SOMMAIRE

Don R. REYNOLDS — A nonbitunicate ascus in the ascostromatic genus

CELLET RTL оАо а

L.M. MELENDEZ-I HOWELL, A. BELLEMERE ‘ET Je -L. ROSSIGNOL —

Remarques à propos de l'ultrastructure d'ascospores « albinos » ou « gra-

nuleuses » de mutants d'Ascobolus immersus Pers. (géne b8) ........

L. NAJIM — Contróle morphogénétique de la différenciation des sclérotes

de Sclerotinia fructigena : 11 — Études cytologiques et ultrastructurales

A.II. ABDEL-HAFEZ, A.M.M. MOHARRAM and A.Y. ABDEL-MALLEK

— Thermophilic and thermotolerant fungi associated with seeds of five

members of Umbelliferae from Egypt ...........................

G. MORENO, C. ILLANA and M. HEYKOOP — Cano e iberica pi nov.

in Spain (Bolbitiaceae, Agaricales) .

Analyses bibliographiques ........

Table du Tome 8 — 1987

CONTENTS

Don R. REYNOLDS — A nonbitunicate ascus in the ascostromatic genus

L. M. MELENDEZ-HOWELL, A. BELLEMERE et J.-L. ROSSIGNOL —

Remarks concerning the ultrastructure of ascospore mutants « albino »

and c granular » in Ascobolus immersus Pers. (bs gene). (in French) ..

L. NAJIM — Morphogenetic control of sclerotia differentiation of Sclero-

tinia fructigena : I1 — Cytological and ultrastructural studies. (in French)

A.LI. ABDEL-HAFEZ, A.M.M. MOHARRAM and A.Y. ABDEL-MALLEK —

Thermophilic and thermotolerant fungi associated with seeds of five

members of Umbelliferae from Egypt .......................

G. MORENO, C. ILLANA and M. HEYKOOP — Gastrocybe iberica sp. nov.

in Spain (Bolbitiaceae, Agaricales) .

и. PES

Table of Volume 8 — 1987

315

321

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Source : MNHN. Paris

CRYPTOGAMIE

MYCOLOGIE

TOMES Fascicule 4 1987

Ancienne Revue de Mycologie. Dirigée par Roger HEIM

DIRECTEUR SCIENTIFIQUE : Madame J. NICOT

SECRÉTAIRE DE RÉDACTION : Mme M.C. BOISSELIER. ÉDITEUR : A.D.A.C.

Publié avec le concours du Muséum National d'Histoire Naturelle

CRYPTOGAMIE, MYCOLOGIE est indexé par : Biological Abstracts, Current Contents,

Publications bibliographiques du CDST (Pascal)

NAA

(Gist | Bibliothèque Centrale Muséum

за 3 3001 002277 Bource : MNHN. Paris

Source : MNHN. Paris

Cryptogamie, Mycol. 1987, 8 (4) : 251-268 251

A NONBITUNICATE ASCUS IN THE ASCOSTROMATIC

GENUS ASTERINA

by Don R. REYNOLDS*

ABSTRACT — The ascus of Asterina carbonacea Cooke is nonbitunicate and is formed in an ascostroma.

There is a similarity with the eu-archaeascé ascus type. A comparison of this ascus type with the bituni-

cate ascus demonstrates a difference in the wall structure and the origin of the extended wall formed

during spore ejaculation, The primary ascus wall stains blue with IKI and Sudan Black B ; pretreatment

with KOH before IKI results in a nonstaining primary wall and blue-staining of the secondary wall. The

banded pattern of the secondary wall is recognizable as Couche D1 and Couche D2. Couche D2 extends

in ascospore dispersal from an apically positioned dome-shaped wall component into a tube reaching

to the surface of the ascocarp. None of the ascus wall layers separate during spore dispersal. This study

indicates that the family Asterinaceae should be recognized as a taxon apart from those included in the

loculoascomycetes

RÉSUMÉ — L'asque d'Asterina carbonacea Cooke est non-bituniqué et est formé dans un ascostroma

Il présente une similitude avec le type eu-archaeascé. La comparaison avec l'asque bituniqué montre

une différence dans la structure de la paroi et dans l'origine de celle qui se forme, par extension, pour

l'éjection des spores. La paroi primaire de l'asque se colore en bleu avec l'IKI et le noir Soudan B ; un

prétraitement par KOH avant l'IKI ne donne pas de coloration de la paroi primaire, mais une coloration

bleue de la paroi secondaire. On peut reconnaitre les couches D1 et D2 dans la paroi secondaire. Lors

de la dispersion des ascopores, la couche D2 s'allonge, à partit d'une zone apicale en forme de dôme,

en un tube qui rejoint la surface de l'ascocarpe. Aucune des couches de la paroi ascale ne se sépare pen

dant les processus d'éjection des spores. Cette étude indique que la famille des Asterinaceae doit être

reconnue comme un taxon particulier parmi les loculo-ascomycètes.

KEY WORDS : Asterina, ascostromatic ascomycete, ascus.

* Natural History Museum, 900 Exposition Boulevard, Los Angeles, California 90007 USA

Source : MNHN. Paris

252 Don R. REYNOLDS

INTRODUCTION

The ascus has a wide variance in structure (SHERWOOD, 1981 ; ERIKSSON,

1981). HAWKSWORTH & al. (1983) noted that the recognition of only the bituni-

cate, prototunicate, and unitunicate major ascus types in the last decade is too

simplistic an approach to ascus characterization.

The development of an Asterina species was shown by WARD (1882) to be ascos-

tromatic in that the ascocarp developed before the origination of asci from an inclu-

ded hyphal system that formed a « boss or raised disc ». The asci were illustrated

as uniformly thin-walled.

The ascus of Asterina melastomatis Léveillé was illustrated by ARNAUD (1918)

as having a thickened apical region with the tube-shaped extension of the proto-

plast ; ascospores were shown reaching the outer surface of the ascocarp hyme-

nium in linear form from an extended thin-walled cupulate enclosure that appears

to be intended as the expended ascus. The asci of Asterina mulleri Stevenson (STE-

VENSON, 1943) and A. solanacearum Orejuela (OREJUELA, 1944) were descri-

bed as « evanescent ».

The family of the species studied here, the Asterinaceae Hansford, has been

described as having a « probably semifissitunicate » or « rostrum-like » jack-in-the-

box ascus (ERIKSSON, 1981). ERIKSSON (1981) described the rostrate type of ascus

as having a wall that is « reverted and extruded as a rostrum ». The semifissituni-

cate type of ascus was described as having a « reverted » inner wall which exten-

ded as a « rather long rostrum ».

The Asterinaceae ascus characterization was composed by ERIKSSON (1981)

from a description of the ascus of the assumed type species of the family type

genus; «type species not indicated, but commonly cited as A. melastomatis

Léveillé ». The material studied was not the type material from Brasil (LEVEILLE,

1845), but rather Guatemalan material collected in 1907 and distributed as # 1749

in Rehm's ascomycete exsiccatum. The inner wall was said to be distinct and stai-

ning IKI+ blue and Congo Red+ as minute granules on the ascus surface. The

inner wall was described as a layered, up to approximately 6 um thick, « apical

dome » which showed an « ocular chamber » and a Cobolt Blue+ meniscus.

The ascus of the asterinaceous Placoasterella baileyi (Berkeley & Broome) Arx

was examined with electron microscopic resolution by TYSON & GRIFFITHS

(1976b). They found the banded pattern secondary wall and compared the struc-

ture to that found by REYNOLDS (1971). The ascus was observed to undergo an

elongation of the secondary wall prior to losing a basal attachment in the asco-

carp. The entire ascus and the contained ascospores of this species were found

to be discharged from the ascocarp with separation of the wall into two layers ;

no actual ascospore discharge was seen by these authors, but a « mechanism invol-

ving the dissolution of the thin ascospore-enclosing sheath, and the passive release

of ascospores » was suggested. ERIKSSON (1981) pronounced the dehiscence of

the ascus of P. baileyi as « pseudofissitunicate » after the false Jack-in-the-Box ascus

of PARGUEY-LEDUC & CHADEFAUD (1963) ; the ascospores are extruded in

the uppermost part of the epiplast with the surrounding plasmalemma in this mode

of dehiscence.

Source : MNHN, Paris

THE ASCUS OF ASTERINA CARBONACEA 253

MATERIALS AND METHODS

The ascus used in this study is that of Asterina carbonacea Cooke.

The material used in this study is curated in Herbarium LAM as # 300451.

The collection was made by Allen G. SHUEY from a cypress swamp located 1

mile west of US Highway 441/17-92 and 4.5 miles north of the Orange-Osceola

county line, between Kissimmee and Orlando, Florida, Section 16, Township 24S,

Range 29E, on 5 February 1980. The fungus was growing on the surface of the

leaves of the swamp red bay, Persea palustris (Raf.) Sarg.

Light microscope observations were made with a Zeiss dissection microscope

and a Nikon compound microscope. Whole and squash mounts and handcut cross

sections were made of the ascocarps. The hymenial layer was dissected from KOH

pretreated ascocarps. Final mounts for observations were made in lactophenol.

Cytochemical tests were made according to the protocol of ERIKSSON (1981) and

BARAL (1987).

Transmission electron microscope observations were made with a JOEL 100 CXII

electron microscope at 80 KV. Fruit bodies were teased off the surface of a leaf

into a 3% KOH solution and allowed to soak for approximately ten minutes. The

material was then fixed in 2% glutaraldehyde and 2% paraformaldehyde mixed

with a 0.1 M cacodylate buffer containing 0.02% CaCl2. The material was rinsed

with the buffer after 24 hours in the fixative, and then rinsed with 30% ethanol.

The ascocarps were soaked in 50% ETOH containing 0.5% uranyl acetate for

12 hours. Dehydration was carried out in a series of 80%, 95%, and 100% ETOH

and in 100% propylene oxide. The infiltration of the embedding material began

in a 12-hour soak in a 50/50 ratio of propylene oxide and Spurr's medium. Final

embedding was carried out in the medium-hard formula of the Spurr's epoxy. A

Sorvall MT2-B ultramicrotome equipped with a diamond knife was used to pro-

duce approximate 0.75 mm thick sections for review with the light microscope

and approximate 800 angstrom sections for TEM viewing. Staining of the thin sec-

tions was done with an aqueous saturated solution of uranyl acetate, followed

by the lead citrate stain. Scanning electron microscope observations were made

with a Cambridge S4-10. Dried leaf specimens with fruit bodies were coated with

gold-platinum in a sputterer coater.

RESULTS

The life cycle (Fig. 1) begins with the germination of the two-celled ascospore

(Figs. 1 A-B) on the leaf surface. An initial hypha is formed in usually the apical

area of one ascospore cell (Fig. 1 BJ ; branching is apparent after the formation

of only a few cells (Fig. 1 CJ. The hyphopodia begin to appear soon thereafter (Fig.

1D).

The ascocarp is comprised of a pair of hyphal systems which make up what

is essentially a fruitbody with indeterminate growth. The ascocarp originates, appa-

rently at random, from a hyphal cell of the darkly pigmented foliicolous myce-

lium (Figs. 1 E, 2 A). Resultant growth progresses in a plane parallel to the substrate

surface. Divisions of the first and a few subsequent cells initiate prescribed meris-

tematic activity. The first cells are somewhat irregularly arranged as a flattened

mass (Fig. 1 F). A peripheral meristematic zone is established by cell division in

Source : MNHN, Paris

254 Don R. REYNOLDS

cohesive hyphal tips (Figs. 1 G-I). The lead cell of each component hyphal strand

gives rise to one to several cells which diverge regularly into the upper hyphal

system and irregularly into a lower hyphal system.

Fig. 1 — Asterina carbonacea Cooke. Life history. A. Three bicelled ascospores. B. Ascospore with germ

tube. C. Initial hypha of young mycelium with three branches. D. A more advanced mycelium with

hyphopodia on some component hypha. E. Hypohyphal growth preliminary to ascocarp formation.

F. Young ascocarp initial. G-H. More advanced ascocarp stages with radiate pattern of upper hyphal

system layer evident. I. Mature ascocarp with ruptured upper layer and continued growth of indivi-

dual hyphal strands at the ascocarp edge.

Fig, 1 — Cycle d'Asterina carbonacea Cooke. A. Trois ascospores bicellulaires. B. Ascospore avec tube

germinatif. C. Hyphes initiales de mycélium jeune avec 3 ramifications. D. Mycélium plus âgé avec

des hyphopodes sur quelques hyphes. E. Croissance hypohyphale précédant la formation de l'asco-

carpe. F. Début d'un ascocarpe. G-H. Stades d'ascocarpes plus avancés montrant l'orientation rayon-

nante de la couche hyphale supérieure. I. Ascocarpe mür montrant une rupture de la couche

supérieure et la croissance continue des hyphes individuelles sur les bords.

Fig. 2 — Asterina carbonacea Cooke. Views of the ascocarp (S.E.M.). A. Four ascocarps (arrows) in the

initial stages of formation from beneath the hyphal strand of origin. B. Ascocarps (arrows) at a more

advanced stage with the radial pattern of upper hyphal system layer evident. C. Mature ascocarp

with intact upper hyphal system layer. Note the hyphopodiate hyphae traversing the leaf surface

and the ascocarp surface as well

Fig. 2 — Ascocarpe d’ Asterina carbonacea Cooke (M.E.B.). A. Premiers stades de formation de 4 ascocarpes

(flèches) sous les hyphes initiales. B. Ascocarpes (flèches) à un stade plus avancé montrant l'orienta-

tion rayonnante de la couche hyphale supérieure. C. Ascocarpe mûr montrant une couche hyphale

supérieure intacte. Noter l'hyphe hyphopodiale traversant la surface de la feuille et celle de l'ascocarpe.

Source : MNHN, Paris

THE ASCUS OF ASTERINA CARBONACEA

Source : MNHN, Paris

256 Don R. REYNOLDS

An unmagnified dorsal view of the upper hyphal system shows a small, roun-

ded, black growth on the surface of a leaf. Low magnification demonstrates the

radial pattern of the component darkly pigmented hyphae which branch at more-

or-less regular intervals so that a tissue-like confluence is maintained with increa-

sing diameter of the fruitbody (Figs. 1 H-I, 2 B-C). The synchronized division results

in a concentric pattern of surface ridges (Fig. 2). The upper layer maintains its

integrity until the pressure from the contained maturing asci, beginning their dis-

charge, causes it to break into deciduous segments in larger-sized fruit bodies (Fig, 1

1). Separations between hyphal strands occur at several points in the central older

portion of the ascoma and radiate outward toward the ascocarp edge. The resul-

tant stellate pattern of the split, pigmented, upper hyphal system is visually enhan-

ced because of the exposed underlying non-pigmented lower hyphal system. The

angular flaps of pigmented hyphae initially remain intact as additional peripheral

meristematic activity and a corresponding maturing of the central area hymenium

occur. Further disintegration of the stellately fractured upper layer into small bits

of tissue is usually associated with the older ascocarp. Both mature asci and deve-

loping asci become apically exposed with only a few hyphal strands running over

the surface of the ascocarp (Fig. 3 A-B). At this stage vertically oriented portions

of the upper layer remain near the outer ascocarp edge (Fig. 3 C)

Source : MNHN, Paris

THE ASCUS OF ASTERINA CARBONACEA 257

The lower hyphal system is the source of the asci and of secreted gelatineous

material. This system is first apparent when the upper hyphal system reaches a

diameter in the range of 300 um (Fig. 4). Copious production of a hygroscopic mucin

coincides with the formation of primary branches directly from the peripheral

meristem zone at irregular intervals. Toluidine blue staining of thin sections and

of squash mounts results in a metachromatic reaction of the gel ; it becomes an

intense purple to light lavender. The non-pigmented hyphae of the lower hyphal

system ultimately form a loose mycelial network under the overlying upper hyphal

system. Secondary branches develop from outgrowths of the primary hyphal cell

at close intervals.

Fig. 4 — Asterina carbonacea Cooke. Longitudinal section through the ascocarp (T.E.M.). The upper

hyphal system forms the shield shaped ascocarp wall jaw). The ascus initials (ac) originate from the

lower hyphal system. A layer of gelatinous material pervades the entire ascocarp.

Fig. 4 — Coupe longitudinale de l'ascocarpe d'Asterina carbonacea Cooke |M.E.T.]. Le systeme hyphal

supérieur forme la paroi de l'ascocarpe en forme de bouclier [aw]. Les initiales des asques [ac] se

forment partir du systéme hyphal inférieur. Une couche de matériel gélatineux occupe l'ascocarpe

tout entier.

Fig. 3 — Schémas de l'ascocarpe d'Asterina carbonacea Cooke. Vue apicale montrant que le réseau

hyphal supérieur du bouclier est désagrégé à l'exception de quelques cellules restant à la surface

d'une matrice gélatineuse. On voit des asques immatures et des asques contenant les ascospores

B. Coupe longitudinale au milieu d'un ascocarpe már à la surface d'une feuille. Le réseau hyphal

supérieur formant le bouclier et le réseau hyphal inférieur ascogene sont immergés dans une matrice

gelatineuse. C. Coupe longitudinale sur les bords d'un ascocarpe mür. Le système hyphal supérieur

est orienté verticalement sur les bords de la masse hyméniale.

Fig. 3 — Asterina carbonacea Cooke. Diagramatic views of the ascocarp. A. Aerial view of the upper

hyphal system forming the shield has disintegrated except for a few cells remaining on the surface

of the inapparent gelatineous matrix. Both immature asci and asci with ascospores are illustrated.

B. Longitudinal midsection through mature ascocarp on leaf surface. The upper hyphal system for-

ming the shield and the lower hyphal system forming the ascogenous system are immersed in a gela-

tineous matrix. C. Longitudinal section through mature ascocarp at its edge. The upper hyphal system

is vertically oriented at the edge of the contained hymenial area.

Source : MNHN, Paris

Don R. REYNOLDS

258

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Source : MNHN, Paris

THE ASCUS OF ASTERINA CARBONACEA 259

The sympodially produced asci originate at irregular intervals from the secon-

dary branches. The ascus initial cell enlarges somewhat in width, but mostly in

length. Growth in the initial stages is accompanied by the deposition of wall mate-

rial in an encompassing primary layer (Fig. 5 A). A single nucleus can be demons-

trated in the cell at this stage with phase microscopy in both recently collected

and KOH reconstituted dried material.

The formation of the secondary ascus wall is apparent when the ascus initial

cell reaches a height of 60-70 um (Fig. 5 B). This material forms an apical dome

in the apex of the ascus which has a conspicuous extension of the protoplast into

its center (Figs. 5 B-C). The longitudinally oriented striae of the nasse apicale can

be demonstrated with the light microscope as was done previously (REYNOLDS,

1971). The striae are somewhat difficult to see with the ascus in midfocus in lac-

tophenol but are discernable when the ascus is stained with IKI, both with and

without KOH pretreatment. They also become better seen with a slight distor-

sion of the ascus apex in a microscope mount ; the striae are more prevalent in

the ascus with formed ascospores and before pigmentation develops in the ascos-

pore wall.

A single nucleus can be demonstrated in the cell at this stage with phase micros-

copy. The ascus undergoes a change in its shape during ascosporogenesis resul-

ting in a different morphology of the secondary wall material in the ascus apex

and in the overall outline of the ascus (Figs. 5 B-C].

The primary ascus wall, illuminated as a heavy line in Figs. 9 C-D, stains blue

in Sudan Black B. The results with dilute and strong solutions of IKI and Melt-

zer's solution are given in Table 1.

The use of the term « couche » to interpret the ascus wall introduced by BEL-

LEMERE (1971) can be used to label the layers of the mature ascus wall. A com-

parison of the ascus in mid- or near midsection with a tangential section is made

in order to give additional characterization to each Couche.

‘The encompassing primary wall is comprised of two layers seen and can be iden-

tified in the mature ascus as comprising Couches A and B (Fig. 6). Couche A is

a densely staining external layer ; Couche B consists of a wall matrix with the

same, but less dense, parallel-to-the-surface orientation of the wall components.

REACTIVE ASCUS | IODINE TREATMENT

WALL COMPONENT No Pretreatment Pretreatment.

IKI Meltzer's | IKI Meltzer's

Primary ascus wall BB b = ---

Secondary ascus wall

Dome

Inner surface

Table 1 — Amyloidity in the ascus of Asterina carbonacea Cooke. Protocol followed was that of Baral

(1987). The color resulting from the application of iodine in IKI and Meltzer’s solutions and with

and without pretreatment of the ascus with KOH are tabulated (BB = blue in high and low iodine

concentration ; -- - = no reaction; b = blue ; 1b = light blue)

Tableau 1 — Réaction amyloide de l'asque d'Asterina carbonacea Cooke. Tableau des colorations obte-

nues par les solutions d'iode dans l'IKI et de Meltzer, avec ou sans prétraitement de l'asque par KOH

[protocole selon Baral, 1987 ; BB = bleu pour des concentrations en iode élevées et faibles ; - -- =

aucune réaction ; b = bleu; 1b = bleu clair].

Source : MNHN, Paris

260

Don R. REYNOLDS

Source : MNHN, Paris

THE ASCUS OF ASTERINA CARBONACEA 261

‘The formation of the two-layered secondary ascus wall begins with the deposi-

tion of Couches C and D. Couche C is apparent as a zone between Couche B and

Couche D, recognizable by an abrupt difference in the microfibrillar distribution

pattern.

There are two regions of Couche D which are visible with the resolution of the

electron microscope (Figs. 6-7) but not with the light microscope (Fig. 5). The Cou-

che D layers are fully deposited prior to ascosporogenesis. Couche D1 is periphe-

rally deposited on the inner surface of Couche C.

Fig. 7 — Asterina carbonacea Cooke. Asci (T.E.M.). Three mature asci with one or two cells of the bicel-

lular ascospores (+) and the apical chamber (small arrows). A discharged ascus (large arrow pointing

in the direction of the ascospore expulsion) can be identified in this hymenial section.

Fig. 7 — Asques d’ Asterina carbonacea Cooke (M.E.T.. Trois asques mars contenant les ascospores bicel-

lulaires (+) et la chambre apicale (petites flèches). Un asque vidé [large flèche pointée dans la direc

tion de l'expulsion des ascospores) est visible sur cette coupe de l'hyménium.

Fig.6 — Asterina carbonacea Cooke. Longitudinal sections in slightly off-center views (T.E.M.]

A. View of tip of ascocarp near wall (aw), showing the tip of an ascus with a mature wall which

contains two immature ascospores (.), Note the gelatineous matrix (g) surrounding the ascus. The

arrows indicate the stress zone just above the tangential view of the nasse apicale which is formed

during ascosporogenesis as the ascus accommodates the developing ascospores. B. An enlarged sec

tion of A. Couche A (a) and Couche B (b) are the outermost layers, with Couche C not well demons-

trated. Couche D1 (di) is indicated in the area outlined by the small stemless arrows with Couche

D2 (d2) evident by the banded layers. The immature ascospores (x) lack walls. С. Oblique tangential

section through ascus apex. Couches A-D (a, b, c, d) are demonstrable. Stressed layer created by

wall reorientation during ascospore formation is seen in a lateral region above Couche D2 (small

arrows).

Fig. 6 — Coupes longitudinales d'asques d'Asterina carbonacea Cooke (M.E.T.). A. Sommet de l'ascocarpe

prés de la paroi [aw), montrant l'apex de l'asque avec une paroi mûre qui entoure 2 ascospores imma:

tures (.). Noter la matrice gélatineuse (g) entourant l'asque. Les flèches indiquent la zone de scission

juste au-dessus de la nasse apicale (vue tangentielle) qui est formée pendant l'ascosporogenèse.

B. Détail de A. La couche À (a) et la couche B |b} sont les couches extrêmes, la couche C est peu

distincte. La couche DI (d1) est la zone définie par les têtes de flèches et la couche D2 [d2) montre

différentes strates. Les ascospores immatures |.] n'ont pas de paroi. C. Coupe tangentielle oblique

dans l'apex de l'asque où l'on peut voir les couches A à D (a, b, c, d). La zone de scission créée par

la réorientation de la paroi au cours de la formation des ascospores est située dans la région latérale

au-dessus de la couche D2 [petites flèches).

Source : MNHN, Paris

262 Don R. REYNOLDS

Couche D1 has the banded pattern of the bitunicate endotunica (REYNOLDS,

1971). Dark-staining microfibrils are embedded in the amorphous wall matrix with

an orientation that is generally horizontal to the protoplast surface. Additionally,

the embedded microfibrils form a reoccurring pattern of verticle bands. The peaks

and valleys of undulations in the wall give definition to the band boundaries. Cou-

the D1 forms a slight bulge (Fig. 6) at the lower edge of the Couche D2 dome and

becomes thinner toward the ascus apex.

Couche D2 is deposited last and is found in the upper third of the ascus as a

dome-shaped layer (Fig. 6). The microfibrillar deposition pattern of Couche D2

in asci with developing or mature ascospores has lines that run across and per-

pendicular to the vertical band zones (Figs. 6 A-B, 7). These lines have a discer-

hibly different arching angle in the preascosporogenic and the post ascosporogenic

ascus. There is a noticeable density in these lines immediately over the nasse api-

cale. These lines appear to be « stretch marks » formed during ascosporogenesis

as a result of the stress in the wall layers induced during the accommodation of

the developing ascospores.

Fig. 8 — Asterina carbonacea Cooke. Comparative light and electron microscopic views of discharged asci

A. Ascus with wall extended beyond disrupted wall (arrows) [light microscope]. This view demons

trates the possibility that the ascus can be interpreted as bitunicate at this resolution. As discerned

from Fig. B, Couche D2 (D2) extends beyond the remaining portion of the wall arrows). B. View

similar to A of the ascus discharge apparatus with the resolution of the transmission electron micros

cope. The ascus breaks (small arrows) to allow an extension of the ascus wall which is formed from

Couche D2. Couche D2 remains unseparated from the Couches A-D1 portion of the ascus wall (indi

cated between large arrows}

Fig. 8 — Asterina carbonacea Cooke. Comparaison des clichés de microscopie optique et électronique

d'asques vidés. A. Asque montrant une paroi étirée au-dessus de la paroi déchirée (flèches) (micros-

copie optique]. Ce cliché montre que l'asque peut être interprété comme bituniqué à ce grandisse

ment. Comme on peut le voir sur la Fig. B, la Couche D2 (D2) s'étend au-delà des restes de la paroi

[flèches]. B. Vue correspondant à la Fig. A, avec la résolution du microscope électronique à trans:

mission, L'asque s'ouvre (petites flèches) pour permettre une extension de la paroi ascale, formée

à partir de la couche D2. La Couche D2 reste liée aux Couches A-D1 de la paroi ascale (portion indi:

quée entre les grandes flèches]

Source : MNHN. Paris

THE ASCUS OF ASTERINA CARBONACEA 263

An apical extension of the protoplast is maintained from the beginning of the

Couche D2 wall deposition (Figs. 5-9). The usual position of the apical extension

is in a line on the approximate axis of the ascus. The structural integrity of the

ascus apex extension and the Couche D2 socket into which it fits can be demons-

trated in squash mounts in which the protoplast is mechanically separated from

the ascus cell wall. Occasionally a slight separation occurs immediately above

the ascus apex extension, forming a spacial artifact,

The inner-wall surface interface with the apical cytoplasmic extension is undu-

late as a result of the underlying surface configuration of the banded pattern Cou-

che D1. This feature can be identified with a through-focus examination which

demonstrates an overlapping array of curving focus-planes formed by the band

boundaries. The spiral rods formed from the optical properties of the protoplast

inner-wall surface can be seen in some microscope preparations.

Ascosporogenesis occurs after the formation of the ascus wall is completed. Most

of the asci are eight-spored, althrough some were seen to have only four pigmen-

ted ascospores. The ascus shape changes as the ascospore initials are formed, pre-

sumably during meiosis and especially during the latter stages when the ascospore

wall is deposited.

With the formation of the ascospores, the ascus assumes a more rounded shape.

During this stage, the Couche D layers undergo further modification as the ascus

stretches to accommodate the developing ascospores (Figs. 5 B-C, 6). At ascos-

pore release, the outer wall layer splits (Figs. 8, 9). The Couche D2 layer extends

as a tube.

Contrary to the impression gained from light microscopic viewing (Fig. 8 A),

there is no separation of the Couche D2 layer from the other wall layers (Figs.

8 B, 9). The orientation of the microfibrils in the wall matrix after ascospore eja-

culation indicate no upward displacement from the original interface of Couche

DI and Couche D2 (Fig. 8 BI.

The ascospores leave the ascus in single-chain formation (Fig. 9 DJ and exit the

extended wall via the unmodified, open apical end of the surrounding tube (Figs.

8-9). The expended asci, consisting of the collapsed lower wall and the tubular

extension of the secondary wall, often remain in situ in the hymenium

DISCUSSION

The results of this study support a recognition of the asterinaceae and related

families as a sister group to the loculoascomycetes which were defined by LUT-

TRELL (1955) as « Ascis bitunicatis, in ascostromate evolutis ». The Asterina ascus

cannot be equated with the bitunicate ascus as defined by LUTTRELL (1951) and

implicated by ERIKSSON (1984). The ascus structure is similar to that described

by HONEGGER (1978) as the « type eu-archaeascé of LETROUIT-GALINOU,

1973 » that ERIKSSON (1981) termed « rostrate ».

The asci from Asterina correicola Cooke & Massee and Asterina sp. were said

to develop from proliferating croziers (SWART, 1969). Their development and the

sympodially produced asci of A. carbonacea originate in a manner suggestive of

the mode of ascus formation discussed by PARGUEY-LEDUC (1977) as « Dan-

geardies simples ». The asci of Placoasterella baileyi were found to arise from a

terminal cell of the fertile member of a duel hyphal system making up the asco-

Source : MNHN. Paris

Don R. REYNOLDS

Sol

urce : MNHN. Paris

THE ASCUS OF ASTERINA CARBONACEA 265

carp (TYSON & GRIFFITHS, 1976a). The ascus-bearing cell was noted to ultima-

tely be connected to a binucleate penultimate cell.

THEISSEN (1913) described the ascus of the genus Asterina species as having

a double tunica with the inner sporesack tightly surrounding the spores and the

outer, mostly very thin, slimy tunica. The illustrations of the ascus in this early

review of the genus Asterina indicate a thick nonlayered wall delimiting the ascus ;

no details of the apical region were provided. The outer tunica was likely a refe-

rence to the reaction that was obtained when iodine was applied to the ascus in

several species.

Sudan Black B stains for total lipids (O'BRIEN & McCULLY, 1981). The blue

reaction in asci without KOH pretreatment possibly indicates the presence of iso-

lichenin (CULBERSON, 1969). The light blue staining of the ascus dome and the

darker blue reaction of the inner surface of the secondary wall with KOH pre-

treatment might be indicative of curled molecular segments presents in the secon-

dary wall material which is destined to undergo stretching (BARAL, 1987).

Spore ejaculation triggers the phenomenon which is the historic basis of cha-

racterization of the bitunicate ascus (LUTTRELL, 1951). The primary wall ruptu-

res in the apical region and slides down the secondary wall which stretches into

a tube through which the ascospores are distributed (REYNOLDS, 1971 ; BEC-

KETT & al., 1974 ; BEZERRA & KIMBROUGH, 1982 ; PARGUEY-LEDUC, 1977;

PARGUEY-LEDUC & JANEX-FAVRE, 1982 ; BELLEMERE & HAFELLNER, 198

NIYO & al., 1986].

Fig, 9 — Diagramatic representations of the Asterina carbonacea Cooke wall structure as seen in light and

electron microscopic views. A comparison of the undischarged ascus with the ascus with the inner

wall extended. A. The undischarged ascus in an electron microscopic view. B. The discharged ascus

in an electron microscopic view. At ascospore discharge, the ascus wall will rupture (X] near where

Couche D1 forms an enlargement and adjacent to the Couche D2 or « apical dome » portion of the

ascus. Stress lines are formed over the nasse apicale (NA) in Couche D2. Couche D2 extends beyond

the remainder of the ascus wall (S) at the rupture (X). C. The undischarged ascus in a light microsco-

pic view. The primary wall (PW) encloses the secondary wall which is largely deposited as an apical

dome (DO) where an apical chamber with a nasse apicale (NA] occurs. The bicelled ascospores (AS)

are contained in an oval chamber shaped during ascosporogenesis by the stretching of the secondary

wall material. D. The discharged ascus in a light microscopic view. The primary wall (PW) splits

to allow the extension of the inner elastic wall (EW). The ascospores [AS] distend the inner canal

of the extended wall as they are discharged from the lower portion of the ascus. The arrows indicate.

direction of ascospore discharge in the undischarged ascus. A = Couche A, B = Couche B, C =

Couche €, Di = Couche D1, D2 = Couche D2.

Fig. 9 — Représentations schématiques de la structure de la paroi d' Asterina carbonacea Cooke, observée

au microscope optique et électronique. Comparaison d'un asque fermé et d'un asque dont la paroi

interne est étirée, A. Asque fermé, en microscopie électronique. B. Asque ouvert, en microscopie

électronique. A l'éjection de l'ascospore, la paroi de l'asque se rompt (X) à l'endroit où la Couche

DI est élargie et adjacente à la couche D2 (« dóme apical » de l'asque]. Des lignes de scission se créent

dans la couche D2, au-dessus de la nasse apicale (NA). La Couche D2 s'étire au-delà de la paroi ascale

(S) au point de rupture (X). C. Asque fermé, en microscopie optique. La paroi primaire (PW) entoure

la paroi secondaire qui forme un dôme apical (DO) oà apparait une chambre apicale avec une nasse

apicale (NA), Les ascospores bicellulaires (AS) sont contenues dans une chambre ovale formée au

cours de l'ascosporogenèse par une extention de la paroi secondaire. D. Asque ouvert, en microsco-

pie optique. La paroi primaire [PW] se divise pour permettre l'extension de la paroi élastique inté-

rieure (EW). Les ascospores (AS) distendent le canal interne de la paroi lorsqu'elles sont expulsées

de la partie inférieure de l'asque. Les flèches indiquent la direction de l’6jection des ascospores dans

l'asque fermé. À = Couche À, B = Couche B, C = Couche C, D1 = Couche D1, D2 = Couche D2

Source : MNHN, Paris

266 Don R. REYNOLDS

The technique stressed by BELLEMERE (1971) and other French workers for

observations on the ascus wall structure at the resolution of the electron micros-

cope is that attributed to THIERY (1967) ; the deposition patterns of the polysac-

charides comprising the ascus wall were enhanced with thiocarbohydrazide or

thiosemicarbazide and with silver proteinate staining. On the other hand, other

recent workers such as HONEGGER (1985) and NIYO & al. (1986) were able to

discern the wall patterns with the use of uranyl acetate and lead citrate, as was

done in this study. I believe that the Thiéry Technique is very useful for impro-

ving the constrast of micrographs but is not a neccessity for the interpretation of

the ascus wall structure.

The Asterina ascus appears bitunicate at the resolution of the light microscope

(Fig. 9 A). The formation of this ascus follows the same sequential pattern as that

of the bitunicate ascus (REYNOLDS, 1971). Yet, the wall structure is not the same

(Fig. 9). The distribution of the banded pattern secondary wall, Couche D (BEL-

LEMERE, 1971), is different than that of the bitunicate ascus with separable wall.

The Couche D layer is characterized by the vertical band pattern of the bitunicate

ascus, yet this secondary wall material is measurably more concentrated in the

apical portion of the ascus. The bulge of Couche D1 at the point where Couche

D2 begins is suggestive of the thickening of the wall found by SAMUELSON &

KIMBROUGH (1978) in Thelebolus polysporus (Marst.) Otani & Kanzawa. Unlike

the ascus of that species, the upper portion of the Asterina ascus wall does not

undergo a separation into an ectotunica and an endotunica during spore ejacula-

tion. Couche D2 stretches into a tube without separation from the rest of the wall.

The ascospores are dispersed through the resultant channel in the extension of

the wall.

The presence of density lines that run parallel to the periphery of the ascus and

across the vertical columns of the banded pattern are an indicator of the reorien-

tation of the secondary wall material during ascospore formation. The increase

in density of these lines just above the nasse apicale might result from the focus

of stress in the stretching ascus at that pivotal point ; the meniscus reported by

ERIKSSON (1981) likely results from mechanical disruption of the wall at this stress

point. Applying the observation of MARTIN & al. (1976) that the « contorted plas-

malemma » is related to an increase in the ascus volume, I suggest that Couche

D1 absorbs the changes in the ascus wall during ascosporogenesis while Couche

D2 functions during ascospore dispersal.

The definition of an ascostroma in HAWKSWORTH & al. (1983) is a stroma in

or on which asci are produced ; the term was said by them to be usually restric-

ted to groups with ascolocular ontogeny. These editors give the definition of Asco-

loculares as ascomycetes having asci developing in cavities in a preformed stroma.

An alternate term, pseudothecium, was defined as an ascostromatic ascocarp having

asci in numerous unwalled locules. The ascocarp formation by Asterina, inclu-

ding A. carbonacea, was investigated by GAILLARD (1893) who found that the

fruitbody developed from a hyphal cell before the appearance of the ascus. RYAN

(1926) confirmed this sequence in eighteen illustrated species of Asterina

The ascoma of Asterina begins from a hyphal cell that, in turn, is the source

of a duel hyphal system. The first developed system forms the ascocarp, and the

second forms the ascogenous system. Therefore the ascoma is an ascostroma sensu

LUTTRELL (1951).

Source : MNHN. Paris

THE ASCUS OF ASTERINA CARBONACEA 267

The systematic implication of this study is that broached by LUTTRELL (1955)

in his discussion of the exceptions (the Coryneliales and the Coronophorales| to

the definition of the subclass Loculoascomycetes because of the occurrence of a

nonbitunicate ascus in an ascostroma. Extrapolating the results of this study, the

groups pointed out by LUTTRELL (1973) as having an ascus that is « globose to

broad oblong or clavate (less than 3 times as long as broad) » apparently also com-

prise a major exception to his definition. This ascus type is found in the Asterina-

ceae as well as the Seuratiaceae and possibly other ascostromatic families such

as the Philipselliaceae. These families are predicted as nonbitunicate-ascus ascos-

tromatic, but not Euascomycetes, sister taxa that are phylogenetically near the

ascostromatic ascomycetes with a bitunicate ascus.

REFERENCES

ARNAUD A., 1918 — Les Astérinées. Thése, Faculté des Sciences de Paris. Montpellier,

Coulet

BARAL H. O., 1987 — Lugol's solution/IKI versus Melzer's reagent : hemiamyloidity, a uni-

versal feature of the ascus wall. Mycotaxon 29 ; 299-450.

BECKETT A., HEATH I. B. and McLAUGHLIN D. J., 1974 — An atlas of fungal ultrastruc-

ture. London, Longman.

BELLEMERE A., 1971 — Les asques et les apothecies des Discomveċtes bituniquċs. Ann.

Sci, Nat. Bot., sér. 12, 12 : 429-464.

BELLEMERE A. et HAFELLNER J., 1982 — Etude ultrastructurale des asques bituniqués

de l'Hysterographium fraxini (Pers. ex Fr.) de Not. (Ascomveċtes, Hvsteriales) : Dévelop-

pement de la paroi et déhiscence. Cryptogamie, Mycol. 3 : 261-295.

BEZERRA J.L. and KIMBROUGH J. W., 1982 — Culture and cytological development of

Rhytidhysterium rufulum on Citrus. Canad. J. Bot. 60 : 568-579.

CULBERSON C. F., 1969 — Chemical and botanical guide to lichen products. Chapal Hill, The

University of North Carolina Press.

ERIKSSON O., 1981 — The families of bitunicate Ascomycetes. Opera Bot. 60 : 1-220.

ERIKSSON O., 1984 — Outline of the ascomycetes, 1984. Systema Ascomycetum 3. Umea,

O. Eriksson : 1-72

GAILLARD A., 1893 — Note sur les hyphopodies mycéliennes et la formation des péri-

thèces des Asterina. Bull. Soc. Mycol. France 9 : 95.

HAWKSWORTH D. L., SUTTON B. C. and AINSWORTH G. C., 1983 — Ainsworth and Bisby’s

dictionary of the fungi (including the lichens), 7th edition. Kew, Surrey, England. Common-

wealth Mycological Institute.

HONEGGER R., 1978 — The ascus apex in lichenized fungi I. The Lecanora -, Peltigera

and Teloschistes - types. Lichenologist 10 : 47-67.

HONEGGER R., 1985 — Ascus structure and ascospore formation in the lichen-forming Chae-

notheca chrysocephala (Caliciales). Sydowia 38 : 146-157.

LETROUIT-GALINOU M. A., 1973 — Les asques des lichens et le type archaeascé. The

Bryologist 76 : 30-47.

LEVEILLE J. H., 1845 — Champignons exotiques. Ann. Sci. Nat. Bot., ser. 3, 3: 38-71

LUTTRELL E, S., 1951 — Taxonomy of the pyrenomycetes. Univ. Missouri Stud. 24 : 1-120.

LUTTRELL E. S., 1955 — The ascostromatic ascomycetes. Mycologia 47 : 511-532.

Source : MNHN. Paris

268 Don R. REYNOLDS

LUTTRELL E. S., 1973 — Loculoascomycetes. In : AINSWORTH G. C., SPARROW F. K. &

SUSSMAN A. S., The fungi, an advanced treatise, Vol. IVA. London, Academic Press :

135-219.

MARTIN M., GAY J. L. and JACSKON G. V. H., 1976 — Electron microscopic study of

developing and mature cleistothecia of Sphaerotheca mors-uvae. Trans. Brit. Mycol. Soc.

66 : 473-487.

NIYO K. A., McNABB H. S., Jr., and TIFFANY L. H., 1986 — Ultrastructure of the asco-

carps, asci, and ascospores of Mycosphaerella populorum. Mycologia 78 : 202-212.

O'BRIEN T. P. and McCULLY M. E., 1981 — The study of plant structure, principles and

selected methods. Melbourne, Australia, Termarcarphi Pty. Ltd

OREJUELA C. G., 1944 — New or heretofore unreported species of the higher Ascomyce-

tes from Colombia and Venezuela, Mycologia 36 : 429-459.

PARGUEY-LEDUC A. et CHADEFAUD M., 1963 — Les asques du Cainia incarcerata

(Desm.) von Arx et Müller et la position systématique du genre Cainia. Rev. Mycol. (Paris)

28 : 200-234.

PARGUEY-LEDUC A., 1977 — Les asques des Pyrénomycètes. Rev. Mycol. (Paris) 41

281-339.

PARGUEY-LEDUC A. et JANEX-FAVRE M. C., 1982 — La paroi des asques chez les Pyré-

nomycètes : étude ultrastructurale. I. Les asques bituniqués typiques. Canad. J. Bot. 60

1222-1230.

REYNOLDS D. R., 1971 — Wall structure of a bitunicate ascus. Planta 98 : 244-257.

RYAN R. W., 1926 — The development of the perithecia in the Microthyriaceae and a com-

parison with Meliola. Mycologia 18 : 100-110.

SAMUELSON D. A. and KIMBROUGH J. W., 1978 — Asci of the Pezizales. IV. The apical

apparatus of Thelebolus. Bot. Gaz. 139 : 346-361

SHERWOOD M. A., 1981 — Convergent evolution in Discomycetes from bark and wood

Bot. J. Linn, Soc. 82 : 15-34.

STEVENSON J. A., 1943 — Fungi novi denominati I. Mycologia 35 : 629-637.

SWART H. J., 1969 — Proliferating croziers in Asterina. Trans. Brit. Mycol. Soc. 53 : 322-323

THEISSEN F.von, 1913 — Die Gattung Asterina in systematischer Darstellung

Abh. K. К. Zool.-Bot. Ges. Wien 7 : 1-130, Pl. 1-8.

THIÉRY J.-P., 1967 — Mise en évidence des polysaccharides sur les coupes fines en micros-

copie électronique. J. Microscop. 6 : 987-1018.

TYSON K. and GRIFFITHS D. A., 1976a — Developmental morphology and fine structure

of Placoasterella baileyi 1. Host/parasite relationships and development of the ascocarp

centrum. Trans, Brit. Mycol. Soc. 66 : 249-262.

TYSON K. and GRIFFITHS D. A., 1976b — Developmental morphology and fine struc-

ture of Placoasterella baileyi I1. Ascus and ascospore development. Trans. Brit. Mycol. Soc.

66 : 263-279.

WARD H. M., 1882 — Researches on the morphology and life history of a tropical pyre-

nomycetous fungus. Quart. J. Microscop. Sci. 22 : 347-354, pl. 28-29

Source : MNHN. Paris

Cryptogamie, Mycol. 1987, 8 (4) : 269-288 269

REMARQUES À PROPOS DE L'ULTRASTRUCTURE

D'ASCOSPORES « ALBINOS » OU

« GRANULEUSES » DE MUTANTS

D'ASCOBOLUS IMMERSUS PERS. (gène bs).

par L.M. MELENDEZ-HOWELL’, A BELLEMERE** et J.-L. ROSSIGNOL***

RÉSUMÉ — Les ascospores du mutant albinos [gene bs) de l'Ascobolus immersus outre leur défaut de

pigmentation présentent certains caractéres ultrastructuraux du mutant granuleux [sur le même gène)

en particulier une périspore interne discontinue se limitant a des loupes. Une modification du métabo-

lisme lipidique associée a la perturbation de certains échanges entre l'ascospore en développement et

l'épiplasme de l'asque parait accompagner l'absence de pigmentation des albinos.

SUMMARY — In Ascobolus immersus the non pigmented ascospores of the albino mutant (bs gene) show

some ultrastructural characters of the granular mutant (on the same gene) specially a discontinuous internal

perispore restricted to a few lens. The absence pigmentation albino mutant spores is probably associated

to a modification of lipid metabolism in connection with perturbations of the exchanges between the

developing ascospore and the ascus epiplasm.

MOTS CLES : Ascobolus, ascospores, mutants, pigmentation, lipides.

* UA 257, CNRS, Laboratoire de Cryptogamie du Muséum d'Histoire Naturelle, 12, rue Buffon, F 75005

Paris, France.

** Laboratoire de Mycologie, Ecole Normale Supérieure de Lyon (Services de Saint-Cloud}, Grille d'Hon:

neur, Parc de Saint-Cloud, F 92211 Saint-Cloud Cedex, France.

*** Laboratoire IMG, Bátiment 400, Université Paris-Sud, F 91405 ORSAY Cedex, France

Source : MNHN, Paris

270 L.M, MELENDEZ-HOWELL, A. BELLEMERE et J.-L. ROSSIGNOL

Chez le champignon Ascomycète hétérothallique Ascobolus immersus 19 gènes

contrôlent la couleur de l'ascopore (NICOLAS & al., 1981). L'examen ultrastruc-

tural du développement des ascospores chez deux mutants (gene bs) de l' Ascobo-

lus immersus l'un & ascospores albinos (bs) et l'autre A ascospores granuleuses

(bs-g) fait suite à une étude de la souche sauvage et de deux mutants (gène bz),

l'un à ascospores « albinos » et l'autre à ascospores « ceinturées » publiée anté-

rieurement (BELLEMERE & al., 1981). Les techniques mises en ceuvre, les défi-

nitions des divers constituants morphologiques, de la paroi ascosporale, et celle

des principaux stades de leur développement utilisées ici ont été indiquées dans

cette précédente publication.

RÉSULTATS

I - Les ascospores du mutant albinos (gène bs)

(PL.I à IV ; Fig.1 A1 à Gi).

Dans ses grandes lignes, le développement des ascospores de ce mutant est ana-

logue à celui de la souche sauvage et des mutants sur le gène bz. Il présente

cependant quelques caractères originaux et remarquables qui seront analysés suc-

cessivement.

1. Les loupes de la périspore.

L'essentiel de la périspore, Patag+, qui correspond à la périspore moyenne de

la souche sauvage contient dans sa partie la plus profonde des portions Patag —

lappelées ici loupes) en forme de lentille plan-convexe dont la face saillante est

dirigée vers l'extérieur. Ces lentilles n'existent pas encore au tout début du déve-

loppement de la paroi ascoporale (Pl.I-B ; Fig. 1Aı]. Au plus jeune stade où on

les observe elles sont nettement hémisphériques [PLI-C ; Fig. 1B1]. Chaque spore

n'en contient que quelques-unes. La base plane de ces loupes est séparée de la

paroi intermédiaire de la spore par une trés mince couche (cs), plus dense et un

peu plus réactive que le reste de la périspore (PI.I-C, E ; Fig. 1Bi). Au contact de

la face convexe de chaque loupe, le contenu de celle-ci devient trés clair, formant

une trés mince zone externe (ze), finement irrégulière, bien distincte (PL.I-C ; Fig.

1Bi). À un stade un peu plus аве [PI.II-A ; Fig. 1Ci), une masse interne (mi) sub-

sphérique, d'aspect plus foncé, se forme dans la loupe tandis que la mince cou-

che basale sombre est un peu moins réactive. Plus tard, cette masse interne envahit

la majeure partie de la loupe (PI.II-C, D, PI.IILB ; Fig. 1D1, Ex). La substance fon-

damentale originelle (so) de celle-ci se réduit désormais à des lambeaux périphé-

riques dont la texture est plus ou moins irrégulièrement vésiculeuse. L'étroite zone

claire (ze) qui borde la loupe vers l'extérieur s'épaissit un peu ; on y discerne de

fins trabécules radiaires mettant en relation la partie interne de la loupe avec la

périspore. Quand la spore est mûre (PL.IV-A ; Fig. 1F1, Gi), la masse interne de

la loupe est devenue plus réactive ainsi que les lambeaux de la substance origi-

nelle ; sous la loupe, la mince bande de périspore (cs) est maintenant revétue d'une

étroite couche claire qui fait suite vers l'intérieur à cette zone externe transpa-

rente de la loupe. La zone externe claire de la loupe s'est épaissie aux endroits

oü persistent des lambeaux (la) de la substance originelle de la loupe. Elle vient

plus ou moins faire saillie dans la périspore et les loupes paraissent ainsi un peu

boursouflées.

Source : MNHN, Paris

ASCOSPORES D'ASCOBOLUS IMMERSUS 271

Fig, 1 — Abscobolus immersus. Schémas du développement des loupes de la périspore chez deux mutants

du gene bs, l'un albinos (A1 à G1) et l'autre granuleux [A2 à G2}. Voir le texte.

Fig. 1. — Abscobolus immersus. Schemes of the development of perispore lens in two mutants of b8 gene ;

one is albino (A1 to G1], the other is granular (A2 to G2). See the text.

Source : MNHN. Paris

272 L.M. MELENDEZ-HOWELL, A. BELLEMERE et J.-L. ROSSIGNOL.

2. Les vésicules de la périspore.

Outre les loupes, la périspore contient aussi, à certains stades, de nombreuses

vésicules subglobuleuses de tailles diverses et d'aspect clair (PL.II-C ; Fig. 1D1).

Ces vésicules n'apparaissent pas avant qu'une masse interne ne se soit formée

à l'intérieur de chacune des loupes (PL.II-A). Au début, elles sont toutes de petite

taille et leur contenu est transparent (PL.II-B ; Fig. 1C1).

Ultérieurement, à la périphérie de la spore, on observe aussi de grosses vesicu-

les à contenu légérement réactif (PL.Il-C, IIl-D, IV ; Fig. 1D: à Gi)

Ceci porterait à croire que les petites vésicules naissent dans la partie profonde

de la périspore, se déplacent de facon centrifuge en s'accroissant sans doute par

fusion. Des figures semblent indiquer que certaines grosses vésicules peuvent con-

fluer avec la limitante externe de la spore et libérer leur contenu à l'extérieur

(PL.IN-D).

Il est remarquable que, dans les spores âgées, la structure de ces grosses vésicu-

les soit analogue à celle des loupes (PLIV-A à D ; Fig. 1G1)

3. La surface externe de la spore.

La surface de la très jeune ascospore montre des ondulations assez profondes,

relativement étroites et régulières (PLI-A ; Fig. 1A1). Rapidement celles-ci s'atté-

nuent très nettement (PI.I-B, C ; Fig. 1B1). Quand des vésicules sont présentes

dans la périspore [PL.II-C], des dépóts localisés et réactifs viennent se plaquer sur

la spore ainsi que sur la surface interne de l'ċpiplasme (Pl.IIl-C). La surface de

la spore devient ensuite irrégulière (PI.II-D, IMI-D ; Fig. 1D: à Fi) : elle forme des

extrusions étroites et minces. Recouvertes de dépóts réactifs en forme de goutte-

lettes, celles-ci ont un aspect caractéristique qui rappelle celui d'un chapelet de

saucisses (PI.IV-D ; Fig.1Gi).

4. La structure de la paroi intermédiaire de l'ascospore.

Elle est toujours complexe et d'analyse difficile en raison de sa minceur et d'arté-

facts résultants de défauts, même minimes, de l'orthogonalité des coupes. On a

vu plus haut que sous les jeunes loupes existe une mince couche basale de péris-

pore nettement plus réactive (PL.I-C, E ; Fig. 1В1). Sous celle-ci, une mince cou-

che blanche est assez bien marquée (PI.I-C) a l'extérieur d'une couche castor

faiblement réactive au début.

Quand une masse interne sombre se développe dans les loupes, la partie la plus

interne de la périspore devient plus réactive sur toute l'étendue de la spore et non

pas seulement sous la base des loupes (PLIIL-A ; Fig. Ei). Puis, ultérieurement,

cette mince couche réactive disparait (Fig. 1F1) ; en dehors des loupes, la couche

blanche devient plus épaisse et elle est clivée par une très mince lamelle réactive

[PLIII-B ; Fig. 1F1) qui est d'ailleurs transitoire (PLIV-B ; Fig. 1Gi).

5. Les globules lipidiques du sporoplasme.

Ces globules lipidiques, qui sont toujours relativement abondants, sont surtout

remarquables dans les jeunes ascospores encore dépourvues de loupes (PI.l-B, D)

A ce stade, en effet, certains d'entre eux paraissent entourés d'une mince zone

claire d'épaisseur irrégulière bordée d'une membrane comme s'ils étaient conte-

nus dans un compartiment de séquestration.

Source : MNHN, Paris

ASCOSPORES D‘ASCOBOLUS IMMERSUS 273

Dans les ascospores mares (PI.IV-E}, les globules lipidiques ont un aspect banal ;

ils sont légérement plus réactifs au test de Patag vers l'extérieur et contiennent

quelques grains plus opaques aux électrons.

On sait que les ascospores des mutants albinos (géne bz) différent des ascospo-

res sauvages non seulement par l'absence de pigmentation de la partie la plus pro-

fonde de la périspore [périspore interne) mais, de plus, par la structure de la surface

sporale, de la périspore moyenne, de la paroi intermédiaire et des globules lipidi-

ques du sporoplasme (BELLEMERE & al., 1981].

Les ascospores du mutant albinos (géne bs), elles aussi dépourvues de pigment,

diffèrent cependant des ascospores précédentes.

_ Tout d'abord, leur périspore interne ne forme pas une couche continue, mais

est réduite à des loupes séparées, ce qui est inattendu.

— De plus, leur surface est beaucoup plus irrégulière, avec des extrusions impor-

tantes.

— Leur paroi intermédiaire ne présente pas de lamelle noire permanente et leur

périspore moyenne ne contient pes de granules Patag +.

— Enfin, les globules lipidiques de leur sporoplasme n'ont pas l'aspect caracté-

ristique « en passoire » de ceux de l'albinos b2.

L'étude d'un autre mutant de ce gène bs (mutant granuleux) permet d'appor-

ter quelques éclaircissements à propos de ces modifications structurales.

II - Les ascospores du mutant granuleux (gène bs)

(P1.V a VIII ; Fig.1 A2 à G2).

Seules certaines parties de la surface de ces ascospores sont pigmentées, ce qui

leur confére un aspect granuleux au microscope photonique.

Dans ses grandes lignes, le développement de ces ascospores est analogue à celui

des ascospores du mutant albinos (gène bs). Toutefois, en fin de maturation, un

dépôt pigmentaire se forme dans la paroi sporale. On n'envisagera ici que les points

remarquables de ce développement.

1. Les loupes de la périspore.

Chez les ascospores du mutant granuleux (gène bs), la périspore comporte des

loupes dont la structure et le développement sont analogues à ceux décrits plus

haut chez le mutant albinos (РІ.У-В, р, Е; УГА; VII-A, B ; Fig. 1A2 à G2).

2. La pigmentation.

L'aspect granuleux de la spore résulte de sa pigmentation qui affecte essentiel-

lement la masse interne de chacune des loupes et de façon moins intense et, plus

tardive, la substance fondamentale qui entoure celle-ci ainsi que la couche castor

de la paroi intermédiaire (Fig. 1G2)

Les premières traces de pigmentation apparaissent d'abord de façon dispersée

dans la masse interne des loupes, sous forme de petits grains très fins bien réac-

tifs au test de Thiéry (PI.VII-A ; Fig. 1E2).

Source : MNHN, Paris

274 L.M, MELENDEZ-HOWELL, A. BELLEMERE et J.-L. ROSSIGNOL

Plus tard (PL.VII-B), des granules de pigmentation plus gros se forment dans la

masse interne des loupes. Ils sont constitués d'une masse amorphe peu réactive

contenant un nombre réduit de petits grains fortement Patag +. Ces granules peu-

vent, çà et là, être plus ou moins fusionnés en bâtonnets sinueux, surtout vers

la périphérie de la masse interne (PI.VII-B, VIII-A ; Fig. 1F2). Dans les lambeaux

de substance fondamentale de la loupe apparaissent alors de petits grains très fins,

dispersés, moins réactifs que ceux des granules (PI.VII-B). Ultérieurement, les

bâtonnets sinueux de la périphérie de la masse interne de la loupe deviennent

plus nombreux, se soudent plus ou moins les uns aux autres et forment ainsi une

sorte de mince croüte irrégulière autour de cette masse (Р.УШ-В).

Quand la spore est mare (PI.VIIL-C ; Fig.1G2), la densité et la réactivité de la

masse interne des loupes sont renforcées par des sortes de cannelures qui résul-

tent probablement de la fusion de nombreux bâtonnets sinueux mentionnés plus

haut. Ces cannelures irrégulières, rapprochées, très réactives, sont plus ou moins

parallèles et disposées un peu obliquement par rapport au plan équatorial de la

spore. La partie centrale de la masse interne des loupes peut être dépourvue de

cannelures (PI.VII-C) et présenter alors un aspect grisâtre assez uniforme. Au cours

de la maturation, la substance fondamentale de la loupe continue à se charger

de pigment, et, par suite, son aspect devient alors analogue à celui que présentait,

au début, la masse interne ; elle ne semble pas être pigmentée davantage quand

la spore est mûre. La couche castor se charge peu à peu de pigment et à la fin

devient très dense et très réactive.

3. La structure de la périspore.

La périspore des ascospores granuleuses (PI.VI-A, E ; Fig. 1D2) a une structure

analogue à celle des ascospores albinos (géne bs). Elle contient des vésicules dont

les plus externes, qui sont plus grosses, semblent aussi pouvoir se déverser a la

surface de la spore. Certaines de ces grosses vésicules peuvent contenir des gra-

nules de pigmentation (PI. VII-B].

4. Surface sporale.

Elle rappelle celle des ascospores albinos (gène bs) aux stades jeunes (РІ.У-А ;

Fig. 1A2) comme aux stades plus âgés. Lors de ceux-ci, on y observe aussi des

extrusions en forme de « chapelets de saucisses » parfois plus spectaculaires encore

que celles du mutant albinos (PI.VL-C, D ; Fig. 1D2 a F2). La surface de la spore

mûre est aussi trés irréguliére [PL.VIL-A ; Fig. 1G2).

5. Paroi intermédiaire.

Aux jeunes stades du développement (PI.V-B, C, D ; Fig.1Bz, C2), la base de la

périspore est renforcée d'une mince couche basale lamellaire trés réactive au test

de Thiéry (mais no: active au citrate ; РІ.У-Е) qui recouvre la couche blanche

de la paroi intermédiaire sur toute la surface de la spore.

Un peu plus tard, une trés mince couche claire, Patag —, apparait à l'extérieur

de la couche basale (PI.VI-A ; Fig. 1D2) et cela sur toute la surface de la spore ;

son épaisseur d'abord irrégulière surtout sous les loupes, s'uniformise ensuite.

La couche basale réactive se trouve ainsi placée dans la position de la lamelle noire

observée chez les ascospores de la lignée sauvage, au milieu de la couche blanche

de la paroi intermédiaire.

Source : MNHN, Paris

ASCOSPORES D’ASCOBOLUS IMMERSUS 275

Plus tard, lorsque les grains fins de pigmentation commencent a se déposer

(PI.VII-A ; Fig. 1Е2), Іа lamelle noire perd sa réactivité en dehors des loupes. Bien-

tat elle ne forme plus sous celles-ci que de trés courtes striations transversales,

fines et contigués (Patag +) (PI.VILB ; Fig. 1F2) et elle s'efface plus ou moins com-

plċtement sur le reste de la surface sporale. Quand les spores sont mares, la lamelle

noire n'est plus distincte (PI.VIII-C ; Fig. 1G2)

6. Les globules lipidiques du sporoplasme.

Ces globules (PI.V-E, VB) ont un aspect analogue à ceux de la lignée sauvage ;

a la périphérie, ils sont un peu plus granuleux que ceux du mutant albinos (gene

bs).

En dehors de la pigmentation des loupes, les différences ultrastructurales entre

le mutant granuleux (gène bs) et le mutant albinos (gene bs) sont faibles : chez

les deux mutants la structure de la périspore est analogue, la surface sporale pré-

sente également des extrusions bien marquées, les différences dans l'aspect des

globules lipidiques du sporoplasme et dans la paroi intermédiaire de la partie pro-

fonde sont légères.

CONCLUSION

Il est remarquable que la mise en place du caractère albinos portant sur le gène

bs s'accompagne de l'établissement d'un caractère propre au mutant granuleux

[limitation de la périspore interne à des loupes séparées) et que les caractères ultra-

structuraux distinctifs du mutant albinos soient des modulations de ceux du mutant

granuleux, le mutant albinos étant en quelque sorte une expression extréme du

mutant granuleux.

Pour comparer utilement les albinos bz et bs, il convient donc de faire abstrac-

tion chez ce dernier des caractères propres au mutant granuleux, pigmentation

mise à part. Alors il apparaît que les modifications qui, chez ces deux mutants,

accompagnent l'absence de pigment sont relativement discrètes et en nombre

réduit : structure et localisation (vacuolaire ou non] des globules lipidiques du spo-

roplasme, détails de l'organisation de la paroi intermédiaire de l'ascospore (mince

couche réactive externe et lamelle noire], importance relative des irrégularités de

la surface sporale.

Parmi ces caractéres, ce sont ceux des globules lipidiques qui sont les premiers

perceptibles au cours du développement ; leur particularité est méme affirmée

avant la formation des loupes chez les albinos bs

L'expression du caractère albinos est donc directement en relation avec le méta-

bolisme lipidique de la spore. La modification de celui-ci semble perturber les

échanges entre la spore et l'épiplasme de l'asque car, non seulement la surface

sporale est affectée, mais aussi la paroi intermédiaire dont on a déjà suggéré qu'elle

pourrait jouer un rôle important dans le contrôle de ces échanges (loc. cit).

La voie vers l'absence de pigment s'établit donc assez précocement mais se

ble être indépendante ou avoir des rapports très lâches avec la voie menant à l'é

fication de la structure de type granuleux puisque celle-ci peut s'établir au cours

du développement de l'albinos bs.

L'étude de doubles mutants, soit entièrement albinos à la fois sur le gène bz

et sur le géne bs, soit albinos pour bz et granuleux sur bs, pourrait se révéler inté-

ressante en permettant une analyse plus fine des conditions d'expression du carac-

tére albinos.

Source : MNHN. Paris

276 L.M. MELENDEZ-HOWELL, A. BELLEMERE et J.-L. ROSSIGNOL

REMERCIEMENTS

Nous avons plaisir à remercier pour leur assistance technique H., CHACUN et M.-C. MALHERBE pour

les coupes ultrafines, M. LETALNET et E. VAST pour les photographies, T. CASSES pour les dessins,

E. VADE pour la frappe du manuscrit

BIBLIOGRAPHIE

BELLEMERE A., MELENDEZ-HOWELL L.M., NICOLAS A. et ROSSIGNOL J.-L., 1981 —

Etude ultrastructurale comparative du développement des ascospores chez la lignée sau-

vage et chez des mutants à ascospores « ceinturées » ou « albinos » de l'Ascobolus immer-

sus Pers. ex. Fr. Cryptogamie, Mycol. 2 : 299-359.

NICOLAS A., ARNAISE S., HAEDENS V. and ROSSIGNOL J.-L., 1981 — Ascospore mutants

and genetic map of Ascobolus immersus stock 28. J. Gen. Microbiol. 125 : 257-272.

Source : MNHN, Paris

ASCOSPORES D'ASCOBOLUS IMMERSUS 277

ABRÉVIATIONS DES LÉGENDES DES PLANCHES

bâtonnets de pigment le

couche blanche In

cannelure m

couche basale sombre sous les mi

loupes р

couche « castor » pa

couche claire à la base d'une pc

loupe

couche « pollux » pe

croüte pigmentée Pg

dépôts pi

épiplasme pl

extrusion de la surface sporale pm

glycogène pp

grains fins de pigment 50

globules lipidiques

granules de pigment sp

loupe spp

lambeaux persistant de Y

substance originelle de la vp

loupe ze

limitante externe

lamelle noire

mitochondrie

masse interne de la loupe

périspore

paroi de l'asque

partie centrale de la masse

interne

périspore externe

petits grains de pigments

paroi intermédiaire

plasmalemme

périspore moyenne

paroi propre de la spore

substance fondamentale

originale de la loupe

sporoplasme

sporoplasme périphérique

vacuole

vésicule de la périspore

zone externe de la loupe

ABBREVIATIONS IN PLATES

rodlet of pigment le

white sheath In

fluting m

dark basal layer under the lens mi

« castor » layer. p

clear layer at the basis of a pa

lens pe

« pollux » layer

pigmented crust pe

deposits pg

epiplasm pi

extruded part on the spore pl

surface pm

glycogen рр

small granules of pigment so

lipid bodies

big granules of pigment sp

lens spp

persisting shreads of original v

lens substance vp

investing membrane

black sheath

mitochrondria

internal part of the lens

perispore

ascus wall

central body of the internal

part

external perispore

small granules of pigment

intermediate wall

plasmalemma

median perispore

proper wall of the spore

original fundamental substance

of the lens

sporoplasm

external sporoplasm

vacuole

perispore vesicle

external part of the lens

Source : MNHN. Paris

278 L.M. MELENDEZ-HOWELL, A. BELLEMERE et J.-L. ROSSIGNOL

Planche I — Abscobolus immersus, mutant albinos (géne bs]. — A. Contact sinueux entre une

jeune ascospore et l'épiplasme [Patag]. — B. Jeune ascopore encore dépourvue de lou-

pes [Patag]. Remarquer les globules lipidiques dans des aires claires du sporoplasme (fle-

ches) (cf. aussi ID]. — C. Loupe bien développée dans la périspore moyenne (рт) d'une

jeune ascospore (Patag). — D. Même ascospore que IB (Patag). Les globules lipidiques

(gl) sont inclus dans des structures vacuolaires (flèches). -- E. Détail de la paroi inter-

médiaire d'une ascospore un peu plus âgée que IC (Patag). La couche castor (cc) est mince,

la couche pollux, sous-jacente, n'est pas encore clairement distincte

Plate 1 = Abscobolus immersus, albino mutant (bs gene]. — A. Meandering contact

between a young ascospore and epiplasm (Patag). - B. Young ascospore still without

lens (Patag). Note the lipid bodies in clear areas of epiplasm [arrows] (cf. also ID). —

C.Well developed lens in the median perispore (pm) in a young ascospore [Patag]. —

D. The same ascospore as IB (Patag). Lipid bodies are included in vacuolar structures

(arrows). — E. Detail of the intermediate wall in a ascospore somewhat older than IC

(Patag). Castor layer (cc) is thin, the underneath pollux layer is not yet clearly distinct.

Planche II — Abscobolus immersus, mutant albinos (gene bs). — A. Ascospore séparée de

l'épiplasme par une large vacuole. Dans une loupe de la périspore une masse interne

(mi) se développe [Patag). — B. Présence de nombreuses petites vésicules dans la péris-

pore (Patag). — C. La périspore contient de petites vésicules dans sa partie profonde

t des vésicules plus volumineuses prés de sa surface oü l'on observe quelques extru-

sions. La loupe est presque complètement envahie par la masse interne [mi] (Patag). —

D. Des dépôts réactifs (d) sont présents dans la vacuole de l'épiplasme [v] et à la surface

de l'ascospsore. La masse interne de la loupe est importante (Patag).

Plate II — Abscobolus immersus, albino mutant (bs gene). — A. The ascospore is separated

from epiplasm by a big vacuole. In a perisporal lens an internal part (mi) is developing

(Patag). — B. Numerous small vesicles are present in the perispore (Patag). — C. In the

internal part of the perispore the vesicles are small ; they are bigger near its surface ;

this shows some extrusions. The lens is nearly quite invaded by the internal part (mi)

(Patag). — D. Reactive deposits (d) are present in epiplasmic vacuoles (v| and on the

ascospore surface. The internal part of lens is important (Patag).

Planche II — Abscobolus immersus, mutant albinos (géne bs). A. Détail de la paroi

d'une ascospore au niveau de sa paroi intermédiaire, au-dessous d'une loupe (Patag)

La mince couche de périspore qui se trouve sous la loupe est bien distincte. Une trés

mince couche réactive [flèche] limite la base de la périspore à ce stade [fleche]. — B. Détail

de la paroi d'une ascospore au niveau de sa paroi intermédiaire (Patag). En dehors de

la loupe la couche blanche (bl) est plus épaisse que sous la loupe et parait dédoublée

{double flèche]. — C. Dépóts réactifs (d) dans une vacuole de l'épiplasme et au contact

entre celle-ci et le cytoplasme de l'asque [Patag]. — D. Surface d'une ascospore en cours

de maturation (Patag). Noter l'abondance de vésicules assez volumineuses à contenu réactif

(мр). L'aspect de la surface sporale [triple flèche] suggère l'exocytose de ces vésicules

Plate III — Ascobolus immersus, albino mutant (bs gene). — A. Detail of an ascospore wall

at the intermediate wall level, under a lens (Patag). The thin perispore sheath under the

lens is quite distinct. At this stage a very thin reactive layer (arrow) limits the perispore

basis (arrow). — B. Detail of ascospore wall at its intermediate wall level (Patag). Out

of the lens the white sheath (bl} is thicker than under the lens and it seems made of

two parts (double arrow). — C. Reactive deposits in an epiplasmic vacuole at its contact

with the ascus cytoplasm [Patag]. — D. Surface of a maturing ascospore (Patag). Note

numerous well-developed vesicles with a reactive content [vp]. Exocytose of these vesi-

cles is suggested by the character of ascospore surface (tripple arrow)

Planche IV — Ascobolus immersus, mutant albinos (вепе bs). — A. Ascospore proche de

la maturité |Patag). La zone externe de la loupe (ze] est dilatée au niveau des lambeaux

de substance fondamentale (la). Sous la masse interne réactive de la loupe une mince

couche claire apparait (fleche). — B. Paroi d'une ascospore proche de la maturité (Patag).

La périspore contient de petites vésicules internes d'aspect clair. Le contenu d'une vési-

cule externe volumineuse est différencié. — C, D. Détails de la surface d'une ascospore

proche de la maturité (Patag). La surface comporte des extrusions [ex] couvertes de dépóts

Source : MNHN, Paris

ASCOSPORES D'ASCOBOLUS IMMERSUS 279

(a). Dans la périspore les vésicules (vp) ont un contenu différencié dont l'aspect rappelle

celui des loupes. — E. Détail du sporoplasme d'une ascospore mare [Patag]. Le plasma-

lemme (pl] forme de nombreuses indentations (double flèche] ; le sporoplasme périphé-

rique, clair, est dépourvu d'organites ; dans les mitochondries [m], qui ont perdu leur

réactivité, les crêtes sont presque effacées.

Plate IV — Ascobolus immersus, albino mutant (bs gene]. — A. Ascospore nearly mature

[Patag]. The external part of the lens [ze] is expanded where shreds of fundamental subs-

tance (la) are present. A thin clear layer is present under the reactive internal part of

the lens (arrow). — B, Wall of a nearly mature ascospore |Patag). Small clear vesicles

are contented in the perispore. An external voluminous vesicle has a differenciated con-

tent. — C, D. Details of the surface of a nearly mature ascospore (Patag). There are extru-

sions (ex) with deposits (d) on its surface. Vesicles [vp] in the perispore have a differentiated

content which looks like the lens content. — E. Detail of the sporoplasme of a mature

ascospore (Patag). Numerous indentations (double arrow] are seen on the plasmalemma

(pl). No organelles are present in the clear external part of the sporoplasm ; mitochon-

dria are not reactive, their crests have quite dissappeared

Planche V — Ascobolus immersus, mutant granuleux (géne bs]. — A. Paroi d'une jeune

ascospore (Patag). Le contact entre la périspore (p) et l'épiplasme (e) est très sinueux.

La paroi intermédiaire n'est pas encore distincte. B. Jeune ascospore avec une loupe

(l) à la base de la périspore (Patag). La paroi intermédiaire, bien distincte, est complexe

(cf. VC). — C. Détail de VB (Patag). Dans la paroi intermédiaire la zonation de la couche

castor est trés apparente. — D. Développement d'une masse interne dans une loupe de

la périspore d'une ascospore assez jeune (Patag). — E. Détail du sporoplasme d'une jeune

ascospore (Patag) (cf. ID). — F. Loupe de la périspore d'une ascospore assez jeune (acé-

tate d'uranyle, citrate de plomb].

Plate V — Ascobolus immersus, granular mutant (bs gene). — A. Wall of a young ascos-

pore (Patag). The contact between the perispore (p) and the epiplasm (e) is meandered.

The intermediate wall is not yet distinct. — B. Young ascospore with a lens (l) in the

perispore basis (Patag). The intermediate wall is quite distinct and complex (cf. VC]. —

C. Detail of VB (Patag). The castor layer is clearly underlayered. — D. An internal part

is developing in a perisporal lens of a young ascospore (Patag). — E. Detail of the sporo-

plasm of a young ascospore (Patag). (cf. ID). — F. Lens in the perispore of a rather young

ascospore (uranyl acetate, lead citrate)

Planche VI — Ascobolus immersus, mutant granuleux |gene bs], — A. Paroi d'une ascospore

en cours de maturation (Patag). Dans la loupe de la périspore la masse interne (mi) est

devenue très importante. Hors de la loupe la périspore contient de petites vésicules inter-

nes, claires, et des vésicules externes, plus grosses, à contenu réactif, La surface sporale

est irrégulière, — B. Détail du sporoplasme d’une ascospore en maturation (Patag). (cf

IVE]. — C. Detail de la surface d’une ascospore (Patag). Noter les extrusions irrégul

res (ex) et les dépôts réactifs |d). — D. Détail de la surface d’une ascospore (acetate

d'uranyle, citrate de plomb]. Les extrusions filiformes (ex) portent des dépôts très réac-

tifs disposés comme des chapelets de saucisses. — E. Détail de la périspore d'une ascos-

pore (acétate d'uranyle, citrate de plomb). La périspore moyenne, claire, contient des

vésicules vp) un peu opaques

Plate VI — Ascobolus immersus, granular mutant [bs gene]. — A. Wall of a maturing asco-

pore [Patag). The internal part [mi] of perispore lens is now very important. Out of the

lens there are small internal vesicles and bigger reactive external vesicles in the peris-

pore. The ascospore surface is irregular. — B. Detail of the sporoplasm of a maturing

ascospore (Patag) (cf. IVE). — C. Detail of an ascospore surface (Patag). Note irregular

extrusions [ex] and reactive deposits (d). — D. Detail of an ascospore surface (uranyl

acetate, lead citrate). Thread-like extrusions (ex) bear very reactive deposits remending

beads of saussages. — E. Detail of the perispore of an ascospore (uranyl acetate, lead

citrate}. The clear median perispore contents rather dark vesicles (vp).

Planche VII — Ascobolus immersus, mutant granuleux (géne bs). — A. Détail de la paroi

d'une ascospore en début de pigmentation (Patag). La masse interne d'une loupe de la

périspore contient de nombreux grains de pigment, très fins (gf) alors qu'il y en a très

Source : MNHN Paris

280 L.M. MELENDEZ-HOWELL, A. BELLEMERE et J.-L. ROSSIGNOL

peu dans le lambeau de substance fondamentale (la). La couche castor (cc) et la couche

pollux se pigmentent aussi. La lamelle noire (In) е bien réactive sous la loupe mais n'est

pas distincte ailleurs (flèche). В. Détail du bord d'une loupe de la périspore d'une

ascospore en cours de pigmentation (Patag). Dans la masse interne de la loupe les fins

grains de pigment sont portés par des granules (gr) coalescents en une croüte vers la

périphérie. Le lambeau de substance fondamentale de la loupe (la) contient de nombreux

grains fins de pigment qui sont dispersés. La couche castor (cc) est bien pigmentée

Plate VII — Ascobolus immersus, granular mutant (bs gene). — A. Detail of the ascospore

wall in an early stage of pigmentation (Patag). The internal part of a perispore lens con-

tents many pigmented, very thin granules (gf) ; those are rather scarce in the shread of

fundamental substance (la). Castor layer (cc) and pollux layer are also pigmented. The

black sheath (In) well reactive under the lens is not elsewhere distinct (arrow). — B. Detail

of the border of a perispore lens in a pigmenting ascospore (Patag). The thin pigmented

granules of the internal part of a lens are born on big granules (gr) which at the peri-

phery, are fusing in a crust. In the shread of fundamental substance of the lens (la) there

are numerous scattered thin pigmented granules, The castor layer (cc) is well pigmented.

Planche VIII — Ascobolus immersus, mutant granuleux [gene bs). — A. Détail d'une loupe

de la périspore d'une ascospore en cours de pigmentation (acétate d'uranyle, citrate de

plomb). La technique de contraste ne fait apparaitre que de courts bâtonnets de pigment

à la périphérie de la masse interne de la loupe. — B. Détail de la périspore surmontant

une loupe dans une ascospore en cours de pigmentation [Patag). Une vésicule volumi-

neuse de la périspore [vp] contient des granules de pigment (gr). Dans la loupe la zone

externe n'est pas pigmentée ; la masse interne montre des grains trés fins portés par des

granules qui, à la périphérie, sont associés en une sorte de croûte [cr]. — C. Périspore

avec loupe dans une ascospore mare (Patag). Dans la masse interne de la loupe le pig-

ment forme des cannelures (ca] trés réactives ; celles-ci font défaut dans sa partie cen-

trale (pc). Dans le lambeau de substance fondamentale (la) le pigment forme des granules

(gr) ou des bátonnets (b). La périspore elle-méme n'est pas pigmentée, sa surface externe

est très irrégulière. — D. Détail de VIIIC (Patag) : contact entre les cannelures de pig-

ment [ca] de la masse interne de la loupe et les bâtonnets (b) et les granules (gr) de pig-

ment d'un lambeau de substance fondamentale (la) de la loupe

Plate VIII — Ascobolus immersus, granular mutant (bs gene). — A. Detail of a perispore lens

in a pigmenting ascopore (uranyl acetate, lead citrate]. Only short rods of pigment appeared

contrasted in the periphery of the internal part of the lens. — B. Detail of the perispore

over a lens in a pigmenting ascospore (Patag]. The perispore shows a big vesicle (vp}

with pigmented granules (gr). The external part of the lens is unpigmented ; in the inter-

nal part very thin granules are born on bigger granules which at the periphery are fused

in a sort of crust (cr]. — C. Perispore with lens in a mature ascospore (Patag). In the

internal part of the lens the pigment is disposed in reactive flutings (ca) ; these lack in

the central part (pe). In the shread of fundamental substance the pigment is disposed

either in granules (gr) or rodlets (b). The perispore is not pigmented ; its external surface

is very irregular. — D. Detail of VIIIC (Patag) : contact between the pigmented flutings

(ca) of the internal part of the lens with the rodlets (b) and the granules of pigment per-

taining to a shread of fundamental substance of the lens (la)

Source : MNHN, Paris

PLANCHE I 281

«or er

аана as

Source - MNHN Paris

282 PLANCHE II

Source : MNHN, Paris

PLANCHE III 283

Source : MNHN, Paris

284 PLANCHE IV

Source : MNHN. Paris

PLANCHE V 285

Source : MNHN, Paris

486 PLANCHE VI

Source : MNHN. Paris

PLANCHE VII 287

Source : MNHN. Paris

288 PLANCHE VIII

Source : MNHN, Paris

Cryptogamie, Mycol. 1987, 8 (4) : 289-313 289

CONTROLE MORPHOGENETIQUE DE LA

DIFFERENCIATION DES SCLEROTES DE SCLEROTINIA

FRUCTIGENA : II - ÉTUDES CYTOLOGIQUES

ET ULTRASTRUCTURALES

par L. NAJIM*

RÉSUMÉ — Le « shift-down » de température permet de suivre aisément le développement de tous les

stades de différenciation des sclérotes, des primordia à la maturation, facilitant ainsi des études cytologi:

ques et ultrastructurales sur les primordi:

Les primordia de sclérotes du Sclerotinia fructigena montrent un développement important des hyphes

intra-hyphales, une mélanisation des hyphes principales et des transformations ultrastructurales de quel-

ques organites, particulièrement le système vacuolaire, les microcorpuscules (s microbodies »), les noyaux

le reticulum endoplasmique, les accumulations fibrillaires et les mitochondries.

Cette réorganisation structurale durant la différenciation des primordia va dans le sens d'une recher-

che d'un nouvel équilibre physiologique, c'est-à-dire, d'un état de croissance active représenté par l'hyphe

végétative vers un état de vie au ralenti : le sclérote.

SUMMARY - The shift-down of temperature permits to follow easily the development and differentia

tion of all states of sclerotia : from primordia to a maturation and facilitates cytological and ultrastructu-

ral studies.

Sclerotial primordia of Sclerotinia fructigena show an important development of intra-hyphal hyphae

a melanization of principal hyphae and ultrastructural transformations of some organels, particularly

vacuolary system, microbodies, nuclei, endoplasmic reticulum, fibrillar accumulations and mitochondria

This structural reorganization during primordia differentiation are in the way of a research of a novel

equilibrium : that is to say from one state with a high level of rate growth represented by the vegetative

hyphae to a state of slow rate of growth : the sclerotia

MOTS CLES : Sclerotinia fructigena, sclérote, primordia, hyphes principales, hyphes intra-hyphales, équi

libre physiologique, mélanines

* Laboratoire de Cryptogamie, Faculté des Sciences de Rabat, avenue Ibn Babota, B.P. 1014, Rabat -

MAROC

Source : MNHN Paris

290 L. NAJIM

INTRODUCTION

La morphogenése et le développement des sclérotes ont été étudiés par divers

auteurs (WILLETTS, 1968a-b, 1969, 1972 ; CHET & HENIS, 1975)

Sur le plan morphogénétique, les sclérotes sont formés de deux parties : le cor-

tex et la médulla. Le cortex est feutré et plus ou moins hyalin, il entoure la médulla

qui est constituée d'un ensemble d'hyphes agglutinées les unes contre les autres

et qui sont riches en substances nutritives (WILLETTS, 1972, 1978).

En général, leur développement se déroule en trois étapes successives : une étape

d'initiation qui consiste en une différenciation des primordia, suivie d'une étape

caractérisée par un accroissement de la taille et enfin une étape de maturation

oü l'on distingue nettement le cortex de la médulla.

Les différentes étapes sont conditionnées par les facteurs trophiques et physi-

ques qui jouent un rôle déterminant dans le contrôle de la différenciation des sclé-

rotes. Cette différenciation s'accompagne de changements physiologiques et

cytologiques importants, car ils marquent le passage à la vie au ralenti.

Dans les conditions de croissance normales, les sclérotes de Sclerotinia fructi-

gena commencent leur différenciation à la fin de la conidiogenèse, et plus parti-

culièrement de la macroconidiogenèse. En effet, dans les conditions naturelles,

la fin de l'étape de la macroconidiogenèse constitue le point de départ de la diffé-

renciation des sclérotes.

Toutefois, l'étape de la macroconidiogenèse n'est pas nécessairement obligatoire,

car avec le systéme de transfert (NAJIM, 1987) on peut induire une différencia-

tion absolue de sclérotes en utilisant seulement les facteurs physiques comme

stimuli.

Les données sur la différenciation des sclérotes étant acquises, nous les avons

utilisées dans un double but ; d'une part pour étudier les changements morpholo-

giques et cytologiques qui accompagnent la différenciation des sclérotes tout en

les comparant parallèlement avec les structures déjà observées de l'hyphe végé-

tative (NAJIM & TURIAN, 1979a) et de l'hyphe conidiogène (NAJIM & TURIAN,

1979b). Ce travail permettra de mieux comprendre les phénomènes de passage

d'un état de croissance active à un état de vie au ralenti, qui peut durer plusieurs

années.

MATERIEL ET METHODES

Souches et méthodes culturales

La souche de Sclerotinia fructigena utilisée a été déjà décrite (NAJIM, 1987). Tou-

tefois, l'induction des primordia a été suivie sur des cultures ayant poussé pen-

dant 7 jours à l'obscurité à 23°C, puis transférées durant 48 ou 96 h à 3°C.

Microscopie électronique à balayage

Le matériel fongique est fixé selon la méthode décrite pour l'étude de l'ultras-

tructure de l'hyphe végétative du S. fructigena (NAJIM & TURIAN, 1979a). Tou-

tefois, après la déshydratation à l'acétone (25, 50, 75 et 100%), les sclérotes sont

sectionnés puis montés directement sur un porte-objet et couverts par une fine

pellicule d'or pour assurer la conductivité.

Source : MNHN Paris

SCLEROTINIA FRUCTIGENA 291

Microscopie électronique a transmission

Des primordia de sclérotes, dont les stades de développement sont déterminés

au microscope optique, sont prélevés et fixés pour la microscopie électronique

4 transmission.

Les primordia sont fixés de la méme facon que les hyphes végétatives ; toute-

fois, la durée de fixation est étendue à 2 h pour la glutaraldéhyde à 296, et 2 h

pour le tétroxyde d'osmium a 2% en raison de la forte agglutination des hyphes

Le matériel est déshydraté à l'alcool (25, 50,75 et 100%) et enrobé dans du SPURR

(1969)

Les coupes subissent successivement une double coloration d'abord à l'acétate

d'uranyle à 2% en solution aqueuse et puis au citrate de plomb selon la méthode

de REYNOLDS (1963).

RESULTATS

Morphogenése et différenciation des sclérotes

Une vue d'ensemble d'un sclérote de 4 mm, sectionné transversalement per-

met de distinguer le cortex et une zone centrale compacte, la médulla [Fig. 1).

Le cortex est constitué de plusieurs zones plus ou moins distinctes ; on y distin-

gue une évolution structurale de l'extérieur vers l'intérieur (Figs. 2, 3). La partie

externe du cortex est feutrée et l'organisation des hyphes y est très lâche, elles

se croisent et s'entrecroisent formant ainsi des alvéoles ou des méats et donnant

un aspect spongieux aux cortex (Fig. 2). La partie interne du cortex est constituée

de cordons qui sont formés de trois ou quatre hyphes accolées longitudinalement

(Fig. 3). Les cordons s'enchevêtrent également dans un sens ou dans un autre.

Il n'existe pas de forme structurale particulière permettant de distinguer le cortex

de la médulla : toutefois, les hyphes s'organisent dans cette limite en un pro-

senchyme (Fig. 4). Par contre, les sclérotes, qui se développent dans le substra-

tum, différencient un cortex réduit avec des hyphes aplaties qui s'entrecroisent

et qui sont mélanisées (Fig. 5).

La médulla forme la partie centrale du sclérote, dont les hyphes sont mélani-

sées et struccurées en un pseudoparenchyme (Fig. 4). Ces hyphes sont par ailleurs

fortement liées entre elles par un ciment inter-hyphal.

Différenciation des primordia de sclérotes

Aprés 48 h de transfert des cultures végétatives a 3°C, les primordia commen-

cent leur différenciation, ces derniers forment en premier le cortex (Fig. 6). Ces

hyphes se croisent à plusieurs endroits, et sécrétent des mucopolysaccharides sous

forme de fibrilles. Ces fibrilles maintiennent les hyphes reliées entre elles (Fig.

6). En outre, un certain nombre de transformations sont notées dans ces hyphes :

une augmentation de la ramification (Fig. 7a), un épaississement de la paroi (Fig.

7b) et une mélanisation qui peut aussi toucher le cytoplasme (Fig. 7a,b).

Après 4 jours de transfert à 3°C, les organites des hyphes situées dans la zone

intermédiaire entre le cortex et la médulla se remplissent d'un ciment en appa-

rence formé de mélanines. Ces hyphes mélanisées et limitrophes à la médulla for-

ment la barrière protectrice de cette dernière.

Source : MNHN, Paris

292 L. NAJIM

La médulla des primordia de sclérotes se différencie progressivement, les hyphes

s'accolent à l'aide du ciment inter-hyphal sécrété par ces dernières et les parois

s épaississent fortement (Fig. 8). Par ailleurs, de nombreuses hyphes intra-hyphales

sont localisées dans la médulla des primordia. Les structures des hyphes intra-

hyphales sont en général préservées, alors que celles des hyphes principales sont

entiérement colmatées par une substance opaque (Figs. 8-13].

Ultrastructure des organites et des différentes formations

Le système vacuolaire — Le système vacuolaire se développe dans les hyphes

du cortex et dans celles de la médulla, il est formé de petites vacuoles à contenu

très dense aux électrons de diamètre variable entre 1 et 2 um (Figs. 10-12), et de

vacuoles plus larges et à contenu moins dense aux électrons (Figs. 25-26). Dans

le cas général, l'origine du système vacuolaire est lié au système réticulai

le cas du S. fructigena, il apparaît que la membrane nucléaire participe à

tion des vacuoles (Figs. 22, 24).

labora-

En effet, certaines vacuoles d'origine nucléaire, dés les premiers stades de leur

formation, peuvent séquestrer des organites (Fig. 23) et du matériel cytoplasmi-

que (Figs. 16, 22, 24) et les « digérer » progressivement.

Cette digestion des organites, qui va dans le sens d'une recherche d'un nouvel

équilibre structurel, se fait aussi par l'intermédiaire de vacuoles autophagiques

(Fig. 25).

Les mitochondries sont progressivement digérées par les vacuoles autophagi-

ques [Fig. 25], laissant apparaitre aprés la lyse des structures de type myélinique

(Fig. 26).

Les microcorpuscules (« Microbodies ») — Les microcorpuscules dans les

hyphes de la médulla ont une membrane unique et une matrice dense finement

granulaire, leur aspect général est tout à fait identique à ceux déjà décrits dans

les hyphes végétatives, dans les macroconidies et les primordia de selerotes (NAJIM

& TURIAN, 1979b ; NAJIM & al., 1979).

À ce stade de différenciation, les microcorpuscules ne sont pas associés aux glo-

bules lipidigues (Fig. 12) qui constituent la principale source de réserve.

Les noyaux — Dès l'initiation des sclérotes, les noyaux [Figs. 8-9-13) devien-

nent progressivement sphériques et contiennent un nucléole fibrillo-granulaire (Fig,

8), et quelquefois des membranes intranucléaires (NAJIM, 1982]. Dans les hyphes

marginales de la médulla, le déplacement des organites continue à se faire malgré

la baisse de température. En effet, les noyaux peuvent encore migrer à travers

un pore septal de 0.2 à 0.3 um de diamétre (Figs. 15, 16).

Les septa — Comparé à l'hyphe végétative, oü les septa ne sont pas épais, dans

les sclérotes ces formations s'épaississent davantage et contiennent tout au long

quelques granulations (Fig. 16), apparemment du méme type que celles décrites

dans les épaississements de paroi de S. fructigena (NAJIM 1982 b,c).

Reticulum endoplasmique — La chute de température fait subir au systéme

endomembranaire des transformations importantes : le réticulum endoplasmique

notamment s'organise d'une facon similaire à un appareil de Golgi (Figs. 17, 18).

Les saccules du réticulum endoplasmique lisse s'empilent les uns sur les autres :

on peut dénombrer jusqu'à 8 saccules pour cet ensemble réticulaire à la figure 17.

Source : MNHN, Paris

SCLEROTINIA FRUCTIGENA 293

Les extrémités de ces saccules sont digitées à la maniére des dictyosomes (Figs.

17, 18). Sur ces microphotographies, il n'apparaît pas de différences d'épaisseur

entre les deux membranes d'un méme saccule (face supérieure et face inférieure].

Accumulations fibrillaires — Des formations de microfilaments sont abon-

dantes dans les primordia de sclérotes (Figs. 19, 20). Ces microfilaments ont un

diamètre de 60 à 70 Â, ils sont groupés en micro-réseaux et montrent une organi-

sation cristalline en coupe transversale (Fig. 20).

Les mitochondries et les formations de figures myéliniques — Dans les

primordia de sclérotes, les mitochondries ont une matrice moins dense aux élec-

trons et présentent peu de crêtes (Fig. 9), elles sont comparables à celles des macro-

conidies (NAJIM, 1979). Certaines de ces mitochrondries ont des crêtes qui se

transforment en corps myéliniques (ou en « whorls ») (Figs. 14, 21).

DISCUSSION

La biogenése est dépendante de la masse des hyphes produites en culture et

notamment des nombreuses hyphes intra-hyphales qui sont générées et qui carac-

térisent la formation d'une part de la médulla et d'autre part du cortex. Les hyphes

intra-hyphales ont été aussi observées chez le mutant « clock » de Neurospora

(LOWRY & SUSSMAN, 1966), chez le Linderina (CHAN & STEPHEN, 1967) ow

encore chez le Trichophyton (FORLEY & al., 1975) ; selon ces auteurs, ce type de

développement est lié à la regénération des champignons.

Cependant, ce phénomène apparait comme déterminant dans la différenciation

des sclérotes. En effet, sur le plan cytologique les hyphes intra-hyphales sont pro-

tégées et peuvent assurer la pérennité de ce champignon ou en quelque sorte la

regénération de cette espace. Le mode de formation de ces hyphes intra-hyphales

reste en partie obscure ; selon CALONGE |1968} ces derniéres se développeraient

à partir des septa de S. fructigena ou encore à la suite d'anastomoses entre les dif-

férentes hyphes (CALONGE, 1968 ; HOFFMAN, 1972). Nos résultats tendent aussi

à confirmer ces hypothèses.

Sur le plan cytologique, les hyphes intra-hyphales sont baignées dans un ciment

probablement constitué de mélanines et se différencient des autres par leur paroi

épaisse. L'origine de ce ciment serait probablement lié aux petites vacuoles au

contenu dense aux électrons.

Ce ciment peut, en effet, assurer la protection des hyphes intra-hyphales qui

pourront assurer la regénération de cette espéce.

La biosynthése des polysaccharides pariétaux et extra-pariétaux est fortement

activée durant la différenciation des sclérotes ; elle n'est donc pas inhibée par la

chute de la température. Ceci a d'ailleurs été confirmé par DARGENT & al. (1984).

Le rôle des mélanines est probablement de protéger les structures qui persis-

tent dans les sclérotes et leur accumulation paraît être liée à l'activation des phénol-

oxydases (tyrosinases) au stade primordia de sclerotes [WONG & WILLETTS, 1974).

Sur le milieu de croissance MCA, les hyphes végétatives présentent à leur apex

de gros globules lipidiques fortement osmiophiles qui seraient principalement com

posés d'acides gras insaturés (NAJIM & TURIAN, 19794). Par opposition, les hyphes

intra-hyphales des primordia de sclérotes, formés sur le méme milieu MCA, con-

tiennent des globules lipidiques dont la densité électronique est relativement fai-

Source : MNHN, Paris

294 L. NAJIM |

ble. On pourrait donc supposer que les globules lipidiques des sclérotes sont

composés d'acides gras saturés.

Dans les primordia, ces lipides semblent constituer la principale source de

réserve ; toutefois, à ce stade de développement, on n'observe pas de contiguité

entre les microcorpuscules je mierobodies »] et les globules lipidiques. Les micro- |

corpuscules, chez le S. fructigena, deviennent proéminents dans les primordia de

sclérotes (NAJIM & al., 1979)

Sur le plan physiologique, CHET & HENIS (1975) ont mis en évidence un cycle

glyoxylique lors de la genése des sclérotes chez le Sclerotinia rolfsii. Cependant,

CHET & al. (1972) et MURAKAWA & al. (1975) notent que l'activité de la péroxy-

dase chez le Sclerotinia augmente du stade primordia à la maturation.

Ainsi, les microcorpuscules observés dans les primordia seraient probablement

des péroxysomes du fait méme de la non contiguité avec les globules lipidiques

Par contre, il n'est pas exclu que lors de la germination des sclérotes, et avec les

lipides comme principale source de carbone, que l'activité glyoxylique n'appa-

raisse pas.

La modification structurelle touchant le réticulum endoplasmique qui s'orga-

nise sous la forme d'un dictyosome est décrite pour la première fois ; cette struc-

ture semble être typique aux sclérotes. Probablement qu'à ce stade de

différenciation, les empilements de saccules du réticulum endoplasmique lisse doi-

ven jouer un rôle dans les sécrétions et les synthèses

Parallèlement, des formations de microfilaments sont observées dans les hyphes

où la croissance est limitée. À l'opposé, dans les hyphes végétatives en pleine crois-

sance, ces formations para-cristallines se présentent rarement. Ces formations sem-

blent être dissociées dans le cytoplasme des hyphes végétatives sous la forme de

microfilaments de 70 À de diamètre et ces derniers, en association avec les micro-

tubules (cytoplasmiques ou nucléaires), joueraient probablement un rôle dans le

déplacement des organites (Figs. 16, 17] ou dans les courants protoplasmiques.

En outre, des formations de ce type s'accumulent dans les hyphes végétatives pla-

cées dans des conditions limitantes pour la croissance (BECK & al., 1970 ; ALLEN

& al., 1974 ; TANAKA £ MIZUGANA, 1974; OULEVEY € al., 1978) et dans cer-

tains cas dans les noyaux (BECK & al., 1970 ; VAN WINKLE &al., 1971 ; ALLEN

& al., 1974 ; TANAKA & MIZUNAGA, 1974).

En effet, dans les hyphes végétatives en pleine croissance (MCA), on trouve peu

de ces formations para-cristallines, mais des microfilaments dissociés (NAJIM &

TURIAN, 1979a ; NAJIM, 1979) ; ce qui nous amène à penser que les courants

protoplasmiques sont liés a la dissociation partielle de formations para-cristallines

en microfilaments ; notons que ces derniers ont été identifiés comme étant de

l'actine chez le Neurospora (ALLEN & SUSSMAN, 1978 ; SIKORA & MARZLOUF,

1982).

Les mitochondries, dans les primordia de sclérotes, ont tendance a présenter

des corps myéliniques ou « worls ». Selon BECK & GREENAWALT (1976), ces for-

mations en « worls » pourraient étre constituées de phospolipides.

CONCLUSION

De nombreuses transformations ultrastructurales sont mises en évidence lors

de la différenciation des primordia de sclérotes :

Source : MNHN. Paris

SCLEROTINIA FRUCTIGENA 295

— la paroi des hyphes s'épaissit, et la synthèse pariétale n'est pas inhibée, ce qui

favorise la septation et le développement des hyphes intra-hyphales ;

— les parois de certaines hyphes du cortex subissent une mélanisation, cette der-

niére pourrait prévenir la dessiccation des sclérotes ;

— les hyphes principales contenant les hyphes intra-hyphales subissent un col-

matage de leurs structures, par un ciment à forte densité électronique, ce dernier

pourrait étre constitué de mélanines. Par ailleurs, le systéme endomembranaire,

subit aussi des transformations :

* empilement de saccules de réticulum endoplasmique ;

* présence de deux types de vacuoles ;

+ participation de l'enveloppe nucléaire à la formation du systéme vacuolaire.

Certains noyaux présentent des invaginations de membranes (NAJIM, 1982a),

par contre d'autres deviennent quiescents et sphériques. Les mitochondries ont

moins de crêtes, elles présentent des structures similaires aux corps myéliniques.

En conclusion, toutes ces transformations montrent qu'un nouvel équilibre

physiologique se crée, avec une élimination des organites en excès [activité du

système vacuolaire, colmatage des hyphes principales) et la préservation d'un mini-

mum de structures vivantes (restructuration du système endomembranaire, des

noyaux et des hyphes intra-hyphales].

La biogenése des sclérotes peut donc se résumer comme suit : une condensa-

tion de structures vivantes et une élimination de la matiére en excés par voie

lytique.

REFERENCES

ALLEN E.D., LOWRY S.A. and SUSSMAN A.S., 1974 — Accumulation of microfilaments

in a colonial mutant of Neurospora crassa. J. Ultrastruct. Res. 48 : 455-465.

ALLEN B.D, and SUSSMAN A.S., 1978 — Presence of an actin-like protein in mycelium

of Neurospora crassa. J. Bacteriol. 135 : 713-716.

BECK D.P., DECKER G.L. and GREENAWALT J.W., 1970 — Ultrastructure of striated inclu-

sion in Neurospora. J. Ultrastruct. Res. 33 : 249-251.

BECK D.P. and GREENAWALT J.W., 1976 — Biogenesis of mitochondrial membranes in

‘Neurospora crassa during cellular differentiation. J. Gen. Microbiol. 97 : 97-110.

CALONGE F.D., 1968 — Origin and development of intra-hyphal hyphae in Sclerotinia fruc-

tigena. Mycologia 60 : 932-942.

CHAN C. and STEPHEN R.C., 1967 — Intra-hyphal hyphae in the genus Linderina. Canad.

J. Bot. 45 : 1995-1998.

CHET L, RETIG N. and HENIS Y., 1972 Changes in total soluble proteins and in some

enzymes during morphogenesis of Sclerotium rolfsii. J. Microbiol. 72 : 451-456.

CHET I. and HENIS Y., 1975 — Sclerotial morphogenesis in fungi. Annual Rev. Phytopa-

thol. 13 : 169-192.

DARGENT R., CHAVANT L., FONVIELLE J.-L. et WOLF C., 1984 — Influence d'un effec-

teur physique : la température sur l'ultrastructure de l' Aspergillus ochraceus. Compt. Rend.

Hebd. Séances Acad. Sci., Sér III, 299 : 831-836,

FORLAY J.F., JERSILD R.A. and NIEDERPRUEM D.J., 1975 — Origin and ultrastructure

of intra-hyphae in Tricophyton terrestre and T. rubrum. Arch. Microbiol. 106 : 195-200.

HOFFMAN G.P., 1972 — Heterokaryose bei Monilia fructigena. Phytopathol. Z. 73 : 326-340.

Source : MNHN. Paris

296 L. NAJIM

LOWRY RJ. and SUSSMAN A.S., 1966 — Intra-hyphal hyphae in « Clock » mutant of

Neurospora. Mycologia 58 : 541-548.

MURAKAWA S., FUNAKAWA S. and SATOMURA Y., 1975 — Role of sclerin on morpho-

genesis on Sclerotinia sclerotiorum de Bary (including S. libertiana Fuckel). Agric. Biol.

Chem. 39 : 645-650.

NAJIM L., 1979 — Contróle morphogénétique et études ultrastructurales d'une moisissure,

le Sclerotinia fructigena |Aderh-Ruhl} agent de la moniliose des arbres fruitiers. Swit., Uni-

versity of Geneva, n° 1926.

NAJIM L., ORTEGA-PEREZ R., VANDERHAGUE F. and TURIAN G., 1979 — Identifica-

tion of microbodies as peroxysomes in Sclerotinía fructigena (Aderh-Ruhl) by cytoche

mistry and isopyonic centrifugation. Proc. Roy. Microscop. Soc. 14 : 4.

NAJIM L. et TURIAN G., 1979a — Ultrastructure de l'hyphe végétative de Sclerotinia fructigena

Canad. J, Bot. 57 : 1299-1313

NAJIM L. and TURIAN G., 1979b — Conidiogenous loss of structurofunctional polarity

in the hyphal tips of Sclerotinia fructigena. Eur. J. Cell Biol. 20 : 24-27.

NAJIM L., 1982a — Nuclear membrane behaviour in Sclerotinia fructigena. Microbios Letters

22 : 85-97.

NAJIM L., 1982b — Localization of microvesicles in Fungus cell wall. I. In germinating conidia

of Sclerotinia fructigena. Microbios Letters 22 : 107-115.

NAJIM L., 1982c — Localization of microvesicles in fungus cell wall. II. Relation to patho-

genesis. Microbios Letters 22 : 143-149.

NAJIM L., 1987 — Contrôle morphogénétique de la différenciation des sclérotes de Scleroti-

nia fructigena : 1. Etudes physiologiques. Cryptogamie, Mycol. 8 : 209-217.

OULEVEY N., DICKER J.W. and TURIAN G., 1978 — Striated inclusion and defective mito-

chondria in the restricted form of the « amycelial » mutant of Neurospora crassa. Expe-

rientia 34 : 840.

REYNOLDS E.S., 1963 — The use of lead acetate at high pH as electron opaque stain in

electron microscopy. J. Cell Biol. 17 : 208-212.

SIKORA L. and MARZLOUF G.A., 1982 — Identification and isolation of actin from Neu-

rospora crassa. J. Gen. Microbiol. 128 : 439-445.

SPURR A.R., 1969 — A low-viscosity epoxy resin embedding medium for electron micros-

copy. J. Ultrastruct. Res. 26 : 31-43.

TANAKA K. and MIZUNAGA T., 1974 — Striated and crystalline inclusions in the nuclei

and cytoplasm of intact yeast protolasts. J. Ultrastruct. Res. 48 : 124-127.

VAN WINKLE W.B., BIESELE J.J. and WAGNER R.P., 1971 — The mitotic apparatus of

Neurospora crassa, Canad. J. Genet. Cytol. 13 : 873-888.

WILLETTS H.].. 1968a — The development of stromata of Sclerotinia fructigena and related

species. I. In culture. Trans. Brit. Mycol. Soc. 51 : 625-632.

WILLETTS H.J., 1968b — The development of stromata of Sclerotinia fructigena and related

species. II. In fruits. Trans. Brit. Mycol. Soc. 51 : 633-642.

WILLETTS H

species. III.

1969 — The development of stromata of Sclerotinia fructigena and related

urther observations and conclusions. Trans. Brit. Mycol. Soc. 52 : 309-314.

WILLETTS H.]., 1972 — The morphogenesis and possible evolutionary origins of fungal scle-

rotia. Biol. Rev. 47 : 515-536.

WILLETTS H.]., 1978 — Sclerotium formation. In : SMITH J.E. & BERRY D.R., The Filamen-

tous Fungi, Vol. III. London, E. Arnold : 197-211.

WONG A.L. and WILLETTS H.J., 1974 — Polyacrylamide-gel electrophoresis of enzymes

during morphogenesis of Selerotia of Sclerotinia sclerotiorum. J. Gen. Microbiol. 103 : 77-83.

Source : MNHN. Paris

SCLEROTINIA FRUCTIGENA 297

ABREVIATIONS UTILISEES DANS LES FIGURES

Cih ciment inter-hyphal Mb microcorpuscule

COR cordon ME médulla

co cortex N noyau

F faisceau de microfilaments n nucléole

g granulations P paroi

H hyphe mélanisée Re réticulum endoplasmique

HM automélanisation 5 septum

i globule lipidique v vacuole

M mitochondrie м corps de Woronin

ABBREVIATIONS USED IN FIGURES

Cih inter-hyphal cement Mb microbodies

COR strand ME medulla

co cortex N nuclei

F bundle of microfilaments n nucleoli

g granulations P wall

H melanized hyphae Re endoplasmic reticulum

HM automelanization 5 septum

L lipid globule v vacuole

M mitochondria w woronin body

Fig. 1 — Sclérote en coupe transversale, observé au microscope électronique à balayage :

on distingue le cortex (CO) et la médulla (ME)

Fig. 2 — Agrandissement de la zone intermédiaire entre le cortex et la médulla. Le cortex

est formé d'hyphes associées en cordons

Fig. 3 — Detail des cordons (COR), espaces libres entre les cordons.

4 — Détails de la médulla : hyphes baignées dans un ciment inter-hyphal (Cih). Plu-

sieurs hyphes paraissent colmatċes.

Fig. 5 — Détail de la surface d'un sclérote formé dans le substratum : sclérote à cortex lisse

et rċduit : hvphes colmatċes et s'entrecroisant (H).

Fig. 6 — Début de différenciation de sclérote (Primordium). Hyphes qui s'entrecroisent,

et accumulation de mucopolysaccharides.

Fig. 7 — a. Biogenése des sclérotes : primordium. Hyphes a parois épaisses et mélanisées,

accumulation du ciment inter-hyphal, ramification des hyphes. b. Large hyphe à paroi

épaisse (P) et automélanisation (HM).

Fig. 8 — Coupe à travers un primordium de sclérotes (après 4 jours de transfert) (même

type de structures que dans la figure 7). Formation du cortex avec des hyphes fortement

mélanisées (HM] dont les divers organites sont colmatés.

Paroi épaisse (P), forte accumulation du ciment inter-hyphal (Cih), vacuolisation inten-

sive dans les hyphes du cortex (v). Les noyaux sont sphériques (N). Forte agglutination

des hyphes de la médulla et développement des hyphes intra-hyphales.

Fig. 9 — Coupe longitudinale d'une hyphe de la médulla. Hyphe intra-hyphale dont la

structure est préservée, contenue dans une hyphe mélanisée [HM). Paroi épaisse des

deux hyphes.

Fig. 10 — Coupe d'une hyphe du cortex. Plusieurs vacuoles à contenu très dense aux élec-

trons [v]. Cytoplasme riche en polysomes. Paroi épaisse avec une forte accumulation

du ciment inter-hyphal (Cih)

Source : MNHN. Paris

298 L. NAJIM

Fig. 11 — Coupe transversale d'une hyphe de la médulla. Hyphe intra-hyphale avec des

globules lipidiques, des mitochondries (MJ et des vacuoles {v}. Structures entièrement

mélanisées de l'hyphe principale [HM]. Paroi épaisse des deux hyphes (P)

Fig. 12 — Détail de la structure d'une hyphe intra-hyphale. Nombreux globules lipidiques

[L], vacuoles à contenu dense aux électrons [v], mitochondries (M), microcorpuscules

(Mb] au voisinage des mitochondries et de nombreux polysomes.

Fig. 13 — Coupe transversale d'une hyphe de la médulla. Hyphe intra-hyphale, avec un noyau

(N) et un microcorpuscule (Mb), comprimant les structures entiérement mélanisées de

l'hyphe principale où subsistent encore des globules lipidiques.

Fig. 14 — Hyphe intra-hyphale avec des mitochondries montrant des figures myéliniques

(flèche)

Fig. 15 — Coupe longitudinale d'une hyphe de la médulla, Nombreux noyaux dans cette

hyphe [N]. Noyau passant à travers un pore septal. Les fléches montrent les « pressions »

que peut avoir subi le noyau et donc le sens de déplacement de ce dernier. Microcorpus-

cule fortement développé (Mb), saccules du réticulum endoplasmisque empilés (Re), fais-

ceau de microfilaments en coupe transversale (Е), granulations (g) observées le long du

septum épais [S]

Fig. 16 — Détail de la figure 15. Pression exercée sur le noyau montrant dans quel sens le

noyau se déplace (double flèche].

Fig. 17 — Empilement de saccules de réticulum endoplasmique lisse. Saccules du réticu-

lum, fenestrés à leurs extrémités (fléche)

Fig. 18 — Huit saccules du réticulum endoplasmique (Re) empilés les uns sur les autres

à la maniére d'un appareil de Golgi.

Fig. 19 — Accumulations fibrillaires : coupe longitudinale au niveau d'un faisceau de

microfilaments formant un véritable réseau [F].

Fig. 20 — Coupe transversale montrant l’organisation pseudo-cristalline des microfila-

ments (F).

Fig, 21 — Corps myélinique (« worls ») intra-mitochondrial (M)

Fig. 22 — Système vacuolaire [v) se formant à partir de l'enveloppe nucléaire (N).

Fig. 23 — Mitochondrie séquestrée par l'enveloppe nucléaire.

Fig. 24 — Vacuole autophagique développée par l'enveloppe nucléaire (double flèche). La

lumière de la vacuole est légèrement transparente aux électrons (v)

Fig. 25 — Mitochondrie digérée par une vacuole autophagique (double fléche)

Fig. 26 — Vacuole autophagique a un stade avancé, avec des dépóts denses aux électrons

et un corps myélinique

Fig. 1 — Transversal section of sclerotia, observed with scanning electron microscope. Cor-

tex (CO) and medulla (ME) are clearly seen

Fig. 2 — High magnification of the jonction zone between cortex and medulla. Cortex is

constitued by strands of hyphae.

Fig. 3 — Detail of strands (COR), empty spaces between strands

Fig. 4 — Detail of medulla : hyphae are plunged in an inter-hyphal cement (Cih). Several

hyphae appear to be cloged.

Fig. 5— Sclerotia formed in the substratum. Detail of sclerotia surface, the cortex is smooth

and reduced in thickness ; hyphae are cloged and cross one another (H).

Fig. 6 — First state of sclerotia differentiation (primordium}. Hyphae that intersect and

accumulation of mucopolysaccharides.

Source : MNHN. Paris

SCLEROTINIA FRUCTIGENA 299

Fig. 7— a. Sclerotia biogenesis : primordium. Hyphae with thick and melanized walls. Accu-

mulation of inter-hyphal cement, ramification of hyphae. b. Large hyphae with thick

walls (Р). Automelanization of hyphae (HM)

Fig. 8 — Section throught a sclerotium primordia (4 days of shift-down ; same struc-

tures as in figure 7). Cortex formation : highly melanized hyphae (HM) with cloged orga-

nelles. Thick wall (P) ; accumulation of inter-hyphal cement (Cih) ; intensive vacuoliza-

tion of cortex hyphae {v}. Nuclei are spherical (N). High agglutination of medulla and

formation of intra-hyphal hyphae.

Fig. 9 — Longitudinal section of medulla hyphae. Intra-hyphal hyphae where all the

structures are preserved and included in a melanized hyphae (HM) ; thick walls of the

two hyphae {P}

Fig. 10 — Section of cortex hyphae. Several vacuoles with electron dense material

inside (v). The cytoplasm contains several polysomes. Thick wall and accumulation of

inter-hyphal cement (Cih]

Fig. 11 — Transversal section of medulla hyphae. Intra-hyphal hyphae with lipid globules

and mitochondria (M) and vacuoles (v). Principal hyphae (HM) where all structures are

melanized. Thick walls of both hyphae.

Fig. 12 — Ultrastructure of intra-hyphal hyphae. Numerous lipid globules (L), vacuoles

with electron dense content [v], mitochondria (M), microbodies (Mb) near mitochondria

and numerous polysomes.

Fig. 13 — Transversal section of medulla hyphae. Intra-hyphal hyphae with nucleus

(N) and microbody (Mb) compressing the melanized structure of the principal hyphae

where subsist some lipid globules.

Fig. 14 — Intra-hyphal hyphae with mitochondria showing myelin figures inside

(arrow)

Fig. 15 — Longitudinal section of medulla hyphae. Numerous nuclei (N) in this hyphae

Nucleus passing through the septal pore. Arrows show the pressions to which the nucleus

is submitted and the removal direction of this later. Large microbody (Mb). Flattened

cisterna of endoplasmic reticulum stacked (Re) ; transversal section of microfilament

bundle (F], granulations (g) in a thick septum (5).

Fig. 16 — Detail of figure 15, showing the thick septum and the nucleus passing through

the septal pore and the direction of removal (double arrow).

Fig. 17 — Cisterna of smooth endoplasmic reticulum. Cisterna fenestrated at the extre-

mities (arrow).

Fig. 18 — Eight cisterna of endoplasmic reticulum [Re] stacked. Cisterna fenestrated

as a Golgi apparatus.

Fig. 19 — Fibrillar accumulations : longitudinal section through bundle of filaments (Е)

Fig, 20 — Transversal section of bundle showing pseudo-cristalline organization of micro-

filaments.

Fig. 21 — Myelin figures (« Whorls ») inside mitochondria (M).

Fig. 22 — Formation of vacuolar system from the endomembranes : nuclear mem-

brane (N)

Fig. 23 — Mitochondria sequestrated by nuclear envelope.

Fig. 24 — Autophagic vacuole (v) in contact with nuclear envelope (double arrow]

Fig. 25 — Mitochondria digested by an autophagic vacuole (double arrow).

Fig. 26 — Advanced stage of autophagic vacuole with electron dense deposit and

myelin figures.

Source : MNHN. Paris

300

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SCLEROTINIA FRUCTIGENA 301

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Cryptogamie, Mycol. 1987, 8 (4) : 315-320 315

THERMOPHILIC AND THERMOTOLERANT FUNGI

ASSOCIATED WITH SEEDS OF FIVE MEMBERS

OF UMBELLIFERAE FROM EGYPT

by ALL ABDEL-HAFEZ*, A.M.M. MOHARRAM** and A.Y ABDEL-MALLEK**

SUMMARY — Eighteen thermophilic and thermotolerant species in addition to 2 varieties belonging to

13 genera were isolated from seeds of caraway (11 genera and 15 species}, cummin (10 genera and 15

species), fennel (9 genera and 12 species), anise (8 genera and 11 species) and coriander (7 genera and

10 species) on glucose-Czapek's agar at 45°C. Total counts of thermophilic and thermotolerant fungi fluc-

tuated according to the samples tested between 24-432, 30-496, 8-1000, 12-572 and 30-520 colonies per

g dry seeds in the five types of seeds, respectively. Aspergillus fumigatus, Emericella nidulans and Rhizo-

mucor pusillus were the most prevalent fungi in all types of seeds. Truly thermophilic fungi were isola-

ted, but with variable densities and frequencies, from the various types of seeds and these were

Chaetomium thermophilum var. coprophilum, Humicola hyalothermophila, H. grisea var. thermoidea, Mal:

branchea pulchella var. sulfurea, Melanocarpus albomyces, Myceliophtora thermophila, Talaromyces dupontii

and Thermomyces lanuginosus.

RÉSUMÉ — Dix-huit espèces et 2 variétés thermophiles et thermotolérantes, appartenant à 13 genres,

ont été isolées de graines de carvi (11 genres et 15 espèces), cumin (10 genres et 15 espèces), fenouil

(9 genres et 12 espèces], anis (8 genres et 11 espèces) et coriandre (7 genres et 10 espèces) sur milieu

Ċzapek (glucose), à 45° C. Les nombres de champignons thermophiles et thermotolérants fluctuent, res-

pectivement dans les cing types de graines, entre 24-432, 30-496, 8-1000, 12-572 et 30-520 colonies par

gramme de graines séches. Aspergillus fumigatus, Emericella nidulans et Rhizomucor pusillus sont les cham

pignons les plus fréquents dans tous les types de graines. Des champignons thermophiles ont été isolés,

mais avec des dentités et des fréquences variables, ce sont Chaetomium thermophilum var. coprophilum,

Humicola hyalothermophila, H. grisea var. thermoidea, Malbranchea pulchella var. sulfurea, Melanocarpus

albomyces, Myceliophtora thermophila, Talaromyces dupontii et Thermomyces lanugisosus.

KEY WORDS : Seed-borne, thermophilic fungi, thermotolerent fungi, caraway, cummin, fennel, anise,

coriander.

* Botany Department, Faculty of Science at Sohag, Assiut University, Egypt.

** Botany Department, Faculty of Science, Assiut University, Assiut, Egypt,

Source : MNHN, Paris

316 A.LI. ABDEL-HAFEZ, A.M.M. MOHARRAM and A.Y. ABDEL-MALLEK

INTRODUCTION

Thermophilic and thermotolerant fungi have been mostly associated with either

heat-damaged or stored seeds from different places of the world (MULINGE &

APINIS, 1969 ; MULINGE & CHESTERS, 1970 ; MILLS & BOLLEN, 1976 ; FLAN-

NIGAN, 1969). These fungi were also isolated from stacks of oil palm kernels in

Nigeria (OSO, 1974] and were found to cause serious deterioration during storage

of the palm kernels (OSO, 1979) or palm produce (OGUNDERO, 1981а).

In Egypt, several investigations have been carried out on the frequencies of occur-

rence and densities of mesophilic seed-borne fungi (MOUBASHER & al., 1972,

1979, 1980, 1983 and others), but only that of MOUBASHER & al. (1979) and

ABDEL-HAFEZ & SHOREIT (1986) dealt with thermophilic fungi associated with

peanut, bean, lupine, and pea seeds. The present investigation aimed to study the

densities and frequencies of occurrence of these fungi associated with seeds of

five medicinal plants of the family Umbelliferae commonly used and cultivated

in Egypt for their nutritive and medicinal values.

MATERIALS AND METHODS

Forty samples of each of caraway (Carum carvi L.), cummin (Cuminum cyminum

L.), fennel (Foeniculum vulgare Miller], anise [Pimpinella anisum L.) and coriander

(Coriandrum sativum L.) seeds of crop 1986, of 250 g each, were collected from

the market in eight Governorates from Egypt namely, Cairo, Giza, Beni-suef, El-

Minya, Assiut, Sohag, Qena and Aswan. The number of samples from each gover-

norate and seed type was five.

Determination of thermophilic (or thermotolerant) seed-borne fungi :

The dilution-plate method was used as employed by MOUBASHER & al. (1972).

Czapek's agar medium was used in which glucose (10 g/l) replaced sucrose. Rose

bengal (66 ppm) was added as a bacteriostatic agent (SMITH & DAWSON, 1944).

Five plates were used for each sample and were incubated at 45°C for 7-10 days

and the developing fungi were counted, identified and calculated per g dry seeds.

RESULTS AND DISCUSSION

Total counts of thermophilic and thermotolerant fungi were considerably high

(Table 1) and anise seeds were the richest in total fungal population (8 700 colonies

рег g seeds in forty samples) followed by cummin (7 370 colonies), fennel

(7 320 colonies), coriander (5 340 colonies) and caraway seeds (5 020 colonies)

Total counts of these fungi ranged between 12-572, 30-496, 8-1000, 30-520, and

24-432 colonies per g dry seeds, respectively. ABDEL-HAFEZ & SHOREIT (1986)

found that total counts of thermophilic and thermotolerant fungi were generally

low in pea (193.2 colonies), bean (79.8 colonies) and lupine seeds (46.2 colonies

per g in all samples ; 30 samples each) collected from eight Governorates in Upper

Egypt.

Thirteen genera and eighteen species in addition to one variety of each of E. nidu-

lans and A. fumigatus were identified on the whole. Broadest spectra of genera

and species was recorded in caraway (11 genera and 15 species} followed by cum-

min (10 genera and 15 species), fennel (9 genera and 12 species), anise (8 genera

and 11 species) and coriander seeds (7 genera and 10 species).

Source : MNHN. Paris

317

THERMOPHILIC AND THERMOTOLERANT SEED-BORNE FUNGI

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Source : MNHN, Paris

318 A.LI. ABDEL-HAFEZ, A.M.M. MOHARRAM and A.Y. ABDEL-MALLEK

Aspergillus fumigatus and E. nidulans were the most prevalent fungi. They emer-

ged in 97.5% and 55%, 100% and 75%, 97.5% and 30%, 100% and 80%, and

100% and 57.5% of the samples contributing 86.5% and 2.6%, 76.9% and 5.8%,

89.3% and 1.1%, 72.8% and 10.4%, and 67.9% and 12% of total fungi, respecti-

vely. Reports from Malaysia showed that A. fumigatus was also the most frequent

species on freshly harvested rice seeds (KUTHUBUTHEEN, 1979). A. terreus reco-

vered in high frequency of occurrence (50% of the samples) from anise and cara-

way seeds, retreated to a backward situation in the other three seed types (15%,

30% and 22.2% of the samples). E. nidulans var. latus also isolated in moderate

frequency of occurrence from caraway (30% of the samples) and cummin (25%)

seeds, was of low or rare frequency in the other seed types (12.5%, 7.5% and

15% of the samples). The preceding species were also observed, but with varia-

ble densities and frequencies, from Egyptian peanuts, bean, lupine and pea seeds

(ABDEL-HAFEZ & SHOREIT, 1986 ; MOUBASHER & al., 1979), as well as from

Nigerian palm produce (OGUNDERO, 19814]. E. quadrilineata, A. fumigatus var

albus, E. rugulosa and A. niger were less common on all seeds.

Rhizomucor pusillus was also common on most types of seeds comprising 65%,

42.5%, 55%, 50%, and 47.5% of the samples, respectively. This species was pre-

viously encountered, but with variable densities and frequencies, from Egyptian

soils, some types of seeds and self-heating materials (MOUBASHER & al., 1979,

1982), as well as from freshly harvested rice seeds from Malaysia (KUTHUBU-

THEEN, 1979).

Paecilomyces variotii, moderately encountered from caraway seeds (25.0% of the

samples), was less frequent on the remainder types of seeds (5-12.5 %). MOUBAS-

HER & al. (1979) isolated P. variotii in rare frequency of occurence (5% of the

samples) from peanut seeds under the same experimental conditions.

Truly thermophiles such as Malbranchea pulchella var. sulfurea, Humicola grisea

var. thermoidea, H. hyalothermophila, Thermomyces lanuginosus, Chaetomium ther-

mophilum var. coprophilum, Myceliophtora thermophila, Melanocarpus albomyces and

Talaromvces dupontii occured in reduced frequencies on one or several types of

seeds tested (Table 1). MOUBASHER & al. (1982) found that the majority of these

thermophiles were active colonizers of wheat and broad-bean straw composts.

They also reported that wheat and broad-bean straws lost nearly half of their dry

weight after 60 days of composting ; this loss was mainly attributed to the acti-

vity of thermophilic fungi. The remaining genera and species isolated (Table 1]

were less frequent. Most of these fungi were reported from strored moist barley

grains (MULINGE & APINIS, 1969), peanut (MOUBASHER & al., 1979], some

leguminous seeds (ABDEL-HAFEZ & SHOREIT, 1986) and from different types

of dates in Aswan area (NASSAR, 1986). T. lanuginosus was one of the most fre-

quent species on freshly harvested rice seeds from Malaysia (K UTHUBUTHEEN,

1979), as well as from Nigerian palm produce (OGUNDERO, 1981a). FLANNI-

GAN & SELLARS (1972) found that A. fumigatus, A. nidulans (= E. nidulans), A. ter-

reus, M. pusillus (= Rh. pusillus) and T. lanuginosus strains recovered from barley

kernels were able to degrade arabinoxylan and carboxymethyl cellulose. They also

reported (in 1977) that A. fumigatus, M. pusillus (= Rh. pusillus) and T. lanuginosus

produced amylase, 8-glucosidase and 8-xylosidase. SELLARS & al. (1976) indica-

ted that A. fumigatus could degrade barley husk and produce 1,4 8-glucanase and

£-glucosidase when grown on eigher barley husk or crystalline cellulose. Ther-

mophilic fungi were found to cause serious deterioration during storage of palm

kernels (OSO, 1979), a considerable decrease in the oil contents of the palm fruit

chaffs and the palm kernels by C. thermophilum, T. lanuginosus and Torula ther-

Source : MNHN, Paris

THERMOPHILIC AND THERMOTOLERANT SEED-BORNE FUNGI 319

mophila (OGUNDERO, 1981b}. Occurrence of these thermophilic or thermotole-

rant fungi in addition to mesophiles on the seeds of different plants which are

grown in Egypt for their nutritive or medicinal values, calls for cautions handling

during transport, storage and processing since numerous of these fungi were repor-

ted to be pathogenic to man and farm animals (COONEY & EMERSON, 1964 and

LACEY, 1975)

ACKNOWLEDGEMENT

‘The authors are deeply indebted to Prof, Dr. 5.1.1. ABDEL-HAFEZ (Bot, Dept., Faculty of Science, Assiut

University} for valuable help

REFERENCES

ABDEL-HABEZ A.L.1. and SHOREIT A.A., 1986 — Mycoflora of bean, lupine and pea seeds

in Egypt. Aswan Sci. Techn. Bull. 7: 127-142,

COONEY D.G. and EMERSON R., 1964 — Thermophilic fungi, Eumycota. San Francisco,

W.H. Freeman Publ. Co.

FLANNIGAN B., 1969 — Microflora of dried barley grain. Trans. Brit. Mycol. Soc. 53 :

371-379.

FLANNIGAN В. and SELLARS P.N., 1972 — Activities of thermophilous fungi from barley

kernels against arabinoxylan and carboxymethyl cellulose. Trans. Brit. Mycol. Soc. 58 :

333-341

FLANNIGAN B. and SELLARS P.N., 1977 — Amylase, &-glucosidase and R-xylosidase activity

of thermotolerant and thermophilic fungi isolated from barley. Trans. Brit. Mycol. Soc.

69 : 316-317.

KUTHUBUTHEEN A J., 1979 — Thermophilous fungi associated with freshly harvested rice

seeds. Trans. Brit. Mycol. Soc. 73 : 357-359.

LACEY J., 1975 — Potential hazards to animal and man from microorganisms in fodders

and grains. Int. Biodeterioration Bull. 12 : 37-41

MILLS J.T, and BOLLEN G.J., 1976 — Microflora of heat-damaged rapeseed. Canad.

J. Bot. 54 : 2893-2902.

MOUBASHER A.H., EL-NAGHY M.A. and ABDEL-HAFEZ S.LI. 1972—Studies on the

fungus flora of three grains in Egyp. Mycopathol. Mycol. Appl. 47 : 261-274,

MOUBASHER A.H., EL-HISSY F.T., ABDEL-HAFEZ S.1.1. and HASSAN S.K.M., 1979 —

The mycoflora of peanuts in Egypt. Mycopathologia 68 : 39-46.

MOUBASHER A.H., ABDEL-HAFEZ S.L.I., EL-HISSY F.T. and HASSAN S.K.M., 1980 —

Effect of temperature and moisture content on Egyptian peanut seed-borne fungi. Myco-

pathologia 70 : 49-54.

MOUBASHER A.H., ABDEL-HAFEZ S.I.I, ABDAL-FATTAH H.M. and MOHARRAM A.M.,

1982 — Fungi of wheat and broad-bean straw composts. II-Thermophilic fungi. Mycopa-

thologia 78 : 169-176.

MOUBASHER A.H., ABDEL-HAFEZ $.1.1. and ABDEL-KADER M.LA., 1983 — Osmophilic

fungi of barley grains in Egypt. Bull. Fac. Sci. Assiut Univ.

MULINGE SK. and APINIS A.E., 1969 — Occurrence of thermophilous fungi in stored moist

barley grain. Trans. Brit. Mycol. Soc. 53 : 361-370.

MULINGE S.K. and CHESTERS C.G.C., 1970 — Ecology of fungi associated with moist

stored barley grain. Ann. Appl. Biol. 65 : 277-284.

NASSAR M.S.M., 1986 — Mycoflora associated with dates in Aswan area. M.Sc. Thesis.

Bot. Dept., Faculty of Science at Aswan, Assiut University

Source : MNHN, Paris

320 A.LI. ABDEL-HAFEZ, A.M.M. MOHARRAM and A.Y. ABDEL-MALLEK

OGUNDERO V.W., 1981a — Thermophilic fungi from Nigerian palm produce. Mycologia

73 : 198-201.

OGUNDERO V.W., 1981b — Degradation of Nigerian palm products by thermophilic

fungi. Trans. Brit. Mycol. Soc. 77 : 267-271

OSO B.A., 1974 — Thermophilic fungi from stacks of oil palm kernels in Nigeria. Z. Allg.

Mikrobiol. 14 : 593-601.

OSO B.A., 1979 — Thermophilic fungi and deterioration of Nigerian oil palm kernels. Econ

Bot. 33 : 58-62.

SELLARS P.N., McGILL C.E.G. and FLANNIGAN B., 1976 — Degradation of barley by

Aspergillus fumigatus Fres. In : J.M. SHARPLEY & A.M. KAPLAN, Proceedings of the Third

International Biodegradation Symposium. London, Applied Science : 635-643.

SMITH М.К. апа DAWSON Y.T., 1944 — The bacteriostatic action of rose bengal in media

used for the plate count of soil fungi. Soil Sci. 58 : 467-471

Source : MNHN. Paris

Cryptogamie, Mycol. 1987, 8 (4) : 321-327 321

GASTROCYBE IBERICA SP. NOV. IN SPAIN

(BOLBITIACEAE, AGARICALES) '

by G. MORENO, C. ILLANA and M. HEYKOOP*

SUMMARY — A new species is proposed, Gastrocybe iberica, characterized by its non-anastomosing lamel

lae, hymeniform cuticle with abundant pileocystidia and its bisporic basidia. It has been collected abun

dantly in hygrophytic meadows with Populus alba, among Poaceae sp. and in meadows of Hordeion leporini.

RÉSUMÉ - Nous proposons comme nouvelle espèce Gastrocybe iberica, qui est caractérisée par ses lames

non anastomosées, sa cuticule hyméniforme avec d'abondants piléocystides et ses basides bisporiques

Cette espèce a été récoltée en abondance dans des prairies hygrophytes sous Populus alba, entre des Poa

ceae sp. et dans des prairies d' Hordeion leporini.

RESUMEN — Se propone Gastrocybe iberica como una especie nueva para la ciencia caracterizada por

sus láminas no anastomosadas, su cutícula himeniforme con abundantes pileocistidios y sus basidios

bispóricos. Ha sido recogida muy abundante en praderas higrófilas de Populus alba entre Poaceae sp. y

en praderas de Hordeion leporini

KEY WORDS : Taxonomy, Gastrocybe, Bolbitiaceae, Basidiomycotina

‘The genus Gastrocybe was created by WATLING (1968) for a gastromycetoid

fungus, G. lateritia found in America, of which WATLING &al. (1966) later exten-

ded its chorology to Europe (Italy and Spain). The second species described up

to date was found in North America, Gastrocybe deceptiva Baroni, and only the

typus collection is known ; BARONI (1981) created this taxon based on the mate-

rial collected by BARTHOLOMEW in 1896.

This genus is very close to Galeropsis Velen. & Dvorak in Velen. but they both

mainly differ in the structure of the cuticle which is a hymeniform pileipellis in

Gastrocybe, and a cutis with filamentous hyphae in Galeropsis.

1. This paper was presented at the « VII Simposio Nacional de Botánica Criptogámica », in Madrid

(23-26 september 1987).

+ Departement of Plant Biology Botany), University of Alcalá de Henares, Madrid. Spain

Source : MNHN. Paris

322 G. MORENO, C. ILLANA and M. HEYKOOP

1cm

«d

Fig. 1-3 — Gastrocybe iberica Moreno, Ilana & Heykoop, carpophores (1-2, Holotypus n° 9 990 ; 3,

n* 9 992)

Source : MNHN, Paris

GASTROCYBE IBERICA SP. NOV. 323

At the present time the taxonomic position of this genus is controversial. For

HAWKSWORTH & al. (1983) the genus Gastrocybe and Galeropsis belong to the

family Galeropsidaceae, order Podaxales of the Gasteromycetes and they would

be related to the family Bolbitiaceae of the Agaricales. SINGER & PONCE DE

LEÓN (1982) placed it with the genus Galeropsis in the family Galeropsidaceae

and pointed out that they represent secotiaceous fungi. Later on, SINGER (1986)

still denotes that both genera belong to the family Galeropsidaceae and that they

can be considered as Gasteromycetes in the traditional sense. WATLING & GRE-

GORY (1981) distinguished agaricoid forms and gasteroid forms in the Bolbitia-

ceae and considered both genera, Galeropsis and Gastrocybe, among the gasteroid

forms. WATLING & YOUNG (1983) included Gastrocybe in the Bolbitiaceae and

not in the Galeropsidaceae. MOSER (1983) included the genus Galeropsis in the

family Bolbitiaceae and no reference was made to Gastrocybe, possibly because

it was unknown in Europe at that time. The first record of this genus in our con-

tionent (Spain and Italy) is made by WATLING & al. (1986).

We agree with these last authors and believe that the genus Gastrocybe, toge-

ther with Galeropsis, belong to the family Bolbitiaceae, an argument based on the

fact that the new described taxon has dermatocystidia, which brings it near to

some species of the genus Conocybe, furthemore, it presents closed carpophores

which makes it close to Galeropsi;

Hypothetically, we think that it is possible that the genus Galeropsis had its ori-

gin through the genus Gastrocybe. The reason for this hypothesis is that some spe-

Cies of Gastrocybe are macroscopically exact to those of Galeropsis, and a

microscopic study of their pellis is necessary to differentiate them. Besides, in the

case of Gastrocybe iberica the hymeniform cuticle is reduced to one single layer

of cells, sometimes difficult to observe under the microscope, and through the

loss of this layer the genus Galeropsis could have been originated

The microphotographs were made under a Nikon microscope model Optiphot

with an incorporated system of automatic photography and "Normaski'' interfe-

rence contrast.

The material examined has been kept in the herbarium of the Departement of

Plant Biology (Botany) of the University of Alcalá de Henares and the numeration

is indicated for any consultation or revision

Gastrocybe iberica Moreno, Ilana & Heykoop, sp. nov., Fig. 1-16

Etymology : from latin iberica, relating to the place where this fungus was col-

lected.

Pileus [0,6], 0,8 - 2,2 (2,5) cm longus, 0,2 - 0,4 cm latus, cylindricus, acuto apice, colori

paleae simili, at cinereo in herbario, sine striis, glaber, cuius inferior pars clausam atque

pedi adhaerentem se praebet.

Stipes, qui fit in basi paulo amplior [1] 2 - 4 (5,5) cm longus, fere 0,1 cm est latus.

Laminae sunt ascendentes, pressae, proba forma, haud anastomosantes, interdum bifur-

catae in basi, ochraceo-ferrugineo colore. Lamellulae non observantur. Velum abest.

Basidiosporae 15-20 (23) um longae, 9-13 (18)um sunt latae, quarum forma inter ellip-

soidea et amygdaliformis, ochraceo colore, germinativo poro praeditae. Basidia bispo-

rica sunt, 18-22 um longa, 9-11 um lata. Cystidia absunt, Pileipellis hymeniformis, cellulis

quarum diameter est 9-17 um longus constituta. Pileocystidia frequentissima, hyalina,

lageniformia, quorum est longitudo maxima 60 um , latitudo e 15 um vergit in 6 um

rursusque in 8 um. Fibulae adsunt.

Source : MNHN. Paris

324 G. MORENO, C. ILLANA and M. HEYKOOP

Habitat : in pratis hygrophytis (Poaceae sps., Trifolio fragiferi-Cynodontetum), basico

in solo [pseudogley) populeti (Populus alba). Item in pratis [Hordeion leporini], basico

in solo (rendsinas). In praedio cui nomen « La Oruga », Compluti (Matriti) 30 TVK7282,

leg. Moreno, C. Illana & M. Heykoop, 9-X-86, Holotypus n° 9 990.

Pileus (0.6) 0.8 - 2.2 (2.5) om high and 0.2 -0.4 cm broad, cylindrincal, acute

apex, cream-straw coloured, ash-coloured when dried, not striate and glabrous,

touching the stipe being narrowed and applicate below. Stipe becoming slightly

broader at the base (1) 2-4 (5.5) cm high and aproximately 0.1 cm broad. Lamellae

ascendant, narrow, well formed, not anastomosing but sometimes forked at the

base, ochraceous-ferrugineous. Lamellulae not observed. Veil absent.

Basidiospores 15-20 (23) x 9-13 (18) um, variable in shape, ellipsoid-amygdaliform,

ochraceous with germ pore not clearly visible under the optical microscope but

very clear with « Nomarski » optics, and with hilar appendage. Basidia bisporic,

18-22 x 9-11 um, sterigmata long, up to 7 um in length. Cystidia not observed. Pilei-

pellis hymeniform, formed by clavate to pyriform or subglobose cells, 9-17 um

in diameter. Pileocystidia very abundant, hyalines, lageniform at the base with

a long cylindrical neck to subcapitate, up to 60x 15x 6x 8 um. Clamp connections

present.

Habitat : In hygrophytic meadow (Poaceae sp., Trifolio fragiferi-Cynodontetum),

basic soil [pseudogley) from poplar grove (Populus alba). And in meadows of Hor-

deion leporini, basic soil (rendsinas).

Material examined : Finca La Oruga, Alcalá de Henares (Madrid) 30TVK7282

leg. C. Moreno, C. Illana & M. Heykoop, 9-X-86, Holotypus n? 9 990 ; ibidem

leg. C. Illana, 11-X-86, n* 9 991 ; climbing from the Finca La Oruga to the hill

Ecce-Homo, Alcala de Henares (Madrid), 30TVK7281, leg. C. Illana, E. Illana &

J. Chico, 2-XI-86, n? 9 993 ; Los Catalanes, Alcalá de Henares (Madrid) 30TVK7081,

leg. C. Illana, I. López & P. Sánchez, 2-XI-86, n^ 9 992 ; Tabla Pintora, Alcalá de

Henares (Madrid) 30TVK6979, leg. C. Illana & M. Heykoop, 9-X1-86, n° 9.994

Isotypus in the herbarium of Dr. R. Watling in Edimburg (E) and in the herba-

rium of the Royal Botanical Garden of Madrid (MA-fungi).

Comments : Gastrocybe iberica is characterized by its non-deliquescent cylin-

drical pileus with acute apex and with the lower part closed and applicate to the

stipe. The gills are not anastomosed. It shows very abundant dermatocystidia in

the cuticle ; it has no pleurocystidia ; the basidia are bisporic and the spores have

a clear germ pore well visible with « Nomarski » interference contrast. Gastrocybe

lateritia Watling is different because of its quickly deliquescent carpophores with

an open and cylindrical-campanulate to conical-campanulate pileus. Moreover,

it presents lecythiform cheilocystidia and tetrasporic basidia. Gastrocybe decep-

tiva Baroni |= Bolbitius tener Berk. var. incarnata Peck}, only known from North

America (BARONI, 1981), is different from G. iberica because of the colour of its

carpophores and the intervenose gills. Besides it lacks pileocystidia. The by

BARONI (1981) observed and sketched cheilo- and pleurocystidia have not been

observed in G. iberica. If we compare G. deceptiva with the new proposed species,

they both have nearly identical macroscopic features, which is also a general cha-

racter for all the species of the genus Gastrocybe ; they both have bisporic basidia

and the same measurements of the spores too, though the germ pore is not so

clear in G. iberica as in G. deceptiva seen under the optical microscope

Source : MNHN. Paris

GASTROCYBE IBERICA SP. NOV. 325

Fig. 4-10 — Gastrocybe iberica Moreno, Illana & Heykoop (Holotypus n? 9 990] ; 4-6 : hymeniform gelati-

nized cuticle, 7-10 : pileocystidia.

Fig. 4-10 — Gastrocybe iberica Moreno, Illana & Heykoop Holotype n* 9 990) ; 4-6 : cuticule hyméni-

forme gélifiée. 7-10 : piléocystides.

Source : MNHN. Paris

3. MORENO, C. ILLANA and M. HEYKOOP

Fig. 11-16 — Gastrocybe iberica Moreno, Illana & Heykoop (Holotypus n° 9 990) ; 11-13 : bisporic basidia

14-16 : basidiospores.

Fig. 11-16 — Gastrocybe iberica Moreno, Illana & Heykoop (Holotype n* 9 990) ; 11-13 : basides bispori.

ques. 14-16 : basidiospores.

Еч

Source : MNHN, Paris

GASTROCYBE IBERICA SP. NOV 327

The described species of the genus Gastrocybe Watl. can be differentiated in the

following key.

Epicutis hymeniform ...... Gastrocybe .............. D

Epicutis a cutis .. .. Galeropsis; SINGER (1963), HEIM

(1950 1968) and SINGER & PONCE DE LEON (1982)

2. Carpophore soon deliquescent ; with lecythiform cheilocystidia ; basidia tetras-

nane BR AR EA Gastrocybe lateritia

2'. Carpophore not deliquescent ; without lecythiform cheilocystidia ; basidia

bisporic ..... "o е Ага

3. Lamellae intervenose ; without pileocystidia ........ Gastrocybe deceptiva

3'. Lamellae free, not intervenose ; abundant Darum pileocystidia, subglobose

GAN NIS L TA TENE MISERTUS да m Gastrocybe iberica

ACKNOWLEDGMENTS

We are particularly greateful to Dr. R. Watling for his scientific advises. Also to Dr. D.H. Pfister, cura-

tor of the Farlow Herbarium (FH) USA, for sending us the typus of Gastrocybe deceptiva Baroni. We also

wish to thank Prof. S. Mariner-Bigorra for making the latin diagnosis. We also are greateful to Dr. F. Esteve

Raventós for advising us with the English manuscript.

REFERENCES

BARONI T.J., 1981 — Collections in the Farlow Herbarium : New species of Melanophyllum

and Gastrocybe, type studies on Armillaria and Stropharia. Mycologia 75 : 181-197.

HAWKSWORTH D.L., SUTTON B.C. and AINSWORTH G.C., 1983 — Ainsworth

& Bisby's Dictionary of the Fungi. Kew, Surrey, Commonwealth Mycological Institute

HEIM R., 1950 — Le genre Galeropsis Velenovsky |- Cyttarophyllum Heim], trait d'union

entre Agaricales et Gastérales. Rev. Mycol. (Paris) 15 : 3-28.

HEIM R., 1968 — Deuxiéme mémoire sur les Cyttarophyllés. Bull. Soc. Mycol. France

84 : 103-116.

MOSER R., 1983 — Die Róhrlinge und Blátterpilze (Polyporales, Boletales, Agaricales, Russula-

les). Band II b/2. Basidiomyceten. Stuttgart, Gustav Fischer Verlag

SINGER R., 1963 — Notes on Secotiaceous fungi : Galeropsis and Brauniella. Proc. Kon. Ned.

Akad. Wetensch., C, 66 : 106-117.

SINGER R. and PONCE DE LEÓN P., 1982 — Galeropsidaceae west of the rocky moun-

tains. Mycotaxon 14 : 82-90.

SINGER R., 1986 — The Agaricales in modern taxonomy. Koenigstein (RFA), Koeltz Scientific

Books.

WATLING R., 1968 — Observations on the Bolbitiaceae IV. A new genus of gastromycetoid

fungi. Michigan Botanist 7 : 19-24.

WATLING R. and GREGORY N.M., 1981 — Census catalogue of worlds members of the

Bolbitiaceae. J. Cramer, Biblioth. Mycol. 82 : 1-224.

WATLING R. and YOUNG T., 1983 — A new species of Panaeolopsis Singer. Notes Roy. Bot.

Gard. Edinburg 41 (2) : 395-399.

WATTLING R., QUADRACCIA L., TABARES M. and ROCABRUNA A., 1986 — Gastrocybe

in Europe. Notes Roy. Bot. Gard. Edinburg 43 (2) : 307-311.

Source : MNHN, Paris

Source : MNHN. Paris

329

ANALYSES BIBLIOGRAPHIQUES

Von ARX J.A., GUARRO J. and FIGUERAS M.J., 1986 — The Ascomycetes genus

Chaetomium. Beihefte zur Nova Hedwigia, Heft 84. Berlin, Stuttgart, J. Cramer,

612 p., 92 pl. ph.

A la révision de la famille des Chaetomiacées, publiée par von ARX J.A., DREY-

FUS M. & MULLER E. en 1984*, celle du genre Chaetomium constitue une suite

logique.

Dans ce travail, les auteurs ajoutent aux espéces généralement acceptées

5 espèces nouvelles : Ch. dreyfusii v. Arx, Ch. hispanicum Guarro et v. Arx,

Ch. muelleri v. Arx, Ch. oblatum Dreyfus et v. Arx et Ch. repens Guarro et Figueras.

En introduction ils présentent des considérations générales sur la morphologie,

la physiologie et l'écologie des espèces du genre. La description des caractères

culturaux, en conditions déterminées, est d'une grande importance dans la déter-

mination des espèces. C'est pourquoi les auteurs ajoutent aux caractères morpho-

logiques (paroi des ascomes, taille et forme et couleur des ascospores) des données

d'ordre physiologique (vitesse de croissance, de production des ascomes et synthése

de pigments libérés dans le milieu) et donnent à l'ensemble une valeur taxonomi-

que. Ils accordent une importance particulière à la symétrie des ascospores, la

présence, le nombre et la position des pores germinatifs dans la délimitation des

espèces. Par contre, la structure et la ramification des poils stériles, bien que pris

en compte dans la clef de détermination, ne sont pas des caractères auxquels von

ARX & al. donnent une valeur taxonomique, en raison de leur dépendance des

conditions de l'environnement. De belles photographies en microscopie électro-

nique à balayage, des photomicrographies et quelques planches au trait donnent

d'intéressantes informations complémentaires.

Ce travail trés clair et bien argumenté sera trés utile pour les spécialistes du

groupe, et pour les mycologues en général.

L. Bettucci

* Persoonia 12 : 169-179

FASSATIOVA O., 1986 — Moulds and filamentous fungi in technical microbiology.

Progress in Industrial Microbiology, vol. 22. Amsterdam, Elsevier, 234 p.

Ouvrage de détermination des principales moisissures rencontrées ou utilisées

en industrie, le livre décrit 31 espèces de Mucorales et 120 espèces de Moniliales.

Une clef de détermination des genres (selon les critères morphologiques classi-

ques) précède chaque groupe et, dans chacun d'eux, les espèces les plus fréquen-

tes sont décrites. Une clef de détermination spécifique est aussi proposée pour

les Mucor, Penicillium, Aspergillus et Fusarium, genres les plus larges et fréquem-

ment rencontrés dans l'industrie. Dans certains cas, la description des espèces

est complétée par quelques notes concernant l'écologie. Des illustrations au trait

ou photographiques, d'inégale qualité, complètent les descriptions. Chaque genre

est suivi d'une liste de références bibliographiques (plutôt de nature systémati-

Source : MNHN, Paris

330 ANALYSES BIBLIOGRAPHIQUES

que) qui permettent d'approfondir ou de compléter les recherches d'identifica-

tion. Cet ouvrage est assez complet et sera certainement utile aux chercheurs

travaillant en mycologie appliquée méme s'il n'apporte pas grand chose par rap-

port à ses prédecesseurs, généralement plus spécialisés.

M.F. Roquebert

AYRES P.G. and BODDY L., 1986 — Water, Fungi and Plants (British Mycologi-

cal Society Symposium 11, Lancaster April 85]. Cambridge, Cambridge Uni-

versity Press, 413 p.

L'eau joue un rôle critique dans le développement des champignons et des plan-

tes, non seulement dans la constitution de la matière organique mais aussi dans

le transport des éléments nutritifs à l'intérieur et à l'extérieur de la cellule et dans

la conservation et la propagation des champignons.

Pourtant les publications sur ce thème étaient jusqu'ici ponctuelles et disper-

sées. L'ouvrage qui nous est proposé, compte rendu d'un symposium organisé par

la British Mycological Society, constitue un bilan intéressant et original sur le sujet.

On peut y reconnaitre trois parties principales, d'ailleurs complémentaires les

unes des autres.

La première regroupe des articles d'ordre général, portant sur les phénomènes

physiques, les méthodes de mesure, de contrôle du potentiel hydrique des orga-

nismes. Il précise les définitions et préconise l'homogénéisation des termes. C'est

une bonne synthèse des données physiques et biologiques sur le rôle des gradients

d'osmose et de turgescence dans la croissance végétative des champignons. L'inci-

dence de l'humidité sur la formation, la dispersion et la germination des propagu-

les est ensuite abordée. Un chapitre sur les relations entre la teneur en eau des

sols et l'activité pathogène des micro-organismes qui y sont présents fait transi-

tion entre cette première partie et la deuxième qui traite plus spécialement de

l'influence des variations d'humidité en phytopathologie (chap. 9 a 16).

La résistance aux maladies fongiques dépend en grande partie du degré d'humi-

dité auquel la plante est soumise. L'effet du « stress hydrique » et son incidence

sur la sensibilité aux pathogènes et sur la senescence est abordé en un chapitre

auquel succèdent des analyses de questions ponctuelles telles que l'alternance

secheresse-irrigation en culture tropicale, l'effet inhibiteur sur les champignons

de composés excrétés par la plante en réaction au stress hydrique (ABA), le rap-

prochement entre le rôle de ces composés et les phytoalexines sur le fonctionne-

mEnt des stomates, l'incidence de la présence des champignons dans les échanges

hydriques des plantes.

La troisième partie [4 chapitres] a trait à la biodégradation des végétaux par les

champignons et souligne, bien sûr, l'importance de la teneur en eau des substrats

et des enceintes de stockage dans cette décomposition. Un dernier chapitre qui

porte sur le rôle de l'eau dans le processus de décomposition des écosystèmes ter-

restres complète cet ensemble d'exposés.

Cet ouvrage est un bilan fort intéressant sur les connaissances du rôle de l'eau

dans la biologie des champignons et des plantes ou dans les interactions entre ces

organismes et l'environnement. Il devrait intéresser les chercheurs fondamenta-

listes et les phytopathologistes comme ceux de l'industrie agroalimentaire et ouvrir

de nouvelles voies d'investigation dans ce domaine.

M.F. Roquebert

Source : MNHN, Paris

ANALYSES BIBLIOGRAPHIQUES 331

ALLSOPP D. & SEAL K.J., 1986 — Introduction to biodeterioration. London,

Edward Arnold, 136 p.

L'objet de ce petit livre est de présenter, de manière synthétique, les différents

aspects de la biodétérioration, définie comme étant l'attaque par des organismes

vivants des matériaux mis en œuvre par l'homme. Les auteurs commencent par

cadrer, un peu rapidement, les dimensions scientifiques et économiques du pro-

blème, qui couvre un large domaine d'applications très diverses. Ils examinent

ensuite successivement, et selon un ordre logique, les diverses classes de produits

susceptibles d'être attaqués. Ils évoquent en premier lieu les matériaux naturels :

cellulose, bois, denrées alimentaires, cuirs, textiles, pierres ; puis ils examinent

la biodétérioration des matériaux manufacturés et transformés : carburants et lubri-

fiants, matières plastiques, peintures, produits pharmaceutiques, métaux et adhé-

sifs. Ils s'intéressent ensuite aux problèmes posés dans le bâtiment, les eaux, les

moyens de transport, ainsi qu'au cas très particulier des collections de musées.

Pour chaque cas, les organismes responsables des dégâts ou nuisances sont signa-

lés, qu'il s'agisse de bactéries, de champignons, de végétaux supérieurs, d'insec-

tes ou de rongeurs. Les moyens de détection, de protection et de lutte sont

également évoqués à chaque étape, en faisant bien ressortir l'incicence des critè-

res économiques dans le choix des décisions.

Suit une intéressante description des méthodes pratiques d'enquête, de diagnostic

et de sélection des traitements, ainsi que des techniques d'analyses et d'essais de

simulation en laboratoire ou dans l'environnement. Enfin, les diverses méthodes

de lutte physique, chimique et biologique sont résumées.

Bien entendu, vu l'ampleur et la diversité du sujet, cet ouvrage ne se prétend

pas exhaustif, et il est nettement insuffisant, à lui seul, sur le plan pratique pour

traiter d'un problème de biodétérioration, qu'il s'agisse de l'identification des orga-

nismes déprédateurs ou des traitements à appliquer. Comme son titre l'indique,

il s'agit en réalité d'une introduction, fort bien faite, sur le sujet, à considérer plu-

tôt comme un condensé destiné à sensibiliser un lecteur intéressé ou concerné,

que comme un manuel technique. Fort heureusement, l'ouvrage est complété par

une bibliographie générale et spécialisée assez brève, mais judicieuse et bien actua-

lisée, qui permettra d'approfondir un sujet particulier en cas de nécessité.

J. Oudot

GINNS J.H., 1986 — Compendium of Plant Disease and Decay Fungi in Canada

1960-1980. Ottawa, Canadian Government Publishing Centre (Research Branch,

Agriculture Canada, Publication 1813), i-x, 416 p

La parution de ce Compendium à l'occasion du centenaire de la division Recher-

ches [ministère de l'Agriculture), représente une étape importante dans l'histoire

mycologique de ce pays, en particulier pour la phytopathologie. En effet, il vient

savamment compléter et rectifier l'Annotated Index of Plant Diseases in Canada de

1. L. CONNORS, publié il y a vingt ans. |. H. GINNS, du Biosystematics Research

Institute d'Ottawa, est un mycologue réputé, entre autres par ses nombreux tra-

vaux sur la systématique des Basidiomycètes déprédateurs de bois.

Ce manuel technique de 400 pages est « concu pour aider les phytopathologues,

les reproducteurs de plantes, les écologistes, les services phytosanitaires et les taxo-

nomistes dans l'identification des champignons se développant, au Canada, sur

des plantes aussi bien cultivées que sauvages », mais son cadre d'utilité déborde

largement cet objectif. Il présente une masse d'informations provenant de

Source : MNHN. Paris

332 ANALYSES BIBLIOGRAPHIQUES

2 000 articles sélectionnés parmi ceux publiés entre 1960 et 1980 dans des mono-

graphies et des revues scientifiques importantes de l'hémisphère nord-américain.

En fait, c'est un résumé des observations faites sur des champignons observés sur.

du matériel végétal, vivant ou mort, au cours de cette période.

L'ouvrage se compose de quatre sections majeures. Après une introduction pré-

cisant les divers objectifs visés, on trouve un index des hôtes, une bibliographie

et les index des champignons. L'index des hôtes constitue le corps de l'ouvrage

(264 p.). Il concerne prés de 600 genres rangés par ordre alphabétique, système

de classement choisi pour la présentation des informations de toute nature. Cha-

que genre comporte les espèces végétales relevées dans les documents consultés,

avec quelques annotations intéressantes sur l'origine géographique, le nom com-

mun français et anglais et l'aire de répartition dans les provinces et territoires cana-

diens. Cette liste d'espèces est suivie par celle des champignons détectés sur ces

plantes-hôtes, et l'on y trouve pour chacun également des informations concer-

nant la distribution au Canada et le(s) numéro(s} de la référence bibliographique.

Au total, prés de 4 000 champignons reconnus constituent ces listes partielles. Ils

relèvent de tous les groupements systématiques classiques et représentent aussi

bien des pathogènes notoires, répandus ou rares, que des espèces dont l'impor-

tance économique, réelle ou anodine, n'a pas encore été confirmée, ou bien des

éléments se développant en association avec les symptômes des maladies ou encore

sur des tissus végétaux morts.

Le chapitre bibliographie présente les 2 000 titres reproduits sur seulement

34 pages. Il est suivi par un index des espèces fongiques à double entrée, genre

et espèce, avec dans les deux cas un renvoi à la bibliographie. En raison de la

diversité des rôles écologiques sur lesquels se fonde la sélection des éléments fon-

giques, le premier index comporte des genres à composants réputés phytopatho-

gènes tels que Ascochyta, Ceratocystis, Cercospora, etc., qui présentent

respectivement un nombre marqué d'espèces, et des entités génériques de cham-

pignons depredateurs de bois : Corticium, Peniophora, Polyporus, Poria, etc. (ceux-

ci révèlent aussi un nombre élevé d'espèces] et, enfin, des genres réunissant de

simples saprophytes. Pour le nombre d'espèces par genre, Puccinia semble se pla-

cer en tête avec un chiffre voisin de cent cinquante

Il y a lieu de souligner que la sélection, la transcription, la synthèse, et la repro-

duction du contenu informatif de cet ouvrage [prés de 30 000 entrées) n'ont pu

ètre accomplies que grâce aux efforts conjugués et méritants de nombreux colla-

borateurs techniques et scientifiques. S'il est évident que les informations publiées

ont été sérieusement évalućes pour leur niveau de crédibilité et la position taxo-

nomique des champignons cités, on note également un effort sensible de mise à

jour de leur binôme et une adaptation des noms d'auteurs aux règles actuelles

de la nomenclature. Un format adéquat, une présentation par page sur double

colonne, des pages bien aérées permettant un balayage visuel rapide et une lec-

ture aisée, constituent des solutions originales pour une présentation soignée de

cette importante masse d'observations.

Ce Compendium est « une étape vers la constitution d'une flore mycologique

du Canada ». Il servira pour l'étude des interactions possibles entre les champi-

gnons pathogènes, la mycoflore permanente et leur substrat écologique. À notre

avis, c'est un modèle en son genre dans ce domaine, à suivre pour la réalisation

de compendiums d'autres pays. Il sera sans doute activement consulté par des

mycologues situés en dehors du territoire canadien.

J. Mouchacca

Source : MNHN, Paris

ANALYSES BIBLIOGRAPHIQUES 333

BOIDIN J. et LANQUETIN P., 1987 — Le genre Scytinostroma Donk. Berlin, Stut-

tgart, J. Cramer, Gebrüder Borntraeger, Bibliotheca Mycologica, Band 114, 130 p.

Bien qu'ils s'en défendent, les auteurs présentent ici une véritable monographie

du genre Scytinostroma puisque la totalité des espèces décrites à ce jour est étu-

diée. Les mycologues qui se sont essayés a l'étude des espèces de ce genre con-

naissent les indiscutables difficultés auxquelles ils ont à faire face : c'est d'abord

la consistance de la chair du basidiome, très coriace du fait de l'abondance de

fibres intriquées masquant les hyphes génératrices ; c'est ensuite l'hyménium à

la fois diffus et fragile ; ce sont enfin les spores très souvent absentes. Conscients

que l'examen des nombreux spécimens d'herbier qu'ils ont effectué — pour indis-

pensable qu'il soit — ne leur permettait pas de comprendre le genre de facon satis-

faisante, les auteurs ont axé leur travail sur l'étude de récoltes fraîches,

accompagnées de sporées. Cette démarche constitue la caractéristique majeure

de l'ouvrage.

Le livre débute par un exposé détaillé des méthodes d'étude les plus favorables

à une observation précise. Sont ensuite traités la question de la délimitation —

particulièrement ardue — entre les genres Vararia et Scytinostroma puis l'évolu-

tion et les affinités du genre Scytinostroma. Suit une clé des espèces, précédant

elle-même l'essentiel du travail qui est consacré à la description de celles-ci ; cette

description est accompagnée des données culturales et cytologiques chaque fois

que cela était possible. En ce qui concerne les caractères des mycéliums, les auteurs

présentent leurs résultats inédits ou renvoient à leurs travaux antérieurs. Les espè-

ces sont classées par ordre alphabétique et, pour la très grande majorité d'entre

elles, accompagnées d'une planche de dessins qui illustre les gloeocystides et les

spores et souligne la variété du type de fibres. Trente-deux espèces sont ainsi pré-

sentées, parmi lesquelles treize sont nouvelles : six espèces peuvent être récol-

tées en France, dont une nouvelle : S. mediterraneense. Enfin, dans une discussion,

les auteurs montrent que les caractères morphologiques et culturaux permettent

de reconnaître quatre groupes d'espèces dans le genre et présentent un tableau

résumant les caractéristiques mycéliennes observées.

Cette étude très complète et détaillée était attendue par tous les mvcologues s'intċ-

ressant à l'étude de ces difficiles Aphyllophorales. Nul doute qu'ils trouvent dans

ce travail des bases trés solides permettant la détermination — jusqu'ici particu-

liċrement ardue — des espéces de ce genre. Une fois encore le lecteur notera

l'importance accordée par les auteurs aux sporées et cultures qui permettent de

faire appel au critére d'intercompatibilité chez les espéces hétérothalles bouclées

ou non. Ainsi par exemple, est affirmée objectivement l'identité des spécimens

indonésiens et africains de S. renisporum, езрёсе dépourvue de boucles. Citons

également le cas de S. galactinum pour lequel les résultats des tests particulière-

ment nombreux [résumés en deux tableaux) conduisent à reconnaitre l'existence

de quatre espèces jumelles allopatriques de microscopie semblable. Un résumé

de l'ensemble de l'ouvrage ainsi qu'une clé des espèces, rédigés en anglais, per-

mettront aux lecteurs anglophones une utilisation aisée de ce livre. Signalons pour

terminer que l'abondance d'espèces originaires d'Afrique et de Guadeloupe n'est

due qu'aux circonstances ayant permis des missions mycologiques dans ces régions

et que de nombreuses espèces restent probablement à découvrir.

J.C. Léger

Source : MNHN. Paris

334 ANALYSES BIBLIOGRAPHIQUES

VÉGH L., 1987 — Champignons des arbres et arbustes d'ornement. Paris, INRA,

121 p.

Cet atlas, de petit format et présenté en reliure spirale, est constitué d'une brève

introduction (2 p.), de la liste des champignons recensés suivant l'ordre alphabé-

tique des hôtes (51 p.), de planches photographiques montrant les symptômes de

quelques maladies répandues (58 p.) et enfin d'un index des essences citées sous

leur nom latin ou francais (3 p.)

On regrette la trop petite taille de certaines photographies ne fournissant pas

une illustration correcte, et ne permettant pas une éventuelle détermination des

maladies de nos arbres et arbustes d'ornement.

Le quatriéme Congrés Mycologique International (IMC IV), organisé par l'Asso-

ciation Mycologique Internationale (IMA) se tiendra à l'Université de Regensbourg,

République Fédérale Allemande, du 28 aoút au 3 septembre 1990 (prof. J. Webs-

ter, président IMA, Dpt of Biological Sciences, Univ. Exeter, Prince of Wales Road,

Exeter EX4 4PS, Angleterre).

The fourth International Mycological Congress (IMC IV) of the International Myco-

logical Association (IMA] will be held at the University of Regensburg, Federal Repu-

blic of Germany, from 28 August to 3 September 1990 (Prof. J. Webster, President IMA,

Dpt of Biological Sciences, Univ. Exeter, Prince of Wales Road, Exeter EX4 4PS, U.K.)

Source : MNHN. Paris

335

TABLE DU TOME 8 — 1987

ABDEL-HAFEZ A.1.1. and EL-SHAROUNY H.M.M. — Seasonal fluctuations of fungi

in Egyptian soil receiving city sewage effluents 235

ABDEL-HAFEZ A.L.L, MOHARRAM A.M.M. and ABDEL-MALLEK A.Y. — Thermo-

philic and thermotolerant fungi associated with seeds of five members of Umbelli-

ferae from Egypt ... 5 315

ABDEL-MALLEK A.Y. — Voir ABDEL- HAFEZ ALI

ADISA V.A. and OLA J.B. — Effects of two fungicides and three environmental fac-

tors on the uredospore germination of Puccinia arachidis Speg. . . 23

ALI M.LA. — Voir ISMAIL I.M.K.

ASCASO C. and RAPSCH S. — Influence of prefixation in the SE of the structure

of symbionts of Lobaria spp. b 13

BEHBOUDI B.Ch. EBRAHIMZADEH H. et HADATCHI G. — Contróle de la forma-

tion des rhizomorphes d'Armillariella mellea (Vahl. ex Fr.) Karst. par l'alternative

nitrate-ammonium et certains acides aminés 227

BELLEMÈRE A. — Voir MELENDEZ-HOWELL L.M

BETTUCCI L. — Variation saisonnière de l'activité colonisatrice de Basidiomycètes sur

bois enterrés dans trois sols volcaniques Е 79

BUENDIA A.G. — Voir ORTEGA A

CAILLEUX R. et JOLY P. — Étude de quelques stations italiennes de Pleurotus eryn-

gii : progression mycélienne et structure des populations 101

DESCALS E. — Voir ROLDAN A.

EBRAHIMZADEH H. — Voir BEHBOUBI B.Ch.

EL-SHAROUNY H.M.M. — Voir ABDEL-HAFEZ A.LI

HADATCHI G. — Voir BEHBOUDI B.Ch.

HENNI J.E. — Evaluation de l'efficacité de certains champignons antagonistes vis-

de Verticillium dahliae Klebahn

KEYKOOP M. — Voir MORENO G.

HONRUBIA M. — Voir ROLDAN A.

ILLANA C. = Voir MORENO G.

ISMAIL 1.M.K., SALAMA A.-A.M., ALI M.LA. and OUF S.A.-E. = Effect of some

phenolic compounds on spore germination and germ-tube length of Aspergillus fumi-

gatus and Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici 51

JOLY P. — Voir CAILLEUX R

KULIFAJ M. — Voir PARGUEY-LEDUC A.

LAJOLO L. — Voir MODENESI P.

LE PICARD D., TIRILLY Y. et TRIQUE B. — Antagonistes et hyperparasites du Fulvia

fulva (Cooke) Ciferri. Interactions mycéliennes avec les champignons colonisant

les taches de cladosporiose de la tomate z 43

MELENDEZ-HOWELL L.M., BELLEMÈRE A. et ROSSIGNOL J. TS NONE

propos de l'ultrastructure d'ascospores « albinos » ou « granuleuses » de mutants

d'Ascobolus immersus Pers. (gene bs} ...... is mA 269

Source : MNHN, Paris

336

MERCE J. — Hyphomycètes aquatiques Etude des variations saisonnières d'une popu-

lation RATE? us Е

MODENESI P. and LAJOLO L. — Histochemistry of cytoplasmic reserves in

excipular hyphae of Catillaria bouteillei (Desm.) Zalhbr. à 38

MOHARRAM A.M.M. — Voir ABDEL-HAFEZ A.LI.

MONTANT C. — Voir PARGUEY-LEDUC A.

MORENO G., ILLANA C. and HEYKOOP M. — Gastrocybe iberica pus nov. in spun

(Bolbitiaceae, Agaricales) 321

MOUCHACCA J. — Quelques Mikromycetes intéressants observes sur des feuilles

vivantes ou mortes de Carpinus betulus L. 141

NAJIM L. — Contróle morphogénétique de la différenciation des sclérotes de Sclero-

tinia fructigena : | — Études physiologiques 209

NAJIM L. — Contrôle morphogénétique de la différenciation des ааа аавд

tinia fructigena : 11 — Études cytologiques et ultrastructurales A

OLA J.B. — Voir ADISA V.A.

ORTEGA A. y BUENDIA A.G*. — Contribución al estudio de la tribu Aleurieae

Seaver emend. Korf en la Península Ibérica .. : 125

OUF S.A.-E. — Voir ISMAIL I.M.K.

PARGUEY-LEDUC A., MONTANT C. et KULIFA] M. — Morphologie et structure de

l'ascocarpe adulte du Tuber melanosporum Vitt. (Truffe noire du Périgord, Discomy-

cétes] ... 173

RAPSCH S. — Voir ASCASO C

REYNOLDS R. Don — A nonbitunicate ascus in the ascostromatic genus Asterina 251

ROLDAN A., DESCALS E. y HONRUBIA M. — Notas sobre hifomicetos acuáticos cas

fitos en restos vegetales

ROLDAN A., DESCALS E. y HONRUBIA M. — Notes on Tetracladium apiense Sinclair

and Eicker 219

ROSSIGNOL J.-L. — Voir MELENDEZ-HOWELL L.M

SALAMA A.-A.M. — Voir ISMAIL I.M.K.

TIRILLY Y. — Voir LE PICARD D.

TORRENTE-PANOS P. — Documentos para la caracterizacion de los ascos del género

Opegrapha Ach. ... 159

TRIQUE B. — Voir LE PICARD D.

Analyses bibliographiques .. v 67, 167, 329

Instructions aux auteurs "es 77

Commission paritaire no 58611

Dépôt légal no 13628 - Imprimerie de Montligeon

Sortie des presses le 20 décembre 1987

Imprimé en France

Éditeur : A.D.A.C. (Association des Amis des Cryptogames)

Président : A. Couté; Secrétaire : D. Lamy

Trésorier : R. Baudoin; Directeur de la publication : H. Causse

Source : MNHN. Paris

CRYPTOGAMIE — MYCOLOGIE

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Laboratoire de Botanique, Faculté des Sciences,

Allées Jules Guesde, 31000 Toulouse (France).

JOLY P., pour les articles traitant de Systématique

Laboratoire de Cryptogamie, Muséum National d'Histoire Naturelle

12, rue de Buffon, 75005 Paris (France).

MANACHERE G., pour les articles traitant de Physiologie

Laboratoire de Mycologie, Université de Lyon 1,

43, Bd du 11 Novembre 1918, 69622 Villeurbanne Cedex (France).

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Laboratoire de Génétique, Université de Paris Sud,

Bát. 400, Centre d'Orsay, 91405 Orsay (France).

ROQUEBERT M.F., s'occupera des autres spécialités.

Laboratoire de Cryptogamie, Muséum National d'Histoire Naturelle

12, rue Buffon, 75005 Paris (France).

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CHEVAUGEON J., Orsay (France) MOREAU Cl., Brest (France)

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(Belgique) TURIAN G., Genève (Suisse)

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Les manuscrits doivent être adressés (en 3 exemplaires) directement à un

membre du Bureau de Rédaction, choisi pour sa spécialité. Chaque membre du

Bureau se charge d'envoyer l'article 4 2 membres du Comité de Lecture (ou

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Bien qu'étant avant tout une revue de langue française, les articles rédigés en

Anglais, Allemand et Espagnol sont acceptés.

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chaque tome.

Source : MNHN Paris

4 JAN, 1986

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Tome 9, 1988

CRYPTOGAMIE comprend trois sections : ALGOLOGIE, BRYOLOGIE-

LICHÉNOLOGIE, MYCOLOGIE, On peut souscrire indépendamment à

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France A TRA аз.» (НТ 870Е) 904,80 Е

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Les anciens tomes et fascicules séparés de la REVUE DE MYCOLOGIE er

de CRYPTOGAMIE - MYCOLOGIE sont toujours disponibles.

MÉMOIRES HORS SÉRIE

NO 2 (1942). Les matières colorantes des champignons, par 1.

Pastac. 88 pages : 15 F.

NO 3 (1943). Les constituants de la membrane chez les champi-

gnons, par R. Ulrich. 44 pages : 15 F,

N° 6 (1958). Essai biotaxonomique sur les Hydnés résupinés et les

Corticiés, par J. Boidin. 390 pages, pl. et fig. : 120 F.

N? 7 (1959). Les champignons et nous (Chroniques) (П), раг С.

Becker. 94 pages : 25 Е,

NO 8 (1966). Catalogue de la Mycothéque de la Chaire de Cryptoga-

mie du Muséum National d'Histoire Naturelle. (1) Micromy-

cètes. Macromycètes (première partie). 68 pages : 25F,

NO 9 (1967). Table des Matières (1936-1965). 85 pages : 20 F. —

(1966-1975). 30 pages : 10 F. A

FLORE MYCOLOGIQUE DE MADAGASCAR ET DÉPENDANCES

publiée sous la direction de M. Roger HEIM

Tome 1. Les Lactario-Russulés, par Roger Heim (1938) (épuisé).

Tome 11. Les Rhodophylles, par Henri Romagnesi (1941). 164 pages,

Ae EOF A Ке

Tome Ill. Les Mycè Métrod (1949). 144 У

оте a я (1949). Pages,

Tome IV. Les Discomycétes de Madagascar Marcelle Le Gal

(1953). 465 pages, 172 fg S150 F. ` =

Tome V. Les Urédinées, par Gilbert et J.P. Bassino

(1965). 180 pages, 97 fig., 4 pL hors-texte : 90 F.

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