocular, mostram-se truncados, como divididos, com

fusão dos pedaços que seriam os loreais. Observando-se a forma do nasal e

preocular em diversos exemplares de diferentes espécies de Apostolepis, não há

esse aspecto truncado. Por outro lado, como não há outro táxon de Elapomor-

phinae com loreal, o táxon ,de Jan seria exceção. Portanto, a presença de loreais

no holótipo é anômala. (Fig. 1).

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LEMA, T. de Apostolepis dimidiata (Jan, 1862), nova combinação, e a validade de .4. erythro-

nota (Peters, 1880) e A. ventrimaculata Lema, 1978. (Serpentes: Colubridae: Elapo-

morphinae). Mem. Inst. Butantan, i7/iS:ll-80, 1983/84.

O holótipo apresenta um temporal muito grande de cada lado (Fig. 1) e o

supralabial que lhe fica abaixo (V) é muito pequeno. Nenhuma espécie de

Elapomorphinae tem temporal semelhante. Deve, pois, tratar-se de anomalia.

A presença de três pares de mentais no holótipo é, obviamenle, uma anomalia,

não só pelo fato em si mas também porque os dois pares anteriores são muito

pequenos em relação ao posterior, indicando-nos divisão equatorial no par

anterior.

Quanto ao escurecimento ocorrente nas escamas vertebrais do final do

tronco do holótipo, pode ser discreto melanismo individual. As faixas pleurais

“pardo-escuras”\ deviam ser pretas, pois é sabido que, em serpentes após vários

anos no fixador, o preto torna-se pardo-ferrugíneo. A coloração cefálica do

holótipo é igual à de A. erythronota. O debrum claro nas escamas dorsais pretas

do tronco e cauda é típico de A. erythronota e assim também as manchas ventrais

pretas e que estão descoradas no holótipo.

O exame de séries de exemplares de Elapomorphus (Phalotris) spegazzinii

Boulenger e E. (P.) lemniscatiis Duméril, Bibron et Duméril-^ mostrou que os

escudos cefálicos variam na forma e até podem faltar em um lado ou simetrica¬

mente, causando contato entre parietais e supralablais. Por outro lado, podem

haver ázigos e divisões, aumentando o número de fâneros, como os supralablais,

que variam de 5 a 7, sendo a normalidade 6.

B — Apostolepis erythronota:

Peters'* (1880) descreveu-a com base em espécimen fixado do Museu de

Berlim, cuja procedência é “São Paulo” e identificado como Elapomorphus (sensu

lato). Diferenciou-a das espécies então, conhecidas por uma série de caracteres,

os quais, de resto, são comuns ao gênero Apostolepis, exceto a cor preta cefálica

e nos lados do corpo. Aproximou-a de A. dorbignyi (Duméril, Bibron et Duméril,

1854) mas diferenciando-a facilmente desta porque esta é toda vermelha dorsal¬

mente. A descrição original é pobre de dados e sem ilustração. Strauch^ descre¬

veu um exemplar de “Ipanema”, que fica em São Paulo, Brasil e não Rio de

Janeiro, como, de um modo geral é aceito. Usa''* Apostolepis como subgênero de

Elapomorphus. Afirmou^ que a maior ou menor projeção do focinho*'*'' pode

estar ligada ao sexo. Pôs em evidência uma contradição de Peters'* quando disse

que sua espécie não tem temporais e, mais adiante, que tem temporais pequenos

(posteriores). Peracca'® descreveu um exemplar do Paraguai que Boulenger*

corrigiu para A. ambiniger, espécie comum e simpátrica com A. erythronota no

Paraguai. Descreveu* resumidamente essa espécie com dados da descrição original

e outras'*''®. Incluiu a forma lineata”'' na sinonímia o que é contraditório porque

ela difere totalmente de A. erythronota. Koslowsky'® llstou-a num lote de exem¬

plares adquirido pelo Museo de La Plata, Argentina, do colecionador particular

C. Bach, capturado em Miranda, cidade à margem esquerda do rio Paraná, no

Estado de Mato Grosso do Sul, Brasil, fronteiro ao Paraguai meridional. Bertoni®

e Schouten® citaram-na para o Paraguai afirmando ser comum nesse país.

Magalhães'® listou-a para o Estado do Rio Grande do Sul, Brasil, como um

recebimento pelo posto do Instituto Oswaldo Cruz instalado na cidade de Pelotas,

a Sudeste desse Estado. Gliesch®® afirmou que a espécie ocorre em Pelotas, Rio

Grande do Sul, mas, sendo um trabalho de divulgação é possível que tenha

compilado'®. Parece-nos ter havido erro de determinação por parte de Magalhães'®

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LEMA, T. de Apostolepis dimidiata (Jan, 1862), nova combinação, e a validade de A. erythro-

iiota (Peters, 1880) e A. ventrimaculata Lema, 1978. (Serpentes; Colubridae: Elapo-

morphinae). Mem. Inst. Butantan, 47/48:71-80, 1983/84.

e Gliesch^® porque, na região de Pelotas é muito comum Elapontorphus (Phalo-

íris) lemniscatus trilineatus Boulenger, 1889, pois ambos os autores não eram

muito versados em sistemática de ofídios. Amarab'* deu a distribuição geográfica

desde São Paulo até Mato Grosso no Brasil, e para o Paraguai e a Argentina

setentrional. Inclue® na sinonímia lineata Cope, sem ter visto esta. E assim

procedeu em trabalhos subseqüentes*®'"®. Peters & Orejas-Miranda" apresentaram

uma chave para Apostolepis na qual esta espécie está diferenciada pelo ventre

manchado de preto, mas incluem lineata em sua sinonímia. AmaraP’* apresentou

estampa colorida de um exemplar adulto procedente de São Paulo, Brasil, no

qual visualiza-se a presença de temporais posteriores quase vcstigiais, sem dúvida

anômalos. Lema*^ seguiu outros^' Savitzky’® defendeu a origem neotropical

dos Micrurinae a partir de ancestral Elapomorphinae e descreveu o hemipênis

de A. erythronota.

É digno de nota que a maioria dos autores aproximou esta espécie de

A. dorbignyi, inclusive Prado"^. No entanto, são tantas as diferenças entre ambas

que discordamos. Boulenger * afirmou que ambas têm a cabeça morfologicamente

iguais o que é falso: dorbignyi tem cabeça curta, alta, larga e focinho arredon¬

dado; erythronota possui a cabeça longa, afilada, deprimida, com focinho proje¬

tado. A. erythronota aproxima-se de A. ambiniger e de A. jlavotorquata.

C — Apostolepis nigriceps:

Werner*'^ descreveu esta espécie com base em exemplar procedente de São

Paulo, Brasil, e comparou-a com A. dorbignyi, diferenciando-a pela forma do

frontal, falta de preocular (ou falta de loreal?) e presença de postoculares muito

grandes. A descrição é resumida. AmaraP igualou-a a A. erythronota, após ter

examinado o holótipo no Museu de Mônaco e tê-lo comparado com um cótipo

da última depositado no Museu de Viena, concluindo que Werner baseou-se na

separação do nasal com preocular, no contato de três supralabiais com parietal

(IV-V-VI) e que o isolamento entre nasal e preocular é variável; notou fusão

do preocular com intcrnasoprefrontal (anomalia), que o contato dos três labiais

com parietal só ocorre à direita e que o IV supralabial só toca o parietal por seu

ângulo súpero-posterior e que, à esquerda, o IV labial está totalmente isolado

do parietal. Berg® descreveu um exemplar de A. erythronota com os três últimos

labiais tocando parietais. O exame da figura de Werner'^ mostrou-nos; cabeça

deprimida, muito alongada (a crer no desenho), com escutelação cefálica notada-

mente anômala, vendo-se fusão do II supralabial com preocular, 5 supralabiais

apenas à esquerda mas o V é anômalo (longo demais) (Fig. 2). A cor vermelha

citada^'^ para os lados e face inferior da cabeça interpretamos como variação na

pigmentação cefálica.

D — Apostolepis erythronota var. lineata;

Cope^® apenas citou este táxon com base em dois exemplares capturados

em “Mato Grosso”, Brasil (síntipos), diferenciando-os por ter estrias longitudinais

em vez de faixas pretas. Boulenger^ igualou-a à A. erythronota sem comentar

essa pretensa variedade. Desde então nunca mais se tocou no assunto!

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LEMA, T. de ApostolepU dimidiata (Jan, 1862), nova combinação, e a validade de A. erythro-

nota (Peters, 1880) e A. ventrimaculata Lema, 1978. (Serpentes: Colubridae: Elapo-

morphinae). Mem. Inst. Butantan, 47/48:71-80, 1983/84.

Fig. 1 — Elapomorphus (Elapomojus) dimidiatus Jan, 1862 — Aspeto da cabeça, segundo

JAN & SORDELLI (2), do holótipo no Museu de Milão.

Fig. 2 — Apostolepis nigriceps Werner, 1897 — Aspeto da cabeça segundo o próprio autor,

do holótipo no Museu de München (17).

Fig. 3 — Apostolepis ventrimaculatus Lema, 1978 — Aspeto da cabeça do holótipo no Museu

de La Plata, Argentina, segundo o autor (12).

SciELO

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LEMA, T. de Apostolepia dimidiata (Jan, 1862), nova combinação, e a validade de A. erytliro-

nota (Peters, 1880) e A. ventrimaculata Lema, 1978. (Serpentes: Colubridae; Elapo-

morphinae). Mem. Inst. Butantan, 47'/4S;71-80, 1983/84.

A citação de A. erythronota em Mato Grosso^" foi baseada somente em

Cope^®. Há uma discordância” na chave quando esta caracteriza A. erythronota

com padrão não-lineado e presença de fila dupla de manchas pretas ventrais ao

mesmo tempo que inclui lineata na sinonímia desta.

A. erythronota lineata não foi descrita, nenhum autor examinou os síntipos,

ninguém discutiu seu status, como não há na bibliografia nenhum dado auxiliar!

Examinamos fotos dos mesmos, cedidas pela Academia de Ciências Naturais de

Filadélfia e achamos muito estranho que Cope, autor cuidadoso, típico isolador

de espécies, tenha considerado o táxon como uma variedade de A. erythronota.

Na verdade, essa pretensa variedade pertence a outro grupo filogenético de

Apostolepis. Ainda não sabemos até que ponto é válido o nome copeano e

propomos previamente seu isolamento como espécie inquirenda, A. lineata, do

grupo das espécies lineadas, ventre imaculado, clara no paraventre. É afim de

A. barrioi Lema, 1978 e A. villaricae Lema, 1978, podendo, até, serem sinônimas

entre si.

E — Apostolepis ventrimaculata:

Lema'^ descreveu-a com base em eiíemplar coletado por Júlio Koslowsky

110 Paraguai, conforme registro no Museo de La Plata. Na ocasião em que o

descobrimos entre outros exemplares abandonados da antiga coleção do Dr. Pablo

Gaggero naquele museu, sentimos forte afinidade entre este espécimen e o de

E. dimidiatus, mas o isolamos pela presença do loreal, presença de dois pares de

mentais, ausência de temporais e a contatação dos três últimos superlabiais com

parietais (Fig. 3).

Após examinar séries de exemplares de A. erythronota posteriormente, fica¬

mos convencidos da igualdade das duas espécies.

Acreditamos que o holótipo de A. ventrimaculata é o espécimen citado por

Koslowsky*® como procedente de Miranda, extremo sudoeste de Mato Grosso

do Sul, Brasil, citado linhas antes.

CONCLUSÕES

Comparamos os dados dos holótipos de E. dimidiatus, A. erythronota e A.

ventrimaculata em forma de um quadro resumido (Quadro I) pelo qual não

é possível manter esses nomes designando espécies diferentes, confirmando regis¬

tros"* de que se não se pode mais determinar exemplares de Apostolepis com

base apenas na presença ou ausência ou comparação ou não de escudos cefálicos.

Essas serpentes são subterrâneas e por isso, são muito variáveis.

Pretendemos estabelecer parâmetros para as diferentes espécies com base

em exame de séries de exemplares, mas não será uma tarefa fácil porque, de

muitas espécies (nomes?) apenas se conhece o holótipo.

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LEMA, T. de Apostolepis dimidiata (Jan, 1862), nova combinação, e a validade de A. erythro-

nota (Peters, 1880) e A. ventrimaculata Lema, 1978. (Serpentes: Colubridae: Elapo-

morphinae). Mem. Inst. Butantan, 47/48:71-80, 1983/84.

QUADRO I

Comparação dos dados dos holótipos de E. dimidiatus, E. erythronotxis e A.

ventrimaculatus. Convenções: AN, anal; CA, comprimento da cabeça; CU, compri¬

mento da cauda; DO. escamas dorsais; IL, infralabial; LO, loreal; MM, mentais;

Mm, mental mediano; MP, mental posterior; MPC, mancha preta caudal; NA, nasal;

OC, ocular; PA, parietais; PRO, preoculares; PSO, póstoculares; SC, subcaudais;

SL, supralabiais; SPC, supracaudais; TE, terminal; TO, comprimento total; TR,

comprimento do tronco; TT, temporais; VE, ventrais

Caracteres

Elapomorphus

(Elapomojus)

dimidiatus Jan

Elapomorphus

erythronotus

Peters

Apostolepis

ventrimaculatus

Lema

localidade-tipo

Brasil

São Paulo, BR

Paraguay/MS, BR

sexo *

2 ?

9 ?

idade

adulto

medidas

(CA-f-TR4-CU=TO)

—1-|-40=:580mm

9-|-368-|-23=400mm

12-|-379-l-34=425mm

CU/TO *

0,068

0,057

0,080

focinho

pouco projetado

muito projetado

cabeça

algo afilada

afilada

PRO

1/1

NAx/PRO

NA/PRO

NAxPRO

grande

longo

grande

1/1

0/0

PSO

1/1

0/0

1/1, grandes

O-fl/O-fl, pequenos

1/1

SLxOC

II-III/II-III

SLxPA

0/4

V-VI/V-VI

IV-V-VI/IV-V-VI

3/3

MA=Min < MP

2/2, longos

MA pouco < MP

2/2

MA pouco < MP

7/7

maior IL

V/V

IV/IV

ILxMM

I-V/I-V

SPC (1/2 CU)

246

244

2-h244

1/1

26/26

28/28

26/26

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LEMA, T. de Apostolepis dimidiata (Jan, 1862), nova combinação, e a validade de A. erythro-

nota (Peters, 1880) e A. ventrimaculata Lema, 1978. (Serpentes: Colubridae; Elapo-

morphinae). Mem. Inst. Butantan, 47/48:71-80, 1983/84.

SC/VE

0,105

0,114

0,106

COR CA

preta

ANEIS NUCAIS

preto unido cor CA

ídem

COR VERTEBRAL

loura, DO post.

escurecidas

basalmente

cor de tijolo

creme sujo

faixa pleural - larg.

4,6 DO

4,5 DO

debrum claro DO

-f

preta

cor do ventre

claro com manchas

pretas, 1/1 linha

média clara

escuro, com 2

séries de manchas

pretas, aumentando

para trás

duas séries de

manchas pretas,

que se juntam

posteriormente,

linha média clara

MFC

1/4 final

1 /4 final

1/3 final

SPCxSC

SPC > SC

branco

creme latero-

-ventralmente,

preto em cima

(* se 0 espécimen

com cauda maior é 9, os outros também

deve ser)

A presença de loreal é uma anomalia (atavismo?) e os temporais geral¬

mente não ocorrem; quando isso acontece eles são pequenos, quase vestigiais. A

forma do focinho c um caráter que merece um estudo aprofundado pois varia

desde o arredondado ao afilado, de alto a deprimido. O focinho de A. erythro-

nota é fortemente projetado, como no holótipo de A. nigriceps, destoando do de

E. dimidiatus. Notamos, entretanto, que na região do Paraguai essas serpentes

tendem a possuir focinho afilado, motivando a criação do gênero Rhynchonyx

Peters, 1869 para ambiniger. Em séries de exemplares de A. erythronota notamos

n predominância do focinho afilado mas, também, alguns arredondados. Não

sabemos se isso está ligado ao sexo, como dito antes'’, ou à idade ou à população.

Só após finalizar nossa revisão da espécie estaremos em condições de concluir

sobre isso.

Resumimos as conclusões nos seguintes itens:

I — Elapomojus Jan é sinônimo de Apostolepis Cope.

II — E. dimidiatus Jan passa a chamar-se Apostolepis dimidiata.

III — Apostolepis erythronota é sinônima de A. dimidiata.

IV — O holótipo de E. dimidiatus é um exemplar anômalo de A. erythro¬

nota.

V — Apostolepis erythronotus var. lineata Cope fica isolada como espécie

válida: A. lineata, previamente.

VI — A. ventrimaculata Lema é igual a A. dimidiata.

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LEMA, T. de Apostolepis dimidiata (Jan, 1862), nova combinação, e a validade de A. erythro-

nota (Peters, 1880) e A. ventrimaculata Lema, 1978. (Serpentes: Colubridae: Elapo-

morphinae). Mem. Inst. Butantan, 47/^5:71-80, 1983/84.

VII — o holótipo de A. dimidiata n. comb., passa a ser representado pelo

de A. erythronota, que é o segundo apresentado em ordem cronológica. A loca¬

lidade-tipo passa, pois, a ser São Paulo, Brasil.

AGRADECIMENTOS

Agradecemos ao Dr. Edmond V. Malnate, curador da coleção da The

Academy of Natural Sciences of Philadelphia, pelo envio das fotografias de

exemplares de Elapomorphinae.

ABSTRACT: Apostolepis dimidiata (Jan, 1862), new combination,

and the validity of Apostolepis erythronota (Peters, 1880) and A.

ventrimaculata Lema, 1978. (Serpentes: Colubridae: Elapomorphi¬

nae). This is a taxonomic study resultant of the comparative analysis

of the data of the holotypes of E. dimidiatus, Elapomorphus eryth-

ronotus, A. erythronotus var. Uneata. A. nigriceps, and A. ventri-

maculatus. All these names refer to a single species, A. dimidiata,

which are very variable in cephalic scutellation, pattern and head

and snout form. The type-specimen (holotypus) is the A. erythrono¬

ta because the Jan’s specimen to be an anomalous. A. Uneata is a

valid species stated here previously. The redescription of these two

taxa are subject of new researches that are in begining by the

author.

KEYWORDS: Elapomojus dimidiatus, Apostolepis erythronota,

Apostolepis ventrimaculata, A. dimidiata n. comb., morphocephalic

variation.

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der Calamariden. Buli. Acad. imper. Sei. St. Pétersbourg, 29:541-590, 1885.

WERNER, F. Ueber einige neue oder seltene Reptilien und Frõsche der Zoologischen

Sanmlung des Staates in München. Sitz. Bayer. Akad. IFtss. München, 1897:

203-220, il., 1897.

Recebido para publicação em 20/03/1984 e aceito em 28/03/1985.

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Mem. Inst. Butantan

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PRODUÇÃO DE VACINA PERTUSSIS POR DIFERENTES

PROCESSOS — NÍVEIS DE PROTEÇÃO E

ASPECTOS ECONÔMICOS*

Maria Ivette Carboni MALUCELLI **

João Pessoa de Paula CARVALHO ***

RESUMO; Diferentes processos foram desenvolvidos para aumen¬

tar a produção de Vacina Pertussis a fim de atender à elevada

demanda deste imunoterápico. A produção de Vacina Pertussis foi

realizada pelos processos de Garrafa de Roux, Fermentador e Agi¬

tador. Foram analisadas a potência, o rendimento e a eficiência da

vacina produzida por estes diferentes processos. Em todos os pro¬

cessos, a potência da vacina foi igual ou superior a 8 Ul/ml, resul¬

tado que está de acordo com as recomendações da Organização

Mundial da Saúde. O processo de Garrafa de Roux produziu vacina

com maior média de potência (12,33 ± 3,11) quando comparado com

os outros processos, mas com maior desvio-padrão. O Agitador produ¬

ziu vacina com menor média de potência (10,99 ± 1,52) porém, com

menor desvio-padrão, demonstrando, conseqüentemente, maior uni¬

formidade metodológica. O rendimento, assim como a eficiência da

vacina, foram maiores com o processo do Agitador.

PALAVRAS-CHAVE: Vacina Pertussis; coqueluche-vacina; Po¬

tência; rendimento e eficiência.

INTRODUÇÃO

A coqueluche, popularmente conhecida por “tosse comprida”, é uma molés¬

tia de distribuição cosmopolita que acomete, preferencialmente, crianças de 0 a

5 anos de idade.

Esta moléstia caracteriza-se por uma infecção respiratória localizada e com

manifestações específicas de tosse paroxística, linfocitose, com sintomas e carac¬

terísticas epidemiológicas únicas.

A evolução prolongada da doença, bem como à gravidade com que a mesma

se reveste, impõem-se medidas eficazes de controle.

* Extraído da Dissertação de Mestrado, defendida na Faculdade de Saúde Pública da

USP, 1983.

Pesquisador Científico Ref. PqC-1, Chefe da Seção de Vacinas Bacterianas do Instituto

Butantan, CEP 05504, Caixa Postal 65, São Paulo, Brasil.

*"• Professor Adjunto do Departamento de Prática de Saúde Pública da Faculdade de

Saúde Pública da USP, Av. Dr. Arnaldo, 715, CEP 01255, São Paulo, Brasil.

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MALUCELLI, M. I. C. & CARVALHO, J. P. P. Produção de Vacina Pertussis por diferentes

processos. Níveis de proteção e aspectos econômicos. Mem. Inst. Butantan, ^7/45:81-94,

1983/84.

Embora medidas inespecíficas de controle, como isolamento e tratamento

sejam adotadas, são as espeeíficas, representadas pela imunização ativa dos sus¬

cetíveis, as mais recomendadas.

A vacinação sistemática contra a coqueluche é feita rotineiramente com três

doses de Vacina Tríplice (Difteria-Tétano-Coqueluche) em crianças a partir de

2 meses até 4 anos de idade.

A Vacina Pertussis é uma suspensão de B. pertussis, fase I, morta por

agentes físieos ou químieos, que associada aos toxóides diftérico e tetânico dá

origem à Vacina Tríplice.

O requisito mínimo da Vacina Pertussis, estabelecido pela Organização

Mundial da Saúde (WORLD HEALTH ORGANIZATION"^, 1982), corresponde

a 4 Unidades Imunizantes por dose (usualmente contida em 0,5 ml), aferida pela

prova de proteção em camundongos infectados pela via intracerebral.

A prova de proteção em camundongos é o método obrigatório de eompro-

vação da atividade protetora da vacina, não eliminando a necessidade de compro¬

vação baseada em testes de campo.

Assim, as investigações efetuadas pelo Conselho de Pesquisas Médicas da

Inglaterra (MEDICAL RESEARCH COUNCIL^", 1956) demonstraram relação

positiva entre os testes de potência em camundongos e nível de proteção em

crianças vacinadas.

O método pioneiro de preparo da Vaeina Pertussis é o eultivo do agente

etiológico em meio sólido de Bordet-Gengou em Garrafas de Roux, executado

por MADSEN*^ em 1933.

O método em meio sólido, embora apresente algumas vantagens, como

eficácia e segurança, também apresenta algumas desvantagens, tais como: tempo

prolongado de cultivo, baixo rendimento a nível industrial e exigência de longo

tempo para sua destoxificação sob refrigeração, o que acarreta, muitas vezes,

perda de potência (CATILLEJOS CARMONA & GONZÁLEZ PACHECO\

1981).

Na procura de métodos alternativos para contornar as desvantagens da utili¬

zação do sistema em meio sólido, HORNIBROOK'* (1939), VERWEY & SAGE^^

(1945) e COHEN & WHEELER^ (1946) verificaram que o meio líquido

era mais adequado que o anterior. Seguiram-se outros trabalhos, visando melhorar

as caraeterísticas do meio líquido (GOLDNER et alii', 1966; STAINER &

SCHOLTE'®, 1971), bem como uma seleção mais criteriosa das cepas a serem

semeadas (STAINER & SCHOLTE'“, 1971; VAN HEMERT-®, 1971).

A tecnologia de produção de vacinas, nos últimos anos, sofreu mudanças

fundamentais com a introdução do uso de fermentadorcs. Este avanço teenológico

possibilitou efetiva simplificação no processamento de produção de vacinas.

O cultivo em fermentadores, embora apresente um rendimento superior, tem

seu valor protetor inferior, comparativamente ao método em meio sólido; porém,

compatível eom os padrões de imunogenicidade requeridos para a imunização

de suscetíveis (GALICIA et aliP, 1981; GÓMEZ REYES & MEDINA

GARCIA", 1981).

Os fermentadores oferecem como vantagens o bom rendimento a nível

industrial, maior homogeneidade de colheita, oferecendo maior eonfiabilidade.

Em contrapartida, temos o custo elevado do equipamento e sua manutenção,

assim como, necessidade de infra-estrutura adequada.

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MALUCELLI, M. I. C. & CARVALHO, J. P. P. Produção de Vacina Pertussis por diferentes

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1983/84.

No momento, no Brasil, apenas o Instituto Butantan de São Paulo, produz

a Vacina Pertussis, cuja produção de 1982 foi da ordem de 5 milhões de doses.

A demanda nacional é da ordem de 15 milhões de doses, segundo a infor¬

mação projetada pelo Anuário Estatístico do Brasil, 1980, relativamente à

população infantil de 0 a 4 anos de idade e considerando-se a vacinação de

75 a 85% desta população, submetida a um esquema completo de três doses e

um reforço. Desta forma, pode-se inferir da necessidade iminente de fomentar-se

a produção interna da Vacina Pertussis.

Preocupado em atender a esta elevada demanda, o Instituto Butantan tem

procurado alternativas de metodologia de preparo de vacina, visando atender

aos propósitos dos Serviços de Saúde Pública. Entre as alternativas, poder-se-ia

adotar a produção da Vacina Pertussis pelo processo de cultivo submerso em

frascos submetidos a agitação constante (Agitador).

Este processo tem sido utilizado em laboratórios, apenas para o preparo

do inóculo, o qual é transferido para o fermentador para a produção final da

vacina e, também, como um veículo para testes de meios de cultura (PUSZTAI

et alii“, 1961; LANE®, 1970; STAINER & SCHOLTE^®, 1971; GÓMEZ

REYES & MEDINA GARCIA®, 1981; MEDINA GARCIA et aliP, 1981;

RECAMIER et aliP®, 1981).

A procura de um processo de produção mais simplificado e econômico

levou-nos a estudar a viabilidade da produção da Vacina Pertussis pelo processo

do Agitador, em comparação com aqueles tradicionalmente utilizados.

Assim, para este trabalho, estabeleceu-se o seguinte objetivo:

— avaliar comparativamente a produção da Vacina Pertussis pelos pro¬

cessos de Garrafa de Roux (método estacionário); Fermentador e Agitador

(métodos de cultivo submerso), quanto a:

a) potência;

b) rendimento; e

c) eficiência (custo/benefício).

MATERIAL E MÉTODOS

O desenvolvimento prático deste trabalho foi realizado junto à Seção de

Vacinas Bacterianas do Serviço de Bacteriologia da Divisão de Microbiologia

e Imunologia do Instituto Butantan, São Paulo, no período de 1981 a 1983.

CEPAS DE Bordetella pertussis

Para a produção de Vacina Pertussis, foram utilizadas as cepas números

137 e 143, provenientes do National Institute of Health (N.I.H.), Bethesda,

Maryland, USA, liofilizadas, sorotipos 1.2.3.5.6. e a cepa número 18.323,

da mesma procedência, a qual foi utilizada para a dose desafiante intracerebral

em camundongos, segundo o método de KENDRICK et alii(1947).

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processos. Níveis de proteção e aspectos econômicos. Mem. Inst. Butantan, 47/45:81-94,

1983/84.

MEIOS DE CULTURA

Os seguintes meios de cultura foram utilizados para a produção da vacina

e testes:

— Meio de Bordet-Gengou, ao qual é acrescentado sangue citratado de

carneiro a 25% (KINDT & KÕRNER 1969) utilizado para a preparação

do inóculo e teste de viabilidade.

— Meio sólido de Holt (KINDT & KÕRNER**, 1969) utilizado para o

cultivo estacionário em Garrafas de Roux.

— Meio líquido de Cohen-Wheeler (COHEN & WHEELER^, 1946)

para o cultivo submerso em Fermentadores e Agitadores.

— Meio líquido de Sabouraud (U.S. DEPARTMENT OF HEALTH,

EDUCATION AND WELFARE 1968) para o teste de esterilidade (detecção

do crescimento de fungos).

— Meio líquido de tioglicolato (WORLD HEALTH ORGANIZATION

1982) para o teste de esterilidade (detecção do crescimento de bactérias

aeróbias e anaeróbias).

ANIMAIS

Foram utilizados camundongos machos da raça Swiss Webster, pesando

14 a 18 g, provenientes do Biotério Geral do Instituto Butantan, para os testes

de potência e toxidez.

OBTENÇÃO DA SUSPENSÃO DE B. pertussis PARA A PRODUÇÃO DA

VAÇINA PERTUSSIS

Os processos de produção seguiram as determinações da Organização

Mundial da Saúde (WORLD HEALTH ORGANIZATION ^3, 1977) com

algumas modificações de acordo com o Manual de Produção da Vacina

Pertussis do Instituto Butantan.

CONTROLE DE QUALIDADE DAS SUSPENSÕES

Para controle de qualidade das suspensões obtidas pelos processos de

Garrafa de Roux, Fermentador e Agitador, foram realizados os testes de pureza,

identidade, esterilidade, opacidade, toxidez e potência, segundo determinações

da Organização Mundial da Saúde (WORLD HEALTH ORGANIZATION

1982).

O poder imunizante da vacina foi determinado pelo método contido no

“Minimum Requirements for Pertussis Vaccine” (U.S. NATIONAL INSTITUTE

OF HEALTH 1968), e os resultados calculados pelo procedimento de

Worcester-Wilson (WORCESTER & WILSON 1943; U.S. NATIONAL

INSTITUTE OF HEALTH 1956).

ANALISE ESTATÍSTICA

Calcularam-se as médias aritméticas, os desvios padrão e os coeficientes de

variabilidade, segundo MARASCUILLO “ (1971).

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processos. Níveis de proteção e aspectos econômicos. Mem. Inst. Butantan, i7/i8:81-9i,

1983/84.

ANÁLISE ECONÔMICA

Quanto aos aspectos econômicos relativos à produção da vacina Pertussis

pelos três processos em questão, tão-somente estarão sendo considerados, pela

oportunidade e importância analítica deste trabalho, os pertinentes aos níveis

de custo da matéria-prima básica, ou seja. meios de cultura necessários.

A análise econômica global das alternativas industriais analisadas,

transcende ao âmbito do presente trabalho.

Portanto, a análise econômica baseou-se nos cálculos do rendimento e

eficiência dos processos de produção da Vacina Pertussis, considerando-se

apenas o custo do meio de cultura empregado.

Para a eficiência foram obtidos os valores em Cruzeiro (Cr$) dos meios

de cultura.

Os valores, em Cruzeiro, por litro dos meios de cultura, foram calculados

com base nos preços das drogas, de mão-de-obra e dos materiais de consumo

empregados, relativamente ao início do l.° semestre de 1983*.

Assim temos:

— Meio sólido de Holt: Cr$ 2.577,49 (dois mil, quinhentos e setenta e

sete cruzeiros e quarenta e nove centavos).

— Meio de Cohen-Wheeler: Cr$ 1.163,16 (hum mil, cento e sessenta e

três cruzeiros e dezesseis centavos).

RESULTADOS

Para o processamento dos resultados foram computados os volumes totais

de suspensão de B. pertussis aprovados nos testes de pureza, identidade,

esterilidade, viabilidade e toxidez, correspondente a 89, 39 e 34 lotes de

suspensão respectivamente para os processos de Garrafa de Roux, Fermentador

e Agitador.

Cada lote de cultura pura foi concentrado e submetido ao teste de

opacidade a fim de se calcular o número de doses.

A determinação do número de doses após concentração da suspensão

bacterlana de cada lote nos diferentes processos, foi obtido a partir do número

de unidades opacimétricas (UO) e do volume (ml) da suspensão. Sabendo-se

que 10 UO corresponde à unidade padrão para a obtenção de uma dose de

vacina, fez-se a relação entre o total de unidades opacimétricas de cada lote e

a unidade padrão para uma dose, cujo resultado é multiplicado pelo volume

da suspensão bacteriana do mesmo lote.

Os lotes foram armazenados entre 2 a 8'’C, aguardando a confirmação dos

resultados dos testes usuais. Aqueles aprovados foram misturados, dando origem

às partidas em número de 15, por processo, para serem submetidos posteriormente

ao teste de potência.

* Dados obtidos na Seção de Meios de Cultura do Serviço de Controle e Técnicas Auxiliares

da Divisão de Microbiologia e Imunologia do Instituto Butantan.

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DETERMINAÇÃO DA POTÊNCIA DA VACINA PERTUSSIS NOS

DIFERENTES PROCESSOS DE PRODUÇÃO

De cada uma das 15 partidas aprovadas, obtidas em cada processo de

produção, foi coletada uma alíquota para a realização do teste de potência,

cujos valores encontram-se na Tabela 1.

TABELA 1

Valores de potência (Ul/ml) da Vacina Pertussis, segundo partida e processo,

S.P.,1983

Processo

Partida

Garrafa de Roux

UI/ml

Fermentador

Ul/ml

Agitador

Ul/ml

12.0

11.2

8.0

11.2

12.8

11.2

13.4

14.4

9.6

12.0

16.0

11.2

9.7

12.8

12.0

8.0

11.9

10.8

19.7

13.4

9.6

11.4

9.9

10.8

13.1

8.0

12.8

12.9

10.8

9.8

13.4

10.8

11.2

18.3

8.0

8.8

13.4

8.8

12.0

12.8

12.0

11.2

Com os dados de potência da Tabela 1, foram calculados a média

aritmética, o desvio padrão e o coeficiente de variabilidade por processo

(Tabela 2).

TABELA 2

Valores da média aritmética, desvio padrão e coeficiente de variabilidade das potências

dos três processos empregados, S.P., 1983

Processo

C.V.

Garrafa de Roux

12,33

3,11

26,2

Fermentador

11,85

2,06

17,4

Agitador

10,99

1,62

13,8

X = média aritmética

s = desvio padrão

C.V. = coeficiente de variabilidade

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processos. Níveis de proteção e aspectos econômicos. Mem. Inst. Butantan, 47/4S:81-94,

1983/84.

AVALIAÇÃO DO RENDIMENTO DOS PROCESSOS DE

PRODUÇÃO DA VACINA PERTUSSIS

Para atender a este objetivo, foram considerados os volumes totais de meio

de cultura pura e o respectivo número de doses de vacina.

O rendimento foi calculado pelo quociente entre o número de dose obtido

e o volume de cultura pura, o qual foi designado pela letra A (delta), tendo

sido calculado, individualmente, pelos processos empregados (Tabela 3).

TABELA 3

Vacina Pertussis, segundo processo de preparo e condição, S.P., 1983

Condição

Processo

Vol de

cult. pura

(ml)

N.° de

doses

Rendimento

Garrafa de Roux

3.082.950

3.250.723

1,05

Permentador

969.600

1.739.629

1,81

Agitador

320.100

743.845

2,32

Total

4.362.650

6.734.197

—

Complementarmente, calculou-se a relação entre o rendimento dos processos

considerados 2 a 2 (Tabela 4).

TABELA 4

Relação entre rendimentos da Vacina Pertussis pelos processos relacionados 2 a 2,

S.P.,

1983

Relação dos Processos

Relação dos Rendimentos

Agitador x Garrafa de Roux

2,21

Fermentador x Garrafa de Roux

1,72

Agitador x Fermentador

1,28

ESTUDO DA EFICIÊNCIA DOS PROCESSOS DE

PRODUÇÃO DA VACINA PERTUSSIS

Neste estudo de eficiência da Vacina Pertussis, estabeleceu-se a relação

entre o custo e o benefício.

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processos. Níveis de proteção e aspectos econômicos. Mem. Inst. Butantan, 47/^3:81-94,

1983/84.

Conforme já nos referimos, por custo, considerou-se os gastos em Cruzeiros

(Cr$) apenas do meio de cultura e por benefício, o número de doses obtido

pelos diversos processos.

Considerou-se adequado avaliar o custo por dose de vacina e para tanto

houve a necessidade de se calcular, inicialmente, o volume de meio de cultura

por unidade de dose obtida pela relação entre o volume de meio (ml) utilizado

e o número de doses obtido. Assim:

Vol. meio de cult. de uma dose =

Vol. total do meio (ml)

N.° de doses obtido

Conhecido o custo de cada meio de cultura, como referido no capítulo

de Material e Métodos, calculou-se o custo de meio de cultura por unidade de

vacina, segundo os processos empregados (Tabela 5).

TABELA 5

Custo de meio de cultura para uma dose dé Vacina Pertussis, segundo processo de

preparo e condição, S.P., 1983

Condição

Vol. de meio/

Custo do ml

Custo de meio

dose

meio de cult.

cult. para uma

Processo

(ml)

(Cr$)

dose (Cr$)

Garrafa de Roux

0,95

2,58

2,45

Fermentador

0,65

1,16

0,63

Agitador

0,43

1,16

0,49

Finalmente, verificou-se a relação entre as eficiências dos processos

considerados 2 a 2 com o intento de se conhecer o número de vezes que um

método é mais eficiente que outro (Tabela 6).

TABELA 6

Relação entre eficiência da Vacina Pertussis pelos processos relacionados 2 a 2,

S.P.,

1983

Relação dos Processos

Relação Entre Eficiência

Agitador x Garrafa de Roux

5,0

Fermentador x Garrafa de Roux

3,9

Agitador x Fermentador

1,3

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DISCUSSÃO

A produção de Vacina Pertussis segundo três diferentes processos de

produção (Garrafa de Roux, Fermentador e Agitador) foi analisada segundo os

critérios de proteção, rendimento e eficiência.

Como pode ser observado pelos resultados constantes da Tabela 1, todas

as partidas, independentemente do processo utilizado, dosaram igual ou acima

do padrão proposto pela Organização Mundial da Saúde, ou seja, 8 Ul/ml

(WORLD HEALTH ORGANIZATION 1982).

O processo de produção em que foi utilizada a Garrafa de Roux, apresentou

maior média expressa em unidades de proteção (12,33 ± 3,11) que o

Fermentador (11,85 ± 2,06) e o Agitador (10,99 ± 1,52) — Tabela 2. Por

outro lado, o coeficiente de variabilidade entre os três processos foi menor para

o Agitador (13,8%), seguido pelo Fermentador (17,4%) e Garrafa de Roux

(25,2%) — Tabela 2. Estes dados estão de acordo com as referências de

GALICIA et alii ® (1981), os quais verificaram que a média de potência era

maior em cultivos estacionários que em fermentadores sendo, porém, a dispersão

dos resultados maior no primeiro processo. Salientam que pelo fato do processo

do fermentador apresentar menor variação em unidades de potência, permite

programar e controlar adequadamente o processo de produção.

A semelhança da observação do referido autor, os resultados obtidos na

presente pesquisa revelaram menor variabilidade para o método do Agitador.

Por outro lado, estes dados não permitem concluir se um processo é melhor

do que outro no que diz respeito à potência da vacina, uma vez que não existem

dados que permitam avaliar se uma vacina que apresenta maior unidade de

proteção, protege mais do que aquela com menor unidade de proteção. Assim,

o significado epidemiológico da maior ou menor proteção da vacina ainda não

é conhecido. Segundo ZAKHAROVA et alii^® (1981), o grau de eficácia

epidemiológica da vacinação varia muito, independente do número de unidades

de proteção da vacina. Portanto, segundo estes autores, a importância prática

do teste de proteção em camundongos é altamente convencional.

O rendimento dos três processos de produção da Vacina Pertussis foi

analisado, estabelecendo-se relação entre o número de doses obtido e o volume

de cultura pura. O melhor rendimento foi obtido pelo processo do Agitador

(A = 2,32), seguido pelo Fermentador (A = 1,81) e Garrafa de Roux

(A = 1,05) — Tabela 3.

Calculando-se a relação entre o rendimento dos processos considerados 2

a 2, podemos observar que o Agitador produz 2,21 (2,32/1,05) vezes mais

doses de vacina que o de Garrafa de Roux e 1,28 (2,32/1,81) vezes mais do

que o Fermentador, enquanto que este produz 1,72 (1,81/1,05) vezes mais que

o da Garrafa de Roux (Tabela 4).

Ao mesmo tempo, foi verificada a eficiência dos processos de produção,

onde se estabeleceu a relação entre o custo e o número de doses obtido pelos

diversos processos.

Os resultados mostraram que, enquanto são necessários 0,43 ml de meio

de cultura para produzir uma dose de vacina pelo processo do Agitador, o

Fermentador necessita 0,55 ml e a Garrafa de Roux 0,95 ml (Tabela 5).

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1983/84.

Com base nesta relação, pode-se verificar que o custo de meio de cultura

para obtenção de uma dose de vacina pelo processo do Agitador é de Cr$ 0,49

(quarenta e nove centavos), pelo Fermentador é de Cr$ 0,63 (sessenta e três

centavos) e pela Garrafa de Roux Cr$ 2,45 (dois cruzeiros e quarenta e cinco

centavos) — Tabela 5.

Estabelecendo-se a relação entre as eficiências dos processos considerados

2 a 2, verificou-se que o Agitador é 5,0 (2,45/0,49) vezes mais eficiente que

a Garrafa de Roux e 1,3 (0,63/0,49) vezes mais eficiente que o Fermentador,

enquanto que este é 3,9 (2,45/0,63) vezes mais eficiente que a Garrafa de

Roux (Tabela 6).

Estes dados favorecem o processo do Agitador, em comparação com os

outros, no que diz respeito ao rendimento e eficiência, uma vez que para se

obter uma dose de vacina é necessário menor volume de meio de cultura e

menor custo.

Ao analisarmos os rendimentos entre os diversos processos de produção,

não encontramos dados que pudessem justificar as diferenças apresentadas.

O menor rendimento da Garrafa de Roux talvez se deva ao crescimento

bacteriano apenas na superfície do meio de cultura, bem como pela

heterogeneidade entre as colheitas. Estes aspectos refletem-se, provavelmente,

em prejuízos da produtividade em larga eseala e, conseqüentemente, no maior

custo de produção.

A literatura não faz referência sobre ps rendimentos entre os dois processos

que utilizam cultivos submersos (Agitador e Fermentador).

Estes dois processos caracterizam-se por utilizar o mesmo meio de eultura

e mesma concentração de inóculo, diferindo porém no que se refere à formação

de espuma e aeração da cultura.

Assim, no Fermentador conseqüente à turbulência observa-se a formação

de grande quantidade de espuma a despeito de se incorporar antiespumante

(Antifoan, Dow Corning) na concentração de 0,9 ml/25 litros e que, segundo

GÓMEZ REYES & MEDINA GARCIA® (1981), arrastaria o crescimento

bacteriano para a superfície do meio, provocando a formação de grumos que

seriam os responsáveis pelo baixo desenvolvimento bacteriano.

GÓMEZ REYES & MEDINA GARCIA® (1981) recomendam, ainda, a

introdução de modificações nos equipamentos que impeçam a turbulência e

dispensem a adição de antiespumante. Com estas alterações, os autores

conseguiram elevar de 2 a 3 vezes o rendimento expresso em unidades de

opacidade/ml.

A impossibilidade de se controlar a aeração do meio de cultura do

Fermentador utilizado para este trabalho, talvez seja um outro fator responsável

pela quebra do rendimento do processo.

Confrontados os três processos de produção da vacina, verificou-se que,

embora o Agitador tivesse conferido menor média de potência comparativamente

aos outros dois processos, a variabilidade dos resultados entre as diversas

partidas foi menor e o rendimento e eficiência foram superiores.

Além destes aspectos, o Agitador oferece algumas vantagens: ausência de

espuma durante o processo da agitação; dispensa a aeração forçada; a

manipulação e manutenção são fáceis, pois exige uma infra-estrutura bastante

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processos. Níveis de proteção e aspectos econômicos. Mem. Inst. Butantan, 47/45:81-94,

1983/84.

simples, com pequeno risco de contaminação que concorrem para o elevado

rendimento do método. Como desvantagens podemos citar principalmente a

heterogeneidade dos cultivos em função do número de frascos Erlenmeyer para

o cultivo.

O Quadro 1 mostra, resumidamente, as vantagens e desvantagens dos três

processos analisados.

QUADRO 1

Caracte-

NJÍsticas

Processo

Vantagens

Desvantagens

Garrafa

Roux

1. Vacina com maior potência

2. Não há necessidade de

infra-estrutura sofisticada

1. Manipulação prolongada

2. Riscos de contaminação

3. Grande heterogeneidade de

cultivos

4. Baixo rendimento

5. Maior volume de mão-de-obra

6. Custo elevado do meio de

cultura e garrafas

Permentador

2. Controle rigoroso de variação

de pH, temperatura e

crescimento

3. Menor volume de mão-de-obra

1. Perda total do cultivo em

caso de contaminação

2. Necessidade de instalações

apropriadas (infra-estrutura

adequada)

3. Serviço de manutenção

constante do equipamento e

instalações (não permite

interrupção no fornecimento

de vapor, ar comprimido ou

água)

4. Adição de antiespumante

5. Custo elevado do

equipamento e manutenção

1. Fácil manutenção

2. Fácil manipulação

1. Frascos grandes e pequeno

volume de meio

Agitador

3. Não utilização de

antiespumante

4. Menor volume de mão-de-obra

5. Pequeno risco de

contaminação

G. Não há necessidade de

infra-estrutura sofisticada

7. Elevado rendimento e

menores custos

2. Heterogeneidade de cultivos

Com base em todos os aspectos constantes dos resultados e do Quadro 1,

é de se considerar a indicação deste último método na elaboração de Vacina

Pertussis. Qbviamente, os resultados ora encontrados são um incentivo a que

SciELO

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MALUCELLI, M. I. C. & CARVALHO, J. P. P. Produção de Vacina Pertussis por diferentes

processos. Níveis de proteção e aspectos econômicos. Mem. Inst. Butantan, 47/^5:81-94,

1983/84,

se prossiga com os estudos concernentes à produção da referida vacina em

quantidade cada vez maior a custo cada vez menor, a fim de atender à demanda

do país.

CONCLUSÕES

Após a realização da análise comparativa quanto à produção da Vacina

Pertussis pelos processos de Garrafa de Roux, Fermentador e Agitador, em

relação à potência, rendimento e eficiência, parece lícito concluir que:

1. QUANTO À POTÊNCIA

— Todos os processos analisados dosaram igual ou acima do padrão

proposto pela Organização Mundial da Saúde, ou seja, 8 Ul/ml.

— O processo de Garrafa de Roux apresentou maior média em unidades

de potência (12,33) em comparação ao Fermentador (11,85) e Agitador (10,99).

— O desvio padrão e o coeficiente de variabilidade da potência foram

menores para o Agitador, demonstrando sua maior uniformidade metodológica.

2. QUANTO AO RENDIMENTO

— O maior rendimento foi obtido pelo processo do Agitador.

3. QUANTO À EFICIÊNCIA

— A eficiência demonstrou ser maior quando se utiliza o processo do

Agitador.

ABSTRACT: Differcnt methodological procedures have been de-

veloped to increase the production of Pertussis Vaccine in order to

supply the increasing demand of this type of immunotherapic. The

production of Pertussis Vaccine was assayed by the Roux Flask,

the Fermentor and the Shaker process. The potency, the rate of

production as well as the efficiency of the vaccine produced by

these different procedures were analysed. Using these different

methods the vaccine produced had a potency of 8 lU/ml or higher,

a result which is in accordance to the recommendations of the World

Health Organization. The Roux Flask method produced vaccine

with the highest mean of potency (12.33±3.11) as compared to the

other ones but with the highest standard deviation. The Shaker

method produced vaccine with the lowest mean of potency (10.99±

1.52) but with a small standard deviation and consequently, with

a more homogeneous pattern of production. The rate of production

as well as the efficiency of the vaccine were higher with the Shaker

method.

KEYWORDS: Pertussis Vaccine; Whooping Cough vaccine; po¬

tency; efficiency and rate of production.

REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

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Recebido para publicação em 22/03/1984 e aceito em 12/06/1984.

i SciELO

Mem, Inst. Butantan

47/^5:95-105, 1983/84

ULTRASTRUCTURAL CHANGES IN NEUROMUSCULAR

JUNCTIONS OF MOUSE DIAPHRAGM CAUSED BY

THE VENOM OF THE CORAL SNAKE

MICRURUS CORALLINUS

Maria Alice da Cruz HOFLING *

Léa RODRIGUES-SIMIONI

Oswaldo Vital BRAZIL **

ABSTRACT: The effects of M. corallinus venom on the ultras-

tructure of the neuromuscular junction were investigated in mouse

phrenic nerve-diaphragm preparation. Crude venom (lO/ig/ml)

was added to the bath, and the muscle stimulated indirectly at 0.05

Hz for 90-180 min. The preparations were then fixed for electron

microscopy. After 90 min the venom caused changes in the nerve

terminais characterized by reduction in number and variation in

size of synaptic vesicles, appearance of omega-shaped axolemmal

indentations, swelling and disruption of mitochondria, increased

electron density of the axoplasm, and a decrease in size of the

terminal. By 180 min, many terminais had disappeared, and the

synaptic gutter appeared shallow, but otherwise normal. No changes

were seen in the postsynaptic folds or the muscle fibres. A remar-

kable finding was the presence of numerous finger-like membrane-

-bound bodies, between the nerve terminal and the Schwann cell,

or covering the denervated postsynaptic sarcolemma. These bodies

could have originated from Schwann cell processes. The results are

in keeping with electrophysiological studies (Vital Brazil and Fon¬

tana, 1983) whlch indicate that the venom has a predominantly

prejunctional action and blocks transmitter release.

KEYWORDS: Nerve terminal uitrastructure changes. Coral Snake

venom, presynaptic action.

INTRODUCTION

American venomous snakes popularly known as coral snakes are members

of the family Elapidae and all Brazilian species belong to the genus Micrurus.

Coral snake venom, similarly to venoms of elapid snakes of Asia, África and

* Department of Histology and Embriology, Institute of Biology. State University of

Campinas.

•* Department of Pharmacology, Faculty of Medicai Sciences, State University of Campinas

(UNICAMP), 13.100 Campinas, SP — Brazil.

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HOFLING, M. A. C.; RÜDRIGUES-SIMIONI, L, & BRAZIL, O. V. Ultrastructural changes in

neuromuscular junctions of mouse diaphragm caused by the venom of the coral snake

Micrurus corallinus. Mem. Inst. Butantan, 47/4S:95-105, 1983/84.

Australia, causes paralysis of skeletal muscle of peripheral origin in humans and

laboratory animais. Vital Brasil & Fontana, 1983/84.

Like the venom Bungarus multicinctus and those of some Austra-

lian snakes that of Micrurus corallinus exerts prejunctional action. The

presynaptic neurotoxins from thesc venoms ()3-bungarotoxin, taipoxin, notexin)

produce ultrastructural alterations of the nerve terminais, mainly related to the

number and localization of synaptic vesicles, and cause vacuolization and

swelling of the mitochondria (Chen & Lee, 1970, Cull-Candy et al 1976, Tsai

et al, 1976). There are indications that these morphological changes could pro-

vide clues to the presynaptic mechanism of snake toxins. It would therefore be

interesting to see whether the venom of M. corallinus induces similar altera¬

tions, and to establish a correlation between the morphological changes and the

electrophysiological findings of Vital Brazil and Fontana.

MATERIAL AND METHODS

Adult albino mice of both sexes (21-25 g) were killed and the diaphragms

excised. The innervated hemidiaphragms were suspended in an organ bath

containing Tyrode solution (with the following composition [mM]: NaCl 136.8,

KCl 2.7; CaCb 1.8; NaHCO.-) 11.9; MgCb 0.25; NaH^PO.! 0.3; glucose 11.0),

incubated at 37°C and aerated with 5% CO:; and 95% O 2 . The phrenic nerves

were stimulated for periods of 90, 120 and 180 min with maximal shocks of

0.05 Hz and 0.2 ms, with a Grass S48 stimulator. The contractions were isome-

trically recorded on an E & M Physiograph through a Linear-Core F50 trans-

ducer.

Control hemi-diaphragms were either fixed immediately for electron micros-

copy (see below) or treated as descrlbed above. In other hemi-diaphragms,

10 pg/ml of venom obtained from M. corallinus (from Eastern São Paulo State,

Brazil) was added to the Tyrode, the diaphragms being stimulated as described.

The LD50 (i.v.) of the venom was 400 (337 to 475) ;rg/kg in mice.

For electron microscopy, the hemi-diaphragms were cut into small pieces

(1 mm^) and fixed with 2.5% glutaraldehyde in 0.1 M cocadylate buffer (pH 7.2)

for 3 hr at 4°C. Specimens were post-fixed with 1% Os0.i in the same buffer

for 2 hr at 4°C, dehydrated in a graded series of ethanol followed by propylene

oxide, and embedded in Epon-812. Thick sections (1-2 pm) were cut with glass

knives and stained with Toluidine blue. Ultrathin sections were contrasted with

uranyl acetate and lead citrate for 30 min and 3-6 min respectively and examined

with a Zeiss EM-9 S2 electron microscope.

RESULTS

Control preparations. The ultrastructure of the neuromuscular junction in

control preparations (fig. 1) closely resembled previous observations in the

mouse and other mammals. (Bowden & Duchen, 1976, Duchen 1971).

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HOFLING, M. A. C.; RODRIGUES-SIMIONI, L. & BRAZIL, O. V. Ultrastructural changes in

neuromuseular junctions of mouse diaphragra caused by the venora of the coral snake

Micninis covallinus. Mem. Inst. Dutantan, 47’/45:95-105, 1983/84.

Fig. 1 — Normal motor end pia te from a diaphragm stimulated wich maximal pulses 0.2 msec

1 Hz in Tyrode solution for 180 min. The nerve terminal (N) eontains mitochondria

(m) and synaptic vesicles (v) and is separated from the post-synaptic folds of the

muscle fiber (M) by basal lamina (♦). A Sehwann cell process (S) covers the

nerve terminal. X 25000.

Venom-treaíed preparation. The ultrastructural changes produced by the

venom were studied in six phrenic nerve-diaphragm preparations. Complete

neuromuseular blockade oceurred 30, 45 and 90 min after the addition of the

venom (10 ng/ml) to the bath, in one, four and one experiments, respectively.

At 90 min although neuromuseular transmission was completely blocked,

most of the nerve terminais looked normal in the 30 motor end-plates examined.

Only some of them had swollen or disrupted mitochondria with dense matrix,

the axolemma indented and forming omega-shaped small invaginations (fig. 1).

A few electron-lucent vacuoles and vesicles larger than synaptic vesicles could

be found scattered in the axoplasm. In some terminais membrane-bound rounded

struetures, sometimes containing vesicles, were interposed bctween the terminal

and the postsynaptic sarcolemma (fig. 2). The nature of this finding was not

clear. It could represent cross-seclioned Sehwann cell processes or sequestered

bits of axoplasm with synaptic vesicles. Also, in many junctions round or oval

membrane-bound profiles were secn between the nerve terminal and the Sehwann

cell processes (fig. 2). The number and size of synaptie vesicles appeared normal.

The postsynaptic region showed normal-looking folds, and contained many

ribosomes, mitochondria, microtubules, microfilaments and sole-plate nuclei.

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HOFLING, M. A. C.; RODRIGUES-SIMIONI, L. & BRAZIL, O. V. Ultrastructural changes in

neuromuscular junctions of mouse diaphragm caused by the venom oí the coral snake

Micrurus corallinus. Mem. Inst. Butantan, 47'/4S;95-105, 1983/84.

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-V '• i.

Fig. 2 — Nerve terminal exposed to M. corallinus venom (10 ug/ml) for 90 min shows

synaptic vesicles in apparently normal number and distribution but with slight

variation in size. Some mitochondria are swollen, neurotubules and neurofilaments

appear normal. A membrane-bound body containing vesicles similar to synaptic

vesicles is wedged between axolemma and sarcolemma (♦). Omega-shaped indenta-

tions of the axolemma are seen (arrows). Membrane-bound bodies (X) lie over

the nervo terminal. Junctional folds and a sole-plate nuclcus appear normal. (Scale

bar: 0.5 /xm).

At 120 min electron microscopic examination of 64 end-plates showed that

almost all nerve endings were markedly depleted of synaptic vesicles, and the

axoplasm appeared electron-lucent (fig. .3). The axolemma was uninterrupted

but wavy (fig. 2) and in most terminais omega-shaped indentations were nume-

rous and present both in the areas of axolemma facing the muscle and the

Schwann cell (fig. 3). Some of the indentations had a thin coating of dense

material similar to that of coated-vesicles. Coated-vesicles larger than synaptic

vesicles could be found dispersed in the axoplasm. In some terminais, the mito¬

chondria were swollen and vacuolated, but in others they were normal in appea-

rance. Neurofilaments and neurotubules looked normal. Although no quanti-

tative analyses were performed, some terminais appeared decreased in size. The

synaptic gutter was not totally occupied by the terminal, but contained abundant

rounded or finger-shaped membrane-bound bodies. These were already seen

at 90 min, but became far more numerous at 120 and 180 min. These profiles

usually contained little amorphous material, some showed vesicles and electron-

dense corpuscles thought to be ribosomes (fig. 3 and 4).

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HOFLING, M. A. C.; RODRIGUES-SIMIONI, L. & BRAZIL, O. V. Ultrastructural changes in

neuromuscular junctions of mouse diaphragm caused by the venom oí the coral snake

Micrurus corallinus. Mem. Inst. Butantan, 47/45:95-105, 1983/84.

Fig. 3 — At 120 min electron-lucent nervo endings (N) are depleted of synaptic vesicles.

Membrane-bound bodies (X) are interposed between the ending and the Schwann

cell and to a lesser degree between the ending and the postsynaptic membrane.

One of the endings appears shrunken. Musele fibre (M). (Scale bar: 1 /xm).

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HOPLING, M. A. C.; I^ODRIGUES-SIMIONI, L. & BRAZIL, O. V. Ultrastructural changes in

neuromuscular junctiona of mouse diaphragm caused by the venom of the coral snake

Micrurus corallinus. Mem. Inat. Butantan, 47/48:95-105, 1983/84.

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Fig. 4

A nerve terminal at 120 min shows numerous omega-shaped indentations facing

both the postsynaptic membrane and the Schwann cell (arrow). The terminal is

depleted of synaptic vesicles, but mitochondria appear normal. Numerous rounded

or finger-like membrane-bound bodies (X) cover the terminal. The synaptic gutter

appears shallow. (Scale bar: 1 fim).

The postsynaptic region of the muscle fibres showed normal-looking postsy¬

naptic folds, but in some fibres the sarcoplasm at the end-plates appeared loose

and electron-lucent, and the rough endoplasmic reticulum and Golgi apparatus

had swollen cisternae. Other regions of the muscle fibres away from the

end-plates did not show significant abnormalities.

At 180 min, most terminais showed drastic reduction in size and some had

disappeared. The main morphological features of these terminais were the

absence of normal-sized synaptic vesicles, high electron density of the axoplasm,

the presence of degenerated swollen or disrupted mitochondria (fig. 5), and

numerous omega-like axolemmal indentations.

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HOFLING, M. A. C.; RODRIGUES-SIMIONI, L. & BRAZIL, O. V. Ultrastructural changes in

neuromuscular junctions of mouse diaphragm caused by the venoin of the coral snake

Micrurus corallinus. Mem. Inst. Butantan, i7/48:95-105, 1983/84.

Fig. 6 — 120 min. A normal-looking pre-terminal axon is surrounded by myelin. Both inside

and outside the myelin sheath there are abundant membrane-bound bodies (X),

similar to those seen at the end-plate below. The latter contains a shrunken

remnant of axonal terminal (A). The muscle fibre seems normal. (Scale bar:

0.5

Fig. 7 — 120 min. This picture probably represents a preterminal axon (A) at the last

heminode, and its axonal terminal (N) at an end-plate. The continuity is supported

by the basal lamina of the Schwann cell covering the axon (arrows), which reaches

down to the Schwana cell processes over the terminal. Many membrane-bound

bodies (X) are eontained between the basal lamina and the myelin sheath and are

also present over the postsynaptic folds at right. These bodies appear to be

derived from the Schwann cell. (Scale bar: 1 fim).

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HOFLING, M. A. C.; RODEIGUES-SIMIONI, L. & BRAZIL, O. V. Ultrastructural changes in

neuromuscular junctions of mouse diaphragm caused by the venoni of the coral snake

Micrurus corallinus. Mem. Inst. Butantan, 47/48:95-105, 1983/84.

DISCUSSION

The mode of action of Aí. corallinus venom in blocking neuromuscular

transmission has been investigated by Vital Brazil and Fontana (1983/84), who

suggested that the irreversible presynaptic action is more important in neuro¬

muscular blockade than the postsynaptic one. The venom caused an increase of

spontaneous ACh release even after neuromuscular blockade. However, the

evoked ACh release was greatly reduced. The present study confirms that Aí.

corallinus venom has a prejunctional neurotoxicity.

Presynaptic neurotoxins are found in some elapid and crotalid venoms such

as /3-bungarotoxin from the Formosa krait Bungarus multicinctus notexin from

the Australian tiger snake Notechis scutatus, toxins III A and III B from the

Indian krait, Bungarus caeruleus, taipoxin from the Australian taipan Oxyura-

nus scutellatus, and crotoxin from the South American rattlesnake Crotalus

durissus terrificus. Some of Ihese toxins e.g. taipoxin, notexin and crotoxin also

exhibit myotoxic activity, while yS-bungarotoxin seems to be exclusively neuro-

toxic. In this respect Aí. corallinus venom seems to act like yS-bungarotoxin,

since it does not alter muscle excitability. (Vital Brazil & Fontana, 1983/84).

In the present study the ultrastructural changes induced by Aí. corallinus

venom in the nerve terminal included the appearance of omega-chaped axo-

lemmal indentations, reduction in number of the synaptic vesicles and variation

oí their size, swelling and disruption of mitochondria, high electrondensity of

the axoplasm and significant reduction in size of the terminais. These features

are similar to those induced by /3-bungarotoxin (Chen & Lee, 1970, Tsai et al,

1976), notexin, taipoxin (Cull-Candy et al, 1976), and crotoxin (Gopalabrishna-

kone & Hawgood 1979). All these toxins have been found to have phospholipase

A-.> activity. Aí. corallinus venom also contains phospholipases (Hertel, personal

communication) which could account for the presynaptic block and the mor-

phological changes caused by the venom.

The present findings also suggest that presynaptic blockade after Aí. coralli¬

nus is not due to synaptic vesicle depletion bccause by 90 min the neuro¬

muscular blockade was complete but the vesicle population was not exhausted.

This is in agreement with the observation of Tsai et al, (1976) and Chang and

Lee (1973) on ^-bungarotoxin. However, by 120 min lhe synaptic vesicles had

disappeared from the terminais. Depletion was found to be accelerated by nerve

stimulation, as observed with taipoxin and notexin. (Cull-Candy et al, 1976).

The nature of the abundant membrane-bound bodies seen dose to degena-

rating terminais is unclear. Similar observations were made by Queiroz (1981)

in crotoxin-treated mouse muscle in vivo. It is possible that the bodies could be

fragments of the degenerating nerve terminal. They might also represent cross

sections through finger-like Schwann cell processes, arising in response to direct

venom action or an attempt at phagocytosis of debris.

This project was supported by grant from Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de

São Paulo (FAPESP — Proc. Biol. 78/202).

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HOPLING, M, A. C.; RODRIGUES-SIMIONI, L. & BRAZIL, O. V. Ultrastructural changes In

neuromuscular junctions of mouse diaphragm caused by the venom of the coral snake

MícrUnts corallinus. Mem. Inst. Butantan, 47/45:95-105, 1983/84.

RESUMO: Os efeitos do veneno de M. corallinus sobre a ultra-

-estrutura da junção neuromuscular, foram investigados em prepa¬

rações isoladas nervo-frênico-diafragma de camundongo. O veneno

bruto (10/ig/ml) foi adicionado ao banho, e o músculo estimulado

indiretamente a 0.05 Hz por 90-180 min. As preparações foram

então fixadas para exame ao microscópio eletrônico. O veneno causou

alterações nas terminações nervosas caracterizadas pela redução do

número e variação no tamanho das vesículas sinápticas, apareci¬

mento de indentações axolemais em forma de ômega, inchamento e

rompimento de mitocóndrias, densidade eletrônica do axoplasma

aumentada, e diminuição no tamanho do terminal. Em 180 min mui¬

tos terminais desapareceram e a goteira sinóptica mostrou-se pouco

profunda, mas normal. Nenhuma alteração foi observada nas dobras

pós-sinápticas ou nas fibras musculares. Uma observação marcante

foi a presença de numerosos corpos membranosos digitiformes, entre

0 terminal nervoso e a célula de Schwann, ou cobrindo o sarcolema

desnervado pós-sináptico. Esses corpos podem ter-se originado dos

processo da célula de Schwann. Estes resultados corroboram os

estudos eletrofisiológicos de Vital Brazil e Fontana (1983) que indi¬

cam que 0 veneno tem uma ação predominantemente prejuncional e

bloqueadora da liberação do neurotransmissor.

REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

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muscular junctions. Inx The neuromuscular junction. Handbook of Experimental

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& THESLEFF, S. The effects of taipoxin and notexin on the function and fine

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HOFLING, M. A. C.; RODRIGUES-SIMIONI, L. & BRAZIL, O. V. Ultrastructural changes in

neuromuscular junctions of mouse diaphragm caused by the venom of the coral snake

Micrwnis corallinus. Mem. Inst. Butantan, 47/^5:95-105, 1983/84.

VITAL BRAZIL, O. & FONTANA, M. D. Ações pré-juncionais e pós-juncionais da

peçonha da cobra coral Micrurus corallinus na junção neuromuscular. Mem. Inst.

Butantan, 47/45:13-26, 1983/84.

Recebido para publicação em 02/04/1984 e aceito em 29/03/1985.

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Mem. Inst. Butantan

47/45:107-111, 1983/84

NEMATÓIDES DE PASSALIDAE (COLEOPTERA).

DESCRIÇÃO DE KLOSSNEMA REPENTINA N. GÊN.,

N. SP. (NEMATODA: HYSTRIGNATHIDAE)

Nelson da Silva CORDEIRO *

Paulo de Toledo ARTIGAS ♦

RESUMO: Propõe-se a criação de uma nova espécie de oxiuróide,

encontrado em passalídeos do Estado de São Paulo (Brasil), para o

qual é proposta a denominação de Klossnema repentina. As carac¬

terísticas morfológicas desta nova espécie impõem a sua colocação

em um novo gênero (Klossnema), para ser situado em uma nova

subfamília (Klossnematinae).

PALAVRAS-CHAVE: Passalidae; Nematoda; Hystrignathidae;

Klossnematinae n. subfam.; Klossnema n. g:ên.; K. repentina n. sp.

INTRODUÇÃO

Os coleópteros da família Passalidae são hospedeiros constantes de nume¬

rosas espécies de nematóides (Cordeiro', 1981). Segundo Travassos & Kloss''

(1958), tais parasitas de passalídeos que integram essa fauna se restringiriam,

necessariamente, a gêneros e espécies das famílias Lepidonematidae (Travassos®,

1920) e Hystrignathidae Travassos & Kloss', 1958.

Em 1978, Clark^ assinala a presença de nematóides intestinais, em passa¬

lídeos australianos, que classificou na família Thelastomatidae (Travassos®,

1929).

No presente artigo, referimos um novo nematóide, encontrado com bastante

freqüência na segunda porção do intestino posterior, na conceituação de Pereira

& Rloss"* (1966), em espécie de Passalidae brasileiros. Fizemos a descrição de

uma subfamília nova, de novo gênero e da espécie tipo, aos quais damos respec¬

tivamente os nomes de Klossnematinae n. subfam. Klossnema n. gên. e K. repen-

tina n. sp., em homenagem à Dra. Rita G. Kloss, que trabalhou intensivamente

no grupo de nematóide de artrópodos.

* Departamento de Parasitologia, Universidade Estadual de Campinas.

Endereço para correspondência: Departamento de Parasitologia, I.B., Universidade Estadual

de Campinas, Caixa Postal 6109, Campinas, SP, Brasil.

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CORDEIRO, N. S. & ARTIGAS, P. T. Nematóides de Passalidae (Coleoptera). Descrição de

Klossnema repentina n. gên., n. sp. (Nematoda; Hystrignathidae). Mem. Inst. Butantan,

107-111, 1983/84.

MATERIAL E MÉTODOS

Os coleópteros utilizados para as pesquisas da fauna helmíntica foram

capturados no bosque da Zoologia, na Cidade Universitária “Armando de Salles

Oliveira”, e na reserva de mata da Fazenda Santa Genebra, em Barão Geraldo,

Campinas — São Paulo, Brasil. Os coleópteros eram sacrificados, para a colheita

de parasitos, apenas poucos dias após sua captura. A obtenção de nematóides

se realiza com a retirada do tubo digestivo, após a morte do inseto em atmosfera

saturada de clorofórmio.

O material parasitológico foi microscopado ainda vivo em soluto fisiológico

(4"/oo), entre lâmina e lamínula. Posteriormente foi transferido para o líquido

conservador Railliet-Henry, levado à câmara clara onde foram obtidos os dese¬

nhos apresentados no texto.

RESULTADOS

Ordem Rhigonematiformes Kloss^ 1960.

Nematóides parasitos do aparelho digestivo de artrópodos; apresentam o

bulbo posterior do esôfago bem desenvolvido e dotado de válvulas masticatórias

quitinizadas.

Superfamília Hystrignathoidea Kloss^ 1960.

Rhigonematiformes. Machos com aparelho espicular ausente, tendo sido

substituído, ou não, por formações cuticulares na extremidade dorsal; fêmeas

com o corpo do esôfago subcilíndrico ou claviforme.

Família Hystrignathidae Travassos & Kloss', 1958.

Hystrignathoidea. Fêmeas: Cutícula revestida, ou não, na região esofagiana,

de espinhos. Asas laterais presentes. Genitália mono ou didelfa. Vulva situada

no terço médio do corpo. Ovos pouco numerosos, elípticos. Complexo esofagiano

apresentando corpo, istmo e bulbo posterir bem destacado; bulbo posterior arre¬

dondado, com válvulas bem desenvolvidas.

Machos: Cutícula não espinhosa. Não apresentando aparelho espicular, que

é substituído por formação quitinizada situada dorsalmente na extremidade distai,

de modo a oferecer maior apoio no ato da cópula, na justaposição das aberturas

sexuais masculina e feminina.

Subfamília Klossnematinae n. subfam.

Hystrignathidae. Fêmeas: Corpo do esôfago longo, discretamente claviforme.

Istmo mais estreito na parte terminal do corpo do esôfago e não se diferenciando

de modo nítido com o bulbo posterior, que apresenta válvulas trituradoras. Cutí¬

cula inerme. Tubo intestinal retilíneo. Genitália didelfa a anfidelfa; Vulva situada

no quarto posterior do corpo; ovos pouco numerosos; cauda curta, terminando

em gancho.

Machos: Menores que as fêmeas e recurvados no quarto posterior. Complexo

esofagiano: Corpo do esôfago com estrangulamento médio, portanto apresentando

pré-corpo e metacorpo; istmo mal diferenciado: bulbo posterior com válvulas

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CORDEIRO, N. S. & ARTIGAS, P. T. Nematóidcs de Passalidae (Coleoptera). Descrição de

Klossnema repentma n. gên., n. sp. (Nematoda: Hystrignathidae). Hem. Inst. Butantan,

1983/84.

trituradoras. Intestino retilíneo. Na extremidade caudal, ânus terminal; na extre¬

midade distai o espessamento dorsal característico dos Hystrignathidae. Presentes

duas papilas, uma prc-anal e outra também anterior ao ânus, porém adanal;

presentes três ou quatro papilas muito discretas subterminais.

Gênero-tipo: Klossnema n. gên.

Gênero: Klossnema n. gên.

Gênero único, portanto com os caracteres da subfamília. Espécie-tipo:

Klossnema repentina n. sp.

Espécie-tipo e única do gênero. Com as características já oferecidas para a

definição da subfamília. Deve ser assinalada, ainda, a conformação da extremi¬

dade proximal do macho; nota-se uma dilatação cuticular bem destacada e enci¬

mada por quatro formações papilares; a esta dilatação proximal, segue-se o

estorna longo e bem diferenciado do esôfago anterior (corpo).

Média de medidas (em mm) de diversos exemplares Klossnema repentina n.

gên. n. sp. (17 machos e 25 fêmeas) :

Especificação

Fêmea

Macho

Comprimento

1,0

0,08

Largura máxima

0,03

0,021

Corpo do esôfago

0,11 X 0,0G

0,050

Istmo

0,024 X 0,016

0,048

Bulbo posterior

0,027 X 0,016

0,019

Vulva

0,65 da extremidade distai

—

Cauda

0,021

—

Espessamento espicular

—

0,012

Hospedeiro: Passalus punctatostriatus Perch., P. rusticus Perch., P. morio

Perch., P. inundulifrons Kuw. (Coleoptera: Passalidae).

Localização parasitária: Divertículos do intestino posterior.

Origem geográfica: Reserva de mata da Cidade Universitária “Armando de

Salles Oliveira” e reserva de mata da Fazenda Santa Genebra, Distrito de

Barão Geraldo, Campinas — São Paulo, Brasil.

Material: O material que serviu para a criação da nova espécie está conservado

em líquido de Railliet-Henry e, constitue uma “série sintípica”, com

numerosos exemplares. Os nematóides de Passalidae são frágeis e a sua

inclusão em preparados definitivos (bálsamo do Canadá, p. ex.) não nos

parece recomendável. É o motivo porque não selecionamos holótipos

macho e fêmea e parátipos.

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CORDEIRO, N. S. & ARTIGAS, P. T. Nematóides de Passalidae (Coleoptera). Descrição de

Klossnema repentina n. gén., n. sp. (Nematoda: Hystrignathidae). Mem. Inst. Butantan,

107-111, 1983/84.

PRANCHA — Klossnema repentina n. sp.; 1 — Fêmea. 2 — Extremidade anterior da fêmea.

3 — Extremidade posterior da fêmea, face lateral. 4 — Macho. 5 — Extremidade anterior

do macho. 6 — Extremidade posterior do macho, face lateral.

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i SciELO

CORDEIRO, N. S. & ARTIGAS, P. T. Nematóides de Passalidae (Coleoptera). Descrição de

Klossnema repentina n. gên., ii. sp. (Nematoda: Hystrignathidae). Mem. Inst. Butantan,

J,7/J,8-.Wl-in, 1983/84.

CONCLUSÃO

Obedecendo critérios seguidos por Travassos & Kloss’’ (1958), para a siste¬

mática de Hystrignathidae, cabe, no caso presente, erigir-se a família Klossnema-

tidae. Criou-se a nova subfamília Klossnematinae para a situação do novo

gênero Klossnema. É, sem dúvida, oportuna a criação desta subfamília, desde

que as características anatômicas de Klossnema são muito particulares. No caso

em tela, trata-se de um nematóide cujas fêmeas fogem completamente e de maneira

profunda às características anatômicas dos demais histrignatídeos. A colocação

de K. repentina n. sp. entre esses nematóides se impõe pela razão de que, em

exemplares masculinos, verificou-se que o complexo genital tem as características

que serviram de base para a criação da família Hystrignathidae, isto é, ausência

de espículo que é substituído por espessamento subcuticular na porção terminal

da cauda.

Assinala-se que este nematóide c relativamente freqüente, com vários

hospedeiros e, também, deve ser mencionado ter sido encontrado em biótipos

diversos, o que não é, em geral, observado com os outros nematóides de

passalídeos.

ABSTRACT: A new species Klossnema repentina is described from

brazilian passalid beetles (Passalidae). It is proposed the creation

of a new subfamily, Klossnematinae and of a new genus, Klossnema,

to situate this new species in the taxonomic System.

KEYWORDS: Passalidae; Nematoda; Hystrignathidae; Klossne¬

matinae n. subfam.; Klossnema n. gen.; K. repentina n. sp.

AGRADECIMENTOS

Ao Prof. Paulo Friedrich Bührnheim, da Universidade do Amazonas, pela

identificação dos coleópteros.

REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

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de São Paulo (Tese de Doutorado), 279 p. + 30 Pranchas, 1981.

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Recebido para publicação em 24/04/1983 e aceito em 19/07/1984.

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Mem. Inst. Butantan

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ESTOMATITE ULCERATIVA INFECCIOSA EM

BOA CONSTRICTOR CONSTRICTOR

MANTIDAS EM CATIVEIRO

Hideyo IIZUKA

Henrique Moisés CANTER

Edison Paulo Tavares de OLIVEIRA

Hisako Gondo HIGASHI

Raymundo ROLIM ROSA

RESUMO: No presente informe, descreve-se o isolamento de Pro-

teus mirabilis e Streptococcus viridans de estomatite ulcerativa em

coleção de Boa constricior conslrictor mantidas em cativeiro no

vivário do Museu do Instituto Butantan, e algumas observações rela¬

tivas a evolução da doença provocada por essa associação bacteriana.

PALAVRAS-CHAVE: Estomatite em Doa constrictor constricior

causada por Proteus mirabilis e Streptococcus viridans-, Mouth rot;

flora bucal de serpentes; serpentes em cativeiro; biotério de ser¬

pentes; répteis.

INTRODUÇÃO

Tem sido verificado, por diversos autores que a estomatite ulcerativa infec¬

ciosa é uma moléstia relativamente comum entre as serpentes, tanto nas vene-

níferas, como nas não-veneníferas “■ Ela ocorre principalmente em

animais depauperados, em conseqüência, predominantemente causadas por con¬

dições adversas, apresentadas pela vida em cativeiro, a qual muito difere daquelas

encontradas em vida livre, visto que as serpentes são animais extremamente

sensíveis a vários fatores externos *■

Em trabalho anterior®, foi descrito o surto de uma epizootia que acometeu

cerca de 70% das serpentes dos gêneros Bothrops e Crotalus, mantidas no bioté¬

rio de serpentes do Instituto Butantan, provocada por um bacilo difteróide. A

infecção caracterizava-se pelo aparecimento de uma massa caseosa, de coloração

branco-amarelada, de odor muito pronunciado, que lesava invariavelmente as

glândulas veneníferas e que resultava na continência da produção de veneno e

na morte de cerca de 25% dos ofídios acometidos.

Endereço para correspondência: Caixa Postal 05, 05504, São PauIo-SP, Brasil.

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nZUKA, H.; CANTER, H. M.; OLIVEIRA, E. P. T.; HIGASHI, H. G. & ROLIM ROSA, R.

Estomatite ulcerativa infecciosa em Boa constrictor constrictor mantidas em cativeiro.

Mem. Inst. Butantan, 47/48:113-120, 1983/84.

Recentemente, novo surto de estomatite ulcerativa de caráter infecto-conta¬

gioso, até então não descrita, irrompeu entre exemplares da coleção de Boa

constrictor constrictor mantidos em cativeiro no serpentário do Museu do mesmo

Instituto.

A Boa constrictor constrictor (L) é uma espécie de serpente que pertence

à família dos boideos, onde estãq classificados os maiores répteis atuais do

mundo, podendo atingir aproximadamente 5 metros de comprimento quando bem

desenvolvido '■ O gênero Boa compreende serpentes típicas do Novo Mundo.

No Brasil, a sua distribuição geográfica se faz por todo o nosso território, exceto

o extremo Sul. É ovovivípara, notívaga, constritora e vive em campos é moitas

não muito úmidas, alimenta-se de grande variedade de animais, dando prefe¬

rência a roedores e aves

Devido a falta de dados referentes a “mouth rot” ” na literatura

consultada, relativo a Boa constrictor constrictor, procuramos, no presente traba¬

lho, relatar o isolamento do agente etlológico, além de algumas observações

relativas à sintomatologia apresentada pelos répteis acometidos pela infecção.

MATERIAL E MÉTODOS

Coleta de amostras — as presentes observações foram realizadas em exem¬

plares adultos de Boa constrictor constrictor, sem distinção de sexo, procedentes

de diversas regiões do território brasileiro, pertencentes a coleção de serpentes

do Museu do Instituto Butantan.

As amostras do material foram colhidas de um lote de 7 animais doentes,

portadores de estomatite ulcerativa, com auxílio de uma espátula esterilizada,

diretamente da cavidade bucal e recolhidas em tubos de ensaio, de acordo com

a técnica descrita em trabalho anterior®. Em seguida, eram homogeneizados e

emulsionados em 5 ml de solução fisiológica estéril, a 0,85% de NaCl, PA, para

exame bacterioscópico e da cultura.

Cultura do material — a semeadura era imediatamente feita em volume de

0,1 ml da suspensão do material em meios de cultura básicos caldo

glicosado, na concentração final de 1% de glicose, meio de Tarozzi^®, caldo

infuso de cérebro e coração de boi — BHI, Difco, e meio de Zeissler modifi¬

cado ®, os quais, eram incubados em estufa, a temperatura de 37°C, durante um

período de 48 horas, e observadas a cada 24 horas. A seguir, as colônias desen¬

volvidas em meios sólidos eram analisadas e selecionadas quanto aos aspectos

morfológico, macroscópico e microscópico. Os esfregaços eram corados pelos

métodos de Gram e Wirtz. As colônias isoladas eram pescadas e conservadas

em tubos com meio de Lignières, protegidos com camada de óleo mineral.

Para o isolamento e classificação do tipo de estreptococo, a cultura em

placas de agar sangue era incubada a 37°C, durante um período de 24 horas

e em seguida, em geladeira, por mais 24 horas “■

A triagem prévia de bactérias aeróbias Gram negativas era realizada em

meio dc SV (Surraco & Violeta) ’®, provido de tubo de Durham invertido *• “L

Os exames bacteriológicos eram realizados de acordo com as técnicas padrões

para classificação de enterobactérias descrita por Rugai c Araújo “ e modificações

propostas por Toledo e col. A identificação bioquímica foi confirmada de

acordo com as técnicas recomendadas por Edwards & Ewing *.

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Estomatite ulcerativa infecciosa em Boa constHctor constrictor mantidas em cativeiro.

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RESULTADOS E DISCUSSÃO

A atividade dos répteis depende muito da pecilotermia e, ao contrário dos

animais homeotermos, não possuem a propriedade de manter constante a tempe¬

ratura corporal. Portanto, apresentam alto grau de sensibilidade às variações

climáticas, tais como: temperatura, grau de umidade relativa, iluminação, aeração

etc., além de outros fatores O índice de sobrevida destes animais, quando

mantidos em cativeiro, depende muito da otimização das variáveis físico-químicas

citadas, para que se mantenham em boas condições de saúde. Qualquer desequi¬

líbrio destes fatores essenciais que garantem o seu bem-estar, poderá desencadear

situações estressantes que levará à instalação de doenças, ou mesmo a surto de

eplzootias '•

No presente estudo, o resultado das provas bacteriológicas e bioquímicas

permitiram verificar que no lote de serpentes doentes, a estomatite ulcerativa

era provocada por uma infecção bacteriana mista, resultante da associação entre

Proteus mirabilis e Streptococcus viridans.

A moléstia inicia-se com hiperemia da mucosa oral, acompanhada de aumento

de sensibilidade dolorosa, motivo pelo qual o ofídio recusa a alimentação. Em

condições normais, a Boa pode aceitar mais de uma presa — camundongos, ratos

ou cobaias — por refeição, que é feita normalmente duas vezes por mês, de

acordo com o porte e apetite do animal *. Mas, o réptil doente muda completa¬

mente seu comportamento, fica mais irritadiço e agressivo. Com a evolução da

doença, cessa o movimento ágil da língua, uma das características de serpente

saudável. Em seguida, aparece edema na mucosa bucal acompanhada de aumento

de secreção, inicialmente fluida, mas, com a progressão da moléstia, torna-se

mais viscosa e de aspecto gelatinoso. Esta abundante sialorréia, mais o edema

da região oro-faringeana, muitas vezes, acaba obstruindo parcialmente as vias

aéreas superiores, e totalmente as narinas, comprometendo a respiração.' Nesta

fase, 0 réptil começa a demonstrar dispnéia e a elevar a cabeça, procurando,

assim, melhorar as condições de respiração, mantendo-a em posição vertical,

apoiando-se na parede do serpentário, imóvel, durante longo espaço de tempo.

Esta postura, caracterizada pela elevação do terço anterior do corpo, até formar

quase um ângulo de 90° em relação ao solo, foi observada também por Burtscher ^

que embora tenha descrito minuciosamente a evolução da estomatite ulcerativa,

inclusive com a distinção de duas formas evolutivas da doença — a aguda e a

crônica, não explicou, contudo, a causa deste comportamento abiiormal.

Muitas vezes, o edema pode deformar a cabeça da jibóia e, nos casos

graves, provocar dispnéia permanente; na fase final das evoluções agudas, antes

de o animal sucumbir, manifestam-se crises intermitentes de apnéia, com espasmos

e contrações serpejantes generalizadas. Toda esta evolução, até a morte, pode

transcorrer num período relativamente curto, de 7 a 10 dias, quando da evolução

aguda da moléstia.

Por outro lado, quando a evolução é do tipo crônico, a serpente poderá

sobreviver durante dois a três meses e, dependendo do estado nutricional, pode

evoluir para a cura completa, ou resultar em morte súbita decorrente da caquexia

profunda (Tabela 1).

Na infecção crônica, o animal fica muito fraco, em virtude da incapacidade

de se alimentar. Não consegue mais permanecer na posição vertical acima refe¬

rida. E, a partir da segunda semana, o fluxo das secreções pode diminuir, ou

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Estomatite ulcerativa infecciosa em Boa constrictor constrictor mantidas em cativeiro,

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desaparecer por completo, como soe acontecer, na maioria das vezes, dando

lugar ao aparecimento de material de aspecto caseoso, esbranquiçado, que torna

abundante, principalmente na mucosa próxima aos dentes, tanto no maxilar

superior, como no inferior (Fig. 1), o qual é destacável, sem provocar hemorragia.

Analisando a Tabela 1, pode-se constatar que o índice de mortalidade pela

estomatite é superior a 50% do lote, visto que, de 7 animais estudados, quatro

tiveram êxito fatal, no período de aproximadamente três meses de observação.

E ainda, o número de mortes foi mais elevado quando a doença evoluía sob

a forma aguda (3 mortos), em relação a crônica (1 morto). Por outro lado, os

répteis que conseguiram vencer estes prazos de sobrevida, recuperaram-se com¬

pletamente da infecção.

Uma particularidade bastante interessante, observada neste estudo, foi o fato

de estomatite ulcerativa. infecciosa, além de ser causada por infecção mista,

resultante da associação bacteriana entre Proteiis mirabilis e Streptococcus alfa-

-reativos, ter afinidade específica para com o hospedeiro, pois, apesar de exem¬

plares de Boa constrictor constrictor estarem sendo criadas juntamente com

serpentes de outras espécies, venenosas e não-venenosas, não houve transmissão

da moléstia.

Alguns autores acham que as serpentes, em liberdade, e em condições

naturais, não estão sujeitas às inúmeras doenças que sofrem, quando em cativeiro.

Williams e col. observaram que as serpentes recém-capturadas não apre¬

sentam flora bacteriana muito numerosa, mas em cativeiro, o número de micror¬

ganismos presentes na boca se multiplica acentuadamente. Estes autores

estudando a microbiota presente na cavidade oral de serpentes australianas

mantidas em cativeiro, conseguiram isolar os microrganismos do gênero Proteus

em mais de 70% dos animais que sofriam de estomatite cancróide.

Wagner ao estudar casos de estomatite ulcerativa em serpentes norte-ame¬

ricanas, bem como de outras origens, afirma que “mouth rot” c uma doença

muito comum entre os répteis. Ele acha que o desequilíbrio de fatores micro-

climáticos é que contribuem para o surto desta moléstia, isto é, quando as

gaiolas não recebem aquecimento suficiente, nem grau de umidade relativa

correta. Quanto à evolução da enfermidade, classificou-a também em dois tipos:

a aguda, com êxito fatal em alguns dias, a qual ele denominou de estomatite

sob forma mucosa, e a crônica, por ele denominada de forma caseosa da

estomatite.

Goldstein e col.'' pesquisaram a flora bacteriana aeróbia e anaeróbia de

amostras de venenos de 19 exemplares de Crotalus norte-americanas, mantidas

em cativeiro, no laboratório, num intervalo de tempo que variava de duas

semanas a seis meses. As espécies bacterianas aeróbias mais comumente isoladas

eram aquelas pertencentes aos gêneros Proteus e Pseudomonas.

Butscher^ estudou 44 casos de “mouth rot” em 13 espécies de serpentes,

sendo a maioria européias, tanto venenosas como não-venenosas, e isolou o

agente etiológico comum — Bacillus fluorescens liquefadens (Flügge), inclusive

de um exemplar de Boa constrictor constrictor, de cerca de dois metros de

tamanho, procedente do Brasil. E concluiu que este agente é altamente patogê¬

nico aos animais pecilotérmicos.

Dessa maneira, podemos verificar que a estomatite infecciosa é uma afecção

peculiar aos ofídios, e que pode ser provocada por diversas espécies bacterianas,

associadas ou não.

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IIZUKA, H.; CANTER, H. M.; OLIVEIRA, E. P. T.; HIGASHI, H. G. A ROLIM ROSA, R.

Estomatite ulcerativa infecciosa em Boa constrictor constrictor mantidas em cativeiro.

Mem. Inst. Butantan, Í7/4S; 113-120, 1983/84.

Parrlsh e col. “ estudaram a flora bacteriana da boca e da glândula vene-

nífera de 25 serpentes norte-americanas, aparentemente normais. Os germes

mais freqüentemente encontrados foram Proteus vulgaris, além de outras espécies

bacterianas, com predominância de coliformes e difteróides. Isolaram também

Streptococcus, porém não chegou a classificá-lo. Estes autores afirmam que não

há diferença significativa entre a flora bacteriana de serpentes recém-capturadas

e a de cativeiro durante algumas semanas.

Em nosso meio, Moreno e col. pesquisaram enterobacteriaceas de 618

exemplares de anfíbios e répteis aparentemente sãos, em sua maioria de material

colhido de ofídios do biotério de serpentes do Instituto Butantan. Os resultados

obtidos indicam a predominância de espécies bacterianas pertencentes ao gênero

Proteus, sendo: 3% de Proteus mirabilis, 15% de Proteus rettgeri, 14% de

Proteus morgani e 16% de Proteus vulgaris, respectivamente, além de outras

espécies bacterianas. Em vista de estes microrganismos não estarem causando

manifestações clínicas aparentemente abnormais, concluíram que os animais de

sangue frio devem representar um papel muito importante como reservatório

primitivo e natural de enterobacteriaceas, na natureza.

Além destes, outros pesquisadores também conseguiram isolar entercbacte-

riaceas do gênero Proteus, da flora bucal de serpentes aparentemente hígidas ’’’

12 . 15 . 16

E, para finalizar, podemos concluir que quanto às bactérias albergadas na

cavidade bucal de répteis, podemos dividi-las em dois grupos: no primeiro, estão

aquelas que causam moléstias, portanto de maior interesse sob o ponto de vista

clínico e noutro, em meros hospedes normais do réptil, pois, apesar de serem

potencialmente patogênicos, não encontram, em condições normais, favorabilidade

para a instalação de um processo infeccioso.

TABELA 1

Estomatite ulcerativa infecciosa em lote de 7 exemplares de Boa constrictor constrictor

mantidas em vivário do Museu do Instituto Butantan

Serpente

N.°

Comprimento

(Cm)

Tempo de

Cativeiro

Evolução da Doença

Observação (Dias)

305

+ (90)

145

-f (18)

140

(*)

250

(*)

ICO

27d

-f (22)

185

15d

-f (10)

183

(*)

a = anos m = meses; d = dias; -j- =; morte

(*) Após 90 dias, os animais que sobreviveram, permaneceram sem sintomas.

117

1 SciELO

IIZUKA, H.; CANTER, H. M.; OLIVEIRA, E. P. T.; HIGASHI, H. G. & ROLIM ROSA, R.

Estomatite ulcerativa infecciosa em Boa constrictor constrictor mantidas em cativeiro.

Mem. Inst. Butantan, 47/4«: 113-120, 1983/84.

CONCLUSÕES

1. Exemplares de Boa constrictor constrictor mantidas em cativeiro são

passíveis de contrair infecção bucal, causando caquexia e morte;

2. sete exemplares doentes de Boa constrictor constrictor apresentaram aos

exames bacteriológicos e bioquímicos, flora bacteriana representada por Proteus

mirabilis e Streptococcus viridans;

3. 0 índice de mortalidade pela estomatite foi superior a 50%, e o número

de mortes foi mais elevado quando a moléstia evoluia sob a forma aguda.

INFECTIOUS ULCERATIVE STOMATITIS IN BOA CONSTRICTOR

CONSTRICTOR MAINTAINED IN CAPTIVITY

ABSTRACT: Isolation of Proteus mirabilis and Streptococcus

viridans from ulcerative stomatitis in Boa constrictor constrictor

maintained in captivity in the Butantan serpentarium and some

observations related to the disease’s developement caused by this

bacterial association.

KEYWORDS: Stomatitis in Boa constrictor constrictor caused by

Proteus mirabilis and Streptococcus viridans; Mouth rot; Oral flora

of the snakes; Snakes in captivity; Reptiles.

118

i SciELO

IIZUKA, H.; CANTER, H. M.; OLIVEIRA, E. P. T.; HIGASHI, H. G. & ROLIM ROSA, R.

Estomatite ulcerativa infecciosa em Boa consirictor constrictor mantidas em cativeiro.

Mem. Inst. Butantan, 47/45:113,-120, 1983/84.

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119

1 SciELO

IIZUKA, H.; CANTER, H. M.; OLIVEIRA, E. P. T.; HIGASHI, H. G. & ROLIM ROSA, R.

Estomatite ulcerativa infecciosa cm Boa constrictor ronstrictor mantidas em cativeiro.

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Recebido para publicação cm 25/04/1984 e aceito em 15/06/1984.

120

SciELO

10 11 12 13 14 15

Mem, Inst. Butantan

47/^5;121-126, 1983/84

RELATO CLÍNICO DE ENVENENAMENTO HUMANO

POR PHILODRYAS OLFERSII

Marcos Vinícius da SILVA *

Marcus Augusto BUONONATO **

RESUMO: Apresenta-se um caso de acidente humano por Philo-

dryas olfersii, serpente até agora considerada não causadora de aci¬

dentes. Relata-se o estudo semiológico, tratamento e a evolução

observada. Compara-se os sinais clínicos registrados com os deter¬

minados pelo acidente botrópico.

PALAVRAS-CHAVE: Síndrome: ofidismo, Philoãryas. Serpente:

Colubridae.

INTRODUÇÃO

Os acidentes humanos cujo agente etiológico são serpentes são freqüentes

em nosso meio. O Hospital Vital Brazil, do Instituto Butantan, onde atende-se

a maioria desses acidentes ocorridos na Grande São Paulo e algumas cidades

vizinhas, recebe em média 500 destes casos por ano, dos quais 40% (200 casos)

são acidentes por serpentes consideradas não peçonhentas. Entre estas encon¬

tramos a serpente opistóglifa, Philodryas olfersii (Liechtenstein, 1823), vulgar¬

mente conhecida como Boiubu, Boiubi, Arabóia (2) e Cobra Verde. Pertence

à família Colubridae e à subfamília Boiginae. Tem o corpo de cor verde, sendo

0 ventre mais claro, ligeiramente amarelado. A parte superior da cabeça apre-

.senta um tom castanho-metálico, de onde parte uma linha ocre no dorso, longitu¬

dinalmente. Na altura do olho há uma faixa mais escura. É tanto terrestre como

dendrícola, habitando vegetação baixa. Mais ativa pela manhã, alimenta-se de

pequenos vertebrados, como lagartos, rãs e pássaros (onicarnívora). É ovípara

t4 a 10 ovos), reproduzindo-se preferencialmente de setembro a novembro (6).

Muito comum no Sul, Centro-Oeste, Nordeste do Brasil e vale amazônico (1).

É encontrada desde a Amazônia até a Patagônia. Mede aproximadamente um

metro de comprimento. Muito ágil, foge do contato com o homem; agressiva

quando acuada ou manuseada, morde com facilidade (fig. 1).

* Médico do Hospital Vital Brazil, Instituto Butantan, São Paulo.

** Biólogo Bolsista da FUNDAP, da Secção de Museu do Instituto Butantan.

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SILVA, M. V. & BUONONATO, M. A. Relato clínico de envenenamento humano por Philo-

dryas olfersii. Mem. Inst. Butantan, i7/i8:121-12G, 1983/84.

MATERIAL E MÉTODOS

Considerou-se o registro detalhado do acidente causado pela serpente

Philodryas olfersii na cidade de São Paulo. Mediante investigações realizadas

determinou-se os seguintes achados:

1. “) Circunstância em que ocorreu o acidente.

2. “) Tempo transcorrido entre o acidente e o atendimento médico.

3. °) Região anatômica em que ocorreu o acidente.

4. °) Sinais e sintomas apresentados.

5. “) Evolução e resolução do quadro clínico.

No Hospital Vital Brazil, onde a estrutura do Serviço, os recursos humanos,

médicos e paramédicos são montados e voltados para os acidentes humanos por

animais peçonhentos, atendemos um caso de acidente por Philodryas olfersii,

que passaremos a relatar:

Relato do caso: paciente masculino, 24 anos de idade, branco, residente na

cidade de São Paulo, biologista, conhecendo bem herpetologia, no dia 26 de

dezembro de 1983, às 08,45h foi mordido no antebraço esquerdo, por um

exemplar adulto de Philodryas olfersii enquanto tratava o animal. No momento

do acidente sentiu dor pouco intensa e contínua, no local da mordedura, e

observou o aparecimento de edema local.

Procurou atendimento médico no Hospital Vital Brazil, do Instituto Butantan,

na mesma data do acidente às 09,40h; queixava-se de dor de pequena intensidade

no antebraço esquerdo; apresentava-se em bom estado geral, corado, hidratado,

normotenso (PA = 120x70 mm. de Hg.), com pulso e freqüência cardíaca de 88

batimentos por minuto e normotérmico (36°C). Na metade proximal, face

antero-medial do braço esquerdo, observou-se quatro ferimentos lineares de

•-t 3 cm, paralelos, equidistantes ± 0,8 cm, recobertos por crostículas hemáticas;

edema +1/+4 de todo o antebraço, de consistência aumentada, não depressível,

discretamente doloroso à palpação, com aumento da temperatura local; área

de equimose circundando o local da mordedura, mais acentuado na região proxi¬

mal do antebraço (fig. 2). Gânglio axilar esquerdo aumentado de tamanho

(± 3 cm), doloroso à palpação, de consistência amolecida, não aderido a planos

profundos e sem sinais flogísticos. O paciente permaneceu em observação, e às

13,10h foi reavaliado; os dados vitais estavam mantidos e houve piora do edema

(+2/-f4), que acometia, além do antebraço esquerdo, o braço e a mão, com as

mesmas características anteriormente descritas; acentuou-se a área de equimose

e a dor permaneceu muito discreta. Foi realizado tempo de coagulação (3), com

resultado normal (coagulável com 6 minutos). O paciente foi medicado com

antihistamínico, antiinflamatório não hormonal, analgésico e repouso. Após 28

horas do acidente o edema progrediu, apresentando o dobro do diâmetro normal

do braço, antebraço esquerdo, e também da mão, com as mesmas características

já referidas (fig. 3). A área de equimose acentuou-se e estendeu-se até a região

axilar esquerda, acometendo toda a face medial do braço e antebraço, acima do

local da mordedura. No local do acidente e abaixo dele não se evidenciava

equimose, apenas edema (fig. 4). O gânglio axilar aumentou de diâmetro (5 cm),

tornou-se bastante doloroso e sem sinais flogísticos; houve qiieixa de piora da

dor em todo o membro superior esquerdo e sensação de fraqueza nos membros

inferiores. A partir do 4.° dia pós-acidente, começou a ocorrer involução gradativa

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SciELO

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SILVA, M. V. & BUONONATO, M. A. Relato clínico de envenenamento humano por Philo-

dryas olfersii. Mem. Inst. Butantan, 47/45:121-126, 1983/84.

do edema, da equimose e do enfartamento ganglionar. No 14.° dia pós-acidente

houve involução total da sintomatologia com exceção da fraqueza nos membros

inferiores, que persiste. '

FIGURA N.° 1 '

Figura 2

SILVA, M. V. & BUONONATO, M. A. Relato clínico de envenenamento humano por Philo

dryas olfersii. Mem. Inst. Butantan, 47/45:121-126, 1983/84.

Figura 3

Figura 4

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SILVA, M. V. & BUONONATO, M. A. Relato clínico de envenenamento humano por Philo-

dryas olfersü. Mem. Inst. Butantan, 4?’/4S:121-126, 1983/84.

DISCUSSÃO

Até o presente acidente pouea ou nenhuma atenção era dada no nosso meio

aos acidentes ofídicos causados por serpentes opistóglifas, que em muitos easos

são benignos, com pouca sintomatologia. Esta atitude decorre da difieuldade

que estas serpentes encontram para inocular sua peçonha, pois os dentes respon¬

sáveis pela inoculação encontram-se na região posterior da maxila.

Em geral, os acidentes eom este tipo de serpente são causados só pelos

dentes anteriores, que não têm capacidade de inoculação do veneno; mas quando

este é inoculado, o quadro clínico pode assumir proporções alarmantes pela

manifestação proteolítica do veneno, bem evidenciável neste caso (4 e 7).

Não foi constatada alteração no tempo de coagulação, fato concordante

com os achados “in vitro” por Martins (4), que mostrou a ausência de atividade

coagulante do veneno de Philodryas sobre sangue de cavalo citratado a 1%.

O aparecimento de lesões equimóticas somente acima do local da mordedura,

acometendo todo o terço proximal do antebraço, braço e região axilar esquerda,

coincide com o sentido do retorno venoso e da drenagem linfática, o que nos

levou a pensar na possível absorção linfática e/ou venosa do veneno para exercer

sua ação fisiopatológica. Se esta estivesse na dependência da difusão do veneno

entre os teeidos a partir do local da inoculação, encontraríamos lesões equimóticas

no local da mordedura e abaixo dela, o que não foi observado. Outro fato

importante é o aeometimento ganglionar axilar esquerdo, não observado em

outros acidentes por serpentes peçonhentas e não peçonhentas, evidenciando o

provável acometimento do sistema linfático.

As lesões equimóticas são muito semelhantes às encontradas em acidentes

botrópicos, e são atribuídas à ação de hemorraginas.

O que não ficou claro foi a queixa persistente de fraqueza nos membros

inferiores, embora Martins (4), tenha mostrado experimentalmente a atividade

neurotóxica do veneno de Philodryas para a rã (Leptodactylus occelatus).

Por muito tempo esta serpente foi colocada entre as não causadoras de

acidentes para o homem, fato com o qual não concordamos, e que vai de encontro

ao relato de Nickerson e Henderson (5). Se não tivéssemos certeza da identi¬

ficação do animal agressor, o quadro clínico dificultaria o diagnóstico pela

semelhança encontrada (sinais proteolíticos e equimose) com o acidente botrópico,

tão freqüente em nosso meio.

ABSTRACT: A case of human accident following bite o£ the snake

Philodryas olfersü, known as a now-poisonous snake, is presented.

Clinicai study, treatment and evoluation are reported. Registered

clinicai signs of this accident are coinpared to those provoked by

poisonous snakes of Bothrops genus.

KEYWORDS: Syndrome; ophidism, Philodryas. Serpente: Colu-

bridae.

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dryas olfersii. Mem. Inst. Butantan, 47/45:121-126, 1983/84.

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2 3

5 SciELO ;lo 11 12 13 14 15

Mem. Inst, Butantan

Í7/4S:127-131, 1983/84

LOXOSCELISMO: RELATO DE UM ACIDENTE HUMANO

ATRIBUÍDO A LOXOSCELES AMAZÔNICA GERTSCH,

1967 (ARANEAE, SCYTODIDAE, LOXOSCELINAE)

(HEMIPTERA, REDUVIIDAE)*

Sylvia LUCAS ♦

João Luiz CARDOSO **

Angelina Cirelli MORAES ***

RESUMO: é relatado um acidente humano atribuído a aranha:

Loxosceles amazônica Gertsch 1967, ocorrido na cidade de Crato,

Ceará, Brasil.

PALAVRAS-CHAVE: Loxoscelismo. Acidente atribuído Loxosceles

amazônica Gertsch, 1967. ARANEAE. SCYTODIDAE. LOXOSCE-

LINAE.

INTRODUÇÃO

Em 1967 Gertsch (3) fazendo a revisão das espécies sul-americanas perten¬

centes ao gênero Loxosceles Heinecken e Lowe, 1835, constatou a existência de

trinta espécies sul-americanas, citando quatro como causadoras de acidentes:

laeta, gaúcho, reclusa e rufescens, não ignorando, porém, a possibilidade de as

demais também apresentarem um veneno ativo para o homem.

A primeira referência a acidentes humanos provocados por aranhas do gênero

Loxosceles na literatura brasileira é devida a Rosenfeld et al, em 1959 (5).

No Hospital Vital Brazil (HVB) são diagnosticados anualmente cerca de 50

casos, sendo que, na maioria das vezes, o diagnóstico é feito baseado nos aspectos

clínicos do envenenamento, pois raramente o paciente traz o animal causador do

acidente para identificação. Schenone et al. (6) estudando 133 casos de Loxos¬

celismo, conseguiram coletar o agente causal em 13 (9,68%) acidentes. Piesco

et al. (4), estudando o material do HVB, assinalaram a ocorrência de 241 casos

de Loxoscelismo num período de cinco anos (1976-1980), onde o agente causal

foi identificado em 13 (5,39%) casos.

No presente trabalho é relatado um caso de lesão cutânea, necrotisante,

clinicamente compatível com o diagnóstico de Loxoscelismo. Posteriormente, o

* Divisão de Biologia — Instituto Butantan.

** Hospital Vital Brasil — Instituto Butantan.

**• Estagiária — Divisão de Biologia — Instituto Butantan.

Endereço para correspondência: Cx. Postal, 65, CEP 05504, São Paulo, Brasil.

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LUCAS, S.; CAEDOSO, J. L. & MORAES, A. C. Loxoscelismo; relato de um acidente humano

atribuído a Loxosceles amazônica Gertsch, 1967 (Araneae, Scytodidae, Loxoscelinae).

Mem. Inst. Butantan, 47/45:127-131, 1983/84.

paciente foi orientado para proceder à captura de aranhas no local do acidente,

tendo sido coletadas aranhas do gênero Loxosceles, espécie amazônica, estabele¬

cendo-se a correlação clínico-etiológica.

MATERIAL E MÉTODO

Foram estudadas quatro fêmeas adultas e três fêmeas e um macho jovens

procedentes de Crato, Ceará, Brasil, coletadas por Maria Aldeí Farias, em sua

residência, em julho de 1982.

Os receptáculos seminais de duas fêmeas adultas foram montados em lâmi¬

nas e microfotografados.

RELATO DO ACIDENTE

Em julho de 1982 foi relatado ao Instituto Butantan, pela própria paciente,

um acidente em Crato, Ceará, causado por uma aranha pequena de pernas

marrons, que havia sido morta no ato da picada. Anexo à descrição foi enviada

uma foto da lesão no 15.“ dia após o acidente.

Solicitamos que fosse feita uma captura das aranhas encontradas na resi¬

dência e em três remessas sucessivas recebemos um total de 17 aranhas, 8 das

quais pertencentes ao gênero Loxosceles e identificadas por nós como perten¬

centes à espécie L. amazônica Gertsch, 1967.

As aranhas deste gênero apresentam hábitos noturnos, vivendo freqüente-

mente dentro das casas e construindo uma teia branca atrás de móveis, em frestas

etc. Picam apenas quando não conseguem fugir e ao serem espremidas contra

o corpo da vítima dentro de uma roupa, por exemplo, como no presente caso.

ASPECTOS CLÍNICOS

O acidente em questão é compatível com o diagnóstico de Loxoscelismo

provável pelo aspecto clínico da lesão, como mostra a foto (Figs. 1 e 2).

Na nossa experiência no HVB raramente o agente causal tem sido trazido

nos acidentes catalogados como Loxoscelismo. O conhecimento prévio das ações

fisiopatológicas fundamentais dos venenos animais tem grande importância no

diagnóstico clínico dos acidentes por animais peçonhentos, notadamente naqueles

provocados por aranhas do gênero Loxosceles, cujo veneno tem ação proteolítica

e hemolítica, segundo Rosenfeld (5).

O fato de paciente ter capturado no local do acidente aranhas identificadas

como L. amazônica, permite supor ter sido esta a espécie causadora do acidente.

DISCUSSÃO

O colorido uniforme, a presença de um desenho claro no cefalotórax, o

tamanho do corpo e o comprimento relativo das pernas aproximam a espécie ao

grupo gaúcho, como já haviam observado Gertsh (3) e Brignolli (1). Não tive¬

mos à nossa disposição, para estudo, machos adultos, porém o aspecto dos recep¬

táculos seminais (Figs. 3 e 4) demonstra tratar-se de uma espécie facilmente

distinguível das demais. L. amazônica, segundo Gertsch, ocorre nos Estados de

Mato Grosso, Amazonas e Pernambuco, ficando agora também registrada a sua

presença no Ceará.

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LUCAS, S.; CARDOSO, J. L. & MORAES, A. C. Loxoscelismo: relato de ura acidente humano

atribuído a Loxosceles amazônica Gertsch, 1967 (Araneae, Scytodidae, Loxoscelinae).

Mem. Inst. Butantan, 47/45:127-131, 1983/84.

Fig. 1 — Lesão após 15 dias do acidente.

Fig. 2 — Cicatriz da lesão.

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1 SciELO

LUCAS, S.; CARDOSO, J. L. & MORAES, A. C. Loxoscelismo: relato de um acidente humano

atribuído a Loxosceles amazônica Gertsch, 1967 (Araneae, Scytodidae, Loxoscelinae).

Mem. Inst. Butantan, 47/45:127-131, 1983/84.

Figs. 3 e 4 — Receptáculos seminais.

SciELO

10 11 12 13 14 15

LUCAS, S.; CARDOSO, J. L. & MORAES, A. C. Loxoscelismo: relato de um acidente humano

atribuído a Loxosceles amazônica Gertsch, 19G7 (Araneae, Scytodidae, Loxoscelinae).

Mem. Inst. Butantan, 1983/84.

AGRADECIMENTOS

Agradecemos a Sra. Maria Aldeí Farias a coleta e o envio dos exemplares

estudados, bem como as fotos das lesões. Aos Drs. Jesus C. Machado e Geraldo

Santiago Hidalgo as fotografias dos receptáculos seminais.

ABSTRACT : A human accident is related, probably caused by a

spider: Loxosceles amazônica Gertsch, in 1967 at the city of Grato,

Ceará, Brazil.

KEYWORDS: Loxoscelism. Probable accident. Loxosceles amazô¬

nica Gertsch, 1967. ARANEAE. SCYTODIDAE. LOXOSCELINAE.

REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

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Boi. Chile Parasit., 50:6-17, 1975.

Trabalho apresentado no IX Congresso Brasileiro de Zoologia, XII :11, 1984, realizado

em Belém — Pará.

131

2 3

5 6

11 12 13 14 15

Mem. Inst. Butantan

47/í«:133-137, 1983/84

ESCORPIONISMO POR TITYUS STIGMURUS NO

NORDESTE DO BRASIL (SCORPIONES; BUTHIDAE)*

Vera Regina D. von EICKSTEDT **

RESUMO: O escorpião Tityus stigmurus (Thorell, 1877) é iden¬

tificado pela primeira vez como responsável por acidentes humanos

graves no nordeste do Brasil. Informações sobre reconhecimento

prático, hábitos e distribuição geográfica são fornecidas. T. stig¬

murus é comparada com espécies morfologicamente afins e demais

Tityus da região nordeste.

PALAVRAS-CHAVE: Tityus stigmurus (Scorpiones, Buthidae):

sistemática; escorpionismo; animais peçonhentos.

INTRODUÇÃO

No Brasil, duas espécies de escorpião do gênero Tityus (Buthidae) têm

sido responsabilizadas por acidentes humanos graves, inclusive casos fatais:

Tityus bahiensis (Perty), para a qual foi preparado o primeiro soro antiveneno

escorpiônico do Brasil e Tityus serrulatus, o escorpião mais perigoso da América

do Sul em virtude da toxicidade do seu veneno e da tendência que tem de

ocasionar surtos de ocorrência. T. bahiensis ocorre nas regiões sul e sudeste,

ao sul de Mato Grosso e norte da Argenitna; T. serrulatus é encontrada na

região sudeste, no Paraná, sul de Goiás e na Bahia (margem direita do rio São

Francisco). Acidentes escorpiônicos graves no nordeste, fora da área de distri¬

buição geográfica dessas duas espécies têm sido esporadicamente relatados por

clínicos e pelos próprios acidentados; o agente causador, entretanto, nunca havia

sido identificado.

Em Recife, no período 1980-1983 foram tratados na Unidade de Pediatria

Helena Moura, no Hospital da Restauração (Moreno) e no Hospital Agamenon

Magalhães, oito acidentes escorpiônicos em crianças de idade variável entre seis

meses e sete anos. Em cinco deles as manifestações clínicas foram graves, levando

a óbito um dos pacientes, dez horas após a picada. Os escorpiões responsáveis

por quatro dos acidentes (três graves e um sem gravidade) foram capturados

e, juntamente com outros espécimes coletados na região, remetidos à autora pelas

* Resumo apresentado no X Congresso Brasileiro de Zoologia, Sociedade Brasileira de

Zoologia, Belo Horizonte, 30 de Janeiro a 5 de fevereiro de 1983.

** Pesquisadora Científica, Seção do Artrópodos Peçonhentos, Instituto Butantan, 05504, São

Paulo, Brasil.

133

1 SciELO

EICKSTEDT, V.R.D. von Escorpionismo por Tityua stigmurus no nordeste do Brasil (Scor-

piones; Buthidae). Mem. Inst. Butantan, 47/45:133-137, 1983/84.

Dras. Selma V. de Figuerôa e Dayse S. Barbosa. Foram identificados como

Tityus stigmurus Thorell; levam a crer que também os acidentes cujo agente

causador não foi recuperado devam ser atribuíveis a esta espécie, inclusive o

caso fatal. Os dados clínicos desses acidentes foram relatados por Figuerôa e

Barbosa (1983); segundo essas autoras o soro antiescorpiônico produzido pelo

Instituto Butantan foi usado com êxito em três dos acidentes graves, o caso

fatal não tendo sido medicado com soroterapia específica em virtude da não

disponibilidade no local de atendimento.

Do Centro Antiveneno de Salvador (Bahia) foram recebidos (1982-1983)

através da Dra. Tânia Brazil Nunes (Universidade Federal da Bahia) quatro

escorpiões, também identificados como Tityus stigmurus. Eles provocaram

acidentes que exigiram medicação dos pacientes em ambulatórios de Salvador,

não existindo, entretanto, nenhum dado clínico disponível a respeito.

Fig. 1 — Tityus stigmurus (Thorell), vista dorsal.

Cardoso (1982) relacionou stigmurus entre as espécies de Tityus de impor¬

tância médica no Brasil, baseando-se no fato de ela ser muito comum em

Pernambuco e Paraíba, conforme mencionado por Mello-Leitão (1945:401) e

Bücherl (1978:373). Nenhuma referência a acidente humano, entretanto, havia

sido feita até o momento. A casuística agora documentada, embora pequena,

comprova a periculosidade dessa espécie. A necessidade de estudos sobre aciden¬

tes por animais peçonhentos nas diferentes regiões brasileiras foi enfatizada por

Cardoso (1982:18) tendo em vista que atualmente os “dados disponíveis na

literatura (...) são provenientes das regiões meridionais do País e não podem

a priori ser aplicados para o Brasil como um todo”. Como contribuição, no’

1.34

SciELO

10 11 12 13 14 15

EICKSTEDT, V.R.D. von Escorpionismo por Tityus stigmurus no nordeste do Brasil (Scor-

piones; Buthidae). Mem. Inst. Butantan, 47/48 1983/84,

presente trabalho são fornecidas informações sobre o reconhecimento prático,

hábitos e área de distribuição geográfica de Tityus stigmurus e uma diagnose

comparativa com as demais espécies de Tityus que ocorrem no nordeste.

Tityus stigmurus (Thorell)

Tityus stigmurus (Thorell, 1877), baseada em um exemplar de Pernambuco,

é a espécie representativa do grupo H, criado por Mello-Leitão (1945), que reúne

T. stigmurus, T. serrulatus Lutz e Mello, 1922, T. serrulatus vellardi Mello-

-Leitão, 1939 e T. acutidens Mello-Leitão, 1933 por compartilharem padrão de

colorido semelhante (coloração geral amarelada, tronco e face ventral dos artí¬

culos terminais da cauda manchados de escuro, palpos e pernas levemente

manchados) e apresentarem de um a cinco dentes nas cristas medianas dorsais

dos segmentos II a IV da cauda. Embora o agrupamento de espécies proposto

por Mello-Leitão não tenha base filogenética ele é útil para a identificação

dos Tityus, que abrange cerca de cento e trinta espécies e subespécies neotro¬

picais, a maioria mal conhecida. O estado caótico em que se encontra a sis¬

temática desse gênero tem induzido os autores a revisões parciais. Lourenço

(1981) reviu o “complexo” stigmurus, incluindo T.s.vellardi na sinonímia de

T. serrulatus e descrevendo uma espécie nova, T. lamottei, para a Bahia.

A descrição original e as redescrições de T. stigmurus permitem a sua

identificação. Tendo em vista o propósito deste trabalho, são mencionados ape¬

nas os caracteres úteis no reconhecimento prático dessa espécie, selecionados a

partir do estudo comparativo dos exemplares disponíveis.

Diagnose — Colorido geral amarelo-palha, prossoma com mancha negra

cm forma de triângulo invertido (base anterior e vértice no cômoro ocular);

tergitos I-VI com uma pequena mancha escura de cada lado e denegridos na

zona central, formando uma faixa contrastante longitudinal mediana no mesos-

soma, mais larga nos tergitos posteriores; mancha do tergito VII restrita à

parte anterior; face ventral do quinto segmento da cauda com mancha escura

na metade posterior, que sc prolonga para diante, alcançando, em certos exem¬

plares, o quarto e mesmo o terceiro artículo caudal (Lourenço, 1981); palpos

e pernas sem manchas conspícuas (Fig. 1). Cristas medianas dorsais do quarto

segmento da cauda com um ou dois grânulos espiniformes apicais. Nos exem¬

plares estudados, 21-23 dentes pectíneos e 15-16 filas oblíquas de grânulos no

gume do dedo móvel do palpo (20-24 dentes e 16-17 filas, segundo Lourenço,

1981). Lâmina intermediária basal da fêmea não dilatada; dedo móvel do palpo

do macho sem lobo basilar. Envergadura máxima observada: 70 mm.

Diagnose diferencial — T. stigmurus distingue-se das outras formas do

“complexo” e das demais espécies do gênero que ocorrem no nordeste (pusillus

Pocock, mattogrossensis Borelli, neglectiis Mello-Leitão e brazilae Lourenço &

Eickstedt) pelo padrão característico do colorido dorsal do tronco (Fig. 1), pre¬

sente inclusive nas primeiras fases do desenvolvimento pós-embrionário.

Material estudado

BRASIL, Piauí: São Raimundo Nonato (Fundação Ruralista), ii.l979, 1

ex. (IB-SC 1124). Ceará: Fortaleza (S. Cardoso), viii.1964, 1 ex. (IB-SC 876);

Sobral (L. Deane), ii.l954, 1 ex. (IB-SC 654). Rio Grande do Norte: Natal

(H. C. Gurgel), ii.l983, 2 exs. (s/n.° H. C. Gurgel). Pernambuco: Recife (Exp.

135

1 SciELO

EICKSTEDT, V.R.D. von Escorpionismo por Tityus atigmurus no nordeste do Brasil (Scor-

piones; Buthidae). Mem. Inst. Butantan, 47/45:133-137, 1983/84.

Dcp. Ecologia, UFPE), ix.l975, 3 exs. (IB-SC 1325, 1326, 1327); (UFPE),

V.1982, 2 exs. (IB-SC 1298 e n.“ 3 SF & DB), iii.1983, 1 ex., acidente grave

(IB-SC 1441), ix.1979, 1 ex. (n.° 6 SF&DB); (UPHM), xi.l981, 1 ex., acidente

grave (n.° 2 SF&DB); (HAM), vii. 1982, 1 ex., acidente grave (n.° 8 SF&DB);

Olinda (UPHM), viii.1982, 1 ex., acidente sem gravidade (n.“ 9 SF&DB);

Macaparana (UFPE), vii. 1982, 1 ex. (n.“ 1 SF&DB), vi. 1982, 1 ex. (n.“ 7

SF&DB). Sergipe: Aracaju (sem coletor), xi.l962, 3 exs. (IB-SC 855); (UFSE),

viii.1980, 1 ex. (IB-SC 1212). Bahia: Raso da Catarina (T. Brazil Nunes),

vii. 1982, 1 ex. (IB-SC 1330), vii. 1983, 2 exs. (IB-SC 1452, 1449), xii.1983,

1 ex. (IB-SC 1477); Salvador (T. Brazil Nunes), viii.1982, 2 exs. (SA-25, SA-27

TBN), 1 ex. (IB-SC 1329), vii. 1983, 1 ex. (IB-SC 1443); (CAV), vii. 1982,

1 ex. (SA-23 TBN), iv.l983, 3 exs. (SA-95, SA-93, SA-92 TBN); Simões

Filho, Camaçari (T. Brazil Nunes), vii. 1983, 1 ex. (IB-SC 1481); Barreiras

(T. Brazil Nunes), vii. 1983, 1 ex. (IB-SC 1482).

Siglas: IB-SC — coleção de escorpiões do Instituto Butantan; UFPE

— Universidade Federal de Pernambuco; SF&DB — coleção S. Figuerôa e

D. Barbosa; UPHM — Unidade de Pediatria Helena Moura; HAM — Hospital

Agamenon Magalhães; UFSE — Universidade Federal de Sergipe; TBN —

coleção T. Brazil Nunes; CAV — Centro Antiveneno (Salvador).

Dados de coleta

Em ambiente natural, T. stigmurus encontra-se refugiado sob cascas de

árvores, em troncos apodrecidos (Reserva Biológica Tapacurá, Pernambuco,

segundo Lourenço, 1982) e beiras de barranco (Raso da Catarina, Bahia, infor¬

mação de T. Brazil Nunes). Nas zonas urbanas domlcilia-se com facilidade,

tendo sido capturado dentro de casa (em leito, na cozinha (ralo da pia),

sob móveis em geral), em telhado e entulho de quintal e jardim. Em Recife

foram encontrados exemplares nos bairros Jardim São Paulo, Tamarineira, Bebe-

ribe. Centro (Av. Estância), Casa Forte e Córrego Euclides; em Salvador, no

bairro de Brotas e em Amaralina.

Distribuição geográfica

T. stigmurus ocorre no nordeste do Brasil. Anteriormente havia sido regis¬

trada para Pernambuco (localidade-tipo), Bahia, Paraíba, Sergipe, Ceará e Rio

Grande do Norte. Agora é mencionada também para o Piauí. Alem das locali¬

dades citadas neste trabalho são confiáveis os seguintes registros feitos a essa

espécie: Bahia: Soledade (Penther, 1913: 239) e Bonfim (Vellard, 1932: 555;

Pessôa, 1935: 429); Pernambuco: Exu (Lourenço, 1981: 351) e S. Lourenço

da Mata, Reserva Biológica Tapacurá (Lourenço, 1982); Paraíba: Penha (Wer-

ner, 1927: 355) e João Pessoa (Lourenço, 1981: 351). As referências para

Goiás e região sudeste (Mello-Campos, 1924: 267; Mello-Leitão, 1932: 30;

Vellard, 1932: 553) não são corretas, conforme suposto por Pessôa (1935);

devem-se provavelmente a identificação errônea.

A área de distribuição geográfica de T. stigmurus sobrepõe-se à de T.

serrulatus ao norte da Bahia, onde as duas espécies, comprovadamente perigosas;

foram coletadas (Salvador, Simões Filho e Raso da Catarina).

136

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EICKSTEDT, V.R.D. von Escorpionismo por Tityus stigmurus no nordeste do Brasil (Scor-

piones; Buthidae). A/em. Inst. Butantan, 47/45:133-137, 1983/84.

ABSTRACT: Tityus stigmurus (Thorell, 1877), a scorpion írom

the northeastern region of Brazil, is reported as dangerous to human

beings. The habits, geographic distribution and recognition of this

species are mentioned as well as a comparative diagnosis with

relatcd and sympatric species.

KEYWORDS: Tityus stigmurus (Thorell, 1877) systematics;

scorpionism; venomous animais.

AGRADECIMENTOS

A autora agradece às Dras. S. Figuerôa e D. Barbosa (Unidade de Pediatria

Helena Moura, Recife) e à Dra. T. Brazil Nunes (Universidade Federal da

Bahia) o recebimento dos escorpiões causadores de acidentes, que possibilitaram

este trabalho e ao Sr. Júlio Abe a fotografia que o ilustra.

REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

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Recebido para publicação em 30-04-1984 e aceito em 15-06-1984.

137

1 SciELO

Mem. Inst. Butantan

139-142, 1983/84

A OCORRÊNCIA DE ÁCIDO URSÓLICO EM

CITHAREXYLUM MYRIANTHUM (VERBENACEAE)

Amabile K. MATIDA *

Ema RABENHORST *

Raymond ZELNIK *

RESUMO: Os extratos acetônicos da periderme e das folhas de

Citharexylurn myrianthum Chamisso L. (Verbenaceae) contêm ácido

ursólico e seu derivado 3 )3-acetilado.

PALAVRAS CHAVE: Verbenaceae; Citharexylurn myrianthum

Chamisso L.; triterpenóides; ácido ursólico; ácido 3 ;8-acetil-ursólico.

As espécies da família das Verbenaceae, com cerca de 100 gêneros (16

brasileiros) e 2600 espécies, estão espalhadas nas regiões tropicais e subtropi¬

cais sendo que algumas espécies são conhecidas pelas suas propriedades

medicinais tais como diuréticas, febrífugas, antiespasmódicas e bactericidas

De Lantana cantara e de Lippia rehmanni foram isoladas, respectivamente,

a lantadena D® e a icterogenina Estes compostos são tóxicos, causando

lesões hepáticas seguidas de fotossensibilização em carneiros.

'CHa

C=CH —CH3

CH3

COOR'

1 - R= OH

2- R= H

3 - R=R'=H

3a - R = H , R'=CH 3

4 - R = C 0 CH 3 ^ R' = H

4a-R=:C0CH3. R'=CH3

* Serviço de Química Orgânica.

139

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MATIDA, A. K.; RABENHORST, E, & ZELNIK, R. A ocorrência de ácido ursólico em

Citkarexylum myrianthum (Verbenaceae). Mem. Inst. Butantan, -47/45:139-142, 1983/84.

A literatura química descreve vários estudos sobre as Verbenaceae brasi¬

leiras: dos gêneros Lantana e Lippia, foram isolados óleos essenciais

em Duranta repens foi detectada a presença de esteróiis e alcalóides em Stacy-

tarpheta australis foi encontrado o iridoide ipolamiida \ e em Lippia sidoides

foram identificados fenóis e cetonas aromáticas

Tendo em vista a ampla distribuição de Citharexylum myrianthum (vulgar¬

mente chamada de pimenteira ou pau-de-viola) desde Pernambuco até Rio Grande

do Sul, iniciamos o estudo desta espécie visando o isolamento de componentes

bioativos. O extrato acetônico da periderme do caule forneceu através de

fracionamento em colunas cromatográficas contendo gel de sílica três compo¬

nentes. Dois foram identificados por análise espectroscópica como sendo o ácido

ursólico 3 e seu derivado 3 /8-acetilado 4. O terceiro componente está sob

investigação.

O produto 3, p.f. 220-240° (MeOH) forma cristais de cor esverdeada e as

absorções no Infra-Vermelho a 3400 e 1730 cm“\ sugerem um ácido carboxílico.

É solúvel em meio alcalino e precipita por acidificação. A eliminação do

pigmento se tornou possível somente após metilação com diazometano seguida

de cromatografia em coluna, resultando na obtenção do éster metílico 3a puro,

p.f. 107°, de fórmula molecular CsiHsoO:) (M^ 470). No espectro de RMN de

pode-se identificar 7 metilas na região de 0,7 a 1,09 ppm, um próton carbi-

nólico a 3,21 ppm (C//OH), um grupamento carboximetila a 3,58 ppm e um

próton vinílico a 5,24 ppm. No espectrômetro de massas a formação do íon de

m/z 262 é típica da dupla ligação C,12-C,13 em triterpenos da classe das

a e /B-amirinas”. Estes dados sugerem para 3a a estrutura do ursolato de metila

e esta suposição foi evidenciada pela comparação direta com os espectros de

RMN de 'H e no Infra-Vermelho de uma amostra padrão de ursolato de metila

O produto 4, p.f. 260-270° (MeOH), apresenta-se na forma de cristais

esverdeados, de difícil purificação. Como no caso precedente 4 foi metilado,

fornecendo o éster metílico 4a, p.f. 235° (acetona). Este derivado possui a

fórmula molecular C3 :íH 5204 (M+ 512) e difere de 3a pela presença no espectro

de RMN de de um sinal a 2,02 ppm (s, 3H) referente a um grupamento

acetila; não há evidência de grupo hidroxila. No espectrômetro de massas 4a

fragmenta-sc basicamente nos íons de m/z 497 (M^ ~ CH,i), 452 (M^

CH.-iCOOH) e 262 (M*^ * CkíHsoOj). Estas observações apontam a estrutura

do éster metílico do ácido 3 /3-acetil-ursólico, logo confirmadas por comparação

com os espectros de RMN de ‘H e de massas de uma amostra padrão

FARTE EXPERIMENTAL

Os pontos de fusão foram determinados em bloco Kofler-Reichert. Os

espectros no IV foram registrados no espectrofotômetro Perkin-Elmer 727 B; os

de massas no Hitachi RMU-7MG e os de RMN de 'H no feol PFIOO (100 MHz)

do Agrupamento de Análises Ouímicas e Instrumentais do Instituto de Pesquisas

Tecnológicas de São Paulo. As análises elementares e polarimétricas foram

efetuadas no Instituto de Ouímica da USP.

140

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MATIDA, A. K.; RABENHORST, E. & ZELNIK, R. A ocorrência de ácido ursólico em

Citharexylum myrianthum (Verbenaceae). Mem. Inst, Butantan, 47/45:139-142, 1983/84.

Extração e Isolamento

Os caules de Citharexylum myrianthum foram coletados no Horto do Insti¬

tuto Butantan e a periderme seca à temperatura ambiente. O material (880 g)

foi reduzido a pó e refluxado com acetona (3x21). Os extratos acetônicos

foram concentrados à pressão reduzida, produzindo 9 g de resíduc que foram

cromatografados em coluna de gel de sílica (Merck 0,05-0,2 mm). As folhas

sofreram o mesmo tratamento: 780 g de material seco e moído foram extraídos

com acetona (3 x 2,5 1) e o resíduo da concentração (23 g) cromatografado em

coluna de gel de sílica.

Ácido 3 j3-acetil-ursólico (4)

Os eluatos de benzeno e benzeno-clorofórmio 3:1 forneceram 1,2 g do

produto (0,14%; periderme), p.f. 260-270° (MeOH). Este foi metilado com

diazometano em solução clorofórmica e o resíduo da concentração cromatogra¬

fado em coluna de gel de sílica, obtendo-se, do eluato de hexano-benzeno 1:2, o

éster 4a (0,9 g), p.f. 235-240° (acetona, lit.’“ 246-7°), [a]™‘’^3 = -f 60°-

I.V.(KBr): 1720, 1600, 1240 e 1140 cm-k RMN de (100 MHz, CDCU, S):

0,72, 0,80, 0,82, 0,84, 0,93, 1,02, 1,04 (s, 7 CH.,); 0,8-2,0 (m, 21 H); 2,02

(s, OCOCHa); 1,7-2,1 (m. CHa-ll); 3,58 (s, COOCHa); 4,46 (dd, J=5 e 2,5 Hz,

CH-OAc); 5,24 (t, J=3 e 1,5 Hz, CH-12). E.M. m/z (int. rei.): M+ 512(9),

452(8), 262(100), 203(53), 189(14), 133(16). Calculado para CssHmOí: C 77,3,

H 10,2%; obtido: C 77,4, H 10,4%.

Ácido Ursólico(3)

Os eluatos de benzeno-clorofórmio 1:1 forneceram 0,33 g (0,04%; peri¬

derme) do produto de p.f. 220-240° e 9g (1,1%; folha) de p.f. 214-226°. A

metilação (CHüN 2 ) e posterior purificação resultou na obtenção do éster metílico

3a (0,175 g, periderme; 5,5 g, folha) p.f. 103-107° (hexano, lit."*' 105-110°).

I.V. (KBr): 3400, 1720, 1600, 1240 e 1140 cm"'. RMN de ^H (100 MHz,

CDCli, S): 0,73, 0,78, 0,91, 0,95, 1,01, 1,12 (s, 7 CHa)-, 0,8-2,0 (m, 21 H);

1,7-2,1 (m, CHa-ll); 2,8 (m, CH-OH); 3,21 (t, J=4 e 2 Hz, CH-OH); 3,58

(s, COOCHa); 5,26 (t, J=3 e 1,5 Hz, CH-12). E.M. m/z (int. rei.): M+ 470(16),

455(5), 411(7), 262(100), 203(98), 189(33), 133(53). Calculado para CrnHsoOs:

C 79,09, H 10,7%; obtido: C 79,4, H 10,9%.

AGRADECIMENTOS

Agradecemos ao Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecno¬

lógico — CNPq e à Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo

pelo apoio contínuo: à Dr.“ Riva Moscovici, do Instituto de Química da ÜSP,

pelas análises elementares.

ABSTRACT: The acetone extracts of the bark and leaves of

Citharexylum myrianthum Chamisso L. (Verbenaceae) contain

ursolic acid and its 3 ^-acetyl derivative.

KEYWORDS: Citharexylum myrianthum Chamisso L.; triterpen-

oids; ursolic acid; 3 ;3-acetyl ursolic acid.

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MATIDA, A. K.; RABENHORST, E. & ZELNIK, R. A ocorrência de ácido ursólico em

Citharexylum myrianthum (Verbenaceae). Mem. Inst. Butantan, : 139-142, 1983/84.

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Recebido para publicação em 30/04/1984 e aceito em 15/06/1984.

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SciELO

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Mem, Inst. Butantan

Í7/45:143-155, 1983/84

ECTOPARASITISMO EM SERPENTES: OBSERVAÇÕES

GERAIS E ALGUMAS CONSIDERAÇÕES SOBRE O

GÊNERO IXOBIOIDES FONSECA, 1934 (ACARINA)

Nélida M. LIZASO *

RESUMO: Expõem-se os dados obtidos do exame de 3.701 serpentes

brasileiras das quais 575 estavam parasitadas por ácaros: referên¬

cias ao habitat das serpentes e sua influência no parasitismo. Anali¬

sam-se resultados para o gênero Ixobioides Fonseca, 1934, quanto a

porcentagem de parasitismo, parasitismo múltiplo, superparasitismo

e distribuição geográfica.

PALAVRAS CHAVE: Ácaros: ectoparasitismo em serpentes.

INTRODUÇÃO

O ectoparasitismo por ácaros em serpentes brasileiras vem sendo estudado

por nós desde 1976; tanto do ponto de vista sistemático como da especificidade

dos ácaros com relação aos hospedeiros, superparasitismo, parasitismo múltiplo

e ainda distribuição geográfica.

Fonseca (1934) caracterizou o gênero Ixobioides descrevendo Ixobioides

butantanensis, coletado parasitando Waglerophis merremii (Wagler), tendo-o

estudado em todas as fases de seu desenvolvimento.

Fain (1961-62), em extenso trabalho sobre ácaros de serpentes, citou alguns

exemplares da região Neotropical e alguns deles de ocorrência no Brasil. Traba¬

lhou com material herpetológico de coleções conservadas em álcool, motivo pelo

qual desprezou os ácaros encontrados soltos neste líquido, considerando apenas

os que estavam aderidos às serpentes ou alojados debaixo das escamas ventrais.

Em 1983 publicamos dados obtidos de material de serpentes coletadas no

Estado de São Paulo e a descrição de novos gêneros e espécies de ácaros de

serpentes de diversas regiões do Brasil (Lizaso, 1983).

Os dados agora apresentados foram obtidos no período de março de 1976

a abril de 1984.

• Seção de Artrópodes Peçonhentos, Instituto Butantan, Caixa Postal 65 — São Paulo —

BRASIL.

Trabalho realizado com o auxilio do Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e

Tecnológico (CNPq).

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LIZASO, N. M. Ectoparasitismo em serpentes: observações gerais e algumas considerações

sobre o gênero Ixobioides Fonseca, 1934 (Acarina). Mem. Inst. Butantan, 47/43:143-155,

1983/84.

MATERIAL E MÉTODO

O material herpetológico foi identificado pelos técnicos da Seção de Herpe-

tologia do Instituto Butantan. Consta de 3.701 exemplares pertencentes a 76

espécies distribuídas em 41 géneros da Família Colubridae e procedem dos

seguintes Estados do Brasil: Pará, Rondônia, Maranhão, Paraíba, Pernambuco,

Bahia, Goiás, Mato Grosso, Minas Gerais, Mato Grosso do Sul, Espírito Santo,

Rio de Janeiro, São Paulo, Paraná, Santa Catarina c Rio Grande do Sul

As serpentes foram examinadas vivas, logo após a chegada ao laboratório,

para evitar possíveis contágios com outros ácaros de especimens mantidos em

gaiolas ou serpentários; as que estavam parasitadas foram anestesiadas e em

seguida os parasitas removidos um a um com escarificador e colocados em álcool

70%. Para a identificação de algumas espécies de ácaros alguns exemplares

foram montados em lâminas e o restante do material mantido na coleção em

meio líquido.

Algumas espécies de serpentes, principalmentc as que procedem do Norte

e Nordeste do Brasil, estão representadas por pequeno número de exemplares

enquanto que as da região Sudeste e Sul estão bem representadas em número

de exemplares.

RESULTADOS, DISCUSSÃO E CONCLUSÃO

De um total de 3.701 serpentes examinadas, 575 estavam parasitadas (Tabela

1), o que corresponde a 15,5% de parasltismo.

Comparando este dado global obtido em 8 anos de observações com as

porcentagens encontradas anualmente, constatamos que as variações são pequenas

quanto ao índice de parasitismo.

No imaterial examinado foram identificadas quatro Famílias de ácaros, sendo

2 parasitas reconhecidamente exclusivas de serpentes: Ixodorhynchidae com os

gêneros Ixobioides Fonseca, 1934, Ophiogongylus Lizaso, 1983 e Chironobius

Lizaso, 1983 e Ophioptidae com o gênero Ophioples Sambom, 1928; as outras

duas Famílias são parasitas em suas formas imaturas: Trombiculidae e Ixodidae.

Foi coletado ainda Heterozercon elegans Lizaso, 1978, ácaro de vida livre que

aparece repetidas vezes sobre as serpentes.

As serpentes podem encontrar-se parasitadas por um único gênero de ácaros

ou por dois ou mais gêneros simultaneamente, num parasitismo múltiplo.

Nas serpentes da Família Boidae nota-se fraco grau de parasitismo, repre¬

sentado unicamente pela presença de Amblyomma Koch, 1844, que se fixam

geralmente na região de união das escamas ventrais com as laterais ou no rebordo

da cavidade ocular por terem um hipostómio fortemente cortante; pode-se atribuir

a ausência de outras espécies de ácaros ao fato dessas serpentes apresentarem

as escamas muito juntas entre si, praticamente sem interstícios de pele nua.

Outro fato importante para a ausência de ácaros é que alguns gêneros de Boidae

são de vida aquática ou semiaquática. O mesmo ocorro com os Colubrideos do

gênero Liophis, que são aquáticos, nos quais também não foram achados para¬

sitados.

O habitat das serpentes parece não ter influência em relação às espécies de

ácaros pelas quais são parasitadas, já que tanto podem ser encontrados nas

serpentes arborícolas como nas terrestres e nas de hábitos noturnos quanto

diurnos, exceção feita para as aquáticas ou semiaquáticas.

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sobre o gênero Ixobioides Fonseca, 1934 (Acarina). Mem. Inst. Butantan, 47/45:143-155,

1983/84.

TABELA 1

Relação das serpentes examinadas e das encontradas parasitadas por ácaros

Relation of the examined snakes and of the ones found parasited by acari

Hospedeiros

Anilius scytale

Liophis brazili

Apostolepis assimilis

—

Liophis jaegeri

—

Apostolepis erythronota

—

Liophis miliaris

123

—

Atractus serranus

—

Liophis undulatus

—

Boa constrictor

144

Liophis viridis

—

Ckironius bicarinatus

Lygophis flavifrenatus

—

Chironius carinatus

Lygophis meridionalis

Chiro7tius flavolineatus

Lystrophis dorbignyi

—

Chironius foveatus

Lystrophis nattereri

—

Chironius laevicolis

—

Mastigodryas bifossatus

262

Chironius quadricarinatus

Mastigodryas boddaerti

—

Clelia neglecta

—

Oxybeles aeneus

Clelia occipitolutea

Oxyrhopus clathractus

—

Clelia plumbia

—

Oxyrhopus petola

—

Dipsas indica

—

Oxyrhopus trigeminus

242

Ditaxon taeniatus

—

Philodryas aestivus

Corallus caninus

—

Philodryas mattogrossensis

—

Corallus enydris

—

Philodryas nattereri

Dromiluber brazili

—

Philodryas olfersii

159

Drymarchon corais

Philodryas patogoniensis

219

Elapomorphus meriensi

—

Phimophis guerini

Elapomorphus nasutus

—

Pseudoboa haasi

—

Elapomorphus quinquelineatus

—

Pseudoboa nigra

—

Elapomorphus tricolor

Pseudoeryx plicatilis

—

Epicrates cenchria

Pseutes sulphureus

Erythrolamprus aesculapii

Rhachidelus brazili

—

Eunectea murinue

—

Sybinomorphus mikanii

Helicops angulatus

Simophis rhinostoma

Helicops carinicaudus

—

Spilotes pullatus

Helicops modestus

—

Thamnodynastes hypoconia

—

Hydrodynastea bicinctus

Thamnodynastes pallidus

Hydrodynastes gigas

Thamnodynastes strigatus

Leimadophis almadensis

—

Tomodon dorsatus

128

Leimadophis poecilogyrus

208

Tropidodryas serra

Leimadophis reginae

Waglerophis merremii

1.148

313

Leimadophis typhlus

Xenodon guentheri

Leptoderia annulata

Xenodon neuwiedii

Leptophis ahaetulla

Xenodon severus

E: Número de exemplares examinados

P: Número de exemplares parasitados

Analisaremos em continuação os dados de Ixobioides Fonseca, 1934 (Ixo-

dorhynchidae) por apresentarem menos especificidade de liospedeiros e distri¬

buição geográfica mais ampla.

O gênero Ixobioides Fonseca, 1934 foi descrito parasitando Waglerophis

merremii (Wagler). São ácaros ovovivíparos, parasitas exclusivos de serpentes

em todas as fases de desenvolvimento.

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sobre o gênero Ixobioides Fonseca, 1934 (Acarina). Mem. Inst, Butantan, 143-155,

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sobre o gênero Ixobioides Fonseca, 1934 (Acarina). Mem. Inat. Butantan, 47/45:143-155,

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sobre o gênero Ixobioides Fonseca, 1934 (Acarina). Mem. Inst. Butantan, 47/45:143-165,

1983/84.

TABELA 3

Distribuição Geográfica do Gênero Ixobioides Fonseca, parasitando 26 espécies de

serpentes partencentes a 17 gêneros da Família Colubridae, em parasitismo único

ou múltiplo

TABLE 3

Geografical Distribution of the Genus Ixobioides Fonseca, parasiting 26 species of

snakes belonging to 17 genus of family Colubridae, in unique or multiple parasitism

T3 <u

• l/i

a-ã

Hospedeiro

6 «

01 .ti

Localidade

Parasitas

° E

4) CS

o. S

C P.

Chironius bicarinatus

Pindorama, SP

Ixobioides brachispinosus

l(Wied)

Foz do Areia, PR

Ixobioides butantanensia

Chironius flavoUneatus

(Boettger)

Itumbiara, GO

Ixobioides butantanensis

Chironius quadricarinatus

Aparecida, SP

Ixobioides butantanensis

(Boie)

Itumbiara, GO

Ixobioides butantanensis

Drymarchon corais

Itumbiara, GO

Ixobioides butantanensia

(Boie)

Penápolis, SP

Ixobioides butantanensis

Trombiculidae

Erythrolamprus aesculapii

Assis, SP

Ixobioides butantanensia

(Linneaus)

Rancharia, SP

Ixobioides butantanensis

Ophioptes parkeri

Trombiculidae

Pedro Nolasco, ES

Ixobioides butantanensis

Helicops angulatus

(Linneaus)

Mirinzal, MA

Ixobioidea butantanensis

Leimadophis almadensis

(Wagler)

Itumbiara, GO

Ixobioides butantanensis

208

Leimadophis poecilogyrus

(Wied)

Itumbiara, GO

Ixobioides butantanensis

Ophioptes parkeri

Trombiculidae

Juiz de Fora, MG

Ixobioides butantanensis

Ophioptes parkeri

Birigüi, SP

Ixobioides butantanensis

Trombiculidae

Nova Odessa, SP

Ixobioides butantanensis

Campo Grande, MS

Ixobioides butantanensis

Trombiculidae

Cassilãndia, MS

Ixobioides butantanensis

Trombiculidae

Leimadophis reginae

Itumbiara, GO

Ixobioides butantanensis

(Linneaus)

Foz do Iguaçu, PR

Trombiculidae

Ixobioides butantanensis

Leimadophis typhlus

Capital, SP

Ixobioides butantanensis

(Linneaus)

Trombiculidae

Leptophia ahaetulla

(Linneaus)

Foz do Iguaçu, PR

Ixobioides butantanensis

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SciELO

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1983/84.

Hospedeiro

• Vi

p na

£ «

Localidade

Parasitas

° s

Oí OJ

=>. S

o. S

C J

Ligophis meridionalis

Itumbiara, GO

Ixobioides butantanensis

Schenkel

Birigüi, SP

Ophioptes parkeri

Trombiculidae

Ixobioides butantanensis

Ophioptes parkeri

262

Maatigodryaa bifossatus

Mirinzal, MA

Ixobioides butantanensis

(Raddi)

Padre Bernardo, GO

Ixobioides butantanensis

Amblyomma sp

Trombiculidae

Iguatemi, MT

Ixobioides butantanensis

Três Lagoas, MS

Ixobioides butantanensis

Ophioptes parkeri

Heterozercon elegans

Trombiculidae

Assis, SP

Ixobioides butaritanensis

Birigüi, SP

Ixobioides butantanensis

Amblyomma sp

Cajuru, SP

Ixobioides butantanensis

Trombiculidae

Ribeirão Claro, SP

Ixobioides butantanensis

São Miguel Arcanjo, SP

Ixobioides butantanensis

Santa do Parnaíba, SP

Ixobioides butantanensis

Tatuí, SP

Ixobioides butantanensis

Valinhos, SP

Ixobioides butantanensis

242

Oxyrhopus trigeminus

Brumado, BA

Ixobioides butantanensis

(Duméril, Bibon and

Itumbiara, GO

Ixobioides butantanensis

Duméril)

Ophioptes parkeri

Trombiculidae

Philodryas aestivus

Uraí, PR

Ixobioides butantanensis

(Duméril, Bibon and

Ophioptes parkeri

Duméril)

Trombiculidae

159

Philodryas olfersii

Itumbiara, GO

Ixobioides butantanensis

(Lichtenstein)

Assis, SP

Ophioptes parkeri

Trombiculidae

Ixobioides butantanensis

Birigüi, SP

Ixobioides butantanensis

Ophioptes parkeri

Amblyomma sp

Trombiculidae

Campinas, SP

Ixobioides butantanensis

São Paulo, Capital

Ixobioides butantanensis

Taciba, SP

Ixobioides butantanensis

Foz do Iguaçu, PR

Ixobioides butantanensis

219

Philodryas patagoniensis

Itumbiara, GO

Ixobioides butantanensis

(Girard)

Antonio João, MS

Trombiculidae

Ixobioides butantanensis

Assis, SP

Ixobioides butantanensis

Barueri, SP

Ixobioides butantanensis

Campos do Jordão, SP

Ixobioides butantanensis

Garça, SP

Ixobioides butantanensis

Jundiai, SP

Ixobioides butantanensis

Juquitiba, SP

Ixobioides butantanensis

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SciELO

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:al de

LIZASO, N. M. Ectoparasitismo em serpentes: observações gerais e algumas considerações

sobre o gênero Ixobioides Fonseca, 1934 (Acarina). Mem. Inst. Butantan, 47/45:143-165,

1983/81.

Hospedeiro

n.® exempl.

parasitados

Localidade

Lins, SP

Mairiporã, SP

Parelheiros, SP

Paranapanema, SP

Pirajuí, SP

São Carlos, SP

São João Novo, SP

Votuporanga, SP

Curitiba, PR

Engenheiro Marsilac, PR

Irati, PR

Palmeira, PR

Porto Amazonas, PR

Telêmaco Borba, PR

Sibinomorphus mikanii

Pres. Bernardes, SP

(Schlegel)

Simophis rhinostoma

Itumbiara, GO

(Schlegel)

Casa Branca, SP

Spilotes pullatus

Belém, PA

(Linneaus)

Iramaia, BA

Santa Vitória, MG

Buri, SP

Juquiá, SP

Santa Fé do Sul, SP

São Sebastião, SP

Ponta Grossa, PR

Thamnodynastes pallidus

Miranda, MS

Linneaus

Foz do Areia, PR

Thamnodynastes strigatus

Caieiras, SP

(Gunther)

Rio Azul, PR

Tomodon dorsatus

Gonçalves Júnior, SP

Duméril Bibon and

Foz do Areia, PR

Duméril

Guajuvira, PR

Irati, PR

Telêmaco Borba, PR

Canoinhas, SC

Parasitas

128

Ixobioides

butantanensis

Ixobioides butantanensis

Trombiculidae

Ixobioides butantanensis

Trombiculidae

Ixobioides butantanensis

Ophioptes parkeri

Amblyoma sp

Trombiculidae

Ixobioides butantanensis

Amblyomma sp

Ixobioides butantanensis

Trombiculidae

Ixobioides butantanensis

Amblyomma sp

Trombiculidae

Ixobioides butantanensis

Amblyomma sp

Ixobioides butantanensis

Trombiculidae

Ixobioides butantanensis

Ixobioides brachispinosus

Ixobioides butantanensis

Trombiculidae

Ixobioides butantanensis

Trombiculidae

Ixobioides butantanensis

150

SciELO

10 11 12 13 14 15

LIZASO, N. M. Ectoparasitismo em serpentes: observações gerais e algumas considerações

sobre o gênero Ixobioides Fonseca, 1934 (Acarina). Mem. Inst. Butantan, 47/45:143-155,

1983/84.

n,° total de

exemplares

Hospedeiro

n.® exempl.

parasitados

Localidade

Parasitas

1.148

Waglerophis merremii

Pesqueira, PE

Ixobioides butantanensis

(Wagler)

Trombiculidae

Goiânia, GO

Ixobioides butantanensis

Trombiculidae

Itumbiara, GO

Ixobioides butantanensis

Ophioptes parkeri

Amblyomma sp

Trombiculidae

Padre Bernardo, GO

Ixobioides butantanensis

Brumado, BA

Ixobioides butantanensis

Iramaia, BA

Ixobioides butantanensis

Amblyomma sp

Campo Grande, MT

Ixobioides butantanensis

Trombiculidae

Sâo Bento, MT

Ixobioides butantanensis

São Félix do Araguaia, GO

Ixobioides butantanensis

Rochedo, MT

Ixobioides butantanensis

Trombiculidae

Belo Horizonte, MG

Ixobioides butantanensis

Hetrozercon elegans

Costa Rica, MG

Ixobioides butantanensis

Trombiculidae

Iguatemi, MG

Ixobioides butantanensis

Pedro Leopoldo, MG

Ixobioides butantanensis

Trombiculidae

Três Lagoas, MG

Ixobioides butantanensis

Trombiculidae

Tupaciguara, MG

Ixobioides butantanensis

Uberlândia, MG

Ixobioides butantanensis

Trombiculidae

Xavantina, MG

Ixobioides butantanensis

Trombiculidae

Antônio João, MS

Ixobioides butantanensis

Paranaíba, MS

Ixobioides butantanensis

Amblyomma sp

Trombiculidae

Nioaqui, MS

Ixobioides butantanensis

Mendes, RJ

Ixobioides butantanensis

Pirai, RJ

Ixobioides butantanensis

Amblyomma sp

Valença, RJ

Ixobioides butantanensis

Arujá, SP

Ixobioides butantanensis

Agudos, SP

Ixobioides butantanensis

Trombiculidae

Assis, SP

Ixobioides butantanensis

Trombiculidae

Araraquara, SP

Ixobioides butantanensis

Trombiculidae

Alvares Machado, SP

Ixobioides butantanensis

Amblyomma sp

Aparecida do Norte, SP

Ixobioides butantanensis

Araçatuba, SP

Ixobioides butantanensis

Barueri, SP

Ixobioides butantanensis

Trombiculidae

Barretos, SP

Ixobioides butantanensis

Trombiculidae

151

SciELO

10 11 12 13 14 15

LIZASO, N. M. Ectoparasitismo em serpentes: observações gerais e algumas considerações

sobre o gênero Ixobioides Fonseca, 1934 (Acarina). Mem. Inat. Butantan, 47/45:143-155,

1983/84.

n.® total de

exemplares-

Hospedeiro

n.® exerapl.

parasitados

Localidade

Parasitas

Bauru, SP

Ixobioides butantanenais

Ixobioides brachispinosus

Trombiculidae

Bebedouro, SP

Ixobioides butantanenais

Birigüi, SP

Ixobioides butantanenais

Boa Esperança do Sul, SP

Ixobioides butantanensis

Trombiculidae

Cotia, SP

Ixobioides butantanensis

Cafelândia, SP

Ixobioides butantanensis

Castilho, SP

Ixobioides butantanensis

Trombiculidae

Capão Bonito, SP

Ixobioides butantanensis

Carapicuíba, SP

Ixobioides butantanenais

Campo Limpo, SP

Ixobioides butantanenais

Dracena, SP

Ixobioides butantanensis

Trombiculidae

Embu, SP

Ixobioides butantanensis

Fernandópolis, SP

Ixobioides butantanenais

Franca, SP

Ixobioides butantanensis

Amblyomma sp

Garça, SP

Ixobioides butantanenais

Guararema, SP

Ixobioides butantanensis

Guarulhos, SP

Ixobioides butantanensis

Jaú, SP

Ixobioides butantanensis

Ophioptes parkeri

Trombiculidae

Jales, SP

Ixobioides butantanensis

Trombiculidae

Juquitiba, SP

Ixobioides butantanensis

Trombiculidae

Jacareí, SP

Ixobioides butantanensis

Lavínia, SP

Ixobioides butantanenais

Trombiculidae

Martinópolis, SP

Ixobioides butantanensis

Matão, SP

Ixobioides butantanensis

Mogi das Cruzes, SP

Ixobioides butantanenais

Nazaré Paulista, SP

Ixobioides butantanensis

Oriente, SP

Ixobioides butantanenais

Olímpia, SP

Ixobioides butantanensis

Osvaldo Cruz, SP

Ixobioides butantanensis

Trombiculidae

Orlândia, SP

Ixobioides butantanensis

Palmital, SP

Ixobioides butantanenais

Pradópolis, SP

Ixobioides butantanensis

Trombiculidae

Penápolis, SP

Ixobioides butantanensis

Ixobioides butantanensis .

Paraguaçu Paulista, SP

Trombiculidae

Pindamonhangaba, SP

Ixobioides butantanenais

Parelheiros, SP

Ixobioides butantanensis

Pindorama, SP

Ixobioides butantanenais

Pres. Prudente, SP

Ixobioides butantanensis

Trombiculidae

Pres. Bernardes, SP

Ixobioides butantanensis

152

SciELO

10 11 12 13 14 15

LIZASO, N. M. Ectoparasitismo em serpentes: observações gerais

e algumas considerações

sobre o gênero Ixobioides

1983/84.

Fonseca,

1934 (Acarina). Mem. Inst.

Butantan, íZ/íí: 143-155,

'O a»

• C/l

Hospedeiro

Localidade

Parasitas

V d

c d

C A

Pompéia, SP

Ixobioides butantanensis

Pres. Venceslau, SP

Ixobioides butantanensis

Ribeirão Pires, SP

Ixobioides butantanensis

Ribeirão Preto, SP

Ixobioides butantanensis

Rincão, SP

Ixobioides butantanensis

Trombiculidae

São Carlos, SP

Ixobioides butantanensis

Ophioptes parkeri

São José dos Campos, SP

Ixobioides butantanensis

São Paulo, Capital

Ixobioides butantanensis

Santa Fé doi Sul, SP

Ixobioides butantanensis

Trombiculidae

São José do Rio Preto, SP

Ixobioides butantanensis

Trombiculidae

Santo Anastácio, SP

Ixobioides butantanensis

Trombiculidae

Sertãozinho, SP

Ixobioides butantanensis

Taboão da Serra, SP

Trombiculidae

Ixobioides butantanensis

Taubaté, SP

Ixobioides butantanensis

Amblyomma sp

Três Fronteiras, SP

Ixobioides butantanensis

Valparaíso, SP

Ixobioides butantanensis

Amblyomma sp

Votuporanga, SP

Ixobioides butantanensis

Curitiba, PR

Ixobioides butantanensis

Londrina, PR

Ixobioides butantanensis

Morretes, PR

Ixobioides butantanensis

Paranavaí, PR

Ixobioides butantanensis

Paulo Frontin, PR

Ixobioides butantanensis

Trombiculidae

Ponta Grossa, PR

Ixobioides butantanensis

Porto Amazonas, PR

Ixobioides butantanensis

Rio Azul, PR

Ixobioides butantanensis

São João do Triunfo

Ixobioides butantanensis

São José dos Pinhais

Ixobioides butantanensis

Caçador, SC

Ixobioides fonsecae

Canoinhas, SC

Ixobioides butantanensis

Filipe Schmidt, SC

Ixobioides butantanensis

Trombiculidae

Ibicaré, SC

Ixobioides butantanensis

Itaiópolis, SC

Ixobioides butantanensis

Heterozercon elegans

Pira tuba, SC

Ixobioides butantanensis

Rio Negrinho, SC

Ixobioides butantanensis

Tangará da Serra, SC

Ixobioides butantanensis

Heterozercon elegans

Gaurama, RS

Ixobioides butantanensis

Porto Alegre, RS

Ixobioides butantanensis

Xenodon guentkeri

Caçador, SC

Ixobioides fonsecae

Boulenger

Porto União, SC

Ixobioides fonsecae

Cruz Machado, PR

Ixobioides fonsecae

Porto Vitória, PR

Ixobioides fonsecae

153

LIZASO, N. M. Ectoparasitismo cm serpentes: observações gerais e algumas considerações

sobre o gênero Ixobioides Fonseca, 1934 (Acarina). Mem. Inat. Butantan, 47/45:143-155,

1983/84.

Hospedeiro

n.“exempl.

parasitados

Localidade

Parasitas

Xenodon neuwiedii

(Gunther)

Juquitiba, SP

Ixobioidea brachispinosus

Ophiogongylus roiundus

Mogi das Cruzes, SP

Ixobioides brachispinosus

Ophiogongylus rotundus

Trombiculidae

Ribeirão Pires, SP

Ixobioides brachispinosus

Ophiogongylus rotundus

Santa Isabel, SP

Ixobioides brachispinosus

Ophiogongylus rotundus

Trombiculidae

São Paulo, Capital

Ixobioides brachispinosus

Ophiogongylus rotundus

São Roque, SP

Ixobioides brachispinosus

Ophiogongylus rotundus

Trombiculidae

O presente material consta de milhares de ácaros coletados parasitando 26

espécies de serpentes pertencentes a 17 gêneros de Colubridae. Esta observação

corresponde a 3.092 das serpentes examinadas.

Identificamos três espécies de Ixobioides: I. butantanensis Fonseca, 1934

com distribuição geográfica em toda América do Sul, é a mais freqüente c com

menor especificidade de hospedeiro; /. fonsecae (Fain, 1961) da região Sul do

Brasil parasita Waglerophis merremii e Xenodon; I. brachispinosus Lizaso, 1983

da região Sudeste e Sul do Brasil, parasita Xenodon, Chironius e Thamnodynastes.

O gênero Ixobioides pod'e ser encontrado como parasita exclusivo de um

determinado hospedeiro ou em parasitismo múltiplo com um ou mais gêneros

de ácaros. No material por nós estudado o parasitismo simples deu-se em 65,2%

dos exemplares (Tabela 2). Pode ser encontrado escasso número de exemplares

(3 ou 4) em um hospedeiro ou até alguns milhares — superparasitismo —

constatado diversas vezes em Waglerophis merremii.

Estes ácaros podem localizar-se na parte inferior da cabeça, cavidade ocular,

região periocular, regiões lateral e dorsal do corpo, sendo mais numerosos no

terço anterior da serpente, e, aumentando a intensidade do parasitismo, no terço

médio e posterior, num gradiente de infestação da região anterior para a posterior

Poucas vezes se localizam debaixo das escamas ventrais.

De modo geral estão bem aderidos ao hospedeiro e não se desprendem,

mesmo quando a serpente passa pela água.

O gênero Ixobioides apresenta ampla distribuição geográfica, especialmente

7. butantanensis. O material relacionado em um total de 357 lotes está assim

distribuído (Tabela 3): Pará, 1; Maranhão, 2; Paraíba, 1; Pernambuco, 1; Bahia,

4; Mato Grosso, 16; Goiás, 37; Minas Gerais, 7; Espírito Santo, 1; Rio de

Janeiro, 3; São Paulo, 199; Paraná, 55; Santa Catarina, 27; Rio Grande do Sul, 3.

154

SciELO

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LIZASO, N. M. Ectoparasitismo em serpentes: observações gerais e algumas considerações

sobre o gênero Ixohioidea Fonseca, 1934 (Acarina). Mem. Inst. Butantan, 47/45:143-156

1983/84.

ABSTRACT: We have examined 3.701 brazilian snakes from which

575 were parasitised by Acari. Data on the snakes habitat and

their influence on the parasitism are given. We pointed out the

percentage of the parasitism, the multiple parasitism and superpa-

rasitism and geografic distribution on the genus Ixobioides Fonseca.

KEYWORDS: Acari: snakes ectoparasitism.

REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

FAIN, A. Espèces et genres nouveaux dans la famille Ixodorhynchidae Ewing, 1922.

Rev. Zool. Bot. Afri., S4(1-2) :175-182, 1961.

FAIN, A. Les acariens mesostigmatiques ectoparasites des serpents. Bidln Inst. r.

Sei. nat. Belg., SS(18) :1-149, 1962.

FONSECA, F. Der Schlangenparasit Ixobioides butantanensis, novi generis, n. sp.

(Acarina, Ixodorhynchidae nov. fam.) Z. Parasitkde, 6(4) :508-527, 1934.

LIZASO, N. M. Levantamento da fauna acarológica ectoparasita de serpentes não

venenosas do Estado de São Paulo. Rev. Bras. Zool., S. Paulo, 1 (3) :203-209, 1983.

LIZASO,-N. M. Novos gêneros e espécies de ácaros (Mesostigmata, Ixodorhynchidae)

ectoparasitas de serpentes. Rev. Bras. Zool., S. Paulo, 1 (3) :193-201, 1983.

Recebido para publicação em 14/05/1984 e aceito em 16/06/1984.

155

1 SciELO

Mem, Inst. Butantan

47/45:157-164, 1983/84

BIONOMIA COMPARATIVA DE TRIATOMÍNEOS.

II — TRIATOMA BRASILIENSIS NEIVA, 1911

(HEMIPTERA, REDUVIIDAE)*

Therezinha J. HEITZMANN-FONTENELLE **

RESUMO: O ciclo evolutivo completo de Triatoma brasiliensis

Neiva, 1911 é estudado em condições de laboratório. Acasalamentos,

posturas, duração dos estádios ninfais, vida adulta e número de

repastos são analisados e comparados com os de Panstrongylus

megistus (Burm., 1835), Triatoma sórdida (Stal, 1859) e Triatoma

vitticeps Stal, 1835, trabalhos já publicados desta série, dos quais

só agora sai a nota II, por motivos independentes da nossa vontade.

PALAVRAS-CHAVE: Triatoma brasiliensis Nevia, 1911: ciclo

evolutivo em laboratório.

INTRODUÇÃO

Sendo T. brasiliensis uma espécie restrita às zonas semi-áridas do nordeste

brasileiro (Alagoas, Bahia, Ceará, Paraíba, Pernambuco, Piauí, Rio Grande do

Norte e norte de Goiás e Minas Gerais) sua adaptação às condições climáticas

em São Paulo foi bastante difícil. Iniciamos a criação desta espécie em 1972,

mas os dados obtidos não foram numerosos. Em 1977 reiniciamos uma nova

criação e os' resultados também não foram satisfatórios. As observações aqui

publicadas, embora em pequeno número, não significativas para um estudo

estatístico ou para dar uma ampla visão das variações biológicas, permitem mos¬

trar a sua difícil adaptação às condições adversas do seu habitat natural.

A maioria dos trabalhos sobre o seu ciclo de vida em laboratório como os

de Brasileiro (1, 2), Costa (3), Ferreira (5), Perondini e al. (11) abordam apenas

fases do ciclo de vida desta espécie e em condições laboratoriais controladas

(SO^C de temperatura e umidade relativa por volta de 70 a 80%). Trabalhos

não tão recentes como os de Pinto (12), Dias (4) e Lucena (9) já apresentam

o ciclo completo em laboratório. Lucena (9) dá as condições ambientais em que

trabalhou (temperatura entre 25,4 e 28,5% e umidade entre 76 e 82%) e Pinto

(12) comenta que há variações no ciclo em temperaturas e umidades diferentes.

As nossas observações são feitas no laboratório da Seção de Parasitologia

do Instituto Butantan, situada no Horto Oswaldo Cruz, onde as temperaturas

* Bolsista do CNPq

'** Seção de Parasitologia do Instituto Butantan.

157

1 SciELO

HEITZMANN-FONTENELLE, T. J. Bionomia comparativa de Triatomíneos. II — Triatoma

brasüiensis Neiva, 1911 (Hemiptera, Reduviidae). Mem. Inst. Butantan, 47/45:157-164,

1983/84.

oscilam durante o ano entre 18 e 26°C, raramente atingindo os 30°C e por vezes

alcançando temperaturas abaixo de 10°C. A umidade relativa anual fica entre

50 e 70%.

MATERIAL E MÉTODO

O material foi obtido de descendentes de uma fêmea recebida de Jaguarari,

BA (Faz. Caraíbas) por oferecimento de Caraíbas Metais S.A. em 29-09-1972 e

pelos descendentes de outra fêmea recebida de São Raimundo Nonato, PI, Maria

Aparecida Pereira leg., em 05-01-1977.

As ninfas, em número de 43, descendentes da primeira fêmea, nos dois

primeiros estágios evolutivos foram criadas isoladamente em pequenos borréis,

passando depois para borréis maiores com ninfas de outras espécies para facilitar

a alimentação coletiva. As ninfas descendentes da segunda fêmea, em número de

32, foram, após eclosão, colocadas diretamente nos borréis maiores com ninfas

de outras espécies e, outras 28 ninfas destá mesma fêmea, foram criadas num

mesmo borrei durante os dois primeiros estádios e somente depois passadas para

os de criação.

Além desse material temos mais 20 observações, obtidas pelo acasalamento

em laboratório de descendentes do material do Piauí.

A alimentação foi feita em coelho em intervalos de aproximadamente 15

a 20 dias.

Para facilitar a descrição dos estádios, faremos os relatos separadamente de

cada lote de observações e no final, reuniremos as conclusões, fazendo-se uma

súmula do ciclo evolutivo para a espécie em pauta.

MATERIAL DESCENDENTE DA FÊMEA DA BAHIA

ESTÁDIO I — Das 43 ninfas eclodidas entre 22-10 e 19-12-1972, 32

morreram antes de completar o estádio, com 2 a 78 dias de vida e quase todas

sem se alimentar; duas se alimentaram por uma vez, morrendo com 10 e 16 dias

e outra por três vezes, morrendo com 78 dias de vida.

As 11 ninfas restantes completaram o estádio I entre 36 e 70 dias, sendo

dois espécimens com menos de 40 dias; seis espécimens de 40 aos 47 dias e

os três exemplares restantes com 54, 67 e 70 dias. A média foi de 47,91 dias.

A primeira refeição ocorreu entre o 5.“ e 41.“ dia, predominando entre o

10.“ e 20.“ dia. Apenas uma ninfa ficou 41 dias sem se alimentar e dois dias

depois de fazê-lo, sofreu a eedise.

O número de refeições oscilou de um a quatro, sendo mais freqüente duas.

O período anual destas observações foi de 22-10-1972 a 27-02-1973.

ESTÁDIO II — Foi completado pelas 11 ninfas entre 22 e 50 dias, sendo

quatro observações com menos de 30 dias, 5 observações com 33 a 40 dias e

os dois casos restantes com 49 e 50 dias. A média foi de 33,37 dias.

Quanto ao número de refeições, oscilou entre um e três.

As ninfas entraram neste estádio entre 18-12-1972 e 27-02-1973 e saíram

dela entre 18-01 e 03-04-1973, predominando os meses de janeiro e fevereiro.

158

2 3

5 6

11 12 13 14 15

HEÍTZMANN-FONTENELLE, T. J. Bionomia comparativa de Triatomíneos. II — THatoma

brasiliensis Neiva, 1911 (Hemiptera, Reduviidae). Mem. Inst. Butantan, 47/^5:157-164,

1983/84.

ESTÁDIO III — Este estádio durou de 29 a 104 dias, sendo que até o 51."

dia, nove ninfas já o haviam realizado. Os dois últimos casos duraram de 90 a

104 dias, prolongando-se mais para o meio do ano, com isto, abrangendo perío¬

dos de temperaturas mais frias. A média foi de 51,82 dias.

O número de repastos foi de dois a sete (este para a ninfa de estádio mais

prolongado). O período anual foi de 18-01 a 03-04-1973 para a entrada no está¬

dio e 03-03 a 16-07-1973 para a saída.

ESTÁDIO IV — Apenas uma ninfa não completou este estádio, morrendo

com 55 dias neste estádio e 167 dias de vida total, após 5 alimentações deficien¬

tes. Os exemplares que o completaram, o realizaram com 37 a 211 dias, sendo

5 com menos de 71 dias e os 5 restantes com 109, 141, 143 e 211 dias, passando

parte dele no inverno ou em temperaturas baixas, que durante o ano de 1973,

iniciaram em fins de maio perdurando até outubro, havendo ligeira elevação em

novembro, embora com noites muito frias. A média de duração deste estádio

foi de 70,5 dias.

O número de repastos foi de dois a treze.

As 10 ninfas entraram neste estádio entre 03-03 e 16-07-1973, saindo dele

entre 09-04 e 18-12-1973.

ESTÁDIO V — Este estádio foi bastante crítico para as ninfas, sendo que,

das 10, apenas quatro atingiram a fase adulta. Uma morreu por acidente durante

a ecdise, ficando bastante defeituosa e sendo sacrificada no mesmo dia; outra,

com 12 dias nesta fase, sem fazer nenhum repasto e os outros quatro casos

com 131, 144, 148 e 462 dias neste estádio, alimentando-se 17, 14, 8 e 52

vezes respectivamente. Todas elas, notadamente o último caso citado não con¬

seguiam se alimentar suficientemente, não alcançando uma completa replecção,

morrendo bastante depauperadas.

As quatro restantes completaram o estádio V com 61, 86, 118 e 154

dias, alimentando-se 4, 7, 9 e 14 vezes respectivamente. A média foi de

104,75 dias.

O período anual foi para a entrada no estádio 19-04 a 20-06-1973 e a

saída foi 15-08 a 05-11-1973.

VIDA NINFAL — O desenvolvimento ninfal completo do desalagamento

até a fase adulta nos quatro exemplares obtidos foi de 245, 278, 280 e 336

dias. A média foi de 284,75 dias.

VIDA ADULTA — Os quatro exemplares adultos, todos fêmeas, viveram

neste estádio 30, 366, 411 e 503 dias, portanto executando o primeiro dado,

vemos que os 3 outros viveram de um a um ano e meio aproximadamente.

A média foi 327,5 dias.

O número de repastos foi de dois a trinta e nove.

VIDA TOTAL — A vida total (vida ninfal mais a vida adulta) dessas

fêmeas foi de 310, 644, 656 e 839 dias, e a média ficou nos 609,25 dias.

ACASALAMENTO — Em virtude de termos apenas fêmeas, não pudemos

realizar acasalamento intra-específicos, mas observamos que as fêmeas de T.

brasiliensis cruzam-se facilmente com machos de outras espécies. Esses acasal-

mentos foram obtidos por acaso, em virtude das criações conjuntas com as

demais espécies. Obtivemos, assim, dois acasalamentos com descendentes:

159

1 SciELO

HEITZMANN-FONTENELLE, T. J. Bionomia comparativa de Triatomíneos. II — Triatoma

brasiliensis Neiva, 1911 (Hemiptera, Reduviidae). Mem. Inst. Butantan, 47/^5:157-164,

1983/84.

1) Num frasco onde havia uma fêmea de T. brasiliensis com 158 dias

de vida adulta e que já havia oviposto 39 óvulos, coabitou com um macho de

T. lenti com apenas um dia de vida, em 25-01-1974. Dessa data até 13-02,

a fêmea ovipôs 8 óvulos ou ovos que não eclodiram. De 13-02 até 01-08-1974,

a fêmea ovipôs 148 ovos que eclodiram era períodos de 29 a 60 dias, dando,

ao todo 118 ninfas híbridas. Até a morte da fêmea em 05-10-1974, o casal

permaneceu no mesmo frasco.

2) Num frasco onde havia uma fêmea de T. brasiliensis com 189 dias

de vida adulta e que já havia oviposto 24 óvulos (no período de 20-10-1973

a 13-02-1974), uma ninfa de T. lenti se transformou em macho a 21-02-1974.

Em 9 e 12 de março, a fêmea ovipôs mais quatro ovos que não eclodiram. De

23-03 a 09-07-1974 ela produziu 32 ovos, eclodindo destes, 18 ninfas. O casal

permaneceu junto até a morte da fêmea em 16-09-1974.

Com a fêmea de vida adulta curta (30 dias) não tentamos nenhum acasa¬

lamento e ela, também, não elaborou óvulos. Com a fêmea de vida adulta mais

longa (503 dias) fizemos várias tentativas de acasalamentos com machos de

T. lenti mas não obtivemos descendentes apesar dela ovipor 254 ovos não

viáveis ou óvulos.

MATERIAL DESCENDENTE DA FÊMEA DO PIAUÍ

ESTÁDIO I — Das 32 ninfas eclodidas entre 20-03 e 07-04-1977, 23 não

completaram o estádio, morrendo com 5 a 73 dias de vida, recusando a ali¬

mentarem-se, embora lhes fosse oferecido a orelha de coelho. As 9 ninfas

restantes tiveram um estádio I de 177 a 256 dias, com a média de 211,13 dias.

O número de repastos foi de 3 a 7. Fez três refeições, além da ninfa

de estádio mais curto (177 dias), mais uma ninfa de estádio de 207 dias. A

ninfa com 7 repastos, completou o estádio em 199 dias e a ninfa de estádio

mais longo (256 dias) fez apenas 4 refeições.

A primeira refeição ocorreu entre o 20.° e o 54.° dia e foi de 18 dias o

maior intervalo entre as refeições, embora tivessem tido oportunidade de se

alimentarem em intervalos menores.

As ninfas entraram neste estádio em 20-03 a 07-04-1977 e passaram ao

estádio II entre 24-09 e 10-12-1977, predominando o mês de outubro.

ESTÁDIO II — Das nove ninfas que entraram neste estádio entre 24-09

e 10-12-1977, uma não o completou, morrendo com 99 dias tendo feito um

único repasto. Esta ninfa já havia apresentado dificuldades de se alimentar

durante o estádio anterior que foi de 197 dias e com 6 repastos, alguns

deficientes.

As ninfas restantes tiveram um estádio entre 49 e 175 dias, sendo a média

de 84,14 dias.

O número de repastos foi de dois a cinco.

O período anual em que predominou este estádio foi de outubro a dezem¬

bro de 1977.

ESTÁDIO III — Apenas sete ninfas completaram este estádio entre 58

e 319 dias, com a média de 126,86 dias. A morte ocorrida foi de uma ninfa

com 52 dias neste estádio e sem fazer nenhum repasto.

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HEITZMANN-FONTENELLE, T. J. Bionomia comparativa de Triatomíneos. II — Triatoma

brasiliensis Neiva, 1911 (Hemiptera, Reduviidae). Mem. Inst. Butantan, í7/4S: 157-164,

1983/84.

O número de repastos foi de dois a cinco.

O período anual foi de 04-12-1977 a 03-06-1978 para a entrada e 12-03

a 28-11-1978 para a saída do estádio, predominando ninfas neste estádio, nos

três primeiros meses de 1978.

ESTÁDIO IV — Ocorreram mais duas mortes neste estádio: ninfas com

113 e 135 dias de vida e 4 repastos. As 5 ninfas restantes tiveram um estádio

IV com durações de 65 a 335 dias, com média de 211,4 dias.

O número de repastos foi de três a oito.

As ninfas entraram neste estádio de 12-03 a 28-11-1978 e saíram entre

11- 11-1978 e 30-10-1979.

ESTÁDIO V — Apenas duas ninfas chegaram a completar este estádio,

com 404 e 525 dias e 2 a 16 refeições. A média ficou em 464,5 dias.

Os óbitos ocorreram: um por acidente durante a ecdise, ao entrar neste

estádio; uma ninfa morreu com 222 dias, fazendo 6 refeições deficientes, outra

ninfa morreu com 558 dias neste estádio, fazendo 11 refeições no período, sendo

algumas deficientes.

As ninfas que completaram o estádio fizeram 7 e 13 repastos.

O período anual foi: 11-11-1978 a 30-10-1979 para a entrada e 04-05 a

07-12-1980 para a saída.

VIDA NINFAL — Apenas duas ninfas completaram a vida ninfal com

1.136 e 1.348 dias, dando a média de 1.242 dias.

ADULTOS — Os dois exemplares adultos obtidos foram um macho e uma

fêmea. O macho teve uma vida adulta de 105 dias (04-05 a 15-08-1980) fazendo

apenas dois repastos. A fêmea teve vida adulta de 548 dias (07-12-1980 a

08-06-1982), fazendo 16 repastos.

VIDA TOTAL — Cs dois exemplares tiveram uma vida total (da eclosão

à morte do adulto) de 1.241 e 1.896 dias, dando uma média de 1.568,5 dias

(4 anos e 3 meses aproximadamente).

ACASALAMENTOS — Não foram tentados acasalamentos.

As 28 ninfas restantes deste lote foram criadas em conjunto no mesmo

frasco durante os dois primeiros estádios, portanto não foram anotados os perío¬

dos evolutivos. A partir do terceiro estádio só restavam 21 ninfas, as demais

haviam morrido.

ESTÁDIO III — Destas 21 ninfas, 4 morreram durante o estádio com 33 a

122 dias. As restantes tiveram este estádio com durações de 60 a 612 dias, dando

a média de 166,87 dias.

O número de repastos foi de dois a quatorze.

Não houve um período anual definido para esta amostragem, pois houve

observações desde 04-06-1978 até 02-12-1979 para o Início do estádio e

12- 12-1978 a 22-11-1980 para o término.

ESTÁDIO IV — Ocorreram dois óbitos no decorrer deste estádio com

ninfas com 14 a 108 dias neste estádio. As 15 ninfas restantes tiveram um

estádio com durações de 64 a 371 dias e com média de 231,27 dias. O número

de repastos foi de dois a oito.

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HEITZMANN-FONTENELLE, T. J. Bionomia comparativa de Triatomíneos. II — Triatoma

brasüiensis Neiva, 1911 (Hemiptera, Eeduviidae). Mem. Inst. Butantan, 47/45:157-164,

1983/84.

ESTÁDIO V — Como nas amostragens anteriores este estádio foi bastante

crítico. Houve nove mortes dos 61 aos 717 dias de vida neste estádio. As cinco

ninfas restantes tiveram um estádio V entre 154 e 443 dias, dando uma média

de 297,5 dias.

VIDA NINFAL — Como iniciamos as observações deste lote somente a

partir do estádio III, não pudemos computar a duração da vida ninfal nem

da vida total.

ADULTOS — Obtivemos um macho (176 dias) e quatro fêmeas (com 74,

178, 551 e 626 dias de duração). As alimentações foram em número de duas a

dezesseis.

ACASALAMENTOS — A fêmea que viveu apenas 74 dias não foi acasa¬

lada e com 51 dias de vida adulta iniciou a postura de óvulos (total sete).

A fêmea que viveu 178 dias não foi acasalada nem ovipôs. A fêmea de

maior vida adulta (626 dias) não foi acasalada mas elaborou quatro óvulos entre

413 e 425 dias de vida adulta. A fêmea com 551 dias de vida adulta foi acasa¬

lada com 178 dias de vida'adulta com um macho sem registro, retirado da

criação geral. Ela produziu 34 ovos dos quais eclodiram 20 ninfas que foram

criadas em laboratório.

MATERIAL RESULTANTE DO ACASALAMENTO ANTERIOR

DESENVOLVIMENTO EMBRIONÁRIO — As 20 ninfas ovipostas entre

20-02 e 31-03-1981 tiveram um desenvolvimento entre 32 e 68 dias com uma

média de 40,4 dias.

ESTÁDIO I — Das 20 ninfas desalagadas, 15 morreram com 26 a 274 dias

de vida e a maioria sem se alimentar; as que se alimentaram fizeram de um a

dois repastos deficientes. Apenas a ninfa que viveu 274 dias fez 6 repastos

deficientes.

As 5 restantes tiveram um estádio entre 140 a 237 dias com a média de

200,6 dias. O número de refeições foi de três a quatro.

Essas ninfas passaram, neste estádio, a época predominantemente fria do ano,

principalmente os meses de junho e julho e que no ano de 1981 atingiram

temperaturas bem baixas.

ESTÁDIO II — Das 5 ninfas, apenas duas completaram o estádio com

105 e 118 dias e com média de 111,5 dias. Os óbitos ocorreram com 83 a

300 dias neste estádio.

ESTÁDIO III — Mais um óbito aos 316 dias de vida neste estádio e

a única ninfa sobrevivente fez um estádio de 45 dias e apenas um repasto.

ESTÁDIO IV — O único exemplar teve este estádio com 307 dias e fez

5 repastos.

ESTÁDIO V — A ninfa não o completou, morrendo com 151 dias de

vida neste estádio.

RESUMINDO OS DADOS OBTIDOS TEMOS:

Desenvolvimento embrionário; 32 a 68 dias, com média de 40,4 dias.

Duração do Estádio I — 36 a 256 dias, com média de 134,13 dias.

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HEITZMANN-FONTENELLE, T. J. Bionomia comparativa de Triatomíneos. U — Triatoma

brasiliensis Neiva, 1911 (Hemiptera, Eeduviidae). Mem. Inst. Butantan, 47/^5:157-164,

1983/84.

Duração do Estádio II — 22 a 175 dias, com média de 59,15 dias.

Duração do Estádio III — 29 a 612 dias, com média de 114,88 dias.

Duração do Estádio IV — 37 a 371 dias, com média de 188,35 dias.

Duração do Estádio V — 61 a 525, com média de 257,64 dias.

Duração da Vida Ninfal — 245 a 1.348 dias, com média de 603,83 dias.

Duração da Fase Adulta — 30 a 626 dias, com média para as fêmeas de 365,11

dias e para os machos de 140,5 dias.

Duração da Vida Total — 310 a 1896, com média de 930,83 dias.

CONCLUSÕES

T. brasiliensis mostrou ser uma espécie muito adaptada a certas condições

de temperatura e umidade, inexistentes nos Estados sulincft do Brasil, o que

a delimita muito, existindo apenas na Região nordeste. Sua criação, em labora¬

tório; requer controles de temperatura e umidade, fato que está fora dos

propósitos da nossa pesquisa que é estudar o comportamento dos diversos tria¬

tomíneos ao mesmo ambiente. Pinto (12) nos dá para o ciclo evolutivo completo,

aproximadamente 290 dias. Dias (4) da entre 333 e 392 dias e Lucena (9)

399,61 dias para a fase ninfal e 417,92 para vida total, valores muito abaixo

dos encontrados por nós.

Outro fato que nos chamou a atenção foi a alta mortalidade observada nos

estádio I e V, fato que ocorreu com todas as criações realizadas.

Comparando-se com os dados obtidos por Heitzmann-Fontenelle ®, ®, temos

para o desenvolvimento ninfal: Panstrongylus megistus — 352,7 dias; Triatoma

sórdida — 460,12 dias; Triatoma vitticeps — 466,89 dias e para Triatoma

brasilienses — 603,83 dias, portanto, esta espécie teve a maior duração entre as

das espécies já estudadas, além de apresentar um alto índice de mortalidade. Para

a duração da fase adulta, o máximo obtido para Panstrongylus megistus foi de

370 dias; para Triatoma sórdida foi de 955 dias; para Triatoma vitticeps foi

de 807 dias e para Triatoma brasiliensis foi de 626 dias.

ABSTRACT: The complete evolutive cycle of Triatoma brasiliensis

Neiva, 1911 is here studied in laboratory conditions and compared

with those of Panstrongylus megistus, Triatoma sórdida and Tria¬

toma vitticeps.

KEYWORDS: Triatoma brasiliensis Neiva, 1911: Evolutive cycle.

REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

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Triatominae): Tempo de sução e repleção de ninfas de 4.° e 5.° estádio.

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2. BRASILEIRO, V.L.F. Fecundidade e fertilidade da fêmea de Triatoma brasi¬

liensis (Hemiptera, Reduviidae). I Influências da cópula e da longevidade.

Rev. Bras. Biol., J,2(\) :1-13, 9 figs, 1980.

3. COSTA, M.J. Estudo do jejum em Triatoma brasiliensis. Memórias de Mes¬

trado. Dep. Biol. Inst. Biociências da USP.

163

SciELO

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HEITZMANN-FONTENELLE, T. J. Bionomia comparativa de Triatomíneos. II — Triatoma

brasiliensis Neiva, 1911 (Hemiptera, Reduviidae). Mem. Inst. Butantan, 47/45:157-164,

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4. DIAS.E. Notas sobre o tempo de evolução de algpimas espécies de triatomíneos

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5.° estádio de T. brasiliensis. Mem. de Mestrado Dep. Biol. Inst. Biociências

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6. HEITZMANN-FONTENELLE, T.J. Bionomia comparativa de Triatomíneos

I — Panstrongylus megistus (Burm., 1836) Hemiptera, Reduviidae). Studia

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7. HEITZMANN-FONTENELLE, T.J. Bionomia comparativa de Triatomíneos.

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8. HEITZMANN-FONTENELLE, T.J. Bionomia comparativa de Triatomineos.

IV — Triatoma sórdida (Stal, 1859) (Hemiptera, Reduviidae). Studia

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9. LUCENA, D.T. Evolução do Triatoma brasiliensis Neiva, 1911, no laboratório.

Rev. Bras. Biol., 20(3) :295-302, 1960.

10. NEIVA, A. Contribuição ao estudo dos hematófagos brasileiros e descrição

de nova espécie de Triatoma. Brasil Med., 25:461-462, 1911.

11. PERONDINI, A.L.P.; Costa, M.J. & BRASILEIRO, V.L.F. Biologia de

Triatoma brasiliensis II. Observação sobre a ontogenia. Rev. Saúde Publ.

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12. PINTO, C. Biologia de Triatoma brasiliensis Neiva, Sei. Med., 2(10) :541,

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Recebido e aceito para publicação em 15/06/1984.

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5 SciELO ;lo 11 12 13 14 15

Mem. Inst. Butantan

47/ÍS:165-174, 1983/84

BIONOMIA COMPARATIVA DE TRIATOMÍNEOS.

V — TRIATOMA LENTI SCHERLOCK & SERAFIM, 1967

(HEMIPTERA, REDUVIIDAE)*

Therezinha J. HEITZMANN-FONTENELLE ”

RESUMO; O ciclo evolutivo de Triatoma lenti é estudado em con¬

dições de laboratório e comparado com as demais espécies já estu¬

dadas nas mesmas condições.

PALAVRA-CHAVE: Triatoma lenti: ciclo evolutivo em labora¬

tório.

INTRODUÇÃO

Dando continuidade à série de estudos bionômicos de triatomíneos prováveis

vectores da Moléstia de Chagas, apresentamos as conclusões obtidas da criação,

em laboratório, de Triatoma lenti Scherlock & Serafim, 1967.

Sendo espécie autóctone da Bahia, sua climatização às condições mais úmidas

e frias do laboratório da Seção de Parasitologia, localizada no Horto Oswaldo

Cruz do Instituto Butantan, São Paulo, apresentou problemas, mas a sua adap¬

tação foi mais fácil do que a da espécie brasiliensis restrita às zonas tropicais do

Nordeste brasileiro.

MATERIAL E MÉTODO

Em janeiro de 1972, a Seção de Parasitologia recebeu, por intermédio do

Dr. A. B. Galvão, um lote rotulado como T. pessoai, posteriormente corrigido

para T. lenti, sinonímia estabelecida em 1979 por Lent & Wigodzinsky (5) prove¬

nientes de uma criação existente no Laboratório de Parasitologia da Faculdade

de Farmácia de Goiânia, GO, a partir de material somente com indicação da

Bahia.

Desse lote, surgiram os primeiros adultos em dezembro de 1972, dentre os

quais isolamos, em janeiro de 1973, uma fêmea, supostamente fecundada, que

elaborou 44 ovos entre 12 de janeiro e 3 de fevereiro, formando a primeira

amostragem de observações. Aproximadamente um ano após, isolamos 68 ovos

* Trabalho efetuado com auxílio do CNPq.

Seção de Parasitologia do Instituto Butantan.

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HEITZMANN-FONTENELLE, T.J, Bionomia comparativa de Triatomíneos. V — Triatoma

lenti Scherlock & Serafim, 1967 (Hemiptera, Eeduviidae). Mem. Inst. Butantan, Ji7/i8:

165-174, 1983/84.

de três fêmeas descendentes da primeira amostragem e acasaladas em laboratório,

perfazendo um total de 112 observações.

Como estamos fazendo um estudo comparativo com as demais espécies em

observação, o método de criação seguiu os mesmos detalhes dos trabalhos

anteriores, apenas que a alimentação em coelho, comumente feita quinzenalmente,

passou a ser feita mais amiúde — 2 vezes por semana — porque alguns exem¬

plares desta espécie apresentaram problemas para se alimentar, fazendo várias

tentativas para introduzir o rostro na pele do coelho e mudando de posição

várias vezes durante o repasto. Geralmente, quando as ninfas apresentavam

essa deficiência, pereciam antes de completar o ciclo de desenvolvimento.

Para uma melhor visão dos problemas que acompanharam a criação em

laboratório dessa espécie, fora do seu ambiente habitual, vamos analisar separa¬

damente as observações em duas amostragens: a primeira formada pelos 44 ovos

iniciais e a segunda pelos 68 ovos descendentes da amostragem anterior, portanto

vamos analisar o comportamento de exemplares recém-chegados a um clima frio

e úmido e outro com mais tempo de convívio nesse ambiente.

DESENVOLVIMENTO EMBRIONÁRIO

Amostragem I — Dos 44 ovos ovipostos entre 13 01 e 03-02-1973, dois

não eclodiram e os demais eclodiram entre 29 e 35 dias, dando uma média de

32,55 dias.

Amostragem II — Neste lote houve oviposições em quase todos os ineses

do ano: 3 ovos de 15 a 31-03-74 com desenvolvimento entre 40 a 49 dias,’com

a média de 43,67 dias; 9 ovos de 02 a 27-04-74 com desenvolvimento de 42 a

51 dias e média de 46,56 dias; dois ovos de 11-05-74 com 42 dias de desenvol¬

vimento; dois ovos de 01 a 30-06-74 com desenvolvimento de 38 a 51 dias e

média de 44,05 dias; 20 ovos de 01 a 31-07-74 com desenvolvimento de 42 a

64 dias e média de 53 dias; 5 ovos de 07 a 26-09-74 com desenvolvimento de

56 a 60 dias e média de 58 dias; 3 ovos de 13 a 28-10-74 com desenvolvimento

de 42 a 48 dias e média de 45,33 dias; 3 ovos de 15 a 19-11-74 com desenvol¬

vimento de 42 a 44 dias com média de 43 dias; 2 ovos de 10 a 27-12-74 com

desenvolvimento de 37 a 40 dias e média de 38,5 dias e, finalmente, 1 ovo de

17-01-75 com desenvolvimento de 34 dias.

ESTÁDIO I

Amostragem I — Das 42 ninfas, apenas uma não completou o estádio,

morrendo após 49 dias, sem se alimentar, embora tentasse em todas as ocasiões

que lhe foi oferecido o alimento. As demais levaram de 25 (duas observações)

a 80 dias para completar o estádio, havendo predominância entre 41 a 60 dias

(25 casos) correspondendo a 60,98% da amostragem. A média foi de 45,8 dias.

O período anual predominante foi fevereiro e março de 1973

Quanto ao número de refeições, como dissemos no início, foi maior nesta

criação, mas quatro ninfas completaram o estádio com apenas uma refeição.

Foram ninfas de estádio I curto (31, 32, 39 e 40 dias). Duas ninfas com o

estádio mais curto (25 dias) tiveram dois e três repastos, sendo que o terceiro

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165-174, 1983/84.

repasto desse exemplar não foi satisfatório, alimentando-se muito pouco. A ninfa

de estádio I mais longo (80 dias) fez também o maior número de repastos —

sete, sendo que alguns deles não foram satisfatórios.

A primeira refeição ocorreu do 5.“ ao 25.° dia de vida, embora se tenha

observado duas ninfas tentando fazê-lo no 2.“ dia de vida, mas ambas pouco se

alimentaram. Até o 10.° dia, 43,9% da amostragem já havia feito a primeira

refeição e 87,8% da amostragem fez o primeiro repasto antes do 20.-' dia de vida.

Amostragem II — Das 68 ninfas, 18 não completaram o estádio: uma

morrendo um dia após a eclosão; em 5 casos a morte ocorreu com menos de

20 dias de vida (duas com dois repastos e três sem se alimentar); em 4 casos

a morte ocorreu entre 21 e 40 dias (todos após algumas tentativas de repastos,

mas sem se alimentarem direito); em 7 casos a morte ocorreu de 41 aos 60 dias

(uma com um repasto, três com 2 repastos e três com 3 repastos), e, finalmente

houve duas mortes com 72 e 94 dias de vida respectivamente. A primeira, após

três repastos, presa ao fundo do frasco nas fezes ainda úmidas, e a outra após

5 tentativas de repastos.

As demais ninfas completaram o estádio entre 45 e 172 dias, predominando

51 a 70 dias (23 observações) dando 46% da amostragem. A média foi de

80,68 dias.

O menor número de refeições foi dois, observado em 4 ninfas com estádio

de 47 (duas observações), 55 e 66 dias. A ninfa de estádio mais curto (45 dias)

fez 5 refeições e a de estádio mais longo (172 dias) fez 10. O maior número

de repastos foi 11, referente a duas ninfas de 110 e 171 dias, sendo que esta

última ninfa, após o segundo repasto, não mais se alimentou em condições

suficientes.

Na amostragem II, praticamente tivemos ninfas no estádio I durante o ano

todo, mas houve uma maior incidência nos meses de julho a outubro de 1974.

ESTÁDIO II

Amostragem I — Das 41 ninfas deste lote, cinco não completaram o estádio:

uma morrendo com 16 dias e sem se alimentar. Esta ninfa já havia apresentado

problemas de deficiência na alimentação durante o estádio anterior, embora tenha

tido um estádio I curto (46 dias) com três refeições. O segundo óbito foi de

uma ninfa, após 25 dias da ecdise e uma refeição (o estádio I foi de 49 dias

e com duas refeições sem problemas). As outras mortes foram com 52, 68 e 72

dias de vida neste estádio e com 4, 5 e 4 refeições respectivamente. Destas três

ninfas, apenas a que viveu 68 dias apresentou problemas de alimentação.

Nas demais ninfas, o estádio II variou de 21 a 334 dias, sendo predomi¬

nante o intervalo de 31 a 50 dias (19 observações) dando uma percentagem de

52,78% da amostragem. A média foi de 67,39 dias.

O número de refeições neste estádio variou entre 1 e 32, predominando

duas a cinco. Três ninfas fizeram apenas uma refeição com estádio II de 21

(o estádio mais curto), 31 e 25 dias. Três ninfas tiveram um número exagerado

de refeições: uma ninfa com estádio II de 186 dias fez 12 refeições: uma ninfa

de estádio II de 288 dias fez 23 repastos muito deficientes e a ninfa de estádio

II mais longo (334 dias) fez 32 repastos, o que não é muito para o longo prazo

deste estádio.

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lenti Scherlock & Serafim, 1967 (Hemiptera, Reduviidae). Mem. Inst. Butantan, i7H8'.

165-174, 1983/84.

Amostragem II — Das 50 ninfas deste lote, nove não completaram o estádio:

2 ninfas sofreram acidente durante a ecdise II, ficando presas às exúvias, fato que

nos obrigou a sacrificá-las; outra ninfa morreu poucos dias após a ecdise sem se

alimentar; as demais mortes ocorreram com 47 dias e três refeições deficientes;

com 86 dias e 6 refeições deficientes; com 112, 117 e 126 dias e 9 refeições

(2 das ninfas com deficiência) e uma com 258 dias e 12 refeições deficientes

As ninfas restantes tiveram um estádio entre 34 e 266 dias, predominando

51 a 100 dias. A média foi de 102, 32 dias.

Quanto ao número de alimentações foi de 2 a 18, predominando 3 a 7

refeições. Duas ninfas fizeram dois repastos: uma com estádio II de 34 dias

(estádio mais curto) e outra com estádio de 43 dias. Apenas três ninfas fizeram

mais de 10 refeições: uma com 171 dias e 12 refeições (deficientes), outra com

190 dias e 13 refeições e a ninfa de estádio mais longo (266 dias) com 18 refei¬

ções (deficientes). Neste estádio observamos um caso de hematofagismo sobre

outro parceiro de frasco: uma ninfa após 79 dias neste estádio e de ter feito

seis repastos em coelho, aproveitou a ecdise de uma ninfa de T. vitticeps, parceira

de frasco, para sugá-la.

ESTÁDIO III

Amostragem I — Das 36 ninfas que entraram neste estádio, sete não o

completaram: duas sofreram acidentes durante a ecdise, ao entrar neste estádio;

uma com seis dias e sem repastos; três com 71, 73 e 75 dias e com respectiva¬

mente 6, 8 e 3 repastos, sendo que a ninfa de 75 dias fez três repastos deficientes.

Uma .ninfa morreu com 134 dias e após 13 repastos.

As 29 ninfas restantes tiveram um estádio de 46 a 237 dias, predominando

o intervalo de 81 a 120 dias. A média foi de 114,31 dias.

O número de refeições foi de dois a vinte, predominando de dois a dez.

Duas ninfas efetuaram dois repastos e tiveram estádios curtos de 66 e 71 dias.

A ninfa que fez 20 repastos teve um estádio de 237 dias (registro mais longo

para o estádio). A ninfa de estádio mais curto (46 dias) fez três repastos.

O período anual predominante foi de maio a setembro de 1973.

Amostragem II — Das 41 ninfas que entraram neste estádio, seis não o

completaram: duas logo após a ecdise, por acidente durante a muda — uma

delas já havia apresentado problemas na alimentação durante o estádio anterior

que teve uma duração de 171 dias (um dos mais longos), quando fez 18 repastos,

sendo o primeiro e o último deficientes. Outra ninfa, também por problemas

durante a ecdise, só viveu 16 dias e sem repastos. Dos três óbitos restantes: um

foi aos 114 dias e após 4 repastos, outra com 146 dias e 7 tentativas de repastos

e finalmente uma ninfa com 214 dias e 10 repastos, alguns deficientes.

As demais ninfas, em número de 34, tiveram um estádio com 45 a 343 dias,

com a média de 147,24 dias.

O número de repastos variou de três a vinte e cinco, predominando de três

a dez. Três ninfas fizeram três repastos e tiveram estádios de 45 dias (o mais

curto) e duas com 65 dias. A ninfa com 25 repastos, sendo dois deficientes, teve

o estádio mais longo (343 dias).

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SciELO

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HEITZMANN-FONTENELLE, T.J. Bionomia comparativa de Triatomíneos. V — Triatoma

lenti Scherlock & Serafim, 1967 (Hemiptera, Reduviidae). Mem. Inst. Butantan, 47/4S:

165-174, 1983/84.

ESTÁDIO IV

Amostragem I — O índice de mortalidade foi bem grande neste estádio:

11 ninfas morreram, sendo que 10 com poucos dias de vida neste estádio.

Quatro ninfas sofreram acidentes durante a ecdise; outras quatro morreram com

4 a 19 dias, sem se alimentar; uma com 26 dias e um repasto deficiente; outra

com 104 dias, 12 repastos sendo três deficientes e o último óbito foi o de uma

ninfa com 209 dias neste estádio e 25 tentativas de repastos.

As 18 ninfas restantes tiveram um estádio IV entre 50 e 353 dias, com

média de 128,06 dias.

O número de repastos foi de quatro a 32, predominando de 4 a 9. Fez

quatro repastos uma ninfa com estádio de 89 dias e, 32 repastos (sendo os seis

primeiros deficientes) a ninfa com 353 dias (o estádio mais longo). A ninfa de

estádio mais curto (50 dias) fez 5 repastos.

Amostragem II — O índice de mortalidade também foi elevado. Das 35

ninfas, 11 morreram: 4 por acidente durante a ecdise e destes, apenas uma ninfa

havia apresentado problemas no estádio anterior que foi longo (262 dias) e com

18 repastos, alguns deficientes. Outra morte ocorreu com ninfa 38 dias e sem

repastos. Duas ninfas morreram com 57 dias, com uma e duas tentativas de

repastos. Outra ninfa morreu com 68 dias e 3 tentativas de repastos. A nona

morte ocorreu com ninfa com 112 dias de vida neste estádio e 7 tentativas de

repastos. A décima e décima primeira mortes ocorreram com ninfas com 234 e

249 dias neste estádio, após 17 e 16 repastos deficientes.

As demais ninfas tiveram um Estádio IV de 63 a 604 dias com média de

210,58 dias.

O número de repastos oscilou entre 3 e 37. Duas ninfas fizeram apenas

três repastos, com 66 e 74 dias de duração do estádio IV. A ninfa que fez

37 repastos teve um estádio de duração de 604 dias (o mais longo), embora

parte dos repastos tenha sido deficiente. A ninfa de estádio mais curto (63 dias)

fez 6 repastos.

Neste estádio observamos 3 casos de hematofagismo em ninfas parceiras de

frasco.

ESTÁDIO V

Amostragem I — Esta amostragem, já reduzida a 18 observações, sofreu

mais a perda de 8 ninfas durante este estádio. Duas mortes foram por acidentes

durante a ecdise, sendo que em uma das ninfas o estádio anterior já havia sido

longo (440 dias) e com 28 repastos (a maioria deficientes). Uma morte ocorreu

aos 49 dias, com 4 repastos, sendo dois deficientes; a quarta morte foi observada

em uma ninfa com 81 dias neste estádio e sete repastos deficientes; a quinta

morte foi de uma ninfa com 185 dias e após 15 repastos. Os três últimos óbitos

foram em ninfas com 429, 475 e 490 dias neste estádio e após 32, 42 (algumas

deficientes) e 35 refeições.

As 10 ninfas restantes tiveram este último estádio ninfal com 74 a 298 dias,

com média de 169,3 dias. O intervalo mais freqüente foi de 121 a 200 dias.

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HEITZMANN-FONTENELLE, T.J. Bionomia comparativa de Triatomíneos. V — Triatoma

lenti Scherlock & Serafim, 1967 (Hemiptera, Reduviidae). Mem. Inst. Butantan, 47/48:

165-174, 1983/84.

O número de refeições foi de 7 a 23. Teve 7 repastos a ninfa com estádio V

de 74 dias (estádio mais curto) e 23 repastos a ninfa de estádio mais longo

(298 dias).

Amostragem II — Das 24 ninfas que entraram neste estádio, 10 não o

completaram: 3 por acidente durante a ecdise (uma teve o estádio IV entre os

mais longos, com 440 dias e 28 repastos, sendo que apenas os cinco últimos

foram relativamente normais); outra com estádio IV de 315 dias, 23 repastos,

alguns deficientes e a terceira ninfa com estádio IV curto (107 dias) e quatro

repastos normais. As outras mortes ocorreram com ninfas com 165 a 456 dias,

com muitos repastos, sendo alguns deficientes.

As 14 ninfas restantes fizeram este estádio num período de 144 a 609 dias,

com a média em torno de 337,62 dias.

O número de repastos variou de 8 (ninfa com o estádio de 144 dias) a

31 (ninfa com o estádio de 609 dias).

VIDA ADULTA

Amostragem I — As 10 ninfas que chegaram a fase adulta, resultaram em

4 fêmeas com vida adulta de 66 a 349 dias, com média de 230 dias, e, 6 machos

com vida adulta de 70 a 336 dias e com média de 221,17 dias.

O número de repastos foi, para as fêmeas, de 2 (para a fêmea de 66 dias) a

24 (para as fêmeas de 269 e 349 dias). Os machos fizeram de dois repastos

(sendo um deficiente) para uma vida adulta de 70 dias a 19 repastos (alguns

deficientes) para um macho de vida adulta de 336 dias.

Amostragem II — Das 14 ninfas que chegaram à fase adulta, cinco se torna¬

ram fêmeas e nove machos. As fêmeas tiveram essa fase com 6 a 419 dias, mas

como a ninfa de vida adulta de somente 6 dias havia sofrido uma queda durante

a ecdise, tornando-se defoimada, este dado não será considerado, então, a vida

adulta mínima foi de 126 dias e a média foi de 267,5 dias. Para os machos a

vida adulta oscilou entre 9 (também deformado por acidente na ecdise) a 429.

A média, tirada de oito observações foi de 199,71 dias.

O número de repastos oscilou entre 5 a 19 (este para a fêmea de. vida

adulta mais longa) e entre os machos oscilou entre uma a dez refeições. O macho

com vida mais longa (429 dias) fez apenas 6 repastos.

VIDA NINFAL

Amostragem I — A vida ninfal das 10 observações que completaram o

desenvolvimento variou de 329 (para um macho) a 796 dias (para uma fêmea).

A média foi de 473 dias.

Amostragem II — A vida ninfal das 14 observações que a completaram

variou de 518 (para um macho) a 1.357 (para uma fêmea), com média de

802,23 dias.

VIDA TOTAL

Amostragem I — A vida total (do ovo até morte do adulto) nos 10 espéci-

mens foi de 559 (para um macho) a 862 (para uma fêmea), com média de

697,7 dias.

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5 6

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HEITZMANN-FONTENELLE, TJ. Bionomia comparativa de Triatomíneos. V — Triatoma

lenti Scherlock & Serafim, 1967 (Hemiptera, Reduviidae). Mem. Inst. Butantan, i7H8:

165-174, 1983/84.

Amostragem II — A vida total nas 13 observações foi de 620 dias (para

um macho) a 1.737 dias (para uma fêmea), a média foi de 987 dias.

ACASALAMENTOS

Dos 10 adultos obtidos na amostragem I (3 fêmeas e 7 machos) temos que

todas as fêmeas foram acasaladas, mas entre os machos, 4 não foram acasalados.

Os acasalamentos foram:

1. Fêmea com 236 dias de vida adulta foi acasalada aos poucos dias de

vida adulta com um macho (com um mês de vida adulta). Elaborou 37 ovos,

dando apenas duas ninfas.

2. Fêmea de 269 dias de vida adulta, foi acasalada aos quatro dias de

vida adulta com macho com dois dias de vida adulta. Elaborou 78 ovos, resul¬

tando 26 ninfas.

3. Fêmea com 349 dias de vida adulta foi acasalada aos 47 dias nesta

fase com macho com 56 dias de vida adulta. Produziu 99 ovos, alguns defor¬

mados, resultando 40 ninfas.

Essas 68 ninfas obtidas nos três acasalamentos formaram a amostragem II.

Um dos machos desta amostragem foi acasalado com uma fêmea de T. bra-

siliensis produzindo ninfas híbridas.

Dos 14 adultos obtidos na segunda amostragem, 5 foram fêmeas e 9 machos.

Das fêmeas, duas não foram acasaladas. Com uma fêmea foram feitas tentativas

de acasalamento com macho de T. brasiliensis, mas apesar de produzir 14 ovos,

não houve descendência.

A quarta fêmea foi acasalada com um macho de T. brasiliensis produzindo

20 ovos, resultando 17 ninfas. Esta mesma fêmea foi acasalada com um macho

da mesma espécie, produzindo 18 ovos viáveis.

A fêmea restante, com vida adulta de 145 dias, foi cruzada com um macho

híbrido de T. brasiliensis e T. lenti. Conviveram no mesmo frasco por 73 dias.

A fêmea elaborou 16 ovos, resultando apenas uma ninfa que pereceu com poucos

dias de vida.

Dos 9 machos, cinco não foram acasalados. Com um dos machos foi tentado

acasalamento com fêmea híbrida de T. brasiliensis e T. lenti, mas não houve

prole. Novo acasalamento foi tentado com esse macho e uma fêmea de T. brasi¬

liensis mas, quatro dias após, a fêmea morreu e o macho sobreviveu ainda 116

dias sem mais acasalamentos.

CONCLUSÕES

Esta espécie apresentou problemas de adaptação às nossas condições ambien¬

tais (Laboratório de Parasitologia do Instituto Butantan, SP) e como nas obser¬

vações sobre T. brasiliensis (Heitzmann-Fontenelle), os índices de mortalidade

foram altos, notadamente nos estádios IV e V quando de 61 observações no

estádio III, passamos para 42 no estádio IV e ficamos reduzidos a 21 obser¬

vações no estádio V.

Comparando-se o ciclo evolutivo desta espécie com o das espécies já estu¬

dadas (1, 2, 3 e 4) teremos o seguinte:

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SciELO

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HEITZMANN-FONTENELLE, T.J. Bionomia comparativa de Triatomíneos. V — Triatoma

lenti Scherlock & Serafim, 1967 (Hemiptera, Reduviidae). Mem. Inst. Butantan, 47/48:

165-174, 1983/84.

Duração do desenvolvimento embrionário (em dias)

minimo

maximo

média

Panstrongylus megistus

24,51

Triatoma sórdida

27,50

Triatoma vitticeps

34,59

Triatoma brasiliensis

40,40

Triatoma lenti

38,11

Duração do estádio I

(em dias)

mínimo

máximo

média

Panstrongylus megistus

119

58,05

Triatoma sórdida

232

71,49

Triatoma vitticeps

105

54,08

Triatoma brasiliensis

256

134,13

Triatoma lenti

172

63,88

Duração do estádio II

(em dias)

mínimo

máximo

média

Panstrongylus megistus

102

52,67

Triatoma sórdida

209

68,35

Triatoma vitticeps

243

64,76

Triatoma brasiliensis

175

59,15

Triatoma lenti

334

86,06

Duração do estádio III (em dias)

mínimo

máximo

média

Panstrongylus megistus

46,73

Triatoma sórdida

172

77,50

Triatoma vitticeps

184

64,50

Triatoma brasiliensis

612

98,64

Triatoma lenti

343

130,87

Duração do estádio IV (em dias)

mínimo

máximo

média

Panstrongylus megistus

53,78

Triatoma sórdida

342

101,19

Triatoma vitticeps

287

106,56

Triatoma brasiliensis

371

188,35

Triatoma lenti

604

175,21

172

SciELO

10 11 12 13 14 15

HEITZMANN-FONTENELLE, T.J. Bionomia comparativa de Triatomíneos. V — Triatoma

lenti Scherlock & Serafim, 1967 (Hemiptera, Reduviidae). Mem. htst. Butantan,

165-174, 1983/84.

Duração do estádio V (em dias)

mínimo

máximo

média

Panstrongylus megistus

377

111,41

Triatoma sórdida

1.112

167,33

Triatoma vitticeps

517

186,24

Triatoma brasiliensis

525

257,64

Triatoma lenti

609

264,43

Duração

da fase adulta (em dias)

mínimo

máximo

média

Panstrongylus megistus

370

117,81

Triatoma sórdida

955

307,97

Triatoma vitticeps

820

369,69

Triatoma brasiliensis

626

324,27

Triatoma lenti

429

214,32

Duração

da vida ninfal

(em dias)

mínimo

máximo

média

Panstrongylus megistus

119

346

323,43

Triatoma sórdida

306

1.408

489,90

Triatoma vitticeps

349

781

463,66

Triatoma brasiliensis

245

1.348

603,83

Triatoma lenti

329

1.357

659,09

Duração

da vida total

(em dias)

mínimo

máximo

média

Panstrongylus megistus

260

689

443,70

Triatoma sórdida

478

1.473

808,62

Triatoma vitticeps

523

1.316

833,55

Triatoma brasiliensis

310

1.896

930,83

Triatoma lenti

559

1.737

861,22

Pela tabela acima podemos ver que, embora as durações dos estádios variem

entre as diversas espécies, a duração da vida ninfal foi mais ou menos constante

entre as duas espécies de Triatoma mais aclimatadas (sórdida e vitticeps) e entre

as duas espécies com problemas de adaptação (brasiliensis e lenti) e diferem do

gênero Pansirongylus. Quanto a vida total podemos ver que todas as espécies de

Triatoma têm aproximadamente durações equivalentes.

ABSTRACT: Here we are studying the Triatoma lenti life cycle

and it are compared with those Triatominae species that have been

reared in some laboratory conditions.

KEYWORD: Triatoma lenti — evolutive cycle in laboratory.

173

SciELO

10 11 12 13 14 15

HEITZMANN-FONTENELLE, T.J. Bionomia comparativa de Triatomíneos. V — Triatoma

lenti Scherlock & Serafim, 1967 (Hemiptera, Reduviidae). Mem. Inst. Butantan, Jt7/It8:

165-174, 1983/84.

REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

HEITZMANN-FONTENELLE, T. J. Bionomia Comparativa de Triatomíneos;

I — Panstronffylus megistus (Bum., 1835). (Hemiptera, Reduviidae).

Studia Ent, 79 (1-4) :201-210, 1976.

HEITZMANN-FONTENELLE, T. J. Bionomia Comparativa de Triatomíneos.

III — Triatoma sórdida (Stal, 1859),. (Hemiptera, Reduviidae). Studia

Ent., 20(1-4) :89-98, 1978.

HEITZMANN-FONTENELLE, T. J. Bionomia Comparativa de Triatomíneos.

IV — Triatoma vitticeps Stal, 1836. (Hemiptera, Reduviidae). Ecossistema,

5:39-46, 1980.

HEITZMANN-FONTENELLE, T. J. Bionomia Comparativa de Triatomíneos.

II — Triatoma brasiliensis Neiva, 1911. Mem. Inst. Butantan, i7H8:

157-164, 1983/84.

LENT, H. & WYGODZINSKY, P. Revision of Triatominae (Hemiptera,

Reduviidae) and their significance as vectors of Chagas’disease. Buli.

Amer. Must. Nat. Hist., 753(3) :123-520, 320 figs., 2 tabl., 1979.

Recebido e aceito para publicação em 15/06/1984.

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Mem. Inst. Butantan

i7/iS: 175-181, 1983/84

BIONOMIA COMPARATIVA DE TRIATOMÍNEOS.

VI — HÍBRIDOS DE TRIATOMA BRASILIENSIS NEIVA,

1911 X TRIATOMA LENTl, SCHERLOCK & SERAFIM, 1967

HEMIPTERA, REDUVIIDAE)* •*

Therezinha J. HEITZMANN-FONTENELLE

RESUMO: O ciclo evolutivo de híbridos resultantes do cruzamento

em laboratório, de Triatoma brasiliensis e Triatoma lenti, é estudado

desde sua fase embrionária até adulto, e os dados obtidos são compa¬

rados com os dos ciclos evolutivos das duas espécies que lhes deram

origem e também criadas em laboratório, com as mesmas condições

ambientais.

PALAVRA-CHAVE: Híbridos de Triatoma brasiliensis x Triatoma

lenti: ciclo evolutivo em laboratório.

INTRODUÇÃO

A obtenção de híbridos entre os triatomíneos, não é fato inédito, NEIVA ^

já menciona a possibilidade de cruzamento entre espécies diferentes. ABALOS

GALVÃO MAZZOTTI & OSORIO ®, “ referem a híbridos experimentais

mas de um miodo geral, é abordado principalmente, o aspecto morfológico dos

híbridos resultantes. Este aspecto será assunto de um próximo trabalho, e agora

irei considerar apenas a sua bionomia, comparando-a com as duas espécies

que lhe deram origem®, ■*.

MATERIAL E MÉTODO

No laboratório de Parasitologia do Instituto Butantan, a criação de triato¬

míneos é feita em pequenos borréis contendo de seis a dez espécimens diferen¬

ciáveis taxonomicamente ou pela fase evolutiva, para ser possível o acompa¬

nhamento individual dos seus ciclos de vida. Esse agrupamento se faz necessário

para um aproveitamento mais racional do tempo gasto nas alimentações, dado

a grande quantidade de observações simultâneas.

Durante o ano de 1973, criava, no laboratório, espécimens de T. brasilien¬

sis e T. lenti. Casualmente, num frasco de criação, onde já havia uma fêmea de

• Trabalho efetuado com auxílio do CNPq.

•* Seção de Parasitologia do Instituto Butantan.

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HEITZMANN-FONTENELLE, T.J. Bionomia comparativa de Triatomíneos. VI — Híbridos

de Triatoma brasiliensis Neiva, 1911 X Triatoma lenti, Scherlock & Serafim, 1967 (Hemip-

tera, Reduviidae). Mem. Inst. Butantan, 47/45:175-181, 1983/84.

T. brasiliensis, uma ninfa de T. lenti tornou-se um macho. O casal foi conser¬

vado junto e das posturas resultantes, eclodiram 118 ninfas híbridas. Ainda,

na mesma época, fiz outras tentativas de acasalamentos e obtive mais 18 ninfas,

mas sempre de fêmeas de T. brasiliensis. O acasalamento inverso, isto é, de

fêmea de T. lenti com macho de T. brasiliensis não deram descendentes.

Dois anos após, tentei novamente o cruzamento de fêmea de T. lenti com

macho de T. brasiliensis e obtive mais 17 ninfas híbridas.

Em virtude do ciclo evolutivo em laboratório ter apresentado variações,

vou analisar separadamente, os descendentes híbridos das fêmeas de T. brasi¬

liensis e de T. lenti.

DESENVOLVIMENTO EMBRIONÁRIO

Como os 153 ovos foram ovipostos em vários meses do ano, vou consi¬

derar as posturas mensais, pois o desenvolvimento embrionário é variável com

o período sazonal (verão-inverno).

No período de 13-02 a 24-02-1974 foram ovipostos pela fêmea brasiliensis,

23 ovos que desalagaram após 29 a 39 dias, com média de 32, 73 dias. A

fêmea lenti ovipôs entre 17-02 e 28-02-1976, 6 ovos com períodos embrioná¬

rios de- 39 a 49 dias e média de 42, 67 dias.

No período de 02-03 a 29-03-1974, obtive 29 ovos da fêmea de brasiliensis

que desalagaram após 34 a 53 dias dando a média de 45, 10 dias. A fêmea

de lenti, ovipôs entre 04-03 e 19-03-1976, 10 ovos com desenvolvimento embrio¬

nário de 44 a 66 dias, com média de 56, 70 dias.

No período entre 02-04 a 17-04-1974 obtive 4 ovos da fêmea de brasiliensis,

com períodos embrionários entre 45 e 49 dias e com média de 47 dias, além de um

ovo da fêmea de lenti com desenvolvimento embrionário de 78 dias.

No período de 01-05 a 27-05-1974, a fêmea de brasiliensis elaborou 28

ovos que tiveram um desenvolvimento embrionário entre 32 e 43 dias, com a

média de 40,04 dias.

No período de 01-06 a 29-06-1974 obtive 42 ovos da fêmea de brasiliensis,

com desenvolvimento embrionário de 40 a 50 dias e com média de 43,63 dias.

Em julho, foram ovipostos 9 ovos pela fêmea brasiliensis, com desenvolvi¬

mento embrionário de 46 a 61 dias e com média de 51,22 dias. Em agosto,

apenas um ovo da fêmea de brasiliensis, com um período embrionário de 60 dias.

ESTÁDIO I

Das 136 ninfas desalagadas entre 16-03 e 05-10-1974 e descendentes de

fêmea brasiliensis, 44 morreram antes de completar este estádio: 32 ninfas mor-

leram com menos de 20 dias de vida, sem se alimentar (a maioria) ou após

um repasto. Quatro morreram entre 21 e 30 dias de vida, sendo uma sem repas¬

to, duas com um repasto deficiente e uma com dois repastos. As outras mortes

foram com ninfas de 50 a 156 dias de vida e com repastos deficientes.

As 92 ninfas restantes tiveram um Estádio I entre 31 e 155 dias, sendo

que dos 31 aos 80 dias houve uma ocorrência de 45,65% (42 observações) e

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2 3

5 6

11 12 13 14 15

HEITZMANN-FONTENELLE, T.J. Bionomia comparativa de Triatomíneos. VI — Híbridos

de Triatoma brasiliensis Neiva, 1911 X Triatoma lenti, Scherlock & Serafim, 1967 (Hemip-

tera, Reduviidae). Mem. Inst. Butantan^ 47/.45:176-181, 1983/84.

dos 81 aos 120 houve uma ocorrência de 46,74% (43 observações). Acima

de 121 dias tive 7 observações (7,61%). A média foi de 80,66 dias.

O número de repastos variou de um a 11, prevalecendo de 3 a 7 repastos.

A ninfa de estádio mais curto (31 dias) fez apenas um repasto. Duas ninfas

fizeram 11 repastos: uma com estádio de 155 dias (o mais longo) e outra com

estádio de 137 dias.

A primeira refeição ocorreu entre o 5." e o 28." dias, sendo que 43,48%

da amostragem já havia feito seu primeiro repasto até o 10." dia e 88,04% da

amostragem, antes do 20." dia. Apenas uma ninfa fez o seu primeiro repasto

no quinto dia e teve um estádio de 37 dias e, também, apenas uma ninfa

fez o repasto no 28." dia, com um estádio de 106 dias. A ninfa de estádio

mais curto fez a primeira refeição aos 13 dias e a de estádio mais longo o

fez no sétimo.

Das ninfas eclodidas entre 30-03 e 19-06-1976, descendentes da fêmea

lenti, 10 morreram antes de completar o estádio, com 8 a 214 dias, sendo que

a ninfa que viveu apenas 8 dias, fazendo um repasto no 7.", morreu por aci¬

dente, presa ao papel suporte, nas fezes dos outros triatomíneos do frasco. Mais

duas ninfas morreram com menos de 30 dias, sem repastos; 5 morreram com

menos de 100 dias e após uma ou duas refeições. Duas mortes ocorreram com

115 e 214 dias, após 2 e 8 repastos, respectivamente.

As demais ninfas, em número de 7, tiveram um estádio entre 113 e 239

dias, com média de 195,33 dias.

O número de repastos nesta amostragem oscilou de 6 a 9. Fez 6 repastos

a ninfa de estádio mais curto (113 dias) e fizeram 9 repastos, duas ninfas com

200 e 205 dias. A ninfa de estádio mais longo (239 dias) fez 8 repastos.

A primeira refeição ocorreu entre o 13." (para a ninfa de estádio mais

curto) e 37." dia (para a ninfa de estádio mais longo).

ESTÁDIO II

Das 92 ninfas que entraram neste estádio entre 27-04-1974 e 04-01-1975,

27 ninfas não o completaram, morrendo com 3 a 369 dias neste estádio. As

mortes ocorreram: cinco com menos de 20 dias, sendo três por acidentes durante

a ecdise. Dos 21 aos 50 dias, houve 7 mortes: uma sem se alimentar e as

demais com dois a quatro repastos deficientes e duas delas tentaram o hema-

tofagismo em ninfas de tamanho maior, parceiras de frasco. Dos 51 aos 100

dias ocorreram 7 mortes após 2 a 5 repastos deficientes. Dos 101 aos 150 dias

ocorreram mais 7 mortes: uma sem repasto e as demais após 5 a 8 repastos

deficientes. A última morte ocorreu em ninfa com 369 dias neste estádio e 25

repastos deficientes.

As 65 ninfas restantes tiveram um Estádio II entre 54 e 213 dias, com

média de 111,50 dias.

O número de refeições variou entre 3 e 15, predominando de 5 a 10. Fize¬

ram 3 repastos, duas ninfas, com estádios de 63 e 72 dias e apenas uma ninfa

fez 15 repastos, sendo alguns deficientes, completando o estádio em 162 dias.

A ninfa de estádio mais curto (54 dias) fez 4 repastos e a ninfa de estádio

mais longo (213 dias) fez 13.

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de Triatoma brasiliensis Neiva, 1911 X Triatoma lenti, Scherlock & Serafim, 1967 (Hemip-

tera, Eeduviidae). Mem. Inst. Butantan, 47/48:175-181, 1983/84.

Nas sete ninfas do segundo lote de observações, o Estádio II, iniciado entre

22-07 e 02-12-1976, durou de 37 a 133 dias com média de 78,43 dias.

O número de repastos foi de 2 a 5. Duas ninfas fizeram 2 repastos, com

estádios de 37 (o mais curto) e 53 dias. Fez 5 repastos uma ninfa com estádio

de 133 dias (o mais longo).

ESTÁDIO III

Das 65 ninfas que iniciaram este estádio entre 08-07-1974 e 03-07-1975,

2*7 não 0 completaram, 10 por acidente durante a ecdise, sendo que uma ainda

viveu 4 dias; 9 morreram antes dos 100 dias e após um a sete repastos defi¬

cientes; 5 com 102 a 159 dias neste estádio e 6 a 14 repastos deficientes. Três

mortes ocorreram com 333, 423 e 436 dias e após 23, 31 e 33 repastos defi¬

cientes. Na ninfa que morreu com 423 dias, foi observado uma tentativa de

hematofagismo em ninfa de T. vitticeps.

As 38 ninfas restantes tiveram um Estádio III com durações de 31 a 452

dias, dando a média de 73,24 dias.

O número de repastos oscilou entre um (ninfa de estádio mais curto) e 30

(ninfa de estádio mais longo). Neste mesmo exemplar, foi observado, por duas

vezes, tentativas de hematofagismo. Em outra ninfa, com estádio de 273 dias,

também houve tentativa de hematofagismo em duas ocasiões.

As 7 ninfas descendentes da fêmea de lenti, tiveram um Estádio III, ini¬

ciado entre 02-12-1976 e 15-03-1977, com durações de 67 a 330 dias, dando

a média de 192,86 dias.

O número de repastos foi de 2 a 11. A ninfa de estádio mais curto fez 2

e a de estádio mais longo fez 11.

ESTÁDIO IV

Das 38 observações que entraram neste estádio, entre 22-10-1974 e 31-03-

1976, 15 morreram: 9 por acidentes durante a ecdise, sendo 8 com morte

imediata e uma após 39 dias. As mortes restantes ocorreram com 29 a 201

dias e após uma a oito refeições deficientes.

As 23 ninfas restantes tiveram um estádio IV com durações de 47 a 428

dias, com média de 203,61 dias.

Das 7 ninfas que entraram neste estádio entre 22-02 e 17-11-1977, uma

morreu aos 46 dias e após um repasto. As demais tiveram um estáido entre

206 e 386 dias, dando a média de 302,17 dias.

O número de repastos foi de 6 a 12, sendo 6 para a ninfa de estádio com

206 dias (o mais curto). Três ninfas fizeram 12 repastos: duas com 386 dias

(o mais longo) e outra com 362 dias.

ESTÁDIO V

Das 23 ninfas que entraram neste estádio entre 27-01-1975 e 28-01-1977,

seis não o completaram, morrendo: duas por acidente durante a ecdise; duas

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de Triatoma brasiliensis Neiva, 1911 X Triato7na lenti, Scherlock & Serafim, 1967 (Hemip-

tera, Reduviidae). Mem. Inst. Butantan, ^7/^5:175-181, 1983/84.

com 107 e 115 dias e ambas após 7 repastos não-satisfatórios; uma com 352

dias no estádio e 13 repastos, sendo alguns deficientes e, o outro óbito foi

com uma ninfa com 722 dias no estádio e 41 repastos, havendo duas tenta¬

tivas de hematofagismo.

As 17 ninfas restantes tiveram um Estádio V de 76 a 610 dias, com

média de 327,12 dias.

O número de repastos foi de 4 (para a ninfa de estádio mais curto) a 41

(para a ninfa de estádio mais longo).

Das 6 ninfas que entraram neste estádio entre 03-11-1977 e 25-11-1978,

uma morreu com 1153 dias e após 27 repastos. As demais tiveram um Estádio

V de 104 a 748 dias, com média de 358,80 dias.

O número de repastos variou entre 3 e 17, sendo 3 para a ninfa de estádio

mais curto e 17 para a de estádio mais longo.

VIDA ADULTA

Apenas 17 ninfas chegaram à fase adulta, iniciada entre 16-10-1975 e

27-02-1978, resultando em 7 fêmeas e 10 machos. A vida adulta entre as fêmeas,

excetuando-se três delas que, por acidentes durante a ecdise, tiveram apenas

poucos dias de vida (4, 8 e 15 dias), foi de 110 a 604 dias, com média de

313,75 dias. A vida adulta dos machos foi de 62 a 453 dias, com média de

184,20 dias.

O número de repastos foi de dois (para o macho com fase adulta mais

curta) a 23 (para a fêmea de vida adulta mais longa). Foram observados alguns

casos de hematofagismo.

As 5 ninfas do segundo lote e que entraram na fase adulta entre 15-02-1978

a 11-12-1980, resultaram em três machos e duas fêmeas. A vida adulta dos

machos foi de 129 a 348 dias, dando a média de 216,33 dias. A vida adulta

das fêmeas foi de 70 e 123 dias, dando a média de 96,50 dias.

O número de repastos foi de 2 (para as duas fêmeas) e 4 a 12 para os

machos.

VIDA NINFAL

A vida ninfal das 17 ninfás que a completaram, durou de 502 dias

(01-06-1974 a 16-10-1975) em uma fêmea, a 1332 dias (26-06-1974 a 27-02-1978)

em um macho. A média foi de 866,65 dias, mas se considerarmos por sexo, a

vida ninfal dos machos foi de 833,20 e das fêmeas 913,86 dias.

O desenvolvimento evolutivo das 5 ninfas do segundo lote foi de 683

(03-04-1976 a 15-02-1978) para um macho e de 1715 dias (03-05-1976 a

12-12-1980) para uma fêmea. A média foi de 1087 dias, mas, por sexo, ela

foi de 805,67 para os machos e 1509 dias para as fêmeas.

O exemplar que morreu durante o Estádio V, com 1153 dias, teve uma

vida ninfal bem mais Içnga que a ninfa de maior vida ninfal: elá foi de 2115

dias (de 03-04-1976 a 17-01-1980).

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HEITZMANN-FONTENELLE, T.J. Bionomia comparativa de Triatomíncos. VI — Híbridos

de Triatoma braailiensis Neiva, 1911 X Triatoma lenti, Scherlock & Serafim, 1967 (Hemip-

tera, Reduviidae). Mem. Inst. Butantan, 47/48:175-181, 1983/84.

VIDA TOTAL

A vida total das 17 observações foi de 770 a 1554 dias para os machos,

com média de 1098,14 dias e de 612 a 1525 dias para as fêmeas, com média

de 1011,20 dias.

A vida total dos 5 espécimens, resultantes da fêmea de T. lenti foi de 855

a 1329 dias, para os machos, dando a média de 1022 dias, e 1431 e 1785 dias

para as fêmeas, dando a média de 1608 dias.

ACASALAMENTOS

Dos 10 machos híbridos obtidos a partir de fêmea brasiliensis, 6 não foram

acasalados e com os 4 restantes foram feitas tentativas de acasalamento com

fêmeas também híbridas, quer descendentes de fêmea brasiliensis ou lenti, sen¬

do que do acasalamento com uma fêmea híbrida descendente de fêmea brasi¬

liensis, resultou uma ninfa que durou apenas 9 dias

Das seis fêmeas híbridas deste lote, com duas não foram tentados acasa¬

lamentos, sendo que uma delas elaborou 29 óvulos. Das outras 5 fêmeas tive:

1 — Fêmea acasalada aos 10 dias de vida adulta com macho

híbrido em 21-12-1976, elaborou 6 ovos (entre 01-03 e 13-04-1977), sendo que

um eclodiu, após 35 dias de desenvolvimento embrionário, dando uma ninfa

muito pequena, que viveu apenas 9 dias. Em 01-07-1977, coabitou com outro

macho híbrido, elaborando mais 10 ovos não-viáveis.

2 — Fêmea acasalada com 6 dias de vida adulta com macho híbrido. A

fêmea viveu apenas 8 dias, não ovlpondo.

3 — Fêmea acasalada com 6 dias de vida adulta com macho de T. lenti,

elaborando 8 ovos não-viáveis. Com a mesma fêmea foi tentado outro acasala¬

mento com macho híbrido, mas ela morreu 29 dias após, sem ovipôr.

4 — Fêmea pouco deformada por acidente durante a ecdise, coabitou com

um macho híbrido, mas conviveu apenas 15 dias, não ovipôs.

5 — Fêmea com 425 dias de vida adulta, coabitou com macho de T. lenti,

não ovlpondo.

Dos 5 adultos obtidos do lote descendente de fêmea de T. lenti temos; um

macho não foi acasalado; um macho foi acasalado com uma fêmea de T. lenti,

e que apesar de eliminar o espermatóforo não deixou descendentes, e um macho

foi acasalados com uma fêmea híbrida, descendente de fêmea brasiliensis.

As duas fêmeas deste lote não foram acasaladas.

CONCLUSÕES

Os híbridos obtidos mostraram grande dificuldade de adaptação, haja vista

pela mortalidade alta durante as fases ninfais (85,62% da amostragem), pelo

grande número de acidentes durante as ecdises, pela grande quantidade de

alimentações deficientes e pelas mortes após estágios muito prolongados.

Quanto ao seu comportamento durante o ciclo evolutivo, embora fossem

perceptível certas diferenças de comportamento entre os resultados obtidos de

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de Triatoma brasiUensis Neiva, 1911 X Triatoma lenti, Seherlock & Serafim, 1967 (Hemip-

tera, Reduviidae). Mem. Inst. Butantan, ^7/48:175-181, 1983/84.

descendentes de fêmea T. brasiUensis e de fêmea de T. lenti, os resultados finais

não as colocam próximas aos das espécies ascentes. Assim, a duração média para

a vida ninfal de T. brasiUensis foi de 603,83 dias, o que foi próxima da de

T. lenti que foi de 659,09 dias. Para os espécimes híbridos de fêmea brasi-

liensis a vida ninfal teve a duração média de 866,65 dias e para os híbridos

de fêmea de lenti a duração média de 1087 dias. A vida total foi: 861,22 dias

para T. lenti; 930,83 dias para T. brasiUensis; 1046,75 dias para os híbridos

descendentes de fêmea brasiUensis e de 1256 dias para os híbridos descendentes

de fêmea lenti. Portanto, o desenvolvimento evolutivo dos híbridos esteve acima

do das duas espécies que lhe deram origem.

ABSTRACTS: The life cycle of hybrids from T. brasiUensis x

T. lenti is here studied in laboratory conditions from oviposition

until death of adults and the results obtained in this paper is

compared with those of T. brasiUensis and T. lenti.

KEYWORDS: Hybrids of T. brasiUensis x T. lenti: Evolutive cycle

in laboratory.

REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

1. ABALOS, W.J. Sobre hídridos naturales y experimentales de Triatoma. An.

Inst. Med. Reg. Tucumán, 2:209-223, figs. 1948.

2. GALVÃO, A.B. Diferenças fenotipicas externas 'entre hídridos interespecíficos

e suas respectivas espécies, vetoras da Doença de Chagas no Brasil (Triato-

minae, Reduviidae). Rev. Bras. Biol., 5S(l):45-54, 1958.

3. HEITZMANN-FONTENELLE, T.J. Bionomia comparativa de triatomíneos. II

— Triatoma brasiUensis Neiva, 1911 (Hemiptera, Reduviidae). Mem. Inst.

Butantan, 47H8:\bl-\04,, 1983/84.

4. HEITZMANN-FONTENELLE, T.J. Bionomia comparativa de triatomíneos. V

— Triatoma lenti Seherlock & Serafim, 1967 (Hemiptera, Reduviidae).

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5. MAZZOTTI, L. & OSORIO, M.T. Resultados obtenidos en cruzamientos con

espécies diferentes de Triatoma. Rev. Fac. Med. Bogotá, 70(2) :159-160,

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6. MAZZOTTI, L. & OSORIO, M.T. Cruzamientos experimentales entre várias

espécies de Triatoma. Rev. Med. Méx., 22:215-222, figs. 1942.

7. NEIVA, A. Revisão do gênero Triatoma Lap. Rio de Janeiro, de Rodrigues et

Cie édit., 80 p., 1914.

Recebido e aceito para publicação em 15/06/1984.

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Mem. Inst. Butantan

^7/45:183-188, 1983/84

BIONOMIA COMPARATIVA DE TRIATOMÍNEOS.

VII — RHODNIUS NEGLECTUS LENT. 1954

(HEMIPTERA, REDUVIIDAE)

Therezinha J. HEITZMANN-FONTENELLE *

RESUMO: O ciclo evolutivo de Rhodnins negleetus Lent, 1954, é

estudado desde ovo até a morte dos adultos e os dados obtidos com¬

parados com os das espécies já estudadas em mesmas condições

laboratoriais.

PALAVRAS-CHAVE: Rhodnius negleetus Lent, 1954: ciclo evolu¬

tivo em laboratório.

INTRODUÇÃO

Pertencem ao gênero Rhodnius, barbeiros de pequeno porte, com desenhos

nos hemiélitros, que o fazem parecer a certos percevejos predadores, não vectores

da Doença de Chagas. Sua freqüência no Estado de São Paulo não é muito

grande e as espécies mais encontradas são prolixas e negleetus.

Costa e colaboradores (1, 2 e 3) estudaram bem a espécie negleetus, assunto

desta nota, no Laboratório da Universidade de Veterinária de Minas Gerais

(Belo Horizonte) e seus trabalhos tratam da evolução, jejuns, acasalamento e

fertilidade. O nosso trabalho é mais uma contribuição para o conhecimento

desta espécie em condições ambientais diferentes.

MATERIAL E MÉTODO

O material em estudo foi isolado de uma criação geral, existente no

Laboratório de Parasitologia do Instituto Butantan, desde 1972, que, por sua vez.

foi obtida de criação do Laboratório da Escola Nacional de Saúde Pública, RJ,

e gentilmente cedida pelo Prof. Dr. Samuel B. Pessoa. A localidade de origem

do material é desconhecida.

Dessa nossa criação geral, foram isolados 51 ovos ovipostos entre 30-10

e 4-12-1980 (dois em outubro, 41 em novembro e 8 em dezembro).

Esses ovos eram colocados em pequenas caixas plásticas com tampa e

forradas de papel-fjltro, anotando-se a data de postura e, as ninfas, à medida

* Seção de Parasitologia do Instituto Butantan.

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1983/84.

que iam eclodindo, eram postas em pequenos borréis de criação junto com ninfas

diferenciáveis, por espécies ou por estádios, para tornar possível as suas distin¬

ções. Cada ninfa era identificada por um número colado externamente no

frasco e seu desenvolvimento, bem como a freqüência da alimentação e outros

dados de interesse, eram devidamente anotados.

A alimentação era feita em orelha de coelho e por uma só pessoa, a fim

de se evitar influências por manuseios diferentes.

A observação da amostragem levou 3 anos e 4 meses (30-10-1980 a

7-2-1984).

DESENVOLVIMENTO EMBRIONÁRIO

Dos 51 ovos ovipostos entre 30-10 e 4-12-1980, o período embrionário

variou de 17 a 28 dias, sendo a maior incidência entre 19 e 25 dias (88,24%

da amostragem). A média foi de 21,8 dias.

ESTÁDIO I

Das 51 ninfas eclodidas entre 23-11 e 21-12-1980, nove morreram antes

de efetuar a primeira ecdise, entre 3 e 63 dias de vida e sem se alimentar; outra

ninfa, que fez sua única refeição aos 45 dias, morreu aos 49 dias.

As 41 ninfas restantes completaram o Estádio I entre 14 e 72 dias, tendo

25 observações (60,98% da amostragem) com este estádio entre 21 e 40 dias.

A média foi de 33,9 dias.

O período anual predominante deste estádio foi de novembro de 1980 a

janeiro de 1981.

O número de repastos foi de um a quatro, sendo que, das 41 observações,

25 fizeram apenas um. A ninfa de estádio mais curso (14 dias) fez um repasto

e a de estádio mais longo (72 dias) fez dois. A ninfa com o maior número de

refeições (quatro) teve um estádio de 54 dias.

A primeira refeição ocorreu a partir do 5.° dia (três observações, sendo

duas em ninfas com estádios de 14 dias e outra com estádio de 29 dias). Apenas

duas ninfas levaram 45 dias para fazer a sua primeira refeição: a que morreu

aos 49 dias e outra com estádio I de 63 dias e que fez, durante o estádio, duas

refeições. Quarenta por cento da amostragem já havia feito um repasto aos

lÓ dias de vida e 42% fez o seu primeiro repasto entre 11 e 20 dias.

O maior jejum inicial foi de 45 dias e, durante o estádio, o maior jejum

foi de 44 dias, entre o l.“ e 2.° repastos, num exemplar de estádio de 72 dias.

ESTÁDIO II

Das 41 ninfas que entraram neste estádio entre 15-12-1980 e 22-2-1981,

duas não o completaram: uma morrendo dois dias após a ecdise e a outra 28

dias após, tendo feito uma refeição aos 19 dias; ambas por acidentes no manuseio,

pois sendo ninfas pequenas e muito ativas, subindo rapidamente pelo suporte,

inadvertidamente foram esmagadas no tampo ao se fechar o frasco.

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neglectus Lent, 1954 (Ilemiptera, Reduviidae). Mem. Inst. Butantan, 183-188,

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Das 39 restantes, em duas não anotamos a ocorrência da ecdise II, mas

foram ninfas de estádio curto, pois a soma dos dois estádios (II e III) nos deu

50 e 69 dias, respectivamente. Para as demais, o estádio II durou de 19 a 127

dias, predominando a faixa dos 19 aos 50 dias. A média foi de 52,43 dias.

O período anual predominante foi de janeiro a fevereiro de 1981.

O número de repastos foi de um a quatro, predominando um (26 observa¬

ções no total de 37). Três ninfas com estádio de 19 dias (o mais curto) fizeram

apenas um repasto e a ninfa de estádio mais longo (127 dias) fez quatro.

ESTÁDIO III

Das 39 ninfas que iniciaram este estádio entre 26-1 e 12-5-1981, em

duas não anotamos as datas de ccdises e completaram, como já dito, os estádios

II+III em 50 e 69 dias. Duas outras não completaram o estádio, morrendo,

com 7 e 70 dias após a ecdise, por acidentes durante a muda.

As 35 ninfas restantes tiveram o estádio com durações de 22 a 230 dias,

predominando estádio de 31 a 60 dias. A média foi de 64,37 dias.

O período anual predominante foi de março a maio de 1981.

O número de repastos foi predominantemente de apenas um (26 observa¬

ções). Uma única ninfa fez quatro repastos e foi justamente a de estádio mais

longo (230 dias).

ESTÁDIO IV

As 37 ninfas que entraram neste estádio entre 17-2 e 2-10-1981, o comple¬

taram entre 33 e 265 dias, sendo pouco freqüentes estádios com menos de 50

dias (5 observações) ou acima de 160 dias (6 observações). A média geral foi

de 120,22 dias.

O período anual predominante foi de maio a agosto de 1981.

O número de repastos foi de um a cinco, predominando dois a três. A

ninfa de estádio mais curto (33 dias) fez um repasto e a de estádio mais longo'

(265 dias) fez três. O maior número de repastos (cinco) foi feito por três ninfas

de estádios com 157, 165 e 211 dias.

ESTÁDIO V

Das 37 ninfas que entraram neste estádio entre 27-3-1981 e 4-4-1982,

sete não o completaram: duas morrendo por acidentes durante a ecdise; uma

morrendo com 152 dias neste estádio e que após ficar sem se alimentar 47 dias

antes e 106 após a ecdise num total de 153 dias, fez um repasto bastante defi¬

ciente; outra morreu com 192 dias neste estádio e sem se alimentar (antes da

ecdise fizera um jejum de 58 dias, perfazendo 248 dias sem se alimentar); as

outras três mortes foram com 338, 399 e 449 dias e após 5 a 8 repastos. Em

todas as observações com vários repastos, sempre houve um ou mais deficientes,

com pouca ingestão de sangue.

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neglectus Lent, 1954 (Hemiptera, Reduviidae). Mem. Jnst. Butantan, 183-188,

1983/84.

Nas 30 ninfas restantes, o Estádio V levou de 34 a 463 dias. Houve apenas

quatro observações com menos de 100 dias (34, 79, 86 e 90 dias) e oito obser¬

vações acima de 200 dias: cinco entre 208 e 261 dias, uma com 313 dias e duas

acima de 400 dias (445 e 463 dias). A media foi de 175,87 dias.

O período anual predominante foi de julho de 1981 a julho de 1982.

O número de repastos foi de um (efetuado pela ninfa de estádio mais curto)

a dez (feito pela ninfa de estádio mais longo).

VIDA ADULTA

Dos 51 ovos selecionados, apenas 30 alcançaram a fase adulta dos quais

16 foram machos e 14 fêmeas.

O primeiro adulto surgiu em 30-09-1981 (um macho, após um período de

desenvolvimento de 288 dias) e o último foi uma fêmea em 2-12-1982 que

infelizmente sofreu acidente durante a última eedise.

A vida adulta variou de 40 a 791 dias: 5 com vida adulta inferior a 100

dias (4 machos e uma fêmea); duas com vida adulta entre 101 e 200 dias (um

macho e uma fêmea); quatro observações com vida adulta de até 300 dias

(machos); nove observações dos 301 a 400 dias (5 fêmeas e 4 machos); seis

entre 401 e 500 dias (quatro fêmeas e dois machos) e finalmeiite, as duas obser¬

vações de vida adulta mais longa, foram duas fêmeas com 692 e 791 dias.

Em relação ao sexo temos: para as fêmeas, a fase adulta foi de 62 a 791

dias, dando uma média de 366,5 dias e para os machos, tivemos durações de

40 a 454 dias, com média de 232,88 dias.

O número de repastos variou de um único (para os adultos com menos de

100 dias) a 22 (para a fêmea de vida adulta mais longa). Um macho que viveu

109 dias não fez nenhum repasto. Além disso, devemos mencionar que uma

grande parte dos adultos, pelo menos uma vez nesta fase, fez repastos exagerados,

ficando excessivamente gordos chegando, quando machos, a extroverter a

genitália.

VIDA NINFAL

Das 51 observações iniciais, 21 ninfas morreram durante o desenvolvimento

e destas, 10 ninfas morreram no estádio I; duas ninfas morreram no estádio II,

vítimas de acidentes no manuseio; duas ninfas morreram por acidente, durante

a Eedise II e 7 ninfas morreram no estádio V, sendo que duas por acidentes

durante a eedise IV.

As 30 ninfas que completaram o período ninfal o fizeram entre 23-11-1980

e 2-12-1982, tendo levado de 288 dias (um macho) a 728 dias (uma fêmea),

predominando as observações de 301 a 500 dias (22 observações).

Os machos tiveram vidas ninfais de 288 a 723 dias, com média de 449,25

dias, e as fêmeas tiveram vidas ninfais de 357 a 728 dias, com média de 455,93

dias.

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HEITZMANN-FONTENELLE, T.J. Bionomia comparativa de Triatomíneos. VII — Rhodnius

neglectus Lent, 1954 (Hemiptera, Reduviidae). Mem. Inst. Butantan, 47/45:183-188,

1983/84.

VIDA TOTAL

A vida total (da eclosão à morte do adulto) oscilou entre 397 a 1.150 dias.

A maioria oscilou entre 601 a 850 dias (11 machos e 11 fêmeas).

O macho de menor vida total viveu 397 dias e de maior viveu 948 dias.

A fêmea de menor vida total viveu 602 dias e a de maior viveu 1.150 dias.

A média foi de 685,25 para os machos e de 822,5 para as fêmeas.

ACASALAMENTOS

Como já mencionamos, obtivemos 16 machos e 14 fêmeas. Das 14 fêmeas,

uma morreu logo após sofrer a última ecdise, devido a acidente durante a muda.

Três outras morreram antes de se acasalarem com 62, 130 e 308 dias de vida

adulta. A fêmea que viveu 62 dias elaborou um único óvulo aos 28 dias de

vida adulta. As 10 restantes foram acasaladas, mas três delas elaboraram óvulos

(36 óvulos no total).

Os acasalamentos foram efetuados tardiamente, quando as fêmeas já conta¬

vam entre 157 e 378 dias. Apenas uma fêmea foi acasalada com 11 dias, e

outra fêmea efetuou dois acasalamentos.

Quanto aos 16 machos: um morreu logo após a última ecdise por acidente.

Outros quatro não acasalaram, e foram os machos de vida curta (40 a 109 dias).

Os 11 restantes foram acasalados com idades de 36 a 454 dias.

A produção de ovos feita pelos 10 acasalamentos não foi grande. Apenas

441 ovos no total e o índice de viabilidade dos ovos também foi baixo — obti¬

vemos apenas 110 ninfas — 22,68%.

CONCLUSÕES

As nossas observações sobre Rhodnius neglectus nos mostraram ser uma

espécie de desenvolvimento rápido, tendo uma vida total entre um ano e um

mês a três anos e dois meses. Quanto ao número de alimentações também foi

bastante pequeno, principalmente na fase ninfal, sendo observado em uma ninfa

apenas sete repastos (um repasto em cada estádio até o III e dois repastos nos

estádios IV e V).

Comparando-se com as espécies já estudadas (4, 5, 6, 7 e 8) vemos

que Rhodnius neglectus teve o menor desenvolvimento embrionário (21,8 dias)

e o menor estádio I (33,9 dias). O estádio II foi de duração aproximada com

0 de Panstrongylus megistus (52,43 dias para neglectus e 52,67 dias para megis-

tus). O estádio III esteve acima da média de megistus (46,73) mas bem próximo

da de T. vitticeps (64,5 dias para esta e 64,37 dias para neglectus). O estádio

IV esteve acima de megistus, sórdida e vitticeps. O estádio V acima de megistus

(111,41 dias) e de sórdida (167,33 dias). A vida adulta, considerando apenas

a duração máxima, esteve abaixo de sórdida (955 dias) e vitticeps (820 dias).

ABSTRACTS: The life cycle of Rhodnius neglectus Lent, 1954, is

here studied in laboratory conditions, from oviposition until death

of adults. The results obtained is compared with those of the others

Triatominae reared in some laboratory conditions.

KEYWORDS: Rhodnius neglectus, Lent, 1954: evolutive cycle in

laboratory.

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HEITZMANN-FONTENELLE, T.J. Bionomia comparativa de Triatomíneos. VII — Rhodnius

neglectus Lent, 1954 (Hemiptera, Reduviidae). Mem. Inst. Butantan, 47/45:183-188,

1983/84.

REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

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do Rhodnius neglectus Lent, 1954 (Hemiptera — Triatominae) em condições

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2. COSTA, H. M., COSTA, J. O. & FREITAS, M. G. Alguns aspectos da biologia

do Rhodnius neglectus Lent, 1954 (Hemiptera — Triatominae) em condições

de laboratório. III — Resistência ao jejum. Arq. Esc. Vet. Univ. Minas

Gerais, 19:147, 1967.

3- FREITAS, M. G., COSTA, J. O. & COSTA, H. M. Alguns aspectos da biologia

do Rhodnius neglectus Lent, 1954 (Hemiptera — Triatominae) em condições

de laboratório. I — Evolução. Arq. Esc. Vet. Univ. Minas Gerais, 19:81-87,

1967.

4. HEITZMANN-FONTENELLE, T. J. Bionomia comparativa de triatomíneos.

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Ent, 19(1-4) :201-210, 1976.

5- HEITZMANN-FONTENELLE, T. J. Bionomia comparativa de triatomíneos.

III — Triatoma sórdida (Stal, 1859). (Hemiptera, Reduviidae). Studia Ent.,

:90(l-4) :89-98, 1978.

6. HEITZMANN-FONTENELLE, T. J. Bionomia comparativa de triatomíneos.

IV — Triatoma vitticeps Stal, 1835 (Hemiptera, Reduviidae). Ecossistema,

5:39-46, 1980.

7 • HEITZMANN-FONTENELLE, T. J. Bionomia comparativa de triatomíneos.

II — Triatoma brasilie-nsis Neiva, 1911. (Hemiptera, Reduviidae). Mem. Inst.

Butantan, 47/45:157-164, 1983/84.

8- HEITZMANN-FONTENELLE, T. J. Bionomia comparativa de triatomíneos.

V — Triatoma lenti Scherlock & Serafim, 1967. (Hemiptera, Reduviidae).

Mem. Inst. Butantan, 47/45:165-174, 1983/84.

9. LIMA, J. D. & COSTA, H. M. Alguns aspectos da biologia de Rhodnius neglectus

Lent, 1954, Hemiptera, Triatominae, em condições de laboratório. V — Evo¬

lução em temperatura ambiente. Arq. Esc. Vet. Univ. Minas Gerais, 22'.

151-158, figs. 3, 1970.

Recebido e aceito para publicação em 15/06/1984.

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5 SciELO ;lo 11 12 13 14 15

Mem. Inst. Butantan

189-194, 1983/84

NECROSE DE PONTA DE CAUDA EM

EUNECTES NOTAEUS COPE, 1862

(SERPENTES, BOIDAE, BOINAE)

Tatiana VEINERT *

Hélio Emerson BELLUOMINI **

Hideyo IIZUKA ***

José Daniel Luzes FEDULLO *

RESUMO: No presente trabalho os autores descrevem um caso de

necrose de ponta de cauda em sücuri amarela Eunectes notaeus,

produzido por Proteus e Alealigenes. Pelo antibiograma, verificou-se

que os germes eram sensíveis aos antibióticos: Kanamicina, Siso-

micina, Sulfazotrin e Novamin. Após a intervenção cirúrgica e

devida medicação, a serpente reagiu satisfatoriamente e o compor¬

tamento foi recuperado. O animal morreu onze meses após, por

causa diversa.

PALAVRAS-CHAVE: Necrose, Proteus mirabilis e Alealigenes

foecalis, Eunectes notaeus, Boidae.

INTRODUÇÃO

As serpentes apresentam com freqüência infecções produzidas por uma série

de microrganismos.

Na literatura são relatados alguns casos de infecções na cavidade bucal

produzidas por Proteus e Alealigenes sp. (Williams e col. *^).

Ledbetter e Kutscher ® também chegaram a resultados semelhantes, quando

pesquisaram a flora bacteriana do orofaringe e venenos de serpentes norte-

-americanas.

Parrish e col. também examinando a flora bacteriana de serpentes vene¬

nosas dos Estados Unidos, verificaram que o microrganismo mais comumente

encontrado era Proteus vulgaris, e Camin ® quando isolou Proteus hydrophillus

* Fundação Parque Zoológico de São Paulo.

*» FUNDACENTRO.

*** Instituto Butantan.

Endereço para correspondência: Tatiana Veinert — Rua Professor Francisco Maffei, n.° 469

— Interlagos — CEP 04787 —• São Paulo — SP.

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VEINERT, T., BELLUOMINI, H. E., IIZUKA, H. & FEDULLO, J. D. L. Necrose de ponta

de cauda em Eunectes notaeus Cope, 1862 (Serpentes, Boidae, Boinae). Mem. Inst.

Butantan, 189-194, 1983/84.

(Sanarelli) verificou ser esse agente etiológico o responsável pelo alto índice de

mortalidade de serpentes.

Moreno e col. ^ estudando a flora intestinal de anfíbios e répteis, registraram

a elevada predominância de espécies de enterobactérias do gênero Pioíeus.

Dissmann, Veinert e Belluomini (1969) assinalaram necrose de ponta de

cauda em Eunectes murhtus, causada por Klebsiella sp. (informação pessoal).

OBSERVAÇÃO

A Fundação Parque Zoológico de São Paulo recebeu um exemplar macho

adulto de Eunectes notaeus Cope, 1862 — Sucuri amarela (Serpentes, Boidae,

Boinae), procedente do Parque Municipal “Quinzinho de Barros”, de Sorocaba,

em 17-3-77. O referido animal pesava na ocasião 5.000 g e media 200 cm de

comprimento.

Após o período de quarentena, a serpente foi colocada em aquário junto

com outras sucuris da espécies Eunectes murinus rnurinus.

A adaptação do animal ao meio foi satisfatória e com a ocorrência de alguns

cruzamentos heterólogos (Veinert e Belluomini 1980”).

Apesar de a serpente alimentar-se normalmente, com isso ganhando 4000 g

de peso, o crescimento não ocorreu. Esse fato perdurou até que exame mais

acurado em l.°-7-80 evidenciou necrose de ponta de cauda, com exposição de

algumas vértebras. (Figs. 1 e 2)

A perda de tecido na porção distai, bem como o agravamento da lesão,

determinou a intervenção cirúrgica, em 10-7-80, que consistiu na amputação

da porção da cauda que apresentava o processo necrótico.

Na ocasião foi colhido material para isolamento de microrganismos. Enquan¬

to se aguardava o resultado do exame bacteriológico c o antibiograma, a serpente

submetida à intervenção cirúrgica foi medicada com Penicilina G sólida crista¬

lina *, um frasco em dias alternados, sete aplicações por via subcutânea.

Colheita de Material

Uma amostra de cerca de 5,0 g do tecido da cauda lesada foi triturada

até ficar reduzida a estado pastoso, em gral estéril. Em seguida, foi homogenei¬

zada e emulsionada em 5,0 ml de solução fisiológica, para exame bacterioscópico

e cultura

A semeadura do material foi feita, em duplicata, em volume de 0,1 ml em

meios básicos de cultura, tioglicolato, Tarozzi, ágar sangue e “cooked meat”,

incubados a 37°C. Uma parte do material foi aquecida a 80°C, durante quinze

minutos, para seleção de germes esporulados.

A leitura das placas foi feita após 24 e 48 horas. As que apresentavam

colônias perfeitamente isoladas foram escolhidas para seqüência de obtenção de

cultura pura e transferidas para tubos, os quais foram incubados a 37°C durante

48 horas.

* Climacilim pediátrico — Laboratório Climax.

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VEINERT, T., BELLUOMINI, H. E., IIZUKA, H. & FEDULLO, J. D. L. Necrose de ponta

de cauda em Eunectes notaeus Cope, 1862 (Serpentes, Boidae, Boinae). Mem. Inst.

Butantan, 47/48:189-194, 1983/84.

Os esfregaços corados pelo Gram possibilitaram a separação dos bacilos

Gram negativos aeróbios, de outros microrganismos. A triagem prévia de germes

Gram negativos aeróbios foi realizada empregando-se meios de cultura capazes

de fornecer identificação perfunctória *■

Para identificação bacteriológica foram empregados meios básicos, adicio¬

nando diferentes fontes de carbono e provas bioquímicas, através de ensaios de

rotina

As amostras isoladas no decorrer do trabalho foram mantidas em meio de

Lignières, à temperatura ambiente.

Determinação de sensibilidade aos antibióticos e quimioterápicos

Pelo método da difusão em ágar, de acordo com a técnica de Kirby-Bauer

segundo as observações constantes nos trabalhos de Rocha e col. ® fez-se o anti-

biograma. Nesta prova utilizaram-se discos impregnados de quimioterápicos

(DIFCO) e meio de Müller Hinton (DIFCO).

Os discos empregados tinham os seguintes antibacterianos: Penicilina G,

Estreptomicina, Tetraciclina, Eritromicina, Cloranfenicol, Novobiocina, Kanami-

cina, Colistina, Neomicina, Amoxicilina, Rifomicina, Polimicina B, Oleandomicina,

Sisomicina, Ácido nalidíxico, Cefalotina, Staficilin, Hetacilina, Ampicilina, Sulfa-

zotrin, Novamin e Fosfocina.

RESULTADOS E DISCUSSÃO

Os resultados dos exames bacteriológicos mostraram a presença de duas

espécies distintas de bacilos Gram negativos aeróbios, no foco necrótico amputado

da cauda de Eunectes notaeus: o Proteus mirabilis e o Alcaligenes foecalis.

Como se sabe, Proteus mirabilis é agente potencialmente infeccioso e patogênico,

acreditando-se ser o principal responsável pela lesão que ocasionou a necrose.

Apesar do Alcaligenes foecalis ser um germe estritamente aeróbio, também

considerado germe saprófito, no presente caso, a sua associação ao Proteus sp.

o qualifica como sendo invasor secundário da infecção necrótica observada em

Eunectes notaeus. Tendo em vista que este animal apresenta níveis metabólicos

diferentes e baixa temperatura corpórea, acreditamos que estas condições expli¬

cariam o estabelecimento desta infecção mista.

Confrontando-se os achados aqui relatados com os de outros autores, chama

atenção a alta freqüência com que são encontrados os microrganismos do gênero

Proteus. O resultado obtido nos testes de sensibilidade de microrganismos isola¬

dos aos antibióticos e quimioterápicos, encontra-se na Tabela 1. As provas revela¬

ram que as duas amostras isoladas foram sensíveis à Kanamicina, Sisomicina,

Sulfazotrin e Novamin; por outro lado, resistentes à Eritromicina, Amoxicilina,

Oleandomicina, Cefalotina e Staficilin, respectivamente.

Os resultados com os demais antibacterianos testados foram variáveis, tanto

em relação ao grau de sensibilidade, quanto às diferenças de comportamento

entre as duas espécies.

Após a intervenção cirúrgica ocorreu a cura do animal. Tendo em vista

que o músculo retrator do hemipênis tem sua inserção na cauda, a preocupação

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SciELO

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VEINERT, T., BELLUOMINI, H. E., IIZUKA, H. & FEDULLO, J. D. L. Necrose de ponta

de cauda em Eunectes notaeus Cope, 1802 fSerpentes, Boidae, Boinae). Mem. Inst.

Butantan, Í7/4S; 189-194, 1983/84.

era de haver prejuízo nos futuros cruzamentos. Não obstante, houve a primeira

cópula, após o período operatório, em 24-4-81 e a partir dessa data os

cruzamentos voltaram a se repetir normalmente. Nessa ocasião a serpente

ganhou 3.000 g de peso. Durante onze meses o local da operação manteve-se

cicatrizado, havendo recidiva em l.°-8-81. Apesar da medicação específica utili¬

zada, a morte ocorreu em 25-9-81.

Figr. 1 — Vista lateral de necrose de ponta de cauda com exposição de vértebras.

Fig. 2 — Vista ventral de necrose de ponta de cauda com exposição de vértebras.

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VEINERT, T., BELLUOMINI, H. E., IIZUKA, H. & PEDULLO, J. D. L. Necrose de ponta

de cauda em Eunectes notaeus Cope, 1862 (Serpentes, Boidae, Boinae). Mem. Inst.

Butantan, ÍZAS: 189-194, 1983/84.

TABELA 1

Comportamento de Proteus mirabilis e Alcaligenes sp. frente a quimioterápicos

Drogas

Proteus

mirabilis

Alcaligenes

Drogas

Proteus

mirabilis

Alcaligenes

Penicilina G

Polimixina B

Estreptomicina

“+■

Oleandomicina

—

Tetraciclina

Sisomicina

-f

Eritromicina

—

Ácido nalidíxico

Cloranfenicol

Cefalotina

—

Novobiocina

—

Staficilin

—

Kanamicina

Hetacilina

—

Colistina

Ampicilina

—

Neomicina

Sulfazotrin

Amoxicilina

—

Novamin

Nitrofurantoina

—

Fosfocina

—

Rifomicina

—

( —) = Resistente

(±) = Moderadamente sensível

(-)-) = Sensível

ABSTRACT: Incidence of necrosis at the tail’s extremity of

“anaconda” Eunectes notaeus has been described. The ínfection

was caused by Proteus and Alcaligenes. The antibiogram revealed

these microorganisms to be sensitive to the following antibiotics:

Kanamycin, Sisomycin, Sulfazotrine and Novamine. After surgical

intervention an adequate medieation was applied; the reaction was

satisfactory and the bchavior became normal. After a period of

eleven months a relapse caused the dcath of the animal.

KEYWORDS: Necrotic; Proteus mirabilis; Alcaligenes foecalis;

Eunectes notaeus; Boidae.

REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

1. BAUER, A. W.; KIRBY, W. M. M.; SHERRIS, J. C. & TURCK, M. An

antibiotic susceptility testing by a standardized single disc method. Am. J.

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2. BIER, O. G. Bacteriologia e imunologia e suas aplicações - a medicina e à

higiene. 18. ed./São Paulo, Melhoramentos, 1977, 1056 p.

3. CAMIN, J. H. Mite transmission of a hemorrhagic septicemia in snakes. J.

Parasitai., 5-4:345-364, 1948.

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5. FURLANETTO, R. S.; BELLUOMINI, H. E.; IIZUKA, H. & ROLIM ROSA, R.

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biotério. Rev. Microbiol. (São Paulo), 10(4) :139-143, 1979.

6. LEDBETTER, E. O. & KUTSCHER, A. G. The aerobic and anaerobic flora of

brattlesnave fangs and venom. Archs. Environ. Heth, 10:770-778, 1969.

193

SciELO

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VEINERT, T., BELLUOMINI, H. E., IIZUKA, H. & FEDULLO. J. D.'L. Necrose de ponta

de cauda era Eunectes notaeus Cope, 1862 (Serpentes, Boidae, Boinae). Mem. Inst.

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7. MORENO, G.; LOPES, C. A. M.; BELLUOMINI, H. E.; PESSOA, G. V. A.;

BIASI, P. & ANDRADE, J. C. R. Enterobacterias isoladas de anfíbios e

répteis. Rev. Inst. Med. Trop. São Paulo, 15(3) :122-126, 1973.

8. PARRISH, H. M.; MAC LAURIN, A. W. & TURTTLE, R. L. North american

pit vipers. Bacterial flora of the mouths and venon glands. Virgínia Med.

Monthly, 55:383-385, 1956.

9. ROCHA, H.; ZULIANI, M. E. & TRABULSI, L. R. Antibiograma. Rev.

MicrobioL, (São Paulo), 5:51-60, 1972.

10. RUGAI, E. & ARAÚJO, A. Meio de cultura para identificação preventiva de

bacilos intestinais Gram-negativos. Rev. Inst. Adolfo Lutz, .25:79-83, 1968.

11. VEINERT, T. & BELLUOMINI, H. E. Observações do comportamento e da

cópula heteróloga de sucuris em cativeiro Eunectes murimis murinus (Lin-

naeus) e Eunectes notaeus Cope, 1862. Mem. Inst. Butantan, 44/45:391-402,

1980/1981.

12. WILLIAMS, F. E.; FREEMAN, M. & KENNEDY, E. The bacterial flora of

mouth of Australian venomous snakes in captivity. Med. J. Australia, 11:

190-193, 1934.

Recebido para publicação era 15/06/1984 e aceito era 27/07/1984.

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2 3

5 SciELO ;lo 11 12 13 14 15

Mem. Inst. Butantan

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ESTUDO DA BIOLOGIA DE AMBLYOMMA ROTUNDATUM

(KOCH, 1844), EM INFESTAÇÕES EXPERIMENTAIS DE

BUFO MARINUS (L., 1758) SOB CONDIÇÕES VARIADAS

DE UMIDADE RELATIVA E DE TEMPERATURA DO AR

Maria Shirley Pizolato OBA * **

Teresinha T. Sato SCHUMAKER •*

RESUMO: Os autores reestudaram o ciclo evolutivo de Amblyomma

rotundatum e o obtiveram 188 dias no minimo e 275 dias no máxima,

trabalhando à temperatura e umidade ambientais e 135 dias no

mínimo e 250 dias no máximo à temperatura de 27°C e cerca de

80% de umidade relativa. Houve uma correlação positiva entre

o peso das fêmeas e o número de ovos postos, quando as condições

de temperatura e umidade foram favoráveis. A umidade constitui

um fator importante para a eclosão dos ovos. Utilizando como

hospedeiro Bufo marinus, A. rotundatum comportou-se como carra¬

pato de três hospedeiros.

PALAVRAS-CHAVE: Amblyomma rotundatum; Ixodidae, Biologia

de Ixodidae.

INTRODUÇÃO

A biologia de Amblyomma rotundatum Koch, 1844, carrapato comum no

Brasil como parasito de vertebrados de sangue frio, foi parcialmente estudada

por ROHR (1909), em exemplares identificados como A. goeldii Newman, 1899.

Nesse trabalho ROHR (1909) empregou 398 ninfas, obtendo somente fêmeas.

ARAGÃO (1912), após extensos estudos morfobiológicos sobre estes carra¬

patos, reconheceu-lhe a condiçcão partenogenctica, redescrevendo-os como Am¬

blyomma agamum n. sp.

A partenogenese foi confirmada por BRUMPT (1924) em experimento para

tal fim delineado observando, também, variações quanto ao número de hospe¬

deiros envolvidos no ciclo (dois ou três).

ROBINSON (1926), em sua monografia sobre o gênero Amblyomma, colo¬

cou A. agamum n. sp. como sinonímia de A. rotundatum, sumariando os dados

sobre biologia, levantados por ARAGÃO (1912).

* Professora Assistente Doutora do Departamento de Parasitologia do Instituto de Ciências

Biomédicas da Universidade de São Paulo. Falecida.

** Professora Assistente do Departamento de Parasitologia do Instituto de Ciências Bio¬

médicas da Universidade de São Paulo.

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OBA, M. S. P. & SCHUMAKER, T. T. S. Estudo da biologia de Amtlyomnia rotundatum

(Koch, 1844), em infestações experimentais de Bufo marinus (L., 1758) sob condições

variadas de umidade relativa e de temperatura do ar. Mem. Inst. Bulantan,

195-204, 1983/84.

ARAGÃO (1936) corrigiu as anteriores confusões em torno da sistemática

deste ixodídeo, reconhecendo que a espécie referida eomo A. agamum n. sp. em

seus trabalhos, tratava-se na realidade de A, rotundatum, esclareceu ainda, ser

A. goeldii espécie parasita de vertebrados de sangue quente restrita ao norte do

Brasil. Resume os dados sobre biologia por ele obtidos em 1912, aerescentando

as características morfológicas diferenciais entre as espécies mencionadas sob

forma de chave de identificação.

Além do estudo do ciclo biológico da espécie em questão, o presente traba¬

lho tem como objetivos verificar a influência da temperatura e umidade relativa

do ar sobre a postura e a eclosão dos ovos, bem como uma possível correlação

entre peso da fêmea ingurgitada e número de ovos postos.

MATERIAL E MÉTODOS

Ninfas colhidas em Waglerophis merremii foram colocadas para se alimen¬

tar em sapo da espécie Bufo marinus. Após 13 dias o hospedeiro morreu. As

ninfas foram colocadas sobre outro hospedeiro da mesma espécie onde se refixa-

ram. Estes ixodídeos deram origem a 9 fêmeas que uma vez ingurgitadas, foram

pesadas e mantidas à temperatura e à umidade relativa ambientais, em frascos

de cultura individuais, até a eclosão de seus ovos. Acompanhou-se a evolução

dos indivíduos resultantes desses ovos, mantidos sob condições ambientais, tendo

sido registrados os tempos máximos e mínimos de fixação, pré-muda e pré-

-postura.

Com o objetivo de se verificar possíveis influências da temperatura (T) e

da umidade relativa do ar (U.R.) sobre período de pré-postura, período de pos¬

tura-incubação, número de ovos e porcentagens de eclosão, 19 fêmeas (Fo) colhi¬

das em Bothrops jararaca, após queda natural, foram pesadas e distribuídas ao

acaso em 3 grupos experimentais:

Grupo

N.° de fêmeas

Temp.

ambiental

27°C

U.R.

ambiental

cerca de 45%

cerca de 80%

Calcularam-se as médias aritméticas (Mo) e os desvios-padrões dos ovos

postos por fêmeas mantidas em cada uma das condições experimentais. Foram

também determinados os coeficientes de correlação de Pearson (r) entre os pesos

destas fêmeas ingurgitadas e o número de ovos postos. Fixou-se em 5% o nível

de rejeição da hipótese da nulidade.

Registraram-se dados individuais sobre período de pré-muda e de fixação

para todos estádios evolutivos de (Fi), indivíduos originários de (Fo), os quais

foram mantidos a 27°C e cerca de 80% U.R. do ar. Utilizou-se também B.

marinus como hospedeiro.

Com a finalidade de ampliar os estudos, especiâlmente aqueles referentes ao

coeficiente de correlação de Pearson (r), acompanhou-se a evolução de 20 fêmeas

Fi mantidas na condição experimental acima citada.

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i SciELO

OBA, M. S. P. & SCHUMAKER, T. T. S. Estudo da biologia de Amblyomma rotundatum

(Koch, 1844), em infestações experimentais de Bufo marinus (L., 1758) sob condições

variadas de umidade relativa e de temperatura do ar. Mem. InH. Butantan, i7/i8-.

195-204, 1983/84.

Tendo como base os dados tanto para Fo quanto para Fi calculou-se a

amplitude do ciclo biológico dos exemplares mantidos a 27°C e cerca de 80%

de U.R. Estimou-se também a amplitude do ciclo biológico dos exemplares colhi¬

dos em W. merremii, mantidos sob condições ambientais. Os tempos de fixação

empregados foram os mesmos, para as duas situações (por ocorrer este fenômeno

sempre sob condições ambientais). Estabeleceu-se uma média de 4 dias para o

período de pré-fixação dos três estádios evolutivos.

Os dados sobre temperatura e umidade relativa do ar foram fornecidos

pelo Centro Tecnológico de Hidráulica (C.T.H.) do Departamento de Águas

e Energia Elétrica (D.A.E.E.) — Estação Hidrometeorológica da Cidade Uni¬

versitária de São Paulo.

RESULTADOS E DISCUSSÃO

Sob as condições do presente trabalho A. rotundatum comportou-se inva¬

riavelmente como carrapato partenogenético, incluindo três hospedeiros em

seu ciclo biológico. Entretanto ARAGAO (1912) e BRUMPT (1924) observaram

que esta espécie pode se comportar tanto como carrapato de três, quanto de

dois hospedeiros. Os dados obtidos por esses autores revelaram que esta varia¬

ção não pode ser atribuída ao emprego de diferentes espécies de hospedeiros,

nem as características das populações de carrapatos ou mesmo às influências

dos fatores ambientais. Para BRUMPT (1924) o modo de evolução desta espé¬

cie ainda não está fixado: A. rotundatum pode estar sofrendo uma evolução

no sentido de reduzir o número de hospedeiro ou, ao contrário, aumentando

o número de hospedeiros em seu ciclo.

A literatura consultada registra com freqüência a morte dos hospedeiros,

tal como se observou neste experimento. ARAGÁO (1912) e BRUMPT (1924)

atribuíram este fato à inoculação de toxinas pela espécie ora estudada. Ainda

mais, BRUMPT (1924) interpretou o fenômeno da refixação das ninfas em

outro hospedeiro, observada também neste trabalho, como uma adaptação à

morte repentina do hospedeiro inicial, conseqüente à inoculação de tal toxina.

As médias mensais e anuais da Temperatura (°C) e da Umidade relativa

do ar (%) registradas no ano de 1979 estão contidas na Tabela 1.

As fêmeas originárias de ninfas recolhidas de W. merremii, sob condições

ambientais dos meses de fevereiro, março e abril, apresentaram posturas com

baixas porcentagens de eclosão variando entre 0,03 e 1,39%. Os períodos de

pré-postura e postura-incubação variaram respectivamente nos intervalos de 7 a

17 dias e 67 a 68 dias (Tabela 2).

As fêmeas Fo, colhidas em B. jararaca, mantidas sob condições ambientais

dos meses de abril, maio e junho, apresentaram período de pré-postura variando

entre 15 e 30 dias e não ocorreu eclosão dos ovos (Tabela 3), esperada para

os meses de maio e junho. Para aquelas Fo mantidas a 27°C e cerca de 45%

de U.R. registrou-sc um período de pré-postura entre 7 e 13 dias e porcenta¬

gens de eclosão entre 0,09 e 0,38% (Tabela 3). Fêmeas Fo mantidas a 27°C e

cerca de 80% de U.R. apresentaram período de pré-postura entre 3 e 13 dias,

período de postura-incubação entre 40 e 41 dias e porcentagens de eclosão

entre 35,48% e 72,46% (Tabela 3). As fêmeas Fi mantidas também a 27°C e

cerca de 80% de U.R. apresentaram a duração do período de pré-postura entre

197

1 SciELO

OBA, M. S. P. & SCHUMAKER, T. T. S. Estudo da biologia de Amblyomma rotundatum

(Koch, 1844 ), em infestações experimentais de Bufo marinus (L., 1768 ) sob condições

e de temperatura do ar. Mem, ínat. fjutantan, 47148:

variadas de umidade relativa

195 - 204 , 1983 / 84 .

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'SciELO

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OBA, M. S. P. & SCHUMAKEE, T. T. S. Estudo da biologia de Amblyomma rotundatum

(Koch, 1844), em infestações experimentais de Bufo marinus (L., 1758) sob condições

variadas de umidade relativa e de temperatura do ar. Mem. Inst. Butantan, U7lUS-

195-204, 1983/84.

TABELA 4

A. rotundatum (Fj) segundo peso da fêmea ingurgitada, período de pré-postura,

período de postura-incubação e porcentagem de eclosão à temperatura de 27°C e

cerca de 80% de U.R., São Paulo, 1979

Condição

Peso da

Período de

Total

N.° de

% de

fêmea

pré-postura

postura-

OVOS

larvas

eclosão

cultura

(mg)

(dias)

-incubação

postos

(dias)

165

548

399

72,9

166

269

153

56,8

193

705

617

87,5

324

903

595

65,9

490

2.113

1.888

89,4

536

3.156

1.619

51,3

630

2.348

1.115

47,8

662

3.156

2.361

74,9

tr-

687

3.034

2.811

92,6

< o

03 00

704

3'. 037

2.825

93,0

PERAT

U.R. :

735

. 757

3.154

3.866

1.651

2.961

52,3

76,5

818

3.040

2.552

83,9

873

3.831

3.334

87,0

888

4.723

3.985

84,3

933

5.021

4.338

86,3

1.060

4.913

3.510

71,4

1.068

5.870

4.914

83,7

1.113

6.233

5.651

90,6

1.152

5.535

4.202

75,9

Mo = 3272,75 ± 551,69

r* = 0,9756

201

SciELO

10 11 12 13 14 15

OBA, M. S. P. & SCHUMAKER, T. T. S. Estudo da biologia de Amblyomma rotundatum

(Koch, 1844), em infestações experimentais de Bufo marinus (L., 1758) sob condições

variadas de umidade relativa e de temperatura do ar. Mem. Inst. Butanian, 47/48:

195-204, 1983/84.

TABELA 5

A. rotundatum (Fa) segundo estádio evolutivo, tempo de fixação, período de pré-muda

e freqüência.

à temperatura de 27°C e cerca de 80% de U.R.;

São Paulo, 1979

Estádio

Tempo de

Freqüência

Período de

Freqüência

evolutivo

fixação

pré-muda

(dias)

—

Total

12:

Total

202

OBA, M. S. P. & SCHUMAKER, T. T. S. Estudo da biologia de Amhlyomma rotundatum

(Koch, 1844), em infestações experimentais de Bufo marinua (L., 1758) sob condições

variadas de umidade relativa e de temperatura do ar. Mem. Inat. Butantan, 47/4S:

195-204, 1983/84.

TABELA 6

Durações dos períodos do ciclo de vida de A. rotundatum à temperatura de 27°C e

cerca de 80% de U.R.; São Paulo, 1979

Condição T. e U.R. ambientes T = 27”C e U.R. = 80%

A. rotundatu

Estádio

Amplitude

m (dias)

Periodo

min.

máx.

min.

máx.

OVO

postura incubação

larva

prefixação

fixação

pré-muda

ninfa

prefixação

fixação

pré-muda

adulta

prefixação

pré-postura

fixação

TOTAL

188

275

135

250

CONCLUSÕES

1. Tal como ARAGÃO (1912) e BRUMPT (1924), verificou-se que em

A. rotundatum os exemplares com repasto incompleto tendem a refixar-se no

mesmo ou outro indivíduo da espécie hospedeira B. marinus.

2. Exemplares de A. rotundatum mantidos a 27°C tiveram os períodos de

pré-postura e postura-incubação reduzidos em relação aos espécimes mantidos

sob temperatura ambiente (T média = 19,5°C).

3. A umidade mostrou-se um fator importante para a eclosão dos ovos de

A. rotundatum.

4. Quando são favoráveis as condições de temperatura e de umidade rela¬

tiva há correlação positiva entre peso das fêmeas e número de ovos produzidos.

5. O tempo para um ciclo biológico de A. rotundatum foi de no mínimo

188 dias e de 275 no máximo para populações mantidas à temperatura e à umi¬

dade relativa ambientes. Variou entre 135 e 250 dias para os exemplares man¬

tidos a 27°C e cerca de 80% de U.R. Estes dados foram obtidos a partir de

exemplares não-submetidos a períodos de jejum o que poderia ampliar a duração

do ciclo.

203

SciELO

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OBA, M. S. P. & SCHUMAKER, T. T. S. Estudo da biologia de Amblyomma rotundatum

(Koch, 1844), em infestações experimentais de Bufo marinus (L., 1758) sob condições

variadas de umidade relativa e de temperatura do ar. Mem. Inst. Butantan,

195-204, 1983/84.

ABSTRACTS: The authors studied the life cycle o£ A. rotundatum

which took from 188 to 275 days to be completed, at ambient labo-

ratory temperature and relative air huinidity. On the other hand

when kept at constant temperature and air humidity-respectively

27°C and 80% — the length of the cycle went down to time limits

of 135 and 250 days. A positive correlation was found between the

initial weight of tick females and the number of eggs they produced

under favorable conditions of temperature and of air humidity.

Relative air humidity was a very relevant factor in egg embryo-

nations and eclosion. Bufo marinus proved to be a good host for

A. rotundatum, which behaved inquestionably as a “three host tick”.

KEYWORD: Amblyomma rotundatum. Ixodidae. Biology of

Ixodidae.

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Mem. Inst. Butantan

47/45:205-216, 1983/84

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A lista correspondente aos volumes 1-33 foi publicada no v. 34 e a lista referente aos

volumes 34-38, foi publicada no v. 39.

205

SciELO

10 11 12 13 14 15

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ENVENENAMENTO OFÍDICO

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IMUNOLOGIA

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e B, em um mesmo animal, para obtenção de antitoxina bivalente. Mem.

Inst. Butantan, 44/45:307-315, 1980/81.

ROLIM ROSA, R.; BELLUOMINI, H. E.; SILES VILLARROEL, M. &

IIZUKA, H. Efeitos sobre a toxicidade da mistura de venenos e a sobre-

vida de exemplares de Crotalus durissus lerrificus e Crotalus durissm

collüineatus, submetidos às extrações manual e elétrica. Mem. Inst. Butan¬

tan, 44/45:245-251, 1980/81.

ROLIM ROSA, R.; SILES VILLARROEL, M.; VIEIRA, E. G. J.; IIZUKA,

H. & NAVAS, J. Produção de soro antiaracnídeo polivalente mediante

inoculações simultâneas de venenos em um me.smo animal. Mem. Inst.

Butantan, 44/45:253-258, 1980/81.

ROLIM ROSA, R.; VIEIRA, E. G. J.; SILES VILLARROEL, M.; SIRACUSA,

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de hiperimunização empregados na produção de soros antiofídicos pelo

Instituto Butantan (1957-1979). Mem. Inst. Butantan, 44/45:259-270,

1980/81.

SILES VILLARROEL, M.; FURLANETTO, R. S.; ZELANTE, F. & ROLIM

ROSA, R. Contribuição ao estudo imunoquímico de venenos botrópicos.

III. Análise dos componentes antigênicos comuns através da dupla difusão

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SILES VILLARROEL, M.; ROLIM ROSA, R.; ZELANTE, F.; BANCHER,

W. & PIOTO, H. M. Verificação da atividade tóxica de venenos crotálicos

e da capacidade neutralizante dos antivenenos específicos em camundongos.

Mem. Inst. Butantan, 44/45:271-279, 1980/81.

SILES VILLARROEL, M.; ROLIM ROSA, R.; ZELANTE, F. & FURLA¬

NETTO, R. S. Padronização da avaliação da potência de antivenenos

botrópicos, em camundongos. Mem. Inst. Butantan, 42/45:325-336, 1978/79.

SILES VILLARROEL, M.; ROLIM ROSA, R.; ZELANTE, F. & GUIDOLIM,

R. Evidenciação em camundongos da soroneutralização paraespecífica

entre venenos e antivenenos botrópicos. Mem. Inst. Butantan, 42/45:337-344,

1978/79.

SILES VILLARROEL, M.; ROLIM ROSA, R.; ZELANTE, F. & VIEIRA,

E. G. J. Perspectivas do padronização das titulações de venenos c anti¬

venenos elapídicos em camundongos. Mem. Inst. Butantan, 44/45:289-297,

SILES VILLARROEL, M.; ZELANTE, F.; ROLIM ROSA, R. & FURLA¬

NETTO, R. S. Padronização da avaliação da atividade necrosante de

venenos botrópicos e da potência antinecrosante do antiveneno de B. Jara¬

raca. Mem. Inst. Butantan, 42/45:345-355, 1978/79.

SILES VILLARROEL, M.; ZELANTE, F.; ROLIM ROSA, R. & DE LOREN-

ZO, J. L. Possibilidade da determinação da toxicidade do veneno de

Lachesis muta muta e da titulação do antiveneno específico, em camun¬

dongos. Mem. Inst. Butantan, 44/45:281-288, 1980/81.

SOERENSEN, B. A erradicação da varíola no mundo. Mem. Inst. Butantan,

42/45:11-20, 1978/79.

VIEIRA, E. G. J.; SILES VILLARROEL, M.; ZELANTE, F.; ÁVILA, S. C.

& ROLIM ROSA, R. Emprego de camundongos na titulação de venenos

e antivenenos escorpiônicos. Mem. Inst. Butantan, 44/45:299-306, 1980/81.

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COMISSÃO EDITORIAL. Lista remissiva dos trabalhos publicados nas Memórias do Instituto

Butantan, 39-46, 1975/82.

INSTITUTO BUTANTAN — HISTÓRIA

879. MACHADO, J. C. 1981. Ano do 80.^^ aniversário do Instituto Butantan.

Mem. Inst. Butantan, 4-4/45:3-10, 1980/81.

880. OLIVEIRA, J. L. Cronologia do Instituto Butantan (1888-1981) 1.® parte:

1888-1945. Mem. Inst. Butantan, 44/45:11-79, 1980/81.

INVERTEBRADOS MARINHOS BRASILEIROS

881. KELECOM, A. & CAVA, A. M. S. Studies of Brazilian marine invertebrates.

IX. Comparative study of Zoanthid sterols. I. The Genus Zoanthus. Mem.

Inst. Butantan, 44/45:451-462, 1980/81.

MAMÍFEROS

RESGATE DE FAUNA

882. BELLUOMINI, H. E. & AUTUORI, M. P. Methodology applied in the

elaboration of faunal savage in the region of “Agua Vermelha” hydro-

electric power plant. Centrais Energéticas de São Paulo — CE SP. Mem.

Inst. Butantan, 45:119-138, 1982.

883. BELLUOMINI, H. E.; CEMBRANELLI, E. L. & AUTUORI, M. P. Wildlife

rescue, capture of snakes and establishment of antiophidic stations in

flooded areas destined for Brazilian hydroelectric power plants. Mem. Inst.

Butantan, JtOUl :129-154, 1976/77.

MICROSCOPIA ELETRÔNICA

884. BRUNNER Jr., A.; COIRO, J. R. R.; MITSUTANI, C. Y.; SANTOS, M. A.

S. C. & MENEZES, H. Ultrastructural aspects of mature. Cyprinus

carpio erythrocytes. Mein. Inst. Butantan, 59:157-168, 1975.

885. COIRO, J. R. R. Comparative study on the structure of the elements of the

avian and mammalian erythrocytes series. Correlation with henioglobin

biosynthesis. Mem. Inst. Butantan, 59:169-206, 1975.

886. COIRO, J. R. R. & BRUNNER Jr., A. Chromatin extrusion niechanism in

avian erythrocytes (Gallus gallus) and its possible significanoe. Mem. Inst.

Butantan, 59:149-155, 1975.

OBITUÁRIO

887. HOMENAGEM, Linda Nahas. Mem. Inst. Butantan, 44/45:1-2, 1980/81.

888. MACHADO, J. C. Homenagem póstuma: Alphonse Richard Hoge (1912-1982).

Mem. Inst. Butantan, 46:1-12, 1982.

889. Mina Fichman. Mem. Inst. Butantan, 42143:9, 1978/79.

890. Mitsuko Akashi Hanashiro. Mem. Inst. Butantan, 45/45:10, 1978/79.

OFÍDIOS

BIOLOGIA

882. BELLUOMINI, H. E. & AUTUORI, M. P. Methodology applied in the

elaboration of faunal savage in the region of “Agua Vermelha” hydro¬

electric power plant. Centrais Energéticas de São Paulo — CESP. Mem.

Inst. Butantan, 46:119-138, 1982.

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SciELO

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COMISSÃO EDITORIAL. Lista remissiva dos trabalhos publicados nas Memórias do Instituto

Butantan, 39-46, 1975/82.

891. BELLUOMINI, H. E.; BIASI, P. de; PUORTO, G. & BORELLI, V. Bicefalia

em Crotalus durissus terrificus (Laurenti). Serpentes, Viperidae, Crota-

linae. Mem. Inst. Butantan, iOili :117-12Í, 1976/77.

883. BELLUOMINI, H. E.; CEMBRANELLI, E. L. & AUTUORI, M. P. Wildlife

rescue, capture of snakes and establishment of antiophidic stations in

flooded areas destined for Brazilian hydroelectric power plants. Mem. Inst.

Butantan, . 40/.41 :129-154,^ 1976/77.

819. BELLUOMINI, H. E.; SALIBA, A. M. & ABE, A. S. Inquérito anátomo-

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Viperidae, Crotalinae). Mem. Inst. Butantan, 40/-41:123-128, 1976/77.

892. BELLUOMINI, H. E.; VEINERT, T.; DISSMANN,^ F.; HOGE, A. R. &

PENHA, A. M. Notas biológicas a respeito do gênero Eunectes Wagler,

1830 “sucuris”. (Serpentes, Boinae). Mem. Inst. Butantan, 40 /.ÍJ :79-115,

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893. CHISZAR, D.; SMITH, H. M. & HOGE, A. R. Post — strike trailing behavlor

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894. FEDERSONI Jr., P. A. Casos teratogênicos em Bothrops atrox (Serpentes:

Viperidae: Crotalinae). Mem. Inst. Butantan, 42/.45:49-64, 1978/79.

895. FEDERSONI Jr., P. A. Criação e manutenção de serpentes da espécie

Bothrops atrox nascidas em cativeiro (Serpentes — Viperidae — Crota¬

linae). Mem. Inst. Butantan, Í^/J5:159-169, 1978/79.

896. HOGE, A. R. & FEDERSONI Jr., P. A. Observações sobre uma ninhada de

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vida de exemplares de Crotalus durissus terrificus e Crotalus durissus

collilineatus, submetidos às extrações manual e elétrica. Mem. Inst. Butan¬

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cópula heteróloga de sucuris em cativeiro — Eunectes murinus murinus

(Linnaeus) e Eunectes Notaeus Cope, 1862. Mem. Inst. Butantan, 44/45:

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OFÍDIOS

RESGATE DE FAUNA

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elaboration of faunal savage in the region of “Agua Vermelha” hydro¬

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883. BELLUOMINI, H. E.; CEMBRANELLI, E. L. & AUTUORI, M. P. Wildlife

rescue, capture of snakes and establishmet of antiophidic stations in

flooded areas destined for Brazilian hydroelectric power plants. Mem.

Inst. Butantan, j^O/H :129-154, 1976/77.

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BRYGOO, E. R. Animaux venimeux de Madagascar. Mem. Inst. Butantan,

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925.

926.

927.

928.

899.

929.

930.

931.

214

SSAO EDITORIAL. Lista remissiva dos trabalhos publicados nas Memórias do Instituto

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ARAÚJO, P. Um novo oxiurídes, Gynaecometra bahiensis n.gen., n.sp. (Nema¬

toda: Oxyuroidea: Oxyuridae), founded in lacertilian. Mem. Inst. Butan¬

tan, 40/41:251-257, 1976/77.

916.

917.

918.

919.

920.

921.

922.

923.

924.

898.

925.

926.

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928.

899.

929.

930.

931.

214

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5 6

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COMISSÃO EDITORIAL. Lista remissiva dos trabalhos publicados nas Memórias do Instituto

Butantan, 39-46, 1975/82.

932. ARAÚJO, P. & ARTIGAS, P. de T. Gyrinicola chabaudi n.sp. (Nematoda,

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Plagiorchüdae), parasito de Hydrodynastes gigas Dum. et Brib. (Reptilia,

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formas evolutivas de trypanosoma de serpentes em meio de cultura. Mem.

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935. CORDEIRO, N. da S. Verificação do parasitismo do Polychrus acutirostris,

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(Carinamoeba) minasense Carini & Rudolph, 1912. Mem. Inst. Butantan,

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Paramphistomidae) parasito de Dromicus typhlus (L.) (Ophidia; Colu¬

bridae). Mem. Inst. Butantan, 42/45:145-149, 1978/79.

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1861. (Nematoda, Diaphanocephalidae). Confirmação desta espécie; infor¬

mações sobre sua dispersão geográfica e enumeração de serpentes para¬

sitadas. Mem. Inst. Butantan, 55:103-121, 1975.

937. FERNANDES, M. P. M. & ARTIGAS, P. de T. Kalicephalus inermis Molin,

1861. (Nematoda; Diaphanocephalidae). Redescrição e confirmação desta

espécie; informações de natureza biológica e critica do grupo “inermis”

proposto por Schad. Mem. Inst. Butantan, JtOiUl :281-297, 1976/77.

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939. REGO, A. A. Encontro de plerocercos de Trypanorhyncha (Cestoda) em ofídio

de rio da América do Sul. Mem. Inst. Butantan, 44/45:239-243, 1980/81.

940. REGO, A. A. Notas sobre alguns pentastomídeos de répteis. Mem. Inst. Butan¬

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QUÍMICA

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Comunicação química e aspectos farmacológicos. Mem. Inst. Butantan,

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215

SciELO

10 11 12 13 14 15

COMISSÃO EDITORIAL. Lista remissiva dos trabalhos publicados nas Memórias do Instituto

Butantan, 39-46, 1975/82.

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946. LOPES, R. A.; COSTA, J. R. V.; CAMPOS, S, M. & CAMPOS, M. N. M.

Estudo histoquímico de proteínas naa glândulas veneníferas e acessória de

Bothrops Jararaca. (Ophidea, Viperidae). Mem. Inst. Butantan, Jt2lUS'.

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946. LOPES, R. A.; COSTA, J. R. V.; PETENUSCI, S. O.; FAVARETTO, A. L. V.

& CHAVES, P. H. F. Estudo morfológico e histoquímico das glândulas

salivares de Ampkisbaena alba (Amphisbaenidae, amphisbaenia). Mem.

Inst. Butantan, 42/45:33-39, 1978/79.

947. RABENHORST, E. & ZELNIK, R. As bases de Mannich de bidantoinas

terpênicas. 11. Mem. Inst. Butantan, 44/45:317-323, 1980/81.

948. ZELNIK, R.; M ATIDA, A. K. & PANIZZA, S. Chemistry of the Brazilian

Labiatae. The occurrence of ursolic acid in Peltodon radicans Pohl. Mem.

Inst. Butantan, 42/45:357-361, 1978/79.

VENENOS ARACNÍDICOS

949. NEWLANDS, G. Preliminary report on the medicai importance of Sicarius

(Araneae: Sicariidae) and the action of its venom. Mem. Inst. Butantan,

46:293-304, 1982.

VENENOS OFÍDICOS

950. BIASI, P. de; BELLUOMINI, H. E. & FERNANDES, W. Quantidades de

veneno obtidas na extração de serpentes Bothrops pradoi (Hoge, 1948).

Serpentes, Viperidae, Crotalinae). Mem. Inst. Butantan, 40/41:155-166,

1976/77.

951. BIASI, P. dej BELLUOMINI, H. E.; HOGE, A. R. & PUORTO, G. Uso do

gás carbônico na extração de veneno de serpentes. Mem. Inst. Butantan,

AO/il :167-172, 1976/77.

952. FEDERSONI Jr., P. A. Novo artefato para a extração de venenos de serpen¬

tes do gênero Micrurus Wagler. Mem. Inst. Butantan, 42/45:171-174,

1978/79.

953. ROLIM ROSA, R.; FURLANETTO, S. M. P.; SILES VILLARROEL, M. &

BANCHER, W. Contribuição ao estudo da determinação da DL50 de

venenos botrópicos. IV. Possibilidade de determinação da DL50 do veneno

de Bothrops altematus. Mem. Inst. Butantan, 40/41:181-185, 1976/77.

877. SILES VILLARROEL, M.; FURLANETTO, R. S.; ZELANTE, F. & ROLIM

ROSA, R. Contribuição ao estudo imunoquímico de venenos botrópicos.

III. Análise dos componentes antigênicos comuns através da dupla difusão

em gel de ágar. Mem. Inst. Butantan, UOIUI :241-250, 1976/77.

829. SILES VILLARROEL, M.; ZELANTE, F,; ROLIM ROSA, R. & FURLA¬

NETTO, R. S. Padronização da avaliação da atividade necrosante de

venenos botrópicos e da potência antinecrosante do antiveneno de B. Jara¬

raca. Mem. Inst. Butantan, 42/45:345-355, 1978/79.

Obs.: Os números das referências que aparecem repetidos indicam que esses trabalhos

aparecem em mais de um assunto.

216

SciELO

10 11 12 13 14 15

Mem. Inst. Butantan

47/45:217-218, 1983/84

ÍNDICE DE AUTOR/AUTHOR INDEX

ARTIGAS, P. T. : 61, 107

BELLUOMINI, H. E. : 189

BRAZIL, O. V. ; 13, 95

BUONONATO, M. A. : 121

CANTER, H. M. : 113

CARDOSO, J. L. : 127

CARVALHO, J. P. P. : 81

CICARELLI, R. M. B. : 27, 33, 45, 55

CORDEIRO, N. S. : 61, 107

CRIVELLARO, O. : 33

EICKSTEDT, V. R. D. von : 133

FEDULLO, I. D. L. : 189

FONTANA, M. D. : 13

GIÓIA, I. : 61

GUIDOLIN, R. ; 33

HEITZMANN-FONTENELLE, T. J. : 157, 165, 175, 183

HIGASHI, H. G. : 113

HOFLING, M. A. C. : 95

IIZUKA, H. : 113, 189

KNYSAK, I. : 5

LEMA, T. : 71

LIMA, R. S. : 61

LIZASO, N. M. : 143

LUCAS, S. : 3, 5, 55, 127

MALUCELLI, M. 1. C. : 81

MATIDA, A. K. : 139

MORAES, A. C. : 127

OBA, M. S. P. : 195

OLIVEIRA, E. P. T. : 113

217

SciELO

10 11 12 13 14 15

ÍNDICE DE AUTOR/AUTHOR INDEX

RABENHORST, E. : 139

RIZZO, E. : 1

RODRIGUES-SIMIONI, L. ; 95

ROLIM ROSA, R. : 27, 113

SCHUMAKER, T. T. S. : 195

SILES VILLARROEL, M. : 27, 33, 45, 55

SILVA, M. V. : 121

VEINERT, T. : 189

ZELANTE, F. : 45

ZELNIK, R. : 139

ZVEIBIL, L. : 5

218

SciELO

10 11 12 13 14 15

Mem. Inst. Butantan

í7/4S:219-222, 1983/84

ÍNDICE DE ASSUNTOS

ÁCAROS

ectoparasitismo em serpentes : 143

Ácido ursólico, ocorrência

Citharexylum myrianthum i 139

Amblyomma rotundatum

ciclo evolutivo : 195

Antiveneno

aracnídico : 27, 45, 55

Apostolepis dimidiata

serpentes

nova combinação : 71

variação morfocefálica : 71

Apostolepis erythronota

serpentes

nova combinação : 71

variação morfocefálica : 71

Apostolepis ventrimaculata

serpentes

nova combinação : 71

variação morfocefálica : 71

Aranhas

antiveneno : 27, 45, 55

Loxosceles amazônica, acidente : 127

Loxosceles gaúcho

veneno : 33

Lycosa erythrognatha

veneno : 33

Phoneutria nigriventer

veneno : 33

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SciELO

10 11 12 13 14 15

ÍNDICE DE ASSUNTOS

Rachias (Araneae, Ctenizidae) : 5

sistemática : 5

Boa constrictor constrictor

biotério : 113

cativeiro : 113

estomatite : 113

Bücherl, W., homenagem ; 3

Citharexylum myrianthum

ácido ursólico, ocorrência : 139

Coqueluche

vacina : 81

Ectoparasitismo, serpentes : 143

Elapomojus dimidiatus

serpentes

nova combinação : 71

variação morfocefálica : 71

Escorpiões

sistemática : 133

Tityus stigmurus (Scorpiones, Buthidae) : 133

Eunectes notaeus

necrose : 189

Henneguya pisciforme : 61

Hyphessobrycon anisitsi \ 61

Klossnema repentina : 107

Loxosceles amazônica

acidente : 127

Loxosceles gaúcho

veneno : 33, 45

Loxoscelismo : 127

Lycosa erythrognatha

veneno : 33, 55

Micrurus corallinus

alterações ultra-estruturais na junção neuromuscular : 95

junção neuromuscular : 13

Mixosporídeo : 61

Necrose

Eunectes notaeus : 189

220

2 3

5 6

11 12 13 14 15

ÍNDICE DE ASSUNTOS

Passalídeos

nematóides : 107

Pertussis

vacina : 81

Philodryas olfersii

envenenamento : 121

Phoneutria nigriventer

veneno : 27, 33

Pimont, R. P., homenagem : 1

Rachias (Araneae, Ctenizidae) : 5

Rhodnius neglectus

ciclo evolutivo em laboratório : 183

Serpentes

Apostolepis dimidiata : 71

Apostolepis erythronota : 71

Apostolepis ventrimaculata : 71

Boa constrictor constrictor

biotério : 113

cativeiro : 113

estomatite : 113

coral, venenos : 95

Elapomojus dimidiatus : 71

Eunectes notaeus

necrose : 189

Micrurus corallinus

alterações ultra-estruturais na junção neuromuscular : 95

junção neuromuscular : 13

Philodryas olfersii, envenenamento : 121

Sistemática

aranhas

Rachias (Araneae, Ctenizidae) : 5

escorpiões

Tityus stigmurus (Scorpiones, Buthidae) : 133

Triatoma brasiliensis

ciclo evolutivo em laboratório : 157, 175

Triatoma lenti

ciclo evolutivo em laboratório : 165, 175

221

2 3

5 6

11 12 13 14 15

ÍNDICE DE ASSUNTOS

Triatomíneos (Hemiptera, Reduviidae) : 157, 165, 175, 183

Vacina

Pertussis : 81

coqueluche : 81

Venenos

aranhas

Loxosceles gaúcho : 33, 45

Lycosa erythrognatha : 33, 55

Phoneutria nigriventer : 27, 33

serpentes

coral : 95

222

i SciELO

Mem. Inst. Butantan

í7/4S:223-226, 1983/84

SUBJECT INDEX

Acarid

ectoparasitism in snakes : 143

Amblyomma roíundatum

evolutionary cycle : 195

Antivenin

spider : 27, 45, 55

Apostolepis dimidiata

snakes

new combination : 71

morphocephalic variation : 71

Apostolepis erythronota

snakes

new combination : 71

morphocephalic variation : 71

Apostolepis ventrimaculata

snakes

new combination : 71

morphocephalic variation : 71

Boa constrictor constrictor

captivity : 113

stoma titis : 113

Bücherl, W., homage : 3

Citharexylum myrianthum

ursolic acid, occurrence : 139

Ectoparasitism, snakes : 143

Elapomojus dimidiatus

snakes

new combination : 71

morphocephalic variation : 71

223

2 3

5 6

11 12 13 14 15

SUBJECT INDEX

Eunectes notaeus

necrotic : 189

Henneguya pisciforme : 61

Hyphessobrycon anisitsi : 61

Klossnema repentina : 107

Loxosceles amazônica

accident : 127

Loxosceles gaúcho

venom : 33, 45

Loxoscelism : 127

Lycosa erythrognatha

venom : 33, 55

Micrurus corallinus

nerve terminal ultrastructure changes : 95

neuromuscular junction : 13

Myxosporea : 61

Necrotic

Eunectes notaeus : 189

Passalidae

nematoda : 107

Pertussis

vaccine : 81

Philodryas olfersii

poisoning : 121

Phoneutria nigriventer

venom : 27, 33

Pimont, R. P., homage : 1

Rachias (Araneae, Ctenizidae) : 5

Rhodnius neglectus

evolutive cycle in laboratory : 183

Scorpions

systematic : 133

Tityus stigmurus (Scorpiones, Buthidae) : 133

Snakes

Apostolepis dimidiata : 71

Apostolepis erythronota : 71

Apostolepis ventrimaculata : 71

Boa constrictor constrictor

224

2 3

5 6

11 12 13 14 15

SUBJECT INDEX

captivity :

stomatitis

coral, venoms

Elapomojus dimidiatus

Eunectes notaeus

necrotic : 189

Micrurus corallinus

nerve terminal ultrastructure changes

neuromuscular junction ; 13

Philodryas olfersii, poisoning : 121

Spiders

antivenin : 27, 45, 55

Loxosceles amazônica, accident : 127

Loxosceles gaúcho

venom : 33

Lycosa erythrognatha

venom : 33

Phoneutria nigriventer

venom : 33

Rachias (Araneae, Ctenizidae) : 5

systematic : 5

Systematic

scorpions

Tityus stigmurus (Scorpiones, Buthidae)

spiders

Rachias (Araneae, Ctenizidae) : 5

Tityus stigmurus (Scorpiones, Buthidae) : 133

Triatoma brasiliensis

evolutive cycle in laboratory : 157, 175

Triatoma lenti

evolutive cycle in laboratory : 165, 175

Triatomines (Hemiptera, Reduviidae) : 157, 165, 175, 183

Ursolic acid, occurrence

Citharexylum myrianthurn : 139

Vaccine

Pertussis : 81

Whooping cough : 81

133

225

SciELO

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