EDITIONS DU CENTRE NATIONAL DE LA RECHERCHE

SCIENTIFIQUE

I. — PUBLICATIONS PÉRIODIQUES

BULLETIN SIGNALÉTIQUE

Le Centre de Documentation du C.N.R.S. publie un « Bulletin signa-

létique > dans lequel sont signalés par de courts extraits classés par

matières tous les travaux scientifiques, techniques et philosophiques,

publiés dans le monde entier.

Le Centre de Documentation du C.N.R.S. fournit également la repro¬

duction sur microfilm ou sur papier des articles signalés dans le « Bulletin

signalétique * ou des articles dont la référence bibliographique précise

lui est fournie.

ABONNEMENT ANNUEL

(y compris table générale des auteurs).

2* Partie (biologie, physiologie, zoologie, agriculture) :

France . 6.500 Fr.

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Tirages à part 2* Partie.

Section IX. — Biochimie, biophysique, sciences

pharmacologiques, toxicologie :

2.000 Fr.

2.200 Fr.

France ..

Etranger

Section X. — Microbiologie, virus et bactério¬

phages, immunologie :

France . 1.300 Fr.

Etranger . 1.450 Fr.

Section XI. — Biologie animale, génétique, biologie

végétale :

Franck . 3.650 Fr.

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Section XII. — Agriculture, aliments et industries

alimentaires :

1.150 Fr.

1.450 Fr.

France ..

Etranger

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16, rue Pierre-Curie, PARIS-5*

C.C.P. Paris 9131-62, Tél. DANton 87-20

l^ouvelle Série. Tome IV, Fasc. 3.

TrMJo

Avril 1959.

REVUE

ALGOLOGIQUE

DIRECTEURS ,

P. BOURRELLY et ROB. LAMI

SOMMAIRE

P. Palik. — New and intcresting Diatoms remainclcrs in thc Pan-

nonian yellow sand of Bogâcs.

P. CiAYRAL et A. Sasson. — Résultats de recherches sur la flore algale

d’une mare temporaire du Maroc.

P. G. Guebrero. — La « PMcosis » ciifermedad morlal en la hidro-

fitia .

H. S. Forest, h. L. Chance et M. M. Davis. — The possible applica¬

tion of bacterial cytological technique to the taxonomy of

blue-green Algae .

R. A. Lewin. — The Isolation of Algae.

I. Mackenzie Lamb. — A new method for the permanent préser¬

vation of Atgal material for microscopie study.

Bibliographie

202

Source : MNHN. Paris •

" New ” and Inferesting Diatom Remainders

in fhe Pannonian “ Yellow ” Sand of Bogàcs

By P, PALIK, Budapest.

The Pannonian sand of Bükkalja was examincd, wilh a view to

inineralogy, by Margaret Herrmann, research worker of the

Minerai Collection of the Natural Science Muséum in Budapest

(Pannonian Sand Examinations of Bükkalja. Bull, of the Hung.

Geol. Soc. 84, 4. p. 338, 1954. Budapest [Fôldtani Kôzlemények.

Bükkaiji pannôniai homokvizsgâlatok 1 ). During lier researches she

found diatom remainders in the sand samples of Bogâcs, so she

requested me to examine this sand also with a view to algology.

Zoltân ScHRÉTER research worker considers it to be Lower

Pannonian « yellow » sand. The village Bogâcs is situated in the

North of Hungary at the foot of the Biükk Mountains, some 12 kilo¬

métrés to the east of Eger and likewise 12 kilométrés to the north

of Mezôkôvesd away.

I found 40 diatom species in the examined sand samples 5 of

w’hich are new for science. The new species are as follows :

Centricae.

Cijclotella Cleve-Eiileriana n. sp. (1).

The discus has a diameter of 74 a. Unes which are radially

arranged being discernible on its margin. This streaked area is

about a third of the radius of the discus. There are 7-8 Unes in an

area of 10 a. On the outer edge a hem of 4 y.. In the central area

sonie dots of irregular forms. The cell is 28 ^ high from side-view.

The more or less pointed thread-like formations running from one

edge of the discus to the opposite one remind us of the appendages

characteristic of the species Melosira granulata (Ehrbg.) Ralfs. It is

possible that the above-nientioned threads are the prints of the

hypha-threads of a fungus species alfecting the diatom cell (Fig. 1,

10 ).

(1) I named the species in honour of the diatom researcher Astrid Cleve

Eui.er "who came to my aid with the identification of some problematical

species. Making use of the opportunity I express my thanks to her for her

kind efforts.

148

P. PALIK

Cyclotella Maiichiana n. sp. (2).

The discus lias an iindulating surface, with a diameter of 70 vl.

On ils margin very short streaks radially arranged. The middle of

the discus is smooth. If tlie cei! is somewhat turned aside there

are two S-shaped formations distinguishable on the discus. The

cell is 22 jx high from side-view, the undulation of the discus can

be well seen. The figures I drew and photographed from the same

specimen in different positions of the cell (Fig. 2, 3, 11, 12, 13, 14).

Pennatae.

Gomphonema Herrmanniana n. sp. (3).

The remainder is 21 jx long with a width of 7 ix in the middle and

2,5 îx at the lower end; clufa-shaped from valve-view. The upper

end is rounded ofF peakedly, the lower end eut off in a straight

line. It is devoid of a stigma. The streaks are restricted to the

margin of the valve, the area is broad. The Unes are running

parallel about the centre of the valve, and radially towards the

apices. There are 11 Unes in an area of 10 jx (Fig. 15). The remainder

reminds us of the species G. platypiis ôstrup. In the latter however

the head part is broadly rounded off. In G. platypiis the streaks

are tender, the Unes are running parallel, 20 Unes in an area of 10 |x.

Its dimensions are : length 20 jx and width 2, 3-3, 5 y. (Fig. 15).

Amphora hungarica n. sp.

The remainder is 70 y. long and 18,5 y, broad in the middle, 12 y

at the apices. The dorsal side is domed in the middle, the ventral

side is slightly concave, nearly straight. The apices are eut ofî

obliquely. The cutting off is slanting from the ventral side towards

the dorsal side. Two limbs of the raphe beginning from the apices

are slightly bent towards the middle of the valve. The ribs are

running in a more or less radial arrangement, there are some 4 ribs

discernible in an area of 10 y (Fig. 5).

Rhopalodia Frickeiana n. sp.

The remainder is more or less sickle-shaped. The ventral side is

somewhat concave, nearly straight, the dorsal side is domed. Us

length is 52 y, its width II y in the middle and 4 u. at the pôles.

The pôle is, as plainly visible at the under end, more or less eut off.

The ribs are running in a radial arrangement, there are some 16-18

(2) So named in honour of the Hungarian hydrobiologist D-’ Ralph Maucha.

(3) In honour of the Hungarian mineralogist D*" Margaret Herrmann who

kindly made the research material available for me.

NEW » AND INTERESTING DIATÜM REMAINDERS

149

ribs on the remainder, with 13-15 areolae in an area of 10 ja. The

keeled raphc is more or less straight, somewhat bent downwards

at the ends. The remainder reminds us of one of Fricke’s figures.

(Cf. Schmidt : Atlas der Diatomaceenkunde. Plate 256, Fig. 9).

In the latter also the ribs are arranged radially, the dimensions of

the cell being similar too (about 63 long and 12 broad in the

middle, 4 a at the ends). Fricke remarks regarding his above men-

lioned figure : « Einstweilen nicht bestimmbar ». As its habitat

he naines Gerinan East Africa (Fig. 4).

I often saw very interesting globular, ellipsoid, or rather more

or less lenticular bodies in the sand samples of lîogâcs. The size

of the latter one was different (140 X 80 |ul, 145 X 135 (j., 152 X

119 lu.). The body is circular or elliptical as seen from above, its

center sinking in like a navel. From the centre furrows arc running

ont in radial arrangement (Fig. 6). This body is divided into qua-

<lrangular, (juinquangular or hexagonal areolae from side-view.

The areolae are swervidng downwards in arciiate lines. Diaraeter

of the areolae about 3 (Fig. 16). These bodies reinind us very

much of the diatom species called Hyalodiscus siibtilis Bail. (Fig. 9).

Therefore I thougt they belong to the genus Hyalodiscus, but I did

not identify them on any account with the species H. subtilis, for

the areolae covering the side of the cell are very tiny, about 23-

26 being discernible in an area of 10 y. according to the descrip¬

tions (Fig. 9 c). On our remainder, however, there were 3 areolae

in an area of 10 iu.. During my researches, when examining the

remainders in hydrochloric acid solution I happened to press on

the covering glass in the microscope somewhat more resolutely,

and then the body which was supposed to be Hyalodiscus dropped

into 4, more or less circulai’ leallets, that is to say 4 disks (Fig. 20).

These disks consisted of silicioiis needles in radial arrangement.

In the middle of cach disk a more or less circular aperture was

perceptible. After further soft pressing these leatlets fcll into sili-

cious needles. (Picture 7, 8). Now it became évident that these

remainders cannot belong to the diatoms. After repeatcd exainina-

tions these bodies turned ont to be identical with the sterrastcrs

rising in the gastral part of some sponge species. It is mentioned

by Cleve-Euler in the description of the genus Flyalodiscus (Die

Diatomeen von Schweden und Finnland, 1951, p. 35) that the

lenticular cells are connected by twos by means of mucilage, for-

mlng a chain in this way (Fig. 18). During the studying of the

literature about sponges a figure of O. Schmidt got into my hands

in which he demonstrates the development of the sterrasters (4).

(4) Supplément der Spongien des Adrialischen Meeres, 1864, Leipzig.

150

P. PALIK

According to the descri])tion of the author lhe sterrasters corne

into being in the body of the respective sponges on the sarcode

fascicles, and are ranged like a string of pearls on these forming

regiilar intervals between them. Thus in the beginning the

Sterrasters are connccted by mucilaginons sarcode fascicles (Pic-

tiire 19) similarly to vvhat we hâve seen in Hyolodiscus. According

to the descriptions the diameter of the cell in the species //. subtilis

is 20-120 ;j.. Siich a considérable lluctuation of size is common also

with the sterrasters, for the developing sterrasters are still small

(Pictiire 19), and then becoine always bigger in conséquence of the

accumulation of more and more silicious matcrial. Relying upon

these fmdings it is to be wished that the genus llijalodiscus,

especially the species H. siibtilis should be revised again, for is

seems probable that the « cells » of the lutter one are nothing but

sterrasters produced in some sponge species. According to Cleve-

Euler (p. 35) no recent habitat of H. subtiUs is known.

Relying upon the diatom species found in the sand samples I

tried to draw conclusions upon the qualities of their habitat in the

Lower Pannonian Age. The number of the species is 40, 5 of which

being new for science, as was mentioned. 5 of the 35 species known

so far are marine species, 12 species live in fresh and brackish-

water, a considérable part (10 species) of which prefer today

waters with highly reduced sait contents. The number of the fresch.

water species is 15, 3 species live exclusively in brackish-waters.

The alga species found prove therefore that the water was brackish.

A considérable part of the 35 species is found at présent in the

littoral zone or in shallow waters living as epiphyts, 20 species

(11 -F 9). 4 species live in the pelagic zone, but 3 of them can be

found also in the littoral zone. From ail that we can draw the

conclusion that the sand examined is of littoral origin. M. Herr-

MANN who assorted the sand according to the size of its grains

considers it to be littoral deposit (p. 385).

Many of these species live both in standing waters and rivers,

14 species however are inhabitants of standing waters exclusively.

The above mentioned author considers, on the basis of her investi¬

gations, that tlîis sand originales from standing water, this state-

ment is supported also by the diatom remainders.

Ont of the insufficient literary data I could ascertain the

pabulum needs of only 10 species of the 35. Today 9 species of them

inhabit mesotroph and eutroph waters.

23 of the 35 species are living now in Central Europe.

Relying upon these fmdings we can ascertain, or rather assume

REVUE ALGOLOGIQUE

N'ie Sér.. T. IV ; PI. 5

Source MNHN, Pans

REVUE ALGOLOGIQUE

Nii^ Sér., T. IV: PI 6

Source MNHN, Pans

NEW » AND INTEREST[NG DIATOM REMAINDERS

151

that the Lower Pannonian sand containing diatoms was deposited

in littoral standing water originating from a water with highly

reduced sait contents, which was. relatively rich in nutritive

materials.

ANNOTATIONS TO THE PLATES. 5 AND 6.

Picture 1,

Ojclotella Cleve-Ealeriana n. sp. Discus.

500

Cyclotella Mauchaiaiia n. sp. Discus.

230

Cyclotella Maiichaiana n. sp. Discus.

230

Rhopalodia Frickeiana n. sp.

420

Anipbota hiingarica n. sp.

470

Surface picture of sterraster.

340

Half of a disk.

420

The disk has fallen into silicious needles.

420

JJyalodisciis subtilis Bail, a) as seen from above, b) side

view, c) areolae on the side of the cell. 500 : 1. (After

fig. 35 of Cleve-Euler.)

10.

Cyclotella Cleve-Euleriana n. sp. The cell from side view.

500

11.

Cyclotella Maucbaiana n. sp. Discus.

500

12.

Cyclotella Maucbaiana n. sp. Discus.

500

13.

The same.

500

14.

The same. The cell from side view.

500

15.

Gomphonema Ilcrrmannian^ n. sp.

2000

16.

The areolae on the side of the sterraster are running

in arcuate lines.

1000

17.

Half of a sterraster from side view.

400

18.

Cells of Ilyalodiscus conneclcd by twos by means of

mucilage hâve forined a chain. (After fig. 36 of Cleve-

Euler.)

280

19.

Development of sterrasters. After plate I, fig. 12 of 0.

Schmidt.

20.

The sterraster has fallen into four disks.

400

Résultats de recherches sur la flore algale

d’une mare temporaire du Maroc

Par Paui-ette GAYRAL et Albert SASSON.

Les mares temporaires sont abondantes dans tout le Maroc sep¬

tentrional où elles sont désignées sous le nom vernaculaire de

« dayas ». Alimentées i)ar les pluies hivernales, elles atteignent en

général leur extension maximum au printemps, et, progressive¬

ment, subissent une régression qui les conduit à un assèchement

complet en fin d’été et pendant l'automne.

Nous nous sommes consacrés, de l’hiver 1056 à l’été 1957, à

l’étude de l’une d’entre elles, la daya Hamida, située sur le plateau

qui s’étend au Nord-Est de Rabat, à 14 km. de cette ville.

De superficie assez considérable pour ce genre de formation

(environ 2-3 ha), cette daya, par sa situation et son origine, peut

servir de type pour l’ensemble des mares temporaires de la région

qui reposent sur un substratum dialogue.

Des observations fréquentes, environ toutes les deux semaines,

ont été etîectuées sur le terrain pour suivre les tluctuations de mise

en eau et d’asséchement, pour des prélèvements de sol aux fins

de mesures iihysico-chimiques ou d'observations biologiques, enfin

jiour dos récoltes de plancton ou d’algues benthiques.

Les résultats de cette étude seront probablement publiés in

extenso ultérieurement: nous nous projîosons de donner dès à

ju’ésent, un résumé des recherches, en insistant sur les résultats

obtenus dans le domaine floristique, et les conclusions qui se

dégagent de cette étude.

CARACTERES MORPHOLOGIQUES ET PHYSICO-CHIMIQUES

DE LA DAYA HAMIDA.

La jnèce d’eau est installée dans une légère dé])ression formée

dans les argiles quaternaires acheuléennes. Le substratum est cons¬

titué,’])our la majeure partie, par une argile brun-jaunâtre et,

pour mie bande plus réduite située à l’Est, par un sol sableux plus

franchement rouge dans lequel un horizon sidérolithique présent

dans l’ensemble de la formation, se trouve là, à une faible profon¬

deur (15 cm. environ), et finit même par aineurcr en certains

])oints.

Source MNHN. Paris

RECHERCHES Sl’R LA FLORE ALGALE DU MAROC'

153

Le pH et les teneurs en sels de ces deux parties sont réunis clans

le tableau suivant :

Sol sableux humide Sol argileux humide

Bicarbonates

Clilorures

Sulfates

Calcium

Magnésium

Potassium

Sodium

K.O

P.O,

7,1

0,6

183

244

100

ing

ni g

9fio

%û

%<1

160

Ces résultats mettent en évidence des ditïérences assez sensibles

entre les deux sols; tout d’abord en ce (jui concerne le pH, les

valeurs ci-dessus cpii correspondent à des moyennes de mesures

renouvelées, montrent (pie le sol argileux est légèrement plus acide

(jue le sol sableux: d’autre part, ce dernier est nettement moins

riche en éléments nutritifs ciuc le sol argileux.

Nous verrons cpie la répartition des algues présente des rap-

j)orts avec cette dilférence de composition.

La température de l’eau à oscillé ])endant la période d’obser¬

vation, entre un minimum de 10° et un maximum de 23“5.

Enfin il y a lieu d’insister sur le régime assez particulier de la

claya, ])our l’année 1956-1957. En effet, en plus d’une sécheresse

exceptionnelle mar<îuée par un défaut d'une centaine de milli¬

mètres d’eau par ra{)i)ort à l’année moyenne, les i)luies ont été

irrégulièrement réparties dans le temps : abondantes au début de

l’hiver et au début du printemps, elles ont été à peu près milles

pendant le mois de février. Il en est résulté, après la mise en eau

de la mare, un assèchement considérable de celle-ci fin mars, puis

une nouvelle mise en eau, mais celte fois éphémère puisque dès le

mois de mai, la daya était asséchée définitivement pour l’année

1957.

RESULTATS CONCERNANT LA VEGETATION.

Des jiriscs de sol effectuées à différents niveaux dans les deux

parties du substratum ont été ensemencées dans les milieux liquides

ou solides classiques (L -H C, L — C, Chu, Detmer) ; ces milieux

étant employés avec succès ])oiir la culture, en laboratoire, d algues

d'eau douce ajiiiartenant à des groupes très variés, nous ont paru

susceptibles, à quelques exceptions près, de faire développer la

154

PAULETTE GAYRAL ET ALBERT SASSON

totalité de la flore algale potentiellement contenue dans ces échan¬

tillons.

De fait, reiisemble de la flore développée dans ces différents

milieux, s’est montré riche, avec environ 70 espèces de variétés

dont un grand nombre, nouvelles pour le Maroc (1).

Sur milieux solides, en boîtes de Pétri ensemencées en grand

nombre, il a été possible de suivre, à différentes époques, l’ap¬

parition ou la disparition de groupes entiers, ou de certaines

espèces, et de comparer les pulsations du développement au labo¬

ratoire et dans l’eau de la mare.

Les deux tableaux ci-dessous rendent compte des espèces rencon¬

trées dans chacun des types de sol, de 0 à —20 cm. pour le sol argi¬

leux, de 0 à —5 cm. pour le sol sableux dans lequel la rencontre du

niveau sidérolithique, dense et solide, vers —10 cm., nous a fait

juger inop])ortunes les jirises plus profondes.

Il nous a paru inutile d’y mentionner les espèces de Bacillario-

phycées qui, abondantes, se sont montrées présentes également

dans les deux types de sol, et à toutes les profondeurs.

RÉï'ARTITION des ALGUES DANS LE SOL SABLEUX.

Espèces rencontrées

Cyanophycées

*Uapnlosiphon Welwitschii . . .

*Cfjlindrospermum alalosporiim

*Annl!aena constricia .

’^Nosloc puncliforme .

Lfjngbya oerngineo-coerulea . ..

Pbormidium foveolarnm .

Oscillaloria amoeiia .

OscUlatoria fonnosn .

Xantiiophycées

“Chloridella neglecta .

*Gloeobolrys chlorinus .

‘‘Chamciopsis ovalis .

*Choraciopsis subulala .

Tribonema minus .

Trihonema vulyare .

*Vauchcria proliféra .

^Vancheria pseudogeminala ....

surf. s/surf. -5 cm. Milieu de culture

CHU

Pr.

CHU

CHU et L-f C

Pr.

CHU

L + C

Pr.

CHU

L + C

Pr.

L + C

Ab.

L-C

Ab.

L + C (solide)

Ah.

Ab.

Pr.

Ab.

Pr.

L + C

T. Ab.

Ab.

L + C et L—C

Pr.

L + C et L —C

Pr.

L + C et L—C

(1) Le.s espèces ou variétés nouvelles pour le Maroc citées dans ce texte sont

marquées d’un astérisque; leur liste complète sera ultérieurement publiée dans

les compléments au catalogue actuel des algues d’eau douce du Maroc.

RECHERCHES SUR LA FLORE ALGALE DU MAROC

155

Chlorophycées

tCarieria multifilis .

tCfiloniydomonas Franki ......

Qhlorococcum humicoium ... .

Qhlorella vulgaris .

,$cencdesmiis longus .

*Scenedesmus obliquas .

}}ormidiuni flaccidiim .

tSiUjeocloniam nanum .

t^liiieocloniam polymorpham .

Coleochaele orbicuîaris .

Pro/ococcRS viridis .

'Closleriiim acerosum .

Closlerium tumidulum .

Cosinarium sp.

^Xyiinema lamellalum .

'lygnemopsis pseudodecussata

Spirogyra sticlita .

PTolosiphon bolryo'ides .

Ab.

Pr.

L—C

Ab.

Pr.

L-C

Ab.

L + G

Ab.

L + C

Ab.

L + C et L—C

Ab.

Ü.

L + C

Ab.

L + C et L —C

L + C

Ab.

L—C

Ab.

.Ab.

Pr.

L + C (solide)

Ab.

CHU (solide)

Ab.

CHU (soli<le)

CHU (solide)

Ab.

L-C

.Ab.

L—C

Ab.

L + C et L—C

Ab.

Pr.

L + C (solide)

Répartition des algues dans le sol argileux.

Espèces rencontrées

surf.

s/surf.

- 5 cm.

-10 cm.

-20 cm. Milieu de culture

Cyanophycées

^Uapalosîphon Welivifschii.

Ab.

CHU

*CyUtidrospermum alato-

sponim .

Pr.

CHU

*.in(ibaena comtricla .

Ab.

Pr.

CHU et L + C

*.\’os/oc punctiforme .

Pr.

CHU

I.yngbya aerugineo-

vnerulea .

Ab.

L + C

Pharmidium foveolarum...

Ab.

T. Ab.

Pr.

CHU

OscUlaloria amoena .

Ab.

L + C

Oscillaloria formosa .

Ab.

Pr.

L+C

Xanthophycées

*CblorideUa neglecla .

L—C

*Gloeobolri/s cblorinus ....

T. Ab.

.Ab.

Ab.

L + C (solide)

*Charociopsis ovalis .

Ab.

Pr.

*Chiiraciopsis subulala .

Ab.

L + C

*Ophiocytium qracillimam.

Pr.

Tribonema minus .

T. Ab.

Ab.

L + C

Tribonema viüqare .

Ab.

L + C et L — C

proliféra .

T. Ab.

L + C et L — C

*yaucheria pseiidogeminala.

T. Ab.

Ü.

L + C et L — C

Chlorophycées

Voluocales .

L—C

Chlorococcum humicoium.

T. Ab.

Pr.

L + C

156

PAULETTE GAYRAL ET ALBERT SASSüN

*ChloreUa ellipsoïdea .

Ab.

L + C

('.hlorella vulqaris .

. T. Ab.

T. Ab.

Pr.

L + C

Ankislrodesnms falcaliis .

Ab.

Pr.

L + C

Ankislrodesimis spiralis. .

Ab.

L + C et L-c

*Kirchneriella obesa .

Ab.

L + C

*Scenedesn}us longus .

Ab.

L + C et L r

*Scenedesmus obliquus.. ..

. T. Ab.

L + C

Hormidium flaccidum . . .

. T. Ab.

Ab.

Pr.

L + C et L c

*Siigeoclonium nannm ....

Ab.

L + C

*SfigeocIonium polymor-

pimm .

Ab.

L + C

Coleochaete orbicularis . .

L—C

I^rolococcus viridis .

T. Ab.

Ab.

L + C (solide)

i.losterium acerosum .

CHU (.solide)

Closteriuni iumidnlum . ..

CHU (solide)

*('.osmarium angulosum ....

Pr.

CHU (solide)

Cosmarium biretum .

Ab.

*Cosmarium galeritum .

Ab.

CHU (.solide)

Cosmarium notabite .

Ab.

ü.

CHU (solide)

*Z!jgnema lamellotnm .

Pr.

I.-C

*Zygnemopsis pseiido-

decussata .

Pr.

L -C

Spirogyra slirlila .

Ah.

Ab.

I.+ C et L C

Protosiphon bolryoïdes ■ .

T. Ab.

I ( C (solitle)

Ab. = abondant

7’. Ab. = très abondant

Pr. = présent, sans plus

0. = absent

L examen de ces tableaux appelle quelques commentaires :

1” — Les deux types de sol ne fournissent pas des lîores fonda¬

mentalement différentes. On jieut noter cependant que les Cyano-

jîhycées sont abondantes et mieux représentées dans le sol argileux

que dans le sol sableux: seul Phonnidiiun foveolanim Goin. est en

elfet présent dans le sol sableux. Parmi les Xanthojihycées, C.hlori-

della neglecta Pascher est localisé au sol sableux, les autres sont

dans l’ensemble mieux représentés dans le sol argileux qui est

plus riche en matière nutritives.

En ce qui concerne les Chlorophycées, les Volvocales sont ab¬

sentes du sol argileux; il s’agit d’algues préférant des teneurs

faibles en Ca., ce qui peut expliquer cette répartition. Les Chloro-

coccales sont beaucoup plus abondantes dans le sol argileux; ces

algues se développent mieux en culture dans les milieux riches

(L + C); leur répartition peut être mise en rapport avec la teneur

plus élevée du sol argileux en éléments nutritifs. Parmi les autres

Chlorophycées, la répartition différente des genres Chsteriiim et

Cosmariiim est intéressante à mettre en parallèle avec le pH :

RECHERCHES SUR LA FLORE ALGALE DU MAROC

157

Closteriiim itiniidulnm Gay. et Closterium acerosum (Schrank)

Ehrenberg sont des espèces réputées basophiles, les 4 espèces de

Cosmarinm présentes clans le sol de cette mare, sont au contraire

éliminées par un pH légèrement supérieur à la neutralité.

Différence de pH, et différences chimiques du sol peuvent donc

avoir un certain retentissement sur la répartition des espèces d’une

même formation aquatique, surtout si l’on considère la ttore totale,

dont une fraction importante doit être fixée sur la couche super¬

ficielle du substratum de la mare.

2° — Parmi les espèces présentes en surface, la plupart dis¬

paraissent en profondeur. Toutefois, il ne faut pas, à notre avis,

attribuer à cette remarciue plus d'importance (pfelle mérite d’en

avoir. Le fait, pour un sol prélevé en profondeur, de développer tel

ou tel organisme, jirouve seulement que les formes de résistance

de cet organisme (kystes, zygotes, etc...), ont pu être mécanique¬

ment entraînées jusqu’à cette profondeur; cela ne signifie nul¬

lement qu’elles puissent effectivement s’y déveloiipcr. Seuls sont

intéressants à considérer, les organismes qui se trouvent en pro¬

fondeur, et dont les formes de repos sont cependant inconnues

c’est par exemple le cas de l’espèce Gloeoboirijs chloriniis Pascher

dont les spores sont inconnues, et qui, présente jusqu’à —20 cm.,

doit effectivement se trouver, sous forme de cellules actives jusqu’à

cette profondeur; c’est aussi, pour la même raison, le cas des

Bacillariophycées.

3° — Le sol sec de cette formation laisse développer en culture,

des espèces dont la présence est évidemment possible en raison

de l’établissement d’un plan d’eau pendant une partie de l’année.

Les Scenedesmus, les Desmidiacées, les Zygnémacées nécessitent

certainement une mise en eau appréciable pour former les organes

de propagation et de résistance reconnus dans le sol sec.

Il nous paraît d’ailleurs intéressant de donner maintenant les

résultats aussi complets que possible, des récoltes faites dans le

plan d’eau lui-même, soit par pêche au filet fin, soit parfois par

centrifugation d’un petit volume d’eau, pour établir une compa¬

raison de la ffore décelée en pleine eau, avec celle que fournit

l’étude du sol.

CYCLE DE LA FLORE DANS L’EAU DE LA DAYA DURANT

L’ANNÉE 1956-57.

PÉRIODE ALLANT DE FIN NOVEMBRE 1956 A FIN JANVIER 1957.

Le phytoplancton comprend : *Phacus caudatus Hüb. var. ovalis

Drez., *Phaciis aenigmaticiis Drez., Chlorella vulgaris Beyer., An-

158

PAULETTE GAYRAL ET ALBERT SASSON

Idsirodesmus falcaius «^orda) Ralfs., Ankistrodesmus falcatiis

(Corda) Ralfs. var. mirabilis W. et G. S. West. Ankistrodesmus

spiralis (Turner) Lemm., *Scenedesmus longus Meyen uar. minutiis

G. M. Smith, Scencdesmiis ohliqiiiis (Turpin) Kütz., Aclinaslriim

Hantzschii Lag.. Kirchneriella lunaris (Kirchn.) Moebius.

PÉRIODE AlU-ANT DE FIN .JANVIER 1957 AU DÉBUT DE MARS 1957.

On note une relative abondance des Ankistrodesmus ; Phaens

aenigmaticiis Drez. est présent ainsi que Phacus triqiieter (Ehr.)

Dujardin.

L’eau SC couvre de Chlorophycées filamenteuses : Zygnema la-

mellatum (Rao.) Kolk. et Krieger, Zygnemopsis pseudodecussata

(Czurda) Kolk. et Krieger sur la rive Ouest; Spirogyra crassa Kütz.,

Spirogyra nitida (Dillw.) Link. sur la rive Est (déterminables ulté¬

rieurement seulement).

PÉRIODE ALLANT DE MARS 1957 AU MILIEU DE MAI 1957.

Le ]dancton ne comjirend que quelques Phacus aenigmaticus

Drez.. et Actinastrum Hantzschii Lag.. Ultérieurement la mare

est asséchée.

Ce plancton n’est pas très riche qualitativement. Quantita¬

tivement, mises à part quelques Chlorococcales et quelques Euglé-

nacées, il s’avère très pauvre. Cette constatation que nous avons eu

déjà l’occasion de faire à_ la suite d’observations dans d’autres

pièces d’eau de même type, trouve son explication dans la forte

turbidité de l’eau de ces mares qui, situées sur un fond argileux

abondamment ])ictiné par le passage des troupeaux, consistent en

une eau riche en matières colloïdales peu propice au développement

du j)hyloplancton.

Naturellement les Zygnémacées se développent abondamment, et

retiennent entre leurs filaments certaines espèces benthiques

comme les Desmidiacées que l’on peut observer dans l’eau d’expres¬

sion des premières: cependant une partie, quantitativement impor¬

tante des espèces benthiques, doit vivre sur la surface même du

substratum, et nous paraît pouvoir passer inaperçue lors des

récoltes effectuées seulement dans l’eau.

SUCCESSION DES FLORES

Les prélèvements de sol effectués à diflerentes époejues et exa¬

minés environ trois semaines après l’ensemencement, ont montré

pour les principaux groupes systématiques, la succession suivante :

Les Cyanophycées présentent un maximum de développement

lors de la deuxième période printanière, et pendant l’été; alors que

Source. MNHN. Pans

RECHERCHES SUR LA FLORE ALGALE DU MAROC

159

le sol d’hiver n’a révélé que les deux espèces Oscillatoria amoena

Gom. et Hapalosiphon Weliuitschii W. et G. S. West, le sol de

printemjis montre le développement de Phormidium foveolanim

Gom., Nostoc punctiforme (Kütz.) Hariot, *Cylindrospermum ala-

tosporiini F. E. Fritsch. En juin, trois autres espèces sont ap¬

parues: *Anabaena constricta (Szafer) Geitler, Oscillatoria formosa

Bory, Lijngbija aeriigineo-coeriilea Gom..

Ees Xanthophycées, relativement abondantes en espèces et en

individus, présentent leur maximum de développement au début

du printemi)s.

Les Bacillariophycées, très abondantes dans le sol, présentent

un maximum hivernal avec Achnantes, Hnntzschio amphioxys

(Ehr.) Grun., Amphora ueneta Kütz., et un deuxième au début de

rété. Aux es])èces précédentes s’ajoutent alors Nitzschia palea

(Kütz.) W. Smith, Fragilaria construens Ehr. var. triiindidata

Reichelt, Gomphonema augustatum (Kütz.) Rab., Stauroneis trun~

cala J. W. G. Lund, Cymbella microcephala Grunow, Pinniilaria

microstaiiron (Ehr.) Cleve.

En ce qui concerne les Chlorophycées dans l’eau, les Volvocales,

très éphémères n’ont été rencontrées qu’après les pluies. Les Chlo-

rococcales et la plupart des autres Chlorophycées sont bien déve¬

loppées au printemps, en particulier les Zygnémacées qui consti¬

tuent, à cette époque, une masse de matière végétale considérable

dans la pièce d’eau.

Parallèlement à ces observations, des sols en culture au labo¬

ratoire depuis le début de la i)ériode d’étude de la daya, ont montré

qu’à une époque donnée, il apparaissait seulement un nombre

limité d’espèces. Observé ultérieurement, le même sol révélait

l’apparition de nouvelles espèces, marquant ainsi une succession

semblable dans l’ensemble des groupes à celle observée dans la

nature. Puisque les conditions de développement étaient, au labo¬

ratoire, sensiblement constantes depuis le début, on peut voir dans

ces faits l’inéluctable nécessité d’une maturation des formes de

repos, une sorte de « dormance » indispensable à ces organes.

CONCLUSIONS

1. — Le sol des dayas, d’après ce que nous a montré la daya Ha¬

mida, et il n’y a aucune raison pour qu’il en soit autrement dans

le plus grand nombre d’entre elles, est pourvu d’un riche potentiel

algologitjue et, étudié sur un nombre suffisant d’échantillons en

culture, est siiscei)tible de livrer successivement les espèces qu’il

renferme, à condition de le placer dans divers milieux nutritifs

160

PAULETTE GAVRAL ET ALBERT SASSON

reconnus favorables à la culture de la plupart des grands groupes

d’algues.

2 . — Cette richesse contraste avec la pauvreté de l’eau en phyto-

plancton, pauvreté explicable la i)lui)art du temps par l’abondance

de colloïdes en suspension.

3. — Lorsque la mare est en eau, à la pauvreté en organismes

planctoniques s’oppose très vraisemblablement une certaine luxu¬

riance d’organismes vivant sur la partie superficielle du substra¬

tum; la plupart passent alors inaperçus si l’on ne conduit parallè¬

lement l’étude du sol et celle de l’eau.

4 . — Cependant l’étude du sol de la l'ormation sèche n’exclut

])as la recherche des organismes prélevés dans le plan d’eau lui-

même; cette étude peut en etïet ne pas livrer des organismes

nécessitant des conditions particulières de culture, ou des orga¬

nismes présents dans l’eau d’une manière occasionnelle, trans¬

portés par exemple par des oiseaux aquatiques ou même par les

troupeaux qui parcourent des mares voisines.

Faites sur un ensemble de formations de ce genre, de telles

observations renouvelées permettraient, à notre avis, de faire la

part des espèces constantes, maintenues dans le sol sec sous forme

de cellules actives ou sous des formes de repos et la part des

espèces sporadiques apportées annuellement ou tout à fait occa¬

sionnellement par des agents extérieurs.

La " Ficosis " enfermedad montai

en la hidrofitia

por Peuro Gonzai-Ez GUERRERO.

Hésnmé. — Ce travail étudie une maladie nouvelle des plantes aqua¬

tiques de la République Argentine, Portugal. France, Italie, Suisse, Bel¬

gique et Espagne, maladie qui est appelée « phycose » car elle est causée

par des Algues. Ce nouveau terme est introduit pour la première fois

dans le langage scientifique. C’est aussi la première fois qu’on utilise le

mot « phycclium » pour désigner un pseudo-tissu formé par l’enche¬

vêtrement de nombreuses algues constituant sur le support végétal une

pellicule ou une masse algale parfois macroscopiciue.

La phycose est une maladie mortelle produite par des végétaux chlo¬

rophylliens sur d’autres végétaux verts, cryptogames ou phanérogames.

Les épil>iontcs n’utilisent pas les tissus du substrat pour leur nutrition,

mais s’en servent uniquement comme support. La suppression de la lu¬

mière {asphyxie photique) provoque la mort de l’hôte par arrêt de

la photosynthèse.

La mente humana aplicô su esfuerzo a través de la Historia al

estudio de las enfennedades producidas por los végétales hetero-

trofos y niinca i)ensô que los cromofllicos, produjesen enferme-

dades mortales sobre las Cormofitas sometidas a su jurisdicciôn.

Al estudiar los materialcs ficolôgicos que cogi en America

(Republica Argentina) y en Eiiropa (Portugal, Francia, Italia,

Suiza, Belgica y Espana) observo con frecuencia que las Algas

caiisan enfennedades, a veces mortales, a las plantas acuaticas

sobre las que se apoyan.

Sin que pretenda agotar el niimero de casos posibles entre la

victima y su epifito (jinete) considero dos habitats : errante el

nno, y fijo el otro, pudiendo existir ambos tanto en las cspecies que

constan de una celula cuanto en las (lue son tllamentosas o lami-

nares.

En el primero, indicaré las « lapas de agua » (« Wasserblüten »,

« fleurs d’eau » « flore dell acqua »), cl « polvillo hidroficieo », las

« lamas hidroficicas » y la « estopa ficolôgica » (fieltro laxo acua-

tico). En el segundo, citaré al a pulgôn de. la Cladophora» (Cor-

coneis), a los Generos Endoderma, Dermocarpa, Gongrosiva, Gloe-

otrichia, y al Gomphonemion.

162

PEDRO GONZALEZ GlERRERO

HABITAT ERRANTE

Las toxinas producidas coino conseciiencia dcl qiiimismo vital

por las Algas errantes infliiyen poco en la cadaverizacioii de las

I)Iantas que estân sometidas a su vecindad, no danando a los tejidos

de las Espermafitas siiinergidas, produciendo a lo sumo un enrare-

cimiento dcl ambiente que no altéra el estado fisiologico del végétal

superior.

En este habitat errante (aiinque se apoyen transitoriamente

sobre el soporte) se encuentran muchas especies unicelulares

{CAiroococcus, Scenedesmus, Coelastrnm, Voluox, Pandorina, Na-

vicnla, etc...), originando pcliculas acuaticas siiperficiales que al

rizarse el agua ])or cl viento, i)rodiice efecto agradal)le la contem-

placiôn de tal fenomeno fisico-biolôgico, adquiriendo coloraciones

variables : aziilada, si abunda Microcystis aeriiginosa (rio Manza-

nares ; Madrid); verde [rio Priinero, einbalse de San Roque, en

Cordoba (Republica Argentina)|, rio Tujo en Toledo (Espana),

como ejeinplos de Cloroficeas; amarilla, en el « curral de la

veceira » en la sierra de Gérés (Portugal), abrevaderos de Esparra-

gosa del Caudillo (Badajoz), région salinera de San Fernando.

Sanlucar de Barranieda (Cadiz), etc... en Espana, y cuyas colora¬

ciones son debidas al pigmento cromolilico que contienen sus

céliilas.

En realidad. verdaderas « lapas de agua », es decir hipotéticas

laminas o peliculas dotantes superficiales es inuy dificil que se

produzcan, porque suben y bajan los individuos que constituyen

asociacién tan numerosa.

Su inlluencia sobre las Macrofitas no es perniciosa, debido a que

la duraciôn de la lapa de agua es fugaz, qiiedando el liquido bas-

tante diâfano una vez que desaparece tal asociacién, aunque

I)erinanezcan disueltos los maleriales producidos durante su exis-

tencia.

El « polüillo Indroficico » esta integrado por billones de celiilas

que nadan entre el fondo del charco y la superficie del agua,

produciendo tal opalinidad en el inedio acuatico que en ocasiones

originan una pulpa ficologica densa, (jne constituye un gran incon-

veniente para las otras plantas acuaticas que alH estén, por ejemplo

el Scenedesinetiim de algunos charcos (rio Manzanares : Madrid,

en Noviembre de 1924) poseedor de tal cantidad de individuos,

que eliminaron a las plantas superiores que alli habia, e hicieron

la vida imposible a los animales acuaticos que se alojaron en

aquellos estanques. El polvillo ficologico es mâs duradero que las

lapas de agua.

Source MNHN. Pans

riCOSIS » KNFKRMEDAD MORTAL EN LA HIDROFITIA 163

El Closterion {Closterium Pritchardianiim Arch.), encontrado

en los fontines del Jardin Bntanico de Madrid en Junio de 1926,

se apoderô de la inasa aciiatica eliminando a las otras especies

vcgctales, lo ciial rcalizo no solainente por sus niimerosos indi-

vidiios sino lambicn i)or la gran secreciôii gelatinosa que produjo.

La cnfermcdad mâs i)erjudicial para las plantas fanerogamas

acuaticas en su estado infantil, es la producida por las « lamas

ficolofficas », que al formar en el fondo del charco una pelicula

constante (verdin o azuHn) de espesor variable, arropan a las

plantas convecinas produciendolas con ello la muerte {Merismope-

(linm convolutum Bréh., en los arroyiielos de Cabeza del Buey

Badajoz. XII-1923).

Estas lamas son principalmente de color azul o amarülo, es

decir, estàn formadas por Cianoficeas (Chroococciis, Merismope-

dium, etc., con algunas Diatoiiicas, pero escasean las de color verde;

Scenedesmus, Ankistrodesiniis, Oocystis, etc., debido entre otras

causas a que las Cloroficeas son mâs autotrofas que las Cianoficeas

y Diatomeas, prefiricndo estas ultimas en muclias ocasiones los lu-

gares cargados de materia orgânica en descomposiciôn (alcanta-

rillas, letrinas, iirinarios, etc...), lugares inhospitalarios para las

Algas vendes en general.

Los sitios prôximos a las alcantarillas, estercoleros, majadales,

etc., son apetecidos por las urofilas (Cianoficeas, Diatomeas, etc...),

habiendo encontrado casos frecuentes de Phorinidion, Oscillaio-

rietum, etc., [Bios : Turia (Valencia), Ercsnia (Scgovia), Henares

(Guadalajara), charcos de las majadas de La Serena (Cabeza del

Buey, Castuera, Camiianario, Villanueva de la Serena, Esparragosa

del Caudillo, Puebla de Alcocer, Talarrubias, Siruela, Penalsordo,

etc. (Espaiia) ; curral de la veceira : Entre Minho y Douro (Portu¬

gal), etc.] El fondo de cstos charcos tienen materiales en putre-

tacciôn y los gases fétidos que se desprenden no son tolerados por

las Cloroficeas jior lo cual se alejan de taies lugares y en canibio, son

apetecidos por las Cianoficeas que al desenvolverse merman la

lozania de las Fanerogamas.

El Oscillatorieto y el Phorinidion, son independientes en cierta

mancra dol nivel acuatico, ya que lo mlsmo se desenvuelven sobre

el tondo que formando lajias de agiia en las salinas de Cadiz, San

Fernando, Sanlucar de Barrameda Ayamonte, Isla Cristina, San

Pedro de Pinatar. Santa Pola (Espana).

La « estopa ficolôgica » (pleon) se desarrolla en un habitat mix¬

te : fijo o errante. En el primer caso puede origiiiarse sobre un

sustrato inmovil o estar adherido a un medio movible, siendo en

miichas ocasiones su adherencia indiferente; asi Homoeolhrix ca-

164

PEDRO GONZALEZ GUERRERO

espitosa (Rab.) Kirchn., var. argeniinensis Gonz. Guerr., iinas

veces se fîja sobre vegetales superiores y a los cuales produce la

mucrte por su abundancia, o se asienta sobre rocas, y en ocasiones

sus propios padres le sirven de asiento.

Spirogijra, Oedogonium, Cladophora, etc., son los ejenii)los clâ-

sicos de estas asociaciones, siendo eliniinados los dos Géncros pri-

meros por la abundancia de la ültiina.

Desprendidos los individuos adultos del soporte o rotos en sus

iiniones cou este, llotan en el agua, bien sea en la superficie o en

el espesor de la misnia y forman inuchas veces un iicltro tan denso

(mantas de ovas) que hacen la vida imposible à las Fanerogamas

(grandes estanques de Madrid, desembocadura del arroyo « Dos

Hermanas » en el rio Zujar (Espana), o e! enorine Cladophorion,

de centenares de métros cuadrados, en las saünas nnircianas. ali-

cantinas, gaditanas u onubenses; siicediendo !o projiio con el Ente-

romorphion de los lugares indicados.

HABITAT FIJO rM\STANTE

En este medio, los epifitos viven siipcditados al liospedaiite, a

diferencia de las especies errantes que cstan sometidas al incdio

acuatico principalmcnte.

Existcn infinitas formas unicelulares o filainentosas que se pre-

sentan con frecuencia forinando una gran populaciôn y que inllu-

yen sobre la planta hospedadora. Uno de estos casos que sorpronde

j)or su abundancia y frecuencia es el producido por cl « pulgôn de

la Cladophora {Cocconeia placentiüa por ejeinjilo).

El Cocconeion es una enfermedad endemica en Cladophora

iglomeraia, fractn) al cual hay que atribuirle un tanto por ciento

inuy clevado de culjia en la desapariciôn de este Genero.

Ea membrana cehilosica de Cladophora es un grand medio de

fijacién para las epifitas, pudiendo considcrarsela coino planta

« nodriza-despensa » j)or cxcelencia, para el asiento de los epi-

biontes universales, siendo Cocconeis su inquilino principal, el

cual se encarga de que Cladophora vaya en régression, por todos

los sitios en los cuales la encontré : rio Primero (Gordoba : Rejiu-

blica Argentina), aguas siliccas de La Serena (Badajoz : Espaiia),

Urdôs (Pirineos franceses), lagos Mayore, Garda (Italia), etc.

CoccoTïeis invade a Cladophora por los sitios alejados de la

celula distal, y avanza paulatinamente hacia el extremo del talo

de Cladophora, pero manteniendosc siempre a cierta distancia de

la celula final.

En algunas celulas de Cladophora hay tal cantidad de Cocco¬

neis y se lian hundido tanto en la membrana hospedadora, que

LA « KICOSIS » ENFERMEDAD MORTAL EN LA HIDROFITIA 165

Megan a ixmerse en contacto con su agonizante citoplasma, eondi-

ciôn que indien el probable cambio de alinientaciôn en Cocconeis,

haciéndosc parâsito.

Hay i)araleUsmo entre la vitalidad del citoplasma de Clado-

phora y el de Cocconeis. En muchos ejomplares de la primera, las

celulas basales del filamento estân muertas, carecen de citoplasma y

se hailan materialmente comidas por Cocconeis que a duras penas

permiten la observaciôn de su soporte.

A medida que avanzamos hacia la parte media de Cladophora,

cl protoi)lasma esta inâs vivo, sucediendole igual a Cocconeis, y

hacia cl extremo del soporte, que es la ])arte mâs viva de este, los

ejeinplares de Cocconeis tienen mayor lozania que en el resto del

végétal hospedador.

Esta Diatomea se fija por la valva que tiene rafe, o por la ([ua

carcce de esta hendidura, aim(|ue dominan los cpie se apoyan jior

la vah’u ratidea sobre el sustrato.

El soporte inlluye en la colocaciôn de la valva de la Diatomea,

pues si es cilindrico y con seccion curva transversal mny cerrada,

entonces Cocconeis se ponc con su eje mayor paralelo al eje del

cilindro, y su valva toma la forma de teja romana, mucho nias

larga que ancha y concéntrica con el hospedante. Si la matriz es

de seccion transversal muy abierta, o se trata de un soporte ])lano,

entonces Cocconeis tiene su cara de union poco curva, o incluso

plana.

En los filamentos jovenes de Claüofhora debido al pequeno ta-

mano (juc tiene el diametro de la seccion transversal, todos los

ejeinplares de Cocconeis colocan su eje mayor paralelamente al

eje longitudinal del filamento (Fig. 2) y lo mismo sucede en Spi-

royijra (Fig. 1).

Sorprendre el hecho de ((ue Cocconeis no forme estratos, es de-

cir, que no cabalguen unos sobre otres, por muy densa que sca

la asociaciôn formada por ellos.

Un gran paralelismo epibiosico existe entre Cocconeis placentn-

lu y Coleochneie sciitata Breb., tanto en los ejemplares procedentes

del rio Turia en Valencia, cuanto en las formas endémicas del rio

Ziijar en Esparragosa del Caudillo (Badajoz), siendo pianos los de

Valencia porque vivian sobre la pared de un acuario, y discos cur-

vos, los que se desarrollaban sobre los Scirpus del rio Zujar.

En la fijaciôn de Cocconeis y de Coleochaete no hay perfora-

ciôn de la membrana hospedadora {Cladophora, Spirogyra, Scir-

pns, Jiinciis, etc.), en general, pero en la asociation originada por

Endoderina sobre Cladophora (marismas gaditanas (Espana) la

celula epibiosica se hunde materialmente en la membrana del hos-

Souroe MNHN. Pens

166

PEDHO GONZALEZ GirERRERO

pédante {Lola, Claiiophora, etc.), Ilegando a danar a los alberga-

dores cuando establcce contacto con el citoplasma de estos, al cual

concliiye por destniir.

Endoderma, présenta nna tendencia al parasitismo mucho nias

jironunciada que su convergente Cocconeis, produciendo ambos cl

efecto destriictor directaincnte por todo su cuerpo que esta adlierido

a la planta hospedadora.

Homoeoihrix caespitosa, var. argentinensis Gonz. Guerr., forma

filamentos que se fijan iinicamentc por la celiila basal sobre el sus-

trato, minerai o végétal, quedando libre el resto del filamento. Los

individiios se yerguen sobre el soporte formando un verdadero

cesped pinccliforme y divergente, todos los individuos que coin-

ciden en el punto de insercion para pasar los primeros instantes

de su dcsarrollo infantil en Cordoba (Republica Argentina). Esta

Cianoticea tampoco se asimila los tejidos de la Fanerogama ([iie la

sirve de apoyo.

Un verdadero estrangulador es Schizothrix CaoaniUesii Gonz.

Guerr., que se enrosca con tal fuerza sobre los filamentos de Rivu-

laria CauaniUesiana Gonz., que déjà sus hiiellas indelcbles sobre la

supcrlicie de la planta hospedadora (charcos marismenos de la

provincia de Cadiz).

Efecto parecido produce Lyngbija epiphijtica sobre los lietero-

geneos soportes végétales que le sirven de fijacion. Sucede lo propio

con Phaeophila floridearum Hauck., sobre Lola labrica en la pro-

vincia de Cadiz.

Tambien Dermocarpa Cavanillesiana Gonz. Guerr., se Iiiinde en

la membrana estratificada de Cladophora, modificando la morfo-

logia de esta.

Homoeoihrix caespitosa var. argentinensis forma pinceles mâs

o iiienos densos e irrcgulaniiente distribiiidos sobre la planta hos¬

pedadora, i)ero Gloeolricbia natans constiluye a modo de un « inan-

giiito de senora», gelatinoso, que rodea por completo zonas mâs o

inenos amj)lias del tallo u hoja de la planta que la sirve de asiento

{Myrioplujllum), matando a la planta que la sostiene [rio Gua-

diana en la provincia de Badajoz (Espana)]. El efecto destriictor se

exacerba debido a que Gloeotrichia se incrusta con frecuencia de

sales calizas que endurecen a su talo y esta piedra, bastante dura

{Gloeotrichia : pisiim, natans, etc.), produeen la rotura transversal

de la Fanerogama y ello hace que veamos trozos de Myriophylliim

flotantes y con frecuencia aorillados en las inargencs de los rios :

Giiadiana, Zujar, etc., en la provincia de Badajoz.

Hydnirus foetidus en las plantas acuaticas del rio Urbiôn (Soria ;

Espana), en los Pirincos de Huesca (Espana), en los riachuelos del

LA 4. FICOSIS » ENFERMEDAD MORTAL EN LA HIDROFITIA 167

valle del Gran San Bernado (Alpes italianos), sc comporta de la

misma forma que Gloeotrichia natans formando masas gelatiiiosas

envolventes sobre la planta (jiie la sostiene.

Gongrnsira inernstans (Reinsch.) Schmidle, invade con iinifor-

midad zonas supcrficiales inâs o menos intensas de Cladophora

fracta formando un cesped cpibiosico tan denso (Fig. 3) que obs-

curece por completo a la planta subyacente, emergiendo rara vez

algun brote rameal (jue a duras penas logra abrirse paro a traves

del marasmo vegetativo que produce Gonyrosira y cuyo brote tar-

darâ i)oco tiempo en morir.

El Gomphonemion [Goniphnnema aciiminainm, consirictiiin, etc.),

y cl Cymbellion {Cymbella cymhifonnis) producen un efecto mor-

tifero sobre las plantas acuaticas que las soportan (Fig. 4).

Las cclulas de Cocconeis, Dermocarpa, Lynghya, Schizothrix,

Gloeotrichia, etc., producen la muerte de la planta liospedadora,

en tantos lugares que observé unas cspecies u otras [rio Primerio :

Cordoba (Republica Argentina) ; sierra de Gérés (Portugal) ; Urdos

(Pirineos franceses); Urbiôn y Pirineos espanoles; Ali>es italianos;

lagos suizos (Iiiterlakcn) y tontines del paseo del Palacio Real (Bru-

selas)], sin distinguir que se encuentren sometidos a reoülia o que

estén aposentados en aguas mâs o menos estâticas (Sena : Paris;

Ebro: Zaragoza; Guadiana: Merida; Guadalquivir : Cordoba, Sevil-

la; Pü : Turin, Ferrara; Lagos : Mayore; Garda : Italia; lagunas

de Ruidera (Espana), etc., pero Gompbonema y Cymbella ocasionan

la destnicciôn del sustrato végétal que los sostiene utilizando para

c-llo los pedunculos gelatinosos que producen.

La célula libre de Gomphone.ma : aciimiiiatiim, constrictiim, etc.,

una vez que se ha desprendido, se fîja por su polo basal que es el

mâs estrecho, sobre la planta hospedante : Phragmites commiinis,

Typha, etc., irguiendose sobre clla (no se tiende como lo hace Coc¬

coneis placentula) y segrega un pedùnculo gelatinoso, sencillo o

ramificado que llcva en sus extreinos a las células aisladas o gemi-

nadas de la Diatomea.

El pedünculo unas veces es inipar, es decir, consta de un solo eje,

pero en muchas ocasiones tiene dos vâstagos adosados el uno al

otro todo el trayecto y con una o dos celulas de Gomphonema en su

extrême distal.

La peana del pedunculo de Gomphonema queda unida al soporte

cuando se rompe aquel. El filainento arborescente desprendido,

zarandeado por la corriente, soltarâ las celulas en el camino e iran

a fijarse en otro lallo u hoja de Phragmites, Typha, Jiincus, Scir-

pus, etc., para empezar el nuevo ciclo de su desarrollo vegetativo.

168

PEDRO GONZALEZ GUKRRERO

Con frecuencia las células desprendidas se üjan sobre su propio

pedunculo matcrno, libre o fijo, originandose asi nuevos centros de

producciôn de células hijas que aumentan los filamentos gelati-

nosos airededor de la jilanta soporte, y originan una especie de

« algodôn en rama » que envuelvc i)or completo al tallo u boja de

Phragmiles, Tijpha, etc., formando un « ficelio », es decir. un pseu-

dotejido constituido por nunierosos fdamentos gelatinosos sencillos

O raniificados, productores de una marana hidroficica tan densa,

(pie imposibilita la vida a otras especies en el interior de las niallasv

de tal pseudotejido esiionjoso.

Muchas células de Gomphonema, erguidas o tendidas, se colocan

en la zona periférica del « ficelio » para recibir la luz directamente,

estando niuy desarrolladas las que se encuentran de esta manera.

No he visto células de Gomphonema npoyadas sobre las valvas de

otro individuo de su jiropia especie.

La iniierte de Phragmiles, de Typha, etc., en ciertas lagunas de

Ruidera (Espana), es producida por el « ficelio » jieduncular y val-

^ar de Gomphonema acuminatum. La iieana de ii.iaciôn se asienta

sobre la cajia de células iierifericas : ejiidermicas, en el caso de (pie

cmpiece la invasion, sobre las células del tejido fundaniental (pa-

renquinia clorofilico) si este se halla al descubierto, sobre el sistenia

csqueletico, o de conduccion, en cl caso de (pie estén destruidas las

células externas.

Todos los « ficelios » (pseudotejidos laminares o formando ma-

sasj enumerados, prodiicidos por unas especies u otras (Cocconeis,

Dermocarpa, Gloeotrichia, etc.), producen la muerte de la planta

hespedadora de una manera indirecta, es decir, no destruyen los

lejidos ])ara asimilarse a estos, pueslo que en general lo que hacen,

es quitar la luz a la planta matriz [Phragmiles, Typha, etc.), y al

carecer esta de tal agente fisico, queda imposibilitada para realizar

su funcién clorofilica y no pudiendo alimentarse, sucumbe por

« asfixia fôtica » (falta de luz).

Lnhoratorio de Fîcoloçia

Instituio Botanico « Caoanilles »

Plaza de Murillo 2, Madrid.

REVUE ALGOLOGIQUE

N'ie Sér., T. IV; PI. 7

Fit'. 1.

Source MNHN, Pans

REVUE ALGOLOGIQUE

N"^ Sér . T. IV: PI. 8

Fig. 3.

Fig, 4.

Source : MNHN, Paris

LA « FICOSIS » KNFERMEDAD MORTAL EN LA HIDROFITIA 1

EXPLICACION DE LAS EIGURAS (PI. 7, Si.

Fig. 1. — Ficosis produeida por Cocconeis pldcenfiila sobre Spirogyra. El

epilito SC coloca en cualquier direcciim sobre cl soportc. inclusive tiansversal-

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Fig. 2. -- Ficosis produeida sobre Cladophnra fracla por Cocconeis plac.en-

iula (65 X). Marismas andaluzas espanolas. Todo el ano. Micrnfotografia.

Fig. 3. — Ficosis produeida por Gongrosiru inernstans (Reinsch.) Schmidle

s(»bre Cladophora fraefa Dillw., en ci « Pico del Urbiôn» a 2400 ms. de altitu(t

en la provincia de Burgos, Junio, 1925.

Fig. 4. — Macrofotografia del ficelio de Gompbonema angustatiim (Kiictz.)

Rab., sobre Phragmites communis Trin.. Typha, etc., en la laguna de « San

Pedro » (Lagunas de Ruidera : Albacete (Espana), Junio, 1955.

The possible application

of bacterial cytologicai technique

to the taxonomy of Blue-green Algae

l\v II. S. FOUEST. H. L. CH.\NGE. and Mar.iorie M. DAVIS (1).

In récent years lhere has been a revival of interest in the cyto-

logy of blue-green algae. l^ejiresenting Ihis work are publications

by Drawert (1949), Zastrow {19oîi), IIerbst (1953, 195-i), Cas-

sel and Mutchinson (1954), Niklowitz and Drews (1955), Kriec.

(1955), Drews and Niklowjtz (1956). Yct these studios bave con-

tribiited little to the basic concepts in the Jield. Even the élec¬

tron microscopie studios of Drews and Niklowitz (1956) show

nothiiig nove! in the chromatic area. The older study of Spearing

(1937) could still be judged as rejiresenting the best etîort in the

field.

Several bacteriologists in recent years bave discussed and illus-

trated the controversial structures of nuclei, chromosomes, and

mitosis. l’hey hâve experimented witli N number, and the process

of sexuality, or at least gene recombination. A compendium of cur-

rent views on bacterial anatomy is available in Spooner and

Stocker (1956). In contrast, a recheck of sevenly-tive publications

on the cytology of bluc-green algae failcd to produce any convin-

cing evidence of a merabrane-bounded nucléus, chromosomes, or

sexuality. The starlling use in OsciUalorin and Nostoc of the ternis

liaploid, diploid, and polypoid by Krieg (1955) is unsubstantiated

in lîis brief report, although it may in time prove correct.

This study was an attempt to apply modem bacteriological tech-

nicpies to a number of blue-green algae. The staining processes

selected were the crystal violet-mercuric chloride method (Ch.ance,

1952) and the hydrochloric acid-neutral red technique (Chance,

1955). The work Avas doue under the direction of D" L. Chance,

by Mrs. Marjorie Moran Davis.

(1) The authors are indeblcd lo D''* Paul'R. BuRKUor.nER and Mary Bei.i,

Ai.t.en for providiiig cultures of algae, and to the Faculty Research Com-

miltec of the l'niA’-ersity of Oklahoma for the purchase of additional cultures.

D*" .1. Bennett Gi.ark gave suggestions regarding current l)acterioIogicaI acti-

vity, and I)'' \V. T. Penfouno rcad and criticized the manuscript.

Source UNHN. Pans

TaXONOMY OF BlUE GREEN AlGAE

171

According to Clark and Webb (1955) crystal violet stains pro-

tein nuclear compoiients, but not desoxyribonuclcic acid, vvhilc

neutral red is considered a DNA stain by Chance (1956).

Algae were obtained from the culture collections of the univer-

sities of Georgia (UG), California (UC), and Indiana (UI). Thirty-

three different cultures were staincd and exainined, including

specimens rei)resentiiig live fainilies and fourteen généra.

Algae were transferred from the medium in which they were

received to Pétri i)lales containing Hoagland’s # 1 solution

(Hoagland and Arnon, 1938) diluted with three volumes of water

in 1 % agar. and the plates were exposed to twenty-four liour

Iluorescent lighting at about two hundred candie power. The algae

were stained after five days growth on the ])lates. The stained

specimens were exainined under an oil immersion lens at a ma-

gnifîcation of 1 lüO.

KESULTS. — I .— Sfaining of cnrreut muterinl. — Some algae failed

lo show differcntial stain for chromatic materials with either crys¬

tal violet or neutral red, the staining being either uniform for the

cell, or else it failed to stain. In this group were Anabaena cgliii-

drica Lemm. (UG 1 403/2), Lyngbi/a spp. (UG 1 446/2), Microco-

leus naginains (Vauch.) Gom. (UC M 7-2-1), Nodidaria splmero-

curpa B. & F. (UC M 11-1-1), Nostoc spp. (UG 1 453/11), Kostoc

punctiforme (Kuelz.) Har. (UG 1 453/3), Phonnidiiim spp. (UG

1 462/4), and Psendanabnena catenata Laut. (UI 425). The algae

which stained showed rather consistent chromatic patterns with

both crystal violet and neutral red. Seventeen were stained by

both, and showed similar patterns in alinost every case. These

were (kdothrix membranacea Schm. (UG 1 4Ü1/1), Calothrix parie-

tina (Naeg.) Thur. (UC M 13-1-1), Nostoc miiscorum Kuetz. (UC M

12-1-1), Anabaena cateniila (Kuetz.) B. & F. (LT 375), Oscîllatoria

tennis Agardh (UI 428), Lyngbija spp. (UG 1 446/2), Anabaena

nariabilis Kuetz. (UI 377), Nostoc calcicola Bréb. (UI 382), Nodu-

laria sphaerocarpa B. & F. (UC M 11-1-1), Anabaena nariabilis

Kuetz. (UC M 1-2-1), Fremijella diplosiphon (B. & F.) Drouet (UC

M 6-1-1), Tolijpothrix distorta v. symplocoides Hansg. (UI 424),

Phormidiiim foveolarnni (Mont.) Gom. (UI 427), Nostoc elUpso-

sporuni (Desm.) Rab. (UI 383), Symploca muscornm (Agardh)

Gom. (UI 617), Phormidiiim hiridiim v. oliuaceiim Boresch (UI

426), and Pleclonema calothricoides Gom. (UI 598). Six stained

only with crystal violet : Plcctonema noiatnin Schm. (UG 1 463/1),

Nostoc miiscoriiin Kuetz. (UG 1 453/12), Fremyella diplosiphon

(B. & F.) Drouet (UG 1 429/1), Nostoc spp. (UG 1 453/8), Plecto-

172

H. S. P'OREST, H. L. CHANCE, AND MARJORIE M. DAVIS

nemn Hori/anum Gom. (UC M 9-2-5), and Gloeocapsa alpicoln

(Lynfîb.) liorn. (UC M 3-1-1). Chlorogloea Friiscbii Mitra (UG

1 411/1) and Nostoc conunune Vauch. (UI 584) stained with neii-

tral red only.

'i4ie structural detail in stained cells was not at ail conii>arable

to that obtained by Acton (1914), Haupt (1923), or .Spearinc,

(1937). Even the best resuits of less impressivc studies by Prat

(1925), PoLJANSKV and Petri'schewski (1929), and Hollande

(1933) exceeded ours. However. discernible patterns were obtained

with relatively simple staining techniques, and these patterns

showcd certain consistencies.

Therc was a high degree of conformity between the shape of the

ccll and that of the chroniatic area. « Chroinatic area » of this

j)aj)er corrcsjionds approximately to the « nucléus », « central bo-

dy », « colorless portion », or « nuclear équivalent » in most of the

literature on the cytology of blue-green algae. Spherical cells sho¬

wcd si)herical chromatic areas, long cylindrical cells tended to

hâve cylindrical chromatic areas, and the saine correspondcnce

was présent to a degree in oval cells as well. This conformity docs

not Hcem to have been mentioned previously, although it was.ap-

jiarent enough after several cells or cell drawings were observed.

The question as lo whether the relationship is a significant one is

not wilhiii the scope of this study, but it should furnish challenges

in sub-microscojne morphology.

Stain patterns could be assigned fairly well to three categories :

a) a single elongated cylinder or rods which stain rather den-

sely; b) a round or oval mass which may be seen as containing

large, densely staining granules; and c) a round or indefinitely

shaped area containing small scattered granules. The only other

attempt at categorization which we find reported is that of Cassel

and Hltchinson (1953), p. 146 : « 1. a loose, sometimes granular

netlike organization ; 2. rodlike éléments oriented parallel to the

longitudinal axis of the cell groiips; and 3. a very much condensed

organization of various shapes». These investigators interpreted

their observations with silhouette diagrams as well as iihotographs,

noüng with soine restraint that drawings generally retlected indi-

vidual interprétations. Indeed, even though both the drawings and

text of their report difTer from those of oiir investigation, their

photographs indicatc that their resuits agréé with ours. A broadly

acceptable scheme of nomenclature and symbolism might well

bring forth a siibstantial agreenient among many workers on the

appearance of the chromatic area in many blue-greens.

TaxONOMY OF BI.UE GREEN AlGAK

173

No careful analysis of lhe structure of the chromatic area is

]) 0 ssible Avith the simple staining employée! here. Before the recent

papers listed in paragraph one of this paper, the structure of the

blue-green cell had been given intensive considération by Schmitz

(1879), McCallum (1899), Fischer (1905), Gard.neu (1906). Ac-

TON (1910), Baumgârtel (1920), Gcilliermond (1925), Hollande

(1933), and Spearing (1937). Of these, the inost convincing are

those of Acton, who studied the Chroococcaceae. and Spearing,

\vlîo succeeded in obtaining interprétable results from OsciUaforia

and Siigonema.

RESULTS. — II. — A coinparison of the slaininy patterns présent

in the relis of seoen familles of blue-green algae. — It was Spearing

(1937) who suggested that the chromatic ap])aratus might be used

as a taxonomie character in the blue-green algae since it showed

constant différences between species. Within the genus Oscilla-

toria, Spearing found longitudinally arranged rods in a species

with fairly long cells; an irregular long cylindrical structure in

O. splendida Grev.; and, in O. tenais Agardh, a réticulum of thick

chromatic threads, the oulline of which corresponded somewhat

to the cell shape. The chromatic apparatus of Siigonema mamillo-

siim (Lyngh.) Agardh was a réticulum with granules which werc

dcnsely staincd in his photographs, the outline of the chromatic

area again corresponding generally to the cell shape.

The sim]de staining technique employcd in this study did not

jiroduce details in the chromatic apjiaratus; but the outline, den-

sity of staining, and something of the size of the area and its

component granules were revealed. It was i)ostulated. then, that

the imttern of lhe chromatic area might provide a useful taxonomie

character at some level of classification. Drawings and photographs

of chromatic areas in blue-green cells were assembled from the

available literature, and original drawing were inade from current

material. After some évaluation and sélection, drawings of cells

representing eighteen généra and seven familles were selected

for inclusion horc as being représentative of the species which

hâve been studied. The drawings and re-drawing (soinetimes sim-

plified) illustrate the évidence available as to the taxonomie possi-

bilities of chromatic area staining.

The pitfalls in such an endeavor are several. 1) The taxonomy

of algal cytologists has not been completely rcliable, and in a few

cases it was clear that observers had illustratcd the wrong species.

2) There is no standard mode of drawing cell structures. Varions

authors liave tended to picture them according to their own taste.

174 II. s. FOREST, H. L. CHANCE, AND MARJORIE M. DAVIS

Most of Baumgârtel’s (1920) cells wcre illustrated as sho^\ing a

bubble-ancl-granulc structure rcminiscent of his « inodel » bluc-

green cell. On the other hand, Ihose who saw « chromosomes » or

chromosome-like figures, Kohl (1903) and to soine extcnt Fischer

(1905), illustrated siniilar «chromosomes» for many kinds of

blue-greens. 3) The cell is, after ail, three dimensional, whereas

drawings are ilat, so that only a part of the cell can bc depictcd.

Spearing (1937) was keenly aware of this. He categorized his own

drawings as : a) jihotographic, in which a shallow plane was in

shai]) focus and depth was illustrated by shaded structures; b)

condenscd, showing all structures sharply defîned as they appearcd

in tbeir own plane of focus; and c) as a single plane. The présent

analysis has been accomplished with an awareness of these and

other pitfalls, but with the hope that the analysis might be infor¬

mative and useful.

Chroococcaceae (Fig. 1-4).

Gloeocapsü alpicolo (UC M 3-1-1), G. polpdermatica (Phillips,

1904), and G. aernginosa (Haupt, 1923) show little concentration

of chromatic material, and only light granular staining. The avai-

iable figures of the family are consistent with the Acton (1914)

conccjit of the Chroococcus cell. There is little difïiculty in distin-

guislîing a spherical Chroococcoid cell from a spherical Nostocoid

cell. Large heavily stained chromatic areas are shown for

('.hroococciis sp. and Gloeocapsa alpicola (Lyngb.) Born. by Cassel

and Hutchinson (1953). Judging from their photographs and a

familiarily with the species, it would appear that the disparity

between their results and ours is a resuit of technique and choice

of symbols.

Chamaesiphonaceae (Fig. 5-7).

Figures of Chamaesiphoii by Bai'MGÂrtel (1920) and Massart

(1901) were examined. but nothing worth noting could be deduced

from them. Chlorogloea Fritschii (UG 1411/1), which is somewhat

similar to Clminaesiphon in morphology, stained with neutral red

to show granules scattered tlirough the chromatic area, and pro-

bably arranged on chromatic threads just as Acton illustrated for

some species of Chroococcus.

Oscillatoriaceae (Fig. 8-25).

Among blue-green généra, Oscillatoria has received by far the

greatest attention from cytologists, but the only general conclusion

TaXONOMY OF BlUE GREEN AlgAE

175

which coiild be clrawn here concerning the gcnus was thaï lhe

shape of lhe chromaüc area corresponds pretty well to the cell

shape. This is truo of other généra as well. Yet, certain consisten-

cies can hc detected. O. tennis (UI 428) (1) shows the same cylin-

drical chromatic area which Spearing (1937) illustrated for O.

splendida Grev. The dividing Oscillatoria cells of Fischer (1905)

and Spearing ajipear to dilTer only in technique of staining and

artistic taste. A réticulum of heavy chromatic threads was shown

hy both species. Olive (1904) illustrated O. princeps Vauch., which

lias extreinely short cells.

Diflcrences lictween certain Oscillatoria species are of such

magnitude as to ruise serions doubts concerning the unity of the

gcnus. The conjecture is olîercd thaï it will be splintered by future

cytotaxonomists.

The other généra of the family hâve received less attention, and

conseiiuently deserve an even more reserved analysis. Two avai-

lable figures of Lyngbya both show a coarse granular staining,

three figures of Phorniidinm ail show a finer granular stain. The

threads shown in Guilliermond's (1910) P. faoosum (Bory) Gom.

arc probably présent in ail of them. Pleclonema appears to show

some of the markcdly different patterns présent in Oscillatoria.

The drawings of Syniploca mostly conform to lheir artist’s concept

of the tyiiical hliie-green cell. Symploca nuiscoriim (UI 617) and

the same species drawn by Gardner (1906), resemhle the pattern

of Lyngbya.

Soslocaceae (Fig. 26-39).

Nosloc and Anabaena bave been chosen for cytological studies

more frequently than any other généra except Oscillatoria. An

elaborate picture of an Anabaena cell was prepared by Haupt

(1923), who ])rovided the best available ideas on its structure. In

addition, at Icast four dilTcrent specimens of Sostoc nmseorum

bave been illustrated. They hâve inciuded UG 1453/2, UC M 12-1-1,

Bai mgârtel’s (1920) and Cassel and Hutchinson’s (1953). Heavy

staining of a distinct chromatic area is consistently jn-esent in this

family. After dismissing such structures as the chromosomes of

Kohl (1903), a similar pattern can be interpolatcd for other

illustrations. The densely-staining chromatic area generally

apjiears coarsely granular, and it is possible that the size of the

area may vary with spécifie signilicance. However, no generic or

siiecilic dilTerences could be ascribed from the information now

(1) Unqucstionably mislabeled.

176

H. S. FOREST, If. L. CHANCE, AND MARJORIE M. DAVIS

available. Cells of Nostoc, Anabaena, Cglindrosperiniim, and pos-

sibly Nodiilaria ajipear quite siniilar aller simple staining.

Scytonematacene {Fig. 40-48).

No convincing common pattern conId lie foiind anioiig the

généra of this fainily, although ail do show distinct, rallier heavy

staining. In Scytonema, threaded chromatic areas were illustrated

by Zacharias (1890) and Guili.iermonu (1907) with rallier siniilar

syinbolisni, and scem lo be alike. Fven Massart’s (1901) granular

area can be understood as reiiresenting the same structure. Two

of the three Tolypolhrix selccted as examples here, Tolypothrix

distoria v. symplocoides (UI 424) and Kohl’s Tolypothrix sp.

(1903), seeni to hâve more or less parallel chromatic rods, while

Kohl’s T. lunata (Desv.) Wartiii. looks entirely dilî'erent.

Stiyonematncene (Fig. 49, 50).

Spearinc’s (1937) elaborate technifiue showed a branching

threaded chromatic area for Siigoncma. Fischer (1905), using

Ilapalosiphon, brought ont coarse granules in a cylindrical central

area with simpler melhods.

Rivulariaceae (Fig. 51-55).

Illustration of Calothrix by Baumoârtel (1920) showed the sanie

bnbble-and-granule structure of his other blue-green cells. The

Calothrix examined in this slndy, UC M 13-1-1 and UG 1401/1.

exhibited A^oxfoc-like patterns in short cells and the only round

jiattern found in rectilinear cells in any of the blue-greens. Howe-

ver. the evidence is too scanty to be taken into serions account at

this tinie. Photographs of Cassel and Hutchinson (1953) showed

an irregular ouLline siniilar to that of the drawing of our UG

1429/1. Cassel and Hi tchinson’s diagrams indicate the struc¬

ture as granular with interlaccd tlireads. Long cylindrical cells of

Calothrix showed a long cylindrical chromatic area.

PoLJANSKi and Pktruschewsky (1929) illustrated Gloeoirichia

with the threaded chromatic area, varying to parallel rods in the

longei-^ cells. The Rwiilaria cells of Massart (1901) and tliosc of

Hai’ft (1923) both indicate a similar threaded chromatic area.

Staining is rather heavy and distinct.

SIJMMARY

The cytology of blue-green algal cells was studied with the aid

of bacteriological chromatin staining techniques devcloped by

Source MNHN. PertM

TAXONOMY OF BLUE GREEN AlGAE

177

H. L. Chance, Thirty-three diiïerenl cultures were treated with

crystal violel-niercuric chloride and hydrochloric acid-neutral red.

Of these, mosl staiued similarly with bolh methods, a feNV stained

with only one, and soinc failed to stain. The detail of the chromatic

pattern obtained did not compare favorably with that altained by

previous invcstigalors who used more elaborate techniques. Howe-

ver, it was noted that chromatic areas and cells almost ahvays

correspondcd in shape, and that chromatic areas could be catego-

rized roughiy as : a) elongated, rather deiisely staining cylinders:

b) rounded or ovahmasses or bunches ot large granules; and c)

round or indefinitely shapcd areas containing small, scattered

granules.

Taxonomie comparison was attempted for a spcctruni of stained

cells rejiresenting seven families. 'lhe chromatic pattern of the

Cliroococcaceae was easily distingiüshable from that of the Nosto-

caceae, but within the gcniis OscUïatoria alone there was almost as

much variation in chromatic pattern as was fonnd through the

entire range of blue-greens. The taxonomie ntility of chromatic

area staining cannot be established at présent. However, consistent

patterns are obtainahle with relatively simple staining techniques,

and it is suggested that additional observations may well bring

into proper promînence the tield of cytotaxononiy in blue-green

algae.

Department of Plant Sciences

The Universitij of Oklahoma

Norman, Oklahoma.

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REVUE ALGOLOGIQUE

N"^ Sér., T. IV: PI. 10

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TAXONOMY OF BLUE GREEN ALGAE

179

FIGURES

PLANCHE X

1. CAoeocapsa polydermatica

2. Gloeocapsa alpicola (Lyngb.) Born.

3. (7. alpicola (Lyngb.) Born.

4. Gloeocapsa aeruginosa Kuetz.

5. Chlorogloea Fritschii Mitra

6. Chamaesiphon curvatus Nordst.

7. Chamaesiphon sp.

8. Oscillatoria tenais Agardh

9. O. tenais v. teryestina (Kuetz.) Rab.

10. Oscillatoria sp.

11. O. princeps Vauch.

12. O. tenais culture (UI 428), probably

O. splendida Grev.

13. O. splendida Grev.

14. Syniploca muscorum (Agardh) Gom.

15. S. muscorum (Agardh) Gom.

16. S. muralis Kuetz.

17. S. mu.srorum (?) (Agardh) Gom.

18. Lyngbya aestuarii (Mert.) Lieb.

19. L. aestuarii (Mert.) Lieb.

20. Phormidium laridam v. olivaceum

Boresch

21. P. autumnale (Agardh) Gom.

22. P. favosum (Bory) Gom.

23. Plectonema notatum Schm.

24. PI. Boryanum Gom.

25. PI. calothricoidcs Gom.

26. .Anabacna catenula (Kuetz.) Born.

27. .4/in. variabilis Kuetz.

28. .4no. inaequalis (Kuetz.) Born. & Flash.

29. .4/10. circinalis (Kuetz.) Rab.

30. Ana. variabilis Kuetz.

Phillips, figure 90

Forest, Chance, and Davis,

slidc # 29, violet

Cassel and Hutchinson ligure

Haupt, figure 12 & 13

Forest, Chance, and Davis,

slide # 12, red

Baumg.4rtei„ figure 42

Massart, figure 12 b & g

Spearing, figure 53

Fischer, figure 57 a & c

Spearing, figure 38

Olive, ligure 10

Forest, Chance, and Davis,

slide # 20

Spearing, figure 31

BaumgXrtel, figure 13

Forest, Chance, and Davis,

slide # 34

Fischer, figure 63

Garoner, plate 23, figure 22

Forest, Chance, and Davis,

slide # 22

Massart, figure 17 & 19

Forest, Chance, and Davis,

slide # 35

Fischer, figure 28

Guii.liermond (1910), plate 10,

figure 1

Forest, Chance, and Davis,

slide # 6, violet

Forest, Chance, and Davis,

slide #17, violet

Forest, Chance, and Davis,

slide # 36

Forest, Chance, and Davis,

slide # 19

Massart, figure 23

Phillips, figure 88 & 89

Haupt, figure 2

Fischer, figure 47 b

PLANCHE XI

31. Cylindrospermum sp.

32. Cyl. licheniforme (Bory) Kuetz.

33. Nostoc cacruleum Lyngb.

34. A', sphaericum Vauch.

35. N. muscorum Agardh

36. A’, muscorum Agardh

Phili.ips, figure 64

Gardner, plate 24, figure 19

Kohl, piale F, figure 1

Forest, Chance, and Davis.

slide # 25

Forest, Chance, and Davis,

slide # 16

Baumg.Xrtel, figure 52

180 H. s. FOREST, H. L. CHANCE, AND MARJORIE M. DAVIS

37. N. muscorum Agardh

38. N. commune Vauch.

39. N. sphaericiim Vauch.

40. Tolgpothrix sp.

•11. Toly. lanata (Desv.) Wartm.

42. Toly. distorfa v. symplocoides Hansg.

43. Toly. tenais Kuetz.

44. Scytonema sp.

45. Scytonema sp.

46. Sept, cinc.innatum (Kuetz.) Thur.

47. Fremyella diplosiphon (B. & F.) Drouet

48. F. diplosiphon (B. & F.) Drouet

49. Hapalosiphon pumilum (Kuetz.) Hansg,

50. Stigonema mamillosum (Lyngb.) Agardh

51. Calothrix parietina (Naeg.) Thur.

52. C. membranacea Schm.

53. Gloeotrichia pisum (Agardh) Thur.

54. G. pisum (Agardh) Thur. (as Rivularia

pisum Agardh)

55. Riimlaria sp.

Forest, Chance, and Davis,

slidc # 7, violet

Forest, Chance, and Davis,

slide # 33, red

Massart, figure 22

Kohl, plate F, figure 14

Kohl, plate D, figure 7

Forest, Chance, and Davis, slide

# 30, red (a) and violet (b)

Poljansky and Petuchewsky,

plate 2, figure 23

Guilliehmond, figure (1907)

Zacharias, figure 23

Massart, figure 23

Forest, Chance, and Davis,

slide # 8

Cassbl and Hutchinson, figure

Fischer, figure 51

Spearing, figure 2 and 5c

Forest, Chance, and Davis,

slide # 15

Forest, Chance, and Davis,

slide # 3, violet

Poljansky and Petuchewsky,

figure 26 (a) and 27(b)

Haupt, figure 7 xs

Massart # 38

©WEE)

REVUE ALGOLOGIQUE

Sér.. T. IV: PI. 11

Source. MNHN, Pans

The Isolation of Algae

by Ralph A. LEWIN.

Atlantic Régional Laboratory,

National Research Council,

Halifax, N. S., Canada (1) (2).

The following is an account of some methods which hâve been

successfully employed in the isolation of algal cultures. They are

not particularly difïicult, nor are they especially new. What little

originality they hâve lies largely in the simplification of techniques

developed hy other workers (2, 3, 8), especially by Pringsheim,

whose handbook (9) contains a vveaith of valuable information

and references to the earüer literature. To Dr. E. G. Pringsheim,

Dr. L. Provasoli and Dr. C. B. van Niel, the author is indebted

for much guidance.

INTRODUCTION

Clonal cultures, the végétative progeny of one individual, bave

long been known to the farmer and the horticulturist, but it was

not until the end of the nineteenth century that their use v^'as re-

cognized in studies of micro-organisms. About the year 1880,

Koch isolated the first pure cultures of bacteria. He was closely

followed by Beijerinck, who isolated the first pure cultures of an

alga in the decade that followed. Since then, bacteriology bas de¬

veloped almost entircly frorn the study of pure cultures, and so,

to a large extent, has mycology; yet pure phycology is still in its

infancy. Why is this so?

For one thing, as a riile people do not suffer from phycoses, nor

do algae ravish our crops or rot our foods, so the need to study

them is less urgent to our immédiate human wclfare. For another,

most algae, even unicellular forms, cxhibit enougli différences of

sizc and sliape and colour to be recognizable when collected from

natural habitats. The need to grow them under controlled condi¬

tions is, therefore, less keenly felt. And a third reason for the

neglect of algal cultures arises from the fact that for growth they

(!) Issued as N.R.C. N° 5137.

(2) Présent address : Marine Biological Laboratorv, Woods Hole, Mass

U. S. A.

182

RALPH A. LE^^'1N

normally rcquire light. and lhe provision of artificial illumination,

essential for most physiological stiidies, may présent technical

diffîculties if overheating is to be avoidcd. Neither the economist

nor the taxonomist has encouraged us to make concerted elTorts

to culture algae.

\Ve are now beginning to rccognise that, in studies of phyto-

plankton or of the algal flora of soils, there is a need for pure

cultures of algae, if wc are to hâve any sure knowledge of the si)e-

cies with which we hâve to deal, their life-cycles, their physio¬

logies and écologies. Where would bacteriology be if we eschew'cd

the use of Pétri plates and agar slants, and confined our sudies to

the natural lloras of skin, faeces, sewage and natural waters?

How much would we know of the mechanisms of fermentation

or wood-rotting if our observations liad been restricted to saniples

taken directly from brewery or wood-pile? Yet, until recently, it

was at such a stage in development that phycology found itseli.

But cultured algae are often unrecognizable, some « classical »

taxonomists still j)rotest: they are not « natural ». This, of course,

is in part true: no more are cultured bacteria. However, we can in

culture control the environments in which our organisins grow, and

can see to what extent the nutricnts in the medium, or such fac¬

tors as temnerature or desiccation, can influence their morpho-

logy. W'ith such information we are in a position to face field col¬

lections with more confidence that our eventual spécifie détermi¬

nations will hâve spécifie meaning.

Let us grant, then, that pure cultures of algae are usefiil, indeed

essential, for many investigations. Are they really as difficult to

obtain and handle as one might gather from the average micro-

biology textbook? The answer, of course, dépends on the species to

be isolated. Many hâve so far resisted ail atteinpts at culture, but

others présent no probleins at ail. Indeed, distilled water and

many reagent solutions which stand around laboratories tend

readily to become infested with Coccomijxa or ChloreUa, indica-

ting the tolérance of these algae for conditions in laboratory cul¬

ture.

If we desire a pure culture of an alga, our ai)proach to its iso¬

lation should be determined by our ultimate objective. On the one

hand, we may hâve a ifiiysiological problem requiring an alga, for

exain])le, capable of withstandiiig high températures or growing

at low light intensities. On the other, we may be interested in

studying a spécifie alga, characterized for instance by its abun-

dance at certain seasons and by the production of substances

toxic to animais. Isolation methods should be determined by the

THE ISOLATION OF ALGAE

183

goals in view. In almosl ail cases, however, the saine Ihree techni-

cal steps are involvecl, and it is well to ascend these one at a time,

if possible, if stumbles are to be avoided. These steps are :

I. Crnde culture.

II. Uni-algal, clonal culture.

111. Pure, bacteria-free culture.

Final ly, we should define the minimal and optimum environ-

mental conditions for growth and reproduction, though these con¬

sidérations lie beyond the sco])e of this article.

I. — SFAÆCriVE CULTURES.

A species tailored to spécial pliysiological requirements can he

sclected by enrichment culture, a primitive ecclogical exercise in

which the environment is provided first. A medium of any rea-

sonable composition is inoculated with a mixture of species from

a suitable source, and illuminated at the light intcnsity and tem-

perature which the investigator ])lans to use in subséquent expé¬

rimentation. He then waits for the prolifération of algae which

can tolcrate and llourish under such conditions. Those appearing

in the earliest crop niay be expected to grow well when subcultur-

ed in the saine medium; those appearing later in the succession

may be sIoav growers, or may be adapted to changes produced in

the medium by the first organisms to ajipear. At least one crude

sub-ciilturc should be made, since the original inocnliim may

hâve introduced niitrient factors, or may have alfected the pH, so

that the first enrichment was not actually of the composition pro¬

vided by the expérimenter. Moreover, it is necessary to provide an

opportunity for species which may be rare in the original inocu-

lum to gain ascendancy over their more abundant. but less well-

adapted, fellows.

A sim])le examiile here will suffice. Supiiose that we are interest-

ed in obtaining an alga capable of iitilizing light with high efïi-

ciency. We might lhen iirejiare a simple solution of inorganic

salts so balanccd that essential nutrients (a nitrogen source, in

particular) are présent in adéquate amounts for good growth, and

précipitation after autoclaving is reduced to a minimum. It should

be adcqualely bufîered as to jill and trace cléments, by the use of

such agents a« «Tris» (1) and « Versene » (2). As inoculuin we

(1) Tris (hydroxymethyl) amino-methane : Sigma Chemical Co. St. Louis,

Mo., U.S.A.

(2) Ethylcne-diamine-tctra-acctate : Bersworth Chemical Co., Framingham,

Mass., U.S..4.

Squtc

184

RALPH A. LEWIN

could use soil or mud, or scia])ings froin caves or dim crannies

Avhcrc a few algae might eke out an existence, and \ve could set iip

enricliment cultures in llasks set at inlervals froin a light source.

Algae which develoj), within a reasonable time, at the dinimest

light intensity would be siibcultured iinder similar conditions,

and finally jiurified in some way for further physiological study.

II. _ CLOI^AL ISOLATÎO!^ OF A SELECTED ALGA.

On the other hand, if lhe alga is aiready defined by the problcin

— a spécifie flagellate, say — we hâve first to find conditions un-

der ■which it will survive in the laboratory. Only then can we nar-

row the liinits of light, température and nutrients to déterminé

favourable conditions for growth. Since the objecl at this stage

is simply to obtain active algal multiplication, any empirical ex¬

pédients, such as the addition of soil extract, or the use of natural

sea-water for marine organisms, can be employed. \Ve are not yet

concerned with refînenients of the medium, but only with the

establishment of a crude culture from which we can proceed to

the next step.

This is the establishment of a clonal culture, in ■v\hich we can

be reasonably sure that ail cells are genetically identical. If we

are to be concerned with sexual rejiroduction and hâve reason to

believe that the sjiecies is heterothallic, then several separate

clones should be obtained in the hope of fmding complementary

mating-types. The methods of choice will ditfer according to the

type of alga, but basically they ail consist of spatial isolation of

single cells, or portions of thallus ■which can be assunied to hâve

derived from a single cell. With a little ingenuity, and some

knowledge of the morphology of the organism, this step can

usually be accomplished without difïiculty.

A. — Slreaking on agar. — Sinali unicellular algae with lirin cell-

walls or pellicles (e. g. Chlorella or Chlamgdomonaa) usually grow

well on agar, and can be isolated in Pétri plates l)y the routine

streaking procedures iised by l)acteriologists. Silica-gel media are

somewhat diffîcult to préparé, and in most cases offer no advan-

tages over agar. The minerai nutrient medium, without organic

supidements, is solidified with 1 % agar for freshwater species,

or 1,5 % agar may be jireferable when the salinity of the medium

is in the région of sea-water (3 % NaCl) or higher. A wire looi)

is iised for streaking, in prcference to a needle, since algal cells

are relatively large and cultures usually contain fewer cells than

do bacterial suspensions. A pattern of « dilution cross-streaking »,

THE ISOLATION OF ALGAE

185

siich as lhat shown in Fig. 1, has heen foiind siiitable. Plates

nsiially hâve to be iliuminated for a week or two beforc colonies

of the varions alga! siiecies présent hâve grown siifficiently large

to bc distingiiishable. They shoitld be examined at intervals, since

imwanted ainœbae, bluc-green algac or pennate diatoms hâve a

tendency to spread ovcr the surface and contaminate colonies

hilhcrto distinct and separate. It is good practice ahvays to pré¬

paré at least a second « streak plate » from each selected colony,

and to re-isolate, in order to exclnde the possibility of algal con¬

tamination. It is also, of course, advisable to check under the

high power of a compoiind microscope to make sure that one is

isolating the desired species.

B. — Single-cell isolation on agar. - When a desired cell type

occurs sparsely in a mixture of other algae or débris, the follow-

ing technique may be followed with advantage. Pour about

15 ml. of 1.5 % agar, made up in any non-toxic solution of sui-

table tonicity, and allovv the surface to dry slightly, forming an

invisible pelliclc. Place a small drop or clump of the mixture on

the surface, and then, with a fine needle under the binocular

microscope, draw ont a selected cell along a zigzag trail until it is

well isolated from the rcst. When the liquid along the trail has

been absorbed into the agar, eut ont a small block on wiiich the

cell stands ulonc, or draw' up the isolated cell into the tip of a fine

jiipette, and transfer il to a tube of fresh liipiid medium. Even quitc

large portions of filamentous lhalli can be freed from contaminating

algae in this way.

In the case of algae which creej), like some pennate diatoms or

blue-green algac, we can often make use of this property by

letting the cells isolate themselves. Allow them several hours to

migrate over the surface away from the clump. and then isolate

them as before. Sometimes unidirectional lighting from one side

of the dish aids in their orientation. Some species W’ili burrow

Ihrough agar, enabling one to pick them from the undersidc of

an inverted slah of agar, but this is usually unnecessary.

C. — Capillanj pipette method for flagellâtes. A cell on the

surface of agar is subjcctcd to physical forces which tend to

ilatten it, forces wdiich may be strong enough to disrujit naked

cells and even walled cells w’ith diameters of c. 25 u or more. For

these more délicate ty])es we hâve to resort to more gcntle hand-

ling in a continuons litpiid phase. With a fine capillary pipette

(soft glass is quite suitable, and casier to draw than Pyrex), a few

cells arc selected, one at a time, from a drop of the original sus-

186

RALPH A. LEWIN

pension. They are cx])clled into a droplet of a suitable fresh

medium, transferred from that to a second droplet, and tlien

isotated singiy in tubes of medium in Avhich they are allowed to

grovv. Since at this stage we are only interested in eliminating

contaminant algae, spécial aseptie techniques necd not be employ-

cd. but a few j)recaution should be observed.

1. —- Tlie bore at the tip of the i)ipette should be several times

the diameter of the celis being isolated, and the cells should not be

drawn uj) or expelled forcefully. These arc ])recautions to reduce

the danger of cell rupture by the shearing action of lliiid llowing

through a narrow cylinder.

2. — The droplets should be siipported on an isotonie agar

surface, rather than on a glass slide. This is cspecially iini)ortant

when the atmosphère is dry or when marine forms are being iso¬

lated, since olherwise évaporation from the droplets could soon

mise the concentration of the salts to léthal levels.

8. -- The cells should be subjected to a minimum of handling

until their limils of tolérance hâve been established by expérience.

It is usualy more practical to isolate a score of cells (juickly than

to wash three or four exhaustively and risk losing ail as a resuit

of excessive manipulation.

This method has been extensively and successfully employed by

pRiNGSHEiM and by Pkovasüli for motile, llagellate unicells, which

can often be recognized at low magnifications by their character-

istic swimming movements. Such organisms hâve the further

advantage that one can allow them to swim clear of contaminant

cells and débris. Phototaxis may jirovide an additionai aid in

isolation, the cells being introduced at the darker side of the

droplet and allowed to swim towards the light into fresh medium.

I). -- Filamentoiis algae. — When attempting to isolate spe-

cies of filamentous algae and forms with more complex thalli, it is

a good precept to work with unicellular stages whenever possible.

Some rilamentoiis bliie-green or green algae, such as strains of

Nosloc or Ilnrmidiiim, tend to fragment into singic-celled sections

in old cultures, so that they can l)e treated like unicellular algae

and isolated by streaking or by individual cell isolation on agar.

Some thalloid species of Pra.^iiola ])roduce akinetes which may be

handlcd in the saine way. Other filamentous forms can be frag-

mented mechanically by chopping with a needle or scalpel or

with the edge of a microscope slide; clumi)s of some of the more

tenuous blue-green algae can be disjiersed into short segments in

a Thomas homogenizer of the pestle-and-mortar type. The sinaÜer

Source : MNHN, Pan

THE ISOLATION OF ALGAE

187

the fragments, lhe Icss lheir chance of being associated with conta¬

minants: one may expect a clone to develop from even a single

cell, provided that it lias not been killcd in the process.

With other green or brovvn algae one can often take advantage

of the ])rodiiction of zoospores, which may occur spontaneously,

especially when lhe thalli are brought into a laboratory warmer

than their original habitat. Such zoospores may be streakcd on agar

or isolated with a capillary pipette in the saine way as permanent

llagellates; species of Stigeoclonium, Enteromorpha, Ectocarpus

and Chordaria hâve been successfully isolated in this way. Here,

it may be pointed ont, are spécial circumstances in which it is

expédient to try to teiescope Iwo steps, the culture of a clone, and

its isolation in bacteria-free condition, into one (see III, F).

III. — ELIMINATION OF BACTERIAL CAINTAMINANTS.

Starting from a iini-algal culture obtained as described above,

one can now go on to obtain pure cultures by sonie of lhe tech¬

niques already described, with only slight refinements to eliminatc

bacteria. As far as possible, one should work from young cultures

in liquid media, in which the algal cells arc robust and growing

actively, and insuffîcient organic matter will hâve accumulated in

the medium to hâve produced a dense bacterial üora. Bacteria,

though not in évidence, may, nevcrtheless, be présent in numbers

equulling those of the algal cells, or even exceeding tliem by a

factor of 10 - 100. Usiially only 2-3 species occur in abundance as

contaminants in any one culture, but more than one step may be

needed to eliminate them ail. For this reason, too, one should

progress from the most recent subcullures, with fewest contamin¬

ant species, thus providing the besl source of algae for the final

stages or inirification.

A. — Streakiiig on agar. — Suspensions of unicellular algae

capable of growth on agar should now be streakcd on a medium

containing a trace of organic matter, c.g. 0.02 %Bacto-tryptone (1).

This is hardly likely to inhibit algal prolifération, and indeed

may wcll promote it, but its chief purpose is to encourage growth

of bacterial colonies. The plates this üme are incubated in light

for only a few days, just sufïîcicnt to allow deielopment of pin-

point colonies visible under the dissecting microscope. A longer

period is to be avoided, otherwise bacteria may spread over the

surface to hitherto uncontamined colonies. Agar-digesting bacteria

(1) Difeo Laboratories, Detroit. Mich., U.S..A..

188

RALPH A. LEWIN

occur commonly in marine cultures, l)iit they rarely présent a

serions problem in plates incubated for only a few days. Well-iso-

lated, apparcntly iincontaminated algal colonies are eut ont with

the tlamed tip of a tiattened ncedle, and transferred to tubes of

stérile medium. Il may be necessary to-repeat the streaking proced¬

ure two or three imes before l)acteria-free colonies are obtained.

These are usually best sub-cultured in liquid media, but for some

bliie-green algae and i)cnnate diatoms agar slants are often found

))referable. All?:n (1) finds that some blue-green algae do not take

kindly to cultivation on the surface of agar. She bas achieved consi¬

dérable success, especially witli unicellular forins, by using poured

agar plates, and excising colonies from within the agar mass.

B. - Isolation of single cells or filaments on agar. — Even if

thej' do not nuiltiply on agar, cells whicli are hacteria-free can be

detected and isolated in the manner just dcscribed. But usually it

is simpler lo isolate cells individually on agar, and to free them

from adhèrent bacteria by drawing them with the point of a needle

for a few millimètres over the surface. Even filaments can be

cleaned in Ihis way, looped over the needle tip and dragged throiigh

the agar beneath the surface.

C. — Washing bg capillary pipette. — Washing is the prefer-

red melhod for the larger tlagellates. Here again agar, rather than

glass, should be used to support the droplets, vvhich can readily

be apidied with a lîamed wire loo]) dipped into the stérile nutrient

solution. Before we proceed to observe ail the précautions recom-

mended by Pringsheim, it is worth a few moments to consider the

varions jiotential sources of contaminant bacteria. The air can be

usually negleclcd; even if 80 separate viable bacteria fall on an

exposed plate in the space of ten minutes, there is only a 1 %

chance of any given square millimétré of agar surface being so

contaminated. The pipette will be stérile if it has been recently

drawn ont. The cotton plug, frequently introduced into the wide

end of the jiijiette, can probably be dispensed with, except as a

barrier to saliva. (Try bubbling exhaled air into nutrient broth for

varions periods. if yoii doubt its low bacterial count!). The

medium, however, is the chief source of contamination, so let us

do a few sim])le calculations. To err on the side of generosity or

jiessimism, let us say that it contains 1,000 bacteria for each algal

ccll. Let us assume, further, that our cells are picked iip in 1 mm'

ot medium lanother overestimate), and expelled into a drojilet

10 miiT' or more in volume. Then each répétition of this operation

dilutes the bacteria at least by a factor of 10; and, by the fourth

Sourcs ■ UNHN,

THE ISOLATION OF ALGAE

189

transfer, medium contamination is negligible. Usiially the passage

of 10-20 cclls each tlirough 3 droplets suftices to give a few pure

cultures; with every further passage more cells become lost and

viability tends to be reduced.

The most troubicsome liacteria to eliminale are those actually

adhering to the algal surface, especially when it is gelatinous.

HoAN-ever, this difliculty is not serions in those algae Avhicli, like

(Jilamijdomonas, produce daughter cells endogenoiisly, since cach

new génération starts Avith a clean skin. We know very little about

the cpiphytic hacterial Oora of naked flagellâtes, but it seems

imlikely that contaminants, if they oceur, could be detached by

further washing Avithout serions damage to the algal cell. In siich

cases, perhaps, the use of sélective antibiotics Avould be indicated

(see Iir, E).

Surface sterilization of fîlamentons thaUi. - Filainentons

algae can soinetimes be surface-sterilized by a lirief immersion

in a solution of a liactericide such as hydrogen peroxide, sodium

hyjiochlorite, or chlorine water. Mercuric chloride bas been ein-

ployed for this purpose, but the toxic cation is difïicult lo remove

once it has been adsorbed, and less persistent agents are préférable.

If necessary, the alga is eut up into short but viable lengths, and

these are immersed in commercial-grade sodium hyjiochlorite solu¬

tion, e. g., 0.1 or 1.0 % eau de Javel, for 1. 3 or 10 min. They are

then rinsed immediately in Iavo changes of stérile medium, and

fragments of suitable length isolated into separate tubes. If it is

not to kill the alga, surface sterilization may dépend for its success

on the presence of relatively thick, imperméable cell Avalls. F’or this

purpose, one may soinetimes take advantage of specially résistant

cells, such as the hypnocysts of Pithophora, spores of Cijlindro-

spermum, or oospores of Chara, but difïiculty may be experieneed

in übtaining germination of such « resting » stages.

Success has been reported in the use of ultra-violet light for ste-

rilizalion of certain blue-green algae (5), though the mechanism

of its action is not clear. If the filaments Avere rotated so that the

bacteria on ail sides receivcd a Icthal dose of radiation, it Avould

seem likely that the algal filaments, themselA’cs only a feAV microns

in diameter, would aiso hâve succuinbcd. Thcre appear to be no

critical data on the dilferential sensitivity of bacteria and algae

to iillra-violet radiation. It is probable that, at controlled doses,

most of the bacteria and most of the algal cclls are killed, but that,

among the survivors, lhere are sonie viable algal cells Avhich hap-

pen to be dissociated from living bacteria; and it is from these that

pure clones can be established. Incidentally, the chances of such

190

RALPH A. LEWIN

cells bcaring U-V induced mutations, and therefore differing from

the parental stock, are probably ne.gligible for our purposes.

!n some cases, rdamenlous algae can bc isolated and purificd by

techniques siniilar to those einployed for mycelial fnngi. From the

edge of a colony of Stigeocîoniiim or Phormidiiun growing on agar,

young filaments at or below the surface can be excised singly, and

may give rise to pure cultures when transferred to fresh media.

However, as algae generally grow less rtipidly than fnngi, and

bacterial contaminants tend to spread along the interfaces bound-

ing the filaments, such attempts are oflen imsuccessfni.

E. _ The use nf antihintics. — Since the introduction of anti¬

biotics into therapy, the problem of ofataining pure cultures of

algae and other organisms has been considerably facilitated. Pro-

bahly the most favonred technique involves serial transfer, at 1-3

day intcrvals, throngh nutrient solutions containing penicillin,

streptom 5 ’cin, or a snitable mixture (6, 11). For exainple, pure cul¬

tures of Goniolrichiiin, a filainentous red alga, were obtained after

a single passage in a medium containing streptomycin (filter-sterili-

zed), since the alga proved capable of slow growth in the presence

of concentrations as high as 0,05 %, whereas the associated bac-

teria were ail killed in media containing more than 0,01 % of

this antibiotic. However, it shonld be remembered that the algae

comprise organisms with widely ditîerent sensitivities to snch

agents (10). For each species, preliminary tests, to déterminé the

tolérance levels to each antibiotic, will probably repay the etîort so

spent. It migbt be worth pointing ont (4) that many of the algae so

far isolated with the helj) of antibiotics (6, 12) could easily hâve

been obtained by more old-fashioned means.

F. — One-step purification. — In attempting to ohtain pure iso¬

lâtes of the larger thalloid forms, it is often expédient to by-pass

the preliminary ste]) of isolating clonal but contaminated cultures.

This is because zoospores are endogenously formed, and, iip to the

time of rupture of the parent sporangium, bacteria-free, a condi¬

tion which may not recur until alfter the completion of a végétative

cycle, weeks or months later. It is therefore recommendcd that the

thallus be well rinsed and immersed in stérile medium, in which

the spores are discharged and may accumulate at the lighted edge

of the meniscus in the culture vessel. They should be isolated as

soon as possible, by streaking on agar or by pipette-washing

lechniques, before bacterial prolifération can get imder way, and

il is often possible to achieve pure cultures by this means.

THE ISOLATION OF ALI'.AE

191

Other circiimstances may arisc in which it is préférable to pro-

ceecl directiy froin natural material to pure culture. For example,

it seems that in nature inany planktonic diatoin cells are tree of

associated bacteria, Ihough contaminants multiply rapidiy when

samples are transferred to the laboratory in a restricted volume of

medium, in whicb extra-cellular métabolites tend to accumulatc. In

sucb cases, provided suitable conditions for cultivation can bc

found, il is préférable to isolate cells as soon as possible after col¬

lection, before bacteria bave had an opportunity to multiply.

Certain algac, including many llagellates, require spécifie organic

nutrilites for growth, and, uniess these are required at very low

levels of concentration (e. g. vitamin B„, of which 0.1 g/l usually

sufïîces), bacterial contaminants may be encouraged when snch

substances are added. Moreover, one usually does not know, before

pure cultures bave bcen established, what precisely are the organic

nutrilites required by the alga, so it may be necessary to add a

coinplex mixture of sujiplements, such as yeast extract. In many

cases of this sort, one bas to forego the intermediate steps of algal

isolation and try to proceed directiy to pure cultures. Cells of the

phiyîotroph Poleriochromonas were isolated by capillary pipette

and transferred into dilute suspensions of the bacterium Escheri-

chia coli, in this way eslablishing two-membered cultures, from

which pure cultures were obtained later when the nutritional

requircments had been determined. But here wc are cncroaching

into the realms of ex]ierimental protozoology, and jierhaps over-

stepjiing the bounds of this discussion of algal cultures.

IV. — SPECIAL CONSIDERATIONS.

A. — The piirifij of cuUures. — It should be stressed that, in

ail cases where pure cultures are required, they should hâve orig-

inated froin a single cell or filament. To introduce more than one

unit into a culture tube is not only unwise from this .standpoint,

but also wasteful of effort. The unwisdom lies in the fact that, by

starting with more than one cell, we may vitiate our idéal of a

clonal culture. The waste of eff ort is ajiparent if we recognize that

each inoculum increases the chances of contamination. For let us

assume that we are isolating llagellates by capillary pipette, and

that each has one chance in 3 of being bacteria-free, Two cells in

a tube hâve then only a 1/9 chance of initiating a pure culture; so

that, with twice as much Work, we hâve rediiced our chances of

success by a factor of 3. Three or more cells |)er tube would be cor-

respondingly worse. It has been argued that, in the case of a sen-

192

BALFH A. LEWIN

sitive species, thc prcsence of several colis in a tube might possible

increase their chance ot survival, by libération o( some sort of

cctocrine; but this is oxtremely unlikely. A cell là g in diameter

bas a dry weight of aliout lü » g. Evcn if this comprised as inuch

as 1 % of such a hypothctical ectocrine, and even it it wcre com-

pletely dissolvcd in 10 ml. of culture medium, this would give. a

final concentration of 10-« mg. h, almost certainly neghgihle.

B_ Tests for contaminants. — After a period, those of our

isolâtes which survive and grow give rise to cultures ot cells dense

enough to be visible to the naked eye. Obviously this svill take

longer than it would aller a mass iiioculalion ; at a reproductive

rate of one doiibling per day, wc musl wait about 3 weeks for the

cell poimlation to rise froin one to a million. To détermine which

ot these cultures are contaminated and w'hich bacteria-tree, it is

iisually onlv necessary to transter a looptiil to the surface ot an

agar mediuni compounded with 0.1 % Bacto-tryptone or some

similar protein hydrolysate. On a single Pétri plate as many as

50 spots can be tested, rcgularly spaced on a coded lattice so

that each is referable to a single culture. After 2-3 days’ incubation

at room température, the plate is examined iinder the dissectmg

mieroscope, w-lieii bacterial growth is readily apparent in spots

from contaminated cultures. Clones suspected of being bacteria-

free can be further tested by sub-cultiire in some nutrient broth,

perhaps followcd by streaking on agar; but such refined tesU are

only necessary for ultimate assurances ot purity. It is conceivablc

lhat highly spécifie symbioses may occur, in which cryptic or

very fastidious bacterial associâtes would not reveal themselves

by such tests, but I know of no such case. Usually, it bacteria are

jiresent. they are ail too apparent in organic media.

c, _ Algae and fnngi as contaminants. — The chances ot aerial

conlamination by algae are negligible. The cells in air are nume-

rically rare, and those of almost ail species are killed by drying.

Filtration throiigh ordinary filter-paper docs not remove ail viab e

algae from natural walersi but no algae can withstand even a brie

lieriod of boiling. Boiled sea- or lake water, for examplc, is there-

fore quite satisfactory as a base for crude cultures ot planktomc

algae. .

Fungal spores are common as aerial contaminants, but the eliini-

nation‘of fiingi can usually be eltected by a single passage ot the

alga through a liquid medium. In the tew cases where a fungous

contaminant proves dilBcult to eliminate by ordinary mcans, the

use of one of the new mycostatic agents might bc worth investi-

gating.

Source : MNHN, Pans ■

THE ISOLATION OF ALGAE

193

V. — MAIXTENANCE OF CUI.TVHES.

The viahility of algae in culture varies considerahly with species.

Sonie should be transferred every 2-4 weeks, others Avili last as

inany inonths at room températures without serious réduction in

cell viability. As a general riile, il is protiably advisable to keep

cultures, on agar if iiossible, at tenijieratures and light intensities

lower tlian tliose at which lhey wcre maintained during active

growth. Many algae, however, soon die when subiected to treezing

temiieratures. Most algae are killcd by drying, so évaporation

should be reduced as niuch as practicable. However, the sealing-

over of cotton-plugged tubes is not to be recommended Avithout

spécial precaulions, since fungal spores AA'hich inay be présent in

the top of tbe plug readily genninate in the hnmid conditions so

produced, and tbe hyphae 'migrate down moist glass surfaces to

invade the culture. ScrcAV-capped glass vials jirovide the best solu¬

tion of this problem, if the inaterial froin which the caps are made

retaiiis its shape and reinains physiologically inert after autoclav-

ing. In using thein, hovA'eAer, we should not lorget that algae arc

])hotosynthetic organisnis. If the caps arc screwed doAA’n during

groAvth, access of CO, is prevented: if the level of illumination

exceeds the compensation point, the cells inay die rapidly, perhaps

as a resuit of photo-reduction of some essential cell constituents.

Caps of polyethylene, Avhich is KlO-lüüO times as permeable to

CO, as to Avater vapour, may provide a further improvenient, Avhen

this inaterial is made available in modifleations Avhich can be

autoclaved without deformation.

Valuahle cultures, in some cases only isolated after considérable

effort, should not run the risk of being lost to science as a resuit of

an accidentai breakage, or of failiire of the réfrigération equipment

in one laboratory. For this rcason, it is recommended that, as soon

as convcniently possible, siib-cultures be dispersed to other labor-

atories, lo colleagues interested in siinilar phases of investigation,

and to algal type-culture collections (sce VHl).

Vt. -- SPECIFIE IDENTIFICATION OF CVLTVREÜ ALGAE.

Since most algal species hâve been originally described from

natural aquatic habitats and not from cultures, conditions ap-

proaching the natural should be reproduced as closely as practic-

ahle before any taxonomie study is undertaken. As a rule, young,

actively growing cultures in dilute (but not nutrient-depleted)

media provide the most characteristic inaterial for végétative mor-

194

RALPH A. LEWIN

phological leatures. As for the induction of reproductive struc¬

tures, tlîis would necessitate a chaptcr in itself, beyond the scope

of the présent article.

\'ir. — TECUMCAL CONSIDERATIONS.

A few words might be added regarding certain spécial précau¬

tions which hâve heen recommended for algal culture work.

A- — Microscopes. — A binocular dissecting microscope, with

a standard mirror. or a direct source of light beneath the stage,

is to be recommended. The magnification and lighting are factors

to be experimented with, and only expérience can indicate the

most favourable conditions, which will be somewhat different for

each investigator and each alga. A combination of transmitted and

rellected light, or light transmitted obliquely so that the algal cells

gleam against a dark background, will often facilitate the manipu-

latory procedures. The use of thin layers of clarified agar reduces

confusion of cells with glinting foreign particles in the medium. It

is often convenient to move the Pétri plate with one hand and the

instrument with the other, exj)erimenting iintil a favourable modns

operandi is discovered. Hand supports on either side of the stage

are a great help. Allow a few minutes for tensions to relax and

fingers to become steady: even a slight smoker’s tremor looks

like parkinsonia at 5()x diameters. An hour or so of practice is

tinie well spent; this is usually sufïicient for any but the most

délicate operations.

B. — Instruments. — As for manipulative instruments, the fol-

lowing four will generally sufïîce, made from nichrome or plati¬

num w’ire and mounted in conventional handles. (1 ) A loo]) about

4 mm. diameter, for streaking, etc. (2) A smaller loop, less than

1 mm. diameter, for picking isolated colonies which happen to

lie close to potential contaminants. (3) A needle, sharpened on

fine sandpaper and bent through 30-40'’ to form a clawed end.

(4) Another needle, flattened by hammering into a small spatula.

A minute loop of tungsten wire, thinned by anodic etching in

acid to a hair-like gauge, bas been recommended for isolating

selected diatom cells from a mixture. A hypodermic syringe, with

a needle filed off almost transversely, has been used for picking

colonies from agar plates. And doubtless the expérimenter with

a modicum of ingenuity will devise other gadgets to suit his parti-

cular tastes and purposes.

Source MNHN, PansJ

THE ISOLATION OF ALGAE

195

C. — Glassware. — Glassware, preferably of a borosilicate

glass such as « Pyrex» (1), should of course be clean, washcd as

soon as possible before the dirt drics on. Chromium ions tend to

adsorb to the surface of glass, and may leach out later into culture

media (7), so I prcfer to avoid chromatc cleaning mixtures. Con-

ccntratcd sulphuric acid, saturatcd with commercial-grade sodium

nitrate, is cheap, and seems just as effective. Where détergents

are used, spécial care should be taken to wash them out, since they

are vcry inhibitory to many algae. Tubes then rinsed and soaked

in hot tap water, followed by two changes of distilled "water, are

adequately cleaned for most purposes; the multiple changes re-

commended by some faddists are unnecessary. (Test this for your-

self with. say, tubes soiled with milk and ink; what remains at-

tached to the glass after three rinses is virtually unaffected by

another 20). Glassware, once washed, should not be inverted over

dirty wooden pegs, but allowed to drain and dry freely in air.

D. _ Media. — Since Bold and Pkinosheim bave extensively

discussed the composition of culture media, only a few notes will

be added here.

Solutions should be prepared with distilled water which has not

been in prolonged contact with copper or brass tubes or fittings.

(However, in many cases the copper so introduced may be at a

concentration considerably helow that deliberately added with

otlier essential trace éléments to the medium). A Utile common-

sense might be used here ; to employ scrupulously washed glass¬

ware and triply-distilled water in the préparation of media xvhich

are ultimatcly supplcmented by 1 % unwashed agar or 10 % soil

extract is somewhat imreasonable. In dealing with organisms

from littoral rock-pools or brine-springs, it is recommended that

preliininary tests be made to ensure isotonicity of culture media, or

to adapt the algae to dilute sait concentrations more convenient

for laboratory use than those of the natural habitat. The initial pH

of a medium usually changes after autoclaving as atmospheric

CO, is absorbed, so it is well to allow a day or so between steriliz-

ation and inoculation.

The use of ammonium salts is generally to be avoided, for at

least three reasons. Firstly, in media of slightly alkaline pH, even

a few parts per million may be inhibitory or toxic to certain sen¬

sitive forms, notably some diatoms, Chrysophyceae and Dinophy-

ceae. Secondly, ammonia distils off when media of high pH are

autoclaved, the nitrogen concentration being thereby reduced to an

(1) Corning Glass AVorks, Corning, N. Y., U.S.A.

196

RALPH A. LEWIN

linknowii qiiantity. And thirdly. the uptakc of ammonium ions by

tolérant species is almost aiways more rapid than that of nitrate,

with the resuit that the pH droijs. In weakly bulîered solutions

this may proceed to léthal levcls; but, even if it does not, it enor-

mously reduces the rate of transfer of atmospheric CO, through

liquid media.

E. — Incubation chambers. — Culture rooms, cupboards, or

modified refrigerators jHovide more cqnstantly controlled condi¬

tions than the ti-aditional north window. Whenever possible, an

einergency thermostatic cut-out should be included in the light cir¬

cuit, so that, in case of a breakdown in the cooling unit, the culture

cabinet may not be Iransforined into an oven by the heat output of

the lamps. Lights providing 100-300 foot-candles (1.000-3.000 lux)

are suitable for growtli of most algae, though some blue-green

algae tend to be inhibited by the higher intensities. There is no

uncquivocal evidence that alternation of light and dark i)eriods

is essential for the growth of any alga. Most fresh-water species

Avhich hâve been isolated in culture can grow at températures up

to 20° or 25° C., but not many can tolcrate much higher tempéra¬

tures. Such few marine algae as hâve been cultivatcd from tempe-

rate shores seem to prefer a lower range of 1()°-15'’ C..

F. — Réduction of coniaminaiion. - - Pétri dishes should bo

incubated upside-down, otherwise there is danger of xvaler conden-

sing on the underside of the lid and drijjping info the middle of

the agar surface. It is convenient to close agar slants with cotton

plugs; but rimless test-tubes containing liquid media can be more

quickly and cleanly covered by glass caps (1), which fit loosely

over the top (Fig. 2). The test-tube rim should be slightly notched,

to rcduce the danger of an air-tight seul which would prevent

access of atmospheric CO,. Such cajis admit light from above, and

retain sterility in a zone outside as well as inside the rim, so that.

if desired, cultures may be transferred by pouring directly into

a fresh vessel. \^'^ith no other précautions, even rich brolh cultures

retain sterility for inonths under normal laboratory conditions;

however. the réduction of draughts or of wide ranges of tempéra¬

ture is generally désirable.

Vni. — CULTURE COLLECTIONS.

A large proportion of the algal cultures in the collection which

Pringsheim initiated at Prague during the 193(fs were brought to

Cambridge just before the second World War. Other ofTshoots

(1) E. g. « Cencaps » : Central Scientific Co., Cambridge, Mass., U.S.A.

Source MNHN, Pans

REVUE ALGOLOGIQUE

Nii« Sér.. T. IV; PI. 9

Source MNHN, Paris

THE ISOLATION OF ALGAE

197

of Ihis original collection, now considerably augmentcd, hâve more

recently been set up and are being maintained in Bloomington,

Indiana, in the New York Botanic Garden, and elsewhere. In ad¬

dition, smaller culture collections for varions purposcs hâve becn

started in a nuinbcr of centres. The fact that the Caml)ridge col¬

lection now lists some 8Ü0 strains, and the two large U. S. A.

collections more than 400 each, attests to the success of algal

isolation and culture inethods in récent years.

It is to be hoped that the expanding use of pure cultures of

algae will justify the elTorts expended in isolating and maintain-

ing them.

REFERENCES

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17. 34-53, 1952.

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parvum (Chrysomonadina). — Bull. Res. Council Israël, 4 , 144-149,

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12. Spencer C. P. — On the use of anlibiolics for isolating bacteria-free

cultures of marine phytoplankton organisms. — Jour Mar biol

Ass. U. K., 31. 97-106, 1952.

Fig. 1. — Dilution streaking on agar plates.

A. Diagrams showing pattern of streaks, starling at top and left, and

working round plate. ’

B. Photograph of plates, showing progressive spacing of algal colonies.

Fig. 2. — Test-tube cultures of algae, closed by glass caps.

A New Method for

the Permanent Préservation of Algol Materiol

for Microscopie Study

by I. Mackenzie LAMB

Farlow Hcrbarium, Harvard University, Cambridge, Mass.

One of the drawbacks attending the formation of uscfiil refe-

rence collections of marine algae has heen the necessity of preser-

ving.portions of the material in liquid for later microscopie exa¬

mination. Bottle or vial collections, preserved in fofrmalin or

alcûhol, croate storage problems on account of their bulk, require

a System of cross-indexing with the corresponding herbarium

mounts, and ([uite often, some years later, when the critical

moment for examination arises, may be foiind to hâve dried uji

and become worthless for the study of finer microscopie structure.

The following method, \vhich utilizes a solid, water-soluble, non-

volatile medium (polyethylene glycol) for the same purpose, has

been fourni to obviate ail these disadvantages and to give equally

satisfactory results.

Polyethylene glycol is commercially marketed under the regis-

tered trade name of « Carbowax » by the Union Carbide Chemicals

Company, 30 East 42nd Street, New York 17, N.Y. It is obtainable

in varions grades of dilîerent moleciilar weight, designated, in

order of ascending M.W., by numhers ranging from 200 to 6000.

The grades of lower M.W. are scr.ü-liquids or soft solids at room

température: those above 1000 are solids of various degrees of

hardness, with a range of consistency varying from that of soft

beeswax to that of hard paraffin. The melting points of tbese

higher M.W. grades lie between 40° and 55“ C. AU of them are

readily soluble in water, do not deteriorate with âge, remain stable

even at températures somewhat above their melting point, and

are not decomposcd by microorganisms.

On account of their resemblance in consistency to paraffin wax

and their solubility in water, very etTective use has been made of

blcnds of the higher M.W. grades of «Carbowax» (1500, 4000)

as a substitute for paraffin in histological work involving imbed-

ding and cutting of serial microtome sections (Blank 1949; Blank

Permanent préservation of Algae

199

and McCarthy, 195U). Their great advantage in tins respect is the

complété élimination of time-consuming déhydration and rehydra¬

tion throiigh graded sériés of alcohols. Préservation of histolo-

gical structure in « Carbowax » imbedded material was found to

be actiially siiperior to that obtainable by the traditional paraffîn

wax technique.

So far as the présent author’s knowledge goes, there has been

only one previous attempt to use « Carbowax » for the permanent

préservation of organic tissues. Sills and Gold (1950) describe a

method in which gross pathologie specimens (slices of lungs and

other organs) are infiltrated with « Carbowax », allowed to harden,

and coated with varnish and finally a thin layer of transparent

méthacrylate plastic, which gives the speciinen a hard surface and

allows il to withstand reasonable handling. This method might

hâve some algological ai>plications for the" three-dimensional pré¬

servation of lleshy forms such as Leathesia, but the method sug-

gested in the présent article aims at preserving portions of vou-

cher material compactly and permanently for later microscopie

examination, rather than the préparation pf whole specimens in

natural appearance for teaching or exhibition purposes.

Silice « Carbowax » tends to be hygroscoiiic in the lower mole-

cular weights, the grade most suitable for the présent method is

4000, which has little or no tendency to absorb moisture froni the

atmosphère. Its higher melting point (55 “ C.) is also an advantage

for the jireservation of material in botter climates.

The following is an outline of the technique involved :

Fixed algal material is transferred, either from 5 % formalin

(after brielly washing with water) or from 70 % alcohol, directly

into a small bath of meltcd « Carbowax » 4000 kept in a thermo-

staticaliy controlled imbedding oven at 56” C. Depending on the

thickness and biilk of the material, it is left in the melted wax

at this température for a period ranging from half-an-hour (for

dclicate or filamentoiis forms) to 2 hoiirs (for thick or densely

parenchymatoiis specimens). Following this, transfer is made to a

second bath of fresh « Carbowax » 400(1 for a similar period. At the

end of this time the algal material is complctely dehydrated and

impregnated with the «Carbowax», and will bave shrunk consi-

derably and taken on a tougher, often almost wiry consistepey.

A plain paper card is now prepared for the specimen by typing

onto it the relevant data-genus, spccies, serial number, etc.

Ordinary 4X6 inch plain index cards arc quite suitable for this

purpose. The algal material is now taken ont of the meltcd « Car¬

bowax » and immediately placcd on the card and spread ont as

200

I. MACKENZIE LAMB

evenly as iiossible. Bcfore the « (,arbo\vax harOens the card is

lilaccd bclween two shefts ot waxed paper (o( the tyjie iised tor

Avraiiping foodstufîs) and flattencd betwecn two pièces of card-

board until it solidifies. A cardboard pamphlet cover, interleaved

with.two sheets of waxed palier, and kept closed by a rubber band,

allows this to lie doue convenicntly, and to accclerate the hardening

of the moiinl with maximum liomogeneity it is best to place the

cover with enclosed specimen in the freezing conipartment of a

refrigcrator for a few minutes.

When the card is cool, the algal material has becoine fixed to it

in a thin layer, iminovably iinbeddcd and permaneiitly protected

from mechanical damage or détérioration. Each card can now bc

enclosed in an individual envelope, siich as is iised for small plant

spécimens in herbaria. These envelopes take iip so little space thaï

they can be stored upright in card index drawers, or if desired,

fastened dircctly to the herbarium sheet with the corresponding

dried specimen, there to remain iintil such tinie as they inay be

needed for microscopie examination.

To rehydrate the sapiple for this purpose, ali that is necessary is

to place the entire card, or a portion eut from it, into a basin ot

lukewarm water. Within a few minutes the « Carhowax » dissolves

completely, and the algal sample imbibes water and swells up to

its natural size and form. It can now be scctioned and mounted

for microsco])ic examination as with Iresh material. The préser¬

vation of microscopie structure is excellent, even in such délicate

forms as Edocnrpns and ('^eraniinin.

By seiccting a suitable portion of the mount. it is often possible

to cul good transverse sections of the imbedded material with a

razor blade on the card itself without the nccessity of dissolving

it otr in water. The sections, transferred to a dro]) of water on a

slide with a dry brush or needle, immediately expand as the

« Carbowax » goes into solution.

Even extremely dclicate and mucilaginous filamentoiis forms.

like Balravhnspermum, can be successfully preserved by this me-

thod. In such cases, owing to the difficulty of transferring nume-

rous minute individual filaments from one bath to another, it is

best to pour the fixed material out of the vial onto a dise of white

filter paper, which is then placed, with the algal material upper-

most, on the surface of the inelted «Carbowax». Imprégnation

lakes place from below through the filter paper without distur¬

bance of the material, and the whole dise is finally placed on a

card and allowed to cool and set hard in the iisual manner.

Permanent préservation of Algae

201

So far. this inethod lias been used to préservé matcrial only for

routine anatomical examination, but, depending on the methods

of initial fixation used, there seems to be no reason why it should

nçt yield equally satisfactory results in the study of cytological

dotail.

BIBLIOGRAPHY

Blank h. — A rapic! imbedding tcchnic for histologie sections emplo-

ying a water soluble Avax. —• Joiirn. Invesl. DermatoL, 12, 95-99, 1949.

Blank h. and McCarthy P. I>. — A general method for preparing

histologie sections with a water-soluble wax. — Journ. Lab. and Clin.

Med., 36, 776-781, 1950.

SiLLS B. and Gold G. — A new technique for the préservation of patho¬

logie specimens in a dry state — Quart. Bull. Sea View IIosp., lî, 159-

168, 1950.

Source MNHN, Paris

BIBLIOGRAPHIE

Les conditions actuelles de l’imprimerie ne permettant plus d'envisager la

parution d’une Bibliographie Algologique méthodique comme dans la première

série de cette revue, il ne sera publié que des indications bibliographiques con¬

cernant les ouvrages importants ou les mémoires d’intérêt général. Les lecteurs

de langue française peuvent trouver un complément d'information dans la

«Bibliographie» paraissant en annexe au «Bulletin de la Société botanique de

France» et dans le «Bulletin analytique» publié par le Centre National de la

Recherche Scientifique.

M'"" P. Gayral. — Algues de la côte Atlantique marocaine. —

Société des Sciences Naturelles et Physiques du Maroc, Rabat, 1958.

1 vol. rel. toile pet., in-8", 524 ])., 152 pl. })hotogr. en noir et en

couleur. Prix : 3.600 fr.

A part l’Aflas des Algues marines d’HARiox, trop ancien pour être

réellement utile et celui de Wuitner, trop plein d’erreurs grossières

pour que son usage puisse être recommandé, il n’existait pas en langue

française d’ouvrage élémentaire commode que l’on puisse conseiller

aux étudiants et amateurs désireux de s’initier à l’étude des Algues

marines.

Le livre que vient de publier M"** Gayral, professeur de Botanique

à la Faculté des Sciences de Rabat, comble cette lacune car il constitue

un excellent guide, pratique et simple en même temps que de haute

tenue scientifique cl bien au courant des travaux modernes. Bien que

consacré aux Algues du Maroc, il pourra être largement utilisé sur nos

côtes où existent également la plupart des espèces décrites.

Après une introduction sur le milieu marin, la répartition des .Algues

et des renseignements pratiques sur leur récolte et leur conservation,

l’auteur résume dans des tableaux originaux les caractères principaux

des classes, ordres, familles et genres d’algues marines marocaines.

Un autre chapitre bien documenté est ensuite consacré à l’utilisation

des Algues marines.

Une clé de détermination des espèces les plus communes de la cote

atlantique du Maroc précède leur description accompagnée de dessins

et de photos originales.

Le texte consacré à chaque espèce comprend, outre une description

morphologique et anatomique, des paragraphes consacré.s à sa biologie,

son écologie, sa répartition géographique et éventuellement .scs usages!

L’ouvrage se termine par un glossaire des termes scientifiques utili.sés

cl un index aphabétique des espèces citées.

On doit féliciter grandement M'"^ G.ayral d’avoir entrepris et mené

a bien lu rédaction de eet ouvrage de haute vulgarisation qui intéressera

non seulement le spécialiste pour les observations originales qu'il

renferme, mais aussi et surtout les débutants, étudiants ou amateurs

à qui on peut le recommander sans hésitation. Nul doute qu’il ne déter¬

mine, tant au Maroc qu’en France un renouveau d’intérêt pour les

Algues marines et ne suscite des vocations d’algologue parmi ses

Iccteur.s.

J. Feldmann.

Source MNHN. Pans

BIBLIOGRAPHIE

203

Ernst J. et Feldmann J. — Une nouvelle Delessériacée des

Côtes de Bretagne : « Drachiella spectabilis » nov. gen. nov. sp. —

Reu. gén. Rot., 64, pp. 466-478, 7 fig., 1957.

Les auteurs décrivent une algue rouge, de la sous-faniille des Nlto-

phylloidées, du groupe des Mgriogramme.

Cette petite algue de 5-6 cm. a été trouvée en place, grâce au sca¬

phandre autonome, entre 3 m. et 25 m. de fond, sous les peuplements de

Laniiimria ochroleuca et L. hgperborea. Elle est largement répandue

dans la région de Roscoff, Morlaix et Lannion.

Ce nouveau genre est caractérisé par la localisation des tétrasporo-

cystes sur de petites folioles spécialisées réparties à la surface de la

fronde et constituant des tétrasporophylles. Les plastes rubannés ont

une structure très voisine de celle qu’on observe chez Mgriogramme.

Drachieila est une algue à stipe pérennant à fructification hivernale,

et à lame foliacée annuelle, tristromatique.

Les individus sexués n’ont pas été observés; le développement des

tétraspores est très lent et en 4 ou 5 semaines, les plantules n’ont que

4 à 6 cellules. ,

Le cycle annuel de Drachiella rappelle celui de Laminaria hgper¬

borea en compagnie duquel il vit. — P. By.

Feldmann J. et G. - - Recherches sur quel([ues Fioridées para¬

sites. — Rev. gén. Bot., 65, pp. 49-127, 30 ftg., 2 p!., 1958.

Cet intéressant mémoire s’attache à deux fioridées parasites ; une

Rhodomelaeée : Janczeivskia verriicaeformis parasite de Laiirencia

obtiisa et une Delesseriacée : Asterocolax Erglhroglossi parasite de

Erythroglossum .sam/r/aniini.,

Ces parasites ont un appareil végétatif très réduit, et des organes

reproducteurs rappelant étrangement ceux de l’algue-hôte.

Les auteurs étudient avec précision la morphologie et la cytologie <le

Laurencia obtasa et de son parasite. Chez le parasite et chez l’hôte ils

retrouvent dans chaque cellule externe un organite spécial, le « corps

en cerise ». Ce corps renferme un produit de sécrétion de nature com¬

plexe. ’

Le Jaiiczewskia ne possède pas de pigments assimilateurs et les pla.stes

incolores, filamenteux, ont l’aspect de gros chondriocontes.

Les organes reproducteurs de ce parasite sont décrits en détails : ils

ont la même structure et le même mode de développement que ceux du

Laurencia parasité.

Les auteurs suivent le développement des spores de Janczeivskia en

Laboratoire sur lame de verre et sur l’hôte. Sur lame de verre, les plan¬

tules, dépourvus de pigments assimilateurs, meurent rapidement. Sur

Laurencia, au contraire, les jeunes plantules à 2 ou 3 cellules, se fixent

par un rhizoïde qui pénètre ensuite dans les tissus de l’hôte et déve¬

loppe un nouveau parasite. Les cellules extérieures disparaissent alors.

L’élude de la Delesseriacée parasite .Asterocolax montre aussi un

parasite à plastes peu pigmentés, à appareil végétatif réduit, et à afTi-

nités systématiques étroites avec la plante parasitée.

Les auteurs tirent de cette belle étude des conclusions fort intéres¬

santes : ils proposent d’appeler « adelphoparasites » les parasites pré-

204

BIBLIOGRAPHIE

sentant des affinités systématiques très étroites avec leur hôte. Ce type

de jiarasite n'exerce pas, semble-t-il, d’activité nocive sur les tissus

parasités : ils mêlent souvent son cytoplasme avec celui de l’hôte et

réussit ainsi une « symliiose » intracellulaire. Souvent, en effet, on

observe des unions par ponctuations secondaires, avec synapses, entre

les cellules du parasite et celles de l’hôte.

Il semble donc que ces parasites soient des simples mutants hétéro-

ti-ophes (rcspèccs autolrophes très voisines de celles qui leur servent

d'hôtes;

Pour terminer les auteurs rapprochent le développement des spores

de Janezewskia de celui de certains Ascomycètes parasites. Il y aurait

là encore un argument en faveur de l’origine floridéenne des Champi¬

gnons. — P. Br.

Balegh E. ' - Plancton de la Campana Antartica Argentina

1954-1955. Physh. 2 I- 60 , pp. 75-108, 7 pl., 1958.

L'auteur présente une belle étude des Tintinnoidiens et des Dinophy-

cécs du plancton antarctique de la région argentine. Il montre que,

dans les travaux anciens sur la microflore de l'antarctique, le genre

Peridinium est pauvrement représenté. Son étude permet de combler

cette lacune : il signale 17 Dinoflagcllés dont une sp. nov. de Dinophijsis

et 11 sp. nov. de Peridinium. Toutes les espèces rencontrées sont

(•écrites avec soin, et d'excellentes figures montrent les détails précis

de la tabulation.

Une liste des stations avec le relevé floristique des Diatomées permet

d’avoir une vue d’ensemble du milieu planctonique. — P. By.

B.viæch E. - - Dinollagellés et Tintinnides de la Terre Adélie

(Secteur français antarctique) récoltes du D’’ Sapin Jalotstre

(1950), du D’^ Cendron (1951) et de M. Prévôt (1052) (Missions

])olaires françaises de P. E. Victor). — Vie et Milieu, 8, 4, pp. 382-

408, 184 fig., 1957-58, 1958.

L’auteur donne une importante étude systématique des Dinoflagcllés

du ])lancton antarctique, cette étude complète celle dont nous donnons

l’analyse ci-dessus. La région de la Terre Adélie fournit 18 espèces de

Dinoflagcllés, dont 5 espèces nouvelles appartenant au genre Peridinium.

Dans ce matériel, l’auteur retrouve 5 espèces qu’il avait décrites comme

nouveautés dans son travail sur le secteur antarctique argentin. Ainsi

.‘^ur les 18 Dinoflagcllés, 10 espèces sont communes à la Terre Adélie et

la région antarctique argentine.

A la fin de son article l’auteur donne la liste floristique par stations,

en indiquant les Diatomées caractéristiques qui accompagnent les

Dinoflagcllés. — P. By.

Boddeke R. — The genus Callithamnion in the Nethcrlands,

taxonomie and oecological Study. — Act. Bot. Neerland. 7,

pp. 589-604, 15 fig., 1958.

BIBLIOGRAPHIE

205

L’aulcur étudie les Callithamnion de Hollande, il prend ce genre au

sens large et ne sépare pas les Aglaeothamnion des CallUhainnion. La

distinction des 2 genres, préconisée par M"' Feldmann, est fondée sur

le nombre des noyaux et la forme des gonimolobes. Le L’’ caractère est

impossible à utiliser pour le matériel d’herbier, le second semble de

valeur douteuse, d’après l’auteur.

5 especes sont rencontrées en Hollande, l’auteur donne pour chacune

de CCS espèces, une élude complète : synonymie, structure, cycle annuel,

milieu écologique, distribution géographique; une carte montre les loca¬

lités des Pays-Bas.

Line belle série de microphotographies illustre cette intéressante

mise au point. — P. By.

SuBRAHMANYAN R. — Observations on the anatoiny cytologie,

development of the reproduction structures, fertilization and em-

bryology of Pelvetia canaliculata. I, II, III. - Joiirn. Indian Bot.

Soc., 35. 36, pp. 374-390, 12-34, 373-395, fig. et pl., 1956-1957.

Dans trois articles illustrés de nombreuses figures et de planches «le

microphotographies, l’auteur étudie successivement l’anatomie du thalle,

la mitose somatique, le développement du conceptacle, les structures au

moment de la reproduction, la méiose dans la gamatogenèse, la libération

de gamètes, leur fusion et la germination du zygote. Nous avons donc

l’étude précise de Pelvetia pendant tout son cycle vital. Dans la l'® par¬

tie, l’auteur observe en détail le mode de croissance du thalle à partir

d’une cellule apicale, en forme de i)yramide tronquée ijui se segmente

suivant ses 5 faces en donnant 3 tissus, méristoderme, cortex et moelle.

La transformation en tissu différencié, la production des hyphes, la

structure du stipe, constituent l’objet des principaux paragraphes. La

division somatique montre plus de 40 chromosomes (2n).

La 2'^ note est consacrée au développement du conceptacle, dont la

première division est longitudinale, tandis que chez les autres Fucalcs

celle division est transversale.

La réduction chromatique a Heu pendant la gamélogcncse et « n » est

voisin de 22. Chaque oogone donne 2 gonidies et chaque anthéridie,

04 spermaties.

La fusion des gamètes est observée ainsi que la segmentation du zy¬

gote et la germination. La production de 4 rhizoïdes par embryon,

montre une affinité avec les Sargasses.

L’origine de la cellule apicale est examinée soigneusement, elle pro¬

vient du méristoderme. Dans les Fucus, la cellule apicale est trichothal-

lique, dans l’embryon de Pelvetia on n’observe jamais de toufl'e de poils,

contrairement à ce qui a été écrit.

Une bibliographie très complète, termine cet important travail.

P. By.

Inagaki K. I. —- A systematic Study of the Order Chordariales

from Japan and its vicinity. — Scient, pap. Inst. Algol, res. Hok-

kaido Univ., 4, 2 , 197 p., 11 pl., 83 fig., 1958.

206

BIBLIOGRAPHIE

Cet important ouvrage se présente comme une étude monographique

des Chordariales du Japon. Apî*ès un court chapitre sur la morphologie

de ces algues, rauteur passe en revue les genres et les espèces <iu’il a

rencontrés au Japon. Pour chaque algue, nous trouvons une description

du genre, puis la deserii)tion des espèces avec les références bibliogra¬

phiques et la synonymie.

Les localités japonaises, les remarques sur l’écologie, et très souvent

de nombreuses figures montrant la structure des algues complètent ce

travail.

De nombreuses espèces, variétés ou formes nouvelles sont décrites ;

elles appartiennent aux genres : Lealhesia, Myriogloia, Papt'iifusieUa,

llaplogtoia, Saiwageaugloia, Sphaerolrichia, Ilelerochordaria et Acro-

Ihrix. Un nouveau genre : Pseiidochorda Yamada, Tokida et Inagaki est

découvert. L’espèce type de ce nov. genre, qui a l’aspect de Chorda

filiim et la structure interne de Chordaria, avait d’abord été placée par

Tokida dans les Chordaria. Mais l’absence de poils hyalins, la forme et

la place des sporanges uniloculaires, l’origine des rhizoides, justifient

la création de ce nov. genre.

Kn résumé un important travail qui complète pour le Japon, les

ouvrages classiques de Kyi.in sur les Chordariales. — P. By.

Hendey 1. — Marine Diatoms froin some West African Ports.

- Journal of lhe Royal Microscopicnl Society, Voi. LXXVII, parts

1 et 2, pp. 27-85, Octobre 1958.

Le matériel étudié par l’auteur provenait du lavage des dépôts pré¬

levés sur une série de panneaux en bakélite de 6 in. X 6 in., immergés

en quatre points de la côte Ouest africaine. Ces panneaux ayant été

utilisés en vue d’évaluer l’intensif' des dépôts produits par les orga¬

nismes marins, susceptibles de détériorer la coque des navires et des

installations immergées. Ces panneaux furent jilongés à des profon¬

deurs de 1 à 10 m., en des positions situées entre les lal. 20“ N et 20“ S.

dans les Iiaics de Fura à Freetown et de Turquah à Lagos, ainsi qu’à

Port Harcourt situé à une soixantaine de kilomètres dans l’estuaire de la

rivière Bonny, enfin à Takoradi où les conditions de milieu étaient

nettement différentes de celles des stations précédentes.

L’analyse du' matériel provenant de ces dispositifs expérimentaux

s’est révélée fort riche en Diatomées, donnant un total de 194 espèces

dont 13 nouveautés pour la Science. L’inventaire systématique de ce tra¬

vail constitue une très importante contril)ution à la biologie de la côte

Ouest du continent africain, encore peu connue jusqu’à ce jour. La flore

diatomique étudiée par l’auteur présente un faciès mangrovicn nette¬

ment accusé, elle révèle également de grandes affinités biogéographiques

avec celle relevée par Hagelstein (1939) pour les Caraïbes. Ainsi sur

les 194 espèces de la côte Ouest africaine, 100 sont communes à ce

domaine des petites .\ntilles.

La partie systématique du travail est accompagnée d’intéressantes

données sur la répartition géographique des espèces observées, ainsi

que de remarquables et judicieuses discriminations sur certaines formes

critiques. I>es nouveautés en espèces sont les suivantes : Coscînodis-

cus domofoclufi, C. noduloîineatiis, Plagiogramma exiguum, Achnanlhes

kiiwaitensis, A. marginalis; Nnvicula inaiirula, N. pseudoapproxiniala.

BIBLIOGRAPHIE

207

N. peltoides; Nilzschia corpiilenla; Surirella senla. Enfin trois genres

nouveaux : Cymatothecn, Cijmntodiscus, Trijblioptychus. fondés sur le

remaniement d’anciens genres, sont créés par l’auteur. Le texte de cette

dernière et importante partie de ce travail est suivi de planclies micro-

photographiques de tout premier ordre. — E. Manguin.

\’on Stoch h. a. — Der Gciselai>parat einer Coccolithopho-

ride. — Die Xalunoiss., 45. 6, pp. 140-141, 2 fig., 1958.

^ Nous n'avions pas de précision sur le type structural des flagelles des

Coccolithophoracées, l’auteur conilile cette lacune importante par l’étude

de Syracosphaera. Les 2 flagelles sont nus, dépourvus de mastigonèmes,

et de plus le pôle flagellaire présente un « haptonème » très court ana¬

logue à celui qui est connu dans le genre Prymiiesinm. On peut donc,

d après ces caractères placer les Coccolithophorides au voisinage des

Prymnésiales. — P. By.

Von Stoch H. A. — Einige Bemerkungen ziir Phylogénie des

Diatomeen. — Die Xalurwiss., 45, 6, j). 141, 1 fig., 1958.

Cette courte noie est fort importante, l’auteur, dont les beaux travaux

sur la sexualité des Diatomées centriques, sont désormais classiques,

y précise la structure fine du flagelle chez les gamètes mâles des Diato¬

mées centriques.

Il colore suivant la technique de Zkttnow les spermaties de Chae~

/ocero.s et d'Actinoplychus et montre que le flagelle unique est pleuroné-

rnaté comme chez les Chrysophycées du genre Chronmlina. Le ratta¬

chement systématique des Diatomées, aux Chrysophycées et aux Hété-

rocontes en un grand phylurn des Chrysophytes est donc pleinement

justifié. — P. By.

Lefkvke M. — De l’influence des matières organiiiues sur la

nature et l'abondance du plancton. — Ann. Stat. Centr. Hydrob.

appl-, 7, pp. 253-267, 1958.

L’auteur étudie la flore algalc d’un étang du Cher, long et étroit, dont

la partie antérieure reçoit les eaux usées d’une ferme.

I>e phytoplancton de la tète de l’étang, riche en matières organiques,

est dominé par les Flagellés et les Chlorococcales.

Dans la partie moyenne, où commence l’autoépuration, les Flagellés

diminuent et sont remplacés par des Cyanophycées, tandis que les Chlo¬

rococcales restent aliondantes. Enfin au déversoir où l’autoépuration est

complète, nous voyons s’installer les Desmidiées avec une baisse specta¬

culaire des Chlorococcales et Flagellés.

Le meme phénomène .s’observe dans l’Etang du Rondeau à Ram¬

bouillet. Cet étang, à rendement piscicole exceptionnel (600 kg. de pois¬

sons à l’hectare), est alimenté par des sources profondes très riches en

matières organicjues. La llorule est dominée par les Eugléniens et les

Chlorococcales.

L’adjonction de purin à des étangs piscicoles pauvres ou déficients,

fait apparaître une population à Eugléniens et Chlorococcales très favo¬

rable au zooplancton et aux poissons.

208

BIBLIOGRAPHIE

Cet intéressant travail met en lumière une série de facteurs ecolo-

oiques importants et souvent négligés, il éclaire ainsi les problèmes

complexes de l’eutrophisation accidentelle, ou volontaire, des eaux

douces. — P. By.

Scott A. M. el Grônblad R. — New and interesting Desnüds

from the Soiitheastern United States. — Act. Soc. Scient. Fenni-

cae, n. s. R. n. 8, 62 p.. .'17 pl., 1957.

Les régions chaudes des U.S.A., Alahama, Géorgie, Tennessee, Loui¬

siane. Mississipi, Floride, fournissent aux auteurs, un nombre considé¬

rable de Desmidiées dont les nouveautés et les espèces intéressantes

sont étudiées avec beaucoup de soin et représentées dans 87 planches

grand format, d’une exécution parfaite groupant plus de 500 figures. Les

taxa nouveaux appartiennent aux genres : (lonolozi/goii, Cylindrocyslis,

Peniimi, Pleurofaeniiim, Docidinm, Triploceras, Enaslnim, Cosmarium.

Arthrodeswiis, Xanlhidinm, Slauraslrnm, Cosmocladium, (iroenbladia.

Spondylosiiirn, Sphaerozosma, Onychoiiema, Desmidiuin, Bnmbusina. En

tout, sont décrites et figurées plus de 200 formes, variétés et espèces

nouvelles. — P. By.

Grônblad R., Prowse G. A. et .Scott A. INI. - - Siidaiiese Des-

iiiids. - Ad. Bot. Fennica, 58, 82 pp., 29 ])1., 1958.

Voici une belle contribution à la connaissance des algues d’eau douce

africaine. Tl s’agit de matériel récolté dans le Soudan égyptien, dans

la région du Bahr cl Gazai. Les Desmidiées sont très abondantes et nous

relevons dans ce mémoire 205 unités sy.stématiques dont 62 nouveautés

appartenant aux genres i Gonotozyyoïi, Pleiirotnciiium, J i iploceros, hAi-

natviiin, Micrnslerias, Cosnwriiiin, Xanthidiuen, Arihrodesinus, Stciuros-

triiin, Onychoiiema, Desmidium, Phymatodocis.

Parmi ces nouveautés signalons la présence de deux nov. Micrnslerias

extraordinaires, présentant, à l’état normal, des hémisomates de formes

difi'érentcs. Il y a là un phénomène intéressant déjà observé par (iRôn-

Bi.Ai) dans le genre Amseotlia. I.es auteurs ne donnent pas d’indications

biogéographiques sur la répartition des Desmidiées étudiées, mais la

lecture de leur mémoire montre un nombre d’espèces déjà signalées

en Afrique australe ou à Madagascar à côté d’autres Desmidiées pantro-

picales connues de l’Amérique ou d’Insulinde.

Ce travail est paru quelques mois après celui de Boubrklly, analysé

ci-dessous, de ce fait quelques espèces nouvelles sont décrites dan^

ces deux études africaines, sous des noms différents. Ainsi VArthro-

dcsimi.s stelliferiim Grônbl. et Scott doit être con.sidéré connue une var.

de r.4. Ileimii Bourr.; le Cosmarium Stephensii f. minor Gronbl. et Scott

est appelé var. minor par Bourrelly, le C. t(i.richondriini v. Sndanense

Gronbl. et Scott est nommé chez nous, pseudolaxichondnim v. penla-

chondrum, tandis que notre Euostrum eteyans v. compoctiim fo. Bourr.

est élevé avec rai.son jiar Grônblad et Scott au rang de variété sous le

nom : var. .spiniferum. De même notre fo. de Xanlhidium calcarato-acn-

lealiim est la var. .sudanens'e Grônlilad et Scott.

BIBLIOGRAPHIi;

209

-Vous pensons que le Micraslerias tropica v. ambadiensis GronbJad et

Scott doit s’appeler : v. senepalensis Nordst; sans doute le Staiiraslrum

lizoskae (Ironblad et Scott n’esl qu’une forme de St. spiciiUferum v.

africaniini Bourr.

Ces quelques précisions montrent bien que la llorule desmidiale du

Niger Français et celle du Soudan Egyptien ont de nombreux points

coniniuns. Les espèces communes aux deux régions sont nombreuses, et

les pourcentages des divers genres de Desmidiées sont remarquablement

voisins. Nous avions pour le Niger : 162 Desmidiées dont 4Ü nouveautés,

soit 24,6 %; pour le Soudan le chiffre est 30,2.

Dans renscmble desniidial. les A/fcra.s/er/üs représentent 6,7 au Niger,

6,8 au Soudan, les Pleurolaenium, Cosmarium et Staurastnim, respecti¬

vement ; 5,3; 35,5; 15,1 au Soudan et 5,5; 30,8 et 22,8 au Niger. On

voit donc que malgré la distance de plusieurs milliers de kilomètres qui

séparent les deux aires étudiées, et malgré la situation nettement plus

nordique (d’environ 500 km.) de la région du Niger, les ressemblances

sont très grandes entre ces llorulcs algales des eaux acides chaudes.

P. By.

Bourrki.i.y P. — Algues d’euii douce du Soudan Français, ré¬

gion du Macina (A.O.F.). Bull. I.F.A.N. 19, scr. A, 4, jq». 1047-

1102, 21 pl., 1956.

L’étude de quelques récoltes de lacs situés du Sud-Oue.st de Tom¬

bouctou, dans la zone d’inondation du Niger, nous a révélé une florule

algale de 213 sp., var. et fo. où dominent les Desmidiées avec 162 unités

systématiques. 44 nouveautés sont décrites, elles appartiennent aux

genres : Trachelomonns, Oedogonium, Bulbochaefe, Spirogyrn, Euas-

Irurn, Aclinotaeniiim, Cosmarium, Xanthidium, Arthrodesmus, Stauras-

trnm. Parmi ces algues l’élément puntropical des régions chaudes, est

abondant ; 32 de plus beaucoup d’espèces sont des endémiques

africaines.

Cette élude nous a permis d’élargir vers l’Ouest de l’Afrique, l’aire de

répartition des Desmidiées de région chaude, et il semble que c’est là,

dans la région du Macina, que certaines espèces reuconlrenl leur limite

septentrionale africaine. — P. By.

Bourrelly P. -- Une nouvelle espèce de Cyanophycée d’eau

douce du genre Desmosiphon. Bull. C.E.R.S., Biarritz, 4,

pp. 589-594, 2 pl., 1957.

Dans un étang acide de la région de Biarritz l’auteur rencontre une

nov. sp. de Cyanophycée du genre Desmosiphon. Cette nov, espèce est

intermédiaire entre les genres Nemaloplaca et Desmosiphon. L’auteur

présente une révision du groupe Nemaloplaca et Desmosiphon et pro¬

pose de supprimer le genre monospéciflque Nemaioplaca en le fusion¬

nant avec Desmosiphon.

De ce fait Desmosiphon renfermera 3 espèces : D. maculans Borzi,

D. Viuieri nov. sp. et D. incnistans (Geitler) nov. comb. --- P. By.

21Ü

BIBLIOGRAPHIE

Bourrellv P. Un genre de Rhodophycée d’eau douce nou-

^'eau pour la France, KylinicUa, récolté dans les environs de Biar¬

ritz. Bull. C.E.R.S. Biarritz, 4, pp. 595-600, 2 pl., 1957.

Dans un petit étang acide, l’auteur signale une Rhodophycée fort

rare : Kyliniella latvica Skuja, espèce connue de Lettonie, Suède, Au¬

triche. Ù.S.A.. Tl étudie le thalle et les filaments et observe la présence

de longs poils muqueux. Ces poils, fort difficiles à observer, sont retrou¬

vés dans les exemplaires de Lettonie, aimablement communiqués par le

D' Skuja. — P. By.

Komarek J. - Die Taxonomoinische Kevi.sion der planktischen

Blaualgen der TschechosUnvakei. — Alglogische Sludien, Prague,

pp. 10-206, 19 pL, 12 pl. idiot., 1958.

I.’auteur nous donne une révision complète des Cyanophycées planc-

toniques de Tchécoslovaquie. Il passe en revue 18 genres et étudie parti¬

culièrement en détail une trentaine d'espèces.

Pour chaque genre, chaque espèce, synonymie très complète, diag¬

nose, iconographie, figures et microphotographies originales, courbes

biométriques, permettent d’arriver à une grande précision systématique.

L’auteur, avec sagesse, revient aux coupures génériques classiques d’A-

phanofhece, Chroococciis, Merismopedia, Coelosphaeriiiin, Gomphos-

phaeria. etc...

Le nom de Microcyslis est proposé pour la liste des nonüna coiiser-

vanda, et en attendant une décision, l’auteur emploi Diplocgslis, terme

plus ancien.

Dans les Microcyslis une tentative de mettre un peu d’ordre, dans ce

genre, oblige à créer 2 nov. nominations. Les Coelosphaerium pusilliim,

roseum, naegeliamim sont réunis, du fait de la présence de Iractus géla¬

tineux rayonnants, aux Goinphosphaeria.

L’étude biométrique des dimensions des trichomes et des spores per¬

met une systématique allégée et rationnelle des Aphanizomenon et des

Anabaena. Dans ce genre, les espèces Vigiiieri, planctonica, limnetica,

Lemmermannii, passent au rang de variétés ou de formes. L’auteur

montre dans une série de figures, les déformations et artefacts causés

par la fixation du matériel. Ce problème déjà étudié par Jaag, avait

besoin d’être rappelé. Comme on le voit par ces quelques lignes, ce

travail, dont les conclusions systématiques, semblent fort raisonnables,

est d’un grand intérêt et rendra service à tous ceux qui étudient le

phytoplanclon. — P. By.

Drew K. M. et Friedmann I. - (Icciireiice of mobile Gametes in

Prasiola stipitaia Suhr. — Nature, 180 , p]L 557-558, 1957.

Dès 1932. Yabe (Sc. Bep. Tokyo, Bnnrika Daiyakn, 1, 39) avait observé

un processus sexuel, anisogainique, chez Prasiola japonica. Fu.iizam.v

{Bot. May. Tokyo, 62, 1949 et J. fac. fish. Anim. Ilush. Hiroshima TJniv.,

1. 1955) confirme ces résultats pour la même espèce, mais pour lui les

éléments femelles sont dépourvus de motilité.

Drew et Friedmann, chez une espèce européenne, observent une ani¬

sogamie avec gamètes mobiles. I..es thalles gamétophytiques. en hiver, se

BiBLIOGRAFHIP:

211

reconnaissent à leur aspect en mosaïque : les parties femelles étant plus

foncées que les parties mâles. Le thalle, ordinairement monostroma-

tique, présente quatre couches dans la partie femelle et huit dans la

partie mâle. Les gamètes sont à deux flagelles, isocontes, à mastigonème

terminal. A la fusion des gamètes, le mâle perd ses deux fouets et la

femelle un seul, puis le planozygote perd ce fouet, s’immoblise et

s’arrondit. — P. By.

Ski'.ta h. — MjTochrysis nov. gcii., Vertreterin eines neuen Ty-

piis der Koloniebildung bei den gefarbten Chrysomonaden. —- Su.

Bot. Tidskr., 52, l, p. 23-36, 14 fig.. 19.38.

Gcttc nov. Ghrysophycée forme des colonies fixées de grande taille

(2 à 3 mm) vivants dans les eaux d’un fossé à végétation thiophile

{Chromaliiim, Thiothrix, Begffialoa).

Les colonies ont un pédoncule composé, gélatineux, élargi ayant l’as¬

pect d'un champignon, du type Cantharelhis, ou mieux Polypoms iim-

beüaliis. Dans les petits chapeaux ainsi formés, sont piquées des mo¬

nades à structure d’Ochromonas, ayant 2 fouets inégaux, un ou 2 plastcs

jaune-brun, un stigma, des vacuoles contractiles, du chrysosc, des corps

mucifères. Les monades se terminent par un style de fixation. La mul¬

tiplication peut se faire par division ou par libération des cellules qui

deviennent alors nageuses; les kystes siliceux ont été obervés. Ce type

de colonie très particulier rappelle celui d’un Monas incolore. Monas

Lindahlii Skuja, mais chez Mijcochrysis, la structure coloniale est plus

complexe que chez le Monas.

Ce nouveau genre, parliculièrement curieux, montre la puissance

adaptative, tant structurale qu’écologique, des Chrysophycées. - - P. By.

Ettl h. --- Zur kennlnis der Klasse Volvophyceae. — Algolo-

gische Sliidieu. Prague, p. 296-289, 40 iig., 1958.

L’auteur, après avoir comparé les diverses classifications des Volvo-

cales (ordre élevé au rang de classe, sous le nom de Volvophyceae)

proposées par Printz, West et Fritsch, Pascher, Korchikov, Skuja,

Smitti, donnent une critique serrée de ces systèmes et propose à son

tour, une nouvelle classification, classification qui lui semble suivre de

plus près la phylogénie de ce groupe de flagellés verts. Il distingue

5 ordres :

1°) Pyramiinonadales, avec la famille unique des Pijranumonadaceac.

2°) Raciborskiellales, famille des Daiu/eardinellaceae et Bacibor.s-

kiellaceae.

3“) Chlamydomonadales avec. Cblorogoniaceae, Chlorothoracaceae,

Haematococcaceae, Chlamgdomoiiadaceae et Phacolaceae.

4°) Volvocales avec Stephanosphaeraceae, Coronaceae, Spondiilomo-

raceae, Volvocaceae.

5") Pedinomonadales avec Pedinomonadoceae et Monoiuastigaceae-

Soufce MNHN, Pans

212

BIBLIOGRAPHIE

Les 2 premiers ordres correspondent aux Polyblépharicacécs clas¬

siques, et groupent les formes nues, sans membrane; les autres ordres

ne présentent que peu de changements avec les classifications des au¬

teurs anciens. Dans la division en famille, l’auteur accorde une place

importante au nombre de vésicules contractiles. Ainsi dans le genre

Chlorogohium seront placées toutes les espèces à plusieurs vacuoles con¬

tractiles. Comme le remarque la « rédaction scientifique» de l’ouvrage,

ce système ne laisse aucune place précise pour les formes marines

dépourvues de vacuoles pulsatiles. Ce caractère permet à l’auteur de

créer le genre Paeudocaricria pour les Cat'lcvia à nombreuses vésicules

contractiles, et une famille spéciale pour le nov. gen. Chlorolhoracus

groupant les Dysmorphococais à plusieurs vacuoles.

L’exposition de ce système achevé, l’auteur présente un grand nom¬

bre d’espèces nouvelles appartenant aux genres Telrachloris, Chlamy-

dowoïKi!;, Brachioinonas, Carieria, Pyrobolnjs, et un certain nombre de

nov. comb. Il précise aussi la description d’espèces rares ou mal con¬

nues. Nous avons là un travail intéressant, fort bien documenté, accom¬

pagné d’observations très précises. Nous regretterons seulement une

büjliographie un peu incomplète : les travaux de Droop sur Haemato-

cocciis parus ici-même, les notes de Chadefaud sur la Phylogénie des

Cblorophycées, les mi.ses au point de Schussnig (Forschr. Bot.) ne sont

malheureusement jias cités. Dans ces travaux sont précisées des hypo¬

thèses importantes qui permettent, pensons-nous de concevoir une systé¬

matique nouvelle des Volvocalcs, où interviendraient les caractères sui¬

vants : présence de membrane, papille ou cratère flagellaire, insertion

apicale ou latérale des fouets, nombre des vacuoles contractiles, tractus

cytoplasmiiiues entre cellule et membrane, etc... — P. By,

Le Gérant : R. Lami. — lmp. Mo.nnoybr, Le Mans.